PL131784B1 - Method of manufacture of novel derivatives of erythromycin a - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych erytromycyny A, o ogólnym wzo¬ rze przedstawionym na rysunku, w którym Ri oznacza grupe metylowa, R2,- Ra i R4 sa jednakowe lub rózne i oznaczaja atomy wodoru lub grupy Ci-C3-alkanoilowe, a R5 oznacza atom wodoru. Zwiazki te wykazuja dzialanie przeciwbakteryjne.Wiadomo, ze amoniak oraz aminy pierwszorzedowe i drugorzedowe mozna alkilowac za pomoca odpowie¬ dnio aldehydów i ketonów, uzyskujac aminy trzeciorzedowe (Org. Reactions 4,174-225,1948; Org. Reactions 5, 301,1949; J.Org.Chem. 37, 1673,1972; Synthesis 55,1974).Wiadomo równiez, ze metylowanie amin pierwszorzedowych i drugorzedowych prowadzi sie glównie me¬ toda Eschweila-Clarka, to znaczy przez reakcje aminy z formaldehydem w obecnosci kwasu mrówkowego (Ber. 38, 880-882, 1905; J.Am.Chem.Soc. 55, 4571-4587, 1933; The Acyclic Aliphatic Tertiary Amines, strony 44-52, The Macmillan Company, New York 1965).Ponadto wiadomo, ze przez przegrupowanie Beckmanna oksymu erytromycyny A, a nastepnie redukcje otrzymanego produktu uzyskuje sie 15-czlonowy pólsyntetyczny antybiotyk z grupy erytromycyn, to znaczy ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A (opis patentowy RFN DOS nr 3 012 533).Sposób wytwarzania nowych pochodnych erytromycyny A polega wedlug wynalazku na tym, ze 1 l-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyne A o wzorze przedstawionym na rysunku, w którym Ri, R2, R3, R4 i R5 sa jednakowe i oznaczaja atomy wodoru, poddaje sie reakcji z formaldehydem w obecnosci kwasu mrówko¬ wego i otrzymany zwiazek o wzorze przedstawionym na rysunku, w którym Ri oznacza grupe metylowa, a R2, R3, R4 i R5 oznaczaja atomy wodoru, ewentualnie poddaje sie acylowaniu bezwodnikami kwasów karboksylo- wych o wzorze R«-0-R7, w którym R6 i R7 sa jednakowe lub rózne i oznaczaja grupy Ci -C3-alkanoilowe.Reakcje metylowania 1 l-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyny A najkorzystniej prowadzi sie z uzyciem 1-3 molowego nadmiaru formaldehydu i kwasu mrówkowego w obojetnym rozpuszczalniku organicznym, ko¬ rzystnie w chlorowcowanym weglowodorze, zwlaszcza w chloroformie lub w czterochlorku wegla, a takze w chlorku metylenu, w poblizu temperatury wrzenia. Reakcja przebiega do konca w ciagu 2-8 godzin w tempera- /2 131 784 turze wrzenia. Produkt reakcji wyodrebnia sie zwyklym sposobem, najdogodniej przez schlodzenie do tempera¬ tury otoczenia, dodanie wody, doprowadzenie pH do okolo 5,0 za pomoca 2N kwasu solnego, oddzielenie rozpuszczalnika i ekstrakcje warstwy wodnej tym samym rozpuszczalnikiem, a nastepnie doprowadzenie pH do okolo 7,5 za pomoca wodorotlenku sodowego o stezeniu 20% wagowych. Polaczone ekstrakty organiczne suszy sie nad weglanem potasowym i odparowuje pod obnizonym cisnieniem uzyskujac chromatograficznie czysta N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A (po eluowaniu mieszanina dwumetyloformamid:meta¬ nol 3:1).