BE560516A

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Info

Publication number: BE560516A
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Description

La présente invention est relative au sel de phénoxyméthyl-péni- cilline avec la N,N-diisopropyl- ss - hydroxyéthylamine. Ce sel est une sub- stance inconnue jusqu'à présent, qui est faiblement soluble dans les sol- vants organiques, par exemple l'acétate de n-butyle, l'acétate de n-amyle, l'acétate d'éthyle, l'acétone, la méthyl éthyl cétone et l'éther. Il est également faiblement soluble dans l'eauo Il a un point de'fusion de 151-1530 C (sous décomposition).

Ce sel peut être produit en ajoutant de la N,N-diisopropyl - ss- hydroxyéthylamine à une solution de phénoxyméthyl-pénicilline dans un solvant organique, et en séparant le sel ainsi formé, à partir de la solution. Il peut également être produit en ajoutant un sel de N,N-diisopropyl-ss- hy- droxyéthylamine, par exemple l'acétate, à une solution aqueuse d'un sel de phénoxyméthyl-pénicilline, par exemple le sel de potassium.

Comme on le sait, le rendement de benzyl-pénicilline, qui est la pénicilline la plus couramment utilisée, peut être grandement accru en ajoutant de l'acide phénylacétique au milieu de culture. Pour la production de phénoxyméthyl-pénicilline, on peut utiliser de l'acide phénoxyacétique ou 0 -phénoxylactique comme précurseur, de sorte que le groupe phénoxymé- thyle est introduit dans la molécule de pénicilline au lieu du groupe benzy- le.

Comme dans le cas de l'utilisation de l'acide phénylacétique, un excès considérable d'acide phénoxyacétique ou ss -phénoxylactique restera toujours dans le milieu de culture après que la fermentation s'est achevée En outre, une certaine quantité de benzyl-pénicilline sera également formée lorsque de l'acide phénoxyacétique est utilisé comme précurseur. Ces trois substances sont indésirables dans la phénoxyméthyl-pénicilline.

Si la benzyl-pénicilline est isolée du milieu de culture sous forme d'un de ses sels avec des amines, il est facile d'obtenir une sépara- tion totale d'avec l'excès inévitable d'acide phénylacétique, car les sels de cet acide avec beaucoup des amines les plus couramment utilisées sont solubles dans les solvants organiques.

On a maintenant trouvé que la N,N-diisopropyl- ss- hydroxyéthyla- mine forme un sel avec la phénoxyméthyl-pénicilline, qui est faiblement soluble dans les solvants organiques, tandis que ses sels-avec l'acide phénoxyacétique, l'acide $ - phénoxylactique et la benzyl-pénicilline sont facilement solubles dans les solvants organiques. Cette découverte permet d'isoler la phénoxyméthylpénicilline des milieux de culture qui en contien- nent ainsi que de l'acide phénoxyacétique ou de l'acide ss -phénoxylactique, sous une forme pratiquement exempte de ces acides et de benzyl-pénicilline.

Suivant l'invention, cela peut être obtenu par un procédé dans lequel le milieu de culture est acidifié jusqu'à un pH auquel la phénoxyméthyl-péni- cilline est présente dans son état libre, le milieu de culture acidifié est extrait avec un solvant organique faiblement soluble dans l'eau, après quoi de'la N,N- diisopropyL-ss -hydroxyéthylamine est ajoutée à l'extrait, et le sel ainsi formé est séparé de la solution, ou bien la solution organique obtenue par l'extraction est extraite avec une solution tampon aqueuse, et la solution aqueuse ainsi obtenue est extraite avec un solvant organique faiblement soluble dans l'eau, après quoi de la N,N-diisopropyl-ss-hydroxyé- thylamine est ajoutée à la solution organique ainsi obtenue et le sel ainsi formé est séparé de la solution.

Le sel ainsi produit peut, par des méthodes connues, être trans- formé en d'autres sels de phénoxyméthyl-pénicilline. En outre, la phénoxy- méthyl-pénicilline libre peut être produite à partir du sel en le traitant en suspension ou solution aqueuse avec un acide fort, car la phénoxyméthyl-

pénicilline libre est très faiblement soluble dans l'eau et n'est pas dé- composée par des acides.

EXEMPLE 1.

A une solution de 1,94 gr de potassium-phénoxyméthyl-péniciline dans 10 ml d'eau, on ajoute une solution 0,72 gr de N,N-diisopropyl-p- hydroxyéthylamime dissous dans un mélange de 2 ml d'eau et de 0,3 ml d'aci- de acétique glacial. Les cristaux ainsi formés sont enlevés de la solution par filtration, lavés à l'eau et séchés à 30 C. Rendement: 1,80 gr, ayant 1200 umités internationales de pénicilline par mgr (détermination iodomé- trique).

EXEMPLE 2.

A une solution de 1,75 gr de phénoxyméthyl-pénicilline dans un mélange de 20 ml d'acétate de n-butyle et de 5 ml d'éthanol à 96%, on ajou- te 0,75 gr de N,N-diisopropyl-ss- hydroxyéthylamine. Les cristaux ainsi formés sont enlevés de la solution par filtration, lavés à l'acétone et séchés. Rendement: 2,15 gr, ayant 1205 unités internationales par mgr.

EXEMPLE 3.

A un milieu de culture contenant de la phénoxyméthyle pénicilline et, en outre, de l'acide phénoxyacétique en excès de la quantité utilisée par la moisissure productrice de pénicilline, on ajoute de l'acide phos- phorique jusqu'au pH2, après quoi le milieu est extrait avec de l'acétate de n-butyle. L'extrait ainsi obtenu est extrait avec une solution tampon de phosphate de sodium aqueuse ayant un pH de 6,5. L'extrait ainsi obtenu est extrait avec un plus petit volume d'acétate de n-butyle que celui uti- lisé pour la première extraction. L'extrait ainsi obtenu contient 63.000 unités internationales de pénicilline (détermination iodométrique) par ml et des impuretés colorées. A 100 ml de cette solution, on ajoute 7,05 gr de N,N-diisopropyl-ss- hydroxyéthylamine, et le mélange est agité à la température ambiante pendant 2 heures.

Les cristaux ainsi formés sont en- levés de la solution par filtration, lavés à l'acétone et séchés à la tem- pérature ambiante. Rendement: 4,1 gr ayant 1215 unités internationales par mgr.

REVENDICATIONS.

1. Comme nouvelle substance, le phénoxyméthyl-pénicillinate de N,N-diisopropyl- P -hydroxyéthylamine.

**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.

Claims

2. Un procédé pour isoler de la phénoxyméthyl-pénicilline de mi- lieux de culture qui en contiennent, par lequel la phénoxyméthyl-pénicilline est obtenue pratiquement exempte d'acide phénoxyacétique ou d'acide ss- phénoxylactique, ajoutés comme précurseurs durant le procédé de fermentation est pratiquement exempte de bemzyl-pénicilline, caractérisé en ce que le milieu de culture est acidifié jusqu'à un pH auquel la phénoxyméthyl-péni- oilline est présente dans son état libre, le milieu de culture acidifié est extrait avec un solvant organique faiblement soluble dans l'eau, après quoi de la N,N-diisopropyl- ss-hydroxyéthylamine est ajoutée à l'extrait et le sel ainsi formé est séparé de la solution,

ou bien la solution organique obtenue par l'extraction est extraite avec une solution tampon aqueuse, et la solu- tion aqueuse ainsi obtenue est extraite avec un solvant organique faible- ment soluble dans l'eau, après quoi de la N,N-diisopropyl-ss -hydroxyéthyla- mine est ajoutée à la solution organique ainsi obtenue et le sel ainsi formé est séparé de la solution. <Desc/Clms Page number 3>

3. Nouvelle substance et procédé, tels que décrits ci-avant.