ES2241830T3 - Composiciones farmaceuticas que comprenden un enantiomero de quinolina condensado en posicion 1,2 inhibidor de la farnesil-transferasa. - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo 600 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-alfa-(4-clorofenil)-alfa-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1, 5a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

Description

Composiciones farmacéuticas que comprenden un enantiómero de quinolina condensado en posición 1,2 inhibidor de la farnesil-transferasa.

La presente invención se refiere a un enantiómero de quinazolina condensado en posición 1,2, la preparación del mismo, composiciones farmacéuticas que comprenden dicho compuesto y el uso de estas composiciones farmacéuticas como medicamento, así como a métodos de tratamiento por administración de estas composiciones farmacéuticas.

Los oncogenes codifican frecuentemente componentes proteínicos de caminos de transducción de señales que conducen a la estimulación del crecimiento y la mitogénesis celulares. La expresión de oncogenes en células cultivadas conduce a transformación celular, caracterizada por la capacidad de las células para crecer en agar blando y el crecimiento de las células como focos densos que carecen de la inhibición por contacto exhibida por las células no transformadas. La mutación y/o sobre-expresión de ciertos oncogenes está asociada frecuentemente con el cáncer humano. Se conoce como ras un grupo particular de oncogenes que han sido identificados en mamíferos, aves, insectos, moluscos, plantas, hongos y levaduras. La familia de oncogenes ras de mamífero está constituida por tres miembros principales ("isoformas"): oncogenes H-ras, K-ras y N-ras. Estos oncogenes ras codifican proteínas muy análogos conocidas generalmente como p21^{ras}. Una vez fijadas a las membranas plasmáticas, las formas mutantes u oncogénicas de p21^{ras} proporcionarán una señal para la transformación y el crecimiento incontrolado de células tumorales malignas. Para adquirir este potencial de transformación, el precursor de la oncoproteína p21^{ras} tiene que sufrir una farnesilación catalizada enzimáticamente del residuo cisteína localizado en un tetrapéptido carboxil-terminal. Por esta razón, los inhibidores de la enzima que cataliza esta modificación, es decir la farnesil-transferasa, impedirán la fijación de p21^{ras} a la membrana y bloquearan el crecimiento aberrante de los tumores transformados por ras. Por ello, está aceptado generalmente en la técnica que los inhibidores de la farnesil-protein-transferasa pueden ser muy útiles como agentes anticáncer para aquellos tumores en los cuales ras contribuye a la transformación.

Dado que las formas mutadas oncogénicas de ras se encuentran frecuentemente en muchos cánceres humanos, muy notablemente en más del 50% de los carcinomas de colon y páncreas (Kohl et al., Science, Vol 260, 1834-1837, 1993), se ha sugerido que los inhibidores de la farnesil-protein-transferasa pueden ser muy útiles contra estos tipos de cáncer.

En los documentos WO 97/16443, WO 97/21701, WO 98/40383 y WO 98/49157, se describen derivados de 2-quinolona que exhiben actividad inhibidora de la farnesil-transferasa. Otros compuestos de quinolona que tienen actividad inhibidora de la farnesil-transferasa se describen en los documentos WO 00/12498, 00/12499 y 00/47574. El documento WO 00/39082 describe una clase de nuevos compuestos de quinolina y quinazolina condensados en posición 1,2, que llevan un imidazol enlazado a nitrógeno o carbono, que exhiben actividad inhibidora de la proteína farnesil-transferasa. Entre tales compuestos descritos en la última memoria descriptiva de patente se encuentra la (\pm)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina que se obtuvo en la forma de una mezcla de enantiómeros. Los autores de la presente invención han separado ahora la mezcla y han encontrado que el enantiómero (-) tiene propiedades farmacológicas especialmente ventajosas comparado con la mezcla de enantiómeros.

La presente invención concierne por tanto a composiciones farmacéuticas que comprenden (-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo-[1,5-a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables, presente en una cantidad de 50, 100, 300, 400 ó 600 mg, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Al enantiómero (-) anterior se hace referencia en lo sucesivo como el compuesto de acuerdo con la invención.

