JPH02138346A - 架橋ヒアルロン酸ゲル組成物及び製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （イ）産業上の利用分野 この発明はヒアルロン酸のゲル及びヒアルロン酸含有の
混合ゲル、またそれらを含む配合物及びその製造法に関
する。

（ロ）従来の技術 ヒアルロン酸（ＨＡ）はへ−アセチル−Ｄ−グルコサミ
ンと単糖類のＤ−グルクロン酸が交互にβ−１，４結合
し、形成された二糖類単位がざらにβ−１，３グリコシ
ド結合した多糖類として天然に存在しよく知られている
。）ＩＡは通常はそのナトリウム塩の形で存在する。一
般にＨＡの分子量は５０．０００から８Ｘ　１０’もし
くはざらに高い範囲にある。

従来ＨＡの架橋は、１，２，３．４−ジェポキシブタン
のアルカリ溶液で５０℃で処理することにより行なわれ
ていた（Ｔ、Ｃ，ローランド、Ｋ８ヘルジング及びＢ、
ゲロツテ、アクタ　ケミ力　スカンティナビ力（Ａｃｔ
ａ　　Ｃｈｅｍ　、　　５ｃａｎｄ、　）　１８［１９
８４］　、　Ｎｏ、１　、　２７４−５）。この方法に
より得られる製品は水で大きく膨潤するゲルである。ま
たジビニルスルホン（以下ＤＶＳとする）も多糖類とり
わけセルロースの架橋剤としてよく知られている。（米
国特許第３，３５７．７８４号）。

（ハ）発明の構成 この発明は高膨潤性架橋ヒアルロン酸ゲルを提供するも
のである。

また、この発明はとアルロン酸と他の親水性ポリマーと
の混合架橋ゲルを提供するものである。

また他に、この発明は他のいろいろな物質を充填した、
ヒアルロン酸と他のポリマーとの架橋ゲルを提供するも
のである。

さらに他に、この発明はゲルの巨大分子構造に共有結合
する低分子量物質を含む架橋ヒアルロン酸ゲルを提供す
るものである。

またざらに他に、この発明は架橋ヒアルロン酸ゲルを含
むいろいろな配合物（組成物）を提供するものである。

最後に、この発明は、口の発明の組成物の製造法を提供
するものである。

この発明は、ジビニルスルホン（Ｄ　ＶＳ　）が嘗温す
なわら約２０℃の温度下でアルカリ水溶液中においてＨ
Ａと容易に反応してＨＡの架橋ゲルを与えるという事実
に基づいている。ここで使われているＨＡという詔は、
ヒアルロン酸及びそれのナトリウム、カリウム、マグネ
シウム、カルシウムなどの塩を表わしている。これらの
ゲルは水または水含有媒体中で膨１ｒｔＩする。膨潤率
（ｓｗｅｌｌｉｎｇｒａｔｉｏ　）はゲルの架橋度に依
存する。発明者等は）−ＩＡの分子量、その反応混合液
中での濃度、アルカリ濃度さらにポリマー／ＤＶＳの比
などを含むいろいろの要因によって架橋度を制御できる
事実を見い出した。反応は非常に速く、たいていの場合
開始数分後には強固なゲルが得られる。これらのゲルの
膨潤率はその反応条件によるが２０〜８．０００もしく
はこれ以上のものである。

ＨＡ架橋ゲルの膨潤率は同じ反応条件下で得られる他の
多糖類の架濤ゲルの膨潤率よりは十分に大きいことも見
い出された。このことは（ｆｌ！！の多糖類と比較した
ときの）ＨＡそれ自身の特性並びにその水溶液特性とに
よって説明されよう。発明者らは、水中で、大きいＨＡ
分子が、その溶液中で著しく大容積になり、非常に可撓
性のある長いランダムコイルを形成することを発見した
。例えば、生理食塩水中における水和したＨＡの比体積
は約２〜６Ｘ１０３１ｆ／Ｉｌｌである。このことは、
ＨＡの非常に低濃度の水溶液中では、溶液の物理化学特
性ばかりでなく、ざらにＨＡと他の低分子量物質との、
反応にも十分に影響を与える排除体積効果が生じること
を意味している。換言すれば、トＩＡ溶液の性質は他の
多糖類で観察されるものとは異なって、架橋度や架橋ゲ
ルの挙動に影響を与えるのである。

発明者らはまた次のことも発見した。すなわち高膨潤率
のゲルを与える）−ＩＡのこの独特の性質は、ＨＡと他
の親水性ポリマーとの混合物とで製造される架橋ゲルの
性質を改質するのに使用することができるということで
ある。上記親水性ポリマーとは、ヒドロキシセルロース
、カルボキシメチルセルＯ−ス、キサンテンゴム、コン
ドロイチン硫１１塩、ヘパリンのような人工または合成
の多糖層、コラーゲン、エラスチン、アルブミン、グロ
ブリンなどのようないろんな各種の蛋白質、硫酸ケラチ
ン、硫酸アミノグリコサミノグリカンのような硫酸蛋白
質、ポリビニルアルコールやその共重合体、ポリヒドロ
キシエチルメタクリレートの共重体などのような合成の
水溶性ポリマー等である。

換言すれば、水またはアルカリ水溶液に可溶性であり、
かつＤＶＳと反応可能な基、すなわち、水酸基、アミＬ
Ｌスルフヒトリル基をもつポリマーはＨＡの高膨潤性混
合架橋ゲルを得るのに使用できる。

発明者らはまたさらにＨＡを上記の反応性の基をもつ低
分子量物質の存在下で架橋反応を行なりせることによっ
て有用な生成物がたやすく得られることを見い出した。

この発明によるもうひとつのタイプの物質はワセリンの
ような炭化水素：みつろう、ココナツオイル、ラノリン
のような油または脂肪；カオリン、酸化第二鉄のような
顔料、不溶性染料；ポリエチレン、ポリテトラフルオロ
エチレン等のようなポリマーなどいろいろな水に不溶性
物質で満たされた架橋親木性ゲルである。この型の製品
中には、微粒子の充填材がゲル網目構造または発明者ら
が“ポリ？−ｎ　（ｐｏｌｙｍｅｒ　　ｃａｇｅ　）　
”と呼んでいるものの中に固定されている。この後者の
製品はいくつかの目的に対して非常に有用なもので、以
下に詳述する。

