CH626363A5

CH626363A5 -

Info

Publication number: CH626363A5
Application number: CH1132275A
Authority: CH
Inventors: Howard John Schaeffer
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1974-09-02
Filing date: 1975-09-02
Publication date: 1981-11-13
Also published as: YU119982A; GB1523865A; CH629805A5; CH628897A5; SU904523A3; CH629206A5; YU40079B; US4294831A; NO144216B; YU120082A; RO74274A; AR220885A1; DK146595C; AR212914A1; ES440631A1; ES455979A1; ZM12875A1; BG24815A3; NL175061B; SU799664A3

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung substituierter Purine, von denen insbesondere die 9-(2-Hydroxy-äthoxymethyl)-Derivate, wie Adenin, Guanin, Thioguanin und 2,6-Diaminopurin, von Bedeutung sind.

Über die Synthese verschiedener acyclischer Purin-Nucleo- s side wurde von Schaeffer et al. in J. Med. Chem. 14 (1971)

367 in einer Studie über die Wechselwirkung zwischen Ade- , \ I / »

nosindesaminase und dem Enzymsubstrat berichtet, wobei insbesondere 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)-adenin erwähnt und

über die Messung von dessen Substrataktivität mit Adenosin- io CH-X-CH-CH-OK

desaminase berichtet wurde. f | f

Es wurde nun gefunden, dass substituierte Purine der ' 6 I 3 ' 4

Formel A R R R

CA),

CH-X-CH-CH-R-

I 6 I 3 I ij R RJ R

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worin X Sauerstoff oder Schwefel und R1, R2, R3, R4, R5 und R6 verschiedenartige Substituenten darstellen, eine Antivirus-Wirkung zeigen und insbesondere gegenüber den verschiedenen Arten von DNA- und RNA-Viren wirksam sind, wie sowohl in vitro- als auch in vivo-Versuche zeigten. Diese Verbindungen 40 sind insbesondere gegen die folgenden Viren wirksam: Cyto-megalovirus, Adenovirus, insbesondere Adenovirus 5, Rhinovirus, Mengovirus und Sindbisvirus, ferner ganz besonders gegen Kuhpocken- und Herpes-Viren, einschliesslich H. simplex, H. zoster und H. varicella, bei Säugetieren, welche Krank- 45 heiten, wie Keratitis herpetica bei Kaninchen und Encephalitis herpetica bei Mäusen, hervorrufen. Darüberhinaus sind die Verbindungen zur Behandlung von Mononucleosis infectiosa nützlich.

In Formel A bedeuten:

X Sauerstoff oder Schwefel;

R1 Wasserstoff, Halogen, Hydroxy, Alkoxy, Azido, Mercapto,

Alkylthio, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino; R2 Wasserstoff, Halogen, Amino oder Azido;

R3 Wasserstoff, Alkyl mit gerader oder verzweigter Kette, Cycloalkyl, Hydroxyalkyl, Benzyloxyalkyl oder Phenyl; R4 Wasserstoff, Hydroxy oder Alkyl;

Rs Wasserstoff, Hydroxy, Amino, Alkyl, Hydroxyalkyl,

Benzoyloxy, Benzoyloxymethyl, Benzyloxy, Sulfamoyloxy, Phosphato, Carboxypropionyloxy, Acetoxy oder substituiertes Carbamoyl der Formel NH-CO-Z, worin Z unsubstituiertes oder ein- oder mehrfach durch Sulfonyl, Amino, Carbamoyl oder Halogen substituiertes Alkyl,

Aryl oder Aralkyl; und R6 Wasserstoff oder Alkyl.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel I

ls worin

X Schwefel oder Sauerstoff;

R1 Wasserstoff, Halogen, Hydroxy, Alkoxy, Mercapto, Alkylthio, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino oder Azido;

20 R2 Wasserstoff, Halogen, Amino oder Azido;

R3 Wasserstoff, Alkyl mit gerader oder verzweigter Kette, Cycloalkyl, Hydroxyalkyl, Benzyloxyalkyl oder Phenyl; R4 Wasserstoff, Hydroxy oder Niederalkyl; und R6 Wasserstoff oder Alkyl bedeuten, vorausgesetzt, dass, falls X Sauerstoff und R2, R3, R4 und R6 Wasserstoff bedeuten, R1 nicht Amino oder Methyl-amino ist, und vorausgesetzt, dass, wenn R2 Wasserstoff darstellt, R1 nicht Chlor bedeutet, sowie von deren Säureadditionssalzen.

