ES2270151T3 - Utilizacion de derivados de pteridina para el tratamiento de la presion intracraneal aumentada. - Google Patents

Abstract

Utilización de un compuesto de fórmula general (Ia) para la producción de una composición farmacéutica pa- ra el tratamiento de la presión intracraneal aumentada, en el que en la fórmula (Ia) R1 y R3 se seleccionan indepen- dientemente de H o OH, R4 es H, CH3, CH2OH, CHO, R2 es H, CH3, CH2OH, CHO o un radical alquilo inferior C1-C9, que pue- de ser de cadena lineal o ramificada, así como (CH(OH)n-Y o (CH(OH))n-(CH2)m-W, donde Y es hidrógeno o un radical alqui- lo inferior, W es hidrógeno o un grupo hidroxilo, y n y m son, independientemente entre sí, de 1 a 20.

Description

Utilización de derivados de pteridina para el tratamiento de la presión intracraneal aumentada.

La presente invención se refiere a la utilización de derivados de pteridina de fórmula general (Ia) o (Ib) para la producción de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de la presión intracraneal aumentada. En particular, estos derivados de pteridina proporcionan un tratamiento para la presión intracraneal aumentada causada por traumatismos craneoencefálicos (TCE) cerrados.

La lesión cerebral traumática (TBI) sigue siendo uno de los principales problemas sanitarios a escala global. En los Estados Unidos la incidencia de traumatismos craneoencefálicos cerrados se estima a la baja en un 200 por 100.000 de la población y la incidencia de traumatismos craneoencefálixos penetrantes se estima en un 12 por 100.000 de la población. Esto significa aproximadamente un número de 500.000 casos nuevos cada año, una proporción considerable de los cuales padece incapacidades importantes a largo plazo.

Desde el punto de vista diagnóstico, se distingue entre TCE abiertos y cerrados. Se considera que un TCE abierto es una lesión en la que las meninges cerebrales (Duramadre) se destruyen de forma mecánica y el encéfalo entra en contacto con el entorno a través de esta abertura. A menudo, un TCE abierto se asocia a la salida de líquido cefalorraquídeo y de fragmentos de tejido encefálico. En un TCE cerrado el cráneo permanece intacto y el daño primario del encéfalo (traumatismo) se caracteriza por lesiones locales como contusiones, hematomas o daño difuso del tejido cerebral. Este daño cerebral primario, junto con una posible depresión cardiovascular o respiratoria, está acompañado de daños secundarios, en particular necrosis, apoptosis, edema (vasogénico o celular), hemorragias secundarias, alteraciones del volumen sanguíneo cerebral, alteraciones de la autorregulación del flujo sanguíneo cerebral e isquemia. Los edemas, la hemorragia y el incremento del volumen sanguíneo cerebral, como procesos que requieren espacio, conducen a un aumento de la presión intracraneal porque, debido a que la bóveda craneal intacta, no puede producirse una compensación de volumen. Este aumento de la presión intracraneal (PIC) puede conducir a su vez a una posible depresión respiratoria aguda y por tanto puede representar en sí mismo un riesgo de muerte. Además, el aumento de la presión intracraneal también puede conducir a otros daños cerebrales secundarios como, por ejemplo, la destrucción de axones y dendritas de células nerviosas debido a fuerzas de cizalla resultantes de la PIC aumentada, y por lo tanto a trastornos permanentes irreversibles de la función cerebral de tipo sensorial, motor o
intelectual.

Hasta el día de hoy, no se conoce ninguna sustancia que se pueda utilizar para disminuir la presión intracraneal o disminuir los efectos perjudiciales asociados a ésta. Las aproximaciones farmacéuticas que se han descrito en conjunción con traumatismos craneoencefálicos se refieren exclusivamente a la prevención de la muerte celular, en particular de la muerte de células neuronales, que tiene lugar como daño cerebral secundario.

Por ejemplo, la Patente Estadounidense 5 409 935 describe la utilización de derivados de xantina para el tratamiento del daño secundario de células nerviosas y de los trastornos funcionales que siguen a los trastornos craneoencefálicos, inhibiendo la formación de radicales libres que dañan las células. De acuerdo con esta Patente Estadounidense, los derivados de xantina descritos allí muestran una inhibición potente de la formación de radicales libres en los macrófagos periféricos y en cultivos de células activadas de microglía del cerebro, es decir exactamente en aquellos dos tipos de células en los que se ha observado una activación en varios procesos neuropatológicos que acompañan a la muerte del tejido cerebral en el transcurso del daño cerebral postraumático.

Las Offenlegungsschriften alemanas 197 40 785 y 197 54 573, así como la solicitud de PCT WO 99/29346, describen la utilización combinada de antagonistas del receptor 5-HT_{1A} y antagonistas de los canales de calcio para tratar los ictus y los traumatismos craneoencefálicos. Mediante esta aproximación, y de acuerdo con estas publicaciones, mejora el efecto protector de los antagonistas del receptor 5-HT_{1A}, como las dihidropiridinas, y de los antagonistas de los canales de calcio, como los 2-aminometil-cromanos que bloquean los canales de calcio tipo L de las células neuronales. La WO 02/069972 describe compuestos triazólicos que también se han descrito como antagonistas específicos del receptor 5-HT_{1A} y de esta forma son útiles en la profilaxis y el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, traumatismos encefálicos e isquemia cerebral.

En las Patentes Estadounidenses 6 469 054 y 6 462 074 se describen arilsulfonamidas y butirolactonas anilladas alfa, beta sustituidas, respectivamente, que deben dirigirse al receptor CB1 para poder ser efectivas para el tratamiento del daño neuronal debido a causas diversas como, por ejemplo, isquemia cerebral, vasoespasmos cerebrales o cambios ateroescleróticos.

Además, la Patente Estadounidense 6 448 270 describe análogos de piperidina 4-sustituidos, incluyendo hidroxipiperidina y tetrahidropiridina que se han descrito como selectivamente activos en forma de antagonistas de los subtipos del receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA). De acuerdo con la Patente Estadounidense 6 448 270 estos compuestos inhiben la acción excitotóxica de los aminoácidos excitantes glutamato y aspartato en el receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA), cuya actividad excitotóxica se considera responsable de la pérdida de neuronas en alteraciones cerebrovasculares debidas a estados como los vasoespasmos cerebrales, la hipoglicemia o el traumatismo encefálico.

La Solicitud de Patente Europea 0 908 182 A1 describe la utilización de ciertos derivados de la tetrahidrobiopterina para el tratamiento de patologías asociadas con la disfunción de la óxido nítrico sintasa (NOS), como la hipertensión o el vasoespasmo cerebral. De acuerdo con esta Solicitud de Patente, estos derivados de tetrahidrobiopterina llevan a cabo su función terapéutica mediante la activación de la función de la NOS.

Sorrenti et al., Nitric Oxide: Biology and Chemistry (2001) 5, 32-38 describe que el N-(4-nitrofenacilo)imidazol y el N-(4-nitrofenacilo)-2-metil-imidazol son inhibidores selectivos de la óxido nítrico sintasa neuronal (nNOS). De acuerdo con Sorrenti et al., dichos inhibidores selectivos de nNOS pueden ser de utilidad en el tratamiento de ictus y otras enfermedades neurodegenerativas.

Aún así, como se menciona anteriormente, no se han realizado esfuerzos para superar el aumento de la presión intracraneal de forma farmacológica. Hasta ahora, este aumento sólo se puede evitar abriendo de forma quirúrgica el cráneo del paciente afectado para obtener un compensación de volumen mediante drenaje quirúrgico de los ventrículos o utilizando agentes osmóticos como manitol o sorbitol. Estos agentes osmóticos se infunden en el torrente sanguíneo donde producen una diferencia entre la presión osmótica del torrente sanguíneo y la región parenquimatosa intracraneal. Este gradiente conduce a una disminución de la presión intracraneal (véase por ejemplo McGraw CP, Alexander E Jr, Howard G. Surg Neurol. 1978 Aug; 10(2):127-30 o McGraw CP, Howard G. Neurosurgery. 1983 Sept; 13(3):269-71).

