DK149022B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminderivater af di-o-(n-alkyl- eller alkenyl)-glyceroler eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf - Google Patents

Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminderivater af di-o-(n-alkyl- eller alkenyl)-glyceroler eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf Download PDF

Info

Publication number
DK149022B
DK149022B DK321478AA DK321478A DK149022B DK 149022 B DK149022 B DK 149022B DK 321478A A DK321478A A DK 321478AA DK 321478 A DK321478 A DK 321478A DK 149022 B DK149022 B DK 149022B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
glycerol
hexadecyl
compounds
alkyl
carbon atoms
Prior art date
Application number
DK321478AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK149022C (da
DK321478A (da
Inventor
Allen Richard Kraska
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of DK321478A publication Critical patent/DK321478A/da
Priority to DK311083A priority Critical patent/DK149331C/da
Priority to DK310983A priority patent/DK148354C/da
Publication of DK149022B publication Critical patent/DK149022B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK149022C publication Critical patent/DK149022C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/12—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms
    • C07D303/18—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms by etherified hydroxyl radicals
    • C07D303/20—Ethers with hydroxy compounds containing no oxirane rings
    • C07D303/24—Ethers with hydroxy compounds containing no oxirane rings with polyhydroxy compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/02—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C217/04—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C217/06—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one etherified hydroxy group and one amino group bound to the carbon skeleton, which is not further substituted
    • C07C217/08—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one etherified hydroxy group and one amino group bound to the carbon skeleton, which is not further substituted the oxygen atom of the etherified hydroxy group being further bound to an acyclic carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/02—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C217/04—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C217/28—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having one amino group and at least two singly-bound oxygen atoms, with at least one being part of an etherified hydroxy group, bound to the carbon skeleton, e.g. ethers of polyhydroxy amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/02—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C217/48—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated and containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/54—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C217/56—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C217/58—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by singly-bound oxygen atoms with amino groups and the six-membered aromatic ring, or the condensed ring system containing that ring, bound to the same carbon atom of the carbon chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/54—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C217/56—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C217/62—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by singly-bound oxygen atoms linked by carbon chains having at least three carbon atoms between the amino groups and the six-membered aromatic ring or the condensed ring system containing that ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/18—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C43/00—Ethers; Compounds having groups, groups or groups
    • C07C43/02—Ethers
    • C07C43/03—Ethers having all ether-oxygen atoms bound to acyclic carbon atoms
    • C07C43/14—Unsaturated ethers
    • C07C43/15—Unsaturated ethers containing only non-aromatic carbon-to-carbon double bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/44—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reduction and hydrolysis of nitriles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C47/00—Compounds having —CHO groups
    • C07C47/02—Saturated compounds having —CHO groups bound to acyclic carbon atoms or to hydrogen
    • C07C47/198—Saturated compounds having —CHO groups bound to acyclic carbon atoms or to hydrogen containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C47/00—Compounds having —CHO groups
    • C07C47/52—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings
    • C07C47/575—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/125—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4
    • C07D211/64—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4 having an aryl radical as the second substituent in position 4

