FI93006B

FI93006B - Menetelmä immunomoduloivien atsaspiraanien valmistamiseksi

Info

Publication number: FI93006B
Application number: FI901530A
Authority: FI
Inventors: David Aaron Schwartz; Alison Mary Badger; Elaine Nicholas Cheeseman; Michael John Dimartino; James Woodrow Dorman; Christopher Kevin Mirabelli; Donald Harold Picker
Original assignee: Smithkline Beckman Corp
Priority date: 1987-09-28
Filing date: 1990-03-27
Publication date: 1994-10-31
Also published as: ES2064356T3; DK77090A; HUT57722A; NO901392D0; FI93006C; EP0310321A3; ATE114463T1; WO1989002889A1; US4963557A; HU208809B; IL87908A0; KR0166336B1; NO173824C; IL87908A; KR890701562A; MX9203765A; EP0310321A2; PT88603B; JP2582888B2; CN1031618C

Description

93006

Menetelmä immunomoduloivien atsaspiraanien valmistamiseksi 5 Tämä keksintö liittyy menetelmään metallia sisältämättömän spirogermaniumanalogin valmistamiseksi.

10

Geschickter et ai., US- patenttijulkaisu 4 468 393, julkaistu 28. elokuuta 1984, esittävät patenttivaatimuksen niveltulehduksen hoitomenetelmästä, jossa käytetään useita eri ger-maniumia sisältäviä spirogermaniumanalogeja, joihin kuuluvat: 15 N- (3-dimetyyliaminopropyyli)-2-atsa-8,8-dimetyyli-8-germa-niumspiro[4,5]dekaani; N- (3 -dimetyyliaminopropyyli) -2-atsa-8,8-dietyyli-8-germa-niumspiro[4,5]dekaani; 20 N- (3-dimetyyliaminopropyyli)-2-atsa-8,8-dipropyyli-8-germa-niumspiro[4,5]dekaani ja N- (3-dimetyyliaminopropyy1i)-2-atsa-8,8-dibutyyli-8-germa-niumspiro[4,5]dekaani.

25 Tenoso et ai., US-patenttijulkaisu 4 654 333, julkaistu 31.

* maaliskuuta 1987, esittää patenttivaatimuksen multippeliskle roosin hoitomenetelmästä, joka käsittää sen, että tätä tautia sairastavalle potilaalle annetaan multippeliskleroosin hoidossa tehoava määrä spirogermaniumia, joka on 30 N- (3-dimetyyliaminopropyyli)-2-atsa-8,8-dimetyyli-8-germa- niumspiro[4:5]dekaani; 2 93006 N- (3-dimetyyliaminopropyyli) -2-atsa-8,8-dietyyli-8-germani-umspiro[4:5]dekaani; N- (3-dimetyyliaminopropyyli) -2-atsa-8,8-dipropyyli-8-ger-maniumspiro[4:5]dekaani tai 5 N-(3-dimetyyliaminopropyyli)-2-atsa-8,8-dibutyy1i-8-germa- niumspiro[4:5]dekaani.

Rice et ai., (1973) J. Heterocycl. Chem., 10(5) 731 - 735 (Rice I), kuvaavat N-(2-dimetyyliaminopropyyli)-8,8-dime-10 tyyli-2-atsaspiro[4,5]dekaanin, N-(2-dimetyyliaminopropyyli) -8 ,8-dietyyli-2-atsaspiro[4,5]dekaanin, N-(3-dimetyyliaminopropyyli) -9,9-dimetyyli-3-atsaspiro[5,5]undekaanin ja N-(3-dimetyyliaminopropyyli)-9,9-dietyyli-3-atsaspiro[5-,5]undekaanin synteesit. Julkaisussa Rice I todetaan, että 15 näiden amiinien biologinen arviointi osoitti syöpäsolun kasvun merkittävää estymistä kudosviljelmänä kasvatetuissa ihmisen syöpäsoluissa. Julkaisussa Rice I ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdotusta siitä, että tällaisilla amiineilla on niveltulehdusta ehkäisevää aktiivisuutta.

20

Rice et ai., (1973) J. Heterocycl. Chem., 10(5) 737 - 741 (Rice II) kuvaavat N-(2-dimetyyliaminopropyyli)-8,8-dime-tyyli-8-sila-2-atsaspiro[4,5]dekaanin ja N-(3-dimetyyliaminopropyyli) -9,9-dimetyyli-9-sila-3-atsaspiro[5,5]undekaanin 25 synteesit ja toteavat lisäksi, että näiden yhdisteiden biologinen arviointi osoitti solutoksista vaikutusta kudosvil-jelmässä kasvatettuja ihmisen syöpäsoluja vastaan. Julkaisussa Rice II ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdotusta siitä, että tällaisilla yhdisteillä on niveltulehdusta eh-30 käisevää aktiivisuutta.

Rice et ai., U.S. patenttijulkaisu 3 256 277, julkaistu 14. kesäkuuta 1966, (Rice III), esittää patenttivaatimuksen yhdisteestä, joka on (1) kaavan 35 li 93006 3

N - [y] „ - R

5 mukainen yhdiste, jossa A on ainakin 5 rengasatomista muodostuva rengas, kaikkien muiden renkaan atomien paitsi R*:n olio lessa hiiltä; R1 on happi tai rikki; X on vety, alempi alkok-si-, alempi alkyyli-, alempi alkenyyli-, syklinen alempi al-kyyli- ja monokarbosyklinen aryyliryhmä, B on 5 - 6 rengas-atomin muodostama tyydyttynyt rengas, renkaassa B olevien rengasatomien ollessa typpiatomia lukuunottamatta hiiliatome-15 ja; Y on alkyleeni- tai korkeintaan 6 hiiliatomia käsittävä alkenyleeniryhmä; n on 0 - 1; ja R on alempi alkyyli-, alempi alkenyyli-, syklinen alempi alkyyli-, syklinen alempi alkenyyli-, alempi ja di- alempi alkyyli- ja alkenyyliaminoryh-mä, tyydyttynyt heterosyklinen ryhmä, joka on morfoliini-, 20 piperidiini-, pyrrolidiini-, piperatsiini-, tetrahydrofuryy-liryhmä ja näiden alempia alkyyli- tai alkenyylisubstituent-teja sisältävä johdannainen, monokarbosyklinen aryyli-, naf-tyyli-, pyridyyli-, kinolyyli-, furyyli- ja alempi alkoksyy-liryhmä; (2) yhdisteen (1) ei-toksiset happoadditiosuolat; ja 25 (3) yhdisteen (1) ei-toksiset kvaternääriset suolat.

·. · ·

Patenttijulkaisussa Rice III todetaan, että näille yhdisteille on luonteenomaista hermojärjestelmään ja sydämeen ja verisuonistoon kohdistuva farmakologinen aktiivisuus. Patent-30 tijulkaisussa Rice III ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdotusta siitä, että tällaisilla yhdisteillä on niveltulehdusta ehkäisevää aktiivisuutta.

4 93006

Rice et ai., U.S. patenttijulkaisu 3 282 947, julkaistu 1. marraskuuta 1966, (Rice IV), esittää patenttivaatimuksen kaavan: '"OO·*1 mukaisesta yhdisteestä, jossa R ja R1 ovat erilaiset ja ne 10 ovat: (a) vety (b) alempi alkyyliryhmä (c) aryylialkyyliryhmä, joka on pyridyyli-, alempi alkyy-li-, tai fenyyli- alempi alkyyliryhmä, 15 (d) di- alempi alkyyliamino alempi alkyleeniryhmä, tai (e) hydroksi- alempi alkyleeniryhmä.

Patenttijulkaisussa Rice IV todetaan, että tällaiset yhdisteet ovat arvokkaita välituotteina ja että niillä on mää-20 rittämätöntä farmakologista aktiivisuutta. Patenttijulkai sussa Rice IV ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdotusta siitä, että tällaisilla amiineilla on niveltulehdusta ehkäisevää aktiivisuutta.

25 Rice et ai., (1963) J. Med. Chem. 6, 388 - 402 (Rice V) *· kuvaavat suuren N-dialkyyliaminoalkyyliatsaspiroalkaanien ryhmän valmistuksen, ja toteavat että kautta koko ryhmän on havaittu voimakasta (mutta määrittelemätöntä) farmakologista aktiivisuutta ja että erityisesti huomionarvoisia ovat 30 tiettyjen jäsenten (esim. 3-(3-dimetyyliaminoprolyyli-9-t- butyyli-3-atsaspiro[5,5]undekaani) huomattavat kasvua estävät vaikutukset kudosviljelmässä oleviin syöpäsoluihin ja objektiiviset kliiniset vaikutukset ihmisen syöpäsoluissa. Julkaisussa Rice V ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdo 93006 5 tusta siitä, että tällaisilla yhdisteillä on niveltulehdusta ehkäisevää aktiivisuutta.

Julkaisussa Rice et ai., (1964) J. Heterocycl. Chem., 1 (3) 5 125 - 127 (Rice VI), kuvataan synteesiteitä useisiin eri symmetrisiin ja epäsymmetrisiin 3,9-diatsaspiro[5,5]unde-kaaneihin. Rice VI:ssa ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdotusta siitä, että näillä yhdisteillä on minkäänlaista biologista aktiivisuutta.

10

Rice et ai., U.S. patenttijulkaisu 3 825 546, julkaistu 23. heinäkuuta 1974, (Rice VII), esittävät patenttivaatimukset rakennekaavan:

r^OQi; " V

20 mukaisesta yhdisteestä, jossa 1 2 R ja R ovat samoja tai eri 1-4 hiiliatomia sisältäviä alkyyliryhmiä, X = pii tai germanium, 25 A ja A1 samoja ja joko » 0

II

Cl^tai C

n = 0 tai 1 B = CH3, kun n on yksi ja B on sama kuin A, kun n on nolla * » R = alkyleeni- tai alkenyleeniryhmä 30 y = 2 - 6, kun R3 on alkyleeni ja 3 - 4, kun R3 on alkenyleeniryhmä 6 93006 R4 ja R5 ovat saman- tai erilaisia, 1-4 hiiliatomisia alempia alkyyliryhmiä, 3-4 hiiliatomisia alempia alkenyyliryhmiä tai rengasrakenteeksi yhtyneenä muodostavat heterosykli-sen ryhmän, joka on morfoliini-, pyrrolidiini-, piperidiini-5 tai alemman alkyyliryhmän (1-4 hiiliatomia) sisältävä pipe-ratsUniryhmä, jossa mainittu alempi alkyyliryhmä on liittynyt päätetyppiatomiin. Rice VIIrssa todetaan, että tällaisten yhdisteiden biskvaternäärisuolat osoittavat verenpainetta alentavaa aktiivisuutta ja ne ovat erityisen käyttökelpoisia 10 ganglioaktiivisuuden estäjiä koirissa ja muissa eläimissä.

Patenttijulkaisussa Rice VII ei ole kuvausta eikä siinä esitetä ehdotusta siitä, että tällaisilla yhdisteillä on niveltulehdusta ehkäisevää aktiivisuutta.

15 Sanwa KK, Euroopan patenttihakemusjulkaisu numero EP 186 505 A2, julkaistu 2. heinäkuuta 1986, esittää patenttivaatinuksen koostumuksesta, joka käsittää kaavan

20 R R

t Ge - C - C - COCh) °l-5 (S) \' * i Jn n

R R

Kaava I 25 esittämän yhdisteen, jossa n on 1 tai tätä suurempi kokonaisluku, R on vety, alkyyliryhmä, -COOH, -COOR', fenyyliryhmä, li 93006 7 o s Ν 5 ja R' on alempi alkyyliryhmä, ja suurimolekyylisen kantaja-aineen farmaseuttisille aineille.

Julkaisussa Sanwa KK olevan kuvauksen mukaisesti tällaisille) la yhdisteillä ei ole immuniteettia kiihdyttävää vaikutusta, mutta sen sijaan niillä on immuniteettia säätävä tai säätelevä vaikutus.

DiMartino et ai., (1986) J. Pharmacol. Exp. Therapeut., 15 236, 103 - 110 raportoivat spirogermaniumin kyvystä aiheut taa suppressorisolujen muodostumisen.

Badger et ai., (1985) Immunopharmacol. 10, 201 - 207 raportoivat suppressorisolujen syntymisestä spirogermaniumilla 20 käsitellyissä normaaleissa rotissa.

Australian National University, PCT patenttihakemusjulkaisu numero WO 85/05031, julkaistu 21. marraskuuta 1985, esittää patenttivaatimuksen eläimen immuunivastetta moduloivasta tai vaimentavasta menetelmästä, joka käsittää vaikuttavan 25 määrän antamisen ainakin yhtä sellaista amfifiilistä ainet-ta, joka kykenee solun pintaan kohdistuvan vuorovaikutuksensa perusteella muuttamaan solun pintaominaisuuksia siten, että muuttuneen solun antigeenin tunnistus estyy tai muuttuu. Tämä amfifiilinen aine on edullisesti kationinen 30 pinta-aktiivinen aine, kuten kaksiketjuinen kvaternäärinen ammoniumpinta-aktiivinen aine.

Gerschickter Fund, Englannin patenttihakemusjulkaisu numero 929 739, julkaistu 26 kesäkuuta 1963, kuvaa rakenteen 8 93006 /CH* - ch2\ (A C N _ R1 - N - R2 5 ^ (CH,)b-CH2^ mukaisia atsaspiraaniyhdisteitä, joissa A on ainakin 5 hiili-atomia sisältävä mono- tai bisyklinen hiilirengas, X on yksi tai useampi vety, alkyyli- tai alkoksiryhmä, n on 0 tai 1, R* 10 on 2 - 6 hiiliatominen alkyleeniketju tai 2-6 hiiliatominen alkyleeniketju, jossa on hydroksyyliryhmäsubstituentti ainakin jommankumman typen suhteen beta-asemassa olevassa hiili-atomissa, ja R2 on dialkyyliryhmä, jonka molemmat alkyyliryh-mät ovat 1-6 hiiliatomisia, tai alkyleeniketju, joka siihen 15 liittyneen typpiatomin kanssa muodostaa morfoliini-, pyrroli- diini- tai piperatsiinirenkaan, tai mikä tahansa näiden al-kyyliryhmällä substituoitu johdannainen, jonka substituent-tiryhmä sisältää 1-6 hiiliatomia, ja näiden ei-toksiset happoadditiosuolat. Gerschickter-patentissa kuvataan myös 20 erityisestdN- (3-dimetyyliaminoprolyyli-9-t-butyyli-3-atsapi- ro (5 :5) undekaani. Gerschickter-patentissa kuvataan myös, että tällaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia hermojärjestelmään ja sydämeen ja verisuonistoon kohdistuvien vaikutustensa vuoksi.

