ES2782873T3

ES2782873T3 - Derivado de purinona como inhibidor de Btk quinasa

Info

Publication number: ES2782873T3
Application number: ES16176735T
Authority: ES
Inventors: Shingo Yamamoto; Toshio Yoshizawa
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2010-05-31
Filing date: 2011-05-30
Publication date: 2020-09-16
Anticipated expiration: 2031-05-30
Also published as: BR112012030711A2; JP2015052000A; NZ603643A; EP3590938A1; BR112012030711B1; KR101537148B1; HRP20161027T1; US10233185B2; US20250197401A1; SI2578585T1; US20170313705A1; EP2578585B1; DK2578585T3; US8557803B2; TW201209057A; CN102918040A; US20240083899A1; US20130079327A1; HK1178882A1; EP3112368A1

Abstract

Un compuesto representado por la fórmula general (I) **(Ver fórmula)** (en la fórmula, L representa (1) -O-, (2) -S-, (3) -SO-, (4) -SO2- (5) -NH-, (6) -C(O)-, (7) -CH2-O-, (8) -O-CH2-, (9) -CH2- o (10) -CH(OH)-; R1 representa (1) un átomo de halógeno, (2) un grupo alquilo C1-4, (3) un grupo alcoxi C1-4, (4) un grupo haloalquilo C1 o (5) un grupo haloalcoxi C1-4; el anillo 1 representa un anillo benceno, ciclohexano o piridina, el cual puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) átomos de halógeno, (2) grupos alquilo C1-4, (3) grupos alcoxi C1-4, (4) nitrilo, (5) grupos haloalquilo C1-4 y (6) grupos haloalcoxi C1-4, en donde cuando dos o más sustituyentes están presentes en el anillo 1, estos sustituyentes pueden formar un grupo cíclico de 4 a 7 miembros junto con los átomos del anillo 1 a los cuales estos sustituyentes están unidos; el anillo 2 representa un heterociclo saturado nitrogenado, de 4 a 6 miembros, que está sustituido por de uno a tres -K-R2; K representa (-C(O)- (en donde el enlace de la izquierda es un enlace al anillo 2); R2 representa un grupo alquenilo C2-4 o un alquinilo C2-4, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) NR3R4, (2) átomos de halógeno, (3) CONR5R6, (4) CO2R7 y (5) OR8; cada uno de R3 y R4 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4 que puede estar sustituido por OR9 o CONR10R11; R3 y R4 pueden, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, formar un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 7 miembros, que puede estar sustituido por un grupo oxo o un grupo hidroxilo; cada uno de R5 y R6 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno, (2) un grupo alquilo C1-4 o (3) un grupo fenilo; R7 representa (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4; R8 representa (1) un átomo de hidrógeno, (2) un grupo alquilo C1-4, (3) un grupo fenilo o (4) un grupo benzotriazolilo; R9 representa (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4; cada uno de R10 y R11 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4; n representa un número entero de 0 a 4; m representa un número entero de 0 a 2 y cuando n es dos o más, los R1 pueden ser el mismo que los demás o pueden ser diferentes entre sí), un isómero óptico de los mismos o sus mezclas, una sal de los mismos, un solvato de los mismos o un N-óxido de los mismos.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivado de purinona como inhibidor de Btk quinasa

Campo técnico

La presente invención se refiere a compuestos representados por la fórmula general (I)

(todos los símbolos en la fórmula tienen las mismas definiciones que se dan a continuación), isómeros ópticos de los mismos o sus mezclas, sales de los mismos, solvatos de los mismos y A/-óxidos de los mismos (abreviado en lo sucesivo como "compuestos de la presente invención").

Antecedentes en la técnica

La tirosina quinasa de Bruton (abreviada en lo sucesivo como "Btk") pertenece a la familia Tec de quinasas, que son tirosina quinasas no receptoras, y se expresan selectivamente en líneas de linfocitos B y mielocitos. Btk desempeña un importante papel en la transducción de señal en linfocitos B y es un factor que contribuye a la supervivencia, diferenciación, proliferación, y activación de linfocitos B. La señalización en linfocitos B a través del receptor antigénico de linfocitos B (BCR) induce una amplia diversidad de respuestas biológicas, y aquí una transducción de señal anómala causa activación anómala de linfocitos B y la formación de autoanticuerpos patógenos. Se cree que Btk forma un eslabón en las rutas de transducción de señal mediadas por BCR en linfocitos B. De ese modo, se conoce que la agammaglobulinemia ligada al cromosoma X (XLA) está causada por un defecto en el gen Btk humano que da como resultado la inducción de diferenciación anómala de linfocitos B y una reducción drástica en la producción de inmunoglobulina (véase el Documento de No Patente 1). Los síntomas de esta enfermedad incluyen una reducción considerable de los linfocitos B en la sangre periférica y un aumento de la susceptibilidad a infecciones bacterianas. Btk también se conoce por participar en la activación de mastocitos y en funciones fisiológicas de las plaquetas. Debido a esto, los compuestos que tienen una actividad inhibidora de Btk son eficaces para el tratamiento de enfermedades en las que participan linfocitos B o mastocitos, por ejemplo, enfermedades alérgicas, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, enfermedades tromboembólicas y cánceres (véase el Documento de No Patente 2).

Los siguientes compuestos se conocen como técnica anterior para los compuestos de la presente invención.

Los compuestos representados por la fórmula general (A) se conocen como compuestos que tienen actividad inhibidora de Btk

(en la fórmula LaA representa CH2, O, NH, o S; Ar* representa arilo sustituido o sin sustituir o heteroarilo sustituido o sin sustituir; YA representa cualquier sustituyente seleccionado entre alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, y heteroarilo; ZA representa CO, OCO, NHCO, o CS; R7-A y R8-A representan cada uno independientemente H, alquilo C1-C4 sin sustituir, alquilo C1-C4 sustituido, heteroalquilo C1-C4 sin sustituir, heteroalquilo C1-C4 sustituido, cicloalquilo C3-C6 sin sustituir, cicloalquilo C3-C6 sustituido, heterocicloalquilo C2-C6 sin sustituir, y heterocicloalquilo C2-C6 sustituido; o R7-A y R8-A forman juntos un enlace; y R6-A representa H, alquilo C1-C4 sustituido o sin sustituir, heteroalquilo C1-C4 sustituido o sin sustituir, alcoxialquilo C1-C6, alquilaminoalquilo C1-C8, cicloalquilo C3-C6 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir (las definiciones de estos grupos se han extraído)) (véanse los Documentos de Patente 1, 2, y 3).

Por otro lado, por ejemplo, los compuestos representados por la fórmula general (B)

(en la fórmula, Q ^1By Q ^2Bse seleccionan independientemente entre CX ^1B, CX ^2B, y nitrógeno; Q ^3Brepresenta N o CH; X1B y X2B se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C1-C6), ciano, halógeno, etc.; R1B se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno y alquilo (C1-C6); y B representa 0 o un número entero de 1 a 3; R y R se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo (C1-C6); R se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, etc.; y R5b se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo, heterociclilo, y heterociclilo sustituido (las definiciones de estos grupos se han extraído)) (véase el Documento de Patente 4) se conocen como compuestos que tienen un esqueleto de purinona. También se conocen los compuestos representados por la fórmula general (C)

(en la fórmul ^{C' r c ' ñ(~'} a, X se selecciona entre el grupo que consiste en nitrógeno y CR ; R se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo sustituido o sin sustituir, etc.; Q1C se selecciona entre el grupo que consiste en O, S, etc.; ZC se selecciona entre el grupo que consiste en oxígeno, azufre, y NY5C; Y5C se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo sustituido o sin sustituir, etc.; Q2C, Q3C, y Q4C se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, etc.; R2C se selecciona entre el grupo que consiste en hidrógeno y alquilo sustituido o sin sustituir; y nC representa 0, 1,2, 3 o 4 (las definiciones de estos grupos se han extraído)) (véase el Documento de Patente 5). También se desvelan compuestos que tienen un esqueleto de purinona como la fórmula 20 (véase el número de párrafo 0028) en el Documento de Patente 6.

También se conocen los compuestos representados por la fórmula general (D)

(en la fórmula, R1D representa un grupo seleccionado entre hidrógeno, alquilo sustituido o sin sustituir,

[C 6]

etc.; R2D representa alquilo sustituido o sin sustituir, alquenilo sustituido o sin sustituir, o alquinilo sustituido o sin sustituir; YD representa un grupo seleccionado entre O, C-NO2, y S; ZD representa un grupo seleccionado entre

etc.; aquí, AD, Dd, Ed, y MD representan cada uno independientemente CR12D, N, y N-óxido; R12D representa un grupo seleccionado entre hidrógeno, halógeno, amino, hidroxi, y ciano; XD representa un grupo seleccionado entre O, C-NO2, y S; R6D representa un grupo seleccionado entre cicloalquilo sustituido o sin sustituir, heteroalquilo sustituido o sin sustituir, y arilo sustituido o sin sustituir; la indicación aD representada por la línea punteada representa un enlace sencillo o un doble enlace; y nD representa un número entero seleccionado entre 0, 1, y 2) (véase el Documento de Patente 7).

El documento WO-2008/121742 se refiere a compuestos inhibidores de cinasa, métodos para sintetizar los compuestos y su uso en el tratamiento de enfermedades. El documento WO-2005/011597 se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades o trastornos asociados con actividad cinasa anormal o desregulada.

Los compuestos de la presente invención son compuestos que, además de tener actividad inhibidora selectiva de Btk, exhiben una excelente actividad metabólica y pueden evitar la actividad inhibidora de CYP y reacciones adversas tales como, por ejemplo, hepatotoxicidad; sin embargo, no existe ninguna declaración o sugerencia con respecto a estos rasgos característicos en ninguno de los documentos de la técnica anterior.

Documento de Patente 1: Traducción Japonesa de Solicitud PCT n.° 2010-504324

Documento de Patente 2: WO 2008/121742

Documento de Patente 3: WO 2010/009342

Documento de Patente 4: WO 2008/060301

Documento de Patente 5: WO 2007/142755

Documento de Patente 6: Traducción Japonesa de Solicitud PCT n.° 2003-509427

Documento de Patente 7: WO 2003/037890

Documento de No Patente 1: Nature, Volumen 361, pp. 226-233, 1993

Documento de No Patente 2: Anticancer Agents in Medicinal Chemistry, Volumen 7, número 6, pp. 624-632, 2007

Divulgación de la invención

Con el fin de proporcionar un agente terapéutico muy seguro para enfermedades en las que participan linfocitos B y/o mastocitos, un objetivo de la presente invención es desarrollar un compuesto que, además de tener una actividad inhibidora selectiva de Btk, exhiba una excelente estabilidad metabólica y pueda evitar hepatotoxicidad o similar. Con el fin de conseguir el objetivo anterior, los presentes inventores llevaron a cabo investigaciones exhaustivas dirigidas a descubrir compuestos que tienen actividad inhibidora selectiva de Btk y descubrieron los compuestos de la presente invención como resultado. Además, también se descubrió que estos compuestos son compuestos que exhiben una excelente actividad metabólica y pueden evitar hepatotoxicidad o similar, y se logró la presente invención como resultado.

Es decir, la presente invención se refiere a

[1] un compuesto representado por la fórmula general (I)

[C 8]

(en la fórmula,

L representa (1) -O-, (2) -S-, (3) -SO-, (4) -SO2-(5) -NH-, (6) -C(O)-, (7) -CH2-O-, (8) -O-CH2-, (9) -CH2- o (10) -CH(OH)-;

R1 representa (1) un átomo de halógeno, (2) un grupo alquilo C1-4, (3) un grupo alcoxi C1-4, (4) un grupo haloalquilo C1 o (5) un grupo haloalcoxi C1-4;

el anillo 1 representa un anillo benceno, ciclohexano o piridina, el cual puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) átomos de halógeno, (2) grupos alquilo C1-4, (3) grupos alcoxi C1-4, (4) nitrilo, (5) grupos haloalquilo C1-4 y (6) grupos haloalcoxi C1-4, en donde cuando dos o más sustituyentes están presentes en el anillo 1, estos sustituyentes pueden formar un grupo cíclico de 4 a 7 miembros junto con los átomos del anillo 1 a los cuales estos sustituyentes están unidos;

el anillo 2 representa un heterociclo saturado de 4 a 6 miembros, que puede estar sustituido por de uno a tres -K-R2;

K representa (-C(O)-(en donde el enlace de la izquierda es un enlace al anillo 2);

R2 representa un grupo alquenilo C2-4 o un alquinilo C2-4, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) NR3R4, (2) átomos de halógeno, (3) CONR5R6, (4) CO2R7 y (5) OR8;

cada uno de R3 y R4 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4 que puede estar sustituido por OR9 o C^oNR10R11;

R3 y R4 pueden, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, formar un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 7 miembros, que puede estar sustituido por un grupo oxo o un grupo hidroxilo;

cada uno de R5 y R6 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno, (2) un grupo alquilo C1-4 o (3) un grupo fenilo;

R7 representa (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4;

R8 representa (1) un átomo de hidrógeno, (2) un grupo alquilo C1-4, (3) un grupo fenilo o (4) un grupo benzotriazolilo;

R9 representa (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4;

cada uno de R10 y R11 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4; n representa un número entero de 0 a 4;

m representa un número entero de 0 a 2 y

cuando n es dos o más, los R1 pueden ser el mismo que los demás o pueden ser diferentes entre sí), un isómero óptico de los mismos o sus mezclas, una sal de los mismos, un solvato de los mismos o un N-óxido de los mismos;

[2] El compuesto de acuerdo con [1], en donde R2 es un grupo alquenilo C2-4 o un grupo alquinilo C2-4, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes, seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) NR3R4, (2) átomos de halógeno, (3) CONR5R6, (4) CO2R7 y (5) OR8;

[3 ] El compuesto de acuerdo con [1], en donde el heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros es un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina;

[4] El compuesto de acuerdo con [1], representado por la fórmula general (I-1)

(en la fórmula, el anillo 1-1 representa un anillo benceno, ciclohexano o piridina, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes, seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) átomos de halógeno, (2) grupos alquilo C1-4, (3) grupos alcoxi C1-4, (4) nitrilo y (5) CF3 y el anillo 2-1 representa un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros que está sustituido con de uno a tres -K-R2, en donde los otros símbolos tienen las mismas definiciones anteriores);

[5] El compuesto de acuerdo con [1], que es

(1) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona,

(2 ) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-(2-butenoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona.

(3) 9-[(1-acriloil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona,

(5 ) 6-amino-9-{(3S)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona,

(6) 6-amino-7-[4-(3-clorofenoxi)fenil]-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona,

(7) 6-amino-9-[1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona u

(8) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona o un isómero óptico de los mismos o sus mezclas.

Los compuestos de la presente invención, además de tener actividad inhibidora selectiva de Btk, exhiben una excelente actividad metabólica y pueden evitar hepatotoxicidad o similar, y como consecuencia son útiles como agentes terapéuticos muy seguros para enfermedades en las que participan linfocitos B y/o mastocitos, tales como linfoma no Hodgkin.

Mejor modo de llevar a cabo la invención

La presente invención se describe con detalle a continuación.

En la presente invención, "que tiene actividad inhibidora selectiva de Btk" representa que tiene actividad inhibidora selectiva de Btk con respecto a tirosina quinasas no Btk y particularmente proteína tirosina quinasa específica de linfocitos (Lck), proteína tirosina quinasas fyn (Fyn), e isoforma A homologa del oncogén relacionado con sarcoma viral de Yamaguchi v-yes-1 (LynA). Esta propiedad hace posible evitar reacciones adversas impredecibles causadas por la inhibición de otras tirosina quinasas. Por ejemplo, se conoce la aparición de anomalías retinianas en ratones deficientes de Lck (Oncogene, Volumen 16, pp. 2351-2356, 1998), que aumenta la posibilidad de que se produzcan reacciones adversas en el ojo en el caso de inhibición de Lck.

En la presente invención, el átomo de halógeno representa flúor, cloro, bromo, y yodo.

En la presente invención, el grupo alquilo C1-4 representa grupos alquilo C1-4 de cadena lineal y de cadena ramificada, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo y ferc-butilo.

En la presente invención, el grupo alquileno C1-4 representa metileno, etileno, propileno, butileno y sus isómeros. En la presente invención, el grupo alcoxi C1-4 representa grupos alcoxi C1-4 de cadena lineal y de cadena ramificada, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutiloxi y ferc-butoxi.

En la presente invención, el grupo alquenilo C2-4 representa grupos alquenilo C2-4 de cadena lineal y de cadena ramificada, por ejemplo, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1 -butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo y 1,3-butadienilo.

En la presente invención, el grupo alquinilo C2-4 representa grupos alquinilo C2-4 de cadena lineal y de cadena ramificada, por ejemplo, etinilo, 1 -propinilo, 2-propinilo, 1 -butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo y 1,3-butadiinilo.

En la presente invención, el grupo haloalquilo C1-4 representa un grupo proporcionado sustituyendo uno o dos o más átomos de halógeno en un grupo alquilo C1-4 y se puede ejemplificar mediante un grupo fluorometilo, un grupo clorometilo, un grupo bromometilo, un grupo yodometilo, un grupo difluorometilo, un grupo trifluorometilo, un grupo 1-fluoroetilo, un grupo 2-fluoroetilo, un grupo 2-cloroetilo, un grupo pentafluoroetilo, un grupo 1-fluoropropilo, un grupo 2-cloropropilo, un grupo 3-fluoropropilo, un grupo 3-cloropropilo, un grupo 4,4,4-trifluorobutilo y un grupo 4-bromobutilo.

En la presente invención, el grupo haloalcoxi C1-4 representa un grupo proporcionado sustituyendo uno o dos o más átomos de halógeno en un grupo alcoxi C1-4 y se puede ejemplificar mediante un grupo trifluorometoxi, un grupo triclorometoxi, un grupo clorometoxi, un grupo bromometoxi, un grupo fluorometoxi, un grupo yodometoxi, un grupo difluorometoxi, un grupo dibromometoxi, un grupo 2-cloroetoxi, un grupo 2,2,2-trifluoroetoxi, un grupo 2,2,2-tricloroetoxi, un grupo 3-bromopropoxi, un grupo 3-cloropropoxi, un grupo 2,3-dicloropropoxi, un grupo 1-fluorobutoxi, un grupo 4-fluorobutoxi y un grupo 1-clorobutoxi.

En la presente invención, el grupo cíclico de 4 a 7 miembros representa un anillo carbocíclico C4-7 o un heterociclo de 4 a 7 miembros.

