JPH0645615B2

JPH0645615B2 - カズサマイシンｂ、その製造法およびその用途

Info

Publication number: JPH0645615B2
Application number: JP61106502A
Authority: JP
Inventors: 巖梅沢; 寛機小宮山; 興太郎船石; 健二河村; 昌則岡西; 隆義岡部; 甫森島
Original assignee: 北里研究所（社団法人）
Priority date: 1986-05-09
Filing date: 1986-05-09
Publication date: 1994-06-15
Anticipated expiration: 2009-06-15
Also published as: JPS62277378A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、抗腫瘍作用および抗真菌作用を有する新規な
カズサマイシンＢ、その製造法およびそれを含有してな
る抗腫瘍剤又は抗真菌剤に関するものである。

〔従来の技術〕

抗腫瘍作用および抗真菌作用を有する微生物産生の抗生
物質としては、例えば制癌性抗生物質８１−４８４〔特
開昭６０−１４１２９３号公報、ジャーナル・オブ・ア
ンティバイオティクス(Journal of Antibiotics)第３７
巻、第７０６頁−第７１１頁（１９８３年）参照〕が知
られている。またこの抗生物質と類似した構造を有し、
かつ抗真菌作用を有する微生物産生の抗生物質として
は、レプトマイシン類〔特開昭５５−１１８４９９号公
報；ジャーナル・オブ・アンティバイオティクス(Journ
al of Antibiotics)第３６巻、第６３９頁−第６５０頁
（１９８３年）〕が知られている。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明は新規で有用な抗腫瘍生抗生物質を提供すること
を目的とするものである。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的として種々
の土壌から菌株を分離し、その生産する代謝産物につい
て研究を続けた結果、千葉県で採取した土壌から分離し
た菌株８１−４８４の培養物中に、一部の真菌類に対し
て抗菌活性を示し、しかもＰ３８８マウス白血病および
ザルコーマ１８０細胞の増殖抑制作用を有する物質が産
生されることを見い出した。さらにまた、本発明のカズ
サマイシンＢは、抗生物質８１−４８４よりも安全域の
広い抗腫瘍剤であることを見い出した。その理化学的性
質を有する物質は他に報告がないことから、この物質を
カズサマイシンＢと呼称することにした。本発明は、か
かる知見に基いて完成されたものである。

本発明は、後記の化学構造式及び理化学的性質を有する
カズサマイシンＢまたはその塩、ストレプトマイセス属
に属するカズサマイシンＢ生産菌を栄養培地に培養し、
該培養中にカズサマイシンＢを蓄積せしめ、該培養物か
らカズサマイシンＢを採取することを特徴とするカズサ
マイシンＢまたはその塩およびカズサマイシンＢまたは
その塩を有効成分として含有することを特徴とする抗腫
瘍剤または抗真菌剤に関するものである。

カズサマイシンＢ生産菌は、ストレプトマイセス属に属
するが、例えば本発明者らが分離したストレプトマイセ
ス属に属する菌株８１−４８４は、本発明に最も有効に
使用される菌株の一例であって、本菌株の菌学的性質を
示すと次ぎの通りである。

(a)．形態的特徴８１−４８４菌株は多くの寒天平板培地上で菌糸状で豊
富に発育し、その基生菌糸の分断は観察されない。気菌
糸が形成される場合は、その胞子柄が直線状またはいわ
ゆる不完全型のら線状であり、その先端の２０個以上の
連鎖状の胞子が観察され、胞子のうは観察されない。そ
の胞子の表面は平滑であり、長径約０．８μｍ×短径約
０．４μの楕円径である。

(b)．次の各培地における生育状態各培地における生育状態（２７℃で３週間培養後の各培
地における生育状態）の観察は第１表の通りである。

(c)．次の各生理学的性質生育温度範囲：２０〜３０℃で生育が可能であり、２
７℃付近が最適である。

ゼラチンの液化（グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地上）：陰性スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地
上）：陰性脱脂牛乳の凝固、ペチトン化（１０％スキムミルク培
地上）：凝固は陰性であり、ペプトン化は陽性である。

