CH289840A - Procédé de préparation d'acide ptéroylglutamique. - Google Patents

Description

  Procédé de préparation d'acide     ptéroylglutamique.       La présente invention est relative à un  procédé de fabrication d'acide     ptéroylglutami-          que.    Cet acide, dont la désignation chimique  est acide N- [4-     {    [     (2-amino-4-hydroxy-6-          pyrimido-        [4,5-b]pyrazyl)        métliyl]        amino}        ben-          zoyl]    -glutamique, est efficace dans la stimu  lation de la formation de l'hémoglobine et  utile dans le traitement de l'anémie     macro-          cytique,

      de la     psilosis    et autres affections. Il       est    connu également sous le nom d'acide foli  que.  



  Le procédé selon l'invention est caractérisé  par le fait qu'on fait réagir une     2,4-,5-tri-          amino-6-alcoxy        -pyrimidine,    l'acide     p-amino-          benzoyiglutamique    et un composé contenant    le     groupe     
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    dans lequel les valences libres dudit groupe  sont saturées par des éléments non métalli  ques éliminés lors de la réaction.  



  La conversion du radical     aleoxy    en un  radical hydroxyle peut ne pas être complète  pendant la condensation; elle est alors achevée  pendant la purification du produit.  



  On peut illustrer par l'équation suivante  le procédé selon la présente invention quand  on utilise comme réactif un     di-halopropion-          aldéhyde     
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    clans laquelle     Ii    représente le reste de l'acide  glutamique, R' un radical alcoyle et X un  halogène.  



  Au lieu d'un     di-halopropionaldéhyde,    on  peut utiliser d'autres composés à trois atomes    de carbone comportant des groupements réac  tifs sur chaque atome de carbone, tels qu'une       1,1,3-trihaloacétone,    un     2,3-dihydroxyacryl-          aldéhyde,    etc. Les atomes d'halogène peuvent  être les mêmes ou non, bien qu'on réalise plus-      aisément d'habitude la condensation quand ces  atomes sont les mêmes.

   Comme     2,4,5-triamino-          6-alcoxy-pyrimidine,    on peut employer la       2,4,5-triamino-6-méthoxy-pyrimidine,    la     2,4,5-          triamino-6-éthoxy-pyrimidine,    la     2,4,5-tri-          amino-6-propionoxy-pyrimidine,    la     2,4,5-tri-          amino-6-butoxy-pyrimidine    et analogues, que  l'on peut préparer par des procédés décrits  dans la littérature chimique.  



  Il est désirable de conduire la condensa  tion dans des conditions acides, à un pH supé  rieur à 1. La température peut varier de 0  à  environ 100  C.  



  Il est préférable de réaliser la réaction  dans l'eau ou un solvant sensiblement, aqueux       qtu    peut être constitué par des mélanges d'eau  et de solvants miscibles à l'eau. Après la con  densation et au cours de la purification du  produit, il est désirable que celui-ci soit  chauffé dans des conditions alcalines ou  acides, dans le but de terminer la conversion  des radicaux     alcoxy    en radicaux hydroxyles.  



  Les exemples suivants se réfèrent à des  réalisations de la présente invention. Les par  ties sont indiquées en poids, sauf indication  contraire.  



  <I>Exemple 1:</I>  A une solution de 44 parties de sulfate de       2,4,5-triamino-6-méthoxy-pyrimidine    dans 760  parties d'eau à 45  C, on ajoute 32,4 parties  d'acide     para-amino-benzoyl-gltitamique.    On  ajuste le mélange à un pH de 3 et on ajoute  goutte à goutte pendant     tune    période de 25 mi  nutes simultanément des solutions de 12,1 par  ties de bichromate de     soditun    dans 150 parties  d'eau et 35 parties     d'a,fl-dibromo-propionaldé-          hyde    dans 33 parties d'acide acétique glacial,  en ajoutant de la soude pour maintenir le pH  à 2,9-3,1. On chauffe le mélange pendant  20 autres minutes à 45  C à un pH de 3, on le  refroidit à 5  C et on le filtre.

