JPS6239697B2 - - Google Patents

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JPS6239697B2
JPS6239697B2 JP54155210A JP15521079A JPS6239697B2 JP S6239697 B2 JPS6239697 B2 JP S6239697B2 JP 54155210 A JP54155210 A JP 54155210A JP 15521079 A JP15521079 A JP 15521079A JP S6239697 B2 JPS6239697 B2 JP S6239697B2
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JP
Japan
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liquid
sample
liquid level
tube
particles
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JP54155210A
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English (en)
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JPS5677743A (en
Inventor
Shigenori Daito
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Sysmex Corp
Original Assignee
Sysmex Corp
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Publication date
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Publication of JPS5677743A publication Critical patent/JPS5677743A/ja
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/1031Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects
    • G01N15/12Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects by observing changes in resistance or impedance across apertures when traversed by individual particles, e.g. by using the Coulter principle

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  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、液体に浮懸する血球などの粒子を、
液と粒子との電気インピーダンスの差異に基づい
て高い精度で検出することができる粒子検出装置
に関するもので、吸引した前回の試料を測定の都
度洗い流し、赤血球と血小板のように大小の粒子
が入り混つた混合液における血小板の補正計数な
どを可能にする粒子検出装置を提供せんとするも
のである。
〔従来の技術〕
従来から、血球などの粒子を計数する場合、液
体に浮懸する血球などの粒子を液と粒子との電気
的差異または光学的差異により検出し、電気信号
に変換して粒子に相当するパルス信号を計数する
方式がとられている。
〔発明が解決しようとする問題点〕
従来の検出器においては、微細孔を通じて吸引
された前回あるいはそれ以前の試料が残り、とく
に比重の大きいものが沈殿し、測定のたびに舞い
上り微細孔の裏側で巻き込みの現象が生じ、この
ため大小の粒子の入り混つたたとえば赤血球と血
小板との混合液中の血小板のみを検出したいとき
に、検出領域に入つた大きい方の赤血球粒子によ
つて生じるパルスと血小板のパルスとの区別がで
きなくなり、測定値に誤差を与えるという欠点が
あつた。さらに赤血球の巻き込みによつて生ずる
パルス数は、赤血球数から補正演算によつて求め
ることができるが、前回あるいは前々回の試料中
の赤血球数の影響もあり、単純な演算では求める
ことができない。
以上のように2種以上の粒子が混在する粒子の
懸濁液中の粒子を、分類計数することはかなり困
難である。微細孔の裏側に微細孔を通過してくる
粒子をすべて吸引して、いわゆる巻き込み現象が
生じないような方法を用いることも可能である
が、吸引した懸濁液の定量が不可能になつたり、
