JPS625990A - 抗生物質およびその製造方法 - Google Patents
抗生物質およびその製造方法Info
- Publication number
- JPS625990A JPS625990A JP60135722A JP13572285A JPS625990A JP S625990 A JPS625990 A JP S625990A JP 60135722 A JP60135722 A JP 60135722A JP 13572285 A JP13572285 A JP 13572285A JP S625990 A JPS625990 A JP S625990A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibiotic
- formula
- methanol
- nocardia
- ethyl acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/58—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound through only acyclic carbon atoms to a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. bleomycin, phleomycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/365—Nocardia
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、抗生物質およびその製造方法に関する０
発明の背景
本発明者らは、多種類の土埃などの試料を採取して、そ
れから分離される微生物についてそれらの生産する抗生
物質を探索したところ、ある種の微生物が新規な抗生物
質を生産すること、該微生物はノカルディアに属するこ
と、該微生物を適宜の栄養培地および培養条件で培養す
ることにより該抗生物質を培養物中に蓄積させうること
を見い出し、本発明を完成した０発明の構成 〔式中、ＲはＨまたはＣＨ３を表わす〕で表わされる抗
生物質〔以下、Ｒが−Ｈで表わされる抗生物質をＰＣ−
７６６Ｂ％Ｒが一〇Ｈ３で表わされる抗生物質をｐｃ−
ｙｅａＴｉと呼ぶ〕、ノカルディア属に属する上記抗生
物質ＣＩ）生産菌を培地に培養し、培養物中にこの抗生
物質を蓄積せしめこれを採取し、必要に応じ適宜メチル
化するととを特徴とする上記式〔υで表わされる抗生物
質の製造法、並びにその生産菌を提供する０ 本発明の上記抗生物質用は、ノカルディア属に属し抗生
物質〔ηを生産する能力を有する微生物を好気的に培養
し、通常菌体および培養液中に抗生物質〔ηを蓄積させ
、これを採取することによって製造される０ツカμダイ
ア属に属し抗生物質美を生産する能力を有する微生物で
あれば、いずれの微生物も用・いることができる０該微
生物の例としては、本発明者らが滋賀県内の一土壌から
分離した放線菌５Ｃ−４７１０株が挙げられる。５Ｃ−
４７１０株の菌学的性質は次のとおシである０ １）形態学的性質 基生菌糸は寒天培地中および液体培地中ともよく伸長し
分岐するが、時には桿菌状または分岐した短い菌糸状に
分断することがある０また、各種分類用培地上でよく生
育し、基生菌糸上に白色ないし灰白色の気菌糸を着生す
る０気菌糸はゆるやかな波状または螺旋状を示し、不規
則な分岐が見られる０成熟した培養試料を走査電子顕微
鏡で観察したととる、気菌糸上に８〜１０個の直鎖状の
胞子の連鎖が観察され、胞子１個の大きさは０．８ Ｘ
Ｏ，８μＮＯ，４Ｘ１．Ｏμの長楕円球状であシ、そ
の表面は平滑であった０胞子のり、菌核等の特異な構造
体は認められなかった０ ２）培養性状 培地および試験方法はシャーリングおよびゴドリープの
方法（Ｉｎｔ＠ｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌｏ
ｆ ８ｙｓｔ＠ｍａｔｌｃ Ｂａｅｔ＊ｒ１ｏ１ｏｇｙ
、１６巻９８１８頁−１９６６年）に従った。２７℃で
８週間各培地で培養した結果を第１表に示した０色調は
標準色としてカラートーンマニュア／Ｌ／（財団法人日
本色彩研究所編集）を用いて決定した。
れから分離される微生物についてそれらの生産する抗生
物質を探索したところ、ある種の微生物が新規な抗生物
質を生産すること、該微生物はノカルディアに属するこ
と、該微生物を適宜の栄養培地および培養条件で培養す
ることにより該抗生物質を培養物中に蓄積させうること
を見い出し、本発明を完成した０発明の構成 〔式中、ＲはＨまたはＣＨ３を表わす〕で表わされる抗
生物質〔以下、Ｒが−Ｈで表わされる抗生物質をＰＣ−
７６６Ｂ％Ｒが一〇Ｈ３で表わされる抗生物質をｐｃ−
ｙｅａＴｉと呼ぶ〕、ノカルディア属に属する上記抗生
物質ＣＩ）生産菌を培地に培養し、培養物中にこの抗生