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

149022
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af .hidtil ukendte aminderivater .ai di-Q-(n-høiere alkyl- og alkenyl)-glyceroler eller'deres farma ceutisk acceptable syreadditionssalte> hvilke forbindelser er nyttige til bekæmpelse af virale infektioner i pattedyr. Af særlig interesse er 1,3-di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol og dens farmaceutisk acceptable syreadditionssalte.
Virusinfektioner, som angriber pattedyr, herunder mennesker, er normalt smitsomme sygdomme, som kan forårsage stor menneskelig lidelse og økonomisk tab. Uheldigvis er opdagelsen af antivirale forbindelser meget mere kompliceret og besværlig end opdagelsen af 2 149022 antibakterielle og antifungale midler. Dette skyldes delvis den tætte strukturelle lighed mellem vira og strukturen af visse essentielle cellulære forbindelser, såsom ribonucleinsyre og desoxyribo-nucleinsyre. Imidlertid er beskrevet adskillige ikke-virale "antivirale forbindelser", dvs.forbindelser "som kan danne enten en beskyttende eller terapeutisk virkning til en klar påviselig fordel for den virusangrebne vært, eller et materiale, som væsentligt kan forøge antistofdannelsen, forbedre antistofaktiviteten, forbedre ikke-speci-fik modstand, bevirke hurtigere helbredelse eller hæmme symptomer", [Herrman et.al., Proc. Soc. Exptl. Biol. Med., 103, 625, (I960)]. Listen af angivne antivirale midler omfatter for at nævne et fåtal, interferon og syntetiske materialer, såsom amantadinhydrochlorid, pyrimidiner, biguanider, guanidin, pteridiner og methisazon. På grund af det temmelig snævre område af virale infektioner, der kan behandles med hver af de i handelen tilgængelige antivirale midler på nuværende tidspunkt, er nye syntetiske antivirale midler altid velkomne som potentiel værdifuld forøgelse af den medicinske teknologis hjælpestoffer.
Pattedyrs celler producerer som svar på virale infektioner et stof, der muliggør, at cellerne kan modstå formering af et antal vira. De virushæmmende eller virusinterfererende stoffer kaldes "interferoner". Interferonerne er glycoproteiner, der kan adskille sig i deres fysisk-kemiske egenskaber, men som alle udøver samme biologiske egenskaber, nemlig hæmning af et stort antal ikke-beslæg-tede vira, ikke har toksisk eller anden skadelig effekt på cellerne og er artsspecifikke (Lockart, Frontiers of Biology, Vol. 2, "Interferons", udgivet af Finter, W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1966, side 19-20).
Ingen praktisk, økonomisk fremgangsmåde er endnu blevet udviklet til fremstilling af exogene interferoner til klinisk rutinebrug overfor virale infektioner. Et alternativ til fremstilling af interferoner har derfor været forsøgt, hvilket omfatter administrering tildet dyr, som skal beskyttes eller behandles, af et ikke-viralt stof, der stimulerer eller inducerer frembringelse af interferon i cellerne. Interferon fremstillet på denne måde betegnes "endogen" interferon.
U.S. patentskrift nr. 2.738.351 beskriver, at forbindelser med den almene formel 3 r1-x-ch2 149022
CH-Z-ALK-B
2 I
R -Y-CH2 1 2 hvor R og R kan være alkyl, aralkyl, aryl, cycloalkyl, nitro- substitueret aryl, halogen-substitueret aryl, alkyl-substitueret aryl eller alkoxy-substitueret aryl, X, Y og Z kan være oxygen, svovl eller sulfonyl, ALK betyder en ligekædet eller forgrenet alkylengruppe med fra 1-6 carbonatomer, og B kan være di(lavere)- alkylamino, piperidino, morpholino, pyrrolidino, (lavere alkyl)- pyrrolidino, N'-alkylpiperazino eller pipecolino, er lokalt anæste- tiske midler. Yderligere beskrives ved diskussionen af alternative syntetiske veje (se spalte 1, 11. 57-70 i nævnte patentskrift) mellemprodukter med den i det foregående nævnte formel, hvor B er amino- og (lavere alkyl)-aminogrupper. Imidlertid indeholder ingen af de i det nævnte patentskrift specielt angivne forbindelser en 1 2 R eller R alkylgruppe, som er større end n-pentyl. Yderligere er 1 2 der ingen forbindelser, hvor både R og R er alkylgrupper, og både X og Y er oxygenatomer.
Insecticide og miticide forbindelser med formelen R1-CH0 I 2
CH-(CH-) -A
9 i ^ g R “CH2 1 2 hvor R og R hver bl.a. kan være lavere alkylthiogrupper, q betyder 0-5, og A bl.a. kan være en 1-piperidino eller di(lavere alkyl)aminogruppe er beskrevet i japansk patentskrift nr. J7-6042-177.
Det har nu vist sig, at visse hidtil ukendte amin-derivater af di-0-(n-ci2 2Q alkyl og-alkenyl)-glyceroler kan bekæmpe virale infektioner i pattedyr. De hidtil ukendte forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge denne opfindelse har formlerne R1-0-CH- I Δ o CH-O-Y-NHR i 2 1 R -0-CH2 eller 3 chjO-y-^nhr·3
R1-0-p II
r2-o-ch2 hvor 12 4 149022 R og R hver er udvalgt fra gruppen bestående af normale alkylgrupper med fra 12-20 carbonatomer og normale alkenylgrupper uden dobbeltbinding i 1-stillingen og med fra 12-20 carbonatomer, Y er udvalgt fra gruppen bestående af alkylengrupper med fra 2-4 carbonatomer, idet de to valenser findes ved forskellige carbonatomer , ortho-, meta- og para-phenylendimethylen, og — I ; (CB2>g-
V
hvor q er et helt tal fra 1-3, og den venstre binding er forbundet med 0, og R3 er et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 2-4 carbonatomer, eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf.
Forbindelserne med formlen I eller ll udyiser antf-yiral virkning overfor en stor mængde vira in vivo i pattedyr og in vitro i cellekulturer fra pattedyr. I det mindste en væsentlig mængde af denne virkning resulterer fra de nævnte forbindelsers evne til at inducere interferonproduktion i cellerne, d.v.s. endogen interferon.
Med "farmaceutisk acceptable" syreadditionssalte menes de salte, som er ikke-toksiske" ved de indgivne doser. De farmaceutisk acceptable syreadditionssalte, der kan anvendes, omfatter sådanne vandopløselige og vanduopløselige salte, såsom hydrochlorider, hydrobromider, fosfater, nitrater, sulfater, acetater, hexafluor-fosfater, citrater, gluconater, benzoater, propionater, butyrater, sulfosalicylater, maleater, laurater, malater, fumarater, succina-ter, oxalater, tartrater, amsonater (4,4'-diamino- stilben-2,2'-di-sulfonater), pamoater (l,l'-methylen-bis-2-hydroxy-3-naphthoater), stearater, 3-hydroxy-2-naphthoater, p-toluen-sulfonater, methansul-fonater, lactater og suraminsalte.
En foretrukket gruppe af forbindelserne med formlerne I £1]ρτ II består af hydrochloridsaltene af baserne med formlerne i eller II
En anden foretrukken gruppe af forbindelserne med formlerne I
X 2 eller II består af de forbindelser, hvor R og R hver er normale alkylgrupper med fra 14-18 carbonatomer.
En anden foretrukken gruppe af forbindelserne med formlerne I
1 2 eller n består af de forbindelser, hvor R og R hver er normale alkylgrupper med fra 14-18 carbonatomer og indeholder samme antal carbonatomer.
5 149022
En anden foretrukken gruppe af forbindelser med formlerne I
1 2 eller u består af de forbindelser, hvor R og R hver er n-hexadecyl-grupper.
En anden foretrukken gruppe af forbindelserne med formlerne I
*0 eller II består af forbindelser, hvor r er et hydrogenatom.
En anden foretrukken gruppe af forbindelser med formlerne I eller II består af de forbindelser, hvor R3 er et hydrogenatom, og Y er en ligekædet alkylengruppe med fra 2-4 carbonatomer.
En anden foretrukken gruppe forbindelser med formlerne I éller 3 II består af de forbindelser, hvor R er et hydrogenatom, og Y er ortho-, meta- eller para-phenylendimethylen.
Særlig værdifulde er følgende forbindelser og deres farmaceutisk acceptable syreadditionssalte.
1,3-di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol, 1.2- di-0-(n-hexadecyl)-3-0-(3-aminopropyl)-glycerol, 1.3- di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(meta-aminomethylbenzyl)-glycerol, 1.2- di-0-(n-hexadecyl)-3-0-(meta-aminomethylbenzyl)-glycerol, 1.2- di-0-(n-tetradecyl)-3-0-(meta-aminomethylbenzyl)-glycerol, 1.3- di-0-(n-hecadecyl)-2-0-(meta-aminomethylphenyl)-glycerol, 1.3- di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(para-aminomethylphenyl)-glycerol, 1,2-di-0-(n-hexadecyl)-3-0-(para-aminomethylphenyl)-glycerol,
Forbindelserne med formlen I eller II i det foregående fremstilles ifølge opfindelsen ved, at man til opnåelse af en forbindelse 3 med formlen I eller II, hvor R er et hydrogenatom, a) reducerer en forbindelse med formlen ^-0-^2
(jlH-O-Y«_CN VI
r1-o-ch2 eller CHo-0-Y'-CN 1 1 2
R -0-CH VII
*
R-O-CH
hvor Y' er udvalgt fra gruppen bestående af alkylengrupper med fra 1-3 carbonatomer, 6 149022 hvor den venstre binding er forbundet til O, og ~0—<cH2)q'1" hvor den venstre binding er forbundet til 0, og q har ovennævnte X 2 betydning, og hvor R og R har den ovennævnte betydning eller b) reducerer en forbindelse méd formlen R1-0-CH-) I 2
CH-O-Y—N-. VIII
2 -I 3 R -0-CH2 eller ch2-o-y-n3
R1-0-CH IX
- R -O-CH
1 2 hvor Y, R og R har den ovennævnte betydning, hvorefter man om ønsket alkylerer den resulterende forbindelse med formlen I eller 3 II, hvor R er et hydrogenatom, og/eller om ønsket omdanner en dannet forbindelse med formlen I eller II til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.
Syreadditions salte af baserne med formlerne I eller II kan fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, såsom ved blanding af aminforbindelsen i et passende opløsningsmiddel med den ønskede syre og udvinding af saltet ved fordampning eller udfældning efter tilsætning af et opløsningsmiddel, hvori saltet er uopløseligt. Hydrochloridsalte kan let fremstilles ved genindvinding af hydrogenchlorid gennem en opløsning af aminforbindelsen i et organisk opløsningsmiddel. Som det kan ses af de følgende eksempler har mange af de isolerede hydrochlorid- eller di-hydrochloridsalte af baserne med formlerne I eller II tendens til at indeholde en betydelig mængde vand. Det vides ikke, hvorvidt dette 7 149022 observerede "fangne" vand er vilkårligt indesluttet under krystallisationen eller svarer til dannelse af virkelige molekylære hydrater eller stammer fra tilstedeværelsen af et andet fænomen. I hvert tilfælde kan saltene indeholdende "fanget" vand let præpareres og administreres uden forudgående dehydratisering.
Udgangsmaterialerne l,2-di-0-(n-højere alkyl)-glyceroler kan fremstilles ved den af Kates, M. et al., Biochemistry, 2_, 394 (1963) angivne metode. Udgangsmaterialerne 1,3-di-O-(n-højere alkyl)-glyceroler kan fremstilles ved den af Damico, R., et al. J, Lipid Res., <?, 63 (1967) angivne metode. Udgangsmaterialerne 1,2- og 1,3-di-O-(n-højere alkenyl)-glyceroler kan fremstilles ved den af Bauman, W.J. og Mangold, Η. K., j. Org. Chem., 31, 498 (1966) angivne metode.
Den anti-virale virkning af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen blev bestemt ved anvendelse af to uafhængige fremgangsmåder. Ved den første blev prøveforbindelsen administreret til mus ad intra-peritoneal vej 18 til 24 timer før indgift af en letal dosis af encephalomyocarditis (EMC) virus. Overlevelsesdata er opført lo dage efter indgift af virus og sammenlignet med data fra ubeskyttede dyr. Fremgangsmåden, ved hvilken medikamentet indgives 18 til 24 timer før og på et væsentligt adskilt sted fra virusinjektionen, er beregnet på at eliminere lokale effekter mellem medikament og virus og identificere udelukkende de forbindelser, som giver et systemisk anti-viralt svar.
Ved den anden fremgangsmåde behandles monolag af humane nasale polypceller, dyrket på mikrotiterplader med prøveforbindelsen ca.