En la presente invención, el anillo carbocíclico C4-7 representa un anillo carbocíclico C4-7 monocíclico, alifático o aromático. El sistema alifático puede estar parcial o completamente saturado. Los ejemplos aquí son ciclobutano, ciclopentano, ciclohexano, cicloheptano, ciclopenteno, ciclohexeno, ciclohepteno, ciclobutadieno, ciclopentadieno, ciclohexadieno, cicloheptadieno y benceno.

En la presente invención, el anillo carbocíclico C5-6 representa un anillo carbocíclico C5-6 monocíclico, alifático o aromático. El sistema alifático puede estar parcial o completamente saturado. Los ejemplos aquí son ciclopentano, ciclohexano, ciclopenteno, ciclohexeno, ciclopentadieno, ciclohexadieno y benceno.

En la presente invención, el heterociclo de 4 a 7 miembros representa un heterociclo de 4 a 7 miembros sin saturar o un heterociclo de 4 a 7 miembros saturado.

En la presente invención, el heterociclo de 4 a 7 miembros sin saturar representa un heterociclo monocíclico de 4 a 7 miembros sin saturar que contiene de uno a cinco heteroátomos seleccionados entre el átomo de oxígeno, átomo de nitrógeno y átomo de azufre y se puede ejemplificar mediante pirrol, imidazol, triazol, tetrazol, pirazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, azepina, diazepina, furano, pirano, oxepina, tiofeno, tiopirano, tiepina, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, furazano, oxadiazol, oxazina, oxadiazina, oxazepina, oxadiazepina, tiadiazol, tiazina, tiadiazina, tiazepina y tiadiazepina.

En la presente invención, el heterociclo de 4 a 7 miembros saturado representa un heterociclo de 4 a 7 miembros monocíclico parcial o completamente saturado que contiene de uno o cinco heteroátomos, seleccionado cada uno independientemente entre el átomo de oxígeno, átomo de nitrógeno y átomo de azufre y se puede ejemplificar mediante azetidina, pirrolina, pirrolidina, imidazolina, imidazolidina, triazolina, triazolidina, tetrazolina, tetrazolidina, pirazolina, pirazolidina, dihidropiridina, tetrahidropiridina, piperidina, dihidropirazina, tetrahidropirazina, piperazina, dihidropirimidina, tetrahidropirimidina, perhidropirimidina, dihidropiridazina, tetrahidropiridazina, perhidropiridazina, dihidroazepina, tetrahidroazepina, perhidroazepina, dihidrodiazepina, tetrahidrodiazepina, perhidrodiazepina, oxetano, dihidrofurano, tetrahidrofurano, dihidropirano, tetrahidropirano, dihidrooxepina, tetrahidrooxepina, perhidrooxepina, tietano, dihidrotiofeno, tetrahidrotiofeno, dihidrotiopirano, tetrahidrotiopirano, dihidrotiepina, tetrahidrotiepina, perhidrotiepina, dihidrooxazol, tetrahidrooxazol (oxazolidina), dihidroisoxazol, tetrahidroisoxazol (isoxazolidina), dihidrotiazol, tetrahidrotiazol (tiazolidina), dihidroisotiazol, tetrahidroisotiazol (isotiazolidina), dihidrofurazano, tetrahidrofurazano, dihidrooxadiazol, tetrahidrooxadiazol (oxadiazolidina), dihidrooxazina, tetrahidrooxazina, dihidrooxadiazina, tetrahidrooxadiazina, dihidrooxazepina, tetrahidrooxazepina, perhidrooxazepina, dihidrooxadiazepina, tetrahidrooxadiazepina, perhidrooxadiazepina, dihidrotiadiazol, tetrahidrotiadiazol (tiadiazolidina), dihidrotiazina, tetrahidrotiazina, dihidrotiadiazina, tetrahidrotiadiazina, dihidrotiazepina, tetrahidrotiazepina, perhidrotiazepina, dihidrotiadiazepina, tetrahidrotiadiazepina, perhidrotiadiazepina, morfolina, tiomorfolina, oxatiano, dioxolano, dioxano, ditiolano y ditiano.

En la presente invención, el heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 7 miembros se refiere a aquellos heterociclos saturados de 4 a 7 miembros que necesariamente contienen al menos un átomo de nitrógeno. Son ejemplos azetidina, pirrolina, pirrolidina, imidazolina, imidazolidina, triazolina, triazolidina, tetrazolina, tetrazolidina, pirazolina, pirazolidina, dihidropiridina, tetrahidropiridina, piperidina, dihidropirazina, tetrahidropirazina, piperazina, dihidropirimidina, tetrahidropirimidina, perhidropirimidina, dihidropiridazina, tetrahidropiridazina, perhidropiridazina, dihidroazepina, tetrahidroazepina, perhidroazepina, dihidrodiazepina, tetrahidrodiazepina, perhidrodiazepina, dihidrooxazol, tetrahidrooxazol (oxazolidina), dihidroisoxazol, tetrahidroisoxazol (isoxazolidina), dihidrotiazol, tetrahidrotiazol (tiazolidina), dihidroisotiazol, tetrahidroisotiazol (isotiazolidina), dihidrofurazano, tetrahidrofurazano, dihidrooxadiazol, tetrahidrooxadiazol (oxadiazolidina), dihidrooxazina, tetrahidrooxazina, dihidrooxadiazina, tetrahidrooxadiazina, dihidrooxazepina, tetrahidrooxazepina, perhidrooxazepina, dihidrooxadiazepina, tetrahidrooxadiazepina, perhidrooxadiazepina, dihidrotiadiazol, tetrahidrotiadiazol (tiadiazolidina), dihidrotiazina, tetrahidrotiazina, dihidrotiadiazina, tetrahidrotiadiazina, dihidrotiazepina, tetrahidrotiazepina, perhidrotiazepina, dihidrotiadiazepina, tetrahidrotiadiazepina, perhidrotiadiazepina, morfolina y tiomorfolina.

Los heterociclos saturados nitrogenados de 4 a 6 miembros se pueden ejemplificar en la presente invención mediante azetidina, pirrolina, pirrolidina, imidazolina, imidazolidina, triazolina, triazolidina, tetrazolina, tetrazolidina, pirazolina, pirazolidina, dihidropiridina, tetrahidropiridina, piperidina, dihidropirazina, tetrahidropirazina, piperazina, dihidropirimidina, tetrahidropirimidina, perhidropirimidina, dihidropiridazina, tetrahidropiridazina, perhidropiridazina, dihidrooxazol, tetrahidrooxazol (oxazolidina), dihidroisoxazol, tetrahidroisoxazol (isoxazolidina), dihidrotiazol, tetrahidrotiazol (tiazolidina), dihidroisotiazol, tetrahidroisotiazol (isotiazolidina), dihidrofurazano, tetrahidrofurazano, dihidrooxadiazol, tetrahidrooxadiazol (oxadiazolidina), dihidrooxazina, tetrahidrooxazina, dihidrooxadiazina, tetrahidrooxadiazina, dihidrotiadiazol, tetrahidrotiadiazol (tiadiazolidina), dihidrotiazina, tetrahidrotiazina, dihidrotiadiazina, tetrahidrotiadiazina, morfolina y tiomorfolina.

L en la presente invención es preferentemente -O-, -C2-O-, -O-C2-, -NH-, -C(O) -, -C2- o -C(OH)-.

R1 en la presente invención es preferentemente un átomo de halógeno o un grupo alcoxi C1-4.

El heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros para el anillo 2 en la presente invención es preferentemente un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina y se prefiere en particular un anillo de azetidina o pirrolidina.

K en la presente invención es -C(O)-.

R2 en la presente invención es un grupo alquenilo C2-4 o un grupo alquinilo C2-4, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes, seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) NR3R4, (2) átomos de halógeno, (3) CONR5R6, (4) CO2R7 y (S) OR8.

m en la presente invención es preferentemente 0 o 1 y más preferentemente es 0.

En la presente invención se prefiere también cualquier combinación de los grupos preferidos individuales proporcionados como ejemplos anteriormente y seleccionados entre L, R1, anillo 1, anillo 2, K, R2 y m.

En la presente invención se prefieren los compuestos representados por la fórmula general (I-1)

[C10]

(todos los símbolos en la fórmula tienen las mismas definiciones que anteriormente) entre los compuestos con fórmula general (I).

R1 en la fórmula general (I-1) es preferentemente un átomo de halógeno o un grupo alcoxi C1-4.

El anillo 1-1 en la fórmula general (I-1) es preferentemente un anillo de benceno.

El heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros para el anillo 2-1 en la fórmula general (I-1) es preferentemente un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina y más preferentemente es un anillo de azetidina o pirrolidina.

Con respecto al sustituyente -K-R2- en el anillo 2-1 en la fórmula general (I-1), K es -C(O)- y R2 es un grupo alquenilo C2-4 o un grupo alquinilo C2-4, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes seleccionado cada uno independientemente del grupo que consiste en (1) NR3R4, (2) átomos de halógeno, (3) CONR5R6, (4) CO2R7 y (5) OR8.

m en la fórmula general (I-1) es preferentemente 0 o 1 y es más preferentemente 0.

También se prefiere cualquier combinación de los grupos preferidos individuales proporcionados como ejemplos anteriormente para la fórmula general (I-1).

[Isómeros]

La presente invención abarca todos los isómeros, a menos que se indique específicamente de otro modo. Por ejemplo, los grupos alquilo incluyen tanto grupos alquilo de cadena lineal como grupos alquilo de cadena ramificada. Además, todos los siguientes está incluidos en la presente invención: isómeros geométricos (configuración E, configuración Z, configuración cis, configuración trans) para dobles enlaces, anillos y anillos condensados; isómeros ópticos debidos a, por ejemplo, la presencia de un átomo de carbono asimétrico (configuraciones R y S, posiciones a y p , enantiómeros, diastereómeros); formas ópticamente activas que muestran rotación óptica (configuraciones D, L, d y l); formas polares generadas por separación cromatográfica (formas de alta polaridad, formas de baja polaridad), compuestos en equilibrio; isómeros rotacionales; mezclas de los anteriores en cualquier proporción y mezclas racémicas. La presente invención también abarca todos los isómeros que aparezcan debido a tautómeros.

Además, un isómero óptico en la presente invención se refiere no solamente al isómero óptico 100 % puro sino que también puede incluir otros isómeros ópticos de al menos el 50 %.

En la presente invención, a menos que se indique específicamente otra cosa, y como es evidente para el experto en la materia, el símbolo

[C 11]

representa que enlaza hacia el lado posterior del plano del papel (es decir, la posición a); el símbolo

[C 12]

representa que enlaza hacia la parte anterior del plano del papel (es decir, la posición p); y

[C 13]

representa la posición a, la posición p, o su mezcla en cualquier proporción.

Los compuestos representados por la fórmula general (I) se convierten en las sales correspondientes mediante métodos conocidos. La sal es preferentemente una sal soluble en agua. Algunas sales adecuadas se pueden mostrar a modo de ejemplo mediante las sales con metales alcalinos (potasio, sodio, etc.), sales con metales alcalinotérreos (calcio, magnesio, etc.), la sal de amonio, sales con aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables (tetrametilamonio, trietilamina, metilamina, dimetilamina, ciclopentilamina, bencilamina, fenetilamina, piperidina, monoetanolamina, dietanolamina, tris(hidroximetil)aminometano, lisina, arginina, N-metil-D-glucamina, etc.), y sales de adición de ácido (sales de ácidos inorgánicos (clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, sulfato, fosfato, nitrato, etc.) y sales de ácidos orgánicos (acetato, trifluoroacetato, lactato, tartrato, oxalato, fumarato, maleato, benzoato, citrato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, toluenosulfonato, isetionato, glucuronato, gluconato, etc.)). Los compuestos representados por la fórmula general (I) y sus sales se pueden convertir en solvatos. Este solvato es preferentemente soluble en agua y tiene baja toxicidad. Algunos solvatos adecuados se pueden mostrar a modo de ejemplo mediante solvatos con, por ejemplo, agua o un disolvente de alcohol (por ejemplo, etanol).

El compuesto representado por la fórmula general (I) se puede usar como un profármaco que representa un compuesto que se convierte mediante una reacción in vivo, por ejemplo, mediante una enzima o ácido gástrico, en el compuesto representado por la fórmula general (I). Algunos profármacos de los compuestos con la fórmula general (I) se pueden mostrar mediante compuestos en los que - cuando el compuesto representado por la fórmula general (I) tiene un grupo hidroxilo - este grupo hidroxilo está acilado, alquilado, fosfatado, o borado (por ejemplo, compuestos proporcionados por acetilación, palmitoilación, propanoilación, pivaloilación, succinilación, fumarilación, alanilación o dimetilaminometilcarbonilación del grupo hidroxilo en los compuestos de la invención); otros ejemplos son compuestos proporcionados por la esterificación o amidación de un grupo carboxilo en un compuesto representado por la fórmula general (I) (por ejemplo, compuestos proporcionados por esterificación de etilo, esterificación de isopropilo, esterificación de fenilo, esterificación de carboximetilo, esterificación de dimetilaminometilo, esterificación de pivaloiloximetilo, esterificación de etoxicarboniloxietilo, esterificación de ftalidilo, esterificación de (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)metilo, esterificación de ciclohexiloxicarboniletilo, o metilamidación de un grupo carboxilo en un compuesto representado por la fórmula general (I)). Estos compuestos se pueden preparar mediante métodos conocidos. Además, el profármaco de un compuesto representado por la fórmula general (I) puede ser un hidrato o anhidro. El profármaco de un compuesto representado por la fórmula general (I) se convierte en condiciones fisiológicas en el compuesto representado por la fórmula general (I), como se describe en las páginas 163 a 198 de Molecular Design en el volumen 7 de Development of Medicines (Hirokawa Shoten Co., 1990). Además, los compuestos representados por la fórmula general (I) se pueden marcar con un isótopo (por eje ^__m^__2p^Ulo, 2H, 33H^l, ⁱ" 1C1^, l 133C^, '1 l44^C, 13 l3^mN, 15 l5^kN ^,, 15 l5^O, 1 '7'^O, 18 l8^O, 35^g18^p36^{q |}123^{, , .}125ⁿ3_i, y I).

[Métodos para producir los compuestos de la presente invención]

Los compuestos de la presente invención se pueden producir modificando y combinando adecuadamente métodos conocidos, por ejemplo, los métodos descritos en Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2a edición (Richard C. Larock, John Wiley & Sons Inc., 1999), o los métodos que se dan en los ejemplos.

Entre los compuestos representados por la fórmula general (I), los compuestos en los que el anillo 2 es un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros, es decir, los compuestos representados por la fórmula general (I-A)

[C14]

(en la fórmula, el anillo 2a representa un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros sin sustituir, mientras que los otros símbolos tienen las mismas definiciones que anteriormente), se pueden producir usando el siguiente esquema de reacción 1.

[C 15]

(En la fórmulas, T1 y T2 representan cada uno independientemente un grupo protector para el grupo amino (por ejemplo, el grupo bencilo (Bn), el grupo 4-metoxibencilo, y el grupo 3,4-dimetoxibencilo); X1 yX 2 representan cada uno independientemente un átomo de halógeno; anillo2-1 representa un anillo2a que se ha protegido mediante un grupo protector representado por T3 (por ejemplo, el grupo ferc-butoxicarbonilo (Boc) y el grupo benciloxicarbonilo (Cbz)) y los otros símbolos tienen las mismas definiciones que anteriormente.)

La reacción 1 en el esquema de reacción 1 se conoce y se lleva a cabo usando un compuesto con fórmula general (a) y un derivado de amina protegido, es decir, un compuesto representado por T1T2-NH (T1 y T2 en la fórmula tienen las mismas definiciones que se han indicado anteriormente) y realizando la reacción en un disolvente orgánico (por ejemplo, diclorometano, tetrahidrofurano, dioxano, dimetilformamida, dimetilacetamida, y 1 -metil-2-pirrolidona) en presencia de una base (por ejemplo, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, y N-metilmorfolina) a una temperatura de -20 °C a la temperatura ambiente.

La reacción 2 en el esquema de reacción 1 se conoce y se lleva a cabo usando un compuesto con fórmula general (b) y un compuesto representado por la fórmula general (II) y realizando la reacción en un disolvente orgánico (por ejemplo, dioxano, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dimetilformamida, dimetilacetamida y 1 -metil-2-pirrolidona) en presencia de una base (por ejemplo, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, y N-metilmorfolina) a una temperatura de -20 °C a 70 °C.

La reacción 3 en el esquema de reacción 1 se conoce y se lleva a cabo usando un compuesto representado por la fórmula general (c) y usando un reactivo metálico (por ejemplo, cinc, hierro, estaño, cloruro de estaño, cloruro de hierro, samario, indio, y borohidruro sódico-cloruro de níquel) en un disolvente miscible en agua (por ejemplo, etanol, metanol, tetrahidrofurano, y acetato de etilo) en presencia o ausencia de un ácido (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, cloruro de amonio, ácido acético, y formiato amónico) a una temperatura de 0 °C a 150 °C.

La reacción 4 en el esquema de reacción 1 se conoce y se lleva a cabo usando un compuesto representado por la fórmula general (d) y usando un reactivo (por ejemplo, 1,1'-carbonildiimidazol (CDI) y trifosgeno) en un disolvente orgánico (por ejemplo, tetrahidrofurano, dimetilformamida, y dimetilacetamida) en presencia o ausencia de una base (por ejemplo, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, y N-metilmorfolina) de una temperatura generada por enfriamiento en hielo a la temperatura de reflujo.

Las reacciones de desprotección para los grupos protectores en el esquema de reacción 1 se conocen y se pueden realizar mediante los métodos descritos a continuación. Algunos ejemplos aquí son (1) reacciones de desprotección basadas en hidrólisis alcalina, (2) reacciones de desprotección en condiciones ácidas, (3) reacciones de desprotección basadas en hidrogenólisis, (4) reacciones de desprotección para el grupo sililo, (5) reacciones de desprotección usando un metal, y (6) reacciones de desprotección usando un complejo metálico.

Estos métodos se describen específicamente continuación.

(1) La reacción de desprotección basada en hidrólisis alcalina se puede llevar a cabo, por ejemplo, en un disolvente orgánico (por ejemplo, metanol, tetrahidrofurano, y dioxano) de 0 °C a 40 °C usando un hidróxido de metal alcalino (por ejemplo, hidróxido sódico, hidróxido potásico, e hidróxido de litio), un hidróxido de metal alcalinotérreo (por ejemplo, hidróxido de bario e hidróxido de calcio), o un carbonato (por ejemplo, carbonato sódico y carbonato potásico), o una solución acuosa de los precedentes, o su mezcla.

