JPH0597858A - アラノロシノール−ａおよびアラノロシノール−ｂ、それらの生産方法およびそれらの使用 - Google Patents
アラノロシノール−ａおよびアラノロシノール−ｂ、それらの生産方法およびそれらの使用Info
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
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- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 新規抗生物質、アラノロシノール−Ａおよび
アラノロシロール−Ｂの提供 【構成】 図示の構造式で表わされる化合物、微生物プ
ソイドアラキニオックスロセウスのクーエン培養菌称Ｎ
ｏ．Ｙ−３０，４９９を発酵により培養して、培養ブロ
スから単離することによる該化合物を製造する方法、な
らびに抗生物質としてこれら化合物を含有する医薬製剤 〔式中ＲはＨ（アラノロシノール−Ａ）またはＣＨ2Ｃ
ＯＣＨ3（アラノロシノール−Ｂ）である〕 【効果】 該化合物は細菌、酵母および真菌に対して有
用な抗生物質である。
アラノロシロール−Ｂの提供 【構成】 図示の構造式で表わされる化合物、微生物プ
ソイドアラキニオックスロセウスのクーエン培養菌称Ｎ
ｏ．Ｙ−３０，４９９を発酵により培養して、培養ブロ
スから単離することによる該化合物を製造する方法、な
らびに抗生物質としてこれら化合物を含有する医薬製剤 〔式中ＲはＨ（アラノロシノール−Ａ）またはＣＨ2Ｃ
ＯＣＨ3（アラノロシノール−Ｂ）である〕 【効果】 該化合物は細菌、酵母および真菌に対して有
用な抗生物質である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は以下アラノロシノール−
Ａ（Aranorosinol−Ａ）およびアラノロシノール−Ｂ
（Aranorosinol−Ｂ）と称する２つの新規抗生物質、微
生物プソイドアラキニオッス ロセウス（Pseudoarachni
otus roseus）（培養菌株No. Ｙ−30,499）の発酵によ
るそれらの生産方法、それらの単離並びに抗生物質とし
ての使用に関する。
Ａ（Aranorosinol−Ａ）およびアラノロシノール−Ｂ
（Aranorosinol−Ｂ）と称する２つの新規抗生物質、微
生物プソイドアラキニオッス ロセウス（Pseudoarachni
otus roseus）（培養菌株No. Ｙ−30,499）の発酵によ
るそれらの生産方法、それらの単離並びに抗生物質とし
ての使用に関する。
【０００２】
【発明の構成】アラノロシノール−Ａおよびアラノロシ
ノール−Ｂは下記構造
ノール−Ｂは下記構造
【化２】 〔式中Ｒ＝Ｈ（アラノロシノール−Ａ）またはＣＨ2Ｃ
ＯＣＨ3（アラノロシノール−Ｂ）〕を有する。
ＯＣＨ3（アラノロシノール−Ｂ）〕を有する。
【０００３】〔生産方法〕本発明により、微生物プソイ
ドアラキニオッス ロセウスのクーエン（Kuehn）培養菌
株No. Ｙ−30,499からアラノロシノール−Ａおよびアラ
ノロシノール−Ｂと称される前記の新規抗生物質を生産
する方法が提供される。該微生物はヨーロッパ特許出願
第０３４１６４９号に概説されているように、ブダペス
ト条約規定の下において１９８７年６月２３日付で寄託
されている（ＤＳＭ ４１５１）。該特許出願明細書中
にはアラノロシン（Aranorosin）、すなわち式
ドアラキニオッス ロセウスのクーエン（Kuehn）培養菌
株No. Ｙ−30,499からアラノロシノール−Ａおよびアラ
ノロシノール−Ｂと称される前記の新規抗生物質を生産
する方法が提供される。該微生物はヨーロッパ特許出願
第０３４１６４９号に概説されているように、ブダペス
ト条約規定の下において１９８７年６月２３日付で寄託