架橋ヒアルロン酸ゲルを得るには、何れかの原料からの
ヒアルロン酸またはその塩を希アルカリ水溶液に溶解す
る。ＨＡの分子量はｓｏ、ｏｏｏ〜８Ｘ　１０ｍもしく
はそれ以上であってもよい。分子量は反応に影響する。

すなわち分子籠が高くなればなる程、架橋ゲルは生成し
やすい。

反応混合物におけるアルカリ濃度はｏ、ｏｏｓ〜１〜０
．５Ｍもしくはそれ以上である。この下限は、媒体の−
が９より低くならないことが必要であることから規制さ
れ、上限はアルカリ溶液中のＨＡが加水分解されないよ
うに規制される。通常アルカリ濃度が小さくなると膨潤
率の大きなゲルが生成するが、これはおそら＜ＯＶＳの
少量が架橋反応に使われるからであろう。

出発溶液中のＨＡの濃度は１〜８重量％またはそれ以上
にいろいろ変えることができる。濃度が１重置％以下で
あればいくら）−ＩＡ／ＤＶＳ比が小さくても架橋ゲル
は得られない。またこの濃度が高すぎると溶液の粘度が
高くなりすぎ扱いにくくなる。ＨＡ１１度はゲルの膨潤
挙動に大きく影響を与える（第１図）。膨潤率−ＨＡ濃
度依存性曲線の形は種々のＨＡ／ＤＶＳ比に対して本質
的に同一であるが、このＨＡ／ＤＶＳ比が小さくなれば
なる程、すなわち反応混合物にＤＶＳがより多聞あると
き、出発混合物中のＨＡの濃度が同じ溶液であっても架
橋ゲルの膨潤率は低くなることが見い出された。

本発明者らは反応混合物中のＨＡ／ＤＶＳ比がまた別の
パラメータであることを見い出した。つまり）−ＩＡ／
ＤＶＳ比は、ＨＡの架橋グルの１膨潤率を制御するのに
簡便に使うことができるということである。この比率が
増加すれば高度に膨潤したやわらかなゲルが生成しく膨
潤率は約４，０００またはそれ以上）、一方この比率が
減少すれば膨潤率の小さいかたいゲルが得られる。一般
にＨＡ／ＤｖＳの重量比は１５：１〜１：５またはそれ
以下が好ましい。

架橋反応は通常空温すなわち約２０℃で行なわれる。し
かし所望によりこの温度以下でも以上でも実施できる。

しかし次のことに留意すべきである。

すなわちＨＡはアルカリ水溶液において、高温では比較
的急速に分解することがあり、かような分解が起こると
、分子量が低下して得られるゲルの特性に影響を与える
ときがある。

この架橋反応は比較的高速であり、したがってＨＡＷ度
が十分に大きく、ＨＡ／ＤＶＳ比が小さいとき通常数分
後には強固なゲルが形成される。

しかし反応混合物におけるＨＡ１１度が低くてもゲル形
成はＤｖＳ添加後通常５〜１０分で開始される。

本発明者らはたいていの場合架橋反応が完了するには一
時間あれば十分であることを見い出した。

１−ＩＡの架橋ゲルの膨潤率を制御するもう１つの方法
として、反応混合物に中性塩を加えることが挙げられる
。本発明者らは、アルカリ金属の塩化物、硫Ｍ塩、リン
酸塩、酢酸塩のような水に可溶性の中性塩の存在下で得
られるゲルの膨潤率はその塩の濃度が増加するにつれて
減少することを発見した。塩は、その性質や反応混合物
中のＨＡ溶解度に及ぼす効果に依存するが、２０重量％
濃度までの、またはそれ以上の濃度で用いることができ
る。

他の親水性ポリマー類の架橋ゲルを得るのに、ＨＡに対
するのと同じ反応条件を用いることができる。これらの
ゲルの膨潤率は、そのゲル構造中にＨＡを結合させるこ
とにより簡便に制御できる。

この混合ゲルを製造する場合、そのポリマー混合物の組
成は所望の架橋ゲルの膨潤率によって広範囲に変化させ
ることができる。反応混合物のＩ−ＩＡの好ましい含有
率は５〜９５重量％である。

マーの架橋ゲル、または混合架橋ゲルは、ＤｖＳを添加
する竹に反応混合物に中に不活性物質を混合させること
により得られる。これらの不活性物質は水に不溶性の液
体または固体が好ましい。これらの物質の例としてはワ
セリンやカオリンがある。この充填された架橋ゲルを得
るためには、選択された不活性物質（ゲルの所望の特性
を考慮して選択されるのであるが）を、ＨＡもしくは他
ポリマー、または）ＩＡと他のひとつもしくは複数のポ
リマーとの混合物をアルカリ溶液に乳化または懸濁させ
、次いでＤｖＳがその混合物に加えられる。ＤＶＳの量
と反応の他のパラメータは、ゲルの要求される特性に応
じて選択される。ゲル中の充填材の比率は広範囲にわた
って変えることができ、ポリマーと充填材との合計１山
から計算して１〜９５重量％であり、５〜９０重置％が
好ましい。

医薬、染料、および巨大分子網目構造に共有結合できる
他の物質のごとき低分子量物質を含む架橋ゲルは好まし
くはＤＶＳを添加する前にＨＡ溶液またはＨＡと他のポ
リマーとの混合溶液に上記物質を加えることによって得
られる。上記物質の１つの例としては食品や医薬製剤の
用途用にＦＤＡが認可した物質のカルミン酸があげられ
る。

ＤＶＳとの架橋反応に関与するのはおそらく、カルミン
酸分子のグルコシド成分であろう。この型の改質架橋ゲ
ルを得るために非常にたくさんの物質が適用できること
を理解すべきである。これらの物質のひとつの特徴は、
ＤＶＳに対し反応性の活性水素原子をもつ化学基を有し
ていることである。反応に使用されるこれら低分子量物
質の柵は、ゲル中でのその物質の所望レベルに左右され
る。この黴は、ゲル中に含まれるポリマー含量に基づい
て、その１〜９９重量％の範囲であってもよく、好まし
くは５〜９０重量％である。