El compuesto de la invención está presente generalmente en una forma sustancialmente pura, es decir sustancialmente exenta del enantiómero (+) opuesto, conteniendo por ejemplo menos de 5% p/p, preferiblemente menos de 2% p/p, y ventajosamente menos de 1% p/p del último enantiómero.

Debe entenderse que las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables como se mencionan anteriormente en esta memoria comprenden las formas de sal de adición de ácido terapéuticamente activas y no tóxicas que puede formar el compuesto de la invención. El último compuesto puede convertirse en sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables por tratamiento de dicha forma de base con un ácido apropiado. Ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como hidrácidos halogenados, v.g. ácido clorhídrico o bromhídrico; ácido sulfúrico; nítrico; fosfórico y los ácidos análogos; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, los ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico, malónico, succínico (es decir ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-amino-salicílico, pamoico y los ácidos análogos.

El término sales de adición de ácido comprende también los hidratos y las formas de adición de disolvente que puede formar el compuesto de la invención. Ejemplos de tales formas son v.g. hidratos, alcoholatos y análogos.

Siempre que se utiliza en lo sucesivo en esta memoria, debe entenderse que el término "compuesto de la invención" incluye también las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

El enantiómero (-) de acuerdo con la presente invención se puede preparar por separación de la mezcla de enantiómeros originaria descrita en el documento WO 00/39082 citado anteriormente. La separación puede efectuarse de manera convencional por ejemplo por reacción con un ácido quiral adecuado tal como ácido (+)-6-aminopenicilánico, ácido D o L-aspártico, ácido (1S,3R) o (1R,3S)-canfórico, ácido (1S) o (1R)-10-canfosulfónico, carbobenciloxi-L-prolina, ácido cólico, ácido deshidrocólico, ácido desoxicólico, ácido (2S,3S) o (2R,3R)-dibenzoiltartárico, ácido (2S,3S) o (2R,3R)-diacetil-tartárico, ácido (2S,3S) o (2R,3R)-tartárico, ácido (2S,3S) o (2R,3R)-ditoluoiltartárico; ácido 2,3:4,6-di-O-isopropilideno-2-ceto-L-gulónico, ácido (+)-3,4-dihidro-2H-1-benzopiran-2-carboxílico, (R) o (S)-4-(2-cloro-fenil)-2-hidroxi-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosforinano-2-óxido, ácido D-glucónico, ácido D o L-glutámico, ácido D-isoascórbico, ácido (S) o (R)-2-hidroxipropanoico, ácido lactobiónico, ácido D o L-málico, ácido (R) o (S)-mandélico, ácido L-2-((4-metoxifenil)sulfonil)-amino-pentanodioico, ácido L-2-((4-metilfenil)sulfonil)amino-pentanodioico, ácido (S)-6-metoxi-\alpha-metil-2-naftaleno-acético, ácido (S)-2-(fenilcarbamoiloxi)-propanoico, ácido (-)-3-pinano-carboxílico, ácido (R) o (S)-2-pirrolidona-5-carboxílico o ácido (R)-tiazolidina-4-carboxílico. Las formas de sal resultantes se separan subsiguientemente, por ejemplo, por cristalización selectiva o fraccionada, y el enantiómero deseado se libera de las mismas por medio de álcali.

Una manera alternativa de separar la forma enantiómera deseada de la mezcla originaria implica cromatografía líquida utilizando una fase estacionaria quiral. La forma enantiomérica pura puede derivarse también de la forma enantiomérica pura correspondiente de los materiales de partida apropiados, con tal que la reacción tenga lugar estereoespecíficamente. La forma enantiomérica pura puede obtenerse también partiendo de un material inicial racémico apropiado con tal que la reacción tenga lugar enantioespecíficamente. La forma enantiomérica pura se puede preparar por reacción de la mezcla de enantiómeros originaria con un enantiómero de algunos agentes quirales tales como ácidos o cloruros de ácido para obtener mezclas de diastereoisómeros, y separación de la misma, por ejemplo por cristalización selectiva o fraccionada o utilización de cromatografía líquida, en diastereoisómeros puros. El diastereoisómero apropiado puede escindirse luego en el enantiómero deseado. La mezcla de enantiómeros originaria se puede preparar de acuerdo con los procesos descritos en el documento WO 00/39082 indicado anteriormente o como se describe más específicamente en esta memoria.