Aún así, ambos métodos presentan varios inconvenientes. La apertura del cráneo es una intervención quirúrgica grave que obviamente puede poner en peligro la vida de los pacientes, especialmente en casos de TCE cerrados graves, incrementa el riesgo de infecciones bacterianas serias y requiere disposiciones específicas para evitar la sepsis. Además, esta cirugía requiere personal especializado en tratamiento postoperatorio y por lo tanto sólo se lleva a cabo en ciertos centros clínicos y hospitales.

La administración de agentes osmóticos sólo proporciona un efecto temporal relativamente corto, seguido de un nuevo aumento de la presión intracraneal que a veces puede observarse ya 10 o 15 minutos después de la administración. Además, el tratamiento osmótico también se complica por el hecho de que la cantidad de osmolito, por ejemplo manitol, aplicado inicialmente influye de forma marcada en el volumen de las dosis siguientes de osmolito. La administración inicial de más osmolito del estrictamente necesario conduce al requerimiento de dosis superiores para controlar la PIC. Por lo tanto, la dosis inicial debe mantenerse lo más baja posible, lo que limita el tratamiento osmótico. Además, dado que la diferencia entre las presiones osmóticas del cerebro y de la sangre disminuye con cada aplicación, normalmente los agentes osmóticos sólo pueden administrarse dos o tres veces. Finalmente, este tratamiento no quirúrgico conlleva el riesgo de isquemia cerebral y de efectos "rebote" sobre la presión intracraneal. Además, se cree que este tratamiento daña la integridad de la barrera hematoencefálica e induce una inflamación cerebral secundaria debida a la infiltración del parénquima cerebral con constituyentes sanguíneos.

Por lo tanto, existe una necesidad de un fármaco que reduzca la presión intracraneal causada por lesiones cerebrales traumáticas y que alivie los trastornos fisiopatológicos asociados a la presión intracraneal aumentada.

Este problema se resuelve mediante la utilización de un derivado de pteridina de una de las fórmulas generales (Ia) o (Ib). De acuerdo con esto, cabe destacar que a continuación la invención no se describirá solamente en referencia a los compuestos de fórmula (Ia) y (Ib), sino también en referencia a los compuestos de fórmula (Ic) a (Ie), el uso de los cuales no pertenece a la invención como se reivindica. Se sabe que los compuestos de fórmula (Ia) a (Ie) son inhibidores de la óxido nítrico sintasa (NO) (véase, por ejemplo, la Patente Estadounidense 5 902 810; WO 95/31987; WO 95/32203; WO 01/21619; la Patente Estadounidense 5 922 713 o Werner, Ernst R, et al. Biochem J. 1996 Nov; 320:193-196).

A nivel molecular, la presente invención se basa en el hallazgo de que la capacidad de los compuestos de acuerdo con las fórmulas (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos (Ia) o (Ib) pertenece a la invención como se reivindica) de actuar como inhibidores de las óxido nítrico sintasas (NO) puede utilizarse para inhibir la producción de NO preferentemente en áreas con una actividad incrementada de la NO sintasa, en particular aquella de la NO sintasa endotelial (e-NOS), que está hiperactivada en la región del traumatismo.

Mediante este mecanismo se evita el efecto vasodilatador del NO sobre los vasos sanguíneos cerebrales. En el caso de un traumatismo craneoencefálico esto conduce al efecto de que los vasos sanguíneos del cerebro no se dilatan, sino que mantienen un volumen constante o incluso se vuelven a contraer, con lo que una dilatación que ya se hubiese desarrollado se superaría en parte. De acuerdo con esto, se crea un espacio intracraneal adicional que puede ocuparse por el tejido cerebral dañado, lo que se ve acompañado por una reducción (en el aumento) de la presión intracraneal. Para sorpresa de los inventores algunos de los compuestos de pteridina utilizados en la presente invención presentan solamente una tendencia muy baja o inexistente de cruzar la barrera hematoencefálica. Esta propiedad junto con la especificidad para las NO sintasas permite que se administren los compuestos de fórmula (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos (Ia) o (Ib) pertenece a la invención como se reivindica) a dosis altas, lo que hace que sean candidatos idóneos para la utilización en situaciones de emergencia y así disminuir la presión intracraneal elevada de forma crítica que generalmente tiene lugar tras los traumatismos craneoencefálicos o las lesiones cerebrales no traumáticas. Por otro lado, la barrera hematoencefálica generalmente se vuelve permeable como efecto a largo plazo de los traumatismos craneoencefálicos cerrados o las lesiones cerebrales no traumáticas. Esto posibilita que los derivados de pteridina utilizados en la presente invención pasen (penetren a través de) la barrera hematoencefálica y se dirijan hacia las NO sintasas (NOS neuronal, NOS inducible, NOS mitocondrial) expresadas particularmente en el parénquima cerebral. De esta forma, una utilización secundaria de los derivados de pteridina aquí descritos consiste en antagonizar el daño cerebral secundario, como son los procesos inflamatorios, la muerte celular aguda vía necrosis, la muerte celular vía necrosis y apoptosis y la formación de edema (véase la Fig. 1).

Los compuestos descritos en la presente invención son por lo tanto útiles en el tratamiento de la presión intracraneal aumentada, en particular una presión intracraneal elevada causada por traumatismos craneoencefálicos cerrados. En particular, los compuestos pueden administrarse en caso de una presión intracraneal aumentada de forma crítica. La utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) para la producción de una composición farmacéutica para el tratamiento de la presión intracraneal aumentada causada por lesiones cerebrales no traumáticas, por ejemplo por ictus o lesiones frías, también se contempla en la presente invención. La utilización de compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) para el tratamiento de la isquemia secundaria también se describe aquí; esta utilización no pertenece a la invención como se reivindica.

También se sabe que la tetrahidrobiopterina es inestable a pH fisiológico y tiende a descomponerse en soluciones oxigenadas. La pérdida de cofactor de tetrahidrobiopterina asociado a enzima conduce a la monomerización y desactivación de la NOS. Aunque el mecanismo exacto mediante el cual la tetrahidrobiopterina estabiliza el complejo dimérico de la NOS no está claro y parece ser específico de isoforma, la tetrahidrobiopterina puede actuar como fijador molecular para evitar la disociación de subunidades de NOS (véase Crane et al., (1998) Science 279: 2121-2126). Aparentemente la tetrahidrobiopterina induce un cambio conformacional importante al unirse al dominio oxigenasa de la NOS. El desacoplamiento de la NO sintasa puede suceder cuando su cofactor tetrahidrobiopterina se reduce o se oxida y se ha demostrado que sucede en el cerebro tras las TBI y fisiopatologías similares como la isquemia cerebral. También es un mecanismo importante en la disfunción endotelial y sus enfermedades relacionadas.

Las conversiones de arginina en N-hidroxi-L-arginina (NHA) y de NHA en L-citrulina y NO dependen ambas de la presencia de tetrahidrobiopterina. En ausencia de suficiente tetrahidrobiopterina, la NOS pasará de sintetizar NO a generar aniones superóxido (Knowles, R.G. y Moncada, S. (1994) Biochem. J. 298: 249-258; Pou, S. et al., (1992) J. Biol. Chem. 267: 24173-24176), y posteriormente conducirá a la reducción de NO y acumulación de oxidante (Beckman, J.S. et al., Methods of Enzymology, Vol. 233, Part C: Oxygen Radicals in Biological Systems. L. Packer (ed.), Academic Press, Inc., San Diego, CA 229-240) lo que causa más desacoplamiento de la NOS. Esta retroalimentación conduce a un aumento súbito de especies reactivas de oxígeno (ROS) citotóxicas, como el superóxido.

El superóxido, el producto principal de la NOS desacoplada, reacciona rápidamente con el NO para formar peroxinitrito, aún más citotóxico y estable, que parece ser el responsable de la mayor parte del daño celular que sucede en las lesiones cerebrales. Esta reacción es aún más rápida que la del anión superóxido con la superóxido dismutasa para formar peróxido de hidrógeno y O_{2}. Cualquier peroxinitrito producido, cuando se protona forma ácido peroxinitroso que generalmente se isomeriza para formar catión hidrógeno y anión nitrato. Además, el ácido peroxinitroso puede escindirse de forma homolítica en un radical libre hidroxilo y en un radical libre dióxido de nitrógeno, o de forma heterolítica en un catión nitronio y un anión hidróxido. Tres de estos productos de escisión (el radical libre hidroxilo, el catión nitronio y los radicales libres de óxido de nitrógeno) se encuentran entre las especies más reactivas y dañinas de los sistemas biológicos.