されている（ＤＳＭ ４１５１）。該特許出願明細書中
にはアラノロシン（Aranorosin）、すなわち式
【化３】 で表される化合物が開示されている。本発明の方法は好
気性条件下で炭素源、窒素源、栄養無機塩および微量元
素を含有する栄養培地中においてＹ−30,499を発酵によ
り培養し次に該化合物を培養ブロスから単離しついで精
製することからなる。
気性条件下で炭素源、窒素源、栄養無機塩および微量元
素を含有する栄養培地中においてＹ−30,499を発酵によ
り培養し次に該化合物を培養ブロスから単離しついで精
製することからなる。
【０００４】炭素源はグルコース、スクロース、デンプ
ンまたはデキストリンであることができる。好ましい炭
素源はデンプンである。窒素源は大豆ミール、トリプト
ン、酵母エキス、ビーフエキス、麦芽エキス、コーンス
ティープリカー、ペプトンまたは無機物質例えばアンモ
ニウム塩であることができる。好ましい窒素源は大豆ミ
ールである。栄養無機塩は塩化ナトリウム、塩化カリウ
ム、りん酸水素塩およびりん酸二水素塩並びに炭酸カル
シウムであることができる。微量元素は鉄、マンガン、
銅、亜鉛、コバルトまたはこのようなその他の重金属の
各塩であることができる。
ンまたはデキストリンであることができる。好ましい炭
素源はデンプンである。窒素源は大豆ミール、トリプト
ン、酵母エキス、ビーフエキス、麦芽エキス、コーンス
ティープリカー、ペプトンまたは無機物質例えばアンモ
ニウム塩であることができる。好ましい窒素源は大豆ミ
ールである。栄養無機塩は塩化ナトリウム、塩化カリウ
ム、りん酸水素塩およびりん酸二水素塩並びに炭酸カル
シウムであることができる。微量元素は鉄、マンガン、
銅、亜鉛、コバルトまたはこのようなその他の重金属の
各塩であることができる。
【０００５】Ｙ−30,499の培養は２４℃〜３０℃の温度
および６.０〜８.０のpHで実施することができる。好ま
しくは２６℃（±１℃）およびpH６.５でＹ−30,499を
培養するのがよい。
および６.０〜８.０のpHで実施することができる。好ま
しくは２６℃（±１℃）およびpH６.５でＹ−30,499を
培養するのがよい。
【０００６】発酵は振とうフラスコ並びに発酵槽の両方
で実施することが可能である。Bayer社製の“デスモフ
ェン”(“Desmophen”R；プロピレンオキシドから誘導
された線状ポリエーテル）は発酵槽中での消泡剤として
使用することができる。発酵は６６〜９０時間で、すな
わち本発明化合物の最適収量が得られたと判明した時点
で停止するのが好ましい。収穫の最適時間は約７２時間
である。発酵は好ましくは液内発酵であるのがよい。発
酵の進行並びに本発明のアラノロシノール−Ａおよびア
ラノロシノール−Ｂの生成は、知られた寒天平板拡散法
（抗生物質の検定方法；Grove, D. C. and Randell, W.
A., Medical Encyclopaedia Inc., New Yorkによるa l
aboratory manual, 1955参照）でバチルス サブチリス
（Bacillussubtilis）に対する培養ブロスの生物活性を
測定することによって検出することかできる。
で実施することが可能である。Bayer社製の“デスモフ
ェン”(“Desmophen”R；プロピレンオキシドから誘導
された線状ポリエーテル）は発酵槽中での消泡剤として
使用することができる。発酵は６６〜９０時間で、すな
わち本発明化合物の最適収量が得られたと判明した時点
で停止するのが好ましい。収穫の最適時間は約７２時間
である。発酵は好ましくは液内発酵であるのがよい。発
酵の進行並びに本発明のアラノロシノール−Ａおよびア
ラノロシノール−Ｂの生成は、知られた寒天平板拡散法
（抗生物質の検定方法；Grove, D. C. and Randell, W.
