JPH04501867A - 抗ウィルス剤としての５´―アルキルホスホニルヌクレオシド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 抗ウィルス剤としての５′−アルキルホスホニルヌクレオシド本発明は、式（１ ） （上記式中、Ｂはプリン又はピリミジンの複素環を表し、Ｘは酸素又は硫黄を表 し、Ｒ１は水酸基又は水素原子を表し、Ｒ２は直鎖、分枝又は環状の炭素数２０ までのアルキル基を表し、Ｒは上記Ｒ２で表した基又は水素原子、陽イオン又は ポリヒドロキシ基を表す）で表される化合物の抗ウィルス剤としての利用に関す る。

Ｂが表す複素環はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、及びウラシル又は５ −メチルウラシルもしくは５−メチルシトシンの如きそれらの誘導体を含むが、 Ｂは好ましくはアデニンを表す。

典型的なＲ２は直鎖又は分枝状の炭素数１〜６、通常１〜４のアルキル基である 。好ましくは、Ｒ２はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル又はｎ−ブチル 基である。Ｒ３が表す陽イオンは例えばナトリウム又はカリウム等のアルカリ金 属陽イオン、及びアルキル基が直鎖、分枝、又は環状で、炭素数が好ましくはＩ 〜６、更に好ましくは１〜４であるアルキルアンモニウム、及びアンモニウム陽 イオンの如き陽イオンを含み、Ｒ３が表す「ポリヒドロキシ基」とはグリセリル 、又はモノ−又はジ−サツカライドの如き炭水化物残基、又はケト誘導体を含む 。

式（１）で表される化合物のいくつかは、従来より合成され、その血圧降下活性 を試験され（米国特許３．５６０．４７１ｉ）、又は酵素の基質として利用され ている５′−メチルホスホニルアデノシンの如く既に知られている。しかし、こ の化合物の抗ウィルス剤としての利用は、未だ記載もなく特許請求もなされてい ない。

本発明の化合物は、いくつかの型のウィルス、とくにＲＮ＾ウィルスに対して生 物学的に活性である広範なスペクトルを持つ抗ウィルス剤である。

式（１）で表される化合物は、未保護の、デオキシリボヌクレオシド又はアデノ シンの如きリボヌクレオシドを、溶媒としてトリアルキルホスフェート（通常ト リメチルホスフェート又はトリエチルホスフェート）を用い、低温で、好ましく は０℃で、適切なアルキルホスホニルジクロリドでホスホニル化することにより 直接調製することができる。低温で１〜１０時間、好ましくは約６時間、混合物 を撹拌した後、重炭酸トリエチルアンモニウム水溶液例えば０．１Ｍを加えるこ とにより、反応を停止させる。この場合、反応生成物の分離は、ＩＲＡ−９３の 如き好適な陰イオン交換樹脂に反応溶液を通して濾過することにより容易に行う ことができ、適切な水洗の後、塩基性水溶液又は塩溶液で生成物を溶出すること ができるが、０．１Ｍ重炭酸トリエチルアンモニウム（ＴＥＡＢ）水溶液を用い て溶出すると更に容易である。

この溶液を蒸発乾固し、残渣を水に溶解し、ナトリウム型の陽イオン交換樹脂、 好ましくはＤｏｖｅｘ　５［ＩＷ−Ｘ８−Ｎａ＋型を充填したカラムを通過させ る。この結果できた水溶液を真空下で蒸発又は凍結乾燥させて、処理したヌクレ オシドの５′−アルキルホスホネートのナトリウム塩を生じさせる。

未保護のヌクレオシドは、新たに調製したアルキルホスホニルジトリアゾリドを 用いることによってもホスホニル化することができる。この活性ホスホニル化剤 は、対応する二塩化物から既知の手法により調製し、得られた溶液のままの形で 用いる。

