DK173936B1

DK173936B1 - Phenolsubstituerede gem-diphosphonatderivater, fremgangsmåder til fremstilling heraf og farmaceutiske sammensætninger indeholdende disse

Info

Publication number: DK173936B1
Application number: DK198901481A
Authority: DK
Inventors: Lan Nguyen; Eric Niesor; Hieu Phan; Pierre Maechler; Craig Bentzen
Original assignee: Symphar Sa
Priority date: 1988-03-31
Filing date: 1989-03-28
Publication date: 2002-02-25
Also published as: JPH0222285A; KR0147830B1; PT90175A; NZ228516A; MY103850A; US5128331A; IL89649A; CN1086820A; HU203556B; JPH0822865B2; PT90175B; FI92933B; GR900300002T1; NO891317L; NO891317D0; US5043330A; ZA892126B; CN1024555C; EP0339237A3; AR247569A1

Description

DK 173936 B1

Den foreliggende opfindelse angår en hidtil ukendt klasse af forbindelser, gem-diphosphonatde-rivater, såvel som fremgangsmåder til fremstilling af sådanne forbindelser. Den angår endvidere farmaceutiske sammensætninger indeholdende ovennævnte forbindelser især til behandling af hyperlipidæmi.

5

Mange epidemiologiske undersøgelser har vist, at personer med høje serumkolesterolniveauer har en stor risiko for at udvikle koronararteriesygdomme. Den overbevisende og definitive påvisning af, at sænkning af serumkolesterol ved hjælp af hypokolesterolæmiske lægemidler reducerer risikoen for koronarhjertesygdomme, fremgår af "Lipid Research Clinics Coronary 10 Prevention Trial Reports" (The Lipid Research Clinics Coronary Primary Prevention Trial results. I. Reduction in incidence of coronary heart disease. Journal of the American Medical Association 251T p. 351-364, 1984. The Lipid Research Clinics Coronary Primary Prevention Trial results. II. The relationship of reduction in incidence of coronary heart disease to cholesterol lowering. Journal of the American Medical Association 231, p. 365-374,1984).

15

Desuden viste den seneste rapport fra Helsinki-undersøgelsen, at gemfibroziibehandllng, som var ledsaget af en modifikation af serumlipoproteinniveauerne og nedsættelse af plasmatrigly-cerider, reducerer forekomsten af koronar hjertesygdom hos mænd med dislipæmi (The New England Journal of Medicine 312. (20), p. 1237-1245,1987).

20

Phenolsubstituerede gem-diphosphonater er blevet afprøvet og viste sig at være kraftigt virkende hypolipidæmiske og lipidændrende midler, yderligere fandtes nogle at besidde hypotensiv aktivitet. Disse gem-diphosphonater er derfor potentielt nyttige midler til behandling af dys-lipæmi og dermed forbundne kardiovaskulære sygdomme.

25 H. Gross et al. har beskrevet syntesen af (2,5-dibutyl-4-hydroxyphenyl)methyIiden-disphos-phonsyre og dens Me, Et og PR estere i Journal f. prakt. Chemie 312 (6), p. 890-896 (1975); ibid. 313 (3), p. 403-408 (1976) og ibid. 32Q (2), p. 344-350 (1978). Der blev ikke angivet nogen potentiel anvendelse af disse forbindelser i artiklerne.

30 W. Lehnert beskrev i Tetrahedron 3Q. P- 301-305 (1974) en fremgangsmåde til fremstilling af enkle phenylethenyliden-diphosphonat- og -carboxyphosphonatestere, uden nogen oplysning om deres potentielle anvendelse.

35 I US-A-4,696,920 (1987) til Symphar S.A. beskrives fremstillingen af tetraethyl- og tetrabutyt-2-(3,5-dibutyl-4-hydroxy)-benzyl-1,3-propylidendiphosphonat og deres mulige anvendelse til behandling af kardiovaskulære sygdomme, som er fremkaldt af eller står i forbindelse med dysfunktion af de langsomme calciumkanaler.

2 DK 173936 B1 I GB-A-2,043,072 (1979) til Symphar S.A. beskrives syntesen af usubstituerede phenyl- og phenoxy-alkyliden-1,1-disphosphonsyrer og Me og Et estere og deres anvendelse som antiathe-rosklerosemldler.

5 I den eksperimentelle del nedenfor er forbindelserne ifølge opfindelsen sammenlignet med den kendte tekniks forbindelser.

Den foreliggende opfindelse angår forbindelser med formlen (I): io ^ p«»*1*2

χ3°—A “ f (O

P(0)Z3Z4 hvor: Z1, Z2, Z3 og Z4 er ens eller forskellige og betyder 15 - OR, hvor R er H eller C-j^-alkyl, - OM, hvor M er en alkali- eller jordalkalimetalion eller en ammoniumgruppe N(R)4, hvor R har den ovenfor angivne betydning, eller . N(R)2> hvor R ligeledes har den ovenfor angivne betydning, eller Z\ Z2 og Z3, Z4 tilsammen danner en C2_8-alkylidendioxyring; 20 χ1 og X2 er ens eller forskellige og er C-j^-alkyl; X3 er H, C-j_4-aIkyl, (C(O)Ci^-alkyl eller C(0)NHC^-alkyl; A er CH=CH-CH2. (CH2)n, S. S02, S(CH2)n, S02(CH2)n eller (CH=CH)k-(CH2)d-CH, hvor n er et helt tal fra 1 til 7, k er 0 eller 1, og d er et helt tal fra 0 til 4; B er H eller C^-alkyl, og 25 t er 0 eller 1, idet t dog kun er 0, når A er (CH=CH)k-(CH2)d-CH, hvor k og d har de ovenfor angivne betydninger.

Forbindelserne med formlen (I) omfatter de phenolsubstituerede alkylidfindiphosphonater (la) og de phenolsubstituerede alkeoylidfin-diphosphonater (Ib) 30 χ1 P(0)21Z2 X30-^^A.C-B (la) X2 P(0)Z3Z4 35 Xlv^ /P(0)Z1Z2 x3°HC^(CH=CHV(CVd-CH=C (!«>) 7^ P(0)Z3Z4 hvor χ1, X2, X3, A, B, k, d, z1, Z2, Z3, Z4 har den ovenfor angivne betydning.

3 DK 173936 B1

Foirbindelser med strukturen (la) omfatter fx sådanne, hvor: - χ3 er hydrogen, - A er CH=CH-CH2, (CH2)n. S, S02, $-(CH2)n, S02-(CH2)n, hvor n er 1-7, 5 - Z\ Z2. z3, Z4 er ens eller forskellige og er OH, alkoxygrupper med 1-8 carbonatomer, og det ene af eller begge parrene Z1.Z2 og Z^, Z4 tilsammen danner en alkylidendioxygruppe med 2-8 carbonatomer.

Forbindelserne med strukturen (Ib) omfatter fx sådanne, hvor 10 - χ3 er hydrogen, - k er nul eller 1, og d er nul til 4, - Z1.Z2,Z3,Z4 er ens eller forskellige og er OH, alkoxygrupper med 1-8 carbonatomer, eller det ene af eller begge parrene Z1, Z2, Z^ og Z4 tilsammen danner en alkylidendioxygruppe 15 med 2-8 carbonatomer.

Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (I)

Den foreliggende opfindelse angår også fremgangsmåder til fremstilling af gem-diphosphonater med formlerne (la) og (Ib). Fremgangsmåderne er ejendommelige ved det i de kendetegnede 20 dele af krav 6 og krav 9-15 angivne.

Den eksperimentdie fremgangsmåde til fremstilling af (la) består i at omsætte diphosphonatfor-bindelsen III med en base såsom natriumhydrid, metallisk natrium, natriumalkoxid, n-butyllithium eller lithiumdiisopropylamid. Udgangsproduktet II omsættes derefter med anlonen af den såle· 25 des in situ dannede forbindelse III til dannelse af det substituerede diphosphonat (la). Reaktionen finder sted i opløsningsmidler såsom hexan, heptan, benzen, toluen, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan, methyltertiærbutylether eller N-N-dimethylformamid. Opløsningsmidlerne kan anvendes rene eller som en blanding afhængig af den ønskede opløsningsmiddelpolaritet. Temperaturområdet for omsætningen er mellem -78°C og kogepunktet af opløsnings-30 midlet eller opløsningsmiddelblandingen. Reaktionstiden varierer mellem adskillige timer og adskillige dage. I det tilfælde, hvor A er svovlatom, er den egnede udgangsforbindelse II det bis-substitueret phenol)-disulfid, og den foretrukne base er n-butyllithium.

Fremgangsmåden til fremstilling af (Ib) består i at kondensere et egnet aldehyd IV med di-35 phosphonatforbindelsen V under anvendelse af titantetrachlorid og en tertiær amin, såsom methylmorpholin eller pyridin, som katalysatorer. Omsætningen gennemføres i en ether som opløsningsmiddel, fx i tetrahydrofuran, dioxan eller dimethoxyethan. Reaktionsmediets polaritet kan modificeres passende ved tilsætning af et upoiært opløsningsmiddel såsom tetrachlorme- 4 DK 173936 B1 than. Temperaturen under omsætningen kan variere mellem -15°C og 40®C, fortrinsvis mellem 0°C og 30°C.

De opnåede alkenylidendlphosphonater (Ib) kan hydrogeneres til de tilsvarende alkylidendi-5 phosphonater (la), hvor B = Η. I det særlige tilfælde, hvor strukturen (Ib) indeholder to dobbeltbindinger, fvs. når k = 1, kan reduktionsbetingelserne tilpasses til dannelse af en af de følgende to forbindelser (la): den delvis mættede forbindelse, hvor A= (CH=CH)|<-(CH2)d-CH2, B = H, eller den fuldstændigt mættede forbindelse, hvor A = (CI^CI^k-iCH^d-Cl·^, B = H.

10 Den delvis mættede forbindelse (la), hvor A= (CH=CH)|(-(CH2)c|-CH2, B = H, kan fremstilles som det dominerende produkt, når (Ib), hvor k = 1, reduceres med et komplekst hydridreagens, såsom natriumborhydrid eller lithiumborhydrid, i et polært opløsningsmiddel, som kan være methanol, ethanol, ved en temperatur mellem -15°C og stuetemperatur.

15 Den fuldstændigt mættede forbindelse (la), hvor A = (CHtøChtøJk-iCKtøJd-Chtø. B = H, kan opnås fra (Ib), hvor k = 1, ved reduktion med et overskud af et komplekst hydridreagens, såsom natriumborhydrid eller lithiumborhydrid i methanol eller ethanol som opløsningsmiddel ved en temperatur mellem stuetemperatur og tilbagesvalingstemperatur. En anden hensigtsmæssig reduktionsmetode er katalytisk hydrogenering under anvendelse af palladium eller platin adsor-20 beret på aktivt kul som katalysator. Egnede opløsningsmidler omfatter methanol, ethanol, dimethoxyethan, dioxan, tetrahydrofuran og eddikesyre. Reduktionen gennemføres ved stuetemperatur og et tryk på mellem 1 og 4 atm.

De ved en af de på side 5 beskrevne fremgangsmåder opnåede forbindelser (I) kan derivatise-25 res til andre produkter med andre estergrupper. En sådan fremgangsmåde omfatter hydrolyse af tetraethylesterforbindelserne (I), Z*1- 2^ = OEt, med saltsyre eller bromtrimethylsilan/vand til dannelse af de tilsvarende diphosphonsyrer (I), Z1-2^ = OH. De sidstnævnte forbindelser alky-leres under anvendelse af trialkylorthoformater til dannelse af de tilsvarende tetraalkylestere.

En alternativ fremgangsmåde består i omsætning af tetraethylesterderivatet med bromtri-30 methylsilan/phosphorpentachlorid til dannelse af diphosphonyltetrachloridet. Foresteringen af dette mellemrpodukt med forskellige alkoholer eller dioler giver nye derivater (i), hvor substitu-entparrene Z\ Z? og Z®, Z* kan være individuelle alkoxygrupper eller kan danne alkylidendi-oxygrupper.

35 De ovenfor beskrevne syntesefremgangsmåder er vist på side 5 og 6.

5 DK 173936 B1 CM U* .. _ 5 S S "k • o O ^ Λ

X> w w O O

— Q. . - Q. X W CM

cm —c a.—-o —o. x x II O I 4 o =-V - =~ 't5 — XJ +J o

_. I JX I CM

λ: csj 3 ^cr X

H CO Λ X Ό ’’v . . .

