JPS6188887A - 酵素法１−ｏ−アルキル−２−アシルグリセロリン脂質誘導体の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は１−０−アルキル−２−アシル−グリセロリン
脂質ＣＩ　−０−Ａｌｋｌｌｌ　−２−ａｃｙｌ　−ｓ
ｎ　−ｇｌｙｃｅｒｏｌ　−３−ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐ
ｉｄ　；以下ＡＧＥｐＬと略称する。〕を出発基質とし
て、従来酵素法によって製造出来ることの知られていな
かったＡＧＥＰＬ誘導体の製造を可能にした酵素法ＡＧ
ＥＰＬ誘導体の製法に関し、該誘導体は例えば血圧降下
剤、抗炎症剤、血管透過性亢進剤、抗腫瘍性剤等の生理
活性物質として有用な酵素法ＡＧＥｐＬ誘導体の製法に
関する息災に詳しくは従来酵素法で使用されたキャベツ
由来のホスホリパ−ゼＤ（至適温度４０℃以下、至適ｐ
Ｈ５，４〜５．６）とは異って至適温度６Ｏ−７０℃、
至適ｐＨ７付近のホスホジノ９−ゼＤＭの存在下で、４
ＧＥＰＬとアルコール性水酸基含有化合物とを反応させ
るＡＧＥＰＬ誘導体の製法に関する。

尚、本発明に於て１．４ＧＥｐＬ誘導体とは出発物質で
あるＡＧＥＰＬのリン酸構造部分と極性側アルコール構
造部分とのエステル結合を、ホスホリパーゼＤＭの作用
で加水分解すると同時に、上記反応に用いるアルコール
性水酸基含有化合物を転移させて誘導した、出発ＡＧＥ
ＰＬとは極性側において異る新しいＡＧＥＰＬ誘導体を
意味する。

特に、本発明は、下記式（Ｉ） ｌ′ 但し式中Ａは下記（１） ＣＭ、−０−Ｒ１ ＣＨ−０−ＣＯ−Ｒ，・・・・・・・・・（１）ＣＨ，
− を示し、ここでＲ２はα、β位に２重結合を持たない飽
和もしくは不飽和のＣ１〜Ｃ！。

の脂肪族炭化水素を示し、Ｒ２は飽和もしくは不飽和の
０１〜Ｃ１１の脂肪族炭化水素を示し　７／はオキシド
アニオン又は水０＋ 基を示し、Ｂは−（ＣＨｘ）ｔＮ　（ＣＨｓ）ｓ、（Ｃ
ｉｔ　）　ｔ　Ａ’Ｈ２、−ＣＭ、ＣＭ（ＨＥ、）ＣＯ
ＯＫ。

−ＣＨ，・ＣＨＯＨ−ＣＭ、ＯＨ，−ＣＨＩＣＭ、ＮＨ
（ｃＨｓ　）、−ＣＨ，ＣＨ，Ｎ　ＣＣＨ，）、もしく
は−ＣＣＨｌ）、、Ｈ（ここでｍは１〜５の数を示す〕
で表わされるリン脂質と下記（１）〜（３）（１）　　
ハロゲン、アミン基、カルボキシル基及び水酸基よシな
る群からえらばれた置換基を有してもよい飽和もしくは
不飽和のＣ６〜Ｃ２６の脂肪族炭化水素残基； 一級アルコール性ＯＨに結合した鎖状の側鎖を有するＣ
７〜Ｃ１，の芳香族炭化水素残基、ここで該芳香族炭化
水素残基の芳香族頂部分はハロゲン、アミン基、カルボ
キシル基及び水酸基よりなる群からえらばれた置換基を
有していてもよい； 一級アルコール性ＯＨに結合した側鎖を有する０６〜Ｃ
１゜の脂環式炭化水素残基；分子内にエーテル結合、エ
ステル結合、及。

びアミド結合からえらばれた結合を有し、且つハロゲン
、アミノ基、カルボキシル基及び水酸基よシなる群から
えらばれた置換基を有してもよい飽和もしくは不飽和の
０６〜Ｃ１６の脂肪族炭化水素残基； 分子内にエーテル結合、エステル結合・及びアミド結合
からえらばれた結合を有し且つ一級アルコール性ＯＨに
結合した鎖状側鎖を有するＣ７〜Ｃ１ｏの芳香族炭化水
素残基、ここで該芳香族炭化水素残基の芳香族環部分に
はハロゲン、アミン基、カルボキシル基及び水酸基より
なる群からえらばれた置換基を有していてもよい； 及び 一級アルコール性ＯＨに結合した鎖状側りを有し且つ下
記複素環 フラン環、テトラヒドロフラン環、ソ オキソラン項、チオフェン環、♂ロリ ジン環、イミダゾール環、イミダゾー ル環、オキサゾール環、チアゾール 環、ビラン環、オキサン環、チアン環、ぎリジン環、ビ
ペラソン環、ビペリソ ン項、ピリミジン環、トリアジン環、 モルホリン環、インドール環、プリン 環、フタルイミド環、テトラヒドロフ タルイミド環、ベンゾオキソラン環及 びヘキサメチレンイミン環 よりなる群からえらばれた複素環を持つ複素環−級アル
コール化合物残基、ここで該残基の複素環部分は０１〜
Ｃ，アルキル基、Ｃ３〜Ｃ，アルキレン基、水酸基、オ
キソ基、カルボキシル基、カルビニル基、ノーロダン、
アミン基、ペンツル基、フェニル基及ヒＣ、〜Ｃ８のア
ルキレンスルホン酸基より成る群からえらばれた置換基
を有してもよい； から成る群よりえらばれた残基を有する一級アルコール
化合物。

（２）　　ハロケ中ン、アミン基及びフェニル基よシ成
る群からえらばれた置換基を有していてもよい飽和もし
くは不飽和のＣ１〜Ｃ１゜の脂肪族炭化水素残基； 環に直接結合した２級アルコール’ＱＯＨを有するＣ４
〜Ｃ８の脂環式炭化水素残基；環に直接結合した二級ア
ルコール性ＯＨを有し、且つぎベリジン環、ビロリソン
珀及びオキサン環よシなる群からえらばれた複素環を持
つ複素環二級アルコール化合物残基、 ここで該残基の複素環部分は０１〜Ｃ５のアルキル基及
び水酸基よシ成る群からえらばれた置換基を有してもよ
い； から成る群よシえらばれた残基を有する２級アルコール
化合物、 （３）　　アミン基、アセチルアミノ基、メチルニトロ
ンウレイド基、０１〜Ｃ５のアルキル基、フェニル基、
フェノール基、ヒドロキジメチルフェニル基、ニトロフ
ェニル基、メルカプト基、メチルメルカプト基、フェニ
ルメルカプト基、ニトロフェニルメルカプト基、ハロケ
°ン、カルボキシル基、リン酸基、ピリツル基、ピリミ
ジル基、トリアジル基、プリン基及び８−アザプリン基
からえらばれた置換基を有してもよいペントース残基、
ヘキソース残基、これらの２糖類残基、デオキシペント
ース残基、デオキシヘキソース残基、ヘプトース残基よ
シ成る群からえらばれた糖残基、ただし上記と於て、置
換基がピリジル基、ピリミジル基、トリアジル基、プリ
ン基及び８−アザプリン基からえらばれた置換基である
場合には、該置換基はメルカプト基、ノ・ログン、水酸
基、オキソ基、カルボキシル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ５
のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、カルがキシメ
チル基、アセチル基及びアニソイル基よシなる群からえ
らばれた置換基で更に置換されていてもよい、よυえら
ばれた糖残基を有する糖化合物、からえらばれたアルコ
ール性水酸基含有化合物とをホスホリノ々−ゼＤＭの存
在下で反応させることを特徴とする下記式（６） ％式％ 但し式中Ａ及びｌ′は上記したと同義であシ、Ｃは上記
（１）〜（３）における残基を示す、で表わされる１−
０−アルキル−２−アシルグリセロリン脂質誘導体、及
びその塩類の製造法に関する。

従来、ホスホリパーゼＤが、リン脂質たとえばホス７ア
チソルコリンのコリン塩基−リン酸エステルを加水分解
し、遊離塩基とホスファチゾン酸を生ずる反応を触媒す
ることが知られているＣＭ。

Ｋａｔｇｓ　Ｃａｎ、　７．　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ｐｈ
ｙｓｉｏｌ、　３２５７１　（１９５４）］。

更に、リン脂質たとえばレシチンとエチルアルコールと
をホスホリノ々−ゼＤの存在下に反応させると、リン脂
質のリン酸構造部分と該リン脂質のアルコール構造部分
とのエステル結合が加水分解されると同時にホスファチ
ジル基転移作用により、ホス７アチソルエタノールを生
成することが報告されている〔Ｒ，Ｍ、　Ｄａｔｂｓｏ
ｎ　ＨＢｔｏｃｈｅｍ、　Ｊ、。

１０２．２０５（１９６７））：［：Ｓ、Ｆ、］’ｃｙ
ＬｇＨ７、Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　２４２　、４７
７　（１９６７））。

上述のようなホスホリンや−ゼＤのホスファチジル基転
移作用が知られて以来、この分野における研究が進めら
れ、英国特許ＮＬｌｌ、５８１，８１０　（対応西ドイ
ツ国公開Ｎα２７１７５４７）の提案が知られている。

この提案によれば、この提案の一般式で示されたリン脂
質と、水酸基、ハロゲン、アミンその他の置換基で置換
されていてもよいＣ６までの直鎖もしくは分枝のアルキ
ル基を有する一級アルコールとの前記キャベツ由来のホ
スホリパーゼＤの酵素作用を利用した一級アルコール転
移反応について開示されている。そして、該反応は、５
を超える炭素原子を含有しない一級アルコールでのみ起
り、若し、５を超える炭素原子を含有する該アルコール
の場合には、反応の主生成物は対応するホスファチゾン
酸であると記載されている。

更に、該提案にはアルコール成分の選択は、上記の要求
を満した一級アルコールである限りとくべつな制約のな
いことも記載されている。

又、上記提案の発明者等であるＳ、Ｋｏταｔｃ＄υ及
びＨ，Ｅｉｂｌ等は、Ａｄｖ、　Ｅｚｐ、　Ｊｈｄ、　
Ｂイｏ１１Ｖｏ１．ｌｏｔ　、２２１　（１９７８）に
於て、ホスホリ・臂−ゼＤの酵素作用を利用した一級ア
ルコール転移反応について、Ｃ１−Ｃｔｓのアルカノー
ルでは転移反応が認められないがＣ０のヘキサノールに
ついては２０％の転移反応が生じたと報告しティる。一
方、Ｒｏｋｈｉｍｏｖ、　Ｍ、　Ｍは、Ｕｚｂ。