• W wyniku reakcji N-metylo-ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyny A z bezwodnikami kwasów karboksylowych o wzorze R6 -O-R7, w którym R0 i R7 sa jednakowe lub rózne i oznaczaja grupy Ci -C3 -alka- noilowe, uzyskuje sie korzystnie pochodne acylowe o wzorze przedstawionym na rysunku, w którym Ri oznacza grupe metylowa, R2 oznacza grupe Ci-C3-alkanoilowa, R3 oznacza atom wodoru lub grupe Ci C3-alkanoilo- wa, R4 oznacza atom wodoru hib grupe Ci-C3-alkanoilowa, a R5 oznacza atom wodoru. Reakcje acylowania korzystnie prowadzi sie w pirydynie, w temperaturze od zblizonej do temperatury otoczenia do okolo 80°C.W przypadku ogrzewania proces nalezy prowadzic w atmosferze azotu. Uzyskany produkt wyodrebnia sie znany¬ mi sposobami ekstrakcji (J.Med.Chem. 15,631, 1972).Zgodnie z korzystnymi wariantami sposobu wedlug wynalazku w przypadku wytwarzania 2'-acetylo-N-me- tylo-ll-aza-10 -dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, 11 -aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-ll-aza-lO-dezoksy-10 -dihydroerytromycyne A acetyluje sie bezwodnikiem octowym w pi¬ rydynie w ciagu 90 minut w temperaturze otoczenia; w przypadku wytwarzania 2'-propionylo-N-metylo-ll-aza- 10 -dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, ll-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytrpmycyne A acyluje sie bezwodnikiem propionowym w pirydynie, wciagu 1 godziny w temperaturze otoczenia; w przypadku wytwarzania 2',4"-dwuacetylo-N-metylo- ll-aza-10- dezoksy-10- dihydroerytromycyny A, ll-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A acetyluje sie bezwodnikiem octwym w pirydynie,w cia¬ gu 7 dni w temperaturze otoczenia; w przypadku wytwarzania 2\4"-dwupropionylo-N-metylo- ll-aza-10-dezo- ksy-10- dihydroerytromycyny A, 1 l-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-me- tylo-ll-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyne A acyluje sie bezwodnikiem propionowym w pirydynie, wciagu 7 dni w temperaturze otoczenia; w przypadku wytwarzania 2\4",13-trójacetylo-ll-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyny A, 1 l-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-11- -aza-10-dezoksy-10 -dihydroerytromycyne A acetyluje sie bezwodnikiem octowym w pirydynie, w ciagu 36 go¬ dzin w temperaturze 60- 80°C; w przypadku wytwarzania 2\4",13-trójpropionylo- N-metylo-1 l-aza-10-dihydro- erytromycyny A, ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-1 l-aza-10-de- zoksy- 10-dihydroerytromycyne A acyluje sie bezwodnikiem propionowym w pirydynie, wciagu 42 godzin w temperaturze 60-80°C; w przypadku wytwarzania 2'-formylo-N-metylo-ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytro- mycyny A, ll-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy- 10- dihydroerytromycyne A traktuje sie mieszanym bezwodnikiem mrówkowooctowym w eterze i w obecnosci pirydyny, w temperaturze 0 5°C w ciagu 30 minut.Nowe zwiazki przebadano in vitro wobec szeregu drobnoustrojów. Uzyskane wyniki podano w tablicy 1, jako minimalne stezenie hamujace (MIC) w porównaniu z wyjsciowa 1 l-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyna A. Aktywnosc przeciwbakteryjna nowych zwiazków zasadniczo odpowiada aktywnosci substancji porównawczej, jednak N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyna A i jej pochodne wykazuja silniejsze dzialanie wobec pewnych badanych drobnoustrojów, niz wyjsciowa 1 l-aza-10-dezoksy-10 -dihydroerytromycyna A.131 784 Tablica 1 Minimalne stezenie hamujace (MIC) Badane szczepy Streptococcus faecalis ATCC 8043 Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 Staphylococcus aureus ATCC 6538 -P Micrococcus flavus ATCC 10240 ' Sarcina lutea ATCC 9341 Bacillus