25 Tämä keksintö liittyy kaavan 3° h >ryi /3

X

35

Kaava (IA) mukaiseen yhdisteeseen, jossa: li 93006 9 n on 3 - 7 m on 1 tai 2 R] ja R2 ovat samoja tai erilaisia ja ne ovat vety tai suora-ketjuinen, haaraketjuinen tai syklinen alkyyliryhmä, edellyt-5 täen, että R^n ja R2:n yhdessä sisältämien hiiliatomien kokonaismäärä on 4 - 10; tai R, ja R2 liittyvät yhteen muodostaen 3-7 hiiliatomia sisältävän syklisen a1kyy1iryhmän; R3 ja R4 ovat samoja tai erilaisia ja ne ovat vety tai suora-ketjuinen 1-3 hiiltä sisältävä alkyyliryhmä; tai R3 ja R4 10 liittyvät yhteen muodostaen 4-7 hiiliatomia sisältävän syklisen aikyyliryhmän; edellyttäen, että kun R, ja R2 ovat CH3CH2, R3 ja R4 ovat CH3 ja m on 1 tai 2, n on muu kuin 3; ja edelleen edellyttäen, että kun R, on H; R2 on (CH3)3C; R3 ja R4 ovat CH3 ja m on 1 tai 2, n 15 on muu kuin 3; ja lisäksi edellyttäen, että kun R2 on H; Rj on (CH3)3C; R3 ja R4 ovat CH3 ja m on 2, n on muu kuin 3; tai näiden farmaseuttisesti hyväksyttävä suola, hydraatti tai solvaatti.

20 Alan ammattimies havaitsee, että kaikki kaavan (IA) mukaiset yhdisteet kuuluvat kaavan (I) mukaisten yhdisteiden piiriin.

Edulliset kaavan (I) mukaiset yhdisteet on lueteltu taulukossa 1. Erityisen edullinen on yhdiste n:o 02 taulukossa 1.

25

Farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ja niiden valmistus on alan ammattimiesten hyvin tuntemaa. Edullisiin kaavan (I) mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttäviin suoloihin kuuluvat, näihin kuitenkaan rajoittumatta, hydrokloridi, 30 dihydrokloridi, sitraatti, maleaatti, laktaatti, hydrobromidi ja sulfaatti. Dihydrokloridisuola on erityisen edullinen.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat muodostaa hydraatteja tai solvaatteja. Alan ammattimiesten tiedossa on, että va-35 raukselliset yhdisteet muodostavat hydratoituja muotoja kyl-mäkuivattaessa veden kanssa, tai muodostavat solvatoituja muotoja väkevöitäessä liuoksessa sopivan oi maanisen liuottimen kanssa.

10 93006

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa myöhemmin esitettävien esimerkkien mukaisesti.

Kaikki kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia 5 immunomodulaatiota tarvitsevien eläinten hoidossa, ihmiset mukaanlukien. Tällainen immunomodulatorinen aktiivisuus varmennettiin käyttäen adjuvantin aiheuttamaa niveltulehdusmää-ritystä rotissa, joka on esitetty yhteenvetona taulukossa I, ja/tai käyttäen suppressorisoluaktiivisuusmääritystä, joka on 10 esitetty yhteenvetona taulukossa II. 1 li · 4 " 93006 'sL 'oooooooooin

Γ? U'romroromrommvDH

t : “ 1 rfj 1 LncoiHt^ooqoqt^-iLn 'ΓΟοο^σισιΐηοοιοοΗ

^ n 1 τ—ΙΟΟΟΟϊ—li—It—l(N1H

g : 4J , rH , > : ö :

Jg m m m m n n ro r> r> ri

g „ ' K K K K K KKK

£ K'UUUUUKffiOUU

£ ; 1 : rt ;

2 m'KWWWK KWWW

'i K'UUUUUKUUUU

1 : h jj ; ^ a) 1 1 I-1 i « δ „ 'H, « , k x £ ~ «

bT s. , u ο π KU

V1 “1 fN CS ΓΛ 'w/ fs1 <N fS MH <N

✓ 1 K — ~ K W K K u ~

\ / 'U^^OUUU ^ V

Ö>» / |(SMHMH(SC4C4(S <S hH

s ,κυυ^κκκ au ,¾ I , u “ — u u u u - Ό \ romr^fnc^im

-H \ „'KffiffiUtrlKffimKK

(U \ K'UUU^'UUUUUU

u >a 1 2 ^h ; •H jri Ό Ö ' ^ rH ^ I 1

k. / I es O

^ / , ffi ffi — ö ,_i · «, u~ u~ 5 „ . . k 0) 1 ~ 1 K ~ ~ K K W K u

4J Am H I

2 L k ,κυυ — κκκκ w M \/0 m , u—— ►T’UOUU u

X s'\ > .'KKKUKKWKWW

3 f I rt K'UUU— uuuuuu ε I I <ti 1 H l J ^ ' h c 'mmmmmmnmmm X , '

Λί G jH r« I

G fti Ίβ £ 1 Hr-IrHHCNrHHHrHrH

rH > CQ I

G (β 0Q '

(tifÖQ) SiCNrO^lD^OP'OOO^OH

Eh X Ol|_ 4fc I OOOOOOOOrHH

LT) O LO

rH rH

• α 93006 ΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΌΟ ' U 1 comcomvommmmmrocom «

I I

1 I

I I

1 ocoaooocNcriLncNcoc^com . . . * · ' Oh^Cnh^CD^aOrNLnO^U4JU4J ' ,Q '^ΟΟΟΗΗΗΟΟΗΗΗΟφφφφ '

I I

1 I

I 1

I I

:* .

m m en hh WMHfHHHMt-lH J—4»—IHHt-fH HH , HH HH HH HH HH HH HM HH HH Γ \

Pi ' U U U U U O UUUO H, '

I I

I »

1 I I » I I I I

I <N C·* <N tN rs I

HH H|H M-l Η-» l-ri H-l I HH HH H-l HH HH HH 1 , u u u u u u co r* cn m rs h-» I ΓΊ CN CS CS <N C·» HH | HH HH •Τ* hr· HH HH Η-»

I HH HH HH HH HH ΜΗ T \ I

, r, u o u u u u Ss , k— — “ — “ — k , Γ \ ΓΗ CH«NfS<HCHr> ...................U '

1 I

I I

CN I ,

H I I

1 >1 1 1 in ' 1 -H 1 1 r-| ' : S s : 00 pHt, rHr»<NrHrstsrsfs<s ' ~ <D WKffiWffiffiffiffiffi 1 H? Λ uuuoouuuu I fN HH 1^1 ΓΗΓΗίΝΓΗΓΗΓΗΓΗΓΗίΝΓΗΓΗΠΐ HH r \ U HH ΗτΗ ΜΗ|ΗΗ|-|ΗΗΗγΙΗΗΗΗΗΗΗΗΙ>ΤΗ I HH W 1 HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH 1 , u ~ 7! uuuauuuuuuuu, m m Hh cs'wms ικκκκκκκκκκκκ1 pi 1 uoroK^ouuuuuuuuuou ·

I HH I

U

1 * n

« I

' U 1 1 ^ 1

I CM W I

, X u , U iff fs HH<sr4(sn<sr4n(sr4 ' — UffiWffiKWKKKiU '„ ' JS* U^VUUUUOUUUU '3

I HH m HH (S(N(N<Nr4<SrtrNfN<N(NfNllJ

, “ wT'^UUUUOUUUUUUU,^ - · k uuKffiKffiWKKWwwmK1·^

Pi < U X tc ~ I UUUUUUUUUUUU 1 ω I I (1) I I 4-)

I I

Ö 1 mmmmmmm^Lnusr-fiujuirororn >-η I 1 <u

I I

• I II

S 1 1—I1—Ir-lt—It—lt—l*""lt—li-li—It—Ir-lt—li—lt—Ir-lt—I 1 I 1 4-) $ iCNCO'tfUJr-'COiTiOHOjmt'-COOOi-IC'Ji I HHrHHHHHCNOqOiCNCSOJCSf^mrO 1 Q)

LD Ο ΙΟ O

H H (N

II

93006 I o β —' i rt β β (ti · I fö I · 1 0) »(ti rH »f0 (ti »(ti «(ti Φ β rH Λί -n -H (Ö Φ jj > rt Λί 4-> ε > ,ν φ «rt ra -h to m -h > tö -u *ro -h -h <u n ' *ns m o-) •H «rt λ; p 4J «tti O H y φ m M M -h (ti a >rti (β ? a ^ Ή 3 ^ M β -U rt φ 0) -i—, «rt β P β p · 0) rt φ o β Ό >>i(ö>a) ε VO ·— m β H φ φ ^ H -H i(ti (ti ε H öS Φ β «rt β >-h — — $ β β .H β ^-πρ^φ-ΗΓΰ H n» s fö <u -H g O) ro ^4J-r-) - «(ti g1 g -n -H o 3 G ^ ^ 1 m _ H s ttCS'g «c«Sc,g S 2, ; « ; J 5 S S S * » «

> «(ti „ P ra P Ή £ ,fÖ irt* ,f^ fO ._I

(ti M o p P 2 P 5

s » ™ f 2 § u 2 j « S ; S S

t s § a 3 “ s· § B z? B jjj s .s > 'o β ra 2 ^ ^ 'a *ra $ 2 β ” § ° JS ί ΪΪ 3 oaStl.|> 3 - « a g, ° 2 ? ti o > S § -h 5 “ Ϊ L 5 § 3 «S 3 -2, -h g g £ «. ® g 1 g | > c * 3 3 g 3 » « (Ό c .2 ra P P β ra c 7 3 9 -*-1 T? ra ' S 3 'g M S 1 s ΐ 12 g s § 8* - - a £ 3 g * § a a s. | 3 | s oj m o3 (ö -ra S .l '3 c. ή rt ,β Λ iJ rt g Λ! > H u *1 m φ

(ti 3 -h . 3 S 'S § « P H rt S P

n 4-) *-,, P 'Ί ö 'd -¾ -π S -rt ,fö β rt Sl o 'fö ti O „) -Ö ' £ ~ 2 Ti s s 5 5 ΐ a ί s " -> s ϊ s « i s . s g I ti si g « & * g a a .5 n il! e «o 'd ·ι-> m > 2

0 2 ö O | 'H o 3 H g £ % -H

„ ti S *tti -h Ό (ti -U H 3 ft ζ H

g 5 £ & s ss « s * 1 2 “ 3 s > 3 g 3 t . ti .« g ti 4 • iS ^ s I .5 g - g S “ f | 3 £ S | » s o ! .S g 5 ti -h S | ° S :“ s I 1 «. J S, S S Ϊ u : J Ϊ, s « 5 5, £ m O ra C ra β ö rH ra -«j ^ β rt ra ^ 2 P P 2 ra T? «rt ra o o ra ra -n 4-> 3 -H p * * H £ p φ o g M ® ^ 5 • 2^ 2 «S -n 2 c rt ra «ra ^ ° Φ p «d ρ ε ra β s ό □ -h ε «ra -h ^ 4-> rt P β P -H \ P -H ^ .rt ra rt >P £ 5h <U m s -h > ö p ti >; . J 2 a 24.) φ ό § -P 'd rt rH Λ -n β Q. ^ β P.4J >p«(ti

£ -rt P g Φ Φ rH rt ^ · _. -rt 2 O * ra p4J

β ° Tl ö xj ·-* «o S ,n ra ra ,H 2 p S m M £ m _ p ti φ ^ m p -H ^ m Ö ·π ε ® p rt m ra φ «rt

P Φ ti Oi Ö) -rt 4J β 3 (ti P ti p π O π H 4J

ra ε £ o Λ! ε ή -n 5 1 * £ p 3 ^ ra -h -h rapP>n\H φ -h β -raP,*-1 sL p p β -ra ö 2ö^-H5,ra >(4Hrtrnrara . ra 3&ε> -H rt 3 ·* * «(ti (ti g β -h * 2 β ’rrt ® ^ ββ^ββ-Η^ 4-)β>>ί§ΦΧ) 'O φ ό β -H rt 3 O Φ «ra «rt (ti (ti -H -H sL -H ra

Λ Ό 5 Iti m -H 4J Q. o O Φ -n rH >-r-i«(ti>H[?rH-H

>i-h m04J 4J q. ϋ Ä «rt rt (ti & rt «rtiP

φ^Μβω ββ^·Η·Ηβςι« χ> ra α ε il u 6 <d c <u («φ 8rara«ra 4-)ββτ)β»(0 ®<Φ(0Εη >φβ-Η>φ^ rt «(ti Φ β >1 Λί «rt

4t-H 4J p ra «iti m p > iti 4-)>raprHrtrH

Ό Λ -r-1 -H rH M M -H X m -H -H λ; rH Λί rH

— iti r-. p — Ό O «(ti (ti H -H rt Φ·(0*(0ΦΦ(0«(0 (ti^^moip < Λί a ε ra > 4-> eh a λ; ra 4j h ε m o LO o H H 03 93006

H

rt G ' ' ' i o G cn ö d

rtrtÄ-Hda)j->(U4t-H(U

ugrt-V-Homm g rt

u £ m M -h d 0) -rl .(tf J* 4J

G a> G o E rt iH u xi rtG-UGGrtGrHU^G ,GGrHGGrarta>rt&ra -h g rt rt »s dtuajg

rtm>> d-HujiiDC

-rl rt rH λ -H >H ”

n. d rt · ra rt g -o O

~JJ π I(ö i rt m i! Oi O]

a-1 .rt -H rH G G S

υ rt ö h u 'i rt -h ra .urt.H.£GG . rt m 0 .H \ -£ u rt rt »rt H tl -¾ n m rt ra ή ra > h -n / -n h S 5 ° 5 g ί ” § * .2 ra ^ Z g - % ^ 3 ! - r ϊ * s s: § 5

