JPS62247243A - 電気泳動用媒体材料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［発明の分野］ 本発明は、電気泳動用媒体材料に関するものであり、さ
らに詳しくは特に蛋白質等の生体高分子成分の電気泳動
分析に使用するのに適した電気泳動用媒体材料に関する
ものである。

［発明の背景］ 電気泳動分析の代表的な態様としては、ガラス板支持体
に寒天、セルロース、セルロースアセテート、デンプン
、シリカゲル、ポリアクリルアミド等の膜形成材料を塗
布または流延して製造した電気泳動膜に緩衝液をしみこ
ませ、この−Ｌに分析対象のＴｈ質を付着させ、支持体
のＰ４端に電圧をかけ、支持体の上または内部で展開（
移動）させたのち、染色し、この染色した試料の光学濃
度を測定して物質の各成分の１雀分析を行なう態様を挙
げることができる。

このような′心気泳動分析および電気泳動膜の詳細につ
いては、電気泳動実験法「電気泳動実験法（Ｌ！に訂第
５版）」（文光堂、１９７５年発行）。

青水、永井編″Ｊ！ｒ最新電気泳動法」　（成用書店、
１９７３年発行）′：９に記載されている。

近年において、電気泳動法は生体成分の分析に多用され
ており、特に蛋白分析は病気診断のための生化学検査に
おいてｓ１繁に用いられている。

電気泳動用膜またはシートとしては古くから濾紙が用い
られていたが、上述のように性能上の面から最近はアガ
ロース膜やポリアクリルアミドゲル膜が用いられるよう
になり、特に分子ふるい効果を有するポリアクリルアミ
ドゲル膜は現在最も多く利用されている。

ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドのような
単量体を、重合触媒の存在下、Ｎ、Ｎ’−メチレンビス
アクリルアミドのような二官滝性の架橋剤で酸素不存在
条件下て重合架橋させることによって得られている。

なお、ポリアクリルアミドゲル膜の製造に際しては変性
剤として陰イオン界面活性剤か添加されることが多いが
、蛋白質分析用ゲル膜の製造においては、変性剤の必要
量が少ないため、湿潤ゲル膜に変性剤水溶液を塗布する
方法、ゲル膜を変性剤水溶液に浸漬する方法等によりゲ
ル膜内に変性剤を含浸させることができる。

上記の重合反応はラジカル架橋重合であり、酸素の影響
により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲル
膜は＃素を遮断した状態で調製する必要かある。この理
由から、現在では一般に。

ポリアクリルアミドゲル膜は２枚のガラス板で形成され
たセル（一定の空間、たとえば約０．３〜１ｍｍ厚の空
間を有するもの）の中にゲル形成液を注入し、酸十を遮
断した状態で架橋重合させてゲル膜を形成させている。

しかし、この方法は二枚のガラス板の間でゲル膜を形成
するために、取り扱い性が悪く、かつゲル膜の量産化か
困難であるといった大きな欠点を有している。

以上のようにして形成したポリアクリルアミドゲル膜を
電気泳動媒体として用いる電気泳動操作は、たとえば、
次のようにして実施される。

サンプルスロットが上端部に設けられたポリアクリルア
ミドゲル膜をガラス板に挟んだままの状態で垂直に配置
し、まず前電気泳ｆｊＪ操作を行なったのち、サンプル
スロット中に試料を一定量注入し、次いで電気泳動操作
を行なう。そして一定時間の電気泳動を行なった後、片
面のガラス板を注意深く除去し、染色液中に浸漬して、
泳動分層した蛋白質もしくはその誘導体１分解物などを
染色して、泳動パターンを画像化する。

従来のアクリルアミドゲル膜な用いた１「気泳動媒体材
料は上記のようにガラス板を用いるために取り扱い性に
問題があり、しばしばガラスを割ったりして実験を失敗
することがある。この様な欠点を改良した取り扱い性の
良好な１に気泳動用媒体材料の開発は既にすすめられ、
支持体としてポリエチレンテレフタレートなどのプラス
チック材料からなる支持体を用い、その上にポリアクリ
ルアミドゲル膜を形成した電気泳動媒体材料か既に提案
されている。

］−記のプラスチック材料製の支持体を用いた゛電気泳
動媒体材料は、その製造が容易で、取り扱い性も良いと
の利点を有する。そして、蛋白質などの電気泳動も、そ
の電気泳動媒体材料を用いて行なうことができるか１本
発明者が詳細に検討したところによると、支持体として
ガラス板を用い、て製造した従来の゛電気泳動媒体材料
に比較すると。