この場合、溶媒及び反応条件は、前述の方法に於るものとは異なる。代表的な手 法に於ては、好適な乾燥溶媒、好ましくはピリジンに溶解させた乾燥ヌクレオシ ドの溶液を、アセトニトリルに溶解させたアルキルホスホニルジトリアゾリドの 乾燥溶液に加える。ヌクレオシドの型により時間は変わるが、通常３０分から５ 時間、室温にて反応混合液を撹拌する。反応は、重炭酸トリエチルアンモニウム 水溶液によって、又は代わりに水−ピリジンに溶解させたトリエチルアミンを用 いて容易に停止することができ、更に重炭酸ナトリウム水溶液で処理する。脱保 護を必要としない場合は、この反応生成物が既に最終化合物であり、水溶液を濃 縮し、この生成物を逆相カラムクロマトグラフィー、好ましくはＬｉＣｈｒｏｐ ｒｅｐ　ＲＰ−８を用いて精製する。前述した如く、ナトリウムイオンを用いて の陽イオン交換によって、最終化合物を得る。同様のホスホニル化の手法は、塩 基及び第二級水酸基又は第二級水酸基のみが好適に保護されたデオキシリボヌク レオチド又はリボヌクレオチドに用いることができる。

アデノシンの如きリボヌクレオシドから開始し、乾燥ＤＭＦに溶解させたカルボ ニルジイミダゾールを用いて室温にて数時間処理し、通常の水相−有機溶媒によ ２仕上げ操作をすることにより、ジエチルエーテルからの結晶化が可能な２’、 ３’−サイクリックカーボネートヌクレオシドを得る。同様の化合物は、触媒量 のフェノールの存在下りボヌクレオシドと乾燥ＤＮＦに溶解させたジフェニール カーボネートを反応させ、高温で必要時間、好ましくは１５０℃で１時間混合液 を熱することによっても得ることができる。

ジエチルエーテルでのこの混合液の希釈により、生成物が沈殿する。

２′及び３′の位置でサイクリックカーボネートとして保護されたヌクレオシド は、前述の如くジトリアゾリド誘導体でホスホニル化することができるが、反応 後、２’、３’−保護は仕上げの条件で不安定である。この方法では、更なる脱 保護段階は必要ではないが、未保護のヌクレオシドについて前述した如く最終的 な精製のみが必要である。

他の種類の保護は、リボヌクレオシドの２′及び３′の位置又はデオキシリボヌ クレオシドの３′の位置の水酸基に用いることができる。

例えば、前述のホスホニル化の手法は、２’、　３’　−０，Ｄ−ビス（ターブ チルジメチルシリル）リボヌクレオ−シト又は３′−０−ターブチルジメチルシ リルデオキシリボヌクレオシドに応用することができ、両者は既知の方法により 対応する未保護のヌクレオシドから容易に得ることができる。この場合、好まし くはテトラヒドロフランに溶解させたフッ化テトラブチルアンモニウムを用いた 脱保護反応が、ホスホニル化段階後に必要である。その後、最終生成物の精製を 前述の如く行うことができる。

前述のホスホニル化反応は、第二級水酸基が保護された、及び可能な場合、ベン ゾイル基の如きアシル基で塩基の環外アミノ基が保護されたりボヌクレオシド又 はデオキシリボヌクレオシドにも応用することができる。この場合の例としては 、標準手法により調製した２’　、　３’　−０，０−６〜Ｎ、Ｎ−テトラベン ゾイルアデノシンが挙げられる。好適な官能基の保護は、６−Ｎ−ベンゾイル− ２’、　３’　−０−（、テトライソプロピルジシロキサン川、３−ジイル）ア デノシンに於る如きアシル及びシリル基による混合様式に於ても達成することが できる。いずれの場合も、′アルキルホスホニル化段階後は前述の如く行い、室 温にて数時間のジオキサンに溶解させた３０％アンモニアを用いての処理は、脱 保護を完了さル化基、通常単純なアルキル基を、反応が停止する前の未だ活性型 の５′ホスホニル化ヌクレオシドに特定のアルコールを加えることによるか、又 はホスホニル化したヌクレオシドを好適な試薬例えばＤＣＣ又はカルボニルジイ ミダゾールを用いて再活性化することによってアルキルホスホニル化反応に容易 に導入することができる。

いずれにしても、良好な結果が、初めにアルキルホスホニルジクロリド又はアル キルホスホニルジトリアゾリドの如き二官能性ホスホニル化剤を当モル量の単純 なアルコールと反応させ、しかる後その結果生成した中間物質を、同様の反応混 合液に溶解させた好適なヌクレオシドと直接反応させることにより得られる。こ の例としては５’−０−（Ｐ−イソプロピルオキシ−Ｐ−メチル−ホスホニル） アデノシンが挙げられる。

