ES2293045T3 - Derivados de benzofurano, procedimiento para su preparacion, e intermedios de los mismos. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I): (Ver fórmula) en la que: el anillo A es piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo; en la que dicho piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R 4 ; uno de R 1 y R 2 es hidrógeno, y el otro es hidrógeno o alquilo C1 - 4; en la que R 1 y R 2 pueden estar sustituidos en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R 5 ; R 3 se selecciona de alquilo C1 - 4, alcoxi C1 - 4, carbociclilo, heterociclilo, carbocicliloxi y heterocicliloxi; en la que R 3 puede estar independientemente sustituido en el carbono, de forma opcional, con uno o más grupos seleccionados de R 6 ; y en la que si dicho heterociclilo contiene un resto -NH-, ese nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido con alquilo C1 - 4; R 4 se selecciona de halo, carboxi y alquilo C1 - 4; R 5 y R 6 se seleccionan independientemente de halo, alquilo C1 - 4, alcoxi C1 - 4, N-(alquil C1 - 4)amino, N,N-(alquil C1 - 4)2amino, carbociclilo, heterociclilo, carbocicliloxi, heterocicliloxi y carbociclilidenilo; en la que R 5 y R 6 pueden estar independientemente sustituidos en el carbono, de forma opcional, con uno o más R 7 ; y en la que si dicho heterociclilo contiene un resto -NH-, ese nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido con alquilo C1 - 4; R 7 se selecciona de halo, carboxi, metilo, etilo, metoxi, etoxi, metilamino, etilamino, dimetilamino, dietilamino y N-metil-N-etilamino; o una sal, solvato o profármaco del mismo.

Description

Derivados de benzofurano, procedimiento para su preparación, e intermedios de los mismos.

La presente invención se refiere a compuestos químicos útiles en el tratamiento o prevención de una enfermedad o afección mediada por glucoquinasa (GLK), conduciendo a una disminución del umbral de glucosa para la secreción de insulina. Además, se predice que los compuestos reducen la glucemia, aumentando la captación hepática de glucosa. Tales compuestos pueden tener utilidad en el tratamiento de la diabetes tipo 2 y de la obesidad. La invención se refiere también a procedimientos para preparar dichos compuestos, a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, y al uso de un compuesto de este tipo en las afecciones arriba descritas.

En la célula \beta pancreática y las células parenquimatosas del hígado, el transportador de glucosa principal de la membrana plasmática es GLUT2. En concentraciones fisiológicas de glucosa, la velocidad a la que GLUT2 transporta glucosa a través de la membrana no es limitante de la velocidad respecto a la velocidad global de captación de glucosa en estas células. La velocidad de captación de glucosa está limitada por la velocidad de fosforilación de glucosa a glucosa-6-fosfato (G-6-P), que está catalizada por la glucoquinasa (GLK) [1]. La GLK tiene un valor Km alto (6-10 mM) para glucosa, y no es inhibida por concentraciones fisiológicas de G-6-P [1]. La expresión de GLK está limitada a unos pocos tejidos y tipos de células, muy principalmente a las células \beta pancreáticas y las células hepáticas (hepatocitos) [1]. En estas células, la actividad de GLK es limitante de la velocidad para utilización de glucosa y, por consiguiente, regula el grado de secreción de insulina inducida por glucosa, y la síntesis hepática de glucógeno. Estos procesos son críticos en el mantenimiento de la homeostasis de glucosa en todo el cuerpo, y ambos son disfuncionales en la diabetes [2].

En un subtipo de diabetes, la diabetes de tipo 2 del joven, de comienzo en la madurez (MODY-2), la diabetes está causada por la pérdida de mutaciones funcionales de GLK [3,4]. La hiperglucemia en los pacientes de MODY-2 es resultado de la utilización deficiente de glucosa tanto en el páncreas como en el hígado [5]. La utilización deficiente de glucosa en el páncreas de los pacientes de MODY-2 da como resultado un umbral elevado para la secreción de insulina estimulada por la glucosa. Inversamente, las mutaciones activantes raras de GLK reducen este umbral, dando como resultado el hiperinsulinismo familiar [6,7]. Además de la actividad reducida de GLK observada en los diabéticos MODY-2, la actividad hepática de glucoquinasa está reducida también en los diabéticos de tipo 2 [8]. De forma importante, la sobreexpresión de GLK global o selectiva del hígado previene o invierte el desarrollo del fenotipo diabético tanto en los modelos dietéticos como genéticos de la enfermedad [9-12]. Además, el tratamiento agudo de los diabéticos de tipo 2 con fructosa mejora la tolerancia a la glucosa por estimulación de la utilización hepática de la glucosa [13]. Se cree que este efecto está mediado por un aumento, inducido por fructosa, de la actividad citosólica de GLK en el hepatocito, mediante el mecanismo descrito más adelante [13].