その解像力か若干低下する傾向かあることがわかった。

［発明の要旨］ 本発明の目的は、新規なプラスチック製フィルム（ある
いはシート）を支持体として用いたポリアクリルアミド
ゲル膜系電気泳動媒体材料を提供することにある。

本発明の］」的は、特にプラスチック製フィルム（ある
いはシート）を支持体として用いたポリアクリルアミド
ゲル膜系電気泳動媒体材料であって、支持体としてガラ
ス板を用いて製造した電気泳動媒体材料と同等もしくは
それ以上の解像力を示す電気泳動媒体材料を提供するこ
とにある。

本発明は、アクリルアミド系化合物と架橋剤とが木の存
在下で架橋刊合してなるポリアクリルアミド系水性ゲル
からなる電気泳動用媒体層およびプラスチック材料製支
持体を含む電気泳動用媒体材料てあって、該電気泳動用
媒体層と支持体層との間に、該支持体材料よりも酸素透
過係数が低い樹脂材料からなる樹脂中間層が備えられて
いることを特徴とする電気泳動用媒体材料からなるもの
である。

［発明の効果］ 本発明の電気泳動用媒体材料は、上記のようにプラスチ
ック製支持体からの電気泳動媒体層への酸素の透過、拡
散を低下させることのできる樹脂中間層が設けられてい
るため、電気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜
）の形成のための架橋重合反応が非常に円滑に進行し、
高度に均質な電気泳動用媒体層が形成される。従って、
そのような樹脂中間層を備えていないプラスチック支持
体層に形成された電気泳動用媒体層に比較して、本発明
の電気泳動用媒体材料の電気泳動用媒体層は、更に高い
解像性を示す。

［発明の詳細な記述］ 本発明の電気泳動用媒体材料の支持体は、プラスチック
材料から形成されるシート状物（フィルム状物も含む）
である。このプラスチック製シートとしては、任意のプ
ラスチック材料から形成したものを用いることができる
。好ましいプラスチック材料の例としては、ポリエチレ
ンテレフタレート、ビスフェノールＡのポリカルボネー
ト、ポリ塩化ビニル、ポリメチルメタクリレート、ポリ
エチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、セルロース
アセテート、およびセルロースアセテートプロピオネー
トをあげることができる。

プラスチック材料製支持体は公知の表面活性化処理によ
り表面を親水化したものであることが好ましい。表面親
木化処理のためには紫外線照射、グロー放電処理、コロ
ナ放電処理、火焔処理、電子線照射、ケミカルエツチン
グ、電解エツチング笠の公知の方法を適用することがで
きる。

支持体は、一般に厚さが約５０〜５００７ｈｍ、好まし
くは約７０〜３００ｐｍのものか用いられる。

これまでに提案されているプラスチック製支持体を用い
た電気泳動用媒体においては、プラスチック製支持体上
に、直接あるいは接着剤層を介してポリアクリルアミド
ゲル形成用塗布液が塗布され、次いで窒素雰囲気下にて
架橋重合反応か行なわれている。

本発明の電気泳動用媒体においては、プラスチック製支
持体上に酸素透過係数が低い樹脂材料からなる樹脂中間
層が設けられる。

と記の樹脂中間層は、層厚２０ｇｍに形成したフィルム
の状態における酸素透過量が１５ｃｃ／ゴ・ａＬＩｌ−
ｄａｙ以下の樹脂材料よりなることが好ましく、特に層
厚２０１Ｌｍに形成したフィルムの状態における酸素透
過量が１Ｏｃｃ／ゴ・ａＬ■・ｄａｙ以下の樹脂材料よ
りなることが好ましい。好ましい樹脂材料の例としては
、塩化ビニリデン・塩化ビニル共重合体、ポリビニルア
ルコール、ポリアクリロニトリル、ポリ塩化ビニリデン
、ビニルアルコール・エチレン共重合体、塩化ビニリデ
ン・アクリロニトリル共重合体、アクリロニトリル・メ
チルアクリレート・ブタジエン共重合体などを挙げるこ
とができる。なお、上記の酸素透過！、：、は、酸素透
過にの測定方法として一般的に利用されているｍ　ｏ　
ｃ　ｏ　ｎ法による測定値である。

