JPS59198971A - ビリルビンオキシダ−ゼの製造法 - Google Patents
ビリルビンオキシダ−ゼの製造法Info
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- JPS59198971A JPS59198971A JP58075587A JP7558783A JPS59198971A JP S59198971 A JPS59198971 A JP S59198971A JP 58075587 A JP58075587 A JP 58075587A JP 7558783 A JP7558783 A JP 7558783A JP S59198971 A JPS59198971 A JP S59198971A
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- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
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- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
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- C12N9/001—Oxidoreductases (1.) acting on the CH-CH group of donors (1.3)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y103/00—Oxidoreductases acting on the CH-CH group of donors (1.3)
- C12Y103/03—Oxidoreductases acting on the CH-CH group of donors (1.3) with oxygen as acceptor (1.3.3)
- C12Y103/03005—Bilirubin oxidase (1.3.3.5)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、ビリルビンオキシダーゼの製造法に関する。
さらに詳しくは本発明はコプリナス属。
トラメテス属、コリオラス属、フォリオタ属、プロイロ
タス属、レンヂテス属又は、フミトブシス属に属し、ビ
リルビンオキシダーゼを生産する能力を有する微生物を
培地に培養し、培養物中にビリルビンオキシダーゼを生
成蓄積せしめ、該培養物から該酵素を採取することを特
徴とするビリルビンオキシダーゼの製造法に関する。
タス属、レンヂテス属又は、フミトブシス属に属し、ビ
リルビンオキシダーゼを生産する能力を有する微生物を
培地に培養し、培養物中にビリルビンオキシダーゼを生
成蓄積せしめ、該培養物から該酵素を採取することを特
徴とするビリルビンオキシダーゼの製造法に関する。
ビリルビンオキシダーゼは血清中のビリルビンの定量、
脱色、及び生化学分析に於けるビリルビンによる干渉作
用の除去等を目的として臨床化学の分野で注目されてい
る酵素である。
脱色、及び生化学分析に於けるビリルビンによる干渉作
用の除去等を目的として臨床化学の分野で注目されてい
る酵素である。
従来、微生物を用いるビリルビンオキシダーゼの製法と
しては、アグリカス属に属する微生物を用いる方法（特
開昭５４．−１５１１９３号公報）。
しては、アグリカス属に属する微生物を用いる方法（特
開昭５４．−１５１１９３号公報）。
ミロセシウム属に属する微生物を用いる方法（特開昭５
７−１５９４８７号公報）及び、その酵素的性質が報告
されている（ Ｎ、 Ｔａｎａｋａ ａｎｄ Ｓ、 Ｍ
ｕｒａｏ。