La actividad hepática de GLK es inhibida por asociación con la proteína reguladora de GLK (GLKRP). El complejo GLK/GLKRP es estabilizado por fructosa-6-fosfato (F6P) que se une a la GLKRP, y se desestabiliza por desplazamiento de este fosfato de azúcar por fructosa-1-fosfato (F1P). El F1P es generado por fosforilación, mediada por fructoquinasa, de la fructosa de la dieta. Por consiguiente, la integridad del complejo GLK/GLKRP y la actividad de GLK hepática están reguladas de una manera dependiente de la nutrición, dado que el F6P es elevado en el estado post-absorbente, mientras que F1P predomina en el estado post-prandial. En contraste con el hepatocito, la célula \beta pancreática expresa GLK en ausencia de GLKRP. Por lo tanto, la actividad de GLK de las células \beta está regulada exclusivamente por la disponibilidad de su sustrato, la glucosa. Las moléculas pequeñas pueden activar GLK, ya sea directamente o por desestabilización del complejo GLK/GLKRP. Se predice que la primera clase de compuestos estimula la utilización de glucosa tanto en el hígado como en el páncreas, en tanto que se predice que los últimos actúan exclusivamente en el hígado. Sin embargo, se predice que los compuestos, cualquiera que sea el perfil, serán terapéuticamente beneficiosos en el tratamiento de la diabetes tipo 2, dado que esta enfermedad se caracteriza por una utilización deficiente de glucosa en ambos tejidos.

GLK y GLKRP y el canal de K_{ATP} se expresan en las neuronas del hipotálamo, una región del cerebro que es importante en la regulación del balance energético y el control de la ingestión de alimentos [14-18]. Se ha demostrado que dichas neuronas expresan neuropéptidos orécticos y anorécticos [15,19,20], y se ha supuesto que son las neuronas sensibles a la glucosa dentro del hipotálamo las que son inhibidas o excitadas por cambios en las concentraciones de glucosa en el ambiente [17,19,21,22]. La capacidad de estas neuronas para detectar cambios en los niveles de glucosa es defectuosa en una diversidad de modelos de obesidad genéticos e inducidos experimentalmente [23-28]. La infusión intracerebroventricular (icv) de análogos de glucosa, que son inhibidores competitivos de la glucoquinasa, estimula la ingestión de alimento en las ratas flacas [29,30]. Por el contrario, la infusión icv de glucosa suprime la alimentación [31]. De este modo, moléculas pequeñas activadoras de GLK pueden reducir la ingestión de alimento y el aumento de peso, a través de efectos centrales sobre GLK. Por lo tanto, los activadores de GLK pueden ser de utilidad terapéutica en el tratamiento de trastornos de alimentarios, incluyendo la obesidad, además de la diabetes. Los efectos hipotalámicos serán aditivos o sinérgicos a los efectos de los mismos compuestos que actúan en el hígado y/o el páncreas en la normalización de la homeostasis de la glucosa, para el tratamiento de la diabetes tipo 2. De este modo, el sistema GLK/GLKRP puede describirse como una diana potencial de la "diabesidad" (ventajosa tanto en la diabetes como en la obesidad).

En los documentos WO00/58293 y WO01/44216 (Roche), se describe una serie de compuestos de bencilcarbamoilo como activadores de la glucoquinasa. El mecanismo por el cual tales compuestos activan GLK se evalúa midiendo el efecto directo de tales compuestos en un ensayo en el cual la actividad de GLK está ligada a la producción de NADH, que a su vez se mide ópticamente - véanse detalles del ensayo in vitro descrito más abajo. Los compuestos de la presente invención pueden activar GLK directamente, o pueden activar GLK inhibiendo la interacción de GLKRP con GLK. Muchos compuestos de la presente invención pueden exhibir una selectividad favorable en comparación con los activadores de GLK conocidos.