メラニン様色素の生成（チロシン寒天培地およびペプ
トン・イースト・鉄寒天培地上）：陰性硫化水素の生成（ペプトン・イースト鉄寒天培地
上）：陰性亜硫酸塩の生成（硫酸塩培地上）：陽性 (d)．次の各炭素源の利用性炭素源の利用性は、プリドハム・コドリープ寒天培地上
２７℃で１ケ月間培養した後に観察した。なお、はよ
く利用する。＋は利用する。−は利用しない意味をそれ
ぞれ示す。

Ｌ−アラビノース − Ｄ−キシロース − Ｄ−グルコースＤ−フラクトース − シュクロース − イノシトール＋Ｌ−ラムノース＋ラフィノース − Ｄ−マンニトール − (e)．細胞壁の組成 Beckerらの方法〔Applied Microbiology，第１３巻、第
２３６頁−第２４３頁（１９６５年）〕に基づいて分析
した結果、．ｃ．型のジアミノピメリン酸が検出され
た。

以上の菌学的性質から、本８１−４８４菌株はストレプ
トマイセス属に属する菌株であることは明らかである。
しかしながら、どの種に属するかは明らかにできないの
で、取りあえず本菌株をストレプトマイセス（Streptom
yces）８１−４８４と命名することにする。なお、本菌
株は、通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所に微
工研菌条寄第５７１号（ＦＥＲＭ−ＢＰ５７１）として
寄託されている。

以上、カズサマイシンＢについて説明したが、放線菌の
一般的性状として菌学上の性状は極めて変異し易く、一
定したものではなく、自然的にあるいは通常行われる紫
外線照射、Ｘ線照射または変異誘導剤、例えばＮ−メチ
ル−Ｎ′−トリロソグアニジン、エチルメタンスルホネ
ートなどを用いる人工的変異手段により変異することは
周知の事実であり、このような人工的変異株も含め、ス
トレプトマイセス属に属し、カズサマイシンＢを生産す
る能力を有する菌株はすべて本発明に使用することがで
きる。

本発明において、先ずストレプトマイセス属に属するカ
ズサマイシンＢ生産菌が適当な培地に培養される。本菌
の培養においては、通常放線菌の培養に使用される培地
ならばいずれも使用することができる。培地としては、
微生物が同化し得る炭素源、消化し得る窒素源、さらに
必要に応じて無機酸塩等を含有させた栄養培地が使用さ
れる。同化し得る炭素源としては、ブドウ糖、糖蜜、澱
粉、デキストリン、セルロース、コーン・スティープ・
リカー、グリセリン、有機酸などが用いられる。同化し
得る窒素源としては、ペプトン、肉エキス、酵母エキ
ス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・スティープ・リカー、
綿実粕、カゼイン、大豆、蛋白分解物、アミノ酸、尿素
などの有機窒素源、硝酸塩、アンモニウム塩などの無機
窒素化合物が単独または組み合わせて用いられる。その
他、必要に応じてナトリウム塩、カリウム塩、リン酸
塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などの無機塩類が添
加される。さらに、培地には、必要に応じて、本菌の生
育やカズサマイシンＢの生産を促進する微量栄養素、発
育促進物質を適当に添加してもよい。

