ES2200362T3

ES2200362T3 - Composiciones cosmeticas.

Info

Publication number: ES2200362T3
Application number: ES98940171T
Authority: ES
Inventors: Robert George Carson; Krupa Patel; Marieann Carlomusto; Carol Annette Bosko; Sreekumar Pillai
Original assignee: Unilever NV
Current assignee: Unilever NV
Priority date: 1997-07-25
Filing date: 1998-07-07
Publication date: 2004-03-01
Anticipated expiration: 2018-07-07
Also published as: ID23932A; WO1999004747A2; WO1999004747A3; AU730825B2; AU8858498A; TW480178B; CN1162145C; PL338451A1; JP2001510777A; DE69815099D1; BR9810810A; CZ295608B6; CA2299458A1; CN1327380A; KR20010022170A; CA2299458C; CZ2000283A3; RU2203036C2; HK1024417A1; PL193397B1

Abstract

El resveratrol, un componente de una pluralidad de plantas comunes comestibles, en particular los cacahuetes y la uva negra, es un fitoestrógeno. El resveratrol impide la proliferación de células epidérmicas de la piel (los queratinocitos) y estimula su diferenciación. Se ha descubierto que el resveratrol alivia la irritación de la piel que puede ser causada por ácidos alfa-hidroxi. El resveratrol se utiliza para mejorar el aspecto de una piel arrugada, ajada, seca, escamosa, envejecida o dañada por el sol así como para aumentar el espesor, la elasticidad, la flexibilidad, el brillo, los colores y las redondeces de la piel.

Description

Composiciones cosméticas.

Campo de la invención

Composiciones cosméticas que contienen resveratrol, un estrógeno natural derivado de plantas, y procedimientos cosméticos de acondicionamiento de la piel mediante la aplicación de dichas composiciones sobre la piel.

Antecedentes de la invención

La piel humana consta de dos capas principales, la capa gruesa inferior, la dermis, y la capa delgada superior, la epidermis. La dermis es la capa que proporciona la resistencia, elasticidad y grosor a la piel. Con los años, el espesor de la capa dérmica se reduce, y se cree que, en parte, ésta es la causa de la formación de arrugas en la piel que envejece. La capa superior de la piel humana, o la epidermis, que proporciona la elasticidad y las propiedades de barrera de la piel, está compuesta de muchos tipos de células diferentes. Los queratinocitos constituyen el tipo principal de células de la epidermis (75-80% del número total de células en la epidermis humana). Dentro de la epidermis, los queratinocitos se encuentran en cuatro estados de diferenciación distintos. La diferenciación epidérmica es importante para proporcionar la función esencial de la piel, a saber, para proporcionar una barrera protectora frente al entorno exterior y para prevenir la pérdida de agua del cuerpo. La formación de la envoltura córnea constituye la etapa final de la diferenciación de los queratinocitos. La enzima responsable de la formación de envolturas córneas, la transglutaminasa, es un marcador de la diferenciación epidérmica. Por lo tanto, los agentes que aumenten el espesor de la capa dérmica y que aumenten la diferenciación de los queratinocitos en la capa epidérmica deberían ser compuestos ideales para proporcionar a la piel beneficios de acondicionamiento y antienvejecimiento.

Se sabe que los estrógenos y los compuestos sintéticos que actúan como estrógenos incrementan el espesor de la capa dérmica y reducen la formación de arrugas en la piel que envejece. Los cambios en la piel, tales como la sequedad en la piel, la pérdida de elasticidad y de grosor de la piel, que tienen lugar después de la menopausia, se atribuyen a la falta de producción de estrógenos. La terapia con estrógenos evita o ralentiza muchos de los cambios asociados a la piel que envejece (Creidi y col., Effect of a conjugated oestrogen cream (Premarin®) on aging facial skin, Maturitas, 19, págs. 211-23, 1994). Un estrógeno sintético, el dietilestilbestrol, presenta la siguiente estructura:

1

Esta estructura es muy diferente de la estructura del estrógeno natural, el estradiol:

2

En los últimos años, se ha aumentado el uso de los fitoestrógenos (es decir, compuestos naturales que presentan una actividad similar a la del estrógeno y que se encuentran en las plantas) con objetivos terapéuticos. Algunos de los usos descritos son su funcionamiento como agentes hipocolesterolémicos y antiaterogénicos, para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, especialmente en mujeres postmenopáusicas, para el tratamiento de la osteoporosis en el anciano, y como agente cancerígeno, especialmente frente al cáncer de mama, de endometrio y cáncer cervical en mujeres (Knight y col., Phytoestrogens -a short review, Maturitas, 22: 167-75, 1995).

La demanda por parte de los consumidores de productos basados en productos "naturales" está creciendo en los últimos años. Los consumidores perciben la síntesis química como medioambientalmente insegura. Un ingrediente sintetizado químicamente puede contener productos químicos agresivos. Los productos naturales se perciben como puros y suaves, y superiores a los productos sintetizados químicamente. No obstante, el suministro de un beneficio cosmético a partir de fuentes de plantas no es algo trivial. Con objeto de establecer un beneficio real de una fuente "natural", debe identificarse en la planta un activo específico que realmente suministre un beneficio cosmético.

Un fitoestrógeno conocido es el fotoanetol:

3

No se ha descrito el uso tópico o cosmético del fotoanetol.

La presente memoria se basa, al menos en parte, en el descubrimiento de que el resveratrol es un fitoestrógeno, que inhibe la proliferación de queratinocitos, aumenta la diferenciación de queratinocitos, y alivia la irritación o escozor asociados potencialmente con el uso de los alfa-hidroxiácidos.

El resveratrol es un compuesto que se encuentra en una variedad de plantas. Se ha descrito el aislamiento y la caracterización del resveratrol a partir de una variedad de plantas, tales como las raíces de sanguinaria mayor japonesa (Powell y col., Phytochemistry 35, pág. 335, 1994), a partir del vino y las uvas (Goldberg y col.; J. Agric. Food Chem., 43, pág. 1820, 1995 y Cellotti y col., "Resveratrol content of some wines obtained from dried Valpolicella grapes: Recioto y Amarone.", J. chromatogr. A (Holanda) 730: 47-52, 1996), y a partir de cultivos de la planta del cacahuete (Kindl y col., patente de Estados Unidos 5391724). Las uvas rojas y el vino tinto contienen altas cantidades de resveratrol, y se reivindica que este compuesto constituye una de las razones de la salud cardiovascular en los consumidores de vino. Además, se ha demostrado que el resveratrol es un potente agente quimiopreventivo frente al cáncer y un agente anti-inflamatorio. También se ha descrito que el resveratrol induce la diferenciación de las células de la leucemia promielocítica humana (Jang y col., Cancer Chemopreventive activity of resveratrol, a natural product derived from grapes, Science 275: 218-220, 1997). Jang y col. describen el uso del resveratrol como agente anticancerígeno frente a las células de piel de ratón en cultivo tratadas carcinogénicamente.