本発明により得られる架橋ＨＡゲル及び混合架橋ゲルに
は多くの用途がある。本発明者らはこれらの高度に膨潤
したゲルが１ヒ粧用製剤に非常−に有用であり、これら
の製剤における水分保持成分、または水分分配成分とし
て考えられることを見い出した。

ＨＡは、人体に導入されたとき免疫や他の反応を起こさ
ない意味で生理学的に認容しうるポリマーとして知られ
ているので、架ＦＩＡＨＡゲルはいろいろな医薬用途に
使用できる。他のポリマーまたは低分子量物質によって
改質された栗ＩＨＡゲルは医薬分配物質として使用でき
うる。たとえば発見者らは架橋ＨＡ中に導入されたヘパ
リンはその抗プロトロンビン活性を維持していることを
見い出した。本発明者らは、ＨＡの架橋ゲルは、その中
に分散させた低分子量物質の放出を遅らせるが、そのゲ
ルの巨大分子マトリックスとは共有結合しないこζを見
い出した。

架橋ヒアルロン酸（ＨＡ単独ポリマー又は他のポリ陰イ
オン系もしくは中性のポリマーとの共重合体）の構造は
、分子ｔＥｉ　（ｍｏｌｅｃｕｌｏｒ　ｃａｏｅ）を形
成する。この層内にはいろいろな薬学的又は生理学的に
活性な親水性又は疎水性の分子を分散させることができ
る。かくのごとくこの寵は、いろいろな大きざのこれら
の物質の貯蔵庫を構成する。

この分子部内に保持された物質は拡散により簡外へ放出
される。この放出過程は、排除体積効果や分子量の細孔
の大きさなどの要因及びポリマーの網目構造とそこに保
持された物質との分子間相互作用により制御される。か
くのごとくこの分子量は、医薬や他の物質を皮膚や他の
組成へ制御して分配するための貯蔵庫を形成する。

また架橋ＨＡゲルにはもうひとつの特性があり、これに
よってこのゲルは医薬分配機構として橿めて有用になる
と考えられる。これらのゲルの水中での膨潤率は溶媒中
の塩濃度に大きく依存し、塩濃度が増加するに伴い、数
倍減少する。このことは水中で膨潤するゲルは体内に導
入されれば大きく縮み（体液や組織には正塩が含有され
ているため）、その結果、そのゲル内保持物、たとえば
混入された医薬が体内組織へ分配されることを意味する
。

種々の物質を充填した架橋ゲルは化粧製剤にも使用でき
る。たとえばワセリンを入れたゲルを化粧製剤に使用す
ると、ワセリン含有製剤に通常見うけられる不快なべと
ついた感触がないという利点がある。

（ニ）実施例 本発明を以下の実施例によってさらに詳しく説明する。

ここで、特別に断わらないかぎり、与えられるｍは重量
単位である。なおこの発明の特許請求の範囲は以下の実
施例により限定されるものではない。

、ＩＪＪＬＬ この実施例ではＨＡの分子量をいろいろ変化させたとき
の架橋反応に及ぼす影響について示しである。

雄鶏のとさかから得られたヒアルロン酸ナトリウム（０
，１５Ｍの食塩溶液の固有粘度［η］　３８５０、分子
ｆｌ約２．５Ｘ１０’　）　　０．３４１０（ｌｅ　Ｏ
，２Ｍ）水Ｍ化ナトリウム水溶液８．１８４０（ｌと混
合し、３０分間攪拌して４重量％濃度の溶液とした。そ
の後その溶液に：　ＩＩ　１１　シＣｈ　ｌｆｉ　ラＤ
　Ｖ　Ｓ　Ｏ，０７２１１１１加えた。ＨＡ／Ｄ■Ｓの
重連比は約４．７であった。約１５分後には強固なゲル
が形成された。このゲルは１ｒ！間放置した後蒸苗“水
１Ｑ中にうつされ、−晩中敢間して膨潤させた。その後
水中ではげしく攪拌してゲルを小さくくだき、それを口
過し次いで数回水洗し、無色透明の粒子が得られた。こ
のゲルの膨潤率を測定するために、約１ｇの試料にグラ
スフィルターを用いて約２時間３，０００ｒｐｍの速さ
で遠心弁ｔｎ機にかけた。次いでフィルター上に残った
粒子を、ＩＮの硫Ｍ２１！で３時間、９５〜９８℃で加
水分解した。

得られた透明の溶液を冷却し、ＩＮの水酸化ナトリウム
水溶液で中和した後、グルクロン酸含有量がカルバゾー
ル法〔ヘクスロン酸類の自動定石法、アナリティカル・
バイオケミストリイ（Ａｎａ−１ｙｔｉＣａｌ　　Ｂ　
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　）、２５１７−５５８［９６
５］　）で測定された。最初に生成した前記ゲルのＨＡ
含有量を計算した。そのＩＢ利率を１００／［ＨＡ］％
とじて表わした。ここで［ＨＡ］％とはＩ！！潤ゲル中
のＨＡのｌ１１１％である。得られたゲルの水中での膨
潤率は８２０であった。

次に、ＨＡのアルカリ溶液を２４時間室温に保持する点
を除いては上記と同様の試験を繰返した。

これは、ＨＡ加水分解に付すものである。ポリマー−の
固有粘度［ηＪは１０６４で約ｏ、ｓｘ　ｉｏ”の分子
量に相当する。上記で用いたＨＡ／ＤＶＳ比では、この
ポリマーから架橋ゲルは得られなかった。

上記の分解したＨＡを用い、ＨＡ／ＤＶＳ比を約２にし
て試験を繰返した。この結果水中での膨潤率が２９１０
の架橋ゲルが得られた。

４Ｘ２ このネ考例はアルカリ濃度のＨＡの架橋反応に及ぼす影
響について示しである。

分子量約３Ｘ　１０＠のＨＡの試料を０．２Ｍ水酸化ナ
トリウム水溶液の計算最に溶解し、４重量％濃度の粘性
溶液を得、これにＨＡ／ＤＶＳ比が約５：１になる伍の
ＤｖＳを加えた。その後本屑例１と同様にして架橋と処
理を行なった。水中における膨潤率が９９０である架橋
ゲルが得られた。