本発明の式（１）で表される化合物は、広範なスペクトルの抗ウィルス活性、特 にＲＮＡウィルスに対する活性を有する。

抗ウィルス活性は、以後、更に詳述する標準手法に於て示される。

この化合物を、緩衝食塩水又は最小必須培地又はトリブタン（丁ｒ７ｐｔａｎ　 ）燐酸ブロス又は類似の培地のような好適な希釈剤に溶解させる。

この化合物の活性は、インビトロ及びインビボの試験の両方に於て評価した。

インビトロ試験は、ＲＳウィルス、セムリキ森林熱ウィルス、コクサラキーウィ ルス、及びワクシニアウィルスに感染させたヒトＨｅｐ　審２細胞、又はコロン ビアＳＫウィルスに感染させたハムスターＢＨＫ細胞の単層上で行った。活性指 数（＾、１．）は、細胞増殖の５０％減少（５０％組織培養阻害量−Ｔ、　Ｃ， １，Ｄ、　５０）を決定する薬剤の濃度として表される細胞毒性の、低温細胞溶 解物中のウィルスのタイターを５０％減少させる濃度として決定される感染性ウ ィルス生産に於る活性に対する比として決定した。

ＦＣＥ２５＋４８Ａとコードした５′−メチルホスホネートアデノシンの結果を 表１に示す。

式（１）で表される化合物は、例えばインフルエンザウィルスによる肺炎、及び セムリキ森林熱ウィルスに感染したマウスの脳炎の実験モデルに対して、インビ ボ試験に於ても活性である。

鼻内注射したインフルエンザウィルスは、接種量により病状の重さが異なる肺炎 をマウスに起こすこと、多量の場合死をもたらし、少量の場合その拡大がスコア により評価できる肺病変を引き起こすことが知られている。マウスを致死量に近 い量のインフルエンザウィルスに感染させ、同様の投与経路により治療した場合 、９日後に頚部脱臼によりマウスを殺して病変を評価することができる。コント ロールとの差の統計的有意性は、ウィルコクソンテスト（１９５２年）により評 価した。代表的実験の結果を表２に報告した。

脳炎モデルに対する本発明の化合物の活性は、例えばセムリキ森林熱ウィルスを マウスに接種することにより決定することができる。例えば、この化合物を３０ μｍ容量の特定の希釈液に溶解して、投与した（ｉ、ｃ、）。表３に報告したＦ ＣＥ２５１４８Ａの結果は、感染後１０日目に、感染させたコントロールと比較 した致死率の％保護として表している。

更に、化合物ＦＣＥ２５１４８＾は、参照化合物として用いたリバビリンよりも インフルエンザウィルス及びセムリキ森林熱ウィルスに対して良好な抗ウィルス 活性を示した。本発明の化合物は、前記ウィルスの感染治療に用いることができ 、又他のウィルス感染、特にＲＮＡウィルスにも用いることができる。特別な適 応は、トガウィルス、ブンヤウィルス、アレナウィルス及びその他の外来ウィル スの治療である。ヒトウィルスに加えて、この化合物は動物ウィルス及び植物ウ ィルスに対しても同様に用いることかできる。

本発明の化合物は、ヒト又は動物体の治療に於て有用である。

これらは、抗ウィルス活性を有し、ヒト及び他の哺乳動物に於てＲＮＡウィルス に対して用いることができる。このために、錠剤、カプセル、及び類似物の如き 経口投与剤の形に製剤することができる。

本発明は、有効成分として式（１）で表される化合物又は医薬上使用可能なその 塩基付加塩を、医薬上使用可能な担体又は希釈剤と共に用いることを特徴とする 医薬用組成物を提供する。

この化合物は、単独で、又は炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タ ルク、蔗糖、乳糖、ペクチン、デキストリン、澱粉、ゼラチン、トラガカント、 メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、低温溶融蝋、ココ アバター及び類似物の如き従来の担体又は希釈剤との組み合せにより投与するこ とができる。