Ｂｉａｓ、　Ｚｈ、、　Ｖｏｌ、　３　、６−９　（１
９７９）に於て、０１以上のアルコール例えばＣ８のヘ
キサノールについては転移反応は起らなかったと報告し
ている。

ＲｌＪ（、Ｄａｗａｏ％は、　リン脂質としてレシチン
を用い、糖類として、シュクロース、グルコース及びガ
ラクトースを夫々用い、キャベツ由来の公知ホスホリパ
ーゼＤによる実験の結果、レシチン基質のホスファチジ
ル基のこれら糖類への転移は起らなかったことを報告し
ている（　Ｂｔｏｃｈｅｍ。

Ｊ、τｏＪ、１０２．２０５〜２０９　（１９６７）〕
。

又、Ｓ、　Ｆ、　Ｙａｎｇは、クルコース及ヒイノシト
ールを用いて上記と同様な実験の結果、糖類への転移は
起らなかったことを報告している〔Ｊ。

Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　ｖｏｌ、　２４２．４７７
−４８４（１９６７）：）。

上述のように、従来ホスホリパーゼＤによるリン脂質と
アルコールとの間の転移反応は、−級アルコールとくに
炭素原子数の比較的小さな単純な構造からなる主に鎖状
の一級アルコールの場合にしか生起せず、ましてや糖類
との間にはペン）　−ス、ヘキソース共に生じないとい
うのがこれまでの技術常識であみ。

又上記英国特許１’ｋ１５８１８１０の請求の範囲に示
された基質リン脂質の範囲の中に本発明で用いる基質、
４ＧＥＰＬも包括概念としては含まれ得るが、具体的開
示は全くなされていない。更に、Ｃｓ以下の一級鎖状ア
ルコール化合物を転移することが開示されているだけで
ある。

更にＡＧＥＰＬを基質とする従来のホスホソノ９−ゼＤ
を用いた転移反応については、１−Ｏ−アルキル−２−
７セチルー８ｎ−グリセロ−３−ホスホリルコリンを基
質とし、受容体アルコールとしてエタノール（Ｃ１）、
２−アミノエタノール塩酸（Ｃ３）、Ｎ−メチル−２−
アミノエタノール塩酸（Ｃ３）、Ｎ、Ｎ−ジメチル−２
アミノエタノール塩酸＜ｃａｔを用い、ホスホリパーゼ
Ｄを作用させて転移物を誘導した報告がある〔Ｋ。

５ａｔｏｕｃｈｉ　ａｔＣ，／、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅ
ｍ、、　　２５６　。

４４２５、（１９８１）”）。

しかしこむに示されているのはいずれもＣ２以下の一級
アルコールを対象としたものであシ、Ｃ１以上の一級ア
ルコール化合物や糖、更には二級アルコール化合物につ
いて転移反応が、認められたという報告は全くない。

又、本発明者等は、従来公知のキャベツ由来ホスホリパ
ーゼＤとは、その至適温度、至適ｐＨ９で異なるホスホ
リパーゼＤ生産能を有する微生物の存在を発見して、既
に、特開昭５８−６３３８８号、特開昭５８−６７１８
３号に提案した。

この提案の中で、該ホスホリパーゼＤ生産菌よシ得られ
る該ホスホリ・々−ゼＤ〔本発明においてはホスホリパ
ーゼＤＭと呼ぶ〕はＣ３以下の一級アルコール化合物を
包含し従来全く言及されたことのない広範囲なアルコー
ル化合物に対してリン脂質を転移させる作用を持つこと
が記載されている。そしてその中で基質となるリン脂質
としては、ジアシルエステル型グリセロリン脂質、ＣＭ
、０ＣＯＲ。

Ｈ Ｃ１ｌ、−０−ＣＯＲ。

Ｈ ＣＭ！−０−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ。

シクロアルキリデン型グリセロリン脂質ＣＭ、−０−Ｒ
。

ＣＨ２−０−Ｒ 番 Ｈ 及び、スフィンゴリン脂質が記載され、具体的に示され
ているのはレシチン、リゾレシチン、βｔｒ−ノへキサ
デシル−Ｌ−α−レシチン、スフィンゴミエリンのみで
ある。

又これらの基質のうちプラスマローダン型グリセロリン
脂質は、α、β位に２重結合を持つアルキル基を有し、
且つアシル基として、Ｃ８６以上の脂肪酸エステルを有
する（　Ｍ、　Ｆ、　Ｆｒｏｓｏｌｏｎｏ。

Ｊｆ、　Ｍａｒｓｈ、　Ｃｈｔｍ、　ｐｈｙｓ、　Ｌｉ
ｐｉｄｓ、、　１０　。

２０３　（１９７３）　、　Ｅ、　Ｌ、　Ｇｏｔｔｆｒ
ｉｇｄ、　Ｍ、Ｍ。

Ｒａｐｐｏｒｔ、　Ｊ、　Ｅｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　
２３７　、３２９（１９６２）１点で、本発明で用いら
れる基質であるＡＧＥＰＬとは本質的に異る。

本発明者等はホスホリパーゼＤＭを用いて、更に詳しく
研究を進めた結果、該ホスホリパーゼＤＭはＡＧＥｐＬ
を基質とした場合、０４以下の一層アルコールを包含し
、従来転移反応が起ることの知られていなかったＣ３以
上の一層アルコール化合物や、糖、更には２級アルコー
ル化合物のような前記ｆｌ）　−＋３１のアルコール性
水酸基含有化合物との転移反応を可能とする酵素的触媒
作用を示すという驚くべき事実を発見した。

本発明者等の研究によれば、前記式（Ｉ）　ＩＪン脂質
と例えばＣＩ。−級アルコールであるゲラニオール、更
に糖としてリポース、グルコースとの間における式＠、
４ＧＥｐＬ誘導体の形成を触媒とする本発明において新
たにホスホリパーゼＤＭと呼称する酵素が存在し、この
ホスホジノ４−ゼＤＭの存在下に、式（Ｉ）で表わされ
るリン脂質と各種アルコール性水酸基含有化合物とを反
応させることにより、従来製造できることの知られてい
なかったＡＧＥｐＬｆ３導体を包含して広範囲のＡＧＥ
ＰＬ誘導体が製造できることが発見された。

斯くて、煩雑且つ不利益な化学的合成手段を要すること
なしに、温和且つ容易な東件及び手段で、副反応を伴う
おそれもなしに、酵素法によって新しいＡＧＥＰＬ誘導
体を好収率で製造できることがわかった。

従って、本発明の目的は新しい酵素法ＡＧＥＰＬ誘導体
の製法を提供するにある。

本発明の上記目的及び更に多くの他の目的ならびに利点
は、以下の記載から一層明らかとなるであろう。

本発明方法で利用する原料リン脂質は下記式（Ｉ）で表
わされる。

Ａ−０−Ｐ−０−Ｂ　　　　・・・・・・・・・（Ｉ）
Ａ′ 但し式中Ａは下記（ｉ） ＣＭ、−０−Ｒ。

ＣＨ−０−ＣＯ−Ｒ，・・・・・・・・・（１）ＣＭ、
　− を示し、ここでＲ４はα、β位に２重結合を持たない飽
和もしくは不飽和のＣ６〜Ｃ２６ｇの脂肪族炭化水素を
示し、Ｒ２は飽和もしくは不飽和のＣ３〜Ｃ３の脂肪族
炭化水素を示し　４１はオキイド＋ アニオン又は水酸基を示し、Ｂは−（ＣＨ＊）ｔＮ　（
（’Ｈｓ）　ｓ、−（ＣＨ２）、ＮＨ，、−ＣＭ、　Ｃ
Ｈ（ＨＥ、　）　Ｃ００Ｋ　。

−ＣＨ，・ＣＨＯＨ−ＣＭ、ＯＨ，−ＣＨ，ＣＨ，ＮＨ
＜ＣＨ，）、−ＣＨ，ＣＨ，Ｎ　（ＣＨ３）　、もしく
は−（ＣＨ＊）−Ｅ　にこで兜は１〜５の数を示す〕で
表わされる。

上記式（Ｉ）原料リン脂質はほとんど公知化合物であっ
て、市場でも入手可能でアシ、それ自体公知の方法によ
って合成することができる。例えば、牛心臓よυ抽出し
たプラスマローグンを接触還元した後、アルカリ水解し
、得られた１−アルキルリゾリン脂質をアセチル化して
調製出来る他、Ｔ、　ｈｆＵＲＡｌｄ、４ＴｓＵ、　　
ｅｔｃ、　Ｃｈｅｍ、　ｐｈｙ、　Ｌｉｐｉｄ、。

２９　＋　１２１　（１９８１）　＋　Ｍ−Ｏｈｎｏ　
ｅｔｃ。

Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ、、　２３　、３５
０７　（１９８２）の雑文に基づき合成する事が出来る
。本発明方法に於て、上記式（Ｉ）原料リン脂質とホス
ホリパーゼＤＭの存在下に反応せしめるアルコール化合
物としては以下に例示するｆｌ）　−＋３）のアルコー
ル性水酸基含有化合物を利用することが出来る。

（１）−級アルコール化合物として下記の化合物をあげ
られる。

ハロゲン、アミン基、カルボキシル基及び水酸基よシな
る群からえらばれた置換基を有してもよい飽和もしくは
不飽和のＣ０〜Ｃ２，の脂肪族炭化水素残基； 上記において置換基を有しない場合は、Ｃ６〜Ｃ２６の
脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例としてはｌ−ヘ
キサノール、１−オクタツール、１−ノナール、ｌ−デ
カノール、１−ウンデカノ−′ル、１−ドデカノール、
１−テトラデカノール、ｌ−ヘキサデカノール、ｌ−オ
クタデカノール、１−ドコサノール、１−エイコサノー
ル、１−へキサコサノール、２−エチル−１−ヘキサノ
ール、ｒラニオール、シトロネロール、ファルネソール
、フィトールなどがあげられる。

上記において置換基としてハロケ゛ンを有する場合は、
Ｃ６の脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例としては
６−クロロ−１−ヘキサノールなどがあげられる。