Se han descrito composiciones cosméticas que contienen extracto de uva. Véase, por ejemplo, el resumen de la solicitud de patente japonesa 06336421 ("JP '421"), que describe el uso de extracto de uva al 0,5% en las composiciones cosméticas. Scafildi y col. (patente de Estados Unidos 5.683.683) y Zabotto y col. (patente de Estados Unidos 5.439.672) describen composiciones cosméticas que contienen aceite de semilla de uva. Grial y col. (patente de Estados Unidos 5.171.577) describen espumas cosméticas que contienen pepitas cosméticas. Ninguna de estas descripciones, excepto JP '421, menciona la cantidad de uva a usar. JP '421 habla de la presencia de 0,5% de extracto de uva. Según el Servicio de Investigación Agrícola del Departamento de Agricultura de Estados Unidos, la concentración de resveratrol en las bayas enteras es de aproximadamente 15 ppm. Por lo tanto, la concentración de resveratrol en extracto de semilla de uva al 0,5% es 0,33 micromolar o 0,0000075% en peso.

La técnica mencionada anteriormente no describe el uso del resveratrol para el cuidado de la piel o para usos cosméticos, no dice que el resveratrol es un fitoestrógeno, o que inhibe la proliferación de queratinocitos, o que promueve la diferenciación de queratinocitos, o que controla la irritación de la piel provocada por los alfa-hidroxiácidos.

Resumen de la invención

La presente memoria incluye una composición para el cuidado de la piel que comprende resveratrol en una cantidad de entre 0,00002 y 10% en peso y un vehículo cosméticamente aceptable.

La presente memoria también incluye un procedimiento para mejorar o prevenir la condición de piel con arrugas, líneas, seca, escamosa, envejecida o dañada por el sol, y para mejorar el grosor, elasticidad, flexibilidad, resplandor, brillo y espesor, que incluye la aplicación de la composición inventiva sobre la piel. La función de las composiciones de la invención es la aplicación tópica sobre la piel de mamíferos que ya está seca, escamosa, con líneas, arrugada, envejecida o dañada por el sol, o bien, las composiciones inventivas pueden aplicarse profilácticamente sobre piel normal y saludable, para prevenir o reducir los cambios que la deterioran.

La presente memoria también incluye procedimientos cosméticos para suministrar actividad estrogénica a la piel, inhibir la proliferación de queratinocitos en la piel humana y aumentar la diferenciación queratinocítica. La invención también incluye un procedimiento cosmético para controlar la irritación de la piel, el escozor o la inflamación que pueden provocar los alfa-hidroxiácidos. A este respecto, la invención también incluye una composición cosmética que contiene resveratrol combinado con un alfa-hidroxiácido.

Descripción detallada de la invención

El resveratrol (también conocido como 5-parahidroxiestirilresorcinol, o 3,4',5-estilbenotriol) es un ingrediente esencial de la composición inventiva. El resveratrol presenta la siguiente estructura:

4

El resveratrol puede obtenerse comercialmente en Sigma.

En general, la cantidad de resveratrol en las composiciones inventivas se encuentra en el intervalo de entre 0,00002 y 10% en peso de la composición. Preferiblemente, con objeto de disminuir costes y maximizar el efecto, la cantidad de resveratrol se encuentra en el intervalo de entre 0,001% y 5%, y preferentemente se encuentra en el intervalo de entre 0,1% y 5%.

La composición de acuerdo con la invención también comprende un vehículo cosméticamente aceptable que actúa como diluyente, dispersante o vehículo para el resveratrol en la composición, de modo que se facilite su distribución cuando la composición se aplica sobre la piel.

Entre los vehículos, distintos al agua o además de ésta, pueden incluirse los emolientes líquidos o sólidos, disolventes, humectantes, espesantes y polvos. Un vehículo no acuoso especialmente preferido es un polidimetil siloxano y/o un polidimetil fenil siloxano. Las siliconas de esta invención pueden ser aquéllas cuya viscosidad se encuentre en cualquier punto entre aproximadamente 10 y 10.000.000 mm^{2}/s (centiestoquios) a 25ºC. Las mezclas de siliconas de baja y alta viscosidad resultan especialmente deseables. Estas siliconas se encuentran disponibles en General Electric Company, bajo las marcas registradas Vicasil, SE y SF, y en Dow Corning Company, como las series 200 y 550. Las cantidades de silicona que pueden usarse en las composiciones de esta invención oscilan en cualquier punto entre 5% y 95%, preferiblemente entre 25% y 90% en peso de la composición.

El vehículo cosméticamente aceptable formará normalmente entre 5% y 99,9%, preferiblemente entre 25% y 80% en peso de la composición, y puede, en ausencia de otros aditivos cosméticos, equilibrar la composición. Preferiblemente, el vehículo está formado por al menos 80% en peso de agua, con respecto al peso del vehículo. Preferiblemente, el agua comprende al menos 50% en peso de la composición inventiva, preferentemente entre 60 y 80% en peso, con respecto al peso de la composición.

En una forma de realización de la invención, las composiciones inventivas también incluyen un alfa-hidroxiácido.

Los hidroxiácidos potencian la proliferación y aumentan la biosíntesis de ceramida en los queratinocitos, aumentan el grosor de la epidermis, y aumentan la descamación de la piel normal, lo que resulta en una piel de aspecto más suave y joven.

El hidroxiácido puede elegirse entre los alfa-hidroxiácidos, beta-hidroxiácidos (por ejemplo, ácido salicílico), otros ácidos hidroxicarboxílicos (por ejemplo, ácido dihidroxicarboxílico, hidroxidicarboxílico, hidroxitricarboxílico) y mezclas de éstos o combinaciones de sus estereoisómeros (DL, D o L).

Las composiciones inventivas preferidas que contienen resveratrol antiirritante incluyen ácido glicólico y/o ácido láctico, ya que se ha averiguado que estos ingredientes presentan un potencial para provocar irritación aunque sean especialmente eficaces en suministrar beneficios cosméticos.