Von den Verbindungen der Formel I sind diejenigen bevorzugt, worin X Sauerstoff;

R1 Wasserstoff, Halogen, Hydroxy, Mercapto, Alkylthio, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino oder Azido; R2 Wasserstoff, Halogen, Amino oder Azido; R3 Wasserstoff, Alkyl mit gerader oder verzweigter Kette,

Cycloalkyl, Hydroxyalkyl oder Phenyl;

R4 Wasserstoff oder Hydroxy; und R6 Wasserstoff oder Alkyl bedeuten, vorausgesetzt, dass, wenn R1 Hydroxy, Alkylthio, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino bedeutet, R2 Amino und R6 Wasserstoff darstellen, und vorausgesetzt, dass, wenn R1 Alkylamino bedeutet, R2 nicht Wasserstoff ist, und vorausgesetzt, dass R1 nur dann Chlor bedeutet, wenn R2 nicht Wasserstoff ist, oder ein Säureadditionssalz davon herstellt.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist die Überführung der Verbindungen der Formel I in ihre Acylierungsprodukte der Formel III

(III)

CH-X-CH-CH-R'

h U I

R6 R3 R4

worin R1, R2, R3, R4, R6 und X die angegebene Bedeutung haben und R5 eine Benzoyloxy-, Sulfamoyloxy-, Carboxypropionyloxy- oder Acetoxygruppe bedeutet, durch Acylierung mit den Rest R5 abgebenden Mitteln.

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Aufgrund ihrer starken Wirkung sind von den Verbindungen der Formel I bzw. III diejenigen bevorzugt, worin X Sauerstoff;

R1 Halogen, Amino, Hydroxy oder Alkylthio;

R2 Amino;

R5 Hydroxy, Benzoyloxy, Carboxypropionyloxy oder

Acetoxy; und R3, R4 und R6 jeweils Wasserstoff bedeuten, vorausgesetzt, dass in der Verbindung der Formel III R5 nur dann Acetoxy bedeutet, wenn R1 Amino darstellt.

Als Halogensubstituent wird Chlor bevorzugt. Alkyl bedeutet im vorliegenden Fall allgemein eine Gruppe mit 1 bis 12, vorzugsweise 1 bis 8, Kohlenstoffatomen.

Als Säureadditionssalze, die für therapeutische Anwendungen bevorzugt sind, kommen insbesondere solche in Betracht, die sich von pharmazeutisch annehmbaren organischen oder anorganischen Säuren, wie Milchsäure, Essigsäure, Äpfelsäure, p-Toluolsulfonsäure, Salzsäure oder Schwefelsäure, herleiten.

Die Verbindungen der Formel I werden mit Hilfe des in Patentanspruch 1 definierten Verfahrens hergestellt.

Die zur Blockierung der 9-Ätherseitenkette in den Ausgangsverbindungen der Formel II dienende Schutzgruppe Y ist eine Acylgruppe. Als Acylgruppen kommen aliphatische Acylgruppen, z. B. Acetyl, oder aromatische Acylgruppen, z. B. Benzoyl, in Betracht. Beide Arten von Acylgruppen können durch basische Hydrolyse unter milden Bedingungen abgespalten werden. Im allgemeinen reicht Erwärmen mit wässriger Methylaminlösung aus, um die Spaltungsreaktion zu bewirken.

Die Verbindungen der Formel III werden mit Hilfe des in Patentanspruch 12 definierten Verfahrens hergestellt.

Die erfindungsgemäss erhältlichen Verbindungen können zu pharmazeutischen Zubereitungen oder Präparaten verarbeitet werden. Hierfür besonders geeignet sind solche Verbindungen, bei denen R6 eine Alkylgruppe mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen bedeutet, ferner solche Verbindungen, bei denen die Substituenten einen Alkylanteil mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen aufweisen. Die Wirkstoffe können, insbesondere in Form ihrer pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze, mit geeigneten, in der Pharmazie üblichen, Trägerstoffen verarbeitet werden. Bevorzugt werden die Präparate in Form von Einzeldosiszubereitungen angeboten.

Dieser oben verwendete Ausdruck «wirksame Einzeldosis» bedeutet eine vorausbestimmte gegen Viren wirksame Menge, die genügt, um in vivo den Virusorganismus zu bekämpfen. Pharmazeutisch annehmbare Trägerstoffe sind Stoffe, welche sich zur Darreichung des Medikamentes eignen. Sie können fest, flüssig oder gasförmig sein, ferner sollen sie inert und medizinisch annehmbar und mit den Wirkstoffen verträglich sein.