物質を蓄積せしめこれを採取し、必要に応じ適宜メチル
化するととを特徴とする上記式〔υで表わされる抗生物
質の製造法、並びにその生産菌を提供する０ 本発明の上記抗生物質用は、ノカルディア属に属し抗生
物質〔ηを生産する能力を有する微生物を好気的に培養
し、通常菌体および培養液中に抗生物質〔ηを蓄積させ
、これを採取することによって製造される０ツカμダイ
ア属に属し抗生物質美を生産する能力を有する微生物で
あれば、いずれの微生物も用・いることができる０該微
生物の例としては、本発明者らが滋賀県内の一土壌から
分離した放線菌５Ｃ−４７１０株が挙げられる。５Ｃ−
４７１０株の菌学的性質は次のとおシである０ １）形態学的性質 基生菌糸は寒天培地中および液体培地中ともよく伸長し
分岐するが、時には桿菌状または分岐した短い菌糸状に
分断することがある０また、各種分類用培地上でよく生
育し、基生菌糸上に白色ないし灰白色の気菌糸を着生す
る０気菌糸はゆるやかな波状または螺旋状を示し、不規
則な分岐が見られる０成熟した培養試料を走査電子顕微
鏡で観察したととる、気菌糸上に８〜１０個の直鎖状の
胞子の連鎖が観察され、胞子１個の大きさは０．８ Ｘ
Ｏ，８μＮＯ，４Ｘ１．Ｏμの長楕円球状であシ、そ
の表面は平滑であった０胞子のり、菌核等の特異な構造
体は認められなかった０ ２）培養性状 培地および試験方法はシャーリングおよびゴドリープの
方法（Ｉｎｔ＠ｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌｏ
ｆ ８ｙｓｔ＠ｍａｔｌｃ Ｂａｅｔ＊ｒ１ｏ１ｏｇｙ
、１６巻９８１８頁−１９６６年）に従った。２７℃で
８週間各培地で培養した結果を第１表に示した０色調は
標準色としてカラートーンマニュア／Ｌ／（財団法人日
本色彩研究所編集）を用いて決定した。
８）生理的諸性質
５Ｃ−４７１０株の生理的諸性質は第２表に示すとおり
である０ ４）炭素源の利用性 プリドハム・ゴドリープ寒天培地での５Ｃ−４７１０株
の各種伏累源の利用性は第８表に示すとおシである０ ５）菌体組成 菌体細胞中のジアミノピメリン酸はメソ体であシ、糖と
してはアラビノース、ガラクト−スが検出された０また
、リン脂質組成をμシエパリエらの方法（Ｂｉｏｃｈ台
ｍ１ｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍａｔｌｅｓａｎｄ Ｅｃｏｌ
ｏｇｙ、 ５巻、２４９頁、１９７７年）に従って分析
したところ、ホスファチジμイノントー！、ホスファチ
ジμイノシトールジマンノシド、ジホスファチジルグリ
セロー〃、およびホスフ７チジμエタノールアミンを検
出したが、ホスファチジμコリンは検出されなかった。
である０ ４）炭素源の利用性 プリドハム・ゴドリープ寒天培地での５Ｃ−４７１０株
の各種伏累源の利用性は第８表に示すとおシである０ ５）菌体組成 菌体細胞中のジアミノピメリン酸はメソ体であシ、糖と
してはアラビノース、ガラクト−スが検出された０また
、リン脂質組成をμシエパリエらの方法（Ｂｉｏｃｈ台
ｍ１ｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍａｔｌｅｓａｎｄ Ｅｃｏｌ
ｏｇｙ、 ５巻、２４９頁、１９７７年）に従って分析
したところ、ホスファチジμイノントー！、ホスファチ
ジμイノシトールジマンノシド、ジホスファチジルグリ
セロー〃、およびホスフ７チジμエタノールアミンを検
出したが、ホスファチジμコリンは検出されなかった。
また、ミコーμ酸をルシェバリエらの方法（Ｃａｎａｄ
ｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌｏ
ｇ）’＊ １９巻、９６５頁。
ｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌｏ
ｇ）’＊ １９巻、９６５頁。
１９７８年）およびミニキンらの方法（Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｓ １８８巻、
２２１頁、 １９８０年）に従って分析したところ、い
わゆるノカルドミコール酸メチμエステルのスポットを
検出シタ。
ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｓ １８８巻、
２２１頁、 １９８０年）に従って分析したところ、い
わゆるノカルドミコール酸メチμエステルのスポットを
検出シタ。
以上、本菌の菌学的性質を要約すると次のとおルである
〇 細胞壁タイプは■型であｐリン脂質タイプはＰＩＩ型で
ある＠培養土の諸性質としては、基生菌糸は褐色ないし
淡黄色を呈し、気菌糸は白色ないし灰白色を呈する０形
態的には、気菌糸上に直鎮状の胞子鎖を形成し、その胞
子の表面は平溺である。
〇 細胞壁タイプは■型であｐリン脂質タイプはＰＩＩ型で
ある＠培養土の諸性質としては、基生菌糸は褐色ないし