La formación de anión superóxido catalizada por NOS y su posterior transformación en productos de escisión del ácido peroxinitroso, o su dismutación en peróxido de hidrógeno y radicales libres hidroxilo desempeña un papel central en la disfunción endotelial y la lesión vascular oxidativa descritas en varias enfermedades vasculares.

Además de su capacidad para inhibir la producción de NO mediante las NO sintasas, las pteridinas de fórmula (Ia) a (Ie) (de las que sólo la utilización de los compuestos (Ia) o (Ib) pertenece a la invención como se reivindica) pueden inhibir la producción de especies reactivas de oxígeno citotóxicas como el superóxido de la NO sintasa desacoplada. Las pteridinas de fórmula (Ia) a (Ie) actúan como antagonistas de la tetrahidrobiopterina endógena. Como la tetrahidrobiopterina, tienen la capacidad de estabilizar los homodímeros de NOS, pero, en contraste con el cofactor endógeno, inhiben la producción de NO. Por otro lado, al estabilizar la estructura dimérica de la enzima, las pteridinas también inhiben la separación de la NO sintasa y de esta forma la producción de peroxinitritos citotóxicos. Este doble mecanismo de acción produce efectos beneficiosos de los compuestos tanto a nivel vascular como celular.

De esta forma, los compuestos descritos en la presente invención no son solamente útiles en el tratamiento de la presión intracraneal aumentada, en particular de una presión intracraneal elevada causada por un traumatismo craneoencefálico cerrado. Además, también pueden utilizarse en el tratamiento de otras alteraciones asociadas con un aumento del nivel de especies reactivas de oxígeno citotóxicas generadas por una NO sintasa desacoplada. De acuerdo con esto, en la presente invención también se contempla la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos (Ia) o (Ib) pertenece a la invención como se reivindica) para la preparación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de la presión intracraneal aumentada causada por lesiones cerebrales no traumáticas, por ejemplo por ictus o lesiones frías.

En los compuestos de fórmula (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos (Ia) o (Ib) pertenece a la invención como se reivindica) se aplican las siguientes definiciones, excepto en caso de que se indique lo contrario.

Si hay más de un grupo o sustituyente en los compuestos de las siguientes fórmulas (Ia) a (Ie), todos pueden, independientemente los unos de los otros, ser los indicados y pueden ser iguales o diferentes en cada caso.

Los radicales alquilo de los compuestos utilizados en la presente invención pueden ser de cadena simple o ramificada. Esto también se aplica si están presentes en otros grupos, por ejemplo en grupos alcoxi, alcoxicarbonilo o amino, o si están sustituidos. Los radicales alquilo normalmente contienen de uno a veinte átomos de carbono, preferiblemente de uno a diez átomos de carbono. Los siguientes son ejemplos de grupos alquilo: metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, los isómeros n de éstos radicales, isopropilo, isobutilo, isopentilo, sec-butilo, terc-butilo, neopentilo y 3,3-dimetilbutilo.

Son ejemplos de radicales alquenilo los radicales de hidrocarburo de cadena simple o ramificada que contienen uno o más enlaces dobles. Los radicales alquenilo normalmente contienen de dos a veinte átomos de carbono y uno o dos dobles enlaces, preferiblemente de dos a diez átomos de carbono y un doble enlace.

Son ejemplos de radicales alquinilo los radicales de hidrocarburo de cadena simple o ramificada que contienen uno o más enlaces triples. Los radicales alquinilo normalmente contienen de dos a veinte átomos de carbono y uno o dos triples enlaces, preferiblemente de dos a diez átomos de carbono y un triple enlace.

Son ejemplos de radicales alquenilo el radical vinilo, el radical 2-propenilo (radical alilo), el radical 2-butenilo y el radical 2-metil-2-propenilo.

Son ejemplos de radicales alquinilo el radical etinilo, el radical 2-propinilo (radical propargilo) o el radical 3-butinilo.

Los radicales cicloalquilo son hidrocarburos cíclicos saturados que normalmente contienen de tres a ocho átomos de carbono de anillo, preferiblemente cinco o seis átomos de carbono de anillo. A su vez, los radicales cicloalquilo pueden estar sustituidos.

Los siguientes son ejemplos de radicales: cicloalquilo: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo, y todos ellos pueden estar sustituidos, por ejemplo, con uno o más radicales alquilo-C_{1}-C_{4} idénticos o diferentes, en particular por metilo. El 4-metilciclohexilo y el 2,3-dimetilciclopentilo son ejemplos de dichos radicales cicloalquilo sustituidos.

Los radicales cicloalquenilo son hidrocarburos cíclicos insaturados que normalmente contienen de tres a ocho átomos de carbono de anillo, preferiblemente cinco o seis átomos de carbono de anillo. Los radicales cicloalquenilo preferiblemente tienen un doble enlace en el sistema del anillo. A su vez, los radicales cicloalquenilo pueden estar sustituidos.

Los radicales cicloalquilalquilo son hidrocarburos saturados derivados de un grupo alquilo sustituido con cicloalquilo. El grupo cicloalquilo normalmente tiene de cinco a seis átomos de carbono. Algunos ejemplos de radicales cicloalquilalquilo son: ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclohexiletilo y, en particular, ciclohexilmetilo. A su vez, los radicales cicloalquilalquilo pueden estar sustituidos.

Arilo es un radical aromático carbocíclico o heterocíclico, preferiblemente fenilo, naftilo o heteroarilo. Los radicales arilo pueden estar sustituidos o no estarlo. Los sustituyentes son uno o más radicales orgánicos monovalentes, iguales o diferentes, del conjunto que forman: halógeno, alquilo, fenilo, -OH, -O-alquilo, alquilendioxi, -NR_{8}R_{9},
-NO_{2}, -CO-alquilo-(C_{1}-C_{5}), CF_{3}, -CN, -CONR_{8}R_{9}, -COOH, -CO-O-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -S(O)_{n}-(alquilo-(C_{1}-C_{5}) y SO_{2}-
NR_{8}R_{9}.

Alquilarilo es un radical arilo sustituido con alquilo, preferiblemente alquilarilo-(C_{1}-C_{3}), en particular metilfenilo.

Arilalquilo es un radical alquilo sustituido con arilo, preferiblemente fenilmetilo o 2-feniletilo.

Heteroarilo o un radical aromático heterocíclico es preferiblemente un heterociclo insaturado de 5 a 7 miembros que tiene uno o más heteroátomos del grupo que forman: O, N y S.

Los siguientes son ejemplos de heteroarilos de los que se pueden derivar los radicales que se dan en los compuestos de fórmula (I): pirrol, furano, tiofeno, imidazol, pirazol, 1,2,3-triazol, 1,2,4-triazol, 1,3-oxazol, 1,2-oxazol, 1,3-tiazol, 1,2-tiazol, tetrazol, piridina, piridazina, pirimidina, piracina, pirano, tiopirano, 1,4-dioxina, 1,2-oxazina, 1,3-oxazina, 1,4-oxazina, 1,2-tiazina, 1,3-tiazina, 1,4-tiazina, 1,2,3-triazina, 1,2,4-triazina, 1,3,5-triazina, 1,2,4,5-tetrazina, azepina, 1,2-diazepina, 1,3-diazepina, 1,4-diazepina, 1,3-oxazepina o 1,3-tiazepina.

Los radicales derivados de los heterociclos pueden unirse a través de cualquier átomo de carbono adecuado. Los heterociclos de nitrógeno que tienen un átomo de hidrógeno (o un sustituyente) en un átomo de nitrógeno del anillo, por ejemplo pirrol, imidazol, etc., también pueden estar unidos a través de un átomo de nitrógeno del anillo, especialmente si el heterociclo de nitrógeno relevante está unido a un átomo de carbono. Un radical tienilo puede estar en forma de, por ejemplo, un radical 2-tienilo o 3-tienilo; un radical furano en forma de 2-furilo o 3-furilo y un radical piridilo en forma de 2-piridilo, 3-piridilo o 4-piridilo.

El halógeno es flúor, cloro, bromo o yodo, preferiblemente flúor o cloro.

En la invención se utilizan derivados de pteridina con un grupo amino monosustituido en las posiciones 2- y 4- del sistema de anillo.