上記において置換基としてアミン基を有する場合は、Ｃ
６〜ＣＯＯの脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例と
しては６−アミノ−１−ヘキサノール、トリエタノール
アミン、Ｎ−（３−アミノプロピル）Ｃ）エタノールア
ミン、スフィンゴシン、Ｎ−プチルソエタノールアミン
、Ｎ−エチルヘキ・サノールアミン、Ｎ−プロピルグロ
ノぞノールアミン、Ｎ−プロピルヘキサノールアミン、
Ｎ−ブチルエタノールアミン、Ｎ−ブチルヘキサノール
アミン、Ｎ−ペンチルエタノールアミン、Ｎ−ヘキシル
エタノールアミン、Ｎ、Ｎ−ツブチルエタノールアミン
、Ｎ、Ｎ−ノエチルエタノールアミン、Ｎ、Ｎ−ジエチ
ルペンタノールアミン、Ｎ、Ｎ−ジゾロビルエタノール
アミン、Ｎ、Ｎ−ツブチルヘキサノールアミン、Ｎ、Ｎ
−ジヘキシルエタノールアミン、Ｎ、Ｎ−ジメチルエタ
ノールアミン、Ｎ、Ｎ、Ｎ−トリメチルプロパツールア
ミン、Ｎ、Ｎ、Ｎ−トリメチルヘキサノールアミン、Ｎ
。

Ｎ、Ｎ−トリエチルブタノールアミン、Ｎ、Ｎ。

Ｎ−トリプロピルエタノールアミン、Ｎ、Ｎ、Ｎ−）　
ＩＪゾロピルペンタノールアミン、Ｎ、Ｎ、Ｎ−トリブ
チルヘキサノールアミン、Ｎ、Ｎ、Ｎ−トリペンチルエ
タノールアミンなどがあげられる。

上記において置換基としてカルボキシル基を有する場合
は０６〜”１６の脂肪族炭化水素残基が好ましく、その
例としてはソヒドロキシエチルグリシン、グルコン酸、
１６−ヒトロキシヘキサデカン酸、グルコン酸、ガラク
トン酸などがあげられる。

上記において置換基として水酸基を有する場合は０６〜
’１６の脂肪族炭化水素残基が好ましくその例としては
１，６−ヘキサンジオール、１，８−オクタンジオール
、１．１０−デカンジオール、１．９−ノナンジオール
、１，１２−ドデカンジオール、１．１６−ヘキサジカ
ンジオール、ｌ。

２．６−ヘキサグリセール、ソルビトール、マンニトー
ル、ガラクチトール、ソルビト−ル、トリグリセロール
、ペンタグリセロール、ヘキサグリセロール、ソペンタ
エリスリトール、１．１゜１−　）　ＩＪス（ヒドロキ
シメチル）プロパン、３゜３−ビス（ヒドロキシメチル
）へブタン、２−ｎ−フチルー１．３−７’ロノ卆ンジ
オール、２−エチル−１，３−ヘキサンジオールなどが
あげられる。

−級アルコール性ＯＨに結合した鎖状の側鎖を有するＣ
１〜Ｃ１゜の芳香族炭化水素残基、ここで該芳香族炭化
水素残基の芳香族頂部分はハロゲノ、アミノ基、カルボ
キシル基及び水酸基よりなる群からえらばれた置換基を
有していてもよいニー上記において、置換基を有しない
場合は０７〜Ｃ１，の芳香族炭化水素残基が好ましく、
その例としてはベンジルアルコール、β−フェネチルア
ルコール、３−フェニル−１−プロノ々ノール、ケイ皮
アルコール、２−ナフタリンエタノールなどがあげられ
る。

上記において置換基としてハロゲノを有する場合はＣ１
〜Ｃ２゜の芳香族炭化水素残基が好ましく、その例とし
てはクロロベンシルアルコール、０゜０−ビス（２−ヒ
ドロキシエチル）テトラブロムビスフェノールなどがあ
げられる。

上記において置換基としてアミノ基を有する場合はＣア
〜Ｃ１，の芳香族炭化水素残基が好ましく、その例とし
てはＰ−アミノフェネチルアルコール、Ｎ−エチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシエチル）−ｍ−トルイジン、β−ヒ
ドロギキシチルアニリン、Ｎ−（２−シアンエチル）−
Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アニリン、Ｎ−フェニル
ソエタノールアミンなどがあげられる。

上記において置換基としてカルボキシル基を有する場合
は、Ｃ８〜”＋２の芳香族炭化水素残基が好ましく、そ
の例としては、２−ヒドロキシエチルサルチル酸などが
あげられる。

分子内にエーテル結合、エステル結合、及びアミド結合
からえらばれた結合を有し、且つハロゲノ、アミン基、
カルボキシル基及び水酸基よりなる群からえらばれた置
換基を有してもよい飽和もしくは不飽和のＣ０〜Ｃ２Ｂ
の脂肪族炭化水素残基：上記においてエーテル結合を有
する場合はＣ６〜Ｃ２，の脂肪族炭化水素残基が好まし
く、その例としてはトリエチレングリコール、ペンタエ
チレングリコール、デカエチレングリコール、エチレン
グリコールモノラウリルエーテル、ジエチレングリコー
ルモノラウリルエーテル、エチレングリコールモノセチ
ルエーテル、ジエチレングリコールモノセチルエーテル
、エチレングリコールモノステアリルエーテル、ジエチ
レングリコールモノステアリルエーテル、エチレングリ
コールモノプチルエーテル、エチレングリコールモノ（
２−ソエチルアミノエチル）エーテル、エチレンクリコ
ールモノヘキシルエーテル、エチレングリコールモノト
リルエーテル、ジエチレングリコールモツプチルエーテ
ル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチ
レングリコールモノヘキシルエーテルなどがあげられる
。

上記においてエステル結合を有する場合ｒｄ　Ｃａ〜Ｃ
２’ｒの脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例として
は、モノラウリン、モノオレイン、１，２−ツカプリン
、メタクリル酸−２−ヒドロキシエチル、エチレングリ
コールモノラウレート、ソエチレンダリコールモノラウ
レート、エチレングリコードモノステアレート、ジエチ
レングリコールモノオレート、エチレングリコールモノ
ノ母ルミテート、ソエチレングリコールモノノぐルミチ
ートナどがあげられる。

上記においてアミド結合を有する場合はＣ３〜Ｃ１゜の
脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例としては／４ン
トテニルアルコール、パンテティン、トリーニーセリン
、Ｌ−セリル−Ｌ−ロイシン、Ｌ−セリル−Ｌ−メチオ
ニン、Ｌ−セリル−Ｌ−アルギニン、Ｌ−セリル−Ｌ−
グルタミン、ラウリルジェタノールアミド、ステアリル
ジェタノールアミド、トリオキシエチレンラウリルアミ
ド、ノぐルミチン酸ゾエタノールアミド、ラウリル硫酸
トリエタノールアミン、テトラオキシエチレンラウリル
エーテル硫酸トリエタノールアミン、Ｎ−カプロイルエ
タノールアミン、Ｎ−５ウロイルエタノールアミン、Ｎ
−バルミトイルエタノールアミン、Ｎ−ステアロイルエ
タノールアミン、Ｎ−オレオイルエタノールアミンなど
があげられる。

分子内にエーテル結合、エステル結合及びアミド結合か
らえらばれた結合を有し、且つ一層アルコール性ＯＨに
結合した鎖状側鎖を有するＣ１〜Ｃ２゜の芳香族炭化水
素残基、ここで該芳香族炭化水素残基の芳香族環部分に
はハロダン、アミノ基、カルブキシル基及び水酸基よシ
なる群からえらばれた置換基を有していてもよいニー 上記において、エーテル結合を有する場合には、Ｃ８〜
Ｃ１゜の芳香族炭化水素残基が好ましく、その例として
は１，４−ゾ（２−ヒドロキシエトキシ）ベンゼン、ア
ニスアルコール、エチレングリコールモノフェニルエー
テル、エチレングリコールモノオクチルフェノールエー
テル、ジエチレングリコールモノオクチルフェノールエ
ーテル、エチレングリコールモノノニルフェノールエー
テル、ジエチレングリコールモノノニルフェノールエー
テル、エチレングリコールモノクロロフェニルエーテル
、エチレングリコールモノトリルエーテル、メフエネシ
ンなどがあげられる。

上記においてエステル結合を有する場合にはＣ１〜Ｃ１
ｍの芳香族炭化水素残基が好ましく、その例としてはセ
リンベンジルエステルなどがあげられる。

上記においてアミド結合を有する場合にはＣ８〜Ｃ４の
芳香族炭化水素残基が好ましく、その例トシてはＬ−セ
リル−Ｌ−チロシン、Ｌ−セリル−Ｌ−フェニルアラニ
ンなどがあげられる。

−級フルコール性ＯＨに結合した側鎖を有する０６〜Ｃ
２゜の脂環式炭化水素残基ニー上記においては、シクロ
ヘキシル残基が好ましくその例としては１，４−ジヒド
ロキシメチルシクロヘキサン、３−シクロヘキシル−１
−グロパノールなどがあげられる。

一層アルコール性ＯＨＩ／Ｃ結合した鎖状側鎖を有し且
つ下記複素環 フラン環、テトラヒドロフラン環、ソオキソラン環、チ
オフェン環、キロリソン環、イミダゾール環、イミダゾ
リジン環、オキサゾール環、チアゾール環、ぎラン環、
オキサン環、チアン環、ピリジン環、ピペラゾン環、ピ
ペリジン環、ピリミジン環、トリアジン環、モルホリン
環、インドール環、プリン環、フタルイミド環、テトラ
ヒドロフタルイミド環、ベンゾオキソラン環、及びヘキ
サメチレンイミン環、 よシなる群からえらばれた複素環を持つ複素環−級アル
コール化合物残基、ここで該残基の複素環部分は０１〜
Ｃ３アルキル基、Ｃ８〜Ｃｓアルキレン基、水酸基、オ
キソ基、カルボキシル基、カルｄｅ　＝　Ａ／　基、ハ
ロゲノ、アミノ基、ペンツル基、フェニル基及び０１〜
Ｃ３のアルキレンスルホン酸基より成る群からえらばれ
た置換基を有してもよい： 上記において置換基を有しない場合は、フラン環、テト
ラヒドロフラン環、チオフェン環、ピロリシン環、イミ
ダゾール環、オキサン環、ピリジン環、ピペラゾン環、
ピペリジン環、モルホリン環、インドール環、フタルイ
ミド環、テトラヒドロフタルイミド環、ベンゾオキソラ
ン環及びヘキサメチレンイミン環、が好ましく、その例
としては、Ｎ−ヒドロキシエチルピリジン、２−（２−
ヒドロキシエチル）ピリジン、２−ヒドロキシメチルピ
リジン、３−ヒドロキシメチルピリジン、４−ヒドロキ
シメチルピリジン、２−（３−ヒドロキシプロピル）ピ
リジン、３−（３−ヒドロキシプロピル）ピリジン、４
−（３−ヒドロキシプロぎル）ピリノン、Ｎ−（２−ヒ
ドロキシエチル）ビペラソン、２−’（４−ピリツル）
−アリルアルコール、Ｎ−＜２−ヒドロキシエチル）ビ
ペリソン、２−（２−ヒドロキシエチル）ビペリソン、
２−ヒドロキシメチルぎベリジン、３−ヒドロキシメチ
ルぎベリジン、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ビロリソ
ン、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）へキサメチレンイミ
ン、２−チオフェンメタノール、２−チオフェンエタノ
ール、＃−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン、Ｎ−
（２−ヒドロキシエチル）フタルイミド、Ｎ−ヒドロキ
シメチルフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシメチルテトラヒ
ドロフタルイミド、２−（３−インドール）エタノール
、４−ヒドロキシメチルイミダゾール、テトラヒドロピ
ラン−２−メタノール、テトラヒドロフルフリルアルコ
ール、フルフリルアルコール、ピペロニルアルコールな
どがあげられる。

