UA73572C2 - 1,2-annelated quinoline enantiomer inhibiting farnesyl transferase - Google Patents

Description

дана реакція здійснюється у стереоспецифічний спосіб. Дана чиста енантіомерна форма може бути також одержана, виходячи із придатного рацемічного вихідного матеріалу, за умови, що дана реакція здійснюється у енантіоспецифічний спосіб. Чиста енантіомерна форма може бути одержана шляхом реакції материнської енантіомерної суміші з одним із енантіомерів деяких хіральних агентів, таких як кислоти або хлорангідриди, для отримання діастереоізомерних сумішей, їх розділення, наприклад, методом селективної або фракціонованої кристалізації, або методом рідинної хроматографії, на чисті діастереоізомери.

Відповідний діастереоїзомер потім може бути розщеплений на потрібний енантіомер. Материнська енантіомерна суміш може бути одержана згідно з процесами, що описані у вищенаведеній УУО 00/39082, або як описано більш детально у даному тексті.

Сполука даного винаходу та її фармацевтично прийнятні кислі адитивні солі мають цінні фармакологічні властивості, які полягають у тому, що ці сполуки виявляють інгібіторний ефект відносно фарнезил протеїнової трансферази (ЕРТавзе), котрий є незвично сильним у порівнянні з ефектом, що дає материнська енантіомерна суміш. Так, остання суміш має ІС50 ЕРтТаве інгібіторну активність 1,1нМ, тоді як (-) енантіомер має відповідну активність 0,7нМ.

Даний винахід запроваджує спосіб інгібування аномального росту клітин, включаючи трансформовані клітини, шляхом застосування ефективної кількості сполуки даного винаходу. Аномальний ріст клітин стосується росту клітин, що не залежить від нормальних регуляторних механізмів (наприклад, втрата контактного гальмування). Це включає аномальний ріст: (1) пухлинних клітин (пухлин), що експресують активований газ онкоген; (2) пухлинних клітин, в яких газ протеїн активований внаслідок онкогенної мутації іншого гена; (3) доброякісних та злоякісних клітин інших проліферативних хвороб, де має місце аберантна газ активація. Крім того, у літературі припускається, що га5 онкогени не тільки приймають участь у рості пухлин іп мімо шляхом безпосереднього впливу на ріст пухлинних клітин, але й діють у непрямий спосіб, тобто полегшують індукований пухлиною ангіогенез (Нак. 4. єї аІ, Сапсег Везеєагсі, 55, 4575-4580, 19951.

Таким чином, цілеспрямований фармакологічний вплив на онкогени мутанти газ може, у принципі, приглушити ріст твердих пухлин іп мімо, частково, шляхом інгібування індукованого пухлиною ангіогенезу.

Даний винахід також запроваджує спосіб інгібування росту пухлин шляхом призначення ефективної кількості сполуки даного винаходу суб'єкту, наприклад, ссавцю (і більш конкретно, людині), що потребує такого лікування. Зокрема, даний винахід запроваджує спосіб інгібування росту пухлин, що експресують активований газ онкоген, шляхом застосування ефективної кількості сполуки даного винаходу. Прикладами пухлин, що можуть бути інгібовані, є (але не обмежуючись цим) рак легень (наприклад, аденокарцинома і включаючи недрібноклітинний рак легень), різновиди панкреатичного раку (наприклад, панкреатична карцинома, така як, наприклад, екзокринна панкреатична карцинома), рак товстої кишки (наприклад, колоректальні карциноми, такі як, наприклад, аденокарцинома товстої кишки і аденома товстої кишки), гемопоетичні пухлини лімфоїдного походження (наприклад, гострий лімфоцитарний лейкоз, В-клітинна лімфома, лімфома Беркіта), мієлоїдні лейкози (наприклад, гострий мієлобластний лейкоз (АМІ)). тиреоїдно- фолікулярний рак, мієлодиспластичний синдром (МО5), пухлини мезенхімального походження (наприклад, фібросаркоми та рабдоміосаркоми), меланоми, тератокарциноми, нейробластоми, гліоми, доброякісні пухлини шкіри (наприклад, кератоакантоми), карцинома молочної залози (наприклад, задавнений рак молочної залози), рак нирок, рак яєчника, рак січового міхура та епідермоїдний рак.

Даний винахід може також запровадити спосіб інгібування проліферативних хвороб, як доброякісних так і злоякісних, де газ протеїни аберантно активовані внаслідок онкогенної мутації у генах. Зазначене інгібування здійснюється шляхом призначення ефективної кількості описаної в даному тексті сполуки суб'єкту, що потребує такого лікування. Наприклад, доброякісний проліферативний нейрофіброматоз або пухлини, де газ активований через мутацію або надекспресію тирозин кіназних онкогенів, може бути інгібований сполуками даного винаходу.

Сполука згідно з даним винаходом може використовуватись для інших терапевтичних цілей, наприклад: а) сенсибілізація пухлин щодо променевої терапії шляхом застосування сполуки згідно з даним винаходом до або після опромінення даної пухлини для лікування раку, наприклад, як описано у УУО 00/01411;

Б) лікування атропатій, таких як ревматоїдний артрит, остеоартрит, ювенільний артрит, подагра, поліартрит, псоріатичний артрит, анкілозивний спондиліт та системний червоний вовчак, наприклад, як описано у УМО 00/01386; с) інгібування проліферації клітин гладкої мускулатури, включаючи васкулярні проліферативні розлади, атеросклероз та рестеноз, наприклад, як описано у УМО 98/55124; а) лікування запальних станів, таких як виразковий коліт, хвороба Крона, алергічний риніт, реакція "трансплантат проти хазяїна", кон'юнктивіт, астма, респіраторний дистрес-синдром у дорослих (АКОЗБ), хвороба Бехчета, відторгнення трансплантата, кропив'янка, алергічний дерматит, гніздова алопеція, склеродермія, екзантема, екзема, дерматоміозит, акне, діабет, системний червоний вовчак, хвороба

Кавасакі, множинний склероз, емфізема, кістозний фіброз та хронічний бронхіт; е) лікування ендометріозу, фіброми матки, дисфункціональної маткової кровотечі та ендометріальної гіперплазії;

У лікування очної васкуляризації включаючи васкулопатію, що вражає ретинальні та хоріоїдальні судини; 9) лікування патологій, що є результатом гетеротримірного з протеїнового мембранного зв'язування, включаючи хвороби, що пов'язані з наступними біологічними функціями або розладами: нюх, смак, сприйняття світла, перцепція, нейротрансмісія, нейродегенерація, оендокринне та екзокринне функціонування залоз, аутокринне та паракринне регулювання, кров'яний тиск, ембріогенез, вірусні інфекції, імунологічні функції, різновиди діабету, ожиріння; п) інгібування вірусного морфогенезу, наприклад, шляхом інгібування реакцій пренілування або постпренілування вірусного протеїну, такого як великий дельта-антиген вірусу гепатиту 0; та лікування ВІЛ інфекцій; ї) лікування полікістозного захворювання нирок; )) приглушення індукції індукованого оксиду азоту, включаючи розлади, що опосередковані оксидом азоту або цитокінами, септичний шок, інгібування апоптозу та інгібування цитотоксичності оксиду азоту; к) лікування малярії.

Таким чином, даний винахід розкриває сполуку даного винаходу для застосування як ліків, так само як і застосування даної сполуки для виробництва ліків для лікування одного або більшої кількості перелічених вище станів та захворювань.

Для лікування вищезазначених станів та хвороб сполука даного винаходу може бути успішно застосована у комбінації з одним або більшою кількістю інших протиракових агентів, що вибираються, наприклад, із координаційних сполук платини, наприклад, цисплатини або карбоплатини, таксанових сполук, наприклад, паклітакселу або доцетакселу, камптотекінових сполук, наприклад, ірінотекану або топотекану, протипухлинних барвінкових алкалоїдів, наприклад, вінбластину, вінкристину або вінорелбіну, протипухлинних нуклеозидних похідних, наприклад, 5-флюороурацилу, гемцитабіну або капецитабіну, азотно гірчичних або нітрозосечовинних алкілувальних агентів, наприклад, циклофосфаміду, хлорамбуцилу, кармустину або ломустину, протипухлинних антрациклінових похідних, наприклад, даунорубіцину, доксорубіцину або ідарубіцину; НЕКЗ2 антитіл, наприклад, трастзумабу; та протипухлинних подофілотоксинових похідних, наприклад, етопозиду або теніпозиду; і протиестрогенних агентів, включаючи антагоністи естрогенних рецепторів або селективні модулятори естрогенних рецепторів, краще, тамоксифен, або, як альтернатива, тореміфен, дролоксифен, фаслодекс та ралоксифен, або інгібітори ароматази, такі як екземестан, анастрозол, летразол та ворозол.

Завдяки своїм корисним фармакологічним властивостям, зазначена сполука, з метою призначення, може бути використана у різних фармацевтичних формах.

Для приготування фармацевтичних композицій даного винаходу ефективну кількість даної сполуки, у формі основної або кислої адитивної солі, як активний інгредієнт, поєднують у вигляді однорідної суміші з фармацевтично прийнятним носієм, котрий може приймати широкий різновид форм, у залежності від форми препарату, потрібної для призначення. Ці фармацевтичні композиції бажано мати в одиничних формах дозування, що придатні, краще, для перорального, ректального, черезшкірного застосування або у вигляді парентеральних ін'єкцій. Наприклад, при приготуванні композицій у формі пероральних доз може використовуватись будь-яке зі звичайних фармацевтичних середовищ, таких як, наприклад, вода, гліколі, олії, спирти і таке подібне, у випадку пероральних рідких препаратів, таких як суспензії, сиропи, еліксири та розчини; або тверді носії, такі як крохмалі, цукри, каолін, мастила, зв'язувальні речовини, дезінтегратори і таке подібне у випадку порошків, пілюль, капсул та таблеток. Завдяки легкості уживання, таблетки та капсули являють собою найбільш придатні стандартні дозові форми для перорального застосування, і в цьому випадку використовуються, очевидно, тверді фармацевтичні носії. Для парентеральних композицій носій звичайно включає стерильну воду, принаймні, у більшій своїй частині, хоча можуть бути включені й інші інгредієнти, наприклад, для поліпшення розчинності. Для ін'єкцій можуть бути, наприклад, виготовлені розчини, в яких носій включає сольовий розчин, розчин глюкози або суміш сольового розчину та розчину глюкози. Можуть бути також виготовлені суспензії для ін'єкцій, Її в цьому разі можуть використовуватись відповідні рідкі носії, агенти для суспендування і таке подібне. У композиціях, що придатні для черезшкірного уведення, носій включає, при потребі, агент, котрий сприяє проникненню, та/або придатний змочувальний агент, що можуть бути, при потребі, скомбіновані з придатними добавками будь-якої природи у незначних пропорціях, добавками, котрі не чинять значної шкідливої дії на шкіру. Зазначені добавки можуть полегшувати нанесення на шкіру талабо можуть бути корисними при виготовленні потрібних композицій. Ці композиції можуть застосовуватись у різні способи, наприклад, як трансдермальні петчі, як бляшки, як мазь.

Особлива перевага віддається складанню вищезазначених фармацевтичних композицій в одиничній формі дозування для легкості уживання та однорідності дозування. Одинична форма дозування в даному описі та формулі винаходу стосується фізично дискретних одиниць як уніфікованих форм дозування, кожна одиниця містить попередньо визначену кількість активного інгредієнта, що розрахована на отримання бажаного терапевтичного ефекту, сумісно з потрібним фармацевтичним носієм. Прикладами таких одиничних форм дозування слугують таблетки (включаючи шорсткі таблетки або таблетки з покриттям), капсули, пілюлі, порошкові упаковки, облатки, розчини або суспензії для ін'єкцій, чайні ложки, столові ложки і таке подібне, та кратні їм сегреговані порції.

Фахівці у даній галузі можуть легко визначити ефективну кількість за результатами тестів, що подані в тексті. Загалом, вважають, що ефективна кількість складає від 0,01мг/кг до 100мг/кг ваги тіла, і зокрема, від 0,О5мг/кг до 10мг/кг ваги тіла. Дорослим призначають добову дозу, переважно, від 10 до бООмг, краще, від до 500мг, і особливо, від 100 до 400мг активного інгредієнта, особлива перевага віддається дозам 200 або З0Омг. У деяких випадках доцільно потрібну дозу розділяти на дві, три. чотири або більше субдоз і вживати через відповідні інтервали часу протягом доби. Зазначені субдози можуть бути складені як одиничні форми дозування, що містять, наприклад, від 10 до 50Омг, і, зокрема, від 50 до З0Омг активного інгредієнта на одиничну форму дозування; особлива перевага віддається одиницям дозування, що містять 50мг, 100мг, 200мг або ЗбОмг активного інгредієнта.

Наступні приклади мають на меті проілюструвати даний винахід.

Експериментальна частина

У наступному викладі "ТНЕ" відповідає тетрагідрофурану, "СІРЕ" відповідає діїзопропіловому ефіру і

ЕЮДАсС відповідає етилацетату.

Приклад а) Одержання проміжної сполуки (2)

Суміш 6-(4-хлоробензоїл)-4-(З-хлорофеніл)-2(1Н)-хіназолінону (проміжна сполука 1) (0,0506бмоль), одержану як описано у УМО 98/49157, у РОСІз (10б0мл) перемішували та нагрівали із оберненим холодильником протягом 1 години. Розчинник випарювали до сухого стану. Залишок розчиняли у СНесСі».

Дану суміш виливали на лід/мМНаОнН. Органічний шар відокремлювали, осушували (Мд5Оз), фільтрували, і розчинник випарювали до сухого стану. Залишок (24,2г) піддавали кристалізації із СНзСМ. Осад відфільтровували та висушували з одержанням 19,8г проміжної сполуки (2) (9495), Тпл. 15276. р С ра й о пови

В) Одержання проміжної сполуки (33

Розчин п-бутиллітію у гексані (1,6М) (90мл) додавали по краплях при -70"С під струменем М» до суміші 1-метилімідазолу (0,144моль) у ТНЕ (120мл). Дану суміш перемішували при -70"С протягом 15 хвилин. По краплях додавали хлоротриетилсилан (0,148моль) при -70"С, і дану суміш перемішували протягом 15 хвилин при цій температурі. По краплях додавали розчин п-бутиллітію у гексані (1,6М) (8ЗОмл). Дану суміш перемішували при -70"С протягом 15 хвилин. По краплях додавали суміш проміжної сполуки (2) (0,0822моль) у ТНЕ (З00Омл). Дану суміш перемішували при -707С протягом 1 години, піддавали гідролізу, екстрагували ЕЮОАс та декантували. Органічний шар осушували (М950О54), фільтрували, і розчинник випарювали. Залишок очищали методом колонкової хроматографії на силікагелі. Чисті фракції збирали, і розчинник випарювали з одержанням 24,9г (6195) проміжної сполуки (3). »4 ширше яка т ОХ (З н а проміжна сполука 2 проміжна сполука 3 с) Суміш проміжної сполуки (3) (0,0061моль) та азиду натрію (0,0079моль) у М,М-диметилацетаміді (ОМА) (20мл) перемішували при 50"С протягом 18 годин. Дану суміш охолоджували до кімнатної температури та виливали у льодяну воду. Осад відфільтровували, промивали ретельно водою та розчиняли у СНеСі». Органічний розчин осушували, фільтрували, і розчинник випарювали. Залишок піддавали кристалізації із СНЗСМ ОІРЕ. Осад відфільтровували та висушували з одержанням 2,3г (7595) (5)- 5-(З-хлорофеніл)-о-(4-хлорофеніл)-о-(1-метил-1Н-імідазол-5-іл)утетразоло(1,5-а|хіназолін-7-метанолу (проміжна сполука 4); Тпл. 232-23376. а) Суміш проміжної сполуки (4) (0,0573моль) та сульфонілсечовини (300г) перемішували при 1607С протягом 5 годин і потім охолоджували. Додавали льодяну воду, потім метиленхлорид, і дану суміш фільтрували через целіт. Органічний шар відокремлювали, осушували (Мд5оО»), фільтрували, і розчинник випарювали до сухого стану. Залишок очищали методом колонкової хроматографії на силікагелі. Чисті фракції збирали, і розчинник випарювали з одержанням 7,5г (26905) (ж)-5-(З-хлорофеніл)-о-(4-хлорофеніл)-о- (1-метил-1Н-імідазол-5-іл)утетразоло(1,5-а|хіназолін-7-метанаміну (проміжна сполука 5). е) Проміжну сполуку (5) розділяли на енантіомери та очищали методом колонкової хроматографії на

Хіралпаку (Спігазрак) АО? (елюент: гексан/ЕЮН 50/50; 15-35мкм). Чисті перші (А) фракції збирали, і розчинник випарювали з одержанням 3,Зг залишку, котрий кристалізували із СНзСМ/ОІРЕ. Осад відфільтровували та висушували з одержанням 2,55г (-)-5-(З-хлорофеніл)-ос-(4-хлорофеніл)-о-(1-метил-1 Н- імідазол-5-іл)тетразоло(1,5-а|хіназолін-7-метанаміну (сполука 1) (оЧо29--7,167 (сх5мг/мл Меон); Тпл.-178- 1807С; ІН-ЯМР (0М5О, 400МГц) 5 у млн.": 8,73 (й, 9У-8,6Гц, 1), 8,38 (ай, У-8,6Гц, 9У-1,5Гц, 1), 7,74-7,67 (т, ЗН); 7,64 (в, 1Н); 1,62-1,56 (т, 2Н); 7,40 (9, 9-8,6Гц, 2Н); 7,21 (а, 9-8,6Гц, 2Н); 5,93 (5, 1Н); 3,43 (5, ЗН); 3,40 (5, широка, 2Н); Мас-спектроскопія (електророзпилення, тоде ро5. ОК-50 В) т/2: 501-505 (М--Н)-к; 473- 477, 391-395, 83; Аналіз: (С25НівСіІ2Ма) С розрах. 59,89, знайдено 59,71, Н розрах. 3,62, знайдено 3,52, М розрах, 22,35, знайдено 22,17. Дана сполука містить менше 0,595 (вага/вага) (ї енантіомера як встановлено методом високоефективної рідинної хроматографії (Спігарак АО?, 10мкм, елюент гексан/етанол 50/50).

Другі (В) фракції збирали та випарювали з одержанням 3,3г залишку, котрий кристалізували із

СНзСМ/ОІРЕ. Осад відфільтровували та висушували з одержанням 2,6бг (ж)-5-(З-хлорофеніл)-о-(4-

хлорофеніл)-о-(1-метил-1Н-імідазол-5-іл)утетразоло|1,5-а)Їхіназолін-7-метанаміну (сполука 2) (оДобо-5,92 (с-5мг/мл МеОН). Ця сполука містить 495 |(вага/вага) (-) енантіомера як визначено методом високоефективної рідинної хроматографії (СпігаІрак АО?, 10мкм, елюент гексан/етанол 50/50).

С. Фармакологічний приклад.

Приклад С.1: "Іп міго проба на інгібування фарнезил протеїнової трансферази":

Іп міго проба на інгібування фарнезил протеїнової трансферази здійснювалась суттєво як описано у

МО 98/40383, сторінки 33-34.

Приклад С.2: "Проба на реверсію газ-трансформованих клітинних фенотипів":

Проба на реверсію газ-трансформованих клітинних фенотипів здійснювалась суттєво як описано у УМО 98/40383, сторінки 34-36.

Приклад С.3: "Модель вторинної пухлини з інгібітором фарнезил протеїнової трансферази":

Модель вторинної пухлини з інгібітором фарнезил протеїнової трансферази була використана як описано у УМО 98/40383, сторінка 37.

О. Приклад на складання композиції: Таблетки з покриттям

Приготування ядра таблетки

Суміш 100г сполуки даного винаходу, 570г лактози та 200г крохмалю ретельно змішують і потім зволожують розчином 5г натрій додецилсульфату та 10г полівінілліролідону у приблизно 200мл води.

Вологу порошкову суміш просівають, висушують і знову просівають. Потім додають 100г мікрокристалічної целюлози та 15г гідрованої рослинної олії. Усі речовини ретельно змішують та пресують у таблетки з одержанням 10000 таблеток, кожна з яких містить 10мг сполуки формули (1).

Покриття

До розчину 10г метилцелюлози у 75мл денатурованого етанолу додають розчин 5г етилцелюлози у 150мл дихлорометану. Потім додають 75мл дихлорометану та 2,5мл 1,2,3-пропантріолу. 10г поліетиленгліколю розплавляють і розчиняють у 75мл дихлорометану. Останній розчин додають до попереднього, і потім додають 2,5г октадеканоату магнію, 5г полівінілпіролідону та 30 мл концентрованої забарвленої суспензії, і потім усе гомогенізують. Ядра таблеток покривають одержаною у такий спосіб сумішшю в апараті для нанесення покриття.