JPH0446119B2

JPH0446119B2 -

Info

Publication number: JPH0446119B2
Application number: JP3233787A
Authority: JP
Inventors: Akihiko Hosoi; Ichiro Watanabe; Etsuko Kobayashi; Akihiro Sakimae
Original assignee: Mitsubishi Rayon Co Ltd
Current assignee: Mitsubishi Chemical Corp
Priority date: 1987-02-17
Filing date: 1987-02-17
Publication date: 1992-07-28
Also published as: JPS63202397A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、一般式（式中R₁はアルキル基、アラルキル基又はアリ
ール基、R₂はアルキル基、ｎは１又は２を示す）
で表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体
エステルの製造法に関する。式のカルボン酸及びその対掌体エステルは光
学活性を有する種々の生理活性物質を合成するた
めの原料として利用されている。従来、式の光学活性カルボン酸の製造方法と
しては、予め有機合成的にラセミ体のカルボン酸
を合成したのち、光学分割剤を用いて分割する方
法、すなわち物理化学的に一方の光学活性体とそ
の対掌体とに分別する方法が知られている（特開
昭55−118455号、同56−81557号、同57−188563
号、ヨーロツパ特許公開第79200477号各公報参
照）。一方、光学活性カルボン酸エステルは、カ
ルボン酸を光学分割したのちエステル化反応を行
い、光学活性エステルに導く方法などが採られて
いる。しかし、これらの方法では、高価な分割剤
が多量に必要とされること、この分割剤が不純物
として製品中に混入しやすいこと、分割工程が複
雑であることなどの欠点があり、工業的な製法と
しては必ずしも満足できるものではない。これらの欠点を改良する方法として、最近、式
で表される光学活性を有するカルボン酸やその
対掌体エステルを微生物の作用により製造する方
法が提案されている（特開昭60−12993号、同60
−30692号、同60−141297号各公報参照）。本発明者らは、さらに微生物の作用によりDL
−カルボン酸エステルを不斉加水分解する方法に
関して鋭意研究を行つた結果、新たに、エンテロ
バクター（Enterobacter）属の微生物を用いる
ことにより、式で表される光学活性カルボン酸
及びその対掌体エステルを効率よく製造できるこ
とを見出した。すなわち、本発明は、一般式（式中R₃はアルキル基を示し、R₁、R₂及びｎは
前記の意味を有する）で表わされるエステルにエ
ステル結合を不斉加水分解する能力を有するエン
テロバクター（Enterobacter）属に属する微生
物の培養液、菌体又は菌体処理物を作用させるこ
とを特徴とする一般式（式中R₁、R₂及びｎは前記の意味を有する）で
表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体エ
ステルの製造法である。式及び式の化合物の置換基R₁のアルキル
基としては、例えばメチル基、エチル基など、ア
ラルキル基としては、例えばベンジル基、アリー
ル基としては、例えばフエニル基が挙げられる。本発明に用いられる式のエステルとしては、
例えばＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メ
チル、Ｓ−アセチル−γ−メルカプト−α−メチ
ル−ｎ−酪酸メチル、Ｓ−ベンゾイル−β−メル
カプトイソ酪酸メチル、Ｓ−フエニルアセチル−
β−メルカプトイソ酪酸メチルなどが挙げられ
る。これらエステルのＤ−体とＬ−体の混合割合
は特に限定されない。本発明で用いられる微生物は、エンテロバクタ
ー属に属し、前記の化合物のエステル結合を不斉
加水分解する能力を有する微生物であつて、例え
ばエンテロバクター・クロアツセ
（Enterobacter cloacae）IAM 1624が挙げられ
る。この微生物は公知の微生物であり、東京大学
応用微生物研究所（IAM）の菌株保存機関を通
じて容易に入手することができる。本発明における微生物の培養は、通常液体培養
で行う。培地としては、微生物が資化し得る炭素
源、窒素源、ビタミン、無機塩類等を適宜使用す
るが、微生物の加水分解能を向上させるために、
エステル等を培地に少量添加することも可能であ
る。培養は微生物が生育可能である温度及びPHで
行われるが、通常、温度５〜50℃、PH２〜11、好
ましくは５〜８の範囲である。微生物の生育を促
進させるために通気撹拌を行つても良い。加水分解反応を行うに際しては、培養の開始時
又は途中で培地にエステル（式）を添加しても
良く、予め微生物を培養したのち培養液にエステ
ル（式）を添加してもよい。また、増殖した微
生物の菌体を遠心分離等により採取し、これをエ
ステルを含む反応媒体に加えても良い。この場
合、菌体は取り扱い上の便宜から乾燥菌体、例え
ば凍結乾燥菌体、噴霧乾燥菌体又は有機溶媒、例
えばアセトン、トルエン等で処理した菌体、ある
いは菌体破砕物、菌体抽出物等の菌体処理物を用
いることもできる。反応媒体としては、例えばイ
オン交換水又は緩衝液が用いられる。反応媒体又
は培養液中のエステルの濃度は0.01〜50重量％が
好ましい。エステルは水に懸濁した状態で加える
こともできる。また、メタノール、アセトンなど
の有機溶媒を反応液に加えてエステルの溶解性を
向上させることもできる。反応液のPHは２〜11、
好ましくは５〜８の範囲である。反応が進行する
に伴い生成したカルボン酸により反応液のPHが低
下してくるが、この場合は適当な中和剤で最適PH
に維持することが好ましい。反応温度は５〜50℃
が好ましい。反応液又は培養液からの生成物の分離精製は通
常の方法、例えば抽出、再結晶、カラムクロマト
グラフイ等により行うことができる。以下、実施例に従つて本発明を詳述する。なお、下記実施例中の％は特定してない限り重
量％を意味する。実施例１エンテロバクター・クロアツセ
（Enterobacter cloacae）IAM1624を肉エキス
1.0％、ペプトン1.0％およびNaCI0.5％からなる
液体培地（PH7.2）100mlに植菌し、30℃１日間振
盪培養を行つた。培養終了後、培養菌体を全量集
菌し、1/10Ｍりん酸緩衝液（PH７）100mlに懸濁
した。この菌体懸濁液に（±）−Ｓ−アセチル−
β−メルカプトイソ酪酸メチル２mlを加え、30℃
で48時間振盪して反応させた。反応終了後、反応
液５mlを除菌し高速液体クロマトグラフイーによ
り反応生成物がＳ−アセチル−β−メルカプトイ
ソ酪酸であることを確認した。この時のＳ−アセ
チル−β−メルカプトイソ酪酸メチルの分解率は
48％であつた。反応液をNaOHでPH7.0に調整し、Ｓ−アセチ
ル−β−メルカプトイソ酪酸メチルを酢酸エチル
で抽出分離した。次いで水層を硫酸でPH2.0に下
げたのち、水層中のＳ−アセチル−β−メルカプ
トイソ酪酸を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル
抽出液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱水処理し
たのち溶媒を蒸発除去した。分離抽出されたＳ−
アセチル−β−メルカプトイソ酪酸及びＳ−アセ
チル−β−メルカプトイソ酪酸メチルの比旋光度
を日本分光製旋光度計（DIP−360型）で測定し
た。結果を表１に示す。この表より光学活性カルボ
ン酸とその対掌体エステルが生成していることが
判る。【表】

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中R₁はアルキル基、アラルキル基又はアリ
ール基、R₂及びR₃はアルキル基、ｎは１又は２
を示す）で表わされるエステルに、エステル結合
を不斉加水分解する能力を有するエンテロバクタ
ー（Enterobacter）属に属する微生物の培養液、
菌体又は菌体処理物を作用させることを特徴とす
る、一般式（式中R₁、R₂及びｎは前記の意味を有する）で
表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体エ
ステルの製造法。