A., Medical Encyclopaedia Inc., New Yorkによるa l
aboratory manual, 1955参照）でバチルス サブチリス
（Bacillussubtilis）に対する培養ブロスの生物活性を
測定することによって検出することかできる。
【０００７】本発明のアラノロシノール−Ａおよびアラ
ノロシノール−Ｂは標準の実験室的技法によって培養ブ
ロスから単離されついで精製される。
ノロシノール−Ｂは標準の実験室的技法によって培養ブ
ロスから単離されついで精製される。
【０００８】培養濾液中のアラノロシノール−Ａおよび
アラノロシノール−Ｂは、水に非混和性の溶媒例えば酢
酸エチル、クロロホルムまたはブタノールでの抽出によ
って回収される。好ましい溶媒は酢酸エチルである。
アラノロシノール−Ｂは、水に非混和性の溶媒例えば酢
酸エチル、クロロホルムまたはブタノールでの抽出によ
って回収される。好ましい溶媒は酢酸エチルである。
【０００９】菌糸体中における本発明の新規化合物アラ
ノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂは、濾過
または遠心分離で得た菌糸体を溶媒例えば酢酸エチル、
クロロホルム、メタノール、エタノール、アセトンまた
はブタノールで抽出することによって回収するのが好ま
しい。好ましい溶媒はアセトンである。抽出後、溶媒は
真空下での蒸発により回収し、そして水性層は水で希釈
しついで酢酸エチルのような溶媒で再抽出すことができ
る。
ノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂは、濾過
または遠心分離で得た菌糸体を溶媒例えば酢酸エチル、
クロロホルム、メタノール、エタノール、アセトンまた
はブタノールで抽出することによって回収するのが好ま
しい。好ましい溶媒はアセトンである。抽出後、溶媒は
真空下での蒸発により回収し、そして水性層は水で希釈
しついで酢酸エチルのような溶媒で再抽出すことができ
る。
【００１０】培養濾液および菌糸体の両者からの溶媒抽
出物は一緒にして蒸発乾固させることができる。この粗
抗生物質混合物からアラノロシノール−Ａ、アラノロシ
ノール−Ｂおよびアラノロシンを、通常のもしくは逆相
のカラムクロマトグラフィーまたは向流クロマトグラフ
ィーまたはゲル濾過クロマトグラフィーのいずれかを用
いることによって精製することができる。精製にはこれ
らの技法を反復使用してもよいし、または異なる技法を
適当に組合せて使用してもよい。好ましい手法は反復し
て行うシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーであ
る。
出物は一緒にして蒸発乾固させることができる。この粗
抗生物質混合物からアラノロシノール−Ａ、アラノロシ
ノール−Ｂおよびアラノロシンを、通常のもしくは逆相
のカラムクロマトグラフィーまたは向流クロマトグラフ
ィーまたはゲル濾過クロマトグラフィーのいずれかを用
いることによって精製することができる。精製にはこれ
らの技法を反復使用してもよいし、または異なる技法を
適当に組合せて使用してもよい。好ましい手法は反復し
て行うシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーであ
る。
【００１１】
【実施例】以下に本発明を実施例により説明する。
【００１２】実施例１ 培養菌株No. Ｙ−30,499の維持 培養菌株Ｙ−30,499を下記組成： グルコース ４０ｇ ペプトン １０ｇ Ｎａ2ＨＰＯ4 １ｇ 寒天 １５ｇ 蒸留水 １リットル ｐＨ ６.５ｇ を有するサブロー（Sabouraud）のグルコース寒天培地