βζ ö ζ * r* UI CQ Tl ^ , rH

ΰ 2 * § -S n g ? ® * | 1 S * ä 3 3 s i Ä s ! « 2 g 8 s S S ' S i u v a .¾ g ,5 m jj S Φ

h G 53 > U iH -H £ -h * G

2 S $ Π 2 ΐ 12 S s .g

i> I « -h ^ .8 e -S 3 8 S

> g. Ji St «rt '0 6 o 10 u « ö -g 3 2 1 e H -H -H 5 ^ ^InlöglSeiSofl mtj Ä rt ^ did01;* -3 ^ « 3 ° M -¾ o -g m V ° g s 0) > rt a 5 § ” V ra o P -H jh G -r-ι 03 -H Ό ^ £ drt ÖQ) - G Ä '3 -h v 3 S s 'H ~ rt . g >< rt g v-urt?ui-i!2 "g

g G rtrtrH^rt-rlnrJ

c CU g m m .m ±-> m G § .

fi ti ^ H fi s ·>< S%

rt rt -rl β -h rt rt q u rH

-öSöiaiAio^^raSSr-i :· G a) ·|β -3 m *h rt _ 'd -h -n *rt G rH > ^ rt in) rt lirt § cu rt ''i •h ra >ö m £3 rä Λί > c ^ Ö Ä 5 ?! 01 rt rt -h 5 -h φ φ ns > . y< ö .m 'H S 'P ^ ^ -h G S G -h rt ui i® Sh >i G ® «j ιί * -H Ό m *rt

^^rt4JU'dcu,rtrtH^m,H

rt 2 6 —I r-| O g a) -1-1 rt -H r-1 " rt rt OJ £ u -rl >Ö Ι-H «rt G £ -rl 4J > 'rt <11 >i.hUH öhu>

«rtSui-H-HHraGnOrtrt >'iimmcirHrk;-HC-Gu£rt dl ai »rt -h o M a m G • 03'Λ®Λί(βιΗυ)Λί«(0® S

ui i—i -H m«rtGOöGGieJirt

-H H r-H G M > G G >(d G Ή rH

^irtiHlrt-H £ G > ra -rl G rH

G rt O £ O G rt-H-Huirtrt rtu)4Jrt>rtG>«rt>JJ4-)B S m ra G g -h o q. -h ai o o -HrtrtrtEGG -h jj G J-i

OrH^m5-Hrt ·υ>>, G — X -h «rt G >trt rt ά ϋ ui O rt rt>nj-) > Ό G CU m h rt ϋ OI ϋ

LD O

j—I

li 93006 15

Taulukko 2

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden suppressorisoluaktiivisuus(c)

Yhdiste00 Suppressorisolu- 5 numero annos aktiivisuus00 1 30 mg/kg 88 2 30 mg/kg 172 3 30 mg/kg 176 10 4 7,5 mg/kg 118 5 30 mg/kg 162 6 30 mg/kg 158 7 30 mg/kg 217 8 15 mg/kg 67 15 9 30 mg/kg 132 10 30 mg/kg 112 11 15 mg/kg 139 12 15 mg/kg 172 13 15 mg/kg 96 20 14 e.t.

15 e.t.

16 e.t.

17 e.t.

18 30 mg/kg 201 25 19 30 mg/kg 241 20 30 mg/kg 178 21 30 mg/kg 177 22 30 mg/kg 141 23 30 mg/kg 146 30 27 30 mg/kg 139 28 30 mg/kg 24 29 30 mg/kg 22 30 30 mg/kg 77 31 30 mg/kg 64 35 32 30 mg/kg 83 e.t. = ei testattu 00 Yhdisteiden rakenteet, katso taulukko l 40 00 Suppressorisoluaktiivisuus lasketaan seuraavasti. Tehtiin kuvaaja prosentuaalisesta suppressiosta (riippuva muuttuja) suppressorisolujen logaritmin (kantalukuna e) (riippumaton . muuttuja) suhteen ja näiden mittaustulospisteiden edustama käyrän alainen pinta-ala (AUC) määritettiin puolisuunnikas-45 säännön mukaan. AUC saadaan puolisuunnikassäännöllä laskemalla yhteen sellaisten puolisuunnikkaiden alat, joiden huiput sijaitsevat riippumattoman muuttujan kahden vierekkäisen arvon kohdalla ja näitä vastaavien riippuvan muuttujan arvojen kohdalla. Kaikki mittaustulokset normalisoitiin spirogerma-50 niumin (SG) suhteen. Joissakin kokeissa taulukon l. yhdistet- 16 93006 tä #2 käytettiin standardina spirogermaniumin (SG) sijaan. Yhdiste #2 on 1,75 kertaa parempi kuin SG suppressorisolumää-rityksessä. Kaikkien yhdisteiden aktiivisuudet normalisoitiin siksi SG:n suhteen kertomalla ne tällä tekijällä (s.o. SG = 5 100, yhdiste #2 = 172).

(c) Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden suppressorisoluja synnyttävän aktiivisuuden määritykseen käytetty testi oli julkaisussa Badger et ai., (1985) Immunopharmacology 10, 201 - 207 kuvattu testi. Lyhyesti: 10 Sisäsiittoisia urospuolisia Lewis-rottia hankittiin yh tiöstä Charles River Breeding Laboratories (Wilmington, MA, U.S.A.). Rottien ravintona oli vettä ja normaalia rotanruokaa ja ne otettiin käyttöön 6-8 viikon ikäisinä (160 - 180 g) . Missä tahansa tietyssä kokeessa 15 käytettiin vain samanikäisiä ja samaa kantaa ja suku puolta olevia rottia. Concanavalin A (Con A) hankittiin yhtiöstä Pharmacia Fine Chemicals (Piscataway, n.j.) ja se liuotettiin RPMI-1640-liuokseen (Flow Laboratories, Rockville, MD), jota oli täydennetty penisilliinillä, 20 streptomysiinillä ja L-glutamiinilla (Grand Island Bio logical Co. Grand Island, NY) ja 10-%:isella lämpöinak-tivoidulla (56 °C, 30 min) fetaalisella vasikanseeru-milla. Tätä liuosta nimitetään seuraavassa RPMI-10:ksi. In vivo -käsittelyä varten yhdisteet liuotettiin 0,5-25 %:iseen tragakanttiin ja annosteltiin suun kautta ker- :· . ran päivässä. Kaavan (I) ja kaavan (II) mukaisilla yh disteillä käsitellyistä eläimistä saatuja pernasoluja vietiin RPMI-10-liuokseen 5 x 106 pitoisuuteen. Rinnak-kaisviljelmäkokeet suppressorisolujen määrittämiseksi 30 suoritettiin lisäämällä ensin vaihtelevia määriä sup- pressorisoluiksi odotettuja soluja (0,15 - 5 x 105) 96-kuoppaisiin pyöreäpohjaisiin mikrotiitterilevyihin (Linbro, Flow Labs) 100 /il:ssa RPMI-10:a. Nämä solut säteilytettiin (2000 Rad) sitten Gamma cell 40:ssa I37Cs 35 säteilylähteellä. Näihin viljelmiin lisättiin sitten 5 x 105 normaaleja soluja ja optimaalinen Con A-pitoisuus (5 μg/ml) ja lopputilavuus säädettiin 200 μΐ^βϊ. Soluviljelmät inkuboitiin 72 tunnin ajan 37 °C:ssa 5- li 93006 17 %:isessa C02-atmosfäärissä ja niille annettiin 0,5 ^Ci:n pulssi [3H] tymidiiniä (spesifinen aktiivisuus 1,9 Ci/millimooli; Schwarz/Mann, Orangeburg, NY) viljelyn viimeisten 16 tunnin aikana. Solut kerättiin automaat -5 tisella moninäytekerääjällä ja soluihin liittynyt ra dioaktiivisuus laskettiin Beckman-nestetuikelaskijassa. Suppressoiva aktiivisuus määritetään vertaamalla käsittelemättömiä soluja sisältävien viljelmien cpm-arvoja käsitellyillä soluilla saatuihin Studentin t-testiä 10 käyttäen.

Taulukko 2 osoittaa useiden kaavan (I) mukaisten yhdisteiden 15 aktiivisuuden suppressorisolujen muodostamisessa in vivo.

Ilmaisulla "suppressorisolujen muodostaminen" tarkoitetaan sitä, että yhdiste indusoi suppressorisolun kaltaista aktiivisuutta, esim. solun, joka kykenee suppressoimaan normaa-lisolun immuunitoiminnon in vitro rinnakkaisviljelmätestissä 20 julkaisun Rich and Pierce, (1973) J. Exp. Med., 137, 649 mukaisesti. Käsitellyistä eläimistä saaduista pernasoluista lähdettiin yhdessä normaalien solujen kanssa suoritettavaan viljelyyn eri solupitoisuuksia käyttäen. Nämä suppressoriso-lut kykenevät myös estämään lymfosyyttien sekareaktioita, 25 vasta-aineiden synteesiä ja viivästyneen tyypin yliherkkyysreaktioita.

Tämä keksintö liittyy myös farmaseuttiseen koostumukseen, joka käsittää farmaseuttisesti hyväksyttävän kantaja- tai 30 liuotusaineen ja tehoavan määrän kaavan (I) mukaista yhdistettä.

Kaavan (I) mukaista yhdistettä annostellaan tavanomaisessa annostelumuodossa, joka on valmistettu yhdistämällä terapeut-35 tisesti tehoava määrä (s.o. tehoava immunomoduloiva määrä) kaavan (I) mukaista yhdistettä ("aktiivista ainesosaa") normaaleihin farmaseuttisiin kantaja- tai liuotusaineisiin tavanomaisia menetelmiä käyttäen. Näihin menetelmiin voi sisäl- 18 93006 tyä ainesosien sekoitus, rakeistus, ja puristus tai liuotus sen mukaan, mitä valmistetta halutaan.

Käytetty farmaseuttinen kantaja-aine voi olla esimerkiksi 5 joko kiinteä tai nestemäinen. Esimerkkejä kiinteistä kantaja-aineista ovat laktoosi, valkea kaoliini, sakkaroosi, talkki, gelatiini, agar-agar, pektiini, arabikumi, magnesiumstea-raatti, steariinihappo ja muut näiden kaltaiset aineet. Esimerkkejä nestemäisistä kantaja-aineista ovat siirappi, maa-10 pähkinäöljy, oliiviöljy, vesi ja muut näiden kaltaiset aineet. Kantaja-aine voi samoin sisältää sinänsä hyvin tunnettua aikaviiveen antavaa ainetta, kuten glyseryylimonostea-raattia tai glyseryylidistearaattia joko yksinään tai yhdessä vahan, etyyliselluloosan, hydroksipropyylimetyyliselluloosan, 15 metyylimetakrylaatin ja näiden kaltaisten aineiden kanssa.

Voidaan käyttää useita eri farmaseuttisia muotoja. Jos käytetään kiinteää kantaja-ainetta, valmisteesta voidaan tehdä tabletti, pakata kovaan gelatiinikapseliin jauhemaisessa tai 20 pellettimuodossa tai tabletin muodossa. Kiinteän kantaja-aineen määrä voi vaihdella paljon, mutta edullisesti tämä on noin 25 mg:sta noin 1 g:aan. Jos käytetään nestemäistä kantaja-ainetta, valmiste on siirapin, emulsion, pehmeän gelatii-nikapselin, ampullissa tai pullossa olevan steriilin injek-25 toitavan liuoksen tai suspension tai vedettömän nestesuspen-·· sion muodossa.

Pysyvän vesiliukoisen annostusmuodon saamiseksi kaavan (I) mukaisen yhdisteen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola liuo-30 tetaan orgaanisen tai epäorgaanisen hapon vesiliuokseen, kuten meripihkahapon, tai edullisemmin sitruunahapon 0,3 M:een liuokseen. Jos sopivaa liukoista suolamuotoa ei ole saatavilla, kaavan (I) mukainen yhdiste liuotetaan sopivaan tukiliu-ottimeen tai näiden yhdistelmään. Esimerkkeihin tällaisista 35 tukiliuottimista kuuluu, näihin kuitenkaan rajoittumatta, alkoholi, propyleeniglykoli, polyetyleeniglykoli 300, po-lysorbaatti 80, glyseriini ja näitä vastaavat aineet pitoisuuksissa, jotka ovat alueella 0 - 60 % kokonaistilavuudesta.

Il 93006 19

Kukin ruoansulatuskanavan ulkopuolinen annostusmuotoyksikkö sisältää edullisesti aktiivista ainesosaa määrän, joka on noin 0,1 mgrsta noin 500 mg:aan. Kukin suun kautta annettava annostusmuoto sisältää aktiivista ainesosaa määrän, joka on 5 noin 1 mg:sta noin 1000 mg:aan.

Kaikki kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat immunomoduloivia aineita immunomodulaation tarpeessa olevissa eläimissä, myös ihmiset mukaanlukien, kun näitä aineita annetaan näille eläi-10 mille tämän keksinnön mukaisella menetelmällä. Käsitteellä "immunomoduloiva aine" tarkoitetaan sitä, että kukin kaavan (I) mukainen yhdiste kykenee aiheuttamaan immuunisuppression indusoimalla suppressorisolun kaltaista aktiivisuutta (josta näyttönä on niiden aktiivisuus taulukossa 2 kuvatussa supp-15 ressorisolumäärityksessä) ja/tai tuottamalla tilastollisesti merkittävän vähenemisen adjuvanttiniveltulehdusmäärityksessä esiintyvässä, immuunijärjestelmävasteen välittämän sekundaa-rivaurion tulehduksessa (katso taulukko 1.) Immunomoduloivia aineita käyttävän hoidon syihin kuuluvat, niihin kuitenkaan 20 rajoittumatta, seuraavien sairaustilojen hoito: nivelreuma punahukka multippeli skleroosi 25 äkillinen kudos- tai elinsiirteen hylkiminen

myasthenia gravis etenevä systeeminen skleroosi multippeli myelooma atooppinen ihotulehdus 30 hyperimmunoglobiini E

hepatiitti-B -antigeeninegatiivinen krooninen aktiivinen maksatulehdus

Hashimoton kilpirauhastulehdus perheittäinen Välimeren kuume 35 Graven tauti autoimmuuninen hemolyyttinen anemia primaarinen sappitietulehduksen aiheuttama maksakirroosi tulehduksellinen suolistotauti.

