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( "2r oàu it d'hydrogénation des hormones fall.ica7,.eu:g et leur 1 procédé de préparation"'
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L'invasion oonoerns un procède de préparation des pro- duits d'hydrogénation des hormones folliouleuses" Il consista à soumettre les hormones folli3u1euBes à l'action de oartains agents qui provoquent la réduction du groupe oétcàîqme, clei3 jor- monos à l'état d'aLcool seon:da3ra, Lors de omette ordration les hormones fixent deux atomes d'hydrogens. Le noyan boazoli- que existant dans les hormones, cl' a:prùa Butenandt,n'est pas hy- drogënë.
On'a constaté qu'il est possible de préparer des ocabi- naiacne de l'espèce en soumettant les matières premières, o'est-a-'dire les hormones foLliouleuses à 1'aQtion de lthydro-
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gêne oatalztiqufiment actif, à condition d'éviter la présence d'un excès considérable d'hydrogène. On a constaté ensuite qu'il était avantageux de se servir soit de solutions alcoo- liques fortement diluées des hormones, soit de catalyseurs de
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réduction à faible activité, c'est-à-dire de catalyseurs qui n'attaquent pas le noyau banzolique.
On peut aussi remplacer l'hydrogène oatalytiquement ac- tif par de l'hydrogène activé par d'autres moyens ou d'autres manières; par exemple,par de l'hydrogène, atomique ou de l'hy- drogène à l'état naissant tel que par exemple celui que l'on prépara en ajoutent un métal alcalin à des solutions alcooli- ques des hormones ou encore en faisant réagir des solutions de l'espèce' contenant des paillais d'aluminium amalgamés En présence de l'eau. On peut aussi réduire les solutions acides des hormones pas des métaux: appropriés ou employer n'importe quel autre procédé par lequel on réduit la groupe se tonique
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de l'hormone folliculeusa à l' état de groupe alcoolique seeon- daire.
On peut aussi préparer des produits"d'hydrog énati on des hormones folliouleuse dont la molécule contient m groupe d'alcool secondaire en faisant agir sur l'hormone, en. présence de catalyseurs d'hydrogénation, decombinaisons qui renferment de l'hydrogène et peuvent céder ce dernier en étant en même temps déshydrogénées. Ces combinaisons sont par exemple les
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benzo1.s hydrogénés, ia na,phtali# et leurs dérivés,tels que par exemple le c7ciohexanol, la tétraline et les corps analo- gues ou encore les hormones folliouleuses à haute hydrogénatiat qui renferment un noyau benzolique hydrogéné; ou l' i s ob orn éol, la pipéridine et autres c#lbinaisC.t1s de même genre.
On peut aussi transformer le groupe cétonique en-groupe alcoolique secondaire en faisant réagir les hormones avec des alcoolats; de cette manière le groupe sétonique est réduit en
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groupe alcoolique secondaire,tandis qu'en même temps 1 ' alo oo-
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lat s'oxyde.
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Un autre procédé de préparation de ses proouit's. dhyclro-.. gênât loo. consiste à réduire tout d'abord l'oxime de l'hormone on l'aminé correspondante et à soumettre cette dernière à température- élevée à l'action de nitrites. Dans ce cas aussi on obtient l'alcool secondaire.
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L'expression "hormone foilisuleuse" dans l'acception du présent mémoire et des revendications comprend toutes les
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combinaisons estr ogène s, qui provoquent les mêmes effets physiologiques que l'hormone foilieuleuse- de la formule 018 H22 02, D*autre s hormones folliculeuses, telles que le-s z\ , matières qui accompagnent l'hormone foLliouleuse 018 N22 p2 dans les huiles harmoniques brutes et qui diifërant' def la première par une plus faible teneur en hydrogène paument également servir de matière première. Ces combinaisons sont
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par exemple des produits de la formule C 18 B80 02 et 818 18 ; 08) décrits par Girard et ses ooilaborateurs dans les acmptes rendus de l'année 1931, pages 912 et 1022.
Elles diffèrent de l'hormone foiliculeuse par la présence dans leurs molécules d'une autre ou de deux autres liaisons doubles. Si l' on s oumat ces produits à l'action de l'hydrogène' de la màni é re; @ 1- d@s m s décrite on sature t out d'abord les doubles liaiscns,tandis que le noyau benzolique reste intact; ensnito, le groupe ce- tonique est réduit en groupe alcoolique secondaire et l'on arrive aux mêmes produits d'hydrogénation que ceux obtenus
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par l'hydrogénation de l'hormone folliculeuso do la formule 018 H22 02.
Les huiles d'hormones qui proviennent par exemple
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du placenta ou de diverses variétés d'urine.- par exemple de l'urine des animaux en gestation, partiovlîbrement des juments ou encore les préparations d'hormone dérivées de: ma'tji.ëres. végétales ou obtenues par synthèse, peuvent également être soumises au processus d'hydrogénation ci-dessus exposé.
L'expression "produits d'hydrogénation des hormones folli-
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ouleuses"dans l'acception du mémoire et des revendications comprend toutes les combinaisons que l'on obtient par l'hydro-
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génation des hormones fo.liculeuses dans lesquelles le noyau benzol ique n'est pas attaque, tandis que le groupe cétonique est transformé en groupe alcoolique secondaire. Cesnouvelles combinaisons diffèrent de la matière première par le fait qu'on
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dépit de l'ahee,.0a du groupe cétonique, elles possèdent une efficacité physiologique considérablement plus élevée que la matière première.
On peut de cette façon transformer la matière première
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très coûtause, c'est-à-dire les huile,s harmoniques brutes et produits analogues à peu de prix et simplement en produits dont Inefficacité thérapeutique et physiologique est considéra'
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ble. f test ainsi, par exemple, alors que l'hormone, falliculeuse normale a une activité de 4,5 à 5 millions d'unités souris par grann dans l'essai dtAllen-Doisy, l'hormone dihydrofoh liculeuse est à peu près 6 fois plus activer'est-a-dire qu'elle possède une efficacité d'environ 30 millions d'unités souris par gramme dans un essai effectué en suspension aqueu- se dans les mêmes conditions que celles de l'essai de l'hor-
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mone f o11 ic u1s usa.
Un autre avantage de l' invention est que l'odeur désagréa- ble des matières premières, disparaît presqu' entièrement sous l'effet de l'hydrogénation.
EXEMPLE 1.
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On dissout 1 gramme d'hormone folliculeuss ayant la formule 018 H22 02 dans 300 cm3 d'alcool.; on y ajoute 0,5 gr. d'un catalyseur au nickel obtenu selon le procédé courant à partir du carbonate de nickel par réduction prudente par '-l'hydrogène et ensuite on réduit par l'hydrogène sous uns
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pression d'environ 20 atm. et à une température de 120 pan- dant 2 heures. On sépare par filtration du catalyseur le li-
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quide obtenu et on isole le produit de la réduction en arro- sant avec de l'eau. Le produit brut est soumis à plusieurs
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recristallîsations par l'alcool en petite quantité pour être obtenu sous sa forme pure.
Il constitue alors de beaux petits : cristaux brillants semblables à des perles,dont le point de
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fus i on A de 168 à 1700. L'analyse de ae corps s d mna là for- mule 018 H84 02. La aaibinaism se dissout dans l'acide r>ulfu- riqua concentre de la même façon que la matière.,. première',
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c'est" a-dire en donnant une coloration jaune'; toutefois ,sa fluorescence- est différente surtout vue à la lamps de. Quartz d'analyse: elle est bleu clair En plus de ce produit, on en obtient un autre d'un p oint de fusion de 198 à 202 , qui est son isomère.
EXEMPLE 2.
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On dissout 1 gramme d'hormone fclliouleuse brute: et cris- tallisée dans 300 ssm3 de cyclohexauol; âpres, addition d'un ' gramme de oatalyaemr au nickel préalablement réduit, m. réduit à la température de 140 et sous une pression de- 40 atmosphè- res,par lthydrogène. Lorsque la fixation de l*'hydrogène est terminée, on cmoentre sous vide la solution en réaction dd barrass'ëe du catalyseur et on agite énergiquement avec une so- lution. aqueuse de potasse le résidu en solution éthérée, En traitant l'extrait alcalin par un asidat, on provoque la sépa- ration. d'un précipité blanc et cristallin qui fond à la tem- pérature de 190 à 1960 et qui accuse dans l'essai d,A7.len.poisy sur la souris castrée une efficacité de 25 millions d'unités souris par gramme,
EXEMPLE 3.
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On chauffe une solution de 1 gramme d'hormone follisuleu- se d'un point de fusion de 240 ( il s'agit ici d'un produit cristallisébrut tel qu'on l'obtient directement des, huilas hormoniques brunes et brutes) dans une quantité à peu près centuple d'alcool amylique jusqu'à ébullition douce.; ensuite,
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on y :introduit du sodium métallique découpe en petits froments à raison de 1 gramme.
La solution, qui, initialement, était jaunâtre, perd sa couleur au cours de la réaction, A la fin de cette dernière, le liquide en réaction se fige après re- fr oidissement pour donner une huile remplie de eristaux. On ajoute ensuite l'eau, on. acidifie,puis on eu,,pulsa l'alcool amylique p ar de la vapeur d'eau. Il reste al orune résine friable que l'on reprend par de l' éther. On soumet la solution éthérée à agitation avec une solution de soude caustique et l'on obtient en concentrant par la chaleur une résine brunâtre.
En traitant par un acide,on précipite de la solution alcaline une matière résineuse qui se solidifie petit à petit. Par su- blimation. sous vide élevé et reoristallisation, on en sép are une substance d'un point de fusion de 167 à 170 qui donne dans l'acide sulfurique une solution de couleur jaune-vert,,
Sous la lumière d'une lampe. d'analyse de Quartz, oette solution accuse la fluorescence bleue caractéristique de la dihydro- hormone folliculeuse.
EXEMPLE 4.
On dissout dans 200 cm3 d'acétate d'éthyle saturée par l'eau 1 gramme, d'hormone folliculeuse et l'on soumet à agita- tion avec 'Un paillon, d'aluminium amalgamé. Lorsque la réactio est terminée, on évapora, la solution d'acétate d'éthyle et l'on épure le reliquat restant somme dans l'exemple 1. On obtient ainsi la même hormone' folliculeuse que dans l'exemple 3.
EXEMPLE 5.
On dissout 1 gramme d'hormone folliculeuse dans 100 cm3 d'acide acétique glacial et l'on y ajoute une trace de chlorure de palladium. On introduit ensuite de la poudre de zinc de bonne qualité en tous petits fragments en l'espace de deux heu- res et à proportion d'à peu près une quantité vingt fois plus considérable; on soumet alors à ébullition jusqu'à ce que la plus grande partie de la poudre de zinc soit dissoute. Après
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filtration de la solution., m précipita par l'eau et l'en dissout le produit de réaction résineux. obtenu, a:'à:J.-s...de l'al- cool.
Après avoir ajouté à la solution alcoolique une solu- tien' renfermarlt la même quantité de semi..oarba.zidOhlQrhradt dans J'alcool et la quantité correspondante dçao-étate de potassium, on laisse reposer pendant 48 heures, puis m se paie par filtration le semioarbazona de l'hormone- fal.lioUls:u6E1 diz fio ilement soluble qui s'est séparée.
On traite la liqueur
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mère par de l'eau pour précipiter le'produit de réduction à
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présent épuré et an lui fait subir une épuration, ocmplémen- taire par recriste-lisatîm, EXBK2LE 6, On dissout de 1 équil ine de la formule C18 B30 02 prépa-
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rée suivant les données de Gérard et se collaborateurs,
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comptes rendus 1931,912î022 par recristallisa tiarl d'une assez grande quantité d'hormones folliculeuse>s brutes, dans une quantité centuple d'a,1.cool; on y ajoute la m8me quantité
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de catalyseur au nickel, âpres quoi on fait agir dessus de
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l'hydrogène à la température de 100 et en autocla'va'. Après
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arrêt de la réaction, on sépare le catalyseur par filtration et en dilue avec de l'eau.
On obtient -on précipité duquel on:
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peut, par recristallisatiari, obtenir dans sa plus grande par- tia, de l'hormone dihyclrofoilioule use, ayant a cmms formule 018 IM4 02 et un point de fusion de 167 à l'OQ, Elle posséda toutes les propriétés du produit obtenu casformément à la demande de brevet Soh. 99330 IVa/12 Allemagne ), EXEl\#LE 7.
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On dissout un produit brut d'une efficacité de 60.000 à
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80.000 unités souris par gramme préparé à partir de 1 trine de j-oment en gestation,par concentration,par évapora tien et
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extraction par des solvants, dans l'alcool; on y ajoute en.. viron 10% en poids de catalyseur au niokel (préparé par pré-
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cipitatioa par le carbonate c'ia s oud9 cl$un mélange de sulfates
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de nickel et de cuivre et réduit à la température de 300 à 350 ) .
Ensuite, on fait passer en autoclave et à la température de
100 à 1200 de l'hydrogène jusqu'à ce que la vitesse de fixa- tion de ce dernier diminue nettement. On sépare an suite du catalyseur par filtration, après refroidissement, et on évapo- re l'alcool.. On obtient ainsi à peu près le même poids que celui de la matière première d'une huile brune dont l'effica- cité est 3 à 5 fois plus élevée que cette dernière.
EXEMPLE 8.
On dissout une préparation d'hormones brutes obtenue à partir de placenta par extraction par des solvants organiques et ayant une efficacité de 30.000 unités souris par gramme, dans de l'alcool amylique; après avoir ajouté du sodium métal- lique, on réduit à température d'ébullition. Lorsque on a in- troduit en sodium la moitiédu poids de la matière première, on termine la réaction en faisant passer de la vapeur d'eau et en expulsant de la sorte l'alcool amylique.A présent, on acidifia) et on extrait par l'éther pour débarrasser la prépa- ration d'hormone de l'eau et des. sels.
Après concentration, l'extrait ethéré donne une huile brune doit 1' odeur est nota- blement moins désagréable, que selle de la matiez, première et dont l'efficacité est trois fois plus consdérable que celle- ci; quant à la quantité de produit, elle, ne change pratique- ment pas.
On peut, de la même facon, opérer sur une préparation de tocoquinine obtenue ,par exemple, à partir de résidus de pression de noyaux de palme par extraction par m procédé con- nu. Dans ce cas également, on obtient une augmentation de l'ef- ficacité au triple ou au quadruple, tandis que la quantité de matière reste pratiquement constante.
EXEMPLE 9,
On dissout dans l'alcool 0,5 gr, de l'oxime d'hormone folliouleuse décrite par Butenandt et on chauffe' à ébullition.
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On introduit ensuite petit à petit 1 granme de sodium métal- lique coupe en petits morceaux dans la solution bouillante; lorsque la dissolution du sodium est terminée, en dilue avec
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de l'eau et l'on élimine l'alcool de la soltltiCl1l par acaeon- tration sous vide,, Sans isoler l'amine formée, on traite, par de l'acide chlorhydrique diluée on ajoute une solution de 0,25 gr. de nitrite de potassium dans l'eau et on porte à' ébullition; on extrait le produit de la réaction hors de; la solution acide par l'éther et après évaporation de. l'éther, il reste une masse faiblement colorée en brun.
En faisant
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reoristalliser, on obtient la dihy3raharmane fo1.li@u1au6SJ déjà décrite de la formule C18H2402 d'un point de fusion de 168 à 170 et possédant la fluorescence typique de la solu-
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tion sulfurique en ultra-viole t.
Exemple 10.
On Phauf fe à 2000 environ des quanti téa équimoléoulaires de cyc.lohexano1. et d'hormo.# fa1.1iauleuse, en agitait éner- giquemente dans un autoclave en présence d'environ 5% de leur poids de catalyseur d'hydrogénation. Le aommenaomoat de la réaction se traduit par une brusqus élévation de la pression à laquelle succède après quelque temps une diminution de pres- sion.
Après quelquesheures, on arrête la réaction, on sépare
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les produits de oelle-oi du catalyseur; on élimine par distillation sous vide le oyolohexanone! formé et le ogclohexa- hol qui n'a pas réagi; on précipite le résidu par dissolution
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dans l'alcool; on précipite- à l'état de semiaarbazana l'hor., mana folliculeuse qui n' a pas réagi et l'on épure la solution alcoolique par évaporât! on.
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On peut remplacer le oyoïQhexanol par d'autres combinai-. que, sons telles/.par exenlple, la tétrahyèironahtali:# ou même des hormones folliouieuBas plus fortement hy!.rogénées,qui renferment,par e;x:anple un noyau benzoliqua hydrogéné.
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Comme la transformation des hormones folliculeuses en leurs produits d'hydrogénation ne s'aooonpiit pas toujours ti
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quan/tivement et corme souvent les réactions se passent de manière qu'une partie de l'hormone n'est pas attaquée, en doit, pour éviter une hydrogénation trop poussée des produits dans
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lesquels le noyau banzoliqua est hydrogéné, généralement épu- rer les produits bruts. Une méthode très simple que l'on em- ploie avantageusement dans ce cas , consiste à faire réagir
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les produits cl' 7 herogênation bruts avec des agents de réac- tion cétoniques, otest-4-dire avec des combinaisons, qui àm- nent des produits de réaction insolubles ou éliminables d'au- tre manière dans l'hormone inchangée.
Une méthode de l'espèce est,,par exemple, celle décrite dans l'exemple 5; suivant celle-
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ci, on prépare la semi-carbazone de l'hormone folliculeuse non hydrogénée, qui se sépare par cristallisation de la solution en réaction.,tandis que les produits d'hydrogénatian restent en solution et peuvent en 'être isolés. On peut évidemment se
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servir d'autres agents de réaction cétoniquas, La présente in van ti on n'est pas limitée àux exemples donnés. On peut y apporter autant de change monts que l'en dé- sire, p our autant que l'on reste en harmonie aveo les princi- pes qui sont exposés dans le présent mémoire et dans lesre-
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vendicaticns qui suivent. 'RE1'ENDI 0ATIOK S.
1.-.Procédé de préparation de produits d'hydrogénation des hormones falliculeuses obtenues à partir de matière ani- male ou végétale ou Synthétiquement, caractérisé par le fait que l'on soumet les hormones aux méthodes employées usuelle- ment pour opérer la réduction des groupes s cétoniques en gr ou,
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:&>19'6., .' Bleo al secondaires, sans que le noyau benzolique de l'hormone soit attaqué.