Diese pharmazeutischen Zubereitungen können parenteral, oral, als Zäpfchen oder als Scheideneinlage verabreicht werden, ferner lokal als Salbe, Crème, Aerosol oder Puder angewendet werden, oder als Augen- oder Nasentropfen verabreicht werden. Die jeweilige Zubereitungsform hängt davon ab, ob eine innerliche oder äusserliche Virusinfektion behandelt werden soll.

Bei innerlichen Infektionen werden die Zubereitungen für gewöhnlich oral oder parenteral in Dosen verabreicht, welche für die freie Base berechnet sind, nämlich 0,1 bis 250, vorzugsweise 1,0 bis 50, mg/kg Körpergewicht des Säugetiers. Beim Menschen werden sie als Einzeldosis, und zwar mehrmals täglich, in einer Menge von 1 bis 250 mg/Einzeldosis verabreicht.

Für die orale Darreichung geeignete Zubereitungen können feine Pulver oder Granulate, Verdünnungsmittel, Dispersionsmittel und/oder oberflächenaktive Mittel enthalten und in einer

Mixtur, entweder in Wasser oder in Sirup, in Kapseln oder Sachets in trockenem Zustand oder in einer nicht-wässrigen Lösung oder Suspension, welche Suspendierungsmittel enthalten, vorliegen. Ferner können die Zubereitungen Tabletten sein, welche Bindemittel oder Gleitmittel enthalten oder aber Suspensionen in Wasser oder Sirup.

Ist es wünschenswert oder notwendig, so können in den Zubereitungen auch Geschmacksmittel, Konservierungsmittel, Suspensionsmittel, Eindickungsmittel oder Emulgatoren enthalten sein. Eine bevorzugte Darreichungsform sind Tabletten und Granulate, wobei diese auch überzogen sein können. Für die parenterale Darreichung oder für die Darreichung in Tropfenform, beispielsweise bei Augeninfektionen, können die Verbindungen in wässriger Lösung in einer Konzentration von ungefähr 0,1 bis 10, vorzugsweise 0,1 bis 7, am meisten bevorzugt in einer Konzentration von 0,2, Gew./Vol./ %, vorliegen. Die Lösungen können Antioxydantien, Puffer und/oder andere Zusätze enthalten.

Andererseits können die vorliegenden Verbindungen bei der Infektion von Augen oder anderen äusserlichen Geweben, beispielsweise im Mund oder auf der Haut, als äusserliche Salbe oder Crème an dem infizierten Körperteil des Patienten abgewendet werden. Die Verbindungen können in einer Salbe, beispielsweise mit einer wasserlöslichen Salbengrundlage,

oder in einer Crème, beispielsweise mit einer öl-in-Wasser-Crèmegrundlage, in einer Konzentration von ungefähr 0,1 bis 10, vorzugsweise 0,1 bis 7, am besten jedoch 1, Gew./Vol./% verabreicht werden.

Besonders bevorzugt aufgrund ihrer äusserst starken Wirkung gegen Viren, insbesondere gegen Herpes-Viren, sind 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)-guanin (R1 = OH, R2 = NH2) und 2-Amino-9-(2-hydroxyäthoxymethyl)-adenin. Darüberhinaus besitzen auch die nachfolgenden Verbindungen eine sehr starke Wirkung gegen die Herpes-Viren und Kuhpocken-Viren: 2-Amino-6-chlor-9-{(2-benzoyloxyäthoxy)methyl}-purin, 9-(2-Benzoyloxyäthoxymethyl)guanin, 9-(3-Hydroxy-propoxymethyl)-guanin, 2-Amino-6-methylthio-9-(2-hydroxy-äthoxymethyl)-purin, 9-{2-(3-Carboxypropionyloxy)äthoxy-methyl}guanin und 9-(2-AcetoxyäthoxymethyI)-2,6-diamino-purin.

Die nachfolgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Erfindung.

Beispiel 1

2-Chlor-9-(2-hydroxyäthoxymethyl)-adenin

2,6-Dichlorpurin wurde mit l-Benzoyloxy-2-chlormethoxy-äthan kondensiert, wobei im wesentlichen nach der von Schaeffer et al. (I.e.) beschriebenen Methode gearbeitet wurde. Man erhielt 2,6-Dichlor-9-(2-benzoyloxy-äthoxymethyl)-purin einer Ausbeute von 41 %d. Th.; Schmelzpunkt 121 bis 125°C. Die so erhaltene Verbindung wurde mit Ammoniak und Methanol im Bombenrohr auf 95 °C erhitzt. Dabei erfolgte eine gleichzeitige Ammonolyse der 6-Chlor- und der Benzoyloxy-gruppe. Man erhielt die Titelverbindung einer Ausbeute von 94% d. Th.

