JPS6028990A - 新規なペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、下式（１） （但し、上一式中ｌ５ｏｖａｌｅｒｙｌはインバレリル
基を表わし、Ｔｙｒ及びＶａｔはそれぞれチロシン及び
バリンの残有を示す。）で表わされる新規なペプチドに
関する。

近年、安全性の高いしかも効力の強い医薬−農薬という
ものの要求が高まシ、生理活性を有するアミノ酸類化合
物、低分子ペプチド化合物にその可能性を見い出すべく
種々の研究がなされている。

本発明者らは、生体の制御機構におけるプロテアーゼの
重要な役割に注目し、プロテアーゼ抑制物質の探索を目
的として、広く微生物の培養物を検討していたところ、
ストレフ’）ミセス属に属する菌株が、培養物中に、プ
ロテアーゼの活性を強く阻害する作用を持った物質を生
成蓄積する事実を発見し、とれを単離、構造を決定した
。

本発明物質は、ｌ５ｏｖａｌｅｒｙｌ　−Ｔｙｒ　−Ｖ
ａｌ−Ａｒｇｉｎａｌの構造を有し、動植物及び微生物
起源のプロテアーゼによる蛋白分解を強く阻害する作用
を有し、筋ジストロフィー、腎性高血圧症の治療薬とし
ての用途が期待される。

キーウリ等の双子葉植物の種子の発芽、発根を少量で抑
制し、良薬としても用途が期待される。

本発明物質を産生ずる菌ＳＡＢ　−９３４株は、昭和５
．６年７月に和歌山県田辺市の土壌よシ分離された。Ｓ
ＡＢ　−９３４株は、後述する性状を持ち、既知のスト
レプトミセス・ガルチェリイに類似するが、気菌糸の着
生状態、炭素源の利用性に若干の差が認められること及
び本発明物質の産生性で大きな相違があるため、発明者
らはこれを新種と認め、ストレットミセス・タナペエン
シス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｔａｎａｂｅｎｓｉｓ
　）と命名すると共に、本菌を工業技術院微生物工業技
術研究所に寄託した。（受託番号微工研寄菌第６９３８
号ＦＥＢＭＰ　−６９３８）〔ストレプトミセス・タナ
ペエンシス（ＳＡＢ−９３４株）の菌学的特徴〕 １、形態 顕微鏡下でよく分岐した基中菌糸から僅かに波形の気菌
糸が多数伸長するのを認める。輪生枝は認められず、直
線型（Ｒｅｅｔｕｓ　）である。

２、各培地における生育状態 以下の記載中、（）内はコンテナー・コーポレーション
・オプ・アメリカ（Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒ
ａｔｉｏｎｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ　）　（Ｄ　カラー・
ハーモニイ・マニュアル（Ｃｏ１ｏｒ　ｈａｒｍｏｎｙ
　ｍａｎｕａｌ　）に基く色彩表示である。

■シュクロース・硝酸塩寒天培地（２８℃培養）無色か
らりすい黄のかかった発育上に、白色（、）の気菌糸を
わずかに着生。裏面は無色〜黄灰色。溶解性色素の産生
は認められない。

■グリセリン・アスパラギン寒天培地（２８℃培養）赤
味をおびた灰色発育上に赤褐色（５ｎｅ）の気菌糸をわ
ずかに着生。裏面は赤灰色で、溶解性色素はうすい赤紫
を呈し、０．０５Ｎ　ＨＣｔ　。