(2) La reacción de desprotección en reacciones ácidas se puede llevar a cabo, por ejemplo, de 0 °C a 100 °C en presencia o ausencia de 2,2,2-trifluoroetanol, en un disolvente orgánico (por ejemplo, diclorometano, cloroformo, dioxano, acetato de etilo, metanol, alcohol isopropílico, tetrahidrofurano, y anisol) y en un ácido orgánico (por ejemplo, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido metanosulfónico, y p-tosilato) o un ácido inorgánico (por ejemplo, ácido clorhídrico y ácido sulfúrico) o su mezcla (por ejemplo, bromuro de hidrógeno/ácido acético). (3) La reacción de desprotección basada en hidrogenólisis se puede llevar a cabo, por ejemplo, de 0 °C a 200 °C en un disolvente (por ejemplo, un éter (por ejemplo, tetrahidrofurano, dioxano, dimetoxietano, y dietil éter), un alcohol (por ejemplo, metanol y etanol), un disolvente de benceno (por ejemplo, benceno y tolueno), una cetona (por ejemplo, acetona y metil etil cetona), un nitrilo (por ejemplo, acetonitrilo), una amida (por ejemplo, N,N-dimetilformamida), agua, acetato de etilo, ácido acético, o un disolvente mixto de dos o más de los precedentes) en presencia de un catalizador (por ejemplo, paladio-carbono, negro de paladio, hidróxido de paladio-carbono, óxido de platino, y níquel Raney) en una atmósfera de hidrógeno a presión normal o presión elevada o en presencia de formiato de amonio.

(4) La reacción de desprotección para el grupo sililo se puede llevar a cabo, por ejemplo, de 0 °C a 40 °C en un disolvente orgánico miscible en agua (por ejemplo, tetrahidrofurano y acetonitrilo) usando fluoruro de tetrabutilamonio. También se puede llevar a cabo, por ejemplo, de -10 °C a 100 °C en un ácido orgánico (por ejemplo, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido metanosulfónico, y p-tosilato) o un ácido inorgánico (por ejemplo, ácido clorhídrico y ácido sulfúrico) o su mezcla (por ejemplo, bromuro de hidrógeno/ácido acético). (5) La reacción de desprotección usando un metal se puede llevar a cabo, por ejemplo, de 0 °C a 40 °C en un disolvente ácido (por ejemplo, ácido acético, un tampón con un pH de 4,2 a 7,2, o una solución mixta de las soluciones precedentes con un disolvente orgánico tal como tetrahidrofurano) en presencia de polvo de cinc y según sea necesario mientras se aplican ultrasonidos.

(6) La reacción de desprotección usando un complejo metálico se puede llevar a cabo, por ejemplo, de 0 °C a 40 °C en un disolvente orgánico (por ejemplo, diclorometano, N,N-dimetilformamida, tetrahidrofurano, acetato de etilo, acetonitrilo, dioxano, y etanol), agua, o sus soluciones mixtas, usando un complejo metálico (por ejemplo, tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II), acetato de paladio(II), y cloruro de tris(trifenilfosfina)rodio(I)) en presencia de un agente de captura (por ejemplo, hidruro de tributilestaño, trietilsilano, dimedona, morfolina, dietilamina, y pirrolidona), un ácido orgánico (por ejemplo, ácido acético, ácido fórmico, y ácido 2-etilhexanoico) y/o una sal de ácido orgánico (por ejemplo, 2-etilhexanoato sódico y 2-etilhexanoato potásico) y en presencia o ausencia de un reactivo de tipo fosfina (por ejemplo, trifenilfosfina). Además de lo expuesto anteriormente, la reacción de desprotección también se puede llevar a cabo usando los métodos que se describen, por ejemplo, en T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, Nueva York, 1999.

El grupo protector para un grupo amino se puede mostrar a modo de ejemplo mediante el grupo benciloxicarbonilo, el grupo t-butoxicarbonilo, el grupo aliloxicarbonilo (Alloc), el grupo 1-metil-1-(4-bifenil)etoxicarbonilo (Bpoc), el grupo trifluoroacetilo, el grupo 9-fluorenilmetoxicarbonilo, el grupo bencilo (Bn), el grupo p-metoxibencilo, el grupo benciloximetilo (BOM), y el grupo 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEM).

Además de lo expuesto anteriormente, el grupo protector para un grupo amino puede ser cualquier grupo capaz de una eliminación fácil y selectiva y no se limita particularmente de otro modo. Por ejemplo, se pueden usar los grupos descritos en T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, Nueva York, 1999.

La reacción 5 en el esquema de reacción 1 se conoce y se lleva a cabo usando un compuesto con fórmula general (f) y un compuesto representado por la fórmula general (III-1) o la fórmula general (III-2) y realizando la reacción de la temperatura ambiente a 120 °C en un disolvente orgánico (por ejemplo, diclorometano y acetonitrilo) en presencia de una base (por ejemplo, piridina, trietilamina, y N,N-diisopropiletilamina), una sal de cobre (por ejemplo, acetato de cobre(II)), y un agente de secado (por ejemplo, tamices moleculares).

Entre los compuestos con fórmula general (I), los compuestos en los que el anillo 2 es un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros que está sustituido por de uno a tres -K-R2 en donde K representa C(O) y R2 representa un grupo alquenileno C2-4 que puede estar sustituido por halógeno, es decir, los compuestos representados por la formula general (I-B)

(en la fórmula, el anillo 2b representa un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros sustituido por -Kb-R2b; Kb representa -C(O)-; R2b representa un grupo alquileno C1-4 o alquinileno C2-4 que puede estar sustituido por halógeno y los otros símbolos tienen las mismas definiciones que anteriormente), se pueden producir usando un compuesto con la formula general (I- A), que se puede producir por el esquema de reacción 1 y un compuesto representado por la formula general (I-B-1)

[C 17]

Xb-C(O)-R2b (I-B-1)

(en la fórmula, Xb representa un átomo de halógeno y R2b tiene la misma definición que anteriormente) y llevando a cabo una reacción a una temperatura de 0 °C a temperatura ambiente en un disolvente orgánico (por ejemplo, diclorometano, cloroformo, dimetilformamida, dimetilacetamida, éter dietílico y tetrahidrofurano) en presencia de una base (por ejemplo, trietilamina, piridina, N,N- diisopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina y N- metilmorfolina).

Entre los compuestos con la formula general (I), los compuestos en los que el anillo 2 es un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros sustituido por al menos un -K-R2 en donde K representa C(O) y R2 representa un grupo alquenileno C2- 4 que puede estar sustituido por NR3R4, es decir, los compuestos con la formula general (I-C)

(en la formula, el anillo 2c representa un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros sustituido por -Kb-R2c; R2c representa un grupo alquinileno C2-4 que puede estar sustituido por NR3R4 y los otros símbolos tienen las mismas definiciones que anteriormente), se pueden producir haciendo reaccionar un compuesto representado por la formula general (I-C-2)

[C 20]

H

r 3 N ' R4 (l-C-2)

(todos los símbolos de la formula se definen como anteriormente) a de temperatura ambiente a 120 °C en un disolvente orgánico (por ejemplo, tetrahidrofurano, dioxano, acetonitrilo, dimetilformamida, dimetilacetamida y 1-metil-2- pirrolidona) con el compuesto obtenido haciendo reaccionar un compuesto representado por la formula general (I-A) con un compuesto representado por la formula general (I-C-1)

[C 19]

Xc'1-C (O) -R2c'1-Xc'2 (I-C-1)

(en la fórmula, cada uno de X ^{c 1}y X ^{c 2}representa independientemente un átomo de halógeno y R ^{2c 1}representa un grupo alquinileno C2-4) a o por debajo de 0 °C en un disolvente orgánico (por ejemplo, diclorometano, cloroformo, dimetilformamida, dimetilacetamida, éter dietílico y tetrahidrofurano) en presencia de una base (por ejemplo, trietilamina, piridina, W,W-diisopropiletilamina, 4- dimetilaminopiridinay W-metilmorfolina).

Entre los compuestos con la formula general (I), los compuestos en los que el anillo 2 es un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros sustituido por al menos un -K-R2 en donde K representa C(O) y R2 representa un grupo alquinileno C2-4 o alquinileno C2-4 que puede estar sustituido por COn R5R6, CO2R7 u OR8, es decir, los compuestos con la formula general (I-D)

(en la fórmula, el anillo 2d representa un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros sustituido por al menos un -Kb-R2d; R2d representa un grupo alquinileno C2-4 o alquinileno C2-4 que puede estar sustituido por CONR5R6, CO2R7 u OR8 y los otros símbolos tienen las mismas definiciones que anteriormente), se pueden producir usando un compuesto representado por la fórmula general (I-A) y un compuesto representado por la fórmula general (I-D-1) [C 22]

R2d-CO2H (I-D-1)

(R2d en la fórmula se define como anteriormente) y llevando a cabo la reacción de 0°C a la temperatura ambiente usando un agente de condensación (por ejemplo, 1,3-diciclohexilcarbodiimida (DCC), 1-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]carbodiimida (EDC), 1,1’-carbonildiimidazol (CDI), yoduro de 2-cloro-1 -metilpiridinio, y anhídrido cíclico de ácido 1-propanofosfónico (PPA)) en un disolvente orgánico (por ejemplo, cloroformo, diclorometano, dimetilformamida, dimetilacetamida, dietil éter, y tetrahidrofurano), o sin disolvente, en presencia o ausencia de una base (por ejemplo, trietilamina, piridina, N,N-diisopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina, y N-metilmorfolina) y con o sin el uso de 1-hidroxibenzotriazol (HOBt).

Los compuestos que se usan como materiales de partida en cada una de las reacciones de la presente Descripción, por ejemplo, de fórmula general (a), (II), (III-1), (III-2), (I-B-1), (I-C-1), (I-C-2) y (I-D-1), se conocen o se pueden producir fácilmente mediante métodos conocidos.

Para cada una de las reacciones de la presente Descripción, las reacciones acompañadas por aplicación de calor se pueden llevar a cabo usando un baño de agua, un baño de aceite, un baño de arena, o microondas, como será evidente para el experto en la materia.

Se puede usar un reactivo de fase sólida, que comprende el reactivo soportado sobre un polímero de alto peso molecular (por ejemplo, poliestireno, poliacrilamida, polipropileno, y polietilenglicol), según sea apropiado en las reacciones de la presente Descripción.

El producto de reacción en cada una de las reacciones de la presente Descripción se puede purificar mediante los medios de purificación habituales, por ejemplo, usando métodos tales como destilación a presión normal o a presión reducida, cromatografía líquida de alta resolución usando gel de sílice o silicato de magnesio, cromatografía en capa fina, resinas de intercambio iónico, resinas secuestradoras, cromatografía en columna, lavado, recristalización, etc. La purificación se puede llevar a cabo en cada reacción o se puede llevar a cabo después de la finalización de varias reacciones.

[Toxicidad]

Los compuestos de la presente invención tienen una toxicidad aceptablemente baja, por ejemplo, casi no tienen actividad inhibitoria de CYP y casi no tienen hepatotoxicidad, y de ese modo se pueden usar de forma segura como ingrediente farmacéutico activo.

[Aplicaciones para compuestos farmacéuticos]

Los compuestos de la presente invención tienen una actividad inhibidora selectiva de Btk y como resultado son útiles como agentes para prevenir y/o tratar enfermedades relacionadas con Btk, es decir, enfermedades en las que participan linfocitos B y/o mastocitos, por ejemplo, enfermedades alérgicas, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, enfermedades tromboembólicas, cánceres, y enfermedades de injerto frente al hospedador. Los compuestos de la presente invención también ejercen una acción inhibidora selectiva en la activación de linfocitos B y como resultado también son eficaces como inhibidores de la activación de linfocitos B. Las enfermedades alérgicas en la presente invención se pueden mostrar a modo de ejemplo mediante alergias, anafilaxis, conjuntivitis alérgica, rinitis alérgica, y dermatitis alérgica.

Las enfermedades autoinmunes en la presente invención se pueden ejemplificar con enfermedad inflamatoria del intestino, artritis, lupus, artritis reumatoide, artritis psoriática, osteoartritis, enfermedad de Still, artritis juvenil, diabetes de tipo I, miastenia gravis, tiroiditis de Hashimoto, tiroiditis de Ord, enfermedad de Basedow, síndrome de Sjogren, esclerosis múltiple, síndrome de Guillain-Barré, encefalomielitis diseminada aguda, enfermedad de Addison, síndrome de opsoclono-mioclono, espondilitis anquilosante, síndrome de anticuerpos antifosfolípidos, anemia aplásica, hepatitis autoinmune, enfermedad celíaca, síndrome de Goodpasture, púrpura trombocitopénica idiopática, neuritis óptica, esclerodermia, cirrosis biliar primaria, enfermedad de Reiter, arteritis de Takayasu, arteritis temporal, anemia hemolítica autoinmune cálida, granuloma de Wegener, psoriasis, alopecia universal, enfermedad de Behget, síndrome de fatiga crónica, disautonomía, endometriosis, cistitis intersticial, miotonía, vulvodinia, y lupus sistémico eritematoso.

Las enfermedades inflamatorias en la presente invención se pueden ejemplificar con asma, apendicitis, blefaritis, bronquiolitis, bronquitis, bursitis, cervicitis, colangitis, colecistitis, colitis, conjuntivitis, cistitis, dacrioadenitis, dermatitis, dermatomiositis, encefalitis, endocarditis, endometritis, enteritis, epicondilitis, epididimitis, fascitis, fibrositis, gastritis, gastroenteritis, hepatitis, hidradenitis supurativa, laringitis, mastitis, meningitis, mielitis, miocarditis, miositis, nefritis, ooforitis, orquitis, osteítis, pancreatitis, parotiditis, pericarditis, peritonitis, faringitis, pleuritis, flebitis, neumonía, proctitis, prostatitis, pielonefritis, rinitis, salpingitis, sinusitis, estomatitis, sinovitis, tendinitis, amigdalitis, uveítis, vaginitis, vasculitis y vulvitis.

Las enfermedades tromboembólicas en la presente invención se pueden ejemplificar con infarto de miocardio, angina de pecho, reoclusión después de angioplastia, reestenosis después de angioplastia, reoclusión después de revascularización aortocoronaria, reestenosis después de revascularización aortocoronaria, apoplejía, isquemia transitoria, trastornos oclusivos de arterias periféricas, embolia pulmonar y trombosis venosa profunda.

En la presente invención, los cánceres incluyen linfomas no Hodgkin, entre los que son particularmente adecuados los linfomas no Hodgkin de linfocitos B, por ejemplo, linfoma de Burkitt, linfoma relacionado con SIDA, linfoma de linfocitos B de zona marginal (linfoma de linfocitos B de zona marginal nodal, linfoma de linfocitos B de zona marginal extranodal y linfoma de linfocitos B de zona marginal esplénica), linfoma de linfocitos B grandes y difusos, linfoma de efusión primaria, granulomatosis linfomatoide, linfoma folicular, leucemia linfocítica crónica de linfocitos B, leucemia prolinfocítica de linfocitos B, leucemia linfoplasmocítica/macroglobulinemia de Waldenstrom, plasmocitoma, linfoma de células del manto, linfoma de linfocitos B grandes mediastínico, linfoma de linfocitos B grandes intravascular, y leucemia de células peludas. Además del linfoma no Hodgkin, los cánceres en la presente invención incluyen tumores endocrinos pancreáticos, por ejemplo, insulinoma, gastrinoma, glucagonoma, somatostatinoma, VIPoma, PPoma, y GRFoma.

Un compuesto de la presente invención se puede administrar por sí mismo o se puede administrar como una preparación combinada en combinación con otro fármaco con el fin de

1) suplementar y/o aumentar el efecto profiláctico y/o terapéutico del compuesto,

2) mejorar la farmacocinética y la absorción y reducir la dosis del compuesto, y/o

3) reducir las reacciones adversas del compuesto.

La preparación combinada de un compuesto de la presente invención con otro fármaco se puede administrar en forma de un agente combinado en el que ambos componentes se combinan en una única formulación o se pueden administrar como formulaciones separadas. La administración como formulaciones separadas incluye administración simultánea y administración en momentos diferentes. En el caso de administración en momentos diferentes, el compuesto de la presente invención se puede administrar primero seguido por la administración del otro fármaco, o el otro fármaco se puede administrar en primer lugar seguido por la administración del compuesto de la presente invención. El mismo modo de administración se puede usar para cada método o se pueden usar diferentes modos de administración.

No hay limitación en particular sobre las enfermedades que se pueden someter a la prevención y/o el tratamiento con la preparación combinada mencionada anteriormente, y esta preparación combinada se puede usar con cualquier enfermedad con la que el efecto de prevención y/o tratamiento del compuesto de la presente invención se suplemente y/o mejore.

Este otro fármaco para suplementar y/o potenciar el efecto profiláctico y/o terapéutico de los compuestos de la presente invención frente a enfermedades alérgicas se puede ejemplificar con antihistamínicos, antagonistas de leucotrienos, fármacos antialérgicos, antagonistas del receptor de tromboxano A2, inhibidores de la tromboxano sintasa y esteroides.

El otro fármaco para suplementar y/o potenciar el efecto profiláctico y/o terapéutico de los compuestos de la presente invención frente a enfermedades autoinmunes se puede ejemplificar con inmunosupresores; esteroides; fármacos antirreumáticos modificados desde la enfermedad; inhibidores de elastasa; agonistas de receptores de cannabinoide-2; prostaglandinas; inhibidores de la prostaglandina sintasa; inhibidores de fosfodiesterasa; inhibidores de metaloproteasas; inhibidores de moléculas de adhesión; agentes de proteínas anti-citoquina, tales como agentes anti-TNF-a, agentes anti-IL-1, y agentes anti-IL-6; inhibidores de citoquinas; antiinflamatorios no esteroideos; y anticuerpos anti-CD20.

El otro fármaco para suplementar y/o potenciar el efecto profiláctico y/o terapéutico de los compuestos de la presente invención frente a enfermedades inflamatorias se puede ejemplificar con esteroides, inhibidores de elastasa, agonistas receptores de cannabinoide-2, prostaglandinas, inhibidores de la prostaglandina sintasa, inhibidores de fosfodiesterasa, inhibidores de metaloproteasas, inhibidores de moléculas de adhesión, antileucotrienos, agentes anticolinérgicos, antagonistas del receptor de tromboxano A2, inhibidores de la tromboxano sintasa, derivados de xantina, agentes expectorantes, antibacterianos, antihistamínicos, agentes de proteína anticitoquina, inhibidores de citoquina, agentes de forskolina, inhibidores de liberación de mediadores, y antiinflamatorios no esteroideos.