あるいは構造が非常に複雑になるなどの欠点があ
つた。また通常の検出器の構造においては、定量
部と直結しているのが一般的で、水銀U字管を用
いたりあるいは空気層との不連続部を設けて液面
を検知することによつて定量を行つているが、試
料の混入によつて汚れや腐蝕を生じたりして、定
量誤差や誤動作を生ずるという欠点があつた。
本発明は上記の欠点を解消するためになされた
もので、検出器内に吸引した前回の試料を測定の
都度洗い流して洗浄し、常に同一条件で測定を行
うことができる粒子検出装置の提供を目的とする
ものである。
すなわち、従来技術においては、たとえば血小
板の計数値を与えるには、今回の赤血球数、前回
の赤血球数、前々回の赤血球数によつて、血小板
数測定結果を補正しなければならなかつた。また
複雑な補正式を避けるためには、赤血球の影響を
受けないようにする必要があり、検出器の構造を
複雑にしなければならない。さらに定量部に試料
が混入し、汚れや腐食を生じるという問題点があ
る。
本発明はこれらの問題点を解決するもので、前
回の試料をすべて洗浄して除去してしまうことに
より、今回の赤血球数のみで血小板数の補正を行
うことができ、複雑な検出器を必要とせず、また
吸引した懸濁液の定量も狂わずに、簡単な補正式
で血小板数を求めることができ、かつ毎回洗浄す
ることにより、定量部が汚れないようにし、正確
な定量を実現することができる粒子検出装置の提
供を目的とするものである。
〔問題点を解決するための手段〕
本発明の粒子検出装置は、図面を参照して説明
すれば、試料チヤンバ1を貫通して管4を設け、
この管の試料チヤンバ内の試料液中に位置する部
分に微細孔6を有する検出器ペレツト7を設け、
この管の下端に電磁弁8を介して洗浄液供給管1
0の下端を接続し、この洗浄液供給管の上部に液
面調節制御装置12を介して洗浄液タンク13を
接続し、一方、前記試料チヤンバ1を貫通する管
4の上部に試料液定量用の液面検出手段16,1
7を設けるとともに、この管の上端に大気および
負圧源に連通自在の絶縁中継部18を接続し、さ
らに前記試料チヤンバ1内の試料液5中と試料チ
ヤンバを貫通する管4内とに電極24,25を配
置し、これらの電極、前記液面検出手段16,1
7および液面調節制御装置12を2種以上の大き
さの粒子を分類計数する信号処理装置26に接続
したことを特徴としている。
〔作用〕
試料チヤンバを貫通する管4の内部に洗浄液を
通過させて洗浄する。同時に試料チヤンバ1内の
試料も排出し、次の試料が試料導入口2から導入
される。ついで検出器ペレツト7の微細孔6を通
じて粒子の懸濁液を管4内に吸入させる。このと
き液と粒子との電気インピーダンスの差異に基づ
いて粒子が検出されパルス信号が発生する。下側
の液面検出手段16を液面が通過する際に計数開
始信号を発生し、上側の液面検出手段17を液面
が通過する際に計数終了信号を発生し、この間の
粒子数を計数し、かつ2つの液面検出手段16,
17の区間を所定体積にすることにより、単位体
積当りの粒子数を測定する。
試料チヤンバを貫通する管4は、定量管と洗浄
管を兼ねている。この管4を毎回測定前に洗浄液
を流して洗うので、液面検出手段16と液面検出
手段17との間の定量部が汚れて定量誤差を生じ
たり、誤動作することがない。このように毎回洗
浄によつて、前検体測定試料は管4から洗い流さ
れるので、常に一定の条件のもとに計数が開始さ
れ、たとえば血小板計数の場合は、前回以前の試
料中の赤血球は、今回の血小板計数値に影響しな
くなる。
〔実施例〕
以下、本発明の実施例を図面に基づいて説明す
る。第1図は本発明の粒子検出装置の一実施例を
示している。1は粒子懸濁液、たとえば血球の浮
懸液を収容するための試料チヤンバで、血球の浮
懸液は試料導入口2から導入され、一方、測定済
の血球の浮懸液は試料排出口3から排出される。
この試料チヤンバ1を縦方向に貫通して内径が3
〜10mm程度のガラス管4が設けられ、このガラス
管4の試料チヤンバ1内の試料液5(粒子浮懸
液)中に位置する部分に、血球が1個づつ通過で
きる程度の70〜100μの微細孔6を有する検出器
ペレツト7が設けられる。ガラス管4の下端は電
磁弁8を介して縦方向に設けられた洗浄液供給管
10の下端に接続され、この洗浄液供給管10の
上部の液溜め部11に液面調節制御装置12を介
して洗浄液タンク13が接続される。14は液溜
め部11に隣接して設けられた液面検出装置、1
5は洗浄液タンク13の下部の管に設けられた液
面調節用の電磁弁である。一方、前記試料チヤン
バ1を貫通するガラス管4の上部に、試料液定量
用の液面検出手段16,17が一定間隔に設けら
れるとともに、このガラス管4の上端に大気およ
び負圧源に連通自在の絶縁中継部18が接続され
る。すなわち、20は大気に連通する管、21は
負圧源に連通する管、22,23は電磁弁であ
る。さらに前記試料液チヤンバ1内の試料液5中
と、試料チヤンバを貫通するガラス管4内とに外
部電極24と内部電極25とがそれぞれ配置さ
れ、これらの電極24,25、前記液面検出手段
16,17および液面調節制御装置12は2種以
上の大きさの粒子を分類計数する信号処理装置2
6に接続されている。絶縁中継部18は内部電極
25がホツト側にあるため電気的に切断し、漏洩
やノイズの混入を防止するためのもので、ガラス
管4の上部先端が絶縁中継部の内部へ突出する構
造をなし、ガラス管内の液が液滴となつて流出す
るようにしている。したがつて電磁弁8の駆動電
源もまたフローテイング方式であり、ノイズや漏
洩を防止した状態で使用される。一方、外部電極
24はアース側に接続されており、前述のように
試料液5中に浸漬されている。
上記のように構成された本発明の粒子検出装置
において、洗浄過程は次のような操作により行わ
れる。まず電磁弁8,23を開放し、電磁弁23
を介して絶縁中継部18内に吸引圧力を与える
と、ガラス管4の内部をガラス管終端の液溜め部
11に溜められた洗浄液が通過して、ガラス管4
の内部が洗浄される。同時に試料チヤンバ1内の
試料も排出され、次の試料が試料導入口2から導
入される。一方、液溜め部11の液面が低下する
ので、洗浄液タンク13内の洗浄液が電磁弁15
を介して徐々に液溜め部11内に導入される。所
定の洗浄が終了すると、電磁弁8を開放したまま
で電磁弁23が閉じられ、大気開放用の電磁弁2
2が開放される。液溜め部11内の液面が液面検
出装置14に達すると、液面検出装置14に接続
されている液面調節制御装置12が作動して電磁
弁15を閉じ、洗浄液の供給が停止され、同時に
電磁弁8,22も閉止され、もはや液の移動は生
じなくなる。液面検出装置14は下側の液面検出
手段16よりやや下方に設けられており、したが
つてこの場合の液位はガラス管4内において下側
の液面検出手段16の真下に位置し、準備完了の
状態にある。
測定過程は次のような操作により行われる。ま
ず電磁弁23のみを開放してガラス管内に吸引圧
力を伝え(他の電磁弁は閉止されている)、検出
器ペレツト7の微細孔6を通じて粒子の懸濁液を
ガラス管4内に吸入せしめる。このとき液と粒子
との電気インピーダンスの差異に基づいて粒子が
検出されパルス信号が発生する。ガラス管4内の
液面は、検出器ペレツト7の微細孔6を通じて試
料液が吸引されるに伴い徐々に上昇し、下側の液
面検出手段16を液面が通過する際に計数開始信
号を発生し、上側の液面検出手段17を液面が通
過する際に計数終了信号を発生し、この間の粒子
数を計数し、かつ2つの液面検出手段16,17
の区間を所定体積にすることにより、単位体積当
りの粒子数が測定される。液面が上側の液面検出
手段17に達して測定が終了すると、再び前述の
洗浄過程を繰り返して、別の試料についての測定
が開始される。
以上は通常の赤血球あるいは白血球などの比較
的大きな単一粒子を測定する操作方法であり、毎
回検出器内部に相当するガラス管4内の洗浄が行
われるので、液体定量部の液面検出手段16,1
7の誤動作が防止される。なお電磁弁15の開放
は、まずガラス管4内の液をすべて排出してから
でもよい。
さらに本発明の装置における信号処理装置(回
路)26を第2図に示すように構成することによ
り、血小板と赤血球のような2種の大きさを持つ
粒子を分類計数することができる粒子計数装置を
提供することができる。第2図において、検出回
路27の出力信号は、2つの閾値レベルを持つた
閾値回路28で2つの閾値レベル間の信号のとき
を血小板とするために、次のゲート回路30で赤
血球のレベルに達した信号のときゲートを閉じ、
血小板として数えないようにして赤血球計数回路
31にのみ信号を通すようにし、一方、血小板レ
ベルのものだけを血小板計数回路32に計数させ
る。なおそれぞれの信号には時間的なずれが生ず
るが、ゲート回路30に遅延回路33を、ゲート
信号発生回路34からのゲート信号35にワンシ
ヨツトマルチバイブレータによる信号を付随させ
ることにより、赤血球信号は血小板計数回路32
へは達しない。以上のようにしてそれぞれの赤血
球数および血小板数が計数されるが、血小板数に
は赤血球の巻き込みによる信号が入つているの
で、次の演算回路36で巻き込み分の赤血球およ
び後述の定数a0を引いて、真の血小板数を算出し
表示回路37に表示する。
この粒子計数装置においては、検出された各々
の信号の高さに応じ別々に計数し、大きい粒子の
巻き込み補正を 小さい粒子数=小さい粒子の測定値−(a0 +a1×大きい粒子数) として計数せしめる。さらに詳しく説明すると、
従来の粒子検出器においては、検出器内部の大き
い粒子の巻き込み現象によつて生じるパルス発生
による小さい粒子の計数値に与える誤差は再現性
があり、大きい粒子の粒子数に関連することが判
明した。たとえば赤血球と血小板との混合溶液に
ついて実測すると、 血小板数(PL)=(血小板数測定結果) −{a0+a1×(今回の赤血球数RBC1) +a2×(前回の赤血球数RBC2)+a3 ×(前々回の赤血球数RBC3)+……} となる。すなわち今回測定した血小板の測定結果
には、今回混入していた赤血球が吸引されてか
ら、検出器内部で巻き込み現象によつて生ずるパ
ルス、前回吸引されていた試料中の赤血球によつ
て生ずるパルス、および前々回………という具合
に赤血球の巻き込み現象によつて生ずるパルスが
あたかも血小板の検出パルスのようにして計数さ
れるので、これらの赤血球によつて生ずるパルス
を除去する必要があり、以上のような演算式の係
数を求めることにより、補正した真の値に近い血
小板数を求めることができる。
本発明の装置を使用するにあたつては、上式を
より簡単確実なものとするために、a2以降を零と
する過程、すなわち前回の試料を第1図に示す本
発明の粒子検出装置を用いてすべて洗浄して除去
してしまい、以下のような式とする。
血小板数(PL)=(血小板数測定結果) −(a0+a1×RBC1) このa0およびa1は検出器の形状や構造、血液の
希釈倍率あるいは測定時間などによつて多分に影
響を受けるが、本装置の測定例においては、 血液の希釈倍率:5万倍 検出器ペレツトの微細孔の径:80μ 計数時間:12秒 検出器の内径:8mm 測定試料:2.5ml という条件下で、a0=7.5(万個)、a1=2.4/
100、RBC:(万個)とした場合、従来の血小板
測定法(PRP法など)と良好な相関が得られた。
〔発明の効果〕
本発明の粒子検出装置は上記のように構成され
ているから、検出器内に吸引した前回の試料が測
定のたびに洗浄されるので、常に同一条件での測
定が可能であり、かつ毎回洗浄することにより、
定量部が汚れることはなく、正確な定量ができ、
また検出器の構造をそれ程複雑にしなくてもよい
という効果を有している。また本発明の粒子検出
装置を用いて粒子計数装置を構成すれば、前述の
ように洗浄機能を有しているので計算式が単純化
され、このため2種以上の大きさの粒子を1回の
測定で分類計数することができるという効果を奏
する。たとえば血小板計数の場合、前回の試料の
すべてを洗浄して除去してしまうことにより、今
回の赤血球数のみで、血小板数の補正を可能と
し、簡単な補正式で血小板数を求めることができ
る。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の粒子検出装置の一実施例を示
す断面説明図、第2図は本発明の粒子検出装置に
おける信号処理装置(回路)の一例を示す系統的
説明図である。 1……試料チヤンバ、2……試料導入口、3…
…試料排出口、4……ガラス管、5……試料液、
6……微細孔、7……検出器ペレツト、8……電
磁弁、10……洗浄液供給管、11……液溜め
部、12……液面調節制御装置、13……洗浄液
タンク、14……液面検出装置、15……電磁
弁、16,17……液面検出手段、18……絶縁
中継部、20……大気連通管、21……負圧源連
通管、22,23……電磁弁、24……外部電
極、25……内部電極、26……信号処理装置、
27……検出回路、28……閾値回路、30……
ゲート回路、31……赤血球計数回路、32……
血小板計数回路、33……遅延回路、34……ゲ
ート信号発生回路、35……ゲート信号、36…
…演算回路、37……表示回路。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 1 試料チヤンバを貫通して管を設け、この管の
    試料チヤンバ内の試料液中に位置する部分に微細
    孔を有する検出器ペレツトを設け、この管の下端
    に電磁弁を介して洗浄液供給管の下端を接続し、
    この洗浄液供給管の上部に液面調節制御装置を介
    して洗浄液タンクを接続し、一方、前記試料チヤ
    ンバを貫通する管の上部に試料液定量用の液面検
    出手段を設けるとともに、この管の上端に大気お
    よび負圧源に連通自在の絶縁中継部を接続し、さ
    らに前記試料チヤンバ内の試料液中と試料チヤン
    バを貫通する管内とに電極を配置し、これらの電
    極、前記液面検出手段および液面調節制御装置を
    2種以上の大きさの粒子を分類計数する信号処理
    装置に接続したことを特徴とする粒子検出装置。
JP15521079A 1979-11-29 1979-11-29 Particle detecting device Granted JPS5677743A (en)

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JP5944118B2 (ja) * 2011-07-06 2016-07-05 シャープ株式会社 粒子測定装置
JP6991156B2 (ja) * 2016-12-15 2022-01-12 株式会社堀場製作所 粒子計数装置

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