香味剤、可溶化剤、潤滑剤、懸濁化剤、結合剤、錠剤崩壊剤及び類似物を用いる ことができる。この化合物は他の担体を用いても用いなくても良いがカプセル化 することができる。固形、液状いずれの場合も当該組成物の有効成分の割合を、 少なくとも経口投与により抗ウィルス活性を示すのに十分にする。この化合物は 、非経口的に注射することもでき、この場合、他の溶質例えば等張液を調製する のに足る食塩又はグルコースを含む滅菌溶液として用いる。代表的には、本発明 の化合物２０−２０００Ｂ量／１日を治療のためにヒトに投与することができる 。　この化合物は、下部気道に達することができる程十分微小な粒子（全エアゾ ル径の中央値＝１−２μ）のエアゾル剤として投与することができ、ＲＳウィル ス又は他のパラミクソウィルス又はミクソウィルスによる重度の下部気道感染の 治療のために酸素フード又はテントを通して供給することができる。

以下に本発明の実施例を示すが、これらの実施例に限定されるものではない。

実施例１ アデノシン５′−メチル燐酸ナトリウム塩（ＦＣＥ　２５１４８＾）調製Ａ 乾燥アセトニトリル（９０ｍｌ）に溶解させたメチルホスホニルジクロリド（６ ００ｍｇ、　４．５ｍｍｏｌ）及び１．２．４−　）リアゾール（８２０ｍｇ。

１１、８　ｍｍｏｌ）を含む液に、撹拌しながらトリエチルアミン（１，２７ｍ １．　９．１５ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合液を室温にて一時間撹拌した。

しかる後、乾燥ピリジン（１０ｍｌ）に溶解させた無水アデノシン（Ｉｇ、　１ ．９ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて四時間撹拌した後、トリエチルアミン（１， ７ｍ１）　、水（Ｉ］、６ｍ１）、及びピリジン（４ｍｌ）の溶液を滴下した。

５％ＮａＨＣＯａ水溶液で反応を停止させた後、混合液を少量になるまで真空蒸 発させた。濃縮水溶液中の生成物を、ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ８Ｒのカラム を用いた逆相クロマトグラフィーにより精製した。（水で溶出した。）生成物を 含むフラクションを集め、Ｎｌ　型のＩ）ＯＶＥＮ　５θＬＫ８にのカラムを通 過させた。

水を蒸発させて表記化合物３５０ｍｇを得た。１（ＰＬＣの結果：９９．０％（ ２５４ｎｍ） ＰＭＲ（２００ＭＨ！、　ＤＭＳＯ）・δ：８．４１．８．１６（２！、　２Ｈ ，アデニン）；７．１１（ｂｅ、　２Ｈ，Ｎ）！、、　：　６．１０（ｂｓ、　 ＩＨ，Ｈ）　；５．１ｔ９（ｄ、　）；５．山、ＩＨ，旧’）；５．８［１（ｂ ｓ、　１８．０社）　：　４．５６（ｄｄ、　Ｊ□３．８．５．４Ｈ！、　ＩＨ ，Ｈ２′）；　４．２５（ｄｄ、　Ｊ＝３．３゜３、８Ｈ！、　ＩＨ，Ｈ３’） ；　３．９９（ｍ、　ＩＨ，８４’）；　３．７９（ｍ、　２Ｈ，ＣＨ２５’） ；　０．９４（１，Ｊ−１５，９Ｈ！、　３Ｈ，Ｐ−ＣＨ３）調製Ｂ ０℃に保ったトリエチル燐酸（５ｍｌＪ　に懸濁させたアデノシン（５４０ｍｇ 、　２ｍｍｏｌ）に、トリエチル燐酸５ｍｌに溶解させたメチルホスホニルジク ロリド（５３０ｍｇ、　４ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合液を０℃で６時 間撹拌した。０℃で０゜ＩＭの重炭酸トリエチルアンモニウム（ＴＥＡＢ）水溶 液１００１を加えることによりこの混合物の反応を停止させた。この結果できた 溶液をＩＲＡ９３カラム（３０Ｘ５　ｃｍ）で濾過した。この生成物を含むカラ ムを水で溶出することにより洗浄し、しかる後０．　ＩＭ　ＴＥＡＢ水溶液を用 いて生成物を溶出した。この溶液を真空で蒸発乾固させ、残渣を水に溶解し、逆 相クロマトグラフィー（ＲＰ８）により精製してＮ！＋型のＩ）ＯＷｏ　５０Ｗ −１８カラムを通過させた。水を蒸発させて表記化合物２００Ｂを得、これは調 製Ａと同様の分析データを示した。

