DK163832B

DK163832B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cephemforbindelser og mellemprodukter til anvendelse ved fremgangsmaaden

Info

Publication number: DK163832B
Application number: DK114878A
Authority: DK
Inventors: Takao Takaya; Hisashi Takasugi; Kiyoshi Tsuji; Toshiyuki Chiba
Original assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co
Priority date: 1977-03-14
Filing date: 1978-03-14
Publication date: 1992-04-06
Also published as: AT364456B; AR230452A1; ES8103752A1; JPH0720947B2; JPH03135971A; PT67773A; NZ199860A; ES8103751A1; ES491183A0; YU60878A; SE8304670D0; NZ186679A; ES8103753A1; SE8304670L; PH17188A; PH17064A; NL7802792A; US4822888A; US4447430A; US4563522A

Description

DK 163832 B

i

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 7-substituerede 3-cephem-4-carboxylsyrer med formlen I, eller farmaceutisk acceptable salte deraf, hvilke forbindelser har antimikrobiel virkning. Opfindelsen angår desuden 5 hidtil ukendte 7-substituerede-3-cephem-4-carboxylsyrer med formlen I" til anvendelse som mellemprodukter ved fremgangsmåden.

Fra dansk fremlæggelsesskrift nr. 154939 kendes thiazolylacetamido-cephemforbindelser med antimikrobiel virkning. Det har nu vist sig, at forbindelserne er fremstillet ved fremgangsmåden ifølge den fore-10 liggende opfindelse har overraskende større antibiotisk virkning end de kendte forbindelser.

De ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede cephemforbindelser er sådanne med den almene formel I

r1- c-conh—j—r/SVvi— r3 R5 hvor R^- betegner thiadiazolyl, thiazolyl med den almene formel N-

.-U

hvor betegner amino, C^.g-alkanamido eller halo(C^.g)alkanamido, hvor betegner hydrogen, C g -alkyl, C£. 6-alkenyl, C2_g-alkynyl, 20 C3.g-cycloalkyl, halo(Cj^.g)alkyl, carboxy(C^.g)alkyl eller alkoxycar-bonyl(C^.g)alkyl, R^ betegner hydrogen eller methyl, R^ betegner hydrogen eller methyl, og R-* betegner carboxy eller farmaceutisk acceptabel esterificeret carboxy, forudsat at i) R4 betegner hydrogen, når betegner hydrogen, 25 ii) R^ betegner methyl, når R^ betegner methyl.

2

DK 163832 B

De ovenfor angivne cephemforbindelser (I) omfatter nyttige antimikro-bielle midler som det belyses nedenfor.

Fremgangsmåden er ejendommelig ved, at

1) en 7-amino-3-cephem-forbindelse med den almene formel II

H2N-fS "S—R3 5 11 ° ί

hvor R^, og R^ har den ovenfor angivne betydning, eller et reaktivt aminoderivat eller et salt deraf omsættes med en carboxylsyre med den almene formel III

R1 - Cj - COOH III

N-OR2 10 hvor R·'· og R^ har den ovenfor angivne betydning, et reaktivt derivat ved carboxy eller et salt deraf til dannelse af en forbindelse med den almene formel I,

2) en forbindelse med den almene formel V

R1 - C - CONH-1-r^S N— R3 il I I Γ 4 N - OH A— — R v I5 hvor R^-, R·^, R^ og R5 har den ovenfor angivne betydning, eller . et salt deraf, omsættes med et etherificeringsmiddel til dannelse af en forbindelse med den almene formel Ic 15

DK 163832 B

3 1 ^S \ 3

R - C - CONH--R

N * OR^ 0J— Ν-γ^Κ4 Ic R5 hvor R^·, R3, R4 og R5 har den ovenfor angivne betydning, og R^ betegner Cj^. g-alkyl, ¢£. g -alkenyl, C2_g-alkynyl, Cg.g-cycloalkyl, 5 halo(Cjl-g)alkyl, carboxyCC^.gJalkyl eller C1.6-alkoxycarbonyl(C1.

g)alkyl, eller et salt deraf 3) en forbindelse med den almene formel VI R? - C - CONH--f S V“ R3 II 2 I Γ 4

N - OR* oi=J-R4 VI

R5

hvor R^b er haloacetyl, og R^, R3, R^ og R3 har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf omsættes med en thiourinstofforbindel-10 se med den almene formel VII

S

6 11

R - C - NH2 VII

hvor R^ har den ovenfor angivne betydning, til dannelse af en forbindelse med den almene formel Id 4

DK 163832 B

ΧΓΪ' τ~εχξχ ί R6 s n - OR-2 n E Id R5 hvor R2, R3, R^, R3 og R® har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf,

5 4) i en forbindelse med den almene formel VIII

N--n S 3

6 h --C - CONH--( —R

Ra ^ST I - * J—p4

N - OR2 NNp R VIII

L5 hvor R2, R3, R^ og R3 har den ovenfor angivne betydning, og R^a betegner beskyttet amino, eller et salt deraf elimineres beskyttel-10 sesgruppen i den beskyttede amino gruppe R^a til dannelse af en forbindelse med den almene formel le N_ „ .. _[i 3-C - CONH -f SSs]—r3 H2N—JII I J_4 N - OR^ O le R5 hvor R2, R3, R^ og R3 har den ovenfor angivne betydning, eller et 15 salt deraf, 5

DK 163832 B

5) en forbindelse med den almene formel 1 *-S .

R - C - CONH—-r > N - OR2 N Y^~° " Ra x3 R5 hvor is7a er C ^ . g - alkansulfonyl og R^a, R^ og R5 har den ovenfor 5 angivne betydning, eller et behandles med en base til dannelse af en forbindelse med den almene formel Ih

R1 - C - CONH--S S N

“ 2 i J

N - OR J— Ih

0 X

R

hvor R*, R^ og R5 har den ovenfor angivne betydning, eller et salt 10 deraf,

6) en fri carboxylforbindelse med den almene formel XII

R1 - C - CONH--rSV- r3 XI1 II 2 N - 0R o^L R*

COOH

hvor R1, R3, R^ og A har den ovenfor angivne betydning, eller et 15 reaktivt carboxyderivat eller et salt deraf omsattes med et esterifi-ceringsmiddel til dannelse af en forbindelse med den almene formel Ij 2 6

DK 163832 B

R1 - C - CONH--S S R

N - OR2 4 .

R

k hvor R^·, R^, r3 0g r4 har <jen ovenfor angivne betydning, og R**a betegner farmaceutisk acceptabel esterificeret carboxy, eller et salt 5 deraf, eller

7) en forbindelse med den almene formel XIII

1 yS. 3

R - C - CONH--S >— R

!! 2

N - OR^ I J— 4 XIII

R

4 hvor R*-, R^, r3 og R^ har den ovenfor angivne betydning, og R^b 10 betegner funktionelt modificeret carboxy, omdannes til en forbindelse med den almene formel Ik 1 S3

R - C - CONH--f V- R

N " or2 — N^j^— R4 Ik

T

COOH

hvor R^·, R^, og R^ har den ovenfor angivne betydning, eller et 15 salt deraf.

DK 163832 B

7 Særligt foretrukne antimikrobielle forbindelser har den almene formel I' R^-C-CONII i y- R3 i, N-OR2 0^J —R4

COOH

5 hvor R^a betegner thiadiazolyl eller thiazolyl med den almene formel v-P” hvor R^ har den ovenfor angivne betydning, og R^, R^ og R4 har den ovenfor angivne betydning.

Opfindelsen angår endvidere forbindelsen med formlen I" rJ-c-conh-->— R3 b II 2 I" N"0R J_R4

-N\^ R

10 hvor R^-b betegner halogenacetyl, og R^, R^, og R^ er som defineret ovenfor, til anvendelse ved fremstilling af forbindelser med formlen I.

De anvendte betegnelser og definitioner forklares nedenfor.

15 Thiazolylgruppen med den almene formel N-n R6 - (hvor R® har den ovenfor angivne betydning) foreligger som bekendt i tautomer ligevægt med en thiazolinylgruppe med den almene formel HN- r,6==^s^

DK 163832B

8 (hvor R'6 betegner imino eller beskyttet imino). Tautomerien mellem disse thiazolyl- og thiazolinylgrupper kan belyses ved følgende ligevagt: iN—Π -> HN-π »6-U~ <— h'sJ3“ (hvor og R' 6 har den ovenfor angivne betydning).

5 Det er derfor klart, at begge de nævnte grupper i det væsentlige er ens, og de tautomere, som består af sådanne grupper, betragtes som værende de samme forbindelser, især inden for den syntetiske kemi.

Begge de tautomere former af forbindelser med sådanne grupper i molekylet er derfor omfattet af den foreliggende opfindelse, og de 10 betegnes sammen med ét udtryk "thiazolyl" og angives med formlen «•-Cl· (hvor R^ har den ovenfor angivne betydning) for overskuelighedens skyld.

De her anvendte definitioner forklares i detaljer i det efterfølgende.

15 "Thiadiazolyl"·kan for RI betegne 1,2,3-thiadiazolyl (f.eks. 1,2,3-thiadiazol-4-yl eller l,2,3-thiadiazolyl-5-yl), 1,3,4-thiadiazolyl eller 1,2,4-thiadiazolyl, fortrinsvis 1,2,3-thiadiazolyl og særlig foretrukket 1,2,3-thiadiazol-4-yl.

C^_g-Alkyl kan være ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 20 1-8 carbonatomer, såsom methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert.butyl, pentyl, neopentyl, hexyl, heptyl, octyl, fortrinsvis C^.g-alkyl, og især foretrækkes grupper med 1-4 carbonatomer.

C2_g-Alkenyl kan være ligekædede eller forgrenede alkenylgrupper med 25 op til 6 carbonatomer, såsom vinyl, allyl, 1-propenyl, isopropenyl, butenyl, isobutenyl, pentenyl og hexenyl og især foretrækkes sådanne grupper med op til 4 carbonatomer.

DK 163832 B

9 C2_6-Alkynyl kan være ligekædede eller forgrenede alkyngrupper med op til 6 carbonatomer, fortrinsvis lavere alkynyl såsom ethynyl, propargyl, 1-propynyl, 3-butynyl, 2-butynyl, 4-pentynyl, 3-pentynyl, 2-pentynyl, 1-pentynyl og 5-hexynyl, og især foretrækkes sådanne 5 grupper med op til 4 carbonatomer.

C3.8-Cycloalkyl kan være cycloalkylgrupper med op til 8 carbonato-mer, fortrinsvis Cj.g-cycloalkyl såsom cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl og cyclohexyl, og især foretrækkes cyclohexyl.

Egnede eksempler på "halogen" kan være chlor, brom, iod og fluor.

10 Halo(Ci*g)alkyl kan for være chlormethyl, brommethyl, iodmethyl, fluormethyl, trichlormethyl, trifluormethyl, 2-chlorethyl, 1,2-dich-lorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 3-chlorpropyl, 4-iodbutyl, 5-fluorpen-tyl og 6-bromhexyl.

Carboxy(CjL*g)alkyl kan for R^ være carboxymethyl, 1-carboxyethyl, 2-15 carboxyethyl, 1-carboxypropyl, 3-carboxypropy 1, 4-carboxybutyl, 5- carboxypentyl, 6-carboxyhexyl, 1-carboxyisopropyl, 1-ethyl·1-carboxyethyl og 2-methyl-2-carboxypropyl.

"Ci-g-AlkoxycarbonylCCi-gJalkyl" kan for være methoxycarbonylmet-hyl, ethoxycarbonylmethyl, propoxycarbonylmethyl, tert.butoxycarbo-20 nylmethyl, 2-ethoxycarbonylethyl, 2-ethoxycarbonylpropyl, 4-ethoxy-carbonylbutyl, 1-tert.butoxycarbonylisopropyl, 1-tert.butoxycarbonyl-1-methylpropyl, 4-tert.-butoxycarbonylbutyl og 5-tert.butoxycarbonyl-pentyl, 6-butoxycarbonylhexyl), og især foretrækkes C^-g-alkoxycarbo-nylmethyl, som angivet ovenfor.

25 "(C^-g)alkanoyl" og "halo(Cj_-g)alkanoyl"-delene i (C^-g)alkanamido og halo(C^-g)alkanamido kan for R^ være formyl, acetyl, chloracetyl, trifluoracetyl eller lignende.

"Beskyttelsesgrupper" i "beskyttet amino" kan betegne sædvanlige N-beskyttende grupper såsom substitueret eller usubstitueret aryl-30 lavere alkyl (f.eks. benzyl, benzhydryl, trityl, 4-methoxybenzyl eller 3,4-dimethoxybenzyl), halogen-lavere alkyl (f.eks. trichlorme- 10

DK 163832 B

thyl, trichlorethyl, trifluorraethyl), tetrahydropyranyl, substitueret phenylthio, substitueret alkyliden, substitueret aralkyliden, substitueret cycloalkyliden eller acyl.

Egnet acyl for beskyttelsesgruppe kan være substitueret eller usub-5 sti tueret lavere alkanoyl (f.eks. formyl, acetyl, chloracetyl eller trifluoracetyl), substitueret eller usubstitueret lavere alkoxycarbo-nyl (f.eks. methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, 1-cyc-lopropylethoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl, butoxycarbonyl, tert.bu-toxycarbonyl, pentyloxycarbonyl, tert.pentyloxycarbonyl, hexyloxy-10 carbonyl, trichlorethoxycarbonyl eller 2-pyridylmethoxycarbonyl), substitueret eller usubstitueret aryl-lavere alkoxycarbonyl (f.eks. benzyloxycarbonyl, benzhydryloxycarbonyl eller 4-nitrobenzyloxycarbo-nyl), lavere cycloalkoxycarbonyl (f.eks. cyclopentyloxycarbonyl eller cyclohexyloxycarbonyl), 8-quinolyloxycarbonyl, succinyl eller phtha-15 loyl.

Endvidere kan beskyttelsesgruppen vare et reaktionsprodukt mellem en silan-, bor-, aluminium- eller phosphorforbindelse med aminogruppen.

Egnede eksempler på sådanne forbindelser er trimethylsilylchlorid, trimethoxysilylchlorid, bortrichlorid, butoxybordichlorid, aluminium-20 trichlc rid, diethoxyaluminiumchlorid, phosphordibromid og phenyl-pho sphordibromid.

Egnede eksempler på estere for R“* er alkylestere (f.eks. methylester, ethylester, propylester, isopropylester, butylester, isobutylester, tert.butylester, pentylester, tert.pentylester, hexylester, heptyl-25 ester, octylester eller 1-cyclopropylethylester), alkenylestere (f.eks. vinylester eller allylester), alkynylestere (f.eks. ethynyle-ster eller propynylester), alkoxyalkylestere (f.eks. methoxymethyle-ster, ethoxymethylester, isopropoxymethylester, 1-methoxyethylester eller 1-ethoxyethylester), alkylthioalkylestere (f.eks. methylthio-30 methylester, ethylthiomethylester, ethylthioethylester eller isopro-pylthiomethylester), halogenalkylestere (f.eks. 2-iodethylester eller 2,2,2-trichlorethylester), alkanoyloxyalkylestere (f.eks. acetoxymethylester, propionyloxyme-thylester, butyryloxymethylester, valeryloxymethylester, pivaloyl-35 oxymethylester, hexanoyloxymethylester, 2-acetoxyethylester, 2-pro-

DK 163832 B

11 pionyloxyethylester eller palmitoyloxymethylester), alkansulfonylal-kylestere (f.eks. mesylmethylester eller 2-mesylethylester), substituerede eller usubstituerede aralkylestere (f.eks. benzyle-ster), 5 4-methoxybenzylester, 4-nitrobenzylester, phenethylester, trityl- ester, benzhydrylester, bis(methoxyphenyl)methylester, 3,4-dimethoxy-benzylester eller 4-hydroxy-3,5-di-tert.butylbenzylester), substituerede eller usubstituerede arylestere (f.eks. phenylester, tolyle-ster, tert.butylphenylester, xylylester, mesitylester, cumenylester 10 eller salicylester), samt estere med en silylforbindelse såsom trialkylsilylforbindelser, di-alkylalkoxysilylforbindelser eller trialkoxysilylforbindelser, f.eks. trialkylsilylestere (f.eks. trimethylsilylester eller triethylsilyl-ester), dialkylalkoxysilylestere (f.eks. dimethylmethoxysilylester, 15 dimethylethoxysilylester eller diethylmethoxysilylester) eller trial-koxysilylestere ( f.eks. trimethoxysilylester, triethoxysilylester).

Ud fra et syntetisk synspunkt kan frie aminogrupper R^ og/eller frie carboxylgrupper R5 omdannes til "beskyttet amino" og/eller "farmaceutisk acceptabelt esterificeret carboxy" som angivet ovenfor før 20 udførelsen af fremgangsmåden(rne) for at undgå mulig(e) uønsket(de) sidereaktion(er), og den "beskyttede amino" og/eller "funktionelt modificerede carboxyl"-gruppe i den resulterende forbindelse kan omdannes til frie amino- og/eller carboxylgrupper, efter at reaktionen er udført. Dette fremgår klart af de nedenstående forklaringer af 25 fremgangsmåderne.

Med hensyn til betydningen af de fysiologiske og farmaceutiske egenskaber af den her omhandlede forbindelse anvendes eventuelt forbindelser, som indeholder alkanamido eller halogenalkanamido eller farmaceutisk acceptabelt esterificeret carboxygruppe R5, for at 30 forbedre egenskaberne, f.eks. opløseligheden, stabiliteten, absorber-barhed eller toxiciteten, af en bestemt aktiv forbindelse med en fri amino- og/eller carboxygruppe.

Egnede "farmaceutisk acceptable salte" af den her omhandlede forbindelse med den almene formel 1' kan være sædvanlige ikke-toxiske 35 salte, herunder salte med uorganiske baser eller syrer, f.eks. me- 12

DK 163832 B

talsalte såsom alkalimetalsalte (f.eks. natriumsalt eller kaliumsalt) eller jordalkalimetalsalte (f.eks. calciumsaltet eller magnesiumsaltet) eller ammoniumsaltet, et uorganisk syresalt (f.eks. hydrochlo-ridet, hydrobromidet, sulfatet, phosphatet, carbonatet eller bicar-5 bonatet), et salt med en uorganisk base eller syre, f.eks. et amin-salt (f.eks. trimethylaminsalt, triethylaminsalt, pyridinsalt, pro-cainsalt, picolinsalt, dicyclohexylaminsalt, N,N'-dibenzylethylen-diaminsalt, N-methylglucaminsalt, diethanolaminsalt, triethanolamin-salt, tris (hydroxymethylamino)methansalt eller phenethylbenzylamin-10 salt, et organisk carboxylsyre- eller sulfonsyresalt (f.eks. acetat, maleat, lactat, tartrat, mesylat, benzensulfonat eller tosylat) eller et basisk eller surt aminosyresalt (f.eks. argininsalt, asparagin-syresalt, glutaminsyresalt, lysinsalt eller serinsalt).

Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse til fremstilling af 15 forbindelser med den almene formel I kan belyses ved nedenstående reaktionsskema;

Fremgangsmåde A: N—acylering H2N—i-R1- C-COOH (III). R1~C-CONH —-r^N—R3 R li 2 * 2 L M / N_0R N‘0R μ ^-T,4 0>—1 R5 R5 (II) (I)

DK 163832 B

13

Fremgangsmåde B: Etherificering r1“C-CONH-i-|^SNsv-r3 Etherif ice- ^-C-CONH—-[^N-R3

S I A ringsmiddel. Il o I

N-OH o/-Mx^1-R4 -» ii-OR U-KJ-R4 L5 R5 (V) (Ic)

Fremgangsmåde C: Thiazolringdannelse

S

r1-c-C0NH—-R6-C-NH0 (VII) o b |l ~ I _ n N-η—C-GONH— f 'V—R3 N-°R A JJ |.or2 ^ 4 R R6 5

R RS

(VI) (Id)

Fremgangsmåde D: Eliminering af amino-beskyttende gruppe R6 jr^J-CONHT-l'/SYR43 -f n“l^-CONB-—Y V1*3 = S- «2N-\Y1_or2XI .J-R4 i5 Js (VIII) de)

DK 163832 B

1A

Fremgangsmåde E: 3-Cephemdannelse

o IS

1 _v. R -C-CONH \ *ΐ“ΤΊ I 7 base 3 || ,

iou2 a -* N-°R

R5 R5 (Ig) (Ih)

Fremgangsmåde F: Esterificering r1”J“C0NH Ί-Γ*6 ''Ύ~ R3 ^ngsmldåll ) R1-C“CONH— ^ N-*3 n-or2o n-or2 N^J_ r4 COOH r5 (XII) (Ij) a

Fremgangsmåde G: Carboxydannelse R1-C-CONH—i i^N-R3 , R^C-CONH— -^N-R3 l-OR2 J_i^4 ' ^

or i 0 I

5 COOH

Rb (XIII) (Ik)

DK 163832 B

15 R-*a betegner farmaceutisk acceptabel esterificeret carboxy, R^a betegner beskyttet amino, og R-*-, R^a, R^, R^, R^ og R^ har den ovenfor angivne betydning.

De ovenfor angivne fremgangsmåder belyses nærmere i det følgende: 5 Fremgangsmåde A: N-Acylering.

En forbindelse med den almene formel I eller et salt deraf kan fremstilles ved at omsætte en 7-amino-3-cephem(eller cepham)forbindelse med den almene formel II eller et reaktivt derivat deraf ved amino-gruppen eller et salt deraf med en carboxylsyre med den almene formel 10 III, et reaktivt derivat deraf ved carboxylgruppen eller et salt deraf på fra /3-lactamkemien ved såkaldt amideringsreaktion sædvanlig måde.

Udgangsforbindelserne med den almene formel III er til dels ukendte, og de hidtil ukendte forbindelser med den almene formel III kan 15 fremstilles ved de fremgangsmåder, som beskrives i det nedenstående.

Egnede reaktive derivater ved aminogruppen i forbindelsen med den almene formel II kan være sædvanlige reaktive derivater, som anvendes i en lang række amideringsreaktioner, f.eks. isocyanato eller isot-hiocyanato-derivater, et derivat dannet ved omsætning af en forbin-20 delse med den almene formel II med en silylforbindelse (f.eks. tri-methylsilylacetamid eller bis(trimethylsilyl)acetamid), med en alde-hydforbindelse (f.eks. acetaldehyd, isopentaldehyd, benzaldehyd, salicylaldehyd, phenylacetaldehyd, p-nitrobenzaldehyd, m-chlorben-zaldehyd, p-chlorbenzaldehyd, hydroxynaphthoaldehyd, furfural eller 25 thiophencarboaldehyd, eller det tilsvarende hydrat, acetal, hemiace-tal eller enolat deraf), med en ketonforbindelse (f.eks, acetone, methylethylketon, methylisobutylketon, acetylacetone eller ethylace-toacetat eller det tilsvarende ketal, hemiketal eller enolat deraf), med en phosphorforbindelse (f.eks. phosphoroxychlorid eller phosphor-30 trichlorid) eller med en svovlforbindelse (f.eks. thionylchlorid).

Egnede salte af forbindelser med den almene formel II kan være sådanne, som er eksemplificeret i sammenhæng med forbindelser med den almene formel I.

16

DK 163832 B

Egnede reaktive derivater af carboxylgruppen i forbindelsen med den almene formel III kan f.eks. være et syrehalogenid, et syreanhydrid, et aktiveret amid eller en aktiveret ester, fortrinsvis et syrehalogenid såsom syrechlorid eller syrebromid, et blandet syreanhydrid med 5 en syre såsom substitueret phosphorsyre (f.eks. dialkylphosphorsyre, phenylphosphorsyre, diphenylphosphorsyre, dibenzylphosphorsyre eller halogeneret phosphorsyre), dialkylphosphorsyre, svovlsyrling, thio-svovlsyre, svovlsyre, alkylcarbonsyre, aliphatisk carboxylsyre (f.eks. pivalinsyre, pentansyre, isopentansyre, 2-ethyl-smørsyre 10 eller trichloreddikesyre), eller aromatisk carboxylsyre (f.eks.

benzoesyre); et symmetrisk syreanhydrid, et aktiveret syreamid med imidazol, 4-substitueret imidazol, dimethylpyrazol, triazol eller tetrazol eller en aktiveret ester (f.eks. cyanomethylester, methoxy-methylester, dimethylaminomethylester, vinylester, propargylester, 15 p-nitrophenylester, 2,4-dinitrophenylester, trichlorphenylester, pen-tachlorphenylester, mesylphenylester, phenylazophenylester, phenyl-thioester, p-nitrophenylthioester, p-cresylthioester, carboxymethyl-thioester, pyranylester, pyridylester, piperidylester, 8-quinolyl-thioester eller en ester med en N-hydroxyforbindelse såsom N,N-dime-20 thylhydroxylamin, l-hydroxy-2-(lH)pyridon, N-hydroxysuccinimid, N-hydroxyphthalimid, 1-hydroxybenzotriazol eller 1-(hydroxy-6-chlor-benzotriazol).

Egnede reaktive derivater af forbindelserne med de almene formler II og III kan frit vælges blandt de ovenfor anførte under hensyntagen 25 til arten af de forbindelser med den almene formel II og III, som skal anvendes i praksis, og til reaktionsbetingelserne.

Egnede salte af forbindelserne med den almene formel III kan være salte med uorganiske baser, f.eks. alkalimetalsalte (f.eks. natriumsaltet eller kaliumsaltet) eller et jordalkalimetalsalt (f.eks.

30 calciumsaltet eller magnesiumsaltet), et salt med en organisk base såsom en tertiær amin (f.eks. trimethylaminsaltet, triethylaminsal-tet, Ν,Ν-dimethylanilinsaltet eller pyridinsaltet), eller et salt med en uorganisk syre (f.eks. hydrochloridet eller hydrobromidet).

DK 163832 B

17

Reaktionen udføres sædvanligvis i et sædvanligt opløsningsmiddel, f.eks. vand, acetone, dioxan, acetonitril, chloroform, benzen, methy-lenchlorid, ethylenchlorid, tetrahydrofuran, ethylacetat, N,N-dime-thylformamid eller pyridin eller hvilket som helst andet opløsnings-5 middel, som ikke har skadelig indflydelse på reaktionen, eller eventuelt en blanding deraf.

Når acyleringsmidlet med den almene formel III anvendes i form af den fri syre eller et salt i denne reaktion, udføres reaktionen fortrinsvis i nærværelse af et kondensationsmiddel, f.eks. en carbo-10 diimidforbindelse (f.eks. N,N'-dicyclohexylcarbodiimid, N-cyclohexyl-N'-morpholinoethylcarbodiimid, N-cyclohexyl-N'-(4-diethylaminocyclo-hexyl)carbodiimid, N,N'-diethylcarbodiimid, N,N'-diisopropylcarbodii-mid eller N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid), en bisimi-dazolidforbindelse (f.eks. N,N'-carbonylbis(2-methylimidazol), en 15 iminforbindelse (f.eks. pentamethylenketen-N-cyclohexylimin eller diphenylketen-N-cyclohexylimin), en olefinisk eller acetylenisk etherforbindelse (f.eks. acetoxyacetylen eller β-chlorvinyle thylet-her), l-(4-chlorbenzensulfonyloxy)-6-chlor-lH-benzotriazol, N-ethyl-benzisoxazoliumsalt, N-ethyl-5-phenylisoxazolium-3'-sulfonat, en 20 phosphorforbindelse (f.eks. polyphosphorsyre, trialkylphosphit, ethylpolyphosphat, isopropylpolyphosphat, phosphoroxychlorid, phos-phortrichlorid, diethylchlorphosphit eller orthophenylenchlorphosp-hit), thionylchloridoxalylchlorid eller Vilsmeier's reagens fremstillet ved at omsætte dimethylformamid med thionylchlorid, phos-25 phoroxychlorid eller phosgen.