Schmelzpunkt 188 bis 190°C nach Umkristallisieren aus Isopropanol.

Beispiel 2

9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)guanin (I; R1 = OH, R2 = NH2)

Eine Mischung von 2,0 g Guanin, 1,5 g Ammoniumsulfat und 126 g Hexamethyldisilazan wurde unter Rückfluss unter Stickstoff über Nacht erwärmt. Überschüssiges Hexamethyldisilazan wurde durch Destillieren bei vermindertem Druck entfernt. 10 ml trockenes Benzol wurden zu dem öligen Rückstand hinzugefügt und das ganze restliche Ammoniumsulfat durch Filtrieren entfernt. Zu dieser Lösung wurden 4 ml Tri-

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äthylamin und eine Lösung von 2,8 g 2-Benzoyloxyäthylmethyl-chlorid in 15 ml trockenem Benzol hinzugefügt und das Gemisch unter Rückfluss in Stickstoffatmosphäre über Nacht erwärmt. Das Lösungsmittel wurde in einem Rotationsverdampfer bei vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand in 95 %igem Äthanol gelöst. Die Lösung wurde auf einem Dampfbad eine halbe Stunde lang erwärmt, um die Hydrolyse der Silylgruppen zu bewirken. Das Äthanol wurde sodann abgedampft und der restliche Feststoff sorgfältig mit Wasser ausgewaschen, filtriert und getrocknet. Die Umkristallisierung aus Methanol und sodann aus Wasser (restliches Guanin war in den heissen Lösungsmitteln unlöslich und wurde durch Filtrieren entfernt) ergaben 0,58 g 9-(2-Benzoyloxyäthylmethyl)-guanin; Ausbeute 14% d. Th.

Schmelzpunkt: 222 bis 226 °C.

Die spätere Kondensation des Tris-(trimethylsilyl)guanin mit einem 60%igen Überschuss an 2-Benzoyloxyäthoxymethyl-chlorid ergaben 9-(2-Benzoyloxyäthoxymethyl)guanin mit einer Ausbeute von 32% d. Th.

0,58 g 9-(Benzoyloxyäthylmethyl)guanin und 80 ml mit Ammoniak gesättigtes Methanol wurden in einem Bombenrohr 16 Stunden lang auf 80°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde aus dem Bombenrohr entfernt und das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abgedampft. Der Rückstand wurde sorgfältig mit Äther ausgewaschen und sodann aus Methanol umkristallisiert, wobei 0,31 g (75 % der theoretischen Ausbeute) 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)guanin resultierten. Schmelzpunkt: 256,5 bis 257°C.

Beispiel 3

9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)thioguanin (I; R1 = SH, R2 = NH2) 0,28 g Thioharnstoff wurden zu einer auf Rückflusstemperatur erhitzten Lösung von 1,27 g 2-Amino-6-chlor-9-(2-ben-zoyloxyäthoxymethyl)purin in 40 ml Isopropanol gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde weiter unter Rückfluss IV2 Stunden lang erhitzt und sodann abgeschreckt. Mittels Filtrieren wurden 0,58 g 9-(2-Benzoyloxyäthoxymethyl)thioguanin (Schmelzpunkt: 199 bis 202 °C) entfernt. Dies wurde zu 40 ml wässrigem Ammoniak (ungefähr 7 n) hinzugefügt und das Gemisch auf einem Dampfbad 10 Minuten lang erhitzt und sodann bei Zimmertemperatur über Nacht gerührt. Das Wasser und der Ammoniak wurden im Vakuum abgedampft und der Rückstand mit Aceton und sodann mit Äther verrieben, um das Benzamid zu entfernen. Der resultierende Feststoff wurde zweimal aus Wasser umkristallisiert und ergab 0,26 g 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)thioguanin in gelben Flocken. Schmelzpunkt: 251 bis 254°C.

Beispiel 4

2-Amino-9-(2-hydroxyäthoxymethyl)adenin-Hydrochlorid 0,25 g 2-Amino-9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)-adenin wurden in 50 ml heissem Äthanol gelöst und die Lösung in einem Eisbad abgekühlt. Zu der kalten Lösung wurde soviel HC1-gesättigtes Äthanol hinzugefügt, dass ein pH-Wert von 1,0 vorlag. Dann wurden 50 mi trockener Äther zugefügt und die Mischung vollständig abgekühlt. Der resultierende fleischfarbene Feststoff wurde abfiltriert und mit kaltem Äthanol ausgewaschen. Durch Umkristallisieren aus Methanol erhielt man 0,21 g (74% der theoretischen Ausbeute) 2-Amino-9-(2-hydroxyäthoxymethyl)adenin.