   On lave le  gâteau avec de l'eau et un mélange     eau-acétone     et on utilise tel quel le gâteau brun rougeâtre  humide pour sa purification.  



  On mélange 60 parties du produit brut  précédent avec 2000 parties d'eau à 50  C et  on ajoute 32 parties de soude 5N. On agite  la solution à 50 C pendant 15 minutes pour    réaliser la dissolution et on ajoute 15,4 parties  d'une     solution    à     301/o    de chlorure de calcium.  On filtre le mélange au moyen de terre de  diatomées, on le lave avec de l'eau et on ajuste  le filtrat à un pH de<B>10,8</B> avec une     solution    à       101/o    de chlorure de zinc. On le filtre à. nou  veau sur de la terre de diatomées et on neutra  lise le filtrat à un pH de 3<B>à</B>     401,   <B>C.</B> On le  refroidit à 8  C pendant 4 heures et on re  cueille le précipité en présence de terre de  diatomées.

   On reprend le précipité dans 1500  parties d'eau, on le chauffe à     501,   <B>C</B> et on  ajoute de l'oxyde de     ma-nésium    jusqu'à un     p,,     de 8. On chauffe le mélange pendant 15 mi  nutes supplémentaires en présence de 1,5 par  tie de charbon actif, on le clarifie, on le neu  tralise à un pH de 3 à 40  C, on le refroidit à  8  C et on recueille le précipité sur de la terre  de diatomées.

   On le mélange alors avec 1000  parties d'eau et on ajoute 6 parties de     chaux.     On chauffe le mélange à 60  C pendant 10 mi  nutes, on le filtre et on ajoute au filtrat,     jus-          qu'à        un        pH        de        10,8,        une        solution    à     10%        de     chlorure de zinc. On     refiltre    la solution et on  neutralise le filtrat à un pH de 3, on le refroi  dit et on recueille le précipité. On répète à  nouveau le processus précédent en utilisant  4 parties de chaux et 800 parties d'eau.

   Après  le traitement au chlorure de zinc, on neutra  lise la solution à un pH de 8, on la traite avec  0,5 partie de charbon de bois actif à 60  C;  on la clarifie et on la neutralise à un pH de 3.  Après refroidissement à 7  C pendant 3 heures,  on recueille le précipité, on le lave avec de  l'eau et de l'acétone et on le sèche;

   on obtient  1,34 partie d'une poudre orange foncé.     L'ana-          lyse        chimique        donne        une        teneur        de        71%        en     acide     ptéroylglntamiqtie.    Essayé comme sti  mulant pour la croissance     dti    S.

       faecalis    R., on       obtient        une        valeur        de        69,3        %        d'acide        ptéroyl-          gluta.mique.     



  <I>Exemple 2:</I>  A une solution de 56,5 parties de sulfate  de     2,4,5-triamino-6-éthoxy--pyrimidine    et 26,6  parties d'acide     para-amino-benzoy        l-glutamique     dans 1000 parties d'eau à     45     C à un pH de 3,  on ajoute goutte à goutte et simultanément  des solutions de 43 parties -de 2,3-dibromo-           propionaldéhyde    dans 43 parties     d'acide    acé  tique glacial et 9,84 parties de bichromate de  sodium clans 57 parties d'eau pendant une  période de 20 minutes. On maintient le pH à 3  pendant l'addition. On continue le chauffage  à 45  C pendant 30 minutes supplémentaires,  après quoi on refroidit le mélange à 10  C.

    On sépare par filtration le produit brun doré,  on le lave avec de l'eau et de l'acétone et on  le sèche. Le produit pèse 56,4 parties et l'essai  chimique donne     20,31/o    comme teneur en  acide     ptéroylglutamique.    L'essai biologique       donne        8,16        %        comme        stimulant        de        croissance     pour le S.     faecalis    R., l'acide     ptéroylglutami-          que    étant compté pour     1001/o.     



