ES2285427T3 - Procedimiento de preparacion de una solucion de albumina. - Google Patents

Procedimiento de preparacion de una solucion de albumina. Download PDF

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Abstract

Procedimiento para la preparación de albúmina, caracterizado por la combinación de las siguientes etapas: a) someter a una primera solución de albúmina acuosa a un tratamiento para la inactivación de virus según el procedimiento SD mediante su puesta en contacto con reactivos SD a una temperatura inferior a 45ºC. b) eliminar los reactivos SD mediante extracción en aceite y a continuación cromatografía de interacción al menos esencialmente, usándose a este respecto para la cromatografía una matriz hidrófoba, en especial una matriz a la que pueden estar unidos dado el caso grupos hidrófobos, con la condición de que estos grupos sean grupos alifáticos con C > 24, y obteniéndose una segunda solución de albúmina, la cual c) se mezcla dado el caso con uno o varios estabilizadores del grupo de azúcares, aminoácidos y alcoholes de azúcar, con la condición de que como estabilizador no se emplea ningún estabilizador de indol ni ningún ácido graso C6-C10, después de lo cual d) la segunda solución de albúmina, dado el caso mezclada con estabilizador se procesa finalmente y se filtra hasta esterilidad y dado el caso se envasa en recipientes finales.

Description

Procedimiento de preparación de una solución de albúmina.
La invención se refiere a un procedimiento para la preparación de albúmina utilizable terapéuticamente inactivada de virus.
La albúmina es la proteína plasmática más fuertemente representada proporcionalmente en el plasma sanguíneo. La albúmina puede unir a su molécula muchas sustancias endógenas y exógenas. En esta capacidad de unión se basa también una de sus funciones principales: el transporte de sustancias unidas a albúmina.
A causa de su capacidad de unión, la albúmina representa un importante depósito para una pluralidad de compuestos, como por ejemplo ácidos grasos de cadena larga, bilirrubina, triptófano, tiroxina o iones metálicos. También principios activos farmacéuticos como warfarina, digitoxina o naxopreno se unen y son transportados por la albúmina.
En este contexto resulta no obstante decisivo saber que únicamente la fracción libre del correspondiente principio activo, es decir, la que no está unida a albúmina, es aquella que desarrolla el efecto farmacológico. Una reducción de la parte unida a albúmina aumenta la fracción libre y con ello la actividad farmacológica.
Muchos de los preparados de albúmina comercialmente disponibles se preparan por medio de un fraccionamiento de Cohn modificado, estando compuesto este procedimiento normalmente por varias etapas de fraccionamiento. La pasteurización (10 horas a 60ºC) del concentrado de albúmina se aplica como etapa de inactivación de virus desde hace décadas. Para evitar la desnaturalización de la albúmina, durante esta etapa se añaden estabilizadores. Según la farmacopea europea, como estabilizadores se emplean caprilato de sodio (octanoato de sodio) o N-acetiltriptófano o una combinación de ambos.
Para obtener preparados de factor VIII u otras proteínas plasmáticas inactivadas de virus se aplica el llamado procedimiento SD, como se describe por ejemplo en el documento EP-A-0 131 740. Se hace referencia explícita a esta publicación para información de solicitud de patente.
La solicitante sabe por estudios propios que la capacidad de unión de la albúmina comercialmente obtenible está sustancialmente disminuida en comparación con la albúmina natural. Esto se debe a que durante la pasteurización, los estabilizadores empleados se unen a la albúmina y ocupan de esta forma importantes sitios de transporte, con lo que se reduce la capacidad de unión. Esto significa que los pacientes que reciben tales preparaciones de albúmina, cuando se les administran principios activos farmacéuticos, están expuestos a una concentración sustancialmente elevada de principio activo libre, es decir, no unido a albúmina, lo cual conlleva para el paciente naturalmente un elevado peligro de efectos farmacológicos exagerados y efectos secundarios.