調製Ｃ 乾燥ＤＭＦ　（２０ｍｌ）に溶解させたアデノシン（２，’　６７ｇ、　１０ｍ ｍｏｌ）の溶液に、カルボニルジイミダゾール（３，３４ｇ、　２０ｍｍｏｌ） を加えた。この溶液を４時間撹拌した後、飽和ＮａＣｌ水溶液で希釈し、酢酸エ チルを用いて数回抽出した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ２）、更に真空で蒸 発させ、残渣をジエチルエーテルから結晶化させて固形アデノシン２′３′サイ クリツクカーボネートを生じさせた。

乾燥アセトニトリル（５０ｍｌ）に溶解させたＩ、　２．４−　）リアゾール（ ４，４ｇ、６３．６ｍｍｏｌ）及びメチルホスホニルジクロリド（３，２５ｇ。

２４、４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（６，８ｍ１．４９ｍｍｏｌ） を滴下した。１５分間撹拌した後、この溶液に、得られた全量のアデノシン２′ ３゛サイクリツクカーボネートを乾燥ピリジン（５０ｍｇ）に溶解させたものを 滴下し、混合液を室温にて１時間撹拌した。

その後、トリエチルアミン（９ｍｇ）　、水（３ｍｌ）　、及びピリジン（２０ ｍｌ）の混合液を加え、反応混合液を５％重炭酸ナトリウム水溶液で希釈し、た 。この水溶液を真空下で濃縮し、ＬｅＣｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ−８カラムを通し て分離した。（水で溶出した。）生成物を含むフラクションを集め、Ｎａ＋型の ＤＯＷＥＸ　５ＱＷ−Ｘ８カラムを通して濾過した。　この水溶液を蒸発させて 表記化合物１，８ｇを得、それは調製Ａと同様の分析データを示した。

調製Ｄ ジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）に溶解させたアデノシン（１［１ｇ。

３７、４ｆｆＩｍｏｌ）及びフェノール（３，４ｇ、　３．６４ｍｍｏ　ｌ）の 溶液にジフェニルカーボネート（１７ｇ、　７９．４ｍｍｏｌ）を加えた。この 懸濁液を１５０℃で１時間熱した。この混合液をジエチルエーテル（２リツトル ）で希釈し、その沈殿物（アデノシン２′３′サイクリツクカーボネート）を濾 過した。

アセトニトリル（２（１０ＩＩ＋ｌ）に溶解させたメチルホスホニルジクロリド （１５，２６ｇ、ＩＨ４，７ｍｍｏｌ）及びＩ、　２．４−　）リアゾール（１ ６，３３ｇ。

Ｈ６，７ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（３５，８ｍｔ　２４８ｍｍｏ ｌ）を滴下した。この溶液を室温にて１時間撹拌した。得られたアデノシン２′ ３′サイクリツクカーボネートを乾燥ピリジン（２００ｍｌ）に溶解させ、先は どの溶液に滴下した。この反応混合液を室温で４時間撹拌した後、トリエチルア ミン（４５ｍｌ）、水（２４ｍ　ｌ　）、及びピリジン（５０ｍｌ）の混合液を 滴下した。混合液に含まれる有機溶媒の全量を真空で蒸発させ、残渣をＬｅＣｈ ｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ−８カラムで分離した。（水で溶出した。）生成物を含むフ ラクションを集め、Ｎａ＋型のＤＯＷＥＸ　５０Ｗ−Ｘ８カラムを通して濾過し 、この水溶液を蒸発させて表記化合物７．５ｇを得、それは調製Ａと同様の分析 データを示した。

調製Ｅ 乾燥アセトニトリル（１０ｍｌ）に溶解させたメチルホスホニルジクロリド（６ ５０ｍｇ、　４．８８ｍｍｏ　ｌ）及び１．２．４−トリアゾール（８８０ｍｇ 。

１２、７２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１，３＆、　９．８１１１ ｍｏｌ）を滴下し、この溶液を１５分間撹拌した。２’３’−０，０−ビス（Ｉ ｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）アデノシン（標準手法により得た；　９９０ｍ ｇ。

