BRPI0111743B1

BRPI0111743B1 - Composições farmacêuticas compreendendo um enantiômero de quinolina 1,2-anelada que inibe farnesil transferase e seu processo de preparação

Info

Publication number: BRPI0111743B1
Application number: BRPI0111743-2A
Authority: BR
Inventors: Marc Gaston Venet; Patrick Rene Angibaud; David William End
Original assignee: Janssen Pharmaceutica N.V.
Priority date: 2000-06-22
Filing date: 2001-06-13
Publication date: 2019-03-26
Also published as: SK285699B6; PL209521B1; PL358918A1; US20080114009A1; HUP0300872A2; CA2410232C; EA200300048A1; EE04966B1; HU229095B1; DE60110592T2; US20030114471A1; IL153560A0; IS6590A; AU2006220405A1; NO324494B1; KR20030009463A; WO2001098302A1; AU2001263962B2; NZ522481A; SK502003A3

Abstract

"farnesil transferase que inibe o enantiômero de quinolina 1,2-anelada". a invenção refere-se a (-)-5-(3-clorofenil)-<244>-(4-clorofenil)-<244>-(1-metil-1h-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina e seus sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis, e ao uso desses compostos em medicina especialmente para o tratamento de câncer.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS COMPREENDENDO UM ENANTIÔMERO DE QUINOLINA 1,2-ANELADA QUE INIBE FARNESIL TRANSFERASE E SEU PROCESSO DE PREPARAÇÃO.

A presente invenção refere-se a um enantiômero de quinazolina

1,2-anelada, à preparação do mesmo, a composições farmacêuticas compreendendo o referido composto e ao uso dessas composições como medicamento bem como a métodos de tratamento por administração dessas composições.

Os oncogenes frequentemente codificam componentes protéicos de trajetos de transdução de sinais que levam à estimulação do crescimento celular e da mitogênese. A expressão de oncogenes em células cultivadas leva à transformação celular, caracterizada pela capacidade das células para se desenvolver em ágar macio e pelo desenvolvimento de células como focos densos sem a inibição de contato mostrada por células nãotransformadas. A mutação e/ou superexpressão de certos oncogenes frequentemente estão associadas com câncer humano. Um grupo particular de oncogenes é conhecido como ras, que foram identificados em mamíferos, pássaros, insetos, moluscos, plantas, fungos e leveduras. A família de oncogenes ras de mamíferos consiste de três membros (isoformas) principais: os oncogenes H-ras, K-ras e N-ras. Estes oncogenes ras codificam proteínas altamente relacionadas genericamente conhecidas como p21^ras. Uma vez fixadas às membranas plasmáticas, as formas mutantes ou oncogênicas de p21^ras vão fornecer um sinal para a transformação e crescimento descontrolado de células tumorosas malignas. Para adquirir este potencial de transformação, o precursor da oncoproteína p21^ras deve sofrer uma farnesilação enzimaticamente catalisada do resíduo cisteína localizado em um tetrapeptídio carboxila-terminal. Portanto, inibidores das enzimas que catalisam esta modificação, isto é, farnesil transferase, vão impedir a fixação de p21^ras a membranas e bloquear o crescimento aberrante de tumores transformados por ras. Assim, em geral a técnica reconhece que inibidores de farnesil transferase protéica podem ser muito úteis como agentes anticâncer para tumores nos quais ras contribui para a transformação.

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Como as formas oncogênicas alteradas de ras são freqüentemente encontradas em muitos cânceres humanos, notavelmente em mais de 50% de carcinomas de cólon e de pâncreas (Kohl et al., Science, vol. 260, 1834 - 1837, 1993), foi sugerido que inibidores de farnesil transferase protéi5 ca podem ser muito úteis contra esses tipos de câncer.

Nos documentos WO 97/16443, WO 97/21701, WO 98/40383 e WO 98/49157 encontram-se descritos derivados de 2-quinolona que apresentam atividade inibidora de farnesil transferase. Outros compostos de quinolona com atividade inibidora de farnesil transferase estão descritos nos 10 documentos WO 00/12498, 00/12499 e 00/47574. O documento WO 00/39082 descreve uma classe de novos compostos de quinolina e quinazolina 1,2-aneladas, portando um imidazol ligado a nitrogênio ou carbono, que mostram atividade inibidora de farnesil transferase protéica. Entre os compostos descritos no relatório descritivo dessa última patente está a (±)-5-(315 clorofenil)-a-(4-clorofenil)-cc-(1-metil-1 H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina que foi obtida na forma de uma mistura enantiomérica. Agora foi separada e foi verificado a mistura que o enantiômero (-) possui propriedades farmacológicas especialmente vantajosas comparado com a mistura enantiomérica.