20 93006 Tämä keksintö liittyy myös kaavan (I) mukaisen yhdisteen käyttöön immunomodulaation tarpeessa olevan eläimen, ihmiset ja muut nisäkkäät mukaanlukien, hoidossa, joka käsittää sen, että tälle eläimelle annetaan tehoava määrä kaavan (I) mu-5 kaista yhdistettä tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa, hydraattia tai solvaattia. Käsitteellä "hoito" tarkoitetaan suojaavaa tai terapeuttista hoitoa. Kaavan (I) mukaista yhdistettä annetaan immunomoduloivan hoidon tarpeessa olevalle eläimelle määrä, joka riittää kohottamaan tällaisen im-10 munomodulaation terapeuttiselle tai suojaavalle asteelle. Tällaista kaavan (I) mukaista yhdistettä voidaan antaa tällaiselle eläimelle tavanomaisessa annostusmuodossa, joka on valmistettu yhdistämällä kaavan (I) mukainen yhdiste tavanomaiseen farmaseuttisesti hyväksyttävään kantaja- tai liuo-15 tusaineeseen tunnettujen menetelmien mukaisesti. Alan ammattimiehelle on selvää, että farmaseuttisesti hyväksyttävän kantaja- tai liuotusaineen muoto ja luonne määräytyy sen aktiivisen ainesosan määrän perusteella, jonka kanssa tämä on yhdistettävä, annostelutien perusteella ja muiden hyvin tun-20 nettujen muuttujien perusteella.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden annostus voi tapahtua suun kautta, ruoansulatuskanavan ulkopuolitse, inhalaation avulla tai paikallisesti. Tässä käytettynä käsite ruoansulatus-25 kanavan ulkopuolinen tarkoittaa suonensisäistä, lihaksen sisäistä, ihonalaista, peräsuolen kautta tapahtuvaa, emättimen kautta tapahtuvaa tai vatsaontelonsisäistä annostelua. Ruoansulatuskanavan ulkopuolisen annostelun ihonalaiset ja lihaksensisäiset muodot ovat tavallisesti edullisia. Päivit-30 täinen ruoansulatuskanavan ulkopuolinen yhdisteen hoitoannos on edullisesti noin 0,1 mg:sta noin 1000 mg:aan päivässä.

• < Päivittäinen suun kautta annettava hoitoannos on edullisesti noin 1 mgrsta 2000 mg:aan.

35 Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan myös antaa inhalaatiol-la. "Inhalaatiolla" tarkoitetaan nenän tai suun kautta tapahtuvaa inhalaatioannostusta. Tällaiseen annosteluun sopivat annostelumuodot, kuten aerosoliformulaatio tai mitta-annosin- it halaattori, voidaan valmistaa tunnetuilla menetelmillä. Kaa van (I) mukaisen yhdisteen edullisen päiväannoksen määrä on noin 10 mg:sta noin 100 mg:aan päivässä.

21 93006 5 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voi myös annostella paikallisesti .

Se kaavan (I) mukaisen yhdisteen (jota jäljempänä kutsutaan aktiiviseksi ainesosaksi) määrä, joka paikallisesti annostel-10 taessa tarvitaan terapeuttisen vaikutuksen aikaansaamiseksi, vaihtelee tietenkin valitun yhdisteen, tulehdustilan luonteen ja vakavuuden ja hoidettavan eläimen mukaan, ja on lopullisesti lääkärin arvion alainen. Sopiva kaavan (I) mukaisen yhdisteen immunomoduloiva annos on 1,5 μg:sta 500 mg:aan ai-15 netta yhtä ruumiinpainokiloa kohti, edullisimman annoksen ollessa 1 μg - 50 mg/eläimen ruumiinpainokilo, esimerkiksi 5 μg - 25 mg/kg; annettuna 2-3 kertaa päivässä. Käytettäessä iholle voidaan käyttökerralla levittää l μ9 - useita mg aktiivista ainesosaa, edullisesti noin 10 μg - 100 μg levitystä 20 kohti.

Paikallisella annostelulla tarkoitetaan ei-systeemistä annostelua ja siihen kuuluu kaavan (I) mukaisen yhdisteen levittäminen ulkoisesti ihon pintakerrokseen, suuonteloon tai täl-25 laisen yhdisteen tiputtaminen korvaan, silmään ja nenään, ja sinne, missä yhdistettä ei merkittävästi pääse vereen. Sys-teemisellä annostelulla tarkoitetaan suun kautta tapahtuvaa, suonensisäistä, vatsaontelonsisäistä ja lihaksensisäistä an-nostelumuotoa.

30

Vaikkakin on mahdollista annostella aktiivinen ainesosa raa-kakemikaalina, on edullista saattaa se käyttöön farmaseuttisen kaavan mukaan valmistettuna. Paikalliseen annosteluun tarkoitettu aktiivinen ainesosa voi käsit-35 tää 0,001 - 10 paino-%, esimerkiksi 1-2 paino-% valmistus-kaavasta, vaikkakin se voi käsittää jopa 10 paino-%, mutta edullisesti ei yli 5 paino-% ja edullisemmin 0,01 - l : paino-% valmistuskaavasta.

22 93006 Tämän keksinnön mukaiset paikallisannosteluun tarkoitetut valmistuskaavat, jotka on tarkoitettu sekä eläinlääketieteelliseen käyttöön että ihmisten lääkitykseen, käsittävät siksi aktiivisen ainesosan yhdessä yhden tai useamman hyväksyttävän 5 kantaja-aineen, ja valinnaisesti minkä tahansa muun (muiden) terapeuttis(t)en ainesosan (-osien) kanssa. Kantaja-aineiden täytyy olla 'hyväksyttäviä' siinä mielessä, että ne ovat yhteensopivia muiden valmistuskaavan ainesosien kanssa eivätkä ole haitallisia tämän saajalle.

10

Paikalliseen annosteluun sopiviin valmistuskaavoihin kuuluvat nestemäiset tai puolittain nestemäiset valmisteet, jotka soveltuvat kulkeutumaan ihon läpi siihen kohtaan, jossa hoitoa tarvitaan kuten: linimentit, liuokset, voiteet, salvat tai 15 pastat ja tipat, jotka soveltuvat silmään, korvaan tai nenään tapahtuvaan annosteluun.

Tämän keksinnön mukaiset tipat voivat käsittää steriilejä vesipitoisia tai öljypitoisia liuoksia tai suspensioita ja 20 niitä voidaan valmistaa liuottamalla aktiivinen ainesosa sopivaan bakteereja ja/tai sieniä tappavan aineen vesiliuokseen ja/tai mihin tahansa muuhun sopivaan säilöntäaineeseen, ja liittämällä mukaan edullisesti pinta-aktiivinen aine. Saatu liuos voidaan sitten kirkastaa suodattamalla, siirtää sopi-25 vaan säiliöön, joka sitten suljetaan ja steriloidaan autokla-: voimalla tai pitämällä se 90 - 100 °C:ssa puolen tunnin ajan.

Vaihtoehtoisesti liuos voidaan steriloida suodattamalla ja siirtää säiliöön aseptista menetelmää käyttäen. Esimerkkejä sopivista tippoihin yhdistettävistä bakteereja ja sieniä tap-30 pavista aineista ovat fenyylielohopeanitraatti tai -asetaatti (0,002 %) , bentsalkoniumkloridi (0,01 %) ja klorheksidiini-asetaatti (0,01 %). Öljypitoisen liuoksen valmistukseen sopiviin liuotusaineisiin kuuluvat glyseroli, laimennettu alkoholi ja propyleeniglykoli.

35 Tämän keksinnön mukaisiin liuoksiin kuuluvat sellaiset liuokset, jotka soveltuvat vietäviksi iholle tai silmiin. Silmä-: liuos voi käsittää steriilin vesipitoisen liuoksen, joka voi li 93006 23 valinnaisesti sisältää bakteereja tappavaa ainetta ja tämä voidaan valmistaa samoilla menetelmillä, joita käytettiin tippojen valmistukseen. Iholle levitettävät liuokset ja linimentit voivat myös sisältää kuivumista nopeuttavaa ja ihoa 5 viilentävää ainetta, kuten alkoholia tai asetonia, ja/tai kosteuttavaa ainetta, kuten glyserolia tai öljyä, kuten risiini- tai maapähkinäöljyä.

Tämän keksinnön mukaiset voiteet, salvat tai pastat ovat ak-10 tiivisen ainesosan ulkoiseen levitykseen tarkoitettuja puoli-kiinteitä valmistuskaavoja. Niitä voidaan tehdä sekoittamalla hienojakoinen tai jauhemainen aktiivinen ainesosa joko sellaisenaan tai liuoksena tai suspensiona vesipitoisessa tai vedettömässä nesteessä sopivan laitteen avulla rasvaisen tai 15 rasvattoman perusaineen kanssa. Perusaine voi käsittää hiilivetyjä, kuten kova, pehmeä tai nestemäinen paraffiini, glyseroli, mehiläisvaha, metallisaippua, arabikumiliuos; luon-nonöljyjä, kuten manteli-, maissi-, maapähkinä-, risiini- tai oliiviöljy; villarasvaa tai sen johdannaisia, tai rasvahapon, 20 kuten steaarihapon tai öljyhapon yhdessä alkoholin, kuten propyleeniglykolin tai makrogolien kanssa. Valmistuskaavaan voi sisältyä mikä tahansa sopiva pinta-aktiivinen aine, kuten anioninen, kationinen tai ioniton pinta-aktiivinen aine, kuten sorbitaaniesterit tai näiden polyoksietyleenijohdannai-25 set. Mukaan voidaan myös liittää suspentoivia aineita, kuten >*; luonnon kasvikumeja, selluloosajohdannaisia tai epäorgaanisia materiaaleja, kuten piimaapohjaiset vesilasit, ja muita ainesosia, kuten lanoliini.

30 Alan ammattimiehelle on selvää, että yksittäisten kaavan (I) tai kaavan (II) mukaisten yhdisteiden optimimäärä ja optimaalinen annosteluväli määräytyy hoidettavan sairaustilan luonteesta ja vaikeusasteesta, annostelumuodosta ja -kohdasta, ja hoidettavasta eläimestä ja että näitä optimeja voidaan mää-35 rittää tavanomaisilla menetelmillä. Alan ammattimies ymmärtää myös sen, että hoidon optimaalinen kulku, s.o. kaavan (I) tai kaavan (II) mukaisten yhdisteiden päiväannosten lukumää-. rät määriteltyjen päivien aikana on alan ammattimiehen var- 24 93006 niistettävissä käyttämällä tavanomaisia hoidon kulun määritykseen käytettäviä testejä.

Tarkempiin yksityiskohtiin menemättä on luultavaa, että alan 5 ammattimies voi edellä olevaa kuvausta käyttäen hyödyntää tätä keksintöä sen täydessä laajuudessa. Seuraavat esimerkit on siksi laadittu ainoastaan kuvaaviksi, eivätkä ne millään tavalla rajoita tämän keksinnön kattamaa sovellusaluetta.

10 Esimerkit I. Koostumusesimerkit

Esimerkki A - Kapselin koostumus 15

Kapselin muodossa oleva, tämän keksinnön mukainen farmaseuttinen koostumus valmistetaan täyttämällä normaali kaksiosainen kova gelatiinikapseli 50 mg:11a jauhemaista kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä, 110 mg:lla laktoosia, 32 2 0 mg:11a talkkia ja 8 mg:11a magnesiumstearaattia.

Esimerkki B - Ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti injektoitava koostumus 25 Injektioannostukseen sopivassa muodossa oleva, tämän keksin-:· nön mukainen farmaseuttinen koostumus valmistetaan sekoitta malla 1,5 paino-% kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä 10 tilavuus-% glyseroliin ja veteen. Liuos steriloidaan suodattamalla.

30

Esimerkki C - Salvakoostumus

Kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä 1,0 g Valkoista pehmeää paraffiiniä täytetään 100 g:ksi.

35 Kaavan (I) tai kaavan (II) mukainen yhdiste dispergoidaan pieneen tilavuuteen kantajaa ja se viedään vähitellen pääosaan kantajaa tasaisen ja tasa-aineisen tuotteen tuottami- li 93006 25 seksi. Puristettavat metalliputkilot täytetään sitten dispersiolla.

Esimerkki D - Paikallisvoidekoostumus 5

Kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä 1,0 g Polawax GP 200 20,0 g vedetöntä lanoliinia 2,0 g kirkasta mehiläisvahaa 2,5 g 10 metyylihydroksibentsoaattia 0,1 g tislattua vettä täytetään 100,0 g:ksi

Polawax, mehiläisvaha ja lanoliini kuumennetaan yhdessä 60 °C:ssa. Lisätään metyylihydroksibentsoaattiliuos ja tasa-15 aineisen seoksen saamiseksi käytetään nopeaa sekoitusta. Lämpötilan annetaan sitten laskea 50 °C:een. Sitten lisätään kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä ja se disper-goidaan kauttaaltaan ja koostumuksen annetaan jäähtyä pienellä sekoitusnopeudella.

20

Esimerkki E - Nestekoostumus paikallisannostukseen

Kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä 1,0 g sorbitaanimonolauraattia 0,6 g 25 Polysorbaatti 20:a 0,6 g setostearyylialkoholia 1,2 g glyseriiniä 6,0 g metyylihydroksibentsoaattia 0,2 g puhdistettua vettä B.P. lisätään 100,00 ml:ksi 30

Metyylihydroksibentsoaatti ja glyseriini liuotetaan 70 ml:aan vettä 75 °C:ssa. Sorbitaanimonolauraatti, polysorbaatti 20 ja setostearyylialkoholi sulatetaan yhdessä 75 °C;ssa ja lisätään vesipitoiseen liuokseen. Saatu emulsio homogenoidaan, 35 sen annetaan jäähtyä jatkuvasti sekoittaen ja kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä lisätään loppuun veteen tehtynä suspensiona. Koko suspensiota sekoitetaan, kunnes se on *· saatu homogeeniseksi.