次にアルカリ濃度を０．０１　Ｍとして試験を繰返した
。水中での膨潤率が３６４０のゲルが得られた。

このように反応混合物中のアルカリ濃度が減少すれば、
水中における膨潤率が著しく大きいゲルが生成する。

本１１よ この４屑例は、出発混合物中におけるＨＡ濃度の変化が
、得られるゲルの膨潤挙動に及ぼす影響について示しで
ある。

０．２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液中のＨＡナトリウム′
ａ度がそれぞれ２，０．　２．５．　３，０．　３，５
゜４．０．　５．５．　８．０及び１０．０重量％であ
るヒアルロン酸ナトリウム溶液を８種類［Ｊした。それ
ぞれの溶液に計障量のＤｖＳをＨＡ／ＤＶＳ重量比が約
１（モル比で約０．３３　’）になるように加えた。

架橋ゲルが上記＄【＠と同様に得られ、次いで処理した
。膨潤率がそれぞれの試料について測定され、出発の）
−ＩＡ１度に対してプロットした。結果を第１図に示す
。

ｔ１１土 この実施例は、いろいろなＨＡ／ＤＶＳ比が、得られる
ゲルの膨潤率に及ぼす影響について示しである。

０．２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を用いて４．Ｏｆｉｍ
％濃度のヒアルロン酸ナトリウム溶液を６つ調製し、そ
れぞれの溶液にＨＡ／ＤＶＳ比が０．２゜０．３．　０
，５．　１，０．　１．５及び２．Ｏｍｏｌ／ｍｏｌに
なるように計算ｍのｏｖｓｍを加えた。架橋ゲルが得ら
れ、得られたゲルは先の参考例で述べたのと同様の方法
で処理された。それぞれの試料について膨潤率を測定し
、混合物中のＨＡ／ＤＶＳ比に対してプロットした。そ
の結果を第２図に示す。

参ｍ このＩｔ例は反応混合物に添加した塩化ナトリウムが、
架橋ゲルのａ同率に及ぼす影響について示しである。

上記方法に従って２つのＨＡ架橋ゲル試料を調製した。

０，２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液中のヒアルロン酸ナト
リウムの濃度は、４重量％であった。

ＨＡ／ＤＶＳ比は約５：１、反応時間は１時間であった
。２番目の反応混合物に、塩濃度が１．０モル濃度にな
るｍで塩化ナトリウムを加えた。一番目のゲルのｍｌ１
１率は２３８０であり、一方無機塩を添加して得られた
ゲルの水中での膨潤率は６５０であった。

った。

遺書ＩＷ　に の参臀例は、とドロキシエチルセルロースのＤＶＳを使
用した場合の架橋反応について示しである。

風乾したヒドロキシエチルセルロース（セロナイズ（Ｃ
ｅｌｌｏｓｉｚｅ）　Ｑ　Ｐ　−１０００００（登録商
標）。

ニュオンカーバイド（ＩＪ　ｎ１ｏｎ　　Ｃａｒｂｉｄ
ｅ）社製〕０．４３１２ｇを０．２Ｎ水酸化ナトリウム
水溶液１０．３ｇに）１！拌しながら溶解し、４重量％
濃度の溶液とした。コノ溶液１ｃ　Ｄ　Ｖ　Ｓ　Ｏ，０
８５５ｏ　（ボ＋）　ｖ　−／　Ｄ　ＶＳの重囚比約５
：１）を攪拌しながら加え、混合物を１時間空温で放置
した。その後塁考例１と同様の処理をして架橋ゲルを得
た。このゲルの中のポリマー濃度と膨潤率とを測定する
ため、このゲルから試料弁を秤取し、アセトン中に入れ
、１夜放ｕし、その後アセトンで数回洗浄した後一定重
量になるまで５０℃で減圧乾燥した。この得られたゲル
の１！！潤率は４３であり、同じ条件下で得られるＨＡ
の架橋ゲルのそれよりもはるかに小さい値である。

１１Ｌ このホ肩例はＤＶＳを使用したキサンテンゴムの架橋反
応について示しである。

ｆｆ１ｉしたキサンテンゴム（ケルザン（Ｋｅｌｚａｎ
。

登録商標）、ケル：）　＜Ｋｅｌｃｏ）社１　）　　０
．４９３５ｇを０．２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液１１
．３りに溶解し、４重量％濃度の溶液を得た。この溶液
に０．０７１８Ｑ（７）ＤＶＳ　（ボ！Ｊｖ−／ＤＶＳ
！ｊＸｌ比が約７：　　１）を加えた。反応混合物を室
温で１時間放置した。

最終的に停られた架橋ゲルを人聞の水の中にうつし、−
夜装置して膨潤させた。そのｖｆｌｌｌｌかくくだき、
丹念に水洗した。上記参考例に記載した、重量法により
ゲルの膨潤率を測定したところ５２Ｇであった。これは
同じ条件下で得られたトＩＡの架橋ゲルのそれよりはる
かに小さい値である。

よ１０− この参考例は陽イオン性の水溶性セルロースポリマーに
ＤｖＳを使用した架橋反応について示しである。

得られる陽イオン性セルロースポリマー（ボリマーユー
ケアジエイアール（ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｌｌ　ｃａｒｅＪ
　Ｒ。

登録商標ン、ユニオンカーバイド社製）　　０．５４ａ
、ｌσを０．２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液１３．７１
ｇ中に溶解して４重量％濃度の溶液とし、これにＤ〜Ｓ
Ｏ，０８４９ｇ（ホＩＪｖ−／ＤＶＳ比カ約６．５：　
１　）　ヲ加えた。反発部８合物を室温で１時間放置し
た後、得られたゲルを前述のように処理して分析した結
果、水中でのゲル膨潤率が３８６であった。これは同じ
条件下で得られる）ＩＡの架橋ゲルのそれより著しく小
さい値である。