上記樹脂中間層は約０．５〜２０μｍの層厚を有するこ
とが好ましく、さらに約１〜８μｍの層厚を有すること
が特に好ましい。

樹脂中間層と上記支持体とがらなる積層体の酸十透過量
は１０　ｃ　ｃ　／ｒｔｆ−ａｌ、ｍ　・ｄａｙ以下で
あることが好ましく、さらに７　ｃ　ｃ　／ｍ′・ａｔ
＠・ｄａｙ以下であることが特に好ましい。

１−、記の樹脂中間層の４−に直接、あるいは接着剤層
などの他の中間層を介して電気泳動用媒体層が設けられ
る。

次に電気泳動用媒体層（以下において、ゲル媒体層、ポ
リアクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル膜ともいう）
について説明する。

ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド系化合物
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中て両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることがてきる０本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて巾に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。

ポリアクリルアミドゲル膜の形成に用いることがてきる
アクリルアミド系化合物の例としては、アクリルアミド
、Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリ
ルアミド、Ｎ−（ヒドロキシメチル）アクリルアミド、
ジアセトンアクリルアミド等のアクリルアミド系化合物
やメタクリルアミド等のメタクリルアミド系化合物が挙
げられ、これらの化合物は単独で、あるいは二種以上を
併用して用いることができる。これらのアクリルアミド
系化合物のうちてはアクリルアミドか最も好ましく、ま
たアクリルアミドと他のアクリルアミ１〜県北合物、メ
タクリルアミド系化合物の一種以上の併用も好ましい。

架橋剤としてはｒ　　ＥＩｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ
Ｊ　１９ｇ１．２゜２２０−２２８等に記載の公知の化
合物（一種または二種以上の組合せ）を用いることがで
きる。架橋剤の其体例としては、Ｎ、Ｎ’　−メチレン
ビスアクリルアミド（ＢＩＳ）；Ｎ、Ｎ’　−プロピレ
ンビスアクリルアミド（ＰＢＡ）、ジ（アクリルアミド
ジメチル）エーテル（ＤＡＥ）；　ｌ、２−ジアクリル
アミドエチレングリコール（ＤＥＧ）；エチレンウレア
ビスアクリルアミド（ＥＵＢ）；エチレンジアクリレー
ト（ＥＤＡ）；Ｎ、Ｎ’　−ジアリルタータルジアミド
（Ｎ、Ｎ’−ｄｉａｌｌｙｌＬａｒｔａｒｄｉａｓｉｄ
ｅ　　：　ＤＡＴＤ）　；およびＮ、Ｎ’　−ビスアク
リリルシスタミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌｃ
ｙｓＬａｍｉｎｅ。

ＢＡＣ）等の二官渣性化合物か挙げられる。

架橋剤の量は、弔が体と架橋剤の総重量に対して約２〜
３０ｗｔ％、好ましくは約３〜ｌｏｗｔ％の範囲である
。

ゲル濃度としては、Ｓ、　１ｌｊｅｒｔｅｎ：　　ｒ　
　Ａｒｃｈ。

口ｉｏｃｈｅｍ、　　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　　Ｊ　　Ｉ　
　（５ｕｐｐ１．　　）、　　１４７（１９６２）に記
載の定義に従って表示して、単量体、架橋剤および水か
らなるゲル膜の容積に対して、単量体と架橋剤の量か約
３〜３０　ｗ　／　ｖ％の範囲で好ましく用いられる。

本発明の電気泳動用媒体材料は主として蛋白質または複
合蛋白質（たとえばリボプロティン、糖プロティンなど
）の分析に有利に用いられるものてあり、電気泳動用媒
体層には、変性剤として陰イオン性界面活性剤を含有さ
せることができる。

分析試料か蛋白質または複合蛋白質（例えばリボ蛋白質
、糖蛋白質など）の場合には陰イオン界面活性剤を含ま
せることは好ましいが、または必須であることが多い。

陰イオン界面活性剤をゲル媒体層に含有させないことが
あることは勿論である。たとえば陰イオン界面活性剤を
含有しないゲル媒体層は、ＤＮＡフラグメント分析に基
づく遺伝病診断あるいは制限酵素分解を利用したＤＮＡ
構造解析などの１］的に用いることができる。