26 93006

Esimerkki F - Silmätippakoostumus

Kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä 0,5 g metyylihydroksibentsoaattia 0,01 g 5 propyylihydroksibentsoaattia 0,04 g puhdistettua vettä lisätään 100,00 ml:ksi (B.P = Britannian farmakopea)

Metyyli- ja propyylihydroksibentsoaatit liuotetaan 70 ml:aan 10 puhdistettua vettä 75 °C:ssa ja saadun liuoksen annetaan jäähtyä. Sitten lisätään kaavan (I) tai kaavan (II) mukainen yhdiste ja liuos steriloidaan suodattamalla kalvosuodattimen läpi (huokoskoko 0,22 μπι) ja se pakataan aseptisesti sopiviin steriileihin säiliöihin.

15

Esimerkki G - Inhalaatioannostuskoostumus 15-20 ml:n vetoista aerosolisäiliötä varten: Sekoitetaan 10 mg kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä 0,2 - 0,2-20 %:n voiteluaineen, kuten polysorbaatti 85:n tai öljyhapon, kanssa ja dispergoidaan tämä seos ponneaineeseen, kuten freoniin, edullisesti yhdessä (1,2 diklooritetrafluorietaanin) ja difluorikloorimetaanin kanssa ja täytetään näillä sopiva aerosol isäiliö, joka soveltuu joko nenäontelon tai suun kautta 25 tapahtuvaan inhalaatioannosteluun.

• 4

Esimerkki H - Inhalaatioannostelukoostumus 15-20 ml:n vetoista aerosolisäiliötä varten: Sekoitetaan 10 30 mg kaavan (I) tai kaavan (II) mukaista yhdistettä etanoliin (6 - 8 ml), lisätään 0,1 - 0,2 % voiteluainetta, kuten polysorbaatti 85:a tai öljyhappoa; ja dispergoidaan tämä seos ponneaineeseen, kuten freoniin, edullisesti yhdessä (1,2-diklooritetrafluorietaanin) ja difluorikloorimetaanin kanssa 35 ja viedään nämä sopivaan aerosolisäiliöön, joka soveltuu joko nenäontelon tai suun kautta tapahtuvaan inhalaatioannoste-luun.

Il 93006 27 II. Synteesiesimerkit

Seuraavissa esimerkeissä lämpötila on Celsius-asteita (°C) . Seuraavissa synteesiesimerkeissä esitettyjen menetelmien 5 avulla valmistettujen kaavan (I) ja kaavan (II) mukaisten yhdisteiden alkuaineanalyysit ja sulamispisteet on luetteloitu taulukoissa 3 ja 4.

Natriumhydridi, trimetyylisulfoksoniumjodidi, metyylivinyyli-10 ketoni, etyylisyanoasetaatti, morfOliini, litiumaluminiumhy-dridi, booritrifluoridieteraatti, heptan-4-oni, nonan-5-oni, undekan-6-oni, 4-(1,1-dimetyylietyyli)sykloheksanoni, 4-syk-loheksyylisykloheksanoni, valeriaanahappoaldehydi, allyyli-bromidi, dodekanaali, 2,3-dimetyylivaleriaanahappoaldehydi, 15 2-etyylibutyylialdehydi, 2-etyyliheksanaali, adamantanoni, bisyklo(3.3.1)nonan-9-oni, 3-dimetyyliaminopropyyliamiini, 3-dietyyliaminopropyyliamiini, di-isobutyyliamiini, 2,6-dime-tyyliheptan-4-oni, sykloheptanoni, etikkahappoanhydridi, Triton B, ja 3-metyyliaminopropyyliamiini hankittiin yhtiöstä 20 Aldrich Chemicals (Milwaukee, Wisconsin, U.S.A.). 3-(1-pipe- ridiini) propyyliamiini syntetisoitiin pelkistämällä 1-piperi-diinipropionitriili (Aldrich Chemicals (Milwaukee, Wisconsin, U.S.A.) litiumaluminiumhydridillä.

25 4-Dimetyyliaminobutyyliamiini ja 6-dimetyyliaminoheksyyli- . amiini hankittiin yhtiöstä Pfaltz and Bauer (Waterbury, Con necticut, U.S.A.). 5-Dimetyyliaminopentyyliamiini ja 7-dime-tyyliaminoheptyyliamiini hankittiin yhtiöstä Karl Industries (Aurora, Ohio, U.S.A.).

30 3-Aminopropaaninitriili ja 3-(1-pyrrolidiini)propyyliamiini hankittiin yhtiöstä Alfa Chemicals (Danvers, Massachusetts, U.S.A.). 6-(1-Piperidiini)heksyyliamiini valmistettiin kah dessa vaiheessa alkyloimalla 6-bromoheksyyliamiini (Aldrich 35 Chemicals) piperidiinillä ja pelkistämällä tämän jälkeen litiumaluminiumhydridillä. 6-(1-pyrrolidiini)heksyyliamiini valmistettiin samoin tähän tarvittavista bromonitriilistä ja • pyrrolidiinistä.

28 93006

Osa 1: 4,4-Disubstituoitujen sykloheksanonien synteesi

Kaavio l on pääpiirteittäinen esitys 4,4-disubstituoitujen sykloheksanonien yleisestä synteesistä lähtien joko kaupalli-5 sesti saatavilla olevasta ketonista tai a, a-disubstituoidusta aldehydistä.

Kaavio l

VtfCH^S+Or 0 BPjOEt? Rj O

o ->- %Δ - > V<

Triton B

.0 O

netyylivinyyliketoni y y tert-butanoll ^ [Ίΐ *** 10%M/C ^ etyyliasetaatti metyylivinyyliketoni ✓ X »''n H2S04 (katal.) "^2 ^ ‘ 10

Esimerkit 1-5 kuvaavat erityisesti 4,4-dipropyylisykloheksa-nonin synteesin heptan-4-onista, mutta tätä menetelmää on ·* käytetty seuraavien sykloheksanonien valmistukseen lähtien 15 seuraavassa luetelluista kaupallisesti saatavilla olevista ketoneista: ketoni sykloheksanoni 2,6-dimetyyliheptanoni 4,4-bis(2-metyylipropyyli)-no- 20 nan-5-oni 4,4-dibutyyli- undekan- 6 -oni 5,5-dipentyyli- sykloheptanoni spiro[5.6]dodekan-3 -oni 2 -adamantanoni spiro(sykloheksaani-1,2'- trisyklo [3.3.1.13,7] de- 25 kan-4-oni • ·

Il : 29 93006

Seuraavissa tapauksissa oli saatavilla a,α-disubstituoidut aldehydit ja näistä syntetisoitiin 4,4-disubstituoidut syklo-heksanonit: 5 aldehydi sykloheksanoni 2 -etyylibutyraldehydi 4,4-dietyyli- 2 -etyyliheksanaali 4 -butyyli- 4 -etyyli- 2,3-dimetyylivaleriaana- 4-metyyli-4-(1-metyyliprohap- 10 poaldehydi pyyli

Toinen paremman saaliin antava tie erityisesti 2-propyylipen-tanaalin syntetisoimiseksi on kuvattu kaaviossa 2. Nämä menetelmät on esitetty pääpiirteittäin esimerkeissä 5 ja 6.

15

Kaavio 2 ^ tolueeni ' I I palautus Jiiah- ® -h2o I l) allyyllbrouidi y I I asatonltrilli ^ /

\ X

H* 10¾ Pd/C / —=—** W“ o 20 « 93006 30

Esimerkki 1: 2-Propyyli-l,2-epoksipentaani

Dimetyylisulfoksidi (1 1/mooli) lisättiin hitaasti mekaanisesti sekoitettuun natriumhydridin (1,1 ekvivalenttia) ja 5 trimetyylisulfoksoniumjodidin (1 ekvivalentti) seokseen iner-tin atmosfäärin alla. Tästä seurasi voimakas vedyn kehitys ja kaasun kehittymisen päätyttyä lisättiin heptan-4-onia (0,4 ekvivalenttia) ja reaktioseosta kuumennettiin 75 °C:ssa 3 -24 tunnin ajan. Reaktioseos juoksutettiin veteen (3 - 5 ti-10 lavuutta) ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen uute kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jotta saatiin haluttu tuote (saanto 85 %) , jota käytettiin pidemmälle puhdistamatta.

15 Esimerkki 2: 2-Propyylipentanaali

Voimakkaasti sekoitettuun, 0 °C:een jäähdytetyssä bentseenis-sä olevaan 2-propyyli-l,2-epoksipentääniin (1 ekvivalentti), joka oli valmistettu esimerkissä 1 olevan kuvauksen mukaises-20 ti, lisättiin bentseeniin valmistettua booritrifluoridiete-raattiliuosta (0,5 ekvivalenttia). Reaktioseosta sekoitettiin 1 minuutin ajan ja reaktio lopetettiin lisäämällä vettä. Faasien erottumisen jälkeen orgaaninen faasi pestiin kylläisellä veteen tehdyllä natriumbikarbonaatilla ja vedellä, kui-25 vattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, > jotta saatiin väritön öljy. Öljy tislattiin, jotta saatiin haluttu tuote värittömänä öljynä; saanto 75 %; kiehumispiste (k.p.) 60 - 63 °C/13,3 Pa.

30 Esimerkki 3: 4,4-Dipropyylisykloheks-2-enoni

Menetelmä 1: Emäksen (Triton B, 0,05 ekvivalenttia) tert- butanolissa olevaan liuokseen lisättiin yhtä aikaa eri tipu-tussuppiloista esimerkin 2 mukaisesti valmistettua 2-propyy-35 lipentanaalia (l ekvivalentti), ja metyylivinyyliketöniä (1,2 ekvivalenttia) 1 tunnin kuluessa siten, että lämpötila pysyi 15 °C:n alapuolella. Reaktioseokseen lisättiin tämän jälkeen väkevää suolahappoa (0,02 - 0,2 ekvivalenttia) ja liuos väke- 93006 31 voitiin tahmeaksi öljyksi. Öljy liuotettiin etyyliasetaat tiin ja pestiin kahdesti 0,5 M natriumhydroksidiliuoksella. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä, suodatettiin ja väkevöitiin, jotta lasihelmikolonnitislauksen jäl-5 keen saatiin haluttu tuote; k.p. 75 - 80 °C/6,7 Pa; saanto 20 -35 %.

Menetelmä 2: Bentseenissä (400 ml/mooli) olevaan 2-propyyli- pentanaalin (1 ekvivalentti) ja metyylivinyyliketonin (1 ek-10 vivalentti) liuokseen lisättiin väkevää rikkihappoa (3 ml/mooli). Reaktioseos kuumennettiin palautusjäähdyttäen käyttäen Dean-Stark-vesiloukkua. Palautusjäähdytystä jatkettiin 3-5 tunnin ajan eikä enempää veden erottumista havaittu. Musta reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja 15 pestiin kylläisellä natriumbikarbonaatilla. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, jotta saatiin tummanruskea öljy. Öljy tislattiin lasihelmi-täytteisessä kolonnissa, jotta saatiin haluttu tuote värittömänä öljynä; k.p. 75 - 85 °C/10 Pa, saanto 65 - 75 %.

20

Esimerkki 4: 4,4-Dipropyylisykloheksanoni

Etyyliasetaatissa olevaan 10-%:een palladiumpäällysteiseen hiileen (0,1 ekvivalenttia) lisättiin 4,4-dipropyylisyklo-25 heks-2-enonia, joka oli valmistettu esimerkissä 3 kuvatulla i tavalla. Reaktioseos vedytettiin 300 N/m2 vetyä Parr-vedytys- laitteessa huoneenlämpötilassa, kunnes vedyn otto oli lakannut (0,5 - 5 tuntia). Katalyytti poistettiin suodattamalla piimaalla ja suodos väkevöitiin halutun tuotteen saamiseksi 30 värittömänä öljynä. Tuote käytettiin ilman jatkopuhdistusta. Saanto oli 98 %.

Esimerkki 5: 2-Propyylipent-4-enaali 35 Tolueeni, valeriaanahappoaldehydi (1 ekvivalentti), jadi-isobutyyliamiini (1 ekvivalentti) yhdistettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen Dean-Stark-vesiloukkua käyttäen.

* • Kuumennusta jatkettiin, kunnes veden kertyminen loukkuun lak- 32 93006 kasi (kerättiin 1 ekvivalentti vettä). Reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja tolueeni poistettiin alipaineessa. Värittömään jäännökseen lisättiin asetonitriiliä (500 ml/mooli), jonka jälkeen lisättiin allyylibromidia (1,5 5 ekvivalenttia) . Reaktioseosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen 16 - 24 tunnin ajan.

Reaktioseosta käsiteltiin puskuriliuoksella ((etikkahappo (60 ml)/natriumasetaatti (30 g)/vesi (300 ml))/mooli) ja kuumen-10 nettiin palautusjäähdyttäen 5 tunnin ajan. Kirkas oranssin-ruskea liuos jäähdytettiin huoneenlämpöön ja tähän lisättiin etyyliasetaattia (300 ml/mooli) ja suolavettä (150 ml/mooli). Orgaaninen faasi pestiin tämän jälkeen 10-%:11a vesipitoisella suolahapolla, vedellä, kylläisellä vesipitoisella natrium-15 bikarbonaattiliuoksella ja suolavedellä. Orgaaninen uute kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä, suodatettiin ja väke-vöitiin, jotta saatiin ruskea öljy. Öljy jakotislattiin halutun tuotteen saamiseksi; k.p. 68 - 73 °C/4000 Pa; saanto oli 50 %.

20

Esimerkki 6: 2-Propyylipentenaali

Parr-vedytyslaitteeseen vietiin 10 % palladiumpäällysteistä hiiltä (0,1 ekvivalenttia) ja etyyliasetaattia. Lisättiin 25 esimerkin 5 mukaisesti valmistettua 2-propyylipent-4-enaalia »· etyyliasetaatissa. Seos vedytettiin 300 N/m2 vetyä Parr-vedy- tyslaitteessa huoneenlämpötilassa, kunnes vedyn otto oli lakannut. Katalyytti poistettiin suodattamalla piimään läpi. Suodos väkevöitiin halutun tuotteen saamiseksi värittömänä 30 öljynä. Tuote käytettiin ilman jatkopuhdistusta.

, Osa IA: 4-Substituoitujen sykloheksanonien synteesi 4-Dekyylisykloheksanonin synteesi kuvataan esimerkissä 7. 35 Muut suoraketjuiset, haaroittuneet tai sykliset a-substitu-oidut aldehydit voitaisiin muuttaa 4-substituoiduiksi syklo-heksanoneiksi.