La presente invención se propone el objetivo de proporcionar una preparación de albúmina que no presente esta desventaja.
la fig. 1 muestra el comportamiento de absorción de albúminas de diferente procedencia en función del tiempo de elución de distintas concentraciones de fenilbutazona.
la fig. 2 ilustra el comportamiento de unión de albúminas de diferente procedencia en presencia de diferentes concentraciones de fenilbutazona.
la fig. 3 ilustra el comportamiento de unión de albúminas de diferente procedencia en presencia de diferentes concentraciones de warfarina.
El problema se resuelve mediante una albúmina utilizable terapéuticamente inactivada de virus con capacidad de unión para sustancias aumentada respecto a albúmina inactivada de virus por pasteurización. La albúmina que se puede preparar según la invención presenta en especial una capacidad de unión aumentada un 10% respecto a albúmina inactivada de virus por pasteurización, típicamente capacidad aumentada de 20 a 500%, en especial capacidad aumentada de 100% a 500%. En función de la sustancia que se va a unir, también son posibles en casos singulares valores aún mayores.
Las sustancias son especialmente aquellas que se unen y/o son transportadas de forma natural por la hemoglobina, a las que pertenecen especialmente principios activos de bajo peso molecular. En especial los principios activos de bajo peso molecular son sustancias orgánicas o inorgánicas, ácidos nucleicos, polipéptidos, que presentan típicamente un peso molecular de \leq10000 Da.
Para los fines terapéuticos pretendidos, la albúmina que se puede preparar según la invención puede encontrarse en solución líquida o en estado sólido, en especial en forma liofilizada.
La albúmina que se puede preparar según la invención también se puede obtener mediante un procedimiento que se caracteriza por la combinación de las siguientes etapas:
a) someter a una primera solución de albúmina acuosa a un tratamiento para la inactivación de virus según el procedimiento SD mediante su puesta en contacto con reactivos SD a una temperatura inferior a 45ºC.
b) eliminar los reactivos SD mediante extracción en aceite y a continuación cromatografía de interacción al menos esencialmente, usándose a este respecto para la cromatografía una matriz hidrófoba, en especial una matriz a la que pueden estar unidos dado el caso grupos hidrófobos, con la condición de que estos grupos sean grupos alifáticos con C > 24, y obteniéndose una segunda solución de albúmina, la cual
c) se mezcla dado el caso con uno o varios estabilizadores del grupo de azúcares, aminoácidos y alcoholes de azúcar, con la condición de que como estabilizador no se emplea ningún estabilizador de indol ni ningún ácido graso C_{6}-C_{10}, después de lo cual
d) la segunda solución de albúmina, dado el caso mezclada con estabilizador se procesa finalmente y se filtra hasta esterilidad y dado el caso se envasa en recipientes finales.
El término estabilizador de indol debe comprender todos aquellos estabilizadores que presentan un esqueleto de indol, como por ejemplo N-acetiltriptófano.
El procedimiento SD (Solvens/Detergens, disolvente/detergente) para la inactivación de virus se conoce del documento EP-A-0131740. En este documento también se menciona la albúmina, entre otras proteínas.
Del documento EP-A-0366946 se conoce que los reactivos de SD se pueden eliminar con aceites vegetales, por ejemplo aceite de soja, y a continuación cromatografía de interacción hidrófoba. El procedimiento según la reivindicación 8, en lo que se solapa con el procedimiento según el documento EP-A-0366946 se debe contemplar en un aspecto como procedimiento de analogía con él para la preparación de la albúmina según la invención. Para la cromatografía se propone no obstante en ese documento una matriz, por ejemplo una matriz de sílice, a la que están unidas cadenas laterales hidrófobas, concretamente cadenas de alquilo C_{6}-C_{24} ramificadas o no ramificadas.