生もｌＬ この番方例は、ＤＶＳを使用したカルボキシメチルセル
ロースの架橋反応について示しである。

カルボキシメチルセルロースのナトリウム塩（９１−１
４１”、　ハーキュルス（Ｈｅｒｃｕ＋ｅｓ　）社製〕
０．４７０３　Ｑを０．２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液
１１、ｌｅｇ中に溶解させ、４重量％の溶液とし、これ
ニＤ　Ｖ　Ｓ　ｏ、ｏｓｓｌｇ　（ボ’Ｊ　？　−／　
Ｄ　Ｖ　Ｓ　比カ約７　：１）を加えた。反応混合物を
室温で１時間放置し、得られたゲルを上記参角例と同様
に処理し分析した。このゲルの水中での膨潤率は８９３
であった。

これは他のセルロース系ポリ７−より得られたものと比
べて大きい値であるがしかし、ＨＡの架橋ゲルに比べる
と小さい値である。

ｋ例１０〜１３ これらの実施例は、ＨＡとカルボキシメチルセルロース
とで作った混合架橋ゲルとその中のＨＡの濃度がゲル全
体の膨潤率に及ぼす影響について示す。

各実施例において、ヒアルロン酸ナトリウムとカルボキ
シメチルセルロース９８４Ｆとを両者を特定の比で秤取
し、０．２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液に溶解した。い
ずれの場合も合計ポリマー開度が４ｉ１Ｊｉ％であり、
ポリマー／ＤＶＳ比が約５＝１であった。上記参老例と
同様の方法でゲルを作製して処理した。ゲル中のポリ７
−含量は、加水分解物中のへキソサミンの濃度を（グル
クロン酸のかわりに）公知の方法（微量分析におけるア
ミノ糖類の迅速窓ｍ法、アナリティカル・バイオケノ糖
類の迅速定量法、アナリティカル・バイオケミストリイ
（Ａ　ｎａｌｙｊｉｃａｌ　　　Ｂ　１ｏｃｈｅｉｉｓ
ｔｒｙ　）　１５゜１６７−１７１　［１９ｆ３６］　
）で測定されたこと以外阜肩例１と同様にしてゲル中の
ポリマーの１１度が測定された。ポリマー合間はＨ−Ａ
の濃度と２つのポリマーの比率とから計算された。

上記データから明らかなように出発混合物中のＨ１！ｆ
ｆｌが増加すると生成したゲルの膨潤率が増加する。

１１１１先 この実施例はＨＡとコラーゲンとから得られた混合架橋
ゲルについて示しである。

０．１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液２　、５　ｘｌ中に
溶解させた。一方、ヒトのへその緒から得られたコラー
ゲンｏ、ｏｔｓ３ｇ　、を０．ＩＭ＃酸溶液２．３ｘｌ
中に溶解させ、両溶液を混合した。合計ポリマー濃度は
６重量％濃度であり、ＨＡ／コラーゲンの重量比は約４
：１であった。この混合溶液中に乾燥したＫＯＩ　００
０５ｇを溶解させ、ＤＶＳを、ポリマー／ＤＶＳの重量
比が約５＝１の割合になる量で反応混合物に加え撹拌し
た。反応混合物を室温で１時間放置し、得られたゲルは
上記実施例と同様の方法で処理された。膨潤ゲル中のポ
リマー含ｍはグルクロン酸分析法によって測定されるＨ
Ａ含向から計算された。強固な、弾力性のあるゲルが得
られ、その水中での膨潤率は３２１であった。

友ＭＩＷ１５ この実施例は、実施例１４に記載のゲルよりもコラーゲ
ン含量が多くかつ膨潤率の低い）−ＩＡ−コラーゲンの
混合架橋ゲルについて示しである。

ヒアルロン酸ナトリウム０．２５４４ｇを０．２Ｍ水酸
化す１−リウム水溶液３．５ｉｌ中に溶解させた。一方
ヒトのへその緒から得られたコラーゲン０．１１９２り
を０．２Ｍ酢ｖｉ溶液１　、５　ｘＩ中に溶解させ、両
溶液を混合した。全ポリマー濃度は７．５１ｆｉ％であ
り、ＨＡ／コラーゲンのｆｆ１ｌ比は約２：１であった
。

この混合溶液に塩化ナトリウムｏ、ｏｓｇを溶かし、さ
らにＤ　Ｖ　Ｓ　０．１１８９ａを加えた。このときポ
リマー／ＤＶＳ比は重量化で約３＝１であった。ゲルが
生成し上述の実施例と同様の処理をした結果、膨潤率３
５の強固なゲルが得られた。

！濾ＩＷ　１凱 この実施例は、ＨＡとヘパリンとの混合架橋ゲルについ
て示しである。

乾燥したヒアルロン酸ナトリウム０．２９６８（］を０
．２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液６．９２１；ｌ中に溶
解させ、４重量％濃度の溶液とし、これにヘパリン０．
０５０３ｇを加えた。このとき全ポリマー聞に基づいて
計算されたヘパリン金回は、１４．５ｆＩｆｆｉ％であ
った。この反応混合物にＤＶＳ　０．０５９０１Ｊを混
合物に撹拌しながら加えた。この反応は室温で１時間行
なわれた。得られたゲルは上記実施例と同様に処理され
、そのゲルの膨潤率は６２５であった。

参肩例１７ この惨汚例はワセリンを充填したヒドロキシエチルセル
ロースの架橋ゲルについて示しである。

乾燥したヒドロキシエチルセルロース０．５２９２０を
１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液１０．５８（７に溶解さ
せ、その溶液に白色のワセリン１，０５８ｇを撹拌しな
がら加えた。ワセリン／ポリマーのｌｆｆ１比は約２で
あった。ＤＶＳの０．１７７１ｇを１Ｍの水酸化ナトリ
ウム水溶液１．０ｇに加えた溶液を激しく撹拌しながら
上記乳濁液に加えた。反応混合物を室温で１時間放置し
た後、得られたゲルは上記実施例と同様に処理された。