En una de estas realizaciones, la invención se refiere a la utilización de pteridinas de fórmula (Ia)

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para la producción de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de la presión intracraneal aumentada, fórmula (Ia) en la que R_{1} y R_{3} se seleccionan independientemente de H u OH; R_{4} es H, CH_{3}, CH_{2}OH o CHO; R_{2} es H, CH_{3}, CH_{2}OH, CHO o un radical alquilo C_{1}-C_{9} de cadena corta, que puede ser de cadena simple o ramificada, así como (CH(OH))_{n}-Y o (CH(OH))_{n}-(CH_{2})_{m}-W, en los que Y es un hidrógeno o un radical alquilo de cadena corta, W es hidrógeno o un grupo hidroxilo, y n y m son, independientemente uno de otro, de 1 a 20.

Los compuestos de fórmula (Ia) pueden prepararse como se describe en la Patente Estadounidense 5 922 713 o en Werner, Ernst R et al. Biochem J. Nov 1996; 320:193-196. Además, estos compuestos también están comercializados y se pueden adquirir, por ejemplo, en Laboratorios Schircks, Jona, Suiza.

En una realización particularmente preferida de la invención, en los compuestos de fórmula (Ia) R_{1} y R_{4} son hidrógeno, R_{2} es metilo y R_{3} es hidroxilo. Un compuesto preferiblemente utilizado en la presente invención es el isómero 6-(L-eritro), es decir, 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina.

Otra realización de pteridinas sustituidas con 2,4-diamino destinadas a la producción de una composición farmacéutica para el tratamiento de la presión intracraneal aumentada está dirigida a la utilización de compuestos de fórmula (Ib)

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en los que en la fórmula (Ib) R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan, independientemente los unos de los otros, entre H u OH, R_{5} es H, CH_{3}, CH_{2}OH, CHO o un radical alquilo C_{1}-C_{9} de cadena corta, que puede ser de cadena simple o ramificada, así como (CH(OH))_{n}-Y o (CH(OH))_{n}-(CH_{2})_{m}-W, en los que Y es un hidrógeno o un radical alquilo de cadena corta, W es hidrógeno o un grupo hidroxilo, y n y m son, independientemente uno de otro, de 1 a 20.

En un compuesto preferido de fórmula (Ib) R_{5} es metilo, R_{3} es hidrógeno, R_{2} y R_{4} son ambos hidrógeno y R_{1} es o hidrógeno o hidroxilo. Los compuestos de fórmula (Ib) pueden prepararse como se describe en la Patente Europea PE 0 906 913.

Otra realización, que no pertenece a la invención tal como se reivindica, se refiere a la utilización de 4-aminopteridinas de fórmula general (Ic)

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para el tratamiento de la presión intracraneal aumentada o la isquemia secundaria, en la que en la fórmula (Ic)

A es un puente de forma

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R_{1} es hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{20}), alquenilo-(C_{1}-C_{20}), alquinilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilo-(C_{1}-C_{10}), cicloalquilo, cicloalquenilo, preferiblemente cicloalquilo-(C_{3}-C_{8}), cicloalquilalquilo, arilo, alquilarilo, preferiblemente alquilarilo-(C_{1}-C_{3}) o arilalquilo, en el que los radicales orgánicos, preferiblemente los radicales alquilo, pueden estar sustituidos con uno o más sustituyentes, preferiblemente con sustituyentes R_{6},

R_{2} es, independientemente de R_{1}, hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{20}), alquenilo-(C_{1}-C_{20}), alquinilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilo-(C_{1}-C_{10}), cicloalquilo, cicloalquenilo, preferiblemente cicloalquilo-(C_{3}-C_{8}), cicloalquilalquilo, arilo, alquilarilo, preferiblemente alquilarilo-(C_{1}-C_{3}) o arilalquilo, en el que los radicales orgánicos, preferiblemente los radicales alquilo, pueden estar sustituidos con uno o más sustituyentes, preferiblemente con sustituyentes R_{6},

R_{1} y R_{2} pueden formar, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un anillo de 3 a 8 miembros que puede contener opcionalmente 0, 1 o 2 heteroátomos más del grupo que consiste en: N, O y S, y que está opcionalmente sustituido con uno o más radicales, preferiblemente radicales R_{6},

R_{3} es hidrógeno, -CO-alquilo, preferiblemente -CO-alquilo-(C_{1}-C_{7}), -CO-alquilarilo, preferiblemente -CO-alquila-
rilo-(C_{1}-C_{3}) o -CO-arilo,

R_{4} es alquilo, alquenilo, alquinilo, preferiblemente alquilo (C_{1}-C_{10}), cicloalquilo, cicloalquenilo, preferiblemente cicloalquilo-(C_{3}-C_{8}), cicloalquilalquilo, arilo o alquilarilo, preferiblemente alquilarilo-(C_{1}-C_{3}), arilalquilo, -CO-O-alquilo, preferiblemente -CO-O-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -CO-O-arilo, -CO-alquilo, preferiblemente -CO-alquilo-(C_{1}-C_{5}) o
-CO-arilo, en el que los radicales orgánicos, preferiblemente los radicales alquilo, pueden estar sustituidos con uno o más sustituyentes, preferiblemente con sustituyentes R_{7},

R_{5} es, independientemente de R_{3}, hidrógeno, -CO-alquilo, preferiblemente -CO-alquilo-(C_{1}-C_{7}), -CO-alquilarilo, preferiblemente -CO-alquilarilo-(C_{1}-C_{3}) o -CO-arilo,

R_{6} es -F, -OH, -O-alquilo-(C_{1}-C_{10}), -O-fenilo, -O-CO-alquilo-(C_{1}-C_{10}), -O-CO-arilo, NR_{8}R_{9}, oxo, fenilo, -CO-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -CF_{3}, -CN, -CONR_{8}R_{9}, -COOH, -CO-O-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -CO-O-arilo, -S(O)_{n}-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -SO_{2}-NR_{8}R_{9},

R_{7} tiene, independientemente de R_{6}, uno de los significados de R_{6},

R_{8} es hidrógeno o alquilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilo-(C_{1}-C_{5}),

R_{9} es hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilo-(C_{1}-C_{5}) o arilo, preferiblemente fenilo,

R_{10} es hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilo-(C_{1}-C_{5}), alcoxi o arilo,

arilo es preferiblemente fenilo, naftilo o heteroarilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido o no, por ejemplo puede estar sustituido con uno o más sustituyentes idénticos o distintos del grupo formado por: halógeno, alquilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilo-(C_{1}-C_{5}) o fenilo, -OH, -O-alquilo-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente -O-alquilo-(C_{1}-C_{5}), alquilendioxi-(C_{1}-C_{20}), preferiblemente alquilendioxi-(C_{1}-C_{2}), -N_{8}R_{9}, -NO_{2}, -CO-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -CF_{3}, -CN,
-CONR_{8}R_{9}, -COOH, -CO-O-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -S(O)_{n}-alquilo-(C_{1}-C_{5}), -SO_{2}-NR_{8}R_{9},

heteroarilo es un heterociclo insaturado de 5 a 7 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados del grupo: O, N y S.

n es 0, 1 o 2,

en todas sus formas estereoisoméricas y tautoméricas y mezclas de las mismas en todas las proporciones, y sus sales, hidratos y ésteres tolerados fisiológicamente. Los compuestos de fórmula (Ic) pueden sintetizarse como se describe en WO 01/21619 o WO 00/39129. También se pueden obtener derivados de 2,4-diaminopteridina de fórmula (Ic) mediante el proceso descrito en WO 97/21711 utilizando por ejemplo dihidrocloruro de 2,4,5,6-tetraaminopirimidina como material inicial, que se hace reaccionar con un respectivo derivado de oximina de acuerdo con la fórmula (II) de WO 97/21711.

En realizaciones preferidas de fórmula (Ic)

R_{1} es preferiblemente hidrógeno, alquilo-(C_{2}-C_{4}) que puede estar sustituido con uno o más sustituyetes R_{6} o alquilarilo-(C_{1}-C_{2}), y se prefiere particularmente que R_{1} sea arilmetilo.