Se ha demostrado sorprendentemente que el empleo de una matriz hidrófoba en lugar de una matriz que porta como cadenas laterales hidrófobas por ejemplo cadenas alquilo C_{18}, posee una capacidad de unión mayor para la absorción de detergentes. De forma correspondiente, a la matriz usada según la invención no necesitan estar unidos grupos hidrófobos adicionales. Un procedimiento que use una matriz de este tipo es por lo tanto también objeto de la invención.
La inactivación de virus se lleva a cabo de forma ventajosa a una temperatura en el intervalo de 25 a 40ºC.
Una forma de realización preferida del procedimiento según la invención consiste en que la inactivación de virus se lleva a cabo durante un periodo en el intervalo de 4 a 6 horas.
Como estabilizador es muy adecuada la glicina.
Para la extracción con aceite es muy adecuado el aceite de ricino.
Para el efecto de limpieza se ha demostrado especialmente ventajoso usar un polímero de poliestireno - divinilbenceno o un polímero basado en metacrilato como matriz hidrófoba.
Las matrices hidrófobas empleadas según la invención pueden portar grupos alifáticos ramificados o lineales con más de 24 átomos de carbono.
En función del material de partida usado, puede ser necesaria una tepa para agotar la llamada actividad de activador de precalicreína (PKA). La PKA se conoce porque, mediante la liberación de la sustancia vasoactiva bradiquinina a partir del quininógeno de alto peso molecular (HMWK), conduce a una disminución de la presión sanguínea tras la administración de preparados que contienen PKA.
La PKA se inactiva por lo general durante la pasteurización de preparados de proteínas. Dado que un tratamiento térmico, mediante el que la PKA según la invención se inactiva parcialmente, es desventajoso para la albúmina preparada según el procedimiento por los motivos anteriormente mencionados, la PKA, en caso de que sea necesario, puede eliminarse mediante medidas especiales. A estas pertenece la incubación con carbón activo con filtración subsiguiente, preferiblemente en filtros de profundidad, o el filtrado directo a través de filtros que contienen carbón activo.
Además son adecuados intercambiadores iónicos, como intercambiadores catiónicos o aniónicos, para la eliminación de la PKA. Esto se puede llevar a cabo poniendo en contacto la solución que contiene albúmina con la matriz en columnas o mediante el procedimiento en lotes conocido para el experto. Como alternativa, se pueden emplear matrices de sulfato de dextrano o heparina para la reducción de la PKA.
En la solución que contiene albúmina obtenida, la PKA es reducida, en el caso óptimo, no detectable. LA PKA, según el estado actual de la técnica, es idéntica al factor XII activado (FXIIa) (de coagulación), que se genera a partir de su forma de proenzima (FXII). Esto se puede llevar a cabo en superficies de forma autocatalítica o mediante acción enzimática, por ejemplo de la calicreína. Correspondientemente, también es recomendable un agotamiento de FXII (proenzima) como sustancia de partida de la PKA, aunque no obligatoriamente necesario. Para prevenir no obstante una nueva generación de PKA a partir de la forma de proenzima, esta también se puede eliminar mediante cromatografía de intercambio iónico. El agotamiento del FXII puede llevarse a cabo dado el caso para posibilitar un almacenamiento a largo plazo de la albúmina en estado líquido. Esto también es importante tras la descongelación de una solución de albúmina dado el caso almacenada en estado congelado. Correspondientemente, la solución de albúmina puede congelarse tras su envasado en los recipientes finales, aunque también puede almacenarse en estado líquido o liofilizado refrigerada y hasta una temperatura de 40ºC.
Por lo tanto, para eliminar la PKA, o sustancias precursoras de PKA, se puede eliminar la actividad de activador de precalicreína (PKA) dado el caso presente, antes o después de las etapas (a), (b) o (c) de forma en sí conocida, especialmente
A) poniéndose en contacto la solución de albúmina con carbón activo, después de lo cual se elimina el carbón activo de la solución de albúmina, o
B) sometiéndola a una cromatografía de intercambio iónico.
La etapa (A) se lleva a cabo en el caso de una concentración de albúmina entre 1 y 25% en peso, en especial entre 5 y 10% en peso.