18 timer før behandling med en letal dosis af vesikular stomatitis-virus (VSV). Prøveforbindelsen vaskes bort fra monolaget før virusbehandling. Kulturvæske ekstraheres fra pladerne efter en inkubationsperiode, titreres for mængden af infectiøs virus tilstedeværende i mikrotiterplader af L-929 muse-fibroblaster. Sammenligning gøres med virusdata fra kulturvæske ekstraheret fra ubeskyttede polypceller.
Yderligere blev mange af foibindelseme fremstillet ifølge opfindelsen afprøvet med hensyn til deres evne til at forøge den kendte anti-virale virkning af polyinosin:polycytidylinsyre. Endelig blev visse af forbindelserne afprøvet med hensyn til deres evne til at inducere cirkulerende interferon i mus efter parenteral administrering ved anvendelse af den af Hoffman, W.W., et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 3, 498-501 (1973) beskrevne fremgangsmåde.
8 149022
Parenteral, topisk eller intranasal administrering af de i det foregående nævnte beskrevne aminer til pattedyr· før udsættelse af pattedyret for en infectiøs virus giver hurtig modstand mod virusen. Fortrinsvis bør administreringen finde sted fra ca. 2 til ca. 1 dag før udsættelse for virus, men dette vil variere noget med den specielle dyreart og med den specielle infec-tiøse virus.
Ved indgift af de pågældende forbindelser anvendes de lettest og mest økonomisk i dispergeret form i en acceptabel bærer.
Når det siges, at forbindelserne er dispergeret, betyder det, at partiklerne kan være af molekulær størrelse og holdes i sand opløsning i et passende opløsningsmiddel, eller at partiklerne kan.være af colloidal størrelse og dispergeret i en væskefase i form af en suspension eller en emulsion. Betegnelsen "dispergeret" betyder også, at partiklerne kan være blandet med og spredt i en fast bærer, således at blandingen er i form af et pulver eller støv.
Denne betegnelse omfatter også blandinger, der egner sig til anvendelse som sprøjtemidler, omfattende opløsninger, suspensioner eller emulsioner af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen.
Administreret parenteralt (subcutant, intramuskulært, intra-peritonealt) anvendes forbindelserne i en mængde på fra ca. 1 mg/kg legemsævgt til ca. 200 mg/kg legemsvægt. Det foretrukne område er fra ca. 5 mg/kg til ca. 100 mg/kg legemsvægt, og det mest foretrukne område fra ca. 5 mg til ca. 50 mg/kg legemsvægt. Dosis afhænger naturligvis af det pattedyr, som skal behandles, og den specielle aminforbindelse, som er anvendt, og bestemmes af den person, som er ansvarlig for administreringen. Sædvanligvis administreres små doser i begyndelsen med gradvis . forøgelse af dosis, indtil det optimale dosisniveau er bestemt for det specielle subjekt, som er under behandling.
' Ved anvendelse af den intranasale administrationsvej kan anvendes en hvilken som helst praktisk fremgangsmåde til kontakt mellem det anti-virale middel og dyrets åndedrætsveje. Effektive fremgangsmåder omfatter administrering af midlet ved hjælp af intranasale eller nasapharyngeale dråber og ved inhalation ved hjælp af en nebulizer eller en aerosol. Sådanne administreringsfremgangsmåder er af praktisk betydning, fordi de tilveje-bringer en let, sikker og effektiv metode. Til intranasal administrering af midlet, sædvanligvis i en 9 149022 acceptabel bærer, er en koncentration af midlet mellem 1,0 mg/ml og 100 mg/ml tilfredsstillende. Koncentrationer i området på fra ca. 30 til 50 mg/ml muliggør administrering af passende volumen .
Til topisk anvendelse benyttes de anti-virale forbindelser mest passende i en bærer for at muliggøre let og sikker anvendelse og bedre absorption. Også her er koncentrationer i området fra ca. 1,0 mg/ml til ca. 250 mg/ml tilfredsstillende. Generelt vil man ved de to foregående metoder anvende en dosis i området fra ca. 1,0 mg/kg til ca. 250 mg/kg legemsvægt og fortrinsvis fra ca.
5,0 mg /kg til ca. 50 mg/kg.
Opfindelsen forklares nærmere ved hjælp af følgende eksempler.
Eksempel 1 1,3-Di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol-hydrochlorid.
A. 1,3-Di-(n-hexadecyl)-2-0-(2-cyanoethyl)-glycerol.
En blanding af l,3-di-0-(n-hexadecyl)-glycerol (80 g, 148 mmol) acrylonitril (1,49 kg, 28,1 mol) og vandig 2N natriumhydroxid (1,2 1) blev opvarmet til 50°C. Tetrabutylammoniumhydroxid (19,2 g 40 vægtprocent vandig opløsning, 29,15 mmol) blev langsomt tilsat, hvorved temperaturen af den exotherme reaktionsblanding steg til ca 80 til 90°C. Reaktionsblandingen blev så omrørt i 20 min. uden ydre opvarmning, efterfulgt af afkøling til 20°C og tilsætning af vand (1,0 1). Et fast materiale, en blanding af ikke-reageret og cyanoethyleret l,3-di-0-(n-hexadecyl)-glycerol blev isoleret og behandlet igen med frisk acrylonitril (1,49 kg, 28,1 mol), vandig 2N natriumhydroxid (1,2 1) og tetrabutylammoniumhydroxid (19,2 g 40 vægtfs vandig opløsning, 29,15 mmol) i 20 min. under omrøring ved 50°C, efterfulgt af afkøling og tilsætning af vand (1,0 1). Den resulterende l,3-di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(2-cyanoethyl)-glycerol i form af et fast stof blev filtreret, vasket med vand, derefter methanol og acetonitril og tørret [82 g, 93% udbytte, smp. 45-46°C
ir (CHC13) 2250 cm”1, nmr (CDCI3) δ 3,92 (t, 2, NCCH2CH20-), 3,33-3,67 (m, 9, -OCH[gi2OCH2C15H31]2), 2,62 (t, 2, NCCH2CH2<>) og 0,75-1,58 (m, 62, alifatiske protoner)].
10 149022 B. Titelforbindelsen.
En blanding af l,3-di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(2-cyanoethyl)-glycerol (20,5 g, 35,5 mmol), tetrahydrofuran (200ml), ethanol (10 ml) og Raneynikkelkatalysator 3 g, blev mættet med ammoniakgas ved 0-5°C og derpå hydrogeneret (3,5 ato) i en Paar-hydrogenator i 3 timer ved stuetemperatur. Blandingen blev så filtreret, katalysatoren vasket med tetrahydrofuran (50 ml) og det totale filtrat fordampet i vakuum til en olie. Denne fremgangsmåde blev gentaget 3 gange mere med friske reaktanter og katalysator til dannelse af en totalmængde på 77 g olie. Olien blev opløst i ether (500 ml) og opløsningen vasket med 2 vægt% vandig ammoniumhydroxidopløsning (500 ml), tørret med MgSO^, filtreret og inddampet i vakuum til dannelse af et fast stof. Det faste stof blev opløst i 300 ml methanol, og opløsningen mættet med hydrogenchloridgas og derpå inddampet i vakuum til fast stof. Det faste stof blev krystalliseret med ethylacetat til dannelse af det angivne produkt med en ringe mængde urenhed (63 g, 72%'s udbytte, smp. 69-70°C), og derpå omkrystalliseret 2 gange med isopropanol:acetonitril (1:1, 800 ml) [47,5 g, 54%'s udbytte, smp. 58-59°C, nmr. (CDCl-jH 3,84 (t, 2, H2NCH2CH2CH20-) , 3,55 (m, 9, -OCHtO^OQ^C·,^.^) , 3,24 (t, 2, I^N^Ci^CI^O-) , 2,04 (m, 2, H2NCH2Cg2CH20-) og 0,90-1,32 (m, 62, alifatiske protoner) , elementær analyse: beregnet: 72,04% C, 12,73% H, 2,21% N, fundet: 71,80% C, 12,41% H, 2,30% N],
Eksempel 2-7 På lignende måde som beskrevet i eksempel 1 blev følgende forbindelser fremstillet ved anvendelse af de passende 1,3- eller l,2-di-0-(n-højere alkyl)-glyceroler som udgangsmateriale c|h-0(CH2)3NH2 i r2-o-ch2 CH2-0(CH2)3nh2
R1-0-CH II
r2-o-ch 11 149022 Η σ σ oo ο- Η νο μ σι νο ο σ _g| * * *. «- * * dP CM CM Η CM CM Η Ρ Η μι· νο in σι 0) σι CM m 00 Η rtø *ϋ Hl ******·
β rtø rtø CM CM CM CM
β rtø rtø rtø rtø rtø rtø
Pm in η νο cm in •31 in σ ο- σ
Cj| - - - - ' s 0 in oo cm ο © o m vo vo o- o- o~ o- >1
<—I
cd -—· ^ in oo CM VO 00 fi dp m co ο μ· Η σ <j ^ g| v «. *.*.*. ·.
+) CM CM CM CM CM H
0) β σ ο M1 in O' o
Cr cm in oo in o· oo (DEI·'
tø CM CM CM CM CM CM
Q) i—t i—I i—1 i—l i—1 i—! « ο ο- ·μ· o σι
vo μ* o vo in H
Ol *· * - *· . *·
in oo co ο ο H
vo vo ο- ο- ο- • *-* o- oo m Η oo σι ftU o- in vo σι o- vo
go I I I I I I
CO VOO'M’OVOO' o· in vo σ vo
0 O
CM CM
E Λ E _
H CM Ο O
(D \ CM \ CM
S co E co E
H * * * * Ο rtø rH rH rH !-l rtø «ρ ο u υ u u u
E E E E E E
tø · · · · · · fB 2 2 E 2 E 2
H CO co CO CO CO CO
> 0 0 0 0 0 0 ,y co Η ο- Η σι ο- Ο) vo O' oo o· o· oo
Η E E E E S E
Ο Ο M* CM Mf 00 CM
S CO CO ·Μ< CO CO M< ο ο ο α u o
I I
1 ti i <ΰ i i
CD tø fd tø id tO
CM I t) -P rtø -Prtø -P rtø X rtø -PH
E| 0 (D>tJ>a)>i(U>iO>i ΌΗ -P 0 0ϋ -P 0 ,fi 0 00 ι > i a) i a> ία) i a) i a) β 0 SO SO β Ό fi fi Ό
I I
I cd i as i i 0) tø id tø id id
H Id -PH -PH -PH XH -PH
El ο α)>υ>,ο>>Φ>(ϋ>ι drl -P 0 00 -PO Λ 0 00 I >1 ! Q> 10) IQ) IQ) IQ) βυ fid fid «Ό βd find β tø tø Η Η Η Η Η Η -Ρ β Η Η Η CO -Ρ ^ 6 fi 0) cm co μ* in vo O' cn >-t Q)
m &J
149022 12
Eksempel 8 1,3-Di-O-(n-hexadecyl)-2-0-(4-aminobutvl)-glycerol—hydrochlorid.
A. 1,3-Di-O-(n-hexadecyl)-2-0-(3-hydroxypropyl)-glycerol.
Boranmethylsulfid (BMS) kompleks (6,5 ml, 68,5 mmol) blev sat ved 0-5°C til en opløsning af l,3-di-0-(n-hexadecyl)-2-0-allyl-glyce-rol (10,82 g, 18,6 mmol, fremstillet som angivet i eksempel 11A) i hexan (190 ml), og den resulterende opløsning blev omrørt i 3 timer ved stuetemperatur. Reaktionsopløsningen blev så igen afkølet til 0-5°C, og ethanol (17,3 ml) blev dråbevis tilsat til spaltning af resterende BMS. Reaktionsopløsningen blev så behandlet med vandig 3N natriumhydroxid (13 ml) og 30 vægt% vandig hydrogenperoxid (11 ml) og omrørt i 16 timer under tilbagesvaling, afkølet og udhældt i isvand indeholdende natriumbisulfit. Isvandopløsningen blev omrørt, indtil den gav negativ stivelses-iodidprøve for peroxider, og derpå ekstraheret med ether (3 x 200 ml). Den samlede ethereks-trakt blev vasket med vand (200 ml), vasket med mættet vandig na-triumchloridopløsning (200 ml), tørret over MgS04, filtreret og inddampet i vakuum. Det resulterende produkt blev renset med chro-matografi på silicagel (eluering med benzen:ethanol) [5 g, 45%'s udbytte, snip. 29°C, nmr. (CDC13) δ 3,80 (t, J = 5 Hz, 2, -OCH2CH2gH2OH) og 3,75 (t, J = 5 Hz, 2, -OCH2CH2CH2)].
B. 1,3-Di-O-(n-hexadecyl)-2-0-[3-(p-tosyloxy)propyl]-glycerol.
1,3-Di-O-(n-hexadecyl-2-O-(3-hydroxypropyl)-glycerol (8,0 g, 13,4 mmol) blev sat ved 10°C til en opløsning af p-toluensulfonylchlorid (5,25 g, 27,5 mmol) og pyridin (10 ml i 200 ml methylenchlorid), og blandingen blev omrørt i 60 timer ved stuetemperatur. Vand (200 ml) blev så tilsat, methylenchlorid og den vandige fase blev adskilt, sidstnævnte blev ekstraheret med methylenchlorid (2 x 150 ml) . De 3 methylenchloridlag blev samlet, vasket med vand (2 x 150 ml), tørret over MgS04, filtreret og inddampet i vakuum. Det resulterende tosylat blev renset ved chromatografi på silicagel (eluering med benzen) [3,0 g, 30%'s udbytte, olie, ir (CHCHl^) 1130og 1350 cm \ nmr. (CDC13) δ 7,53 (q, 4, protoner på phenylringen), 4,15 (t, 2, -S03gH2CH2CH20-), 3,63 (t, 2, -S03CH2CH2CH20-), 3,42 (m, 9, -Ora[CH2OCH2C15H31]2), 2,45 (s, 3, Ar-CH-j) , 1,90 (m, 2, -S03CH2CH2CH20-) og 0,90-1,50 (m, 62, alifatiske protoner)].
13 149022 C. 1,3-Di-O-(n-hexadecyl)-2-0-(3-cyanopropyl)-glycerol.
1,3-Di-0-(n-hexadecyl)-2-0-[3-(p-tosyloxy)propyl]-glycerol (3,0 g, 4,0 mmol) blev opløst i en opløsning af natriumcyanid (0,5 g, 10 mmol) i Ν,Ν-dimethylformamid (50 ml) og den resulterende opløsning blev omrørt i 16 timer ved 80°C, afkølet, fortyndet med vand (100 ml) og ekstraheret med ether (3 x 150 ml). Den samlede etherekstrakt blev vasket med IN saltsyre (3 x 75 ml), derpå med mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning (3 x 75 ml), så vand (75 ml) og til slut mættet vandig natriumchloridopløsning (75 ml) og derpå tørret (MgSO^), filtreret og inddampet i vakuum til dannelse af et voksagtigt fast stof, der blev anvendt til næste trin uden yderligere rensning [2,0 g, 83%'s udbytte, ir (CHCl^) 2250 cm-1].
D. Titelforbindelseii.