ゲル中のワセリン含ｍを調べるためにゲル試料を　１Ｎ
硫酸２１！中に３時間９５℃で浸漬した。その後この反
応混合物に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液２１！を加えた
侵、キシレン４１！でワセリンを抽出した。抽出液を減
圧蒸発し、残留物の重量を測定した。ゲル中の計算ワセ
リン含量は６重量％であった。

実施例１８ この実施例はワセリンを充填した）−ＩＡ−カルボキシ
メチルセルロースの混合架橋ゲルについて示しである。

乾燥したヒアルロン酸ナトリウム０．１８３０ｇと、同
ｍのカルボキシメチルセルロースとを０．２Ｎの水酸化
ナトリウム水溶液９．１ｇ中に溶解し、４重量％のポリ
マー溶液とした。この溶液にワセリン０．３６６０ｇを
撹拌しながら加え得られた乳濁液にＤＶ　Ｓ　Ｏ，０７
３０Ｃ１をはげしくｂ！１半しながら加えた。ポリマー
／ＤＶＳ比は約５：１であった。反応混合物を１時間室
温で放置した後、得られたゲルは前述の実施例と同様の
処理をした。ヘキソサミン含ｍより測定されたゲルの膨
潤率は７３８であり、前記実施例と同様にして定量され
たワセリン含量は０．１重量％であった。

ｍ工り この４．４例は、カオリンを充填したＨＡの架橋ゲルに
ついて示しである。

乾燥したヒアルロン酸ナトリウム０．２７００ｇを０．
２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液に溶解して４重量％のポリ
マー溶液とした。その溶液にカオリン０．５４００ｇを
攪拌しながら加えた。得られた懸濁液にＤＶＳ　Ｏ，５
４００ｇを加え、反応混合物を室温で１時間放置した。

生成したゲルを多口の水にうつし、膨潤させた。その高
膨潤ゲルを針つきの注射器から押し出して小さな粒状に
くだいた。粒状物は丹念に水で洗われた。乳白色の高膨
潤度の粒状物が得られた。ゲル中の固体成分の含Ｍは０
．０６４１　ｆｉ％であった。

患ｍ口と この参４例は巨大分子網目構造に共有結合したカルミン
酸を含むＨＡの架橋ゲルについて示しである。

乾燥したヒアルロン酸ナトリウム０．２０１７と、カル
ミン７１９０，０４１；ｌを０．２Ｍ水酸化ナトリウム
水溶液５　、　Ｏｚｌ中に溶解し、約４重量％のポリマ
ー溶液とした。次にこの溶液にＤ　Ｖ　Ｓ　０．４０ｇ
（ポリマーＺＤｖＳ比が１：２）を加えた後反応混合物
を至温の処理をした。

赤色透明なゲル粒状物が得られ、１念に水洗しても色は
消えなかった。重量分析法により測定された水中での膨
潤率は１１５であった。

ムとｆＪ　２上 この嬰３例はＨＡＭ橋ゲルのｉ潤挙動に及ぼす水中の塩
濃度の影響について示しである。

０．２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液中のＨＡＷ度が４重量
％、ＨＡ／ＤＶＳ比が５：１　で１１１ｆｌＷｍで放置
して前記実施例と同様にしてひとつの架橋ＨＡゲルを得
た。ゲル粒状物を水と、異なった塩化ナトリウム濃度の
水溶液中に入れて膨潤率を測定し、以下に示す結果を得
た。

Ｎａ　Ｃ１８度、Ｍ　　膨潤率 水　　　　　　　　　　　　９９０ ０．０５、　　　　　　４１３ ０．１５　　　　　　　３８４ ０．５０　　　　　　　２１９ １．００　　　　　　　１７６ 衷ＭｆＨＭ２２ この実施例はＨＡ−ヘパリン混合架橋ゲルの生物活性を
示す。

実施例１６に従って調製されたＨＡ−ヘパリン混合架橋
ゲルの微粒子を架橋ＨＡの濃度が０．０１．０．０２及
び０．０４　Ｉｒｆｆ１％になる山で、正常なヒトの面
漿に混合したところ、これらの試料の凝固時間はそれぞ
れ１，４．　２，８．及び５．０倍に増加した。

ヘパリンを含まない架橋ゲル粒状物の同じ濃度のものは
凝固時間に影響を与えなかった。

これらのデータは、ヘパリンが架橋ゲル構造中に混入さ
れてもｉ・ロンビンで触媒されるフィブリン形成を阻害
する能力を失わないことを示している。

参２ この岸月例はＨＡ架橋ゲル粒状物を含んだ製品が、化粧
品製剤として有用であることを示す。

次に示す反応条件下で希３例１と同様の方法によりＨＡ
の架橋ゲルを調製した。すなわち、０．２Ｍ水酸化ナト
リウム水溶液中のＨＡ１１度が３．０重ｆｆｉ％、ＨＡ
／ＤＶＳ比が約３：　１　及びｉｍｒ　１時間である。

ゲルは多量の水中に一夜放置されｉ　潤させられた。そ
の後１８−　１／　２ゲージの釘付注射器より押しだし
て小さな粒状にくだき、さらに２５１／２ゲージの釘付
注射器より押し出してくだいた。粒状物は徹底的に水洗
された。無色透明の粒状物が得られた。そのゲルの膨潤
率は１９８０であった。口過されたゲル粒状物中のＨＡ
１５度は０．０２５重山１であった。これらの粒状物は
、高分子ｍのポリエチレンオキサイド（ポリオツクス（
Ｐｏｌｙｏｘ、登録商標）、コーギュラント（Ｃｏａｇ
ｕ＋ａｎｔ）　、ユニオンカーバイド社製）と水溶性ヒ
アルロン酸ナトリウム（ヒラダーム（Ｈｙｌａｄｅｒｎ
＋　。

登録商標）、バイオマトリックス　インコーポレーショ
ン（３ｉｏｍａｔｒｉｘ、　　ｌ　ｒ３ａ、　）製〕と
の下記組成の混合物に用いられた。

匡塗」ＬＬ　乱造」Ｌと　鳳塗」しＬ 底−一」Ｌ 架　　橋　　ゲ　　ル ヒラダーム（登録 商標）　（ヒアル Ｏン酸ナトリウ ムの１％水水溶ク ンリオックス（登 録商標）　１％水 溶液 水 これらすべての配合物は成分の性質が異なっているにも
かかわらず外観は均一な粘性液体であった。皮膚に塗布
すると、それらは非常にしっとりとしたすべすべした感
触を与える。