For selektivt og i højt udbytte at vinde en syn-isomer af oxyimino-forbindelse I foretrækkes det derfor at anvende en syn-isomer af oxyiminoacyleringsmiddel III og at udføre reaktionen under udvalgte reaktionsbetingelser. Dvs., at en syn-isomer af oxyiminoforbindelse I 30 kan vindes selektivt og i højt udbytte ved at udføre reaktionen af en forbindelse med den almene formel II med en syn-isomer af oxyiminoacyleringsmiddel III, f.eks. i nærværelse af et Vilsmeier-reagens, som beskrevet ovenfor, og under omtrent neutrale betingelser.

18

DK 163832 B

De her omhandlede forbindelser med den almene formel I og salte deraf er nyttige som antimikrobielle midler, og nogle af disse kan også anvendes som udgangsmaterialer i de følgende fremgangsmåder.

Fremgangsmåde B: Etherificering.

5 En forbindelse med den almene formel Ic eller et salt deraf kan fremstilles ved at omsætte en forbindelse med den almene formel V eller et salt deraf med et etherificeringsmiddel.

Udgangsforbindelsen med den almene formel V svarer til en forbindelse med den almene formel I, og den kan fremstilles ved de ovenfor nævnte 10 fremgangsmåde A og også ved den nedenstående fremgangsmåde C.

Egnede eksempler på etherificeringsmidler kan være sædvanlige alky-leringsmidler såsom dialkylsulfater (f.eks. dimethylsulfat eller diethylsulfat), diazoalkaner (f.eks. diazomethan eller diazoethan), alkylhalogenider (f.eks. methyliodid, ethyliodid eller ethylbromid) 15 eller alkylsulfonater (f.eks. methyltosylat), de tilsvarende alkeny-lerings-, alkynylerings- eller cycloalkyleringsmidler, hvori den aliphatiske carbonhydridgruppe kan være substitueret med halogen, carboxy eller esterificeret carboxy, f.eks. alkenylhalogenider (f.eks. allyliodid), alkynylhalogenider (f.eks. propargylbromid), 20 cycloalkylhalogenider (f.eks. cyclohexylbromid) eller lavere alkoxy-carbonylalkylhalogenider (f.eks. ethoxycarbonylmethyliodid).

Når der anvendes diazoalkaner som etherificeringsmiddel, udføres reaktionen sædvanligvis i et opløsningsmiddel såsom diethylether eller dioxan eller et andet opløsningsmiddel, som ikke har skadelig 25 indvirkning på reaktionen, under afkøling eller ved stuetemperatur.

Når der anvendes et andet etherificeringsmiddel, udføres reaktionen sædvanligvis i et opløsningsmiddel såsom vand, acetone, ethanol, diethylether eller dimethylformamid eller et andet opløsningsmiddel, som ikke har skadelig indflydelse på reaktionen, og reaktionen kan 30 udføres under afkøling, ved stuetemperatur eller under opvarmning, fortrinsvis i nærværelse af en base, f.eks. en uorganisk eller orga-

DK 163832 B

19 nisk base, og egnede eksempler derpå er de samme, som er angivet nedenfor til anvendelse ved den basiske hydrolyse i fremgangsmåde D.

Fremgangsmåde C: Thiazolringdannelse.

En forbindelse med den almene formel Id eller et salt deraf kan 5 fremstilles ved at omsætte en forbindelse med den almene formel VI eller et salt deraf med en thiourinstofforbindelse med den almene formel VII.

Reaktionen udføres sædvanligvis i et opløsningsmiddel såsom vand, alkohol (f.eks. methanol eller ethanol), benzen, dimethylformamid 10 eller tetrahydrofuran eller et andet opløsningsmiddel, som ikke har skadelig indvirkning på reaktionen, ved stuetemperatur eller under opvarmning.

Denne fremgangsmåde er en alternativ fremgangsmåde og særdeles fordelagtig til fremstilling af den aktive forbindelse med den almene 15 formel Id, især forbindelsen med den almene formel Id, hvor betegner lavere alkyl, og betegner amino, ud fra en forbindelse med den almene formel IV.

Fremgangsmåde D: Eliminering af den aminobeskyttende gruppe.

En forbindelse med den almene formel le eller et salt deraf kan 20 fremstilles ved at underkaste en forbindelse med den almene formel VIII eller et salt deraf en reaktion til eliminering af den beskyttende gruppe i den beskyttede aminogruppe R^a.

Elimineringsreaktionen kan udføres på i og for sig kendt måde, f.eks. ved hydrolyse eller reduktion. Disse fremgangsmåder kan udvælges i 25 overensstemmelse med arten af den beskyttende gruppe, som skal elimineres .

Hydrolysen kan udføres under anvendelse af en syre (sur hydrolyse), en base (basisk hydrolyse) eller hydrazin.

20

DK 163832 B

Blandt disse metoder er syrehydrolysen en af de almindelige og foretrukne måder til eliminering af beskyttelsesgrupper såsom acylgrup-per, f.eks. substitueret eller usubstitueret lavere alkanoyl, substitueret eller usubstitueret lavere alkoxycarbonyl, substitueret 5 eller usubstitueret aryl-lavere alkoxycarbonyl, lavere cycloalkoxy-carbonyl, substitueret phenylthio, substitueret alkyliden, substitueret aralkyliden eller substitueret cycloalkyliden; detaljerede oplysninger herom er angivet i forbindelse med omtalen af den N* beskyttende gruppe.

10 En egnet syre til anvendelse ved denne syrehydrolyse kan være en organisk eller uorganisk syre, f.eks. myresyre, trifluoreddikesyre, benzensulfonsyre, p-toluensulfonsyre, saltsyre eller kationbytter-harpiks. Foretrukne syrer er sådanne, som let kan skilles fra reaktionsproduktet på sædvanlig måde, f.eks. neutralisering eller destil-15 lation under reduceret tryk, f.eks. myresyre, trifluoreddikesyre eller saltsyre. En egnet syre for reaktionen kan udvælges under hensyntagen til de kemiske egenskaber af udgangsforbindelsen og af produktet samt af arten af den beskyttelsesgruppe, som skal elimineres. Syrehydrolysen kan udføres i nærværelse eller fraværelse af et 20 opløsningsmiddel. Egnede opløsningsmidler kan være sædvanlige organiske opløsningsmidler, vand eller blandinger deraf, som ikke har skadelig indvirkning på reaktionen. Især når hydrolysen udføres med trifluoreddikesyre, kan reaktionen accelereres ved tilsætning af anisol.

25 Hydrolyse under anvendelse af en base kan anvendes til at eliminere sådanne beskyttelsesgrupper som acylgrupper, fortrinsvis halogenalka-noyl (f.eks. trifluoracetyl). En egnet base kan f.eks. være en uorganisk base såsom alkalimetalhydroxid (f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid), et jordalkalimetalhydroxid (f.eks. magnesiumhydroxid 30 eller calciumhydroxid), et alkalimetalcarbonat (f.eks. natriumcarbo-nat eller kaliumcarbonat), et jordalkalimetalcarbonat (f.eks. magne-siumcarbonat eller calciumcarbonat), et alkalimetalbicarbonat (f.eks. natriumbicarbonat eller kaliumbicarbonat), et j ordalkalimetalphosphat (f.eks. magnesiumphosphat eller calciumphosphat), eller et alkalime-35 talhydrogenphosphat (f.eks. dinatriumhydrogenphosphat eller dikalium-hydrogenphosphat) eller en organisk base såsom et alkalimetalacetat

DK 163832 B

21 (f.eks. natriumacetat eller kaliumacetat), en trialkylamin (f.eks. trimethylamin eller triethylamin), picolin, N-methylpyrrolidin, N-methylmorpholin, l,5-diazabicyclo[4,3,0]-5-nonen, 1,4-diazabicyclo[2,2,2]octan, l,5-diazabicyclo[5,4,0]-7-undecen eller en 5 anionbytterharpiks.

Hydrolyse under anvendelse af en base udføres ofte i vand eller et sædvanligt organisk opløsningsmiddel eller en blanding deraf.

Hydrolyse under anvendelse af hydrazin kan anvendes til at eliminere beskyttelsesgrupper såsom dibasisk acyl, f.eks. succinyl eller phtha-10 loyl.

Reduktion kan anvendes til at eliminere beskyttelsesgrupper såsom acyl, f.eks. halogen-lavere alkoxycarbonyl (f.eks. trichlorethoxycar-bonyl), substitueret eller usubstitueret aryl-lavere alkoxycarbonyl (f.eks. benzyloxycarbonyl eller p-nitrobenzyloxycarbonyl), 2-pyridyl-15 methoxycarbonyl eller aralkyl (f.eks. benzyl, benzhydryl eller tri-tyl). En egnet reduktion kan også udføres under anvendelse af et alkalimetalborhydrid (f.eks. natriumborhydrid) eller sædvanlig katalytisk hydrogenolyse.

Endvidere kan beskyttelsesgrupper som f.eks. halogen-lavere alkoxy-20 carbonyl eller 8-quinolyloxycarbonyl elimineres ved behandling med et tungtmetal såsom kobber eller zink.

Reaktionstemperaturen er ikke kritisk, og den kan vælges frit under hensyntagen til de kemiske egenskaber af udgangsprodukterne og reaktionsprodukterne samt arten af den N-beskyttende gruppe og den an-25 vendte fremgangsmåde, og reaktionen udføres fortrinsvis under milde betingelser, f.eks. under afkøling, ved stuetemperatur eller ved svagt forhøjet temperatur.

Det falder inden for den foreliggende fremgangsmådes rammer, at den funktionelt farmaceutisk acceptable carboxylgruppe R-* simul-30 tant omdannes til en fri carboxylgruppe under den ovenfor anførte reaktion eller i efterbehandlingen.

DK 163832B

22

Med hensyn til denne fremgangsmåde er det klart, at fremgangsmådens formål er at fremstille den generelt mere aktive forbindelse med den almene formel I', hvor R^a betegner aminothiazoly1, ved at eliminere beskyttelsesgruppen i den beskyttede aminogruppe i en forbindelse med 5 den almene formel VIII, som er fremstillet ved de andre ovenfor og nedenfor angivne fremgangsmåder.

Fremgangsmåde E: 3-Cephemdannelse.

Denne fremgangsmåde er det endelige trin i omdannelsen af 3-hydroxy-cephemforbindelsen med den almene formel IX til den mere aktive 3-10 cephemforbindelse med den almene formel Ih eller et salt deraf. Dvs., at en forbindelse med den almene formel Ih eller et salt deraf kan fremstilles ved at behandle en forbindelse med den almene formel Ig, som er fremstillet ved 0-acylering af den tilsvarende forbindelse, hvor R^a er H.

15 O-Acyleringen kan ske ved hjælp af et reaktivt derivat R^a-OH, som kan være et syrehalogenid, anhydrid, amid, aktiveret ester eller aktiveret amid, og detaljerede oplysninger herom er angivet i forbindelse med omtalen af forbindelsen med den almene formel III i fremgangsmåde A; derivatet er fortrinsvis et acylhalogenid, f.eks. et 20 lavere alkanoylhalogenid (f.eks. acetylchlorid), et aroylhalogenid (f.eks. benzoylchlorid), et lavere alkansulfonylhalogenid (f.eks. mesylchlorid, mesylbromid eller ethansulfonylchlorid), et arensulfo-nylhalogenid (f.eks. tosylchlorid), et acylazid såsom et lavere alkansulfonylazid (f.eks. mesylazid) eller et arensulfonylazid 25 (f.eks. tosylazid), og især foretrækkes lavere alkansulfonylhalogeni-der eller arensulfonylhalogenider.

Reaktionen udføres sædvanligvis i et sædvanligt opløsningsmiddel såsom dimethylformamid, chloroform eller methylenchlorid eller et andet opløsningsmiddel, som ikke har skadelig indvirkning på reaktio-30 nen, og reaktionen kan udføres under afkøling, ved stuetemperatur eller under svag· opvarmning.

Når der anvendes et acylhalogenid som acyleringsmiddel, udføres 23

DK 163832B

reaktionen sædvanligvis i nærværelse af en base, som er eksemplificeret i sammenhæng med den ovenstående fremgangsmåde D.

Foretrukne baser er uorganiske baser såsom metalhydroxider (f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid), metalcarbonater (f.eks.

5 natriumcarbonat, kaliumcarbonat eller magnesiumcarbonat), eller metalbicarbonater (f.eks. natriumbicarbonat eller kaliumbicarbonat) eller organiske baser såsom tertiære aminer (f.eks. trimethylamin, triethylamin eller pyridin) eller alkalimetalalkoxider (f.eks. natriummethoxid eller natriumethoxid).

10 Reaktionen udføres sædvanligvis i et sædvanligt opløsningsmiddel såsom en alkohol, dimethylformamid, chloroform, methylenchlorid eller et andet opløsningsmiddel, som ikke har skadelig indvirkning på reaktionen, og reaktionen kan udføres under afkøling, ved stuetemperatur eller under svag opvarmning.

15 Fremgangsmåde F: Esterificering.

Denne fremgangsmåde anvendes til fremstilling af en esterforbindelse med den almene formel Ij eller et salt deraf til forbedring af de kemiske, fysiologiske og/eller farmaceutiske egenskaber af den tilsvarende fri carboxylforbindelse med den almene formel XII, som 20 svarer til 3-cephemforbindelsen med den almene formel I, hvor betegner carboxy, eller et salt deraf.

Esterificeringen udføres ved at omsætte en fri carboxylforbindelse med den almene formel XII, et reaktivt derivat deraf ved carboxyl-gruppen eller et salt deraf med et esterificeringsmiddel.

25 Det foretrukne reaktive derivat af carboxylgruppen i forbindelsen med den almene formel XII er sådanne, som er angivet i forbindelse med den almene formel III, som nærmere er angivet i fremgangsmåde A.

Esterificeringsmidlet kan være en hydroxyforbindelse eller et tilsvarende reaktivt middel.

DK 163832 B

24

Egnede eksempler på hydroxyforbindelser er substituerede eller usub-stituerede alkoholer såsom alkanoler, aralkanoler eller arenoler, som f.eks. kan være en substitueret alkohol såsom en alkanoyloxy-lavere alkanol (f.eks. acetoxymethanol, propionyloxymethanol, butyryloxymet-5 hanol, pentanoyloxymethanol, hexanoyloxymethanol, acetoxyethanol, propionyloxyethanol, butyryloxyethanol, pentanoyloxyethanol, hexanoy-loxyethanol, acetoxypropanol, propionyloxypropanol, hexanoyloxypropa-nol, hexanoyloxyhexanol eller palmitoyloxymethanol), en halogenlavere alkanol (f.eks. mono-, di- eller tri-chlorethanol), lavere 10 cycloalkyl-lavere alkanol (f.eks. 1-cyclopropylethanol), substitueret aryl-lavere alkanol (f.eks. 4-nitrobenzylalkohol, 4-chlorbenzylalko-hol, 4-methoxybenzylalkohol, 3,5-di-tert.butyl-4-hydroxybenzylalkohol eller bis(methoxyphenyl)methanol, eller en substitueret arenol (f.eks. 4-methoxyphenol) eller den tilsvarende usubstituerede alko-15 hol.

Et egnet reaktivt ækvivalent af hydroxyforbindelsen kan være en sædvanlig forbindelse, f.eks. et halogenid, et alkansulfonat, et arensulfonat eller et salt af hydroxyforbindelsen, diazoalkan eller diazoaralkan.

20 Et foretrukket halogenid af hydroxyforbindelsen er chloridet, bromi-det eller iodidet.

Foretrukne alkan- eller arensulfonater af hydroxyforbindelsen er methansulfonatet, ethansulfonatet, benzensulfonatet eller tosylatet.

Et foretrukket salt af hydroxyforbindelsen er et alkalimetalsalt, 25 f.eks. et lithiumsalt, et natriumsalt eller et kaliumsalt.

Foretrukne diazoalkaner eller diazoaralkaner er diazomethan, diazo-ethan, diazopropan eller diphenyldiazomethan.

Reaktionen kan udføres i nærværelse eller fraværelse af et opløs -30 ningsmiddel, f.eks. N,N-dimethylformamid, dimethylsulfoxid eller et andet opløsningsmiddel, som ikke påvirker reaktionen skadeligt, og reaktionen kan udføres under afkøling, ved stuetemperatur eller under

DK 163832 B

25 opvarmning. Den flydende hydroxyforbindelse kan også anvendes som opløsningsmiddel ved denne reaktion.

Reaktionen kan fortrinsvis udføres i nærværelse af en uorganisk eller organisk base, som er nærmere angivet ovenfor i sammenhæng med frem-5 gangsmåde D.

Når der fremstilles en substitueret eller usubstitueret arylester med den almene formel Ij, især en substitueret eller usubstitueret phe-nylester, skal denne reaktion udføres ved at omsætte, 10 a) en forbindelse med den almene formel XII eller et salt deraf med phenol eller et salt deraf i nærværelse af et kondensationsmiddel, f.eks. de ovenfor i sammenhæng med fremgangsmåde A angivne, eller b) et reaktivt derivat af en forbindelse med den almene formel XII, fortrinsvis et blandet syreanhydrid af forbindelsen med den almene 15 formel XII med phenol eller et salt deraf i nærværelse af en base.

Når der ved denne reaktion som udgangsmateriale anvendes en forbindelse med den almene formel (Ik), hvor er carboxy(C^.g)alkyl, kan denne carboxygruppe også esterificeres, alt afhængigt af reagenset og reaktionsbetingelserne, og denne reaktions variant er et aspekt af 20 den her omhandlede fremgangsmåde.

Når 2-cephemforbindelsen svarende til forbindelsen med den almene formel Ij fremstilles, kan denne 2-cephemforbindelse endvidere omdannes til 3-cephemforbindelsen med den almene formel Ij ved at oxidere og derpå at reducere den resulterende S-oxidforbindelse på i 25 og for sig kendt måde. Denne reaktionsvariant er også et aspekt af den her omhandlede fremgangsmåde.

Fremgangsmåde G: Carboxydannelse.

Ved denne fremgangsmåde fremstilles en fri carboxyforbindelse med den almene formel Ik eller et salt deraf.

26

DK 163832B

Esterificeringen af carboxylgruppen i forbindelsen med den almene formel XIII har hovedsageligt betydning ved den kemiske syntetiske fremstilling, som det er belyst ovenfor.

Denne fremgangsmåde udføres ved at omdanne den funktionelle modifi-5 cerede carboxylgruppe i udgangsforbindelsen med den almene formel XIII til en fri carboxylgruppe, og foretrukne betydninger for symbolet R^b som funktionelt modificeret carboxy i forbindelsen med den almene formel XIII er esterificeret carboxy, som er eksemplificeret for i forbindelsen med den almene formel I.

10 Ved denne fremgangsmåde anvendes sædvanlige reaktioner, f.eks. hydrolyse eller reduktion.

Der kan anvendes en sædvanlig hydrolysereaktion under anvendelse af en syre, en base, et enzym eller et enzymatisk præparat.

Egnede eksempler på syrer og baser er de samme, som er anført ovenfor 15 i sammenhæng med fremgangsmåde D, og den sure eller basiske hydrolyse kan udføres på analog måde som ved fremgangsmåde D.

Et egnet enzym kan være en esterase eller et esterasepræparat, som har esterasevirkning, f.eks. et med en mikroorganisme dyrket substrat eller materiale fra mikroorganismer eller et præparat af dyre- eller 20 plantevæv, fortrinsvis et med en mikroorganisme dyrket substrat eller materiale derfra.

En esterase, som skal anvendes ved en enzymatisk hydrolyse, kan ikke blot anvendes i renset tilstand, men også i rå tilstand.

Sådanne esteraser har ofte vist sig at være almindelige, f.eks. i 25 forskellige slags mikroorganismer, som let kan isoleres fra en jordprøve eller andre kilder på sædvanlig måde, og de kan let udvælges blandt de kulturer, som er tilgængelige på offentlige steder for kulturdeponering, f.eks. ATCC (American Type Culture Collection,

Maryland, USA), IAM (Institute of Applied Microbiology, University of 30 Tokyo, Japan), IFO (Institute For Fermentation, Osaka, Japan), IID (The Institute for Infectious Diseases, University of Tokyo, Japan),

DK 163832 B

27 CBS (Centraalbureau voor Schimmelcultures, Baarn, Holland), FERM (Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Chiba, Japan) og NRRL (Northern Utilization Research and Development Division, U.S. Department of Agriculture, Illinois, 5 U.S.A.).

Mikroorganismer med en es te rase aktivitet kan f.eks. høre til én af slægterne Bacillus, Corynebacterium, Micrococcus, Flavobacterium,

Salmonella, Staphylococcus, Vibrio, Microbacterium, Escherichia, Arthrobacter, Azotobacter, Alcaligenes, Rhizobium, Brevibacterium, 10 Kluyvera Proteus, Sarcina, Pseudomonas, Xanthomonas, Protaminobacter eller Comamonus.

Som eksempler på de ovenfor anførte mikroorganismer kan nævnes Bacillus subtilis IAM-1069, IAM-1107, IAM-1214, Bacillus sphaericus IAM-1286, Corynebacterium equi IAM-1308, Micrococcus varians IAM-1314, 15 Flavobacterium rigeus IAM-1238, Salmonella typhimurium IAM-1406,

Staphylococcus epidermidis IAM-1296, Microbacterium flavum IAM-1642, Alcaligenes faecalis ATCC-8750, Arthrobacter simplex ATCC-6946,

Azotobacter vinelandii IAM-1078, Escherichia coli IAM-1101, Rhizobium japonicum IAM-0001, Vibrio metchnikovii IAM-1039, Brevibacterium 20 helvolum IAM-1637, Protaminobacter alboflavum IAM-1040, Comamonas terrigena IFO-12685, Sarcina lutea IAM-1099, Pseudomonas schuylkilli-ensis IAM-1055 eller Xanthomonas trifolii ATCC-12287.

Ved den enzymatiske hydrolyse kan esterasen fortrinsvis anvendes i form af et dyrket medium, som fås ved at dyrke mikroorganismer med en 25 esteraseaktivitet på passende måde eller som et bearbejdet materiale deraf.

Dyrkningen af mikroorganismer kan generelt udføres på sædvanlig måde.

Som det anvendte dyrkningsmedium kan der anvendes et næringsmedium, som indeholder kilder assimilerbart carbon og nitrogen og uorganiske 30 salte. De foretrukne carbonkilder er f.eks. glucose, saccharose, lactose, sukkerarter, glycerol og stivelse. Foretrukne kilder for nitrogen er f.eks. kødekstrakt, pepton, glutenmel, majsmel, bomulds-frømel, sojabønnemel, maj sstøbevand, gærekstrakter, caseinhydrolysa-ter eller aminosyrer samt uorganiske og organiske nitrogenkilder

DK 163832 B

28 såsom ammoniumsalte (f.eks. ammoniumsulfat, ammoniumnitrat eller ammoniumphosphat) eller natriumnitrat. Der kan også, om ønsket, anvendes mineralske salte, f.eks. calciumcarbonat, natrium- eller kaliumphosphat, magnesiumsalte eller kobbersalte samt forskellige 5 vitaminer.

Hensigtsmæssig pH-værdi i dyrkningsmediet, hensigtsmæssig dyrkningstemperatur og hensigtsmæssig dyrkningstid afhænger af arten af den anvendte mikroorganisme. En ønskelig pH-værdi ligger sædvanligvis i området 5-8. Temperaturen vælges sædvanligvis fra ca. 20°C til ca.

10 35°C. Dyrkningstiden vælges sædvanligvis i området 20 - 120 timer.

Til den enzymatiske hydrolyse ved denne fremgangsmåde kan det således vundne dyrkede medium anvendes per se eller i form af et bearbejdet materiale deraf. Det "bearbejdede materiale" fra et dyrket medium betyder et hvilket som helst præparat, som har esteraseaktivitet, og 15 som er bearbejdet på sædvanlige egnede måder til forøgelse af denne esteraseaktivitet.

Esteraseaktiviteten af det dyrkede medium er til stede i cellerne (intracellulært) og/eller uden for cellerne (extracellulært).

Når aktiviteten i hovedsagen er i cellerne, kan f.eks. følgende 20 præparat anvendes som et bearbejdet materiale af dyrkningsmediet: 1) Rå celler; adskilt fra dyrkningsmediet på sædvanlig måde, f.eks. ved filtrering eller centrifugering, 2) tørrede celler; vundet ved at tørre disse rå celler på sædvanlig måde, f.eks. ved lyofilisering og vakuumtørring, 25 3) et cellefrit ekstrakt; vundet ved at ødelægge disse rå eller tørrede celler på sædvanlig måde (f.eks. ved at formale cellerne sammen med aluminiumoxid eller strandsand eller at behandle cellerne med ultralydbølger), eller 4) en enzymatisk opløsning; fremstillet ved rensning eller delvis 30 rensning af det cellefri ekstrakt på sædvanlig måde.

DK 163832 B ) 29 Når aktiviteten i hovedsagen er uden for cellerne, kan f.eks. følgende præparat anvendes som bearbejdet materiale: 1) En supernatant eller et filtrat; fremstillet ud fra dyrkningsmediet på sædvanlig måde, eller 5 2) en enzymopløsning; fremstillet ved rensning eller delvis rensning af denne supernatant eller dette filtrat på sædvanlig måde.

Den enzymatiske hydrolyse udføres ved at bringe forbindelsen med den almene formel XIII i kontakt med et dyrkningsmedium fra mikroorganismerne eller et bearbejdet materiale deraf i et vandigt medium såsom 10 vand eller en pufferoplcsning (f.eks. phosphatpuffer), fortrinsvis i nærværelse af et sædvanligt overfladeaktivt middel. Dvs., at reaktionen sædvanligvis udføres ved at sætte forbindelsen med den almene formel XIII til et dyrkningsmedium af mikroorganismen eller et flydende bearbejdet materiale deraf (f.eks. supernatant, filtrat eller 15 enzymopløsning) eller til opløsningen eller suspensionen af dyrkningsmediet eller et bearbejdet materiale deraf i et vandigt medium.

Undertiden foretrækkes det at omryste denne reaktionsblanding.