淡黄色を呈し、気菌糸は白色ないし灰白色を呈する０形
態的には、気菌糸上に直鎮状の胞子鎖を形成し、その胞
子の表面は平溺である。
これらの結果から、本発明者らは５Ｃ−４７１０株をツ
カμディア属に属する菌株であると同定シ、ノカルディ
ア拳ニス［有］ビー（Ｎｏｃａｒｄｉａｓｐ、 ） ５
Ｃ−４７１０と命名し、工業技術院微生物工業技術研究
所に寄託した（微工研菌寄第８２３３号）０ 第２表 生理的諸性質 本発明の方法において、抗生物質〔ｌを生産する微生物
を培養する培地としては、ツカμディア属微生物の培養
に常用される炭素源、窒素源、無機物等を含む各種の培
地を使用することができる０培地の炭素源としては、ブ
ドウ糖、麦芽糖、デンプン、デキストリン、グリセリン
、糖蜜などである。窒素源としては、たとえば大豆粉、
コーンスディープリカー、綿実粉、ベグトン、肉エキス
、乾燥酵母、カゼイン加水分解物、アンモニウム塩、硝
酸塩などである。無機物の例は、リン酸塩、あるいはマ
グネシウム、カリウム、カルシウム、ナトリウム、鉄、
マンガンなどの塩類である。
カμディア属に属する菌株であると同定シ、ノカルディ
ア拳ニス［有］ビー（Ｎｏｃａｒｄｉａｓｐ、 ） ５
Ｃ−４７１０と命名し、工業技術院微生物工業技術研究
所に寄託した（微工研菌寄第８２３３号）０ 第２表 生理的諸性質 本発明の方法において、抗生物質〔ｌを生産する微生物
を培養する培地としては、ツカμディア属微生物の培養
に常用される炭素源、窒素源、無機物等を含む各種の培
地を使用することができる０培地の炭素源としては、ブ
ドウ糖、麦芽糖、デンプン、デキストリン、グリセリン
、糖蜜などである。窒素源としては、たとえば大豆粉、
コーンスディープリカー、綿実粉、ベグトン、肉エキス
、乾燥酵母、カゼイン加水分解物、アンモニウム塩、硝
酸塩などである。無機物の例は、リン酸塩、あるいはマ
グネシウム、カリウム、カルシウム、ナトリウム、鉄、
マンガンなどの塩類である。
培養は通常好気的に行なわれ、通気攪拌培養が好適であ
る。培養温度は微生物が発育し、抗生物質ＣＩ）を生産
する範囲で適宜変更できるが、好ましいのは２５〜８０
℃であるｏ ｐＨは７〜８が好ましい。培養時間は種々
の条件によって異なるが、通常８０〜１２０時間程度で
培養物中に蓄積される抗生物質〔υが最高力価に達する
〇培養終了後の培養物からの抗生物質ＣＣの採取は、微
生物の培養物よシ抗生物質を分離精製する公知の手段を
単独または組合わせて行なうことができる。たとえば不
純物との溶解度の差を利用する手段、活性炭、マクロボ
ーラス非イオン系樹脂、シリカゲル、アルミナ等各皿の
吸差剤の吸着親和力の差を利用する手段、イオン交換樹
脂による不純物除去手段のいずれもがそれぞれ単独で、
また組合わせて、あるいは反覆して利用される０夾用的
な分離精製法の一例を示すと次のとおシである。
る。培養温度は微生物が発育し、抗生物質ＣＩ）を生産
する範囲で適宜変更できるが、好ましいのは２５〜８０
℃であるｏ ｐＨは７〜８が好ましい。培養時間は種々
の条件によって異なるが、通常８０〜１２０時間程度で
培養物中に蓄積される抗生物質〔υが最高力価に達する
〇培養終了後の培養物からの抗生物質ＣＣの採取は、微
生物の培養物よシ抗生物質を分離精製する公知の手段を
単独または組合わせて行なうことができる。たとえば不
純物との溶解度の差を利用する手段、活性炭、マクロボ
ーラス非イオン系樹脂、シリカゲル、アルミナ等各皿の
吸差剤の吸着親和力の差を利用する手段、イオン交換樹
脂による不純物除去手段のいずれもがそれぞれ単独で、
また組合わせて、あるいは反覆して利用される０夾用的
な分離精製法の一例を示すと次のとおシである。
培養物を菌体とろ液に分別する。菌体はアセトンまたは
メタノールで抽出し、その抽出液を濃縮したのちそれを
さらに酢酸エチル、ｎ−ブタノ−μ等の有機溶媒で抽出
する。一方Ｆ液は、水と分離し抗生物質 〔工〕 を
溶解せしめる有機溶媒（酢酸エチル、ｎ−ブタノール、
メチルイソブチルケトン等）で抽出する。その後脂溶性
物質の精製において通常用いられる公知の方法によシ抗
生物質〔ηを回収する◇たとえば、酢酸エチル抽出液を
水洗し、減圧下で濃縮後、ｎ−ヘキサン等を加えて有効
成分を析出させ、それを遠心分離あるいは沢過して抗生
物質〔υの粗物質が得られる０得られた粗物質は、分子
ふるい的効果を持つセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ
） ＬＨ−２０（スウェーデン ７１ｐマシア社製）等
を担体トンだカラムで、メタノール等のアルコール類あ
るいはりｐロホルム等のハロゲン化度化水素類あるいは
両者の混合溶媒を屓開液として用いるととＫよシ精製で
きる◎さらに精製するためには種々の吸着クロマトグラ
フィーが利用できる０吸着剤としては、抗生物質の吸着
分離に一般に使用される担体（たとえば吸着性樹脂、シ
リカゲル、アルミナ等）が使用できる０吸着剤としてた