El compuesto de la invención y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables tienen propiedades farmacológicas valiosas en el sentido de que tienen un efecto inhibidor sobre la farnesil-protein-transferasa (FPTasa) que es sorprendentemente potente en comparación con el de la mezcla de enantiómeros originaria. Así, la última mezcla tiene una actividad inhibidora CI_{50} de la FPTasa de 1,1 nM mientras que el enantiómero (-) tiene una actividad correspondiente de 0,7 nM.

Esta invención proporciona un método para inhibir el crecimiento anormal de las células, con inclusión de células transformadas, por administración de una cantidad eficaz del compuesto de la invención en la forma de una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la invención en una cantidad de 50, 100, 300, 400 ó 600 mg, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. El crecimiento anormal de las células hace referencia al crecimiento celular independiente de los mecanismos normales de regulación (v.g. la pérdida de la inhibición por contacto). Esto incluye el crecimiento anormal de: (1) células tumorales (tumores) que expresan un oncogén ras activado; (2) células tumorales en las cuales la proteína ras está activada como resultado de la mutación oncogénica de otro gen; (3) células benignas y malignas de otras enfermedades proliferativas en las cuales ocurre activación aberrante de ras. Adicionalmente, se ha sugerido en la bibliografía que los oncogenes ras no sólo contribuyen al crecimiento de tumores in vivo por un efecto directo sobre el crecimiento de células tumorales, sino también indirectamente, es decir por facilitación de la angiogénesis inducida por tumores (Rak. J. et al, Cancer Research, 55, 4575-4580, 1995). Por tanto, los oncogenes ras mutantes de direccionamiento farmacológico podrían suprimir posiblemente el crecimiento de tumores sólidos in vivo, en parte, por inhibición de la angiogénesis inducida por los tumores.

Esta invención proporciona también un método para inhibir el crecimiento de tumores por administración de una cantidad eficaz del compuesto de la invención en la forma de una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la invención en una cantidad de 50, 100, 300, 400 ó 600 mg, y un vehículo farmacéuticamente aceptable a un individuo, v.g. un mamífero (y más particularmente un humano) que necesita dicho tratamiento. En particular, esta invención proporciona un método para inhibir el crecimiento de tumores que expresan un oncogén ras activado por administración de una cantidad eficaz del compuesto de la invención en la forma de una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la invención en una cantidad de 50, 100, 300, 400 ó 600 mg, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Ejemplos de tumores que pueden ser inhibidos, pero sin carácter limitante, son cáncer de pulmón (v.g. adenocarcinoma y con inclusión de cáncer de pulmón de células no pequeñas), cánceres pancreáticos (v.g. carcinoma pancreático tal como, por ejemplo, carcinoma pancreático exocrino), cánceres de colon (v.g. carcinomas colorrectales, tales como, por ejemplo, adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), tumores hematopoyéticos de linaje linfoide (v.g. leucemia linfocítica aguda, linfoma de células B, linfoma de Burkitt), leucemias mieloides (por ejemplo, leucemia mielógena aguda (AML)), cáncer folicular de tiroides (síndrome mielodisplástico (MDS), tumores de origen mesenquimático (v.g. fibrosarcomas y rabdomiosarcomas), melanomas, teratocarcinomas, neuroblastomas, gliomas, tumor benigno de la piel (v.g. queratoacantomas), carcinoma de mama (v.g. carcinoma de mama avanzado), carcinoma de riñón, carcinoma de ovario, carcinoma de vejiga y carcinoma epidérmico.