ＮａＯＨによって変色しない。

■グルコース・アスパラギン寒天培地（２８℃培養）無
色の発育上に灰白色（ｂ）の気菌糸を着生するが極めて
貧弱。裏面は、無色。溶解性色素の産生は認められない
。

■グルコース・ツアペック寒天培地（２８℃培養）無色
の発育は貧弱とはいえないが、気菌糸の着生及び溶解性
色素の産生はともに認められない。

■スターチ寒天培地（２８℃培養） うすい灰色の発育上に白色（１３ｈａ）の気菌糸を着生
。裏面はうすい黄土色で、黄土色の溶解性色素の産生が
認められる。

■栄養寒天培地（２８℃培養） 発育は貧弱で無色。気菌糸の産生、溶解性色素の産生は
認められない。

■普通寒天培地（２８℃培養） 発育は貧弱で無色。気菌糸の着生、溶解性色素の産生は
認められない。

■ペプトン・グルコース寒天培地（２８℃培養）無色の
発育は貧弱とはいえないが、気菌糸の着生、溶解性色素
の産生けともに認められない。

■チロシン寒天培地（２８℃培養） 淡褐色の発育上に、灰白色（ｂ）の気菌糸を着生。裏面
は赤味をおびた淡褐色。わずかに褐色の溶解性色素の産
生が認められる。

■パレイシ田片培地（２８℃培養） 発育は吸盤状のシワのあるよく発達した淡褐灰楓。気菌
糸の着生、溶解性色素の産生は認められない。なお８週
間後に灰白色（ｂ）の気菌糸の着生が認められた。

■エフ２フ片培地（２８℃培養） 発育は吸盤状のシワのある淡褐灰色。気菌糸の着生、溶
解性色素の産生は認められない。

■馬血清寒天培地（２８℃培養） 発育は無色で貧弱。気菌糸の着生、溶解性色素の産生は
認められない。

■セルレース寒天培地（２８℃培養） ２週間の観察中、生育は認められない。

■イースト・麦芽寒天培地（２８℃培養）褐灰色の発育
上に、白色（、）の気菌糸を着生。

裏面は褐灰色。溶解性色素の産生は認められない。

■オートミール寒天培地（２８℃培養）無色から黄味の
かかった発育上に白色（、）の気菌糸をわずかに着生。

溶解性色素の産生は認められない。

■ペプトン・イースト・鉄寒天培地（２８℃培養）発育
は無色で貧弱、まれに黄味をおびた灰色（２ｂａ）の気
菌糸を着生。裏面は無色で、溶解性色素の産生は認めら
れない。

Ｏ卵培地（２８℃培養） 発育はきわめて貧弱で無色。気菌糸の着生、溶解性色素
の産生けともに認められない。

■牛乳（Ｌｉｔｍｕｓ　ｍ１ｌｋ　）培地（２８℃培養
）白色系の菌体が沈澱部で生育し、リドマス試薬がわず
かに赤変していることが認められるもののペプトン化、
凝固はともに認めがたい。

■ゼラチン穿刺培養（２８℃培養） わずかに生育が認められるものの、溶解性色素の産生及
びゼラチンの液化はともに認められない。

■ペプトン水（１，０％硝酸塩含有） 無から白色系の菌体が沈澱部に生育し、溶解性色素の産
生は認められない。硝酸還元反応は陽性である。

３、生理的性質 （１）生育温度範囲 イースト・麦芽液体培地を用いて１０〜４５℃の範囲に
おいて試験の結果、最適温度は２８℃付近である。また
生育した菌体容量の比較から、最適温度におけるものに
対して５チ以上生育する温度範囲は１４〜３７℃、３０
％以上では２０〜３３℃であった。

（２）ゼラチンの液化（ゼラチン穿刺培養）液化能は認
められない。

（３）スターチの加水分解（スターチ寒天培地）ルゴー
ル液染色において、プレート全体が赤味を呈することか
ら、アミロースの加水分解は人混にわたるがアミロペク
チンの加水分解能は低い。

（４）脱脂牛乳の凝固及びペプトン化（リドマスミルク
培地） 両者ともに認められ々い。

（５）メラニン様色素の形成 チロシン寒天培地でわずかに産生が認められるがペプト
ン・イースト・鉄寒天培地では認められない。ゼラチン
においても認められない。

（６）炭素源の利用性（プリドハム・ゴツトリープグル
コース、ガラクトースを利用して生育するが、キシロー
ス、フルクトース、アラビノース、シュクロース、イノ
シトール、ラムノース、ラフィノース、マンニ）−ルを
利用しない。

以上の性状を要約すると、８ＡＢ−９３４株はストレプ
トミセス属に属し、気菌糸は単純分岐形で、直線型を永
し、胞子の表面は平滑でおる。種々のがって、本菌は非
クロモジェニック型の菌である。

チロシン寒天培地にわずかのメラニン様色素の生成が認
められる。ゼラチンの液化、脱脂牛乳の凝固及び液化は
陰性で、硝酸塩の還元反応は全て陽性で、スターチの加
水分解能はやや強い。