Schmelzpunkt: 207 bis 211°C.

Elementaranalyse und NMR bestätigten diese Struktur.

Beispiel 5

Eigenschaften des 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)guanins Die Bestimmung mittels UV-Licht ergab, dass das 9-(2-

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Hydroxyäthoxymethyl)guanin entweder in Wasser oder in 0,1 n-wässriger Salzsäure bis zu ungefähr 2 % löslich war.

Es war entweder in 0,01 n oder 0,1 n wässriger Salzsäure bei 26 °C bzw. bei 37 °C stabil und zeigte nach einer Woche noch keine Hydrolyse. Jedoch hydrolysierte es in 1 n-wässriger Salzsäure entweder bei 26 °C oder bei 37 °C langsam zu Guanin.

Beispiel 6

Herstellung von 2-Ämino-9-(2-hydroxy-äthoxymethyl)adenin 10 g 2,6-Dichlor-9-(2-benzoyloxyäthoxymethyl)purin, 3,5 g Natriumacid und 54 ml eines Äthanol/Wasser-Gemisches (1:1, Vol./Vol.) wurden unter Rühren 3V2 Stunden lang bei 110 bis 120°C unter Rückfluss und Rühren erhitzt. Die Dünnschichtchromatographie des Reaktionsgemisches zeigte eine vollständige Umsetzung. Beim Abkühlen über Nacht verfestigte sich das öl und wurde filtriert, mit Äthanol und Wasser ausgewaschen und aus Äthanol umkristallisiert. Die Verbindung wurde mit quantitativer Ausbeute erhalten und wies einen Schmelzpunkt bei 124 bis 125°Cauf. Die Verbindung ist in wässriger Base labil und sonnenlichtempfindlich.

1,2 g 2,6-Diazido-9-(2-benzoyloxyäthoxymethyl)purin wurden in 51 ml Methanol/Tetrahydrofuran (1:1) gelöst und das Lösungsmittel in einer «Paar»-Hydrierungsvorrichtung, welche 33 mg 10%iger Palladiumkohle, die mit Wasser befeuchtet worden war, eingebracht und bei einem Druck von 3,5 kp/cm2 4,5 Stunden lang geschüttelt. Der Katalysator wurde abfiltriert und gut mit Wasser und Methanol ausgewaschen. Die Dünnschichtchromatographie zeigte die vollständige Reduktion. Sodann wurde die Lösung zur Trockne eingedampft und ergab eine Ausbeute von 87 % einer 2,6-Di-amino-Zwischenverbindung.

Der Rückstand wurde in der Mindestmenge 40 %igem wässrigem Methylamin gelöst und eine halbe Stunde lang auf einem Dampfbad erhitzt, abgekühlt und dreimal mit dem gleichen Volumen/Äther extrahiert. Die vereinigten Ätherauszüge wurden mit Wasser gewaschen und die vereinigte wässrige Phase zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde aus Äthanol umkristallisiert und ergab die Titelverbindung mit einer Ausbeute von 89 % d. Th.

Schmelzpunkt: 182 bis 183,5°C.

Beispiel 7 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)guanin 0,75 ml 2-Mercaptoäthanol, gelöst in 7,5 ml 1-molarem methanolischem Natriummethylat, wurde zu 0,89 g 2-Amino-6-chlor-9-(2-benzoyloxyäthoxymethyl)purin in 150 ml Methanol gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde unter Rückfluss 3 Stunden lang in Stickstoffatmosphäre erhitzt. Das Lösungsmittel wurde bei vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand in Wasser gelöst. Die wässrige Lösung wurde auf einem Dampfbad 2 Stunden lang erhitzt, abgekühlt und mit Essigsäure auf pH 5,0 angesäuert. Der resultierende weisse Feststoff wurde durch Filtrieren entfernt, gut mit eiskaltem Wasser und Äther ausgewaschen und sodann aus Methanol umkristallisiert. Man erhielt die Titelverbindung in 45 %iger Ausbeute.