上に維持した。
上に維持した。
【００１３】各成分を加熱により完全に溶解した後に培
地を試験管中に分配しついで１２１℃で２０分間滅菌し
た。加圧滅菌前のpHは６.５であった。寒天斜面調製の
ために試験管を斜めの位置にして冷却した。これらの寒
天斜面に土壌から単離した菌株No. Ｙ−30,499の胞子を
接種しついで良好な胞子形成が観察されるまで２６℃
（±１℃）で培養した。十分に胞子形成された株は冷蔵
庫に保存した。
地を試験管中に分配しついで１２１℃で２０分間滅菌し
た。加圧滅菌前のpHは６.５であった。寒天斜面調製の
ために試験管を斜めの位置にして冷却した。これらの寒
天斜面に土壌から単離した菌株No. Ｙ−30,499の胞子を
接種しついで良好な胞子形成が観察されるまで２６℃
（±１℃）で培養した。十分に胞子形成された株は冷蔵
庫に保存した。
【００１４】実施例２ 新規抗生物質アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノ
ール−Ｂの発酵生産のために振とうフラスコ中で行う菌
株Ｙ−30,499の培養 種培地の組成は下記のとおりである。
ール−Ｂの発酵生産のために振とうフラスコ中で行う菌
株Ｙ−30,499の培養 種培地の組成は下記のとおりである。
【００１５】可溶性デンプン １５ｇ 大豆ミール １５ｇ グルコース ５ｇ ＣａＣｏ3 ２ｇ ＮａＣｌ ５ｇ 酵母エキス ２ｇ コーンスティープリカー １ｇ 蒸留水 １リットル
【００１６】上記種培地を１００mlずつの量で５００ml
広口エルレンマイヤーフラスコ中に分配しついで１２１
℃で２０分間滅菌した。加圧滅菌の前にpHを６.５に調
整した。加圧滅菌後のpHは６.０であった。フラスコを
冷却し、次に実施例１の十分に胞子形成された培養物の
数白金耳分（few loopfuls）を接種し、２６℃（±１
℃）で６０時間２４０r.p.m.で振とう培養したところ良
好な生長が観察された。これは生産培地に接種する種培
養として使用された。
広口エルレンマイヤーフラスコ中に分配しついで１２１
℃で２０分間滅菌した。加圧滅菌の前にpHを６.５に調
整した。加圧滅菌後のpHは６.０であった。フラスコを
冷却し、次に実施例１の十分に胞子形成された培養物の
数白金耳分（few loopfuls）を接種し、２６℃（±１
℃）で６０時間２４０r.p.m.で振とう培養したところ良
好な生長が観察された。これは生産培地に接種する種培
養として使用された。
【００１７】生産培地の組成は下記のとおりである。
【００１８】大豆ミール ２０ｇ グルコース ３０ｇ ＣａＣＯ3 ６ｇ ＮａＣｌ ３ｇ ＮＨ4Ｃｌ ２.５ｇ ＫＨ2ＰＯ4 ２ｇ ＺｎＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０.２２ｇ ＣａＣｌ2 ０.５５ｇ ＭｎＣｌ2・４Ｈ2Ｏ ０.５mg ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０.５mg ＣｕＳＯ4・５Ｈ2Ｏ ０.１６mg ＣｏＣｌ2・６Ｈ2Ｏ ０.１６mg 蒸留水 １リットル
【００１９】上記生産培地を２００mlずつの量で１リッ
トル エルレンマイヤーフラスコ中に分配し次に１２１
℃で２０分間滅菌した。加圧滅菌の前に培地のpHを６.
３に調整した。加圧滅菌後のpHは６.０であった。フラ
スコを冷却し、次に種培養〔１％ｖ／ｖ〕を接種した。
発酵は回転振とう器上で２６℃（±１℃）において７２
時間実施した。
トル エルレンマイヤーフラスコ中に分配し次に１２１
℃で２０分間滅菌した。加圧滅菌の前に培地のpHを６.