これらの特徴的性状を有する既知菌種を検索したが、類
似した菌種を見出せなかった。比較的類似していると思
われるものにストレプトミセス・ガルチェリイ（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇａｌｔｉｅｒｉ　）があるが、
こしｔ−パージエイズ・マニュアル・オブ・ディターミ
ナティブ・バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｃｙ’ｓ　Ｍａ
ｎｎｕａｌｏｆ　Ｄｅｔｅｒｒｎｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）　８版、及びワクスマン（Ｗ
ａｋｓｍａｎ　）のジ・アクチノミセテス（ＴｈｅＡｃ
ｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ＠）　２巻・２１５頁（１９６１
）に基いてＳＡＢ　−９３４の性状と比較すると下記の
とおルである。

以上の相違は明らかに種内変異の範ちゅうを超えるもの
である。

〔本発明物質の製造法〕

本発明物質を製造する際に使用される培地は、液状でも
固状でもよいが、通常は液体培地による振盪培養または
通気攪拌培養が便利である。培地は本発明物質生産菌が
生育して培地中に本発明物質を蓄積するものであればど
のようなものでもよい。即ち、炭素源としては、例えば
グルコース、ラクトース、グリセリン、デンプン、シュ
クロース、デキストリン、精密、有機酸類などが、また
窒素源としては、例えばペグトン、カザミノ酸などの蛋
白加水分解物、肉エキス、酵母エキス、大豆粕、コーン
ステイブリカー、アミノ酸類、アンモニウム塩、硝酸塩
その他の各種有機あるいは無機窒素化合物が用いられる
。無機塩として各１１　＋７ン酸塩、硫酸マグネシウム
、塩化ナトリウムを添加してもよく、また茜の生育を促
進する目的でビタミン類、核酸関連化合物などを添加し
てもよい。

なお、シリコン、ポリゾロ−レンゲリコール誘導体、大
豆油などの消泡剤を培地の添加が本発明物質の蓄積量を
増大させるのに効果的な場合もある。

培養にあたっては、いきなル本培養するよシは予め小規
模な前培養を行って得られる培養物を培地に接種するの
が望ましい。培養温度、培養期間、培養の液性などの条
件は、本発明物質の蓄積量が最大となるように適当に選
択、調節されるが、多くの場合、好気的条件下に２５℃
〜３５℃、３〜７日の培養でよく、また培地の液性紘ｐ
Ｈ４〜７に保つのがよい。

このように培養することによシ、培養物中に本発明物質
が生成蓄積される。液体培地を用いて培養した場合は、
主としてその液状部分に目的物が蓄積されるので、培養
物を一旦濾過あるいは遠心分離して菌体を除去した後の
戸液あるいは上清液からこれを分離するのが好ましいが
、必要に応じ菌体を除°去−することなく培養液から直
接目的物を分離することもできる。培養物からの目的物
の分離、精製には、本発明物質の化学的特性に基づく種
々の手段が採択される。即ち、例えば硫酸アンモニウム
等の沈澱剤の添加による沈澱、ｎ−ブタノールなどの水
と任意に混合せず、しかも、本発明物質を溶解しうる有
機溶媒による抽出、メタノール、エタノールなどの極性
の大きい溶媒への溶解、ヘキサンなどで処理することに
よる不純物の除去、セファデックス類によるダル濾過、
イオン交換樹脂、イオン交換セルロース、イオン交換セ
ファデックスなど各種イオン交換体によるイオン交換ク
ロマトグラフィー、活性炭、アルミナ、シリカゲル、ア
ンバーライトＸＡＤ−１，２，ＨＰ−２０などの吸着剤
を用いる吸着クロマトグラフィーなどが有効に用いられ
、これらの手段を適当に組み合わせて使用することによ
シ、本発明物質は粉末状に単離される。但し、これら以
外の方法であっても、本発明物質の特性を有効に利用す
るものであれば適宜使用できる。

〔本発明物質の物理化学的性質〕

１、　元素分析値 （Ｃ２５Ｈ４ｏＮ６０５・４Ｈ２０として）２３分子量
：５０４．６（Ｃ２５Ｈ４ｏＮ６０５として）３、　融
　点：１８４℃−１８８℃（分解）４、比旋光度：〔α
発’−１０，９°（Ｃ＝ｏ、　１３７　ｉｎ　Ｈ２Ｏ）
５、紫外線吸収スペクトル：２７８ｎｍにチロシンに特
異的な吸収が認められる。