  Le produit brut peut être purifié d'une  manière     analogue    à celle décrite dans l'exem  ple 1.  



       Exemple   <I>3:</I>  On chauffe à 80  C, pendant une heure,  un mélange de 54,2 parties de sulfate de       ?,4,5-triamino-6-méthoxy-pyrimidine,    26,6 par  ties d'acide     para-amino-benzoyl-glutamique    et  75 parties de     1,1,3-tribromo-acétone    dans  1000 parties d'eau, en maintenant le pH entre  1,7 et 2,2 par addition de soude diluée. On  ajuste alors le pH à 3, on refroidit le mélange,  on sépare par filtration le précipité brun, on  le lave et on le sèche.

   Celui-ci pèse 49,1 par  ties et l'analyse chimique donne une teneur       de        19,1%        en        acide        folique.        L'essai        biologique     comme stimulant de la croissance du S.

       faeca-          lis        R.        donne        un        résultat        de        6,48        %.        Ce        pro-          duit    peut être purifié d'une manière analo  gue à celle décrite dans l'exemple 1.  



  <I>Exemple 4:</I>  A un mélange de 54,2 parties de sulfate de       2,4,5-triamino-6-méthoxy-pyrimidine    et 26,6  parties d'acide     para-amino-benzoyl-glutamique,     dans 1000 parties d'eau à 45  C, on ajoute  goutte à goutte et simultanément pendant une  période de 20 minutes, des solutions de 43,2  parties de     2,3-dibromo-propionaldéhyde    dans  43 parties d'acide acétique glacial et 9,84 par  ties de bichromate de sodium dans 57 par  ties d'eau. On maintient le pH à 3 pendant  cette période par addition de soude diluée. On    chauffe le mélange à 45  C pendant     h0    autres  minutes, on le refroidit et on sépare par fil  tration le produit brun orangé, on le lave  avec de l'eau et de l'acétone et on le sèche.

   Le  produit brut pèse 63,5 parties et donne à       l'analyse        chimique        16,9        %        d'acide        folique.     L'essai biologique comme stimulant de crois  sance du S.     faecalis    R. donne 9,6 0/0. La teneur  en     méthoxyle    est de 6 0/0.  



  On ajoute 59 parties du produit brut à  10 000 parties d'eau à 80  C-, puis on ajoute  115 parties d'une solution de soude     5-N.     Après 15 minutes, on ajoute 16 parties de  chlorure de calcium dans 37 parties d'eau et  on filtre le mélange à l'aide de terre de diato  mées. On prélève un échantillon de 200 par  ties que l'on neutralise à un pH de 3 à 80  C,  qu'on refroidit et dont on sépare par filtra  tion le précipité que l'on sèche.

   Celui-ci donne  à     l'analyse        chimique        35,6        %        en        acide        folique,     à     l'essai        biologique        26,97%        et    a     une        teneur        en          méthoxyle    de 2,390/0.

   On neutralise la solu  tion restante à un pH de 10,85 avec du     chlo-          rure        de        zinc    à     10        %,        on        la        clarifie        et        on        aci-          difie    le filtrat à un     pg    de 3 à 80  C avec de  l'acide chlorhydrique dilué. On la refroidit  alors, et on en sépare le précipité par filtra  tion.

   Un échantillon de celui-ci est séché pour  l'analyse; il donne à l'analyse chimique 39 0/0       en        acide        folique,    à     l'essai        biologique        20,3%          et    a     une        teneur        en        méthoxyle        de        1,87%.        On     met en boue le précipité restant dans 7500 par  ties d'eau à 80  C, et on ajoute suffisamment  de soude pour réaliser la dissolution.

   On fait  alors barboter de l'anhydride carbonique ga  zeux jusqu'à l'obtention d'un pH égal à 7 en  refroidissant à 20  C. On clarifie le mélange  et on acidifie le filtrat à un pH de 3 à 80  C  avec de l'acide chlorhydrique dilué. Après re  froidissement, on sépare le précipité par fil  tration.