A presente invenção refere-se, portanto, às composições farmacêuticas compreendendo (-)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1 -metil-1 Himidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina e seus sais de adição ácido farmaceuticamente aceitáveis, presente em uma quantidade de 50, 100, 300, 400 ou 600 mg, e um veículo farmacêuticamente aceitável.

O enantiômero (-) acima é doravante chamado de composto de acordo com a invenção.

O composto da invenção geralmente está presente em uma forma substancialmente pura, isto é, substancialmente livre do enantiômero (+) oposto, por exemplo contendo menos de 5% p/p, de preferência menos de 30 2% p/p, e vantajosamente menos de 1% p/p deste último enantiômero.

Os sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis mencionados acima compreendem as formas de sais de adição ácidos não-tóxicas

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terapeuticamente ativas que o composto da invenção pode adquirir. Este último composto pode ser convertido em seus sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis por tratamento da referida forma básica com um ácido apropriado. Ácidos apropriados compreendem, por exemplo, ácidos 5 inorgânicos tais como ácidos halídricos, por exemplo ácido clorídrico ou bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e similares; ou áci-

dos orgânicos tais como, por exemplo, ácido acético, ácido propanóico, ácido hidroxiacético, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido malônico, ácido succínico (isto é, ácido butanodióico), ácido maléico, ácido fumárico, 10 ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido ciclâmico, ácido salicílico, ácido p-amino-salicílico, ácido pamóico e ácidos similares.

O termo sais de adição ácido compreende os hidratos e as for15 mas de adição de solvente que o composto da invenção pode tomar. Exemplos de tais formas são, por exemplo, hidratos, alcoolatos e outras.

Sempre que usado daqui em diante, o termo composto da invenção também inclui os sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis.

O enantiômero (-) de acordo com a presente invenção pode ser preparado por separação da mistura enantiomérica original descrita no documento WO 00/39082 acima. A separação pode ser efetuada de maneira convencional, por exemplo por reação de um ácido quiral adequado tal como ácido (+)-6-aminopenicilânico, ácido D ou L aspártico, ácido (1S,3R) ou (1R,3S)-canfórico, ácido (1S) ou (1R)-10-canforsulfônico, carbobenzilóxi-Lprolina, ácido cólico, ácido desidrocólico, ácido desoxicólico, ácido (2S,3S) ou (2R,3R) dibenzoiltartárico, ácido (2S,3S) ou (2R,3R) diacetiltartárico, ácido (2S,3S) ou (2R,3R)-tartárico, ácido (2S,3S) ou (2R,3R) ditoluoiltartárico, ácido 2,3:4,6-di-O-isopropilideno-2-ceto-L-gulônico, ácido (+)-3,4-dihidro-2H30 1-benzopiran-2-carboxílico, ácido (R) ou (S)-4-(2-clorofenil)-2-hidroxi-5,5dimetil-1,3,2-dioxafosforinano-2-óxido, ácido D-glucônico, ácido D ou Lglutâmico, ácido D-isoascórbico, ácido (S) ou (R)-2-hidroxipropanóico, ácido

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lactobiônico, ácido D ou L-málico, ácido (R) ou (S)-mandélico, ácido L-2-((4metoxifenil)sulfonil)amino pentanodióico, ácido L-2-((4-metilfenil)sulfonil) amino pentanodióico, ácido (S)-6-metóxi-a-metil-2-naftaleno acético, ácido (S)-2-(fenilcarbamoilóxi) propanóico, ácido (-)-3-pinano carboxílico, ácido (R) 5 ou (S)-2-pirrolidona-5-carboxílico ou ácido (R)-tiazolidina-4-carboxílico. As formas salinas resultantes são subseqüentemente separadas, por exemplo, por cristalização seletiva ou fracionada e o enantiômero desejado é liberado dali por um álcali.