６、ＦＤ−ＭＳ：　ｒｒｖ’Ｚ　５０４　（Ｍ＋）７、
　赤外線吸収スペクトル ２９５０（ＣＨ） １６３０　（ａｍｉｄｅ　ｌ　、　ｇｕａｎｉｄｌｎｉ
ｕｍ　）１５４０（ａｍｉｄｅｎ）、１５００（ｐｈｅ
ｎｙｌ）８、核磁気共鳴スペクトル ０．８０ｐｐｍ　（ＣＨｓ、ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ）０−
８３　ｐｐｍ　（ｃ！！３．　ｄ　、　Ｊ　〜６．５　
Ｈｚ　）０−９０　ｐｐｍ　（Ｃ五、　ｄ　、　Ｊ　〜
６．５　Ｈｚ　）０−９４　ｐｐｍ　（Ｃ５、ｄ　、Ｊ
　〜６−５　Ｈｚ　）１、５０　ｐｐｍ　（ＣＨ、ｍ　
） １．７０〜１．９０ｐｐｍ　（５Ｈ，ｍ）２．０９ｐｐ
ｍ　（２Ｈ，ｍ） ２．９４ｐｐｍ　（２Ｈ，ｍ） ３．１５〜４．１２ｐｐｍ　（３Ｈ，ｍ）４、５０〜４
．６５　ｐｐｍ　（２Ｈ、ｍ　）４、９６　ｐｐｍ（０
，５Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝４Ｈｚ　）　５．４２ｐｐｍ（０
，５Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝３Ｈｚ　）６．８０ｐｐｍ　（Ｉ
Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝７．３Ｈｚ　）６．８２ｐｐｍ　（Ｉ
Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝７．３Ｈｚ　）７、ｌｌｐｐｍ　（Ｉ
Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）７．１３ｐｐｍ　（ＩＨ，ｄ
、Ｊ＝７．３Ｈｚ）９、各種溶媒に対する溶解性： 水、メタノール、エタノールに易溶、ブタノールニ可溶
、ベンゼン、エーテル、石油エーテル、クロロホルム、
四塩化炭素、ヘキサン、酢酸エチルには難溶である。

１０、呈色反応： 坂口反応及びトレンズテストに陽性、ニンヒドリン及び
２，４−ジニトロフェニル・ヒドラジンには陰性である
。

１１、構成成分ニ アミノ酸分析によシ、チロシン、バリンを含む。

アミノ酸分析結果 Ｎモル　モル比　アミノ酸数 グリシン　０．１１０　０．０１４　０システイｙ　Ｏ
，１０７０，０１４０ パ　リ　ン　７．７４８　１．００４　１イソ四イ７ン
　０．２３９　０．０３１　０チ四シン　７．７１７　
１．０　１ 〔日立製作所アミノ酸分析計モデル８３５〕以上の物理
化学的分析結果を総合して、本発明物質の化学構造はｌ
５ｏｖａｌｅｒｙｌ　−（Ｔｙｒ　、　Ｖａｌ　）−Ａ
ｒｇｉｎｉｎａｌと構造決定された。

アミノ酸配列： 本物質１〜を１−重炭酸ソーダｏ、ＩＷＬｌに溶解し、
これをキモートリグシン０．０５１Ｖを加えて、４０℃
、１時間反応させた。この反応液２ｏμｔをと、り０．
２５チダンシルクロライド２ｏμｔを加え４０℃、２０
分間反応させた後、減圧乾固し、６礪定塩酸を加え、真
空下１０５℃、２４時間加水分解した。加水分解物を減
圧乾固した後、５０チピリジン溶液に溶解し、これをポ
リアミド薄層を用いて１．５％ギ酸水溶液及びベンゼン
−酢酸（９：１）で２次展開した。これを紫外線ランプ
下で照射したところ、裏面にマーカーとしてつけたＤＮ
Ｓ　−Ｖａｌｉｎｅと一致した。

以上の結果から、本発明物質の化学構造式は下記と決定
された。

Ｈ 〔本発明物質の生理活性〕 ■９本発明物質の酵素阻害活性 測定法 本発明物質と酵素溶液とを混合し、３０℃で５分間プレ
インキュベイトしてから基質溶液を混合して反応を開始
させる。基質として０．５％カゼインを用い、その他に
５ｍＭ塩化カルシウム、１０　ｍＭシスティン及び５０
ｍＭ）リス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，５）を加え、３０℃
で３０分間反応させる。次いで反応液に６．５　％　）
　’）クロル酢酸を加えて反応を停止させ、酵素によシ
加水分解されたカゼインのトリクロル酢酸可溶画分中の
タン／？り量をローリ−・フォリン（Ｌｏｗｙ　−Ｆｏ
ｌｉｎ　）法によシ測定し、対照液との対比から阻害能
をめる。