とえばシリカゲルを用いるときは、非極性溶媒（たとえ
ばクロロホルムなどのハロゲン化炭化水累）とメタノー
ルのような極性溶媒との混合比を変化させることによシ
クロマドグツフィー分離が行なわれる◎抗生物質〔η中
のＰＣ−７６６Ｂおよびｄを分離するためには、さらに
上記の吸着剤を使用したクロマトグラフィーが繰シ返し
て行なわれる。すなわち、吸着剤としてたとえばシリカ
ゲルを使用するときは、ベンゼン−酢酸エチル系の溶媒
で展開するとＰｃ−７６６Ｔｉ、Ｂの順に分離して溶出
されるので、これをＴＬＣあるいはＨＰＬＣによシ純度
を検定後、減圧下で濃縮乾固してそれぞれの粉末結晶を
得ることができる０ ＰＣ−７６６Ｂおよびゴはともに発酵によって生産され
るが、ＰＣ−７ｅ ｅ ＴｉはまたＰＣ−７６６１を適
当な条件下でメチμ化することによっても得られる０こ
のメチ〃化反応はメタノール溶液中、室温（２０〜２５
℃）でゆるやかに進行する０式ｍで示した抗生物質〔幻
の構造は、同定分析、特に分光学的検討に基づいて決定
した。ｐｃ−７６６Ｂおよびゴを理化学的性質によって
いくつか特徴づけると次のとおシである。
メタノールで抽出し、その抽出液を濃縮したのちそれを
さらに酢酸エチル、ｎ−ブタノ−μ等の有機溶媒で抽出
する。一方Ｆ液は、水と分離し抗生物質 〔工〕 を
溶解せしめる有機溶媒（酢酸エチル、ｎ−ブタノール、
メチルイソブチルケトン等）で抽出する。その後脂溶性
物質の精製において通常用いられる公知の方法によシ抗
生物質〔ηを回収する◇たとえば、酢酸エチル抽出液を
水洗し、減圧下で濃縮後、ｎ−ヘキサン等を加えて有効
成分を析出させ、それを遠心分離あるいは沢過して抗生
物質〔υの粗物質が得られる０得られた粗物質は、分子
ふるい的効果を持つセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ
） ＬＨ−２０（スウェーデン ７１ｐマシア社製）等
を担体トンだカラムで、メタノール等のアルコール類あ
るいはりｐロホルム等のハロゲン化度化水素類あるいは
両者の混合溶媒を屓開液として用いるととＫよシ精製で
きる◎さらに精製するためには種々の吸着クロマトグラ
フィーが利用できる０吸着剤としては、抗生物質の吸着
分離に一般に使用される担体（たとえば吸着性樹脂、シ
リカゲル、アルミナ等）が使用できる０吸着剤としてた
とえばシリカゲルを用いるときは、非極性溶媒（たとえ
ばクロロホルムなどのハロゲン化炭化水累）とメタノー
ルのような極性溶媒との混合比を変化させることによシ
クロマドグツフィー分離が行なわれる◎抗生物質〔η中
のＰＣ−７６６Ｂおよびｄを分離するためには、さらに
上記の吸着剤を使用したクロマトグラフィーが繰シ返し
て行なわれる。すなわち、吸着剤としてたとえばシリカ
ゲルを使用するときは、ベンゼン−酢酸エチル系の溶媒
で展開するとＰｃ−７６６Ｔｉ、Ｂの順に分離して溶出
されるので、これをＴＬＣあるいはＨＰＬＣによシ純度
を検定後、減圧下で濃縮乾固してそれぞれの粉末結晶を
得ることができる０ ＰＣ−７６６Ｂおよびゴはともに発酵によって生産され
るが、ＰＣ−７ｅ ｅ ＴｉはまたＰＣ−７６６１を適
当な条件下でメチμ化することによっても得られる０こ
のメチ〃化反応はメタノール溶液中、室温（２０〜２５
℃）でゆるやかに進行する０式ｍで示した抗生物質〔幻
の構造は、同定分析、特に分光学的検討に基づいて決定
した。ｐｃ−７６６Ｂおよびゴを理化学的性質によって
いくつか特徴づけると次のとおシである。
１、 ＰＣ−７６６Ｂ
性状：無色の非定型粉末
元素分析値：Ｃ＋６１．２９％＊ Ｈ＋８．１１４９−
７−１ニア７Ｌ６ 質量分析： Ｆ Ｄ −Ｆ Ａ Ｂ−ＭＳ Ｉｍ／ｚ
７９９ （Ｍ”＋Ｎａ）、ｍ／ｚ ８１５ （Ｍ”＋Ｋ
） 分子式： Ｃ４５Ｈｕ ０１１ 融 点：１８２〜１８４℃ 比旋光度： ＠］、５０ａ＝＋ １７．７°（Ｃ−０，
６１，メタノール）溶解性： メタノール、クロロホル
ム、酢酸エチルニ可溶ｎ−ヘキサン、水に不溶 呈色反応：■、吸収、アニスアルデヒド反応陽性ニンヒ
ドリン反応陰性 ＴＬＣ（シリカゲＡ／）：クロロホルムーメタノール（
１５：１容量比）Ｒｆセ０．１４ ベンゼン−酢酸エチＡ／ （１： ４容足比）Ｒｆ−０
，２８ ＵＶ吸収スペクトル（メタノール中）：第１図ＩＲ吸収
スペクト１ｖ（ＫＢｒ錠剤法）；第２図’Ｈ−ＮＭＲス
ペクト／Ｉ／（２００ＭＨｚ、ＣＤＣ１３ｆ、ＴＭ８基
準＝ｔｔｒＪ８図’”Ｃ−ＮＭＲ７”／）／’（５０１
３ＭＨｚ、ＣＤＣ１３ｆ、７Ｍ８基準：第４図２、
ＰＣ−７６６Ｂ 性 状：無色の非定型粉末 分子量ニア９０ 分子式： Ｃ４４■■７゜〜 Ｓ解性：メタノール、クロロホルム、酢酸エチルに可ｆ
ｆ１ｒ Ｉ ｎ−ヘキサン、水に不溶呈色反応二Ｉ、吸
収、アニスアルデヒド反応陽性ニンヒドリン反応陰性 ＴＬＣ（シリカゲル）：クロロホル広−メタノー、ル（
１５： １ 容量比） Ｒｆ社０．１８ ベンゼン−酢酸エチ／Ｉ／（１：４容址比）Ｒｆ−０，