上記において置換基としてＣ１〜Ｃ３のアルキル基を有
する場合はソオキンラン環、ピリジン環、ピロリシン環
、チアゾール環、オキサゾール環、イミダゾール環、ピ
リミジン環、イミダゾリジン環及びプリン環が好ましく
、その例としては、Ｎ−）ｆルー２−ヒドロキシエチル
ゾロリシン、２．２−ツメチル−１，３−ジオキソラン
−４−メタノール、５−エチル−２−ピリジンエタノー
ル、６−メチル−２＋　ヒＩ７ノンエタノール、１−（
ヒドロキシメチル）−５，５−ツメチルヒダントイン、
２，４−ツメチル−４−ヒドロキシオキサゾリン、チア
ミン、５−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチルチア
ゾール、７−（２−ヒドロキシエチル）テオフィリン、
７−（３−ヒドロキシプロピル）テオフィリンなどがあ
げられる。

上記において置換基として０１〜Ｃ５のアルキレン基を
有する場合は、該アルキレン基は２つの複素環を結ぶ結
合を意味し、その際の複素環としてはピペリジン環が好
ましく、その例としては１．３−ビス（Ｎ−２−ヒドロ
キシエチル−４−、ピペリジル）プロパン、１−（Ａ’
−２−ヒドロキジエチル−４−ピペリジル）−３−（４
’−ピペリジル）プロノンなどがあげられる。

上記において置換基として水酸基を有する場合は、モル
ホリン環、フラン環、ピリジン環、♂ペラジン猿、ピペ
リジノ環、プリン環、テトラヒドロフラン環、オキサン
環及び２リミソン環が好まシく、その例としては２−ヒ
ドロキシメチル−２−（４−Ｓリソル）−１，３−プロ
パンジオール、２．６−ピリジンメタノール、５−（Ｘ
−ビペラソニル）−１，２−プロパンジオール、Ｎ−（
２−ヒドロキシエチル）−４−（ヒドロキシプロピル）
ピペリジノ、３−モルホリノ−１，２−７’ロノぞンソ
オール、２．５−フランジメタノール、５−チオグルコ
ース、３，４−７ランジメタノール、５−ヒドロキシメ
チルウラシル、５−ヒドロキシメチルウラシル、コーソ
酸、アスコルビン酸、イソアスコルビン酸、グルコノ−
δ−ラクトン、ガラクトノ−γ−ラクトン、α−グルコ
ヘプトニックアシッド−γ−ラクトン、ピリドキシン、
ピリドキサール、ピリドキサミンなどがあげられる。

上記において置換基としてオキソ基を有する場合はピロ
リノン環が好ましく、その例としては、Ｎ−（２−ヒド
ロキシエチル）−２−ピロリドン、Ｎ−（３−ヒドロキ
シプロピル）−２−ピロリドンなどがあげられる。

上記において置換基としてアミノ基を有する場合はピリ
ミジン環が好ましく、その例としては、５−ヒドロキシ
メチルシトシン、トキンピリミジンなどがあげられる。

上記において置換基としてフェニル基を有する場合はぜ
ベリジン環及びピペラジン環が好ましく、その例として
はスコポラミン、アトロビン、ヒドロキシシンなどがあ
げられる。

上記において置換基として０１〜Ｃ３のアルキレンスル
ホン酸を有する場合はぜペラジン猿が好まシく、その例
としてはＮ−（２−ヒドロキシエチル）２ペラソンーＮ
′−２−エタンスルホン酸、Ｎ−（２−ヒドロキシエチ
ル）ビペラソンーＮ′−３−７’ロノぐンスルホンＬ＃
−（２−ヒドロキシエチル）ビペラソンーＮ′−２−ヒ
ドロキシプロノソン−３−スルホン酸がアケラレル。

上記において置換基としてカルボニル基ヲ有スる場合は
フラン環が好ましくその例としては５−ヒドロキシメチ
ル−２−フルフラールなどがアケられる。

（２）２級アルコール化合物として下記の化合物をあげ
られる。

ハロゲン、アミノ基及びフェニル基よシ成る群からえら
ばれだ置換基を有してもよい飽和もしくは不飽和の６１
〜Ｃ１ｏの脂肪族炭化水素残基：上記において置換基を
有しない場合はＣ５〜ＣＩＯの脂肪族炭化水素残基が好
ましく、その例としてハ２−７’ロバノール、２−ブタ
ノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、４−メ
チル−２−ペンタノール、２−ヘキサノール、３−ヘキ
サノール、１−ヘキセン−３−オール、２−ヘプタツー
ル、３−へゲタノール、２−オクタツール、２−ノナノ
ール、２−デカノール、２，３−ブタンジオール、２−
メチル−２，４−ペンタンソオールなどがあげられる。

上記において置換基としてハロゲンを有する場合はＣ５
〜Ｃ５の脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例として
は１−クロロ−２−フルフラール、１−ブロモ−２−ブ
タノールなどがあげられる。

上記において置換基としてアミン基を有する場合はＣ５
〜Ｃ８の脂肪族炭化水素残基が好ましく、その例として
は、１−アミノ−２−プロパツール、ツインプロパツー
ルアミン、１−アミノ−２−プタノールなどがあげられ
る。

上記において置換基としてフェニル基を有する場合はＣ
３〜Ｃ６の脂肪族炭化水素残基が好ましく、ソの例トシ
ては、１−フェニルエタノール、１−フェニル−２−グ
ロパノール、ｐ−クロロフェニルメチルカルビノール、
α−（１−アミノエチル）−ｐ−ヒドロキシペンツルア
ルコール、ジフェニルメタノールなどがあげられる。

環に直接結合した２級アルコール性ＯＨを有するＣ４〜
Ｃ１の脂環式炭化水素残基： 上記において０４〜Ｃ６の脂環式炭化水素残基トシては
、シクロブタノール、シクロペンタノール、シクロヘキ
サノール、シクロオクタツール、２−クロロシクロヘキ
サノール、１．４−ソヒドロキシシクロヘキサンなどが
あげられる。

環に直接結合した二級アルコール性ＯＨを有し、且つピ
ペリジン環、ピロリジン環及びオキサン環よυなる群か
らえらばれだ複素環を持つ複素環二級アルコール化合物
残基、 ここで残基の複素環部分はＣ１〜Ｃ５のアルキル基及び
水酸基よシ成る群からえらばれた置換基を有してもよい
ニー 上記において環に直接結合した二級アルコール性ＯＨを
持つ複素環としては、ピペリジン環及びピロリジン環が
好ましく、その例としては３−ヒドロキシピペリジン、
４−ヒドロキシピペリジン、３−ヒドロキシピペリジン
などがアケラレル。

上記において置換基として０１〜Ｃ５のアルキル基を有
する場合はピペリジン環が好ましく、その例としてはＮ
−メチル−４−ヒドロキシピペリジンなどがあげられる
。

上記において置換基として水酸基を有する場合は、オキ
サン環が好ましく、その例としては、リキソースなどが
あげられる。

（３）糖化合物として下記の化合物をあげられる。

アミン基、アセチルアミノ基、メチルニトロソウレイド
基、Ｃ１〜Ｃ８のアルキル基、フェニル基、フェノール
基、ヒドロキシメチルフェニル基、ニトロフェニル基、
メルカプト基、メチルメルヵｆｉｚ、フェニルメルカプ
ト基、ニトロフェニルメルカプト基、ハロゲノ、カルボ
キシル基、す／酸基、ピリツル基、ピリミジル基、トリ
アジル基、プリン基及び８−アザプリン基からえらばれ
だ責・換基を有してもよいペントース残基、ヘキソース
残基、これらの２糖類残基、デオキシペント−２残基、
デオキシヘキソース残基及びヘプ）　−ス残基よシ成る
群からえらばれた糖残基、ただし上記に於て、置換基が
ピリジル基、ピリミジル基、トリアツル基、プリン基及
び８−アザプリン基がらえらばれた置換基である場合に
は、該置換基はメルカプト基、ハロケ゛ン、水酸基、オ
キソ基、カルボキシル基、アミン基、（’Ｌ−（’、の
アルキル基、メトキシ基、エトキシ基、カルボキシメチ
ル基、アセチル基及びアニンイル基よりなる群からえら
ばれた置換基で更に置換されていてもよいニー上記にお
いて置換基を有しない場合の例としてｉｌ：、へｙ）−
ス残基トシてリデース、キシロース、アラビノース、キ
シルロース、リブロースなど；ヘキソース残基としてグ
ルコース、ガラクトース、マンノース、ソルボース、ク
ロース、７７クトースなど；これらの２糖類残基として
、ヘキソースの２糖類、たとえば、サッカロース、マル
トース、セロビオース、ｒンチオピオース、ラクトース
、インマルトース、メリビオースなど：デオキシペント
ース残基として、２−デオキシリポースナト；デオキシ
ヘキソース残基として、２−デオキシグルコース残！、
７’Ｃとえげ２−デオキシグルコース、２−デオキシが
ラクトースなど；ヘプトース残基として、グルコヘプト
ース、セドヘプツロース、グルコヘプツロース、マンノ
ヘプツロースナト；があけられる。