   On prélève un échantillon pour l'ana  lyse, qui donne les résultats suivants: analyse       chimique        41,4%        en        acide        folique,        essai        biolo-          gique        32,5%,        teneur        en        méthoxyle        1,720/0.        On     met en boue le précipité restant dans 6000  parties d'eau à 80  C avec 18 parties de chaux.

    Après 15 minutes, on filtre le mélange et on  neutralise le filtrat à un pH de 10,9 avec une           solution    à     10        %        de        chlorure        de        zinc.        On        cla-          rifie    alors celle-ci et on neutralise à un pH de  3 à 80  C. Après refroidissement, on sépare le  précipité par filtration et on en sèche un  échantillon pour analyse.

   L'analyse chimique       donne        maintenant        52,7        %        en        acide        folique;          l'essai        biologique        donne        44,3%;        la        teneur        en          méthoxyle    est 1,27%. On met en boue le gâ  teau dans 4500 parties d'eau à     801,   <B>C</B> et on  ajoute 15 parties de chaux.

   Après 15 minutes,  on filtre le mélange et on acidifie le filtrat à       un        pH        de        10,9        avec        une        solution    à     10%        de        chlo-          rure    de zinc. On le clarifie à nouveau et on  le neutralise à un pH de 3 à 80  C, on le refroi  dit et on en sépare le précipité par filtration.

    On sèche un échantillon pour l'analyse, qui  donne les résultats suivants: analyse chimique       57,8        %,        essai        biologique        51,1.        0/0,        teneur        en          méthoxyle        0,96        %.        On        mélange        le        précipité     restant avec 4000 parties d'eau à 80  C, et on  ajoute lentement une partie d'oxyde de magné  sium.

   Après 10 minutes, on ajoute 2,2 parties  de charbon décolorant et on chauffe le mé  lange pendant 15 autres minutes. On le filtre  alors et on neutralise le filtrat à un pH de 3  à 80  C. Après refroidissement, on sépare le  précipité par filtration, on le lave avec de       l'eaiu    et de l'acétone et on le sèche;

   poids       4,1        parties.        L'analyse        chimique        donne        71,7%          en        acide        folique,        l'essai        biologique        donne        75%     et la teneur en     méthoxyle    est de 0,65 0/0. On  dissout un échantillon de 2,9 parties de celui-ci  dans 29 parties d'acide chlorhydrique concen-         tré    et on le traite avec 2,9 parties de charbon  décolorant.

   On le clarifie et on le dilue à  290 parties, on le refroidit et on sépare le  précipité par filtration. On le lave avec de  l'eau et on le sèche;     celui-ci    pèse 1,355 partie  et donne à l'analyse chimique     891/o    en acide  folique, à l'essai biologique     8711/o    et a une  teneur en     méthoxyle    inférieure à 0,010/0. On  l'ajoute alors à 1200 parties d'eau à     801,   <B>C</B> et  on 1e traite par 0,6 partie de carbonate de  magnésium et 0,7 partie de charbon décolo  rant, puis on le clarifie et on le neutralise à  un pH de 3 à 80  C.

   Il se forme au refroidisse  ment des cristaux jaunes en forme de bateau  qui, après isolement et séchage, pèsent 1,1     par-          tie.        L'analyse        chimique        donne        alors        93,6        %        en          acide        folique,        l'essai        biologique        donne        92,1%:     la teneur en     méthoxyle    est. 00/0.

Claims (1)

1. REVENDICATION: Procédé de préparation d'acide ptéroyl- glutamique, caractérisé en ce qu'on fait réagir une 2,4,5-triamino-6-aleoxy-pyrimidine, l'acide p-aminobenzoylglutamique et un composé contenant le groupe EMI0004.0094 dans lequel les valences libres dudit groupe sont saturées par des éléments non métalliques éliminés lors de la réaction.