♦ »« II; 93006 33

Esimerkki 7: 4-Dekyylisykloheksanonin synteesi

Kaliumkarbonaatin (1 ekvivalentti) ja morfoliinin (3,3 ekvivalenttia) seos jäähdytettiin -5 °C:n lämpötilaan inertin 5 atmosfäärin alla ja dodekanaalia (1 ekvivalentti) lisättiin tipoittain 30 minuutin ajan. Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpöiseksi ja sekoitusta jatkettiin 3-6 tunnin ajan. Eetteriin lisäämisestä ja tätä seuraavista suodatuksesta ja väkevöinnistä saatiin raaka morfoliinieeniamiini. 10 Jäännös tislattiin halutun tuotteen saamiseksi; k.p. 103 -108 °C/9,3 Pa; saanto oli 74 %.

Edellä kuvattu morfoliinieeniamiini (1 ekvivalentti) ja me-tyylivinyyliketoni (1,05 ekvivalenttia) yhdistettiin ja se-15 koitettiin yli yön huoneenlämmössä inertin atmosfäärin alla.

Lisättiin puskuriliuosta ((natriumasetaatti (70 g)/etikkahap-po (700 ml)/etanoli (525 ml)/vesi (175 ml))/mooli ja liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 4-6 tunnin ajan. Haihtuvat ainesosat poistettiin alipaineessa ja paksulle ruskealle 20 öljylle tehtiin jaotteleva uutto etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen faasi pestiin vedellä ja suolavedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä, suodatettiin ja väke-vöitiin, jotta saatiin vaaleanruskea tahmea öljy. Öljy tislattiin lasihelmitäytteisessä kolonnissa, jotta saatiin väri-25 tön tahmea öljy, k.p. 122 - 135 °C/29,3 Pa; saanto oli 40 %.

• I

Edellä syntetisoitu sykloheksanoni vedytettiin esimerkissä 6 kuvatulla tavalla, jotta saatiin 4-dekyylisykloheksanoni. Tuotetta käytettiin ilman jatkopuhdistusta.

30

Osa 2: Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa m on 1 ja R3 ja

R* ovat muita kuin H

Kaaviossa 3 on esitetty pääpiirteittäin sellaisten atsaspi-35 raanianalogien yleinen synteesi, jotka ovat kaavan (I) mukaisia, joissa m on 1; R3 ja R4 ovat muita kuin H, ja n, R, ja R2 ovat määritelty edellä esitetysti, käyttäen lähtöaineina sopivasti substituoituja sykloheksanoneja.

Kaavio 3 34 93006 O NC ODOEt

JL Y

Γ | NCCHaCOOEt ^ KQ< «tikkahappo 11 EtOH,95°

ns \ _ natriiunasetaatti yC

* 1(2 «f XR,

COOH

L COOH _ HO/HOAe/HjO ><^ AejO Rl\/ \ R, Ra

HjNiCHai.NR^ -Wy a l)U^ >- M-vC, ~ XXV· x \.

• 2J« Rs 5 Esimerkit 8-12 kuvaavat 2-(3-dimetyyliaminopropyyli)-8,8-dietyyli-2-atsaspiro[4.5]dekaanidihydrokloridin synteesin 4.4- dietyylisykloheksanonista. Seuraavien syklisten ketonien annettiin reagoida samoin, jotta saatiin kaavan (I) mukaisia analogisia johdannaisia, ja näihin kuuluvat: 10 4.4- dipropyylisykloheksanoni 4.4- dibutyylisykloheksanoni 4.4- dipentyylisykloheksanoni 4.4- bis(2-metyylipropyyli)sykloheksanoni 15 4 - etyyli -4-butyylisykloheksanoni 4-metyyli-4-(1-metyylipropyyli)sykloheksanoni 4-sykloheksyylisykloheksanoni li 93006 35 4 -dekyylisykioheksanoni 4-(1,1-dimetyyli)sykloheksanoni

Esimerkki 11 kuvaa anhydridin reaktion dimetyyliaminopropyy-5 liamiinin kanssa, jotta saadaan haluttu imidi. Samalla tavoin on kondensoitu 4,4-dipropyylisykloheksaani-l-karboksi-l-etikkahappoanhydridi yhdisteiden: 4-dimetyyliaminobutyyliamiini 10 5-dimetyyliaminopentyyliamiini 6 - dime tyyl iaminoheksyyl iami ini 7 - dime tyyl iaminoheptyyl iamiini 3-dimetyyliaminopropyyliamiini 3-(l-piperidiini)propyyliamiini 15 6-(1-piperidiini)heksyyliamiini 3-(1-pyrrolidiini)propyyliamiini 6-(1-pyrrolidiini)heksyyliamiini kanssa ja pelkistetty tämän jälkeen, kuten esimerkissä 12 on 20 kuvattu, halutun tuotteen saamiseksi hydrokloridin muodosta misen jälkeen.

Samalla tavoin voidaan mikä tahansa sopivasti substituoidusta sykloheksanonista johdettu anhydridi saattaa reagoimaan minkä 25 tahansa edellä luetellun amiinin kanssa ja saattaa edelleen reagoimaan esimerkin 12 mukaisesti, jotta saadaan haluttu atsaspiraanianalogi.

Esimerkki 8: Etyyli-a-syaani-a-(4,4-dietyylisykloheksylidee- 30 ni)asetaatti

Tolueenissa olevaan 4,4-dietyylisykloheksanoniliuokseen (1 ekvivalentti) lisättiin etyylisyaaniasetaattia (1 ekvivalentti) , etikkahappoa (0,2 ekvivalenttia) ja ammoniumasetaattia 35 (0,1 ekvivalenttia). Seos kuumennettiin palautusjäähdyttäen käyttäen Dean-Stark-laitetta keräämään talteen atseotrooppi-sesti reaktiosta poistuneen veden. Kun yksi ekvivalentti vettä oli kerätty, reaktioseos jäähdytettiin ja pestiin ve- 36 93006 della ja kylläisellä natriumbikarbonaattiliuoksella. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös puhdistettiin tislaamalla lasihelmi täyt teisessä kolonnissa, jotta saatiin haluttu tuote 5 värittömänä öljynä; k.p. 92 - 98 °C/20 Pa; saanto oli 80 -95 %.

Esimerkki 9: 4,4-Dietyylisykloheksaani-1-karboksi-1-etikka- happo 10

Etanolissa olevaan, edellä kuvatulla tavalla valmistetun etyyli-a-syaani-a-(4,4-dietyylisykloheksylideeni)asetaatin liuokseen (1 ekvivalentti) lisättiin vedessä olevaa kaliumsy-anidiliuosta (1,15 ekvivalenttia). Reaktioseos kuumennettiin 15 50 - 85 °C:ssa 3-9 tunnin ajan ja väkevöitiin sitten kui vaksi. Jäännös käsiteltiin suolahapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä, suodatettiin ja väkevöitiin. Jäännös liuotettiin koostumuksen etikkahappo/suolahappo/vesi ((4,5 20 1/2 1/0,2 1)/mooli) omaavaan seokseen ja kuumennettiin palau tus jäähdyttäen 2-5 päivän ajan. Haihtuvat aineet poistettiin alipaineessa ja kiinteälle jäännökselle tehtiin jaotte-leva uutto etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen uute kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin, 25 jotta saatiin haluttu dihappo valkeana kiinteänä aineena.

:v Uudelleenkiteytyksellä etyyliasetaatista saatiin valkea ki teinen kiinteä aine; sp. 150 - 152 °C, saanto oli 75 - 85 %.

Esimerkki 10: 4,4-Dietyylisykloheksaani-1-karboksi-l-etikka- 30 happoanhydridi

Esimerkin 9 mukaan valmistettu 4,4-dietyylisykloheksaani-l-karboksi-l-etikkahappo liuotettiin etikkahappoanhydridiin ja palautusjäähdytettiin 1-6 tunnin ajan. Ylimäärä etikkahap-35 poanhydridiä poistettiin alipainetislauksella ja jäännös ki teytettiin uudelleen heksaaneista; sp. 91 - 93 °C; saanto oli 90 - 95 %.

«

II

93006 37

Huomaa: Tapauksissa, joissa lähtöaineena olevan syklohek- sanonin 4-asemassa olevat substituentit eivät ole identtisiä, erotettiin geometrisesta isomeeriset anhydridit kromatografi-sesti preparatiivisella Waters 500-järjestelmällä käyttäen 5 heksaani/etyyliasetaattiseoksia eluenttina.

Esimerkki 11: 2-(3-Dimetyyliaminopropyyli)-8,8-dietyyli-2- atsaspiro[4.5]dekaani-l,3-dioni 10 Tolueenissa olevaan 4,4-dietyylisykloheksaani-1-karboksi-l- etikkahappoanhydridilluokseen (1 ekvivalentti) lisättiin 3-dimetyyliaminopropyyliamiinia (1,05 ekvivalenttia) ja reak-tioseos kuumennettiin palautusjäähdyttäen Dean-Stark-loukkua käyttäen. Loukussa olevan veden talteenoton ((1 ekvivalent-15 ti) jälkeen reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpöön ja liuo tin poistettiin alipaineessa. Jäännös käytettiin suoraan ilman jatkopuhdistusta.

Esimerkki 12: 2-(3-Dimetyyliaminopropyyli)-8,8-dietyyli-2- 20 atsaspiro[4.5]dekaanidihydrokloridi

Dietyylieetterissä olevaan litiumaluminiumhydridiin (4 ekvivalenttia) lisättiin tipoittain dietyylieetterissä olevan, esimerkissä 11 kuvatulla tavalla valmistetun 2-(3-dimetyyli-2 5 aminopropyyli)- 8,8 -dietyyli-2 -atsaspiro[4.5]dekaani-1,3 -dio- nin liuosta (1 ekvivalentti). Reaktioseosta sekoitettiin 2 -6 tuntia lisäyksen päättymisestä. Hydridiylimäärä tuhottiin natriumsulfaattidekahydraatilla ja saatu seos suodatettiin ja suodos väkevöitiin halutun amiinin saamiseksi värittömänä 30 öljynä; saanto oli 90 - 95 %.

Öljy liuotettiin minimimäärään vedetöntä etanolia ja siihen lisättiin etanolissa oleva suolahappoliuos. Lisättäessä suuri tilavuus eetteriä muodostui valkea sakka, joka eristettiin 35 suodattamalla. Valkea kiinteä aine kiteytettiin uudelleen etanolista; sp. 298 - 299 °C (hajoaminen). Saanto oli 90 %.

38 93006

Osa 3: Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa m on 1 ja R3 ja

R4 ovat H

Kaaviossa 4 on esitetty pääpiirteittäin sellaisten atsaspi-5 raanianalogien yleinen synteesi, jotka ovat kaavan (I) mukaisia, missä m on 1; R3 ja R4 ovat H, ja n, R, ja R2 ovat määriteltyjä edellä esitetysti, käyttäen lähtöaineina sopivasti 6äBSfe$t&oituja sykloheksanoneja.

»LiAlH, /H

»HQ/EtOH 1/

.2 Ηα X \H

• <

Esimerkit 13 ja 14 kuvaavat 2-(3-aminopropyyli)-8,8-dipropyy-li-2-atsaspiro[4.5]dekaanidihydrokloridin synteesin 4,4-dip-ropyylisykloheksaani-1-karboksi-1- et ikkahappoan hydridistä.

15

Samalla tavalla voidaan sopivasti substituoidut sykloheksano-nit ja näistä johdetut edellä kuvatut anhydridit saattaa reagoimaan ω-aminoalkyylinitriilien (n = 4 - 7) kanssa, kuten esimerkeissä 13 ja 14, sellaisten haluttujen atsaspiraanien 20 syntetisoimiseksi, joissa R3 = R4 = H.

Il 93006 39

Esimerkki 13 : 2-(2-syaanietyyli)-8,8-dipropyyli-2-atsaspi- ro[4.5]-dekaani-1,3-dioni 4,4 -Dipropyylisykloheksaani-1-karboksi-1-etikkahappoanhydri-5 diliuokseen (1 ekvivalentti), joka oli valmistettu analogisesti esimerkissä 10 valmistetun 4,4-dietyylijohdannaisen kanssa, lisättiin 3-aminopropaaninitriiliä (1,1 ekvivalenttia) ja tolueenia. Reaktioseos kuumennettiin palautusjäähdyttäen Dean-Stark-loukkua käyttäen. Veden talteenoton (1 10 ekvivalentti) jälkeen reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpöön ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös puhdistettiin pyiväskromatografiällä (heksaani/etyyliasetaatti (2/1)) valkean kiinteän aineen saamiseksi; sp. 117 - 117,5 °C; saalis oli 95 %.

15

Esimerkki 14: 2-(3-Aminopropyyli)- 8,8-dipropyyli-2-atsaspi- ro[4.5]dekaanidihydrokloridi

Dietyylieetterissä olevaan litiumaluminiumhydridiin (4 ekvi-20 valenttia) lisättiin tipoittain dietyylieetterissä olevan, esimerkissä 13 kuvatulla tavalla valmistetun 2- (2-syaanietyyli) -8,8-dipropyyli-2 -atsaspiro[4.5]-dekaani-1,3-dioniril iuos -ta (1 ekvivalentti). Reaktioseosta sekoitettiin 2-4 tuntia lisäyksen päätyttymisestä. Hydridiylimäärä tuhottiin nat-25 riumsulfaattidekahydraatilla ja saatu seos suodatettiin ja . suodos väkevöitiin. Saatu neste puhdistettiin preparatiivi- sella nestekromatografiällä (silikageeli; 2,5 % ammoniumhy-droksidi metanolissa) halutun amiinin saamiseksi värittömänä öljynä; saanto oli 73 %.

30 Öljy liuotettiin minimimäärään vedetöntä etanolia ja siihen lisättiin etanolissa oleva suolahappoliuos. Liuos väkevöitiin valkean kiinteän aineen saamiseksi, sp. 245 - 249 °C (hajoaminen); saanto 95 %.