３に調整した。加圧滅菌後のpHは６.０であった。フラ
スコを冷却し、次に種培養〔１％ｖ／ｖ〕を接種した。
発酵は回転振とう器上で２６℃（±１℃）において７２
時間実施した。
【００２０】収穫後、培養液を遠心分離し次に新規抗生
物質アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂ
を実施例４に記載のようにして菌糸体および濾液の両方
から単離した。
物質アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂ
を実施例４に記載のようにして菌糸体および濾液の両方
から単離した。
【００２１】実施例３ 新規抗生物質アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノ
ール−Ｂの発酵生産のために発酵槽中で行う培養菌株Ｙ
−30,499の培養 段階Ｉ：種培養の生産 ａ) 振とうフラスコ培養：種培地（実施例２に記載）
１００mlを５００ml広口エルレンマイヤーフラスコ中に
入れ、滅菌前のpHを６.５に調整した。これを本発明者
等のオートクレーブ中において１２１℃で２０分間滅菌
し、冷却しついで実施例１の斜面培養の数白金耳分を接
種した。滅菌後のpHは６.０であった。フラスコを回転
振とう器上で２６℃（±１℃）において７２時間２４０
r.p.m.で培養した。
ール−Ｂの発酵生産のために発酵槽中で行う培養菌株Ｙ
−30,499の培養 段階Ｉ：種培養の生産 ａ) 振とうフラスコ培養：種培地（実施例２に記載）
１００mlを５００ml広口エルレンマイヤーフラスコ中に
入れ、滅菌前のpHを６.５に調整した。これを本発明者
等のオートクレーブ中において１２１℃で２０分間滅菌
し、冷却しついで実施例１の斜面培養の数白金耳分を接
種した。滅菌後のpHは６.０であった。フラスコを回転
振とう器上で２６℃（±１℃）において７２時間２４０
r.p.m.で培養した。
【００２２】ｂ) 吸引びん培養：種培地（実施例２に
記載）１リットルを５リットル吸引びんに入れた。これ
をオートクレーブ中において１２１℃で３０分間滅菌
し、冷却しついで実施例１の斜面培養からの数白金耳分
を接種した。培地のpHは滅菌前では６.５でありそして
滅菌後では６.０であった。これらのボトルを回転振と
う器上にのせて２６℃（±１℃）で７２時間２４０r.p.
m.において培養した。
記載）１リットルを５リットル吸引びんに入れた。これ
をオートクレーブ中において１２１℃で３０分間滅菌
し、冷却しついで実施例１の斜面培養からの数白金耳分
を接種した。培地のpHは滅菌前では６.５でありそして
滅菌後では６.０であった。これらのボトルを回転振と
う器上にのせて２６℃（±１℃）で７２時間２４０r.p.
m.において培養した。
【００２３】段階II：発酵 ａ) 小規模培養：１５リットル ステンレス鋼発酵槽中
において０.０４％デスモフェンと一緒の生産培地（実
施例２に記載）１０リットルを１２１〜１２２℃で３６
分間加圧滅菌した。滅菌前のpHは６.５であり、滅菌後
では６.０であった。
において０.０４％デスモフェンと一緒の生産培地（実
施例２に記載）１０リットルを１２１〜１２２℃で３６
分間加圧滅菌した。滅菌前のpHは６.５であり、滅菌後
では６.０であった。
【００２４】生産培地（実施例２に記載）２０リットル
を０.０４％デスモフェンとともに３０リットル ステン
レス鋼発酵槽中に入れ、ついでその場で１２２℃、１.
２kg／cm2蒸気圧において３２分間滅菌した。滅菌前pH
は６.５に調整した。滅菌後pHは６.０であった。冷却
後、無菌状態下でそれらに１〜３％（ｖ／ｖ）種培養を
接種しついで生長および発泡により左右される１２０〜
１８０r.p.m.の撹拌数並びに６〜１０ l.p.m.の通気で
２６℃（±１℃）において培養を行った。
を０.０４％デスモフェンとともに３０リットル ステン
レス鋼発酵槽中に入れ、ついでその場で１２２℃、１.