ｔ１１Ｌ先 このｐ例は本発明による１−ＩＡの架橋ゲルを含んだモ
イスチャライジング・アイクリーム（ｍｏｉｓｔｕｒｉ
ｚｉｎｇ　ｅｙｅ　ｃｒｅａｍ＞を示す。

Ａｌ）−ボボー／Ｌ／　（Ｃａｒｂｏｐ。

登録商標）　　９４０　　（Ｂ、　Ｆ。

グツドリッチ　（Ｇｏｏｄ　ｒｉｃｈ）社製〕 混合物＃３（実施例２３） 水 Ｂ、ボルボ（Ｖｏｌｐｏ、　ｌｆｌｉｍ）　−３（クロ
ダインコーボレション製） ボルボ（Ｖ　ｏｌｐｏ、登録商標）−５（クロダインコ
ーボレション製） ツルラン（Ｓ　ｏｌｕｌａｎ、登録商標）Ｃ−２４（ア
マコールシーオー （Ａ　ｍｅｒｃｈｏｌ　Ｃｏ、　）製）ローパン（Ｒ０
ｂａｎ、登録商標） クロダモール（ＣｒｏｄａｆｆｌｏＩ　、登録商標）Ｐ
ＭＰ　（クロゲインコーポ レーション製） グルカム（ＧＩｕｃａｍ　、登録商標）Ｅ　−１０（ア
マコールシーオー類） 重量％ ０．４ １０．０ ８３．３ １．０ ０．５ １．８ １．０ ０．５ ０．７ 防　　腐　　剤 Ｃ，トリエタノールアミン 香　　　　料 ０．３ ０．４ ０．１ この配合物は次に示すように段階的に調製される。パー
トＡの混合物は、水にカーボボールを分散させて調製さ
れ、次いで他の成分に加えて攪拌される。バートＢの成
分はすべて一緒に混合し７０℃に加熱した。パー１−　
Ａ　Ｉ製物とバートＢ調製物とを和し、次いでトリエタ
ノールアミンと香料を加えた。出き上がったクリームは
安定であり、なめらかであった。そして良好な湿分付与
性能を有し、皮膚にすぐれた感触を与えた。

実施例２５ この実施例は、架橋ゲルにワセリンを充填したものをハ
ンドローションに用いた実施例を示す。

Ａ、カーボボール（登録商標） カルボキシメチルセルロース ９Ｈ４Ｆ、の１％水溶液 実施例１８の製品 水 Ｂ、ｏバーン（Ｒｏｂａｎｅ　、登録商標）コツキン（
Ｃｏｃｈｉｎ　、登録商標）防　　腐　　剤 Ｃ，トリエタノールアミン 香　　　料 重量％ ０．２５ ２．００ ６０．００ ３６．７０ ０．２０ ０．１０ ０．３０ ０．２５ ０．２０ この配合物は上記実施例に記載した同様の方法で調製さ
れた。出き上がったローションはぎわめて湿潤性に富ん
でおり肌につけた際べとつきが感下記のとおりである。

ボルボ（登録商標）−５ オＬ／スー５　　（Ｏｌｅｔｈ　− ５、オレイルアルコ− ボルボ （登録商標） ルのポリエチレングリ コールエーテル） Ａレス−３（Ｏｌｅｔｈ　− ３、オレイルアルコ− ルのポリエチレングリ コールエーテル） ツルラン （登録商標） コレスー２４　（Ｃｈｏｌｅｔｈ ２４、コレステロール のポリエチレングリコ ールエーテル） クロダモール（登録 商標）ＰＭＰ （プロポキシ化したミ リスチルプロピオネ− ト’）ＰＰＧ−３ミリス チルエーテルプロピオ ネート グルカム （登録商標） メチルグルセス−１０ Ｅ−１０ （Ｍｅｔｈｙｌ　　ａｌｕｃｅｔｈ−１０、メチルグル
コースのポ リエチレングリコール エーテル） １茄」シシ［ この実施例は架橋ヒアルロン酸のマトリックス中に分散
された低分子母物質の緩徐な離散現象について示しであ
る。

この実験では、放射性同位元素でラベルされた物質（以
下ラベル物質と略す）、すなわちヒトＯキシトリブタミ
ンビノキソレート、５−　（１，２−ｊ）Ｉ（Ｎ））−
１が使用された。この物質の４０μＭの２つの５Ａ溶液
に、ＨＡの架橋ゲル粒状物（ゲル中のＨＡ濃度が０．１
３１％）　　５ｍ及び水５Ａとをそれぞれ混合した。こ
の両混合物を別々の透析管にうつし０．１５Ｍｍ化ナト
リウム水溶液中で２４時間透析した。架橋ゲルとラベル
物質との混合物の方には、ラベル物質の出発量のうちの
５４％が透析管内に残っていた。しかし−力水にラベル
物質を混ぎた方ではわずか１０％しか残っていなかりた
。このことはＨＡの架橋ゲルは低分子固物質の離散速度
を５倍以上も遅延させることを如実にあられしている。