Lithiumaluminiumhvdrid (800 mg, 21 mmol) blev sat til en opløsning af l,3-di-0-(n-hexadecyl)-2-0-(3-cyanopropyl)-glycerol (2,0 g, 3,3 mmmol) i ether (100 ml), og blandingen blev omrørt i 60 timer ved stuetemperatur. Tilstrækkeligt vand til afslutning af reaktionen blev forsigtigt tilsat, efterfulgt af yderligere 100 ml vand. Den resulterende blanding blev omrørt i yderligere 1 time ved stuetemperatur og derpå ekstraheret med ether (3 x 100 ml). Den samlede etherekstrakt blev vasket med mættet vandig natriumchloridopløsning (3 x 75 ml), tørret over MgS04, filtreret og inddampet i vakuum til en olie, som blev renset ved chromatografi på silicagel (eluering med benzen:ethanol) og derpå opløst i ethanol. Opløsningen blev behandlet med hydrogenchloridgas og derpå inddampet i vakuum til dannelse af et fast stof, som blev omkrystalliseret med ethyl-acetat. [444 mg, 21%'s udbytte, smp. 61,5-63,5°C, nmr. (CDC13) δ 3,67 (t, 2, -OCH2CH2CH2CH2NH2), 3,55 (m, 9, -OCH[qH2OCH2C15H31]2), 3,10 (t, 2, -OCH2CH2CH2CH2NH2), 15,0-2,00 (m, 4, -OCH2CH2CH2CH2NH2) og 0,80-1,50 (m, 62, alifatiske protoner), elementær analyse beregnet: 72,23% C, 12,74% H, 2,16% N, fundet: 72,53 % C, 12,42% H, 2,10% N].
149022 14
Eksempel 9 1,2-Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(3-aminomethylbenzyl)-glycerol—hydro-chlorid.
A. l,2-D±-0—(n—hexadecyl)-3-0-(3-cyanobenzyl)-glycerol.
Natriumhydrid (1,056 g af 50 vægt% mineraloliedispersion, - 22 .mmol) blev sat til en opløsning af 1,2-di-O-(n-hexadecyl)-glycerol (9,73 g, 18 mmol) i tetrahydrofuran (150 ml), og den resulterende opløsning blev omrørt i 20 min. ved stuetemperatur under nitrogen. m-Cyanobenzylbromid (4,0 g, 20 mmol) blev tilsat, og.reaktionsblandingen omrørt natten over ved stuetemperatur under nitrogen. Vand (200 ml) blev så tilsat forsigtigt, og den resulterende blanding ekstraheret med ethylacetat (3 x 150 ml). Det samlede ethylacetatekstrakt blev tørret over MgSO^, filtreret og inddampet i vakuum til en olie (12 g), som blev renset ved chromatografi på . silicagel (eluering med benzenzhexan) [8,0 g, 68%'s udbytte, olie, ir (CHCI3) 2230 cm"1.
. B. Titelforbindelsen.
En opløsning af 1,2-di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(3-cyanobenzyl)-glycerol (1,0 g, 1,5 mmol) i ether (10 ml) blev langsomt under nitrogen sat til en suspension af lithiumaluminiumhydrid (0,057 g, 1,5 mmol) i ether (40 ml)., og den resulterende blanding blev omrørt i 1 time under tilbagesvaling og. nitrogen og derpå afkølet. 50 ml vand blev forsigtigt tilsat, og blandingen blev ekstraheret med ether (3 x 50 ml). Den samlede etherekstrakt blev tørret over MgSO^, filtreret og inddampet i vakuum til en olie, som blev renset ved chromatografi på silicagel (eluering med benzen:ethanol) og derpå opløst i ethylacetat. Opløsningen blev behandlet med hydrogenchlorid-gas og derpå inddampet i vakuum til dannelse af et fast stof, som blev omkrystalliseret med ethylacetat [220 mg, 21%'s udbytte, smp. 88-90°C, elementær analyse beregnet: 74,14% C, 11,87% H, 2,01% N, fundet: 74,35% C, 11,54% H, 2,15% N].
Eksempel 10-21 På lignende måde som beskrevet i eksempel 9 blev følgende forbindelser fremstillet ved anvendelse af passende 1,3- eller 1,2-di-O- (n-hø jere alkyl- eller alkenyl)-glyceroler og cyanobenzylbromid som udgangsmaterialer 149022 15
Rl~°'f2 ^ /CS2m2 iH-0-CH2_yY τ
R‘-O-CH, I
V
. /CH2NH? CH,-O-CEL-/rx * Δ
J-o-lx H
R2-0-^H2 Nj/ 149022 16 t n σ\
CO rH
ΓΟ <T\ CO C^l O OO LO r—i r—I CJ“> • ^ r** r- r- r- co co r- qj i i vd <l)
P.U I I I I I i 1 -H £J <> I
go ΗΓ-Γ-ΗσϊΙ''<θΗ ΠΗΓ~Η
(qw ^ > [s. Γ* CO P> O HHVO O
o o o
CM N CM
ffi ca m
o *3* CM
CM \ \ \ W H r-l ro • · · *
»—4 i-1 H i—1 H ·—1 «—1 >“H Η H f-i H
Jj u ouuuouu u u o o 5 MfSffiætEKffiK ffitacna ri ···· ···· .···
>,ri 3 52 S S 52 52 S3 53 S !3 S S
«*; tu cororocorocococo ro ro ro ro
©SOOOOOOOO O O O O
Hk HHHcoHrocnin coHcnio 0 O o co-co > ffl h co oo co ω oo si« KffiwaKKiuw « a a a (ΟΓΟΓοσιΓοσιΓ-Γ- m η h h CO'3l^i'S' uuuuuuuu ouuo ord 6 ti c
Od) •H 01 jj β O o o S-HxlctJnJXlx:©©© njcd rtinj 4Jk+)+) M4J4J+J+>4J k k k k •HHk©tfkk©©© © 5 © £ 4J>osaoogee & ft ft ft m ti Λ 0) ti XJ CO Oj
HH H
Η Η H Η κΟ H Η H
>i >i >i O >« O >1 I 0>i>il
ΟϋΟΦϋΦϋϋ <D O O O
ωοο'ΟΦΌΦΟ) Ό © © ©
lit! UflC (arOOO
a nSn5©k(dk(d©HknJ©©H X X X4J i! 4J 4J Jj I>1 4J X JJ JJ
®©©©©©ϋϋε!©© ϋϋβ X! Xi X! +) X! +J O O © -P X! O O©
I I I I I I I I I I I I I I
βββββββ βσιββββσι
Η Η H
Η Η Η >ι H >i H >Ί Η H
>i >i >i O >i O 5» ! O >ι >ί I
Ο'ΟΟΦΟΦΟΟ © O O O
©©©Ό©Ό©© Ό © © © ΌΌΌ(ΰΓ0©Ό,,0 (ΰΌΌΌ H|<drdnJk(dk ©nJHktdcd©H Ρί ΧΧΧ·ΡΧ-Ρ·Ρ·Ρ>»·ΡΧ·Ρ·Ρ>· ©©©©©©οοΰ©©ϋϋβ χ! χί Xi -P Xi -P O O © -P X! O O©
I I I I I i I I I I I I I I
ί-«ββββββσ>ββββσ\
3 HHHHH HHHH
kkHHHH HHHH HHHH
P ti CO -P
I k s c © ohcmco'M,w'£>['~ oooioh
©HH HHH HHHH Η H CM CM
X © h a 17 149022
Analyse
Eksem- Beregnet (%) Fundet (%)
pel nr. C Η N C Η N
10 74,14 11,87 2,01 73,89 11,43 1,99 11 73,20 11,85 1,98 73,17 11,53 2,28 12 72,28 11,83 1,96 75,52 11,46 1,90 13 72,63 11,48 2,17 72,62 11,81 2,43 14 74,14 11,87 2,01 73,94 11,25 2,02 15 73,14 11,65 2,19 72,86 11,44 2,11 16 74,99 12,06 1,86 74,97 11,73 1,83 17 74,50 11,57 1,85 74,40 11,08 2,08 18 73,14 11,65 2,19 72,84 11,30 2,26 19 74,14 11,87 2,01 74,33 11,55 2,15 20 74,99 12,06 1,86 74,50 11,30 1,91 21 74,06 11,54 1,83 74,00 10,99 1,93 149022 18
Eksempel 22 1.2- Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(4-aminomethylphenyl)-glycerol-hydrochlo-rid.
A. 1/2-Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(p-tosyl)-glycerol.
På lignende måde som beskrevet i eksempel 8B blev den angivne forbindelse fremstillet ved reaktion mellem l,2-di-0-(n-hexadecyl)-glycerol og p-toluensulfonylchlorid. Rensning skete ved omkrystallisation med ethylacetat [smp. 53-55°C, ir (CHClg) 1360 og 1180 cm .
B. 1,2-Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(4-cyanophenyl)-glycerol.
En blanding af l,2-di-0-(n-hexadecyl)-3-0-(p-tosyl)-glycerol (1,4 g, 2,0 mmol), natrium-4-cyanophenolat (0,5 g, 3,5 mmol) og xylen (100 ml) blev omrørt i 16 timer under tilbagesvaling. Da reaktionen endnu ikke var fuldendt, blev xylenet fjernet ved destillation og erstattet med Ν,Ν-dimethylformamid (100 ml) og den resulterende opløsning blev omrørt i yderligere 16 timer ved 150°C. Reaktionsopløsningen blev så afkølet, fortyndet med vand (100 ml) og ekstraheret med ether (2 x 100 ml). Den samlede ether-ekstrakt blev vasket, først med 3N saltsyre (100 ml), så med 10vægt% - vandig natriumhydrogencarbonatopløsning (100 ml) og derpå vand (100 ml), tørret over MgSO^, filtreret og inddampet i vakuum til en olie, som blev renset ved chromatografi på silicagel (eluering med benzen) [0,65 g, 50%'s udbytte, smp. 53-55°C, ir (CHCl^) 2210 cm"1].
C. Titelforbindelsen.
1.2- Di-O-(-n-hexadecyl)-3-0-(4-cyanophenol)-glycerol (0,60 g, 0,93 mmol) blev sat til en suspension af lithiumaluminiumhydrid (0,3 g, 7,9 mmol) i ether (25 ml), og den resulterende blanding blev omrørt i 30 min. ved stuetemperatur, vand (25 ml) blev så forsigtigt tilsat, etherfasen og den vandige fase blev adskilt, og sidstnævnte blev ekstraheret med ether (3 x 25 ml) og ethylacetat (25 ml). De 5 organiske ekstrakter blev samlet, tørret over MgSO^, filtreret og inddampet i vakuum til en olie, som blev opløst i ether. Opløsningen blev behandlet med hydrogenchloridgas, hvorved et fast stof udfældedes [0,41 g, 64%'s* udbytte, smp. 110-112°C, nmr. (CDClg) δ 4,02, (s, 2> -CH2NH2)/ elementær analyse beregnet: 73,91% C, 11,81 % H, 2,05% N, fundet: 73,62% C, 11,71% H, 2,14% N] .
Eksempel 23-25 På lignende måde som beskrevet i eksempel22 B-C blev følgende forbindelser fremstillet ud fra passende tosylater (fremstillet som 149022 19 i eksempel 22A) og natriumcyanophenolat: 149022 20 sr ->3· 'a·
«tf O O
—> !al - - -
<SP Ol Ol OJ
«tf r-- «tf +J vo ro ro <U Kl - - *· *0 Η r—i Η
C Η Η H
β
fe H «tf O
i—l (Ti O
H Ul - *> - H H «tf ro «tf ø r- r" ul h in in in cd -- o o o C <*> SI - ' - <; —· cm cm cm
-P Η Η H
Q) 00 00 00 C Kl - - - H ri H φ r-\ i—i «Η
OJ oj U
g {1} φ ri Η H
J2 J2 ώ G\ G\ G\
CM CM Ul * - K
K K ro co ro O U r- r- <_> O i®!?? >-----/ cn oo o «tf I / h m oo / / I o
O I
CM I CM CM CM
K K K K K K
u— u—u u—u— u
II II Η Η H
o o o o u u u
II II K K K
HH HH ...
>i >i So >1 MKKZ
ου O O IB ro ro ro
φ φ ΦΦ H O O O
Ό Ό Ό Ό >ιΗ σι σ> σι φ cd njcd Μ 0) Γ" Γ" O'
X X XX Φ S K K K
φ φ ΦΦ Η 5-1 CM (Μ ΟΙ
Si Λ ΚΛ 0 0 «tf «τ «tf II II smuuu β β β β oid a c c 0 Φ •Η φ +> β <d id <d 3Ή +1 Ο +> +> β Φ m φ •Η Η E Di 6 +) >1 CO β Λ Φ Si CO oj
β H
Cl' Cf Η Η H
-μ β CO 4J I β g fi n «f in Φ CM CM CM 01 H Μ Φ W Oj 149022 21
Eksempel 26 1.2- Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-[4-(3-aminopropyl)phenyl]-glycerol-hydro-chlorid.
På lignende måde som beskrevet i eksempel 22 blev den angivne forbindelse fremstillet ved anvendelse af 4-(2-cyanoethyl)phenolat i stedet for natrium-4-phenolat (smp. 153-155°C, elementær analyse beregnet: 74,37% C, 11,91% H, 1,97% N, fundet: 74,13% C, 11,44% H, 2,08% N).
Eksempel 27 1.2- Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(2-aminopropyl)-glycerol-hydrochlorid.
A. 1,2-Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-[2-(p-tosyloxy)propyl]-glycerol.
På lignende måde som beskrevet i eksempel 8 A og B blev 1,2-di-0-(n-hexadecyl)-3-0-allyl-glycerol bragt til reaktion med BMS, og de resulterende 2-hydroxypropyl- og 3-hydroxypropvlforbindelser omdannet til deres tilsvarende tosylater. Adskillelse blev ikke foretaget på dette trin. Blandingen af tosylater blev anvendt direkte ved næste trin.
B. 1,2-Di-O-(n-hexadecyl)-3-0-(2-azidopropyl)-glycerol.
Den resulterende blanding af tosylater (3,0 g, 4,0 mmol) blev opløst i N,N-dimethylacetamid (50 ml) og behandlet med en opløsning af natriumazid (0,326 g, 5,0 mmol) i vand (5 ml) i 16 timer ved 90°C. Reaktionsopløsningen blev så afkølet, fortyndet med vand (200 ml) og ekstraheret med ether (2 x 150 ml). Den samlede ether-ekstrakt blev vasket med vand, tørret over MgSO., filtreret og ind- ^ —i dampet i vakuum til en olie (2 g, 81%'s udbytte, ir (CHClg) 2100 cm , som var en blanding af 2-azidopropyl- og 3-azido propylforbindelser, som blev anvendt uden yderligere rensning til næste trin.
C. Titelforbindelsen.
Den resulterende blanding af azider (2 g, 3,2 mmol) blev opløst i ether (100 ml), behandlet med lithiumaluminiumhydrid (0,4 g, 10,5 mmol), og henstod under omrøring i 2 timer ved stuetemperatur. Overskydende hydrid blev ødelagt ved forsigtig tilsætning af ethanol (10 ml) og vand (150 ml), og blandingen blev så ekstraheret med ether (2 x 100 ml). Den samlede etherekstrakt blev tørret over MgSO^, filtreret og inddampet i vakuum til en olie (1,8 g), som blev renset ved chromatografi på silicagel (eluering med benzen: ethanol) og derpå omdannet til hydrochloridsalt ved opløsning og behandling med hydrogenchloridgas. Saltet blev omkrystalliseret 149022 22 fra ethylacetat (0,21 .g, fast stof indeholde ca. 1/2 mol I^O per mol produkt, 10%'s udbytte, smp. 56-58°C, elementær analyse beregnet: '71,03% C, 12,70% H, 2,18% N, fundet: 71,11% C, 12,91% H, 2,16% N).
Eksempel 28 1,2-Di-O-(n-octadecyl)-3-0-(2-aminopropyl)-glycerol-hydrochlorid.
På lignende måde som beskrevet i eksempel 27 A blev l,2-di-0-(n-octadecyl)-3-0-(2-hydroxypropyl)-glycerol fremstillet ud fra 1,2-di- 0-(n-octadecyl)-3-0-ally1-glycerol. Det angivne produkt blev fremstillet ud fra l,2-di-0-(n-octadecyl)-3-0-(2-hydroxypropyl)-glycerol på lignende måde som beskrevet i eksempel 27 B-C (fast stof indeholdende ca. 1 mol 1^0 per mol produkt, smp. 65-67°C, elementær analyse beregnet: 71,19% C, 12,80% H, 1,98% N, fundet: 71,12% C, 12,52 % H, 1,92% N).