２kg／cm2蒸気圧において３２分間滅菌した。滅菌前pH
は６.５に調整した。滅菌後pHは６.０であった。冷却
後、無菌状態下でそれらに１〜３％（ｖ／ｖ）種培養を
接種しついで生長および発泡により左右される１２０〜
１８０r.p.m.の撹拌数並びに６〜１０ l.p.m.の通気で
２６℃（±１℃）において培養を行った。
【００２５】ｂ) 大規模培養：生産培地（実施例２に
記載）１００リットルを１５０リットル発酵槽中に入れ
た。滅菌前pHを６.５に調整し、０.０４％デスモフェン
を加えた。その場で培地を１２１〜１２２℃で３２分間
１.２kg／cm2蒸気圧において滅菌した。滅菌後のpHは
６.０であった。２６℃に冷却後、それに無菌状態下で
吸引びんからの種培養１％を接種しついで１００r.p.m.
の撹拌数および６０ l.p.m.の通気により２６℃（±１
℃）の温度で培養を行った。
記載）１００リットルを１５０リットル発酵槽中に入れ
た。滅菌前pHを６.５に調整し、０.０４％デスモフェン
を加えた。その場で培地を１２１〜１２２℃で３２分間
１.２kg／cm2蒸気圧において滅菌した。滅菌後のpHは
６.０であった。２６℃に冷却後、それに無菌状態下で
吸引びんからの種培養１％を接種しついで１００r.p.m.
の撹拌数および６０ l.p.m.の通気により２６℃（±１
℃）の温度で培養を行った。
【００２６】７２時間でこれらの発酵槽から収穫し、次
にアラノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂの
生産を、バチルス サブチリスに対して試験する活性に
より測定した。
にアラノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂの
生産を、バチルス サブチリスに対して試験する活性に
より測定した。
【００２７】収穫したブロスを遠心分離しついでさらに
実施例４により記載のように処理した。
実施例４により記載のように処理した。
【００２８】実施例４ アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノール−Ｂの単
離、精製および同定約３００リットルの発酵ブロスを遠
心分離にかけて菌糸体および培養濾液を分離した。
離、精製および同定約３００リットルの発酵ブロスを遠
心分離にかけて菌糸体および培養濾液を分離した。
【００２９】pH６.２である培養濾液（２７０リット
ル）をそれぞれ９０リットルずつの酢酸エチルで２回抽
出した。合一した抽出物を減圧下３５℃で溶媒から回収
した。
ル）をそれぞれ９０リットルずつの酢酸エチルで２回抽
出した。合一した抽出物を減圧下３５℃で溶媒から回収
した。
【００３０】菌糸体ケーキ（２４.５kg）をそれぞれ５
０リットルずつの溶媒アセトンで２回抽出した。大部分
の溶媒を減圧下３５℃で合一抽出物から除去し、残留水
性相を水で希釈しついで５リットルずつの酢酸エチルで
２回抽出した。酢酸エチル抽出物を減圧下３５℃で濃縮
しついで培養濾液抽出物からの濃縮物と合一した。
０リットルずつの溶媒アセトンで２回抽出した。大部分
の溶媒を減圧下３５℃で合一抽出物から除去し、残留水
性相を水で希釈しついで５リットルずつの酢酸エチルで
２回抽出した。酢酸エチル抽出物を減圧下３５℃で濃縮
しついで培養濾液抽出物からの濃縮物と合一した。
【００３１】赤味がかった茶色の粗抗生物質混合物（１
２５ｇ）を加圧下（流速：５０ml／分）シリカゲル
（１.６５kg、２３０〜４００メッシュ）でクロマトグ
ラフィー処理した。このカラムを、メタノールの量を増
加させながら用いるクロロホルム−メタノール混合物
で、クロロホルム中に１０％メタノールの濃度が得られ
るまで溶離した。
２５ｇ）を加圧下（流速：５０ml／分）シリカゲル
（１.６５kg、２３０〜４００メッシュ）でクロマトグ
ラフィー処理した。このカラムを、メタノールの量を増
加させながら用いるクロロホルム−メタノール混合物
で、クロロホルム中に１０％メタノールの濃度が得られ
るまで溶離した。
【００３２】アラノロシノール−Ｂおよびアラノロシン
の混合物はクロロホルム中の２〜３％メタノールで溶離
され、一方アラノロシノール−Ａはクロロホルム中の５
〜１０％で溶離された。
の混合物はクロロホルム中の２〜３％メタノールで溶離
され、一方アラノロシノール−Ａはクロロホルム中の５
〜１０％で溶離された。
【００３３】半精製アラノロシノール−Ａ（２５ｇ）を