培養は通常振盪または通気攪拌培養などの好気的条件下
で行うのが好ましい。工業的には深部通気攪拌培養を行
うのが好ましい。培地のpHは中性付近で培養を行うのが
好ましい。培養温度は２０〜３７℃でも行い得るが、通
常は２４〜３０℃、好ましくは２７℃に保つのがよい。
培養時間、液体培養の場合、通常４〜６時間培養を行う
と、本発明によるカズサマイシンＢが生産蓄積される。
好ましくは、培養液中の蓄積量が最大に達した時に培養
を終了すればよい。これらの培地組成、培地の液性、培
養温度、攪拌温度、通気量などの培養条件は使用する菌
株の種類や外部の条件などに応じて好ましい結果が得ら
れるように適宜調節、選択されることはいうまでもな
い。液体培養において発泡があるときは、シリコン油、
植物油、界面活性剤などの消泡剤を適宜使用してもよ
い。このようにして得られた培養物中に蓄積されたカズ
サマイシンＢは主として培養濾液中に含有されているの
で、培養物を必要に応じて濾過補助剤例えばセライト、
ハイフロスーパーセルなどを加えて濾過するか、又は遠
心分離して培養濾液と菌体とに分離し、その培養濾液か
らカズサマイシンＢを採取するのが有利である。

また、本発明のカズサマイシンＢは菌体にも含まれるの
で、菌体からメタノールなどの低級アルコール、アセト
ンなどでカズサマイシンＢを抽出し、得られた抽出液を
減圧濃縮して該有機溶媒を除去した後、以下に述べる培
養濾過からの精製を進めることができる。培養濾液から
カズサマイシンＢの分離精製を行うためには、カズサマ
イシンＢが後述のようにヘキサンおよび水に不溶であ
り、メタノール、エタノールなどのアルコール系溶媒、
ジクロルメタン、クロロホルムなどの塩素化メタン系溶
媒、アセトン、メチルイソブチルケトンなどのケトン系
溶媒などの多くの有機溶媒に可溶である酸性物質である
ので、これらの性質を利用した精製法が用いられる。通
常、培養濾液を非親水性有機溶媒、例えばクロロホル
ム、メチルイソブチルケトン、酢酸エチル、酢酸ブチル
などで抽出することにより、カズサマイシンＢが有機溶
媒層に転溶される。上記抽出操作を行う際に、培養濾液
を予め、pH３．０〜５．０の範囲に調節するのが好まし
い。このようにして得られた有機溶媒層は、必要に応じ
て金属イオンなどを除去するために希薄なエチレンジア
ミン四酢酸塩水溶液で洗浄した後、種々の脱水剤例えば
無水硫酸ナトリウム、無水硫酸マグネシウム、ビーズゲ
ルなどを加えて脱水される。脱水された有機溶媒層を減
圧下で濃縮する。この濃縮操作においてカズサマイシン
Ｂは安定な物質であるが、通常加熱温度を６０℃以下と
なるように行うのが好ましい。残渣にヘキサン、石油エ
ーテルなどの有機溶媒を加えてカズサマイシンＢを沈澱
させることができる。得られた沈澱物を数回ヘキサンな
どで洗浄後、吸引濾過または遠心分離によりカズサマイ
シンＢを褐色の粗製物として採取することができる。

上記の粗製物をさらに精製するためには、カズサマイシ
ンＢと混合物との溶解度の差や、混じり合わない二液層
間の分配率の差や、各種吸着担体に対する吸着力の差を
利用したクロマトグラフィーなど多くの手段が可能であ
るが、特にクロマトグラフィーはカズサマイシンＢの精
製には非常に有効な方法である。カズサマイシンＢの精
製に有効なクロマトグラフィーとしては、例えばシリカ
ゲル、アルミナ、活性炭、セルロース、ヒドロキシアパ
タイド、ＨＰ−２０などの吸着剤による吸着クロマトグ
ラフィー、シラン化シリカゲル、オクタデシルシラン化
シリカゲルなどを用いる逆相分配クロマトグラフィー、
セファデックスＬＨ−２０、トヨパールなどを用いる分
子篩にもとずくゲル濾過クロマトグラフィー、ＤＥＡＥ
セルロース、ＤＥＡＥセファデックス、ＤＥＡＥトヨパ
ールなどを用いるイオン交換クロマトグラフィーなどが
あげられる。