Reaktionsblandingens foretrukne pH-værdi, substratkoncentrationerne, reaktionstiden og reaktionstemperaturen kan varieres med egenskaberne 20 af det dyrkningsmedium eller det bearbejdede materiale deraf, som skal anvendes, eller den forbindelse med den almene formel XIII, som skal anvendes. Foretrukne reaktionsbetingelser er imidlertid: pH-Værdi i området 4-10, mere foretrukket ved pH-værdi 6-8, reaktionstemperatur 20 - 50°C, mere foretrukket ved 25 - 35°C, og reak-25 tionstiden er 1 - 100 timer. Koncentrationen af den som substrat anvendte udgangsforbindelse med den almene formel XIII kan i reaktionsblandingen ligge i området 0,1 - 100 mg pr. ml, fortrinsvis 1 - 20 mg pr. ml.

Reduktionen ved denne fremgangsmåde kan udføres analogt med den 30 ovenfor anførte fremgangsmåde D.

DK 163832 B

30

Det falder inden for opfindelsens rammer at eliminere den beskyttende gruppe i den beskyttede aminogruppe R^, som er substituent på thiazolylgruppen RI, og/eller at omdanne den esterificerede car-boxylgruppe, som er fakultativ substituent på den aliphatiske car-5 bonhydridgruppe R^ til en fri carboxylgruppe under denne reaktion eller ved efterbehandlingen.

De ved de ovenfor beskrevne fremgangsmåder fremstillede forbindelser kan isoleres og renses på sædvanlig måde.

Når den fremstillede forbindelse med den almene formel I har en fri 10 carboxylsyregruppe R^ og/eller fri aminogruppe R^, kan den omdannes til et farmaceutisk acceptabelt salt på i og for sig kendt måde.

De fremstillede forbindelser med den under den almene formel I, deres farmaceutisk acceptable salte og bioprecursorer derfor udviser en høj antimikrobiel virkning og inhiberer væksten af en lang række patogene 15 mikroorganismer, herunder grampositive og gramnegative bakterier, og er nyttige som antimikrobielle midler.

Ved de ovennævnte fremgangsmåder kan især fremstilles følgende forbindelser: 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -2,3-dimethyl-3-20 cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7 - [2- (1,2,3-thiadiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-car-boxylsyre (syn-isomer) 25 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-car- boxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isopropoxyiminoacetamido ]-3-cephem-4 -carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-car-30 boxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isobutyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) DK 163832 B ' 31 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-n-butoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-n-hexyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 5 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-cyclohexyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4- carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-allyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propargyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-10 carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxycarbonylmethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido]-3-cephem- 4-carboxylsyre (syn-isomer) 15 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-n-pentyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4- carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(2,2,2-trifluorethoxyimino)acetamido] - 3 -cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-(2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(2-chlorethoxyimino)ace tamido] - 3 -cephem-20 -4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-n-octyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 25 7-(2-(1,2,3-thiadiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4- carboxylsyre (syn-isomer) 7-(2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-trifluormethoxyiminoacetamido]-3-cephem- 4-carboxylsyre (syn-isomer) de tilsvarende funktionelt esterificerede derivater, f.eks. hexano-30 yloxymethyl-7-(2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3 - cephem-4-carboxylat (syn-isomer) pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) 4-nitrobenzy1-7-(2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoace tamido]- 3 -35 cephem-4-carboxylat (syn-isomer) eller de tilsvarende salte, f.eks.

natrium-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem--4-carboxylat (syn-isomer)

DK 163832 B

32 calcium-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem- 4-carboxylat (syn-isomer) magnesium-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) 5 argininsaltet af 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyirainoacetamido] - 3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) lysinsaltet af 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carlo boxylsyre, hydrochlorid (syn-isomer).

Til påvisning af nytten af de aktive forbindelser med den almene formel 1' er nedenfor anført testdata for nogle repræsentative forbindelser med den almene formel I.

15 1. In vitro antibakteriel aktivitet: 1) Testmetode.

Den antibakterielle aktivitet in vitro bestemmes ved den nedenfor beskrevne dobbelte agar-pladefortyndingsmetode.

Indholdet af et podenåleøje af en 100 ganges fortynding af en kultur, 20 der har stået natten over, af hver teststamme i trypticase-sojasubstrat stryges ud på hjerteinfusionsagar (HI-agar), som indeholder graduerede koncentrationer af testforbindelsen, og der inkuberes ved 37°C i 20 timer. Den mindste inhiberende koncentration (MIC) udtrykkes i /ig/ml.

25 2) Testforbindelser: 1. 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 2. 7 - [ 2 - ( 2 -amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3 -cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 30 3. 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4- carboxylsyre (syn-isomer) 4. 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-n-propoxyiminoacetamido]-3-cephem- 4-carboxylsyre (syn-isomer)

DK 163832B

33 5. 7 - [ 2 - (2 - amino -4- thiazolyl) - 2-n-butoxyiminoacetamido ] - 3 - cephem- 4 -carboxylsyre (syn-isomer) 6. 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2 -allyloxyiminoacetamido]- 3 -cephem-4 -carboxylsyre (syn-isomer) 5 7. 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propargyloxyiminoacetamido] -3- cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 8. 7- [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-n-pentyloxyiminoacetamido]-3-ce-phem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 9. 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-n-hexyloxyiminoacetamido] -3-ce- 10 phem-4-carboxylsyre (syn-isomer) 10. 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl)-2-cyclohexyloxyiminoacetamido] -3--cephem-4-carboxy1syre (syn-isomer) 11. 7- [2 - (2-amino-4-thiazolyl) -2 - (2-chlorethoxyimino)acetamido] -3--cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) og 15 12. 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(2,2,2-trifluorethoxyimino)acet- mido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

i

DK 163832 B

34

LO lO lO

LO CM N ΙΊ LO CO

t" LO ιΗΟΟΟ lO H

S Η k, ^ 1, 1.

H O O O O Η Γ0 _ vi> vi) v/ii yn_

LO LO LO

LO CM CM CM LO LO

LO CM O O O tO LO

^ SV«,«, S s

H OOOO HH

^ Vil v1 v" Vlj LO

H_________ LO CM lO LO LO

g CM tO CM O O CM LO CM

\ H - 1> vw«. 1 ·»

tn COCTLLO LO LO Η O O O O H LO

3 r- ro o cm cm to cm v(, y.

^ O OOOO r-lLD____

_ VI» lO

C -—-—----------- LO CM LO

O LOiHOiHCMLOLO

•h to m s. - ^ » -

-P LO CM CM LOCO Η Η O Ο Ο O Η N

ro TT LO CM O O H LO iH Vil 1-1

s k «, «. s s ·« V” VM

•P i-t O p Ο O H ro £ VM vi) V»_ · 0 O tn io io c\ co oo cn to lo

C CO LO CM CM CM LO O O CO H t2 Γ0 lO tO LO

0 H OOOO LO Γ" r-i “· - >· - '

X CO - ^ ^ - 1 O CO O O iH ri CM

CO OOOO H O Mil η Q) V» V» VJ1 VJ1 Ό--___--- c

0 LO LO LO LO to CO LO

P σι CM CM tO LO LO CM O r~ lO to 0 CO —I H O O CM LO OL - - 1«··> ' »

XX CM r-l rH O O O rH CM

H O O O O O LO CM VII r-l

XX VII vn H

c •H ' .....-.1 ......... I —Ml—. ..II— .

0 LO LO lO LO GLCOCTtLOCOCO

P LO CM CM CM CM O LO COiHCOCMlOHiH

Ui r—i CM OOOO CO LO CO 1- 1. ·.·2· » ·» Ό - ^ ^ o co o o i—i ro ro

C LO OOOO O iH

3 Vil V,I vn vn / LO · /

U CM O P / O

C / O CM c / CM

/ h ro to / ro lo 0 / ro iroroco ø / to ø ω co to / d ± ro co o ro/3 ro oo o

P / 0 < -H r-1 c ro H / 0 Η H C W

2

O / P HC-HC 0 / P C H G

p Ό / 3 orocnro 'u / 3 o ii) i? ø Q) c / ro -H wg-H3 u c ro h w g h 3 o p h / η η ο η ρ w ή / η η ο η ρ ro ro ja/ w o p ø h ø ø ja/ ro o p ø h ø ø -p p / 3 u ro g ja ro o u p u ro cjaro o '-ιο/ o υ α u p o/o tnaro p 3 Cl,/ o ro h Proro g,/ ø ro h pwro w / ro o ·ρ 3 ro h ro o g Zoo -n 3 ro h ro o g 0 / g OH ja cm > H g c cpl / g oh j: cm > Hg c σ, s-ι / goioi h o^ro / g o i o i ion o ro -p / ro HU-HuroøwgoH /ro hohumcmøwEo-h w / -p >i>aPl-33H30H4J /+1 >ιΐρΡΐρ3σ·Η3 0Η+ΐ o / wja ø øroøOiro / ro ja ø ø h ro ø 10 i ro eh / +) aoc jaf-o-pja-ppup /·ρ acu jai-a-ρι j:-p3up / ro rocLUaaoøoøgiP / ro rocnoæosøoøE-iP — / ø J-ioroHpHprouø / ø -pomhp«]hpwuø

m _E-ι tom HZ g, tc; ¢, 1X2 M / E-< CflcMCJZ&iHX&PkgCO

DK 163832 B

35 2. Beskyttelsesvirkning mod eksperimentelle infektioner i mus: 1) Testmetode.

4 uger gamle hanmus fra stamme ICR, som hver vejer 18,5 - 21,5 g, anvendes i grupper på 10 mus. Testbakterien dyrkes natten over ved 5 37eC på trypticase-sojaagar og suspenderes derpå i 5% mucin til dannelse af en suspension af celler af hver stamme, som skal anvendes til infektion. Musene podes intraperitonealt med 0,5 ml af suspensionen. En opløsning indeholdende hver testforbindelse administreres subcutant til musene i forskellige doser 1 time efter infektionen.

10 ED50-Værdierne beregnes ud fra antallet af overlevende mus for hver dosis efter 4 dages observation.

2) Testforbindelser.

1. 7- [2- (2-Amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4- -carboxylsyre (syn-isomer) 15 reference 7- [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]cephalo-sporansyre (syn-isomer), kendt fra DK 154.939.

3) Testresultater:

Testbakterie Podning ΕΡςη(s.c.) (mgdtg) MIC (yug/ml)_ (celler pr. mus) Testforbindelse—InckulumIjEestforiaindslss, __1__1 ......... -]-JrpfftTTinCff-

Escherichia _ .

coli 54 1,1 x 10' 0,95 2,8 10° 0,78 3,13 ____10~212 0,05 0,1

Klebsiella pneumoniae 39 8 x 10& <0,98 0,995 10° 0,39 3,13 ____10~2 £0,025 0,05

Proteus r rettgeri 24 9,9 x 10 0,39 1,171 10° 1,56 50 _______10~2 £0,025 0,1

Serratia 13 n marcescens 58 1,2 x 10 3,5621J 31,427 10u IS 50 ___ |10~2 10,39 1 1,56 1 - kultur, som har stået natten over *2 - 100 gange fortynding af kultur, som har stået natten over 20 13 1 behandlet med to delte doser 1 time og 3 timer efter infektionen.

DK 163832B

36

Fra resultaterne ses, at forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen har større antibiotisk virkning end referencen.

3. Akut toxicitet.

1) Testmetode: 5 I hver gruppe er 10 6-uger gamle hanrotter og 10 6-uger gamle hunrotter (JCL-SD-stamme). Testforbindelsen opløses i destilleret vand og administreres subcutant og intravenøst til dyrene. Disse dyr observeres i 7 dage efter doseringen. LD50-værdierne beregnes ud fra antallet af døde dyr ved Li tchfield-Wilcoxon-me toden.

10 2) Testforbindelse: 7 - [2 - (2-Amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-car-boxylsyre (syn-isomer).

3) Testresultat: 15 Testdyr Køn LD50-værdi (mg/kg)

Subcutant Intravenøst

Rotte han >8000 ca. 8000 hun >8000 >8000 20 _ 4. Absorberbarhed 1) Testmetode:

Testforbindelsen administreres oralt til en gruppe på 5 rotter (JCL-SD stamme, 6 uger gamle hanrotter), som er fastet. Der opsamles 25 galde- og urinprøver for 0-6 og 6-24 timer. Koncentrationerne af testforbindelsen i prøverne bestemmes ved bioforsøg (plademetode) under anvendelse af Bacillus subtilis ATCC-6633 som testorganisme, og genfindeisen i galde og urin beregnes.

DK 163832 B

37 2) Testforbindelse: 7- [2- (2-Amino-4-thiazolyl) -2-n-pentyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

3) Testresultat: 5 Total genfindelse i galde og urin i 24 timer er 22,8%.

Til profylaktisk og/eller terapeutisk administration anvendes den ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede aktive forbindelse med den almene formel 1' i form af et sædvanligt farmaceutisk præparat, der som aktiv bestanddel indeholder denne 10 forbindelse i blanding med farmaceutisk acceptable bærere, f.eks. et uorganisk eller organisk fast eller flydende excipiens, som er egnet til oral, parenteral eller exoterm administration. Det farmaceutiske præparat kan være i fast form, f.eks. en kapsel, tablet, dragée, salve eller suppositorie eller i flydende form, f.eks. en opløsning, 15 suspension eller emulsion. Om fornødent kan der i de ovenfor nævnte præparater inkorporeres hjælpemidler, stabiliseringsmidler, befugt-nings- eller emulgeringsmidler, puffere eller andre sædvanligvis anvendte additiver.

Selv om dosis af forbindelsen kan variere med og også afhænoe af 20 patientens alder og tilstand, sygdommens art og infektionsgraden samt arten af den anvendte aktive forbindelse med den almene formel I', er en gennemsnitlig enkelt dosis på ca. 50 mg, 100 mg, 250 mg eller 500 mg af den aktive forbindelse med den almene formel 1' tilstrækkelig til at behandle infektionssygdomme forårsaoet af pato-25 gene bakterier. Sædvanligvis administreres den aktive forbindelse med den almene formel 1' i en mængde på mellem 1 mg/kg og 100 mg/kg, fortrinsvis mængder på mellem 5 mg/kg og 50 mg/kg.

Udgangsforbindelserne med den almene formel III kan fremstilles som vist nedenfor:

DK 163832 B

38 X-CH-CO-C-COOZ (Illa) I .

/ N-OH N.

X X. r§-c-nh9 (Vila) X Na II 2 s N-r-C-COOZ (IIIc) X-CH-CO-C-COOZ (mb) 6 li I J nu

2 .. R N-OH

I 2 ab N"0Rå 6

Ra“if-NH2 iVIIa) ^ N-r- C-COOZ (Illd) Rå “U R - 0Ra \ I/ \ N-jpC-C00Z (Ille) „- C-COOH (Ulf) H2H-ASJ I - OR^ r| —llsJl I - OR^ \ ^ Λ 2 N—-r—C-COOH (Illg) Χ-ΟΝΗ, (XIV) J 0 II 2 3 H-N“^S^ N - OR_, z ^ v,-π-C-COOH (Illh) ui U ™ o

NNH-Y

il H3CCO-C-COOZ (XV) Y-NHNH2 (XVI) H3C-C-C-COOZ (XVII) J 2 ---=> II 2

N - ORz N - OR

a 1 a ^^-^SX2 (XVIII) N-r-C-COOZ (Illi) Μ-j C-COOH (III j) U ϋ - „i -> y ! - o,;

DK 163832 B

39 hvor R^a er som angivet ovenfor, R^a betegner C^.g-alkanamido eller halo(Ci.g)alkanamido, X betegner halogen, Y betegner lavere alkoxy-carbonyl, og Z betegner lavere alkyl.

Hver af de ovenfor angivne fremgangsmåder beskrives nærmere i det 5 følgende.

Fremgangsmåde 1: Etherificering.

Forbindelser med den almene formel Hib eller Illb kan fremstilles ved at omsætte en forbindelse med den almene formel Illa eller IIIc med et etherificeringsmiddel.

10 Denne reaktion kan udføres i det væsentlige på samme måde som den ovenfor nævnte fremgangsmåde B.

Fremgangsmåde 2: Thiazolringdannelse.

En forbindelse med den almene formel IIIc eller Uld kan fremstilles ved at omsætte en forbindelse med den almene formel Illa eller Illb 15 med en thiourinstofforbindelse med den almene formel Vila, og endvidere kan forbindelsen med den almene formel Ille fremstilles ved at omsætte en forbindelse med den almene formel Illb med thiourinstof.

Denne reaktion kan udføres i det væsentlige på samme måde som den 20 ovenfor nævnte fremgangsmåde C.

Fremgangsmåde 3: Eliminering af den aminobeskyttende gruppe.

En forbindelse med den almene formel Ille eller Ilid kan fremstilles ved i en forbindelse med den almene formel eller eliminere den beskyttende gruppe i den beskyttede aminogruppe R^a.

25 Denne reaktion kan udføres i det væsentlige på samme måde som den ovenfor nævnte fremgangsmåde D.

DK 163832B

40

Fremgangsmåde 4: Carboxydannelse.

En forbindelse med den almene formel Ulf, Illg eller Illj kan fremstilles ved at omdanne en esterificeret carboxylgruppe af en forbindelse med den almene formel Uld, Ille eller Illi til en fri 5 carboxylsyregruppe.

Denne fremgangsmåde kan udføres i det væsentlige på samme måde som den ovenfor nævnte fremgangsmåde G.

Fremgangsmåde 5: Oximering.

En forbindelse med den almene formel If kan ooså fremstilles ved at 10 omsætte en forbindelse med den almene formel Illh med et hydroxyla-minderivat med den almene formel XIV eller et salt deraf.

Hydroxylaminderivatet med den almene formel XIV kan være hydroxylamin substitueret med en aliphatisk carbonhydridgruppe, som kan være substitueret med halogen, carboxy eller esterificeret carboxy; detal-15 jerede oplysninger herom er angivet i det ovenstående. Et egnet salt af hydroxylaminderivatet med den almene formel XIV kan være hydroch-loridet, hydrobromidet eller sulfatet.

Reaktionen udføres sædvanligvis i et sædvanligt opløsningsmiddel såsom vand, alkohol, tetrahydrofuran, acetonitril, dimethylsulfoxid 20 eller pyridin eller et andet opløsningsmiddel, som ikke indvirker skadeligt på reaktionen, eller blandinger deraf, og reaktionstemperaturen er ikke kritisk. Når der som reagens anvendes et salt af hydroxylaminderivatet med den almene formel XIV, udføres reaktionen fortrinsvis i nærværelse af en sædvanlig base.

25 Fremgangsmåde 6: Thiadiazolringdannelse.

En forbindelse med den almene formel Illi kan fremstilles ved at omsætte en forbindelse med den almene formel XV med et hydrazinderivat med den almene formel XVI, og en vunden forbindelse med den almene formel XVII omsættes derpå med et svovldihalogenid med den 30 almene formel XVIII.

DK 163832 B

41

Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse belyses nærmere ved følgende eksempler:

Fremstilling af udgangsforbindelser: EKSEMPEL A.

5 1) En opløsning af 34,6 g ethyl-2-methoxyiminoacetoacetat (en blan ding af syn- og anti-isomer) og 26,4 g tert.butoxycarbonylhydrazin i 200 ml ethanol omrøres i 7,5 timer ved stuetemperatur og lades henstå natten over til udfældning af krystaller. Krystallerne frafiltreres, vaskes med ethanol og tørres, hvorved fås 41,7 g ethyl-2-methoxyimi-10 no-3-tert.butoxycarbonylhydrazonbutyrat (en blanding af syn- og antiisomere), smeltepunkt 144 - 145°C.

IR-Spektrum (nujol): ymax - 3200, 1750, 1705, 1600 og 1520 cm"·1·.

NMR-Spektrum (CDC13): S ppm - 8,52 (IH, bred s), 4,35 (2H, q, J=7Hz), 4,10 (3H, s), 2,00 (3H, s), 1,50 (9H, s), 1,33 (3H, t, J=7Hz).

15 2) 15,9 ml svovldichlorid sættes under omrøring ved stuetemperatur til en opløsning af 14,36 g ethyl-2-methoxyiroino-3-tert.butoxycar-bonylhydrazonbutyrat (en blanding af syn- og antiisomere) i 150 ml methylenchlorid, og blandingen omrøres i 1 time ved stuetemperatur.

Til reaktionsblandingen sættes 300 ml isvand, og methylenchloridfasen 20 vaskes med vand, mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og mættet vandig natriumchloridopløsning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdestilleres, hvorved fås en olie. Olien renses ved søjlechromatografi på silicagel under anvendelse af en blanding af benzen og n-hexan (19:1) som eluent, hvorved først fås 1,8 g ethyl-2-25 methoxyimino-2-(l,2,3-thiadiazol-4-yl)acetat (syn-isomer), smeltepunkt 77 - 79°C.

IR-Spektrum (nujol): ν^χ “ 1720 og 1595 cm’^·.

NMR-Spektrum (CDC13): δ ppm - 8,92 (IH, s), 4,46 (2H, q, J=7Hz), 4,06 (3H, s), 1,38 (3H, t, J-7Hz).

DK 163832B

42

Fra efterfølgende fraktioner fås 0,7 g ethyl-2-methoxyimino-2-(1,2,3--thiadiazol-4-yl)acetat (anti-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): j/max - 1730 og 1590 cm" NMR-Spektrum (CDC13): δ ppm - 9,38 (IH, s), 4,47 (2H, q, J=7Hz), 4,20 5 (3H, s), 1,40 (3H, t, J«7Hz).

3) 6,7 ml IN vandig natriumhydroxidopløsning sættes til en opløsning af 1,2 g ethyl-2-methoxyimino-2-(l,2,3-thiadiazol-4-yl)acetat (syn-isomer) i 10 ml methanol, og blandingen omrøres i 1,5 timer ved stuetemperatur. Methanolet af destilleres fra reaktionsblandingen, og 10 der sættes vand til remanensen. Blandingen vaskes med ether, der indstilles til pH-værdi 1 med 10%'s saltsyre og ekstraheres med ethylacetat. Ekstrakten vaskes med mættet vandig natriumchloridopløs-ning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdestilleres, hvorved fås 0,7 g 2-methoxyimino-2-(l,2,3-thiadiazol-4-yl)eddikesyre 15 (syn-isomer) i form af prismer, smeltepunkt 110 - 113eC.

IR-Spektrum (nujol): vmax = 2750 - 2150, 1730 og 1595 cm"^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm = 9,47 (IH, s), 4,01 (3H, s).

EKSEMPEL B.

1) 160 g pulveriseret kaliumcarbonat sattes til en opløsning af 152 g 20 ethyl-2-hydroxyiminoacetoacetat (en blanding af syn- og antiisomere) i 500 ml acetone. Der tilsættes dråbevis under omrøring i løbet af 1 time 130 g dimethylsulfat ved 45 - 50°C, og blandingen omrøres i 2 timer. Uopløseligt materiale frafiltreres, og filtratet inddampes under reduceret tryk. Det frafiltrerede uopløselige materiale opløses 25 i 500 ml vand, og denne opløsning sættes til remanensen. Blandingen ekstraheres to gange med 300 ml ethylacetat. Ekstrakten vaskes to gange med 200 ml vand og med 200 ml mættet vandig natriumchloridopløsning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet sidestilleres under reduceret tryk, og remanensen destilleres under reduceret 30 tryk, hvorved fås 145,3 g ethyl-2-methoxyiminoacetoacetat i form af

DK 163832 B

43 en farveles olie (en blanding af syn- og antiisomere), kogepunkt 55 - 64°C/0,5 uun Hg.

IR-Spektrum (film): vmax. “ 1745, 1695 og 1600 cm'*.

NMR-Spektrum (CDC1): S ppm - 4,33 (4H, q, J»8Hz), 4,08 (3H, s), 3,95 5 (3H, s), 2,40 (3H, s), 1,63 (3H, s), 1,33 (6H, t, J-8Hz).

2) 235 ml sulfurylchlorid sættes dråbevis i løbet af 20 minutter under omrøring og isafkøling til en opløsning af 500 g ethyl-2-me -thoxyiminoacetoacetat (syn-isomer) i 500 ml eddikesyre, og blandingen øres natten over under køling med vand. Der bobles nitrogengas gennem 10 reaktionsblandingen i 2 timer, og den resulterende blanding hældes ud i 2,5 liter vand. Efter ekstraktion med 500 ral methylenchlorid og to gange med 200 ml methylenchlorid forenes ekstrakterne. De forenede ekstrakter vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, og pH-værdien indstilles til 6,5 ved tilsætning af 800 ml vand og natri -15 umbicarbonat. Methylenchloridfasen fraskilles, vaskes med en vandig natriumchloridopløsning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdestilleres, hvorved fås 559 g ethyl-2-methoxyimino-4-chlor-acetoacetat (syn-isomer).

IR-Spektrum (film): i/max - 1735 og 1705 cm'*.

20 3) 50 g ethyl-2-methoxyimino-4-chloracetoacetat (syn-isomer) sættes i løbet af 3 minutter under omrøring ved stuetemperatur til en opløsning af 18,4 g thiourinstof og 19,8 g natriumacetat i en blanding af 250 ml methanol og 250 ml vand. Efter omrøring i 35 minutter ved 40 - 45eC afkøles reaktionsblandingen med is, og pH-værdien indstil-25 les til 6,3 med en mættet vandig natriumbicarbonatopløsning. Efter omrøring i 30 minutter ved denne temperatur opsamles bundfaldet ved filtrering, vaskes med 200 ml vand og derpå med 100 ml diisopropyl-ether og tørres, hvorved fås 37,8 g ethyl-2-methoxyimino-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)acetat (syn-isomer) i form af farveløse krystaller 30 med smeltepunkt 161 - 162eC.

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3400, 3300, 3150, 1725, 1630 og 1559 cm'*.

DK 163832 B

44 NMR-Spektrum (CDC13): S ppm = 6,72 (IH, s), 5,91 (2H, bred s), 4,38 (2H, q, J=7Hz), 4,03 (3H, s), 1,38 (3H, t, J=7Hz).

4) 10 ml ethanol sættes til en suspension af 2,2 g ethyl-2-methoxy-imino-2-(2-amino-l,3-thiazol-4-yl)acetat (syn-isomer) i 12 ml IN 5 vandig natriumhydroxidopløsning, og blandingen omrøres i 15 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen indstilles til pH-værdi 7,0 med 10%'s saltsyre, og ethanolet afdestilleres under reduceret tryk. Den som remanens vundne vandige opløsning vaskes med ethylacetat og indstilles til pH-værdi 2,8 med 10%'s saltsyre, og der omrøres under 10 isafkøling til udfældning af krystaller. Krystallerne opsamles ved filtrering, vaskes med acetone og omkrystalliseres af ethanol, hvorved fås 1,1 g 2-methoxyimino-2-(2-amino-l,3-thiazol-4-yl)eddikesyre (syn-isomer) i form af farveløse nåle.

IR-Spektrum (nujol): umav = 3150, 1670, 1610 og 1585 cm’^·.

15 NMR-Spektrum (dg-DMSO): 5 ppm = 7,20 (2H, bred s), 6,85 (IH, s), 3,83 (3H, s).

EKSEMPEL C.