MM CM <-> <U —5s* ^

-r· „ cr χ V

ST—0 — 0. cm ^ i . «"J

i xx x

«r o O r-*. O

T* *—. ϋ ii «—* cm i

, η XXJ x CM

m i-4 o *—· x

i ^ Λ\ *- -* ^ w w I O

AVA _^cm Z^X 5 < Ί< I Y VC^t^ / I \ x

(*P Ό 1-1 ^ I CM / f. )\ X

— x I x \V y/

UJ CM O AVyS

Q X «*> . C _ '——'. *7? *—*· Η . % X V w η Η I (M id X ^ \ r'r_ O «—' ι/i i α \ pp (o

CJ3 fiC \ -* JwC X

z -x \ ω 3

<C X \ 1— -O

ej? « o \ a> o> i s m H el- cf \</> S.

IjlI JS X r-- \ o: o u ε \ π U. >-r *r- « \

UJ II , \ I

00 <*i \ 1— mm \ X ri CO Ol \ >- Μ M ·—< o \

^ 0030·"· CSJ ** V

S I w ^ XM M ^ °* V °* ^ I ΊΜ ‘Tsl ^ * Ϊ S S ^ ^

4-> Q. — CJ—Q. Π CO

C t- Μ M

«- "c 3 S 3: S

_ ** _c ΪΓ-5-Λ CM

* C r-. I x

UJ J. <0 II CM O

M C 1—1 O XI

= --° =-Δ V -? t — "g1 \j -? nT*

Ό O O . CM CJ

Λ CM SC *—

DD a — p— X O I

C *t XJ tJ —- * ··" =7 T, t« - i- Y ‘jéx ^ < ΛΗΚ/' -~T 5

I L \T )) >4- h X* O X

4J / I-, \ M xNt/ RS φ U > *1 O

</) / /|\\ Μ I II Μ X ^ E (Cj) - Or- g ϋ ^ SC» C 3 w i

1- ri I CM 1- i— / I —\ //K\ X

x 1 x o r- ii //T\\ (C J/ <a " **S m ^ * volt μ (/) /1 T Λ ri I CM x <o « E i- π I cm x I x n C r— (VOX I X On a> <-> s- > O <o i— o n °x ^ • >· · DK 173936 B1 6 ί ο

C\J 5E

-M en'4 CM ^ irs

~ η ~ -Ϊ4 ^<oM

o '_' o ΓΜ '—- M

. . g ._. ¢0 rv —O — CL. «β· O --- O Is· I M —' I « K o.— o—cl co l φ = i-f CO X X tf- c

X (O 0J

nf n > t \ ~ \ irs r— -M \ -Λ Q. >, fj · g \ -* ns 'TF Λ +* i— V) ji o 0\ r— S- Ό fj lf_ JE \ o <0

5- IQ O O \ ·>- > C

o ·>- sc j* \ o i i) £ Jr ti ^ \ — ^ O < \ ω \ o «c ^ fj f>

rr> CM ^ CM CM ^ CM

CD X ffl I t— CQ r— z ro w co o «— o < O I O O I o 3 o--o—o. o--o—a.

3E ‘ 1 ω < < cc

?Z pf N ·—« I CM

°° X 1 X X * X

O o

CO CO

X X

\ O P

. \ # / J_\ CO CO / <D \ 4) <U / ,_ \ :ε ς: / _ \ v i- / tn *” \ C/0 OO / r- <U \ u u / o \CD CO / O.

3: \ ’-y 00 CM +-» CM M *—* 4-»

Ui CO UJ

CO w CO

O I O

□__O — O.

<å ‘

—· CM

X ^ X

CO

X

7 DK 173936 B1 Når A er S-(CH2)n eller 0-(CH2)n. kan (la) også fremstilles ved omsætning af bromalkylidendiphosphonat VIII med henholdsvis thiohydroquinon- VI eller hydroquinonderivatet VII under tilstedeværelse afen base.

5 X1 x3o —£Λ"λ1-$-η + X2'*^ P(0)Z1Z2 I Base 10 VI Br-(CH-) -CH -> el1er 1 1 34 χ P(0)Z3Z4

15 X

VII

χ1 f(0)zlz2 x3°—£3-S'tCH2,'>‘CH <Ia· A=‘S(CH2)n) 20 X2 P(0)Z3Z4 el 1 er χ1 P(0)Z1Z2 25 (Ia* X2 P(0)Z3Z4 Når A er S-(CH2>n. hvor a 3, omfatter en yderligere fremgangsmåde til fremstilling af (la) 30 omsætning af VI med et alkenylidendiphosphonat IX under tilstedeværelse af et radikalffembringende middel, såsom benzoylperoxid eller hydrogenperoxid.

8 DK 173936 B1 x V\ Ρ(0)Ζ2Ζ2 χ3°ΐ@-$-Η + --- 5 x P(0)Z3Z4

VI IX

χ1ν\ Ρ(0)ζ!ζ2 10 X P(0)Z3Z4 (la), A = S-(CH2)n, m+2 = π 15 Sulfidgruppen omdannes til højere oxidationstrin, dvs. sulfongrupper ved anvendelse af et oxidationsmiddel, der kan være en peroxysyre, såsom m-chlorperoxybenzoesyre eller et peroxidsalt, såsom kaliumpermanganat eller kaliumhydrogenpersulfat.

χ1 PiojzV

x P(0)ZJZ4 25 χΙν~. S nonh* 0 P(0)Z3Z4 30 Forbindelser (I), hvor X3 er forskellig fra H, kan fremstilles ved anvendelse af den tilsvarende udgangsforbindelse II, hvor X3 = H. En alternativ fremgangsmåde omfatter derivatisering af den phenoliske -OH-gruppe i forbindelser (I) ved standardsyntesefremgangsmåder: alkylering, ved omsætning af phenoxidanionen med alkyleringsmidler, såsom alkylhalid eller dialkylsulfat, forestering under anvendelse af acyleringsmidler, såsom syreanhydrider eller acylhalider, til 35 dannelse af de tilsvarende estere, eller ved anvendelse af isocyanater til dannelse af de tilsvarende carbamater.

9 DK 173936 B1

Udgangsforbindelserne V, som ikke er kommercielt tilgængelige, fremstilles ved en af de to følgende fremgangsmåder: - Arbuzovreaktion mellem et alkylphosphit og et halogenmethylphosphonat.

5 1 2 , , ffoiz^2

Z Z P-O-Alkyl + Hal-CH?-P(0)Z3Z4 --> CH

4 I 2 m M

P(0)Z3Z4 i

V

10 - Omestering af methylendiphosphonatethylesteren.

P(0)(0Et)2 P(0)C12 P(0>Z1Z2 ,2 -» fH2 -=► CH, 15 P(0)(0Et)j PfO)Cl2 ko)Z3Z4

V

Ved disse to fremgangsmåder frembringes nye udgangsforbindelser V, hvor substituenterne Z1, 20 Z2, Z3, Z4 kan være individuelle alkoxygrupper, eller hvor substituentparrent , Z2 og/eller Z3· Z4 kan danne alkylidendioxyringe.

Strukturen af forbindelser med formlen (I) bestemmes ved elementaranalyse, infrarød (IR), masse (MS) og nuclearmagnetisk resonans (NMR) spektroskopi. Renheden af forbindelserne 25 verificeres ved tyndtlagskromatografi (Silicagel, CH2Cl2/MeOH eller CHC^/MeOH eluentblan-dinger), gas/væske-kromatografi (methylsiliconesøjle) eller højtydende væskekromatografi (HPLC) (octadecylsilan Cfg modstrømssøjle).

De i den foreliggende ansøgning benyttede forkortelser er som følger: 30 I tabel 1 og 2 er n- normal, i- er iso, see- er sekunder, t- er tertiær. I NMR-spektrene er s singlet, d dublet, t triplet, m multiplet. Temperaturerne er målt i grader celsius, og smeltepunkterne er ukorrigerede. Kogepunkterne refererer til værdier opnået ved destillation i en kort kolonne og er udført i et destillationsapparat af kuglerørstypen (Kugelrohr).

Opfindelsen vil blive yderligere belyst ved eksemplerne 1-23, som er typiske for de anvendte syntesefremgangsmåder.

35

Eksempel 1 (forbindelse 7)

Tetrabutyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat 10 DK 173936 B1 t8V-X ?°3"Bu2

5 H0-(O)'CH2iH

ti)-7 P°3"Bu2

En opløsning af 3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxybenzylbromid (2,48 g, 8,3 mmol) i 30 ml dioxan blev 10 sat til en opløsning af 12,5 mmol natriumtetrabutylmethylendiphosphonat fremstillet ved omsætning af ækvimolære mængder NaH og methylendiphosphonat i 30 ml tetrahydrofuran. Reaktionsblandingen blev opvarmet til tilbagesvaling i 16 timer og derefter fordelt mellem H20 og CHCI3. Den tørnede organiske fase (MgSC^) inddampedes, og remanensen rensedes ved søjlekromatografi (Si02, CHCI3 derefter 95/5 CHCl3/MeOH) til frembringelse af 2,9 g (4,6 15 mmol, 56%) tetrabutyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat.

IR (film): 2980 cm'1: aliphatisk C-H

1440: t-C4Hg 1240: P=0

20 1020-970: P-O-C

NMR (CDCI3):’

5 = 7,05 (s, 2H): aromatisk H

5,08 (s, 1H) OH

25 4,1-3.95 (m. 8H): P-O-CH2-C3H7

3,18 (t x d, J = 7 og 16 Hz, 2H): Ph-Ctø-2,66 (t x t, J = 7 og 24 Hz, 1H): pH-CH2-CH

1,60 (sextet. J = 7 Hz, 8H): P-O-CH2CH2-C2H5 1,44 (s, 18H): t-C/jHg 30 1,38 (multiplet, J = 7 Hz, 8H): P-O-C2H4-CH2-CH3 0,90 (2 x t, J = 7 Hz, 12H): P-0-C3H6-CH3,

Eksempel 2 (forbindelse 5)

Tetraethyl-3,5-ditertiærbutyl~4-hydroxyphenylthio-methylen-diphosphonat 11 DK 173936 B1 tB>x

5 H0\O/T

tB/-7 °3^2

Til en opløsning af tetraethylmethylendiphosphonat {2,43 g, 8,43 mmol) i 15 ml tørt tetrahydrofu-ran blev sat 5,3 ml (8,43 mmol) 1,6 M n-butyllithium i hexan ved -78“C under nitrogen. Til den 10 ovennævnte opløsning blev derefter sat 15 ml af en tetrahydrofuranopiøsning af 4,0 g (8,43 mmol) bis-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxypheny!)-disulfid fremstillet som beskrevet i T. Fujisawa et al., Synthesis 1972. p. 624-625. Blandingen blev anbragt ved -78eC i 1 time og derefter omrørt ved 25DC i 3 dage. Der blev hydrolyseret med 20 ml mættet NH4CI opløsning, og blandingen ekstraheredes med 3 x 40 ml dlethylether. Den organiske fase blev tørret over MgS04 og 15 inddampet, og remanensen blev renset ved søjlekromatografi (S1O2, 95/5 Ch^C^/MeOH). Der opnåedes 2,2 g (4,2 mmol) af en gul olie, som langsomt krystalliserede; udbytte = 49%. Smp. = 78-80T.