加圧下（流速：４０ml／分）で溶離剤としてクロロホル
ム中の５％メタノールを用いてシリカゲル（４００ｇ、
２３０〜４００メッシュ）でクロマトグラフィー処理し
た。純粋なアラノロシノール−Ａ（７.５ｇ）が白色固
形物として単離された。この物質を酢酸エチルまたはク
ロロホルム中に溶解し次いでｎ−ヘキサンで沈殿させて
痕跡量の色素を除去した。
加圧下（流速：４０ml／分）で溶離剤としてクロロホル
ム中の５％メタノールを用いてシリカゲル（４００ｇ、
２３０〜４００メッシュ）でクロマトグラフィー処理し
た。純粋なアラノロシノール−Ａ（７.５ｇ）が白色固
形物として単離された。この物質を酢酸エチルまたはク
ロロホルム中に溶解し次いでｎ−ヘキサンで沈殿させて
痕跡量の色素を除去した。
【００３４】アラノロシノール−Ｂおよびアラノロシン
の混合物（２４.５ｇ）は、石油エーテル中の酢酸エチ
ル濃度を増加させながら用いる石油エーテル−酢酸エチ
ル混合物で溶離するシリカゲル（１.１kg、２３０〜４
００メッシュ）カラム上において分離された。純粋なア
ラノロシン（３.８ｇ）は１：１ 石油エーテル−酢酸エ
チル中で溶離され、一方アラノロシノール−Ｂ（２４０
mg）は１：３ 石油エーテル−酢酸エチル中で溶離され
た。こうして単離されたアラノロシノール−Ｂを酢酸エ
チルまたはクロロホルム中に溶解しついでｎ−ヘキサン
で沈殿させて痕跡量の色素を除去することができる。
の混合物（２４.５ｇ）は、石油エーテル中の酢酸エチ
ル濃度を増加させながら用いる石油エーテル−酢酸エチ
ル混合物で溶離するシリカゲル（１.１kg、２３０〜４
００メッシュ）カラム上において分離された。純粋なア
ラノロシン（３.８ｇ）は１：１ 石油エーテル−酢酸エ
チル中で溶離され、一方アラノロシノール−Ｂ（２４０
mg）は１：３ 石油エーテル−酢酸エチル中で溶離され
た。こうして単離されたアラノロシノール−Ｂを酢酸エ
チルまたはクロロホルム中に溶解しついでｎ−ヘキサン
で沈殿させて痕跡量の色素を除去することができる。
【００３５】アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノ
ール−Ｂは化学分析および分光測定法により分析した。
それらは下記の特徴を示す。
ール−Ｂは化学分析および分光測定法により分析した。
それらは下記の特徴を示す。
【００３６】
【表１】
【００３７】アラノロシノール−Ａおよびアラノロシノ
ール−Ｂによって種々の細菌および真菌の株の発育を阻
止するのに必要とされる最小発育阻止濃度は、下記表２
に示すとおりである。
ール−Ｂによって種々の細菌および真菌の株の発育を阻
止するのに必要とされる最小発育阻止濃度は、下記表２
に示すとおりである。
【００３８】
【表２】
【００３９】すなわち、アラノロシノール−Ａはグラム
陽性菌、グラム陰性菌並びに酵母および糸状菌に対して
活性であるが、一方アラノロシノール−Ｂはグラム陽性
菌のみに対して活性である。
陽性菌、グラム陰性菌並びに酵母および糸状菌に対して
活性であるが、一方アラノロシノール−Ｂはグラム陽性
菌のみに対して活性である。
【図１】アラノロシノール−Ａの1Ｈ ＮＭＲスペクトル
を示す図。
を示す図。
【図２】アラノロシノール−Ａの13Ｃ−ＮＭＲスペクト
ルを示す図。
ルを示す図。
【図３】アラノロシノール−Ｂの1Ｈ ＮＭＲスペクトル
を示す図。
を示す図。
【図４】アラノロシノール−Ｂの13Ｃ−ＮＭＲスペクト
ルを示す図。
ルを示す図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ラービー・ガジヤナン・バート インド国ボンベイ400080．ムランド／ウエ スト．モデルタウン．ラデイワラコロニ ー．ウマ デイー−22 (72)発明者 トリプテイクマル・ムコーパデイーアイ インド国ボンベイ400080．ムランド／ウエ スト．ダルガロード エム−23 (72)発明者 ビマル・ナレツシユ・ガングリ インド国ボンベイ400071．チエンブール． シンデイソサイエテイ．エイトスロード． バイクント 401−402
Claims (8)
- 【請求項１】 式 【化１】 （式中ＲはＨまたはＣＨ2ＣＯＣＨ3である）で表される
化合物。 - 【請求項２】 請求項１記載の化合物の生産において、
真菌培養物No. Ｙ−30,499（ＤＳＭ ４１５１）を好気
性条件下、炭素源、窒素源、無機栄養塩および微量元素
を含有する栄養培地上で、２４〜３０℃の温度および