In vivo aktivitet af l,3-di-0-(n-hexadeyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol—hydrochlorid overfor EMC-virus.
Fremstilling af en emulsion skete ved smeltning og blanding af lige dele af den angivne forbindelse, polysorbat 80 og glycerin og påfølgende dispergering af blandingen i varmt vand under voldsom omrøring. Præparatet blev så indstillet til en endelig koncentration på 0,14M natriumchlorid og 0,01M natriumfosfat, pH 7.Yderligere fortyndinger blev gjort med 0,14M natriumchlorid, 0,01M natriumfosfat, pH 7, pufferopløsning.
3 Grupper af 10 hun-albinomus (20-25 g legemsvægt) blev givet 0,5 ml intraperitoneale injektioner indeholdende mængder på 1,5, 5, og 15 mg af den angivne forbindelse/kg legemsvægt. En fjerde kontrolgruppe på 10 mus fik ingen injektion. 18-24 Timer senere fik alle 4 grupper 0,2 ml subeutan injektion indeholdende 20 gange LDgg dosis, som forårsager 50% dødelighed i ubeskyttede mus i 10 dage, af encephalomyocarditis (EMC) virus. Overlevelsesdata blev opsamlet over de næste 10 dage, og den relative overlevelse (Sr) beregnet:
Dosis af forbindelsen Sr (gennemsnit af syv forsøg) 15 mg/kg 61 5 45 1,5 24 149022 23
Antiviral virkning udtrykkes som den relative overlevelse (Sr) i eksperimentelle grupper sammenlignet med kontrollen 10 dage efter smitte. Sr defineres ved hjælp af formelen ' Z + } - xi - ) -ej.
Sr = i=l til 10 i=l til 10 X 100 100 + 100 e.; _ i=l til 10 hvor Sr = den relative overlevelse εχ = procentisk overlevelse efter 10 dage i den eksperimentelle gruppe = antallet af overlevende på dag i i den eksperimentelle gruppe e^ = antallet af overlevende på dag i i kontrolgruppen.
På lignende måde som beskrevet ovenfor blev in vivo-akti viteten overfor EMC-virus bestemt for de følgende forbindelser.
149022 24 “1 VD I I I 1 I I I I I o I I I I I r- vo ^.o S' ,¾ \ tr £
ID
ω-οοοο^ηιητί'νο'^ΓΟΜοοΓνίΓ'-ηνονοο
Η H OJHOJ H 00 rH HroHHCN
m 0 d ΓΟιη|σιΓ^(Μνο(Νοθ'3,ι^ιηνοΗοηιΠ£θΠ'ίΐη <u τ 'T r~ «a· •a· in 'S* >
CO
m|i-iC'iO'3't''-'3<'3'voinot~''roovDOOorovo
Hir~vooor~Lnvor~'d‘‘5),t^(¥,i'i'VD'x>vDvoinir)
rH
•H
+1 ·
ID H
e β 0) S-) i—I IW 0) (1 ο) ε in a) Γί*®θΓΐΝΐΊ'ίΐηώΓ4α)θΐοΗ(Ίη^ΐίΐΌ
HHHHHHHHrHHC<lMCMCNOJCMCS
Ό 0)
C
•Η ·Η •041
Ο (1) p4 I—I
149022 25
Reduktion af virusudbytte i humane polypceller in vitro med 1,3-di-O-(n-hexadecyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol— hydrochlorid.
Et dyrkningsmedium blev fremstillet ved til Eagle's minimale essentielle medium (100 ml) at sætte 100X koncentreret antibiotisk-antimycotisk opløsning (2 ml) 200 mM glutaminopløsning (1 ml) 100X koncentreret opløsning af ikke-essentielle aminosyrer (1 ml) 100 mM natriumpyruvat opløsning (1 ml) og varme-inaktiveret kalvefos ter serum (10%) . Hver fordybning i mikrotiterplader med 96 fordyb-r ninger blev podet med ca. 50.000 menneskelige nasale polypceller suspenderet i 0,2 ml vækstmedium. Pladerne blev så inkuberet i 8-10 dage ved 37°C i en 5% CO2 atmosfære til dannelse af monolag af cellerne.
Efter cellevækstnerioden på 8-10 dage blev sammenløbende monolag på pladerne vasket flere gange med fosfatforpufret saltvand og umiddelbart efter behandlet med 0,2 ml per fordybning af vedligeholdelsesmedium indeholdende 10, 5,0, 1,0, 0,5, 0,1 og 0 yg/ml af den angivne forbindelse. Vedligeholdelsesmediet var identisk med vækstmediet, som er beskrevet i det foregående, med den undtagelse, at mængden af kalvefosterserum er. 5%. Pladerne blev inkuberet i yderligere 18 timer ved 37°C, og monolagene blev derpå vasket flere gange med fosfatforpufret saltvand til fjernelse af den angivne forbindelse, smittet med et materiale indeholdende ca.
1000 gange TCID^q, d.v.s. den dosis, som forårsager 50%'s infektion 1 ubeskyttede kulturer, af vesikular stomatitis-virus (VSV) i en 2 timers adsorptionsperiode ved 37°C, vasket 4 gange med fosfatforpufret saltvand til fjernelse af ikke-adsorberede viruspartikler og forsynet med 0,2 ml per fordybning af vedligeholdelsesmediet. Pladerne blev så inkuberet i 7 timer ved 37°C, og dyrkningsvæsken fra 5-8 reproducerede celler taget fra hver plade, oplagret frosne i prøverør og derpå filtreret for mængden af tilstedeværende infek-tiøs virus i mikrotiterplader af L-929 musefibroblaster. L-929 musekulturerne blev talt mikroskopisk og analyseret ca. 3-4 dage senere med følgende fald i virusudbytte (med hensyn til kontrollen) bestemt for de 5 koncentrationer af den angivne prøveforbindelse:
Procentreduktion af virusudbytte
Koncentration (yg/ml) af den angivne forbindelse.
10 ^0 1^0 0^5 θα 94% 90% 84% 75% <68% 149022 26 På lignende måde som beskrevet ovenfor blev formindskelsen af virusudbytte i humane polypceller in vitro bestemt for de i det følgende angivne forbindelser.
149022 27
pH
u w i—I *"
U H
w o u ω * <u -tf o ϋ o >1 >1 i-l i-t f§ — a) &>
3HH qqqdiDIIIIIQQqq >. JL
e-ssss b ssss h i m\o tp >, tf ^ I ft tf .3 — o
> in H M
C ‘ I I P P ‘tt Q I I I I 1 P P P Q ςϋ o ήοο s & :; s i sssia o> n c (0 -H tn tf .¾ +> η S, g tu (C <U o §
tn Μ o M G H
•H-P'lllllllllllll'll “ £ -H
0) tlH tJ g g a M <U tf g § o ? S. g S >i ft C O O H y ri o
•H W ' + -Η + +1 + I ++I+I+I+ + + + + O-Q 4JW
E " " » f V
£ ί S ;; OI+Q + + + + + + + + + + ++ Q IX) -H i 1
* H| B B P i|i O O
C Q i i hi g 77 +1 Λ Λ n\ n\ rH l”t <D d3 >) >) t n t n g* g1 Η Η φφ (1) ti) rrt rrj I Μ M fi & h tn tn v *
Ti -s -O Φ ffl m u ί ri f f g g k k
Jh H O O i 1 g fe ^ o o
& I I
<u ε (» «> 4 τ) intD ® t!Æcoo)fo^m>(0(,iinit)>co 0000 rrj(rt H td rlHrlrlHNN(N(M(\J (X)<X)|| ® ^ V n n tj 0) w c tu 11/ _7 ,
·Η·Η + , Η H
fp ·· ·· o 0) υ ^
p4 I—I
149022 28
Virkning af 1,3-Di-O-(n-hexadecyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol-hydrochlorid til at inducere cirkulerende interferon.
En blanding af lige vægtmængder af den angivne forbindelse, polysorbat 80 og glycerol blev samlet og derpå homogeniseret i varm 0,14M natriumchlorid indeholdende 0,01M natriumfosfat, pH 7, (PBS).
Den resulterende olie-i-vand-emulsion blev let fortyndet med PBS til administrering.
Hunmus (med legemsvægt 20 til 25 g) blev injiceret intraperi-tonealt (0,5 ml) med en mængde af den i det foregående nævnte fortyndede emulsion indeholdende 25 mg af den angivne forbindelse per kg legemsvægt. 8, 12, 16 og 20 timer efter injektion blev prøver af plasma taget fra 4 mus og samlet. Seriefortyndinger i L-15 (Leibovitz) medium indeholdende 5% kalvefosterserum blev inkuberet i mikrotiterplader natten over ved 37°C på sammenløbne monolag af L-929 musefibroblaster. Monolagene blev så vasket med proteinfrit medium, smittet med 10 gange TCID^Q, d.v.s. den dosis, som forårsager 50%'s infektion i ubeskyttede kulturer, af vesikular stomatitis-virus (VSV) i en adsorptionsperiode på 1 time ved 37°C, vasket, igen behandlet med L-15 medium indeholdende 5% kalvefosterserum og derpå inkuberet igen i 48 timer ved 37°C. L-929 kulturerne blev så talt mikroskopisk for viral cytopatologi og analyseret, og med plasma interferonniveauet blev den reciprokke af plasmafortyndingen, som forårsagede 50%’s beskyttelse af L-929 monolagene, bestemt.
Endnu et forsøg efter den i det foregående nævnte fremgangsmåde med undtagelse af, at musene fik 10 mg af den angivne forbindelse per kg legemsvægt, og prøver af peritoneal vask blev taget fra 4 mus og samlet 6, 9, 12, 15 og 18 timer efter injektion. Prøverne blev taget ved at frilægge peritonealmembranen, injicere 1 ml Hank's afbalancerede saltopløsning indeholdende 100 penicillinenheder/ml og 100 yg streptomycin/ml i peritonealhulen, kort massering af abdomen og påfølgende opsugrdng af peritonealvasken.
De følgende data blev opnået fra disse to forsøg
Interferonmsngder (enhed/ml)
Interferon- Tid (timer) efter injektion kilde_ 68912 15 161820
Plasma - 34 - 67 - 52 - 40
Peritoneal vask <16 - 768 320 448 - 448 149022 29 På lignende måde som beskrevet ovenfor blev evnen til at inducere cirkulerende interferon bestemt for de i det følgende angivne forbindelser..
149022 30 Λ ,— OO CM CM I'- Ο η η| r- m in ιη 6 ti \ 0 Μ ·Η 0) -Ρ , Ό & ιη ιη σι cm σι Φ Φ hi cn ιη σι ο Λ ·η η C a φ -Η Ρ , pi φ CM σι Μ Μ Η d +) η| η •«tf tf1 σι Φ in > Φ •Η £
£ U
0 Φ σι| η oo η m P g Η Η Η Η
Φ ·Η V V V V
ιρ -μ ρ~ φ +> ·0 vol tn οο η η C ·Η ι-Ι r-ι Η Η
Η t-i ν V V V
d γΗ g s \ ο Ρ Ή Φ +ι ο] ο oo ro ο fø ,¾ cm I σι ιο ιο Γ"- φ φ Η Λ *η ti ti Φ ·Η Ρ ιοί in 'tf ρ* ο 3 (DH| ρ ιη Η ό
id -Ρ CM
Φ lp > φ ‘d ν tiοί β p CM ΓΟ ι-Ι 00 00 J" 0 © H l cm r- ro cm Ρ U g Η > ©•η ri ip +) ™ ρ— 2 d) *-« •Ρ Ό co| ο ο oo ο S Ρ C ·Η CM CM Η CM «Η Η ti ν Vs/ ™ ‘£j Η φ a a Η 5.,8,2 W Ρ 2 3 §fi 5 5 ΰ © ti a S ρ ρ ©g ft ft Γβ m νϋ ιυ r-π m 4-ι M-j mi/ . J-l Μ -S® S h 3 3 2
•H -P C C
Λ H H
P -P
o φ -r (PH 1,3 £ 149022 31
Forøgelse af den med polyinosin-’po ly cy tidy linsyre [poly-(I:C)]-inducerede cellulære modstand mod virale infektioner af 1,3-di-O-(n-hexadecyl)-2-0-(3-aminopropyl)-glycerol—hydrochlorid.
Vækstmedium blev fremstillet ved til Eagle's minimum essentielle medium (100 mil at sætte 100X koncentreret antibiotisk-antimycotisk opløsning (2 ml), 200 mM glutaminopløsning (1 ml) og varme-inaktiveret kalvefosterserum (5%). Muse-L-929 fibroblaster blev suspenderet i vækstmedium og hver fordybning i mikrotiterplader med 96 fordybninger blev podet med 0,2 ml af suspensionen indeholdende 20.000 til 30.000 celler. Pladerne blev inkuberet i 2-4 dage ved 37°C i en 5%fs C02 atmosfære til dannelse af monolag af cellerne. Pladerne blev vasket 4 gange med fosfatforpufret saltvand umiddelbart før behandling.
Poly-(I:C) blev fremstillet i koncentrationer på 5,0, 1,0, 0,2 og 0,04 yg/ml i det i det foregående beskrevne medium minus kalveserum. 0,1 ml af hver fortynding blev samlet i et dambrædt-arrangement på L-929 cellemonolagene med 0,1 ml fortyndinger indeholdende 20,0, 4,0, 0,8, 0,16 og 0,032 ug af den angivne forbindelse per ml serumfrit medium. Kontrolfordybninger blev givet enten poly (I:C) eller forbindelsen alene. Pladerne blev inkuberet i 6 timer ved 37°C i en 5% CO^ atmosfære, vasket 4 gange med fosfatforpufret saltvand og forsynet med 0,1 ml per fordybning af vækstmedium indeholdende 2% kalvefosterserum. Efter yderligere 18 timers inkubering blev pladerne vurderet for toksicitet og derpå smittet med 0,1 ml per fordybning af vesikular stomatitisvirus (VSV) suspension indeholdende 10-30 g TCID^q (vævskultur inficeret med dosis, som forårsager 50%'s infektion). Pladerne blev inkuberet i yderligere 3-4. dage og derpå vurderet mikroskopisk for cytopatogen effekt (CPE). Celler beskyttet for virusinfektion var frie for CPE. Den minimale beskyttende dosis (MPD) af poly—(I:C) alene blev noteret, og mængden af forbedret eller forøget anti-viral virkning forårsaget ved kombination med den angivne forbindelse opført for hvert fortyndingsniveau og forbindelsen.
Forøgelse af poly—(I:C)-induceret cellulær modstand mod virale infektioner.
Koncentration (yg/ml) af forbindelsen_ 20,0 4,0 0,8 0,16 0,032
125X 125X 125X 5X <5X
Bemærk: kombination af poly— (I:C) med forbindelsen giver samme anti-virale virkning som forøget poly— (I sC) koncentration med det angivne antal gange.
32 143022 På lignende måde som beskrevet ovenfor blev forøgelsen af den cellulære modstand induceret med poly-(I:C) overfor virale infektioner bestemt med de i det følgende angivne forbindelser.
149022 33 g
Poly(I:C) Forøgelse
Forbindelse fremstil- Koncentration (ug/ml) let i eksempel nr. 20 4,0 0 /8 6 + + 7 + + - 9 + + + 10 + + + 11 + + ± 12 + + + 13 + + + 14' + + + 15 + + + 16 + + 17 - 18 + + + 19 + + + 20 + + 21 + 22 + + 23 + + 24 + + 25 + + + 26 + + - 27 + + + 28 + + - (a) += >5X forøgelse + = <^-/5X forøgelse -= <5X forøgelse