Elementaranalyse C23H42O7P2S

20 % beregnet C 52,66 H8.07 P 11,88 S 6,11 % fundet C 52,13 H 7,77 P 11,65 S 6,62

IR (film): 3600 + 3450 cm-1: OH

1430: t-C4Hg 25 1250: P=0 NMR (CDCI3):

δ * 7,5 (s, 2H): aromatisk H

5,4 (s, 1 Η): Οϋ 30 4,35-4,2 (m,8H): P-O-CH2CH3 3,55 (t, J - 21 Hz, 1H): -CH-P03Et2 1,45 (s, 18H): U^tlg 1,35 (t. J - 7 Hx, 12H): P-0-CH2-CH3 35 MS: 524 (M+)

Eksempel 3 (forbindelse 4)

Tetraethyl-2-{3,5-ditertiaerbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat 12 DK 173936 B1 tBu-' P03Et2

Tetraethylmethylendiphosphonat (21,2 g, 73,5 mmol) blev ved stuetemperatur sat til en 80% 10 dispersion af natriumhydrid i mineralolie (2,2 g, 73,5 mmol) suspenderet i 70 ml tør benzen. Til denne opløsning af natriumtetraethylmethylendisphosphonat blev derefter sat en 30 ml toluenopløsning af 20 g (66,8 mmol) 3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxybenzylbromid fremstillet ifølge H Gross, H. Seibt og I. Keitel, Journal fiir prakt. Chemie 312 (6), p. 890-896 (1975). Den resulterende blanding opvarmedes til tilbagesvaling i 16 timer. Den afkølede toluenfase blev ekstrahe-15 ret med H2O, tørret over MgSC>4 og inddampet til tørhed. Remanensen blev renset ved søjle-kromatografi (S1O2. ren CHCI3 efterfulgt af en 95/5 CHCiy-MeOH-opløsning) til dannelse af 21,3 g (63% udbytte) af tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphos-phonat. Smp. = 62-63°C.

20 Elementaranalyse C24H44O7P2 % beregnet C 56,90 H8.76 P 12,23 % fundet C 56,76 H8,53 P 12,15

IR(KBr): 3400 cm-1: O-H

25 2850: aliphatisk C-H

1440: t-butyl 1240: P = O 1040: P-O-C

30 NMR (CDCI3):

δ = 7,1 (s, 2H): aromatisk H

5,1 (s, 1H): OH

4,15 - 4,05 (m, 8H): P-0-CH2CH3

3,18 (t x d, J = 6 og 17 Hz, 2H): Ph-CH2 35 2,65 (t x t. J = 6 og 24 Hz, 1H): Ph-CH2-CH

1,45 (s, 18H): 1,26 (to overlappende t, J = 7 Hz, 12H): P-0-CH2*CH3 13 DK 173936 B1

Eksempel S (forbindelse 30)

Tetraethyl-2-{3-tertiaBrbutyM-hydroxy-5-methylphenyl)-ethyliden'1,1-diphosphonat

Me /P03Et2 5 80 \0/CH=\

Vo.Et- tBu 3 2

Under nitrogen blev 300 ml tørt tetrahydrofuran anbragt i en 500 ml reaktor og afkølet til 0e. Ti-10 tantetrachlorid (27,5 mg, 145 mmol) blev tilsat dråbevis efterfulgt af 10 g (52 mmol) 3-tertiær-butyl-4-hydroxy-5-methylbenzaldehyd syntetiseret ifølge G.A. Nikoforov et al., Izv. Akad. Nauk SSSR, Otd. Khim. Nauk 1962. p. 1836-8; Chem. Abst. 58, 7856f (1963). Tetraethylmethylen-diphosphonat (21 g, 72 mmol) blev tilsat, efterfulgt af pyridin (22,9 g, 290 mmol). Blandingen blev omrørt I 3 timer ved stuetemperatur og koncentreret under vakuum. Remanensen blev 15 adskilt mellem Et20 og H2O. Etherfasen blev vasket med NaHC03-opløsning til pH 7, tørret og inddampet til tørhed. Der opnåedes en mængde på 18,5 g (40 mmol, 77% udbytte) af titelfor-bindefsen, ren ifølge GLC.

IR (film): 3400 cm'1: OH

20 2950: allphatisk C-H

1240: P=0 1060: P-O-C

NMR (CDCI3): 25 δ = 8,2 (d x d, J = 30 og 50 Hz, 1 Η): Ph-Cfci=CP2

7,7-7,6 (m, 2H): aromatisk H

4,25-4m05 (m, 8H): P-0-CH2CH3 2,25 (s, 3H): Cti3 1,4 (s. 9H): t-C4Hg 30 1.35 og 1,2 (2 x t, 12H): P-O CH2-CH3

Eksempel 6 (forbindelse 33)

Tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonat 14 DK 173936 B1 ' tBu ' p03Et2

En mængde på 700 ml tørt tetrahydrofuran blev anbragt i en 1 liter reaktor i nitrogenatmosfære.

Der blev sat titantetrachlorid (96,5 g, 0,51 mol) til THF-opløsningen afkølet til 0", efterfulgt af 10 40,0 g (0,17 mmol) 3,5-ditertiaerbutyl-4-hydroxybenzaldehyd. Tetraethylmethylendiphosphonat (69,1 g, 0,24 mol) blev tilsat dråbevis, efterfulgt af methylmorpholin )97,6 g, 0,97 mol), og den resulterende blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 4 timer. Reaktionsblandingen blev derefter opdelt mellem H2O og diethylether. Etherfasen blev vasket til neutralt pH, tørret og inddampet. Remanensen blev omkrystalliseret i acetone, og moderluden blev renset ved 15 søjlekromatografi (Si02, rent CHCI3 efterfulgt af 95/5 CHC^/MeOH). De samlede fraktioner gav 53 g (0,11 mol, 62% udbytte) af tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1-diphosphonat. Smp. = 120-121 °C.

Elementaranalyse C24H42O7P2 20 % beregnet C 57,14 H8.39 P 12,28 % fundet C 56,89 H8.23 P 12,05

IR(KBr): 3200 cm*1: OH

2850: aliphatisk C-H 25 1570: C=C

1440: t-butyl 1240: P=0 1060: P-O-C

30 NMR (CDCI3): δ = 8,25 (d x d, J = 30 og 48 Hz, 1H): Ph-CH=C-P2

7,7 (m, 2H): aromatisk H 5,65 (s, 1H): OH

4,2-4,0 (2 x m, 8H): P-0-CH2*cH3 35 1,5 og 1,45 (3 x s, 18H): t-C4Hg 1,4 og 1,2 (2 x t, 12H): P-0*CH2CH3

Eksempel 8 (forbindelse 1)

Tetraethyl-2-{3-tertiært>utyM-hydroxy-5-methylphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat 15 DK 173936 B1 '°3Et2

5 H0^n>CHrCH

tBj P03Et2

En mængde på 11,4 g (24,6 mmol) tetraethyl-2-(3-tertiærbutyl-4-hydroxy-5-methylphenyl)-10 ethenyliden-1,1-diphosphonat blev sat til en opløsning af 4,65 g (123 mmol) NaBH4 i EtOH, og blandingen blev opvarmet til tilbagesvaling i 90 minutter. Ethanolopløsningen blev inddampet og remanensen opdelt mellem 2.5 N HCi og Et20. Inddampning af den tørrede organiske fase gav en die, som blev renset ved destillation i en kort kolonne. Der opnåedes 9,9 g (87% udbytte) tetraethyl-2-(3-tertiærbu»yl-4-hydroxy-5-methylphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat. Kp = 15 190eC (0,05 mmHg).

Elementaranalyse C2iH3g07P2 % beregnet C 54,30 H8.25 P 13,34 % fundet C 54,04 H 8,15 P 12,94 20

IR (film): 3400 em*1: OH

2850: aliphatiskC-H 1240: P=0 1060: P-O-C 25 NMR (CDCI3):

δ = 7,0 - 6.9 (m, 2H): aromatisk H

4,2-4,05 (m, 8H): P-0-Cti2-CH3

3,14 (d x t, J = 6 og 18 Hz, 2H) ®h-CW2 30 2,6 (t x t, J = 6 og 24 Hz, 1H): Ph-CH2-CH

2,2 (s, 3H): CH3 1,4 (s, 9H): t-C4Hg 1,25(2xt, 12H): P-0-CH2-CH3

Eksempel 9 (forbindelse 4)

Tetraethy l-2-(3I5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1 -diphosphonat 16 DK 173936 B1 tBu- P03£t2 10 En 80 ml ethanolisk opløsning af tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden- 1,1-diphosphonat (25,3 g, 50 mmol) (forbindelse 33) blev under nitrogen sat til en suspension af lithiumborhydrid (3,3 g, 150 mmol) i 250 ml ethanol, og blandingen blev opvarmet til tilbagesva-ling i 1 time. Opløsningsmidlet blev afdampet og remanensen optaget i diethylether. Etherfasen blev vasket med en 10%'s HCI-opiøsning og med H2O til pH 6 og derefter tørret over MgS04-15 Inddampning af etheropløsningen gav 24 g (47 mmol, 95% udbytte) tetraethyl-2-(3,5-ditertiaer-butyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat.

Reduktionen af forbindelse 33 kan også udføres ved katalytisk hydrogenering.

20 En blanding af forbindelse 33 (1 g, 2 mmol) og 20 mg 10% palladium på aktivt kul (10% Pd/C) i 50 ml eddikesyre blev hydrogeneret ved stuetemperatur og 1,5 atm. tryk i 16 timer. Frafiltrering af katalysatoren og afdampning af opløsningsmidlet gav 1,0 g (2 mmol, 100%) af titelforbindelsen.

25 Platin på aktivt kul (10% PVC) kan også anvendes med lige så gode resultater. En blanding af forbindelse 33 (1 g 2 mmol) og 20 mg 10% Pt/C i 50 ml CH3COOH blev hydrogeneret ved stuetemperatur og 1,2 atm. i 16 timer og gav efter oparbejdning 1 g af forbindelse 4 (2 mmol, 100%). - 30 Den ved disse reduktionsfremgangsmåder fremstillede forbindelse har fysiske og spektroskopi-ske data, der er identiske med dem for det i eksempel 3 beskrevne produkt.

Eksempel 10 (forbindelse 8) 2-{3,5-ditertiærbutyl*4*hydroxyphenyl)<ethyliden-1,1-diphosphonsyre 17 DK 173936 B1 tB/^\ i°3H2

5 H0-(O>CH2-H

ah' P03K2

Under vandfri betingelser blev trimethylbromsilan (5 ml, 38,6 moi) sat dråbevis til 10 ml af en carbontetrachloridopløsning af tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl-ethyllden-1,1-di-10 phosphonat (1.95 g, 3,86 mmol). Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 timer. Overskuddet af BrSiMe3 blev flernet ved destillation og remanensen behandlet med 20 ml H2O i 2 timer. Inddampning af den vandige opløsning gav 1,43 g (3,6 mol, 94%) af diphosphonsyren.

Smp. = 177-178°C.

15 IR(KBr): 3600 cnr1: OH

3000-2500: P-O-H 1430: t-C4Hg 1200: P=0 20 Forbindelse 8 kan også opnås ved hydrolyse med saltsyre.

En blanding af forbindelse 4 (2.5 g, 50 mmol) i 10 ml 37% HCI opvarmedes til 115eC i 16 timer. Afdampning af HCI til tørhed gav 1,9 g (4,8 mmol, 96%) 2-(3,5*ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl-ethyliden-1,1 -diphosphonsyre.

25

Eksempel 11 (forbindelse 10)

Tetramethyl-2-(3,5-dftertiaerbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat tB;-, PO-Me,

30 H0-(O/CH2lH

te)-' P03Me2

En blanding af 3,5 g (8,9 mmol) 2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphos-35 phonsyre og 10 g (94 mmol) trimethylorthoformat blev opvarmet til tilbagesvaling i en time. Det dannede methylformat og methanol blev afdestilleret. Nyt trimethyiformat (10 g, 94 mmol) blev tilsat, og blandingen blev opvarmet til tilbagesvaling i en time. Fjernelse af overskydende rea- 18 DK 173936 B1 gens og destillation i kort kolonne (200eC, 0,05 mmHg) gav 2.5 g (65%) tetramethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat. Smp. = 77-78°C.

IR(KBr): 3400 cm’1: 0_H

5 2850: aliphatisk C-H

1430: t-butyl 1245: P=0 1185: P-O-Me 1030: P-O-C

10 NMR (CDCI3):

δ = 7,25 og 7,05 (m, 2H): aromatisk H

5.0 (s, 1H): OH

3,7-3,65 (to d, J = 11 Hz, 12H): P-0-Ctf3 15 3,1 (t x d. J = 6 og 17 Hz, 2H): pH-CH2 2,6 (t x t, J = 6 og 24 Hz, 1H): pH-CH^CH 2,1,35 (s, 18H): t-C4H9

Eksempel 12 (forbindelse 15) 20 Tøtraethyl-l-^.S-ditertiaerbutyM-hydroxyphenylJpropyliden^^-diphosphonat tBu_ P0 Et 25

Tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat (500 mg, 1 mmol) blev sat til en suspension af 80% NaH (40 mg, 1,3 mmol) i 20 ml tørt THF. Der bl.ev tilsat methyljodid (1,3 ml, 6 mmol), og reaktionsblandingen blev opvarmet til tilbagesvaling i 15 timer.

Efter Et20/H20-ekstraktion blev den organiske fase tørret og inddampet. Søjlekromatografi 30 (S1O2, 95/5 CHCl3/MeOH) gav 440 mg (0,84 mmol, 84%) af titelforbindelsen.

IR: 2980 cm~1: aliphatisk C-H

1240: P=0 1030: P-O-C 35 MS: 534 (M+), 397 (100%, M-P03Et2)+, 233 19 DK 173936 B1

Eksempel 13 (forbindelse 41)

Tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4*acetoxyphenyl)-ethenyliden-1,1>dipfiosphonat /P°3Et2

5 MeC0-0-/(")\CH=C

tBu 'P03Et2

En blanding af tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1-diphosphonat (3 g, 6 mmol) og en katalytisk mængde (50 mg) H2SO4 i 3 g eddikesyreanhydrid blev opvarmet til 10 80°C i 3 timer. Reaktionsblandingen blev hældt på is og ekstraheret med Et20. Den organiske fase blev vasket med H20, tørret over MgS04 og inddampet til tørhed. Remanensen blev renset ved søjlekromatografi (S1O2.95/5 CHCl3/MeOH) og gav 2,32 g (4,2 mmol, 71% udbytte) af titelforbindelsen.

15 IR: 2840 cm'1: aliphatisk C-H

1760: C*0 1560: C=C 1240: PO 1030: P-O-C

20

Eksempel 14 (forbindelse 17)

Tetraethyl-4-{3.5*ditertlsrbutyl'4-hydroxyphenylthiO'biilyliden>1,1-dlphosphonat 25 f°3Et2

25 H0Y(jVs-CH2CH.CH2-CH

«ίΓ-7 P03Et2

En blanding af 1,0 g (3,04 mmol) tetraethyl-3-butenyliden-1,1-diphosphonat, fremstillet ved 30 omsætning af tetraethylmethylendiphosphonat og allylbromid, 0,8 g (3,36 mmol) 3,5-ditertiær-butyl-4-hydroxyphenylmercaptan og 0,022 g (0,09 mmol) dibenzoylperoxid blev opvarmet til tilbagesvaling i benzen natten over. Efter afdampning af opløsningsmidlet blev råproduktet søjlekromatograferet, og der blev isoleret 0,44 g (25% udbytte) tetraethyl-4-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenylthio)-.butyliden-1,1-diphosphonat.

IR (film): 3400 cm-1: O-H

2850: aliphatisk C-H 1430: t-butyl 35 20 DK 173936 B1

1240: P=0 1020: P-O-C

MS: 566 (M+), 429 (M-P03Et2)+ 5

Eksempel 15 (forbindelse 19)

Diethyl-1-bis(dimethylamlno)phosphinyl-2*(3,5>ditertiærbutyl-4- hydroxyphenyl)ethylphosphonat '0 “Jhj. f°3Et2

H0<O/CH2-fH

tBa— PO(NMe2)2

Diethyl-bis(dimethylamino)phosphinyl-methylphosphonat (1,4 g, 5 mmol) blev ved stuetempera-15 tur sat til en suspension af 80% NaH (0,15 g, 5 mmol) i 20 ml tort tetrahydrofuran. En opløsning af 3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxybenzylbromid (1,5 g, 5 mmol) i 20 ml dioxan blev tilsat, og blandingen blev opvarmet til tilbagesvaling natten over. Efter afdampning af opløsningsmidlerne blev remanensen opdelt mellem H20 og CHCI3. Remanensen fra den organiske fase blev renset ved søjlekromatografi (Si02, 95/5 CHCI3/MeOH) og gav 490 mg (20% udbytte) af titel-20 forbindelsen.

IR (film): 3400 cm-1: OH

2860: aliphatisk C-H 1440: t-C4Hg 25 1240 + 1220: P=0 1030: P-O-C- MS: (m/e)+: 504 (M+); 369 (100%, M+-PO (Nme2)2); 135 (PO(NMe2)2)+ 30 NMR (CDCI3):

δ = 7,08 (s, 2H): aromatisk H

5,08 (s, 1H): OH

4,1-3,9 (m,4H): P-0-CH2CH3

3,25-3,1 (stor m, 2H): pH-CH2-CH 35 2,9-2,7 (stor m, 1H): Ph-CH^CH

2,5 og 2,55 (t d, J = 9 Hz, 12H): N-CH3 1,38 (s, 18H): t-C4Hg 1,15 (tot, J = 7HZ, 6H): P-O-CHCH3

Eksempel 16 (forbindelse 16)

Tetraethyl-3,5-ditertlaerbutyl-4-hydroxyphenylsulfonylmethylen-diphosphonat 21 DK 173936 B1 tBu- P03Et2

En opløsning af 800 mg (1,26 mmol) 49,5% KHSO5 (kaliumpersulfat "oxone") i 0,8 ml H2O blev sat til en opløsning af 400 mg tetraethyl-3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenylthio-methylen-di-10 phosphonat (forbindelse 5) (0,84 mmol) i 5 ml CH3OH under omrøring i isbad. Den resulterende opslæmning blev omrørt natten over, og blandingen blev koncentreret til fjernelse af MeO-H. Remanensen blev opdelt med H2O og CH2CI2. Den organiske fase blev vasket med H2O til neutralt pH og koncentreret, og remanensen blev renset ved søjlekromatografi (CHCIg/MeOH).

Der oipnåedes en mængde på 200 mg (0,36 mmol), 29%) tetraethyl-3,5-ditertiærbutyl-4-hy-15 droxyphenylsulfonyl-methylen-diphosphonat. Smp. = 118-120eC.

MS: (m/e): 556 (M+). 492 ((M-S02)+, 100%), 355 (M-P03Et2)+

En blanding af forbindelse 5 (400 mg, 0,76 mmol) og 85% m-chlorbenzoesyre (0,5 g, 2,5 mmol) 20 i 5 ml CH2CI2 blev omrørt ved stuetemperatur i 16 timer. Den organiske opløsning blev ekstraheret med mættet NaHS03 og tørret over MgSO^ Søjlekromatografisk rensning (CHClij/MeOH) gav 160 mg af forbindelse 16 (0,28 mmol, 38%).

Eksempel 17 (forbindelse 42) 25 Dibutyl-diethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl~4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1-diphosphonat tBu)_. PO-Btu h°<Qw P03Et2 30

Dibutyl-diethyl-methylendiphosphonat blev fremstillet i 43%'s udbytte ved omsætning af natri-umdibutylphosphit med diethyl-chlormethylphosphanat, kp. = 140* (0,05 mmHg) (Kugelrohr).

Dibutyl-diethyl-2-(3,5-ditertiærbutyM-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonat blev synteti-35 seret ved omsætning af TiCI (4,94 g, 26 mmol), 3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxybenzaldehyd (3 g, 13 mmol), dibutyl-diethyl-methylendiphosphonat (4,4 g, 13 mmol) og N-methylmorpholin (5,25 g, 52 mmol) i 20 ml THF ved stuetemperatur. Søjlekromatografi (95/5 CHCI^MeOH) gav 2,6 g (4,6 mmol, 36%) af titelforbindelsen.

22 DK 173936 B1

IR (film): 2980 cm*1: aliphatisk C-H

1560: C=C 1430: t-C4H9 1240: P=0

5 1020-970: P-O-C

MS (m/e): 560 (M+), 423 (Μ-Ρ03Ε12)+, 367 (M-P03Bu2)+, 311 Eksempel 18 (forbindelse 21) 10 Tetraethyl-1 -<3,5-ditertiaerbutyl-4-hydroxyphenyl)-butyHden-2,2-diphosphonat tBU;-- PO-Et,, tBu-' P03Et2 15

Tetraethyl-propyliden-1,1-diphosphonat blev fremstillet i 65%’s udbytte ved omsætning af tetra-ethylmethylendiphosphonat med ethyljodid under tilstedeværelse af NaH i tetrahydrofuran.

Tetraethyl-propyliden-1,1-diphosphonat (1,5 g, 4,75 mmol) blev sat til en suspension af 80% 20 NaH (0,143 g, 4,75 mmol) i tørt THF (10 ml), og blandingen blev omrørt, indtil der ikke var synligt NaH. 3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxybenzylbromid (1,42 g, 4,75 mmol) i 5 ml THF blev tilsat, og blandingen blev opvarmet til tilbagesvaling i 4 timer. Efter oparbejdning gav søjlekromatografi (Si02, 95/5 CHCIs/MeOH) 0,9 g (1,7 mmol, 36%) af titelforbindelsen. Smp. = 107-110°C.

25 IR (film): 3400 cm'1: OH

2850: aliphatisk C-H 1440: t-butyl 1240: P=0 1040: P-O-C 30 NMR (CDCI3):

δ = 7,15 (m, 2H): aromatisk H

5,1 (s, 1H): OH

4.2- 4,04 (m, 8H): 0-CH2-CH3 35 3,2 (to d, J = 12 og 16 Hz, 2H): Ph-CH2*CP2 2,1-1,9 (m, 2H): -C(P2)-Cfcl2-CH3 1,45 (s, 18H): t-C^g 1.3- 1,15 (flere t, J = 7 Hz, 15H): -C(P2)-CH2-Cfc!3 + O-CH2CH3 23 DK 173936 B1

Eksempel 19 (forbindelse 20) T etraethyl-7 -{3,5-ditertiaerbutyl-4-hydroxyphenyIthio)-heptyliden-1,1 -diphosphonat tBl)-V f°3Et2

5 H0<O}S-(CH2V?H

tBu '

Tetraethyl-7-bromheptyliden-1,1 -diphosphonat blev fremstillet ved omsætning af natrium-tetraethylmethylendiphosphonat med 1,6-dibromhexan.

10

En 20 ml tetrahydrofuranopløsning indeholdende 4,2 mmol af natriumsaltet af 3,5-ditertiærbutyl- 4-hydroxyphenyl-mercaptan blev sat til 20 ml af en tetrahydrofuranopløsning indeholdende tetraethyl-7-bromheptyliden-1,1-diphosphonat (1,89 g, 4,2 mmol). Reaktionsblandingen blev omrørt ved stuetemperatur natten over. Efter hydrolyse og ekstraktion med Et20 blev råproduk-15 tet renset ved søjlekromatografi (Si02, 95/5 CHCtø/MeOH) og gav 1,6 g (2,63 mmol, 62%) af titelforbindelsen.

IR (film): 3400 cm'1: OH

2940: aliphatisk C-H 20 1430: t-C4H9

1250: P=0 1030 + 980: P-O-C

MS: (mfe): 608 (M+), 371, 288(100%), 152 25

Eksempel 20 (forbindelse 24) 2-(3,5-diterti*rbutyl-4-hydroxyphenyl)ethyliden-1,1-bis(2-oxo-1,3,2-dioxaphosphorinan) «V-, jb

30 H0/f)yCH7-CH

2£> o

Behandling af tetratethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1.1-diphosphonat med 35 BrSiMe3 gav det tilsvarende tetrakis (trimethylsilyl)-diphosphonat. Sidstnævnte forbindelse blev omsat med PCI5 i CCI4 efter de i T. Morita et al., Chemistry Letters p. 435-438 (1980) beskrevne reaktionsbetingelser, hvorved der opnåedes 2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonyl-tetrachlorid.

24 DK 173936 B1

Til en opløsning af Et3N (7,86 g, 78 mmol) i 80 ml dioxan ved 55“ blev der samtidig sat det ovennævnte diphosphonyl-tetrachlorid (9,0 g, 19 mmol) i 40 ml dioxan og 1,3-propandiol (2,90 g, 38 mmol) i 40 ml dioxan. Reaktionsblandingen blev opvarmet til tilbagesvaling i 3 timer efter tilsætningen. Bundfaldet af Et3N.HCI blev fjernet ved filtrering, og filtratet blev renset ved søjle-5 kromatografi (SiC>2. CHCl3/MeOH 95/5). En mængde på 1,35 g (2,9 mmol, 15% udbytte) af titelforbindelsen blev opnået. Smp. = 175-176°C.

IR (KBr) = 3400 1430,1260 (P=0), 1040 (P-O-C).