Preferiblemente, el hidroxiácido se elige entre los alfa-hidroxiácidos que presentan la estructura general (1)

(1)M

\uelm{C}{\uelm{\para}{OH}}

HCOOH

en la que M es H, o una cadena hidrocarbonada saturada o insaturada, lineal o ramificada, que contiene entre 1 y 27 átomos de carbono.

Preferentemente, el hidroxiácido se elige entre el ácido láctico, ácido 2-hidroxioctanoico, ácido hidroxiláurico, ácido glicólico, y mezclas de éstos. Si existen estereoisómeros, se prefiere más el isómero L.

Una ventaja especial de las composiciones inventivas es que pueden usarse cantidades mayores de hidroxiácidos sin provocar irritación en la piel. Preferiblemente, la cantidad del componente hidroxiácido presente en la composición de acuerdo con la invención se encuentra entre 0,01 y 20%, preferentemente entre 2 y 12%, y preferentemente entre 4 y 12% en peso.

Debe comprenderse que en función del pH de la composición, el hidroxiácido puede estar presente como una sal, por ejemplo, una sal amónica, potásica o sódica.

Aunque las composiciones inventivas pueden mostrar cualquier pH en el intervalo general de 2,5 a 10, las composiciones inventivas son especialmente útiles cuando se encuentran a un pH ácido (especialmente si contienen un hidroxiácido), preferiblemente 3-5 y preferentemente a un pH de 3-4, ya que tales composiciones son especialmente irritantes.

Materiales opcionales beneficiosos para la piel y aditivos cosméticos

Puede estar presente un material oleoso o un aceite, junto con un emulsionante, para proporcionar tanto una emulsión de agua en aceite como una emulsión de aceite en agua, dependiendo en gran medida del equilibrio hidrófilo-lipófilo (HLB) del emulsionante empleado.

Preferiblemente, las composiciones inventivas incluyen filtros solares. Los filtros solares incluyen aquellos materiales que se usan habitualmente para impedir el paso de la luz ultravioleta. Son compuestos ilustrativos de esta categoría los derivados de PABA, cinamato y salicilato. Por ejemplo, pueden usarse el metoxicinamato de octilo y la 2-hidroxi-4-metoxi benzofenona (también conocida como oxibenzona). El metoxicinamato de octilo y la 2-hidroxi-4-metoxi benzofenona se encuentran disponibles comercialmente con las marcas registradas Parsol MCX y Benzophenone-3, respectivamente. La cantidad exacta de filtro solar empleado en las emulsiones puede variar en función del grado de protección deseado frente a la radiación UV del sol.

Frecuentemente se incorporan emolientes en las composiciones cosméticas de la presente memoria. Los niveles de tales emolientes pueden oscilar entre 0,5% y 50%, preferiblemente entre 5% y 30% en peso de la composición total. Los emolientes pueden clasificarse en categorías químicas generales tales como ésteres, ácidos y alcoholes grasos, polioles e hidrocarburos.

Los ésteres pueden ser mono- o di-ésteres. Entre los ejemplos aceptables de di-ésteres grasos se incluyen adipato de dibutilo, sebacato de dietilo, dimerato de diisopropilo, y succinato de dioctilo. Entre los ésteres grasos de cadena ramificada aceptables se incluyen miristato de 2-etilhexilo, estearato de isopropilo y palmitato de isostearilo. Entre los ésteres ácidos tribásicos aceptables se incluyen el trilinoleato de triisopropilo y el citrato de trilaurilo. Entre los ésteres grasos de cadena lineal aceptables se incluyen palmitato de laurilo, lactato de miristilo, y oleato de estearilo. Entre los ésteres preferidos se incluyen coco-caprilato/caprato (una mezcla de coco-caprato y coco-caprilato), acetato de propilenglicol miristil éter, adipato de diisopropilo y octanoato de cetilo.

Los alcoholes y ácidos grasos adecuados incluyen a aquellos compuestos que poseen entre 10 y 20 átomos de carbono. Se prefiere especialmente a compuestos tales como los alcoholes y ácidos cetílico, miristílico, palmítico y estearílico.

Entre los polioles que pueden servir como emolientes se encuentran los compuestos alquil polihidroxílicos de cadena lineal y ramificada. Por ejemplo, propilenglicol, sorbitol y glicerina son los preferidos. También resultan útiles los polioles poliméricos tales como poli-propilenglicol y polietilenglicol. También se prefiere especialmente al butilén y al propilenglicol como potenciadores de la penetración.

Los hidrocarburos ejemplares que pueden servir como emolientes son aquellos que poseen cadenas de hidrocarburo de cualquier número de átomos de carbono entre 12 y 30. Entre los ejemplos específicos se incluyen aceite mineral, vaselina, escualeno e isoparafinas.

Otra categoría de ingredientes funcionales de las composiciones cosméticas de la presente memoria son los espesantes. Normalmente, un espesante estará presente en cantidades entre 0,1 y 20% en peso, preferiblemente entre aproximadamente 0,5% y 10% en peso de la composición. Los espesantes ejemplares son los materiales de poliacrilato entrecruzados, disponibles con la marca registrada Carbopol, en B. F. Goodrich Company. Pueden emplearse gomas como la goma xántica, carragenano, gelatina, karaya, pectina y algarroba. En determinadas circunstancias, la función espesante puede llevarla a cabo un material que también sirva como silicona o emoliente. Por ejemplo, las gomas de silicona en un exceso de 10 centiestoquios y los ésteres como el estearato de glicerol presentan una doble funcionalidad.

Pueden incorporarse polvos a la composición cosmética de la invención. Entre estos polvos se incluyen la tiza, talco, caolín, almidón, arcilla esmectita, silicato de aluminio y magnesio químicamente modificado, arcilla montmorilonita orgánicamente modificada, silicato de aluminio hidratado, sílice pirógena, octenil succinato de aluminio y almidón y mezclas de éstos.

También pueden incorporarse otros componentes aditivos minoritarios en las composiciones cosméticas. Entre estos ingredientes pueden incluirse los agentes colorantes, opacificantes y perfumes. Las cantidades de estos otros componentes aditivos minoritarios pueden oscilar entre 0,001% y 20% en peso de la composición.

Uso de la composición

La composición de acuerdo con la invención se pretende que sea principalmente un producto de aplicación tópica sobre la piel humana, especialmente como un agente para acondicionar, hidratar y suavizar la piel, y para prevenir o reducir la aparición de piel con líneas, arrugas o envejecida.

En uso, se aplica una pequeña cantidad de la composición, por ejemplo entre 1 y 100 ml, a las áreas expuestas de la piel, desde un recipiente o aplicador adecuado, y si es necesario, se extiende y/o se frota a continuación sobre la piel usando la mano, los dedos, o un dispositivo adecuado.

Forma y envasado del producto

La composición tópica para el tratamiento de la piel de la invención puede formularse como una loción, una crema o un gel. La composición puede envasarse en un recipiente adecuado que se adapte a su viscosidad y al uso al que el consumidor la destina. Por ejemplo, una loción o crema puede envasarse en una botella o un aplicador rolón, o un dispositivo de aerosol impulsado por un propelente, o un envase dotado de una bomba adecuada para manipularse con los dedos. Cuando la composición es una crema, puede almacenarse simplemente en una botella no deformable o envase dosificador, como un tubo o una jarra con tapa. La composición también puede incluirse en cápsulas, tales como las descritas en la patente de Estados Unidos 5.063.507, incorporada como antecedente en la presente memoria. De acuerdo con esto, la invención también proporciona un envase cerrado que contiene una composición cosméticamente aceptable, según se define en la presente memoria.

Los siguientes ejemplos específicos ilustran de manera adicional la invención, pero ésta no se limita a dichos ejemplos. En todos los ejemplos, el resveratrol se ha obtenido en Sigma. Para calcular todos los valores p se usó la prueba de la t de Student.

Ejemplo 1

Este ejemplo muestra que el resveratrol es un fitoestrógeno.

Se usó el siguiente análisis para determinar si el resveratrol presenta actividad estrogénica:

la línea celular ZR75 es una línea celular del carcinoma de mama ductal, originalmente aislada a partir del epitelio mamario maligno de una hembra caucásica de sesenta y tres años de edad (Engel y col., Human breast carcinoma cells in continuous culture: A review, Cancer Res., 38: 4327-4339, 1978). Esta línea celular contiene receptores para el estrógeno, progesterona y otras hormonas esteroideas humanas, pero responde sólo al estrógeno, a través de un incremento en la proliferación. La línea celular contiene receptores específicos del estrógeno de alta afinidad. Por lo tanto, esta línea celular se usa para analizar la actividad estrogénica (Markiewicz y col., In vitro bioassays of non-steroidal phytoestrogens, J. Steroid Biochem. Molec. Biol.., 45: 399-405, 1993).

Metodología usada para determinar la tasa de síntesis de ADN en las células

Se usó la incorporación de ^{3}H-timidina por las células cultivadas como ensayo de proliferación celular (tanto para las células ZR75 como para los queratinocitos). La timidina es uno de los cuatro desoxinucleósidos que constituyen las unidades monoméricas del ADN. Antes de la división celular de una célula somática, el genoma completo de la célula que sufre la división celular se replica. Esto implica una síntesis de ADN a gran escala por parte de la célula, y permite a ambas células hijas recibir copias idénticas del material genético. Cuando se incluye ^{3}H-timidina en el medio de cultivo de las células que están sintentizando el ADN como preparación para la división celular, entonces la timidina marcada se incorpora en el ADN recién sintetizado. El grado de incorporación de ^{3}H-timidina en una población de células es proporcional a la tasa de síntesis de ADN por parte de esta población de células, y por lo tanto constituye una indicación de su proliferación celular.

Se cultivaron células ZR75 (de American Type Culture Collection, Rockville, Maryland) en medio RPMI1640 (de Gibco Life Technologies) con 10% de suero fetal bovino (FBS), 100 unidades de penicilina por ml y 100 unidades de estreptomicina por ml. Todas las incubaciones se llevaron a cabo a 37ºC en CO_{2} al 5%. El medio no contenía rojo de fenol (un débil mimético de estrógeno). Se sembraron las células a una densidad de un millón por 75 cm^{2} de matraz. Para el experimento, las células se sembraron en placas de 24 pocillos a 100.000 células por ml por pocillo.

Después de crecer durante 24 horas, se retiró el medio, se lavaron las células con PBS (suero salino tampón fosfato, fosfato sódico 0,01 M, cloruro sódico 0,138 M, cloruro potásico 0,0027 M, pH 7,4) y se añadió 1 ml de RPMI 1640 sin suero (pero con estreptomicina y penicilina). Se prepararon disoluciones madre de resveratrol en dimetil sulfóxido (DMSO) y estradiol en agua. A continuación, se dosificaron directamente diversas concentraciones de resveratrol y estradiol, según se indica en la Tabla 1, en cada pocillo. Después de otras 24 horas, se añadió un \muCi de [3H-metil] timidina a cada pocillo. El medio se retiró después de 24 horas. Las células se lavaron una vez en PBS, el PBS se retiró completamente y las células se dejaron incubar en hielo con 1 ml por pocillo de TCA al 10% (ácido tricloroacético) durante 30 minutos. Las placas se lavaron 3 veces con TCA al 5% para eliminar todas las trazas de timidina que no se habían incorporado a las células. Se añadieron 500 \mul de hidróxido sódico 0,1 M a cada pocillo, y se incubaron las placas a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos. Se transfirieron 250 \mul de cada muestra a viales de centelleo, y después de añadir 5 ml de fluido de recuento, se llevó a cabo el recuento de los viales durante 5 minutos cada uno, en base al tritio. Los datos para los pocillos cuadruplicados se calcularon como % de incorporación de timidina en el ADN comparado con el de los pocillos control que no recibieron nada de resveratrol o estradiol. Los valores se expresaron como la media de los pocillos cuadruplicados +/- la desviación típica.

Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 1.

TABLA 1

	EXPT 1	EXPT 1	EXPT 2	EXPT 2
Compuesto (\muM)	Síntesis de	valor de p	Síntesis de	valor de p
	ADN (% de control)		ADN (% de control)
Control (agua)	100 \pm 20,4	- -	100 \pm 1,9	- -
Estradiol (1 nM)	220 \pm 11	0,00059	133,4 \pm 29	0,062
10 nM	210 \pm 9,7	0,00079	152 \pm 17,7	0,0011
100 nM	205 \pm 15,6	0,0016	156 \pm 11,7	0,00008
1000 nM	190 \pm 24,5	0,0068	142 \pm 18,3	0,0039
Control (DMSO)	100 \pm 7,0	- -	100 \pm 0,08	- -
Resveratrol (0,5 \muM)	69,7 \pm 10,0		56,8 \pm 4,2
1 \muM	58,8 \pm 9,0		60,5 \pm 3,6
5 \muM			158,8 \pm 4,1	0,000008
10 \muM	207,8 \pm 32,5	0,0026	163 \pm 13,7	0,00029
15 \muM			119 \pm 2,5	0,00009
20 \muM	134,8 \pm 21,4	0,612	68 \pm 3,9
40 \muM	60,8 \pm 26,4
50 \muM	4,1 \pm 1,4

El valor de incorporación de ^{3}H-timidina control para el experimento 1 fue de 71513 cpm, y el control para el experimento 2 fue de 114958 cpm.

Los resultados de la Tabla 1 demuestran que el estradiol, un estrógeno conocido, estimula la proliferación de las células ZR75, tal y como se esperaba. El resveratrol aumentó la proliferación de las células ZR75 a una concentración entre 5 y 20 \muM.

Ejemplo 2

Este ejemplo demuestra que el resveratrol inhibe la proliferación de los queratinocitos.

1. Se cultivaron queratinocitos humanos normales aislados de prepucios de neonatos mediante tratamiento con tripsina, en el medio de Dulbecco con la modificación de Eagle (DME)/5% de suero fetal bovino, en presencia de fibroblastos de ratón 3T3 tratados con mitomicina C, para establecer colonias de queratinocitos en división. Los queratinocitos se cultivaron en las condiciones siguientes hasta su tercer pasaje.

\newpage

2. Para los experimentos, se colocaron queratinocitos de tercer pasaje en un medio de crecimiento de queratinocitos libre de suero (KGM; obtenido en Clonetics, San Diego, California) que contenía calcio 0,09 mM. Se colocaron aproximadamente 30.000 células en cada pocillo de placas de cultivo celular de 6 pocillos y se cultivaron durante 5 días, hasta que las células alcanzaron aproximadamente 40% de confluencia.

3. El medio se cambió por medio nuevo (KBM; obtenido en Clonetics) y se añadió al medio resveratrol en diversas concentraciones, según se indica en la Tabla 2, procedente de una disolución madre de DMSO (dimetilsulfóxido). La concentración final de DMSO en los cultivos fue de 0,1%. Los cultivos de control no recibieron resveratrol, pero se dosificaron con 0,1% de DMSO. Cada concentración se analizó en tres pocillos separados. Después de cuatro horas, se añadió 1 \muCi de ^{3}H-timidina (Amersham Corp., actividad Sp de 40 Ci/mol) a 1 ml de medio en cada pocillo. Las células se incubaron durante 2 horas. La cantidad de ^{3}H-timidina asociada con el ADN celular de los queratinocitos se determinó según se describe a continuación.

4. El medio se aspiró, y los pocillos se lavaron con 1 ml de PBS. A continuación, se precipitaron el ADN y las proteínas de las células en la placa, mediante la adición de 1 ml de TCA al 10% congelado. Se dejaron las placas en hielo durante 30 minutos para completar el procedimiento de precipitación. A continuación se aspiró el TCA y se lavó cada pocillo 4 veces con TCA al 5%. Las células en los pocillos se disolvieron en 0,5 ml de hidróxido sódico 0,1 N. Se transfirieron entonces 200 \mul a un vial de centelleo, para determinar la incorporación de timidina, y se usaron 25 \mul para un ensayo de proteínas usando el reactivo de ensayo de proteínas BCA, según se describe a continuación. Se añadieron 5 ml de fluido de centelleo (Scintiverse) al resto de la disolución en el vial, y se llevó a cabo el recuento de los viales en un contador de centelleo, para determinar la cantidad de radioactividad en cada vial.

BCA (Ácido bicinconínico) - Ensayo de proteínas

Se colocaron 25 \mul de una suspensión de células en una placa de 96 pocillos. También se pipetearon patrones de BSA (albúmina de suero bovino) en Hidróxido Sódico 0,1 N, por triplicado en la misma placa de 96 pocillos. Se añadió el reactivo de ensayo de proteínas BCA penetrante (200 \mul/pocillo) y la placa se inicuo durante 2 horas a temperatura ambiente. Se llevó a cabo la lectura de absorbancia a una longitud de onda de 570 nm en un lector de placa Dynatech MR7000.

La velocidad de síntesis de ADN se calculó entonces como cpm de ^{3}H-timidina incorporada el ADN celular total/\mug de proteína celular para cada pocillo individual. También se calcularon la media y la desviación típica para cada grupo. Estos números se expresaron también como porcentaje de pocillos control. Cada dato se expresa como la media de los pocillos triplicados \pm la desviación típica.

Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 2.

Se consideró que los valores p menores de 0,5 indicaban una relevancia estadística.

TABLA 2

Resveratrol (\muM)	Síntesis de ADN	% de inhibición	Valor de p
	(cpm/\mug de proteína)
Experimento 1
0	29,52 \pm 4,44	0	- -
50	0,62 \pm 0,09	98	0,012
Experimento 2
0	17,17 \pm 1,21	0	- -
0,78	11,57 \pm 1,7	33	0,053
1,56	8,89 \pm 1,12	48	0,016
3,12	5,11 \pm 0,27	70	0,0074
6,25	2,45 \pm 0,56	86	0,0053
12,5	1,07 \pm 0,11	94	0,003

TABLA 2 (continuación)

Resveratrol (\muM)	Síntesis de ADN	% de inhibición	Valor de p
	(cpm/\mug de proteína)
25	0,58 \pm 0,05	97	0,0029
50	0,44 \pm 0,12	97	0,0028

Como puede observarse puede observarse a partir de los resultados de la Tabla 2, concentraciones de resveratrol tan bajas como 1,56 \muM descendieron significativamente la síntesis de ADN de los queratinocitos. El resveratrol
1,56 \muM redujo la proliferación de queratinocitos tanto como en hasta un 50%. En ambos experimentos, resveratrol 50 \muM inhibió la síntesis de ADN por completo.

Ejemplo 3

Se repitió el ejemplo 2 a diversas concentraciones adicionales de resveratrol. Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 3.

TABLA 3 Efecto del resveratrol a bajas concentraciones sobre la recaptación de timidina en queratinocitos

Concentración	Síntesis de ADN	% de inhibición	Valor de p	Estadísticamente significativo
de resveratrol	(cpm/\mug de proteína)			(a un valor de p inferior a 0,5)
0,0 \muM	63,4 \pm 5,2	- - -	- - -	- - -
0,1 \muM	60,4 \pm 4,1	5	0,502	NO
0,2 \muM	56,3 \pm 3,0	12	0,079	NO
0,3 \muM	58,8 \pm 0,4	7	0,254	NO
0,4 \muM	54,2 \pm 1,2	14	0,051	NO
0,6 \muM	59,3 \pm 5,5	6	0,310	NO
0,8 \muM	44,4 \pm 2,6	30	0,00023	SÍ
1,0 \muM	37,7 \pm 4,0	40	<0,0001	SÍ
2,0 \muM	25,7 \pm 2,4	59	<0,0001	SÍ

A partir de los resultados de la Tabla 3 puede apreciarse que el resveratrol no fue efectivo en la reducción de la proliferación de queratinocitos a concentraciones menores de 0,8 \mum (o 0,000018% en peso), incluyendo una concentración muy baja, de 0,33 \mum que sería la máxima concentración presente en el extracto de uva al 0,5% descrita en la patente japonesa JP-6336421.

Ejemplo 4

Este ejemplo demuestra que el resveratrol induce la diferenciación de los queratinocitos:

Metodología para la medida de la transglutaminasa

Durante el procedimiento de diferenciación terminal en la epidermis, se forma una capa de proteínas de 15 nm de espesor, conocida como la envoltura córnea (EC), sobre la superficie interior de la periferia celular. La EC se compone de numerosas proteínas distintas que se han entrecruzado entre sí por la formación de enlaces N-((-glutamil) lisina) isodipéptido, catalizada por la acción de al menos dos transglutaminasas diferentes expresadas en la epidermis. La transglutaminasa (TG-1) se expresa en abundancia en las capas diferenciadas de la epidermis, especialmente en la capa granular, pero no se encuentra en la epidermis basal no diferenciada. Así, TG-1 es un marcados útil de la diferenciación de queratinocitos epidérmica, y los valores de TG-1 altos indicarían un estado de mayor diferenciación. Un ensayo de TG-1 basado en ELISA, usando un anticuerpo de TG-1, se usó para determinar el estado de diferenciación de los queratinocitos cultivados en los ejemplos siguientes.

Se midió el nivel de TG-1 de la siguiente manera: se obtuvieron queratinocitos según se describe en el Ejemplo 2. Para el experimento, se colocaron aproximadamente 30.000 células en cada pocillo de placas de 6 pocillos, y se cultivaron durante cinco días, hasta que las células alcanzaron una confluencia de aproximadamente 20-30%. Se añadieron 2 ml/pocillo de KGM nuevo diariamente, con 2 \mul de resveratrol 2-50 mM en DMSO durante 3 días. Los pocillos de control también recibieron 2 \mul de DMSO. Después de 3 días de tratamiento, las células se lavaron dos veces con PBS y se colocaron en un congelador durante 2 horas. A continuación, las células se descongelaron durante 2 horas. Se cuantificó el contenido de ADN de las células usando el fluoróforo de unión de ADN, bis-benzimidazol (Hoechst 33258) y midiendo la fluorescencia específica del fluoróforo unido al ADN a 450 nm (excitación a 360 nm).

Se determinaron los niveles de TG-1 de las células en los pocillos usando el anticuerpo monoclonal específico de TG-1 (BC1) (primer anticuerpo) (obtenido en Amersham Life Sciences) y usando un fragmento anti-ratón IgG de conejo marcado con peroxidasa (segundo anticuerpo). Las placas se bloquearon con leche desnatada al 5% en TBS (tampón tris salino, tris 0,01 M, cloruro sódico 0,150 M, pH 8,0) durante una hora, seguido de 2 horas de incubación con el primer anticuerpo (1:4.000 diluciones) en 1% de leche/TBS a temperatura ambiente. Tras enjuagar tres veces las placas con 1% de leche/TBS que contenía 0,05% de Tween 20, se incubaron las placas con una dilución 1:4000 del segundo anticuerpo a temperatura ambiente durante dos horas. Las placas se enjuagaron tres veces con 1% de leche/TBS/Tween y tres veces con TBS. El color se desarrolló por incubación con o-fenilén diamina y peróxido de hidrógeno. Se llevó a cabo la lectura de absorbancia a 492 nm en un espectrofotómetro Ultrospec 3000 (Pharmacia Biotech) y se calcularon los valores TG-1 como Abs/fluorescencia del ADN. Se usó la media \pm la desviación típica de al menos 3 pocillos separados para el cálculo y el análisis estadístico de los datos. Los valores se expresaron como absorbancia para TG-1 por unidad arbitraria de fluorescencia de ADN de los pocillos triplicados \pm la desviación típica. Los resultados se expresaron también como % de control.

Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 4.

TABLA 4

Resveratrol (\muM)	Niveles de	% de control	Valor de p
	TG-1/g de ADN
Experimento 1
0 \muM	6,74 \pm 0,79	- - -	- - -
10 \muM	8,49 \pm 1,77	126	0,1195
25 \muM	10,92 \pm 2,29	162	0,0008
50 \muM	22,2 \pm 1,50	329	0,0001
Experimento 2
0 \muM	1,91 \pm 0,03	- - -	- - -
2 \muM	3,42 \pm 0,42	179	< 0,0001
5 \muM	3,51 \pm 0,41	184	< 0,0001
10 \muM	3,61 \pm 0,17	189	< 0,0001
25 \muM	4,69 \pm 0,21	246	< 0,0001
50 \muM	4,65 \pm 0,46	243	< 0,0001

El resveratrol 10 \muM no fue significativamente diferente del control en el Experimento 1, debido a variaciones normales experimentales en los sistemas biológicos, pero todas las otras concentraciones aumentaron significativamente la expresión de la transglutaminasa de los queratinocitos, probando así que el resveratrol aumenta la diferenciación de los queratinocitos. En el Experimento 2, todas las concentraciones de resveratrol de 2 \muM y superiores aumentaron significativamente la diferenciación de los queratinocitos.

Ejemplo 5

Este ejemplo demuestra que el resveratrol alivia la inflamación de la piel que pueden provocar los alfa-hidroxiácidos.

El resveratrol es un conocido inhibidor de la ciclooxigenasa. La inhibición de la ciclooxigenasa reduce la conversión del ácido araquidónico en sustancias proinflamatorias tales como las prostaglandinas, incluyendo PGE2. Aunque se esperaría que la inhibición de ciclooxigenasa redujese la inflamación, no todos los inhibidores de ciclooxigenasa reducen la irritación asociada potencialmente con un ingrediente cosmético como los alfa-hidroxiácidos.

Ejemplo 5A

Procedimiento del análisis de la irritación

Prueba de la exposición a cuatro parches: El objetivo era comparar el nivel de irritación producido por diversos materiales de análisis después de repetidas aplicaciones de parches. Los materiales a analizar se pusieron en contacto con la piel en condiciones oclusivas. La parte superior externa del panelista se designó cono el área de aplicación. Se usó una venda (Scanpor tape) para sujetar los parches (Hill Top Chamber de 25 mm ajustada con un disco de 18 mm de relleno de Webril) en su sitio. Se usaron ambos brazos del panelista. Los parches se aplicaron en un orden aleatorio equilibrado.

Los parches se aplicaron a las 9:00 en punto un lunes por la mañana y se retiraron a las 9:00 en punto de un martes por la mañana (exposición de 24 horas). Se aplicó un nuevo conjunto de parches a las 3:00 en punto del martes por la tarde y se retiró el miércoles por la mañana a las 9:00 en punto (18 horas de exposición). Se aplicó un tercer conjunto de parches a las 3:00 en punto del miércoles por la tarde y se retiró el jueves por la mañana a las 9:00 en punto (18 horas de exposición). Se aplicó un último conjunto de parches a las 3:00 en punto del jueves por la tarde y se retiró el viernes por la mañana a las 9:00 en punto (18 horas de exposición).

Cada vez que se retiraban los parches, los lugares se enjuagaban con agua caliente y se secaban. A continuación, se marcaron los lugares con un rotulador quirúrgico para piel, con objeto de asegurar su localización para la evaluación y las subsiguientes aplicaciones de parches. Los lugares de análisis se evaluaron a las 3:00 p.m. del martes, miércoles, jueves y viernes del estudio, antes de volver a aplicar otros parches.

Se esperaba irritación de la piel, como enrojecimiento moderado, sequedad y/o picor del lugar de análisis. Era posible la hinchazón de los lugares de análisis. Si cualquier lugar de análisis mostraba enrojecimiento moderado o cualquier hinchazón en cualquier evaluación, no se volvía a aplicar otro parche en ese lugar de análisis concreto.

Dos examinadores expertos clasificaron visualmente los lugares de análisis de cada brazo bajo una iluminación consistente. Los lugares de análisis se clasificaron en orden de gravedad. El examinador que clasificó las respuestas en el primer periodo de evaluación siguió clasificando los lugares cada día a lo largo del estudio.

Al clasificar las reacciones, el lugar con la respuesta más grave recibió la puntuación más baja. El lugar con la segunda respuesta más grave recibió la segunda puntuación más baja, etc. No hubo clasificación forzosa. Si dos o más lugares no mostraban respuesta o mostraban la misma respuesta (sin diferencias entre los lugares), se asignaba una media de las puntuaciones. Si un lugar recibía un tratamiento discontinuo, debido al grado de irritación, el lugar mantenía la puntuación recibida en el momento en el que se dosificación se hizo discontinua.

Análisis estadístico

Los resultados de clasificación de los tratamientos con parches se compararon estadísticamente mediante procedimientos estadísticos no paramétricos. Los materiales de análisis que contenían a los antiirritantes se compararon con el control correspondiente que contenía sólo un hidroxiácido, usando la Suma de Rangos de Friedman en cada punto de evaluación, con el panelista actuando como un bloque (es decir, se analizó cada panelista con cada tratamiento de análisis). Se consideró que un valor p inferior a 0,10 indicaba relevancia estadística.

Las composiciones que contenían los ingredientes indicados en la Tabla 5A se analizaron mediante el procedimiento del análisis de la irritación. Se analizaron veinte (20) sujetos. Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 5A. Cuanto mayor es la suma de rangos, menor es la irritación.

Fórmula base

Nombre químico completo o nombre cfta	Nombre registrado y % de compuesto activo	% en peso
Agua desionizada		46,54
EDTA disódico	Sequesterene Na2	0,05
Silicato de magnesio y aluminio	Veegum Ultra	0,6
Metilparabén	Metil Paraben	0,15
Simeticona	DC Antifoam Emulsion	0,01
1,3-butilenglicol	Butylene Glycol 1,3	3,0
Hidroxietilcelulosa	Natrosol 250HHR	0,5
Glicerina, USP	Glycerine USP	2,0
Goma xántica	Keltrol 1000	0,2
Trietanolamina	Triethanolamine 99 (%)	1,2
Ácido esteárico	Pristerene 4911	3,0
Propilparabén NF	Propylparaben NF	0,1
Hidroestearato de glicerilo	Naturechem GMHS	1,5
Alcohol estearílico	Lanette 18DEO	1,5
Palmitato de isoestearilo	Protachem ISP	6,0
Octanoato de alcoholes C_{12-15}	Hetester FAO	3,0
Dimeticona	Silicone Fluid 200 (50cts)	1,0
Colesterol NF	Colesterol NF	0,5
Estearato de sorbitán	Sorbitan Stearate	1,0
Hidroxitolueno butilado	Embanox BHT	0,05
Acetato de tocoferilo	Vitamin E Acetate	0,1
Estearato de PEG-100	MYRJ 59	2,0
Estearoil lactilato sódico	Pationic SSL	0,5
Palmitato de retinilo	Vit. A Palmitate 84%	0,06
Ácido hidroxicaprílico	Hidroxi caprylic acid	0,1
Agua desionizada		c.s. para 99,80
Alfa-bisabolol	Alpha-bisabolol	0,2
pH		7-8

TABLA 5A

Composición	Ingredientes	Suma de rangos (Día 1)	Suma de rangos (Día 4)
1	Fórmula base	65,5	79,5
2	Fórmula base + 8% de ácido glicólico	63	72
3	Composición nº2 + 0,1% de resveratrol	85ª	66
a: significativamente menos irritante que la composición 2.

A partir de los resultados de la Tabla 5A puede apreciarse que el resveratrol (composición 3) redujo significativamente la irritación inducida por la composición nº2 (que contenía 8% de ácido glicólico) en el Día 1, después de la exposición inicial a la composición nº2.