La etapa (B) se lleva a cabo en especial en el caso de una concentración de albúmina entre 5 y 10% en peso.
Una forma de realización adicional del procedimiento según la invención consiste en que el intercambiador iónico es un intercambiador aniónico y la solución de albúmina está tamponada con acetato de sodio en el intervalo de 100-150 mMol/l y el pH se encuentra en el intervalo de 5,0-6,0, en especial <5,5.
Además se describe un procedimiento que se caracteriza porque el intercambiador iónico es un intercambiador catiónico la solución de albúmina está tamponada con acetato de sodio en el intervalo de 20-30 mMol/l y el pH se encuentra en el intervalo de 4,8-6,0, en especial en el intervalo de 4,8-5,2.
El procedimiento se puede aplicar en soluciones de albúmina obtenidas de distintas fuentes, por ejemplo de plasma o suero sanguíneo, de fracciones que contienen albúmina del fraccionamiento del plasma, de albúmina obtenida de sobrenadantes de cultivos según la preparación recombinante o albúmina preparada de forma transgénica o de medio que contiene albúmina, como leche.
Por medio de los siguientes ejemplos se describirá una forma de realización preferida de la invención.
Ejemplo
A 1000 g de una solución acuosa de albúmina del procedimiento de Cohn (después de dia/ultrafiltración) con un contenido en proteína de aproximadamente 23% se le añaden triton X-100 y trifosfato de n-butilo (TNBP) hasta una concentración del 1% respectivamente. A continuación se agita la solución de albúmina durante 4 horas a 30ºC.
Para eliminar los reactivos de SD se añade a continuación aceite de ricino con agitación hasta una concentración del 5%, mientras que la solución se lleva a una temperatura en el intervalo de 20-25ºC. Después se agita la mezcla 30 minutos. Después de la agitación, la mezcla se deja reposar 60 minutos, formándose una fase acuosa pesada y una fase ligera. Se separa la fase pesada y se filtra sobre un filtro con membranas de un tamaño de poro de < 1 \mum y < 0,45 \mum. La fase ligera (fase oleosa) contiene el TNBP y se desecha.
La solución filtrada se conduce para la separación del triton X-100 sobre una columna de extracción de fase sólida. Como matriz hidrófoba se usa un polímero de poliestireno-divinilbenceno (Amberchrome CG 161) sin cadenas laterales hidrófobas. Se usa agua para inyección para lavar la columna, vigilándose este procedimiento mediante la medición de la absorción de UV a 280 nm. Tras su uso, la columna se regenera.
Como estabilizadores se pueden añadir: glicina, glutamato, arginina, maltosa, sorbitol o mezclas de las sustancias.
La solución obtenida se lleva a pH = 7,0 y se ajustan el contenido en proteína a 200 g/l y el contenido en sodio a 80 mMol/l Na^{+}. Después la solución se filtra hasta esterilidad a través de un filtro de membrana con un tamaño de poro de \leq 0,2 \mum.
La solución esterilizada se envasa en condiciones asépticas en bolsas estériles exentas de pirógenos de PVC y se etiqueta.
Las bolsas etiquetadas se congelan a una temperatura de < -60ºC, de forma que la temperatura en el interior de las bolsas alcanza < -30ºC. A esta temperatura (\leq -30ºC) se almacenan las bolsas.
Agotamiento de precalicreína
En caso del enriquecimiento de PKA, se pueden llevar a cabo las siguientes variantes:
a) una solución de albúmina con una concentración de proteína de 1-25% en peso, en especial de 5-10% en peso se agita con 3-10% en peso, en especial 5% en peso de carbón activo a pH = 5 durante una hora. A continuación se elimina por filtración el carbón activo.
b) una solución de albúmina con una concentración de proteína de 5-10% en peso se somete a ph 5-6, en especial < 5,5 en un sistema tamponado con acetato de sodio 100-150 mMol a una cromatografía de intercambio iónico (DEAE-sefarosa, Q-sefarosa). A causa de la elevada fuerza iónica, en el ciclo se obtiene una solución de albúmina exenta de PKA.
c) una solución de albúmina con una concentración de proteína de 5-10% en peso se somete a ph 5-6, preferiblemente 4,8-5,2 en un sistema tamponado con acetato de sodio 20-30 mMol a una cromatografía de intercambio iónico (SP-toyopearl, CM-sefarosa). A causa de la elevada fuerza iónica, en el ciclo se obtiene una solución de albúmina exenta de PKA.
Formulación final
Las soluciones obtenidas se llevan respectivamente a pH = 7,0 y se ajustan el contenido en proteína a 200 g/l y el contenido en sodio a 80 mMol/l de Na^{+}. Después, la solución se filtra hasta esterilidad a través de un filtro de membrana con un tamaño de poro < 0,2 \mum.
Las soluciones esterilizadas se envasan en condiciones asépticas en bolsas estériles exentas de pirógenos de PVC y se etiquetan.
Las bolsas etiquetadas se congelan a una temperatura de < -60ºC, de forma que la temperatura en el interior de las bolsas alcanza < -30ºC. A esta temperatura (\leq -30ºC) se almacenan las bolsas.
Medición de la unión de sustancias a diferentes preparaciones de albúmina
La cromatografía de exclusión molecular (SEC; size exclusion cromatography) según Hummel y Dreyer (Biochim Biophys Acta 1962; 63: 530-532) ofrece un procedimiento directo para determinar las características de unión de sustancias a albúmina.
Para ello se equilibra una columna SEC con una solución tampón que contiene los ligandos de unión (por ejemplo, fenilbutazona o warfarina). La absorción en el intervalo UV se monitoriza continuamente. La proteína se dispone en la columna y se eluye con el tampón de equilibrio. A este respecto, el ligando unido eluye junto con la albúmina, mientras que el ligando no unido, en la mayoría de las ocasiones más pequeño eluye correspondientemente más tarde. La absorción del ligando unido interfiere a este respecto en la mayoría de las ocasiones con la absorción de la albúmina y posibles sustancias acompañantes, como estabilizadores. El pico que eluye más tarde negativo, llamado "vacío" está causado por el agotamiento del ligando en el siguiente tampón, que ocupa más superficie cuanto más se ha unido a la albúmina que eluyó antes. Kozumi y col. (Biomed Chromatogr 1998; 12: 203-210) usaron este procedimiento de forma ligeramente modificada para investigar las capacidades de unión de sustancias a albúmina o sus afinidades, añadiendo por ejemplo a concentraciones constantes de albúmina en diferentes pases cantidades crecientes del ligando y de este forma se pudo determinar la capacidad de unión en forma de proporciones de albúmina a sustancia.
Para estas investigaciones se usó una columna Biosep-SEC-S 4000 de 300 x 4,6 mm micron (Phenomenenx) en un dispositivo de HPLC Shimadzu. El caudal de tampón ascendió a 0,35 ml/min, habiéndose equilibrado la columna con tampón fosfato de potasio 50 mM, pH 7,4. La concentración de proteína ascendió a 50 \muM, el vol de inyección a 80 \mul. Se monitorizó fenilbutazona a 263 nm, warfarina a 308 nm. Los intervalos lineales de absorción se habían determinado anteriormente.
Se usó la albúmina descrita en esta solicitud (1), así como dos preparados de albúmina comercialmente obtenibles (estabilizados) (2, 3). A este respecto se trataba de soluciones de albúmina al 20%.
La fig. 1 representa una transposición de dos cromatogramas diferentes, habiéndose equilibrado la columna en fenilbutazona 50 \muM (en tampón fosfato). A un tiempo de retención de 11 minutos, la albúmina eluyó en primer lugar, indicando el pico la sima de la absorción de la proteína y de la sustancia unida. A 14,5 min se muestra en el caso de una albúmina comercial por lo general un pico de N-acetiltriptófano (estabilizador). Después de 18,5 minutos aparece el pico "vacío" en forma de una representación de absorción negativa en relación al nivel del tampón de equilibrio del resto de la sustancia. Cuanto mayor (en sentido negativo) es este pico, o cuanto mayor es el área del pico, más sustancia se ha unido a la albúmina que ha eluído anteriormente.
La fig. 2 muestra las absorciones de UV de tres concentraciones de fenilbutazona unidas a albúmina (después de restar el pico del tampón).Para ello se cromatografiaron dos albúminas obtenibles comercialmente (que contenían caprilato y N-acetiltriptófano) así como la albúmina preparada según el procedimiento descrito en esta solicitud y se compararon las cualidades de unión. A concentraciones molares comparables de fenilbutazona a albúmina, se demostró claramente que el pico en tamaño y área es considerablemente mayor en el caso de la nueva albúmina. Esto es válido de forma similar para el segundo ejemplo, concretamente warfarina, como se representa en la fig. 3.
Estos resultados subrayan que la albúmina comercial es inferior en cuanto a sus características de unión a la albúmina descrita en el presente documento.
Comparación de la capacidad de unión de columnas RP-18 en comparación con polímeros de poliestireno-divinilbenceno (Amberchrome 161 M)
Sistema de ensayo: Volumen de columna: 44 ml
Caudal: 4 ml/min.
La columna se cargó con una solución de triton X-100. Se midió el contenido en triton X-100 en el eluato después de cada volumen de columna por medio de HPLC de fase inversa. Cuando se podía percibir triton en el eluato, se había alcanzado la capacidad del gel.
Resultado
El gel RP-18 une 140 mg de triton X-100/ml de gel y el gel Amberchrome une 16o mg de triton X-100/ml de gel.

Claims (18)

1. Procedimiento para la preparación de albúmina, caracterizado por la combinación de las siguientes etapas:
a)
someter a una primera solución de albúmina acuosa a un tratamiento para la inactivación de virus según el procedimiento SD mediante su puesta en contacto con reactivos SD a una temperatura inferior a 45ºC.
b)
eliminar los reactivos SD mediante extracción en aceite y a continuación cromatografía de interacción al menos esencialmente, usándose a este respecto para la cromatografía una matriz hidrófoba, en especial una matriz a la que pueden estar unidos dado el caso grupos hidrófobos, con la condición de que estos grupos sean grupos alifáticos con C > 24, y obteniéndose una segunda solución de albúmina, la cual
c)
se mezcla dado el caso con uno o varios estabilizadores del grupo de azúcares, aminoácidos y alcoholes de azúcar, con la condición de que como estabilizador no se emplea ningún estabilizador de indol ni ningún ácido graso C_{6}-C_{10}, después de lo cual
d)
la segunda solución de albúmina, dado el caso mezclada con estabilizador se procesa finalmente y se filtra hasta esterilidad y dado el caso se envasa en recipientes finales.
2. Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado porque la inactivación de virus se lleva a cabo a una temperatura en el intervalo de 25 a 40ºC.
3. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 y/o 2, caracterizado porque la inactivación de virus se lleva a cabo durante un periodo en el intervalo de 4 a 6 horas.
4. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque como estabilizado se emplea glicina, glutamato, arginina o lisina o una combinación de los mismos.
5. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque como estabilizado se emplea maltosa y/o sorbitol.
6. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque para la extracción con aceite se emplea aceite de ricino.
7. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque como matriz hidrófoba se emplea una polímero de poliestireno-divinilbenceno o un polímero basado en metacrilato.
8. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque a la matriz están unidos grupos alifáticos ramificados o lineales con más de 24 átomos de C.
9. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque la solución de albúmina se congela tras el envasado en los recipientes finales.
10. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque antes o después de las etapas (a), (b) o (c) se elimina la actividad de activador de precalicreína (PKA) dado el caso presenta de una forma en sí conocida.
11. Procedimiento según la reivindicación 10, caracterizado porque para la eliminación de la actividad de activador de precalicreína dado el caso presente, la solución de albúmina
a) se pone en contacto con carbón activo, después de lo cual se elimina el carbón activo de la solución de albúmina, o
b) se somete a una cromatografía de intercambio iónico.
12. Procedimiento según la reivindicación 11, caracterizado porque la etapa (A) se lleva a cabo en caso de una concentración de albúmina entre 1 y 25% en peso.
13. Procedimiento según la reivindicación 12, caracterizado porque la concentración de albúmina asciende a entre 5 y 10% en peso.
14. Procedimiento según la reivindicación 11, caracterizado porque la etapa (B) se lleva a cabo en el caso de una concentración de albúmina entre 5 y 10% en peso.
15. Procedimiento según una de las reivindicaciones 11 ó 14, caracterizado porque el intercambiador iónico es un intercambiador aniónico y la solución de albúmina está tamponada con acetato de sodio en el intervalo de 100-150 mmol/l y el pH se encuentra en el intervalo de 5,0 - 6,0.
16. Procedimiento según la reivindicación 15, caracterizado porque el pH es < 5,5.
17. Procedimiento según una de las reivindicaciones 11 ó 14, caracterizado porque el intercambiador iónico es un intercambiador catiónico y la solución de albúmina está tamponada con acetato de sodio en el intervalo de 20-30 mmol/l y el pH se encuentra en el intervalo de 4,8 - 6,0.
18. procedimiento según la reivindicación 17, caracterizado porque el pH se encuentra en el intervalo de 4,8 a 5,2.
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102005023155A1 (de) * 2005-05-13 2006-11-16 Albutec Gmbh Albuminlösung
CA2634329A1 (en) 2005-12-22 2007-07-19 Csl Behring Gmbh Octanoate-reduced human albumin
ES2332846B1 (es) 2007-10-26 2010-07-08 Grifols, S.A. Utilizacion de albumina humana terapeutica para la preparacion de un medicamento para el tratamiento de pacientes afectados por desordenes cognitivos.
ES2294976B1 (es) * 2007-11-12 2008-12-16 Grifols, S.A. "procedimiento de obtencion de albumina humana de alta eficacia para su uso en terapia de detoxificacion".
EP2382993A1 (en) 2010-04-19 2011-11-02 KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH Combination of drugs with protein-binding prodrugs
CN111195351A (zh) * 2020-01-20 2020-05-26 华兰生物工程重庆有限公司 5%低浓度人血白蛋白的制备方法

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2190436B1 (es) * 1972-07-05 1975-06-20 Merieux Inst
SU1212416A1 (ru) * 1984-04-03 1986-02-23 Научно-Исследовательский Институт Гематологии И Переливания Крови Им.Проф.Р.О.Еоляна Способ выделени альбумина из плазмы крови
JPH0669961B2 (ja) * 1984-09-25 1994-09-07 株式会社ミドリ十字 免疫グロブリンの加熱処理方法
US5094960A (en) * 1988-10-07 1992-03-10 New York Blood Center, Inc. Removal of process chemicals from labile biological mixtures by hydrophobic interaction chromatography
US5250662A (en) * 1989-10-05 1993-10-05 Alpha Therapeutic Corporation Albumin purification
RU2007423C1 (ru) * 1991-06-04 1994-02-15 Институт биофизики клетки РАН Способ очистки сывороточного альбумина
DE19729778A1 (de) * 1997-07-11 1999-01-21 Blutspendedienst Der Drk Lande Verfahren zur Herstellung von virusinaktivierten biologischen Flüssigkeiten
US5919907A (en) * 1997-12-22 1999-07-06 Shanbrom Technologies Llc Preparation and utilization of a novel sterile albumin
IL136552A (en) * 2000-06-05 2005-05-17 Omrix Biopharmaceuticals Ltd Method for the inactivation of viruses by a solvent - detergent combination and by nanofiltration

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Publication number Publication date
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