カズサマイシンＢは、これらのクロマトグラフィーや電
気泳動、向流分配、限外濾過、蒸溜などの手段を単独あ
るいは任意の順序に組み合わせるか、または反復して用
いることにより分離精製することができる。例えば前記
粗製物を少量のクロロホルム、ベンゼンなどに溶かし、
これを予め充填されたシリカゲルのカラムに吸着させ、
ヘキサン−アセトン系混合溶媒を用いてカラムクロマト
グラフィーを行い、その活性画分を集め、減圧濃縮せし
める。これをさらに少量のクロロホルムなどに溶解し、
シリカゲルに吸着させ、クロロホルム−メタノール系混
合溶媒を用いてカラムクロマトグラフィーを行い、その
活性画分を集め、減圧濃縮後、少量のメタノールに溶か
し、これを逆層シリカゲルカラムに吸着させ、メタノー
ル−水系混合溶媒でカラムクロマトグラフィーを行うこ
とによりカズサマイシンＢを分離精製することができ
る。

このようにして得られたカズサマイシンＢは酸性物質で
あるから、公知の方法により塩に変換し得る。

このような塩としては、医薬的に許容し得る非毒性塩が
あげられ、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアル
カリ金属塩、カルシウム塩、公知の有機アミンとの塩な
どがあげられる。

次に、以上の如くして得られたカズサマイシンＢの理化
学的性質について述べる。

元素組成；C₃₂H₄₆O₇（高分解能マススペクトルによ
る）分子量；５４２〔ＦＤＳＩマススペクトルによる〕融点；５２〜５５℃ 比旋光度：▲〔α〕²⁰ _D▼＝−８６．９５℃（ｃ＝
０．１、メタノール）紫外線吸収スペクトル；第１図の通り（メタノール中
で測定）赤外線吸収スペクトル；第２図の通り（ＫＢｒディス
ク法で測定）^１Ｈ−NMRスペクトル；第３図の通り（重クロロホル
ム中３６０MHzで測定）^１３ｃ−NMRスペクトル；第４図の通り（重クロロホ
ルム中９０．５６MHzで測定）溶剤に対する溶解性；ジエチルエーテル、メタノー
ル、エタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、酢酸
エチル、酢酸ブチル、アセトンおよびベンゼンに可溶、
ヘキサン、水に不溶。

塩基性、酸性、中性の区別；酸性物質物質の色；淡黄色の粉末呈色反応；ヨード発色、三塩化アンチモン反応に陽
性。

ニンヒドリン反応、アントロン−硫酸反応、塩化第二鉄
反応に陰性。

シリカゲル薄層クロマトグラフィー：（担体メルク社
製、シリカゲル６０）；Ｒｆ値＝０．１７（展開溶媒：
クロロホルム−メタノール＝１０：１）；Ｒｆ値＝０．
２３（展開溶媒：酢酸エチル−メタノール＝４０：１）以上の理化学的性質から、本発明のカズサマイシンＢの
化学構造は式〔Ｉ〕の如く決定される。

その名称は、１９−（３，６−ジヒドロ−３−メチル−
６−オキソ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−ヒドロキ
シ−９−ヒドロキシメチル−３，５，７，１１，１５，
１７−ヘキサメチル−８−オキソ−２，１０，１２，１
６，１８−ノナデカペンタン酸である。

上記の通り、本発明のカズサマイシンＢは、抗真菌作用
および抗腫瘍作用を有することから、真菌感染症および
腫瘍の治療剤として有用である。

前記の理化学的性質を有するカズサマイシンＢと比較的
類似している物質としては抗生物質８１−４８４および
抗生物質レプトマイシン類があげられる。しかしなが
ら、カズサマイシンＢの¹Hおよび¹³C−ＮＭＲスペクト
ルがこれらの物質のものとは明らかに異ることから、本
発明のカズサマイシンＢは新規な抗腫瘍性物質であると
認められる。