Ejemplo comparativo 5B

Las composiciones que contenían los ingredientes indicados en la Tabla 5B se analizaron mediante el procedimiento del análisis de la irritación descrito en el Ejemplo 5A. Se analizaron veintidós (22) sujetos. Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 5B. Cuanto mayor es la suma de rangos, menor es la irritación.

TABLA 5B

Composición	Ingredientes	Suma de rangos (Día 1)	Suma de rangos (Día 4)
1	Fórmula base	81	90,5
2	Fórmula base + 8% de ácido glicólico	75	73,5
4	Composición nº2 + 5% de ibuprofeno	71,5	65,5

A partir de los resultados de la Tabla 5B puede apreciarse que el ibuprofeno, un conocido ingrediente anti-inflamatorio (composición nº4) no redujo la irritación de la fórmula que contenía 8% de ácido glicólico (composición nº2).

Ejemplo comparativo 5C

Las composiciones que contenían los ingredientes indicados en la Tabla 5C se analizaron mediante el Procedimiento de Análisis de la Irritación descrito en el Ejemplo 5A. Se analizaron diecinueve (19) sujetos. Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 5C. Cuanto mayor es la suma de rangos, menor es la irritación.

TABLA 5C

Composición	Ingredientes	Suma de rangos (Día 1)	Suma de rangos (Día 4)
2	Fórmula base + 8% de ácido glicólico	70	62,5
5	Composición #2 + 1% de indometacina	53,5	52,5

A partir de los resultados de la Tabla 5C puede apreciarse que la indometacina, un conocido ingrediente antiinflamatorio e inhibidor de la ciclooxigenasa (composición nº5) no redujo la irritación de la fórmula que contenía 8% de ácido glicólico (composición nº2).

Los ejemplos 6-11 ilustran composiciones para el cuidado de la piel de acuerdo con la presente memoria. Las composiciones pueden elaborarse en la manera convencional. Son adecuadas para el uso cosmético. En concreto, las composiciones son adecuadas para su aplicación sobre piel con arrugas, líneas, áspera, seca, escamosa, envejecida y/o dañada por la radiación UV, para mejorar el aspecto y la sensación de ésa, así como para su aplicación sobre piel saludable para prevenir o retardar su deterioración. Las composiciones también son especialmente adecuadas para reducir la irritación, escozor o inflamación que pueden estar asociados con el uso de alfa-hidroxiácidos.

Ejemplo 6

Este ejemplo ilustra una emulsión de agua en aceite de alto contenido en fase interna, que incorpora la composición inventiva.

	% en peso
RESVERATROL	0,5
1,3-dimetil-2-imidazolidinona	0,2
Brij 92*	5
Bentona 38	0,5
MgSO_{4}7H_{2}O	0,3
Hidroxitolueno butilado	0,01
Perfume	c.s.
Agua	hasta 100
* Brij 92 es polioxietilén (2) oleil éter

Ejemplo 7

Este ejemplo ilustra una crema de aceite en agua que incorpora la composición inventiva.

	% en peso
RESVERATROL	2
Ácido glicólico	8
Aceite mineral	4
1,3-dimetil-2-imidazolidinona	1
Brij 56*	4
Alfol 16RD*	4
Trietanolamina	0,75
1,3-butanodiol	3
Goma xántica	0,3
Perfume	c.s.
Hidroxitolueno butilado	0,01
Agua	hasta 100
* Brij 56 es alcohol cetílico POE (10) Alfol 16RD es alcohol cetílico

Ejemplo 8

Este ejemplo ilustra una loción alcohólica que incorpora la composición de acuerdo con la invención.

	% en peso
RESVERATROL	5
1,3-dimetil-2-imidazolidinona	0,1
Etanol	40
Perfume	c.s.
Hidroxitolueno butilado	0,01
Agua	hasta 100

Ejemplo 9

Este ejemplo ilustra otra loción alcohólica que incorpora la composición inventiva.

	% en peso
RESVERATROL	10
1,3-dimetil-2-imidazolidinona	0,01
Etanol	40
Antioxidante	0,1
Perfume	c.s.
Agua	hasta 100

Ejemplo 10

Este ejemplo ilustra una crema de protección solar que incorpora la composición de la invención.

	% en peso
RESVERATROL	2
1,3-dimetil-2-imidazolidinona	0,2
Aceite de silicona 200 cts	7,5
Monoestearato de glicerilo	3
Alcohol cetoestearílico	1,6
Alcohol polioxietilén-(20)-cetílico	1,4
Goma xántica	0,5
Parsol 1789	1,5
Metoxicinamato de octilo (PARSOL MCX)	7
Perfume	c.s.

(Continuación)

	% en peso
Color	c.s.
Agua	hasta 100

Ejemplo 11

Este ejemplo ilustra una composición no acuosa para el cuidado de la piel que incorpora la combinación inventiva.

	% en peso
RESVERATROL	5
1,3-dimetil-2-imidazolidinona	1
Goma de silicona SE-30^{1}	10
Fluido de silicona 345^{2}	20
Fluido de silicona 344^{3}	50,26
Escualeno	10
Ácido linoleico	0,01
Colesterol	0,03
Ácido 2-hidroxi-n-octanoico	0,7
Linoleato de vitamina E	0,5
Aceite de hierbas	0,5
Etanol	2

^{1} Un polímero de dimetil silicona que tiene un peso molecular de al menos 50.000 y una viscosidad de al menos 10.000 centiestoquios a 25ºC, disponible en GEC

^{2} Pentámero cíclico de dimetil siloxano, disponible en Dow Corning Corp.

^{3} Tetrámero de dimetil siloxano, disponible en Dow Corning Corp.

Claims

1. Una composición para el cuidado de la piel, que comprende

(a) resveratrol en una cantidad de entre 0,00002 y 10% en peso;

(b) hidroxiácido en una cantidad de entre 0,01% y 20%; y

(c) un vehículo cosméticamente aceptable.

2. Una composición según la reivindicación 1, en la que la cantidad de hidroxiácido se encuentra entre 2% y 12%.

3. Una composición para el cuidado de la piel según las reivindicaciones 1 ó 2, en la que el pH de la composición se encuentra entre 3 y 5.

4. Un procedimiento cosmético para mejorar o prevenir la aparición de arrugas, líneas, sequedad, piel escamosa y envejecida, y mejorar el grosor, elasticidad, flexibilidad, resplandor, brillo y espesor de la piel, que comprende la aplicación sobre la piel de una composición cosmética que comprende resveratrol en una cantidad de entre 0,00002 y 10% en peso de la composición y un vehículo cosméticamente aceptable.