Esta invención puede proporcionar también un método para inhibir enfermedades proliferativas, tanto benignas como malignas, en las cuales las proteínas ras están activadas aberrantemente como resultado de la mutación oncogénica en genes; realizándose dicha inhibición por la administración de una composición farmacéutica de acuerdo con las reivindicaciones, a un individuo que necesita dicho tratamiento. Por ejemplo, el trastorno proliferativo benigno neurofibromatosis, o tumores en los cuales está activado ras debido a mutación o sobreexpresión de oncogenes de tirosina-quinasa, puede ser inhibida por una composición farmacéutica de acuerdo con las reivindicaciones.

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden utilizarse para otros propósitos terapéuticos, por ejemplo:

a)

la sensibilización de tumores a radioterapia por administración del compuesto de acuerdo con la invención antes, durante o después de la irradiación del tumor para tratamiento del cáncer, por ejemplo como se describe en el documento WO 00/01411;

b)

tratamiento de artropatías tales como artritis reumatoide, osteoartritis, artritis juvenil, gota, poliartritis, artritis psoriásica, espondilitis anquilosante y lupus eritematoso sistémico, por ejemplo como se describe en WO 00/01386;

c)

inhibición de la proliferación de células musculares lisas con inclusión de trastornos proliferativos vasculares, ateroesclerosis y restenosis, por ejemplo como se describe en el documento WO 98/55124;

d)

tratamiento de afecciones inflamatorias tales como colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, rinitis alérgica, enfermedad de rechazo inverso, conjuntivitis, asma, ARDS, enfermedad de Behcet, rechazo de trasplantes, urticaria, dermatitis alérgica, alopecia areata, escleroderma, exantema, eczema, dermatomiositis, acné, diabetes, lupus eritematoso sistémico, enfermedad de Kawasaki, esclerosis múltiple, enfisema, fibrosis quística y bronquitis crónica;

e)

tratamiento de la endometriosis, fibroides uterinos, hemorragia uterina disfuncional e hiperplasia endometrial;

f)

tratamiento de la vascularización ocular con inclusión de vasculopatía que afecta a los vasos retinianos y coroideos;

g)

tratamiento de patologías resultantes de la fijación de la proteína G heterotrímera a las membranas con inclusión de enfermedades relacionadas con las funciones biológicas o trastornos siguientes: olfato, gusto, luz, percepción, neurotransmisión, neurodegeneración, funcionamiento de las glándulas endocrinas y exocrinas, regulación autocrina y paracrina, presión sanguínea, embriogénesis, infecciones víricas, funciones inmunológicas, diabetes y obesidad;

h)

inhibición de la morfogénesis vírica, por ejemplo por inhibición de las reacciones de prenilación o post-prenilación de una proteína vírica tal como el antígeno delta grande del virus de la hepatitis D; y el tratamiento de infecciones de HIV;

i)

tratamiento de la enfermedad poliquística renal;

j)

supresión de la inducción de trastornos inducibles mediados por óxido nítrico con inclusión de los mediados por óxido nítrico o citoquinas, choque séptico, inhibición de la apoptosis e inhibición de la citotoxicidad del óxido nítrico;

k)

tratamiento de la malaria.

Por consiguiente, la presente invención describe una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de una o más de las afecciones arriba mencionadas.

Para el tratamiento de las afecciones anteriores, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden emplearse ventajosamente en combinación con uno o más agentes anti-cáncer diferentes, seleccionados por ejemplo de compuestos de coordinación de platino, por ejemplo cisplatino o carboplatino, compuestos de taxano, por ejemplo paclitaxel o docetaxel, compuestos de camptotecina, por ejemplo irinotecán o topotecán, alcaloides anti-tumorales de la vinca, por ejemplo vinblastina, vincristina o vinorrelbina, derivados de nucleósidos anti-tumorales, por ejemplo 5-fluorouracilo, gemcitabina o capecitabina, mostazas nitrogenadas o agentes de alquilación de nitroso-urea, por ejemplo ciclofosfamida, clorambucil, carmustina o lomustina, derivados anti-tumorales de antraciclina, por ejemplo daunorrubicina, doxorrubicina o idarrubicina; anticuerpos HER2, por ejemplo trastzumab; y derivados anti-tumorales de podofilotoxina, por ejemplo etoposido o teniposido; y agentes antiestrogénicos que incluyen antagonistas de los receptores de estrógenos o moduladores selectivos de los receptores de estrógenos, preferiblemente tamoxifeno, o alternativamente toremifeno, droloxifeno, faslodex y raloxifeno, o inhibidores de las aromatasas tales como exemestano, anastrozol, letrazol y vorozol.