La Solicitud Internacional número WO03/000267 describe un grupo de ácidos benzoilaminopiridilcarboxílicos que son activadores de la enzima glucoquinasa (GLK), el número de Solicitud Internacional WO03/015774 describe un grupo de compuestos bezoilaminoheterocíclicos como activadores de glucoquinasa, y el número de Solicitud Internacional WO03/000262 describe un grupo de derivados vinilfenílicos como activadores de glucoquinasa.

Según la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I):

1

en la que:

el anillo A es piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo; en la que dicho piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{4};

uno de R^{1} y R^{2} es hidrógeno, y el otro es hidrógeno o alquilo C_{1-4}; en la que R^{1} y R^{2} pueden estar sustituidos en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{5};

R^{3} se selecciona de alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, carbociclilo, heterociclilo, carbocicliloxi y heterocicliloxi; en la que R^{3} puede estar independientemente sustituido en el carbono, de forma opcional, con uno o más grupos seleccionados de R^{6}; y en la que si dicho heterociclilo contiene un resto -NH-, ese nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-4};

R^{4} se selecciona de halo, carboxi y alquilo C_{1-4};

R^{5} y R^{6} se seleccionan independientemente de halo, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, N-(alquil C_{1-4})amino, N,N-(alquil C_{1-4})_{2}amino, carbociclilo, heterociclilo, carbocicliloxi, heterocicliloxi y carbociclilidenilo; en la que R^{5} y R^{6} pueden estar independientemente sustituidos en el carbono, de forma opcional, con uno o más R^{7}; y en la que si dicho heterociclilo contiene un resto -NH-, ese nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-4};

R^{7} se selecciona de halo, carboxi, metilo, etilo, metoxi, etoxi, metilamino, etilamino, dimetilamino, dietilamino y N-metil-N-etilamino;

o una sal, solvato o profármaco del mismo.

Los compuestos de fórmula (I) pueden formar sales que están dentro del ámbito de la invención. Se prefieren sales farmacéuticamente aceptables, aunque pueden ser útiles otras sales, por ejemplo en el aislamiento o la purificación de los compuestos.

El término "halo" incluye cloro, bromo, fluoro y yodo; preferiblemente cloro, bromo y fluoro; lo más preferible, fluoro.

En esta memoria descriptiva, el término "alquilo" incluye grupos alquilo tanto de cadena lineal como de cadena ramificada. Por ejemplo, "alquilo C_{1-4}" y "alquilo C_{1-6}" incluyen propilo, isopropilo y t-butilo.

Un "carbociclilo" es un anillo de carbono mono- o bicíclico, saturado, parcialmente saturado o insaturado, que contiene 3-12 átomos; en el que un grupo -CH_{2}- puede estar sustituido opcionalmente por un -C(O)-. Preferiblemente, "carbociclilo" es un anillo monocíclico que contiene 5 ó 6 átomos, o un anillo bicíclico que contiene 9 ó 10 átomos. Los valores adecuados para "carbociclilo" incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, 1-oxociclopentilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, fenilo, naftilo, tetralinilo, indanilo o 1-oxoindanilo. Particularmente, "carbociclilo" es ciclohexilo o fenilo. Lo más particularmente, fenilo.

Un "heterociclilo" es un anillo monocíclico o bicíclico, saturado, parcialmente saturado o insaturado, que contiene 3-12 átomos, de los cuales al menos un átomo se selecciona de nitrógeno, azufre u oxígeno, en el que un grupo -CH_{2}- puede estar sustituido opcionalmente por un grupo -C(O)-, o los átomos de azufre en un anillo heterocíclico pueden estar oxidados a S(O) o S(O)_{2}. Un anillo "heterociclilo" puede, a no ser que se especifique de otro modo, estar enlazado mediante carbono o nitrógeno, a no ser que el enlace vía el nitrógeno conduzca a un nitrógeno cuaternario. Preferiblemente, un "heterociclilo" es un anillo monocíclico o bicíclico, saturado, parcialmente saturado o insaturado, en el que cada anillo contiene 5 ó 6 átomos, de los cuales 1 a 3 átomos son nitrógeno, azufre u oxígeno, que puede, a no ser que se especifique de otro modo, estar enlazado mediante carbono o nitrógeno, en el que un grupo -CH_{2}- puede estar sustituido opcionalmente por un grupo -C(O)-, o los átomos de azufre en un anillo heterocíclico pueden estar oxidados a grupos S(O) o S(O)_{2}. Más preferiblemente, un "heterociclilo" es un anillo monocíclico saturado, parcialmente saturado o insaturado, en el que cada anillo contiene 5 ó 6 átomos, de los cuales 1 a 3 átomos son nitrógeno, azufre u oxígeno. Preferiblemente además, un "heterociclilo" es un anillo monocíclico, parcialmente saturado o insaturado, en el que cada anillo contiene 5 ó 6 átomos, preferiblemente 5 átomos, de los cuales 1 a 2 átomos son nitrógeno, azufre u oxígeno.