：ｆｍｏｌ　）を乾燥ピリジン（１０ｍｌ）に溶解させ、先はどの溶液に滴下し 、室温にて４５分間撹拌した。トリエチルアミン（１，８ｍ１）、水（０，６ｍ １）　、及びピリジン（４ｍｌ）の混合液を加えることにより反応を停止させ、 ５％重炭酸ナトリウム水溶液で希釈した。この水相をクロロホルムで数回抽出し た。この有機抽出物を蒸発させ、残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）に溶解 させた。

この溶液にフッ化テトラブチルアンモニウム（１，２ｇ、　３．８ｍｍｏｌ）を 加え、室温にて３０分間撹拌した。０．１Ｍ重炭酸トリエチルアンモニウム水溶 液を用いて反応を停止させ、メチレンクロリドを用いて洗浄した。水相を真空下 で濃縮し、逆相カラムクロマトグラフ　イー　（ＬｅＣｂｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ− ８）に供した。（水で溶出した。）生成物を含むフラクションを集め、Ｎａ＋型 のＤＯＷＥＸ　５０Ｗ−Ｘ８カラムを通過させた。この水溶液を真空下で蒸発さ せて表記化合物６００ｍｇを得、それは調製Ａと同様の分析データを示した。

調製Ｆ 乾燥アセトニトリル（３０［１１１）に溶解させたメチルホスホニルジクロリド （２，ｆ５ｇ、１５．ｌｌｍｍｏｌ　）及び１．２．４−　）リアゾール（２， ３ｇ。

３３、３ａｕｎｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（５ｍｌ、３３．５ｍｍｏｌ ）を滴下した。室温にて１時間撹拌した後、乾燥ピリジン（１０ｍｌ）に溶解さ せた６−Ｎ、　Ｎ−２’　３’　−Ｑ、　０−テトラベンゾイルアデノシン（既 知の手法により得た；　３．６ｇ、５．２７ｍｍｏｌ）を滴下し、混合液を室温 にて４時間撹拌した。０．１Ｍ重炭酸トリエチルアンモニウム水溶液（２５０ｍ ｇ）を加え、この混合液を、メチレンクロリド（３Ｘ１００ｍｌ）を用いて抽出 した。この有機相を減圧下で蒸発させ、残渣をジオキサン（５０ａ＋Ｉ）に溶解 させ、３０％ＮＨ４ＯＨ水溶液（４５０＋＋＋１）を加えて室温にて１２時間撹 拌した。この水溶液を真空下で蒸発乾固した。残渣をジエチルエーテルで洗浄し 、ＬｅＣｈｔｏｐｒｅｐ　Ｐ、Ｐ−８の逆相カラムクロマトグラフィーにより精 製した。（水で溶出した。）生成物を含むフラクションを集め、Ｎａ＋型のＤＯ ＷＥＸ　５０Ｗ−Ｘ８カラムを通過させ濾過した。この水溶液を真空下で蒸発さ せて表記化合物１．３ｇを得、それは調製Ａと同様の分析データを５’　−０− （Ｐ−イソプロピルオキシ−Ｐ−メチルホスホニル）アデノシン（ＦＣＥ２６３ ９５） 乾燥ピリジン（２０Ｉｌｌｌ）に溶解させたメチルホスボニルジクロリド（２５ ０ｍｇ、　２ｍｍｏｌ）の溶液に、乾燥ピリジン（２０ｍｌ）ニ溶解すセタ乾燥 イソプロパツール（１６０μｌ、　２ｍｍｏ　ｌ）を滴下し、混合液を室温にて ４時間撹拌した。しかる後、この混合液に、乾燥ピリジン（２０ｍｌ）に懸濁さ せたアデノシン（５００ｍｇ、　１．８ｍｍｏｌ）の懸濁液を加え、１０ｍ１に なるまで真空下で濃縮し、室温にて１２時間撹拌した。５に重炭酸ナトリウム水 溶液（ＩＧＯｍｌ）を用いて反応を停止させた。この混合液を真空下で蒸発させ 、残渣をＬｉｃｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ−８カラムクロマトグラフイーにかけた。