Uma maneira alternativa de separar a forma enantiomérica de10 sejada da mistura original envolve cromatografia líquida usando uma fase estacionária quiral. A forma enantiomérica pura também pode ser derivada da forma enantiomérica pura correspondente dos materiais de partida apropriados, contanto que a reação ocorra de forma estereoespecífica. A forma enantiomérica pura também pode ser obtida a partir de um material de parti15 da racêmico apropriado desde que a reação ocorra de forma enantioespecífica. A forma enantiomérica pura pode ser preparada por reação da mistura enantiomérica original com um outro enantiômero de alguns agentes quirais tais como ácidos ou cloretos de ácidos para obter misturas diastereoisoméricas, separando-a, por exemplo, por cristalização seletiva ou fracionada ou 20 usando cromatografia líquida, em seus diastereoisômeros puros. O diastere-

oisômero apropriado pode ser então clivado no enantiômero desejado. A mistura enantiomérica original pode ser preparada de acordo com os pro cessos descritos no documento WO 00/39082 acima ou da maneira especificamente descrita neste relatório.

O composto da invenção e seus sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis possuem propriedades farmacológicas aceitáveis pelo fato de terem efeito inibidor de farnesil transferase protéica (FPTase) que é surpreendentemente potente em comparação com aquele da mistura enantiomérica original. Dessa forma, esta última mistura tem uma atividade inibido30 ra de FPTase IC50 de 1,1 nM ao passo que o enantiômero (-) tem uma atividade correspondente de 0,7 nM.

Esta invenção fornece um método para inibir o crescimento a5/14

normal de células, inclusive de células transformadas, por administração de uma quantidade eficaz do composto da invenção na forma de uma composição farmacêutica compreendendo o composto da invenção em uma quantidade de 50, 100, 300, 400 ou 600 mg, e um veículo farmaceuticamente acei5 tável. Crescimento anormal de células refere-se ao crescimento celular independente de mecanismos reguladores normais (por exemplo perda da inibição de contato). Isto inclui o crescimento anormal de: (1) células tumorosas (tumores) expressando um oncogene ras ativado; (2) células tumorosas nas quais a proteína ras é ativada como conseqüência da mutação oncogênica 10 de um outro gene; (3) células benignas e malignas de outras doenças proliferativas nas quais ocorre ativação aberrante de ras. Ademais, foi sugerido na literatura que oncogenes ras não contribuem apenas para o crescimento de tumores in vivo por um efeito direto sobre o crescimento de células tumorosas mas também indiretamente, isto é, facilitando a angiogênese induzida 15 por tumor (Rak, J. et al., Câncer Research, 55, 4575-4580, 1995). Assim, o direcionamento farmacológico de oncogenes ras mutantes poderia suprimir de forma aceitável o crescimento de tumores sólidos in vivo, em parte inibindo a angiogênese induzida pelo tumor.

A invenção também fornece um método para inibir o crescimento 20 de tumores por administração de uma quantidade eficaz de um composto da invenção na forma de uma composição farmacêutica compreendendo o composto da invenção em uma quantidade de 50, 100, 300, 400 ou 600 mg, e um veículo farmaceuticamente aceitável a um indivíduo, por exemplo um mamífero (e mais particularmente um ser humano) com necessidade de tal 25 tratamento. Em particular, esta invenção fornece um método para inibir o crescimento de tumores que expressam um oncogene ras ativado pela administração de uma quantidade eficaz do composto da invenção na forma de uma composição farmacêutica compreendendo o composto da invenção em uma quantidade de 50, 100, 300, 400 ou 600 mg, e um veículo farmaceuti30 camente aceitável. Exemplos de tumores que podem ser inibidos incluem, porém sem limitação, câncer de pulmão (por exemplo, adenocarcinoma, inclusive câncer de pulmão de células não-pequenas), cânceres pancreáticos

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(por exemplo, carcinoma pancreático tal como, por exemplo, carcinoma pancreático exócrino), cânceres de cólon (por exemplo, carcinomas colo-retais tal como, por exemplo, adenocarcinoma de cólon e adenoma de cólon), tumores hematopoiéticos da linhagem linfóide (por exemplo, leucemia linfocíti5 ca aguda, linfoma de células B, linfoma de Burkitt), leucemias mielóides (por exemplo, leucemia mielógena aguda (AML)), câncer folicular da tireóide, síndrome mielodisplásica (MDS), tumores de origem mesenquimatosa (por exemplo, fibrossarcomas e rabdomiossarcomas), melanomas, teratocarcinomas, neuroblastomas, gliomas, tumor de pele benigno (por exemplo, cera10 toacantomas), carcinoma de mama (por exemplo, câncer de mama avançado), carcinoma de rim, carcinoma de ovário, carcinoma de bexiga e carcinoma epidérmico.