1) 35,2 g sulfurylchlorid sættes på én gang til en omrørt opløsning af 48,9 g ethyl-2-ethoxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i 49 ml ed- 20 dikesyre ved stuetemperatur, og der omrøres ved samme temperatur i 1 time. Den resulterende opløsning hældes ud i 200 ml vand, og opløsningen ekstraheres med methylenchlorid. Ekstrakten vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, neutraliseres med en vandig natrium-bicarbonatopløsning og vaskes med vand. Opløsningen tørres over 25 magnesiumsulfat og inddampes under reduceret tryk, hvorved fås 53,8 g ethyl-2-ethoxyimino-3-oxo-4-chlorbutyrat (syn-isomer) i form af en bleggul olie.

2) En blanding af 38,7 g ethyl-2-ethoxyimino-3-oxo-4-chlorbutyrat (syn-isomer), 13,2 g thiourinstof, 14,3 g natriumacetat, 95 ml me- 30 thanol og 95 ml vand omrøres i 40 minutter ved 48°C. Efter at den resulterende opløsning er indstillet til pH-værdi 6,5 med en vandig

DK 163832 B

45 natriumbicarbonatopløsning, opsamles det udfældede materiale ved filtrering og vaskes med diisopropylether, hvorved fås 14,7 g ethyl-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoacetat (syn-isomer) med smeltepunkt 130 - 131eC.

5 IR-Spektrum (nujol): *= 3450, 3275, 3125, 1715 og 1620 cm-·*-.

3) 5 g ethyl-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoacetat (syn-isomer) sættes til en blanding af 45,9 ml IN natriumhydroxidopløsning og 30 ml ethanol og omrøres ved stuetemperatur i 5 timer. Efter afdampning af ethanolet fra den resulterende opløsning under reduceret tryk 10 opløses remanensen i 60 ml vand, og pH-værdien indstilles til 2,0 med 10%'s saltsyre. Opløsningen underkastes en udsaltning, og bundfaldet opsamles ved filtrering og tørres, hvorved fås 2,9 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoeddikesyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): ** 3625, 3225 (skulder), 3100, 1650 og 15 1615 cm"1 NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm = 1,20 (3H, t, J~7Hz), 4,09 (2H, q, J-7Hz) 6,82 (IH, s), 7,24 (2H, bred s).

4) 100 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 85,5 g myresyre og 190,1 g eddikesyreanhydrid behandles på 20 analog måde som i eksempel F-(5) til dannelse af 99,1 g 2-(2-form-amidothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoeddikesyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): - 3200, 3140, 3050 og 1700 cm'^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm = 1,18 (3H, t, J=6Hz), 4,22 (2H, q, J-6Hz), 7,56 (IH, s), 8,56 (IH, s), 12,62 (IH, bred s).

25 EKSEMPEL D.

1) Til en suspension af 15 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) og 19,8 g kaliumcarbonat i 75 ml acetone sættes dråbevis 16,2 g propyliodid under omrøring, og blandingen omrøres ved stuetempera-

DK 163832B

46 tur i 1 1/2 time. Det uopløselige stof frafiltreres og vaskes med acetone. Vaskevæskerne og filtratet forenes og inddampes til tørhed under reduceret tryk. Der tilsættes vand til remanensen, og den vandige opløsning ekstraheres to gange med chloroform. Ekstrakten 5 vaskes med en vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes derpå til tørhed under reduceret tryk, hvorved fås 15,4 g ethyl-3-oxo-2-propoxyiminobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

2) 15,4 g ethyl-3-oxo-2-propoxyiminobutyrat (syn-isomer) og 10,6 g 10 sulfurylchlorid opløses i 15,4 ml eddikesyre, opvarmes til 35 40eC i 10 minutter under omrøring og omrøres derpå ved stuetemperatur i yderligere 6 timer. Reaktionsblandingen hældes ud i 200 ml isvand, og den resulterende blanding ekstraheres to gange med chloroform. Ekstrakten vaskes med en vandig natriumchloridopløsning, to gange med 15 en mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og én gang med vand/ i den nævnte rækkefølge, tørres over magnesiumsulfat og inddampes derpå til tørhed under reduceret tryk, hvorved fås 15,4 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-propoxyiminobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): ymax ** 1740, 1710, 1695 og 1455 cm"1.

20 3) 15,4 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-propoxyiminobutyrat (syn-isomer), 4,97 g thiourinstof og 8,89 g natriumacetathydrat opløses i en blanding af 40 ml vand og 50 ml ethanol og omrøres ved 40®C i 1 time.

Reaktionsblandingen indstilles til pH-værdi 6,5 med en mættet vandig kaliumcarbonatopløsning under afkøling og omrøres ved samme tempera-25 tur i 1/2 time. De udfældede krystaller frafiltreres, vaskes med vand og diisopropylether og tørres derpå, hvorved fås 10,55 g ethyl-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propoxyiminoacetat (syn-isomer) i form af krystaller, smeltepunkt 142 - 144°C.

IR-Spektrum (nujol): i/fflax - 3460, 3260, 3120, 1720, 1620 og 30 1540 cm"^-.

NMR-Spektrum (d6-DMSO): δ ppm = 0,88 (3H, t, J=7Hz), 1,27 (3H, t,

DK 163832 B

47 J-6Hz), 1,60 (2H, sextet, J-7Hz), 4,04 (2H, t, J=7Hz), 4,28 (2H, q, J-6Hz), 6,86 (IH, s), 7,23 (2H, s).

4) En opløsning af 10 g ethyl-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propoxyimi-noacetat (syn-isomer) i en blanding af 39 ml tetrahydrofuran, 39 ml 5 methanol og 75,8 ml IN natriumhydroxid omrøres ved 35 - 40°C i 5 timer.

Efter inddampning af den resulterende opløsning under reduceret tryk indstilles den vandige remanens til pH-værdi 2,5 med 10%'s saltsyre.

Det udfældede materiale frafiltreres og tørres, hvorved fås 6,2 g 2-10 (2-amino-4-thiazolyl)-2-propoxyiminoeddikesyre (syn-isomer) med smeltepunkt 161“C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): ^max * 3380, 3120 (bred), 1630, 1610 og 1460 cm"^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm*» 0,89 (3H, t, J*=7Hz), 1,63 (2H, sex- 15 tet, J***7Hz), 4,05 (2H, t, J-7Hz), 6,83 (IH, s), 6,9 - 8,8 (3H, bred).

5) 21,8 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-propoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 38,8 g eddikesyreanhydrid og 17,15 g myresyre behandles på analog måde som i eksempel F-(5), og den således vundne olie tri-tureres med diisopropylether, hvorved fås 19,2 g 2-(2-formamidothia- 20 zol-4-yl)-2-n-propoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 164°C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): j/max “ 3200, 3120, 3050, 1700 og 1550 cm*^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): $ ppm = 0,92 (3H, t, J=7Hz), 1,67 (2H, sextet, J«7Hz), 4,12 (2H, c, J=7Hz), 7,53 (IH, s), 8,54 (IH, s).

25 EKSEMPEL E.

1) 30 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 32,5 g iso-propyliodid, 39,5 g kaliumcarbohat og 150 ml acetone behandles på analog måde som i eksempel D-(l), hvorved fås 35,4 g ethyl-2-isopro-poxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

DK 163832 B

48 IR-Spektrum (film): i/max = 1745, 1690 og 1600 cm"^.

NMR-Spektrum (CC14): δ ppm — 1,33 (3H, t, J«7Hz), 1,35 (6H, d, J-6Hz), 2,32 (3H, s), 4,1-4,7 (3H, m).

2) 35,4 g ethyl-2-isopropoxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 24,5 g 5 sulfurylchlorid og 35,4 g eddikesyre behandles på analog måde som i eksempel D-(2), hvorved fås 41,5 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-isopropoxy-iminobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): i/max - 1745, 1715 og 1375 cm"^·.

3) 41,5 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-isopropoxyiminobutyrat (syn-isomer), 10 13,4 g thiourinstof, 14,4 g natriumacetat, 110 ml vand og 110 ml ethanol behandles på analog måde som i eksempel D-(3), hvorved fås 27,3 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 162 - 164°C.

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3460, 3430, 3260, 3150, 1725, 1615 og 15 1540 cm-1.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm- 1,17 (6H, d, J-6Hz), 1,24 (3H, t, J-7Hz), 4-4,7 (3H, m), 6,86 (IH, s), 7,24 (2H, s).

4) 26,8 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacetat (syn-isomer), 156 ml IN vandig natriumhydroxidopløsning, 156 ml methanol 20 og 100 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i eksempel D-(4), hvorved fås 15,3 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyimino-eddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 151°C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): ^max - 3610, 3580, 3080, 1650 og 1610 cm'^.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 1,22 (6H, d, J=6Hz), 4,33 (IH, kvin-25 tet, J=6Hz), 6,80 (IH, s), 7,22 (2H, bred s).

5) 4 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 7,6 g eddikesyreanhydrid og 3,4 g myresyre behandles på

DK 163832 B

49 analog måde som i eksempel F-(5), hvorved fås 3,75 g 2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 168 - 169eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): “ 3200, 3130, 1710, 1600 og 1560 cm*1.

5 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm« 1,26 (6H, d), 4,4 (IH, m), 7,54 (IH, s), 8,52 (IH, s), 12,56 (IH, bred s).

EKSEMPEL F.

1) 46,9 g n-butyliodid tilsættes i løbet af 5 minutter dråbevis til en omrørt suspension af 40 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn- 10 isomer), 52,7 g kaliumcarbonat og 200 ml acetone under isafkøling, og der omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Den resulterende opløsning filtreres og vaskes med acetone. Filtratet og vaskeopløsningen forenes, og inddampes i vakuum. Til remanensen sættes 300 ml vand, og opløsningen ekstraheres tre gange med methylenchlorid. Opløsningen 15 vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes i vakuum, hvorved fås 48,8 g ethyl-2-n-butoxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): i/max - 1750, 1700, 1470, 1370 og 1320 cm*1.

2) En opløsning af 48,8 g ethyl-2-n-butoxyimino-3-oxobutyrat (syn-20 isomer), 31,5 g sulfurylchlorid og 48,8 ml eddikesyre omrøres i 10 minutter ved 40°C og derpå ved stuetemperatur i 5 1/2 time. Til den resulterende opløsning sættes 300 ml vand under isafkøling, og opløsningen ekstraheres tre gange med methylenchlorid. Ekstrakterne vaskes med vand, vandig natriumbicarbonatopløsning og en mættet 25 vandig natriumchloridopløsning i den nævnte rækkefølge og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningen inddampes i vakuum, hvorved fås 52,1 g ethyl-2-n-butoxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): ^ax - 1740, 1710, 1470 og 1370 cm*1.

DK 163832B

50 3) En opløsning af 52,1 g ethyl-2-n-butoxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer), 15,9 g thiourinstof, 28,4 g natriumacetattrihydrat, 130 ml vand og 180 ml ethanol omrøres ved 40°C i 1 1/4 time. Den resulterende opløsning indstilles til pH-værdi 6,5 med en vandig natrium-5 carbonatopløsning under isafkøling og omrøres i 20 minutter under isafkøling. Det udfældede materiale frafiltreres og vaskes med vand og derpå med diisopropylether, hvorved fås 36,1 g ethyl-2-(2-amino-thiazol-4-yl)-2-n-butoxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 126 - 128eC.

10 IR-Spektrum (nujol): i/max - 3460, 3370, 3230, 1720, 1620 og 1550 cnT^-.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm = 0,6 - 2,0 (6H, m), 1,28 (3H, t, J-7Hz), 4,12 (3H, t, J«6Hz), 4,31 (2H, q, J«7Hz), 6,89 (IH, s), 7,24 (2H, s).

15 4) En opløsning af 36 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-butoxyimi noacetat (syn-isomer), 133 ml methanol, 133 ml tetrahydrofuran og 133 ral vandig 2N natriumhydroxidopløsning omrøres ved 30°C i 5 timer.

Derefter inddampes den resulterende opløsning i vakuum, og remanensen opløses i vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi 7 med 10%'s 20 saltsyre og behandles med aktivkul. Opløsningen indstilles til pH-værdi 2,0 med 10%'s saltsyre og omrøres i 20 minutter under isafkøling. Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med vand og acetone i den nævnte rækkefølge og tørres, hvorved fås 25,4 g 2-(aminothiazol-4-yl)-2-n-butoxyiminoeddikesyre (syn-isomer).

25 IR-Spektrum (nujol): i/max - 3325, 3190, 1660 og 1620 cm'^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 5 ppm - 0,88 (3H, t, J-7Hz), 1,0-1,9 (4H, m), 4,06 (2H, t, J*7Hz), 6,81 (IH, s), 7,21 (2H, bred s).

5) 18,95 g myresyre sættes i løbet af 5 minutter dråbevis under omrøring til 42,0 g eddikesyreanhydrid ved stuetemperatur, og der 30 omrøres ved 50°C i 1 time. Til opløsningen sættes under isfkøling 25 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-butoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), og der omrøres ved stuetemperatur i 3 timer og ved 30°C i yderligere

DK 163832 B

51 1 time. Den resulterende opløsning inddampes i vakuum, og remanensen opløses i diethylether. Opløsningen vaskes med vand og mættet vandig natriumchloridopløsning i nævnte rækkefølge, tørres over magnesiumsulfat og inddampes i vakuum. Den vundne olie tritureres med en 5 opløsning af n-hexan (1 del) og diisopropylether (1 del), og der filtreres, hvorved fås 20,1 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-n-bu-toxyiminoeddikesyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): ^max - 3350, 3160, 3050, 1700, 1680 og 1570 cm"1.

10 NMR-Spektrum (dg-DHS0): δ ppm - 0,91 (3H, t, J-6Hz), 1,0 - 2,2 (4H, m), 4,18 (2H, t, J=6Hz), 7,57 (IH, s), 8,59 (IH, s), 12,66 (IH, bred s).

EKSEMPEL G.

1) 40 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 200 ml N,N-15 dimethylforoamid, 52,7 g kaliumcarbonat og 34,94 g isobutylbromid behandles på analog måde som i eksempel F-(l), hvorved fås 42 g ethyl-2-isobutoxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 1740 og 1670 (bred) cm"1.

2) 42 g ethyl-2-isobutoxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 42 ml 20 eddikesyre og 27,1 g sulfurylchlorid behandles på analog måde som i eksempel F-(2), hvorved fås 31,9 g ethyl-2-isobutoxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer).

IR-Spektrum (film): i/max = 1750, 1720 og 1680 cm'1.

3) 31,9 g ethyl-2-isobutoxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer), 25 9,72 g thiourinstof, 17,4 g natriumacetattrihydrat, 120 ml ethanol og 80 ml vand behandles på analog måde som i eksempel F-(3), nvorved fås 17,6 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 122 - 124°C.

DK 163832 B

52 IR-Spektrum (nujol): i/max 3470, 3260, 3120, 1730, 1620 og 1545 cm* .

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 8 ppm - 0,86 (6H, d, J*=7Hz), 1,28 (3H, t, J*=7Hz), 1,6-2,2 (IH, m), 3,86 (2H, d, J«7Hz), 4,28 (2H, q, J«7Hz), 5 6,86 (IH, s), 7,22 (2H, s).

4) 19,6 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoacetat, 72.2 ml vandig 2N natriumhydroxidopløsning, 72,2 ml methanol og 72.2 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i eksempel F-(4), hvorved fås 16,1 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoed- 10 dikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 180eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): = 3375, 3300, 3130, 3050 og 1640 cnT^-.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 8 ppm = 0,91 (6H, d, J=7Hz), 1,5-2,3 (IH, m), 3,90 (2H, d, J-7Hz), 6,87 (IH, s), 7,26 (2H, bred s).

5) 11,5 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoeddikesyre (syn-15 isomer), 19,3 g eddikesyreahhydrid og 8,7 g myresyre behandles på analog måde som i eksempel F-(5), hvorved fås 11,15 g 2-(2-forma-midothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 163eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3175, 3110, 3050, 1695 og 1550 cm'1.

20 NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm = 0,91 (6H, d, J~7Hz), 1,7-2,3 (IH, m), 3,92 (2H, d, J=7Hz), 7,52 (IH, s), 8,52 (IH, s), 12,58 (IH, bred s).

EKSEMPEL H.

1) 30 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 100 ml N,N-25 dimethylformamid, 39,5 g kaliumcarbonat og 31,1 g cyclohexylbromid behandles på analog måde som i eksempel F-(l), hvorved fås 41,8 g ethyl-2-cyclohexyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

DK 163832 B

53 IR-Spektrum (film): - 1740 og 1680 cm'^.

2) 41,3 g ethyl-2-cyclohexyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 41,3 ml eddikesyre og 23,8 g sulfurylchlorid behandles på analog måde som i eksempel F-(2), hvorved fås 27,8 g ethyl-4-chlor-2-cyclohex-5 yloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): ^max - 1745, 1715 og 1680 cm"^·.

3) 27,8 g ethyl-4-chlor-2-cyclohexyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 7,7 g thiourinstof, 13,7 g natriumacetattrihydrat, 70 ml vand og 140 ml ethanol behandles på analog måde som i eksempel F-(3), 10 hvorved fås 3,6 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyimino-acetat (syn-isomer), smeltepunkt 125 - 126°C.

IR-Spektrum (nujol): * 3430, 3250, 3160, 3130, 1715 og 1635 cm'^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 1,28 (3H, t, J-7Hz), 1,0-2,2 (10H, 15 m), 4,22 (IH, m), 4,32 (2H, q, J-7Hz), 6,88 (IH, s), 7,24 (2H, bred s).

4) 3,5 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoacetat (syn-isomer), 11,8 ml vandig 2N natriumhydroxidopløsning, 11,8 ml methanol og 11,8 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i 20 eksempel F-(4), hvorved fås 2,1 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-cyclo-hexyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 148eC (sønderdeling) .

IR-Spektrum (nujol): j/max - 3110, 1630 og 1450 cm"*.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 0,8-2,3 (10H, m), 4,14 (IH, m), 6,86 25 (IH, s), 7,5 (2H, bred s).

5) 1,5 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer) , 2,27 g eddikesyreanhydrid og 1,03 g myresyre behandles på analog måde som i eksempel F-(5), og den vundne olie suspenderes i en vandig natriumbicarbonatopløsning. Suspensionen indstilles til pH-

DK 163832 B

54 værdi 3,5 med 10%'s saltsyre. Det udfældede materiale opsamles ved filtrering, vaskes med vand og tørres, hvorved fås 1,0 g 2-(2-for-mamidothiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt over 230eC.

5 IR-Spektrum (nujol): vmax - 3175, 3100, 3060 og 1680 cm-1.

EKSEMPEL I.

1) 56,7 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 280 ml N,N-dimethylformamid, 72,3 g kaliumcarbonat og 43 g propargylbromid behandles på analog måde som i eksempel F-(l), hvorved fås 71,2 g 10 ethyl-2-propargyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer).

IR-Spektrum (film): vmax - 3280, 3220, 2120, 1735 og 1670 cm"1.

2) 71,2 g ethyl-2-propargyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 81 ml eddikesyre og 50,2 g sulfurylchlorid behandles på analog måde som i eksempel F-(2), hvorved fås 61,6 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-propargyl- 15 oxyiminobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): umax ~ 3300, 2130, 1745, 1720 og 1675 cm*1.

NMR-Spektrum (CC14): S ppm = 1,39 (3H, t, J=7Hz), 2,57 (IH, t, J-2Hz), 4,36 (2H, q, J-7Hz), 4,56 (2H, s), 4,86 (2H, d, J=2Hz).

3) 61 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-propargyloxyiminobutyrat (syn-isomer), 20 20 g thiourinstof, 35,8 g natriumacetattrihydrat, 150 ml vand og 180 ml ethanol behandles på analog måde som i eksempel F-(3), hvorved fås 35,6 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoacetat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax = 3290, 2220 og 1729 cm*1.

25 NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm = 1,28 (3H, t, J=7Hz), 3,49 (IH, t, J-3HZ), 4,31 (2H, q, J=7Hz), 4,76 (2H, d, J=3Hz), 6,95 (IH, s), 7,29 (2H, s).

DK 163832 B

55 4) 2,8 g ethyI-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoacetat (syn-isomer), 23 ml methanol, 20 ml tetrahydrofuran og 22,17 ml vandig IN natriumhydroxidopløsning behandles på analog måde som i eksempel F-(4), hvorved fås 1,924 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-pro-5 pargyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 2190 og 1740 cm'^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 3,47 (IH, t, J«l,5Hz), 4,74 (2H, d, J-l,5Hz), 6,90 (IH, s).

EKSEMPEL J.

10 1) 40 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 200 ml N,N- dimethylformamid, 52 g kaliumcarbonat og 41,4 g n-hexylbromid behandles på analog måde som i eksempel F-(l), hvorved fås 60,7 g ethyl-2-n-hexyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): i/max - 1740, 1705 og 1700 cm"·*-.

15 NMR-Spektrum (CC14): δ ppm - 0,6-2,1 (14H, m), 2,37 (3H, s), 4,1-4,6 (4H, m).

2) 60,7 g ethyl-2-n-hexyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 61 ml eddikesyre og 34,7 g sulfurylchlorid behandles på analog måde som i eksempel F-(2), hvorved fås 55,6 g ethyl-2-n-hexyloxyimino-4-chlor-3- 20 oxobutyrat (syn-isomer).

IR-Spektrum (film): i/max - 1740, 1720 og 1470 cm'^.

NMR-Spektrum (CC14): δ ppm - 0,6-2,2 (14H, m), 4,1-4,6 (4H, in), 4,47 (2H, s).

3) 55,6 g ethyl-2-n-hexyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer), 25 15,2 g thiourinstof, 27,2 g natriumacetattrihydrat, 280 ml ethanol og 140 ml vand behandles på analog måde som i eksempel F-(3), hvorved

DK 163832 B

56 fås 29,3 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 77 - 78eC.

IR-Spektrum (nujol): i/max » 3460, 3250, 3140, 1720 og 1535 cm' NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm = 0,85 (3H, t, J=6Hz) , 1,0-1,9 (UH, 5 m), 2,07 (2H, t, J»6Hz), 2,26 (2H, q, J»7Hz), 6,85 (IH, s), 7,22 (2H, s)- 4) 29,1 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoacetat (syn-isomer), 97,2 ml methanol, 97,2 ml vandig 2N natriumhydroxidopløsning og 50 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i eksempel 10 F-(4), hvorved fås 24,0 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyimino- eddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 174eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): i/may » 1660, 1625 og 1425 cm'^-.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,6-2,1 (11H, m), 4,07 (2H, t, J»6Hz), 6,83 (IH, s), 7,19 (2H, s).

15 EKSEMPEL K.

1) 40 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 200 ml N,N-dimethylformamid, 52 g kaliumcarbonat og 37,9 g pentylbromid behandles på analog måde som i eksempel F-(l), hvorved fås 57,5 g ethyl-2-pentyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

20 IR-Spektrum (film): vmax — 1745, 1680 og 1470 cm'^-.

NMR-Spektrum (CC14): 5 ppm» 0,7 - 2,2 (12H, m), 2,36 (3H, s), 4,1 - 4,6 (4H, m).

2) 57,5 g ethyl-2-pentyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 58,5 ml eddikesyre og 20,9 ml sulfurylchlorid behandles på analog måde som i 25 eksempel F-(2), hvorved fås 51,1 g ethyl-2-pentyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

DK 163832B

57 IR-Spektrum (film): i/max - 1750, 1715 og 1470 cm'·*-.

NMR-Spektrum (CC14): 5 ppm» 0,7 - 2,1 (11H, m), 4,1 - 4,6 (4H, m), 4,48 (2H, s).

3) 51,1 g ethyl-2-pentyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer), 5 14,7 g thiourinstof, 26,4 g natriumacetattrihydrat, 175 ml ethanol og 125 ml vand behandles på analog måde som i eksempel F-(3), hvorved fås 28,7 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 86 - 88®C.

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3450, 3250, 3130, 1715 og 1535 cm'*·.

10 NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 0,6 - 2,0 (12H, m), 4,11 (2H, t, J«6Hz), 4,32 (2H, q, J-7Hz), 6,90 (IH, s), 7,25 (2H, s).

4) 28,6 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetat (syn-isomer), 100,2 ml vandig 2N natriumhydroxidopløsning, 100 ral methanol og 100 ml tetrahydrofuran behandles analogt som i eksempel F-(4), 15 hvorved fås 22,4 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 176eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): i/max » 3160, 1655, 1620 og 1460 cm"·*·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm » 0,6 - 2,2 (9H, m), 4,07 (2H, t, J»6Hz), 6,82 (iH, s), 7,20 (2H, s).

20 5) 15 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoeddikesyre (syn- isomer), 23,8 g eddikesyreanhydrid og 10,7 g myresyre behandles på analog måde som i eksempel F-(5), hvorved fås 14,7 g 2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 125eC (sønderdeling).

25 IR-Spektrum (nujol): i/max » 3200, 3140, 1700 og 1565 cm'*·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm «0,6 - 2,0 (9H, m) , 4,13 (2H, t, J»6Hz), 7,53 (IH, s), 7,54 (IH, s), 12,66 (IH, s).

DK 163832 B

58

Eksempel L.

1) 2,91 g allylbromid sættes dråbevis under isafkøling i løbet af 5 minutter til en omrørt suspension af 10 g ethyl-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat (syn-isomer), 100 ml N,N-dime-5 thylformamid og 4,54 g kaliumcarbonat, og der omrøres ved denne temperatur i 4 timer. Til den resulterende opløsning sættes 200 ml vand, og opløsningen ekstraheres to gange med diethylether. Ekstrakten vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningen inddampes i vakuum, og remanensen tri-10 tureres med en opløsning af n-hexan og diethylether. Det udfældede materiale frafiltreres, hvorved fås 9,4 g ethyl-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-2-allyloxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 130 -132eC.

IR-Spektrum (nujol): i/max = 3380, 1735, 1520 og 1500 cm'^·.

15 NMR-Spektrum (d5-DMS0): S ppm = 1,08 (3H, t, J-7Hz), 3,96 (2H, q, J-7Hz), 4,54 (2H, bred d, J«5Hz), 5,0-5,5 (2H, m),5,6-6,3 (IH, m), 6,90 (15H, bred s), 7,74 (IH, s).

2) En opløsning af 8,7 g ethyl-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-allyl-oxyiminoacetat (syn-isomer), 42,5 ml 50Z's myresyre og 42,5 ml tetra- 20 hydrofuran omrøres ved 60°C i 40 minutter. Efter inddampning af den resulterende opløsning i vakuum opløses remanensen i ethylacetat, vaskes med en vandig natriumbicarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning i den nævnte rækkefølge og tørres over magnesiumsulfat. Efter inddampning af den resulterende opløsning i vakuum 25 søjlechromatograferes remanensen på silicagel med benzen og ethylace tat i den nævnte rækkefølge, hvorved fås 3,7 g ethyl-2-(2-aminothia-zol-4-yl)-2-allyloxyiminoacetat (syn-isomer), smeltepunkt 102 -104°C.

IR-Spektrum (nujol): * 3460, 3260, 3130, 1725, 1620, 1540 og 30 1460 cm-1.