８５ Ｈ−？ＧＩＲスペクト／Ｌ／（９０ＭＨｚ％ＣＤＣＪ、
φ、ＴＭＳ基準）：第５図抗生物質〔ｌは各種の微生物
に対して抗菌力を示す。寒天希釈法で測定したＰＣ−７
６６Ｂの各ｔｉｎｓ生物に対する最少阻止濃度を第４表
に示す。また、ｐｃ−７６６ｍも同様の生物活性である
。
７−１ニア７Ｌ６ 質量分析： Ｆ Ｄ −Ｆ Ａ Ｂ−ＭＳ Ｉｍ／ｚ
７９９ （Ｍ”＋Ｎａ）、ｍ／ｚ ８１５ （Ｍ”＋Ｋ
） 分子式： Ｃ４５Ｈｕ ０１１ 融 点：１８２〜１８４℃ 比旋光度： ＠］、５０ａ＝＋ １７．７°（Ｃ−０，
６１，メタノール）溶解性： メタノール、クロロホル
ム、酢酸エチルニ可溶ｎ−ヘキサン、水に不溶 呈色反応：■、吸収、アニスアルデヒド反応陽性ニンヒ
ドリン反応陰性 ＴＬＣ（シリカゲＡ／）：クロロホルムーメタノール（
１５：１容量比）Ｒｆセ０．１４ ベンゼン−酢酸エチＡ／ （１： ４容足比）Ｒｆ−０
，２８ ＵＶ吸収スペクトル（メタノール中）：第１図ＩＲ吸収
スペクト１ｖ（ＫＢｒ錠剤法）；第２図’Ｈ−ＮＭＲス
ペクト／Ｉ／（２００ＭＨｚ、ＣＤＣ１３ｆ、ＴＭ８基
準＝ｔｔｒＪ８図’”Ｃ−ＮＭＲ７”／）／’（５０１
３ＭＨｚ、ＣＤＣ１３ｆ、７Ｍ８基準：第４図２、
ＰＣ−７６６Ｂ 性 状：無色の非定型粉末 分子量ニア９０ 分子式： Ｃ４４■■７゜〜 Ｓ解性：メタノール、クロロホルム、酢酸エチルに可ｆ
ｆ１ｒ Ｉ ｎ−ヘキサン、水に不溶呈色反応二Ｉ、吸
収、アニスアルデヒド反応陽性ニンヒドリン反応陰性 ＴＬＣ（シリカゲル）：クロロホル広−メタノー、ル（
１５： １ 容量比） Ｒｆ社０．１８ ベンゼン−酢酸エチ／Ｉ／（１：４容址比）Ｒｆ−０，
８５ Ｈ−？ＧＩＲスペクト／Ｌ／（９０ＭＨｚ％ＣＤＣＪ、
φ、ＴＭＳ基準）：第５図抗生物質〔ｌは各種の微生物
に対して抗菌力を示す。寒天希釈法で測定したＰＣ−７
６６Ｂの各ｔｉｎｓ生物に対する最少阻止濃度を第４表
に示す。また、ｐｃ−７６６ｍも同様の生物活性である
。
次に本発明の実施例を示すが、この実施例は単なる一例
を示すものであって本発明を限定するものではない。
を示すものであって本発明を限定するものではない。
実施例１
ノカルディア・ニス◆ピー（Ｎｏａａｒｄｌａ ｓｐ、
）ＳＣ−４７１０（微工υｔｍ＊第８２８８号−）の
斜面培養から１白金耳を種培養培地に接種し、２７Ｃで
５日間振とう＠養した後２％の割合で前項ωｙ培地に接
種した０とれを２７℃で６日１１１振とぅ培養した後９
゜１容ジャーファーメンタ−中の５０ｊの本培養培地に
２％の割合で接種し、２７℃で４日間、通ＳＣ量２５１
／’ｙ）、攪拌速度２０Ｏｒ、ｐ、ｍの条件で通気攪拌
培養し九〇培地組成はいずれの培地もグμコース２．５
ｍ、大豆粉１．５％、酵母エキス０２％、ＣａＣＯ２０
，４９６であシ、使用時にｐＨを７．２に調整した後１
２１℃で２０分間滅菌して用いた〇実施例２ 実施例１で得られた培養液５０１を遠心にょシ菌体と培
養上清に分離した０得られた湿菌体にア七トン５ｊを加
えて借拌抽出し、これをｐ別してアセトン抽出液とした
０との操作を２回縁シ返して得たアセトン抽出液計１５
１を減圧下で１００ｍｊまで？＃縮し、これに水１ｊお
よび酢酸エチル１ノを加えて振シ混ぜ活性画分を酢酸エ
チル抽出した〇一方培養上消はｐＨを７．０に調整した
後等容の酢酸エチルを加えて攪拌抽出し、この酢酸エチ
／＋１／層を水８０１で水洗して酢酸エチル抽出液とし
た。とれら両酢酸エチル抽出液を合して減圧下で濃縮し
た後、ｎ−ヘキサンを加えて沈峨を析出させた◇得られ
た粗物質を約１００ｍＪのクロロホルム−メタノ−／Ｉ
／（１：１ｔ４量比）に溶かし、あらかじめクロロホル
ム−メタノ−／ｌ／（１： １容量比）で平衡化したセ
フアデックス（８ｅｐｈｓｄｅｘ） ＬＨ−２０（）１
／Ｉ／マシア社製）カラム（５００ｍＪ）に上層し、こ
れをクロロホルム−メタノール（１：１容量比）で溶出
して５０ｍＪずつ分画した０活性画分を減圧下で濃縮乾
固し、約５０ｍｊのクロロホルムに溶解した後、あらか
じめクロロホルムで充填したＶリカゲ／Ｌ／（西独メル
ク社製キーゼルグ／ｌ’６０．６８〜２００μ）カラム
（５００ｍｊ）の上端に添加した。カラムを最初クロロ
ホルム、次いでクロロホルム−メタノール（９７：８容
量比）で溶出して５０ｍＪずつ分画した０活性画分を減
圧下で濃縮乾固し抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物６４
０岬を得た。得られた抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物
は、主成分としてＰＣ−７６６Ｂと９ｉｉ成分としてｐ
ｃ−７ｅｅＴｉを含んでいた０ 実施例８ 実施例２で得られた抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物６
４０ｍ’Ｐを大量分取用ＨＰＬＣによシ精製した０大量
分取用ＨＰＬＣ装置はシステム５００（米つォーターズ