Ejemplos y valores adecuados del término "heterociclilo" son tiazolidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2-pirrolidonilo, 2,5-dioxopirrolidinilo, 2-benzoxazol-inonilo, 1,1-dioxotetrahidrotienilo, 2,4-dioxoimidazol-idinilo, 2-oxo-l,3,4-(4-triazolinilo), 2-oxazol-idinonilo, 5,6-dihidrouracililo, 1,3-benzodioxolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 2-azabiciclo[2.2.1]heptilo, 4-tiazolidonilo, morfolino, 2-oxotetrahidrofuranilo, tetrahidrofuranilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, benzotienilo, isoxazolilo, tetrahidropiranilo, piperidilo, l-oxo-l,3-dihidroisoindolilo, piperazinilo, tiomorfolino, 1,1-dioxotiomorfolino, tetrahidropiranilo, 1,3-dioxolanilo, homopiperazinilo, tienilo, isoxazolilo, imidazolilo, pirrolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-triazolilo, piranilo, indolilo, pirimidilo, tiazolilo, pirazinilo, piridazinilo, piridilo, 4-piridonilo, quinolilo y 1-isoquinolonilo. Preferiblemente, el término "heterociclilo" hace referencia a anillos monocíclicos heterocíclicos, con sistemas de 5 ó 6 miembros, tales como isoxazolilo, pirrolidinilo, 2-pirrolidonilo, 2,5-dioxopirrolidinilo, morfolino, tetrahidrofuranilo, piperidilo, piperazinilo, tiomorfolino, tetrahidropiranilo, tienilo, imidazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,3,4-triazolilo, indolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, pirazinilo, piridazinilo y piridilo. Ejemplos preferidos de sistemas de anillos bicíclicos 5/6 y 6/6 incluyen benzofuranilo, bencimidazolilo, benztiofenilo, benztiazolilo, bencisotiazolilo, benzoxazolilo, bencisoxazolilo, piridoimidazolilo, pirimidoimidazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, cinolinilo y naftiridinilo.

Ejemplos de alquilo C_{1-4} y alquilo C_{1-6} incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, sec-butilo y terc-butilo; ejemplos de alcoxi C_{1-4} incluyen metoxi, etoxi, propoxi y terc-butoxi; ejemplos de N-(alquil C_{1-4})amino incluyen metilamino, etilamino e isopropilamino; ejemplos de N,N-(alquil C_{1-4})_{2}amino incluyen dimetilamino, N-metil-N-etilamino y N-etil-N-isopropilamino; ejemplos de carbociclilidenilo son ciclopentilidenilo y 2,4-ciclohexadien-1-ilidenilo.

Debe entenderse que, en tanto que algunos de los compuestos de fórmula (I) definidos más abajo pueden existir en formas ópticamente activas o racémicas en virtud de uno o más átomos de carbono asimétricos, la invención incluye en su definición cualquiera de dichas formas ópticamente activas o racémicas que posea la propiedad de estimular directamente GLK o de inhibir la interacción GLK/GLKRP. La síntesis de formas ópticamente activas se puede llevar a cabo por técnicas estándar de química orgánica, bien conocidas en la técnica, por ejemplo por síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos, o por resolución de una forma racémica. Debe entenderse también que ciertos compuestos pueden existir en formas tautómeras, y que la invención se refiere también a cualquiera y a todas las formas tautómeras de los compuestos de la invención que activan GLK.

Compuestos adecuados de fórmula (I) son aquellos en los cuales se aplica una cualquiera o más de las condiciones siguientes. Tales valores se pueden usar, cuando sea apropiado, con cualquiera de las definiciones, reivindicaciones o realizaciones definidas aquí anteriormente o en lo sucesivo.

El anillo A es piridin-2-ilo, opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{4}.

El anillo A es tiazol-2-ilo, opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{4}.

El anillo A es piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo; en la que dicho piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{4}, en la que R^{4} es carboxi.