Beispiel 8 9-(2-Hydroxyäthylthiomethyl)adenin Nach der von Mills und Owen in J. Chem. Soc. (1952)

Seite 817 beschriebenen Methode wurde 2-Acetoxyäthanthiol hergestellt. Dabei wurden 102,1 g Essigsäureanhydrid während IV4 Stunden zu einer Mischung aus 78,1 g 2-Mercaptoäthanol und 3 ml einer 10%igen Schwefelsäurelösung in Essigsäure zugesetzt. Während der Zugabe wurde von aussen gekühlt, um die Reaktionstemperatur unterhalb 40 °C zu halten. Nach

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Beendigung der Zugabe des Essigsäureanhydrids wurde das Reaktionsgemisch 1 Stunde lang auf 65 ° C erhitzt und sodann über Nacht bei Zimmertemperatur stehen gelassen. Sodann wurden 500 ml Äther zu dem Reaktionsgemisch zugegeben und die resultierende Lösung dreimal mit je 100 ml Wasser und einmal mit 100 ml Kochsalzlösung ausgewaschen. Die ätherische Lösung wurde über wasserfreiem Natriumsulfat und Natriumbicarbonat getrocknet. Die Destillation ergab 77,5 g 2-Acetoxyäthanthiol.

Siedepunkt: 57 bis 67°C bei 10 mm Hg.

In eine Mischung von 24,0 g 2-Acetoxyäthanthiol und 6,0 g Paraformaldehyd wurde 3 Stunden lang Chlorwasserstoffgas bei massiger Geschwindigkeit unter äusserem Kühlen eingeleitet. Sodann wurden 25 g Calciumchlorid zugesetzt und das Reaktionsgemisch in einem Salz/Eisbad 4 Stunden lang stehen gelassen. 200 ml Methylenchlorid wurden zugesetzt, das Reaktionsgemisch filtriert und das Lösungsmittel unter strengstem Feuchtigkeitsausschluss abgedampft. Der ölige Rückstand wurde destilliert und ergab 18,5 g 2-Acetyloxyäthyl-chlor-methylsulfid.

Siedepunkt: 82 bis 87 °C bei 3 mm Hg.

Auf die von Schaefferin J. Med. Chem., Band 14 (1971) Seite 367 beschriebene Weise wurden 3,37 g 2-Acetoxyäthyl-chlormethylsulfid zu einer Mischung aus 3,09 g 6-Chlorpurin, 2,23 g Triäthylamin und 20 ml Dimethylformamid hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde bei Zimmertemperatur 90 Stunden lang gerührt und das Lösungsmittel sodann bei vermindertem Druck entfernt. Der ölige Rückstand wurde in 30 ml Chloroform gelöst und in eine Säule aus 200 g «Florisil» in Chloroform eingebracht. Die Eluierung ergab das gewünschte Produkt in 2,1 Liter Eluat, nachdem die anfänglichen 300 ml Eluat verworfen worden waren. Das Lösungsmittel wurde abgedampft und ergab einen öligen Rückstand. Sodann wurde Äther/Petroläther zugesetzt und die Mischung abgeschreckt, wobei 1,4 g 9-(2-Acetoxyäthylthiomethyl)-6-chlorpurin (Schmelzpunkt: 82 bis 87°C) resultierten. Die Umkristalli-sation aus Äther ergab weisse Prismen mit einem Schmelzpunkt von 89 bis 91°C. 1,1 g 9-(2-Acetoxyäthylthiomethyl)-6-chlorpurin und 20 ml Ammoniak wurden in ein Bombenrohr eingebracht und 24 Stunden lang auf 60 °C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde aus dem Bombenrohr entfernt und der Ammoniak abgedampft. Der Rückstand wurde mit kaltem Wasser verrieben, filtriert und mit zusätzlichem kaltem Wasser ausgewaschen. Man erhielt 0,73 g rohes 9-(2-Hydroxyäthyl-thiomethyl)adenin mit einem Schmelzpunkt bei 166 bis 169,5°C. Nach Umkristallisieren aus Äthanol erhielt man weisse Plättchen mit einem Schmelzpunkt bei 170 bis 172°C.

Beispiel 9

9-[2-(3-Carboxypropionyloxy)äthoxymethyl]guanin

Eine Mischung von 0,25 g 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)-guanin, 0,55 g Bernsteinsäureanhydrid und 50 ml Pyridin wurde unter wasserfreien Bedingungen auf einem Dampfbad über Nacht erwärmt. Das Lösungsmittel wurde bei vermindertem Druck bei weniger als 40°C abgedampft, wobei die letzte Spur des Lösungsmittels azeotropisch mit Toluol entfernt wurde. Der Rückstand wurde mit Aceton verrieben und das Reaktionsprodukt durch Filtrieren entfernt. Nach Umkristallisieren aus Methanol erhielt man 9-[2-(3-Carboxypropionyl-oxy)-äthoxymethyl]guanin in 44 %iger Ausbeute. Schmelzpunkt: 202 bis 207°C (Sinterung bei 190°C).