Esta invenção também fornece um método para inibir doenças proliferativas, tanto benignas como malignas, onde as proteínas ras são a15 berrantemente ativadas como conseqüência de mutação oncogênica nos genes. Com a referida inibição sendo realizada pela administração de uma composição farmacêutica de acordo como as reivindicações, a um indivíduo com necessidade de tal tratamento. Por exemplo, o distúrbio proliferativo benigno neurofibromatose ou tumores onde ras é ativada devido à mutação 20 ou superexpressão de oncogenes de tirosina cinase podem ser inibidos pelas composições farmacêuticas de acordo com as reivindicações.

As composições farmacêuticas de acordo com a invenção pode ser usado com outros fins terapêuticos, por exemplo:

a) sensibilização de tumores à radioterapia pela administração do compos25 to de acordo com a invenção antes, durante ou depois da irradiação do tumor para tratamento de câncer, por exemplo como descrito no documento WO 00/01411;

b) tratamento de atropatias tais como artrite reumatóide, osteoartrite, artrite juvenil, gota, poliartrite, artrite psoriática, espondilite ancilosante e lupus eritematoso sistêmico, por exemplo como descrito no documento WO 00/01386;

c) inibição da proliferação de células de músculos lisos incluindo distúrbios

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proliferativos vasculares, aterosclerose e restenose, por exemplo como descrito no documento WO 98/55124;

d) tratamento de condições inflamatórias tais como colite ulcerativa, doença de Crohn, rinite alérgica, doença do enxerto vs. hospedeiro, conjuntivite, 5 asma, ARDS, doença de Behcets, rejeição a transplante, urticária, dermatite alérgica, alopecia em áreas, escleroderma, exantema, eczema, dermatomiosite, acne, diabetes, lupus eritematoso sistêmico, doença de Kawasaki, esclerose múltipla, enfisema, fibrose cística e bronquite crônica;

e) tratamento de endometriose, fibróide uterino, sangramento uterino disfuncional e hiperplasia endometrial;

f) tratamento de vascularização ocular que inclui vasculopatia afetando vasos retinais e coroidais;

g) tratamento de patologias resultantes de fixação da proteína G heterotri15 mérica a membranas que incluem doenças relacionadas que ocorrem depois de funções ou distúrbios biológicos; olfato, paladar, luz, percepção, neurotransmissão, neurodegeneração, funcionamento das glândulas endócrinas e exócrinas, regulação autócrina e parácrina, pressão sangüínea, embriogênese, infecções virais, funções imunológicas, diabe20 tes, obesidade;

h) inibição da morfogênese viral por exemplo inibindo as reações de prenilação ou de pós-prenilação de uma proteína viral tal como o antígeno delta grande do vírus da hepatite D; e o tratamento de infecções por HIV;

i) tratamento da doença do rim policístico;

j) supressão da indução de óxido nítrico induzível incluindo distúrbios mediados por óxido nítrico ou citocina, choque séptico, inibição da apoptose, inibição da citotoxidez por óxido nítrico;

k) tratamento de malária.

Dessa forma, a presente invenção descreve uma composição 30 farmacêutica para uso no tratamento de uma ou mais das condições mencionadas acima.

Para o tratamento das condições acima, as composições farma8/14

cêuticas da invenção pode ser vantajosamente empregadas em combinação com um ou mais outros agentes anticâncer, por exemplo, selecionados de compostos de coordenação de platina, por exemplo, cisplatina ou carboplatina, compostos de taxano, por exemplo, paclitaxel ou docetaxel, compostos 5 de camptotecina, por exemplo, irinotecan ou topotecan, alcalóides da vinca antitumorais, por exemplo, vinblastina, vincristina ou vinorelbina, derivados antitumorais de nucleosídeos, por exemplo, 5-fluoruracila, gemcitabina ou capecitabina, agentes alquilantes de mostarda nitrogenosa ou nitrosouréia, por exemplo, ciclofosfamida, clorambucil, carmustine ou lomustine, deriva10 dos antitumorais de antraciclina, por exemplo, daunorubicina, doxorubicina ou idarubicina; anticorpos de HER2, por exemplo, trastzumab; e derivados antitumorais de podofilotoxina, por exemplo, etoposida ou teniposida; e agentes antiestrogênio que incluem antagonistas de receptores de estrogênio ou moduladores seletivos de receptores de estrogênio, de preferência tamo15 xifeno, ou alternativamente toremifeno, droloxifeno, faslodex e raloxifeno, ou inibidores de aromatase tais como exemestane, anastrozol, letrazol e vorozol.