DK 163832 B

59 NMR-Spektrum (dg-DMSO): 5 ppm - 1,25 (3H, t, J-7Hz) , 4,30 (2H, q, J-7Hz 4,61 (2H, dd, J-5Hz, 1Hz), 5,0-5,5 (2H, m), 5,6-6,5 (IH, m), 6,95 (IH, s), 7,28 (2H, s).

3) En opløsning af 3,6 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-allyloxyimi-5 noacetat (syn-isomer),'14,1 ml vandig 2N natriumhydroxidopløsning, 14,1 ml tetrahydrofuran og 15 ml methanol omrøres ved 40eC i 1 1/2 time. Den resulterende opløsning inddampes i vakuum, og remanensen opløses i vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi 2,8 med 10%'s saltsyre under isafkøling, og det udfældede materiale frafiltreres, 10 vaskes med vand og acetone i den nævnte rækkefølge og tørres, hvorved fås 1,91 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-allyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 187eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): ^max " 3350, 1630, 1580 og 1460 cra"^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 4,61 (2H, d, J-6Hz), 5,1-5,5 (2H, m), 15 5,7-6,2 (IH, m), 6,84 (IH, s), 7,25 (2H, bred s).

EKSEMPEL M.

4,16 g propargylbromid sættes til en suspension af 10 g ethyl-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat (syn-isomer), 4,84 g kaliumcarbonat og 22 ml Ν,Ν-dimethylformamid under en nitrogengasat-20 mosfære, og der omrøres ved stuetemperatur i 100 minutter. De uopløselige stoffer frafiltreres og vaskes med lidt Ν,Ν-dimethylformamid. Filtratet og vaskevæsken forenes, og der sættes 400 ml vand til opløsningen. Suspensionen ekstraheres med 400 ml ethylacetat, og ekstrakten vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning og tørres 25 over magnesiumsulfat. Opløsningen behandles med aktivkul, og opløsningen inddampes i vakuum. Remanensen tritureres med diisopropylet-her. Det udfældede materiale frafiltreres og vaskes med diisopropy-lether, hvorved fås 8,34 g ethyl-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoacetat (syn-isomer).

30 IR-Spektrum (nujol): i/max - 3290, 2225 og 1735 cm"*.

DK 163832 B

60 NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm = 1,12 (3H, t, J=7Hz), 3,47 (IH, t, J-3Hz), 3,97 (2H, q, J=7Hz), 4,67 (2H, d, J-3Hz), 6,95 (IH, s), 7,26 (15H, s), 8,77 (IH, s).

2) Til en opløsning af 8,2 g ethyl-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-5 propargyloxyiminoacetat (syn-isomer) og 41 ml tetrahydrofuran sættes 41 ml 50%'s myresyre, og der omrøres i 1 time ved 60°C. Den resulterende opløsning inddampes til halvdelen af det oprindelige volumen under reduceret tryk, og bundfaldet frafiltreres og vaskes med diiso-propylether. Filtratet og vaskevæsken forenes og inddampes i vakuum.

10 Til remanensen sættes under omrøring 200 ml ethylacetat. Det uopløselige stof frafiltreres og vaskes med diethylether, hvorved fås 0,3 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoacetat (syn-isomer). Filtratet og ethylacetatvaskevæsken forenes, vaskes to gange med mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og mættet vandig natri-15 umchloridopløsning i den nævnte rækkefølge og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningen behandles med aktivkul og inddampes i vakuum.

Remanensen tørres i vakuum efter tilsætning af benzen. Remanensen søjlechromatograferes på silicagel med benzen og ethylacetat i den nævnte rækkefølge. Eluatet inddampes i vakuum, og remanensen tri-20 tureres med diisopropylether. Det udfældede stof frafiltreres og vaskes med diisopropylether, hvorved fås 2,658 g af den ovenfor nævnte forbindelse (syn-isomer).

IR-Spektret og NMR-spektret er de samme som for den i eksempel I-(3) vundne forbindelse.

25 EKSEMPEL N.

0,84 g natriumbicarbonat sættes til en suspension af 2 g 2-(2-for-mamidothiazol-4-yl)oxalsyre i 120 ml vand til fremstilling af en opløsning. Til opløsningen sættes 4,56 g ethyl-2-aminoxyacetat-hy-drochlorid, og der omrøres ved stuetemperatur i 3 timer, medens pH-30 værdien indstilles til 6 med natriumbicarbonat. Den resulterende opløsning indstilles til pH-værdi 1,5 med saltsyre, udsaltes og ekstraheres tre gange med ethylacetat. Ekstrakten tørres over magnesiumsulfat og inddampes i vakuum. Remanensen pulveriseres med diet-

DK 163832 B

61 hylether, og det udfældede materiale frafiltreres og tørres, hvorved fås 1,44 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-ethoxycarbonylmethoxyimino-eddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 112eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3150, 1740, 1670 og 1550 cm'*·.

5 NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 1,23 (3H, t, J-7Hz), 4,16 (2H, q, J=7Hz), 4,77 (2H, s), 7,56 (IH, s), 8,54 (IH, s).

EKSEMPEL 0.

1) 60 g ethyl-2-hydroxyimino-3~oxobutyrat (syn-isomer), 54,1 g l-brom-2-chlorethan, 78 g kaliumcarbonat og 200 ml N,N-diraethylforma- 10 mid behandles på analog måde som i eksempel F-(l), hvorved fås 83,6 g ethyl-2-(2-chlorethoxyimino)-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): t/max - 1740, 1680 og 1430 cm'1.

NMR-Spektrum (CC14): δ ppm - 1,34 (3H, t, J-7Hz), 2,34 (3H, s), 3,72 15 (2H, t, J-6Hz), 4,28 (2H, q, J=7Hz), 4,46 (2H, t, J-6Hz).

2) 83,6 g ethyl-2-(2-chlorethoxyimino)-3-oxobutyrat (syn-isomer), 52,4 g sulfurylchlorid og 83,6 ml eddikesyre behandles på analog måde som i eksempel F-(2), hvorved fås 68 g ethyl-2-(2-chlorethoxy-imino)-3-oxo-4-chlorbutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

20 IR*Spektrum (film): i/max = 1740 og 1720 cm"*·.

NMR-Spektrum (CC14): δ ppm - 1,32 (3H, t, J-7Hz), 3,70 (2H, t, J-6Hz), 4,29 (2H, q, J-7Hz), 4,47 (2H, s), 4,48 (2H, t, J-6Hz).

3) 68 g ethyl-2-(2-chlorethoxyimino)-3-oxo-4-chlorbutyrat (syn-isomer), 20,2 g thiourinstof, 36,2 g natriumacetattrihydrat, 270 ml 25 ethanol og 170 ml vand behandles på analog måde som i eksempel F-(3), hvorved fås 33,7 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxy-imino)acetat (syn-isomer), smeltepunkt 126 - 128°C.

DK 163832 B

62 IR-Spektrum (nujol): j/max - 3440, 3260, 3140, 1725, 1620 og 1540 cnT*-.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): 6 ppm - 1,30 (3H, t, J-7Hz), 3,78 (2H, t, J-6Hz), 4,1-4,6 (4H, m), 6,96 (IH, s), 7,27 (2H, s).

5 4) 30,5 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxyimino)acetat (syn-isomer), 220 ml vandig IN natriumhydroxidopløsning, 110 ml methanol og 140 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i eksempel F-(4), hvorved fås 23,4 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-chlor-ethoxyimino)eddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 201eC (sønderde-10 ling).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3210, 3100, 1640, 1620 og 1580 cm"^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 3,83 (2H, t, J-6Hz), 4,36 (2H, t, J«6Hz), 6,92 (IH, s), 7,30 (2H, s).

5) 15 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxyimino)eddikesyre 15 (syn-isomer), 24,5 g eddikesyreanhydrid, 11,0 g myresyre og 50 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i eksempel F-(5), hvorved fås 13,4 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxyimino)ed-dikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 155°C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3100, 1740, 1690 og 1660 cm"^·.

/ 20 NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 3,87 (2H, t, J-6Hz), 4,40 (2H, t, J-6Hz), 7,60 (IH, s) , 8,56 (IH, s), 12,62 (IH, bred s).

EKSEMPEL P.

En suspension af 3,0 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)oxalsyre i 60 ml methanol og 60 ml vand indstilles under omrøring til pH-værdi 8 med 25 en vandig IN natriumhydroxidopløsning. Til opløsningen sættes 2,24 g 2,2,2-trifluorethoxyaminhydrochlorid, og opløsningen indstilles til pH-værdi 2,5-3 med en vandig IN natriumhydroxidopløsning. Opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 1,5 time, og methanolet afdampes

DK 163832 B

63 fra den resulterende opløsning under reduceret tryk. Den koncentrerede vandige opløsning indstilles til pH-værdi 7 med vandig IN natriumhydroxidopløsning og vaskes med ethylacetat. Der sættes ethylacetat til den vandige opløsning, og pH-værdien indstilles til 1,5 med 10%'s 5 saltsyre, og derpå ekstraheres med ethylacetat. Den vandige fase ekstraheres atter med ethylacetat. Ekstrakterne forenes og vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningen inddampes i vakuum, hvorved fås 2,4 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorethoxyimino)eddikesyre (syn-10 isomer), smeltepunkt 162 - 163°C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3200, 1700, 1600 og 1560 cm'^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 4,83 (2H, q, J=8,5Hz), 7,65 (IH, s), 8,58 (IH, s), 12,60 (IH, bred s).

EKSEMPEL Q.

15 10 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)oxalsyre, 4,2 g natriumbicarbonat og 8,1 g tert.butyl-2-aminooxyacetat behandles på analog måde som i eksempel N, hvorved fås en olie. Olien tritureres med n-hexan, og det udfældede materiale frafiltreres og tørres, hvorved fås 11,3 g 2-(2-formaraidothiazol-4-yl) - 2 - tert. butoxycarbonylmethoxyiminoeddikesyre 20 (syn-isomer), smeltepunkt 117°C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): z/max - 3180, 3140, 1750, 1690 og 1630 cnf^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm = 1,46 (9H, s), 4,66 (2H, s), 7,56 (IH, s), 8,56 (IH, s), 12,67 (IH, bred s).

EKSEMPEL R.

25 1) 100 g ethyl-2-hydroxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 300 ml N,N- dimethylformamid, 130 g kaliumcarbonat og 121 g bromoctan behandles på analog måde som i eksempel F-(1), hvorved fås 165,5 g ethyl-2-n-octyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

DK 163832 B

64 IR-Spektrum (film): i/max - 1745, 1695 og 1470 cm'^·.

NMR-Spektrum (CC14): S ppm = 0,6-2,1 (18H, m), 2,35 (3H, s), 4,0-4,6 (4H, m).

2) 165,5 g ethyl-2-n-octyloxyimino-3-oxobutyrat (syn-isomer), 84,7 g 5 sulfurylchlorid og 165 ml eddikesyre behandles på analog måde som i eksempel F-(2), hvorved fås fås 169,6 g ethyl-2-n-octyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer) i form af en olie.

IR-Spektrum (film): i/max = 1745, 1710 og 1465 cm"^-.

NMR-Spektrum (CC14): S ppm - 0,6-2,1 (18H, m), 4,0-4,6 (4H, m), 4,48 10 (2H, s).

3) 169,6 g ethyl-2-n-octyloxyimino-4-chlor-3-oxobutyrat (syn-isomer), 42,3 g thiourinstof, 75,5 g natriumacetattrihydrat, 420 ml vand og 1020 ml ethanol behandles på analog måde som i eksempel F-(3), hvorved fås 65 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-octyloxyiminoacetat 15 (syn-isomer), smeltepunkt 77 - 78eC.

IR-Spektrum (nujol): J/max *= 3470, 3250, 3125, 1735, 1545 og 1465 cm' NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm = 0,81 (3H, t, J=6Hz), 0,6-1,9 (15H, m), 4,07 (2H, t, J-6Hz), 4,28 (2H, q, J=7Hz), 6,86 (IH, s), 7,02 (2H, 20 bred s).

4) 64 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-octyloxyiminoacetat (syn-isomer), 196 ml 2N vandig natriumhydroxidopløsning, 196 ml methanol og 300 ml tetrahydrofuran behandles på analog måde som i eksempel F-(4), hvorved fås 52,5 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-oc- 25 tyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 146eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): j/max = 3170, 1635, 1565 og 1460 cm'l.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm = 0,86 (3H, t, J=6Hz), 0,6-1,9 (12H, m), 4,06 (2H, t, J=6Hz), 6,81 (IH, s), 7,22 (2H, s).

DK 163832 B

65 5) 20 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-octyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 27,3 g eddikesyreanhydrid og 12,3 g myresyre behandles på analog måde som i eksempel F-(5), hvorved fås 21,3 g 2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-n-octyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), smeltepunkt 5 122eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): i/raax “ 3350, 3150, 3050, 1700, 1675 og 1560 cm-1.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,6-2,0 (15H, m), 4,16 (2H, t, J-6Hz), 7,56 (IH, s), 8,57 (IH, s), 12,67 (IH, s).

10 EKSEMPEL 1.

1) 0,65 g 2-(2-(2,2,2-trifluoracetamido)-4-thiazolyl]-2-methoxyimino-eddikesyre (syn-isomer) sættes ved 0°C til et Vilsmeier-reagens, som er fremstillet ud fra dimethylformamid og phosphoroxychlorid i 10 ml ethylacetat, og blandingen omrøres ved denne temperatur i 40 minutter 15 til fremstilling af en aktiveret syreopløsning. Den aktiverede syreopløsning sættes dråbevis ved -20“C til en opløsning af 0,5 g 7-ami-no-2,3-dimethyl-3-cephem-4-carboxylsyre og 1,73 g trimethylsilyl-acetamid i 30 ml ethylacetat, og blandingen omrøres ved denne temperatur i 40 minutter. Til den resulterende blanding sættes 10 ml 20 vand, og ethylacetatfasen skilles fra blandingen og vaskes med vand.

Der sættes 30 ml vand til opløsningen, og blandingen indstilles til pH-værdi 7,5 med natriumbicarbonat under isafkøling. Blandingen omrystes, og den vandige fase fraskilles. Til den vandige opløsning sættes 50 ml ethylacetat, og blandingen indstilles til pH-værdi 2 med 25 fortyndet saltsyre under omrøring, og ethylacetatfasen fraskilles, vaskes med vand og mættet vandig natriumchloridopløsning i den nævnte rækkefølge, behandles med aktivkul, tørres over magnesiumsulfat og inddampes derpå under reduceret tryk. Remanensen pulveriseres med diisopropylether, hvorved fås 0,9 g 7-(2-[2-(2,2,2-trifluoracetami-30 do)-4-thiazolyl) -2-raethoxyiminoacetamido) -2,3-dimethyl-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): “ 3250, 1780, 1725, 1680 og 1650 cm'^·.

DK 163832 B

66 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 1,43 (3H, d, J=8Hz), 1,92 (IH, s), 3,82 (3H, s), 3,98 (IH, q, J-8Hz), 5,18 (IH, d, J«6Hz), 5,73 (IH, AB-q, J-6Hz), 7,43 (IH, s), 9,63 (IH, d, J«8Hz).

2) 0,86 g 7-(2-[2-(2,2,2-trifluoracetamido)-4-thiazolyl]-2-methoxy-5 iminoacetamido)-2,3-dimethyl-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) opløses i 9 ml vandig opløsning indeholdende 2,3 g natriumacetat-trihydrat, og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 19 timer.

Uopløseligt materiale frafiltreres fra den resulterende blanding, og filtratet indstilles til en pH-værdi på ca. 2,5 med 10%'s saltsyre 10 under isafkøling. Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med vand og tørres, hvorved fås 0,16 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -2,3-dimethyl-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmav =° 3320, 3200, 1770 (skulder), 1670 og 15 1630 cm*^·.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm - 1,44 (3H, d, J-7Hz), 1,98 (3H, s), 3,57 (IH, q, J-7Hz), 3,82 (3H, s), 5,18 (IH, d, J-5Hz), 5,73 (IH, dd, J-5, 8Hz), 6,75 (IH, s), 9,63 (IH, d, J-8Hz).

EKSEMPEL 2.

20 1) Til en suspension af 10,50 g p-nitrobenzyl-7-phenylacetamido-3- cephem-4-carboxylat i 100 ml tørt dichlormethan sættes 2,14 g tør pyridin. Til opløsningen sættes ved -10eC 5,50 g phosphorpenta-chlorid, og blandingen omrøres ved -5"C i 45 minutter, og derpå ved 10°C i 1 time. Til den resulterende blanding sættes 520 g methanol, 25 og blandingen omrøres derpå i 1,5 timer ved -20°C. Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med 120 ml dichlormethan og 130 ml diethylether i den nævnte rækkefølge og tørres derpå, hvorved fås 7,90 g p-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat, smeltepunkt l82eC (sønderdeling).

30 IR-Spektrum (nujol): t/max = 1790, 1730, 1638 og 1600 cm"1·.

DK 163832 B

67 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm ** 3,78 (2H, d, J-4Hz), 5,27 (2H, dd, J-5Hz), 5,44 (2H, s), 6,78 (IH, t, J-4Hz), 7,72 (2H, d, J-9Hz), 8,26 (2H, d, J*=9Hz).

2) Et Vilsmeier-reagens fremstillet ud fra 0,43 g dimethylformamid og 5 0,92 g phosphoroxychlorid suspenderes i 10 ml tørt ethylacetat. Til suspensionen sættes under isafkøling og omrøring 1,15 g 2-(2-for-mamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), og blandingen omrøres ved denne temperatur i 30 minutter til fremstilling af den aktiverede syreopløsning. 1,79 g p-nitrobenzyl-7-araino-3-cephem-10 4-carboxylat-hydrochlorid og 5,0 g trimethylsilylacetamid opløses i 40 ml ethylacetat. Til denne opløsning sættes den aktiverede syreopløsning på én gang ved -20eC, og blandingen omrøres ved denne temperatur i 2 1/2 time. Til den resulterende opløsning sættes 60 ml vand og 200 ml ethylacetat, og ethylacetatfasen fraskilles, vaskes 15 med 60 ml lOZ's saltsyre, 60 ral mættet vandig natriumbicarbonatopløs-ning og 50 ml vandig natriurachloridopløsning i den nævnte rækkefølge, tørres over magnesiumsulfat, behandles med aktivkul og inddampes derpå under reduceret tryk. Til remanensen sættes diethylether, og det udfældede materiale frafiltreres, hvorved fås 1,30 g p-nitroben-20 zyl-7- [2- (2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3- cephem-4-carboxylat (syn-isomer), smeltepunkt 210 - 212eC (sønderdeling) .

IR-Spektrum (nujol): t/max - 3240, 1780, 1730, 1690, 1655, 1605, 1550 og 1520 cm*^.

25 NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm - 3,65 (2H, bred s), 3,90 (3H, s), 5,20 (IH, d, J«5Hz), 5,43 (2H, s), 5,95 (IH, q, J«5,8Hz), 6,68 (IH, t, J-4Hz), 7,42 (IH, s), 7,72 (2H, d, J-9Hz), 8,28 (2H, d, J-9Hz), 8,46 (IH, s), 9,72 (IH, d, J=8Hz).

3) Til en opløsning af 1,25 g p-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-4-30 thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i 40 ml methanol og 50 ml tetrahydrofuran sættes 0,65 g 10%'s palladium/kul, og blandingen underkastes katalytisk reduktion ved stuetemperatur under atmosfæretryk i 3 1/2 time. Katalysatoren fjernes fra reaktionsblandingen, og filtratet inddampes under reduceret

DK 163832 B

68 tryk. Til remanensen sættes 80 ml vand, og blandingen indstilles til pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning, og derpå frafiltreres uopløseligt stof. Filtratet vaskes med 50 ml ethylace-tat, og derpå sættes 100 ml ethylacetat til opløsningen. Efter ind-5 stilling af pH-værdien til 1,5 med 10%'s saltsyre fraskilles ethyla-cetatfasen. Den som remanens vundne vandige fase ekstraheres to gange med 80 ml ethylacetat, og ekstrakterne forenes med den ovenfor vundne ethylacetatfase, vaskes med en vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiurasulfat og inddampes derpå under reduceret tryk, hvorved 10 fås 0,60 g 7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), smeltepunkt 176 - 183°C (sønderdeling) .

IR-Spektrum (nujol): i'max “ 3250, 1780, 1690, 1660 og 1550 cm-^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 5 ppm- 3,63 (2H, d, J-4Hz), 3,93 (3H, s), 15 5,10 (IH, d, J—5Hz), 5,90 (IH, q, J-5,8Hz), 6,53 (IH, t, J=4Hz), 7,47 (IH, s), 8,57 (IH, s), 9,70 (IH, d, J-8Hz), 12,63 (IH, s).

4) 95 mg 7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) suspenderes i 4 ml methanol. Til suspensionen sættes 110 mg koncentreret saltsyre, og opløsningen 20 omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Methanolet afdestilleres under reduceret tryk, og derpå opløses remanensen i 30 ml vand, og den vandige opløsning vaskes med 10 ml ethylacetat og 15 ml dichlormethan i den nævnte rækkefølge. Der ledes nitrogengas ned i den vandige opløsning for at uddrive det resterende organiske opløsningsmiddel, 25 og den vandige opløsning lyofiliseres, hvorved fås 83 mg 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre -hydrochlor id (syn-isomer), smeltepunkt 180 - 190eC (sønderdeling) .

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3300, 1770, 1710, 1660 og 1630 crn*^-.

30 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 3,64 (2H, bred s), 3,95 (3H, s), 5,14 (IH, d, J=5Hz), 5,82 (IH, t, J=4Hz), 6,95 (IH, s), 9,80 (IH, d, J«8Hz).

DK 163832B

69 5) En opløsning af 10,8 g 7-[2-(2-formaraido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephera-4-carboxylsyre (syn-isomer), 11 g koncentrerer saltsyre og 350 ml methanol omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Den resulterende opløsning inddampes under reduceret tryk, og 5 der sættes ethylacetat til remanensen. Opløsningen indstilles til pH-værdi 8,0 med mættet vandig natriurabicarbonatopløsning, og den vandige fase fraskilles og vaskes med diethylether. Derpå bobles nitrogengas gennem den vandige opløsning, og den vandige opløsning indstilles til pH-værdi 4,0 med 102's saltsyre. Det udfældede stof 10 frafiltreres og vaskes med vand, hvorved fås 8,2 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), smeltepunkt >290°C.

IR-Spektrum (nujol): umax - 3470, 3280, 3200, 1780, 1695, 1655 og 1622 cm*1.

15 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 3,60 (2H, bred s), 3,84 (3H, s), 5,12 (IH, dd, J«5Hz), 5,84 (IH, dd, J-5,8Hz), 6,52 (IH, bred t), 6,76 (IH, s), 7,26 (2H, bred s), 9,65 (IH, d, J-8Hz).

6) 1,04 g natriumbicarbonat sættes under isafkøling til en opløsning af 2,6 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-ce- 20 phem-4-carboxylsyre-hydrochlorid (syn-isomer) i 100 ml vand, og der omrøres ved stuetemperatur. Den resulterende opløsning lyofiliseres, hvorved fås 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3100, 1760, 1650, 1590 og 1530 cm*1.

25 NMR-Spektrum (D20): δ ppm - 3,60 (2H, bred q), 4,00 (3H, s), 5,22 (IH, d), 5,88 (IH, d), 6,35 (IH, q), 7,03 (IH, s).

7) Det ovenfor vundne produkt opløses i 20 ml tørt N,N-dimethylforma-mid. Til opløsningen sættes dråbevis ved -40°C i løbet af 5 minutter en opløsning af 1,33 g iodmethyl-n-hexanoat og 5 ml tørt N,N-dime- 30 thylformamid, og der omrøres derpå ved denne temperatur i 40 minutter og isafkøles derpå i 45 minutter. Den resulterende opløsning sættes til en blanding af 60 ml ethylacetat og 125 ml vand. Ethylacetatfasen

DK 163832 B

70 fraskilles, vaskes med mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og mættet vandig natriumchloridopløsning i den nævnte rækkefølge, tørres over magnesiumsulfat og behandles derpå med aktivkul. Ethylacetatet afdampes fra opløsningen, og remanensen tritureres med diethylether, 5 hvorved fås 750 mg n-hexanoyloxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): - 3170, 1780, 1750 (skulder), 1670, 1630 og 1530 cm' NMR-Spektrum (CDC13): δ ppm - 0,68 - 1,84 (9H, m) , 2,20 - 2,48 (2H, 10 t), 3,20 - 3,80 (2H, m), 4,02 (3H, s), 5,04 (IH, d), 5,60 - 6,20 (3H, m), 6,62 (IH, q), 6,80 (IH, s), 7,72 (IH, d).

8) 1,1 g p-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) suspenderes i en blanding af 10 ml ethanol og 15 ml vand. Til suspensionen sættes dråbevis 15 ved 5 76C i løbet af 10 minutter 6 ml IN vandig kaliumhydroxidopløsning, og der omrøres i 10 minutter. Den resulterende opløsning indstilles til pH-værdi 7,5 med 10%'s saltsyre, vaskes med ethylacetat og indstilles til pH-værdi 2,5 med 10%'s saltsyre. De udfældede krystaller frafiltreres, hvorved fås en blanding af 0,32 g 7-(2-(2-20 formamido-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] - 3-cephem-4-carboxyl syre (syn-isomer) og 0,035 g 7-(2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi-noacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

9) 5 g 7-(2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem- 4-carboxylsyre (syn-isomer) sættes langsomt til en opløsning af 1,04 25 g natriumbicarbonat i 30 ml vand ved 35 - 40°C, og der omrøres ved 50 - 53°C i 30 minutter. Uopløseligt materiale filtreres fra den resulterende opløsning, og filtratet behandles med 0,3 g aktivkul og filtreres. Filtratet lyofiliseres, hvorved fås 4,2 g natrium-7-[2-(2-amino -4- thiazolyl) - 2 -methoxyiminoacetamido ] - 3 - cephem-4 - carboxylat 30 (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax = 3300 - 3100, 1760, 1670, 1595 og 1530 cm'^·.

DK 163832 B

71 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 3,50 (2H, bred s), 3,83 (3H, s), 5,00 (IH, d, J-5Hz), 5,68 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,13 (IH, bred s), 6,73 (IH, s), 7,3 (2H, bred s), 9,60 (IH, d, J-8Hz).

10) 1,15 g 7-[2-(2-arainothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3- 5 cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) sættes til en vandig opløsning af 0,111 g calciumhydroxid i 100 ml vand, og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 10 minutter. Derefter filtreres opløsningen, og filtratet lyofiliseres, hvorved fås 1,2 g calcium-7-[2-(2-aminothia-zol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-iso -10 mer).

IR-Spektrum (nujol): j/max - 3350, 1760, 1670, 1590, 1535 og 1465 cm'^·.

NMR-Spektrum (D20): S ppm - 3,51 (IH, d, J-5Hz), 3,59 (IH, d, J-3Hz), 3,97 (3H, s), 5,15 (IH, d, J-5Hz), 5,82 (IH, d, J-5Hz), 6,33 (IH, dd, 15 J-5Hz, 3Hz), 6,95 (IH, s).