Beispiel 10 9-(3-Hydroxypropoxymethyl)guanin

96,32 g Natriumbenzoat in 690 ml DMF wurden auf 80°C erhitzt und 63,06 g l-Chlor-3-hydroxypropan während 15 Minuten zugesetzt. Die Temperaturstieg auf 135°C. Das Reaktionsgemisch wurde 3 Stunden lang weiter bei 135bisl75°C erhitzt. Es konnten 38 g Natriumchlorid (97% des theoretischen Wertes) abfiltriert werden. Das Filtrat wurde zeitweise bei vermindertem Druck bei weniger als 40° C abgedampft. Das konzentrierte Filtrat wurde in Eiswasser gegossen und gut mit Äther extrahiert. Die vereinigten Ätherextrakte wurden mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der ölige Rückstand wurde sodann in einer Vigreux-Kolonne destilliert und ergab 85,2 g 2-Ben-zoyl-l-propanol.

Siedepunkt: 124 bis 132°C bei 0,055 mm Hg.

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde in eine Lösung von 15,02 g 3-Benzoyl-l-propanol und 2,49 g Paraformaldehyd in 35 ml Dichlormethan eine Stunde lang bei 0°C einge-blasen. Das Lösungsmittel wurde bei vermindertem Druck unterhalb 40 °C abgedampft und ergab rohes Benzoyloxy-propoxymethylchlorid mit einer Ausbeute von 92%. Dieses wurde ohne Reinigung weiterverwendet.

Eine Lösung vom trimethylsilylierten Guanin in 25 ml Benzol, hergestellt nach Beispiel 2 (aus 2,0 g Guanin), welche Triäthylamin enthielt, wurde unter Rückfluss erhitzt. Dann wurden 2,96 g Benzoyloxypropoxymethylchlorid, gelöst in 15 ml Benzol, während 3 Stunden zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde unter Rückfluss in Stickstoffatmosphäre über Nacht erwärmt. Das Lösungsmittel wurde bei vermindertem Druck entfernt und zu dem öligen Rückstand 95 %iges Äthanol und Methanol zugesetzt. Die Mischung wurde auf einem Dampfbad einige Minuten lang erhitzt und das Lösungsmittel sodann bei vermindertem Druck abgedampft. Anschliessend wurden 200 ml Chloroform zugesetzt und der resultierende Feststoff abfiltriert. Der Feststoff wurde in der Minimalmenge DMF gelöst, filtriert, um alles Guanin zu entfernen, und durch Wasserzugabe ausgefällt. Durch Umkristallisieren aus Methanol (mit Kohlezusatz) erhielt man 0,94 g 9-(3-Benzoyloxypropoxy-methyl)guanin als fahlgelbe Substanz.

Schmelzpunkt: 198 bis 201 °C.

Eine Mischung aus 0,5 g 9-(3-Benzoyloxypropoxymethyl)-guanin und 10 ml wässrigem 45 %igem Methylamin wurde über Nacht bei Zimmertemperatur gerührt. Überschüssiges Methylamin und Wasser wurden bei weniger als 30°C unter vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand aus Äthanol umkristallisiert, wobei 0,24 g 9-(3-Hydroxypropoxymethyl)guanin als das Vî-Hydrat resultierten.

Schmelzpunkt: 223 °C (mit Wiederverfestigung).

Beispiel 11

9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)-6-mercaptopurin 9-(2-Hydroxyäthoxymethyl)-6-mercaptopurin wurde nach dem in Beispiel 8 beschriebenen Verfahren hergestellt (zersetzt sich).

Beispiel 12 9-[l-(2-Hydroxyäthoxy)äthyl]guanin 9-[l-(2-Hydroxyäthoxy)äthyl]guanin wurde nach dem in Beispiel 8 beschriebenen Verfahren hergestellt (Schmelzpunkt >260°C).

Beispiel 13 9-(4-Hydroxy-n-butoxymethyl)guanin 9-(4-Hydroxy-n-butoxymethyl)guanin wurde nach dem in Beispiel 8 beschriebenen Verfahren hergestellt (Schmelzpunkt 234° C).

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Beispiel 14

6-Dimethylamino-9-(2-hydroxypropoxy)methylpurin-Hydrochlorid

6-Dimethylamino-9-(2-hydroxypropoxy)-methylpurin-Hydrochlorid wurde nach dem in Beispiel 8 beschriebenen Verfahren hergestellt (Schmelzpunkt 144 bis 146°C).