Tendo em vista suas propriedades farmacológicas úteis, as presentes composições farmacêuticas podem ser formuladas em várias formas

farmacêuticas para fins de administração.

Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção, a quantidade determinada do composto, na forma de sal de adição de base ou ácido, como o ingrediente ativo é combinada em mistura íntima com um veículo farmaceuticamente aceitável, veículo este que pode adquirir várias for25 mas dependendo da forma de preparação desejada para administração. Estas composições farmacêuticas estão desejavelmente na forma de dosagem unitária adequada, de preferência, para administração por via oral, retal, percutânea ou por injeção parenteral. Por exemplo, quando se prepara as composições na forma de dosagem oral, pode-se empregar qualquer dos meios farmacêuticos usuais tais como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e outros no caso de preparações líquidas orais tais como suspensões, xaropes, elixires e soluções; ou veículos sólidos tais como amidos, açúcares,

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caulim, lubrificantes, aglutinantes, agentes de desintegração e outros no caso de pós, pílulas, cápsulas e comprimidos. Por causa de sua fácil administração, comprimidos e cápsulas representam a forma de dosagem unitária oral mais vantajosa, em cujo caso veículos farmacêuticos sólidos são obvi5 amente empregados. Para composições parenterais, o veículo usualmente vai compreender água estéril, pelo menos em grande parte, embora outros ingredientes, para ajudar a solubilidade por exemplo, possam ser incluídos. Pode-se preparar soluções injetáveis, por exemplo, onde o veículo compreenda solução salina, solução de glicose ou uma mistura de solução salina e 10 solução de glicose. Também podem ser preparadas suspensões injetáveis em que veículos líquidos apropriados, agentes de suspensão e outros podem ser empregados. Nas composições adequadas para administração percutânea, o veículo opcionalmente compreende um agente intensificador de penetração e/ou um agente umectante adequado, opcionalmente combinado 15 com aditivos adequados de qualquer natureza em pequenas proporções, aditivos estes que não causam efeito nocivo significativo à pele. Os referidos aditivos podem facilitar a administração à pele e/ou podem ser úteis para preparar as composições desejadas. Estas composições podem ser administradas de várias maneiras, por exemplo, como emplastro transdérmico, 20 como deposição cutânea, como pomada.

É especialmente vantajoso formular as composições farmacêuticas acima mencionadas em uma forma de dosagem unitária que facilite a administração e a uniformidade da dosagem. Forma de dosagem unitária, conforme usado neste relatório descritivo e reivindicações, refere-se a uni25 dades fisicamente distintas adequadas como dosagens unitárias, cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o veículo farmacêutico requerido. Exemplos de tais formas de unidade de dosagem são comprimidos (inclusive comprimidos ranhurados ou revestidos), cápsu30 Ias, pílulas, pacotes de pó, wafers, soluções ou suspensões injetáveis, colheres de chá, colheres de sopa e outras, e múltiplos segregados das mesmas.

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Aqueles versados na técnica podem determinar facilmente a quantidade eficaz a partir dos resultados de teste apresentadas acima. Em geral contempla-se que uma quantidade eficaz variaria de 0,01 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal, e em particular de 0,05 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Para um adulto, geralmente prefere-se administrar uma dose diária de 10 a 600 mg, vantajosamente 50 a 500 mg e especialmente 100 a 400 mg de ingrediente ativo, doses de 200 ou 300 mg sendo particularmente preferidas. Pode ser apropriado administrar a dose requerida em duas, três, quatro ou mais subdoses a intervalos apropriados durante o dia. As referidas subdoses podem ser formuladas como formas de dosagem unitárias, por exemplo, contendo 10 a 500 mg, e em particular 50 mg a 300 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária; unidades de dosagem contendo 50 mg, 100 mg, 200 mg ou 300 mg de ingrediente ativo são especialmente preferidas.

Os exemplos a seguir são dados a título ilustrativo.

Parte experimental

Doravante THF significa tetrahidrofurano, DIPE significa éter diisopropílico e EtOAc significa etil acetato.

Exemplo

a) Preparação do intermediário 2

Uma mistura de 6-(4-clorobenzoil)-4-(3-clorofenil)-2-(1H)-quinazolinona (intermediário 1) (0,0506 mol), preparada da maneira descrita no documento WO 98/49157, em POCI₃ (100 ml) foi agitada e refluxada por 1 hora. O solvente foi evaporado até a secura. O resíduo foi recuperado várias 25 vezes em CH₂CI₂. O solvente foi evaporado até a secura. O resíduo foi recuperado em CH₂CI₂. A mistura foi despejada em gelo/NH₄OH. A camada orgânica foi separada, secada (MgSO₄), filtrada e o solvente foi evaporado até a secura. O resíduo (24,2 g) foi cristalizado de CH₃CN. O precipitado foi re11/14

movido por filtração e secado, dando 19,8 g de intermediário (2) (94%), p.f.

152°C.

b) Preparação do intermediário (3)

Uma solução de n-butil lítio em hexano (1,6 M) (90 ml) foi adicio5 nada em gotas a -70°C em uma atmosfera de N₂ a uma mistura de 1metilimidazol (0,144 mol) em THF (120 ml). A mistura foi agitada a -70°C por 15 minutos. Clorotrietilsilano (0,148 mol) foi adicionado em gotas a -70°C e a mistura foi agitada por 15 minutos a esta temperatura. Uma solução de nbutil lítio em hexano (1,6 M) (80 ml) foi adicionada em gotas. A mistura foi 10 agitada a -70°C por 15 minutos. Uma mistura de intermediário (2) (0,0822 mol) em THF (300 ml) foi adicionada em gotas. A mistura foi agitada a -70°C por 1 hora, hidrolisada, extraída com EtOAc e decantada. A camada orgânica foi secada (MgSO₄), filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel. As frações puras foram 15 colhidas e o solvente foi evaporado, dando 24,9 g (61%) de intermediário (3).

intermediário 2 intermediário 3

c) Uma mistura de intermediário (3) (0,0061 mol) e azida de sódio (0,0079 mol) em Ν,Ν-dimetilacetamida (DMA) (20 ml) foi agitada a 50°C por 18 horas. A mistura foi resfriada para a temperatura ambiente e despejada em 20 água gelada. O precipitado foi removido por filtração, lavado vigorosamente com H₂O e recuperado em CH₂CI₂. A solução orgânica foi secada, filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo foi cristalizado de CH₃CN Dl PE. O precipitado foi removido por filtração e secado, dando 2,3 g (75%) de (±)-5-(312/14

clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1 H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a] quinazolina-7-metanol (intermediário 4); p.f. 232 - 233°C.

d) Uma mistura de intermediário (4) (0,0573 mmol) e sulfoniluréia (300 g) foi agitada a 160°C por 5 horas e em seguida resfriada. Água gelada foi adicio- nada, em seguida cloreto de metileno e a mistura foi filtrada em ceiite. A camada orgânica foi separada, secada (MgSO₄), filtrada e o solvente foi evaporado até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel. A fração pura foi colhida e o solvente foi evaporado, dando 7,5 g (26%) de (±)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1 H-imidazol-510 il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina (intermediário 5).

e) O intermediário (5) foi separado em seus enantiômeros e purificado por cromatografia de coluna em Chiralpak AD® (eluente: hexano/ EtOH 50/50; 15

- 35 pm). As primeiras frações puras (A) foram colhidas e o solvente foi evaporado, dando 3,3 g de resíduo que foi cristalizado de CH₃CN/DIPE. O pre- cipitado foi removido por filtração e secado, dando 2,55 g de (-)-5-(3clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1 H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a] quinazolina-7-metanamina (composto 1) [a]_D ²⁰ = -7,16° (c = 5 mg/ml MeOH); p.f. 178

- 180°C; 1H-RMN (DMSO, 400 MHz) δ em ppm: 8,73 (d,J = 8,6 Hz, 1H), 8,38 (dd,J = 8,6 Hz, J = 1,5 Hz, 1H); 7,74-7,67 (m,3H); 7,64 (s,1H); 7,62-7,56 (m,2H); 7,40 (d,J = 8,6 Hz, 2H); 7,21 (d,J = 8,6 Hz, 2H); 5,93 (s, 1H), 3,43 (s,3H); 3,40 (s, amplo, 2H); EM (eletroaspersão, modo pos. OR = 50V) m/z: 501 - 505 (M+H)+; 473 - 477, 391 - 395; 83; Anal. (C25H18CI2N8) C calc. 59,89 encontrado 59,71, H calc. 3,62 encontrado 3,52, N calc. 22,35 encontrado 22,17. Este composto contém menos de 0,5% p/p do enantiômero (+), medido por HPLC (Chiralpak AD® 10 pm eluente hexano/etanol 50/50).

As segundas frações (B) foram colhidas e evaporadas, dando

3,3 g de resíduo que foi cristalizado de CH3CN/DIPE. O precipitado foi removido por filtração e secado, dando 2,6 g de (+)-5-(3-clorofenil)-oc-(4clorofenil)-a-(1 -metil-1 H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metana30 mina (composto 2) [a]_D ²⁰ = +5,9° (c = 5 mg/ml MeOH). Este composto contém 4% p/p do enantiômero (-), medido por HPLC (Chiralpak AD® 10 pm eluente hexano/etanol 50/50).

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C. Exemplo farmacolóqico

Exemplo C.1: Ensaio in vitro para inibição de farnesil transferase protéica

Um ensaio in vitro para inibição de farnesil transferase protéica foi realizado essencialmente da maneira descrita no documento WO 5 98/40383, páginas 33-34.

Exemplo C.2: Ensaio de reversão de fenótipo de células transformadas por ras

O ensaio de reversão de fenótipo de células transformadas por ras foi realizado essencialmente da maneira descrita no documento WO 10 98/40383, páginas 34-36.

Exemplo C.3: Modelo de tumor secundário de inibidor de farnesil transferase protéica

O modelo de tumor secundário de inibidor de farnesil transferase protéica foi usado da maneira descrita no documento WO 98/40383, página 15 37.

D. Exemplo de composição: comprimidos revestidos com película para exemplos ilustrativos, mas não sendo parte da invenção

Preparação.do núcleo do.comprimido

Uma mistura de 100 g do composto da invenção, 570 g de lacto20 se e 200 g de amido foi bem misturada e em seguida umidificada com uma solução de 5 g de dodecil sulfato de sódio e 10 g de polivinil - pirrolidona em cerca de 200 ml de água. A mistura em pó úmida foi peneirada, secada e novamente peneirada. Em seguida foram adicionados 100 g de celulose microcristalina e 15 g de óleo vegetal hidrogenado. Tudo isso foi bem mistura25 do e prensado formando comprimidos, dando 10.000 comprimidos, cada um compreendendo 10 mg de um composto de fórmula (I).

Revestimento

A uma solução de 10 g de metil celulose em 75 ml de etanol desnaturado adicionou-se uma solução de 5 g de etil celulose em 150 ml 30 de diclorometano. Em seguida foram adicionados 75 ml de diclorometano e 2,5 ml de 1,2,3-propanotriol. 10 g de polietileno glicol foram derretidos e dissolvidos em 75 ml de diclorometano. Esta última solução foi adicionada à

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primeira e em seguida foram adicionados 2,5 g de octadecanoato de magnésio, 5 g de polivinil - pirrolidona e 30 ml de suspensão colorida concentrada e tudo isso foi homogeneizado. Os núcleos de comprimido foram revestidos com a mistura assim obtida em um aparelho de revestimento.

Claims

1. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que consiste em um veículo farmaceuticamente aceitável, e como ingrediente ativo 600 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1/-/-imidazol-5il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que consiste em um veículo farmaceuticamente aceitável, e como ingrediente ativo 400 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1/-/-imidazol-5il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que consiste em veículo farmaceuticamente aceitável, e como ingrediente ativo 300 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1/-/-imidazol-5il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que consiste em veículo farmaceuticamente aceitável, e como ingrediente ativo 100 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1/-/-imidazol-5il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que consiste em veículo farmaceuticamente aceitável, e como ingrediente ativo 50 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-a-(4-clorofenil)-a-(1-metil-1/-/-imidazol-5il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Processo para preparar uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que uma determinada quantidade do ingrediente ativo é intimamente misturada com um veículo farmaceuticamente aceitável.