６.０〜８.０のpHにおいて６６〜９０時間培養し、次に
該化合物を常套法で培養ブロスから単離しついで精製す
ることからなる生産方法。 - 【請求項３】 培養を２６℃（±１℃）およびpH６.５
で行う請求項２記載の方法。 - 【請求項４】 培養を約７２時間行う請求項２または３
記載の方法。 - 【請求項５】 発酵を液内発酵として行う請求項２〜４
のいずれか１項に記載の方法。 - 【請求項６】 慣用の補助剤および／またはビヒクルの
ほかに請求項１記載の化合物を含有する製剤。 - 【請求項７】 抗生作用を有する製剤の調製における請
求項１記載の化合物の使用。 - 【請求項８】 抗真菌作用を有する製剤の調製におけ
る、ＲがＨである請求項１記載の化合物の使用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT91104313.1 | 1991-03-20 | ||
| EP91104313 | 1991-03-20 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0597858A true JPH0597858A (ja) | 1993-04-20 |
Family
ID=8206547
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4063122A Pending JPH0597858A (ja) | 1991-03-20 | 1992-03-19 | アラノロシノール−ａおよびアラノロシノール−ｂ、それらの生産方法およびそれらの使用 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5240959A (ja) |
| EP (1) | EP0504871A1 (ja) |
| JP (1) | JPH0597858A (ja) |
| TW (1) | TW209866B (ja) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3991052A (en) * | 1975-07-18 | 1976-11-09 | Eli Lilly And Company | Antibiotic A-30641 |
| ZA818741B (en) * | 1980-12-18 | 1983-07-27 | Wellcome Found | Pharmaceutical compounds,preparation,use and intermediates therefor and their preparation |
| EP0341649A1 (de) * | 1988-05-13 | 1989-11-15 | Hoechst Aktiengesellschaft | Ein neues Antibiotikum, Aranorosin, ein mikrobiologisches Verfahren zu seiner Herstellung und seine Verwendung als Arzneimittel |
| US5064856A (en) * | 1989-07-31 | 1991-11-12 | Merck & Co., Inc. | Novel hmg-coa synthase inhibitors |
-
1991
- 1991-09-13 TW TW080107239A patent/TW209866B/zh active
-
1992
- 1992-03-18 US US07/853,040 patent/US5240959A/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-03-19 EP EP92104776A patent/EP0504871A1/en not_active Withdrawn
- 1992-03-19 JP JP4063122A patent/JPH0597858A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5240959A (en) | 1993-08-31 |
| TW209866B (ja) | 1993-07-21 |
| EP0504871A1 (en) | 1992-09-23 |
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