Claims (2)

149022
1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af aminderivater af di-O-(n-alkyl- eller alkenyl)-glyceroler med formlen R1-0-CH9 1 z 3 CH-O-Y-NHR I r2-o-ch2 eller <pi2-0-Y-NHR3 R1-0-CH II r2-o-ch2 eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, hvor R og R hver er udvalgt fra gruppen bestående af normale alkyl-grupper med fra 12-20 carbonatomer og normale alkenylgrupper, hvor dobbeltbindingen ikke er i 1-stillingen, med fra 12-20 carbonatomer, Y er udvalgt fra gruppen bestående af alkylengrupper med fra 2-4 carbonatomer, hvor de to valenser er på forskellige carbonatomer, ortho-, meta- og paraphenylendimethylen, og 1>—λ' hvor q er et helt tal fra 1-3, og den venstre binding er forbundet til 0, og R er udvalgt fra gruppen bestående af et hydrogenatom og alkyl-grupper med fra 2-4 carbonatomer, kendetegnet ved, at man til opnåelse af en forbindelse med formlen I eller II, hvor R er et hydrogenatom, a) reducerer en forbindelse med formlen R1-°-(j:H2 (jlH-O-Y * -CN VI r2-o-ch2 eller CH--0-Y1-CN 1 1 2 Pv-O-CH VII
2. R -O-CH hvor Y1 er udvalgt fra gruppen bestående af alkylengrupper med fra 1-3 carbonatomer,
DK321478A 1977-08-18 1978-07-18 Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminderivater af di-o-(n-alkyl- eller alkenyl)-glyceroler eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf DK149022C (da)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK311083A DK149331C (da) 1977-08-18 1983-07-05 Analogifremgangsmaade til fremstilling af piperidinderivater afdi-0-(n-alkyl- eller n-alkenyl)-propandiol eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf
DK310983A DK148354C (da) 1977-08-18 1983-07-05 Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminderivater af di-o-(n-alkyl)-glyceroler eller syreadditionssalte deraf