結果 本物質０．０６μｙは１．２５μｙのパパイン活性を５
０％以上阻害した。同様にカルパインＩ及びカルパイン
Ｉ［［Ｃａｌｃｉｕｍ　ａｎｄ　Ｃｅ１ｌ　Ｆｕｎｃｔ
ｌｏｎ　（Ｗ、Ｙ。

Ｃｈｅｕｎｇ、ｅｄ、　）　Ｖｏｌ　、　３　、　Ａｃ
ａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　ｐ　ＮｅｗＹｏｒｋ（１９
８３）：］に対して夫々１μｇで２５％及び６０％の活
性阻害を示した。

以上によ−り本発明物質は既存のグロテアーゼ阻害剤で
あるロイペプチンと比較してカルパイン■では低いがノ
４パイン及びカルパイン■に対してよシ強い阻害作用を
有し、特徴的なグロテアーゼ阻害剤である。

■１本発明物質の種子に対する作用 試験法 シャーレに本発明物質の水溶液２ｄを湿潤させたＦ紙（
９Ｑｎ径）を敷き、オオムギ（単子葉植物）とキュウリ
（双子葉植物）の種子１０粒づつをおき、これを３０℃
８４時間インキュベートし、各各の種子の発芽、発根の
状態を比較する。

対照区としては、水を用いる。

本発明物質の水溶液の濃度は、２５　、５０　。

１００．５００μｐゴとする。

結果 オオムギでは各濃度において対照区との差は認められな
い。

キュウリでは、２５．５０．１００μｇ〜の濃度では根
の生育が悪く、根毛の発生も抑制され、発芽は全く認め
られなかった。また５００μｆｌ／ｍｌの濃度では、発
芽、発根とも認められなかった。

以上の結果は、本発明物質の選択的除草剤としての用途
の可能性を示すものである。

〔本発明物の製造例〕

ブドウ糖、ペプトン及び酵母エキスから成る合成培地（
ＹＭ培地）　６０００１ｄ（ｐＨ５，８）にＳＡＢ　−
９３４株の純培養物を接種し、小型ジャー中で２８℃７
２時間培養した後、培養物を遠心し、上清をダイヤイオ
７　ＨＰ　−２０のカラム（１４０ｍｎＸ　２００Ｗｍ
）に吸着させ、とのカラムを水２ｏ、ｏｏｏ１ｒＬｌで
洗浄後、メタノール１０，０００１ｍで溶出させた。溶
出物を減圧下に濃縮・乾個させてからこれを水１０００
ｍに溶かし、ＤＥＡＥセルロース（Ｈ型）を充填したカ
ラム（６０＋ａ＋Ｘ１００ａｉ）に通した。これを水１
０００ｍＡ！で洗浄し、先のエルエートと合併して減圧
下に２００ｄ容まで濃縮した。濃縮物を塩酸でｐＨ５，
０に調整し、アンパンイトＣＧ−５０Ｈ＋（イオン交換
樹脂）のカラム（６０＋ｍｎＸ　１０００ｖａ　）に吸
着させた。

コ（７）力７ムヲ水１０００ｄ及び０．２規定酢酸３０
０ｍｌ！で洗浄後、−１，０規定ピリジン・酢酸緩衝液
ｐＨ５，０゜１００１ｎｌで溶出させ、溶出液を減圧・
濃縮し、乾個物を酢酸０．５チを含む５０％メタノール
溶液３罰に溶かしてセファデックスＬｌ（−２０のカラ
ム（３０ｍ＋Ｘ１８５０ｍ）に負荷し、酢酸０．５チを
含む５０％メタノール溶液１０１００Ｏで、溶出分画し
、活性分画を集めた。活性は全１００個の分画中筒６９
〜第７９番目のものに現われた。・活性分画を合併しく
計１１０コ）、濃縮・乾個させてから水２ｒＩＬｌ中に
溶かし、これをセファデックスＧ−２５のカラム（２０
ｓ＋Ｘ４７０ｍｍ）に負荷し、水６００ｄで洗浄後、１
．２％酢酸６００ｄで溶出分画した。活性部分は全１０
０個の分画中筒２５〜第２７番目の分画であった。この
活性分画を濃縮・乾個させることによシ、はぼ純粋な本
発明物質３７１１４１７が無色の無定形物質として得ら
れた。