上記において置換基としてアミン基を有する場合は、２
位又は３位が置換されたヘキソース残基が好ましく、そ
の例としては、グルコサミン、がラクトサミン、マンノ
サミン、メチル−３−アミノ−３−デオキシ−β−グル
コシド、メチル−３−アミノ−３−デオキシ−β−マン
ノシドなどがあげられる。

上記において置換基としてアセデルアミノ基を有する場
合は、２位が置換されたヘキソース残基が好ましく、そ
の例としては、Ｎ−アセチル−グルコサミン、Ｎ−アセ
チル−がラクトサミン、Ｎ−アセチル−マンノサミンな
どがあげられる。

上記において置換基としてメチルニトロソウレイド基を
有する場合は２位が置換されたヘキソース残基が好まし
く、その例としてはストレプトシトシンなどがあげられ
る。

上記において置換基として０１〜Ｃ５のアルキル基を有
する場合は、１位もしくは３位が置換されたペントース
残基及び１位もしくは３位が置換されたヘキソース残基
が好ましく、その例としては、α−メチルリボシド、β
−メチルリボシド、β−メチルアラビノシト、２−Ｏ−
メチルキシロース、α−メチルキシロシド、α−メチル
グルコシド、β−メチルグルコシド、α−メチルマンノ
シド、β−メチルマンノシド、α−メチルガラクトシド
、β−メチルがラクトシト、３−Ｏ−メチルグルコース
などがあげられる。

上記において置換基としてフェニル基もしくはニトロフ
ェニル基を有する場合は１位が置換されたペントース残
基及び１位が置換されたヘキソース残基が好ましく、そ
の例としてはフェニル−α−ダルコシド、フェニル−β
−グルコシド、フェニル−α−ガラクトシド、フェニル
−β−ガラクトシド、０−ニトロフェニル−α−ガラク
トシド、０−二）ロフェニルーβ−ガラクトシド、飢−
二トロフェニルーα−ガラクトシド、ｍ−ニトロフェニ
ル−β−１ｆ”ｙり）７ド、ｐ−ニトロフェニル−α−
ガラクトシド、ｐ−ニトロフェニル−β−がラクトシト
、Ｏ−ニトロフェニル−β−７７ｔ、　）シト、ｐ−ニ
トロフェニル−β−グルコシド、７’−二トロフェニル
ーα−グルコシド、Ｏ−ニトロフェニル−β−キシロシ
ド、ｐ−ニトロフェニル−β−キシロシド、ｐ−ニトロ
フェニル−α−マンノシド、ｐ−ニトロフェニル−β−
マンノシドなどがあげられる。

上記において置換基として、フェノール基、ヒドロキシ
メチルフェニル基、メルカプト基、メチルメルカプト基
、フェニルメルカプト基もしくはニトロフェニルメルカ
プト基を有する場合は、１位がこれらの基で置換された
ヘキソース残基が好ましく、その例としてはフェニル−
β−チオガラクトシド、フェニル−α−チオガラクトシ
ド、Ｏ−ニトロフェニル−１−チオ−β−ガラクトシド
、ｐ−ニトロフェニル−１−チオ−β−ガラクトノＰ、
７）−二トロフェニル−１−チ、ｔ−β−クルコシド、
β−チオグルコース、β−チオガラクトース、サリシン
、アルボチンなどがあげられる。

上記において置換基としてリン酸基を有する場合は１位
が置換されたペントース残基及び１位が置換されたヘキ
ソース残基が好ましく、その例としてはキシロース−１
−リン酸などがあげられる。

上記において置換基としてハロケ゛ンを有する場合はヘ
キソース残基が好ましく、その例として：・弓、フロラ
ロースなどがあげられる。

上記において置換基としてピリジル基、ピリミツル基、
トリアツル基、プリン基又は８−アザプリン基を有する
場合は、１位がこれらの基で置換されたペントース残基
又はデオキシペントース残基が好ましい。

更に前記メルカプト基、ノ・口ｒン、水酸基、オキソ基
、カルブキシル基、アミノ基、Ｃ，−Ｃ。

のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、カルボキシメ
チル基、アセチル基及びアニソイル基よシなる群からえ
らばれた置換基を有するのが好ましい。

その例としては、シチジン、ウリジン、アデノシン、ア
ラピノシチジン、グアノシン、サイクロシチジン、アデ
ニンデオキシリボシド、シトシンデオキシリボシド、グ
アニンデオキシリボンド、チミンデオキシリゴシド、ウ
ラシルデオキシリボシド、イノシン、オロチジン、６−
メルカグトプリンリボシド、４−チオウリジン、５−プ
ロモウリソン、６−フルオロデオキシウリジン、６−メ
チルアミソゲリン−９−リボシド、８−アザアデノシン
、５−アザシチジン、３−デアザウリジン、＃４−７セ
チルシチゾン、５−カルがキシメチルウリジン、Ｎ６−
メチル−２′−デオキシアデノクン、５−プロモー２′
−デオキシシチジン、　８−ブロモアデノシン、５−ヒ
ドロキシウリノン、５−メチルウリνン、Ｎ４−アニソ
イル−２′−デオキシシチジン、Ｎ′−エタノアデノシ
ン、５−メトキシウリｖ／、３−メチルウリノン、２′
−クロロアデノシン、ｌ−メチルアデノシン、Ｎ６゜Ｎ
６−ソメチルアデノシン、２’−０−メチルアデノシン
、３’−０−メチルシチジンなどがあげられる。

上記例示の如き（１）〜Ｃ３）からえらばれたアルコー
ル性水酸基含有化合物が例示出来るが、前記（１）〜（
３）までの範囲がみたされる限ジアルコール類の選択に
制限はない。

上記例示の如きアルコール性水酸基含有化合物は、天然
物、合成品いずれでも利用できるが、目的とするアルコ
ール性水酸基含有化合物以外のアルコールを含まないよ
うに予め適当な公知手段を用い精製して利用するのが好
ましい。このような精製手段の例としては、たとえば、
蒸留、再結晶、アルミナ、シリカグル、活性炭、イオン
交換樹脂などを用いたカラムクロマトグラフィー、薄層
クロマトグラフィー及びこれらの適当な組み合わせ精製
手段を例示できる。

本発明方法によれば、前記例示の如き式（Ｉ）　ＩＪノ
ン質と上記例示の如き（１）〜（３）のアルコール性水
酸基含有化合物とをホスホリパーゼＤＭの存在下に反応
させる。

この際利用するホスホリパーゼＤ　Ｍとしては、従来公
知のキャベツから抽出されたホスホリパーゼＤの至適温
度４０℃以下、至適ｐＨ５，４〜５．６に対して、至適
温度６０〜７０℃、至適ｐＥ７付近である点で公知ホス
ホリパーゼＤと区別できるホスホリノ々−°ゼＤＭ生産
菌の生産するホスホリパーゼＤＭが例示できる。該ホス
ホリパーゼＤ　Ｊｌ　ハ、Ｃ１゜−級アルコールである
ｒラニオールと更に糖としてリポース、グルコースと前
記式（Ｉ）リン脂質との間におけるリン脂質アルコール
誘導体の形成を触媒する点でも公知ホスホリパーゼＤと
区別できる。

このようなホスホリパーゼＤＭ生産菌の例としては、同
一出願人の出願に係わる特開昭５８−６３３８８号に開
示されたノカルディオプシス（Ｎ０ＣａｒｄｉＯｐ８ｉ
８　）　　属に属するホスホリパーゼＤＭ生産菌たとえ
ばノカルデオプシス属Ｎ。

７７９株（ＦＥＲＮ　　１３ｐ−５１２）、同一出願人
の出願に係わる４￥開昭５８−６７１８３号に開示され
たアクチノマデューラ（，４ｃｔｉｎｏｔｎαｄｕ、ｒ
α）属に属するホスホリノ！−ゼＤＭ生産菌たとえばア
クチノマデューラ属ＮＯ３６２株ＣＦ　Ｅ　ＲＪｆＢＰ
−５１１〕等を挙げることができ、前記式（Ｉ）　　　
・のリン脂質を原料として前記（１１−ｆ３）のアルコ
ール性水酸基含有化合物の転移反応を起す作用を有する
ホスホリンぐ−ゼＤであれば如何なる起源のホスホリパ
ーゼＤでもホスホソノ９−ゼＤＭとして用いることが出
来る。至適温度及び至適ｐＨの相違と共に他のいくつか
の相違点と共に、下掲第１表に、本発明方法で利用する
ホスホリパーゼＤＭと公知ホスホリパーゼＤとの酵素学
的性質の差異を示した。

公知ホスホリパーゼＤを用いては得られなかったＡＧＥ
ＰＬ誘導体が、本発明方法で形成できる理由には、この
酵素的触媒反応に関与する公知ホスホリパーゼＤと本発
明方法で用いるホスホリノぐ一ゼＤＭとの上記の如き酵
素学的性質の差異が関与しているものと推測される。勿
論、本発明方法はこのような作用の推測によって何等の
制約もうけるものではない。

本発明方法で利用するホスホリパーゼＤＭは、後記転移
作用の実験方法（ＴＬＣによる１移生成物の生成確認方
法）に従って反応を行うと、Ｃ１Ｑ−級アルコール例、
ｔ　ハｆラニオールや、ペントースとして例えばリボー
ス、ヘキソースとして例えばグルコースｈ４　ト１−　
Ｑ−アルキル−２−アセチル−５ｎ−グリセロ−３−ホ
スホリルコリンとの間における転移反応を触媒して、１
−０−アルキル−２−アセチル−８ｎ−グリセロ−３−
ホスホリルゲラニオール、１−Ｏ−アルキル−２−アセ
チル−８ｎ−グリセロ−３−ホスホリルコリンス、１−
０−アルキル−２−アセチル−８ｎ−３−ホスホリルグ
ルコースを形成する。

公知ホスホリ・々−ゼＤは、上記誘導体を形成しない。

本発明方法によれば、前記例示の如き式（Ｉ）　ＩＪノ
ン質と前記例示の如き（１１−ｆ３１のアルコール注水
酸基含有化合物とを、上記に詳しく述べたホスホリ／ぐ
一ゼＤＭの存在下に反応させることによシ、下記式（２
） ％式％（６） 但し式中、イ、イ′及びＣは前記したと同義である、 で表わされるＡＧＥＰＬ誘導体を製造することができる
。この際、ホスホリパーゼＤＭは精製品として使用する
必要はなく粗製品であってもよい。