社製）を使用した０ 運転条件は次のとおシである。
）ＳＣ−４７１０（微工υｔｍ＊第８２８８号−）の
斜面培養から１白金耳を種培養培地に接種し、２７Ｃで
５日間振とう＠養した後２％の割合で前項ωｙ培地に接
種した０とれを２７℃で６日１１１振とぅ培養した後９
゜１容ジャーファーメンタ−中の５０ｊの本培養培地に
２％の割合で接種し、２７℃で４日間、通ＳＣ量２５１
／’ｙ）、攪拌速度２０Ｏｒ、ｐ、ｍの条件で通気攪拌
培養し九〇培地組成はいずれの培地もグμコース２．５
ｍ、大豆粉１．５％、酵母エキス０２％、ＣａＣＯ２０
，４９６であシ、使用時にｐＨを７．２に調整した後１
２１℃で２０分間滅菌して用いた〇実施例２ 実施例１で得られた培養液５０１を遠心にょシ菌体と培
養上清に分離した０得られた湿菌体にア七トン５ｊを加
えて借拌抽出し、これをｐ別してアセトン抽出液とした
０との操作を２回縁シ返して得たアセトン抽出液計１５
１を減圧下で１００ｍｊまで？＃縮し、これに水１ｊお
よび酢酸エチル１ノを加えて振シ混ぜ活性画分を酢酸エ
チル抽出した〇一方培養上消はｐＨを７．０に調整した
後等容の酢酸エチルを加えて攪拌抽出し、この酢酸エチ
／＋１／層を水８０１で水洗して酢酸エチル抽出液とし
た。とれら両酢酸エチル抽出液を合して減圧下で濃縮し
た後、ｎ−ヘキサンを加えて沈峨を析出させた◇得られ
た粗物質を約１００ｍＪのクロロホルム−メタノ−／Ｉ
／（１：１ｔ４量比）に溶かし、あらかじめクロロホル
ム−メタノ−／ｌ／（１： １容量比）で平衡化したセ
フアデックス（８ｅｐｈｓｄｅｘ） ＬＨ−２０（）１
／Ｉ／マシア社製）カラム（５００ｍＪ）に上層し、こ
れをクロロホルム−メタノール（１：１容量比）で溶出
して５０ｍＪずつ分画した０活性画分を減圧下で濃縮乾
固し、約５０ｍｊのクロロホルムに溶解した後、あらか
じめクロロホルムで充填したＶリカゲ／Ｌ／（西独メル
ク社製キーゼルグ／ｌ’６０．６８〜２００μ）カラム
（５００ｍｊ）の上端に添加した。カラムを最初クロロ
ホルム、次いでクロロホルム−メタノール（９７：８容
量比）で溶出して５０ｍＪずつ分画した０活性画分を減
圧下で濃縮乾固し抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物６４
０岬を得た。得られた抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物
は、主成分としてＰＣ−７６６Ｂと９ｉｉ成分としてｐ
ｃ−７ｅｅＴｉを含んでいた０ 実施例８ 実施例２で得られた抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物６
４０ｍ’Ｐを大量分取用ＨＰＬＣによシ精製した０大量
分取用ＨＰＬＣ装置はシステム５００（米つォーターズ
社製）を使用した０ 運転条件は次のとおシである。
カラム；プレツブパック−５００７シリカゲルカラム（
ウォーター：ＱＪＭ）２水 溶出ｉ ： クロロホルム−メタノ−／Ｉ／（９８：２
ｇ１ｔ比）流速： １００ ｍｌ滲 検出： ２５４ ｎｍにおけるＵＶ吸収サンプル注入法
：抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物６４０ｗ９をクロロ
ホルム ８０ｍＪに溶解して注入 □分画容Ｊ！ｔ：５０ｍＪ 溶出画分２７〜２８を減圧下で濃縮乾固してＰＣ−７６
６Ｂおよびｄの混合物２ａｇを得た０また溶出両分２９
〜４７を減圧下で濃縮乾固してＰＣ−７６６Ｂ ５８０
５ｗを得た０実施例４ 実施ＦＪ ８で得られたＰＣ−７６６Ｂの５０１＋１！
を１００ｍＪのメタノールに溶解し、室温（２０〜２５
℃）に放置してメチル化した０１週間後これを減圧下で
濃縮し、・プレバラティブＴＬＣ（西独メルク社製キー
ゼルゲ／Ｉ／ ６０ Ｆ、、、 Ｉ ２ｍ、 ２０Ｘ２
０ｍ）に画線吸着させ、ベンゼン−酢酸エチ、ル（１：
４容量比）で展開した０これを紫外線照射下観察し、ｐ
ｃ−７６６コおよびＢのバンドをそれぞれかきとシ、メ
タノールでそれぞれ抽出し、減圧下で濃縮乾固してｐｃ
−７ｅｅｎ ｓηおよび未反応ＰＣ−７６６Ｂ８４１’
ｖｆ：得た０得られたこれらの標品の諸性質は前述した
理化学的性質および生物学的性質と一致した０
ウォーター：ＱＪＭ）２水 溶出ｉ ： クロロホルム−メタノ−／Ｉ／（９８：２
ｇ１ｔ比）流速： １００ ｍｌ滲 検出： ２５４ ｎｍにおけるＵＶ吸収サンプル注入法
：抗生物質ＰＣ−７６６の粗精製物６４０ｗ９をクロロ
ホルム ８０ｍＪに溶解して注入 □分画容Ｊ！ｔ：５０ｍＪ 溶出画分２７〜２８を減圧下で濃縮乾固してＰＣ−７６
６Ｂおよびｄの混合物２ａｇを得た０また溶出両分２９
〜４７を減圧下で濃縮乾固してＰＣ−７６６Ｂ ５８０
５ｗを得た０実施例４ 実施ＦＪ ８で得られたＰＣ−７６６Ｂの５０１＋１！
を１００ｍＪのメタノールに溶解し、室温（２０〜２５
℃）に放置してメチル化した０１週間後これを減圧下で
濃縮し、・プレバラティブＴＬＣ（西独メルク社製キー
ゼルゲ／Ｉ／ ６０ Ｆ、、、 Ｉ ２ｍ、 ２０Ｘ２
０ｍ）に画線吸着させ、ベンゼン−酢酸エチ、ル（１：
４容量比）で展開した０これを紫外線照射下観察し、ｐ
ｃ−７６６コおよびＢのバンドをそれぞれかきとシ、メ
タノールでそれぞれ抽出し、減圧下で濃縮乾固してｐｃ
−７ｅｅｎ ｓηおよび未反応ＰＣ−７６６Ｂ８４１’
ｖｆ：得た０得られたこれらの標品の諸性質は前述した
理化学的性質および生物学的性質と一致した０
第１図はＰＣ−７６６ＢのＵＶ吸収スベク）／しくメタ
ノール中）を表す図である〇 第２図はＰＣ−７６６ＢのＩＲ吸収スペクトル（ＫＢ
ｒ錠剤法）を表す図である〇 第８図はＰＣ−７６６Ｂの’Ｈ−ＮＭＲヌベクトル（２
００ＭＨｚ。 ＣＤＣｌ、ｄ％ＴＭＳ基準）を表す図である。 第４図はＰＣ−７６６Ｂの１３０−ＮＭＲスペクト／’
（５０，８Ｍ）Ｉｔ。 ＣＤＣＪｓφ、ＴＭＳ基準）を表す図である。 第５図はｐｃ−７ｅ６ｇの”Ｈ−ＮＭＲスペクト／’（
９０ＭＨｚｓＣＤＣＩｓ１１、ＴＭＳ基準を表す図であ
る。 （２２完） Ｑ□□□□・・・ヲヨヨ１−′°°・・・・°・す１了
７−二］■：二−一−−に
ノール中）を表す図である〇 第２図はＰＣ−７６６ＢのＩＲ吸収スペクトル（ＫＢ
ｒ錠剤法）を表す図である〇 第８図はＰＣ−７６６Ｂの’Ｈ−ＮＭＲヌベクトル（２
００ＭＨｚ。 ＣＤＣｌ、ｄ％ＴＭＳ基準）を表す図である。 第４図はＰＣ−７６６Ｂの１３０−ＮＭＲスペクト／’
（５０，８Ｍ）Ｉｔ。 ＣＤＣＪｓφ、ＴＭＳ基準）を表す図である。 第５図はｐｃ−７ｅ６ｇの”Ｈ−ＮＭＲスペクト／’（
９０ＭＨｚｓＣＤＣＩｓ１１、ＴＭＳ基準を表す図であ
る。 （２２完） Ｑ□□□□・・・ヲヨヨ１−′°°・・・・°・す１了
７−二］■：二−一−−に
Claims (7)
- （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中、Ｒは−Ｈまたは−ＣＨ＿３を表わす。〕で表わ
される抗生物質。 - （２）Ｒが−Ｈである特許請求の範囲第１項記載の抗生
物質。 - （３）Ｒが−ＣＨ＿３である特許請求の範囲第１項記載
の抗生物質。 - （４）ノカルディア属に属する ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中、Ｒは−Ｈまたは−ＣＨ＿３を表わす。〕で表わ
される抗生物質生産菌を培養し、培地にこの抗生物質を
生成蓄積せしめこれを採取することを特徴とする上記式
〔 I 〕の抗生物質の製造方法。 - （５）抗生物質生産菌がノカルディア・エス・ピーＳＣ
−４７１０（微工研菌寄第８２３３号）である。特許請
求の範囲第４項記載の製造方法。 - （６）▲数式、化学式、表等があります▼ をメチル化することを特徴とする ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる抗生物質の製造方法。
- （７）ノカルディア・エヌ・ピーＳＣ４７１０（微工研
菌寄第８２３３号）。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60135722A JPS625990A (ja) | 1985-06-20 | 1985-06-20 | 抗生物質およびその製造方法 |
| AU66781/86A AU587884B2 (en) | 1985-06-20 | 1986-12-19 | Antibiotics, and their production |
| US06/943,906 US4764602A (en) | 1985-06-20 | 1986-12-19 | Antibiotics, and their production |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60135722A JPS625990A (ja) | 1985-06-20 | 1985-06-20 | 抗生物質およびその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS625990A true JPS625990A (ja) | 1987-01-12 |
Family
ID=15158349
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60135722A Pending JPS625990A (ja) | 1985-06-20 | 1985-06-20 | 抗生物質およびその製造方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4764602A (ja) |
| JP (1) | JPS625990A (ja) |
| AU (1) | AU587884B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| OA09249A (fr) * | 1988-12-19 | 1992-06-30 | Lilly Co Eli | Composés de macrolides. |
| WO1991006552A1 (en) * | 1989-10-30 | 1991-05-16 | Eli Lilly And Company | A83543 recovery process |
| US5591606A (en) * | 1992-11-06 | 1997-01-07 | Dowelanco | Process for the production of A83543 compounds with Saccharopolyspora spinosa |
| JP4258575B2 (ja) * | 1993-03-12 | 2009-04-30 | ダウ・アグロサイエンス・エル・エル・シー | 新規ａ８３５４３化合物及びそれらの製造法 |
| US6001981A (en) * | 1996-06-13 | 1999-12-14 | Dow Agrosciences Llc | Synthetic modification of Spinosyn compounds |
| GB9915306D0 (en) * | 1999-06-30 | 1999-09-01 | Inst Biomar Sa | New macrolide compounds,new use of known and new macrolides |
-
1985
- 1985-06-20 JP JP60135722A patent/JPS625990A/ja active Pending
-
1986
- 1986-12-19 AU AU66781/86A patent/AU587884B2/en not_active Ceased
- 1986-12-19 US US06/943,906 patent/US4764602A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU6678186A (en) | 1988-06-30 |
| US4764602A (en) | 1988-08-16 |
| AU587884B2 (en) | 1989-08-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0216756B2 (ja) | ||
| JPS5910798B2 (ja) | 新しいリフアマイシン類の製造方法 | |
| JPH03141290A (ja) | 抗腫瘍抗生物質ｂｍｙ―４１３３９ | |
| JPS60141293A (ja) | 新規制癌性抗生物質８１−４８４およびその製造法 | |
| KR880001638B1 (ko) | 항종양성 항생물질 루조펩틴 e₂ 및 그 제조방법 | |
| JPH07233184A (ja) | 新規な抗腫瘍性抗生物質 | |
| JPS6034556B2 (ja) | 抗生物質ｃ−１５００３ | |
| JPS59170092A (ja) | 新規抗生物質ｓｓ８２０１ｄ及びその製造法 | |
| JPH029382A (ja) | 新抗生物質ｉｋｄ−８３４４物質及びその製造法並びにこれを有効成分とする抗腫瘍剤 | |
| JPH0436276A (ja) | 抗生物質ｍａ―６３８―２―ｂ、その製造方法および抗生物質ｍａ―６３８―２―ｂを有効成分とする抗腫瘍剤 | |
| JP4235298B2 (ja) | 抗生物質パレイン酸ａとその製造法 | |
| JPH0631280B2 (ja) | Ｗｓ７７３９物質およびその製造法 | |
| JPH0272167A (ja) | Ｂｕ―３８６２ｔ抗腫瘍性抗生物質 | |
| JPH0639480B2 (ja) | 新規マクロライド系抗生物質ｍ１１９ | |
| JPS62186787A (ja) | 新規な微生物 | |
| JPS6348284A (ja) | 新抗生物質ｙｐ−０２９０８ｌ−ａおよびその製造法 | |
| JPH03220196A (ja) | ベンズアンスラキノン化合物 | |
| JPS623789A (ja) | 抗生物質トキマイシンａおよびその製造法 | |
| JPH06316595A (ja) | 環状ペプチド化合物 | |
| JPS62138196A (ja) | アンスラサイクリン化合物およびその製造法 | |
| JPH0259596A (ja) | 新規物質、その使用および製造 | |
| JPH0725878A (ja) | 血小板凝集阻害物質ｐｉ−３３４ | |
| JPH0449291A (ja) | 生理活性物質ｆｄ―８９１ | |
| JPS6293292A (ja) | 新規抗生物質ラクトキノマイシンｂおよびその製造法 | |
| JPS6121089A (ja) | 抗生物質２７１−４ｓａまたは２７１−４ｓｂ、およびその製造法 |