10 MS (m/e)+ = 474 (M+), 353 (100%, M-P03(C3H6)2)+ NMR (CDCI3):

δ = 7,25 og 7,1 (m,2H): aromatisk H

5.1 (s. 1H): OH

15 4,45, 4,3 og 4,1 (3m, 8H): P-0-(CH2)-

3,26 (d x t, J = 6 og 17 Hz, 2H): Ph-CH2-2,80 (t x t, J = 7 og 23 Hz, 1H): Ph-CH2-CH

2.1 og 1.9 (2m, 4H): P-0-CH2-CH2-CH2 1,4 (S, 18h): t-C4H9 20

Eksempel 21 (forbindelse 43)

Tetraethyl-4-{3,5-dltertIærbutyl-4-hydroxyphenyl)-1,3-butadienyliden-1,1 -diphosphonat tBH_ /P03Et2

25 H0-/P)yCH=CH-CH*C

P°3Et2

Titantetrachlorid (3,14 g, 0,017 mol) blev under nitrogen sat til 40 ml vandfrit THF afkølet i et 30 isbad. Der blev successive tilsat 2,15 g (0,008 mol) 3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxy-cinnamalde-hyd, 2,39 g (0,008 mol) tetraethyl-methylendiphosphonat og 3,25 g (0,033 mol) methylmorpho-lin. Den resulterende blanding forblev i isbadet I yderligere 1 time og blev derefter anbragt ved stuetemperatur natten over. Der blev tilsat 50 ml vand, og den resulterende blanding blev ekstraheret med 3x50 ml natriumchloridopløsning, tørret over magnesiumsulfat og inddampet.

35 Remanensen blev renset ved søjlekromatografi (Si02< 95/5 CHCl3/MeOH) og gav 3,6 g (0,0068 mol, 82%) af den rå titelforbindelse. Sidstnævnte blev omkrystalliseret fra acetone, hvorved der opnåedes 2,1 g (0,0040 mol, 48%) rent produkt. Smeltepunktet var 141-143eC under dannelse af en dybrød opløsning.

25 DK 173936 B1

lR(KBr): 3360 cm'1: OH

1600,1550 og 1530: C=C 1420 og 1430: t-C4Hg 1200: P=0

5 1020: P-O-C

MS: mle: 530 (M+), 515 (M-Me), 393 (M-P03Et) NMR (CDCI3):

10 δ s 8,05-7,07 (flere m, 2H): C=CH-Chl=C

7.4 (s, 2H): aromatisk H

7.04 (d, J = 15 Hz, 1H): pH-CH=C

5,6 (s. 1H): OH

4,2 (m, 8H): P-0-Cb2CH3 15 1,45 (s. 18H): t-C^dg 1,35 (t, J = 7 Hz. 12H): P-0-CH2Cfcj3

Eksempel 22 (forbindelse 45)

Diethyl-2-(3,5-dltertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-1-(2-oxo-1,3,2-dioxaphosphorln-2*y0 20 ethenyl-1 -phosphonat H0\O/CH=c υύ~J 'P03£t2 25

Diethyl-(2-oxo-1,3,2-dioxaphosphorin-2-yl)-methylphosphonat blev fremstillet ved Arbuzov-reak-tionen mellem triethylphosphit og 2-chlormethyl-2-oxo-1,3,2-dioxaphosphorinan (IR: 1260 og 1030 cm’1).

30 De i eksempel 6 beskrevne generelle reaktionsbetingelser blev anvendt med diethyl-(2-oxo-1,3,2-dioxaphosphorin-2-yl)-methylphosphonat som phosphonatreagens. Efter oparbejdning gav rensning ved søjlekromatografi titelforbindelsen som en olie i 63% udbytte.

IR (film): 3450 cm*1,1570 (OC). 1420,1260,1030 (P-O-C) MS; 488 (M+), 367 (M-P03Et2)+, 351 (M-P03(CH)3)+, 57 (t-Bu) 35 26 DK 173936 B1 NMR (CDCI3): δ = 8.2 (d x d, J = 30 og 48 Hz, 1H); Ph-CH=CP2

7,75 (m, 2H): aromatisk H 5,65 (Μ, 1H): OH

5 4,3-4.0 (flere m, 8H): P-0-CH2-CH3 og P-0-Cti2-(CH2)2 2,1-1.6 (flere m. 2H): P-0-CH2-CH2-CH2 1.4 (s, 18H): t-C4H9 1.4 (t, J = 7 Hz): P-0-CH2-CH3 10 Eksempel 23 (forbindelse 28)

Tetraethyl-4-{3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-butyliden-1,1-diphosphonat ho/()Vch2-ch2-ch2-ch ,5 tBu ™3Et2 0,5 g (0,94 mmol) tetraethyl-4-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-1,3-butadienyliden-1,1-diphosphonat (forbindelse 43), 0,23 g 10% palladium på aktivt kul i 25 ml iseddikesyre blev anbragt i et Parr hydrogeneringsapparat under hydrogen med et tryk på 3 atm., indtil der ikke 20 længere kunne observeres adsorption. Katalysatoren blev frafiltreret. Filtratet blev fortyndet med samme volumen vand og ekstraheret med chloroform. Chloroformfasen blev vasket successive med 10% NaOH og vand og tørret over MgS04. Afdampning af opløsningsmidlet gav 0,4 g af titelforbindelsen (98% renhed ifølge GC).

25 IR (film): 3400 cm'1: 0_H

2940: aliphatisk C-H 1440: t-butyl 1250: P=0 1020. P-O-C

30 NMR (CDCI3):

δ = 6,96 (s, 2H): aromatisk H

5,03 (s, 1H): OH

4,24-4,10 (m,8H): P.-O.Cti2-CH3 2m52 (t, J = 7 Hz, 2H): pH-.CH2- 35 2,28 (t x t, J = 6 og 24 Hz, 1H): Ph-CH2-CH2.CH2-CtlP2 2,04-1,78 (2 x m, 4H): Ph-CH2CH2-CH2*CHP2 1,40 (s, 18H): t-C4Ug 1,28 (to overlappende t, J = 7 Hz, 12H): p-0-CH2-CH3 27 DK 173936 B1 MS: 534 (M+)

Denne forbindelse var kromatografisk og spektroskopisk identisk med det materiale, der isoleredes fra omsætningen af 3-(3,5-ditertiøerbutyl-4-hydroxyphenyl)-propylbromid (smp. = 52-5 54°C) med natriumsaltet af tetraethyl-methylendiphosphonat i benzen.

v> 28 DK 173936 B1

N W N CSJ N M ^CVJ

Q- Q- Q. CL Q. O- Q- c. o.

<o Γ» ΓΝ. rs. I^_r^ r- ot O O o O O O O o o 'T OJO«j-ri-(MNOU O Ό "O £

4» (V) V *t V ^ ^ M CO

ψ XXX X X X_ x , ΧΛ X

s- h n »f <j· ci ta w o σι o Μ N N M CJ N c) CM —·

U. U u O O O u u O O

CL

-SÉ O .—. »— - -—- c0 m in lo uo x in i£> m o o o ro O O N 00 CO o Λ * · · 10 CO Η Η Η N 9 \Z*-+ o o O I I I «O I I I X3 o 'T. σι <—> s_* cm co <r son -~- ω X O LO O LO I-, O S 03 N tn 0 _ at at CD r-t i-t r-i o

g £ ·—f r-t CVJ CVJ

r*. «5

(O

~ JJ JJ P jo Jj U 3XX0J4J+J

d- UILUUJUJUJ0.09OOSUJUJ

. M O O O O O I I o o o

*r- C

£ _ O ° <0 Itl 0 C- +J4J+JPJ4J u 3xx_ajj->-t-> ” ro ujuJUjujujn.xooxujuj ~ N O O O O O I I o o o

-I— C

to O O ίο 03 -c ;g -M4->4J+J+Ji-3XX0J4J*J li

II ovj uiuiujuJujo.QQOOSi-1-iui W

^ M O O O O O I I o o o >

1 -r- C

ε cm m· o o *> oxo 'T, ujluujujujclcoooXujuj o> T3wi_ M O OOOOlt O O O *r <υ a--o—o. *jr S 2

i- I O O V

Q) ^ =3 I Sjj *- y/z^vX 00 xxxxxxxxxxxx (L J) ^

(Λ yc .x/ K

-o {Γ /N O

^ rH I Csl .

vi x I x *·

r- o N CM N Csi(/) CSJ N (MV) CM CM CM O

O ro XXXX XXX XXX ^ C X ^ o o o o u u u o o o j= g*

®. c W

s £

s- +J

· 03 DIP«: ro ’XXXXXXXXXXXO) % = g.

x i i i i i i i i i i t X JS C 5*

t— r— 03 I

03 "* 3 -i- 1_ tn -O ΙΛ 4- +J x tO 03 tO -i— L_ L LP α CO I o -·> O X Q.PO I « «a;

3)-333333330)0) « c Z S

cao-mcocococococacoxx xo CVJ I I I I I I I I I I O O L Ό Ό X 4->.^04->4->4->4->4->-»->4->Ι I ,ν φ gi iioJiitiiiiintn ooj>> ιηιηοοιηιηιηιηνηιηιη i— I 1_ -I-J +J -4-» t n o o o> 03 4- ΙΛ S- i- 031-33333333030) +J TJ 3> Si accLoacooQeocacocacaxiE — I I I I I I I I I I O O L. > i_ L.

X i i 0) o o iO)i i i i i i i ro ro vi p p jj ro trtrocococncococo >>iuacac

1 I i— V) fl (O

c ro «JCLt-

-r . C O) fl O

«03 ta V. j* ^ 7_ *Λ i: η n li ii

03 rHCVJC'lvJ'LntØr-OOCnOt-lCM

U. T3 i ri t flA υΐ i 29 DK 173936 B1 CM i

CO Cl. W lO

{VJ N N ΝιΛΜΝΝΝΝΝ _CM CM

(O 0.0.0. 0.00.0.0.0.0.0.0.0.

Γ». f** OS N. CM N. fM r>. ΓΜ )>· r». γμ f*·· I— o o o ozooooooo o __ <D LO 00 CM 3 CM LO M" CO O CM Ό CO CM tf3 3 ε «j· rr **· in m· m ^ _P -in J?" £ IX* xxxxxxxxxx o lo lo co ca tf m te n co n « « φ

i· CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM

o u u ϋϋϋϋϋϋϋουυ o.

o i- ° o o co *a· _ _ CL) . CM i-< O Γ". o r·«·

1—4 Η Η N Η ΙΟ lO

"ti r> n, OjQI<Q^<AOI i i t IOIOO

<0 q>°? “**00 · s io « n o co to ^-4 o o r-. r-. in i©

+J O c H HH H

S- EB

0 ^ —

CH

—- O

+j 4J +4 +J 3 CM Ή ·*-* L- S- 1»U CM +* 4^

—. ti· LU LU LU LU CQ CJU1LUO.O.OO.O.XUJLU

ifl NI OOOOISOOI I MI I O O O

J* C g »r· C f* O- I

M .O O O CM O O CM

•— h« x a> «β O Σ s_ ►—· — cu φ ' 4J4J+JU3 CM 4J 4J L. L. I U L. -*-» .♦-» ro tuuiLULOC00)uiiuo.o.oo.a. cm uj lu

Jo M OOOOIJCOOI) 11X00 10 C 2: -r- C T- T- C-J .

c O O O O O O i] X 0 X) £ 4J-M4J4J4J+J4J+Ji-L-©-Mt-CM·»-»·*-» k; S ggggg8ggn'«8^SSS > a. cm oo^joVj Ξ μ m S x «« •oh M “5 (- » ϋ .(j.M-U-L->JJ4J-U-*OL.S~ I 4-> 1» I U +-> ·*£

g s " £ "n ggggggggn°gi =~g g I

O. 0.-0—o. Ξ o 5 o "

ai «C

1 J-v * u //^Γν\ CO X CUXXXXX+JXXXXXXXX ** OJ (( )) Σ LU <13- 3 VOv " w -Λ_Τ_Α ° -U *“* 1 CM L.

tf> ~ ~ CMCMCMCOCMCMIOCMC/) CM CM CM CM CM CO CM £ .,_ μ «Α ^ s o x «C x X X X X X X p ^ ·£ >< < CM O LO CM U O CM LU O O U O U NU φ o ^ X X X X » T3 v tf) CJCJO u I c in

·— ___ ' »W ·*—' LJ Q

o to to 2L ϊ.