更に、適当な固定化担体たとえばポリプロピレン膜、セ
ライト粒、ガラスピーズなどの如き各種の重合体樹脂類
や無機材料の粒状物やフィルム状物に担持固定化して利
用することもできる。

反応は、ホスホリ・クーゼＤＭの存在下で、好ましくは
溶媒の存在下に、式（Ｉ）　！ｊン脂質と前記（１）〜
（３）よシ選ばれるアルコール性水酸基含有化合物とを
接触せしめることにより行うことができる。利用する溶
媒の例としては、水性溶媒及び水性溶媒と有機溶媒との
混合溶媒を例示することができる。

又、場合によってはアルコール性水酸基含有化合物それ
自体に溶媒の役目を兼ねさせることもできる。また、ホ
スホリパーゼＤＭの酵素学的触媒作用を阻害しない任意
の他の添加剤を含む溶媒も利用でき、たとえば該作用を
促進したシ、酵素の安定化に役立つ適当な添加剤を含有
した溶媒であることができる。例えば、アルブミン、カ
ゼイン等。

の蛋白質の他酢酸、クエン酸、リン酸などの緩衝剤を含
有したり、又タウロコール酸ソーダ等の胆汁酸塩類を含
有したり、塩化カルシウムその池の中性塩を含有したり
した水性溶媒であることができる。更に、有機溶媒の例
としては、アルコール性水酸基含有化合物それ自体を包
含して、例えば、ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサン、インオ
クタンなどの如き脂肪族炭化水素類；シクロペンタン、
シクロヘキサン、シクロブタンなどの如き脂甲族炭化水
素類；ベンゼン、トルエン、キシレンナトの如き芳香族
炭化水素類；アセトン、メチルイソプロピルケトンなど
の如きケトン類；ツメチルエーテル、ソエチルエーテル
、ソイソゾロビルエーテルなどの如きエーテル類；酢酸
メチル、酢酸エチルなどの如きエステル類；四塩化炭素
、クロロホルム、塩化メチレンなどの如きノ・ロケ゛ン
化炭化水素類−ノメチルホルムアミドの如きアミド溶媒
類；ツメチルスルホキシドの如きスルホキシド溶媒類な
どを例示することができる。

水性溶媒を有機溶媒との混合溶媒の形で利用する場合の
両者の混合比は適当に選択できるが、例えば水性溶媒：
有機溶媒（υ／Ｖ比）の比で１００：Ｏ〜１：９９の如
き混合比を例示することができる。

反応モル比、ホスホリパーゼＤＭの使用量、溶媒の使用
量などは、適宜に選択できるが、例えば、式（Ｉ）リン
脂質１モルに対してアルコール性水酸基含有化合物約１
：１〜約１：１０００モルの反応モル比を例示すること
ができる。また、ホスホリ・ぐ−ゼＤＭの使用量どして
は、例えば、式（Ｉ）リン脂質１１当シ約１０〜約１０
０．０００単位、好ましくは約１００〜約１０００単位
程度の使用量を例示することができる。さらに、溶媒の
使用量としては、例えば、式（Ｉ）　！Ｊノン質に対し
て約２倍〜約１００倍（容量）程度の使用量を例示でき
る。

反応は、室温で進行するので、とくに冷却或は加熱の必
要はないが、所望によシ適宜に冷却もしくは加温条件を
採用することができる。例えば、約り℃〜約９０℃、好
ましくは約り０℃〜約６０℃の如き反応温度を例示する
ことができる。また反応時間も適宜に選択できるが、例
えば約１分〜約１０日、好ましくは約１時間〜約７２時
間の如き反応時間を例示することができる。所望によ）
、たとえばＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）などの手
法を利用して反応経過を追跡し、所望の目的物の形成を
確認することによシ反応時間を適宜に変更することがで
きる。

ホスホリ・４−七ＤＭの存在下で式（Ｉ）　’Ｊノン質
と前記（１）〜（３）アルコール性水酸基含有化合物と
を接触せしめる態様は適宜に選択できるが、攪拌もしく
は振盪条件下で行うのが普通である。酸化分解を受は易
い基質又はアルコール性水酸基含有化合物を用いて反応
する場合には窒素気流中で行う事が望ましい。又、前記
のように適当な粒状物やフィルム状物担体に担持固定化
した固定化酵素の形で糸スホリパーゼＤＭを利用する場
合には、例えば、固定化酵素膜もしくは固定化酵素粒子
層を介して反応組成液を循環ポンプを用いて通過させる
態様で行うことができる。

上述のようにして反応を行った後、形成された式卸、４
ＧＥＰＬ誘導体は、そのま＼又は塩の形で沈澱させて分
離し利用することができる。尚、ここで式＠／１ＧＥＰ
Ｌ誘導体の塩としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸
、燐酸等の無機酸との塩、シュウ酸、マレイン酸、乳酸
、酒石酸、フマール酸、メタンスルホン酸、ベンゼンス
ルホン酸、トルエンスルホン酸等の有機酸との塩、アル
ギニン、アスノ（ラギン酸、グルタミン酸等のアミノ酸
との塩、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属との
塩、マグネシウム、カルシウム等のアルカリ土類金属と
の塩及びアンモニウム塩等があげられる。

更に、該誘導体及びその塩はケイ酸カラムクロマト、ア
ルミナカラムクロマト、イオン交換クロマト、高速液体
クロマト、向流分配、ｒル濾過、吸着クロマト等の適当
な公知の方法を利用して分＾１精製することができる。

本発明方法によれば、上述したようにして、式（Ｉ）　
ＩＪノン質とアルコール性水酸基含有化合物とを、ホス
ホジノ９−ゼＤＭの存在下に反応させて式（２）、４Ｇ
ＥＰＬ誘導体を製造することができる。

本発明で用いられる式（Ｉ）　！ｊン脂質において１−
Ｏ−アルキル−２−アセチル−８ｎ−グリセリル−３−
ホスホリルコリンは即時型アレルギーにおけるメディエ
ータ−の１つとして見出された血小板活性化因子（ｐｌ
ａｌｅｔ−ａｃｔｉｖｉｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ。

ｐＡＦ）の代表的物質として知られている。

多くの場合、リン脂質はそれぞれ特異な生理活性を有す
るが、特に上記ＰイＦ壓リン脂質は血小板活性化作用や
面圧降下等の生理活性を有し、又、アナフラキシーなど
の炎症などにも関与している。

ＰＩＦ型リン脂質誘導体の有用性については例えば特開
昭５８−１３５９２には下記式ｉ）の化学合成ＰＡＦ型
リン脂質誘導体についての製法と血圧降下剤としての有
効性について開示している。

更に特開昭５８−１５４５１２には下記式１１）の化学
合成ｐ／４ｐ型類似リン脂質誘導体についての製法と血
小板活性化因子拮抗剤としての有効性について開示して
いる。

ＣＨ２−０−Ｒ。

ＣＨ，−０−Ｒ１ 但しＲ１は０１〜’Ｉｌ＋の脂肪族炭化水素Ｒ２はＣ５
〜Ｃ６の　　〃 上記化学合成リン脂質は複雑な手法と何段階にも及び合
成経路を経て合成される。これに対して本発明は生化学
的酵素作用による一段階反応でるシ複雑且つ不利益な化
学合成手段とは異って、温和且つ容易な条件下に特異的
に転移誘導体を生成させることが出来る。

又本発明によれば式（Ｉ）　ＩＪノン質と前記ｆｉｌ　
−（３１の多くのアルコール性水酸基含有化合物の中よ
り選ばれるアルコールとの共存下にホスホリ・セーゼＤ
Ｍを作用させることによって極めて多くの、４０ＥＰＬ
誘導体を得ることが出来ることから、それ等の中には抗
血／」・板凝集剤として又地圧降下剤として更には抗炎
症剤として利用して有効な作用を持ち、しかも血小板凝
固作用のない誘導体の存在が期待できる。

又得られる式＠　Ａ　Ｇ　Ｅ　Ｐ　Ｌ誘導体は、すぐれ
た界面活性作用を有し細胞膜の透過性に大きな影響を持
つ。この意味から、該式＠ＡＧＥｐＬ誘導体はリポソー
ム形成基材として、又、化粧品たとえばクリーム、乳液
に配合して皮膚生理に役立つ乳化剤として、更に脂肪系
薬剤の乳化剤、殺虫剤、除草剤などの如き農薬の乳化剤
用途に有用である。

又、アルコール水酸基を有する或はアルコール水酸基を
導入した薬理活性化合物を、式（Ｉ）　ＩＪノン質に転
移させることによって、該化合物の薬理的副作用を弱め
たシ或は薬理効果を高めてその投与量を低減させたりす
ることも期待できる。さらに又、上記薬理活性化合物を
式（Ｉ）　ＩＪノン質に転移させて、該化合物を患部に
的確に集中させるための薬理活性化合物のキャリヤーと
して、さらには、薬理活性化合物の保護基として有用な
役割をはだすことも期待できる。

ヌ更に、各種医薬品をはじめとする化学合成の中間体と
して有用であり、例えば、反応性の高いハロゲンやアミ
ン置換基を有するアルコールを転移させた誘導体を利用
できる。更に又三重水素や１４Ｃでラベルしたアルコー
ルを転移することによってラベルされだＡＧＥＰＬ誘導
体が得られ、リン脂質の代謝経路の解明に利用する事も
できる。

以下、実施例によυ本発明方法実施の数態様について、
更に詳しく例示する。

参考例１　　ホスホリパーゼＤＭの調製きな粉３．０％
、コーンスターチ−プリカー１．０％、ペプトン０．５
に、粉末酵母エキス０．１％、グルコース１０％、ＮＨ
４Ｎｏ、０．２５％、Ｋ、　Ｈｐ　０゜０４％、３１ｇ
ＳＯ４・７Ｈ，００，０１％、ツウイン（Ｔｗｅｅｎ）
−８５０，１％から成る培地（ｐＨ６，０）約１５１を
３０１ジャーファーメンタ−に４入れ、１２０°Ｃで１
５分間滅菌後、シード培養液１．５１を植菌し、２７℃
で４０時間培養を行った。