もちろんこの発明は、この発明の思想及び範囲からはず
れることなしに変化させることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は４Ａ例３で述べた、出発溶液中におけるＨＡの
いろいろな濃度に対して、ＨＡ／ＤＶＳの重量化が約１
でｖ温下１時間反応させて得られるゲルの膨潤率を示す
グラフ、第２図はネ為例４で述べた、ＨＡ／ＤＶＳのい
ろいろなモル比に対して出発溶液中のＨＡａ１度が４１
ｆｆｉパーセントで室温下１時間反応させて得られるゲ
ルのｆ！温潤率示ずグラフである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、繰り返し単位がヒアルロン酸もしくはその塩とジビ
   ニルスルホンと反応しうる官能基を有する他の親水性ポ
   リマーの少なくとも１つであり、架橋剤がジビニルスル
   ホンであり、ヒアルロン酸もしくはその塩と親水性ポリ
   マーとの合計濃度が１〜８重量％でその中でヒアルロン
   酸もしくはその塩が５〜９５重量％である混合架橋ヒア
   ルロン酸ゲル組成物。 ２、他の親水性ポリマーがヒドロキシエチルセルロース
   、カルボキシメチルセルロース、キサンテンゴム、コン
   ドロイチン硫酸塩、ヘパリンからなる群から選ばれた天
   然または合成の多糖類、またはコラーゲン、エラスチン
   、アルブミン、グロブリン、ケラチン硫酸塩、硫酸アミ
   ノグリコサミノグリカンからなる群から選択される蛋白
   質、または合成の水溶性ポリマーである特許請求の範囲
   第１項に記載の組成物。 ３、不活性な水不溶性物質を、ゲル中の高分子物質と不
   活性な水不溶性物質との合計した重量の１〜９５％含有
   する特許請求の範囲第１項記載の組成物。 ４、不活性な水不溶性物質が炭化水素、油または脂肪、
   顔料、ポリエチレンまたはポリテトラフルオロエチレン
   である特許請求の範囲第３項に記載の組成物。 ５、炭化水素がワセリン、油または脂肪がみつろう、や
   し油またはラノリン、顔料がカオリン、酸化第二鉄、ま
   たは不溶性染料である特許請求の範囲第４項記載の組成
   物。 ６、ゲル中の巨大網目分子構造に共有結合しうる低分子
   量物質を、高分子物質の重量の１〜９５重量％含有する
   特許請求の範囲第１項記載の組成物。 ７、低分子量物質が医薬である特許請求の範囲第６項に
   記載の組成物。 ８、低分子量物質がカルミン酸である特許請求の範囲第
   ７項記載の組成物。 ９、特許請求の範囲第１項のゲルで形成された分子籠に
   生物学的もしくは薬学的活性物質が分散されかつ制御さ
   れた仕方で拡散しうる特許請求の範囲第１項記載の組成
   物。 １０、ヒアルロン酸またはその塩と、ジビニルスルホン
   と反応しうる官能基を有する他の親水性ポリマーの少な
   くとも１つとの混合物を、ｐＨ約９以上の希アルカリ水
   溶液中、約２０℃でジビニルスルホンとの架橋反応に付
   し、ヒアルロン酸と他の親水性ポリマーの混合架橋ゲル
   を得ることを特徴とする混合架橋ヒアルロン酸ゲル組成
   物の製造法。 １１、他の親水性ポリマーがヒドロキシエチルセルロー
   ス、カルボキシメチルセルロース、キサンテンゴム、コ
   ンドロイチン硫酸塩、ヘパリンからなる群から選ばれた
   天然または合成の多糖類、またはコラーゲン、エラスチ
   ン、アルブミン、グロブリン、ケラチン硫酸塩、硫酸ア
   ミノグリコサミノグリカンからなる群から選択される蛋
   白質、または合成の水溶性ポリマーである特許請求の範
   囲第１０項記載の方法。 １２、ヒアルロン酸またはその塩が、分子量約５０，０
   ００〜８×１０＾８である特許請求の範囲第１０項に記
   載の方法。 １３、反応混合物におけるヒアルロン酸またはその塩と
   前記池の親水性ポリマーとの合計濃度が１〜８重量％で
   、ヒアルロン酸またはその塩が、ヒアルロン酸またはそ
   の塩と前記他の親水性ポリマーとの合計量の５〜９５重
   量％である特許請求の範囲第１０項に記載の方法。 １４、ヒアルロン酸またはその塩とジビニルスルホンと
   の重量比が１５：１〜１：５である特許請求の範囲第１
   ０項に記載の方法。 １５、反応混合物にさらに塩酸、硫酸、リン酸または酢
   酸のそれぞれのアルカリ金属塩を、約２０重量％になる
   まで十分に添加することからなる特許請求の範囲第１０
   項に記載の方法。 １６、ヒアルロン酸もしくはその塩とジビニルスルホン
   と反応しうる官能基を有する他の親水性ポリマーの少な
   くとも１つとの混合物のｐＨ９以上の希アルカリ水溶液
   中に、不活性の、水に不溶性の物質を添加し、常温でジ
   ビニルスルホンとの架橋反応に付す特許請求の範囲第１
   ０項記載の方法。 １７、不活性の、水に不溶性の物質が炭化水素、油また
   は脂肪、顔料、ポリエチレンまたはポリテトラフルオロ
   エチレンである特許請求の範囲第１６項に記載の方法。 １８、炭化水素がワセリン、油または脂肪がみつろう、
   やし油またはラノリン、顔料がカオリン、酸化第二鉄ま
   たは不溶性染料である特許請求の範囲の第１７項に記載
   の方法。 １９、ヒアルロン酸もしくはその塩と他の親水性ポリマ
   ーとの混合物の濃度が１〜８重量％であり、不活性の、
   水に不溶性の物質が、ヒアルロン酸もしくはその塩とポ
   リマーとに不活性の、水に不溶性の物質を合計した重量
   の１〜９５重量％含まれてなる特許請求の範囲第１６項
   に記載の方法。 ２０、ヒアルロン酸もしくはその塩とジビニルスルホン
   と反応しうる官能基を有する他の親水性ポリマーの少な
   くとも１つとの混合物のｐＨ約９以上の希アルカリ水溶
   液中に、ジビニルスルホンに対して反応性の活性水素原
   子を有する官能基をもつ低分子量物質を加え、約２０℃
   でジビニルスルホンとの架橋反応に付す特許請求の範囲
   第１０項記載の方法。 ２１、低分子量物質が医薬である特許請求の範囲第２０
   項に記載の方法。 ２２、低分子量物質がカルミン酸である特許請求の範囲
   第２０項に記載の方法。 ２３、ヒアルロン酸もしくはその塩と他の親水性ポリマ
   ーとの混合物の濃度が１〜８重量％であり、低分子量物
   質が、ヒアルロン酸もしくはその塩とポリマーとに低分
   子量物質を合計した重量の１〜９５重量％含まれてなる
   特許請求の範囲第２０項記載の方法。