11) 1,15 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) sættes til en suspension af 0,088 g magnesiumhydroxid i 100 ml vand, og blandingen omrøres ved 70°C i 30 minutter til dannelse af en opløsning. Den resulterende opløsning 20 filtreres, og filtratet lyofiliseres, hvorved fås 1,1 g magnesium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephera-4-carboxy-lat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): t/max = 3350, 1760, 1660, 1610, 1530 og 1460 cm' 25 NMR-Spektrum (D20): S ppm - 3,53 (IH, d, J-5Hz), 3,59 (IH, d, J-3Hz), 3,96 (3H, s), 5,16 (IH, d, J-5Hz), 5,84 (IH, d, J-5Hz), 6,32 (IH, dd, J-5Hz, 3Hz), 7,98 (IH, s). 1 1,15 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) sættes til en opløsning af 0,523 g 30 arginin i 50 ml vand, og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 10 minutter. Den resulterende blanding filtreres, og filtratet lyofili-

DK 163832 B

72 seres, hvorved fås 1,35 g argininsalt af 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3350, 3150, 1770, 1650 (bred), 1580, 1530 og 1460 cm" 5 NMR-Spektrum ( D20): δ ppm ** 1,4 - 2,1 (4H, m), 3,22 (2H, t, J=6Hz), 3,55 (IH, d, J«6Hz), 3,65 (IH, d, J-3Hz), 3,82 (IH, d, J«6Hz), 3,97 (3H, s), 5,18 (IH, d, J=5Hz), 5,85 (IH, d, J«5Hz), 6,33 (IH, dd, J-6Hz, 3Hz), 7,00 (IH, s).

13) 1,21 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetami-10 do]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) sattes til en opløsning af 0,55 g lysinhydrochlorid i 12 ml vand. Opløsningen lyofiliseres, hvorved fås 1,6 g lysinsalt af 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-raethoxy-iminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): ^max - 3350, 3150, 1770, 1600 (bred), 1530 og 15 1460 cm"^·.

NMR-Spektrum (D20): δ ppm - 1,3 - 2,1 (6H, m), 3,03 (2H, t, J=7Hz), 3,54 (IH, d , J«5Hz), 3,64 (IH, d, J-3Hz), 3,80 (IH, d, J-6Hz), 3,97 (3H, s), 5,17 (IH, d, J-5Hz), 5,84 (IH, d, J-5Hz), 6,32 (IH, dd, J-5Hz, 3Hz), 6,99 (IH, s).

20 14) Til en suspension af 15 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxy- iminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) i en blanding af 8 ml ethanol og 8 ml vand sættes ved stuetemperatur 20%'s vandig natriumhydroxidopløsning, til der fås en opløsning med pH-værdi 7,5.

Den filtreres og vaskes, og filtratet og vaskevæskerne forenes (i alt 25 18,3 ml vand) og sættes dråbevis til 46 ml ethanol ved 20 - 25°C

under omrøring, og der omrøres ved denne temperatur i 30 minutter.

Til blandingen sættes dråbevis 28 ml ethanol i løbet af 30 minutter, og der omrøres ved samme temperatur i 2 timer. Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med 20 ml ethanol og tørres i vakuum ved 30 stuetemperatur, hvorved fås 13,5 g plader af natrium-7-[2-(2-ami-nothiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat-di-hydrat (syn-isomer), smeltepunkt 260eC (sønderdeling).

DK 163832 B

73 IR-Spektrum (nujol): i/max - 3430, 3250, 1760 (skulder), 1745, 1650, 1630 (skulder), 1590 og 1540 cm"1.

15) 15 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] --3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) opløses i 13 ml vand under omrø- 5 ring ved 35 - 45"C. 52 ml ethanol opvarmet til 30°C sættes dråbevis til den omrørte opløsning, og der omrøres ved denne temperatur i 5 minutter, og derpå ved stuetemperatur i 2 timer. Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med ethanol og tørres under reduceret tryk, hvorved fås 13,45 g plader af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-10 yl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat-dihydrat (syn-isomer).

16) Til en omrørt suspension af 52 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) i 100 ml vand sættes forsigtigt ved en temperatur under 5eC dråbevis 4N vandig 15 natriumhydroxidopløsning,til der fås en opløsning med pH-værdi 7,0 - 7,5. Der filtreres og vaskes, og filtratet og vaskevæskerne (200 ml) forenes og sættes dråbevis under omrøring i løbet af 30 minutter til 2 liter ethanol, og der omrøres ved stuetemperatur i 15 minutter og derpå ved 5 - 10°C i 1 time. Det udfældede materiale frafiltreres, 20 vaskes med 200 ml ethanol og tørres i vakuum ved 30eC, hvorved fås 46,3 g amorft natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax « 3400, 3300, 3170, 1750, 1650 og 1580 cm-1.

25 17) En suspension af 10 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-me thoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i 250 ml methanol behandles i et ultralydsapparat til dannelse af en klar opløsning. Opløsningen lades henstå ved stuetemperatur og omrøres derpå ved samme temperatur i 3 timer. Det udfældede materiale fra-30 filtreres og vaskes med methanol, hvorved fås amorft natrium-7-[2- (2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

DK 163832B

74 EKSEMPEL 3.

1) På sædvanlig måde fremstilles en opløsning af et Vilsmeier-reagens ud fra 0,39 g tørt dimethylfc.rmamid, 1,2 n:l tørt ethylacetat og 0,84 g phosphoroxychlorid. Opløsningen sættes ved -15°C til en op- 5 løsning af 0,93 g 2-(l,2,3-thiadiazol-4-yl)-2-methoxyiminoeddikesyre (syn-isomer) i 10 ml ethylacetat til fremstilling af en aktiveret syreopløsning. 1,5·g p-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat, 4,6 g trimethylsilylacetamid, 1 ml bis(trimethylsilyl)acetamid og 50 ml tørt ethylacetat omrøres ved 45°C i 5 timer til dannelse af en op-10 løsning. Til opløsningen sættes på én gang ved -10°C og under omrøring den ovenfor vundne aktiverede syreopløsning, og den blandede opløsning omrøres ved -5°C i 1,5 timer. Til reaktionsblandingen sættes vand, og det uopløselige produkt frafiltreres, vaskes med ethylacetat og vand i den nævnte rækkefølge og tørres derpå, hvorved 15 fås 1,9 g p-nitrobenzyl-7-[2-(1,2,3-thiadiazol-4-yl)-2-methoxyimino-acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i form af et bleggult pulver, smeltepunkt 243 - 245“C (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): j/max - 3250, 1782, 1725, 1655, 1630, 1600, 1520 og 1345 cm" 20 NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 3,69 (2H, AB-q, J-14Hz) , 4,00 (3H, s), 5,24 (IH, d, J-5Hz), 5,46 (2H, s), 6,00 (IH, dd, J«5,8Hz), 6,68 (IH, t, J«4Hz), 7,7 - 8,4 (4H, m), 9,44 (IH, s), 9,88 (IH, d, J=8Hz).

2) 0,85 g 10%'s palladium/kul sættes til en opløsning af 1,65 g p-nitrobenzyl-7- [2-(1,2,3-thiadiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacetamido] - 25 3-cephen-4-carboxylat (syn-isomer) i 70 ml methanol og 90 ml tetrahy-drofuran, og blandingen underkastes katalytisk reduktion ved stuetemperatur og under atmosfæretryk i 3,5 timer. Katalysatoren filtreres fra reaktionsblandingen, og filtratet inddampes under reduceret tryk.

Til remanensen sættes vand, og blandingen indstilles til pH-værdi 30 7 - 8 med natriumbicarbonat og vaskes med ethylacetat, indstilles til pH-værdi 1,5 med 10%'s saltsyre og ekstraheres derpå med ethylacetat. Ekstrakten vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og filtreres derpå. Filtratet inddampes under reduceret tryk, og remanensen pulveriseres med diethylether.

DK 163832 B

75

Det udfældede stof frafiltreres og tørres, hvorved fås 0,3 g 7-[2-(1,2,3-thiadiazol-4-yl)- 2-me thoxy iminoacetamido}-3-cephem- 4-carboxyl-syre (syn-isomer) i form af et gult pulver, smeltepunkt 200 - 210eC (sønderdeling).

5 IR-Spektrum (nujol): vmax - 3250, 2550 - 2600, 1785, 1715, 1655, 1630 og 1600 cm"l.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm « 3,58 (2H, AB-q, J-14Hz), 4,00 (3H, s), 5,15 (IH, d, J-5Hz), 5,90 (IH, dd, J-5,8Hz), 6,52 (IH, t, J-5Hz), 9,38 (IH, s), 9,84 (IH, d, J-8Hz).

10 EKSEMPEL 4.

1,7 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre og 2,84 g natriumbicarbonat opløses i en blanding af 35 ml vand og 35 ml acetone. 1,95 ml phos-phoroxychlorid sættes dråbevis i løbet af 10 minutter ved 0 - 6®C til en suspension af 3,42 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-raethoxyiminoeddike-15 syre (syn-isomer) i 34 ml tør ethylacetat, og blandingen omrøres ved samme temperatur i 30 minutter. Til opløsningen sættes dråbevis ved 0 - 6eC i løbet af 20 minutter en opløsning af 2,39 g trimethylsilyl-acetamid i 5 ml ethylacetat, og blandingen omrøres i 20 minutter.

Til blandingen sættes dråbevis i løbet af 10 minutter og ved den 20 ovenfor angivne temperatur 1,95 ml phosphoroxychlorid, og den vundne blanding omrøres i 30 minutter. Derpå tilsættes 1,29 ml dimethylfor-mamid dråbevis til blandingen i løbet af 10 minutter ved samme temperatur, og der omrøres i 1 time, hvorved fås en klar opløsning.

Opløsningen sættes dråbevis ved -5 - +5°C i løbet af 30 minutter til 25 en opløsning af 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre ved en pH-værdi i området 6,5 - 7,5, og reaktionsblandingen omrøres i 1 time ved samme temperatur. Til den resulterende opløsning sættes 200 ml ethylacetat, og den vandige fase fraskilles og vaskes med methylenchlorid, der gennembobles nitrogengas, og der indstilles til pH-værdi 4 med eddi-30 kesyre. Opløsningen søjlechromatograferes på en makroporøs, ikke- ionisk adsorptionsharpiks "Diaion"® (varemærke, fremstillet af Mitsubishi Chemical Industries Ltd.), og der elueres med 20Z's vandig isopropylalkoholopløsning. Eluatet inddampes under reduceret tryk og

DK 163832 B

76 lyofiliseres, hvorved fås 2,0 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-meth-oxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer). Produktet identificeres med den autentiske prøve ved IR- og NMR-spektrum.

EKSEMPEL 5.

5 i) 1,2 g phosphoroxychlorid sættes på én gang ved 5eC til en suspension af 1,23 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre (syn-isomer) i 12 ml ethylacetat, og der omrøres ved 4 - 6°C i 30 minutter. Til opløsningen sættes 1,0 g trimethylsilylacetamid, og der omrøres ved 4 - 6°C i 30 minutter. Til opløsningen tilsættes atter 10 1,2 g phosphoroxychlorid, og der omrøres i 15 minutter. Til opløs ningen sættes der på én gang ved 4 - 6°C 0,5 g dimethylformamid, og der omrøres i 40 minutter, hvorved fås en klar opløsning. 1,9 g p -nitrobenzyl - 7 - amino - 3 - cephem- 4- carboxylat -hydrochlor id sættes til en blanding af 30 ml tetrahydrofuran og 10 ml acetone, og til blan-15 dingen sættes 20 ml vandig opløsning af 0,6 g natriumbicarbonat. Til denne opløsning sættes den ovenfor vundne opløsning dråbevis ved 0 - 5eC, pH-værdi 8,0. Blandingen omrøres ved -2 - +2°C og ved pH-værdi 8,0 i 30 minutter, og derpå frafiltreres uopløseligt materiale. Filtratet ekstraheres med ethylacetat, og ekstrakten vaskes med en 20 mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes derpå under reduceret tryk. Remanensen pulveriseres med diisopropylether, hvorved fås 1,6 g p-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetaraido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) .

25 IR-Spektrum (nujol): vmaX » 3300, 1780, 1730, 1670 og 1520 cm"^·.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm = 3,60 (2H, m), 3,81 (3H, s), 5,12 (IH, d, J-5Hz), 5,85 (IH, dd, J=5Hz, 10Hz), 6,64 (IH, m), 6,70 (IH, s), 7,20 (2H, s), 7,65 (2H, d, J=10Hz), 8,19 (2H, d, J=10Hz), 9,60 (IH, d, J=10Hz).

30 2) 7,8 g p-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacet- amido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) suspenderes i en blanding af 60 ml ethanol og 60 ml vand. Til den omrørte suspension sættes

DK 163832 B

77 dråbevis i løbet af 10 minutter under isafkøling 45 ml IN vandig kaliumhydroxidopløsning, og der omrøres ved 5eC i 15 minutter. Den resulterende opløsning indstilles til pH-værdi 7,0 med koncentreret saltsyre, der vaskes med ethylacetat og inddampes under reduceret 5 tryk til halvdelen af det oprindelige volumen. Den inddampede opløsning indstilles til pH-værdi 5,0 og søjlechromatograferes på 80 ml makroporøs ikke-ionisk adsorptionsharpiks "Diaion"® HP-20 (varemærke, fremstillet af Mitsubishi Chemical Industries Ltd.), og der elueres med 5%'s vandig isopropylalkoholopløsning. De fraktioner, 10 som indeholder den fremstillede forbindelse, samles og indstilles til pH-værdi 3,2 med 102's saltsyre. De udfældede krystaller frafiltreres og tørres, hvorved fås 2,3 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi-noacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

EKSEMPEL 6.

15 3,4 g p-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat suspenderes i 60 ml tetrahydrofuran, og til suspensionen sættes 20 ml vandig opløsning af 1,2 g natriumbicarbonat. Til opløsningen sættes dråbevis ved 3 - 4eC 30 ml IN vandig natriumhydroxidopløsning, og der omrøres i 20 minutter. Den resulterende opløsning indstilles til pH-værdi 7,0 med 102's 20 saltsyre og inddampes under reduceret tryk. Det uopløselige materiale frafiltreres, og filtratet vaskes med ethylacetat. Til filtratet sættes 30 ml acetone, og der afkøles til -5eC. Til den ovenfor vundne opløsning sættes ved -5 - 0eC og en pH-værdi i området 7,5 - 8,5 en opløsning af phosphoroxychlorid, dimethylformamid, trimethylsilyl-25 acetamid og 2,2 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), som er fremstillet på analog måde som i eksempel 7.

Blandingen omrøres ved 3 - 7“C og en pH-værdi i området 7,5 - 8,5 i 2 timer, og det uopløselige materiale frafiltreres. Den vandige fase skilles fra filtratet, vaskes med ethylacetat og indstilles til pH-30 værdi 3,0, hvorved fås 1,1 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi-noacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

DK 163832 B

78 EKSEMPEL 7.

1) i,764 g phosphorylchlorid sættes til en suspension af 1,0 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoeddikesyre (syn-isomer) i 10 ml tetrahydrofuran ved en temperatur under 5°C, og der omrøres ved samme 5 temperatur i 20 minutter. Til opløsningen sættes 0,4 g trimethylsi-lylacetamid og 0,4 g N,N-dimethylformamid, og opløsningen omrøres ved en temperatur under 5eC i 40 minutter (opløsning A). 3,5 g tri-methylsilylacetamid sættes til en suspension af 1,5 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat i 15 ml tetrahydrofuran, og der omrøres 10 ved stuetemperatur i 1,5 timer. Til denne opløsning sættes hele opløsning A på én gang ved -20®C, og opløsningen omrøres ved -5 - 0®C i 1 time. Der tilsættes 20 ml vand til den resulterende opløsning ved -20°C, og opløsningen indstilles til pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning.

15 Til opløsningen sættes 70 ml tetrahydrofuran og 50 ml mættet vandig natriumchloridopløsning, og opløsningen omrystes tilstrækkeligt. Den vandige fase fraskilles og ekstraheres med tetrahydrofuran. Tetrahy-drofuranfasen og ekstrakten forenes og vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning. Opløsningen tørres over magnesiumsulfat og 20 inddampes over reduceret tryk. Remanensen tritureres med diisopropy-lether, hvorved fås 2,5 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3330, 1780, 1730, 1680, 1640 og 1610 cm"^.

25 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm = 1,17 (3H, t, J=7Hz), 3,50 (2H, m), 4,05 (2H, q, J-7Hz), 5,10 (IH, d, J=5Hz), 5,85 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6,67 (IH, s), 7,17 (2H, m), 7,63 (2H, d, J=8Hz), 8,18 (2H, d, J-8Hz), 10,13 (IH, d, J-8Hz).

2) 1,0 g palladium/kul befugtet med 3 ml vand sættes til en opløsning 30 af 2,3 g 4-nitrobenzyl-7- [2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-ethoxyiminoacet- amido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i en blanding af 30 ml tetrahydrofuran, 15 ml methanol og 0,3 ml eddikesyre, og suspensionen underkastes katalytisk reduktion ved stuetemperatur under atmosfære-

DK 163832 B

79 tryk i 2 timer. Katalysatoren filtreres fra den resulterende blanding, og filtratet inddampes under reduceret tryk. Til remanensen sættes ethylacetat, og opløsningen indstilles til pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning. Uopløseligt materiale frafiltre-5 res, og derpå fraskilles den vandige fase, der vaskes med ethylacetat, indstilles til pH-værdi 5,5 og behandles derpå med aktivt kul.

Den vandige opløsning indstilles til pH-værdi 3,2, og det udfældede materiale frafiltreres og tørres, hvorved fås 0,6 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-10 isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3500, 3300, 3200, 1785, 1625 og 1600 cm"^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm « 1,20 (3H, t, J-7Hz), 3,57 (2H, m), 4,08 (2H, q, J-7Hz), 5,08 (IH, d, J«5Hz), 5,83 (IH, dd, J«5Hz, 8Hz), 15 6,47 (IH, m), 6,73 (IH, s), 7,20 (2H, m), 9,58 (IH, d, J«8Hz).

EKSEMPEL 8.

1) 4,6 g phosphorylchlorid, 0,95 g trimethylsilylacetamid og 1,2 g N,N-dimethylformamid sættes ved en temperatur under 5®C i løbet af 30 minutter til en omrørt suspension af 2,8 g 2-(2-araino-4-thiazolyl)-2-20 isopropoxyiminoeddikesyre (syn-isomer) i 25 ml tetrahydrofuran (opløsning A). 10,5 g trimethylsilylacetamid sættes til en suspension af 3,9 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat i 50 ml tetrahydrofuran, og der omrøres ved stuetemperatur i 1,5 timer. Til denne opløsning sættes den ovenfor vundne opløsning A ved -20®C på én gang, 25 og opløsningen omrøres ved -5 - 0®C i 40 minutter. Til den resulterende opløsning sættes ved -20°C 70 ml vand og 100 ml tetrahydrofuran. Opløsningen indstilles til pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning og omrøres i 1 time. Derpå tilsættes 200 ml mættet vandig natriumchloridopløsning, og den organiske fase fra-30 skilles. Den som remanens vundne vandige fase ekstraheres med tetrahydrofuran, og ekstrakten og den ovenfor vundne organiske fase forenes, vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes derpå under reduceret tryk. Remanensen

DK 163832 B

80 tritureres med diisopropylether, og det udfældede stof frafIltreres, hvorved fås 6,0 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isopro-poxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max “ 3320, 3270, 1775, 1730, 1670 og 1630 5 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm « 1,17 (6H, d, J-6Hz), 3,63 (2H, m), 4,33 (IH, q, J=6Hz), 5,17 (IH, d, J-5Hz), 5,42 (2H, s), 5,92 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6,67 (IH, m), 6,70 (IH, s), 7,22 (2H, m), 7,70 (2H, d, J=8Hz), 8,25 (2H, d, J=8Hz), 10,13 (IH, d, J=8Hz).

10 2) 1 ml eddikesyre og en suspension af 2,0 g 102's palladium/kul i 8 ml vand sættes til en opløsning af 5,0 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isopropoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i 150 ml tetrahydrofuran, og suspensionen underkastes katalytisk reduktion ved stuetemperatur og atmosfæretryk. Katalysatoren 15 frafiltreres, og filtratet inddampes derpå under reduceret tryk. Til remanensen sættes 80 ml ethylacetat, og der indstilles til pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning. Den organiske fase fraskilles og ekstraheres med en vandig natriumbicarbonatopløsning.

Ekstrakten og den ovenfor vundne vandige fase forenes, indstilles til 20 pH-værdi 3,0 med koncentreret saltsyre og ekstraheres med tetrahydrofuran. Ekstrakten vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under reduceret tryk. De udfældede krystaller frafiltreres og tørres, hvorved fås 0,8 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-isopropoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-car-25 boxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): * 3320, 1780, 1670 og 1635 cm-*·.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm = 1,20 (6H, d, J=6Hz), 3,55 (2H, m), 4,30 (IH, q, J=6Hz), 5,08 (IH, d, J-5Hz), 5,82 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6,45 (IH, m), 6,68 (IH, s), 7,10 (2H, m), 10,08 (IH, d, J=8Hz).

DK 163832 B

81 EKSEMPEL 9.

1) 4,6 g phosphorylchlorid, 0,95 g trimethylsilylacetaraid og 1,2 g N.N-dimethylformamid sættes ved en temperatur under 5°C til en omrørt suspension af 2,8 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propoxyiminoeddikesyre 5 (syn-isomer) i 25 ml tetrahydrofuran, og der omrøres i 20 minutter. Opløsningen sættes ved -5 - +5eC dråbevis til en suspension af 3,9 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat i en blanding af 20 ml tetrahydrofuran, 20 ml vand og 20 ml acetone, idet pH-værdien holdes i området 6,9 - 7,1 med 20%'s vandig natriumbicarbonatopløsning.

10 Opløsningen omrøres ved -5 - +5°C i 30 minutter og derpå ved 10°C i 1 time og indstilles til pH-værdi 7,5. Til den resulterende opløsning sættes 100 ml tetrahydrofuran og 200 ml mættet vandig natriumchlori-dopløsning, og det uopløselige stof frafiltreres. Den organiske fase skilles fra filtratet, vaskes med mættet vandig natriurachloridopløs -15 ning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes derpå under reduceret tryk. Remanensen tritureres med diisopropylether, og det udfældede stof frafiltreres, hvorved fås 5,8 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-propoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) .

20 IR-Spektrum (nujol): vmax - 3300, 1780, 1730, 1670 og 1640 cm" NMR-Spektrum (dg-DMS0): S ppm - 0,93 (3H, t, J-6Hz), 1,70 (2H, m), 3,70 (2H, m), 4,08 (2H, t, J-6Hz), 4,5 (2H, m), 5,23 (IH, d, J-5Hz), 5,50 (2H, s), 5,97 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,73 (IH, m), 6,80 (IH, s), 7,75 (2H, d, J-9Hz), 8,30 (2H, d, J-9Hz), 9,65 (IH, d, J-8Hz).

25 2) 5,0 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-propoxyimino- acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) behandles på analog måde som i eksempel 13-(2), hvorved fås 0,9 g 7-[2-(2-amino-4-thiazo-lyl)-2-propoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3250, 1770, 1650, 1660 og 1620 cm'^·.

30 NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 0,93 (3H, t, J-7Hz), 1,67 (2H, sextet, J-7Hz), 3,60 (2H, m), 4,03 (2H, t, J-7Hz), 5,13 (IH, d, J-5Hz),

DK 163832 B

82 5,83 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,48 (2H, t, J=4Hz), 6,70 (IH, s), 7,18 (2H, m), 9,53 (IH, d, J«8Hz).

EKSEMPEL 10.

1) 13,2 g phosphorylchlorid sættes dråbevis ved -5°C til en omrørt 5 opløsning af 6,3 g Ν,Ν-dimethylformamid og 24,7 ml tetrahydrofuran, og der omrøres ved samme temperatur i 30 minutter. Til opløsningen sættes ved -5eC 120 ml tetrahydrofuran og 19,5 g 2-(2-formamidothia-zol-4-yl)-2-n-butoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), og der omrøres ved samme temperatur i 30 minutter. Denne opløsning sættes dråbevis ved 10 en temperatur mellem -5 og +5eC i løbet af 15 minutter til en omrørt suspension af 24,7 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat, 120 ml tetrahydrofuran, 60 ml acetone og 60 ml vand, idet pH-værdien indstilles til 7-7,5 med 20%'s vandig natriumcarbonatopløsning, og derpå omrøres opløsningen i 30 minutter. Det uopløselige stof fra-15 filtreres, og til filtratet sættes en mættet vandig natriumchloridopløsning. Opløsningen ekstraheres to gange med tetrahydrofuran. Ekstrakten vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes i vakuum. Remanensen tritureres med diisopropylether, hvorved fås 34,6 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formami-20 dothiazol-4-yl)-2-n-butoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax “ 3240, 3050, 1780, 1730, 1695 og 1660 cm* 1.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 6 ppm = 0,92 (3H, t, J=7Hz), 0,8-2,2 (4H, m), 25 3,67 (2H, d, J-4Hz), 4,16 (2H, t, J=7Hz), 5,23 (IH, d, J=5Hz), 5,46 (2H, s), 5,99 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6,71 (IH, t, J=5Hz), 7,43 (IH, s), 7,76 (2H, d, J=9Hz), 8,30 (2H, d, J-9Hz), 8,58 (IH, s), 9,72 (IH, d, J«8Hz), 12,66 (IH, s).

2) En blanding af 34,5 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4- 30 yl)-2-n-butoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), 345 ml tetrahydrofuran, 14 g 10%'s palladium/kul, 140 ml methanol, 2,5 ml eddikesyre og 50 ml vand underkastes katalytisk reduktion ved at-

DK 163832 B

83 mosfæretryk og ved stuetemperatur i 3 timer. Den resulterende blanding filtreres og vaskes med tetrahydrofuran. Filtratet inddampes i vakuum, og remanensen opløses i en blanding af ethylacetat og vandig natriumbicarbonatopløsning. Det uopløselige stof frafiltreres. Ethy-5 lacetatfasen fraskilles og ekstraheres med en vandig natriumbicarbonatopløsning, den vandige fase og den vandige ekstrakt forenes. Den vandige opløsning vaskes med ethylacetat og diethylether i den nævnte rækkefølge, og opløsningen indstilles til pH-værdi 2,0 med 10%'s saltsyre og omrøres i 30 minutter. Det udfældede stof frafiltreres, 10 vaskes med vand og tørres over magnesiumsulfat, hvorved fås 18,3 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-butoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax 3330, 3040, 1780, 1725, 1695 og 1655 cm" .

15 NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 0,90 (3H, t, J-7Hz), 1,1-1,9 (4H, m), 3,58 (2H, d, J-5Hz), 4,12 (2H, t, J-7Hz), 5,13 (IH, d, J-5Hz), 5,86 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,46 (IH, t, J-4Hz), 7,40 (IH, s), 8,50 (IH, s), 9,63 (IH, d, J«8Hz), 12,57 (IH, bred s).