本発明のカズサマイシンＢまたはその塩を有効成分とし
て抗腫瘍剤または抗真菌剤として使用する場合は、相容
性の薬学的に許容し得る担体とともに薬学的組成物とす
ることができる。これらの組成物は、所望の投与方法に
対して適当な薬学的形態のいずれかになし得る。このよ
うな形態の例としては、錠剤、カプセル、ピル、粉剤お
よび顆粒のような経口投与に対する固体形態、溶液、懸
濁液、シロップおよびエリキサーのような局所または経
口投与に対する液状形態および滅菌溶液、懸濁液または
エマルジョンのような非経口投与に適した形態を包含す
る。

本発明の有効成分を用いて薬学的組成物を調整する場合
に使用される相容性の薬学的に許容し得る担体は、固体
または液体である。固体形態の製剤は、粉剤、錠剤、分
散性顆粒、カプセル、カシエーおよび坐剤を包含する。
固体の担体は希釈剤、風味剤、可溶化剤、結合剤または
錠剤崩壊剤として作用する１種またはそれ以上の物質で
あり得る。また、それはカプセル化物質であってもよ
い。粉剤においては、微細な活性化合物と混合される微
細な固体である。錠剤においては、活性化合物を必要な
結合性を有する担体と適当な割合で混合し、そして所望
の形状および大きさに圧搾する。粉剤および錠剤は、好
適な有効成分５ないし７０％を含有する。適当な固体担
体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、
タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、澱
粉、ゼラチン、トラガントゴム、メチルセルロース、ナ
トリウム、カルボキシメチルセルロース、低融点ワック
ス、ココアバターなどである。

坐剤の製造に対しては、脂肪酸グリセライドまたはココ
アバターの混合物のような低融点ワックスを始めに融解
し、そして活性成分を攪拌によってその中に均等に分散
させる。次に融解した均質な混合物を所定の大きさの型
に注入し、冷却し、固化させる。

非経口または経口投与に使用される液状形態の製剤とし
ては、例えば溶液、懸濁液およびエマルジョンがあげら
れる。より具体的にはその非経口投与に使用される液状
製剤としては、水また水−プロピレングリコール溶液を
あげることができ、一方経口使用に適した液状製剤とし
ては、所望に応じて適当な着色剤、風味剤、安定剤およ
び濃化剤を加えることのある、水溶液、並びに微細な活
性成分を粘稠な物質、例えば天然または合成ゴム、樹
脂、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセ
ルロースおよび他の公知の懸濁剤とともに水に分散した
水性懸濁液があげられる。これらの液状形態の製剤は、
適当な溶剤に分散または溶解させることにより容易に調
整される。

製剤の単位使用における有効成分の量は、約０．１〜５
００mg、好適には１〜１００mgである。なお。これらの
製剤は、必要ならば、他の相容性の治療剤、例えば他の
抗腫瘍剤、抗菌剤または抗真菌剤を含有することもでき
る。

治療に供する場合における使用量の範囲は、経口投与の
場合における１日あたり体重１kgに付１〜５００mgであ
り、一方経口投与の場合には１日あたり体重１kgに付
０．１〜１００mgである。しかしながら、この使用量は
患者の年齢、性別、体重、症状などにより適宜増減させ
ることができる。

〔発明の効果〕

次に本発明のカズサマイシンＢの生物学的性質について
述べる。

(1)抗菌スペクトル試験化合物のＭＩＣは寒天希釈法により決定された。即
ち、順次希釈された試験化合物の水溶液１．０ｍをシ
ャーレに注ぎ、次に試験菌が細菌である場合にはミュー
ラ・ヒントン寒天培地９．０ｍを、一方試験菌が真菌
である場合には、サブロー寒天培地９．０ｍを注いで
混ぜる。その混合寒天プレート上に、試験菌の混濁液
（約１０^６ＣＦＵ／ｍ）を塗沫する。３７℃で一夜培
養した後、試験菌の増殖を完全に阻害する試験化合物の
濃度を、最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）とする。その測定
結果を第２表に示す。なお、（＊）印を付した試験菌に
ついては、栄養寒天培地（日水製）を用いて、２８℃で
２日間培養して測定した。