陰イオン界面活性剤を電気泳動用媒体層に含有させるこ
とにより、蛋白質または複合蛋白質の効率的な分離およ
びそれらの分子が測定か可能となる。

陰イオン性界面活性剤の例としてはアルキル硫酸塩か挙
げることができ、特に炭素原子数ｌＯ以七の長鎖アルキ
ル基を有するアルキル硫酸塩が好ましく用いられる。塩
を形成する陽イオンとしては、ナトリウムイオン、カリ
ウムイオン、リチウムイオン笠のアルカリ金属イオンが
一般的であり、これらのうちてはナトリウムイオンか用
いやすい。アルキル硫酸塩のうちではドデシル硫酸塩（
ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等）が好ましく
、なかてもドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）か最も好
ましい。ＳＤＳを本発明のゲル媒体層に含有させること
により蛋白質または複合蛋白質の効率的な分ｍおよびそ
れらの分子量測定が可ｆ敵となる。

変性剤としての陰イオン界面活性剤の含有州はゲル形成
液に対して、約０，０５〜２．０ｗ／ｖ％、好ましくは
約０．１〜１．５ｗ／ｖ％の範囲である。

ポリアクリルアミドゲル膜には水溶性ポリマーを含有さ
せることができる。

水溶性ポリマーとしては、付加重合型または縮東金型の
水溶性ポリマーを用いることがてきる。

付加重合型ポリマーの具体例としては、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーか挙げられる。１Ｉｉｉｆ
ｆｉ合型ポリマーの具体例としてポリエチレングリコー
ル、ポリプロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポ
リアルキレンゲリコールか挙げられる。水溶性ポリマー
の分子量は、約１万から約１００万の範囲のものか好ま
しい。これらの水溶性ポリマーのうちては、ポリエチレ
ングリコール、ポリアクリルアミドか特に好ましい。

水溶性ポリマーは、単量体と架橋剤の合計重量に対して
約２〜１００　ｗ　ｔ％の範囲、好ましくは約５〜５０
　ｗ　ｔ％の範囲の量で用いられる。水溶性ポリマーを
添加することにより、ポリアクリルアミドゲル膜は可塑
性を有するようになるため、裁断加工時に壊れることが
なくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有するよう
になり、もろさが改良され、壊れにくくなるとの利点が
ある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加量を選
択することにより、ゲル膜の粘度をコントロールするこ
ともできる。

ポリアクリルアミドゲル膜にはアガロースを含有させる
ことがてきる。アガロースは公知のアガロースであれば
特に制限はなく、低電気浸透性、中電気＄２′Ｘ１ｉ性
、高電気浸透性アガロースのいずれをも用いることがで
きる。用いることのできるアガロースの例としては特開
昭５５−５７３０号、特開昭５５−１１０９４６号、特
表昭５７−５０２０９８号等の公報に開示されているア
ガロース等がある。

アガロースは、ｍ　Ｈ体と架橋剤とを含むゲル組成液の
容積に対して約０．２〜２　ｗ　／　ｖ％、好ましくは
約０．３〜１．２ｗ／ｖ％の割合にて添加される。ゲル
膜にアガロースを添加することにより、ゲル形成用溶液
温度を変化させることにより、適当な溶液粘度にコント
ロールすることが可能となり、そのｔｌｉ、ｆｈ性を止
めることができ、またゲル膜を成形する時には成形しや
すくなるとの利点がある。

ゲル媒体層にはｐＨ緩衝剤を含有させることもできる。

緩衝剤としては、電気泳動分析される試料に応じて、Ｐ
Ｈ２，５から１０．０の範囲内のｐＨ４ｔｉに緩衝でき
る公知の緩衝剤から適宜選択して用いることができる。

用いつる緩衝剤としては、日本化学会ｔ！Ａ「化学便覧
　基礎編」（東京、丸管■１９６６年発行）１３１２−
１３２０ベージ：８木、永井編「最新電気泳動法」　（
東京、広角書店、　１９７３年発行３２０−３２２ベー
ジ；　ｒ　Ｄａｔａ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ
　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＪ　（Ｒ，Ｍ。

Ｃ，Ｄａｗｓｏｎ　ｃＬ　ａｌ、編、第２版、　０ｘｆ
ｏｒｄ　ａｔ　ＬｈｅＣｌａｒｃｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ
、　１９６９年発行）　　４７６−５０８ベージ；　ｒ
　ＲｉｏｃｈｅｍｉｓＬｒｙ　Ｊ　　５．４６７　（１
９６６）、ｒ　ＡｎａｌｙＬｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｓＬｒｙＪ　１０４．　：１００−：１１０（１９８
０）ｉに記載の緩衝剤か挙げられる。