3) En blanding af 12,7 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-n-butoxyi-20 minoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) , 9,6 ml koncen treret saltsyre, 9,5 ml methanol og 9,5 ml tetrahydrofuran omrøres ved stuetemperatur i 3 timer. Den resulterende opløsning inddampes i vakuum, og remanensen suspenderes i vand. Suspensionen indstilles til pH-værdi 3,5 med natriumbicarbonat under isafkøling og omrøres ved 25 samme temperatur i 30 minutter. Det udfældede stof frafiltreres og tørres over magnesiumsulfat, hvorved fås 10 g af et pulver. Pulveret suspenderes i 300 ml vand, og pH-værdien indstilles til 7,0 med natriumbicarbonat. Opløsningen indstilles til pH-værdi 6,0 med 10%'s saltsyre og søjlchromatograferes på 300 ml ikke-ionisk adsorptions-30 harpiks ("Diaion"® HP-20: varemærke, fremstillet af Mitsubishi Chemical Industries Ltd.) med 10%' vandig isopropylalkoholopløsning.

Eluatet indstilles til pH-værdi 3,5 med 10%'s saltsyre under isafkøling, og det udfældede stof frafiltreres, vaskes med vand og tørres, hvorved fås 7,2 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-butoxyiminoace-35 tamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

DK 163832 B

84 IR-Spektrum (nujol): ^ax - 3320, 1775 og 1660 cnT^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,88 (3H, t, J=7Hz), 1,1-1,9 (4H, m), 3,58 (2H, bred s), 4,05 (2H, t, J-7Hz), 5,08 (IH, d), J-5Hz), 5,80 (IH, dd, J—5Hz, 8Hz), 6,44 (IH, bred s), 7,18 (2H, s), 9,51 (IH, d, 5 J»8Hz).

EKSEMPEL 11.

1) 6,48 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 2,10 g N,N-dimethylformamid, 4,40 g phosphorylchlorid, 110 ml tetrahydrofuran, 8,23 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4- 10 carboxylat, 16 ml acetone og 16 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 10-(1), hvorved fås 12,8 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formami-dothiazol-4-yl)-2-is obutoxy iminoacetamido ] - 3 - cephem- 4 - carb oxy lat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax “ 3240, 3050, 1780, 1720, 1700 og 1655 15 cm"^.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm = 0,92 (6H, d, J-7Hz), 1,7-2,2 (IH, m), 3,67 (2H, bred s), 3,91 (2H, d, J=7Hz), 5,21 (IH, d, J=5Hz), 5,95 (IH, dd, J-5Hz, 9Hz), 6,67 (IH, t, J=4Hz), 7,37 (IH, s), 7,72 (2H, d, J-8Hz), 8,24 (2H, d, J-8Hz), 8,52 (IH, s), 9,68 (IH, d, J=9Hz), 12,58 20 (IH, bred s).

2) 14,2 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-isobutoxy-iminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), 5,7 g 10%'s palladium/kul, 57 ml methanol, 142 ml tetrahydrofuran, 1 ml eddikesyre og 10 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 10-(2), 25 hvorved fås 4,25 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoa-cetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): ^max “ 3260, 1790, 1725 og 1670 cm‘^.

DK 163832 B

85 NMR-Spektrum (d6-DMSO): S ppm - 0,92 (6H, d, J-6Hz), 1,6-2,3 (IH, m), 3,61 (2H, d, J«4Hz), 3,91 (2H, d, J-6Hz), 5,14 (IH, d, J-5Hz), 5,88 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,50 (IH, t, J-5Hz), 7,40 (IH, s), 8,56 (IH, s), 9,64 (IH, d, J-8Hz).

5 3) 4,1 g 7-[2-(2-formamidothiazol~4-yl)-2-isobutoxyiminoacetamido]-3- cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), 3,65 g koncentreret saltsyre og 61,5 ml methanol behandles på analog måde som i eksempel 10-(3), hvorved fås 2,4 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isobutoxyiminoacetami-do]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

10 IR-Spektrum (nujol): = 3330, 1780, 1665, 1630 og 1545 cm-*·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,89 (6H, d, J-7Hz), 1,6-2,2 (IH, m), 3,58 (2H, bred s), 3,84 (2H, d, J«7Hz), 5,10 (IH, d, J-5Hz), 5,82 (IH, dd, J-5Hz, 9Hz), 6,46 (IH, bred s), 6,68 (IH, s), 7,20 (2H, s), 9,53 (IH, d, J-9Hz).

15 EKSEMPEL 12.

1) 0,9 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 266 mg N,N-dimethylformamid, 557 mg phosphorylchlorid, 20 ml tetrahydrofuran, 1,05 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-car-boxylat, 3 ml acetone og 3 ml vand behandles på analog måde som i 20 eksempel 10-(1), hvorved fås 1,69 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): t/max - 3260, 3170, 3070, 1785, 1725, 1700 og 1655 cm'^.

25 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,8-2,2 (10H, m), 3,66 (2H, bred s), 4,10 (IH, m), 5,16 (IH, d, J-5Hz), 5,42 (2H, s), 5,95 (IH, dd, J-5Hz, 9Hz), 6,66 (IH, bred s), 7,37 (IH, s), 7,70 (2H, d, J-8Hz), 8,22 (2H, d, J-8Hz), 8,50 (IH, s), 9,63 (IH, d, J=9Hz), 12,60 (IH, bred s).

DK 163832 B

86 2) 2,0 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-cyclohexyl-oxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), 0,8 g 10%'s palladium/kul, 8 ml methanol, 20 ml tetrahydrofuran, 0,14 ml eddikesyre og 1,4 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 5 10-(2), hvorved fås 0,77 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-cyclo- hexyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) .

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3275, 3070, 1780 og 1675 cm"^.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 5 ppm - 0,8-2,2 (10H, m), 3,62 (2H, bred s), 4,12 (IH, m), 5,13 (IH, d, J-5Hz), 5,87 (IH, dd, J~5Hz, 9Hz), 6,47 10 (IH, bred s), 7,37 (IH, s), 8,50 (IH, s), 9,58 (IH, d, J-9Hz), 12,61 (IH, bred s).

3) 0,72 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-cyclohexyloxyiminoaceta-mido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), 10,8 ml methanol og 0,61 g koncentreret saltsyre behandles på analog måde som i eksempel 15 10-(3), hvorved fås 0,28 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-cyclohexy- loxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) .

IR-Spektrum (nujol): j/max “ 3350, 1775, 1665, 1620 og 1540 cm'*·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,8-2,2 (10H, m), 3,60 (2H, bred s), 4,04 (IH, m), 5,09 (IH, d, J-5Hz), 5,83 (IH, dd, J«5Hz, 9Hz),.6,45 20 (IH, t, J*=4Hz), 6,67 (IH, s), 7,19 (2H, s), 9,48 (IH, d, J=9Hz).

EKSEMPEL 13.

0,84 g phosphorylchlorid sættes ved 5eC dråbevis til en omrørt suspension af 1,0 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-allyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 10 ml tetrahydrofuran og 0,05 ml vand, og der omrøres 25 ved samme temperatur i 20 minutter. Til opløsningen sættes 0,66 g trimethylsilylacetamid, 0,84 g phosphorylchlorid og 0,45 g N,N-dime-thylformamid, og der omrøres ved 5°C i 1 time til fremstilling af en aktiveret syreopløsning. 4,0 g trimethylsilylacetamid sættes ved 40°C til en suspension af 0,88 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre i 10 30 ml tetrahydrofuran, og der omrøres i 30 minutter. Til denne opløsning

DK 163832 B

87 sættes på én gang ved -20°C den ovenfor fremstillede aktiverede syreopløsning, og der omrøres ved 0°C i 1 time. Til den resulterende opløsning sættes ved -20*C 20 ml vand, og opløsningen indstilles til pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning. Til opløs -5 ningen sættes ethylacetat, og den vandige fase fraskilles. Opløs-, ningen vaskes med ethylacetat og diisopropylether i den nævnte rækkefølge, pH-værdien indstilles til 5,0, og der behandles med aktivt kul. pH-Værdien indstilles til 3,0, og det udfældede materiale fra-filtreres, vaskes med vand og tørres over phosphorpentoxid, hvorved 10 fås 0,8 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-allyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax “ 3300, 1780, 1660 og 1630 cm"^.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 3,67 (2H, d, J«4Hz), 4,67 (2H, m), 5,17 (IH, d, J«5Hz), 5,25 (IH, m), 5,50 (IH, m), 5,90 (IH, dd, J«5Hz, 15 8Hz), 6,03 (IH, m), 6,55 (IH, m), 6,80 (IH, s), 7,50 (2H, m), 9,68 (IH, d, J»8Hz).

EKSEMPEL 14.

1,4 g phosphorylchlorid sættes ved en temperatur under 7eC dråbevis til en suspension af 1,7 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyimi-20 noeddikesyre (syn-isomer) i 15 ml tetrahydrofuran, og der omrøres ved samme temperatur i 10 minutter. Til opløsningen sættes 1,4 g phosphorylchlorid, 1,3 g trimethylsilylacetamid og 0,76 g N,N-dimethyl-formamid, og der omrøres i 20 minutter til fremstilling af en aktiveret syreopløsning. 7,8 g trimethylsilylacetamid sættes til en 25 suspension af 1,5 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre i 20 ml tetrahydrofuran, og der omrøres ved 40°C i 30 minutter. Til denne opløsning sættes på én gang ved -20°C den ovenfor vundne aktiverede syreopløsning, og der omrøres i 30 minutter ved 0eC. Til den resulterende opløsning sættes ved -20°C 20 ml vand, og opløsningen indstilles til 30 pH-værdi 7,5 med en vandig natriumbicarbonatopløsning. Den vandige fase fraskilles, vaskes med ethylacetat og diisopropylether i den nævnte rækkefølge og behandles med aktivkul ved pH-værdi 5,5. Opløsningen indstilles til pH-værdi 3,0, og det udfældede stof fra-

DK 163832B

SS

filtreres og tørres over phosphorpentoxid under reduceret tryk, hvorved fås 1,47 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxyiminoace-tamido]-3-cephem-4-carboxylsrye (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): j/max - 3500, 3300, 1780, 1720, 1660 og 1630 5 cm"^-.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm = 3,48 (IH, m), 3,67 (2H, m), 4,80 (2H, d, J«2Hz), 5,17 (IH, d, J=5Hz), 5,88 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6,55 (IH, m), 6,85 (IH, s), 7,33 (2H, m), 9,73 (IH, d, J-8Hz).

EKSEMPEL 15.

10 3 g 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyirainoeddikesyre (syn-isomer), 0,15 g vand, 3,8 g phosphorylchlorid, 10,7 g trimethylsilylacetamid, 1,0 g N,N-dimethylformamid, 50 ml tetrahydrofuran og 2,0 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre behandles på analog måde som i eksempel 13, hvorved fås 1,1 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-n-hexyloxyiminoaceta-15 mido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): t/mav = 3250, 1760, 1640 og 1600 crn-^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 1,88 (3H, m), 1,1-1,9 (8H, m), 3,60 (2H, m), 4,06 (2H, t, J-6Hz), 5,10 (IH, d, J«5Hz), 5,82 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,46 (IH, m), 6,70 (IH, s), 7,26 (2H, m), 9,56 (IH, d, 20 J«8Hz).

EKSEMPEL 16.

1) 4,14 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoeddikesyre (syn-isomer), 4,5 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat, 1,41 g N,N-dimethylformamid, 2,96 g phosphorylchlorid, 72 ml tetrahy-25 drofuran, 15 ml acetone og 15 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 10-(1), hvorved fås 8,1 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) .

DK 163832 B

89 IR-Spektrum (nujol): ^ax “ 3240, 3050, 1780, 1730 og 1655 cm* NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm- 0,6 - 2,0 (9H, m), 3,66 (2H, s), 4,10 (2H, t, J-6Hz), 5,19 (IH, d, J=5Hz), 5,42 (2H, s), 5,95 (IH, dd, J«5Hz,. 8Hz), 6,16 (IH, bred s), 7,38 (IH, s), 7,72 (2H, d, 5 J«9Hz), 8,26 (2H, d, J-9Hz), 8,54 (IH, s), 9,69 (IH, d, J-8Hz), 12,69 (IH, bred s).

2) 8 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-pentyloxyimino-acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), 3,6 g 10%'s palladium/ kul, 36 ml methanol, 90 ml tetrahydrofuran, 0,63 g eddikesyre og 6,3 10 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 10-(2), hvorved fås 3,4 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max “ 3275, 3075, 1795, 1700, 1660 og 1630 cm* .

15 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,6 - 2,0 (9H, m), 3,60 (2H, d, J-4Hz), 4,12 (2H, t, J-6Hz), 5,14 (IH, d, J-5Hz), 5,87 (IH, dd, J«5Hz, 9Hz), 6,49 (IH, t, J-3Hz), 7,40 (IH, s), 8,53 (IH, s), 9,64 (IH, d, J-9Hz), 12,68 (IH, s).

3) 3,3 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetamido]-3-20 -cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), 2,80 g koncentreret saltsyre, 20 ml tetrahydrofuran og 50 ml methanol behandles på analog måde som i eksempel 10-(3), hvorved fås 2,3 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) .

IR-Spektrum (nujol): »/max·- 3300, 1775, 1650 og 1540 cm'*.

25 NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 0,6 - 2,0 (9H, m), 3,56 (2H, d, J«2Hz), 4,03 (2H, t, J-6Hz), 5,08 (IH, d, J«5Hz), 5,81 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,46 (IH, t, J-4Hz), 6,69 (IH, s), 7,20 (2H, s), 9,15 (IH, d, J-8Hz),

DK 163832 B

90 EKSEMPEL 17.

1) 1,35 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-ethoxycarbonylmethoxyiminoed-dikesyre (syn-isomer), 1,54 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-car-boxylat, 393 mg N,N-dimethylformamid, 825 rag phosphorylchlorid, 21,2 5 ml tetrahydrofuran, 3,9 ml acetone og 3,9 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 10-(1), hvorved fås 2,52 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-ethoxycarbonylmethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3250, 1790, 1730, 1690 og 1640 cm~^-.

10 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm- 1,23 (3H, t, J-7Hz), 3,66 (2H, s), 4,13 (2H, q, J-7Hz), 4,74 (2H, s), 5,22 (IH, d, J=5Hz), 5,42 (2H, s), 5,98 (IH, dd, J-5Hz, 9Hz), 6,49 (IH, bred s), 7,43 (IH, s), 7,71 (2H, d, J*9Hz), 8,23 (2H, d, J«9Hz), 8,52 (IH, s), 9,68 (IH, d, J=9Hz), 12,66 (IH, s).

15 2) 2,52 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-ethoxycarbo- nylmethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), 1,3 g 10%'s palladium/kul, 13 ml ethanol, 25 ml tetrahydrofuran, 0,22 ml eddikesyre og 2,2 ml vand behandles på analog måde som i eksempel 10-(2), hvorved fås 0,4 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-ethoxycar-20 bonylmethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3250, 3060, 1780, 1750, 1690 og 1660 cm" NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm *= 1,23 (3H, t, J-7Hz), 3,61 (2H, bred s), 4,15 (2H, q, J-7Hz), 4,73 (2H, s), 5,13 (IH, d, J-5Hz), 5,87 (IH, 25 dd, J«5Hz, 9Hz), 6,48 (IH, bred s), 7,43 (IH, s), 8,50 (IH, s), 9,62 (IH, d, J—9Hz), 12,58 (IH, s).

3) En opløsning af 0,35 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-ethoxy-carbonylmethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) , 0,39 g koncentreret saltsyre, 5,3 ml ethanol og 8 ml tetrahydrofuran 30 omrøres ved stuetemperatur i 4,5 timer. Den resulterende opløsning inddampes i vakuum, og derpå opløses remanensen i en vandig opløsning

DK 163832B

91 af natriumbicarbonat, behandles med aktivt kul og filtreres. Filtratet indstilles til pH-værdi 3,5 med 10%'s saltsyre under isafkøling.

Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med vand og tørres, hvorved fås 0,1 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxycarbonylmet-5 hoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) .

IR-Spektrum (nujol): ymax - 3250, 3050, 1775, 1720, 1660, 1630 og 1550 cm*1.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 1,21 (3H, t, J-7Hz), 3,59 (2H, s), 4,14 (2H, q, J=7Hz), 4,66 (2H, s), 5,10 (IH, d, J-5Hz), 5,83 .(IH, 10 dd, J-5Hz, 8Hz), 6,47 (IH, bred s), 6,78 (IH, s), 7,23 (2H, s), 9,52 (IH, d, J-8Hz).

EKSEMPEL 18.

1) Et Vilsmeier-reagens fremstilles ud fra 0,32 g N,N-dimethylfor-mamid og 0,67 g phosphorylchlorid på sædvanlig måde. Reagenset sus-15 penderes i 10 ml ethylacetat, og derpå tilsættes til den omrørte suspension under isafkøling 1,2 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorethoxyiminoeddikesyre (syn-isomer), og der omrøres ved samme temperatur i 30 minutter. Opløsningen sættes ved -25®C til en opløsning af 0,8 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre og 4,2 g trimet-20 hylsilylacetamid i 20 ml ethylacetat, og der omrøres ved -20 - -10®C i 1 time. Til den resulterende opløsning sættes vand og ethylacetat, og ethylacetatfasen fraskilles. Den vandige fase ekstraheres med ethylacetat. Til de forenede ekstrakter sættes vand, og pH-værdien indstilles til 7,5 med en mættet vandig natriumbicarbonatopløsning, 25 og derpå fraskilles den vandige fase. Til den vandige fase sættes ethylacetat, pH-værdien indstilles til 1,5 med saltsyre, og ethylacetatfasen fraskilles. Den vandige fase ekstraheres atter med ethylacetat. Ekstrakterne forenes, vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningen inddampes i 30 vakuum, og remanensen tritureres derpå med diethylether, og det udfældede materiale frafiltreres og tørres, hvorved fås 1,55 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)- 2- (2,2,2 -trifluorethoxyimino)acetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

DK 163832 B

92 IR-Spektrum (nujol): i/max - 3250, 1790, 1690, 1660, 1630, 1605, 1580 og 1550 cm**·.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm = 3,67 (2H, bred s), 4,78 (2H, q, J-8,5Hz), 5,17 (IH, d, J=5Hz), 5,92 (IH, dd, J-5Hz, 8Hz), 6,53 (IH, 5 t, J=4Hz), 7,52 (IH, s), 8,57 (IH, s), 9,83 (IH, d, J=8Hz), 12,67 (IH, bred s).

2) En suspension af 1,5 g 7-[2-(2-£ormamidothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorethoxyimino)acetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), 1.3 ml koncentreret saltsyre, 10 ml tetrahydrofuran og 30 ml methanol 10 omrøres ved stuetemperatur i 1,5 timer. Methanolet afdampes fra den resulterende opløsning i vakuum, og der tilsættes 30 ml vand til remanensen. Opløsningen indstilles til pH-værdi 7,5 med en mættet vandig natriumbicarbonatopløsning, og det uopløselige stof frafil-treres. Filtratet indstilles til pH-værdi 3 med 10%'s saltsyre. Det 15 udfældede stof frafiltreres og tørres over phosphorpentoxid, hvorved fås 1,1 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorethoxyimino)-acetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 3450, 3300, 1780, 1660, 1625, 1590 og 1550 cm**·.

20 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm =* 3,60 (2H, bred s), 4,70 (2H, q, J-8,5Hz), 5,13 (IH, d, J»5Hz), 5,87 (IH, dd, J=5Hz, 8Hz), 6,52 (IH, t, J-4Hz), 6,87 (IH, s), 9,80 (IH, d, J«8Hz).

EKSEMPEL 19.

1) En opløsning af 3,47 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(2-chlor-25 ethoxyimino)eddikesyre (syn-isomer), 1,1 g N,N-dimethylformamid og 2.3 g phosphorylchlorid i 35 ml ethylacetat og en opløsning af 2,5 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre og 12,7 g bis(trimethylsilyl)acetamid i 25 ml ethylacetat behandles på analog måde som i eksempel 10-(1), hvorved fås 1,85 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxyi- 30 mino)acetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

DK 163832B

93 IR-Spektrum (nujol): i/max - 3250, 3050, 1780, 1695, 1685, 1655 og 1625 cm'*.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm- 3,62 (2H, d, J-4Hz), 3,86 (2H, t, J-6Hz), 4,37 (2H, t, J-6Hz), 5,16 (IH, d, J-5Hz), 5,90 (IH, dd, J-5Hz 5 9Hz), 6,52 (IH, t, J-4Hz), 7,50 (IH, s), 8,53 (IH, s), 9,68 (IH, d, J-9Hz), 12,72 (IH, bred s).

2) 1,8 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxyimino)acet-amido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) , 1,6 g koncentreret saltsyre, 27 ml methanol og 40 ml tetrahydrofuran behandles på analog 10 måde som i eksempel 10-(3), hvorved fås 1,4 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-chlorethoxyimino)acetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3440, 3300, 3070, 1780, 1660, 1625 og 1555 cm'*.

15 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm- 3,60 (2H, s), 3,80 (2H, t, J-6Hz), 4,30 (2H, t, J-6Hz), 5,10 (IH, d, J-5Hz), 5,83 (IH, dd, J«5Hz, 9Hz), 6,47 (IH, s), 6,78 (IH, s), 7,24 (2H, s), 9,58 (IH, d, J-9Hz).

EKSEMPEL 20.

1) En opløsning af 3,2 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(tert.buto-20 xycarbonylmethoxyimino)eddikesyre (syn-isomer), 0,852 g N,N-dimethyl- formamid og 1,79 g phosphorylchlorid i 34 ml ethylacetat og en opløsning af 1,95 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre og 9,9 g bis(tri-methylsilyl)acetamid i 19,5 ml ethylacetat behandles på analog måde som i eksempel 10-(1), hvorved fås 2,9 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-25 yl) -2- (tert.butoxycarbonylmethoxyimino)acetamido] -3-cephem-4-car-boxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3260, .3180, 3060, 1785, 1730, 1690 og 1640 cm'*.

DK 163832 B

94 NMR-Spektrum (dg-DMSO): δ ppm - 1,44 (9H, s), 3,63 (2H, s), 4,62 (2H, s), 5,12 (IH, d, J-5Hz), 5,87 (IH, dd, J-5Hz, 9Hz), 6,48 (IH, bred s), 7,42 (IH, s), 8,50 (IH, s), 9,57 (IH, d, J-9Hz), 12,62 (IH, bred s).

5 2) En blanding af 2,8 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-(tert.bu- toxycarbonylmethoxyimino)acetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), 2,8 ml anisol og 11,2 ml trifluoreddikesyre omrøres ved stuetemperatur i 1 time. Til den resulterende opløsning sættes ethy-lacetat og vand, og der indstilles til pH-værdi 7,0 med natriumbi-10 carbonat. Den vandige fase fraskilles, og ethylacetatfasen ekstra- heres med vand. De vandige ekstrakter forenes, der vaskes med ethyla-cetat og diethylether i den nævnte rækkefølge, og derpå indstilles pH-værdien til 2,0 med 10%'s saltsyre under isafkøling: Det udfældede materiale frafiltreres, vaskes med vand og tørres, hvorved fås 1,43 g 15 7- [2-(2-formamidothiazol-4-yl) -2-carboxymethoxyiminoacetamido] -3- cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): j/max - 3270, 3120, 3070, 1760, 1720, 1690, 1660 og 1620 cnT^-.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): δ ppm - 3,60 (2H, s), 4,63 (2H, s), 5,11 20 (IH, d, J-5Hz), 5,88 (IH, dd, J«5Hz, 9Hz), 6,48 (IH, t, J-4Hz), 7,44 (IH, s), 8,52 (IH, s), 9,59 (IH, d, J-9Hz), 12,64 (IH, bred s).

3) En blanding af 1,35 g 7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer), 3,926 g koncentreret saltsyre, 20 ml methanol, 10 ml vand og 40 ml tetrahy-25 drofuran omrøres ved 30“C i 6 timer. Den resulterende opløsning inddampes i vakuum for at afdampe methanolet, og den vundne vandige opløsning indstilles til pH-værdi 4,2 med 10%'s vandig natriumhydroxidopløsning. Opløsningen indstilles til pH-værdi 3,0 med 10%'s saltsyre. Det udfældede materiale frafiltreres og tørres, hvorved fås 30 0,8 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido]-3- cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3300 (bred), 3200 (bred), 1775, 1670 og 1635 cm-1.

DK 163832 B

95 / NMR-Spektrum (dg-DMSO): 5 ppm ** 3,64 (2H, s), 4,64 (2H, s), 5,13 (IH, d, J-5Hz), 5,86 (IH, dd, J-5Hz, 7Hz), 6,49 (IH, t, J-4Hz), 6,82 (IH, s), 7,33 (2H, s), 9,57 (IH, d, J-9Hz).

EKSEMPEL 21.

5 1) 5 g 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat opløses i en opløsning af 13,8 g trimethylsilylacetamid og 10 ml bis (tr ime thyl -silyl)acetamid i 50 ral tørt ethylacetat, og der omrøres ved 45eC i 1 1/2 time. Til en opløsning af 1,5 g diketen i 7 ml methylenchlorid sættes ved -40eC i løbet af 20 minutter dråbevis en opløsning af 2,88 10 g brom i 7 ml methylenchlorid, og der omrøres ved -30'C i 1 time. Den således vundne opløsning sættes dråbevis under afkøling til -15'C til den ovenfor vundne opløsning af 4-nitrobenzyl-7-amino-3-cephem-4-carboxylat, og der omrøres ved samme temperatur i 30 minutter. Til den resulterende opløsning sættes 50 ml vand, og der ekstraheres med 15 ethylacetat. Ethylacetatekstrakten vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under reduceret tryk, hvorved fås 6,15 g 4-nitrobenzyl-7- [2-(2-bromacetyl)acetamido] -3-cephem-4-carboxylat i form af en olie.

IR-Spektrura (nujol): ^max - 1780, 1740 og 1630 cm"^.

20 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm = 3,62 (2H, bred s), 4,37 (2H, s), 5,08 (IH, d, J=5Hz), 5,40 (2H, s), 5,77 - 6,05 (m), 6,67 (IH, t, J-5Hz), 7,68, 8,04 (4H, m, J=9Hz), 9,07 (IH, d, J«8Hz).

2) 8,40 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-bromacetyl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat suspenderes i en blanding af 150 ml tetrahydrofuran og 30 25 ml vand. Til suspensionen sættes 50 ml eddikesyre og en opløsning af 1,20 g natriumnitrit i 15 ml vand under isafkøling, og der omrøres ved 20 - 22*C i 1,5 timer. Den resulterende opløsning hældes ud i 300 ml isvand og omrøres i 20 minutter. Det udfældede materiale frafil-treres, vaskes med vand, tørres og omkrystalliseres derpå af ethyla-30 cetat, hvorved fås 3,1 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-bromacetyl)-2-hydroxy-iminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), smeltepunkt

DK 163832 B

96 153 - 162°C.

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3250, 1780, 1720, 1705, 1650, 1610, 1600 (skulder), 1550 og 1520 crn"^·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 3,67 (2H, d, J-4Hz), 4,63 (1,5H, s), 5 4,88 (0.5H, s), 5,18 (IH, d, J=5Hz), 5,45 (2H, s), 5,93 (IH, dd, J—5Hz, 8Hz), 6,72 (IH, t, J-4Hz), 7,73 (2H, d, J«9Hz), 8,28 (2H, d, J=9Hz), 9,38 (IH, d, J=8Hz), 11,27 (IH, s), 3) En opløsning af diazomethan i diethylether sattes i små portioner til en opløsning af 0,9 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-bromacetyl)-2-hy- 10 droxyiminoacetamido)-3-cephem-4-carboxylat i 30 ml tetrahydrofuran under isafkøling, indtil reaktionen er afsluttet, og derpå sættes eddikesyre til den resulterende opløsning for at sønderdele overskydende diazomethan. Den resulterende opløsning inddampes under reduceret tryk, hvorved fås 0,9 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-bromacetyl)-15 2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i form af et skum.

4) 0,14 g thiourinstof sættes til en opløsning af 0,8 g 4-nitroben-zyl-7- [2- (2-bromacetyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxy-lat (syn-isomer) i 20 ml ethanol og 5 ml vand, og der omrøres ved 20 stuetemperatur i 3,5 timer. Den resulterende opløsning inddampes under reduceret tryk, og til remanensen sættes vand og ethylacetat. Ethylacetatfasen fraskilles, vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under reduceret tryk, hvorved fås 0,6 g råt produkt. Dette produkt renses ved søjlechromatografi på silicagel (elu-25 ent: benzen og ethylacetat 8:2), hvorved fås 0,21 g 4-nitrobenzyl-7-[2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxy-lat (syn-isomer), smeltepunkt 165 - 170eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): i/max - 3350-3200, 1770, 1720, 1665, 1615 og 1515 cm*^-.

30 NMR-Spektrum (d6-DMS0): 6 ppm - 3,60 (2H, bred s), 3,81 (3H, s), 5,12 (IH, d, J—5Hz), 5,36 (2H, s), 5,83 (IH, dd, J«5Hz, 8Hz), 6,64

DK 163832 B

97 (IH, t, J-4Hz), 6,70 (IH, s), 7,20 (2H, s), 7,65 (2H, d, J-9Hz), 8,19 (2H, d, J-9Hz), 9,60 (IH, d, J-8Hz).

EKSEMPEL 22.

1) En opløsning af 43,0 g brom i 30 ml methylenchlorid sættes dråbe-5 vis ved -30eC i løbet af 35 minutter til en opløsning af 22,6 g diketen i 30 ml methylenchlorid, og der omrøres ved samme temperatur i 30 minutter. Opløsningen sættes dråbevis ved -15eC i løbet af 10 minutter til en omrørt opløsning af 75,1 g 4-nitrobenzy1-7-amino-3-cephem-4-carboxylat og 68,4 g bis(trimethylsilyl)acetamid i 1,5 liter 10 tetrahydrofuran, og opløsningen omrøres ved samme temperatur i 50 minutter. Til den resulterende opløsning sættes 35 ml vand og 35 ml vandig opløsning af 18,6 g natriumnitrit, medens pH-værdien holdes på 2,0, og opløsningen omrøres ved 10 - 15°C i 15 minutter. Opløsningens pH-værdi indstilles til 4,5 med mættet vandig natriumbicarbonatopløs-15 ning, og derpå tilsættes 150 ml vandig opløsning af 17,1 g thiourin-stof, pH-værdien indstilles til 6,0 med mættet vandig natriumbicarbo-natopløsning, og der omrøres i 20 minutter. Den organiske fase fraskilles og inddampes under reduceret tryk. Remanensen opløses i 1,5 liter ethylacetat, og der vaskes med vand tre gange. Opløsningen 20 tørres over magnesiumsulfat, behandles med aktivkul og inddampes under reduceret tryk. Remanensen tritureres med 200 ml diethylether, og det udfældede materiale opsamles ved dekantering, vaskes med 300 ml ethylacetat, en blanding af 500 ml tetrahydrofuran og 1 liter ethylacetat ved 60"C og derpå med 100 ml ethylacetat tre gange og 25 tørres, hvorved fås 55,5 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): vmax - 1760, 1710, 1660 og 1630 cm"^·.

NMR-Spektrum (d6-DMS0): S ppm = 3,60 (2H, d, J=5Hz), 5,12 (IH, d, J=5Hz), 5,39 (2H, s), 5,88 (IH, dd, J«8Hz, 5Hz), 6,63 (IH, s), 6,53 -30 6,77 (IH, m), 7,08 (2H, bred s), 7,68 (2H, d, J=9Hz), 8,22 (2H, d, J-9Hz), 9,47 (IH, d, J-8Hz), 11,33 (IH, s).

DK 163832 B

98 2) Til en opløsning af 0,7 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazo-lyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i 70 ml methanol sættes 0,35 g 102's palladium/kul, og blandingen underkastes katalytisk reduktion ved stuetemperatur og atmosfæretryk i 1,5 5 timer. Den resulterende blanding filtreres, og filtratet inddampes under reduceret tryk. Til remanensen sættes en vandig opløsning af natriumbicarbonat, og det uopløselige stof frafiltreres. Filtratet vaskes med ethylacetat og methylenchlorid i den nævnte rækkefølge, der bobles nitrogengas igennem og derpå lyofiliseres. Remanensen 10 opløses i 30 ml vand, og der indstilles til pH-værdi 3,8 med 10%'s saltsyre. Opløsningen søjlechromatograferes nå 20 ml makroporøs ikke--ionisk adsorptionsharpiks "Diaion"® HP-20 (varemærke, fremstillet af Mitsubishi Chemical Industries Ltd.), der vaskes med vand og elueres derpå med 40%'s vandig acetone. Acetonen afdampes fra eluatet under 15 reduceret tryk, og derpå lyofiliseres remanensen, hvorved fås 0,25 g 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

IR-Spektrum (nujol): i/max = 3350 til 3200, 1770, 1670 og 1630 cm"*·.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 3,60 (2H, bred s), 5,10 (IH, d, 20 J-5Hz), 5,83 (IH, dd, J-=5Hz, 8Hz), 6,47 (IH, t, J=4Hz), 6,67 (IH, s), 9,47 (IH, d, J«8Hz).

EKSEMPEL 23.

1) 0,18 g thiourinstof sættes til en suspension af 1,05 g 4-nitro-benzyl-7-[2-(2-bromacetyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-car-25 boxylat (syn-isomer) i 25 ml ethanol, 25 ml tetrahydrofuran og 5 ml vand, og der omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Den resulterende opløsning inddampes under reduceret tryk og afkøles. Remanensen udkrystalliseres ved at behandle med en blanding af tetrahydrofuran og ethylacetat og isoleres ved filtrering, hvorved fås 0,95 g 4-ni-30 trobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i form af farveløse krystaller, smeltepunkt 172 - 175°C (sønderdeling).

DK 163832B

99 IR-Spektrum (nujol): i/max * 3350 - 3200, 1770, 1725, 1670, 1625 og 1520 cm*^-.

NMR-Spektrum (dg-DMSO): 6 ppm - 3,68 (2H, d, J-4Hz), 5,20 (IH, d, J—5Hz), 5,43 (2H, s), 5,90 (IH, dd, J-8Hz, 5Hz), 6,70 (IH, t, J-4Hz), 5 6,88 (IH, s), 7,70 (2H, d, J~9Hz), 8,23 (2H, d, J-9Hz), 9,68 (IH, d, J-8Hz).

2) En opløsning af diazomethan i diethylether sættes i små portioner til en opløsning af 0,3 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i 30 ml 10 methanol, indtil reaktionen afsluttes. Den resulterende opløsning inddampes under reduceret tryk, og remanensen pulveriseres med diethylether, og ved filtrering og tørring fås 0,26 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2~amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer). Dette produkt er identisk med en autentisk prøve.

15 EKSEMPEL 24.

2,54 g 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre opløses i en opløsning af 11,7 g trimethylsilylacetamid og 15 ml bis(triraethylsilyl)acetamid i 50 ml tørt ethylacetat. En opløsning af 2,43 g brom i 10 ml tørt methylenchlorid sættes dråbevis ved -30eC i løbet af 10 minutter til 20 en opløsning af 1,28 g diketen i 25 ml tørt methylenchlorid, og der omrøres ved samme temperatur i 1,5 timer. Opløsningen sættes ved -15®C i løbet af 10 minutter til den ovenfor fremstillede opløsning indeholdende 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyre, og der omrøres ved -15 -10eC i 1,5 timer. Til den resulterende opløsning sættes 50 ml 25 vand. Ethylacetatfasen fraskilles, og ekstraheres med en vandig natriumbicarbonatopløsning. Den vandige ekstrakt indstilles til pH-værdi 2,0 med 10%'s saltsyre og ekstraheres med ethylacetat. Ethyla-cetatekstrakten vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under reduceret tryk, hvorved fås 2,82 g 7-[2-(2-bromace-30 tyl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre.

IR-Spektrum (nujol): vmax - 1760 og 1660 cm”^·.

DK 163832B

100 NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm» 3,58 (2H, d, J»4Hz), 3,65 (2H, s), 4,40 (2H, s), 5,06 (IH, d, J»5Hz), 5,73 (IH, dd, J«8Hz, 5Hz), 6,50 (IH, t, J=4Hz), 9,08 (IH, d, J=8Hz).

EKSEMPEL 25.

5 Nedenstående forbindelser fremstilles på analog måde som i eksempel 21: 1) 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]- 3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) 2) 4-nitrobenzyl-7- [2- (2-aminothiazol-4-yl) -2-propoxyiminoacetamido] -10 -3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) 3) 4-nitrobenzyl-7- [2- (2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoaceta-mido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

EKSEMPEL 26.

Nedenstående forbindelser fremstilles på analog måde som i eksempel 15 23-(2): 1) 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]- 3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) 2) 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propoxyiminoacetamido]--3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) 20 3) 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacetami- do]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

EKSEMPEL 27.

1) 160 mg natriumborhydrid sættes ved 0°C i løbet af 10 minutter til en suspension af 1 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-25 methoxyiminoacetamido]-3-hydroxy-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer) i 10 ml tetrahydrofuran, 3 ml eddikesyre og 1 ml vand, og der omrøres ved 0 - 3°C i 55 minutter. Der sættes vand til den resulterende

DK 163832 B

101 opløsning, og derpå ekstraheres opløsningen med ethylacetat. Ekstrakten vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, en mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning i den nævnte rækkefølge og tørres over magnesiumsul-5 fat. Opløsningen inddampes under reduceret tryk, og remanensen pulveriseres med diethylether, hvorved fås 0,77 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-4- thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-hydroxycepham-4-carboxylat (syn-isomer), smeltepunkt 172 175eC (sønderdeling).

IR-Spektrum (nujol): umax - 3250, 1775, 1745 og 1660 cm'1.

10 NMR-Spektrum (dg-DMSSO): δ ppm- 2,76 (IH, dd, J-14Hz, 3Hz), 3,17 (IH, dd, J-14Hz, 13Hz), 3,92 (3H, s), 4,03 (IH, m), 4,72 (IH, d, J-6Hz), 5,24 (IH, d, J-4Hz), 5,37 (2H, s), 5,56 (IH, dd, J-9Hz, 4Hz), 6,07 (IH, d, J-4Hz), 7,44 (IH, s), 7,72 (2H, d, J-8Hz), 8,27 (2H, d, J-8Hz), 8,54 (IH, s), 9,67 (IH, d, J=9Hz).

15 2) 0,406 g mesylchlorid sættes dråbevis ved 0 - 5eC i løbet af 2 minutter til en omrørt blanding af 1 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-for-mamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-hydroxycepham-4-car-boxylat (syn-isomer), 10 ml N,N-dimethylformamid og 0,732 g kaliura-carbonat, og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 2,5 timer. Til 20 den resulterende opløsning sættes ethylacetat og vand, og opløsningen ekstraheres med ethylacetat. Den tilbageværende vandige fase ekstraheres atter med ethylacetat. Ethylacetatekstraktopløsningen vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under reduceret tryk. Remanensen søjlechromato-25 graferes på 30 g silicagel, og der elueres med en blanding af chloroform og ethylacetat. Eluatet inddampes under reduceret tryk, hvorved fås 0,12 g 4-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-methoxy-irainoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer), smeltepunkt 224*C (sønderdeling).

DK 163832 B

102 EKSEMPEL 28.

Fermentation:

Forkulturmedium: Trypticase-soja-medium (BBL)

Hovedkulturmedium: 5 Glycerol 3 g

Pepton 1 g

Majsstøbevand 1 g Tørgær 2 g

Natriumcarbonat 0,1 g 10 KH2P04 0,55 g

Na2HP04.12H20 2,15 g (De ovenfor anførte bestanddele opløses i vand i et totalvolumen på 100 ml, og mediet indstilles til pH-værdi 7,2).

En 100 ml's portion af hovedkulturmediet anbringes i en 500 ml's 15 Sakaguchi-kolbe og steriliseres ved 120°C i 20 minutter. Dette medium inokuleres med 1 ml's portioner kulturmedium af hver af de nedenfor angivne mikroorganis, som dyrkes ved 30°C i 18 timer i et forkulturmedium, og derpå dyrkes i rystekultur ved 30°C i 48 timer.

Reaktion: 20 Til 1 ml af dyrkningsmediet ovenfor sættes 0,1 g af det nedenfor angivne substrat suspenderet 1 ml 0,1M phosphatpuffer (pH-værdi 7,2), og derpå rystes blandingen ved 30°C i 48 timer.

Identifikation og forsøg:

Efter reaktionen chromatograferes den ovenfor vundne reaktionsblan-25 ding på en Eastman chromatogram 6065 cellulose ved stuetemperatur for at identificere det dannede produkt. Som fremkaldelsesmiddel anvendes A) den øvre fase af en blanding af n-butanol, ethanol og vand [4:1:5 (v/v/v)] og B) en blanding af n-propanol og vand [7:3 (v/v)]. Rf-Værdien bestemmes ved antimikrobiel aktivitetsindeks mod en sensitiv 30 stamme af Escherichia coli ES 111, og som resultat ses kun én plet

DK 163832 B

103 for hvert produkt I og II på Eastman chromatogram 6065 cellulose, og der er ikke nogen plet for nogen af substraterne I og II. Rf-Værdier-ne er anført i nedenstående tabel.

Fremkaldelsesopløsningsmiddel 5 _

A B

Reakt i onsblanding (produkt I) 0,85 0,90 10 Kontrol (substrat I) 0,39 0,60

Reaktionsblanding (produkt II) 0,90 0,92 15 Kontrol (substrat II) 0,36 0,54

Note:

Substrat I : 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido-4-thiazolyl)-2-met- 20 hoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-iso- mer).

Produkt I 7* (2- (2-Formamido-4-thiazolyl)-2-methoxyirainoacetami- do] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

Substrat II: 4-Nitrobenzyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi- 25 noacetamido]-3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

Produkt II : 7-[2-(2-Araino-4-thiazolyl)-2-raethoxyiminoacetamido]-3- cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

Det i den ovenfor vundne reaktionsblanding fremstillede produkt undersøges ved papirskive-plade-metode under anvendelse af en følsom 30 stamme af Escherichia coli ES 111 (kultur: 37°C, 16 timer), og udbyttet deraf beregnes. Resultaterne er anført nedenfor.

DK 163832 B

104

Mikroorganisme anvendt for Udbytte, %

enzymatisk hydrolyse Produkt I Produkt II

Bacillus subtilis IAM 1069 75 60 5 Bacillus sphaericus IAM 1286 75 20

Bacillus subtilis IAM 1107 75 95

Bacillus subtilis IAM 1214 85 20

Corynebacterium equi IAM 1038 95 95

Micrococcus varians IAM 1314 70 20 10 Flavobacterium rigens IAM 1238 85 90

Salmonella typhimurium IAM 1406 90 20

Staphylococcus epidermidis IAM 1296 90 95

Microbacterium flavura IAM 1642 90 95 15 I de nedenstående eksempler betegnes fremstillingen af farmaceutiske præparater, der som aktiv bestanddel indeholder 7-[2-(2-amino-4-thia-zolyl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer, forbindelse A).

EKSEMPEL 29.

20 11 mg thiourinstof og en opløsning af 30 mg 7-[2-(2-bromacetyl)-2- methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer) i 2 ml ethanol behandles på analog måde som i eksempel 21-(4), hvorved fås 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer). Produktet findes ved tyndtlagschromatografi 25 at være identisk med en autentisk prøve.

EKSEMPEL 30.

1) En opløsning af 7,52 g 2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-n-octyloxyi-minoeddikesyre (syn-isomer), 5,4 g phosphorylchlorid og 2,58 g N,N-dimethylformamid i 16 ml tetrahydrofuran, som fremstilles på analog 30 måde som i eksempel 30-(1), og en opløsning af 4 g 7-amino-3-cephem- 4-carboxylsyre i en blanding af 20 ml acetone, 20 ml vand og 20 ml

Claims

1. T R - C - CONH--S N- R N - OR2 J_ 4 mi o^r~N'YR k hvor R^-, R^, R3 og har den ovenfor angivne betydning, og R3b 15 betegner funktionelt modificeret carboxy, omdannes til en forbindelse med den almene formel Ik DK 163832 B R1 - C “ CONH--Γ^Ύ" r3 N - OR2 LJ- r4 Ik COOH hvor rA, R^, R^ og r4 har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf.

1 S3 R1 - C - CONH--S V1—R N - OR2 si— N R Ic a 0' T R5 hvor R^, R^, R^ og R^ har den ovenfor angivne betydning, og R2 betegner Cj^-8-alkyl, C£.g-alkenyl, C2_6*alkynyl, C3.g-cycloalkyl, 10 halo (C jl . 6 ) alkyl, carboxy(C^.g)alkyl eller C j_ _ g - alkoxycarbonyl -(C^.g)alkyl, eller et salt deraf 3. en forbindelse med den almene formel VI Rb “ c ~ C0NH--^ S V- r3 I! - OR2 0 xjj -N\ji^—R4 VI R5 hvor R*b er haloacetyl, og R2, R^, R^ og R^ har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf omsættes med en thiourinstofforbindel-15 se med den almene formel VII DK 163832B S 6 il R - C - NH2 VII hvor har den ovenfor angivne betydning, til dannelse af en forbindelse med den almene formel Id 5 N-ir—c " C0NH-1-r^s v- R3 - c ’· „ R hvor R^, R^, R^, R^ og R^ har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf, 4. i en forbindelse med den almene formel VIII 10 R6 jn-p"-rtsv; H - OR2 o J- ΗΝρ~Ε VIII R5 hvor R^, R^, R^ og R-* har den ovenfor angivne betydning, og R^a betegner beskyttet amino, eller et salt deraf elimineres beskyttelsesgruppen i den beskyttede aminogruppe R^a til dannelse af en for-15 bindelse med den almene formel le DK 163832 B N_ h2n ——f - cotm—|—-r SV-E3 I 7 X— ly^-R4 N - OR O T Te i5 hvor R2, R3, R4 og R5 har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf, 5 5) en forbindelse med den almene formel Ig R1 - C - CONH—i-f ''i Il 2 1 7 » - °R 0Jr- s Y~° " Ra Ig E5 hvor R^a er _ g - alkansul f ony 1 og R^a, og R5 har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf, behandles med en base til 10 dannelse af en forbindelse med den almene formel Ih R1 - C - CONH--< S > I - OR2 ^r— Ih

0 X hvor R^-, R^ og R^ har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf, 1 6. en fri carboxylforbindelse med den almene formel XII DK 163832 B R1 - C - CONH--<SV- R3 XII n - °*20J- 'yL r* COOH hvor R^-, R3, R^ og A har den ovenfor angivne betydning, eller et reaktivt carboxyderivat eller et salt deraf omsattes med et esterifi-5 ceringsmiddel til dannelse af en forbindelse med den almene formel Ij R1 - C - CONH--S S N— R II 2 N - ORz 4 T · s?— r4 ° v hvor R*-, R^, R3 og R^ har den ovenfor angivne betydning, og R3a betegner farmaceutisk acceptabel esterificeret carboxy, eller et salt 10 deraf, eller 7. en forbindelse med den almene formel XIII

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af syn-7-substituerede 3-cephem-4-carboxylsyrederivater med den almene formel I S 3 R1-C-CONH--{" N— R I " 2 I Tr4 N-Οκ A- 0 u ir DK 163832B hvor rA betegner thiadiazolyl, thiazolyl med den almene formel S- R6-\ j” hvor R^ betegner amino, C·^_2-alkanamido, halo(C^_.g)alkanamido, 5 hvor betegner hydrogen, CjL.g-alkyl, 6-alkenyl, C2_6-alkynyl, C3.g-cyeloalkyl, halo(¾.g)alkyl, carboxy(_ g )alkyl eller alkoxycar-bonyl(G]_.g)alkyl, R^ betegner hydrogen eller methyl, betegner hydrogen eller methyl, og R-5 betegner carboxy eller farmaceutisk acceptabel esterificeret carboxy, forudsat at 10 i) R^ betegner hydrogen, når R^ betegner hydrogen, ii) R^ betegner methyl, når R^ betegner methyl, eller farmaceutisk acceptable salte deraf, kendetegnet ved, at 1. en 7-amino-3-cephem-forbindelse med den almene formel II H2N--|^SvpR3 15 „ 11 0>~T R R5 hvor R^, R^ og R^ har den ovenfor angivne betydning, eller et reaktivt aminoderivat eller et salt deraf omsættes med en carboxylsyre med den almene formel III R1 - C - COOH N-OR1 III 20 hvor R*- og R^ har den ovenfor angivne betydning, et reaktivt derivat ved carboxy eller et salt deraf til dannelse af en forbindelse med den almene formel I, en forbindelse med den almene formel V DK 163832 B R1 - C - CONH-1-fS N— R3 II I Γ 4 H-°H V l5 hvor R*·, R^, R^ og R·5 har den ovenfor angivne betydning, eller et salt deraf, omsættes med et etherificeringsmiddel til dannelse af en 5 forbindelse med den almene formel Ic

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R^ er C^.g-alkyl, eller farmaceutisk acceptable salte deraf.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-[l,2,3-dithiazol-10 4-yl)-2»methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

4. Fremgangsmåde ifølge krav 57, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(l,2,3-thiadiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carbo-xylat (syn-isomer).

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer).

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-20 yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer),

7. Fremgangsmåde ifølge krav i, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre (syn-isomer). DK 163832 B

8. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-propoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

9. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 5 kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-isopropoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre.

10. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-butoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

11. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-isobutoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

12. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-15 yl) -2-pentyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

13. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-hexyloxyiminoacetamido] -3-cephcm-4-carboxylsyre.

14. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 20 kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-octyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

15. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles natrium-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat.

15 IR-Spektrum (nujol): t/TOaY - 3320 (skulder), 1785, 1660, 1630 og 1535 cm'^·. NMR-Spektrum (dg-DMSO): S ppm - 0,6-2,0 (15H, m), 3,62 (2H, bred s), 4,07 (2H, t, J-6Hz), 5,12 (IH, d, J-5Hz), 5,83 (IH, d,d, J-5Hz, 9Hz), 6,48 (IH, bred s), 6,72 (IH, s), 7,22 (2H, s), 9,53 (IH, d, J-9Hz).

16. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) - 2-methoxyiminoacetamido ] - 3 - cephem-4- carboxylsyre-hydrochlor id. DK 163832 B

17. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-y1)-2-hydroxyiminoacetamido] - 3 -cephem-4-carboxylat.

18. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 5 kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-cephem-4-carboxylat.

19. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylat.

20. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-amino thiazol -4-yl) - 2 -propoxy iminoacetamido ] - 3 - cephem-4 - carboxylat.

20 PATENTKRAV

21. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-15 aminothiazol-4-yl) -2-isopropoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat.

22. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles hexanoyloxymethyl-7-[2-(2-amino thiazol-4-yl)-2-me thoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat.

23. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 20 kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre.

24. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl)-2-butoxyiminoace tamido]-3-cephem-4-carboxylsyre.

25. Fremgangsmåde ifølge krav 89, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl)-2-isobutoxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre. DK 163832 B

26. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2-pentyloxyiminoacetamido] - 3-cephem-4-carboxylsyre.

27. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 5 kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacetamido ] - 3-cephem-4-carboxylat (syn-isomer).

28. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-10 formamidothiazol-4-yl) -2-butoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat.

29. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamido thiazol - 4-yl)-2 - isobutoxyiminoacetamido ] - 3 - cephem- 4 - carboxylat.

30. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-formamidothiazol-4-yl)-2-pentyloxyiminoacetamido]-3-cephem-4-carboxy-lat.

31. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 20 kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol- 4-yl) -2-cyclohexyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

32. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2-cyclohexyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

33. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[2-(2-f ormamido thiazol -4 -yl) - 2 - cyclohexyloxy iminoace tamido ] - 3 - cephem-4 -carboxylat. DK 163832B

34. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-arainothiazol-4-yl)-2-allyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

35. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 5 kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-.[2-(2-aminothiazol-4-yl) - 2-allyloxyiminoacetamido ] - 3 -cephem-4- carboxylat.

36. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-propargyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

37. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl)-2 -propargyloxy iminoace tamido ] - 3 - cephem-4 - carboxylsyre.

38. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-15 yl) -2- (2-chlorethoxy)iminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

39. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2- (2-chlorethoxy)iminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

40. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 20 kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorethoxy)iminoacetamido]-3-cephem-4-carboxylsyre.

41. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl)-2-(2,2,2-trifluorethoxy)iminoacetamido]-3-cephem-4-car-25 boxylsyre.

42. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-carboxymethoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre. DK 163832 B

43. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2- (carboxymethoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

44. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 5 kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-ethoxycarbonylmethoxyacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

45. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2 -ethoxycarbonylmethoxyacetamido ] - 3 -cephem-4- carboxylsyre.

46. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2 - tert .butoxycarbonylmethoxyiminoacetamido] - 3 -cephem-4-carboxylsyre.

47. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 15 kendetegnet ved, at der fremstilles p-nitrobenzyl-7-[ 2 - < 2 -formamidothiazol-4-yl) -2-ethoxycarbonylmethoxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylat.

48. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-aminothiazol-4-20 yl) - 2 -me thoxy iminoacetamido ] - 2,3 - dimethyl - 3 - cephem- 4- carboxylsyre.

49. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-trifluoracet-amidothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-2,3-dimethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

50. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fremstilles 7-[2-(2-formamidothia-zol-4-yl) -2-octyloxyiminoacetamido] -3-cephem-4-carboxylsyre.

51. 7-Haloacetyl-substituerede-3-cephem-4-carboxylforbindelser med den almene formel I" DK 163832 B R^-f-CONB—|-γ·3γ-Ε3 r. N-OIT __N /_ 4 R5 hvor R^b er haloacetyl, og R^, R^, R^ og R-5 er angivet som i krav 1, eller et salt deraf, til anvendelse som udgangsmateriale ved fremstilling af 7-substitu-erede-3-cephem-4-carboxylforbindelser med formlen I ifølge krav 1.