R_{2} es preferiblemente alquilo-(C_{2}-C_{4}) que puede estar sustituido con uno o más sustituyentes R_{6} o alquilarilo-(C_{1}-C_{2}), y R_{2} se prefiere particularmente que sea arilmetilo.

además, R_{1} y R_{2} forman preferiblemente, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un anillo de 5 a 7 miembros que preferiblemente no contiene ninguno o solamente otro heteroátomo seleccionado de: N, O y S. De los anillos de este tipo se prefieren muy particularmente los siguientes: pirrolidina, piperidina, morfolina, dimetilmorfolina, tiomorfolina o N-alquilpiperazina-(C_{1}-C_{2}), en las que estos anillos también pueden estar sustituidos, por ejemplo con -OH, -O-alquilo-(C_{1}-C_{3}), -NR_{8}R_{9} o -COOH.

R_{3} preferiblemente es hidrógeno, CO-alquilo-(C_{1}-C_{3}) o CO-arilo, y se prefiere muy en especial que R_{3} sea hidrógeno.

R_{4} preferiblemente es arilo, alquilo-(C_{1}-C_{3}) que puede estar sustituido con uno o más sustituyentes R_{7}, o -CO-O-arilo. Los radicales R_{4} particularmente preferidos son arilo y 1,2-dihidroxipropilo.

R_{5} preferiblemente es hidrógeno.

R_{6} preferiblemente es -OH, O-alquilo-(C_{1}-C_{3}), -NR_{8}R_{9} o -COOH.

R_{7} preferiblemente es -OH, O-alquilo-(C_{1}-C_{10}), fenoxi, oxo y en particular se prefiere que sea -OH, deciloxi o fenoxi.

R_{10} preferiblemente es hidrógeno o metilo.

arilo preferiblemente es fenilo, tiofenilo, furilo o piridilo, se prefiere particularmente fenilo y todos ellos pueden estar sustituidos como se describe. Son sustituyentes preferidos: alquilo-(C_{1}-C_{3}), halógeno, alquiloxi-(C_{1}-C_{3}) y alquilendioxi-(C_{1}-C_{2}). El número preferido de sustituyentes sobre los radicales arilo es 0, 1 o 2; los sustituyentes fenilo se encuentran preferiblemente en las posiciones para- o meta-, y en caso de que haya dos sustituyentes, en las posiciones 3 y 4.

n preferiblemente es 0 o 2.

Se prefiere particularmente la utilización de 5,6,7,8-tetrahidropteridinas de fórmula (Ic) en las que R_{1} y R_{2} son ambos metilo, etilo o propilo o bien R_{1} y R_{2} forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un anillo de 5 o 6 miembros que preferiblemente no contiene ningún otro o sólo un heteroátomo seleccionado de N, O y S y en el que R_{4} es bencilo o tiofenilo opcionalmente sustituido con alquilo-(C_{1}-C_{3}), halógeno y alcoxilo-(C_{1}-C_{3}) y alquilendioxi-(C_{1}-C_{2}).

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Otra realización, que no pertenece a la invención como se reivindica, se refiere a la utilización de compuestos de fórmula general (Id)

5

para tratar la presión intracraneal aumentada o la isquemia secundaria, donde en la fórmula (Id)

X es O o NH;

R_{1} es hidrógeno, metilo, alcanoilo-(C_{1}-C_{5}), nicotinoilo o (1-metil-3-piridinio)carbonilo;

R_{2} es hidrógeno o metilo;

R_{3} es hidrógeno, metilo, etilo, bencilo, alcanoilo-(C_{1}-C_{5}), benzoilo sin sustituir, benzoilo sustituido, piridoilo, tienilcarbonilo, uno de los radicales

6

o

7

el radical R_{9}R_{9a}N-CO-, el radical R_{9}R_{9a}N-CS-, fenoxicarbonilo o benciloxicarbonilo;

R_{4} es hidrógeno, alquilo-(C_{2}-C_{5}), fenilo no sustituido, fenilo sustituido o el radical R_{4a}-CH_{2}-;

R_{4a} es hidrógeno, alquilmercapto-(C_{2}-C_{4}), el radical -S(O)_{m}R_{10} (en el que m es el número 1 o 2), el radical -NR_{11}R_{12} o el radical -OR_{13}, o

R_{3} y R_{4} juntos son el grupo -CO-O-, cuyo átomo de carbono del carbonilo está unido a la posición 5 de la molécula de pteridina;

R_{5} es hidrógeno o fenilo;

R_{6} es hidrógeno;

R_{7} es hidrógeno o metilo;

R_{8} es alquilo-(C_{1}-C_{10}) o bencilo;

R_{9} es hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{6}), ciclohexilo, fenilo o benzoilo;

R_{9a} es hidrógeno, metilo o etilo;

R_{10} es metilo;

R_{11} y R_{12}, independientemente uno del otro, son hidrógeno o metilo;

R_{13} es hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{10}), 2-metoxietilo, fenilo, 3-fenilpropilo, 3-ciclohexipropilo, alcanoilo-(C_{1}-C_{5}), hidroxiacetilo, 2-amino-alcanoilo-(C_{2}-C_{6}) que está no sustituido o sustituido en el fragmento alquilo por un radical fenilo, o (alcoxi-(C_{1}-C_{2}))carbonilo;

A es un anión farmacológicamente tolerable y sus formas tautoméricas o sus sales farmacológicamente tolerables.

Son compuestos preferidos de fórmula (Id) los compuestos en los que X= O; R_{1}, R_{2}, R_{5} y R_{6} representan H, R_{3} representa H, metilo o etilo y R_{4} es CH_{2}NH_{2}, CH_{2}NHMe o CH_{2}NMe_{2}.

Otra realización, que no pertenece a la invención como se reivindica, se refiere a la utilización de compuestos de fórmula general (Ie)

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para tratar la presión intracraneal aumentada o la isquemia secundaria, en los que en la fórmula (Ie)

X es O, NH o N-alcanoilo-(C_{1}-C_{5});

R es hidrógeno y

R_{1} es hidrógeno o alcanoilo-(C_{1}-C_{5}) o bien R y R_{1}, junto con el átomo de hidrógeno al que están unidos, forman un grupo dimetilamino-metilenamino;

R_{2} es hidrógeno, metilo, fenilo, hidroxilo, metoxi o amino;

R_{3} es el radical -OR_{4}, -NR_{5}R_{6} o -S(O)mR_{7}, en el que m representa el número 0, 1 o 2;

R_{4} es hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{10}), ciclohexilo, bencilo, fenilo no sustituido o sustituido con cloro o el radical
-COR_{8}, aminocarbonilmetilo no sustituido o sustituido en el nitrógeno con uno o dos radicales alquilo-(C_{1}-C_{4}) idénticos o diferentes, 2-metoxietilo, el radical (2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metilo o el radical -COR_{9};

R_{5} es hidrógeno, metilo, etilo, 2-hidroxietilo, 2-cloroetilo, bencilo, piridilmetilo, feniletilo, piridiletilo o acetilo;

R_{6}, independientemente del significado de R_{5}, tiene los significados indicados para R_{5} o, si R_{5} es hidrógeno o metilo, también es ciclohexilo, 3-(2-etoxietoxi)-propilo, bencilo que contiene uno o dos átomos de cloro o el radical -COR_{10} sobre el anillo de fenilo, alcanoilo-(C_{1}-C_{5}), el radical -COR_{10} o el radical -(CH_{2})_{4}-COR_{10};

R_{7} es alquilo-(C_{1}-C_{4}), bencilo, fenilo no sustituido o sustituido con cloro, el radical -COR_{8} o el radical -CO-O-CO-alquilo-(C_{1}-C_{4}) o naftilo;

R_{8} es hidrógeno, metoxi, amino o R_{10};

R_{9} es alquilo-(C_{1}-C_{4}), hidroximetilo, trifluorometilo, alcoxi-(C_{1}-C_{2}) o R_{11}; R_{10} es el radical

---

\delm{N}{H}

---

\melm{H}{C}{\uelm{\para}{COR _{12} }}

--- (CH_{2})_{2} --- COR_{12};

\vskip1.000000\baselineskip

R_{11} es el radical

---

\melm{\delm{\para}{R _{13} }}{C}{H}

---

\delm{N}{H}

--- R_{14}

R_{12} es hidroxilo o alcoxi-(C_{1}-C_{2});

R_{13} es alquilo-(C_{1}-C_{4}) o bencilo;

R_{14} es hidrógeno o benciloxicarbonilo y sus formas tautoméricas y sales farmacológicamente tolerables.