El otro fármaco para suplementar y/o potenciar el efecto profiláctico y/o terapéutico de los compuestos de la presente invención frente a enfermedades tromboembólicas se puede ejemplificar con agentes trombolíticos, heparina, heparinoides, heparinas de bajo peso molecular, warfarina, inhibidores de trombina, inhibidores del factor Xa, antagonistas del receptor de ADP, e inhibidores de ciclooxigenasa.

El otro fármaco para suplementar y/o potenciar el efecto profiláctico y/o terapéutico de los compuestos de la presente invención frente a linfomas no Hodgkin se puede ejemplificar con agentes de alquilación, antimetabolitos, antibióticos anticáncer, alcaloides vegetales, hormonas, compuestos de platino, anticuerpos anti-CD20, y otros agentes anticáncer.

Los antihistamínicos se pueden ejemplificar con clorhidrato de azelastina, ebastina, clorhidrato de epinastina, fumarato de emedastina, auranofina, oxatomida, clorhidrato de olopatadina, maleato de dl-clorfeniramina, fumarato de clemastina, fumarato de ketotifeno, cimetidina, dimenhidrinato, clorhidrato de difenhidramina, clorhidrato de ciproheptadina, clorhidrato de cetirizina, desloratadina, terfenadina, famotidina, clorhidrato de fexofenadina, bepotastina, besilato de bepotastina, mizolastina, mequitazina, furoato de mometasona, ranitidina, clorhidrato de ranitidina, loratadina, clorhidrato de prometazina y clorhidrato de homoclorciclicina.

Los antagonistas de leucotrieno se pueden ejemplificar con hidrato de pranlukast, montelukast sódico, zafirlukast, ablukast, pobilukast, sulukast, iralukast sódico, verlukast, ritolukast, cinalukast, pirodomast, tomelukast, y doqualast. Los fármacos antialérgicos se pueden ejemplificar con amlexanox, clorhidrato de azelastina, israpafant, ibudilast, imitrodast sódico, ebastina, clorhidrato de epinastina, fumarato de emedastina, oxatomida, clorhidrato de ozagrel, clorhidrato de olopatadina, ácido cromoglícico, cromoglicato sódico, fumarato de ketotifeno, seratrodast, clorhidrato de cetirizina, tosilato de suplatast, tazanolast, terfenadina, hidrato de domitrobán y calcio, tranilast, nedocromilo, fexofenadina, clorhidrato de fexofenadina, pemirolast potásico, mequitazina, ramatrobán, repirinast, y loratadina. Los antagonistas de receptor de tromboxano A2 se pueden ejemplificar con seratrodast, hidrato de domitrobán y calcio, y ramatrobán.

Los inhibidores de la tromboxano sintasa se pueden ejemplificar con imitrodast sódico y clorhidrato de ozagrel. Los esteroides se pueden ejemplificar con amcinonida, succinato de hidrocortisona y sodio, succinato de prednisolona y sodio, succinato de metilprednisolona y sodio, ciclesonida, difluprednato, propionato de betametasona, dexametasona, deflazacort, triamcinolona, acetónido de triamcinolona, halcinonida, palmitato de dexametasona, hidrocortisona, pivalato de flumetasona, butilacetato prednisolona, budesonida, sulfato de prasterona, furoato de mometasona, fluocinonida, acetónido de fluocinolona, fludroxicortida, flunisolida, prednisolona, propionato de alclometasona, propionato de clobetasol, propionato de dexametasona, propionato de deprodona, propionato de fluticasona, propionato de beclometasona, betametasona, metilprednisolona, suleptanato de metilprednisolona, succinato de metilprednisolona y sodio, fosfato de dexametasona y sodio, fosfato de hidrocortisona y sodio, fosfato de prednisolona y sodio, valerato de diflucortolona, valerato de dexametasona, valerato de betametasona, valerato acetato de prednisolona, acetato de cortisona, acetato de diflorasona, acetato de dexametasona, acetato de triamcinolona, acetato de parametasona, acetato de halopredona, acetato de fludrocortisona, acetato de prednisolona, acetato de metilprednisolona, butirato de clobetasona, butirato de hidrocortisona, butirato propionato de hidrocortisona, butirato propionato de betametasona.

Los agentes inmunosupresores se pueden ejemplificar con azatioprina, ascomicina, everolimus, salazosulfapiridina, ciclosporina, ciclofosfamida, sirolimus, tacrolimus, bucillamina, metotrexato, y leflunomida.

Los fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad se pueden ejemplificar con D-penicilamina, actarit, auranofina, salazosulfapiridina, hidroxicloroquina, bucillamina, metotrexato, leflunomida, lobenzarit sódico, aurotioglucosa, y aurotiomalato sódico.

Los inhibidores de elastasa se pueden ejemplificar con ONO-5046, ONO-6818, MR-889, PBI-1101, EPI-HNE-4, R-665, ZD-0892, ZD-8321, GW-311616, DMP-777, L-659286, L-680833, L-683845, y AE-3763.

Las prostaglandinas (abreviadas en lo sucesivo como "PG") se pueden ejemplificar con fármacos de PGE1 (ejemplos: alprostadilo alfadex, alprostadilo), fármacos de PGI2 (ejemplo: beraprost sódico), agonistas de receptor de PG, y antagonistas de receptor de PG. El receptor de PG receptor se puede ejemplificar con receptores de PGE (EP1, EP2, EP3, y EP4), receptores de PGD (DP, CRTH2), receptores de PGF (f P), receptores de PGI2 (IP), y receptores de TX (TP).

Los inhibidores de la prostaglandina sintasa se pueden ejemplificar con salazosulfapiridina, mesalazina, olsalazina, ácido 4-aminosalicílico, JTE-522, auranofina, carprofeno, difenpiramida, flunoxaprofeno, flurbiprofeno, indometacina, ketoprofeno, lornoxicam, loxoprofeno, meloxicam, oxaprozina, parsalmida, piproxeno, piroxicam, cinamato de piroxicam, zaltoprofeno, y pranoprofeno.

Los inhibidores de la fosfodiesterasa se pueden ejemplificar con rolipram, cilomilast, Bayl9-8004, NIK-616, roflumilast (A-217), cipamfilina (BRL-61063), atizoram (CP-80633), ONO-6126, SCH-351591, YM-976, V-11294A, PD-168787, D-4396, e IC-485.

Los inhibidores de molécula de adhesión se pueden ejemplificar con antagonista de a4 integrina.

Los agentes anti-TNF- a se pueden ejemplificar con anticuerpos anti-TNF-a, receptor de TNF-a soluble, anticuerpos de receptor anti-TNF-a, y proteína de unión a TNF-a soluble y en particular por infliximab y etanercept.

Los agentes anti-IL-1 se pueden ejemplificar con anticuerpos anti-IL-1, receptor soluble de IL-1, anticuerpos anti-IL-1Ra y/o anticuerpos anti-receptor de IL-1 y en particular con anakinra.

Los agentes anti-IL-6 se pueden ejemplificar con anticuerpos anti-IL-6, receptor soluble de IL-6, anticuerpos anti receptor de IL-6 y en particular con tocilizumab.

Los inhibidores de citoquina se pueden ejemplificar con tosilato de suplatast, T-614, RS-31747, y sonatimod.

Los agentes anticolinérgicos se pueden ejemplificar con trihexifenidilo, clorhidrato de trihexifenidilo, clorhidrato de biperideno, y clorhidrato de biperideno.

Los derivados de xantina se pueden ejemplificar con aminofilina, teofilina, doxofilina, sipamfilina, y diprofilina.

Los expectorantes se pueden ejemplificar con disolventes de amoniaco foeniculado, bicarbonato sódico, clorhidrato de bromhexina, carbocisteína, clorhidrato de ambroxol, clorhidrato de metilcisteína, acetilcisteína, clorhidrato de etil L-cisteína, y tiloxapol.

Los antibacterianos se pueden ejemplificar con cefuroxima sódica, trihidrato de meropenem, sulfato de netilmicina, sulfato de sisomicina, ceftibuteno, ^pA-1806, IB-367, tobramicina, PA-1420, doxorrubicina, sulfato de astromicina, y clorhidrato de cefetamet pivoxilo.

Los inhibidores de liberación de mediador se pueden ejemplificar con tranilast, cromoglicato sódico, amlexanox, repirinast, ibudilast, dazanolast, y pemirolast potásico.

Los agentes trombolíticos se pueden ejemplificar con alteplasa, uroquinasa, tisoquinasa, nasaruplasa, nateplasa, t-PA, pamiteplasa, monteplasa, prouroquinasa, y estreptoquinasa.

Los heparinoides se pueden ejemplificar con fondaparinux.

Las heparinas de bajo peso molecular se pueden ejemplificar con danaparoid sódico, enoxaparina (sódica), nadroparina cálcica, bemiparina (sódica), reviparina (sódica), y tinzaparina (sódica).

El inhibidor de trombina se puede ejemplificar con argatrobán, ximelagatrán, melagatrán, dabigatrán, bivalirudina, lepirudina, hirudina, y desirudina.

Los antagonistas del receptor de ADP se pueden ejemplificar con clorhidrato de ticlopidina y sulfato de clopidogrel. Los inhibidores de ciclooxigenasa se pueden ejemplificar con aspirina.

Los agentes de alquilación se pueden ejemplificar con clorhidrato de N-óxido de mostaza de nitrógeno, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalán, tiotepa, carbocuona, busulfán, clorhidrato de nimustina, dacarbazina, y ranimustina.

Los antimetabolitos se pueden ejemplificar con metotrexato, mercaptopurina, ribósido de 6-mercaptopurina, fluorouracilo, tegafur, tegafur uracilo, carmofur, doxifluridina, citarabina, enocitabina, tegafur gimestat otastat potásico, clorhidrato de gemcitabina, ocfosfato de citarabina, clorhidrato de procarbazina, e hidroxicarbamida.

Los antibióticos anticáncer se pueden ejemplificar con actinomicina D, mitomicina C, clorhidrato de daunorrubicina, clorhidrato de doxorrubicina, clorhidrato de aclarrubicina, neocarzinostatina, clorhidrato de pirarrubicina, epirubicina (clorhidrato), clorhidrato de idarrubicina, cromomicina A3, bleomicina (clorhidrato), sulfato de peplomicina, terarrubicina, y estimalámero de zinostatina.

Los alcaloides vegetales se pueden ejemplificar con sulfato de vinblastina, sulfato de vincristina, sulfato de vindesina, clorhidrato de irinotecán, etopósido, flutamida, tartrato de vinorelbina, hidrato de docetaxel, y paclitaxel.

Las hormonas se pueden ejemplificar con estramustina fosfato sódico, mepitiostano, epitiostanol, acetato de goserelina, fosfestrol (fosfato de dietilestilbestrol), citrato de tamoxifeno, citrato de toremifeno, hidrato de clorhidrato de fadrozol, acetato de medroxiprogesterona, bicalutamida, acetato de leuprorelina, anastrozol, y exemestano. Los compuestos de platino se pueden ejemplificar con carboplatino, cisplatino, y nedaplatino.

Los anticuerpos anti-CD-20 se pueden ejemplificar con rituximab, ibritumomab, y ocrelizumab.

Los otros agentes anticáncer se pueden ejemplificar con L-asparaginasa, acetato de octreótido, porfímero sódico, y acetato de mitoxantrona.

La preparación combinada que comprende una combinación con un compuesto de la presente invención no solamente incluye las preparaciones combinadas descubiertas hasta la fecha, sino que también incluye preparaciones combinadas que se puedan descubrir en el futuro.

Los compuestos de la presente invención se administran por lo general por vía sistémica o por vía local como un componente farmacéuticamente eficaz es una forma oral o parenteral. Las formulaciones orales se pueden ejemplificar con líquidos para administración oral (por ejemplo, elixires, jarabes, formulaciones con base de agua farmacéuticamente aceptables, suspensiones, y emulsiones) y sólidos para administración oral (por ejemplo, comprimidos (incluyendo comprimidos sublinguales y comprimidos de desintegración por vía oral), píldoras, cápsulas (incluyendo cápsulas duras, cápsulas blandas, cápsulas de gelatina, y microcápsulas), polvos, gránulos, y pastillas para chupar). Las formulaciones parenterales se pueden ejemplificar con soluciones (por ejemplo, inyectables (por ejemplo, inyectables subcutáneos, inyectables intravenosos, inyectables intramusculares, inyectables por vía intraperitoneal, y formulaciones de goteo), gotas oftálmicas (por ejemplo, gotas oftálmicas acuosas (por ejemplo, gotas oftálmicas acuosas, suspensiones de gotas oftálmicas acuosas, gotas oftálmicas viscosas, y gotas oftálmicas solubilizadas) y gotas oculares no acuosas (por ejemplo, gotas oculares no acuosas y suspensiones de gotas oftálmicas no acuosas)), agentes tópicos (por ejemplo, pomadas (por ejemplo, ungüentos oftálmicos)), y gotas para los oídos). Estas formulaciones pueden ser formulaciones de liberación controlada tales como formulaciones de liberación rápida, formulaciones de liberación sostenida, etc. Estas formulaciones se pueden producir con métodos conocidos, por ejemplo, con los métodos que se describen en la farmacopea japonesa.

Los líquidos para administración oral dentro del ámbito de formulaciones orales se pueden producir, por ejemplo, por disolución, suspensión, o emulsión del componente eficaz en un diluyente de uso común (por ejemplo, agua purificada, etanol, o una mezcla de los mismos). Estas formulaciones líquidas también pueden contener, por ejemplo, un agente humectante, agente de suspensión, agente emulgente, edulcorante, aromatizante, fragancia, conservante, tampón, etc.

Los sólidos para administración oral dentro del ámbito de formulaciones orales se pueden preparar mezclando el componente eficaz, por ejemplo, con un vehículo (por ejemplo, lactosa, manitol, glucosa, celulosa microcristalina, y almidón), un aglutinante (por ejemplo, hidroxipropil celulosa, polivinilpirrolidona, y metasilicato aluminato de magnesio), un agente disgregante (por ejemplo, glicolato de celulosa y calcio), un lubricante (por ejemplo, estearato de magnesio), un estabilizante, un adyuvante de disolución (por ejemplo, ácido glutámico y ácido aspártico), etc y se pueden formular de acuerdo con métodos convencionales. Si fuera necesario, se puede realizar un revestimiento con un agente de revestimiento (por ejemplo, azúcar, gelatina, hidroxipropil celulosa, y ftalato de hidroxipropil metil celulosa) y se pueden aplicar dos o más capas.

Dentro del ámbito de las formulaciones parenterales, un agente tópico se puede producir usando un método conocido o una formulación de uso común. Por ejemplo, una pomada se puede preparar mediante la incorporación o fusión del componente eficaz en una base. La base de pomada se selecciona entre bases de pomada conocidas o una base de pomada de uso común. Por ejemplo, se puede usar una selección individual a partir de lo que sigue a continuación o una mezcla de dos o más selecciones a partir de lo que sigue a continuación: ácidos grasos superiores y ésteres de ácidos grasos superiores (por ejemplo, ácido adípico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido oleico, ésteres de adipato, ésteres de miristato, ésteres de palmitato, ésteres de estearato, y ésteres de oleato), ceras (por ejemplo, cera de abejas, esperma de ballena, y ceresina), tensioactivos (por ejemplo, ésteres de fosfato de polioxietilen alquil éter), alcoholes superiores (por ejemplo, cetanol, alcohol estearílico, y alcohol cetoestearílico), aceites de silicona (por ejemplo, dimetilpolisiloxano), hidrocarburos (por ejemplo, vaselina hidrófila, vaselina blanca, lanolina purificada, y parafina líquida), glicoles (por ejemplo, etilenglicol, dietilenglicol, propilenglicol, polietilenglicol, y macrogol), aceites vegetales (por ejemplo, aceites de ricino, aceite de oliva, aceite de sésamo, y aceite trementina), aceites animales (por ejemplo, aceite de visón, aceite de yema de huevo, escualeno, y escualeno), agua, promotores de absorción, y agentes antiirritantes. También se puede incorporar un agente humectante, conservante, estabilizante, antioxidante, fragancia, etc.

Los agentes inyectables dentro del ámbito de las formulaciones parenterales incluyen soluciones, suspensiones, y emulsiones así como agentes inyectables sólidos usados por disolución o suspensión en un disolvente en el momento de su uso. Por ejemplo, se puede usar un agente inyectable en el que el componente eficaz se disuelve, suspende, o emulsiona en un disolvente. Por ejemplo, para el disolvente se puede usar agua destilada para inyección, solución salina fisiológica, un aceite vegetal, propilenglicol, polietilenglicol, un alcohol tal como etanol, o una combinación de los agentes mencionados anteriormente. El agente inyectable también puede contener un estabilizante, un adyuvante de disolución (por ejemplo, ácido glutámico, ácido aspártico, y Polisorbato 80 (marca registrada)), un agente de suspensión, un agente emulgente, un agente calmante, un tampón, un conservante, etc. El agente inyectable se puede esterilizar en la etapa final o se puede fabricar usando procesamiento aséptico. El agente inyectable también se puede fabricar como una forma sólida estéril, por ejemplo, un producto liofilizado, y se puede usar después de la disolución en agua destilada para inyección o en otro disolvente, que es estéril o se esteriliza antes de su uso.

La dosis cuando se usa un compuesto de la presente invención como un componente eficaz en un fármaco se puede seleccionar según sea apropiado dependiendo, por ejemplo, de los síntomas, edad, tipo de formulación, etc. En el caso de una formulación oral, preferentemente de 1 mg a 100 mg y más preferentemente de 5 mg a 30 mg se pueden administrar de una a varias veces al día (por ejemplo, de una a tres veces). En el caso de las gotas oftálmicas, se pueden infundir de una a varias gotas por administración de una solución oftálmica con una concentración preferentemente de un 0,000001 % aun 5 % (p/v) y más preferentemente de un 0,00001 % a un 0,05 % (p/v) de una a varias veces al día (por ejemplo, de una a ocho veces). En el caso de una pomada oftálmica, una pomada oftálmica con una concentración preferentemente de un 0,000001 % a un 5 % (p/p) y más preferentemente de un 0,00001 % a un 0,05 % (p/p) se puede aplicar de una a varias veces al día (por ejemplo, de una a cuatro veces).