Teniendo en cuenta sus útiles propiedades farmacológicas, las presentes composiciones farmacéuticas se pueden formular en diversas formas farmacéuticas para propósitos de administración.

Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, la cantidad dada del compuesto, en forma de base o sal de adición de ácido, como el ingrediente activo, se combina en mezcla íntima con un vehículo farmacéuticamente aceptable, vehículo que puede tomar una gran diversidad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Estas composiciones farmacéuticas se encuentran deseablemente en la forma de dosificación unitaria adecuada, preferiblemente, para administración por vías oral, rectal, percutánea, o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, pueden emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos usuales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y análogos en el caso de preparaciones líquidas orales tales como suspensiones, jarabes, elixires y soluciones; o vehículos sólidos tales como almidones, azúcares y caolín; lubricantes, aglomerantes, agentes de desintegración y análogos en el caso de polvos, píldoras, cápsulas y tabletas. Debido a su facilidad de administración, tabletas y cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso se emplean obviamente vehículos farmacéuticos sólidos. Para composiciones parenterales, el vehículo comprenderá usualmente agua estéril, al menos en gran parte, aunque pueden incluirse otros ingredientes, por ejemplo para favorecer la solubilidad. Por ejemplo, se pueden preparar soluciones inyectables en las cuales el vehículo comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y solución de glucosa. Pueden prepararse también suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear vehículos líquidos apropiados, agentes de suspensión y análogos. En las composiciones adecuadas para administración percutánea, el vehículo comprende opcionalmente un agente mejorador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, combinado opcionalmente con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en menores proporciones, aditivos que no causan un efecto deletéreo significativo a la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones se pueden administrar de diversas maneras, v.g., como un parche transdérmico, como una formulación de aplicación por toque, o como un ungüento.

Es especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas arriba mencionadas en forma de dosis unitaria para facilidad de administración y uniformidad de dosificación. La expresión forma unitaria de dosificación tal como se utiliza en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas hace referencia a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitaria, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de ingrediente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Ejemplos de tales formas unitarias de dosificación son tabletas (con inclusión de tabletas ranuradas o recubiertas), cápsulas, píldoras, paquetes de polvos, pastillas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas de té, cucharadas de mesa y análogas, y múltiplos segregados de las mismas.

Los expertos en la técnica podrían determinar fácilmente la cantidad eficaz a partir de los resultados presentados anteriormente. En general, se contempla que una cantidad eficaz sería de 0,01 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal, y en particular de 0,05 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Para un adulto, se prefiere generalmente administrar una dosis diaria de 10 a 600 mg, ventajosamente 50 a 500 mg y especialmente 100 a 400 mg de ingrediente activo, siendo particularmente preferidas dosis de 200 ó 300 mg. Puede ser apropiado administrar la dosis requerida como dos, tres, cuatro o más sub-dosis a intervalos apropiados a lo largo del día. Dichas sub-dosis se pueden formular como formas unitarias de dosificación; siendo especialmente preferidas unidades de dosificación que contienen 50 mg, 100 mg o 300 mg de ingrediente activo.

Los ejemplos siguientes se proporcionan para propósitos de ilustración.

Parte experimental

En lo sucesivo, "THF" significa tetrahidrofurano, "DIPE" significa diisopropiléter y "EtOAc" significa acetato de etilo.