En realizaciones preferidas se prefiere la utilización de compuestos en los que R es hidrógeno y X es O o NH. Además, se prefiere la utilización de compuestos de fórmula (Ie) con R_{1} o R_{2} como hidrógeno.

Como se menciona anteriormente, la presente invención también se refiere a la utilización de sales correspondientes fisiológica y toxicológicamente aceptables, en particular las sales farmacéuticamente utilizables de los compuestos de acuerdo con la fórmula (Ia) o (Ib). De esta forma, los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) que contienen grupos ácidos pueden estar, por ejemplo, en forma de sales de metales alcalinos, sales de metales alcalinotérreos o sales de amonio y estos grupos pueden utilizarse de acuerdo con la invención. Son ejemplos de este tipo de sales las sales de sodio, de potasio, de calcio, de magnesio o las sales de amonio o de aminas orgánicas como, por ejemplo, etilamina, etanolamina, trietanolamina o aminoácidos. Los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) que contienen uno o más grupos básicos, es decir protonables, pueden utilizarse en forma de sus sales de adición ácida con ácidos orgánicos o inorgánicos fisiológicamente tolerables y utilizarse de acuerdo con la invención, por ejemplo como sales con ácido clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, sulfúrico, nítrico, metanosulfónico, p-toluenosulfónico, naftalendisulfónico, oxálico, acético, tartárico, láctico, salicílico, benzoico, fórmico, propiónico, piválico, dietilacético, malónico, succínico, pimélico, fumárico, maleico, málico, sulfámico, fenilpropiónico, glucónico, ascórbico, isonicotínico, cítrico, adípico, etc.

Si un compuesto de acuerdo con la fórmula (Ia) o (Ib) contiene tanto grupos ácidos como básicos en la molécula, la invención también incluye sales internas o betaínas (zwitteriones) además de las formas salinas descritas.

Las sales pueden obtenerse a partir de compuestos de fórmula I mediante procesos convencionales conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo combinando con ácidos o bases orgánicos o inorgánicos en un disolvente o dispersante, o si no mediante intercambio de aniones o cationes de otras sales. La presente invención además incluye la utilización de todos los solvatos de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib), por ejemplo hidratos o aductos con alcoholes y los derivados de compuestos de fórmula I como por ejemplo ésteres, profármacos y metabolitos activos.

De acuerdo con lo descrito anteriormente, la presente invención se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula (Ia) o (Ib) para la producción de una composición farmacéutica detinada al tratamiento de sujetos que presenten presión intracraneal aumentada, tratamiento que consiste en la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente suficiente de un compuesto de cualquiera de las fórmulas generales (Ia) y (Ib). La aplicación de los compuestos descritos aquí se prefiere cuando la presión intracraneal aumentada está causada por un traumatismo craneoencefálico cerrado.

Otra realización se refiere a un método para tratar a un sujeto que presente un trastorno asociado a un nivel aumentado de especies reactivas de oxígeno citotóxicas generadas por una NO sintasa desacoplada. Por ejemplo, estas especies reactivas de oxígeno citotóxicas incluyen: anión superóxido, peroxinitritos, radicales libres de hidroxilo, radicales libres de dióxido de nitrógeno y catión nitronio. Los trastornos que pueden estar asociados con un nivel aumentado de especies reactivas de oxígeno citotóxicas generadas por una NO sintasa desacoplada incluyen, pero no se limitan a, presión intracraneal elevada causada por traumatismo craneoencefálico cerrado o lesión cerebral no traumática. Estos trastornos también incluyen cualquier trastorno asociado con disfunciones endoteliales. Algunos ejemplos de este tipo de trastornos son: hipercolesterolemia, daño endotelial debido a anoxia mecánica o química, enfermedad arterial periférica y enfermedades cardiovasculares como arteriosclerosis, cardiopatías, enfermedades coronarias, micro y macroangiopatía diabética, insuficiencia cardíaca, ictus, angina de pecho, hipertensión, lesión por isquemia-reperfusión y diabetes resistente a insulina. El término "disfunción endotelial" aquí se utiliza de acuerdo con su significado habitual como se proporciona en, por ejemplo, Widlansky M.E. et al., J. Am. Coll. Cardiol. 2003, 1 Oct; 42(7): 1149-60. De esta forma, disfunción endotelial significa que el endotelio de los vasos ya no puede funcionar de forma normal, por ejemplo debido al estrés oxidativo (la presencia de especies reactivas de oxígeno).

Los compuestos de fórmula general (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) pertenece a la invención tal como se reivindica) ejercen esta función inhibiendo el desacoplamiento de la NO sintasa y por tanto la producción de peroxinitrito, superóxido y especies reactivas de oxígeno relacionadas citotóxicos. En una de estas realizaciones la NO sintasa se encuentra inhibida.

Los sujetos que son tratados en la presente invención son preferiblemente mamíferos como son humanos, monos, gatos, perros, ratones o ratas; siendo preferidos los humanos.

Para disminuir la presión intracraneal (aumentada), los compuestos de fórmula general (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) pertenece a la invención tal como se reivindica) pueden administrarse por vía oral, por ejemplo en forma de píldoras, comprimidos, comprimidos recubiertos de película, grageas, gránulos, cápsulas de gelatina dura y blanda, soluciones acuosas, alcohólicas o aceitosas, jarabes, emulsiones o suspensiones, o por vía rectal, por ejemplo en forma de supositorios. La administración también puede tener lugar de forma parenteral, por ejemplo de forma subcutánea, intramuscular o intravenosa en forma de soluciones de infusión o inyectables. También son formas de administración adecuadas, por ejemplo, las administraciones por vía tópica o percutánea, por ejemplo en forma de ungüentos, tinturas, espráis o sistemas terapéuticos transdérmicos, o la administración por vía inhalatoria en forma de espráis nasales o mezclas de aerosoles o, por ejemplo, microcápsulas, implantes o bastoncillos. Una vía de administración preferida, especialmente en caso de emergencias, es mediante inyección o infusión en una solución acuosa farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones farmacéuticas correspondientes que se utilizan de acuerdo con la invención pueden producirse mediante los procesos estándar para producir productos farmacéuticos.

Con este propósito, uno o más componentes de fórmula (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) pertenece a la invención tal como se reivindica), o sus sales, ésteres o hidratos fisiológicamente tolerables, se juntan con uno o más vehículos farmacéuticos, aditivos o excipientes sólidos o líquidos y, si se desea, en combinación con otros principios activos farmacéuticos con actividad terapéutica o profiláctica, para dar una forma de administración o de dosificación adecuada, que se podrá utilizar como fármaco en medicina humana o veterinaria. Los productos farmacéuticos contienen una dosis efectiva terapéutica o profiláctica de los compuestos de fórmula (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) pertenece a la invención tal como se reivindica) o de sus sales, ésteres o hidratos fisiológicamente tolerados, que normalmente oscila entre el 0,5 y el 90% del peso del producto farmacéutico.

Para producir, por ejemplo, píldoras, comprimidos, grageas y cápsulas de gelatina dura es posible usar lactosa, almidón (por ejemplo almidón de maíz o derivados), talco, ácido esteárico o sales del mismo etc. Son ejemplos de excipientes para cápsulas de gelatina blanda y supositorios: lípidos, ceras, polioles semisólidos o líquidos, aceites naturales o hidrogenados, etc. Algunos ejemplos de excipientes adecuados para producir soluciones, por ejemplo, soluciones inyectables o emulsiones o jarabes son: agua, suero salino fisiológico, alcoholes como el etanol, glicerol, polioles, sacarosa, azúcar invertido, glucosa, manitol, ciclodextrina, aceites vegetales, etc. Los compuestos de fórmula (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) pertenece a la invención tal como se reivindica), y sus sales, ésteres o hidratos farmacéuticamente tolerados, también pueden liofilizarse, y los liofilizados resultantes pueden utilizarse junto con una solución de reconstituciónpara obtener, por ejemplo, productos para inyección o infusión. Son ejemplos de excipientes adecuados para las microcápsulas, implantes y bastoncillos los copolímeros de ácido glicólico o de ácido láctico.