Por supuesto, como se ha indicado anteriormente, la dosis dependerá de diversas condiciones y como resultado se producirán casos en los que será suficiente una cantidad inferior a la de los niveles de dosificación mencionados anteriormente o en los que estos intervalos se deben superar.

Ejemplos

La presente invención se describe a continuación usando ejemplos no limitantes. Sin embargo, los compuestos divulgados a continuación no son ejemplos de la presente invención si sus estructuras quedan fuera de la fórmula general (I) de la reivindicación 1 adjunta.

Los disolventes que se dan entre paréntesis para TLC y en las secciones de separación cromatográfica indican los disolventes de elución o los disolventes de revelado usados, y las proporciones son relaciones en volumen.

A menos que se indique específicamente otra cosa, los datos de RMN son datos para RMN 1H.

El disolvente que se usa en la medición se da entre paréntesis en la sección de RMN.

Los nombres de los compuestos que se usan en la presente Descripción son generalmente nombres generados basándose en las reglas de nomenclatura de la IUPAC o generados usando ACD/Name (marca registrada), un programa de ordenador de Advanced Chemistry Development, Inc., que lleva a cabo la nomenclatura basándose en las reglas de la IUPAC.

Ejemplo 1

N,N-dibencil-6-cloro-5-nitropirimidina-4-amina

Se añadió gota a gota dibencilamina (10,2 g) en una solución de diclorometano (30 ml) en un baño de hielo a una solución en diclorometano (70 ml) de 4,6-dicloro-5-nitropirimidina (10 g). Esto fue seguido de la adición de trietilamina (14,4 ml) y agitación durante 1 hora. A continuación, se añadió agua a la mezcla de reacción y la fase orgánica se lavó posteriormente con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se secó sobre sulfato sódico anhidro. El disolvente se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título (19,2 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,50 (hexano : acetato de etilo = 7 : 1).

Ejemplo 2

3-{[6-(dibencilamino)-5-nitropirimidin-4-il]amino}azetidina-1-carboxilato de ferc-butilo

El compuesto (10,3 g) preparado en el Ejemplo 1 y 3-aminoazetidina-1-carboxilato de ferc-butilo (5,0 g) se disolvieron en dioxano (58 ml); se añadió trietilamina (8,1 ml); y a continuación se llevó cabo una agitación durante 5 horas a 50 °C. La mezcla de reacción se devolvió a temperatura ambiente; a continuación se retiró el disolvente por destilación; se añadió agua; y se llevó a cabo una extracción con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se secó posteriormente sobre sulfato sódico anhidro y a continuación se retiró el disolvente por destilación. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice para obtener el compuesto del título (10,8 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,40 (hexano : acetato de etilo = 4 : 1).

Ejemplo 3

3-{[5-amino-6-(dibencilamino)pirimidin-4-il]amino}azetidina-1-carboxilato de ferc-butilo

Una solución de acetato de etilo (360 ml) del compuesto (17,5 g) preparado en el Ejemplo 2 se añadió gota a gota a una mezcla de cinc (23,3 g) y una solución acuosa 3,0 M de cloruro de amonio (11,4 g) en un baño de hielo y la temperatura se aumentó inmediatamente a la temperatura ambiente. Después de agitar durante 2 horas, la mezcla de reacción se filtró sobre Celite (nombre comercial) y a continuación se retiró el disolvente por destilación. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice para obtener el compuesto del título (12,4 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,69 (hexano : acetato de etilo = 1 : 1).

Ejemplo 4

3-[6-(dibencilamino)-8-oxo-7,8-dihidro-9H-purin-9-il]azetidina-1-carboxilato de ferc-butilo

El compuesto (8,4 g) preparado en el Ejemplo 3 y 1,1'-carbonildiimidazol (5,9 g) se disolvieron en tetrahidrofurano (120 ml) seguido de agitación durante 15 horas a 60 °C. Después de que el disolvente se hubiera destilado de la mezcla de reacción, se añadió agua y se llevó a cabo una extracción con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se secó sobre sulfato sódico anhidro y a continuación se retiró el disolvente por destilación. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice para obtener el compuesto del título (7,8 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,28 (hexano : acetato de etilo = 2 : 1).

Ejemplo 5

3-(6-amino-8-oxo-7,8-dihidro-9H-purin-9-il)azetidina-1-carboxilato de ferc-butilo

El compuesto (7,8 g) preparado en el Ejemplo 4 se disolvió en metanol (240 ml) y acetato de etilo (50 ml); se añadió catalizador de Pearlman al 20 % (Pd(OH)2/C) (8,0 g, 100 % en peso); se llevó a cabo un reemplazo con hidrógeno; y se llevó a cabo una agitación durante 7,5 horas a 60 °C. La mezcla de reacción se filtró sobre Celite (nombre comercial) y el disolvente se retiró por destilación para obtener el compuesto del título (5,0 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,50 (acetato de etilo).

Ejemplo 6

3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-dihidro-9H-purin-9-il]azetidina-1-carboxilato de ferc-butilo

Se añadieron ácido p-fenoxifenilbórico (2,1 g), acetato de cobre(II) (1,48 g), tamiz molecular de 4A (2,5 g), y piridina (0,82 ml) a temperatura ambiente a una suspensión en diclorometano (200 ml) del compuesto (2,5 g) preparado en el Ejemplo 5, seguido de agitación durante 21 horas. La solución de reacción se filtró sobre Celite (nombre comercial) y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice para obtener el compuesto del título (1,3 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,18 (hexano : acetato de etilo = 1 : 1).

Ejemplo 7

Diclorhidrato de 6-amino-9-azetidin-3-il-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

Se añadió ácido clorhídrico/dioxano 4 N (13 ml) a temperatura ambiente a una suspensión en metanol (13 ml) del compuesto (1,3 g, 2,76 mmol, 1,0 equivalente) preparado en el Ejemplo 6 y se llevó a cabo una agitación durante 1 hora. A continuación se retiró el disolvente por destilación para obtener el compuesto del título (1,5 g) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación.

TLC: Rf 0,50 (diclorometano : metanol : amoníaco acuoso al 28 % = 9 : 1 : 0,1).

Ejemplo 8

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

Se añadió trietilamina (1,1 ml) a una suspensión en diclorometano (16 ml) del compuesto (1,5 g) preparado en el ejemplo 7 y después se añadió gota a gota una solución en diclorometano (10 ml) de cloruro acriloílo (0,32 ml) a -10 °C. Se destiló el disolvente de la mezcla de reacción, seguido de la adición de agua y extracción con cloruro de metileno. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio y se secó sobre sulfato de sodio anhídrido y el disolvente se eliminó por destilación. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice para obtener el compuesto del título el compuesto del título (0,8 g) que tiene los valores de propiedad física indicados a continuación.

TLC: Rf 0,43 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla) : 84,47-4,61, 4,83-4,88, 5,06-5,11, 5,37-5,47, 5,70-5,74, 6,21-6,30, 6,36-6,43, 7,07-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Ejemplo 8 (1) a ejemplo 8 (22)

Los compuestos a modo de ejemplo dados a continuación se obtuvieron siguiendo la misma plantilla de procedimiento que en el Ejemplo 1 ^ Ejemplo 2 ^ Ejemplo 3 ^ Ejemplo 4 ^ Ejemplo 5 ^ Ejemplo 6 ^ Ejemplo 7 ^ Ejemplo 8, usando 4,6-dicloro-5-nitropirimidina, usando 3-aminoazetidin-1-carboxilato de ferc-butilo o el derivado de amina correspondiente en su lugar, usando cloruro de acriloílo o el cloruro ácido correspondiente en su lugar y usando ácido p-fenoxifenilbórico o el ácido bórico correspondiente en su lugar.

Ejemplo 8 (1)

9-[(3R)-1-acriloil-3-piperidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,33 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla) : 81,64-1,78, 1,90-2,12, 2,55-2,80, 3,10-3,22, 3,63-3,74, 3,99-4,12, 4,40-4,55, 4,73-4,82, 5,66 5,72, 6,26-6,31, 6,53-6,65, 7,07-7,22, 7,36-7,44, 8,23.

Ejemplo 8 (2)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3-clorofenoxi)-3-metoxifenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8- ona

TLC: Rf 0,25 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh) : 83,88, 4,47-4,62, 4,83-4,89, 5,07-5,12, 5,39-5,48, 5,70-5,74, 6,21-6,30, 6,37-6,43, 6,87-6,91, 6,95-7,00, 7,08-7,13, 7,24-7,29, 8,27.

Ejemplo 8 (3)

9-(1-acriloil-4-piperidinil)-6-amino-7-(4- fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,38 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh) : 81,88-1,96, 2,59-2,80, 3,15-3,27, 4,13-4,22, 4,48, 4,58-4,69, 4,85-4,95, 5,69-5,73, 6,27-6,34, 6,59-6,68, 7,07-7,15, 7,17-7,22, 7,34-7,44, 8,21.

Ejemplo 8 (4)

9-[(3R)-1-acriloil-3-pirrolidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,60 (cloroformo : metanol : amoniaco acuoso = 80 : 10 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 82,21-2,46, 2,82-3,08, 3,53-3,76, 3,89-4,36, 4,40-4,59, 5,11-5,32, 5,64-5,77, 6,34-6,58, 7,04 7,24, 7,34-7,49, 8,18-8,26.

Ejemplo 8 (5)

9-[(3S)-1-acriloil-3-piperidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,71 (cloroformo : metanol : amoniaco acuoso = 80 : 10 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 81,52-1,80, 1,88-2,17, 2,51-2,84, 3,07- 3,26, 3,59-3,76, 3,94-4,16, 4,38-4,63, 4,66-4,90, 5,61 5,80, 6,21-6,40, 6,48-6,72, 7,03-7,25, 7,33-7,50, 8,23.

Ejemplo 8 (6)

9-[(3S)-1-acriloil-3-pirrolidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,50 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 82,23-2,43, 2,84-3,04, 3,55-3,73, 3,91-4,08, 4,12-4,19, 4,26-4,32, 4,47-4,49, 5,13-5,27, 5,66 5,73, 6,35-6,54, 7,03-7,28, 7,33-7,43, 8,20-8,22.

Ejemplo 8 (7)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3-clorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

LC: Rf 0,53 (cloroformo : metanol : amoniaco acuoso = 9 : 1 : 0,01);

RMN 1H (CDCl3): 84,46-4,61, 4,85, 5,08, 5,42, 5,71, 6,24, 6,38, 6,96, 7,08, 7,13-7,18, 7,32, 7,42, 8,24.

Ejemplo 8 (8)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(3-metoxi-4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,18 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 83,90, 4,45-4,65, 4,80-4,90, 5,05-5,15, 5,35-5,45, 5,72, 6,26, 6,39, 6,90-7,40, 8,25.

Ejemplo 8 (9)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(3-fluoro-4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,27 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 84,45-4,65, 4,80-4,90, 5,05-5,15, 5,35-5,45, 5,72, 6,25, 6,40, 7,05-7,42, 8,26.

Ejemplo 8 (10)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3,4- diclorofenoxi)-3-metoxifenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,20 (acetato de etilo);

RMN 1H (CD3OD): 8 3,82, 4,47, 4,59, 4,72, 4,77-4,95, 5,00-5,09, 5,40-5,53, 5,77, 6,28, 6,41, 6,91, 7,09, 7,28, 7,43, 8,17.

Ejemplo 8 (11)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3-fluorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,73 (acetato de etilo : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCh) : 84,50, 4,59, 4,85, 5,08, 5,42, 5,72, 6,25, 6,40, 6,78-6,93, 7,17, 7,33, 7,43, 8,26.

Ejemplo 8 (12)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3,5-difluorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,78 (acetato de etilo : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCh) : 84,50, 4,59, 4,85, 5,08, 5,42, 5,71, 6,25, 6,39, 6,57-6,62, 7,19, 7,45, 8,26.

Ejemplo 8 (13)

9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(2-fluoro-4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,47 (metanol: acetato de etilo = 1 : 19);

RMN 1H (CDCla) : 84,40-4,60, 4,80-4,90, 5,00-5,10, 5,35-5,45, 5,72, 6,25, 6,39, 6,80-7,50, 8,24.

Ejemplo 8 (14)

9-[(1-acriloil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 24]

TLC: Rf 0,50 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 81,27-1,44, 1,72-1,86, 2,18-2,37, 2,66, 3,04, 3,90, 4,00, 4,51, 4,67, 5,66, 6,24, 6,56, 7,03-7,24, 7,32-7,46, 8,25.

Ejemplo 8 (15)

6-amino-9-[1-(cloroacetil)-3-azetidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,41 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 83,96-4,05, 4,44-4,53, 4,62-4,72, 4,80-4,87, 5,08-5,16, 5,38-5,48, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,24.

Ejemplo 8 (16)

6-amino-9-[(3R)-1-(cloroacetil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,49 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh) : 82,20-2,48, 2,78-3,01, 3,50-3,63, 3,64-3,81, 3,90-4,19, 4,26-4,36, 4,51, 5,14-5,32, 7,02-7,26, 7,27-7,46, 8,21.

Ejemplo 8 (17)

6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,41 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh) : 81,88, 2,19-2,43, 2,82-3,05, 3,50-3,74, 3,88-4,18, 4,20-4,30, 4,48, 5,08-5,16, 6,13, 6,95, 7,05 7,23, 7,34-7,46, 8,22.

Ejemplo 8 (18)

6-amino-9-{[1-(cloroacetil)-4-piperidinil]metil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,54 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCl3): 81,14-1,59, 1,70-1,87, 2,19-2,37, 2,65, 3,10, 3,81-3,95, 3,91, 4,06, 4,50, 4,51-4,63, 7,05-7,23, 7,34-7,46, 8,25.

Ejemplo 8 (19)

9-[(1-acriloil-4-metil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,55 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCh) : 81,15, 1,37-1,85, 3,21-3,50, 3,70-3,99, 4,03-4,23, 4,52-4,73, 5,64, 6,24, 6,56, 6,97-7,23, 7,31 7 ^,50 ^,8 ^,21^.

Ejemplo 8 (20)

6-amino-9-{1-[(2E)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,63 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 61,89, 4,46, 4,51, 4,79, 5,03, 5,20, 5,39, 5,94, 6,93, 7,07-7,10, 7,19, 7,36-7,43, 8,23.

Ejemplo 8 (21)

9-{[(3R)-1-acriloil-3-pirrolidinil]metil}-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-8-ona

TLC: Rf 0,49 (diclorometano : metanol : amoniaco acuoso = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla): 6 1,77-1,97, 2,02-2,19, 2,83-3,01, 3,38-3,62, 3,66-3,83, 3,98-4,11, 4,42-4,54, 5,61-5,70, 6,30 6,45, 7,04-7,23, 7,36-7,43, 8,23.

Ejemplo 8 (22)

9-{[(2S)-1-acriloil-2-pirrolidinil]metil}-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,44 (diclorometano : metanol : amoniaco acuoso = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla): 6 1,87-2,28, 3,46-3,78, 3,86-3,96, 3,99-4,10, 4,15-4,23, 4,40, 4,45-4,60, 4,81-4,91, 5,54-5,72, 6,16-6,44, 6,86-6,97, 7,04-7,22, 7,36-7,45, 8,21-8,26.

Ejemplo 9

(3R)-3-{[6-(dibencilamino)-5-nitropirimidin-4-il]amino}piperidina-1-carboxilato de ferc-butilo

El compuesto del título (1,44 g) que tenía los valores de propiedades físicas que se dan a continuación se obtuvo siguiendo la misma plantilla de proceso que en el Ejemplo 2 usando el compuesto (1,5 g) producido en el Ejemplo 1 y usando (3R)-3-aminopiperidina-1-carboxilato de ferc-butilo (0,85 g) en lugar de 3-aminoazetidina-1-carboxilato de ferc-butilo.

TLC: Rf 0,23 (hexano : acetato de etilo = 9 : 1).

Ejemplo 10

Diclorhidrato de 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(3R)-piperidin-3-il]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

El compuesto del título (155 mg) que tenía los valores de propiedades físicas que se dan a continuación se obtuvo siguiendo la misma plantilla de proceso que en el Ejemplo 3 ^ Ejemplo 4 ^ Ejemplo 5 ^ Ejemplo 6 ^ Ejemplo 7, usando el compuesto producido en el Ejemplo 9 y usando ácido p-fenoxifenilbórico (154 mg).

TLC: Rf 0,68 (metanol : diclorometano : amoníaco acuoso = 80 : 20 : 4).

Ejemplo 11

6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-piperidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro- 8H-purin-8-ona

[C 25]

Se añadió trietilamina (1,40 ml) a una solución en diclorometano (6 ml) del compuesto (1,20 g) producido en el ejemplo 10. Se añadió cloruro de 4-bromocrotonilo (solución en dicloroetano 0,5 M, 5,04 ml) en un baño de hielo y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos en un baño de hielo. Después de concentrar, se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se llevó a cabo extracción con acetato de etilo. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio y se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se añadieron tetrahidrofurano (6 ml) y dimetilamina (solución en tetrahidrofurano 2,0 M, 6,3 ml) al residuo y se calentó durante 2 horas 50 °C. Esto se siguió de filtración y después concentración. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (hexano : acetato de etilo = 1:1 — acetato de etilo—» acetato de etilo : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1) para producir el compuesto del título (0,66 g) que tiene los valores de propiedad física indicados a continuación.

TLC: Rf 0,40 (acetato de etilo : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,52-1,77, 1,87-2,00, 2,00-2,12, 2,18- 2,35, 2,53-2,85, 2,93-3,22, 3,57-3,74, 3,97-4,17, 4,36 4,60, 4,66-4,89, 6,35-6,55, 6,76-6,94, 7,03-7,30, 7,32- 7,48, 8,21.

Ejemplos 11 (1) a 11 (26)

Los compuestos a modo de ejemplo proporcionados a continuación se obtuvieron siguiendo la misma plantilla de proceso que en el Ejemplo 9 — Ejemplo 10 — Ejemplo 11, usando el compuesto producido en el Ejemplo 1, usando (3R)-3-aminopiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo o el derivado de amina correspondiente en su lugar, usando ácido p-fenoxifenilbórico o el ácido bórico correspondiente en su lugar y usando dimetilamina o el derivado de amina correspondiente en su lugar.