緩衝剤の例としては、バルビツールを含む緩衝剤、トリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）を含
む緩衝剤、燐酸塩を含む緩衝剤、ホウ酸塩を含む緩衝剤
、酢酸または酢酸塩を含む緩衝剤、クエン酸またはクエ
ン酸塩を含む緩衝剤、乳酸または乳＃Ｊｉ！を含む緩衝
剤、グリシンを含む緩衝剤、Ｎ、Ｎ−ビス（２−ヒドロ
キシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、Ｎ−２−ヒド
ロキシエチルピペラジン−Ｎ’　−２−ヒドロキシプロ
パン−３−スルホン＃　（ＨＥＰＰＳＯ）またはその塩
、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’　−３−
プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳ）またはその塩、Ｎ−［
トリス（ヒドロキシメチル）コー３−アミノプロパンス
ルホン酸（ＴＡＰＳ）またはその塩等をおよび、これら
のいずれかと必要により組合せられる酸、アルカリ、ま
たはＪ′ｉ！等を挙げることができる。好ましい緩衝剤
の具体例としては、燐酸二水素カリウム−燐酸水素二ナ
トリウム、Ｔｒｉｓ・ホウ酸ナトリウム、Ｔｒｉｓ・ホ
ウ酸ナトリウム・ＥＤＴＡＺＮａ塩、Ｔｒｉｓ・クエン
酸、ハルビタールナトリウム・酢酸ナトリウム、ハルビ
タールナトリウム・塩酸。

バルビツール・ハルビタールナトリウム、酢酸・酢酸ナ
トリウム、乳酸・乳酸ナトリウム、クエン酸−燐酸木よ
ニナトリウム、ビシン（Ｂｉｃｉｎｅ）　。

ＨＥＰＰＳＯ，ＨＥＰＰＳＯナトリウム塩、ＥＰＰＳ、
ＥＰＰＳナトリウム塩、ＴＡＰＳ、ＴＡＰＳナトリウム
塩等を挙げることができる。

本発明においてポリアクリルアミドゲル膜はアクリルア
ミドに代表される単量体、二官能性のアリル（ａｌｌｙ
ｌ　）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水溶性
ポリマー、およびアガロースを実質的に均一に溶解させ
た水溶液中で単量体と架橋剤とをラジカル架橋重合させ
て得られるものであり、単量体と架橋剤から形成された
三次元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースか実質
的に分散されて、後二者のポリマー釦か三次元架橋重合
体とがらみあっている構造を有すると推定される。

上記のラジカル架橋重合反応は、分子状酸素の不存在下
で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知の
方法により発生させることができる。この反応を加熱お
よび紫外線照射により加速することもできる。

ラジカル架橋重合用触媒としては、ｒ　　Ｅｌｅｃｔｒ
。

ｐｈｏｒｅｓｉｓＪ　　１９８１．　２．　２１３−２
１９．　同　　１９８１．　２．　２２０−２２８；青
水、永井編［最新電気泳動法Ｊ　（１９７３年発行）等
に記載の公知の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜
選択して用いることができる。

好ましいラジカル重合開始剤の具体例としては、β−ジ
メチルアミノプロピオニトリル（ＤＭＡＰＮ）−ベルオ
クソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ、Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’
−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＥＭＥＤ）−ベル
オクソニ硫酸アンモニウム混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフ
ラビン混合物、ＴＥＭＥＤ−リボフラビン−過酸化水素
混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げられる。ラジカル
重合開始剤の含有量は、巾ｈ１一体と架橋剤の合計重碌
に対して約０．３〜５重量％、そして好ましくは約０．
５〜３屯量％の範囲である。

ゲル媒体層は、支持体上の前記の樹脂中間層の上に直接
あるいは接着剤層などの他の中間層を介して上記のゲル
形成液を公知の方法により塗布して設けたのち、ゲル形
成液を架橋重合させることにより形成することができる
。

ゲル形成液を樹脂中間層の表面で架橋重合させる場合に
は、ゲル形成液塗布層の上をさらにカバーフィルム、シ
ートまたは板などの被覆材料でおおうことができる。こ
の目的に使用されるカバーフィルム、シート、または板
としては前記支持体と同様な素材からなり、更に支持体
と同様に、酸実透過能を低下させているものを用いるこ
とがてきる。被覆材料の厚さは３００Ｂｍ以下てあり、
実用的に好ましい厚さの範囲は約４〜２００延ｍであり
、特に好ましい範囲は約４４ｍ〜１００ｇｍである。

ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて抗酸化剤
などの他の添加剤を含有させることができる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうろことが知られている種々
の化合物を用いることができる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールを
挙げることがてきる。

その他の添加剤としては湿潤剤かあり、ポリアクリルア
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコールＴのポ
リオール化合物を含有させることもてきる。ポリオール
化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約５〜約４０
　ｗ　／　ｖ％の範囲から選ばれる。ポリオール化合物
のうちではグリセリンか特に好ましい。湿潤剤を配合す
ることによりゲル膜の保存時の極端な水分の蒸発による
乾燥を防ぐことがｌｌｆｆ駈となり、また極端な乾燥に
起因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等のゲル膜の物
性か改Ｒされるとの利点かある。

本発明の電気泳動用媒体材料は、前述の諸文献等に記載
の公知の方法に従って、水モ型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とができる。

以ドに本発明の実施例を記載するが、これらは未発１１
の範囲を限定するものてはない。

［実施例１］ 紫外線照射処理により表面を親木性にした厚さ１８０ｇ
ｍの無色透明ポリエチレンテレフタレートシート（支持
体）七に、塩化ビニリデン・塩化ビニル（９：ｌ）共重
合体のラテックス（この塩化ビニリデン・塩化ビニル（
９：ｌ）共重合体の層厚２０ｐｍに形成したフィルムの
状態における酸素透過量は約５ｃｃ／ｍ２・ａｔｍ　・
ｄａｙ　）を塗布して、層厚か約５ｐｍの樹脂層を形成
した。

Ｌ記の樹脂層か付設された支持体の酸素透′ｊＳ係数は
４ｃｃ／ｒｒｆ−ａｔｍ・ｄａｙてあった。

支持体上に設けられた蒸着層の上に、アクリルアミド９
．５ｇ、ＢＩＳｏ、５ｇ、リン酸水素二ナトリウム・十
三水塩３．５８ｇ、　　リン酸二水素ナトリウム・二水
塩０．３３ｇ、および５ＤＳＯ、ｌｏｇを含有する１０
０ｍＪＬの溶液に改合開始剤としてベルオクソニ硫酸ア
ンモニウム（５ｍ　ｊｉ１％）１．３ｍｌ、ＴＥＭＥＤ
３３．ｕを加えたものを０．３ｍｍの厚みに塗布成形し
、窒素雰囲気下にて、１００ｗ高圧水銀灯をｌｏｃｍの
距離から照射し、１０分間静置しポリアクリルアミドゲ
ル膜を得た。

［比較例１］ ポリエチレンテレフタレートシート（支持体）Ｌに、塩
化ビニリデン・塩化ビニル（９：１）共重合体の塗布層
を設けなかったこと以外は実施例１と同様にして支持体
上にポリアクリルアミドゲル１悶を形成した。

なお、Ｌ記の支持体の酸素透過係数は１７ｃｃ／ゴ・ａ
ｔｅ　−ｄａｙてあった。

［参考例１］ 支持体としてポリエチレンテレフタレートシートの代り
にガラス板を用い、ｔｉｊ化ビニリデン・塩化ビニル（
９・ｌ）共重合体の塗布層を設けなかったこと以外は実
施例１と同様にして支持体上にポリアクリルアミドゲル
膜を形成した。

［電気泳動試験］ 実施例１、比較例１および参考例１で１１）られたポリ
アクリルアミドゲル膜にサンプル注入口を形成し１次い
でゲル膜に厚さ６３牌ｍのポリエチレンテレフタレート
シート（カバーシート）をかぶせた。

このポリアクリルアミドゲル膜を使用して！！準蛋白質
試料を電気泳動にかけ、分離実験を行なった。

電気泳動終了後に、ゲル膜のカバーフィルムを静かには
がして除去し、ゲル膜全体を０．１％コーマシープルー
水溶液に浸漬して、泳動ゾーンを青色に染色した。

実施例１および参照例１のゲル膜により得られた泳動パ
ターンは高い解像力を示し、解読か容易であった。一方
、比較例１のゲル膜により得られた泳動パターンの解像
力は、実施例１および参照例１のゲル膜により得られた
泳動パターンの解像力に比較して低かった。

また、実施例１および参照例１のゲル膜により得られた
泳動パターンのスマイリング効果による中央部泳動列と
両側部泳動列との泳動距離の差はいずれも小さい値てあ
ったが、比較例１のゲル膜により得られた泳動パターン
のスマイリンク効果による中央部泳動列とｒ＋？側部泳
動列との泳動距離の差は大きかった。

［実施例２］ 支持体りに設ける中間樹脂層をポリアクリロニトリル（
このポリアクリロニトリルの層厚２０μｍに形成したフ
ィルムの状態における酸素透過量は約２ｃｃ／ｌｒｒ’
・ａｔｍ　−ｄａｙ　）から、厚さを１１０１Ｌの層と
して形成した以外は実施例１と同様にして中間樹脂層を
有する支持体を形成した。

上記の樹脂層か付設された支持体の酸よ透過係数は２　
ｃ　ｃ　／ｒｎ’−ａｔｍ　−ｄａｙであった。

次いて、］二２支持体七に中間樹脂層の上に実施例１と
同様にしてポリアクリルアミドゲル膜を形成した。

［電気泳動試験］ 実施例２、比較例１および参考例１で得られたポリアク
リルアミドゲル膜にサンプル注入口を形成し、次いでゲ
ル膜に厚さ５０４ｍのポリエチレンテレフタレートシー
ト（カバーシート）をかぶせた。

このポリアクリルアミドゲル膜な使用して、標準蛋白質
試料を電気泳動にかけ１分離実験を行なった。

電気泳動路ｒ後に、ゲル膜のカバーフィルムを静かには
かして除去し、ゲル膜全体を０．１％コーマシーブルー
水溶液に浸漬して、泳動ゾーンを青色に染色した。

実施例１および参照例１のゲル膜により得られた泳動パ
ターンは高い解像力を示し、解読か容易であった。一方
、比較例１のゲル膜により得られた泳動パターンの解像
力は、実施例１および参照例１．のゲル膜により得られ
た泳動パターンの解像力に比較して低かった。

また、実施例１および参照例１のゲル膜により得られた
泳動パターンのスマイリング効果による中央部泳動列と
両測部泳動列との泳動距離の差はいずれも小さい値であ
ったが、比較例１のゲル膜により１りられた泳動パター
ンのスマイリング効果による中央部泳動列と両測部泳動
列との泳動距離の差は大きかった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、アクリルアミド系化合物と架橋剤とが水の存在下で
   架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲルからな
   る電気泳動用媒体層およびプラスチック材料製支持体を
   含む電気泳動用媒体材料であって、該電気泳動用媒体層
   と支持体層との間に、該支持体材料よりも酸素透過係数
   が低い樹脂材料からなる樹脂中間層が備えられているこ
   とを特徴とする電気泳動用媒体材料。 ２、上記樹脂中間層が０．５〜２０μｍの層厚を有する
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動
   用媒体材料。 ３、上記樹脂中間層が、層厚２０μｍに形成したフィル
   ムの状態における酸素透過量が１５ｃｃ／ｍ＾２・ａｔ
   ｍ・ｄａｙ以下の樹脂材料よりなることを特徴とする特
   許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒体材料。 ４、上記樹脂中間層が、塩化ビニリデン・塩化ビニル共
   重合体、ポリビニルアルコール、ポリアクリロニトリル
   、ポリ塩化ビニリデン、ビニルアルコール・エチレン共
   重合体、塩化ビニリデン・アクリロニトリル共重合体、
   およびアクリロニトリル・メチルアクリレート・ブタジ
   エン共重合体からなる酸素低透過性樹脂材料を含むこと
   を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒
   体材料。 ５、上記樹脂中間層が上記支持体に塗布により形成され
   ており、かつ該樹脂中間層と支持体とが形成する積層体
   の酸素透過量が、１０ｃｃ／ｍ＾２・ａｔｍ・ｄａｙ以
   下であることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
   電気泳動用媒体材料。 ６、プラスチック材料製支持体がポリエチレンテレフタ
   レートからなることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   記載の電気泳動用媒体材料。 ７、上記電気泳動用媒体層がさらに水溶性ポリマーおよ
   びアガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲第
   １項乃至第６項のいずれかの項記載の電気泳動用媒体材
   料。 ８、上記電気泳動用媒体層がさらに陰イオン界面活性剤
   からなる変性剤を含むことを特徴とする特許請求の範囲
   第１項乃至第６項のいずれかの項記載の電気泳動用媒体
   材料。