Los productos farmacéuticos, además de los principios activos y vehículos, también pueden contener aditivos convencionales, por ejemplo, disgregantes, aglutinantes, lubricantes, agentes humectantes, estabilizantes, emulsificantes, dispersantes, conservantes, edulcorantes, colorantes, aromatizantes, espesantes, diluyentes, sustancias tamponantes, también solventes o solubilizantes o medios para obtener un efecto depot, sales para alterar la presión osmótica, agentes recubridores o antioxidantes.

La dosificación del principio activo de fórmula I a administrar, o de una sal, éster o hidrato fisiológicamente tolerado del mismo, depende de cada caso particular y debe adaptarse a las circunstancias individuales para alcanzar de forma convencional el efecto óptimo. De esta forma, depende de la naturaleza y gravedad de la enfermedad a tratar y del sexo, edad, peso y respuesta individual del ser humano o animal a tratar, de la potencia y duración de la acción de los compuestos empleados, o de si se administran otros ingredientes activos además de los compuestos de fórmula I. En general, para obtener el efecto deseado en un adulto de aproximadamente 75 kg de peso, la dosis diaria apropiada es de unos 0,01 a 100 mg/kg, preferiblemente de 0,1 a 10 mg/kg, en particular de 0,3 a 5 mg/kg (en cada caso mg por kg de masa corporal). La dosis diaria puede administrarse en una sola dosis o, especialmente al administrar cantidades altas, dividirse en varias, por ejemplo tres o cuatro dosis únicas. En algunos casos, dependiendo de las características individuales, puede ser necesario desviarse por encima o por debajo de la dosis diaria especificada. Los productos farmacéuticos normalmente contienen de 0,2 a 500 mg, preferiblemente de 1 a 200 mg, de un principio activo de cualquiera de las fórmulas (Ia) a (Ie) (de los que sólo la utilización de los compuestos de fórmula (Ia) o (Ib) pertenece a la invención tal como se reivindica) o sus sales fisiológicamente toleradas.

La presente invención se ilustrará con más detalle mediante las Figuras adjuntas y los siguientes Ejemplos no limitantes.

La Fig. 1 es un esquema que ilustra el transcurso de los acontecimientos durante el tratamiento de la presión intracraneal aumentada y de la isquemia secundaria aquí descrito. En primer lugar, generalmente durante las primeras 6 horas tras el traumatismo encefálico, como un TCE o una lesión cerebral no traumática, la presión intracraneal aumenta hasta un nivel elevado de forma crítica, es decir un nivel que amenaza la vida del paciente, porque por ejemplo conduce a una posible depresión respiratoria aguda y una pérdida de consciencia. Como han descubierto los inventores, la administración de los derivados de pteridina aquí descritos conduce a una inhibición de la NO sintasa endotelial (e-NOS), particularmente en la región del cerebro donde ha tenido lugar el traumatismo y ha aumentado la actividad de la e-NOS. Esto está acompañado por una contracción de los vasos sanguíneos del cerebro y por lo tanto conduce a un descenso de la PIC en estas primeras horas posteriores al traumatismo. Como efecto secundario, una vez que la barrera hematoencefálica se vuelve permisiva como resultado del traumatismo, las pteridinas utilizadas en la invención también son capaces de cruzar esta la barrera e inhibir la NO sintasa neuronal (n-NOS), la NO sintasa inducible (i-NOS) y la NO sintasa mitocondrial (m-NOS), cuyas actividades están aumentadas después de traumatismos e isquemias secundarias. Por lo tanto se puede evitar o tratar la muerte celular aguda vía necrosis, los procesos inflamatorios, la muerte celular vía necrosis y apoptosis, así como la formación de edema. Además, se bloquea la síntesis de NO en el parénquima cerebral. Esto antagoniza la dilatación de los vasos causada por el NO proveniente del parénquima cerebral.

La Figura 2 muestra el efecto contráctil de la 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina en arterias basilares de rata aisladas (BA, círculos blancos) y arterias cerebrales mediales (MCA, círculos negros) ensayado como describe el Ejemplo 4. La contracción se mide en fuerza de MN y se expresa en porcentaje de contracción relativo a la contracción de las arterias causada por una solución de K^{+}-Krebs 124 mM. La concentración de 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina se ilustra en escala semilogarítmica.

Ejemplo 1 Preparación de 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina (H_{4}-aminobiopterina)

La 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina se sintetizó de la siguiente manera:

A una mezcla de N^{2},1',2'-triacetilbiopterina (7,9 g), 2-(4-nitrofenil)etanol (5,1 g) y trifenilfosfano (8,4 g) en dioxano (150 ml) se le añadió azodicarbonato de etilo gota a gota y después la solución restante se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. La solución se evaporó con rotación, después el resto se disolvió en CHCl_{3} y se colocó en una columna de gel de sílice (18 x 6 cm). Para eliminar el óxido de trifenilfosfano primero se cromatografió la solución mediante EtOAc/n-hexano (1:1) y EtOAc/n-hexano (4:1) y después se utilizó EtOAc (1,5 l) para eluir el producto de reacción de la cromatografía. La concentración de la solución proporciona el producto puro: 8,63 g (75%) de N_{2},1'2'-triacetil-O^{4}-2-(4-nitrofenil)etilbiopterina.

Se suspendió N_{2},1'2'-triacetil-O^{4}-2-(4-nitrofenil) etilbiopterina (9,0 g) en una mezcla de metanol (90 ml) y amoníaco concentrado (90 ml) y la solución restante se agitó a temperatura ambiente durante 36 horas. La solución se concentró hasta la mitad del volumen, se extrajo mediante CH_{2}Cl_{2} y la fase acuosa se concentró. El resto se trató con etanol caliente. Tras enfriar, recoger la precipitación y lavar con éter, el producto se secó sobre P_{4}O_{10} en un desecador al vacío. Rendimiento: 3,3 g(77%) de 4-amino-4-desoxibiopterina. Opcionalmente se puede purificar aún más mediante recristalización utilizando una gran cantidad de etanol.

Se prehidrogenó PtO_{2} (0,15 g) en una solución de ácido trifluoroacético (50 ml) situada en un agitador bajo atmósfera de hidrógeno. Después se añadió 4-amino-4-desoxibiopterina (1,0 g) y se continuó el proceso de reducción bajo agitación. Tras 3 horas, terminó la captación de H_{2} (200 ml, leídos de la bureta). El catalizador se eliminó bajo atmósfera de nitrógeno, la solución se secó mediante concentración y se añadieron dioxano/HCl-gas (10 ml) y éter (100 ml) al resto de consistencia similar al jarabe, y la solución restante se agitó durante varias horas hasta que se depositó un precipitado incoloro. El precipitado se apartó, se lavó con éter y se secó sobre KOH y P_{4}O_{10} en un desecador al vacío. Rendimiento: 1,23 g (90%) de 4-amino-4-desoxi-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina.

C_{9}H_{16}N_{6}N_{2} x 2HCl x 2 H_{2}O (348,3); teórico: C 31,3; H 6,37; N 24,13; determinado: C 31,23; H 6,18; N 23,95.

Ejemplo 2 Determinación de la especificidad de unión de la H_{4}-aminobiopterina mediante pruebas de unión radiactivas

Se determinó el comportamiento de unión de la H_{4}-aminobiopterina respecto a varios receptores de relevancia fisiológica mediante ensayos de unión competitivos utilizando un ligando marcado radiactivamente. La determinación de los valores de CI_{50} para la NO-sintasa se realizó de acuerdo con el protocolo publicado en POLLOCK, J.S.,
FORSTERMANN, U., MITCHELL, J.A., WARNER, T.D., SCHMIDT, H.H.H., NAKANE, M. y MURAD, F. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88 10480-10484 (véase también el núm. de referencia de ensayo 766-c del catálogo de Cerep, París, Francia, edición 2002).

La determinación del valor de CI_{50} para cada uno de los demás receptores que se escogieron para determinar la especificidad de unión de la H_{4}-aminobiopterina se llevó a cabo como también se describe en el catálogo de Cerep, Paris, Francia, edición 2002.

Los resultados se ilustran en la Tabla 1. Como se ve en esta tabla, la H_{4}-aminobiopterina no presenta ninguna afinidad de unión cuantificable respecto a cualquier otro receptor fisiológico investigado importante, particularmente respecto a receptores del tipo 5-HT, el receptor de N-metil-D-aspartato (NDMA) o el receptor de GABA, que están implicados en la muerte de células neuronales tras TCE. Esto sugiere claramente que los compuestos de pteridina utilizados en la presente invención llevan a cabo su actividad preferentemente mediante su unión a los NOS.