上記の第２表から明らかな如く、カズサマイシンＢは、
一部の真菌類に対して抗菌活性を示すが、細菌に対して
は抗菌活性を示さない。

(2)Ｐ３８８マウス白血病に対する治療効果ＢＤＦ_１マウス（雌、６週令）の腹腔内Ｐ３８８細胞１
×１０^５個を移植後、１日、５日および９日目に１日１
回所定の投与量の試験化合物を腹腔内に注射し、移植後
の生存日数を指標に試験化合物の抗腫瘍効果を検討し
た。なお、延命率は下記の計算式により求め、その結果
を第３表に示す。

(3)急性毒性試験ＩＣＲマウス（雌、５週令）に試験化合物を種々の投与
量で腹腔内に注射後、１週間観察し、急性毒性について
検討した。Litchfield-Wilcoxon法により５０％致死濃
度（ＬＤ_５０）を求めた。その結果を第４表に示す。

以上第３表および第４表の結果から、Ｐ３８８白血病マ
ウスの治療効果において、本発明のカズサマイシンＢは
抗生物質８１−４８４よりもすぐれ、さらに、抗生物質
８１−４８４投与群においてマウスの毒性死が観察され
る投与量と同じ投与量の本発明のカズサマイシンＢの投
与群ではマウスの毒性死が観察されないことおよび急性
毒性においても本発明のカズサマイシンＢは抗生物質８
１−４８４よりも低いことから、本発明のカズサマイシ
ンＢは抗生物質８１−４８４よりも広い投与量の安全域
を有する。

実施例次に実施例を挙げて、本発明を具体的に説明するが、こ
れにより本発明を限定するものではない。

実施例１８１−４８４菌の培養５００ｍ容坂口フラスコにグルコース２．０％、ペプ
トン０．５％、肉エキス０．５％、乾燥酵母０．３％、
食塩０．５％、炭酸カルシウム０．３％を含む液体培地
（pH７．０）１００ｍを滅菌し、これにグルコース
０．４％、麦芽エキス１．０％、イーストエキス０．４
％、寒天１．５％を含む寒天斜面培地（pH７．０）上
で、２７℃で６日間培養したストレプトマイセス８１−
４８４の斜面培養から一白金耳を接種し、振幅１７cm毎
分１２０回往復するレシプロシェーカーにより２７℃で
７２時間振盪培養して種母を得た。次に２００容ジャ
ーファーメンターにグルコース３．０％、肉エキス０．
７５％、乾燥酵母０．３％、硫酸マグネシウム０．２％
を含む液体培地（pH７．０）１２０を仕込み、滅菌し
た後、前記方法で得られた種母２．５を無菌的に接種
し、通気量１３０／分、攪拌２３８rpm、２８℃で１
４６時間培養し、培養液約１１０を得た。

実施例２培養物からのカズサマイシンＢの抽出実施例１で得た培養液１１０に濾過補助剤４．５kgを
加え濾過し、菌体ケーキ約１２kgと濾液および洗液１２
０を得た。

この濾液および洗液を５容のアンバーライトＸＡＤ−
７カラムに通過させ、活性成分を吸着させた。このカラ
ムを水１０および２０％メタノール−水１０にて洗
浄した後、６０％メタノール−水で活性成分を溶出させ
た。得られた溶出液２５を約３まで減圧濃縮し、溶
出濃縮液を得た。

他方、該菌体ケーキをメタノール４５に懸濁し、約１
時間攪拌した後、濾過し、さらに得られたケーキをメタ
ノール５で洗浄した。得られた濾液および洗液５０
を３まで減圧濃縮し、菌体抽出濃縮液を得た。

前記の如くして得られた溶出濃縮液と菌体抽出濃縮液を
合わせて、３０％硫酸を加えてpH６．８に調節し、次い
で酢酸エチル１２を加え、充分に攪拌した。生成した
沈澱物を濾去した後、酢酸エチル層を分取し、無水硫酸
ナトリウムで脱水後減圧濃縮し、カズサマイシンＢを含
む茶褐色の油状物３１．３ｇを得た。

実施例３シリカゲルクロマトクラフィーによるカズサマイシンＢ
の精製実施例２で得られた油状物を予めヘキサンで充填された
シリカゲルＣ−２００（和光純薬製）カラム（３０６×
５０cm）に吸着せしめ、ヘキサン１．５とヘキサン−
アセトン（１：１）混液によるグラジェント溶出クロマ
トグラフィーを行った。得られた活性画分１．３を減
圧濃縮し、茶褐色の油状残渣４．４９ｇを得た。これを
予め、酢酸エチルで充填されたシリカゲル（和光純薬
製，Ｃ−２００））のカラム（５．０×５１cm）に吸着
させ、展開液として酢酸エチルを用い、クロマトグラフ
ィーを行い、得られた活性画分１．８を減圧濃縮し
て、純度５０％程度の淡黄色のカズサマイシンＢの粗製
固形物９４５mgを得た。

実施例４高速液体クロマトグラフィーによるカズサマイシンＢの
単離実施例３で得たカズサマイシンＢの粗製固形物をさらに
精製して、その純品を得るために、高速液体クロマトグ
ラフィー（日本分光TRIROTAR-V,UVIDEC-100-V）を行っ
た。その際、使用したカラムはステンレス製パックドカ
ラムＹＭＣ−Ａ−３４３（ＯＤＳ−５，内径２０mm×長
さ２５０mm，山村化学研究所製）を用いた。

実施例３で得たカズサマイシンＢの粗製品１２０mgをメ
タノール１ｍに溶解した試料を注入し、展開溶媒とし
て０．０５Ｍリン酸−メタノール混液（１：３，高速液
体クロマトグラフィー用溶媒）を用いて分画を行った。
２２０nmの紫外部吸収でカズサマイシンＢに該当するピ
ークを集め、これを減圧下メタノールを留去した。残渣
に酢酸エチルを加え、５％水酸化ナトリウム水溶液でpH
６．５ち調節し酢酸エチル層に転溶させた。酢酸エチル
層を精製水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した
後、濃縮乾固して淡黄色のカズサマイシンＢの純品４４
mgを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図はメタノール中で測定したカズサマイシンＢの紫
外線吸収スペクトルを、第２図は該物質のＫＢｒディス
ク法で測定した赤外線吸収スペクトルを、第３図に該物
質の重クロロホルム中３６０MHzで測定した^１Ｈ−ＮＭ
Ｒスペクトルを、第４図は該物質の重クロロホルム中９
０．５６MHzで測定した^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルをそ
れぞれ示す。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 17/06 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者岡部隆義千葉県市川市福栄３丁目19番15−205号 (72)発明者森島甫東京都目黒区中目黒１丁目１番32−301号

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の構造式で表されるカズサマイシンＢ
またはその塩。
【請求項２】ストレプトマイセス属に属するカズサマイ
シンＢ生産菌を栄養培地に培養し、培養物中にカズサマ
イシンＢを蓄積せしめ、該培養物中からカズサマイシン
Ｂを採取することを特徴とするカズサマイシンＢ、また
はその塩の製造法。
【請求項３】ストレプトマイセス属に属するカズサマイ
シンＢ生産菌がストレプトマイセス８１−４８４株（Ｆ
ＥＲＭ−ＢＰ５７１）である特許請求の範囲第２項記載
の製造法。
【請求項４】カズサマイシンＢまたはその塩を有効成分
として含有することを特徴とする抗腫瘍剤。
【請求項５】カズサマイシンＢまたはその塩を有効成分
として含有することを特徴とする抗真菌剤。