（ＭｅＯＨＢ２０　（２：８）を用いて溶出した。）Ｐの位置でのジアステレオ マーの、比がｌ：ｌの混合物として１４０ｍｇの５’−０−（Ｐ−イソプロピル オキシ−Ｐ−メチルホスホニル）アデノシンを得た。ＨＰＬＣの結果：９６％（ ２５４ｒ＋ｍ） ＰＭＲ（２００ＭＨ！、　ＤＭＳＯ）　：　δ＝８．３４．８．　Ｂ６（２ｓ、 　２Ｈ，アデニン）、７．４５（ｔｕ、　２Ｈ，Ｎ旦２）　；　５．９１　（ｄ 、　Ｊ□５．１ｆ（ｒ、　１）１．　ＨＩ’）；　５．２−５．７（ｂｇ、　２ Ｑ）　；４、６３（＋ｎ、　ＩＭ、ト２’）；　４．５０（ｍ、　ＩＨ，ＣＨ３ −ＣＭ−ＣＨ３）　；　４．２３　（ｍ、　２Ｈ，Ｈ−３’　Ｈ１’）；　４． ０−４．２（ｍ、　２Ｌ　ＣＨ２−５’）　；　１．４０．１．３８　（２ｄ、 　Ｊ１７．３８！、　３Ｈ。

ＣＨ３−Ｐ、　２ジアステレオ７−）　；　１．２０（ｍ、６Ｈ，ＣＢ（Ｃ動） 　２）実施例３ アデノシン５ｌ−ｎ−ブチルホスホネートナトリウム塩（ＦＣＥ２６２３１＾） 乾燥ピリジン（１５ｍｌ）に溶解させた６−Ｎ−ベンゾイル−２’　−３’　− ０−（テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）アデノシン（既知の 手法により得た；　Ｉｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の溶液に０℃に保ったまま、Ｎ− ブチルホスホニルジクロリド（２３０ｍｇ、　１．６３ｎｍｏｌ）を加えた。こ の反応混合液を室温になるままにして２時間撹拌した。

０．１Ｍの重炭酸トリエチルアンモニウム水溶液（２５ｍｌ）を加え、水（５０ ｍｌ）で希釈した後、この混合液をメチレンクロリド（３Ｘ５０ｍｌ）で抽出し た。有機相から溶媒を真空下で蒸発させた。残渣をジオキサン（２５ｍｌ）に溶 解させ、３０％ＮＩ（４０Ｈ水溶液（７５ｍｌ）を用いて室温にて一晩処理した 。この水溶液をジエチルエーテル（３Ｘ５０ｍｌ）で洗浄し、水を真空下で蒸発 させた。残渣をＬｉＣｂｒ。

ｐｒｅｐ　ＲＰ−８の逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。

（水、その後０−１ｆ１％勾配のメタノールで溶出した。）適切なフラクション から溶媒を蒸発させ、生じた濃縮溶液を、Ｎａ＋型のＤｏｖｅｘ　５Ｈ−Ｘ８の カラムを通過させた。水を真空下で蒸発させ、表記化合物２４０ｍｇを得た。

ＨＰＬＣの結果：９５，７％（２５４ｎｍ）ＰＭＲ（２００ＭＨ！、　ＤＭＳＯ ）　：δＪ、　４１．８．１２　（２ｇ、　２８．　アデニン）　；　７．１１ ７　（ｔ＋ｓ。

２Ｈ，ＮＦＩ２）；　５．８Ｂ（ｄ、　Ｊ＝５．山、　ＩＨ，Ｉ（−１’　）　 ；　４．５５　（ｄｄ、　Ｊ＝５．３．５．山。

ＩＨ，ト２’）　；　４．２２　（ｄｄ、　Ｊ：３．７．５．３Ｈ！、　ＩＮ、 　Ｈ−３’）　；　４．０（１（ｍ、　ＩＨ，Ｈ−４’）　F ３、８２　（ｍ、　２Ｈ，ＣＨ２−５’　）　；　ｌ。４−１．１（ｍ、５）１ ．　ＣＨ３（ＣＢ２　）　３Ｐ）；　０．７７（ｔ、Ｊ＝７．ＯＨ２，３Ｈ，Ｃ Ｈ３（ＣＨ２）　３　Ｆ）。