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US82553577 1977-08-18
US05/825,535 US4166132A (en) 1977-08-18 1977-08-18 Antiviral amine derivatives of glycerol and propanediols

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK321478A DK321478A (da) 1979-02-19
DK149022B true DK149022B (da) 1985-12-23
DK149022C DK149022C (da) 1986-10-13

Family

ID=25244254

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK321478A DK149022C (da) 1977-08-18 1978-07-18 Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminderivater af di-o-(n-alkyl- eller alkenyl)-glyceroler eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf

Country Status (35)

Country Link
US (1) US4166132A (da)
JP (3) JPS5829939B2 (da)
AR (2) AR219543A1 (da)
AT (1) AT363922B (da)
AU (1) AU503079B1 (da)
BE (1) BE869793A (da)
CA (1) CA1102354A (da)
CH (1) CH634544A5 (da)
CS (1) CS208155B2 (da)
DD (2) DD143902A5 (da)
DE (3) DE2835369C2 (da)
DK (1) DK149022C (da)
EG (1) EG13438A (da)
ES (3) ES472659A1 (da)
FI (1) FI67687C (da)
FR (2) FR2421871A1 (da)
GB (1) GB2005248B (da)
GR (1) GR73154B (da)
HU (2) HU177884B (da)
IE (1) IE47151B1 (da)
IL (1) IL55370A (da)
IN (1) IN148386B (da)
IT (1) IT1098280B (da)
LU (1) LU80114A1 (da)
MX (1) MX6091E (da)
NL (1) NL176670C (da)
NO (3) NO147300C (da)
NZ (1) NZ188174A (da)
PH (4) PH16469A (da)
PL (3) PL116119B1 (da)
PT (1) PT68426A (da)
SE (3) SE447823B (da)
SU (3) SU893128A3 (da)
YU (3) YU41115B (da)
ZA (1) ZA783855B (da)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4173641A (en) * 1978-05-15 1979-11-06 Pfizer Inc. Di-O-n-alkyl glycerol derivatives as immune stimulants
YU41932B (en) * 1979-07-09 1988-02-29 Pfizer Process for obtaining substituted piperazines and piperidi
US4312877A (en) * 1979-07-09 1982-01-26 Pfizer Inc. 1-(2-Hydroxy-3-n-alkoxypropyl)-4-substituted piperidines, pharmaceutical compositions, thereof and use thereof
US4255426A (en) * 1979-07-09 1981-03-10 Pfizer Inc. 1-(2-Hydroxy-3-n-alkoxypropyl)-4-substituted-piperazines and piperidines
EP0094586A3 (en) * 1982-05-13 1984-06-06 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Glycerol derivatives, process for preparing same and pharmaceutical composition containing same
JPS5988447A (ja) * 1982-11-11 1984-05-22 Ono Pharmaceut Co Ltd グリセリン誘導体、その製造方法及びその誘導体を含有する薬剤
JPS60100544A (ja) * 1983-11-08 1985-06-04 Ono Pharmaceut Co Ltd 新規なグリセリン誘導体，その製造方法及びその誘導体を含有する薬剤
JPS60104066A (ja) * 1983-11-10 1985-06-08 Ono Pharmaceut Co Ltd グリセリン誘導体
JPS60105650A (ja) * 1983-11-14 1985-06-11 Ono Pharmaceut Co Ltd グリセリン誘導体、その製造方法及びその誘導体を含有する薬剤
JPS6164353A (ja) * 1984-09-04 1986-04-02 川崎重工業株式会社 湿式ミルの運転方法
US5550289A (en) * 1985-01-07 1996-08-27 Syntex (U.S.A.) Inc. N-(1,(1-1)-dialkyloxy)-and N-(1,(1-1)-dialkenyloxy alk-1-yl-N-N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor
US4897355A (en) * 1985-01-07 1990-01-30 Syntex (U.S.A.) Inc. N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor
CA1291036C (en) * 1986-04-23 1991-10-22 Edwin I. Stoltz Nasal administration of drugs
US4751245A (en) * 1986-06-25 1988-06-14 E. R. Squibb & Sons, Inc. Antifungal derivatives of N-(6,6-dimethyl-2-hepten-4-ynyl)-1-naphthalenemethanamine and method of using same
JPS63166237U (da) * 1987-04-16 1988-10-28
US5093198A (en) * 1987-06-19 1992-03-03 Temple University Adjuvant-enhanced sustained release composition and method for making
AU614636B2 (en) * 1988-07-21 1991-09-05 Ciba Specialty Chemicals Holding Inc. Corrosion inhibition
US5176850A (en) * 1988-07-21 1993-01-05 Ciba-Geigy Corporation Substituted glycerol compounds
ZA899436B (en) * 1988-12-12 1990-08-29 Ciba Geigy Piperidine derivatives
JP2604268B2 (ja) * 1990-04-09 1997-04-30 富士写真フイルム株式会社 ペプチド誘導体両親媒性化合物、その中間体、ペプチド誘導体両親媒性化合物を用いたリポソームおよび薄膜
JPH0439597A (ja) * 1990-06-01 1992-02-10 Corona:Kk 給湯装置の熱交換器
DE19521412A1 (de) * 1995-06-14 1996-12-19 Boehringer Mannheim Gmbh Neue kationische und polykationische Amphiphile, diese enthaltende Reagenzien und deren Verwendung
DE19755268A1 (de) * 1997-12-12 1999-06-17 Merck Patent Gmbh Benzamidinderivate
GB0106041D0 (en) * 2001-03-12 2001-05-02 Cancer Res Ventures Ltd Lipids and liposomes
US7622541B2 (en) * 2003-01-17 2009-11-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Polyurethane coating
US7615604B2 (en) * 2003-01-17 2009-11-10 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Diols formed by ring-opening of epoxies
WO2009129387A2 (en) * 2008-04-16 2009-10-22 Abbott Laboratories Cationic lipids and uses thereof
WO2009129395A1 (en) * 2008-04-16 2009-10-22 Abbott Laboratories Cationic lipids and uses thereof
WO2009129385A1 (en) * 2008-04-16 2009-10-22 Abbott Laboratories Cationic lipids and uses thereof
EP2348864A4 (en) 2008-10-08 2013-07-31 Vascular Biogenics Ltd OXIDIZED THIOPHOSPHOLIPID COMPOUNDS AND USES THEREOF
EP2826370A3 (en) * 2008-11-06 2015-04-08 Vascular Biogenics Ltd. Oxidized lipid compounds and uses thereof
CA3009891C (en) 2009-12-23 2020-09-15 Novartis Ag Lipids, lipid compositions, and methods of using them
CN106794141B (zh) 2014-07-16 2021-05-28 诺华股份有限公司 将核酸包封在脂质纳米粒主体中的方法
EP3223824B1 (en) 2014-11-26 2021-01-06 Vascular Biogenics Ltd. Oxidized lipids and treatment or prevention of fibrosis
US9771385B2 (en) 2014-11-26 2017-09-26 Vascular Biogenics Ltd. Oxidized lipids