尚、上記シード培養液は、澱粉１９ぎ、（ＮＨ，）　Ｈ
２ｐＯ，０，２５％、ベプト７０．２５．９３、Ｋ２Ｈ
ｐ０，０．２に、ＭｇＳＯ４・ＴＥ１０１．０１％を含
む水溶液培地（ｐＨ６，８）　１００ｍｌを５００　ｍ
ｅ坂ロフラスコに入れ、蒸気殺菌後、ノカルディオプシ
ス属Ｎ０７７９株〔ｐＥｉｕｔ−Ｂｐ−ｓ　１２　］又
はアクチノマデューラ属ＮＯ３６２株ＣＦＥＲ，Ｍ−Ｂ
Ｐ−５１１〕の胞子を一白金耳接種し、培養温度３０℃
、１２０回転／分の条件で２日間振盪培惨して調製した
。

培養後、菌体固形物を遠心分離により除去し、遠心上清
１３１（ノカルディオプシス属Ｆ　Ｅ　ＲＭ−ＢＰ−５
１２株を用いた場合は０．５４　ｕ　／　ｍｌ　；アク
チノマデューラ属ＦＥＲＭ−ＢＰ−５１１株を用いた場
合は１．７　ｕ　／　ｒｒ、ｔであった。）を得た。

この遠心上清を５℃に冷却した後、−２０°Ｃのアセト
ンを加えてアセトン濃度３０〜７０　％画分に相当する
ホスホリパーゼＤ　ｔｌｆを含む沈澱物を述心分離によ
り集めた。この沈澱物を、ノカルディオプシス属ＰＥＲ
Ｍ　Ｂｐ−５１２株を用いたｆ：′４．含にはｐ　Ｈ６
，０、アクチノマデューラ属Ｆ　Ｅ　ＲＭＢＰ−５１１
株を用いた場合はｐ　Ｈ６，５のトリス−マレイン酸に
溶解し、０．０２Ｊ／の同緩衝液に対して透析した後、
同緩衝液で平衡化したＤＥＡＥ−セルロースに通塔し、
通過区分を集めた。次に堀内等の方法（Ｊ、　Ｂｉｏｅ
ｈｓｍ、　８１．１６３９（１９７７）］で調整したバ
ルミトイルガーゼをカラムに充填し、充分に、水洗して
から上記ＤＥＡＥ−セルロース通過液を注入し、活性を
吸着した。これを０．０５　Ｍ　）　！Ｊスス−酸緩衝
液（ｐＨ７，２）−１：洗浄後、０．２％Ｔｒｉｔｏｎ
　Ｘ−Ｚｏ。

を含む同緩衝液を加え活性を溶出した。活性区分を集め
てバイオエンジニアリング社製の限外濾過膜（Ｔｙｐｅ
Ｇ−１０Ｔ）を用いて濃縮した後、ｒル濾過担体として
トヨパールＨＷ−５５ＦＣ東洋曹達（株）製〕充填カラ
ムに注入し、蒸留水を用いて通塔し、活性区分を集めて
凍結乾燥を行った。

この乾燥粉末を、ノカルディオプシス、属ホスホリ／平
−ゼＤＭの場合には０．０２５　Ｍイミダゾール−塩酸
（ｐ　Ｈ７，４）に溶解後、アクチノマデューラ属ホス
ホリパーゼＤＭの場合には０．０２５　Ｍ　トリス−酢
酸１ｐｆｆｓ、ａ）に溶解後、ファルマシア・ファイン
ケミカルス社製のポリバッファ交換体ＰＢＥＴＮ９４　
（２０ゴ）充填カラムに通塔して活性を吸着後、同社製
の溶出用４？リパツフア（ｐＨ５，０）を用いてｐＨ勾
配により溶出した。

溶出したホスホリパーゼＤＭの活性区分を集めて限外濾
過膜にて濃縮し、セファデックスＧ−７５充填カラムに
通塔し、ホスホリパーゼＤ、’Ｉｔ活性区分を集めて凍
結乾燥した。

斯くて、ノカルディオプシス属ホスホリノ！−七ＤＭの
場合には、約４０％の活性回収率で、比活ｉ１’７８．
３１Ｌ／■蛋白質として、アクチノマデューラ属ホスホ
ＩＪ　／々−ゼＤＭの場合には約４３％の活性回収率で
、比活性２１ａａｕ／■蛋白質として、ホスポリ・や−
ゼＤＭが回収された。

実施例１　　（Ｒｕｎ　Ｎｃｃｌ　〜Ｎａｌ　２７　）
１−０−アルキル−２−アセチル−８ｎ−グリセロ−３
−ホスホリルコリン（ウシ心ＳＪ由ｅ、フナコシ薬品社
製）と後掲第２表に示した多数種のアルコールとを後記
ＴＬＣによる転移物の生成確認方法に従ってホスホＩＪ
　／々−ゼＤＭの存在下で反応させて転移生成物の形成
を確認した。そのＲｆ値を後掲第２表に示した。

ＴＬＣによる転移生成物の生成確認方法ニー下記組成 １％基質水溶液　　　　　　　　　０．１−０．２Ｍ酢
酸緩衝液１ｐＨ５，７）　　　０．１ｍ／’Ｉ　Ｍ塩化
カルシウム水溶液　　　　０．０１　ｍ１２０％アルコ
ール溶液　　　　　　０．２　ｍｅジエチルエーテル　
　　　　　　　０．２　ｍｌ。

の反応液にホスホリ／Ｊ？−ゼＤ−Ｍ水溶液０．０１　
ｍｌ（ＩＶ）をカロえ、３０℃で２日射１置した。

尚上記２０％アルコール溶液を調整する際には必要に応
じて水又はジエチルエーテル、アセトン等の有機溶媒溶
液とし、酸性アルコールはＩＮカセイソーダで、又はア
ミン類はＩＮ塩酸でｐ　ＩＩａ、Ｏに調整した。

上記静置後前Ｎ塩酸０．５ゴを加え反応を停止した抜機
しく攪拌し、脂質（生成物）を抽出した。

この懸濁液を数分間静置し、下層のクロロホルム層を分
取し、３０°Ｃで減圧乾固した後、クロロホルム−ｙ’
　タ／−ル混液（２：　Ｉ　Ｖ／Ｖ　）　１００ｔｒｔ
ｅに溶解してＴＬＣの試料とした。このうち１０　ＴＴ
ｔｔをシリカケ゛ルＲ，Ｉｅ！　（メルク社製、シリカ
ケ゛ル６゜ＴＬＣｆｖ−ト、２０　Ｘ　２０　ｃｔｒｃ
　）にスポットし、クロロホルム−メタノール−水（６
０：３０：５Ｖ／ＶＩ、クロロホルム−メタノール−ア
ンモニア−水（５０：２０：１＝２Ｖ／Ｖ）、ソイソブ
チルケトン−酢酸−水（４０：２５：５Ｖ／Ｆ）を展開
溶媒として展開した。

スポットの検出は下記の試薬を用いた。

検出されたスポットで未分解の基質及び、その加水分解
物である１−（７−アルキル−２−アセチル−８ｎ−グ
リ七〇−３−リン酸以外のリン脂質のスポットが検出さ
れた場合、これを転移生成物と認めた。展開溶媒として
クロロホルム−メタノール−水（６０：３０：５Ｖ／Ｔ
ｌ）を用いた時のＲｆ値を８２表に示した。

検出試薬 リン酸の呈色： Ｚｉｎｚａｄｅの試薬（Ｂｅ１ｓｓ　Ｕ、　Ｊ、　Ｃｈ
ｒｏｍｔｘｔｏｇ。

１３　１０４、　１９６４） 一層アミンの呈色： ニンヒドリンＥｉにニンヒドリンの０，２５％アセトン
溶液） 二級アミンの呈色： 次亜塩素酸−ペンソノン試薬（ＢｉｓｃｈｅｌＭ、　　
Ｃ，ら　Ｂｉｏｃｈｉｍ、　　Ｂゼｏｐｈｙｓ、　　Ａ
ｃ、ｔａ　　７　０５９８．１９６３） 糖の呈色： ナフトレゾルシノールーリン酸Ｅ薬 （Ｈａｙ　Ｇ、　Ｗ、らＪ、　Ｃｈｒｏｍｔｏｇ、　１
１過ヨウ素酸−ペンジゾン試薬 （Ｗ’ｏｌｆｏｒｍ、、Ｍ、　　Ｌ、　　ら　Ａｎａｌ
、　　Ｃｈｅｍ、。

２８．１０３７．１９５６） プリン及びピリミジンの呈色： フルオレッセインーアンモニア試薬 （Ｆｉｎｌａｎｄ　Ｔ、らＡｎｇａｗ、　Ｃｈｅｍ、　
６３５１１．１９５１） アミノ糖の呈色ニ アセチルアセトン−エールリッヒ試薬 （エルソンーモンがン反応）　（ｐａｒｔｒｉｄｇｅＳ
、　Ｍ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、　４２　２３８　。

比較例１ 実施例１に於て、ホスホリノや一ゼＤＭの代υに、キャ
ベツ由来の公知ホスホリ／Ｊ−ゼＤ（Ｐ−ＬＢｉｏｃｈ
ｅｍｉｃａｌｓ　Ｉｎｃ、　）を用いるほかは、実施例
１と同様に行った。その結果、後掲第２表に示したすべ
てのアルコールについて転移生成物の生成は認められな
かった。

第２表 すべての試料をＺｉｎｚａｄａの試薬で発色して、リン
脂質を検出し、特別な官能基をもつものは、別に前述し
た各種試薬で検出した。

実施例２　　（Ｒｕｎ　Ｎｏ、ｌ〜ＮＩＩＬ４７　）１
−０−アルキル−２−アセチル−８’ｎ　−グリセロ−
３−ホスホリルコリン、（ウシ心臓由来、フナコシ薬品
社製）の１％水溶液２＋＋＋ｇ、０．２Ｍ酢酸緩衝液（
７’　Ｈ５，７）　２　ｍ１１１　Ｊ／塩化カルシウム
水ｆａ液ｏ、　１ｍ、及び２０％ｒラニオールソエチル
エーテル溶液２−を共栓付試験管中に入れ、ホスホリパ
ーゼＤＭ水溶液０．１　ｍｔｔ　（２０Ｕ　）を加えて
よく混合した後、３０℃で２日、反応した。次に反応液
にα５Ｎ塩酸０．５−を加え、更にクロロホルム−メタ
ノール混液（２：　Ｉ　Ｖ／Ｖ　）　１５ｍｌを加えて
、激しく混和し、リン脂質を抽出した。この混合液から
２０００ＸｆｌＯ分間の遠心によってクロロホルム層を
分取し、分取したクロロホルム層を更にＩｏｍ／！の水
で洗った。この混合液から遠心によって再びクロロホル
ム層を分取し、３０℃で減圧乾固した後、残渣を０．５
−のｎ−ヘキサン−２−プロパノ−ルー水（６０：８０
：１４Ｖ／Ｖ　）混液に溶解した。この試料２０μノを
シリカゲル薄層（メルク社製シリカゲル６０ＴＬＣプレ
ート）にスポットし、クロロホルム−メタノール−水（
６０：３０：５Ｖ／Ｖ）の溶媒系で展開したところ３種
類のリン脂質が検出され、そのうちの二つは１−０−ア
ルキル−２−アセチル−５ｎ−グリセロ−３−ホスホリ
ルコリン及び１−〇−アルキルー２−アセチルー８ｎ−
グリセロ−３−リン酸とＲｆ値が一致した。