Ejemplo 11 (1)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3- azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,21 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla) : 82,27, 3,08-3,10, 4,45-4,60, 4,80-4,86, 5,05-5,10, 5,36-5,44, 6,06-6,12, 6,87-6,96, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (2)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(4-morfolinil)-2-butenoil]-3- azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,48 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCls) : 82,48, 3,14-3,16, 3,71-3,73, 4,44-4,59, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,08-6,13, 6,86-6,95, 7,07-7,15, 7,17-7,22, 7,34-7,42, 8,23.

Ejemplo 11 (3)

6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2- butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9- dihidro-8H-purin-8-ona

[C 26]

TLC: Rf 0,21 (diclorometano : metanol = 17 : 3);

RMN 1H (CDCls): 82,20-2,42, 2,84-3,14, 3,52-3,76, 3,90-4,20, 4,22-4,34, 4,42-4,51, 5,10-5,29, 6,20-6,38, 6,86 7,01, 7,03-7,24, 7,37-7,46, 8,20-8,23.

Ejemplo 11 (4)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{1-[(2E)-4-(1-piperidinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7,9-dihidro-8H- purin-8-ona

TLC: Rf 0,48 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCls): 8 1,32-1,47, 1,57-1,64, 2,38-2,44, 3,13-3,14, 4,44-4,60, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,35-5,46, 6,05 6,11, 6,89-6,99, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (5)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{1-[(2E)-4-(4-tiomorfolinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,58 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla): 82,66-2,75, 3,15-3,17, 4,44-4,59, 4,80- 4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,44, 6,05-6,11, 6,85-6,94, 7,07 7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (6)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(3-oxo-1-piperazinil)-2- butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,16 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla): 82,67-2,71, 3,19, 3,22-3,24, 3,36-3,40, 4,45-4,59, 4,81-4,87, 5,05-5,10, 5,37-5,47, 6,05, 6,10 6,16, 6,84-6,93, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,36-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (7)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{1-[ (2E)-4-(1-pirrolidinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,39 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla) : 81,79-1,83, 2,50-2,65, 3,28-3,31, 4,44-4,60, 4,80-4,85, 5,04-5,09, 5,35-5,45, 6,10-6,15, 6,90 6,99, 7,06-7,14, 7,16-7,22, 7,35-7,43, 8,23.

Ejemplo 11 (8)

6-amino-9-(1-{(2E)-4-[(2-hidroxietil)(metil)amino]-2-butenoil}-3-azetidinil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,40 (diclorometano : metanol: amoniaco acuoso = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCls) : 82,29, 2,57-2,61, 3,23-3,26, 3,59-3,63, 4,44-4,59, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,06-6,13, 6.86- 6,95, 7,07-7,15, 7,16-7,26, 7,35-7,42, 8,24.

Ejemplo 11 (9)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(1-pirrolidinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-dihidro-8H- purin-8-ona TLC: Rf 0,42 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCls) : 81,74-1,92, 2,15-2,43, 2,54-2,70, 2,82-3,06, 3,32, 3,49-3,77, 3,91-4,20, 4,23-4,36, 4,51, 5,10 5,28, 6,36, 6,91-7,04, 7,06-7,24, 7,37-7,45, 8,21.

Ejemplo 11 (10)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(1-piperidinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-dihidro-8H- purin-8-ona TLC: Rf 0,39 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCls) : 81,35-1,50, 1,51-1,65, 2,20-2,48, 2,82-3,06, 3,12, 3,52-3,75, 3,88-4,19, 4,21-4,33, 4,51, 5,09 5,28, 6,27, 6,88-7,04, 7,05-7,23, 7,34-7,44, 8,22.

Ejemplo 11 (11)

6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(4-morfolinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,51 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCls) : 82,19-2,54, 2,83-3,05, 3,14, 3,51-3,77, 3,89-4,19, 4,21-4,32, 4,57, 5,10-5,28, 6,31, 6,87-6,99, 7,04-7,23, 7,34-7,46, 8,21.

Ejemplo 11 (12)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(4-tiomorfolinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,54 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCls): 82,10-2,43, 2,50-2,78, 2,82-3,06, 3,15, 3,51-3,74, 3,89-4,19, 4,22-4,33, 4,51, 5,09-5,28, 6,29, 6.86- 6,99, 7,04-7,23, 7,35-7,47, 8,22.

Ejemplo 11 (13)

6-amino-9-[(3R)-1-{(2E)-4-[etil(metil) amino]-2-butenoil}-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7, 9- dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,34 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla): 81,05-1,19, 2,20-2,43, 2,35, 2,59, 2,82- 3,08, 3,31, 3,50-3,77, 3,90-4,20, 4,23-4,33, 4,50, 5,10 5,28, 6,38, 6,88-6,99, 7,04-7,23, 7,35-7,46, 8,21.

Ejemplo 11 (14)

6-amino-9-{(3S)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 27]

TLC: Rf 0,38 (diclorometano : metanol: amoniaco acuoso = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla): 82,20-2,42, 2,83-3,14, 3,52-3,74, 3,92-4,20, 4,24-4,32, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 6,20-6,38, 6,87 7,00, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Ejemplo 11 (15)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dietilamino)-2-butenoil]-3- azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,47 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCls): 8 1,01-1,06, 2,51-2,58, 3,25-3,27, 4,44-4,59, 4,81-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,07-6,13, 6,91 7,00, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,36-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (16)

6-amino-9-(1-{(2E)-4-[etil(metil)amino]-2-butenoil}-3-azetidinil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,50 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCls): 8 1,05-1,09, 2,24, 2,41-2,48, 3,15-3,18, 4,44-4,59, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,05-6,12, 6,89-6,98, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,36-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (17)

2-{[(2E)-4-{3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-dihidro-9H-purin-9-il]-1-azetidinil}-4-oxo-2-buten-1-il](metil)amino}acetamida

TLC: Rf 0,30 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCls): 82,35, 3,04, 3,23-3,25, 4,45-4,60, 4,81-4,87, 5,04-5,09, 5,37-5,47, 5,61, 6,05-6,11, 6,84-6,94, 6,99, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Ejemplo 11 (18)

6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dietilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,52 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCls): 80,96-1,11, 2,21-2,43, 2,45-2,63, 2,83-3,05, 3,29, 3,52-3,78, 3,90-4,20, 4,22-4,33, 4,49, 5,10 5,28, 6,33, 6,90-7,04, 7,05-7,23, 7,34-7,47, 8,21.

Ejemplo 11 (19)

6-amino-9-[(3R)-1-{(2E)-4-[(2-hidroxietil)(metil)amino]-2-butenoil}-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,18 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla) : 82,21-2,62, 2,85-3,08, 3,21-3,28, 3,52-3,74, 3,92-4,17, 4,25-4,33, 4,61-4,63, 5,13-5,30, 6,24 6,37, 6,87-6,98, 7,07-7,23, 7,35-7,44, 8,19-8,22.

Ejemplo 11 (20)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(4-hidroxi-1-piperidinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,30 (diclorometano : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla) : 81,30-1,75, 1,82-1,97, 2,10-2,24, 2,65-2,82, 3,05-3,20, 3,61-3,78, 4,40-4,60, 4,78-4,86, 5,00 5,11, 5,33-5,46, 6,02-6,12, 6,84-6,98, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,23.

Ejemplo 11 (21)

6-amino-7-[4-(3-clorofenoxi)fenil]-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 28]

TLC: Rf 0,28 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 82,17-2,43, 2,25, 2,83-3,05, 3,08, 3,51- 3,76, 3,91-4,20, 4,22-4,33, 4,50, 5,10-5,18, 6,29, 6,88 7,01, 7,09, 7,10-7,20, 7,33, 7,42, 8,23.

Ejemplo 11 (22)

6-amino-9-[(3S)

(2E)-4-[etil(metil)amino]-2- butenoil}-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7, 9- dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,44 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 18 : 2 : 1);

RMN 1H (CDCls) : 81,00-1,14, 2,18-2,32, 2,32-2,53, 2,82-3,06, 3,10-3,23, 3,50-3,77, 3,86-4,09, 4,09-4,35, 4,37 4,58, 5,06-5,32, 6,20-6,41, 6,87-7,03, 7,03-7,25, 7,31-7,50, 8,14-8,30.

Ejemplo 11 (23)

6-amino-9-{(3S)-1-[(2E)-4-(dietilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,44 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 18 : 2 : 1);

RMN 1H (CDCls) : 80,97-1,11, 2,19-2,46, 2,47-2,65, 2,85-3,05, 3,21-3,35, 3,50-3,76, 3,89-4,09, 4,09-4,33, 4,40 4,55, 5,10-5,28, 6,21-6,43, 6,88-7,05, 7,05-7,24, 7,34-7,48, 8,17-8,27.

Ejemplo 11 (24)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 29]

TLC: Rf 0,38 (diclorometano : metanol: amoniaco acuoso = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla) : 82,20-2,42, 2,83-3,14, 3,52-3,74, 3,92-4,20, 4,24-4,32, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 6,20-6,38, 6,87-7,00, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Ejemplo 11 (25)

6-amino-9-({(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2- butenoil]-3-pirrolidiniymetil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,28 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,75-1,97, 2,00-2,16, 2,20-2,26, 2,83-3,00, 3,02-3,10, 3,38-3,62, 3,69-3,82, 3,98-4,08, 4,50 4,60, 6,19-6,31, 6,82-6,96, 7,04-7,22, 7,35-7,43, 8,23.

Ejemplo 11 (26)

6-amino-9-({(2S)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2- butenoil]-2-pirrolidiniljmetil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,30 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (CDCla): 8 1,86-2,27, 2,98-3,02, 3,03-3,17, 3,45-3,76, 3,88-3,95, 3,98-4,08, 4,15-4,23, 4,39-4,42, 4,47 4,57, 4,80-4,91, 6,09-6,19, 6,66-6,83, 6,94-7,03, 7,04-7,23, 7,35-7,46, 8,20-8,27.

Ejemplo 12

Disulfito de dimetilaminoacetaldehído

Se añadieron agua (1 ml) y ácido clorhídrico concentrado (2,4 ml) a dimetilaminoacetaldehído dietil acetal (2,00 g) y se calentó durante 3 horas a 40 °C. Se añadieron disulfito de sodio (solución acuosa 3,0 M, 3,6 ml) y etanol (10 ml) en un baño de hielo y se agitó durante 1 hora y 30 minutos a temperatura ambiente. Se llevó a cabo filtración seguida de concentración. El residuo resultante se evaporó a sequedad a presión reducida a 60 °C para obtener el compuesto del título (1,29 g).

Ejemplo 13

(3R)-3-{[6-(dibencilamino)-5- nitropirimidin-4-il]amino}pirrolidin-1 -carboxilato de ferc-butilo

El compuesto del título (27,0 g), que tiene el valor de propiedad física dado a continuación, se obtuvo siguiendo la misma plantilla de procedimiento que en el Ejemplo 2, usando el compuesto (19 g) producido en el Ejemplo 1 y usando (3R)-3-aminopirrolidin-1-carboxilato de ferc-butilo (10,5 g) en lugar de 3-aminoazetidina-1-carboxilato de fercbutilo.

TLC: Rf 0.29 (hexano : acetato de etilo =4 : 1).

Ejemplo 14

Diclorhidrato de 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(3R)-pirrolidin-3-il]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

El compuesto del título (945 mg) que tenía los valores de propiedades físicas indicados a continuación se obtuvo siguiendo la misma plantilla de proceso que en el Ejemplo 10, usando el compuesto (9,0 g) producido en el Ejemplo 13 y usando ácido p-fenoxifenilbórico (2,1 g).

TLC: Rf 0, 43 (diclorometano : metanol: amoniaco acuoso =8 : 1 : 0,1).

Ejemplo 15

(2-{[(3R)-3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-dihidro-9H-purin-9-il]pirrolidin-1-il}-2-oxoetil)fosfonato de dietilo Se añadió 1,1'-carbonildiimidazol (0,827 g) a tetrahidrofurano (5 ml) y se calentó a 40 °C. A esta solución se le añadió ácido dietilfosfonoacético (1,00 g) disuelto en tetrahidrofurano (5 ml). Se agitó durante 30 minutos a 40 °C. La solución así producida (0,28 ml), el compuesto (50 mg) producido en el ejemplo 14 y trietilamina (0,03 ml) se añadieron a tetrahidrofurano (0,5 ml) y se agitó durante 1 día a temperatura ambiente. Se añadió agua y se realizó extracción con acetato de etilo. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, después se filtró y se concentró. El residuo resultante se evaporó a sequedad a presión reducida para obtener el compuesto del título (53 mg) que tiene el valor de propiedad física indicado a continuación.

TLC: Rf 0,46 (cloroformo : metanol: amoniaco acuoso al 28 % =80:10:1).

Ejemplo 16

6-amino-9-{(3R)-1-[(2Z)-4-(dimetilamino)-2- butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9- dihidro-8H-purin-8-ona

[C 30]

El compuesto (53 mg) preparado en el ejemplo 12 se añadió a etanol (0,9 ml) y se añadió cloruro de litio (4,2 mg). Se añadió hidróxido de potasio (solución acuosa al 45 %, 0,056 ml) en un baño de hielo y se añadió el compuesto (25 mg) preparado en el ejemplo 15 disuelto en agua (0,25 ml). Se llevó a cabo agitación durante 30 minutos en un baño de hielo. Se hizo otra adición del compuesto (7,5 mg) preparado en el ejemplo 15 disuelto en agua (0,25 ml). Se agitó durante 2 horas en un baño de hielo, después de lo cual se agitó durante 1 día a temperatura ambiente. La extracción se realizó con acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía de capa fina (diclorometano : metanol : amonio acuoso al 28% = 80 : 10 : 1) para obtener el compuesto del título (7,7 mg) que tiene los valores de propiedad física indicados a continuación.

TLC: Rf 0,43 (cloroformo : metanol: amoniaco acuoso = 80 : 10 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 82,14-2,45, 2,81-3,03, 3,43-3,68, 3,80-4,06, 4,06-4,28, 4,42-4,62, 5,11-5,29, 5,97-6,24, 7,03-7,25, 8,17-8,28.

Ejemplo 17

4-({[6-(dibencilamino)-5-nitropirimidinidil]amino}metil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo

El compuesto del título (68,3 g) que tiene el valor de propiedad física indicado a continuación se obtuvo siguiendo la misma plantilla de procedimiento que en el ejemplo 2, usando el compuesto (45,5 g) producido en el ejemplo 1 y usando 4-(aminometil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (27,5 g) en lugar de 3-aminoazetidin-1-carboxilato de fercbutilo.

TLC: Rf 0,56 (hexano : acetato de etilo =2 : 1).

Ejemplo 18

Clorhidrato de 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-(piperidin-4-ilmetil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

El compuesto del título (1,66 g) que tiene el valor de propiedad física indicado a continuación se obtuvo siguiendo el mismo modelo de procedimiento que en el ejemplo 10, usando el compuesto producido en el ejemplo 17 y usando ácido p-fenoxifenilbórico (19 g).

TLC: Rf 0,10 (acetato de etilo : metanol: trietilamina = 18:2:1).

Ejemplo 19

6-amino-9-{[1-(2-butinoil)-4-piperidinil]metil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 31]

Se añadieron ácido 2-butinoico (34 mg), clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) (78 mg), 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) (62 mg), y trietilamina (114 |jl) a una solución en dimetilformamida (3 ml) del compuesto (100 mg) preparado en el Ejemplo 18, seguido de agitación durante 3 horas a temperatura ambiente. Se añadió agua a la mezcla de reacción y se llevó a cabo extracción con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y a continuación se secó sobre sulfato sódico anhidro y el disolvente se retiró por destilación. El residuo se purificó por cromatografía en capa fina (diclorometano : metanol : amoníaco acuoso al 28 % = 90 : 10 : 1) para obtener el compuesto del título (75 mg) que tenía los valores de propiedades físicas que se indican a continuación.

TLC: Rf 0,43 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 8 1,21-1,45, 1,71-1,83, 1,99, 2,18-2,36, 2,59-2,72, 2,99-3,94, 4,34-4,61, 7,05-7,24, 7,36-7,43, 8,24.

Ejemplos 19 (1) a 19 (49)

Los compuestos a modo de ejemplo que se dan a continuación se obtuvieron siguiendo la misma plantilla de proceso que en el Ejemplo 9 ^ Ejemplo 10 ^ Ejemplo 19, usando el compuesto preparado en el Ejemplo 1, usando (3R)-3-aminopiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo o el derivado de amina correspondiente en su lugar y usando ácido p-fenoxifenilbórico o el ácido bórico correspondiente en su lugar.

Ejemplo 19 (1)

6-amino-9-[-1-(2-butinoil)-3-azetidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0.38 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 81,99, 4,39-4,57, 4,75-4,83, 4,97-5,05, 5,32-5,43, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,24.

Ejemplo 19 (2)

6-amino-9-[ (3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 32]

4,51, 5,11-5,25, 7,04-7,23, 7,34-7,45, 8,20-8,23.

Ejemplo 19 (3)

6-amino-9-[(3S)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4- fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,27 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCls) : 81,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47- 3,62, 3,69-3,80, 3,89-4,00, 4,03-4,18, 4,23-4,34, 4,42 4,51, 5,13-5,25, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Ejemplo 19 (4)

6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(3R)-1-propioloil-3-pirrolidinil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,51 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 82,25-2,43, 2,82-3,01, 3,05, 3,52-3,66, 3,73-3,85, 3,92-4,04, 4,07-4,23, 4,31-4,40, 4,48, 5,17 5,27, 7,06-7,23, 7,34-7,47, 8,23.

Ejemplo 19 (5)

(2E)-4-{3-[6-am¡no-8-oxo-7-(4-fenox¡feml)-7,8-d¡h¡dro-9H-punn-9-¡l]-1-azet¡d¡n¡l}-4-oxo-A/-feml-2-butenam¡da TLC: Rf 0,56 (acetato de et¡lo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 84,43-4,72, 4,87-4,96, 5,10-5,20, 5,40-5,52, 6,20, 6,36, 7,04-7,43, 7,72, 8,22, 12,49.

Ejemplo 19 (6)

(2E)-4-{3-[6-am¡no-8-oxo-7-(4-fenox¡fen¡l)-7,8-d¡h¡dro-9H-pur¡n-9-¡l]-1-azet¡d¡n¡l}-4-oxo-2-butenam¡da

TLC: Rf 0,50 (acetato de et¡lo : metanol : tr¡et¡lam¡na = 9 : 1 : 0,5);

RMN 1H (DMSO): 84,29-4,35, 4,57-4,70, 4,86-4,91, 5,28-5,37, 5,82, 6,77-6,88, 7,10-7,20, 7,39-7,46, 7,86, 8,14.

Ejemplo 19 (7)

6-am¡no-7-(4-fenox¡fen¡l)-9-[(1-prop¡olo¡l-4-p¡per¡d¡n¡l)met¡l]-7,9-d¡h¡dro-8H-pur¡n-8-ona

TLC: Rf 0,38 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 81,26-1,50, 1,74-1,88, 2,19-2,38, 2,69, 3,09, 3,10, 3,91, 4,41, 4,49, 4,56, 7,05-7,23, 7,35-7,44, 8,25.

Ejemplo 19 (8)

(2E)-4-{ (3R)-3-[ 6-am¡no-8-oxo-7-(4-fenox¡fen¡l)-7,8-d¡h¡dro-9H-pur¡n-9-¡l]-1-p¡rrol¡d¡n¡l}-4-oxo-2-butenam¡da TLC: Rf 0,41 (d¡clorometano : metanol : amon¡aco acuoso= 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCls): 82,23-2,47, 2,81-3,02, 3,45-3,82, 3,99-4,23, 4,35-4,53, 5,16-5,31, 5,50-5,65, 5,84-6,00, 6,97 7,30, 7,34-7,43, 8,19-8,22.

Ejemplo 19 (9)

6-am¡no-9-[1-(2-but¡no¡l)-3-p¡rrol¡d¡n¡l] -7-(4- fenox¡fen¡l)-7,9-d¡h¡dro-8H-pur¡n-8-ona

[C 33]

TLC: Rf 0,27 (acetato de et¡lo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCls): 81,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,89-4,00, 4,03-4,18, 4,23-4,34, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Ejemplo 19 (10)

(2E)-4-{3-[6-am¡no-8-oxo-7-(4-fenox¡fen¡l)-7,8-d¡h¡dro-9H-pur¡n-9-¡l]-1-azet¡d¡n¡l}-4-oxo-2-butenoato de et¡lo TLC: Rf 0,35 (acetato de et¡lo);

RMN 1H (CDCls): 8 1,30-1,35, 4,22-4,30, 4,48-4,68, 4,84-4,90, 5,12-5,17, 5,40-5,50, 6,86-7,06, 7,07-7,16, 7,18 7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Ejemplo 19 (11)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-fenoxi-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,55 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 84,38-4,60, 4,68-4,79, 4,80-4,89, 4,99-5,11, 5,32-5,46, 6,24-6,34, 6,87-7,43, 8,22.

Ejemplo 19 (12)

6-amino-9-{1-[(2E)-4-hidroxi-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,21 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,82-1,90, 4,35-4,41, 4,43-4,62, 4,79-4,87, 5,03-5,12, 5,36-5,47, 6,19-6,26, 6,98-7,23, 7,35 7,44, 8,23.

Ejemplo 19 (13)

6-amino-9-{1-[(2E)-2,4-pentadienoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,47 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla): 84,42-4,67, 4,80-4,90, 5,02-5,13, 5,33-5,50, 5,61, 6,02, 6,39-6,55, 7,04-7,27, 7,32-7,48, 8,24.

Ejemplo 19 (14)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(ciclohexiloxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,44 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCl3): 8 1,22-2,46, 1,48-1,70, 1,72-1,88, 1,94-2,05, 2,22-2,40, 2,80-3,01, 3,51-3,62, 3,68-3,80, 3,87 4,00, 4,02-4,18, 4,22-4,37, 4,42-4,55, 5,11-5,24, 6,98-7,05, 7,29-7,36, 8,19-8,23.

Ejemplo 19 (15)

6-amino-9-({(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2- butenoil]-3-pirrolidiniljmetil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9- dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,28 (cloroformo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,75-1,97, 2,00-2,16, 2,20-2,26, 2,83-3,00, 3,02-3,10, 3,38-3,62, 3,69-3,82, 3,98-4,08, 4,50 4,60, 6,19-6,31, 6,82-6,96, 7,04-7,22, 7,35-7,43, 8,23.

Ejemplo 19 (16)

6-amino-9-{ [ (2S)-1-(2-butenoil)-2-pirrolidinil]metil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H- purin-8-ona

TLC: Rf 0,48 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,75, 3,80-2,27, 3,58-3,73, 3,94-4,04, 4,06-4,19, 4,39-4,55, 4,66-4,82, 7,03-7,22, 7,35-7,46, 8,22-8,24.

Ejemplo 19 (17)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-clorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,45 (diclorometano : metanol : amoniaco acuoso= 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,51, 5,13-5,25, 6,93-7,00, 7,05-7,09, 7,10-7,20, 7,26-7,35, 7,38-7,44, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (18)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-fluorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,52 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,51-3,62, 3,68-3,80, 3,88-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,40 4,55, 5,13-5,25, 6,77-6,93, 7,12-7,20, 7,28-7,44, 8,20-8,25.

Ejemplo 19 (19)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,5-difluorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,48 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,52-3,63, 3,68-3,80, 3,88-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,54, 5,13-5,25, 6,53-6,66, 7,17-7,27, 7,41-7,48, 8,21-8,26.

Ejemplo 19 (20)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(3-fluoro-4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,41 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 81,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,00, 3,52-3,63, 3,68-3,80, 3,88-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,46 4,57, 5,13-5,25, 7,02-7,21, 7,29-7,42, 8,21-8,26.

Ejemplo 19 (21)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-fluorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,26 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla) : 81,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,54, 5,12-5,25, 6,99-7,16, 7,35-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (22)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-clorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,28 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCl3) : 81,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,02, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,54, 5,12-5,25, 7,00-7,06, 7,09-7,17, 7,30-7,43, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (23)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-metilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,35 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh) : 81,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,51, 5,13-5,25, 6,84-6,92, 6,99-7,03, 7,07-7,15, 7,24-7,31, 7,36-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (24)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-metilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,33 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh) : 81,94-2,03, 2,22-2,42, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,55, 5,13-5,25, 6,95-7,02, 7,04-7,16, 7,17-7,23, 7,33-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (25)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-{4-[3-(trifluorometil)fenoxi]fenil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,33 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh) : 81,94-2,03, 2,22-2,42, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,55, 5,13-5,25, 7,12-7,20, 7,22-7,28, 7,35-7,38, 7,40-7,57, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (26)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-methoxifenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,23 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,83, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,41-4,55, 5,13-5,25, 6,89-6,97, 7,00-7,08, 7,30-7,38,8,19-8,23.

Ejemplo 19 (27)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-methoxifenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,28 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,83, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,41 4,55, 5,13-5,25, 6,62-6,69, 6,71-6,78, 7,10-7,19, 7,24-7,35, 7,36-7,42, 6,89-6,97, 7,00-7,08, 7,30-7,38, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (28)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-isopropilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,31 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla): 8 1,20-1,34, 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,47-3,63, 3,69-3,79, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23 4,34 , 4,46-4,57, 5,13-5,25, 6,98-7,03, 7,06-7,15, 7,21-7,30, 7,33-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (29)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-isopropilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,40 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla) : 8 1,20-1,28, 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,47-3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23 4,34 , 4,46-4,57, 5,13-5,25, 6,84-6,90, 6,98, 7,04-7,16, 7,27-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (30)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(2-isopropilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,37 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCl3) : 8 1,20-1,27, 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,16-3,30, 3,47-3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03 4,19, 4,23-4,34, 4,46-4,56, 5,13-5,25, 6,93-7,00, 7,01-7,08, 7,17-7,24, 7,32-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (31)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(2-metilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,64 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCl3): 8 1,94-2,03, 2,24, 2,24-2,40, 2,81-3,01,3,47- 3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,44-4,55, 5,13-5,25, 6,98-7,05, 7,10-7,18, 7,20-7,40,8,20-8,24.

Ejemplo 19 (32)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-clorofenoxi)-3-methoxifenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,33 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,82-3,01, 3,47-3,63, 3,69-3,81, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48 4,60, 5,14-5,26, 6,85-6,92, 6,95-7,01, 7,05-7,14, 7,22-7,29, 8,23-8,27.

Ejemplo 19 (33)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,4-diclorofenoxi)-3-methoxifenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,33 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,82-3,01, 3,47-3,63, 3,69-3,81, 3,87, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23 4,34,4,48-4,60, 5,14-5,27, 6,81-6,86, 6,97-7,01, 7,06-7,16,7,37-7,40, 8,23-8,27.

Ejemplo 19 (34)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(3-methoxi-4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,31 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,82-3,01, 3,47-3,63, 3,69-3,81, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48 4,60, 5,14-5,27, 6,90-6,97, 7,00-7,04, 7,05-7,18, 7,32-7,41, 8,23-8,26.

Ejemplo 19 (35)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,4-diclorofenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,37 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,50-3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,44 4,55, 5,14-5,27, 6,92-6,98, 7,12-7,22, 7,40-7,49, 8,21-8,26.

Ejemplo 19 (36)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-piperidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,59 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla): 8 1,55-1,80, 1,84-2,11, 2,55-2,76, 3,07-3,21, 3,63-3,74, 4,06-4,17, 4,38-4,59, 4,60-4,74, 7,04 7,23, 7,33-7,44, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (37)

6-amino-7-[4-(benziloxi)fenil]-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,22 (acetato de etilo);

RMN 1H (CDCla): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,50-3,62, 3,68-3,79, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,40 4,50, 5,08-5,27, 7,07-7,16, 7,32-7,46, 8,18-8,25.

Ejemplo 19 (38)

6-amino-7-[4-(1,3-benzodioxol-5-iloxi)fenil]-9-[1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,69 (acetato de etilo : metanol : amoniaco acuoso= 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,47-3,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,40 4,51, 5,12-5,25, 6,01, 6,53-6,59, 6,60-6,63, 6,79-6,83,7,04-7,13, 7,32-7,40, 8,20-8,23.

Ejemplo 19 (39)

6-amino-7-(4-anilinofenil)-9-[(3R)-1-(2-butinoil)- 3-pirrolidinil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,66 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCl3): 8 1,94-2,03, 2,23-2,40, 2,80-3,01, 3,50-3,62, 3,68-3,80, 3,87-4,00, 4,02-4,19, 4,23-4,34, 4,46 4,60, 5,12-5,25, 6,02, 7,00-7,18, 7,22-7,40, 8,18-8,22.

Ejemplo 19 (40)

6-amino-7-(4-benzoilfenil)-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,62 (acetato de etilo : metanol =8 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,41, 2,81-3,01, 3,52-3,63, 3,68-3,81, 3,88-4,01, 4,03-4,20, 4,25-4,36, 4,55 4,65, 5,17-5,29, 7,49-7,68, 7,81-7,86, 7,97-8,03, 8,25-8,29.

Ejemplo 19 (41)

6-amino-7-(4-bencilfenil)-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,53 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,02, 2,23-2,39, 2,80-3,00, 3,50-3,61, 3,67-3,79, 3,87-4,00, 4,02-4,18, 4,23-4,32, 4,44 4,52, 5,12-5,24, 7,18-7,42, 8,19-8,23.

Ejemplo 19 (42)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(fenoximetil)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,50 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,25-2,40, 2,82-3,01, 3,51-3,63, 3,69-3,80, 3,88-4,01, 4,05-4,19, 4,25-4,34, 4,45 4,54, 5,11-5,27, 6,95-7,05, 7,28-7,37, 7,43-7,51, 7,60-7,66, 8,22-8,27.

Ejemplo 19 (43)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-{4-[(6-metil-2-piridinil)oxi]fenil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,48 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,46, 2,81-3,01, 3,50-3,62, 3,68-3,80, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,52-4,62, 5,14-5,27, 6,73-6,78, 6,93-6,98, 7,23-7,32, 7,40-7,46, 7,60-7,67, 8,21-8,25.

Ejemplo 19 (44)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-fluoro-3-metilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,51 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,52-3,63, 3,68-3,80, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42 4,54, 5,14-5,27, 6,84-6,95, 6,99-7,12, 7,34-7,41, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (45)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-metoxi-3-metilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,51 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 81,94-2,03, 2,23, 2,24-2,39, 2,81-3,01, 3,52- 3,62, 3,68-3,80, 3,85, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23 4 ,34 , 4,42-4 ,54, 5,14-5,26, 6,80-6,84, 6,85-6,93, 7,01-7,09, 7,31-7,39, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (46)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-fluoro-3-methoxifenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona TLC: Rf 0,48 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCla): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,48-3,63, 3,68-3,80, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,44 4,56, 5,14-5,26, 6,57-6,63, 6,70-6,78, 7,03-7,14, 7,37-7,43, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (47)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,4-dimetilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,53 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCl3): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,48-3,62, 3,68-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48 4,59, 5,14-5,25, 6,80-6,84, 6,89, 7,04-7,17, 7,32-7,40, 8,20-8,24.

Ejemplo 19 (48)

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-cloro-3-metilfenoxi)fenil]-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,64 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh): 8 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,52-3,64, 3,70-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48 4,59, 5,14-5,25, 6,82-6,88, 6,98, 7,06-7,15, 7,33-7,42,8,20- 8,24.

Ejemplo 19 (49)

6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-3-cloro-2-butenoil]-3- pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

TLC: Rf 0,64 (acetato de etilo : metanol = 19 : 1);

RMN 1H (CDCh) : 82,23-2,31, 2,32-2,40, 2,54-2,60, 2,86- 2,97, 3,47-3,65, 2,81-3,01, 3,52-3,64, 3,84-3,88, 3,93

4,01, 4,08-4,14, 4,20-4,25, 4,40-4,54, 5,15-5,24, 6,20-6,31, 7,07-7,17, 7,18-7,22, 7,35-7,44, 8,20-8,24.

Ejemplo 20

6-amino-9-{1-[(2E)-4-(1H-benzotriazol-1-iloxi)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

[C 34]

Se añadieron ácido 4-bromocrotónico (0,44 g), clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (0,86 g) , HOBt (0,68 g) y trietilamina (1,3 ml) a una solución en dimetilformamida (22 ml) del compuesto (1,0 g) preparado en el ejemplo 7, seguido de agitación durante 1 hora a temperatura ambiente. Se añadió agua a la mezcla de reacción y se realizó extracción con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro y el disolvente se eliminó por destilación. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice para obtener el compuesto del título (0,43 g) que tenía los valores de propiedad física indicados a continuación.

TLC: Rf 0,56 (diclorometano : metanol : amoniaco acuoso al 28 % = 9 : 1 : 0,1);

RMN 1H (CDCla) : 84,43-4,63, 4,79-4,88, 4,99-5,05, 5,22-5,24, 5,35-5,45, 6,26-6,34, 7,01-7,23, 7,36-7,44, 7,51-7,62, 8,22.

Ejemplo 21

6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-{4-[hidroxi(fenil)metil]fenil}-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona

Una solución en metanol (1 ml) del compuesto (30 mg) preparado en el ejemplo 19 (40) se enfrió a 0 °C; se añadió borohidruro de sodio (2,4 mg) y se agitó durante 30 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y después se lavó con agua y solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio seguido de concentración a presión reducida y el residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo—^ acetato de etilo : metanol = 10 : 1) para obtener el compuesto del título (28 mg) que tiene los valores de propiedad física indicados a continuación.

T^lC: Rf 0,58 (acetato de etilo : metanol =9 : 1);

RMN 1H (CDCla) : 81,94-2,03, 2,23-2,39, 2,57, 2,80-3,00, 3,50-3,61, 3,67-3,79, 3,87-4,00, 4,02-4,18, 4,23-4,32, 4,45 4,54, 5,12-5,24, 5,91, 7,27-7,43, 7,56-7,62, 8,20-8,23.

[Ejemplos experimentales farmacológicos]

Ejemplo Biológico 1

Medición (ensayos in vitro) de la actividad inhibidora de Btk y la selectividad para Btk

La actividad inhibidora de la enzima Btk se midió, basándose en el protocolo proporcionado por el fabricante, usando Btk (Invitrogen Corporation) y el Ensayo de Quinasa Z'-LYTE™ de péptido Kit-Tyr1 (Invitrogen Corporation), que contenía los siguientes reactivos: péptido Tyr-1, fosfopéptido Thy-1, tampón de quinasa 5x, ATP, reactivo revelado B, tampón revelado, y reactivo de parada.

Se dispensaron 5 pl/pocillo de una solución del compuesto de ensayo diluida con dimetilsulfóxido (DMSO), o DMSO, y 10 pl/pocillo de la solución de mezcla de sustrato/enzima a una placa de ensayo de 96 pocillos y se llevó a cabo una reacción durante 20 minutos a 30 °C. La solución de mezcla de sustrato/enzima se preparó por dilución con el tampón de quinasa (DL-ditiotreitol (DTT, 2,7 mM), tampón de quinasa 1,33x) para proporcionar una concentración final para el péptido Tyr-1 de 4 pM y una concentración final de Btk de 5 nM. A continuación se añadieron 5 pl/pocillo del trifosfato de adenosina (ATP, concentración final = 36 pM) y se llevó a cabo la reacción durante 1 hora a 30 °C. Después de la finalización de la reacción, se añadieron 10 pl de una solución de revelado, proporcionada por dilución del reactivo de revelado B hasta 128x usando tampón de revelado, y se llevó a cabo una reacción durante un período adicional de 1 hora a 30 °C. La reacción enzimática se detuvo a continuación por adición de 10 pl de la solución de parada. Se midió la intensidad de fluorescencia a 445 nm y 520 nm en cada pocillo usando un lector de fluorescencia en placa Fusion Universal Microplate Analyzer (PerkinElmer Inc.). Se determinó el porcentaje de fosforilación usando la proporción de la emisión a 445 nm (emisión de cumarina) con respecto a la emisión a 520 nm (emisión de fluoresceína) de acuerdo con el protocolo proporcionado con el kit.

Se calculó el porcentaje de inhibición (%) por parte del compuesto de ensayo usando la siguiente ecuación.

[E1]

porcentaje de inhibición (%) de fosforilación =

1 - { (Ac - Ax) / (Ac - Ab) } x 100

Ax: % de fosforilación cuando se añadió el compuesto de ensayo

Ab : % de fosforilación en ausencia de adición de ATP (blanco)

A^c: % de fosforilación cuando se añadió solo DMSO (control)

El valor del 50 % de inhibición (valor de CI50) para el compuesto de ensayo se determinó a partir de la curva de inhibición basada en el % de inhibición para cada concentración del compuesto de ensayo.

Se midió la actividad inhibidora para otras quinasas (por ejemplo, Lck, Fyn, y LynA (todas de Invitrogen Corporation) de la misma forma que se ha descrito anteriormente usando la quinasa particular en lugar de la Btk.