７−１５９４８７号公報）及び、その酵素的性質が報告
されている（ Ｎ、 Ｔａｎａｋａ ａｎｄ Ｓ、 Ｍ
ｕｒａｏ。
＾ｇｒ＋ｃ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、、 ４６．２４
９９−２５０３ （１９８２） ）。
９９−２５０３ （１９８２） ）。
ビリルビンオキシダーゼの製造法について、種々検討し
た結果、広ＩＩｉ！囲の担子菌がビリルビンオキシダー
ゼを生産することが見い出された。
た結果、広ＩＩｉ！囲の担子菌がビリルビンオキシダー
ゼを生産することが見い出された。
以下に本発明の詳細な説明する。
本発明に使用される微生物としては、コプリナス属、ト
ラメテス属、コリオラス属、フォリオタ属、プロイロタ
ス属、レンヂテス属又はフミトプシス属に属し、ビリル
ビンオキシダーゼを生産する能力を有するものであれば
いずれの菌株でもよい。
ラメテス属、コリオラス属、フォリオタ属、プロイロタ
ス属、レンヂテス属又はフミトプシス属に属し、ビリル
ビンオキシダーゼを生産する能力を有するものであれば
いずれの菌株でもよい。
好適な菌株の例としては、コプリナス・シネレウスＨＵ
８３０１ （ＮＲＲＬ Ｈケ３’ｌ’ｌ）、 コプ
リナス・ミカセウスＨＵ８３０２ （ＮＲＲＴ−ＩＥＩ
＋ｏｏ ） 。
８３０１ （ＮＲＲＬ Ｈケ３’ｌ’ｌ）、 コプ
リナス・ミカセウスＨＵ８３０２ （ＮＲＲＴ−ＩＥＩ
＋ｏｏ ） 。
トラメテス・ヒルサタ）ＴＵ８３１１ （ＮＲＲＬ１
！；＃ｏ１’Ｉ 、’ ）ラメテス・ベルシコラーＨＵ
８３１２（ＮＲＲＬ１５４０２）、 コリオラス・コン
ソルスＨＵ８３１３ （ＮＲＲＬＩ５４０３）、
フォリオタ・ナメコＨＵ８３２１ （ＮＲＲＬ１５４０
４）。
！；＃ｏ１’Ｉ 、’ ）ラメテス・ベルシコラーＨＵ
８３１２（ＮＲＲＬ１５４０２）、 コリオラス・コン
ソルスＨＵ８３１３ （ＮＲＲＬＩ５４０３）、
フォリオタ・ナメコＨＵ８３２１ （ＮＲＲＬ１５４０
４）。
プロイロタス・オステアタスＨＵ８３３１（ＮＲＲＬ１
５４０５）、 レンヂテス・ステラシナＨＵ８３４１
（ＮＲＲＬ１５４０６）、 フミトブシス・カス
タネアＨＵ８３５１ （ＮＲＲＬＩ ５４０７）等が
あげられる。これらの微生物の菌学的性質は、今関六也
１本郷次雄 共著「原色日本菌類図鑑」保育社、１９６
５年版に記載されている。
５４０５）、 レンヂテス・ステラシナＨＵ８３４１
（ＮＲＲＬ１５４０６）、 フミトブシス・カス
タネアＨＵ８３５１ （ＮＲＲＬＩ ５４０７）等が
あげられる。これらの微生物の菌学的性質は、今関六也
１本郷次雄 共著「原色日本菌類図鑑」保育社、１９６
５年版に記載されている。
本発明で使用する培地としては、炭素源、無機物その他
栄養を程よく含有すれば、合成培地、天然培地のいずれ
も使用可能である。炭素源としては、グルコース、シュ
ークロース、廃糖蜜などの糖類、グリセロール、ソルビ
トール、マンニトール等の糖アルコール類が使用できる
。窒素源としては、アンモニア水、塩化アンモニウム、
硫酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウ
ム、燐酸アンモニウム等の各種無機及び有機のアンモニ
ウム化合物、尿素などの窒素化合物、ペプトン、酵母エ
キス、カゼイン加水分解物、脱脂大豆あるいはその消化
物等の窒素性有機物質等が使用できる。無機物としては
、ナトリウム、カリウム、マンガン、マグネシウム、カ
ルシウム、銅等（３） の金属の塩類や燐酸、硫酸、硝酸、塩酸等の塩類が使用
できる。
栄養を程よく含有すれば、合成培地、天然培地のいずれ
も使用可能である。炭素源としては、グルコース、シュ
ークロース、廃糖蜜などの糖類、グリセロール、ソルビ
トール、マンニトール等の糖アルコール類が使用できる
。窒素源としては、アンモニア水、塩化アンモニウム、