そこでこの３種類のリン脂質混合物を高速液体クロマト
グラフィーによって分離、精製した。

カラムはシソアルパックカートリッジシリカ８朋Ｘ　１
０ａｎ　（ウォーターズ社製）溶離液は上述したｎ−ヘ
キサン−２−プロ／やノール−水＝６０：８０　：　１
４、でピークの検出には４４１型紫外線検出器（ウォー
ターズ社）による２１４ｎｍの吸収及びＲ４０１型示差
屈折計（同ンを用いた。試料は５回に分け、０．１づつ
注入した。

この溶媒により、１−Ｏ−アルキル−２−アセチル−８
ｎ−グリセロ−３−リン酸、１−〇−アルキルー２−ア
セチルー８ｎ−グリセロ−３−ホスホリルコリン、１−
Ｏ−アルキル−２−アセチル−５ｎ−グリセロ−３−ホ
スホリルダラニオール、の３成分を分取した。

得られだ１−０−アルキル−２−アセチル−５ｎ−グリ
セロ−３−ホスホリルゲラニオールは、もう一度量様な
操作によシ８製し、精製物３ｍｑを得だ。これはＴＬＣ
及び高速液クロで単一であることを確認した。この化合
物のＩＲス被クりルは日本分光Ａ２０２型赤外分光光度
計を用い、液膜法で測定した。その結果を第３表に示し
た。（Ｒｕｎ隘４）さらに第３表に示しだ各種アルコー
ルについて同様な方法で転谷生成物を調製してＩＲスペ
クトルを測定した。（Ｒ１１，ｎ　Ｎａ　１〜３、ＮＱ
５〜ただし反応液にアルコールを加える際、そのアルコ
ールの溶解性に応じて水又はソエチルエーテルあるいは
アセトン等の有機溶媒溶液とし、酸性アルコールはＩＮ
カセイソーダ−で、アミン類はＩＮ塩酸でｐＨを６．０
に調整して用いた。

第３表（絖） 第３表（続） 第３表（続） 実施例３ １−〇−アルキルー２−アセチルー８７１−グリセロ−
３−ホスホリルコリンを出発物質として、Ｓ、　Ｆ、　
Ｙａｎｇら（Ｊ、　Ｅｉｏｌ　Ｃｈｅｍ　２４２　。

４７７．１９６７）又はに、　５ａｔｏｕｃｈｉら（Ｊ
。

Ｂｚｏｌ、　Ｃｈｅｒｎ、　２５６　＋　４４２５　ｔ
　１９８１）の方法でホスホリパーゼＤＭを作用させ調
整した、１−〇−アルキルー２−アセチルー５ｎ−グリ
セロ−３−ホスホリルエタノール（Ｉ）、１−Ｏ−アル
キル−２−アセチル−８ｒＬ−グリセロ−３−ホスホリ
ルエタノールアミン（２）、１−Ｏ−アルキル−２−ア
セチル−８ｎ−グリセロ−３−ホスホリルグリセロール
（ホ）を基質として実施例２と同様の方法で反応を行っ
た。ただしアルコールとして２０％リボース溶液を用い
た。これらの反応液を実施例２と同様に処理して共通の
転移生成物である、１−０−アルキル−２−アセチル−
８ｎ−グリセロ−３−ホスホリルリデースヲ得た。

その化合物のＪＲスペクトルを第４表に示した。

第４表

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・・・・（ I
   ） 但し式中Ａは下記（ｉ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・・・・（ｉ） を示し、ここでＲ＿１はα、β位に２重結合を持たない
   飽和もしくは不飽和のＣ＿７〜Ｃ＿２＿１の脂肪族炭化
   水素を示し、Ｒ＿２は飽和もしくは不飽和のＣ＿１〜Ｃ
   ＿５の脂肪族炭化水素を示し、Ａ′はオキシドアニオン
   又は水酸 基を示し、Ｂは−（ＣＨ＿２）＿２Ｎ＾＋（ＣＨ＿３）
   ＿３、−（ＣＨ＿２）＿２ＮＨ＿２、−ＣＨ＿２ＣＨ（
   ＮＨ＿２）ＣＯＯＨ、−ＣＨ＿２・ＣＨＯＨ・ＣＨ＿２
   ＯＨ、−ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＮＨ（ＣＨ＿３）、−ＣＨ＿
   ２ＣＨ＿２Ｎ（ＣＨ＿３）＿２もしくは−（ＣＨ＿２）
   ＿ｍＨ〔ここでｍは１〜５の数を示す〕で表わされるリ
   ン脂質と下記（１）〜（３）（１）ハロゲン、アミノ基
   、カルボキシル基及び水酸基よりなる群からえらばれた
   置換基 を有してもよい飽和もしくは不飽和のＣ＿６〜Ｃ＿２＿
   ６の脂肪族炭化水素残基； 一級アルコール性ＯＨに結合した鎖状の側 鎖を有するＣ＿７〜Ｃ＿２＿０の芳香族炭化水素残基、
   ここで該芳香族炭化水素残基の芳香族 環部分はハロゲン、アミノ基、カルボキシ ル基及び水酸基よりなる群からえらばれた 置換基を有していてもよい； 一級アルコール性ＯＨに結合した側鎖を有 するＣ＿６〜Ｃ＿２＿０の脂環式炭化水素残基；分子内
   にエーテル結合、エステル結合、及 びアミド結合からえらばれた結合を有し、 且つハロゲン、アミノ基、カルボキシル基 及び水酸基よりなる群からえらばれた置換 基を有してもよい飽和もしくは不飽和の Ｃ＿６〜Ｃ＿２＿０の脂肪族炭化水素残基；分子内にエ
   ーテル結合、エステル結合及び アミド結合からえらばれた結合を有し且つ 一級アルコール性ＯＨに結合した鎖状側鎖 を有するＣ＿７〜Ｃ＿２＿０の芳香族炭化水素残基、こ
   こで該芳香族炭化水素残基の芳香族環部 分にはハロゲン、アミノ基、カルボキシル 基及び水酸基よりなる群からえらばれた置 換基を有していてもよい； 及び 一級アルコール性ＯＨに結合した鎖状側鎖 を有し且つ下記複素環 フラン環、テトラヒドロフラン環、ジオ キソラン環、チオフエン環、ピロリジン 環、イミダゾール環、イミダゾリジン環、 オキサゾール環、チアゾール環、ピラン 環、オキサン環、チアン環、ピリジン環、 ピペラジン環、ピペリジン環、ピリミジ ン環、トリアジン環、モルホリン環、イ ンドール環、プリン環、フタルイミド環、 テトラヒドロフタルイミド環、ベンゾオ キソラン環及びヘキサメチレンイミン環 よりなる群からえらばれた複素環を持つ複 素環一級アルコール化合物残基、ここで該 残基の複素環部分はＣ＿１〜Ｃ＿３アルキル基、Ｃ＿１
   〜Ｃ＿３アルキレン基、水酸基、オキソ基、カルボキシ
   ル基、カルボニル基、ハロ ゲン、アミノ基、ベンジル基、フエニル基 及びＣ＿１〜Ｃ＿３のアルキレンスルホン酸基より成る
   群からえらばれた置換基を有して もよい； から成る群よりえらばれた残基を有する一級アルコール
   化合物、 （２）ハロゲン、アミノ基及びフエニル基より成る群か
   らえらばれた置換基を有していて もよい飽和もしくは不飽和のＣ＿１〜Ｃ＿１＿０の脂肪
   族炭化水素残基； 環に直接結合した２級アルコール性ＯＨを 有するＣ＿４〜Ｃ＿８の脂環式炭化水素残基；及び 環に直接結合した二級アルコール性ＯＨを 有し、且つピペリジン環、ピロリジン環及 びオキサン環よりなる群からえらばれた複 素環を持つ複素環二級アルコール化合物残 基、 ここで該残基の複素環部分はＣ＿１〜Ｃ＿３のアルキル
   基及び水酸基より成る群からえ らばれた置換基を有してもよい； から成る群よりえらばれた残基を有する２級アルコール
   化合物、及び （３）アミノ基、アセチルアミノ基、メチルニトロソウ
   レイド基、Ｃ＿１〜Ｃ＿３のアルキル基、フエニル基、
   フエノール基、ヒドロキ シメチルフエニル基、ニトロフエニル基、 メルカプト基、メチルメルカプト基、フエ ニルメルカプト基、ニトロフエニルメルカ プト基、ハロゲン、カルボキシル基、リン 酸基、ピリジル基、ピリミジル基、トリア ジル基、プリン基及び８−アザプリン基か らえらばれた置換基を有してもよいペント ース残基、ヘキソース残基、これらの２糖 類残基、デオキシペントース残基、デオキ シヘキソース残基及びヘプトース残基より 成る群からえらばれた糖残基、ただし上記 に於て、置換基がピリジル基、ピリミジル 基、トリアジル基、プリン基及び８−アザ プリン基からえらばれた置換基である場合 には、該置換基はメルカプト基、ハロゲン、水酸基、オ
   キソ基、カルボキシル基、アミ ノ基、Ｃ＿１〜Ｃ＿３のアルキル基、メトキシ基、エト
   キシ基、カルボキシメチル基、ア セチル基及びアニソイル基よりなる群から えらばれた置換基で更に置換されていても よい、 よりえらばれた糖残基を有する糖化合物、 からえらばれたアルコール性水酸基含有化合物とをホス
   ホリパーゼＤＭの存在下で反応させることを特徴とする
   下記式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・・・・・・・
   （II） 但し式中Ａ及びＡ′は上記したと同義であ りＣは上記（１）〜（３）における残基を示す、で表わ
   される１−Ｏ−アルキル−２−アシルグリセロリン脂質
   誘導体及びその塩類の製法。