TABLA 1 Efectos de la H_{4}-aminobiopterina sobre la unión específica a los receptores estudiados y los valores de CI_{50} de los compuestos de referencia con afinidad de unión conocida al receptor dado

9

10

11

Para la H_{4}-aminobiopterina, los resultados se expresan como porcentaje de inhibición de unión específica de control (valores medios; n=2). El símbolo "-" indica una inhibición inferior al 10%.

Ejemplo 3 Especificidad in Vitro de la H_{4}-aminobiopterina

El efecto fisiológico de la H_{4}-aminobiopterina sobre las NO sintasas se continuó examinando mediante pruebas de cultivos celulares con células que expresaban receptores relevantes mediante la utilización del protocolo descrito en el catálogo de Cerep, Paris, Francia, edición 2002 (véase la Tabla 2). La determinación del valor de CI_{50} para cada uno de los otros receptores que se escogieron para determinar la especificidad de unión de la H_{4}-aminobiopterina también se realizó como se describe en el catálogo de Cerep, Paris, Francia, edición 2002. Además, se estudió el efecto modulador de la H_{4}-aminobiopterina sobre el acoplamiento \beta-adenoceptor-proteína G (Tabla 3), mediante el ensayo descrito en la ref. 758-2a (p.134) de la edición de 2002 del catálogo Cerep.

Los resultados de estos experimentos se resumen en las Tablas 2 y 3. Estos datos también confirman que la H_{4}-aminobiopterina tiene una afinidad de unión preferida al NOS.

TABLA 2 Efectos de la H_{4}-aminobiopterina en ensayos de biología celular estudiados y valores de CI_{50} para compuestos de referencia

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TABLA 3a Efectos de la H_{4}-aminobiopterina en los ensayos de biología celular estudiados y valores de CI_{50} o CE_{50} para el compuesto de referencia

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TABLA 3b Efectos de la H_{4}-aminobiopterina en los ensayos de biología celular estudiados y valores de CI_{50} o CE_{50} para el compuesto de referencia

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Ejemplo 4 Caracterización de la acción contráctil de la H_{4}-aminobiopterina en arterias cerebrales aisladas de rata

El efecto contráctil de la 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina en arterias basilares aisladas de rata (BA) y arterias cerebrales medias (MCA) se puso a prueba como describe Schilling et al., Peptides 21 (2000), 91-99.

Para estos experimentos se prepararon segmentos en anillo de vasos sanguíneos cerebrales de ratas Sprague-Dawley adultas (300-450 g) como describe Shilling et al., 2000 supra. Tras sacrificar a los animales mediante sangrado de las carótidas, se extrajo rápidamente el cerebro y se sumergió en una solución de Krebs-Högestätt modificada con la composición (mM): NaCl, 119; KCl, 3,0; Na_{2}HPO_{4}, 1,2; CaCl_{2} x 2 H_{2}O, 1,5; MgCl_{2} x 6H_{2}O, 1,2; NaHCO_{3}, 20, glucosa, 10. Mediante un microscopio binocular se diseccionó la arteria respectiva de forma meticulosa y se cortó en 4 segmentos con forma de anillo que se montaron en dos cables de acero inoxidable en forma de L (79 mm) en un baño de órganos de 5 ml de volumen. Un cable se unió firmemente a la pared del baño, mientras que el otro se conectó a un transductor de fuerza montado en un "microdrive" (M33, Märzhäuser), Wetzlar, Alemania). Los cambios en las fuerzas isométricas se midieron mediante un transductor acoplado a un amplificador (amplificadores Q11 y QT233, ambos de Hottinger Baldwin, Darmstadt, Alemania) y se dispusieron en un registrador gráfico.

Tras el montaje, los segmentos tuvieron un periodo de acomodación de 90 minutos, incrementando gradualmente la temperatura del baño hasta 37ºC. La solución del baño se burbujeó de forma constante con una mezcla de gases humidificada de O_{2} al 93%/CO_{2} al 7% a un pH alrededor de 7,35; a 37ºC.

Durante la acomodación, los segmentos se estiraron constantemente y la tensión en reposo se ajustó hasta una fuerza de 2,5 a 5,5 mili-Newton (mN). Después, se obtuvo una contracción de referencia intercambiando la solución de baño con solución de K^{+}-Krebs 2,5 mM (NaCl reemplazado por KCl). Los segmentos que desarrollaron menos de 2,5 mN se descartaron. Se puso a prueba el estado funcional del endotelio mediante aplicación acumulativa de acetilcolina (10^{-8} a 10^{-4} M) tras precontracción con serotonina (5-HT, 10^{-6} M) seguida de intercambio de la solución de baño otra vez a la solución de Krebs-Högestätt como se describe anteriormente. Como se escribe en Schilling et al., 2000, véase anteriormente, se consideró que sólo los segmentos con precontracción superior al 25% portaban endotelio funcional y por lo tanto fueron éstos los incluidos en el análisis. Después en cada segmento se aplicó H_{4}-aminobiopterina de forma acumulativa (10-10 a 1-3 M en el primer experimento para determinar la concentración efectiva, después en un rango de concentración más estrecho) a la solución de baño, en la que los segmentos se incubaron bajo tensión de reposo para caracterizar la contracción. La contracción se midió en fuerza mN y se expresó en porcentaje de la concentración de referencia (concentración producida por K^{+}-solución de Krebs 124 mM, véase anteriormente).

Los resultados se muestran en la Figura 2. Como se puede ver en la Figura 2, la H_{4}-aminobiopterina causó una contracción claramente dependiente de la concentración tanto en las arterias basilares de rata como en las arterias cerebrales medias. De acuerdo con esto, los resultados indican claramente el efecto vasoconstrictor de la H_{4}-aminobiopterina sobre los vasos cerebrales y de esta forma que ésta es adecuada para reducir la presión intracraneal aumentada al recontraer los vasos dilatados en el cerebro.

Claims (8)

1. Utilización de un compuesto de fórmula general (Ia)

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para la producción de una composición farmacéutica para el tratamiento de la presión intracraneal aumentada, en el que en la fórmula (Ia) R_{1} y R_{3} se seleccionan independientemente de H o OH, R_{4} es H, CH_{3}, CH_{2}OH, CHO, R_{2} es H, CH_{3}, CH_{2}OH, CHO o un radical alquilo inferior C_{1}-C_{9}, que puede ser de cadena lineal o ramificada, así como (CH(OH)_{n}-Y o (CH(OH))_{n}-(CH_{2})_{m}-W, donde Y es hidrógeno o un radical alquilo inferior, W es hidrógeno o un grupo hidroxilo, y n y m son, independientemente entre sí, de 1 a 20.

2. La utilización de la reivindicación 1, donde R_{1} y R_{4} en la fórmula (Ia) son hidrógeno, R_{2} es metilo y R_{3} es hidroxilo.

3. La utilización de la reivindicación 2, donde el compuesto es 2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-6-(L-eritro-1,2-dihidroxipropil)-pteridina.

4. La utilización de un compuesto de la fórmula general (Ib)

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para la producción de una composición farmacéutica para el tratamiento de la presión intracraneal aumentada, en la que en la fórmula (Ib) R_{1}, R_{2}, R_{3} y R_{4} se seleccionan independientemente de H o OH, R_{5} es H, CH_{3}, CH_{2}OH, CHO o un radical alquilo inferior C_{1}-C_{9}, que puede ser de cadena lineal o ramificada, así como (CH(OH)_{n}-Y o (CH(OH))_{n}
-(CH_{2})_{m}-W, donde Y es hidrógeno o un radical alquilo inferior, W es hidrógeno o un grupo hidroxilo, y n y m son, independientemente entre sí, de 1 a 20.

5. La utilización de la reivindicación 4, donde R_{5} es metilo, R_{3} es hidrógeno, R_{2} y R_{4} son ambos hidrógeno y R_{1} es hidrógeno o hidroxilo.

6. La utilización de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la presión intracraneal aumentada está causada por un traumatismo craneoencefálico cerrado o por una lesión cerebral no traumática.

7. La utilización de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para el tratamiento de un mamífero.

8. La utilización de la reivindicación 7, en la que el mamífero es un ser humano.