表　１ ＦＣＥ２５１４８　：インビトロ活性 細胞毒性　抗ウィルス活性 ウィルス　細胞　Ｔ、　Ｃ，ＩＤ　＾、Ｉ、（ＴＣＩＤ５ｏ／ＩＶ（ｍｇ／ｍ　 ｌ）　Ｉ　Ｄ５０） インフルエンサ°ウィルス　Ｂ）ＩＫ　４００　１１ＲＳウイルス　Ｈｅｐ　３ ６０　１８ セムリキ森林熱ウイルス　Ｈｅｐ　３６０　１５コクサヲキーウイルス　Ｈｅｐ 　３６０　６コロンヒ゛アＳＫウイルス　Ｌ９２９　２７０　５ワクシニアウイ ルス　Ｈｅｐ　３６０　５表　２ インフルエンサ゛ウィルス感染マウスに於るＦＣＥ２５１４８Ａのインビボ活性 化合物　投与量　％保護（肺病変） ｍｇ／ｋｇ　。６ｇ／７ウス　投与経路　試験ＦＣＥ　２５１４８＾　６．２５ 　１２５　ｉ、ｎ、　２４．５”〃１００　２０００　ｐ、　ｏｓ　２７’ｏ　 ＝ｐ＜０．０２５　（ＷＩＬＣＯＸＯＮテスト）＊＝ｐ＜０．０１　（同上） 表　３ 化合物　Ｉ、Ｃ，処理　％保護（致死率）量（ｍｇ／ｋｇ）濃度（ｍｃｇ／ｍｌ ）　範囲Ｆ　ＣＥ　３．５　２０００　９５−１００用紛ｖａ査報告 １−ｗｍ’Ａｍｃａ１ｍＭ　ＰＣＴ／ＥＰ　９０１０１６０２国際調査報告 ＥＰ　９００１６０２ ＳＡ　４０１０６

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．式（Ｉ） ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）（上記式中、Ｂはプリン又はピリミジ ンの複素環を表し、Ｘは酸素又は硫黄を表し、Ｒ１は水酸基又は水素原子を表し 、Ｒ２は直鎖、分枝又は環状の炭素数２０までのアルキル基を表し、Ｒ３は上記 Ｒ２で表した基、又は水素原子、陽イオン又はポリヒドロキシ基を表す）で表さ れる化合物のウィルス病治療用医薬生産への利用。
2. ２．Ｂがアデニン、グアニン、シトシン、チミン又はウラシルである請求項１に 記載の利用。
3. ３．Ｒ２がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル又はｎ−ブチルである請求 項１又は２に記載の利用。
4. ４．Ｒ３がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ナトリウム 、カリウム、アンモニウム、又はグリセリル又は炭水化物残基である前記請求項 のいずれか１項に記載の利用。
5. ５．式（Ｉ）で表される化合物が５′−メチルホスホネートアデノシン又はその ナトリウム塩、５′−Ｏ−（Ｐ−イソプロピルオキシ−Ｐ−メチルホスホニル） アデノシン又はアデノシン５′−ｎ−ブチルホスホネート又はそのナトリウム塩 である請求項１に記載の利用。
6. ６．５′−メチルホスホニルアデノシンを除く、請求項１ないし５のいずれか１ 項に記載の式（Ｉ）で表される化合物。
7. ７．デオキシリボヌクレオシド又はリボヌクレオシドを、適切なアルキルホスホ ニルジクロリド又はアルキルホスホニルジトリアゾリドを用いて、ホスホニル化 することから成る請求項６に記載の化合物の製造法。
8. ８．塩基及び／又は第二級水酸基が保護されたデオキシリボヌクレオシド又はリ ボヌクレオシドを、ホスホニル化し、必要に応じて、ホスホニル化後の生成物を 脱保護する請求項７に記載の製造法。
9. ９．デオキシリボヌクレオシド又はリボヌクレオシドを、アルキルホスホニルジ クロリド又はアルキルホスホニルジトリアゾリド、及び式Ｒ３−ＯＨ（ここでＲ ３は水素原子を除く請求項１に記載の基を表す）で表される化合物と反応させ、 式（Ｉ）（ここでＲ３は水素原子を含まない）で表される化合物を得る請求項７ 又は８に記載の製造法。
10. １０．請求項６に記載の式（Ｉ）で表される化合物及び医薬的に許容可能な希釈 剤又は担体を含む、ウィルス病の治療に好適な組成物。
11. １１．請求項１に記載の式（Ｉ）で表される化合物の有効量をヒト又は動物に投 与することから成る、ウィルス病に感染した患者又は動物の治療法。
12. １２．請求項１に記載の式（Ｉ）で表される化合物を含む抗ウィルス剤。