Beispiel 15 9-(2-Sulfamoyloxyäthoxymethyl)adenin 9-(2-Sulfamoyloxyäthoxymethyl)adenin wurde nach dem in Beispiel 9 beschriebenen Verfahren hergestellt (Schmelz-s punkt 172 bis 173,5 °C).

B

Claims

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2. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I, worin X Sauerstoff;

R1 Wasserstoff, Halogen, Hydroxy, Mercapto, Alkylthio, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino oder Azido; R2 Wasserstoff, Halogen, Amino der Azido ;

R3 Wasserstoff, Alkyl mit gerader oder verzweigter Kette,

Cycloalkyl, Hydroxyalkyl oder Phenyl;

R4 Wasserstoff oder Hydroxy; und

R6 Wasserstoff oder Alkyl bedeuten, oder ein Säureadditionssalz davon herstellt.

(III),

CH-X-CH-CH-R ss 16 j 3 114

R RJ R

worin R1, R2, R3, R4, R6 und X die in Patentanspruch 1 angegebene Bedeutung haben und R5 eine Benzoyloxy-, Sulfamoyl-60 oxy-, Carboxypropionyloxy- oder Acetoxygruppe bedeutet, dadurch gekennzeichnet, dass man nach dem Verfahren gemäss Patentanspruch 1 eine Verbindung der Formel I herstellt und diese durch Umsetzung mit einer den Rest R5 abgebenden Verbindung acyliert.

2

PATENTANSPRÜCHE 1. Verfahren zur Herstellung substituierter Purine der Formel I

R1 R2 R3,

R1 R2 R3,

CH-X-CH-CH-OH

l 6 I 3 I 4

R R R

worin

X Schwefel oder Sauerstoff;

R1 Wasserstoff, Halogen, Hydroxy, Alkoxy, Mercapto, Alkylthio, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino oder Azido;

R2 Wasserstoff, Halogen, Amino oder Azido ; R3 Wasserstoff, Alkyl mit gerader oder verzweigter Kette, Cycloalkyl, Hydroxyalkyl, Benzyloxyalkyl oder Phenyl; R4 Wasserstoff, Hydroxy oder Niederalkyl; und R6 Wasserstoff oder Alkyl bedeuten, vorausgesetzt, dass, falls X Sauerstoff und R2, R3, R4 und R6 Wasserstoff bedeuten, R1 nicht Amino oder Methyl-amino ist, und vorausgesetzt, dass, wenn R2 Wasserstoff darstellt, R1 nicht Chlor bedeutet, sowie von deren Säureadditionssalzen, dadurch gekennzeichnet, dass man von einer Verbindung der Formel II

3. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I, worin X Sauerstoff;

Halogen, Amino, Hydroxy oder Alkylthio;

Amino; und

R4 und R6 jeweils Wasserstoff bedeuten, oder ein Säureadditionssalz davon herstellt.

4. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I, worin io X Sauerstoff;

( I ) 3 R1 Amino, Mercapto oder Hydroxy;

Amino; und

R4 und R6 jeweils Wasserstoff bedeuten, oder ein Säureadditionssalz davon herstellt.

is 5. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I, worin X Schwefel;

R1 Halogen, Amino oder Monoalkylamino; und R2, R3, R4 und R6 jeweils Wasserstoff bedeuten, oder ein m Säureadditionssalz davon herstellt.

6. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I, worin X Sauerstoff;

R1 und R2 jeweils Amino; und 2S R3, R4 und R6 jeweils Wasserstoff bedeuten, oder ein Säureadditionssalz davon herstellt.

7. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Forme] I, worin X Sauerstoff;

30 R1 Hydroxy;

R2 Amino; und

R3, R4 und R6 jeweils Wasserstoff bedeuten, oder ein Säureadditionssalz davon herstellt.

8. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeich-35 net, dass man von einer Verbindung der Formel II, worin Y

eine aliphatische oder aromatische Acylgruppe bedeutet, ausgeht.

9. Verfahren nach Patentanspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass man die Acylgruppe Y durch basische Hydrolyse unter

40 milden Bedingungen entfernt.

10. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel III

(II),

CH-X-CH-CH-O-Y

\e I3 U

R R^ R

worin Y eine Acylschutzgruppe bedeutet, diese durch Hydrolyse oder Ammonolyse abspaltet und dass man, sofern das Reaktionsprodukt als freie Base anfällt, die Verbindung der Formel I gegebenenfalls in ein Säureadditionssalz überführt oder, falls das Reaktionsprodukt ein Salz der Verbindung der Formel I ist, dieses gegebenenfalls in die freie Base oder in ein anderes Salz überführt.
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