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2738351A (en) * 1952-08-02 1956-03-13 Bristol Lab Inc Substituted glycerol ethers
GB1013603A (en) * 1961-06-08 1965-12-15 Sandoz Ltd Level-dyeing process
GB1369248A (en) * 1970-08-07 1974-10-02 Pfizer Amides the preparation thereof and their use in pharmacjeutical compositions
US3960958A (en) * 1974-08-26 1976-06-01 Pfizer Inc. 3,4- AND 3,5-Dialkoxybenzylamines
US4025555A (en) * 1976-07-23 1977-05-24 Pfizer Inc. Aromatic amidines as antiviral agents in animals

Also Published As

Publication number Publication date
NL7808565A (nl) 1979-02-20
YU262982A (en) 1983-04-30
SE463456B (sv) 1990-11-26
PH18067A (en) 1985-03-18
IL55370A0 (en) 1978-10-31
BE869793A (fr) 1979-02-19
SE8401850L (sv) 1984-04-03
AR218733A1 (es) 1980-06-30
EG13438A (en) 1981-12-31
YU41115B (en) 1986-12-31
ES472659A1 (es) 1979-10-16
IN148386B (da) 1981-02-07
CH634544A5 (fr) 1983-02-15
DE2857416C2 (de) 1984-05-24
NO813324L (no) 1979-02-20
FI782518A7 (fi) 1979-02-19
IT7826813A0 (it) 1978-08-17
SE447823B (sv) 1986-12-15
PL115777B1 (en) 1981-04-30
AU503079B1 (en) 1979-08-23
FR2414038A1 (fr) 1979-08-03
NO782791L (no) 1979-02-20
MX6091E (es) 1984-11-12
JPS5929582B2 (ja) 1984-07-21
SU850005A3 (ru) 1981-07-23
HU181238B (en) 1983-06-28
SE8401849D0 (sv) 1984-04-03
AT363922B (de) 1981-09-10
FI67687B (fi) 1985-01-31
SU906363A3 (ru) 1982-02-15
US4166132A (en) 1979-08-28
GB2005248A (en) 1979-04-19
FR2421871B1 (da) 1982-07-02
DE2857415C2 (de) 1985-02-07
NZ188174A (en) 1984-07-31
GR73154B (da) 1984-02-13
JPS57167966A (en) 1982-10-16
PT68426A (en) 1978-09-01
ES479616A1 (es) 1979-08-01
DD148951A5 (de) 1981-06-17
HU177884B (en) 1982-01-28
JPS5441807A (en) 1979-04-03
CA1102354A (en) 1981-06-02
NL176670B (nl) 1984-12-17
DE2835369A1 (de) 1979-02-22
NO813325L (no) 1979-02-20
GB2005248B (en) 1982-03-24
IE781658L (en) 1979-02-18
IL55370A (en) 1981-11-30
JPS57167913A (en) 1982-10-16
YU263082A (en) 1983-04-30
JPS5924144B2 (ja) 1984-06-07
FR2421871A1 (fr) 1979-11-02
AR219543A1 (es) 1980-08-29
SE7808701L (sv) 1979-02-19
NO147300B (no) 1982-12-06
PH18111A (en) 1985-03-22
SE8401850D0 (sv) 1984-04-03
DK149022C (da) 1986-10-13
CS208155B2 (en) 1981-08-31
ES479615A1 (es) 1979-08-01
DD143902A5 (de) 1980-09-17
LU80114A1 (fr) 1980-04-21
ATA600278A (de) 1981-02-15
NL176670C (nl) 1985-05-17
PL209092A1 (pl) 1979-06-04
FI67687C (fi) 1985-05-10
NO147670B (no) 1983-02-14
SE8401849L (sv) 1984-04-03
NO154344C (no) 1986-09-03
FR2414038B1 (da) 1982-07-02
IT1098280B (it) 1985-09-07
PH16469A (en) 1983-10-21
PH17789A (en) 1984-12-13
ZA783855B (en) 1979-07-25
YU41276B (en) 1986-12-31
DK321478A (da) 1979-02-19
YU197478A (en) 1983-02-28
JPS5829939B2 (ja) 1983-06-25
YU41277B (en) 1986-12-31
SU893128A3 (ru) 1981-12-23
NO154344B (no) 1986-05-26
PL116434B1 (en) 1981-06-30
NO147300C (no) 1983-03-16
NO147670C (no) 1983-05-25
PL116119B1 (en) 1981-05-30
DE2835369C2 (de) 1982-12-02
IE47151B1 (en) 1983-12-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK149022B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminderivater af di-o-(n-alkyl- eller alkenyl)-glyceroler eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf
US5576355A (en) Diamondoid derivatives for pharmaceutical use
US6030960A (en) Method of treating hepatitis virus infections
US20050228013A1 (en) Azabenzofuran substituted thioureas; inhibitors of viral replication
US4766151A (en) Ethers and oxime ethers of alkylamino alcohols as medicaments and novel products, and processes for their preparation
FI67556C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya saosom antivirala medelanvaendbara substituerade acetofenonderivat
JPH01128959A (ja) オルト−置換カルボン酸ベンジルエステル、該化合物を含有する殺菌剤及び殺菌法
US4324916A (en) Decaprenylamine derivatives
PL97347B1 (pl) Sposob wytwarzania nowych 2-fenylohydrazyno-tiazolin lub-tiazyn
US4262021A (en) Antiviral amine and amidine derivatives of glycerol and propanediols
US4215146A (en) Antiviral amine derivatives of glycerol and propanediols
EP1892245A2 (en) Antineoplastic compounds and pharmaceutical compositions thereof
US4193999A (en) Antiviral amine derivatives of propanediols
JP3045354B2 (ja) チオキサンテノン類およびその抗腫瘍剤
US4318925A (en) 4-Homoisotwistane derivatives
US6251898B1 (en) Medical use of fluorenone derivatives for treating and preventing brain and spinal injury
CA1307222C (en) Thiadiazole antiviral agents
CA1121358A (en) Antiviral amine and amidine derivatives of glycerol and propanediols
US3635971A (en) 3 (3 4-dihydro-3-oxo-2-quinoxalinyl) propionamides
FI85140C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara n-(1h-indol-4-yl)-bensamidderivat.
US4283422A (en) 3-Amino-4-homoisotwistane derivatives
US3621033A (en) 5-hydroxyamino-1,3-dioxanes
KR830000465B1 (ko) 항바이러스제인 글리세롤 및 프로판디올의 아민 및 아미딘유도체의 제조방법
DK149331B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af piperidinderivater afdi-0-(n-alkyl- eller n-alkenyl)-propandiol eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf
RU1792417C (ru) Способ получени 1,4-бис-замещенных 2,6,7-триоксабицикло (2,2,2)октанов

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed