JPS602194A - 多糖類の製造法 - Google Patents
多糖類の製造法Info
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- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は１．常温でケル全形成する新規な多糖類の製造
法に関する。
法に関する。
微生物の生産する多糖類に関し７ては、これまでアルカ
リ土類金属、キサントモナス属、アースロバフタ−属あ
るいはバチルス属に属する細菌、ノ・ンゼヌラ属等の酵
母類、ブルラリア属等のカビ類の生産するものが知られ
てしる。
リ土類金属、キサントモナス属、アースロバフタ−属あ
るいはバチルス属に属する細菌、ノ・ンゼヌラ属等の酵
母類、ブルラリア属等のカビ類の生産するものが知られ
てしる。
しかし、これら多糖類のうち、常温で高い粘度を示しゲ
ルを形成するようなものは意外に少なかった。
ルを形成するようなものは意外に少なかった。
本発明者らは、特に粘度の高い多糖類を得る目的で広く
土壌菌を採取し、その多糖類生産能全検索した。その結
果、本発明者らが新たに分離したバチルス・ポリミキサ
Ｓ−８菌が、培地中に極めて粘度の高い多糖類様物質を
蓄積することを見出した。
土壌菌を採取し、その多糖類生産能全検索した。その結
果、本発明者らが新たに分離したバチルス・ポリミキサ
Ｓ−８菌が、培地中に極めて粘度の高い多糖類様物質を
蓄積することを見出した。
本発明は、上記の知見に基いて完成したもので、その要
旨ハ、バチルス・ボリミキザＳ−８菌全培地に培養し、
培地中に主要構成成分がグルコース、マンノース、ガラ
クトース、グルクロン酸からなる常温でゲルを形成する
多糖類全生成せしめ、これを採取することを特徴とする
多糖類の製造法である。
旨ハ、バチルス・ボリミキザＳ−８菌全培地に培養し、
培地中に主要構成成分がグルコース、マンノース、ガラ
クトース、グルクロン酸からなる常温でゲルを形成する
多糖類全生成せしめ、これを採取することを特徴とする
多糖類の製造法である。
以下、本発明について詳しく述べる。
本発明において、主要構成成分がグルコース、マンノー
ス、ガラクトース、グルクロン酸からなシ、常温でゲル
全形成する多糖類生産菌は、本発間者らが土壌よシ新た
に分離したバチルス・ポリミキサＳ−８菌であり、その
菌学的性質は次のとおりである。
ス、ガラクトース、グルクロン酸からなシ、常温でゲル
全形成する多糖類生産菌は、本発間者らが土壌よシ新た
に分離したバチルス・ポリミキサＳ−８菌であり、その
菌学的性質は次のとおりである。
く１〉形態的性質
■、顕微鏡による観察
栄養細胞
形態：桿菌
運動性：あシ
大きさ二〇、６〜０．８ Ｘ ２．Ｄ〜５．０μ胞子：
楕円形の内生胞子 大きさは１．０〜１．２ Ｘ １．５〜２．５μ胞子鶴
はふくらむ。
楕円形の内生胞子 大きさは１．０〜１．２ Ｘ １．５〜２．５μ胞子鶴
はふくらむ。
■、染色
ダラム染色：陰性
抗酸性染色：陰性
■、培地における生育状況
（１）肉汁寒天平板培養
生育は不良。不規則状または仮組状にひろがる。
（２）グルコース寒天平板培養
生育は良好。もりあがシ粘稠性あり。表面はなめらかで
光沢あり。
光沢あり。
（３）肉汁液体培養
表面生育あシ。わずかに混濁する。少量の粘質性沈澱を
生じる。
生じる。
（４）グルコース肉汁液体培養
一様に良好に生育し、粘質性の沈澱を多量に生じる。被
膜は形成しない。
膜は形成しない。
（５）肉汁ゼラチン穿刺培養
上部に生育、ゆるやかに液化する。
（６１リドマスミルクにおける生育
酸およびガスを発生も、凝固しペプトン化する。リドマ
スを還元する。
スを還元する。
く２〉生理的性質
１、生育温度＝１３〜４１Ｃ
２、生育最適温度：６５〜３７’Ｃ
３、生育ｐＨ： ５．０〜９．０
４、生育最適ｐＨ： ６．０〜６．５
５、酸素要求性二進性嫌気性
６、硝酸塩の還元性：あシ
フ、脱窒反応：なし
８、メチルレッド反応：陽性
９、フオーグスブロスカウエル反応：陽性１０、インド
ールの生成：なし １１、硫化水素の生成：なし １２、澱粉の加水分解能：あり １３、クエン酸の利用性：なし １４、無機輩素源の利用性：あシ １５、色累の生ｂｙ ：なし １６、ウレアーゼの生成：なし １７、オキシダーゼの生成：なし １８、フタラーゼの生成：あり １９．０−Ｆテスト：醗酵 く３〉炭水化物の醗酵性 第１表に示したような結果が得られた。
ールの生成：なし １１、硫化水素の生成：なし １２、澱粉の加水分解能：あり １３、クエン酸の利用性：なし １４、無機輩素源の利用性：あシ １５、色累の生ｂｙ ：なし １６、ウレアーゼの生成：なし １７、オキシダーゼの生成：なし １８、フタラーゼの生成：あり １９．０−Ｆテスト：醗酵 く３〉炭水化物の醗酵性 第１表に示したような結果が得られた。
第１表
以上の諸性状にしたがい、バージイズ・マニュアル・オ
ブ・デターミネーテイブ・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇ
ｅｙｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ
ｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ）第８版によシ検索し
た結果、本菌はバチルス・ポリミキサと同定された。そ
して、多糖類全生産する菌として公知（特公昭４２−７
６００号、良化第４３巻第８号）のバチルス・ポリミキ
サＡ２７１と本発明のノくチルス・ポリミキサＢ−ａ菌
と比較すると、前者は「肉汁培地二表面生育なし」であ
るのに対し、後者は「肉汁液体培地二表面生育あり」で
あり、また、前者は「ゼラチン培地：液化は早い」のに
対し、後者は「肉汁ゼラチン穿刺培地：ゆるやかに液化
する」であシ、さらに前者は「生育温度：適温２５〜３
３Ｃ」であるのに対し、後者は「生育最適温度：３５〜
５７Ｃ」である点で相違していることから、バチルス・
ポリミキサＳ−ｓ菌を新規な菌であると認定し、工業技
術院微生物工業技術研究所に寄託した（微工研菌寄第７
０３５号）。
ブ・デターミネーテイブ・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇ
ｅｙｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ
ｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ）第８版によシ検索し
た結果、本菌はバチルス・ポリミキサと同定された。そ
して、多糖類全生産する菌として公知（特公昭４２−７
６００号、良化第４３巻第８号）のバチルス・ポリミキ
サＡ２７１と本発明のノくチルス・ポリミキサＢ−ａ菌
と比較すると、前者は「肉汁培地二表面生育なし」であ
るのに対し、後者は「肉汁液体培地二表面生育あり」で
あり、また、前者は「ゼラチン培地：液化は早い」のに
対し、後者は「肉汁ゼラチン穿刺培地：ゆるやかに液化
する」であシ、さらに前者は「生育温度：適温２５〜３
３Ｃ」であるのに対し、後者は「生育最適温度：３５〜
５７Ｃ」である点で相違していることから、バチルス・
ポリミキサＳ−ｓ菌を新規な菌であると認定し、工業技
術院微生物工業技術研究所に寄託した（微工研菌寄第７
０３５号）。
本発明においては、前記バチルス・ポリミキサＳ−ａ菌
全培地で培養する。培地にはバチルス・ポリミキサＳ−
ａ菌が資化できる炭素源、窒素源、生育に必要な各種無
機塩等の栄養源を含むものが用いられる。より具体的に
は、炭素源として、デンプン、ブドウ糖、蔗糖、アラビ
ノース、マンニットなどがあり、窒素源としては尿素、
肉エキス、ペフトン、コーンステイー・ブリカー、酵母
エキス、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、その他
の有機物あるいは無機物が用いられ、無機物としては塩
化ナトリウム−！たはマグネシウム、マンガン、カリウ
ム、鉄、カルシウムなどの燐酸塩、硫酸塩、炭酸塩など
があげられる。
全培地で培養する。培地にはバチルス・ポリミキサＳ−
ａ菌が資化できる炭素源、窒素源、生育に必要な各種無
機塩等の栄養源を含むものが用いられる。より具体的に
は、炭素源として、デンプン、ブドウ糖、蔗糖、アラビ
ノース、マンニットなどがあり、窒素源としては尿素、
肉エキス、ペフトン、コーンステイー・ブリカー、酵母
エキス、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、その他
の有機物あるいは無機物が用いられ、無機物としては塩
化ナトリウム−！たはマグネシウム、マンガン、カリウ
ム、鉄、カルシウムなどの燐酸塩、硫酸塩、炭酸塩など
があげられる。
培養はｐＨ５，Ｄ〜９．０好ましくは６．０〜８，５、
温度１０〜４０Ｃ好ましくは１５〜３７Ｃで行うのが適
当であり、通常１数日程度の培養でよい。
温度１０〜４０Ｃ好ましくは１５〜３７Ｃで行うのが適
当であり、通常１数日程度の培養でよい。
このようにして得られた培養物から、本発明の目的の多
糖類が得られる。多糖類は大部分培養液中に生成するの
で、ｆｌｌＪ！！’に先立って培地中の菌体その他の固
形分を除去し、得られた液から多糖類を回収するのがよ
い。
糖類が得られる。多糖類は大部分培養液中に生成するの
で、ｆｌｌＪ！！’に先立って培地中の菌体その他の固
形分を除去し、得られた液から多糖類を回収するのがよ
い。
精製には、加熱、遠心分離、洗浄、乾燥、溶媒による分
別沈澱や抽出等、多糖類を不純物より回収するために通
常用いられる手段を単独に、または適宜組み合わせるこ
とによって行う。例えば、上記固形分を除去して得られ
た溶液に、アセトン等の溶媒を添加して多糖類を析出せ
しめ、析出した多糖類を水に溶解させ、再びアセトン等
の溶媒によシ多糖類を析出させる。この処理を繰シ返し
た後、透析、凍結乾燥することにより精製多糖類が得ら
れる。
別沈澱や抽出等、多糖類を不純物より回収するために通
常用いられる手段を単独に、または適宜組み合わせるこ
とによって行う。例えば、上記固形分を除去して得られ
た溶液に、アセトン等の溶媒を添加して多糖類を析出せ
しめ、析出した多糖類を水に溶解させ、再びアセトン等
の溶媒によシ多糖類を析出させる。この処理を繰シ返し
た後、透析、凍結乾燥することにより精製多糖類が得ら
れる。
本発明の多糖類の性質は下記のとおりである。
（１）構成成分
本多糖類の加水分解物〔加水分解条件：５チ（Ｖ／Ｖ
）硫酸１００Ｃ１０時間〕ヲ濃縮し、薄層クロマトグラ
フィー、液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフ
ィー、カルバゾール’ｆｔｂＨ比色法によシ分析定量し
た。その結果、グルコース、マンノース、ガラクトース
、グルクロン酸が主要構成成分であることがわかった。
）硫酸１００Ｃ１０時間〕ヲ濃縮し、薄層クロマトグラ
フィー、液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフ
ィー、カルバゾール’ｆｔｂＨ比色法によシ分析定量し
た。その結果、グルコース、マンノース、ガラクトース
、グルクロン酸が主要構成成分であることがわかった。
そして、それぞれの成分はモル比４：３：２二２で構成
されている。また、本多糖類の加水分解物をエルノン−
モルガン法により比色定量すると、微量のへキソサミン
が検出された。
されている。また、本多糖類の加水分解物をエルノン−
モルガン法により比色定量すると、微量のへキソサミン
が検出された。
（２）−膜組成分析（乾物当たり）
粗蛋白質（６，２５ＸＮ）：５．１％ 灰分：１０，２
チ 粗脂肪＝０．０チ 炭水化物： ８ ｊ８チ（３）
分子量 ２００、（１００以上（５ｅｐｈａｄｅｘ Ｇ −２０
０によるグルい適法で測定） （４）融点 融点は認められない。２２０〜２３０Ｃで炭化しはじめ
２８０Ｃ付近で完全に炭化する。
チ 粗脂肪＝０．０チ 炭水化物： ８ ｊ８チ（３）
分子量 ２００、（１００以上（５ｅｐｈａｄｅｘ Ｇ −２０
０によるグルい適法で測定） （４）融点 融点は認められない。２２０〜２３０Ｃで炭化しはじめ
２８０Ｃ付近で完全に炭化する。
（５）赤外線吸収スペクトル
第１図のとおシである。
（６）溶剤に対する溶解性
水に可溶、メタノール、エタノール、アセトン等有機溶
媒に不溶 （力量色反応 アンスロン反応、ａｅカルバソール反応、エルンンーモ
ルガン反応に陽性 （８）塩基性、酸性、中性の区別 セチルトリメチルアンモニウムブロマイドにより沈澱を
生ずることから酸性多糖である。
媒に不溶 （力量色反応 アンスロン反応、ａｅカルバソール反応、エルンンーモ
ルガン反応に陽性 （８）塩基性、酸性、中性の区別 セチルトリメチルアンモニウムブロマイドにより沈澱を
生ずることから酸性多糖である。
（９）物質の色
白色である。
００）粘度
常温で水に溶け、粘性の高い中性溶液になる。
粘度と濃度との関係は第２図に示すとおりである。
なお、第２図において、（イ）は本発明の多糖類の粘度
を示し、（ロ）はグアガムの粘度を示す。
を示し、（ロ）はグアガムの粘度を示す。
α】）酸およびアルカリに対する安定度ｐＨ２〜１２の
範囲で比較的゛安定した粘度を示す。
範囲で比較的゛安定した粘度を示す。
ａカ塩に対する安定度
カリウム、ナトリウム等′の一価の金属塩およびカルシ
ウム等の二価の付属塩の存在下で粘度の低下は認められ
ず、高粘性を示す。
ウム等の二価の付属塩の存在下で粘度の低下は認められ
ず、高粘性を示す。
Ｑ９熱に対する安定度
９０７：、５０分間の加熱で安定である。
（１４）その他の特徴的性質
本多糖類は比較的低濃度（０，’７ ％、Ｗ／Ｖ ）で
加熱溶解、冷却凝固の性質を有することはもちろん−の
こと、室温で水と接触させるだけで流動性を全く失ない
、ゼリー状になるという特徴的性質を有する。また、ゲ
ル形成のために架橋剤を必要としたり、ｐＨの調整等を
する必要がなく、塩類等の水溶性物質が共存してもゲル
を形成する。
加熱溶解、冷却凝固の性質を有することはもちろん−の
こと、室温で水と接触させるだけで流動性を全く失ない
、ゼリー状になるという特徴的性質を有する。また、ゲ
ル形成のために架橋剤を必要としたり、ｐＨの調整等を
する必要がなく、塩類等の水溶性物質が共存してもゲル
を形成する。
本多糖類は、その特異的な性質全考慮して、増粘剤、ゲ
ル化剤、賦形剤等として食品加工の分野において利用す
ることができる。また、サイジング剤、凝集剤等として
各種工業分野において利用することができ、土壌改良剤
、肥料粒化剤等として農業の分野において利用すること
ができる。
ル化剤、賦形剤等として食品加工の分野において利用す
ることができる。また、サイジング剤、凝集剤等として
各種工業分野において利用することができ、土壌改良剤
、肥料粒化剤等として農業の分野において利用すること
ができる。
実施例
５００ゴ用坂口フラスコに次の組成の培地を１００ｍ１
入れて滅菌した。
入れて滅菌した。
培地組成ニ
ゲルコース４％、酵母エキス０．６％、フイトン０．７
％、リン酸−カリウム０．１チ、硫酸マグネシウム（７
水塩）０．１％％炭酸カルシウム０．２５チ、ｐＨ７，
０゜ この培地にバチルス・ポリミキサＳ−８菌（微工研菌寄
第７０５５号）を接種し、２５Ｕ７２時間振盪培養を行
った。培養液１００−に５〜４倍量の水を加えて希釈し
、８０Ｃ１０分加熱した後、直ちに遠心分離（１４，０
００Ｇ、２０分）を施して、菌体その他不溶成分を除き
、上澄液に倍量のアセトン全攪拌しながら圧加して多糖
を繊維状に析出させる。これｋ濾過し、アセトンで充分
に洗浄し乾燥すると、徂多糖０，４６ ｆが得られた。
％、リン酸−カリウム０．１チ、硫酸マグネシウム（７
水塩）０．１％％炭酸カルシウム０．２５チ、ｐＨ７，
０゜ この培地にバチルス・ポリミキサＳ−８菌（微工研菌寄
第７０５５号）を接種し、２５Ｕ７２時間振盪培養を行
った。培養液１００−に５〜４倍量の水を加えて希釈し
、８０Ｃ１０分加熱した後、直ちに遠心分離（１４，０
００Ｇ、２０分）を施して、菌体その他不溶成分を除き
、上澄液に倍量のアセトン全攪拌しながら圧加して多糖
を繊維状に析出させる。これｋ濾過し、アセトンで充分
に洗浄し乾燥すると、徂多糖０，４６ ｆが得られた。
この粗多糖を再び水に溶解させ、上記した方法と同一の
方法でアセトン沈澱処理全２回操り返し行った後、通常
のセルロースチューブに入れ、流水で３日間、脱イオン
水で２日間透析を行った後、凍結乾燥して綿状の精製多
糖類０．５９７ を得た。
方法でアセトン沈澱処理全２回操り返し行った後、通常
のセルロースチューブに入れ、流水で３日間、脱イオン
水で２日間透析を行った後、凍結乾燥して綿状の精製多
糖類０．５９７ を得た。
第１図はＳ−８菌多糖類の赤外線吸収スペクトルのパタ
ーンであり、第２図は本発明の多糖類の濃度と粘度との
関係を示す片対数グラフである。
ーンであり、第２図は本発明の多糖類の濃度と粘度との
関係を示す片対数グラフである。
Claims (1)
- （１）バチルス・ポリミキサＳ−８菌を培地に培養し、
培地中に主要構成成分がグルコース、マンノース、ガラ
クトース、グルクロン酸からなる常温でゲルを形成する
多糖類を生成せしめ、これを採取することを特徴とする
多糖類の製造法。 ＋２） グルコース、マンノース、ガラクトース、グル
クロン酸の構成モル比が４：３：２：２である特許請求
の範囲第１項記載の多糖類の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10932083A JPS602194A (ja) | 1983-06-20 | 1983-06-20 | 多糖類の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10932083A JPS602194A (ja) | 1983-06-20 | 1983-06-20 | 多糖類の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS602194A true JPS602194A (ja) | 1985-01-08 |
| JPH029797B2 JPH029797B2 (ja) | 1990-03-05 |
Family
ID=14507229
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10932083A Granted JPS602194A (ja) | 1983-06-20 | 1983-06-20 | 多糖類の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS602194A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04103396A (ja) * | 1990-08-23 | 1992-04-06 | Fujitsu Ltd | 印刷処理装置 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02137699U (ja) * | 1989-04-19 | 1990-11-16 |
-
1983
- 1983-06-20 JP JP10932083A patent/JPS602194A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04103396A (ja) * | 1990-08-23 | 1992-04-06 | Fujitsu Ltd | 印刷処理装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH029797B2 (ja) | 1990-03-05 |
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