35

Osa 4: Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa m on 1 ja R3 on

muu kuin H ja R4 on H

« 40 93006

Kaaviossa 5 on esitetty pääpiirteittäin sellaisten atsaspi-raanianalogien yleinen synteesi, jotka ovat kaavan (I) mukaisia, jossa m on 1; toinen R3.:sta ja R4:sta on H, ja n, R, ja R2 ovat edellä olevan esityksen mukaisesti määriteltyjä, käyt-5 täen lähtöaineina sopivasti substituoituja sykloheksanoneja.

Kaavio 5 O O a R* -1)L1A1Ha-/r3

2) HCVEtOH

.2 Ha

Esimerkit 15 ja 16 kuvaavat 2-(3-metyyliaminopropyyli)-8,8-10 dipropyyli-2-atsaspiro[4.5]dekaanidihydrokloridin synteesin 4,4- dipropyylisykloheksaani-1-karboks i-1-et ikkahappoanhydri-distä.

Samalla tavalla voidaan sopivasti substituoidut edellä kuva-·· 15 tut sykloheksanonit ja näistä johdetut anhydridit saattaa reagoimaan ω-alkyyliaminoalkyyliamiinien (n = 4 - 8) kanssa sellaisten atsaspiraanien saamiseksi, joissa R3 = alkyyliryhmä ja R4 = H.

20 Esimerkki 15: 2-(3-Metyyliaminopropyyli)-8,8-dipropyyli-2- atsaspiro[4.5]dekaanidioni

Tolueenin j a 4,4 - dipropyyl isykloheksaani -1 - karboksi -1 - et ikka -happoanhydridin liuokseen (1 ekvivalentti) lisättiin 3-metyy-25 liaminopropyyliamiinia (1,05 ekvivalenttia). Reaktioseos kuumennettiin palautusjäähdyttäen Dean-Stark-loukkua käyttä-en. Veden talteenoton (1 ekvivalentti) jälkeen reaktioseos

II

93006 41 jäähdytettiin huoneenlämpöön ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös käytettiin ilman jatkopuhdistusta.

Esimerkki 16: 2-(3-Metyyliaminopropyyli)-8,8-dipropyyli-2- 5 atsaspiro[4.5]dekaanidihydrokloridi

Dietyylieetterissä olevaan litiumaluminiumhydridiseokseen (4 ekvivalenttia) lisättiin tipoittain dietyylieetterissä olevan, esimerkissä 15 kuvatulla tavalla valmistetun 2-(3-metyy-10 liaminopropyyli) -8,8-dipropyyli-2-atsaspiro[4.5]dekaanidionin liuosta (1 ekvivalentti). Reaktion myöhemmät vaiheet tehtiin esimerkin 14 mukaisesti. Tuote puhdistettiin pylväskromato-grafialla (silikageeli; 0,5-%: inen ammoniumhydroksidi metano-lissa) värittömän öljyn saamiseksi; saanto oli 67 %.

15 Öljy liuotettiin minimimäärään vedetöntä etanolia ja siihen lisättiin etanolissa oleva suolahappoliuos. Jäähdytettäessä muodostui valkea sakka, joka eristettiin suodattamalla; sp. 258 - 260 °C (hajoaminen); saanto 84 %.

20

Osa 5: Kaavan (I) mukaiset yhdisteet, jossa m on 2

Kaaviossa 6 on esitetty pääpiirteittäin synteesitie alkyyli-substituoituihin atsaspiro [5.5] undekaanianalogeihin sopivasti 25 substituoiduista sykloheksanoneista lähtien.

Esimerkit 17 - 21 kuvaavat 3-(3-dimetyyliamino)propyyli-9,9-dipropyyli - 3 - atsaspiro [5.5] undekaanidihydrokloridinsynteesin 4,4-dipropyylisykloheksanonista.

42 93006

Kaavio 6 £> ^ χφ-

Rl Rl X)Q; ^ χφ ” XXi\<·^* XXDvi 20 Edellä kuvatun mukaiset (katso osat 1, IA ja 2) , sopivasti substituoidut sykloheksanonit ja näistä tässä osassa esitetyn kuvauksen mukasesti johdetut anhydridit voidaan samoin saattaa reagoimaan: a) synteesiesimerkkien osassa 2 esitetyn kuvauksen mukaisten 25 dialkyyliaminoalkyyliamiinien kanssa sellaisten atsaspiraani- johdannaisten saamiseksi, joissa R3 = R4 = alkyyliryhmä

b) synteesiesimerkkien osassa 3 esitetyn kuvauksen mukaisten aminoalkyylinitriilien kanssa sellaisten atsaspiraanijohdannaisten saamiseksi, joissa R3 = R4 = H

30 c) synteesiesimerkkien osassa 4 esitetyn kuvauksen mukaisten alkyyliaminoalkyyliamiinien kanssa sellaisten atsaspi-raanijohdannaisten saamiseksi, joissa R3 = alkyyliryhmä ja R4 = H.

35 II, 93006 43

Esimerkki 17; 9,9-Dipropyyli-l,5-disyaani-3-atsaspiro[5.5]- undekaani-2,4-dioni

Etanolissa olevaan, 0 °C:een jäähdytettyyn 4,4-dipropyylisyk-5 loheksanonin (1 ekvivalentti) ja etyylisyaaniasetaatin (2 ekvivalenttia) liuokseen lisättiin kylläistä alkoholisen ammoniakin liuosta. Reaktioliuos suljettiin korkilla ja sen annettiin reagoida 0 °C:ssa kahdesta seitsemään päivään. Saostunut disyaani-imidin ammoniumsuola suodatettiin, puris-10 tettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin. Kuivattu suola liuotettiin minimimäärään kiehuvaa vettä ja suodatettiin kuumana. Kuumaa suodosta sekoitettiin ja se tehtiin happameksi väkevällä suolahapolla ja tämän jäähdyttyä saostunut tuote eristettiin suodattamalla, jotta saatiin haluttu imidi; saan-15 to oli 33 %.

Esimerkki 18 : 4,4-Dipropyylisykloheksaani-l,1-dietikkahappo

Esimerkin 17 mukaisen menetelmän mukaan valmistettu 9,9-dip-20 ropyyli-1,5 - disyaani- 3 - atsaspiro [5.5] -undekaani-2,4 - dioni liuotettiin liuokseen, jonka koostumus oli väkevä suolahappo-/etikkahappo/vesi (4/7/1) , ja liuosta kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 2-3 päivää. Reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpöön ja haihtuvat aineet poistettiin pyöröhaihduttajassa. 25 Jäännökselle tehtiin jaotteleva uutto veden ja etyyliasetaa-; tin kesken. Orgaaninen faasi pestiin suolavedellä, kuivat tiin magnesiumsulfaatin päällä, suodatettiin ja väkevöitiin, jotta saatiin haluttu happo, joka kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatti/heksaanit -liuoksesta; saanto oli 35 - 50 %. 30

Esimerkki 19 : 4,4-Dipropyylisykloheksaani-l,1-dietikkahappo- anhydridi

Esimerkissä 18 kuvatulla tavalla valmistettu 4,4-dipropyyli-35 sykloheksaani-1,1-dietikkahappo liuotettiin etikkahappoanhyd-ridiin ja palautusjäähdytettiin 1 - 6 tuntia. Etikkahappo-anhydridin ylimäärä poistettiin alipainetislauksella ja jään- « 44 93006 nös kiteytettiin uudelleen heksaaneista, sp. 91 - 93 °C; saanto oli 90 - 95 %.

Esimerkki 20: 3-(3-Dimetyyliamino)propyyli-9,9-dipropyyli-3- 5 atsaspiro[5.5]undekaani-2,4-dioni Tämä imidi valmistettiin esimerkissä 19 kuvatulla tavalla 9,9-dipropyylisykloheksaani-l,1-dietikkahappoanhydridistä (1 ekvivalentti) ja 3-dimetyyliaminopropyyliamiinista (1 ekviva-10 lentti) esimerkissä 11 esitetyn kuvauksen mukaisesti. Tuote, väritön öljy, käytettiin ilman jatkopuhdistusta.

Esimerkki 21: 3-(3-Dimetyyliamino)propyyli-9,9-dipropyyli-3- atsaspiro[5.5]undekaanidihydrokloridi 15

Amiini valmistettiin pelkistämällä litiumaluminiumhydridillä esimerkissä 16 esitetyn kuvauksen mukaisesti valmistettu 3-(dime tyyl iamino) propyyl i - 9,9 - dipropyyl i - 3 - at saspiro [5.5] unde -kaani-2,4-dioni esimerkissä 12 kuvatun tavan mukaisesti. 20 Raakatuotteena saatu valkea kiinteä aine saostui eetteri-lisäyksellä ja tämä kiteytettiin uudelleen etanolista; sp. >320 °C, hajoaminen; saanto oli 85 - 90 %.

Osa 6: Kaavan (II) mukaisten polysyklisten atsaspiraania- 25 nalogien synteesi 2 -Adamantanoni muunnettiin 4,4-spirosubstituoiduksi syklohek-sanoniksi, kuten osassa 1 on kuvattu, ja muunnettiin sen jälkeen halutuksi atsaspiraanianalogiksi osassa 2 kuvattuja me-30 netelmiä (esimerkit 8-12) käyttäen; 329 - 330°C.

2-Adamantanoni muunnettiin halutuksi atsaspiraanijohdannaiseksi osassa 2 kuvattuja menetelmiä käyttäen (esimerkit 8 - 12); sp. 300 - 302 °C.

35 2-Adamantanoni voitiin myös saada reagoimaan osassa 5 kuvatulla tavalla sellaisten atsaspiraanijohdannaisten saamisek-: si, joissa m = 2.

Il 93006 45

Samoin voitiin 2-adamantanonin anhydridi, joka oli syntetisoitu joko osassa 2 tai osassa 5 kuvatulla tavalla, saattaa reagoimaan: a) synteesiesimerkkien osassa 2 kuvattujen dialkyyliaminoal-5 kyyliamiinien kanssa sellaisten atsaspiraanijohdannaisten saamiseksi, joissa R3 = R4 = alkyyliryhmä

b) synteesiesimerkkien osassa 3 kuvattujen aminoalkyylinit-riilien kanssa sellaisten johdannaisten saamiseksi, joissa R3 = R4 = H

10 c) synteesiesimerkkien osassa 4 kuvattujen alkyyliaminoal-kyyliamiinien kanssa sellaisten atsaspiraanijohdannaisten saamiseksi, joissa R3 = alkyyliryhma ja R4 = H.

Bisyklo[3.3.1]nonan-9-oni saatettiin samoin reagoimaan osan 15 2 mukaisesti halutun atsaspiraanianalogin saamiseksi; sp. 303 - 304 °C. Tämä ketoni voitiin myös 2 -adamantanonin tavoin modifioida samalla tavalla substituoiduiksi diamiinijohdannaisiksi .

20 3,3-Dimetyylibisyklo[3.3.1]nonan-9-oni ja 3,3,7,7-tetrametyy- libisyklo[3.3.1]nonan-9-oni (valmistettu väitöskirjan Y. Chan, (1972) Ph. D. Dissertation, University of Utah, mukaisesti) voitiin saada reagoimaan lähtösysteemistä edellä esitetyn kuvauksen mukaisesti.

25 46 93006

Taulukko 3

Sulamispisteet (hajoaminen) kaavan (I) ja kaavan (II) mukaisilla yhdisteillä, jotka on valmistettu synteesiesimerkeissä 5 esitettyjen menetelmien mukaisesti #<a) sp. CC) 01 300 - 302 02 299 - 300 10 03 299 - 301 04 301 - 302 05 297 - 298 06 245 - 249 07 258 - 260 15 08 295 - 296 09 296 - 298 10 289 - 291 11 303 - 304 12 306 - 307 20 13 297 - 298 14 326 - 328 15 325 - 326 16 334 - 335 17 305 - 307 25 18 252 - 254 19 285 - 286 20 266 - 269 21 274 - 276 22 259 - 261 30 23 245 - 246 24 329 - 330 25 308 - 310 26 323 - 325 27 284 - 286 * . 35 28 287 - 289 29 293 - 296 30 271 - 272 31 275 - 278 32 240 - 245 40 . (a) Katso rakenteet, taulukko 1.

45 li 93006 47

Taulukko 4

Alkuaineanalyysi kaavan (I) ja kaavan (li) mukaisista yhdisteistä, jotka on valmistettu synteesiesimerkeissä esitettyjen 5 menetelmien mukaisesti # molekyyli- mol.

kaava paino laskettu: havaittu: 10 C: H: N: O: C· H: H: Ct 01 Sw&'S’S1 “H }?“ 2-¾ ass κπι 7.6* ηοι 02 CgHnNjCl} 3813 62.97 11.10 7.34 11.59 ¢2.73 jq 97 7J2 u 42 03 CKHja; 409 3 64.53 11.32 6.84 1731 64.69 1I.34 632 04 437.6 65.88 11.52 6.40 16.20 66.04 11.42 6.31 16.39 05 CcHi^N-Qj 409.5 64.52 11.32 6.84 17.31 64.23 · Π.32 6.76 17.28 06 CjjHjjNjCI, 353.4 61.17 10.84 7.93 19.30 61.03 10.90 7.85 19.97 07 CijH^NjCIj .367.4 62.11 10.97 7.62 19.30 62.06 10 99 738 · 19.33 08 CuH^dj 3953 63.78 11.21 7.08 17.93 63.68 11.07 7.08 18.12 15 09 C^H^jNja, 367.4 62.11 10.97 7.62 19.30 62.06 10.98 7.61 19.35 10 ^«βΝ,α, 367.4 62.11 10.97 7.62 19.30 61.99 11 OI 7 58 19.36 11 Ca>H0N3Clj 3gu 62.97 11.10 734 1839 62.92 11.11 730 18.64 11 Ο,οϋ,,Ν,α, 3813 62.97 11.10 734 18.59 62.88 11 13 7.31 18.65 »3 437.6 65.88 11.52 6.40 16.20 ijj 638 16.17 14 CeH^jOj 3793 63.31 10.62 7.38 18.69 63.24 10.64 7.37 18.68 13 Ο,,Η,,Ν^ 353.4 61.17 10.84 7.93 20.06 61.10 10.77 8.02 20.07 16 ε,,Η,,Ν,α! 353.4 61.17 10.84 7.93 20.06 61.16 10.86 7.92 19.94 17 CaH^Cl! 379.5 63.31 10.62 7.38 18.69 6332 10.67 7.35 18.70 2 0 11 CsH^N^a, 409.5 6432 11.32 6.84 1731 «.42 1132 6.82 1739 19 CjjH^Njd, 4213 6533 11.00 6.65 16.82 65.42 U.03 6.64 16.89 20 Ο,,Η^Ν,α, 3953 63.78 1131 7.08 17.93 63.64 10 99 - 6 96 21 CsH^d, 409.3 6432 11.32 6.84 17.31 64.59 UJO 6.78 1730 22 CuH<,N,a, 423.6 65.22 11.42 6.61 16.74 65.05 1139 6 57 23 437.6 65.88 Π32 6.40 16.20 65.91 11 48 6 37 16.19 24 CbH^oNjOj 4173 66.17 10.14 6.71 16.98 66.21 10.16 6.67 16.94 25 C„HvN7a: 349.4 61.88 9.81 8.02 20.29 61.30 9.70 7.83 26 337.4 6032 10.16 8 3 0 21.02 60.35 10.12 8.31 27 407 3 64.84 10.88 6.87 17.40 64.73 10.89 · 6.87 17.34 25 23 CijHjoN^G, 449.6 66.79 113 1 6.23 15.77 66.68 11.31 6.30 15.67 29 Cj^jN^G, 463.6 67.36 1130 6.0* 15.29 57 39 j j 39 6.03 15.24 30 CjoH^N^Clj 3793 63.31 10.62 7.38 18.69 63.24 10.65 7.35 18.63 31 393 3 64.10 10.76 7.12 18.02 60.01 10.81 7 10 17.93 32 C^H^NjG, 3813 62.97 11.10 734 1839 62.83 11.11 731 1832 30 -----------------------

Huomautus: Yhdisteistä 03, 20, 22, 25 ja 26 ei analysoitu kloridikoostumusta

Claims

93006

1. Menetelmä immunomodulatorisen vaikutuksen omaavan kaavan (IA) mukaisen atsaspiraanianalogin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan, hydraatin tai solvaatin valmistamisek-5 si, ‘ΌΊ /3 10 *2 '---Nv Kaava (IA) 15 jossa kaavassa n on 3 - 7; 20. on 1 tai 2; R, ja R2 ovat samoja tai erilaisia ja valitaan ryhmästä, johon kuuluvat vety ja suoraketjuinen, haarautunut tai syklinen alkyyli, edellyttäen, että R^n ja R2:n sisältämien hiiliato-25 mien kokonaismäärä on yhteensä 4-10; tai R, ja R2 ovat liitty-neet yhteen muodostaen syklisen alkyyliryhmän, joka sisältää 3-7 hiiliatomia; R3 ja R4 ovat samoja tai erilaisia ja valitaan ryhmästä, johon 30 kuuluu vety ja suoraketjuinen alkyyli, joka sisältää 1-3 hiiliatomia; tai R3 ja R4 ovat liittyneet yhteen muodostaen syk-lisen alkyyliryhmän, joka sisältää 4-7 hiiliatomia; edellyttäen, että kun R, ja R2 ovat CH3CH2, R3 ja R4 ovat 35 CH3 ja m on 1 tai 2, n on muu kuin 3; ja edellyttäen edelleen, että kun Rt on H; R2 on (CH3)3C; R3 ja R4 ovat CH3 ja m on 1 tai 2, n on muu kuin 3; ja edellyttäen edelleen, että * 4 II 93006 kun R2 on H; Rj on (CH3)3C; R3 ja R4 ovat CH3 ja m on 2, n on muu kuin 3; tunnettu siitä, että A) kun m on l ja R3 ja R4 ovat 5 muita kuin vetyjä, sellainen menetelmä käsittää sen, että i) käsitellään ( (CH3) 3S+0) I':a, emästä (edullisesti NaH/DMSO:a DMSOrssa) tai emästä inertissä liuottimessa ja sopivaa kaavan A mukaista yhdistettä 10 R1 ^>=0 r2 Kaava A 15 jolloin muodostuu kaavan B mukaista yhdistettä

20 O r2 ^ Kaava B 25 ii) käsitellään vaiheessa i) valmistettua, kaavan B mukaista ·* yhdistettä Lewis'in hapon ja inertin liuottimen (edullisesti BF3OEt2:n tai bentseenin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan C mukaista yhdistettä: 30 R, O R2 H Kaava C iii) käsitellään vaiheessa ii) tuotettua, kaavan C mukaista yhdistettä metyylivinyyliketönin kanssa ja katalyyttisen 35 • · · 93006 määrän kanssa väkevöityä rikkihappoa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan D mukaista yhdistettä: £ R2 Kaava D iv) käsitellään vaiheessa iii) tuotettua, kaavan D mukaista 15 yhdistettä H2:n, hydrauskatalysaattorin (edullisesti 5-10- %:isen palladiumhiilen) ja inertin liuottimen (edullisesti etyyliasetaatin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan E mukaista yhdistettä: 20 .. 6 Rl R2 Kaava E v) käsitellään vaiheessa iv) tuotettua, kaavan E mukaista 30 yhdistettä alkyylisyaaniasetaatin (edullisesti metyyli- tai etyylisyaaniasetaatin) kanssa ja happokatalyysissä (edullisesti etikkahappo/natriumasetaatti) tai emäskatalyysissä ’ (edullisesti piperidiini) ja liuottimen kanssa veden poista miseksi atseotrooppisesti (edullisesti bentseeni tai toluee-35 ni) , jolloin muodostuu vastaavaa kaavan F mukaista yhdistettä: Il i 93006 NC~j j-COOEt y Rj R2 Kaava F 10 vi) käsitellään vaiheessa v) tuotettua, kaavan F mukaista yhdistettä perättäisestä a) natrium- tai kaliumsyanidin, veden ja alkoholin (edullisesti metanolin tai etanolin) kanssa, lämpötilassa 95°C, b) emäksisellä vesipitoisella hydro-lyysillä ja lämmöllä (edullisesti kaiiumhydroksidi, vesi, 15 etyleeniglykoli 120°C:ssa) tai happamessa hydrolyysissä (e-dullisesti väkevöity HC1, etikkahappo, vesi ja palautusjääh-dytys), tai c) vettä poistavan aineen kanssa (edullisesti asetanhydridin kanssa 100°C:ssa), jolloin muodostuu vastaavaa kaavan G mukaista yhdistettä 20 XX 25 >C Rj Rj Kaava G 30 vii) käsitellään vaiheessa vi) tuotettua, kaavan G mukaista yhdistettä perättäisestä a) H2N(CH2)nNR3R4:n liuottimen kanssa •j veden poistamiseksi atseotrooppisesti (edullisesti tolueenin kanssa), b) vahvan pelkistävän aineen kanssa (edullisesti litiumalumiinihydridin kanssa), ja c) kloorivetykaasun ja 35 inertin liuottimen (edullisesti etanolin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan (IA) mukaista yhdistettä; ja silloin, B) kun m on 1 ja R3 ja R4 ovat vetyjä, sellainen menetelmä käsittää sen, että • · · 93006 i) käsitellään ( (CH3)3S+0) I':a, emästä (edullisesti NaH/DMSO:a DMSO.-ssa) tai emästä inertissä liuottimessa ja sopivaa kaavan A mukaista yhdistettä 5 _ R2 Kaava A 10 jolloin muodostuu kaavan B mukaista yhdistettä 15 *-/\ R2 Kaava B ii) käsitellään vaiheessa i) valmistettua, kaavan B mukaista 20 yhdistettä Lewis'in hapon ja inertin liuottimen (edullisesti BF3OEt2:n tai bentseenin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan C mukaista yhdistettä:

25 Rj O R2 H Kaava C 30 iii) käsitellään vaiheessa ii) tuotettua, kaavan C mukaista yhdistettä metyylivinyyliketönin kanssa ja katalyyttisen määrän kanssa väkevöityä rikkihappoa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan D mukaista yhdistettä: II * 35 ,3 93006 ä Rl R2 Kaava D 10 iv) käsitellään vaiheessa iii) tuotettua, kaavan D mukaista yhdistettä H2:n, hydrauskatalysaattorin (edullisesti 5-10-%:isen palladiumhiilen) ja inertin liuottimen (edullisesti etyyliasetaatin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan E mukaista yhdistettä: 15 • Ö Rl R2 Kaava E 25 v) käsitellään vaiheessa iv) tuotettua, kaavan E mukaista yhdistettä alkyylisyaaniasetaatin (edullisesti metyyli- tai etyylisyaaniasetaatin) kanssa ja happokatalyysillä (edullisesti etikkahappo/natriumasetaatti) tai emäskatalyysillä (edullisesti piperidiini) ja liuottimen kanssa veden poista- 30 miseksi atseotrooppisesti (edullisesti bentseeni tai toluee-ni) , jolloin muodostuu vastaavaa kaavan F mukaista yhdistettä: 35 54 93006 NC .COOEt . δ R-L R2 Kaava F vi) käsitellään vaiheessa v) tuotettua, kaavan F mukaista 10 yhdistettä perättäisesti a) natrium- tai kaliumsyanidin, veden ja alkoholin (edullisesti metanolin tai etanolin) kanssa, lämpötilassa 95°C, b) emäksisellä vesipitoisella hydrolyysillä ja lämmöllä (edullisesti kaliumhydroksidi, vesi, etyleeniglykoli 120°C:ssa) tai happamessa hydrolyysis-15 sä (edullisesti väkevöity HC1, etikkahappo, vesi ja palautus jäähdytys) , tai c) vettä poistavan aineen kanssa (edullisesti asetanhydridin kanssa 100°C:ssa), jolloin muodostuu vastaavaa kaavan G mukaista yhdistettä 20 °X>° Rj"^ ^r2 Kaava G 30 vii) käsitellään vaiheessa vi) tuotettua, kaavan G mukaista yhdistettä H2N(CH2) nNR3R4:n liuottimena veden poistamiseksi atseotrooppisesti (edullisesti tolueenilla), jolloin muodostuu vastaavaa kaavan L mukaista yhdistettä Il : 35 93006 CN (])>„ -Nj

5 L X 10 >< R! R2 Kaava L viii) käsitellään vaiheessa vii) tuotettua, kaavan L mukaista 15 yhdistettä a) vahvan pelkistävän aineen kanssa (edullisesti litiumalumiinihydridin kanssa), ja b) kloorivetykaasulla ja inertillä liuottimena (edullisesti etanolilla), jolloin muodostuu vastaavaa, kaavan (IA) mukaista yhdistettä; ja silloin, C) kun m on 2, sellainen menetelmä käsittää sen, 20 että: i) käsitellään ((CH3)3S+0) Γ:, emästä (edullisesti NaH/DMSO:a DMS0:ssa) tai emästä inertissä liuottimessa ja sopivaa kaavan A mukaista yhdistettä 25 Ri \=° R2 Kaava A 30 \\ jolloin muodostuu kaavan B mukaista yhdistettä

35 O Ri -^/\ R2 ^ Kaava B • · 93006 ii) käsitellään vaiheessa i) valmistettua, kaavan B mukaista yhdistettä Lewis'in hapon ja inertin liuottimen (edullisesti BF3OEt2:n tai bentseenin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan C mukaista yhdistettä: 5 Rt O >—^ r2 H Kaava C 10 iii) käsitellään vaiheessa ii) tuotettua, kaavan C mukaista yhdistettä metyylivinyyliketonin kanssa ja katalyyttisen määrän kanssa väkevöityä rikkihappoa, jolloin muodostuu vas- 15 taavaa kaavan D mukaista yhdistettä: 6 R3 R2 Kaava D 25 iv) käsitellään vaiheessa iii) tuotettua, kaavan D mukaista yhdistettä H2:n, hydrauskatalysaattorin (edullisesti 5-10-%:isen palladiumhiilen) ja inertin liuottimen (edullisesti 30 etyyliasetaatin) kanssa, jolloin muodostuu vastaavaa kaavan E mukaista yhdistettä: Il : 57 9 3 0 0 6 £

5 Rl Kaava E v) käsitellään vaiheessa iv) tuotettua, kaavan E mukaista yhdistettä alkyylisyaaniasetaatin kanssa (edullisesti metyyli- tai etyylisyaaniasetaatin kanssa), NH3:n ja alkoholin 10 kanssa (edullisesti etanolin kanssa), jolloin muodostuu vastaavaa, kaavan I mukaista yhdistettä JcX δ Rl R2 Kaava I 25 vi) käsitellään vaiheessa v) tuotettua, kaavan I mukaista yhdistettä perättäisesti a) emäksisellä vesipitoisella hyd-rolyysillä ja lämmöllä (edullisesti kaliumhydroksidi, vesi, etyleeniglykoli 120°C:ssa) tai happamella hydrolyysillä (e-dullisesti väkevöity HCl, etikkahappo, vesi ja palautusjääh- 30 dytys), tai b) vettä poistavan aineen kanssa (edullisesti asetanhydridin kanssa 100°C:ssa), jolloin muodostuu vastaavaa, kaavan J mukaista yhdistettä 35 ‘ X 5β 93006 Ον O O X R[ R2 Kaava J 10 vii) käsitellään vaiheessa vi) tuotettua, kaavan J mukaista yhdistettä perättäisesti H2N (CH2) nNR3R4: n liuottimena veden poistamiseksi atseotrooppisesti (edullisesti tolueenilla), b) vahvalla pelkistävällä aineella (edullisesti litiumalu-15 miinihydridillä), ja c) kloorivetykaasulla ja inertillä liuottimena (edullisesti etanolilla), jolloin muodostuu vastaavaa, kaavan (IA) mukaista yhdistettä.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet - t u siitä, että se on: χοα_<

25 N

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet -t u siitä, että yhdiste on: tai

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet - t u siitä, että yhdiste on: Il i „ 55006 iXXDwc. ^>οα_<: ^XDQ - coooLx; ' w' ; 'Λ^ΛΛΊ ^^ν^ΛΓΊ N~^-yv*v^< ; -. ν' · ^XXI '' 'x>Cx:]~< ‘ ’_' Q //Λ''ν'-— N s- χοη_,;·; H 0,-v- i 50O0w·:, W;' 93006 XXU„c : χχχΐ \ ooa_.c, xoa^.,, oocl0 . ooo _ n v_y tQ| O's/W' :::: LAw_/V/\ xxxLo : yoGQ^^ ^ O ll « 93006