硫酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウ
ム、燐酸アンモニウム等の各種無機及び有機のアンモニ
ウム化合物、尿素などの窒素化合物、ペプトン、酵母エ
キス、カゼイン加水分解物、脱脂大豆あるいはその消化
物等の窒素性有機物質等が使用できる。無機物としては
、ナトリウム、カリウム、マンガン、マグネシウム、カ
ルシウム、銅等（３） の金属の塩類や燐酸、硫酸、硝酸、塩酸等の塩類が使用
できる。
培養温度は、通常２０〜４０℃の範囲で、好適には２５
〜３０℃の範囲で行われる。培養開始時のｐＨは通常５
．５〜７．５の範囲で、好適には６附近で行われる。こ
の様な条件下で４〜６日間振とう培養もしくは深部攪拌
培養すれば培養物中にビリルビンオキシダーゼが著量生
成する。
〜３０℃の範囲で行われる。培養開始時のｐＨは通常５
．５〜７．５の範囲で、好適には６附近で行われる。こ
の様な条件下で４〜６日間振とう培養もしくは深部攪拌
培養すれば培養物中にビリルビンオキシダーゼが著量生
成する。
培養終了後、該培養物より本酵素を採取するには通常の
酵素採取手段を用いて得ることができる。
酵素採取手段を用いて得ることができる。
なお、本酵素は菌体内及び培＃濾液の両方に存在するが
、量的には培養濾液の方が多いので、通常は、該培養物
より歯体を分別除去した培養濾液より得る。こうして得
られた粗酵素液を精製するには次のごとき方法が行われ
る。粗酵素液に８０％飽和まで硫酸アンモニウムを加え
４℃で一晩放置後、濾過助剤を加えて沈殿区分を集める
。０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）で十分透析後、
透析内液を遠心分離し、上清液を得る。これをＤＥＡＥ
−セルロース、ＱＡＥ−セファデックス等を用いるイオ
ン交換クロマトグラフィー法やセファデックスＧ−２０
０，セファロース６Ｂ等を用いるゲル濾過法、及びハイ
ドロキシアパタイトを用いる吸着溶出法などを組合わせ
て実施することにより（４） 高度に精製された本酵素標品を得ることができる。
、量的には培養濾液の方が多いので、通常は、該培養物
より歯体を分別除去した培養濾液より得る。こうして得
られた粗酵素液を精製するには次のごとき方法が行われ
る。粗酵素液に８０％飽和まで硫酸アンモニウムを加え
４℃で一晩放置後、濾過助剤を加えて沈殿区分を集める
。０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）で十分透析後、
透析内液を遠心分離し、上清液を得る。これをＤＥＡＥ
−セルロース、ＱＡＥ−セファデックス等を用いるイオ
ン交換クロマトグラフィー法やセファデックスＧ−２０
０，セファロース６Ｂ等を用いるゲル濾過法、及びハイ
ドロキシアパタイトを用いる吸着溶出法などを組合わせ
て実施することにより（４） 高度に精製された本酵素標品を得ることができる。
次に上記精製手段により得られた本酵素の理化学的性質
を以下に記載する。
を以下に記載する。
１）作用及び基質特異性
本酵素は、分子状酸素の存在下、ビリルビンを酸化分解
する。第１回に本酵素を作用させた時の、可視部に於け
るとリルビンの吸収の経時的減少を示す。その際、過酸
化水素は発生せず水を生成する。またビリベルジンをも
酸化するが、酸化速度はビリルビンの場合に比べ遅い。
する。第１回に本酵素を作用させた時の、可視部に於け
るとリルビンの吸収の経時的減少を示す。その際、過酸
化水素は発生せず水を生成する。またビリベルジンをも
酸化するが、酸化速度はビリルビンの場合に比べ遅い。
第２図にビリルビン及びビリベルジンを基質とした時の
反応初期の酸素消費量を示す。
反応初期の酸素消費量を示す。
２）至！ｐＨ，安定ｐＨ範囲
本酵素の至適ｐＨは菌によって多少異なるが、６から９
付近にある。また３７℃、６０分処理でｐＨ５からｐＨ
１１まで安定である。
付近にある。また３７℃、６０分処理でｐＨ５からｐＨ
１１まで安定である。
３）至適温度、安定温度範囲
本酵素の至適温度は、５０℃から６０℃にあり、０．１
Ｍ ＴＥＳ緩衝液（ｐ Ｈ８，０）で６０℃１５分処
理でも９０〜９５％の残存活性を示す。
Ｍ ＴＥＳ緩衝液（ｐ Ｈ８，０）で６０℃１５分処
理でも９０〜９５％の残存活性を示す。
４）分子量
セファデックスＧ−１００を用いたゲル濾過法により測
定した本酵素の分子量は４４，０００であった。
定した本酵素の分子量は４４，０００であった。
５）等電点
焦点電気泳動法により本酵素の等電点を測定した結果、
３．９８であった。
３．９８であった。
６）吸収スペクトル
精製酵素は、２８０ｎｍ及び６００ｎｍに極大吸収を示
し、銅蛋白であることが明らかになった（第３図）。
し、銅蛋白であることが明らかになった（第３図）。
本酵素活性の測定は次の如く行う。
０．０１％ビリルヒン溶液０．５ｍｌ？、：Ｏ，ＩＭ
ＴＥＳ緩衝液（＋） Ｈ７，Ｏ） ０．５ ｍｌ、
Ｈ２０１，９ｍｌ及ヒ本酵素液０．１ｍｌを加え、３７
℃で５分間、振とうして反応させる。反応液中のビリル
ビンの４４０ ｎｍにおける吸光度の減少を測定するこ
とにより酵素活性を求めた。酵素単位は、ビリルビンの
分子吸光係数５６．３を用いて、３７℃で１分間に１μ
ｍｏｌのビリルビンを酸化させる量を１単位とした。
ＴＥＳ緩衝液（＋） Ｈ７，Ｏ） ０．５ ｍｌ、
Ｈ２０１，９ｍｌ及ヒ本酵素液０．１ｍｌを加え、３７
℃で５分間、振とうして反応させる。反応液中のビリル
ビンの４４０ ｎｍにおける吸光度の減少を測定するこ
とにより酵素活性を求めた。酵素単位は、ビリルビンの
分子吸光係数５６．３を用いて、３７℃で１分間に１μ
ｍｏｌのビリルビンを酸化させる量を１単位とした。
又、酵素蛋白量は銅−フォーリン（Ｆｏｌｉｎ ） Ｋ
薬を用いるロウリイ （Ｌｏｗｒｙ ）の方法（Ｑ、ｌ
（、Ｌｏｗｒｙ。
薬を用いるロウリイ （Ｌｏｗｒｙ ）の方法（Ｑ、ｌ
（、Ｌｏｗｒｙ。
Ｎ、Ｊ、Ｒｏｓｅｂｒｏｕｇｈ、 へル、Ｆａｖ
ａｎｄ Ｒ，Ｊ、Ｒａｎｄａｌｌ、 Ｊ。
ａｎｄ Ｒ，Ｊ、Ｒａｎｄａｌｌ、 Ｊ。
Ｒｉｏｔ、 Ｃｈｅｍ、 １９３ 、 ２６５ （１９
５１） ）によって測定した。
５１） ）によって測定した。
以下に実施例を示す。
実施例１゜
コプリナス・シネレウスＨＵ ８３０１をグルコース３
％、シｊ−クロース２％、大豆蛋白粉１．５％、 Ｃ
Ｓ Ｌ （ｃｏｒｕ ５ｔｅｅｋ １ｉｑｕｏｒ ）
０．５％、に２ＨＰ Ｏ４０，１％、Ｍｇ５Ｏ，・７８
２００．０５％、ＦｅＣＡ’３ ・６Ｈ２０１Ｑ＋＋１
ｇ／Ａ’、 ビタミン８２ ２■／１の組成（ｐＨ６
，５）を有する培地０．３１を含む２１１容ひだ付三角
フラスコ３本に接種し、２８°Ｃ４日間振とう培養し、
得られた種培養物をあらかじめ３０ｆｆ容量のジャーフ
ァーメンタ−に殺菌した」二記培地１５７！中に接種す
る。
％、シｊ−クロース２％、大豆蛋白粉１．５％、 Ｃ
Ｓ Ｌ （ｃｏｒｕ ５ｔｅｅｋ １ｉｑｕｏｒ ）
０．５％、に２ＨＰ Ｏ４０，１％、Ｍｇ５Ｏ，・７８
２００．０５％、ＦｅＣＡ’３ ・６Ｈ２０１Ｑ＋＋１
ｇ／Ａ’、 ビタミン８２ ２■／１の組成（ｐＨ６
，５）を有する培地０．３１を含む２１１容ひだ付三角
フラスコ３本に接種し、２８°Ｃ４日間振とう培養し、
得られた種培養物をあらかじめ３０ｆｆ容量のジャーフ
ァーメンタ−に殺菌した」二記培地１５７！中に接種す
る。
２８℃で４日間５通気量１５１１７分、攪拌２５０ｒｐ
ｍで培養する。培養後、ブフナー漏斗を用いて菌体を除
去し、培養濾液１０．５ ｎ （２，３５単位／ｍ１）
を得る。得られた粗酵素液の硫酸アンモニウム０〜８０
％飽和沈殿区分を０．ＯＩＭ＃酸緩衝液（ｐＨ７，０）
に溶解し、透析膜としてセルロースチューブを使い、同
緩衝液で一晩透析する。次いで本透析液に生じた沈殿を
遠心分離法により除去する。得られた」二清液に硫酸ア
ンモニウムを加え、５０〜７０％飽和で沈殿する区分を
上記緩衝液で十分透析後、０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，０）で平衡化した、ＤＥＡＥ−セルロース（５ｅ
ｒｖａ社製、西独）のカラム（５，５Ｘ４０ｃｍ）に通
す。
ｍで培養する。培養後、ブフナー漏斗を用いて菌体を除
去し、培養濾液１０．５ ｎ （２，３５単位／ｍ１）
を得る。得られた粗酵素液の硫酸アンモニウム０〜８０
％飽和沈殿区分を０．ＯＩＭ＃酸緩衝液（ｐＨ７，０）
に溶解し、透析膜としてセルロースチューブを使い、同
緩衝液で一晩透析する。次いで本透析液に生じた沈殿を
遠心分離法により除去する。得られた」二清液に硫酸ア
ンモニウムを加え、５０〜７０％飽和で沈殿する区分を
上記緩衝液で十分透析後、０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，０）で平衡化した、ＤＥＡＥ−セルロース（５ｅ
ｒｖａ社製、西独）のカラム（５，５Ｘ４０ｃｍ）に通
す。
（７）
同緩衝液で吸着されない不純蛋白を洗浄した後に、０．
０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）ｌｊｌ！と０．２ Ｍ
ＮａＣｆｆを含む同緩衝液１βとを用いて、濃度勾配法
で溶出すると、ビリルビンオキシダーゼが溶出される。
０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）ｌｊｌ！と０．２ Ｍ
ＮａＣｆｆを含む同緩衝液１βとを用いて、濃度勾配法
で溶出すると、ビリルビンオキシダーゼが溶出される。
この活性区分を合わせ硫酸アンモニウムが７０％飽和に
なるように添加し、酵素を沈殿させる。次に生ずる沈殿
を遠心分離（２０，０ＯＯｘ ｇ 。
なるように添加し、酵素を沈殿させる。次に生ずる沈殿
を遠心分離（２０，０ＯＯｘ ｇ 。
２０分）で集め、Ｏ，Ｏｉ Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０
）５ｍｌに溶解する。これを０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，０）で平衡化しておいた。セファデックスＧ−１
００（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａ
ｌｓ社製、スウェーデン）のカラム（５，５Ｘ８０ｃｍ
）に通す。０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）ｌＩｌ
を流し、活性区分を集め、硫酸アンモニウムを７０％飽
和まで添加し、酵素を沈殿させる。次に沈殿を遠心分離
（２０，０００Ｘ ｇ 、 ２０分）で集め、０．０１
Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ４７，０） １０ｍｌで溶解し、
同緩衝液５１で２４時間透析する。透析終了後、凍結乾
燥し、ビリルビンオキシダーゼの粉末精製標品２４■を
得る。
）５ｍｌに溶解する。これを０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，０）で平衡化しておいた。セファデックスＧ−１
００（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａ
ｌｓ社製、スウェーデン）のカラム（５，５Ｘ８０ｃｍ
）に通す。０．０１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）ｌＩｌ
を流し、活性区分を集め、硫酸アンモニウムを７０％飽
和まで添加し、酵素を沈殿させる。次に沈殿を遠心分離
（２０，０００Ｘ ｇ 、 ２０分）で集め、０．０１
Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ４７，０） １０ｍｌで溶解し、
同緩衝液５１で２４時間透析する。透析終了後、凍結乾
燥し、ビリルビンオキシダーゼの粉末精製標品２４■を
得る。
実施例２゜
実施例１において、コプリナス・シネレウスＨＵ８３０
１の代わりにトラメテス・ヒルサタＨＵ８３１１を用い
る以外は実施例１と同様に培（８） 養し、Ｉ５βの培地よりビリルビンオキシダーゼ活性０
．２４単位／ｍ＋を含む培養液１０．２ ｊ！を得る。
１の代わりにトラメテス・ヒルサタＨＵ８３１１を用い
る以外は実施例１と同様に培（８） 養し、Ｉ５βの培地よりビリルビンオキシダーゼ活性０
．２４単位／ｍ＋を含む培養液１０．２ ｊ！を得る。
このものをさらに実施例１と同様に精製し、粉末精製標
品１３■を得る。
品１３■を得る。
実施例３゜
実施例１において、コプリナス・シネレウスＨＵ８３０
１の代わりに第１表の菌株を用いる以外は実施例１と同
様に実施して第１表の結果をうる。
１の代わりに第１表の菌株を用いる以外は実施例１と同
様に実施して第１表の結果をうる。
第１図は本酵素をビリルビンに作用した時のビリルビン
の吸収の経時的減少を示す。 第２図はビリルビン及びビリベルジンを基質とした時の
本酵素の酸素吸収量を示す。 ０□０ ： ビリルビン ・□φ ： ビリベルジン 第３図は本酵素の吸収スペクトルを示す。 鶏し 昭和５８年６月２日 特許庁長百 服 １ 事件の表示 昭和５８年特許願第７５５８７号 ２ 発明の名称 ビリルビンオキシダーゼの製造法 ３ 補正をｑる者 事件との関係 特許出願人 郵便番号 １００ 住所 東京都千代田区大手町−丁目６番１号名称 （１
０２＞協和醗酵工業株式会社５ 補正の内容 （１） 明細書第５頁６行 （第１回」を１第１図」に訂正する。 （２） 明細用第７頁４行 ｌ （ｃｏｒｕ ５ｔｅｅｋ １ｉｑｕｏｒ） Ｊを
［（ｃｏｒｎｓｔｅｅｐ １ｉｑｕｏｒ） Ｊに訂正
する。
の吸収の経時的減少を示す。 第２図はビリルビン及びビリベルジンを基質とした時の
本酵素の酸素吸収量を示す。 ０□０ ： ビリルビン ・□φ ： ビリベルジン 第３図は本酵素の吸収スペクトルを示す。 鶏し 昭和５８年６月２日 特許庁長百 服 １ 事件の表示 昭和５８年特許願第７５５８７号 ２ 発明の名称 ビリルビンオキシダーゼの製造法 ３ 補正をｑる者 事件との関係 特許出願人 郵便番号 １００ 住所 東京都千代田区大手町−丁目６番１号名称 （１
０２＞協和醗酵工業株式会社５ 補正の内容 （１） 明細書第５頁６行 （第１回」を１第１図」に訂正する。 （２） 明細用第７頁４行 ｌ （ｃｏｒｕ ５ｔｅｅｋ １ｉｑｕｏｒ） Ｊを
［（ｃｏｒｎｓｔｅｅｐ １ｉｑｕｏｒ） Ｊに訂正
する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 コプリナス属、トラメテス属、コリオラス属。 フォリオタ属、プロイロタス属、レンヂテス属又は、フ
ミトプシス属に属し、ビリルビンオキシダーゼを生産す
る能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中にビリ
ルビンオキシダーゼを生成蓄積せしめ、該培養物から該
酵素を採取することを特徴とするビリルビンオキシダー
ゼの製造法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58075587A JPS59198971A (ja) | 1983-04-28 | 1983-04-28 | ビリルビンオキシダ−ゼの製造法 |
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