cereus var. mycoides ATCC 11778 Bacillus subtilis [ \TCC663.MIC Oig/ml) A 0,05 0,5 0,5 0,05 0,05 0,5 0,5 I 0,01 0,5 0,5 0,01 0,05 0,5 0,1 II 0,1 0,5 0,5 0,5 0,1 0,5 0,1 III 0,5 2 5 0,5 0,1 0,1 0,5 2,5 IV 1,0 5,0 0,1 2,5 0,5 2 5 ' 5,0 V 0,05 0,05 0,1 0,05 0,05 0,5 0,5 VI 0,1 0,1 0,5 0,5 0,05 0,5 0,1 VII 2,5 10,0 1,0 5,0 0,5 1,0 5,0 VIIIX 0,05 0,1 0,5 0,05 0,05 0,1 0,5 1 A — Substancja porównawcza: ll-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyna A I - N-metylo-ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyna A II - 2'-acetylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyna A III - 2'4"-dwuacetylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyna A IV - 2\4,\13-trójacetylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyna A V - 2,-propionylo-N-metylo-ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyna A VI -- 2,,4,,-dwupropionylo-N-metylo-ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyna A VII - 2',4,\13-trójpropionylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy-10-dihydromycyna A VIII - 2'-formylo-N-metylo-ll-aza-10-dezoksy-10-dihydromycyna A x/ Liczby rzymskie odpowiadaja numeracji przykladów.Badania aktywnosci przeciwbakteryjnej wobec szeregu izolatów klinicznych bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych wykazaly, ze badane szczepy sa znacznie bardziej wrazliwe na N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyne A w porównaniu z erytromycyna A, przy czym znacznie zmniejszyla sie liczba opor¬ nych drobnoustrojów. Wyniki podano w tablicach 2 i 3, w których symbol E oznacza erytromycyne A, symbol A-ll-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyne A, a I - N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A. Wspomniane zwiazki oznaczono takimi samymi symbolami w tablicach 4 i 5.Badania ostrej toksycznosci na myszach NMRI przeprowadzone metoda Lichtfielda-Wilcoxona wykazaly, ze N-metylo-1 l-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyna A ma nizsza toksycznosc niz erytromycyna A, W tabli¬ cy 4 podano wyniki okreslajace najmniejsza dawke smiertelna LD5 o LDi 6, LDg4 powodujaca smierc odpowied¬ nio 50%, 16% i 84% otrzymujacych ja osobników. Badane zwiazki stosowane w postaci laktobionianów.W przypadku dawki LDso liczby w nawiasach sa wartosciami przeliczonymi na zwiazek aktywny.Badania stabilnosci nowych zwiazków wytwarzanych sposobem wedlug wynalazku przeprowadzone w kwasnym srodowisku wykazaly, ze N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy-dihydroerytromycyna A ma polepszona stabil¬ nosc w porównaniu z erytromycyna A przy wartosci pH = 1,2, to jest w warunkach symulujacych warunki w przewodzie zoladkowo-jelitowym. Testy przeprowadzono poddajac badane zwiazki dzialaniu IN HC1 w ciagu 30 minut, 1, 3 i 6 godzin i okreslajac minimalne stezenie hamujace (MIC) wobec drobnoustroju Staphylococcus aureus ATCC 6538-P. Wyniki podano w tablicy 5.4 131 784 Tablica 2.Aktywnosc przeciwbakteryjna wobec klinicznych izolatów bakterii Gram-dodatnich Badany organizm Enterococcus Staph. aureus Staph. albus Streptococcus pneumoniae Streptococcus haemolyticus Liczba izolatów dla poszczególnych stezen Zwia¬ zek E A E A I E A E A.E A I E A I MIC (jUg/ml) 0,5 26 20 15 9 10 11 22 24 30 9 12 11 17 20 13 83 86 80 1,0 11 6 13 7 7 10 6 9 12 7 4 5 3 7 34 26 47 ?Q 9 11 10 12 12 4 12 4 33 27 14 4,0 1 6 1 6 2 4 12 8,0 6 5 3 2 8 8 3 16,0 3 4 3 4 32,0 1 1 64,0 1 4 4 1 4 1 128,0 Liczba opornych izolatów 7 12 15 13 10 7 20 22 12 Ogólna liczba izolatów 63 41 42 16 20 182 182 182 Tablica3 Aktywnosc przeciwbakteryjna wobec klinicznych izolatów bakterii Gram-ujemnych Badany organizm 1 E.coli Klebsiella pneumon.Klebsiella aerogenes Proteus mirabilis Pseudomonas aerug.Enterobacter aerog.Enterobacter liauefac.Mima polymorpha Zwia¬ zek E A I E A I E A E A I E A I E A I E A I E A MIC (jtig/ml) 0,5 1 1,0 4 2,0 2 42 4,0 39 45 3 4 1 3 1 8,0 2 50 5 1 4 3 9 13 2 2 1 1 1 6 1 1 | 16,0 28 2 2 1 3 1 1 5 1 5 6 i 1 1 32,0 40 1 1 1 2 1 1 3 10 2 1 j 7 2 3 1 | 64,0 8 2 1 2 2 1 1 3 5 1 | 4 1 1 | 128,0 Liczba opornych izolatów 22 3 0 4 1 7 2 3 10 2 9 4 3 17 1 1 2 Ogólna liczba | izolatów 100 9 10 16 18 1 3131784 5 c.d. Tablicy 3 1 Here Ha Haemophylus. influ.Liczba izolatów dla poszczególnych stezen 2 E A I E A 1 E A 3 1 l 3 1 2 3 4 1 1 3 3 0 4 8 5 . 1 2 2 2 4 43 6 3 3 42 54 7 1 16 59 28 8 3 l 3 35 16 13 9 1 3 1 45 19 17 10 1 15 U 7 11 12 1 64 22 6 13 6 6 179 179 179 Tablica 4 Toksycznosc ostra Zwiazek E I Droga podawania dozylnie dootrzewnowo doustnie dozylnie dootrzewnowo doustnie LD50 360(241,9) 520 (349,4) — 825(421,6) 1200(513,2) 10000(5100) LD16 280 326 - 610 1010 LD84 460 840 - 1020 1400 Tablica 5 Stabilnosc w srodowisku kwasnym przy pH = 1,2 Czas dzialania (godziny) Próba kontrolna- bez kwasu 0 1/2 1 3 , 6 MIC Cug/ml) E 0,1 5 10 10 25 25 A 0,5 0,5 0,5 1,0 1,0 1,0 I 0,1 0,1 0,1 0,5 1,0 2,5 | Wynalazek ilustruja nastepujace przyklady.Przyklad I. N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy-10-dihydro- erytromycyna A.Do roztworu 0,54 g (0,000722 mola) 1 l-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyny A w 20 ml chloroformu, mieszajac, dodano 0,0589 ml (0,000741 mola) formaldehydu (o stezeniu okolo 35% wagowych) i 0,0283 g (0,000735 mola) kwasu mrówkowego (o stezeniu okolo 98-100% wagowych). Mieszanine reakcyjna mieszano w ciagu 8 godzin ogrzewajac ja w temperaturze wrzenia pod chlodnica zwrotna, po czym ochlodzono do tempe¬ ratury otoczenia i dodano 15 ml wody (pH 5,8). Wartosc pH mieszaniny reakcyjnej doprowadzono do 5,0 za pomoca 2N kwasu solnego, po czym warstwe chloroformu oddzielono. Do warstwy wodnej dodano 15 ml chloroformu i pH zawiesiny doprowadzono do 7,5 za pomoca wodorotlenku sodowego o stezeniu 20% wago¬ wych, po czym warstwy rozdzielono, a warstwe wodna ekstrahowano trzykrotnie porcjami po 15 ml chloro¬ formu. Polaczone ekstrakty chloroformowe o pH =7,5 osuszono nad weglanem potasowym i odparowano pod obnizonym cisnieniem uzyskujac 0,45 g (82,4%) N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyny A o tem¬ peraturze topnienia 113-115°C.6 131784 lalD° = -37»0° O* roztwór w chloroformie) NT = 748 Przyklad II. 2'-acetylo-N-metylo-l 1 -aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyna A. Do roztworu 1,5 g (0,002 mola) N-metylo-ll-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A w 40 ml pirydyny dodano 5 ml (0,053 mola) bezwodnika octowego i pozostawiono na 90 minut w temperaturze otoczenia. Reakcje przerwano dodajac okolo 50 cm3 lodu i 30 ml chloroformu, po czym pH mjeszaniny reakcyjnej doprowadzono do 8,3 za pomoca wodorotlenku sodowego o stezeniu 20% wagowych. Warstwe chloroformowa oddzielono, a warstwe wodna dwu¬ krotnie ekstrahowano ponownie porcjami po 30 ml chloroformu. Polaczone ekstrakty chloroformowe przemyto dwoma porcjami wody po 50 ml, osuszono nad siarczanem potasowym i odparowano pod obnizonym cisnieniem uzyskujac 1,5 g (94,6%) surowej 2'-acetylo-N-metylo-ll-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyny A o tempera¬ turze topnienia 110-113°C. Przed analiza produkt oczyszczono na kolumnie wypelnionej zelem krzemionko¬ wym stosujac uklad chloroform: metanol 9:1. Po eluowaniu mieszanina chloroform:metanol 7:3 otrzymano chro¬ matograficznie czysty produkt o temperaturze topnienia 118-124°C. Widmo IR (CHC1)3: 1745 cm"1 (C=0 estru), 1730 cm"1 (C=0 laktonu)oraz 1240cm-1 (-C O -octanu). Widmo lH NMR(CDC13): 3,33 (3H, 2,26 (3H, 2,25 (6H, l ,99 (3H ppm.Przyklad III. 2',4,,-dwuacetylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy -10-dihydroerytromycyna A.Do roztworu 1,5 g (0,002 mola) N-metylo-1 l-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A w 40 ml pirydy¬ ny dodano 10 ml (0,106 mola) bezwodnika octowego i pozostawiono na 7 dni w temperaturze pokojowej.Reakcje przerwano dodajac okolo 50 cm* lodu, a produkt wyodrebniono tak, jak opisano w przykladzie II.Surowy 2\4"-dwuoctan w ilosci 1,52 g (89,9%) rozpuszczono ogrzewajac w n-heksanie, czesc nierozpuszczalna odsaczono, a przesacz pozostawiono do wykrystalizowania w kapieli z lodem. Uzyskano analitycznie czysty dwu- octan o temperaturze topnienia 98-102°C. Widmo IR (CHC13): 1745 cm"1 (C=0 estru), 1730 cm"1 (C=0 laktonu) oraz 1240 cm"1 (-C-0 -octanu). Widmo l H NMR (CDCI3): 3,26 (3H, 2,23 (6H, 2,10 (3H, 2,06 (3H, l,98(3H)sppm.Przyklad IV. 2\4',,13-trójacetylo-l l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyna A.Do roztworu 1,5 g (0,002 mola) N-metylo-1 l-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A w 20 ml pirydy¬ ny dodano 10 ml (0,106 mola) bezwodnika octowego, po czym mieszano przez 36 godzin w strumieniu azotu w temperaturze od 60 do 80°C. Reakcje przerwano dodajac okolo 100 cm3 lodu, po czym produkt wyodrebnio¬ no przez ekstrakcje 4 porcjami chloroformu po 30 ml przy pH 8,5. Polaczone ekstrakty chloroformowe przemy¬ to dwoma porcjami po 50 ml roztworu wodoroweglanu sodowego o stezeniu 5% wagowych i osuszono nad weglanem potasowym Po odparowaniu chloroformu pozostalosc osuszono benzenem, a nastepnie oczyszczono przez chromatografie na kolumnie wypelnionej zelem krzemionkowym, stosujac uklad chloroform metanol 9:1.Uzyskano 0,89 g (51%) analitycznie czystego trójoctanu o temperaturze topnienia 126-130°C. Widmo IR (CHCb): 1738 cm"1 (C=0 estru, laktonu), 1245 cm-1 (C-0 -octanu). Widmo !HNMR (CDCI3): 3,28 (3H)s, 2,29(6H, 2,13 (3H, 2,20 (3H, 2,03 (3H.Przyklad V. 2'-propionylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyna A.Do roztworu 0,7 g (0,0094 mola) N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A w 20 ml piry¬ dyny dodano 6 ml (0,046 mola) bezwodnika propionowego i pozostawiono na 1 godzine w temperaturze otocze¬ nia. Reakcje przerwano przez dodanie lodu, a produkt wyodrebniono przez ekstrakcje chloroformem przy pH 8,6, tak jak w przykladzie II. Surowy 2'-jednopropionian w ilosci 0,73 g (97,3%) zdyspergowano w eterze, nie¬ rozpuszczalny osad odsaczono i ponownie rozpuszczono w 40 ml chlorku metylenu. Uzyskany roztwór zatezono przez odparowanie pod obnizonym cisnieniem do 1/3 objetosci, w wyniku czego wykrystalizowala analitycznie czysta 2'-propionylo-N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyna A o temperaturze topnienia 164-166°C. Widmo IR(CHC13): 1730 cm"1 (C=0 estru i laktonu), 1180 cm"1 (-C-O-propionianu).Przyklad VI. 2\4"-dwupropionylo-N-metylo-l l-aza-10- decoksy-10-dihydroerytromycyna A.Do roztworu 0,7 g (0,0094 mola) N-metylo-1 l-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A w 20 ml piry¬ dyny dodano 20 nil (0,155 mola) bezwodnika propionowego, po czym pozostawiono na 7 dni w temperaturze otoczenia. Reakcje przerwano przez dodanie lodu, a produkt wyodrebniono tak, jak w przykladzie II, otrzymu¬ jac go w ilosci 0,72 g (89,4%). Po chromatografii na kolumnie wypelnionej zelem krzemionkowym z zastosowa¬ niem ukladu chloroform:metanol 7:3 uzyskano analitycznie czysty produkt o temperaturze topnienia 80-83°C.Przyklad VII. 2',4",13-trójpropionylo-N-metylo-l 1-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycynaA.Do roztworu 3,5 g (0,0268 mola) N-metylo-1 l-aza-lO-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A w 90 ml piry¬ dyny dodano 20 ml (0,212 mola) bezwodnika propionowego i mieszajac utrzymywano w atmosferze azotu w temperaturze wrzenia pod chlodnica zwrotna w ciagu 42 godzin. Reakcje przerwano przez dodanie lodu, a produkt wyodrebniono przez ekstrakcje chloroformem (3 x 50 ml) przy pH = 9,0. Polaczone ekstrakty chloro-131784 7 formowe przemyto woda (2x50 ml), osuszono nad K2CO3 i odparowano pod zmniejszonym cisnieniem otrzymujac 4,27 g surowego produktu. Po chromatografii na kolumnie wypelnionej zelem krzemionkowym przy uzyciu ukladu CHCl3:CH3OH (7:3) otrzymano 3,2 g (78,0%) analitycznie czystego 2\4'\13-trójpropionianu o temperaturze topnienia 76-80°C.Przyklad VIII. 2'-formylo-N-metylo-l l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyna A.Do roztworu 1,5 g (0,002 mola) N-metylo-11-aza-l0-dezoksy-10--dihydroerytromycyny A w suchym eterze dodano 1 ml pirydyny, po czym mieszajac w temperaturze 0~5°C w ciagu 30 minut wkroplono 3,2 bezwodnika mrówkowo-octowego. Calosc mieszano w ciagu 1 godziny w tej samej temperaturze, a nastepnie w ciagu 1 godzi¬ ny w tej samej temperaturze, a nastepnie wciagu 6 godzin w temperaturze 20-25°C. Reakcje formylowania przerwano dodajac 150 ml 5% roztworu NaHCCb uprzednio ochlodzonego do temperatury 0-5°C, a produkt wyodrebniono przez ekstrakcje chloroformem (3 x 50 ml) i odparowanie osuszonych ekstraktów chloroformo¬ wych. Otrzymano 1,2 g surowego produktu, który dwukrotnie przekrystalizowano z mieszaniny eteru i eteru naftowego, otrzymujac analitycznie czysta 2'-formylopochodna o temperaturze topnienia 178-181°C.Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych pochodnych erytromycyny A o ogólnym wzorze przedstawionym na, rysunku, w którym Ri oznacza grupe metylowa, R2, R3 i R4 sa jednakowe lub rózne i oznaczaja atomy wodoru lub grupy Ci -C3-alkanoilowe, a R5 oznacza atom wodoru, znamienny tym, zel 1-aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyne A o wzorze przedstawionym na rysunku, w którym Ri, R2, ^3, R4 i Rs sa jednakowe i oznaczaja atomy wodoru, podaje sie reakcji z formaldehydem w obecnosci kwasu mrókowego i otrzymany zwiazek o wzorze przedstawionym na rysunku, w którym Ri oznacza grupe metylowa. aR2, R3, R4 i Rs oznaczaja atomy wodoru, ewentualnie poddaje sie acylowaniu bezwodnikami kwasów karboksylowych o wzorze Re-O-R7, w którym R6 i R7 sa jednakowe lub rózne i oznaczaja grupy Ci -C3 -alkanoilowe. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje metylowania prowadzi sie z uzyciem 1-3 molowego nadmiaru formaldehydu i kwasu mrówkowego w obojetnym rozpuszczalniku organicznym. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje metylowania prowadzi sie w temperatu¬ rze zblizonej do temperatury wrzenia. 4. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze jako rozpuszczalnik stosuje sie chloroform lub czterochlorek wegla. 5. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje acylowania prowadzi sie w temperaturze od zblizonej do temperatury otoczenia do okolo 80°C. 6. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje acylowania prowadzi sie w pirydynie. 7. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2'-acetylo-N-metylo- 11-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, ll-aza-10-dezoksy-lO-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-11-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyne A acetyluje sie bezwodnikiem octowym w pi¬ rydynie, w ciagu 90 minut w temperaturze otoczenia. 8. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2,-propionylo-N-me- tylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, 11-aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A acyluje sie bezwodnikiem propionowym w pirydynie w ciagu 1 godziny w temperaturze otoczenia. 9. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2',4"-dwuacetylo-N- metylo-11-aza- 10-dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, 11-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A acetyluje sie bezwodnikiem octowym w pirydynie, w ciagu 7 dni w temperaturze otoczenia. 10. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2\4"-dwupropiony- lo-N-metylo- 11-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, 11-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A me¬ tyluje sie i powstala N-metylo-ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A acyluje sie bezwodnikiem propio¬ nowym w pirydynie, w ciagu 7 dni w temperaturze otoczenia. 11. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2\4,,,13-trójacetylo- 11-aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A, ll-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-11-aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyne A acetyluje sie bezwodnikiem octowym w pi¬ rydynie, w ciagu 36 godzin w temperaturze 60-80°C. 12. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2\4'\13-trójpropio- nylo- N-metylo-11-aza-10-dezoksy-10- dihydroerytromycyny A, 11-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyne A8 131 784 metyluje sie i powstala N-metylo-1 l-aza-10- dezoksy-10-dihydroerytromycyne A acyluje sie bezwodnikiem pro- pionowym w pirydynie, w ciagu 42 godzin w temperaturze 60 80°C. 13. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 2'-formylo-N-metylo- ll-aza-10-dezoksy-10-dihydroerytromycyny A, ll-aza-10-dezoksy -10-dihydroerytromycyne A metyluje sie i powstala N-metylo-1 l-aza-10-dezoksy- 10-dihydroerytromycyne A traktuje sie mieszanym bezwodnikiem mrówkowo-octowym w eterze i w obecnosci pirydyny, w temperaturze 0-5°C w ciagu 30 minut.Wzór Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 cgz.Cena 100 zl PL PL PL PL