De acuerdo con los resultados, los valores de CI50 para los compuestos de la presente invención fueron, por ejemplo, 0, 004 pM para el compuesto del ejemplo 8, 0,014 pM para el compuesto del ejemplo 11 (3), 0,004 pM para el compuesto del ejemplo 8 (14), 0,007 pM para el compuesto del Ejemplo 19 (2) y 0,011 pM para el compuesto del ejemplo 19 (40).

Además, se calculó la actividad inhibidora selectiva de Btk de los compuestos de la presente invención para otras quinasas, y particularmente para Lck, Fyn, y LynA, como la proporción de los valores de CI50 de las quinasas individuales y se da en la siguiente Tabla 1.

T l 1

Estos resultados muestran que los compuestos de la presente invención no solo tienen actividad inhibidora de Btk, sino que también tienen una actividad inhibidora selectiva de Btk con respecto a otras quinasas.

Ejemplo Biológico 2

Medida de la activación de linfocitos B o la activación de linfocitos T usando PBMC humanas

Se dispensó una solución 10 mmol/l del compuesto de ensayo en DMSO en una placa de 96 pocillos (Nunc) y se preparó una dilución en serie 5x usando DMSO. Se preparó una solución de dilución del compuesto de ensayo a concentración 100x por dilución adicional 10x con medio RPMI1640 (que contenía HI-FBS al 10%, penicilina al 1 %). Se diluyeron células mononucleares de sangre periférica humana (PBMC) con el medio para proporcionar una densidad de 2 x 106 células/ml. Se añadieron 396 pl de la suspensión de células a una placa de 96 pocillos en la que ya se habían introducido 4 pl de la solución de dilución del compuesto de ensayo a concentración 100x o el disolvente (DMSO al 10%) y se llevó a cabo una incubación durante 10 minutos a 37 °C y 5% de CO2. Se añadieron 10 pl de una solución de anticuerpo anti-IgM (Southern Biotech)/IL-4 (R & D Systems) o una suspensión de perlas de anticuerpo anti-CD3/CD28 (Invitrogen Corporation) a una placa de 96 pocillos y también se añadieron 90 pl de la suspensión de células preparada como se ha descrito anteriormente (concentraciones finales: anticuerpo anti-IgM = 1 pg/ml, IL-4 = 3 ng/ml, y perlas de anticuerpo anti-CD3/CD28 = 2 x 106 perlas/ml). Se añadieron 10 pl del medio a pocillos de muestra sin estimular en lugar de estas sustancias estimulantes, y se llevó a cabo una incubación a 37 °C y 5% de CO2 de nuevo. La incubación se llevó a cabo durante 16 horas en el caso de la evaluación de la activación de linfocitos T y durante 22 horas en el caso de la evaluación de la activación de linfocitos B. Se añadieron 100 pl de Tampón Cytofix (BD Biosciences); se llevó a cabo una incubación durante 15 minutos a 37 °C; se llevó a cabo una centrifugación durante 10 minutos a 1500 rpm; y se retiró el sobrenadante. Se añadieron 200 pl de tampón Perm II (BD Biosciences) a -20 °C; se llevó a cabo una incubación durante 30 minutos en hielo; se llevó a cabo una centrifugación durante 10 minutos a 1500 rpm; y se retiró el sobrenadante. Se añadieron 0,5 ml de tampón de Tinción (BD Biosciences) y se llevó a cabo una centrifugación durante 10 minutos a 1500 rpm. Se añadieron 100 pl de una solución mixta de anticuerpo y se llevó a cabo una incubación durante 30 minutos en hielo en oscuridad. El anticuerpo fue la dilución 10x con Tampón de Tinción de la mezcla 1:1:1 de anticuerpo anti-CD3 marcado con PerCP (BD Biosciences), anticuerpo anti-CD20 marcado con AF488 (BD Biosciences), y anticuerpo anti-CD69 marcado con PE (BD Biosciences). Se añadieron 0,4 ml de Tampón de Tinción y se retiró el sobrenadante. Se añadieron 0,3 ml de Tampón de Tinción y el sedimento de células se suspendió para preparar una muestra para medición de FACS. El análisis de FACS usó un equipo BD FACSCalibur (BD Biosciences) y un software de análisis de datos CELLQuest versión 3.3, (BD Biosciences). Se midió la señal CD69-positivo (intensidad de fluorescencia promedio) de las células CD20-positivo CD3-negativo (linfocitos B) o las células CD3-positivo CD20-negativo (linfocitos T). Después de restar el valor para la muestra sin estimular, se determinó el % de inhibición por referencia al valor para la muestra de control estimulada. El % de inhibición se representó gráficamente usando Prism (ver. 5.01J, GraphPad Software) y se determinó el valor de CI50.

De acuerdo con los resultados, los valores de CI50 de compuestos de la presente invención para la señal CD69-positivo para linfocitos B fueron, por ejemplo, 0,021 pM para el compuesto del ejemplo 8, 0,032 pM para el compuesto del ejemplo 11 (3), 0,023 pM para el compuesto del ejemplo 8 (14) y 0,061 pM para el compuesto del Ejemplo 19 (2). Por otro lado, los valores de CI50 de compuestos de la presente invención para la señal CD69 positivo para linfocitos T fueron > 10 pM para todos los compuestos precedentes. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención mostraron tener una acción inhibidora selectiva sobre la activación de linfocitos B.

Ejemplo Biológico 3

Evaluación de la estabilidad en microsomas hepáticos de rata y humanos

(1) Preparación de la solución de compuesto de ensayo

Se preparó una solución 0,25 mmol/l por dilución del compuesto de ensayo (solución 10 mmol/l en DMSO, 5 pl) con una solución acuosa al 50 % de acetonitrilo (195 pl).

(2) Preparación de la muestra la reacción del minuto 0

Se añadieron 245 pl de un tampón fosfato 0,1 mol/l (pH 7,4) que contenía 0,5 mg/ml de microsomas de rata y humanos (XenoTech) y cofactor de NADPH (BD Biosciences) a un reactor que se había calentado previamente a 37 °C; se llevó a cabo una incubación previa durante 5 minutos; y se añadió la solución del compuesto de ensayo indicada anteriormente (5 pl) y se inició la reacción. Se recogieron 20 pl inmediatamente después del comienzo y la reacción se detuvo mediante la adición de 180 pl de acetonitrilo que contenía un estándar interno (warfarina). Se agitaron 20 pl de esta solución con 180 pl de una solución acuosa al 50 % de acetonitrilo sobre una placa de filtro para la depleción de proteínas seguido de filtración por succión, y el filtrado se usó como la muestra estándar.

(3) Preparación de la muestra de reacción del minuto 15

La solución de reacción indicada anteriormente se incubó durante 15 minutos a 37 °C, y a continuación se añadieron 20 pl a 180 pl de acetonitrilo frío (que contenía el estándar interno de warfarina) para detener la reacción. Se agitaron 20 pl de esto con 180 pl de una solución acusa al 50 % de acetonitrilo sobre una placa de filtro para la depleción de proteínas seguido de filtración por succión, y el filtrado se usó como la muestra estándar.

(4) Método de evaluación y resultados

Se calculó la proporción residual (%) por inyección de 1 pl de la solución demuestra en un equipo de LC-MS/MS; división de la proporción de área de pico para la muestra de reacción (área de pico para el compuesto de ensayo/área de pico para el estándar interno) por la proporción de área de pico para la muestra estándar; y multiplicación del valor resultante por 100.

Se usaron los siguientes compuestos como compuestos de ensayo: compuestos de la presente invención y 1-{(3R)-3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il]-1-piperidinil}-2-propen-1-ona (compuesto comparativo A) y 1-{3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il]-1-pirrolidinil}-2-propin-1-ona (compuesto comparativo B), que son compuestos a modo de ejemplo descritos en el Documento de Patente 1 que tienen un esqueleto de pirazolopirimidina. La proporción residual (%) de los compuestos de ensayo en los microsomas hepáticos de rata y humanos fue la que se muestra en la siguiente Tabla 2.

T l 2

Los resultados muestran que los compuestos de la presente invención son mucho más estables en microsomas hepáticos de rata y humanos que los compuestos comparativos.

Ejemplo Biológico 4

Medición de la actividad inhibidora en enzimas metabolizadoras de fármacos (acción inhibidora en CYP2C8 humana y CYP2C19 humana)

[Método experimental]

La reacción se llevó a cabo en una placa de 96 pocilios. Las sustancias de control positivo (CYP2C8: ketoconazol, CYP2C19: tranilcipromina) se ajustaron (CYP2C8: 0,6 y 6 mmol/l, CYP2C19: 0,9 y 9 mmol/l) con DMSO a concentraciones que fueron 300 veces la concentración final, y se prepararon soluciones (CYP2C8: 8 y 80 pmol/l, CYP2C19: 12 y 120 pmol/l) por dilución 75x con agua purificada que contenía un 2,7% de acetonitrilo. Los compuestos de ensayo se ajustaron a 0,3 y 3 mol/l con DMSO y se ajustaron a 4 y 40 pmol/l por dilución 75x con agua purificada que contenía un 2,7 % de acetonitrilo. A continuación se preparó una mezcla de reacción (los valores numéricos son las concentraciones finales) mediante la adición de tampón fosfato potásico (pH 7,4), cloruro de magnesio (5 mol/l), sustrato (CYP2C8: dibencilfluoresceína 1 pmol/l, CYP2C19: 3-ciano-7-etoxicumarina 25 pmol/l), y CYP2C8 (Cypex, 10 pmol/l) y CYP2C19 (Cypex, 3 pmol/l) de microsoma hepático expresadas en E. coli. Se dispensaron en cada pocillo 100 pl de esta mezcla de reacción y 50 pl del compuesto de ensayo preparados como se ha descrito anteriormente y la solución de control positivo preparada como se ha descrito anteriormente y se llevó a cabo una incubación previa durante 10 minutos a 37 °C. La reacción se inició mediante la adición de 50 pl de solución de NADPH (concentración final = 1 mmol/l) y se llevó a cabo una incubación durante 30 minutos a 37 °C. Se midió la intensidad de fluorescencia (CYP2C8: longitud de onda de excitación = 485 nm, longitud de onda de fluorescencia = 538 nm; CYP2C19: longitud de onda de excitación = 409 nm, longitud de onda de fluorescencia = 460 nm) inmediatamente después de la adición de NADPH y después de incubación durante 30 minutos. Se tomó el % como el % de declinación (% de inhibición) en la intensidad de fluorescencia en comparación con un control en el que se añadió DMSO en lugar de la solución de compuesto de ensayo y se llevó a cabo la reacción y se calculó usando la siguiente fórmula.

Inhibición (%) = 100 - { (intensidad de fluorescencia después de la reacción del compuesto de ensayo -intensidad de fluorescencia antes de la reacción del compuesto de ensayo)/(intensidad de fluorescencia después de la reacción del control - intensidad de fluorescencia antes de la reacción de control) x 100} Se tomó el valor de CI50 para que fuera < 1 pM cuando el % de inhibición a 1 pmol/l fue al menos un 50 %; se tomó para que fuera > 10 pmol/l cuando el % de inhibición a 10 pmol/l fue no más de un 50 %; y los valores intermedios a los precedentes (no más de un 50 % a 1 pmol/l y al menos un 50 % a 10 pmol/l) se calcularon usando la siguiente fórmula

CI50 = (50 - b)/a

en la que a y b son la pendiente y la ordenada en el origen de la recta de regresión lineal y = ax b que pasa a través de los dos puntos siguientes: la concentración de 1 pmol/l, % de inhibición y la concentración de 10 pmol/l, % de inhibición.

Los valores de CI50 de los compuestos comparativos y los compuestos de la presente invención se midieron usando el método de medición descrita anteriormente.

Los resultados son los que siguen a continuación: para el compuesto comparativo A y el compuesto comparativo B, los valores de CI50 para CYP2C8 fueron 4,7 pM y 6,9 pM, respectivamente, y los valores de CI50 para CYP2C19 fueron 5,6 pM y 8,1 pM, respectivamente. Por otro lado, los compuestos de la presente invención, por ejemplo, los compuestos del Ejemplo 8, Ejemplo 11 (3), Ejemplo 8 (14) y Ejemplo 19 (2), tuvieron todos valores de CI50 para CYP2C8 y CYP2C19 de > 10 pM. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención mostraron tener una menor actividad inhibidora de CYP que los compuestos comparativos.

Ejemplo Biológico 5

Medición de la citotoxicidad y la capacidad de reducir el potencial de membrana mitocondrial en células cultivadas de hepatoma humano

Se conoce que el tejido que mantiene un equilibrio aeróbico, por ejemplo, de riñones y corazón, y el tejido que se expone a altas concentraciones del fármaco y lleva a cabo el metabolismo del fármaco, por ejemplo, el hepático, es sensible a disfunción mitocondrial (Drug Discovery Today, 12 (17-18), 777-785, 2007). La reducción o extinción del potencial de membrana mitocondrial mediante un fármaco está causada por la inhibición directa del sistema de transporte de electrones, desacoplamiento del transporte de electrones de la ATP sintasa, o la apertura de un poro de transición de permeabilidad de membrana mitocondrial. Como consecuencia, la medición del potencial de membrana mitocondrial de células hepáticas puede proporcionar un parámetro para la hepatotoxicidad.

Se sembraron células hepáticas humanas en una placa de 96 pocillos revestida con colágeno con una densidad celular de 30.000 células/pocillo y se llevó a cabo una incubación durante una noche en una incubadora a 37 °C en 5 % de CO2-95 % de aire. Las células cultivadas se tiñeron durante 1 hora con yoduro de 5,5',6,6'-tetrahidro-1,1',3,3'-tetrametil-benzamidazolocarbocianina (JC-1) seguido de tratamiento con el compuesto de ensayo. El compuesto de ensayo se disolvió en DMSO y a continuación se diluyó con el medio de cultivo líquido Hepatocyte Culture Medium (HCM) y se añadió a las células. Las concentraciones de tratamiento del compuesto de ensayo fueron 0, 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200, y 400 pmol/l. Después de la exposición al compuesto de ensayo durante 24 horas, se llevó a cabo una medición con un lector de placas SpectraMax (Molecular Devices, LLC) a una longitud de onda de excitación de 485 nm y una longitud de onda de fluorescencia de 538 nm y una longitud de onda de excitación de 544 nm y una longitud de onda de fluorescencia de 590 nm. El potencial de membrana se determinó mediante la proporción entre el valor de medición de 544 nm/590 nm y el valor de medición de 485 nm/538 nm. Después de esto, se midió la concentración de ATP en las células usando un kit de ensayo luminescente Celltiter Glo (Promega Corporation) con el fin de evaluar la toxicidad celular en el compuesto de ensayo. Las células se lisaron mediante el tampón de ensayo proporcionado con el kit de medición y se midió la concentración del ATP liberado por las células usando como índice la actividad enzimática de luciferina-luciferasa. La emisión se midió usando un lector de placas SpectraMax. La capacidad del compuesto de ensayo para disminuir el potencial de membrana mitocondrial y la citotoxicidad del compuesto de ensayo se representaron mediante la concentración (valor de CI50) que causó un 50 % de disminución en el potencial de membrana mitocondrial y la concentración de ATP, respectivamente. La capacidad para disminuir el potencial de membrana mitocondrial de los compuestos de ensayo y la citotoxicidad de los compuestos de ensayos se dan en la siguiente Tabla 3.

T l 1

Los resultados mostraron que ambos valores de CI50 fueron inferiores para todos los compuestos de la presente invención que para los compuestos comparativos.

[Ejemplos de formulación]

Ejemplo de Formulación 1

Los componentes indicados a continuación se mezclaron por un método estándar, se filtraron a través de un filtro de desempolvado, se rellenaron en ampollas de 5 ml y se esterilizaron térmicamente con un autoclave para obtener 10.000 ampollas que contenían 20 mg de componente activo por ampolla.

• 6-am¡no-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(d¡met¡lam¡no)-2-buteno¡l]3-p¡rrol¡d¡nil}-7-(4-fenox¡fen¡l)-7,9-d¡h¡dro-8H-purin-8-ona 200 g • manitol 20 g • agua destilada 50 l Ejemplo de formulación 2

Los componentes indicados a continuación se mezclaron mediante un método convencional y a continuación se conformaron en comprimidos para obtener 10.000 comprimidos que contenían 10 mg de cada componente activo en cada comprimido.

•■6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona 100 g • carboximetilcelulosa de calcio (disgregante) 20 g • estearato de magnesio (lubricante) 10 g • celulosa microcristalina 870 g Aplicabilidad industrial

Los compuestos de la presente invención son compuestos que, además de tener actividad inhibidora selectiva de Btk, exhiben una excelente estabilidad metabólica y pueden evitar hepatotoxicidad o similar, y en consecuencia son útiles como agentes terapéuticos muy seguros para enfermedades en las que participan linfocitos B o mastocitos.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto representado por la fórmula general (I)

(en la fórmula,

el anillo 2 representa un heterociclo saturado nitrogenado, de 4 a 6 miembros, que está sustituido por de uno a tres -K-R2;

R7 representa (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4;

R9 representa (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4;

cada uno de R1oy R11 representa independientemente (1) un átomo de hidrógeno o (2) un grupo alquilo C1-4; n representa un número entero de 0 a 4;

m representa un número entero de 0 a 2 y

cuando n es dos o más, los R1 pueden ser el mismo que los demás o pueden ser diferentes entre sí), un isómero óptico de los mismos o sus mezclas, una sal de los mismos, un solvato de los mismos o un N-óxido de los mismos.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R2 es un grupo alquenilo C2-4 o un grupo alquinilo C2-4, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes, seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) NR3R4, (2) átomos de halógeno, (3) CONR5R6, (4) CO2R7 y (5) OR8.

3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros es un anillo de azetidina, pirrolidina o piperidina.

4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, representado por la fórmula general (I-1)

(en la fórmula, el anillo 1-1 representa un anillo benceno, ciclohexano o piridina, cada uno de los cuales puede estar sustituido por de uno a cinco sustituyentes, seleccionado cada uno independientemente entre el grupo que consiste en (1) átomos de halógeno, (2) grupos alquilo C1-4, (3) grupos alcoxi C1-4, (4) nitrilo y (5) CF3, y el anillo 2-1 representa un heterociclo saturado nitrogenado de 4 a 6 miembros que está sustituido con de uno a tres -K-R2, en donde los otros símbolos tienen los mismos significados que se han descrito en la reivindicación 1).

5. El compuesto de acuerdo con 1, que es

(2 ) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-(2-butenoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona. (3) 9-[(1-acriloil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona,