BE516120A - - Google Patents
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Description
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PROCEDE POUR L'OBTENTION D'UN AGENT EMPE.CHANT LA CROISSANCE CELLULAIRE.
Ce procède se rapporte à l'obtention d'un agent hematogène et ré- gulateur de métabolisme des protéines et qui empêche la croissance cellu- laire, constitué par des matières-premières animales et végétales protéi- ques, et se caractérise par le fait que les matières premières sont soumises à une décomposition protéolytique, séparant les parties non-ferrugineuses des parties ferrugineuses du produit de cette décomposition., tout en isolant ces dernières.
Après purification., 15' agent peut être administré par la bouche ou par injections. Les produits obtenus ne produisent aucun effet allergique ou autres réactions nuisibles.
Les substances aptes à être utilisées comme matières premières sont par exemple, le sang, les organes réticulo-endothélialaux d'animaux de n'im- porte quel age, et aussi les embryons, ou plantes de la famille des lorantha- cées. Les matières premières peuvent âtre soumises directement à la diges- tion protéolytique ' ou bien au débuta des extraits peuvent être produits de ces matières premres qui sont subséquemment soumises à la décomposition protéolytique,,
Les extraits obtenus des matières premières sont convenablement purifiés, au moyen d'une précipitation iso-électrique, par desselage simple ou fractionnaire, précipitation fractionnaire avec des solvants organiques aqueuxpurification au phénol,
adsorption ou élution au moyen d'une puri- fication électrophorétique ou chromographique.
Les matières premières après avoir été broyées sont ou bien direc- tement soumises à une décomposition protéolytique avec des enzymes, comme la papaïne ou la pepsineou bien sont extraites en combinaison avec de la trypsine ou de l'érepsine dans des solvants organiques, en utilisant de préférence pour cela le méthanol., l'éthanol ou le propanol.
L'extrait est convenablement concentré par distillation dans le
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vide et ainsi libéré des solvants organiques. Les extraits obtenus peu-vent être alors soumis à un procédé de dessalage par exemple, ou bien à une pu- rification fractionnaire dans l'alcool et l'acétone. On procède à la sépa- ration de l'agent non-ferrugineux de l'agent ferrugineux selon l'un des pro- cédés indiqués ci-dessus.
On a constaté que par la séparation des substances non-ferrugineu- ses du produit de la décomposition, les fractions qui stimulent la crois- sance sont éliminées,
Les produits obtenus sont aptes aux injections et contiennent les substances actives en concentration appropriée.
On montrera maintenant différents exemples d'application du pro- cédé suivant l'invention.
EXEMPLE 1.
50 kgs, de rate de veau ou de vache sont hachés dans un hache-vian- de et agités dans 25 litres d'eau distillée. Après avoir ajouté du toluol comme élément conservateur, la valeur du pH est fixée par une solution d'am- moniaque à 8. 50 grs. de pancréatine sont alors ajoutés à cela et le mé- lange est continuellement remué pendant 4 heures à 37 C. pour lui permettre d'effectuer une digestion tryptique, Après dépôt, la solution est filtrée et le résultat du filtrage est mélangé et remué avec une solution de sulfa- te d'ammoniaque à 75% à 40 C. Le précipité obtenu est recueilli. Chaque kilo de ce précipité est dissous dans 10 litres d'eau distillée. Ceci est ensuite filtré, en ajoutant au résultat'du filtrage, 10 litres d'alcool à 95%.
Un autre filtrage est fait et le résultat est réduit au moyen d'une distillation dans le vide, au volume de µ/la litre. La solution restante est de nouveau filtrée, et ensuite le résultat du filtrage est dilué dans de l'eau distillée à la concentration désirée. Ce liquide, après fixation de son isotonie, est apte à âtre utilisé pour les injections.
EXEMPLE 2.
10 kgs. de viscus cruciatum pulvis subtilis sont agités dans 20 litres d'eau distillée jusqu'à ce qu'ils soient complètement trempés, et ensuite on ajoute 20 litres d'éthanol permettant au tout de se reposer et ' de passer à travers un percolateur pendant 3 jours. L'extrait qui en ré- sulte est soumis à une distillation dans le vide et après réduction à 1/10, soumis à une digestion protéolytique. 5 grs; de pepsine (DAB VI) sont ajoutés à 1 litre de ce liquide, fixant à 2 la valeur du pH de la so- lution avec de l'acide sulfurique en maintenant l'extrait pendant 24 heu- res à 37 C.
Ce dernier est ensuite filtré; on remue le résultat du fil- trage en y ajoutant 40 grs. de carbone activé et en faisant l'élution deux fois en utilisant 400 grs. de phénol chaque fois. L'addition de 1600 cm3 d'un mélange d'éthanol-éther (1:4), provoque une précipitation qui est la- vée deux fois en utilisant 200 cm3 du mélange éthanol-éther chaque fois, et ensuite lavé à nouveau avec 200 cm3 d'éther. On peut maintenant donner la concentration voulue au précipité avec de l'eau distillée, et après fixa- tion de son isotonie celui-ci est apte à être utilisé pour les injections.
EXEMPLE
10 kgs. de mou de porc sont hachés et on y ajoute 10 litres d'eau distillée. Après avoir agité, on y ajoute de l'acide chlorhydrique jusqu'à obtention de la valeur du pH égale à 2. On ajoute aussi 1 gr. de pepsine concentrée (1:10000). Le mélange est remué constamment à 40 C pendant 4 heures. On laisse reposer les substances solides et la solution est ensuite filtrée. On ajoute 300 grs. de carbone activé à 10 litres de cette solution qui est éluée avec 3 kgs de phénol en agitant pendant une heu- re. Après filtrage, on ajoute 6 litres d'un mélange d'éthanol-éther (1:4), le précipité obtenu est lavé deux fois à l'éther, et ensuite dissous dans 3 litres d'eau. On ajoute 2250 grs. de sulfate d'ammoniaque. Le précipité qui en résulte est retiré.
Après passage et dessication, le précipité est ... dissous à la concentration voulue, et la solution après fixation de son iso- tonie est alors apte à être utilisée pour injections.
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EXEMPLE 4.
10 kgs. de cotylédons de boeuf sont séparés à la main, de leurs parties blanches et rouges. Les parties blanches (5 kgs. par exemple) sont mélangées à une quantité égale d'eau distillée. La valeur du pH est fixée par de l'acide chlorhydrique à 3.5, en y ajoutant 50 grs. de papaïne. Tout en remuant, le mélange est maintenu à 30 C. pendant 8 heures. Après dépôt, on effectue le filtrage.
Un litre du résultat de filtrage est mélangé à 100 grs. de sel de cuisine et le précipité qui en résulte est filtré. Apres cela 600 grs. de sulfate d'ammoniaque sont ajoutés à la solution et le pré- cipité qui en résulte est dissous dans 500 cm3 d'eau. 125 grs. de phénol sont ajoutés à ce liquide et le précipité qui en résulte est séparé au moyen de l'entonnoir séparateur du liquide surnageant, mélangé avec 100 cm3 d'eau distillée .et après, rincé avec 300 cm3 d'un mélange d'éthanol-éther (1:3).
Après séparation des résidus d'alcool et d'éther par distillation dans le vide la solution obtenue après filtrage, est fixée à la concentration dési- rée. Cette solution après fixation de son isotonie est aussi apte: à être utilisée pour les injections.
EXEMPLE 5.
1 Kg. de rate embryonnaire est mélangé à 1250 cm3 d'eau distillée, et fixé avec de l'acide chlorhydrique à une valeur-pH de 1.7, et à cela on ajoute 1 gr. de pepsine (1:3000). On agite la préparation pendant 2 x 4 heu- res à la température de 40 C. Après dépôt et filtrage, on ajoute 200 grs. de phénol à 1 litre du résultat du filtrage. Le précipité ainsi obtenu est retiré par l'entonnoir séparateur. Le précipité obtenu est lavé deux fois avec 300 cm3 d'éther, et ensuite on ajoute de l'eau distillée jusqu'à obte- nir 1000 cm3, et après on ajoute 20 grs. de charbon très actif.. Ce charbon est élue deux fois, en utilisant 200 grs. de phénol chaque fois.
Après ce- la, le charbon est séparé de la solution par filtrage, tout en ajoutant à 400 cm3 du résultat du filtrage, 600 cm3 d'un mélange d'éthanol-éther (1:3).
Le précipité obtenu est de nouveau lavé à l'éther et après addition de 300 cm3 d'eau, les solvants organiques sont séparés par distillation dans le vi- de, la solution est ensuite fixée à la concentration et isotonie désirées, et est alors apte à être utilisée pour les injections.
EXEMPLE 6.
5 kgs. de thymus (après avoir été hachés), sont mélangés à 10 li- tres d'eau distillée et à 10 litres d'éthanol, et ensuite agités pendant 3 heures. Ce mélange après dépôt est clarifié dans l'entonnoir séparateur.
Le liquide clarifié est réduit par distillation dans le vide à 1/10, et après le filtrage, 350 grs, de sel de cuisine sont ajoutés à un litre de cet- te préparation pendant que la température du liquide est maintenue à 40 C.
Le précipité est dissous dans 2 litres d'eau distillée après fixation de la valeur. du PH avecde la soude caustique à 8.7, et ensuite est remué avec 10 grs de pancréatine pendant 5 heures à 37 C. La solution est filtrée, et un litre de cette solution est mélangé avec 600 grs. de sulfate d'ammoniaque.
Claims (1)
- Lé précipité est enlevé, séché et dissous dans 300 cm3 d'eau. Après avoir ajouté 100 grs. de phénol, on le sépare au moyen de l'entonnoir séparateur et le précipité du phénol est ensuite lavé trois fois, en utilisant pour cela chaque fois 150 cm3 d'éther. On ajoute 200 cm3 d'eau en enlevant les résidus des solvants organiques par distillation dans le vide. La solution après filtrage et fixation de sa concentration et isotonie est alors prête à être utilisée pour les injections ; R E V E N D I C A T I O N S.1. - Procédé d'obtention d'un agent hématogène et régulateur du métabolisme des protéines, et qui empêche la croissance cellulaire, cons- titué par des matières premières animales et végétales protéiques, caracté- risé en ce que les matières premières sont soumises à une décomposition pro- téblytique séparant les parties non-ferrugineuses des parties ferrugineu- ses du produit de cette décomposition, tout en isolant ces dernières. <Desc/Clms Page number 4>2. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé par l'emploi du sang comme matière première. par l'emploi 30 - Procédé selon la revendication l, caractérisé par l'emploi des organes réticuloendothélialaux comme matière première.4 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé par l'emploi . des plantes de la famille des loranthacées comme matière première.5. - Procédé selon la revendication l, caractérisé en ce que la décomposition protéolytique est obtenue d'un extrait des matières premiè- res.6. - Procédé selon les revendications 1 et 5, caractérisé en ce que la décomposition protéolytique est obtenue d'un extrait aqueux des ma- tières premières.7. - Procédé selon les revendications 1 et 5, caractérisé en ce que la décomposition protéolytique est obtenue d'un extrait alcoolique a- queux des matières premières.8. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue au moyen d'une précipitation isoélectrique.9. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue au moyen d'un procédé de dessalage.10. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue par précipitation fractionnaire au moyen de sol- vants organiques aqueux.11. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue par purification au phénol.12. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue par adsorption.13. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue par élution.14. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue par électrolyse.15. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la séparation est obtenue par des moyens chromographiques.16. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la papaïne est utilisée pour la décomposition protéolytique.17. - Procédé selon la revendication l, caractérisé en ce que la pepsine est utilisée pour la décomposition protéolytique.18. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la pancréatine est utilisée pour la décomposition protéolytique.19. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la trypsine et l'erépsine sont utilisés pour la décomposition protéolytique.20. - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le produit n'estltant de la décomposition protéolytique avant la séparation, est extrait au moyen d'un solvant organique.21. - Procédé selon les revendications 1 et 20, caractérisé par l'utilisation du méthanol.22. - Procédé selon les revendications 1 et 20, caractérisé par l'utilisation de l'éthanol.23. - Procédé selon les revendications 1 et 20, caractérisé par l'utilisation du propanol.24. - Procédé selon les revendications 1 et 20, caractérisé en ce que l'extrait est concentré dans le vide séparant de celui-ci les solvants <Desc/Clms Page number 5> organiques.
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