Ejemplo a) Preparación del compuesto intermedio (2)

1

Una mezcla de 6-(4-clorobenzoil)-4-(3-clorofenil)-2-(1H)-quinazolinona (compuesto intermedio 1) (0,0506 mol), preparada como se describe en el documento WO 98/49157, en POCl_{3} (100 ml) se agitó y se calentó a reflujo durante 1 hora. El disolvente se evaporó a sequedad. El residuo se recogió varias veces en CH_{2}Cl_{2}. Se evaporó el disolvente hasta sequedad. El residuo se recogió en CH_{2}Cl_{2}. La mezcla se vertió en hielo/NH_{4}OH. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente hasta sequedad. El residuo (24,2 g) se cristalizó en CH_{3}CN. El precipitado se separó por filtración y se secó, obteniéndose: 19,8 g de compuesto intermedio (2) (94%), pf. 152ºC.

b) Preparación del compuesto intermedio (3)

2

Se añadió gota a gota una solución de n-butil-litio en hexano (1,6 M) (90 ml) a -70ºC en corriente de N_{2} a una mezcla de 1-metilimidazol (0,144 mol) en THF (120 ml). La mezcla se agitó a -70ºC durante 15 minutos. Se añadió gota a gota clorotrietilsilano (0,148 mol) a -70ºC y la mezcla se agitó 15 min a esta temperatura. Se añadió gota a gota una solución de n-butil-litio en hexano (1,6 M) (80 ml). La mezcla se agitó a -70ºC durante 15 min. Se añadió gota a gota una mezcla de compuesto intermedio (2) (0,0822 mol) en THF (300 ml). La mezcla se agitó a -70ºC durante 1 hora, se hidrolizó, se extrajo con EtOAc y se decantó. La capa orgánica se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice. Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 24,9 g (61%) de compuesto intermedio (3).

3

c) Una mezcla de compuesto intermedio (3) (0,0061 mol) y azida de sodio (0,0079 mol) en N,N-dimetilacetamida (DMA) (20 ml) se agitó a 50ºC durante 18 horas. La mezcla se enfrió a la temperatura ambiente y se vertió en agua y hielo. El precipitado se separó por filtración, se lavó concienzudamente con H_{2}O y se recogió en CH_{2}Cl_{2}. La solución orgánica se secó, se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo se cristalizó en CH_{3}CN DIPE. El precipitado se separó por filtración y se secó, obteniéndose 2,3 g (75%) de (\pm)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]-quinazolina-7-metanol (compuesto intermedio 4); pf. 232-233ºC.

d) Una mezcla de compuesto intermedio (4) (0,0573 mmol) y sulfonilurea (300 g) se agitó a 160ºC durante 5 horas y se enfrió luego. Se añadió agua con hielo, a continuación cloruro de metileno y la mezcla se filtró sobre celita. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice. Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente obteniéndose 7,5 g (26%) de (\pm)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina (compuesto intermedio 5).

e) Se separó el compuesto intermedio (5) en sus enantiómeros y se purificó por cromatografía en columna sobre Chiralpak AD® (eluyente: hexano/EtOH 50/50; 15-35 \mum). Las primeras fracciones (A) puras se recogieron y se evaporó el disolvente, obteniéndose 3,3 g de residuo que se cristalizó en CH_{3}CN/DIPE. El precipitado se separó por filtración y se secó, obteniéndose 2,55 g de(-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina (compuesto 1) [\alpha]^{20}_{D}= -7,16º (c = 5 mg/ml de MeOH); pf. = 178-180ºC; 1H-NMR (DMSO, 400 MHz) \delta en ppm: 8,73 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,38 (dd, J = 8,6 Hz, J = 1,5 Hz, 1H); 7,74-7,67 (m, 3H); 7,64 (s, 1H); 7,62-7,56 (m, 2H); 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 2H); 7,21 (d, J = 8,6 Hz, 2H); 5,93 (s, 1H); 3,43 (s, 3H); 3,40 (s, ancho, 2H); MS (pulverización electrónica, modo pos. OR = 50 V) m/z: 501-505 (M+H)^{+}: 473-477, 391-395, 83. Análisis (C_{25}H_{18}Cl_{2}N_{8}): C calculado 59,89, encontrado 59,71; H calculado 3,62, encontrado 3,52; N calculado 22,35, encontrado 22,17. Este compuesto contiene menos de 0,5% p/p del enantiómero (+) tal como se mide por HPLC (Chiralpak AD® 10 \mum, eluyente hexano/etanol 50/50).

Las segundas fracciones (B) se recogieron y evaporaron, obteniéndose 3,3 g de residuo que se cristalizó en CH_{3}CN/DIPE. El precipitado se separó por filtración y se secó, obteniéndose 2,6 g de (+)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]-quinazolina-7-metanamina (compuesto 2) [\alpha]^{20}_{D}= +5,9º (c = 5 mg/ml MeOH). Este compuesto contiene 4% p/p del enantiómero (-) tal como se mide por HPLC (Chiralpak AD® 10 \mum, eluyente hexano/etanol 50/50).

C. Ejemplo farmacológico

Ejemplo C.1

Ensayo in vitro para inhibición de la farnesil-protein-transferasa

Se realizó un ensayo in vitro para la inhibición de la farnesil-protein-transferasa esencialmente como se describe en el documento WO 98/40383, páginas 33-34.

Ejemplo C.2

Ensayo de reversión del fenotipo de las células transformadas con ras

El ensayo de reversión del fenotipo de las transformadas con ras se realizó esencialmente como se describe en el documento WO 98/40383, páginas 34-36.

Ejemplo C.3

Modelo de tumor secundario del inhibidor de la farnesil-protein-transferasa

El modelo de tumor secundario del inhibidor de la farnesil-protein-transferasa se utilizó como se describe en el documento WO 98/40383, página 37.

D. Ejemplo de composición Tabletas recubiertas de película para propósitos de ilustración pero que no forma parte de la invención Preparación del núcleo de las tabletas

Una mixtura de 100 g del compuesto de la invención, 570 g de lactosa y 200 g de almidón se mezcla bien y se humidifica después con una solución de 5 g de dodecil-sulfato de sodio y 10 g de polivinil-pirrolidona en aproximadamente 200 ml de agua. La mezcla de polvo húmeda se tamiza, se seca y se tamiza nuevamente. Se añaden luego 100 g de celulosa microcristalina y 15 g de aceite vegetal hidrogenado. Se mezcla bien el todo y se comprime en tabletas, obteniéndose 10.000 tabletas, cada una de las cuales comprende 10 mg de un compuesto de fórmula (I).

Recubrimiento

A una solución de 10 g de metil-celulosa en 75 ml de etanol desnaturalizado se añade una solución de 5 g de etil-celulosa en 150 ml de diclorometano. Se añaden luego 75 ml de diclorometano y 2,5 ml de 1,2,3-propanotriol. Se funden 10 g de polietilen-glicol y se disuelven en 75 ml de diclorometano. Se añade la última solución a la primera y se añaden luego 2,5 g de octadecanoato de magnesio, 5 g de polivinilpirrolidona y 30 ml de suspensión concentrada de colorante, y se homogeneíza el todo. Los núcleos de las tabletas se recubren con la mezcla así obtenida en un aparato de recubrimiento.

Claims (10)

1. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo 600 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

2. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo 400 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

3. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo 300 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

4. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo 100 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

5. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, y como ingrediente activo 50 mg de (-)-5-(3-clorofenil)-\alpha-(4-clorofenil)-\alpha-(1-metil-1H-imidazol-5-il)tetrazolo[1,5-a]quinazolina-7-metanamina o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

6. Un proceso para preparar una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en el cual la cantidad dada del ingrediente activo se mezcla íntimamente con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. Una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para uso en la inhibición del crecimiento de células anormales.

8. Una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para uso en la inhibición del crecimiento de tumores.

9. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 8 para uso en la inhibición del crecimiento de tumores que expresan un oncogén ras activado.

10. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 9, en la cual los tumores son cáncer de pulmón, cáncer de páncreas, cáncer de colon, tumores hematopoyéticos de linaje linfoide, leucemia mieloide, cáncer folicular de tiroides, síndrome mielodisplástico (MDS), tumores de origen mesenquimático, melanoma, teratocarcinoma, neuroblastoma, glioma, tumor benigno de la piel, carcinoma de mama, carcinoma de riñón, carcinoma de ovario, carcinoma de vejiga y carcinoma epidérmico.