C g $- 4J

OJ »J CU σ».* -F c xaixxxxxxxxxxxxxx « 5S, o. ‘T, Xllllllllltlll) 4-» l- tf) x i— aii ·· 3h U/l ,— ΙΛ1-ΡΧ CU « *P- _ L L 4) O) T. σ> i o

<U _ ·» O X

JO 3 O. Jj O I

<rt CO ID o x L_ 3339333333331333 · E Z ·—· aacooococococacacococneo u ea co cq x o cm » i i i i i i i i i i » a> » 1 1 s- *3 3

x +JU-*->+J4->4->-U4->.LJ-M-(->-LJ »I J J +J ».iC al <U

I I I I I I I I I I I I I I i · oa)>> lo lo lo 10 10 in in tn in lo lo lo lo lo lo lo r—

t_ *OJJ 4J

O S O) O)

3 4· M L L

co _ ai ai 333333333333 »333 -M TO tf) tf) cQcacQcocacacocococQCQca ucacoco ai ai -r- >- I— till I I I I I I I I 01 I I I L- > i- £- x 4J4J4J4J4U4J4J4J-4J-M4J-LJ ΙΛ *) *) W O) 0)0)

11111)111)1111») V) JJ +j +J

nnWMMinrtnwnMMMMnn >,o)^cjtc . r- tf) 10 <0

L Q C L L

C O O O

2 CU IS LJCJC

s- il n « ii ii o φ M-ioior>-oooso»HCMcoti>mioi^-coo> ll. -o pH r-< 1-J —J *—l I-JCMCMCMCMCMCMCMCMCMCM isn uo 30 DK 173936 B1 (Μ (Μ Μ N N N CM CM _CM CM CM 00 _ o. CL O. CL O- G. O. Cl CL. O. CL Q_ ”3 Γν N N is N rs Ot Os 00 Os. Os Os o O O O O O o o o o o o r— UD CO CM CM O 00 O O tf Ί· O ΌΌ 00 <y η n tf tf to w ro *t* «J· lo m- g ^ =, =« *» =¾. =«o =.o =¾ £ o~ s>~ u~ J* u" iT o~ ow o~ u~ o~

CL

-i£ O

—s . ° σ cn τ-t cm is. oo Λ „ O O CM OO I—< 00 LO tff I—i t—l T—4 r-i *—I LO *—l LO i-* -__ æx i i i i i i i ja jo -Q i C Λ 7: ^ rs.ooo»-iooiooo *-> σι o cm co m m in *»

J3 Q. P r-l r-t r-4 t-H

HH E C

w to- s_ Yu Ys| 4_> L> +J -*-> S- 3 I L> 4J 3 4J ·*-> *->

/nr-) ΓΟ <*- LU LU UJ LU O* CO O LU LU LU CQ LU LU LU

r\ om om κι σ o o o i i O o o o o o o

Ti ys c 2 o o o o

° CO s> y. OL

M= ^ c_3 ' S’ i +J4J4J-M J- 3 X 4-> -*-»·*-> 3 U> -U 4-> i? u OO LULULULUO.COOUJ LU LU CQ LU LU IU .

° I OM O O O O I I o O O C O O O φ -c Ό f- c Q. O O *n CVi S-

Tg > E V L L L> *J L- 3 X U> +J+J+J-U-U ni == -r- c oo .,_ QJ LU O O "-S +_>

•ri " J?4 CD

DC X Ιο o o o L »w· 1—* ni 4-» 4-· -M 4J O +j /—I" I I— LULULULUClCOOLU lu lu lu lu lu ^ ΑφΛ om o o o o i i o o o o o o h_ s \Mc , 5 ® «

ι/t I />· T3 OOOOOOOO O O O O CM O

= HX T O

w 0 ^ OOOOOOOO O O O rH o O L.

·— Γ0 O

O X >+- -r- c c: cl

ni 0) O

~ -σ Mie -F xxxxxxxx « o x x x x c «λ

(lllllll Σ Ο I I I I -r- O

'iy· Μ·Μ·Μ·τί·ιΤΜ·Μ·ιΤ i V «i* <tf· <4* L-

.. rt- S' L U

csi I ω CTUni —. 4-> C 0) 10 ·*— o.

I- +J i- LO

o) r- a> i

X» 3 T- i- LO

_ wv uz ” <D <13 ·«- 3U333S30I 333333s- g* cocuoacocococox CQ CO CQ CO CQ cn _ g* ·. ° CM I I I I I I I O I I I I I I :'°ϊ .

x -U -f- U 4-> *> 4-> 1 +J +J +> +> 4·) +> ^ 9 J, I I (U I I I I LO I I I I I I .252 in η ίο in in in lo in in in in in in a:Sz J, S- -3 -3 “* <L> CL) o a> > > J_ ·!->+-) 4-> 421.333330) 333333 »£ S 2f XCLCOCQCOCQCQS; CO CQ CQ CO 00 CO α>α> > lllllll O I I I I I I i) τι ι/ι (Λ X CO ·*- V -U> U> -M U> l 4U 4-> +-» -U 4-> -*-> ^ J,” " I di I I I i 00 tiiii» r > Γ Γ CO l/t CO CO CO Γθ π O « (O Μ M m nj ω

<*> >1 (U JC DC

, r—· VI (tf (O

i. fl C L L

,E fl. C QJ (tf tf

ri *ni II II II II

.? o ru cu n tf in 10 ps o η n m tf m

COCOCOCOCOCOCOCO ^*•»<4'^·^*··^· «J-OOTJ

31 DK 173936 B1

CM CM CM CM CM CM

ta o. o. cl α» cl o.

p«. rs. r>. r». rs. p*

rr. o o o o o o 22 n <t o « O 'T

E co m iti m s- x s: x s: s: x

0 *3- O 00 lO CO CM

U. CM CM CM CM CM CM

O <J o o o o Q.

-*C O

, o

+-> to h , w !>>. CO

«O H S' * « β N O r-<

CO s_- _r-n η cn 00 H _ CM

'T. C? I I I I j3 I

, ω x co lo lo co r-> i: r. c ^ cn 00 o o o 2· S «-η «-« cm

(a_. (S ES

3 <λ — cm ^r r^s< —C"4 « v. s- i_ ° fsi fsl 'io LU X O. O. CL, *-< Zz. M 0 0 1)1

cj o c O

S- S o O o CO

i- Q. - - CL ""ij 0) '“O ^ ~ +j n g c *7* ^ ujIl&lo gj 0 ° ° i -Λ " > °e ° 1 s s >

η λι 4·* <U l* 4^ l· S

·* Vt- LU 5! £L LJ flu ri r o ^ o S i o i o " T3 C f- CO Jj 1 V o o — % E X ™ s- 0) g go cn ϋ Si I _ 4-> α) l- 4-> L. o +* tu f _L~\ LU X O. LU O. u_ s /rys o g . o i5 i_ VC-XC o o «

Si /v4—-c'' ·° oooooo ^ 5 -X T n< •r— ^ t_ +J o ** OOOOOO o

(/) **0 «♦- τη ** C CL

= 0) o

3 T3 JC

</> c > CO I I I I I I 1_ ? >< CM ·Μ· *3· "d" 5_ 4-> rj 0> ω 4J C 01 JC ΙΟ -Γ- O.

CL· +j i- ΙΛ

r- (U I

.. 3 «- U LO

- . «Λ «4- X

CM 3 QJ (O *r CQ L. &_ +> 0>

r- 333313 C7>IO

o i

~ x 4_> 4-> 4-> +-> (Λ 4-> (O Q QC

/° I I I I I I »ε z ·-< I— ΙΟΙΛΙΛΙΛΙΛΙΛΧΟ S- T3 T3 «.X > 3 J_ -r-} 4J 4-1 CQ O S dl Φ 3333 I 3 <*- i/> i- L- CQ CQ CQ CQ CJ CQ 0)0) r— I I I I 0) · 4-) T3 (Λ (Λ X fl |J 41 41 ΙΛ -M o) O) -I- -r-

I I I I I I

CO CO CO CO CO CO 0) 0)0) WU+J+» >ia)AC^ r- οι id ifl

1 fl C L L

C- c α> <β n)

•r-0) ro S_ X X

.O LO

S- .— II II II II

O0) ΙΟ N OO ΟΙ O H

U. Ό ^ ^ ^ ΙΛ li) id O U Ό 32 DK 173936 B1 FARMAKOLOGISK AKTIVITET AF GEM-DIPHOSPHONATER MED FORMLEN (I)

Under rutineafprøvning viste gem-diphosphonaterne sig at udvise et spektrum af farmakologiske virkninger, hvoraf den mest markante var en hypolipidæmisk virkning (hypokolesterolæmisk og/eller hypotriglyceridæmisk). Nogle af diphosphonsyrederlvaterne viste antiinflammatorisk ak-5 tivitet, og nogle diphosphonatestere havde hypotensiv virkning. Diuretisk og inotropisk aktivitet blev også observeret.

Desuden kunne det forventes, at gem-diphosphonaterne havde antioxidant og radikalfjernende virkning i forbindelse med dialkylhydroxyphenylgrupperne, der er til stede i deres strukturer.

10 Forbindelser, der fjerner frie radikaler, er kendt for at være effektive til forebyggelse af patologiske ændringer ved en række sygdomme fremkaldt ved oxidativ belastning. Gem-diphosphonaterne er således potentielt nyttige til behandling af sygdomme såsom: vævsiskæmi, såsom hjerte- og hjerneiskæmi, 15 - muskeldystrofi, kronisk obstruktiv lungesygdom, virusinfektioner, senil caractogenese og vitamin E mangel.

20 A. Hypolipidæmisk aktivitet

Med det formål at finde nye lægemidler, som kunne have hypolipidæmisk aktivitet, blev de i den foreliggende ansøgning beskrevne nye diphosphonater administreret oralt til mus. Denne gnaverart har et plasmalipidniveau, der ligger relativt tæt på menneskets (generelt over 150 mg/dl).

25 Hos mus, der får en normal diæt, ligger kolesterol- og triglyceridniveaueme fx i området omkring 100 mg/dl, medens de sammenlignelige værdier hos rotter er tæt ved 50 mg/dl. Andre forskere har for nylig undersøgt anvendelsen af mus og har fundet, at denne art er en relevant model til afprøvning af nye midler til sammenligning med lægemidler, der er kendt for at være effektive ved human hyperlipidæmi (Effects of Fenofibrate, Gemfibrozil and Nicotinic Acid on Plasma 30 Lipoprotein Levels in Normal and Hyperlipidemic Mice, a Proposed Model for Drug Screening.

Olivier, P. et al. Atherosclerosis ΖΩ, p. 107.114,1988).

1. Fremgangsmåder

Ved hvert screening-forsøg blev 30 mus af OF1 stammen med en vægt på 25-35 g opdelt i 5 35 grupper med 6 dyr i hver. Fire grupper modtog forbindelserne, der skulle afprøves, eller referenceforbindelserne, den femte gruppe tjente som kontrol. Forbindelserne blev opløst i diethyl-ether, opløsningen blev sat til foderpillerne, og etheren blev afdampet.

33 DK 173936 B1

Alle forbindelser blev afprøvet ved en koncentration på 0,1% i dyrefoderet, ækvivalent til en daglig indtagelse på ca. 180 mg/kg. Denne diæt blev givet i 10 dage, og efter en nats faste blev dyrene dræbt ved decapitering under etheranæstesi. Blodprøver blev opsamlet i EDTA-holdige rør.

5

Plasmakolesterol og plasmatriglycerider blev målt ved enzymatiske metoder (Ames kit No. 6376 og No. 6630). Middelværdierne for kolesterol og triglycerid for hver gruppe, der havde modtaget testforbindelseme eller referenceforbindelserne, blev udtrykt som procent af middelværdien, der blev målt hos den samtidige kontrolgruppe.

10 2. Resultater

Tabel 3 viser, at et antal diphosphonatderivater (forbindelserne 3, 4, 5, 6, 7,18, 21, 22, 23, 24, 33, 34, 37, 47 og 48) var markant hypokolesterolæmiske, idet forbindelserne 33 og 34 var de mest virkningsfulde (-40% og -41%). Clofibrate, Gemfibrozil og Fenofibrate, lægemidler der 15 anvendes klinisk til behandling af hyperlipidæmi, viste sig at være mindre hypokolesterolæmiske end mange af de afprøvede diphosphonater. Fenofibrate var det mest virkningsfulde (-15%) af de afprøvede lægemiddelreferencer. En lignende hypokolesterolæmisk aktivitet blev målt hos mus, der modtog de fibratderivater, der blev publiceret i den ovennævnte reference (Olivier, P. et al.). En signifikant hypotriglyceridæmisk aktivitet blev observeret med forbindelserne 3,5, 6, 20 7,21, 22,23, 24,30. 31, 33, 37,47 og 48. Det skal bemærkes, at forbindelserne 3,19, 24, 30, 37 og 47 nedsatte plasmatriglyceridindholdet med mere end 44%, værdier som ikke nås med de på samme måde afprøvede referenceforbindelser. Gemfibrozil var den mest virkningsfulde hypotriglyceridæmiske referenceforbindelse (-35%), hvilket er i overensstemmelse med værdier publiceret i litteraturen.

25

Den eksakte mekanisme, hvorved disse diphosphonater nedsætter plasmalipidniveauet i forskellige in vivo modeller, er ikke kendt. Imidlertid har undersøgelser under anvendelse af in vitro præparater vist, at disse forbindelser inhiberer og interfererer med nogle vigtige enzymer, der er Involveret i kolesterolsyntesen og -metabolismen, specifikt acyl-CoA, kolesterolacyltrans-30 ferase (ACAT), lipaser etc., og angiver således nogle mulige virkningsområder.

B. Antiinflammatorisk virkning 1. Fremgangsmåder

Virkningen af fire udvalgte diphosphonater på den inflammatoriske reaktion på kappa-carra-35 geenan ved rottepoteødemmodellen blev undersøgt. Der blev anvendt otte hanrotter pr. gruppe.

Der blev Induceret ødem i højre bagpote hos hvert dyr ved en enkelt injektion i den plantare aponeurosis af 0,1 ml af en 1% vægt/volumen opløsning af kappa-carrageenan I 0,9% NaCI.

34 DK 173936 B1

Testforbindelserne (100 mg/kg) og referenceforbindelsen (indomethacin 30 mg/kg) blev administreret ved gavage 1 time før induktion af ødem ved carrageenan-injektion.

Volumen af højre bagpote blev målt på hvert dyr 0,1, 2½ og 4 timer efter carrageenan-injektion 5 (kun 4 timers værdier er angivet).

2. Resultater

Tabel 4 viser, at indomethacin fuldstændigt forhindrede forøgelse af potevolumen, som forventet. Forbindelserne 8 og 36 viste væsentlige inhibitoriske aktiviteter, medens de tilsvarende 10 ethylestere kun viste minimal aktivitet.

Disse resultater indikerer, at diphosphonsyrerne, såsom forbindelse 8, er antiinflammatoriske i denne dyremodel.

15 C. Oral hypotensiv aktivitet i hypertensive rotter

Den spontant hypertensive rotte (SHR) er en velkendt dyremodel for human arteriel hypertension. Gem-diphosphonaterne med formlen (I) viste sig at inducere en markant hypotension ved administrering til SHR.

20 Ved screening-forsøg blev forskellige gem-diphosphonater opløst i Tween-80 og administreret oralt til SH-rotter. Blodtrykket blev målt hver time under anvendelse af en halemanchetmetode. Hypotension målt to timer efter dosis er angivet i tabel 5.

Forbindelserne 4, 6, 7 og 18 formindskede blodtrykket med 30-50% og er lige så virkningsfulde 25 som de på samme måde afprøvede referenceforbindelser, der anvendes til behandling af angina pectoris og hypertension.

Gem-diphosphonaterne med formlen (I) er således potentielt nyttige til behandling af kardiova-skulaere sygdomme via en afslappende virkning på glat muskulatur. De primære Indikationer for 30 disse forbindelser ville være behandlingen af angina pectoris, kongestiv hjerteiammelse og hypertension.

Tabel 3 35 DK 173936 B1

Hypolipidæmisk aktivitet af diphosphonater med formlen (I) og referenceforbindelser

Forbindelser (I) Kolesterol (% kontrol) Triglycerider (% kontrol) 1 -2 - 28 2 +6 -17 4 -12 -1 6 - 37 - 34 7 -23 -15 8 -2 +19 10 -5 -19 19 -6 -44 3 -19 -46 5 -22 -24 33 -40 -21 30 +2 -45 31 +4 -11 35 0 +7 36 - 9 - 5 13 -5 +38 18 -31 +60 20 +5 +13 21 -16 - 28 22 -21 -37 23 -15 -33 24 -20 -71 32 +8 +9 34 -41 +11 37 -16 -70

Tabel 3 (fortsat) 36 DK 173936 B1

Hypolipidæmisk aktivitet af diphosphonater med formlen (I) og referenceforbindelser 5

Forbindelser (I) Kolesterol (% kontrol) Triglycerider (% kontrol) 39 + 4 +17 41 -3 +6 42 +12 +1 43 -5 -14 46 +1 -12 47 - 31 - 45 _48_;_21_136_

Referenceforbindelser

Clofibrate +4 - 5

Gemfibrozil - 7 - 35

Fenofibrate -15 -2

Tabel 4 10

Antiinflammatorisk aktivitet af diphosphonater med formlen (i) og Indomethacin

Inhibering af volumenforøgelse af højre bagpote 15 (4 timer efter ødeminduktion)

Forbindelser (I) % Ændring fra kontrol

Forbindelse 4 +1,5

Forbindelse 8 - 54,2

Forbindelse 33 - 5,8

Forbindelse 36_-25,0_

Referenceforbindelse_

Indomethacin_-92,3_

Tabel 5 37 DK 173936 B1

Virkning af gem-diphosphonater med formlen (I) på blodtrykket hos hypertensive rotter (2 timer efter dosis) 5 _____

Forbindelser (!) % formindskelse af blodtryk 4 -34 6 -64 7 -30 18 -41 _3_^20_

Referenceforbindelser

Dlltiazem - 38

Nifedipine - 47

ADMINISTRERINGSMETODER

Gem-diphosphonaterne med formlen (I) kan således anvendes til behandling af hyperlipidæmi 10 og/eller hypertension og kan fortrinsvis administreres i form af kapsler, tabletter og granuler. Til dette formål skal den aktive forbindelse blandes med en farmaceutisk bærer.

I den foreliggende ansøgning betegner "farmaceutisk bærer” fast eller flydende fyldstof, fortyndingsmiddel eller indkapslingsmateriale. Nogle eksempler på materialer, der kan anvendes som 15 farmaceutiske bærere, er sukker, stivelse, cellulose og derivater deraf, pulveriseret tragacant, malt, gelatine, talkum, stearinsyre, magneslumstearat, calciumsulfat, vegetabilske olier, polyoier og polyethylenglycoi. agar, alginsyre, pyrogenfrit vand, isotonisk saltopløsning og phosphatbuf-feropløsninger, såvel som andre ikke-toksiske, kompatible materialer, der anvendes i farmaceutiske formuleringer. Befugtningsmidler og smøremidler, såsom natriumlaurylsulfat, såvel som 20 farvestoffer, smagsstoffer og konserveringsmidler kan også forefindes.

Den farmaceutiske bærer, der anvendes i forbindelse med phosphonaterne, benyttes i en tilstrækkelig koncentration til at frembringe et praktisk størrelse/dosis-forhold. Den farmaceutiske bærer udgør fortrinsvis ffa ca. 0,1 til 99 vægt% af den totale sammensætning. Kapsler og 25 tabletter fremstilles ved konventionelle metoder under anvendelse af gem-diphosphonater i deres flydende eller krystallinske form, som beskrevet i de følgende eksepler: 38 DK 173936 B1

Eksempel på en kapsetfonmulering

Ingredienser_mg/kapsel

Forbindelse 7 300

Gelatine 100

Polyethylenglyco! 600

Kaliumsorbat_0Æ_ 5 Eksempel på en tabletformulering

Ingredienser mg/tablet

Forbindelse 33 500

Hydroxypropylmethylcellulose 500

Magnesiumstearat 3

Til behandling af specifikke sygdomstilstande kan en sammensætning indeholdende et farma· 10 ceutisk acceptabelt gem-diphosphonat administreres som opløsning, suspension eller emulsion eller ved intradermal, intramuskulær, intravenøs eller intraperitoneal injektion. Rektal administrering af gem-diphosphonater kan gennemføres ved at inkorporere den aktive forbindelse i en konventionel gelebasis til frembringelse af suppositorier.

15 Om den nærmeste kendte teknik skal anføres følgende: - Tetrahedron Vo. 30, p. 301-305 (1974), W. Lehnert:

Der anvises syntese af diphosphonatderivater substitueret med phenyl, p-.chlor, p-nitro, p-methoxyphenyl, furan og thiophen. Der er ingen anvendelsesresultater. I forbindelse med 20 opfindelsen har man fremstillet n-MeO-phenylderivatet, tabel 2, tetrahedron og målt aktiviteten med musemodellen. Den kendte forbindelse (kodenr. SR-21913) er inaktiv både på kolesterol og triglycerider.

- EP-A-0 015 370 (1980), Bentzen: 25 Der anvises methyl- og ethylestere af phenylalkyl- og phenoxyalkyldiphosphonater. Disse forbindelser ændrer lipoproteinprofilerne til fordel for den anti-atherogene HDL-fraktion (high density lipoprotein).

39 DK 173936 B1

Ifølge den foreliggende opfindelse fremstilles der kun diphosphonater substitueret med dial· kylphenylgrupper til forskel fra den kendte tekniks usubstituerede phenylalkyldiphosphona- ter.

5 Virkningen af forbindelserne ifølge Bentzen er beskrevet i EP-A-0 015 370, s. 1,1. 22-28 og S. 23,1.23-32. Ingen af forbindelserne har hypotensiv virkning.

Forbindelserne ifølge opfindelsen har hypolipidæmisk og hypotensiv virkning.

10 Som det fremgår af nedenstående tabel 6 er forbindelserne ifølge Bentzen ikke hypoli-pidæmiske.

Den ovenfor beskrevne standardprotokol er benyttet. Resultaterne viser: 15 1) at forbindelse 33 (SR-12813) og 7 (SR 9233) har potent hypolipidæmisk aktivitet (nedsættelse af både kolesterol- og triglyceridniveauet), og 2) at de tre kendte forbindelser ifølge Bentzen ikke har nogen virkning af betydning. SR-2313 og SR-1703 er svagt hyperkolesteroiæmiske; sidstnævnte forøger også triglycerideme.

SR-2303 har ingen virkning på kolesterol.

20

Den manglende aktivitet hos de kendte diphosphonater alene substitueret med simple phenylgrupper viser, at den hypolipidæmiske aktivitet kræver kombinationen af diphospho-nat og dialkylhydroxyphenyl som fx i SR-12813 og SR-9233 ifølge opfindelsen.

40 DK 173936 B1

Strukturformler for sammenlignende forbindelser Foreliggende opfindelse 5 t£u SR-12813 /P02'^

(forbindelse 33) H0"\C)/ CH=C

tsj-' Vojitj, 10 +e tfiu SR-9233 f°33a2

(forbindelse 7) H° \C>/ CH2 "CH

tSu-' " P033uz 15

Kendte forbindelser

Bentzen et al. (EP-0 015 370 (1980)) r—*\ PO-Me- SR,703 C,*0^2> · y-v. PO-M* Ρ0-Μ» 25 J f

SR-2313 \W^(CH2^3*CH

P03Et2 30

Lehnert, Tetrahedron 2Ω, p. 301-305 (1974) _. P0-Et2 SR-21913 Meo /Qvch-c x—7

Tabel 6 41 DK 173936 B1

Virkning af opfindelsens og kendte forbindelser på museplasmalipider _Forbindelser_Kolesterol (% kontrol)_Triglycerider (% kontrol) SR-12813 -28 -25 _SR-9233_-22_J7_ SR-1703 +20 +17 SR-2303 0 +18 _SR-2313_+J10_-J4_ SR-21913 +2 -4 42 DK 173936 B1

Screening af hypoilpidæmiske forbindelser hos mus på normal diaet (170 mg/kg i foder i 10 dage)

Middelværdier ± Sem

Legemsvægt Levervægt (g) Kolesterol Triglycerider Phospholipider (g) _(mg/100 ml) (mg/100 ml) (mg/100 ml)

Kontrol n=18 31,9 ±0,6 1,56 ±0,1 136,2 ±4,7 106,2 ±7,5 239,3 ±8,3 SR-12813 31,2 ±0,6 1,78 ±0,1 98,2 ±5,1 80,1 ± 13,2 170,7 ±8,4 n=18 (-28%) (-25%)

Screening af hypolipidæmlske forbindelser hos mus på normal diæt (170 mg/kg i 10 dage)

Middelværdier i Sem

Legemsvægt Levervægt (g) Kolesterol Triglycerider Phospholipider _(g) (mg/100 ml) (mg/100 ml) (mg/100 ml)

Kontrol n=18 31,1 ±0,5 1,42±0,1 136,9± 5,2 90,8 ±4,5 231,3±8,6 SR-9233 30,9 ±0,4 1,55 ±0,1 107,2 ± 5,8 75,0 ±6,5 184,0 ±8,1 η=1β (-22%) (-17%) 43 DK 173936 B1

Sccreenlng af hypolipidæmlske forbindelser hos mus på normal diæt (170 mg/kg i foder i 10 dage)

Middelværdier ± Sem

Legemsvægt Levervægt (g) Kolesterol Triglycerider Phospholipider (g) (mg/100ml) (mg/100 ml) (mg/100 ml)

Kontrol (n=6) 35 ±1 1,94 ± 0,06 105 1 2 155 ±16 200 ±6 SR-1703 34 ±1 1,87 ± 0.08 127 ±6 182 ±39 221 ±6 (n=6)_(±20%) (+ 17%) (+ 10%) SR-2303 34 ±1 2,08 ±0,02 106 ±6(0%) 183 ±21 198 ±11(0%) (n=6)_(+ 10%)_ SR-2313 32 ±1 1,60 ±0,06 116 ±10 134 ±21 200 ±9(0%) (n=6)_(+ 10%) (- 14%)_

Screening af hypolipidæmlske forbindelser hos mus på normal diæt Middelværdier t Sem

Legems- Levervægt Kolesterol Frit kole- Triglycerider Phospho- vægt(g) (g) (mg/100ml) sterol (mg/100ml) lipider (mg/100 ml) (mg/100 ml)

Kontrol 34,0±1,2 1.7±0,1 126,2±9,2 37,4±7,0 119.7 ±: 16,6 204,8±11.6 n=6_ SR-21913 34,2 ±0,6 1.7 ±0,1 129,2 ±6,5 38,3 ±2.4 115,2 ±16,6 209,6 ±13,2 n=6 +2% -4%

Claims

1. Phenolsubstituerede gem-diphosphonatderivater med formlen (I): s χΐ w ><o)zlzZ χ3°χΤΡ·A · 5:¾ (I) x p(o)zJz4 hvor:

2. Phenolsubstituerede alkyliden-diphosphonater med formlen (la) ifølge krav 1 xlw p(o)z¥ x3°7®-AtB (u) P(0)zV 30 hvor X1, X2, X3, A, B, Z1, Z2, Z3 og Z4 har den ovenfor angivne betydning.

3. Phenolsubstituerede alkenyliden-diphosphonater med formlen (Ib) ifølge krav 1 χ1 nonv 35 x 0 (Ib) X P(0)Z3Z4 hvor X-*, X2, X3, k, d, Z1, Z2, Z3 og Z4 har den ovenfor angivne betydning. DK 173936 B1

4. Phenolsubstituerede alkyliden-diphosphonater med formlen (la) ifølge krav 2 udvalgt blandt: tetraethyl^-fS.S-di-sekundærbutyM-hydroxyphenyOethyliden-l.l-diphosphonat, tetraisopropyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat, 5 tetrabutyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat, tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1-diphosphonat, tetraethyl-3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenylthio-methylen-diphosphonat, 2-{3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethyliden-1,1 -bis(2-oxo-1,3,2-dioxaphosphorinan) og 2-(3,5-ditertiærbutyt-4-hydroxyphenyt)-ethyliden-1,1 -diphosphonsyre. 10

5. Phenolsubstituerede alkenyliden-diphosphonater med formlen (Ib) ifølge krav 3 udvalgt blandt: tetraethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyåhenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonat, 15 tetraethyl-2-(3-tertiærbutyl-4-hydroxy-5-methylphenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonat, tetraisopropyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonat, tetramethyl-2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonat og 2-(3,5-ditertiærbutyl-4-hydroxyphenyl)-ethenyliden-1,1 -diphosphonsyre.

6. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) ifølge krav 2. kendeteg- n e t ved, at man omsætter en forbindelse med formlen II X1 *3°-ητ)·Α·ν π 25 x7w hvor Y = Cl, Br eller °*3 og A, X1,X2 og X3 har de ovenfor angivne betydninger, med en diphosphonatforbindelse med 30 formlen ill ...... P(0)zV H-C-B m P(0)Z3Z4 35 hvor B, Z1, Z2, Z3 og Z^ har de ovenfor angivne betydninger, under tilstedeværelse af en base. DK 173936 B1

7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at anionen af diphosphonatforbin-delsen med formlen III, der er dannet in situ ved omsætning af III med en base, såsom natrium-hydrid, omsættes med et halid med formlen II (II, Y = Cl eller Br) i et aprotisk opløsningsmiddel, som er et carbonhydrid, såsom toluen, benzen eller en ether, såsom tetrahydrofuran, dioxan, 5 dimethoxyethan eller en blanding af to af disse opløsningsmidler, ved en temperatur mellem 65"C og 110 eC.

8. Fremgangsmåde ifølge krav 6, hvor A er S, kendetegnet ved, at anionen af diphos-phonatforbindelsen med formlen III, der er dannet in situ ved omsætning af III med en base, 10 såsom n-butyllithium, omsættes med et disulfid med formlen II X1 x30—II 15 og A, , X2 og Χ^ har de ovenfor angivne betydninger, i et opløsningsmiddel, såsom tetrahydrofuran eller benzen, ved en temperatur mellem -78”C og 40°C-

9. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (Ib) ifølge krav 3, kendeteg-n e t ved, at man omsætter et aldehyd med formlen IV

20 X1 H χ3° —iCH=CH ^ k~ (CH2 ^ d ”C*° IV X2 hvor X1. X2, χ3, d og k har de ovenfor angivne betydninger, med et diphosphonat med formlen 25 V PfO^Z2 ch2 V P(0)Z3Z4 30 hvor z\ Z2, og Z^ har de ovenfor angivne betydninger, med tilstedeværelse af titantetra-chlorid og en tertiær amin, såsom pyridin eller methylmorpholin, i en ether som opløsningsmiddel, fortrinsvis i tetrahydrofuran, dioxan eller dimethoxyethan eller en blanding af to af disse opløsningsmidler, ved en temperatur mellem 0°C og 3QeC.

10. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) ifølge krav 2, kende tegnet ved at vinyliden-diphosphonat-dobbeltbindingen i en forbindelse med formlen (Ib) ifølge krav 3 reduceres selektivt ved anvendelse af et komplekst hydrid, såsom natriumborhy-drid eller lithiumborhydrid i ethanol eller methanol ved en temperatur mellem -15° og 25°C. DK 173936 B1

10 Z4. Z2. Z3 og Z4 er ens eller forskellige og betyder - OR, hvor R er H eller C-|_8-alkyl. - OM, hvor M er en alkali- eller jordalkalimetaiion eller en ammoniumgruppe N(R)4, hvor R har den ovenfor angivne betydning, eller - N(R)2, hvor R ligeledes har den ovenfor angivne betydning, eller 15 Z1, Z2 og Z3, Z4 tilsammen danner en C2_8*alkylidendioxyring; X1 og X2 er ens eller forskellige og er C^.g-alkyl; X3 er H, C^-alkyl, (C(O)C-u-alkyl eller C^NHC^-alkyl; A er CH=CH-CH2. (CH2)n, S. S02, S(CH2)n, S02(CH2)n eller (CH=CH)k-(CH2)d-CH, hvor n er et helt tal fra 1 til 7, k er 0 eller 1, og d er et helt tal fra 0 til 4; 20. er H eller Ci _4-alkyl, og t er 0 eller 1, idet t dog kun er 0, når A er (CH=CH)k-(CH2)d-CH. hvor k og d har de ovenfor angivne betydninger.

11. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) ifølge krav 2, kendetegnet ved, at dobbeltbindingerne i en forbindelse med formlen (Ib) ifølge krav 3 reduceres fuldstændigt ved anvendelse af et overskud af et komplekst hydrid, såsom natriumborhydrid eller Iithiumborhydrid i ethanol eller methanol, ved en temperatur mellem 30°C og 80°C. 5

12. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) ifølge krav 2, kendetegnet ved, at dobbeltbindingerne i en forbindelse med formlen (Ib) ifølge krav 3 reduceres fuldstændigt ved katalytisk hydrogenering under anvendelse af gasformigt hydrogen som reagens og palladium eller platin adsorberet på aktivt kul som katalysator i et polært opløsnings- 10 middel såsom methanol, ethanol, dimethoxyethan, dioxan, tetrahydrofuran eller eddikesyre, ved stuetemperatur og et tryk mellem 1 atm. og 4 atm.

13. Fremgangsmåde til fremstilling af diphosphonsyreforbindelser med formlen (I) ifølge krav 1, hvor Z1 = Z2 = Z3 = Z4 = OH, kendetegnet ved, at man hydrolyserer en diphosphonat- 15 ester med formlen (I) ifølge krav 1, hvor Z1 = Z2 = Z3 * Z4 = OEt, med koncentreret saltsyre ved tilbagesvalingstemperatur eller med bromtrimethylsilan efterfulgt af behandling med vand.

14. Fremgangsmåde til fremstilling af diphosphonatforbindelser med formlen (I) ifølge krav 1, hvorZ1 = z2 = Z3 = Z4 = OMe, kendetegnet ved, at man omsætterdiphosphonsyren 20 fremstillet ifølge krav 13 med trimethylorthoformat ved tilbagesvalingstemperatur.

15. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (f) ifølge krav 1, hvor hvert af de to substituentpar Z1,Z2 og Z3,Z4 danner en alkylidendioxyring med 2-8 carbonatomer, kendetegnet ved, at man omsætter diphosphonyltetrachlorid fremstillet ved omsætning af 25 tetraethylesteren af diphosphonatet med formlen (I), hvor Z1 = Z2 = Z3 = Z4 = OEt, med tri-methylbromsiian og derefter med phosphorpentachlorid, med en diol under tilstedeværelse af en tertiær amin i en polær ether som opløsningsmiddel, såsom i dioxan, ved en temperatur mellem 20°C og 100°C.

16. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) ifølge krav 2, hvor A = S- (CH2)n eller0-(CH2)n. kendetegnet ved, at man omsætter henholdsvis en thiophenol med formlen VI X1 x3oJt\Ls-h vi hvor x\ X2ogX3 haar de ovenfor angivne betydninger 35 DK 173936 B1 eller en hydroquinon med formlen VII X1 X3°-^^-°H VII X hvor X1, X2 og X3 har de ovenfor angivne betydninger, med et bromalkylidendiphosphonat med formlen VIII 1n p(Q)zhz 10 , Br”(CH2VfH VIII P(0)Z3Z4 15 hvor Z1, Z2. Z3 og Z4 har de ovenfor angivne betydningeer, under tilstedeværelse af en base.

17. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) Ifølge krav 2, hvor S(CH2)3, kendetegnet ved, at man omsætter en thlophenol med formlen VI som angivet i krav 16 og et alkenylidendiphosphonat med formlen IX 2° ρ(ο)ζ!ζ2 CH2 -CH IX P(0)Z3Z4 25 hvor Z1, Z2, Z3 og Z4 har de ovenfor angivne betydninger, under tilstedeværelse af et radikal-dannende middel, såsom dibenzoylperoxid.

18. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (la) ifølge krav 2, hvor A er 30 S02(CH2)ry og n har den ovenfor angivne betydning, kendetegnet ved, at man oxiderer forbindelserne med formlen (la), hvor A = S(CH2)n- °9 n har den ovenfor angivne betydning, ved anvendelse af m-chlorperoxybenzoesyre eller kaliumhydrogenpersulfat.

19. Farmaceutisk sammensætning, kendetegnet ved, at den indeholder en terapeutisk 35 effektiv mængde af mindst en diphosphonatforbindelse med formlen (I) ifølge krav 1 i kombination med en farmaceutisk acceptabel bærer.