特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １．事件の表示 昭和５８年特許願第１１６６１６号 ２、発明の名称 新規なペノチド ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住所　大阪市北区堂島浜２丁目１番４０号名称　（１９
０）サントリー株式会社 代表者佐治敬三 ４、代理人 住所　東京都港区元赤坂１丁目２番３号サントリー株式
会社特許室 （電話　４７０−１１３１　） ６、補正の内容 （１）　明細書の「特許請求の範囲」を別紙のとおり改
める。

（２）明細書の第１頁下２行目：「残有を示す。」とあ
るのを「残基を示す。」に改める。

（３）明細書の第７頁、１３行行目：０ペゾトン水（１
，０％硝酸塩含有）」とあるのを「のペゾトン水（１，
０％硝酸塩含有）（２８℃培養）」に改めるう （４）明細書の第９頁、１５〜１６行目：「硝酸塩の還
元反応は全て陽性で」とあるのを「硝酸塩の還元反応は
陽性で」に改める。

（５）明細書の第１１頁、表中、発育の色の項目の「黄
色〜淡黄色」とあるのを「黄色〜淡灰色」と改める。

（６）　明細書の第１２頁、１４行行目：コーンステイ
ブリカー」とあるのを「コーンステイブリカー」に改め
る。

（７）　明細書の第１３頁、１８行目：「培養物からの
」とあるのを「培養液からの」と改める。

（８）明細書の第１３頁、２０行目〜明細書の第１４頁
、２行目：「即ち、例えば硫酸アンモニウム等の沈澱剤
の添加による沈澱、ｎ−ブタノールなど」とあるのを「
即ち、例えば、ｎ−ブタノールなど」と改める。

（９）明細書の第１５頁、下から１０行目：ｒＦｎ−Ｍ
Ｓ　：　ｍ／Ｚ　５０４　（Ｍ＋）　Ｊとあるのをｌ’
−ＦＤ−ＭＳ：ｍＨｚ　５０５　（Ｍ＋１　）＋Ｊと改
める。

αＧ　明細書の第１６頁、１９行〜２０行目：「坂口反
応及びトレンズテストに陽性、ニンヒドリン及ヒ２，４
−ジニトロフェニル・ヒドラジンには」とあるのを「坂
口反応、パクリ反応及びトレンズテストに陽性、ニンヒ
ドリンには」と改める。

０■　明細書の第２１頁、２行目：［ブドウ糖、ペプト
ン及び酵母エキスから」とあるのを「プドーウ糖、ペプ
トン、マルトエキス及び酵母エキスから」に改める。

（ロ）　明細書の第２１頁、１０行目：　ｒ　ＤＥＡＥ
セルロース（Ｈ型）を」とあるのをｒ　ＤＥＡＥセルロ
ース（ＯＨ型）を」と改める。

０埠　明細書の第２１頁、１４行〜１５行目二「アンパ
ライトＣＧ−５０Ｈ＋（イオン交換樹脂）のカラム（６
０ｓ＋Ｘ１０００閣）に」とあるのを「アンバーライト
ＣＧ−’５０（Ｈ型）のカラム（６０間×１００瓢）に
」に改める。

ａ＜　明細書の第２１頁、１８行目：ｒ１０ｏｍｌで溶
出させ、」とあるのをｒｌｏｏｏｍｌで溶出させ、」と
改める。

７、添付書類の目録 （１）別　紙　１通 〔別紙〕 「２、特許請求の範囲 構造式 （但し、上式中のｌ５ｏｖａｌｅｒｙ＋はインバレリル
基を表わし、Ｔｙｒ及びＶａｌ　はそれぞれチロシン及
びバリンの残基を示す。）で表わされる新規なペプチド
。」

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 構造式 （但し、上式中ｌ５ｏｖａｌｅｒｙｌ　Ｉｄ、インバレ
   リル基を表わし、Ｔｙｒ及びＶａｌはそれぞれチロシン
   及びバリンの残有を示す。）で表わされる新規なペプチ
   ド。