El anillo A está no sustituido, o está sustituido con carboxi.

El anillo A es piridin-2-ilo, 5-carboxipiridin-2-ilo, tiazol-2-ilo o 5-carboxitiazol-2-ilo.

El anillo A es 5-carboxipiridin-2-ilo, tiazol-2-ilo o 5-carboxitiazol-2-ilo.

R^{1} es hidrógeno y R^{2} es alquilo C_{1-4}; en la que R^{2} puede estar sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{5}.

R^{1} es alquilo C_{1-4}, y R^{2} es hidrógeno; en la que R^{1} puede estar sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{5}.

Uno de R^{1} y R^{2} es hidrógeno, y el otro es hidrógeno o alquilo C_{1-4}.

R^{1} es hidrógeno o alquilo C_{1-4}, y R^{2} es hidrógeno.

Tanto R^{1} como R^{2} son hidrógeno.

R^{1} es metilo o hidrógeno, y R^{2} es hidrógeno.

R^{3} se selecciona de alcoxi C_{1-4} y carbocicliloxi; en la que R^{3} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono, de forma independiente, con uno o más grupos seleccionados de R^{6};

en la que: R^{6} se selecciona de halo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilidenilo; en la que R^{6} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más R^{7}; en la que:

R^{7} se selecciona de halo y metilo.

R^{3} se selecciona de alcoxi C_{1-4}; en la que R^{3} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono, de forma independiente, con uno o más grupos seleccionados de R^{6};

en la que: R^{6} se selecciona de carbociclilo y heterociclilo; en la que R^{6} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más R^{7}; en la que:

R^{7} se selecciona de halo y metilo.

R^{3} se selecciona de metoxi, etoxi, iso-butoxi, fenoxi y benzociclopent-1-iloxi; en la que R^{3} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono, de forma independiente, con uno o más grupos seleccionados de R^{6};

en la que: R^{6} se selecciona de fluoro, fenilo, isoxazolilo, tienilo y ciclopentilidenilo; en la que R^{6} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más R^{7}; en la que:

R^{7} se selecciona de fluoro y metilo.

R^{3} se selecciona de metoxi, etoxi e iso-butoxi; en la que R^{3} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono, de forma independiente, con uno o más grupos seleccionados de R^{6};

en la que: R^{6} se selecciona de fenilo, isoxazolilo y tienilo; en la que R^{6} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más R^{7}; en la que:

R^{7} se selecciona de fluoro y metilo.

R^{3} se selecciona de 2-fluorobenciloxi, 5-metilisoxazol-3-ilmetoxi, 2-tien-3-iletoxi, ciclopenilidenilmetoxi, 1-ciclopenilideniletoxi, fenoxi, benzociclopent-1-iloxi y 2-fenil-2,2-difluoroetoxi.

R^{3} se selecciona de 2-fluorobenciloxi, 5-metilisoxazol-3-ilmetoxi y 2-tien-3-iletoxi.

Por lo tanto, en un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) (como se representa anteriormente), en la que

el anillo A es piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo; en la que dichos piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo pueden estar opcionalmente sustituidos en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{4}, en la que:

R^{4} es carboxi;

R^{1} es metilo o hidrógeno, y R^{2} es hidrógeno; y

R^{3} se selecciona de alcoxi C_{1-4}; en la que R^{3} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono, de forma independiente, con uno o más grupos seleccionados de R^{6}; en la que:

R^{6} se selecciona de carbociclilo y heterociclilo; preferiblemente fenilo, tienilo o isoxazolilo, en la que R^{6} puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más R^{7}; en la que:

R^{7} se selecciona de halo y metilo;

o una sal, solvato o profármaco del mismo.

Por lo tanto, en un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) (como se representa anteriormente), en la que

el anillo A es 5-carboxipiridin-2-ilo, tiazol-2-ilo o 5-carboxitiazol-2-ilo;

R^{1} es metilo o hidrógeno, y R^{2} es hidrógeno; y

R^{3} se selecciona de 2-fluorobenciloxi, 5-metilisoxazol-3-ilmetoxi y 2-tien-3-iletoxi;

o una sal, solvato o profármaco del mismo.

En otro aspecto de la invención, compuestos preferidos de la invención incluyen:

\quad

2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-(2-fluorofenilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-carboxitiazol-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-(5-metilisoxazol-3-ilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

4-(2-fluorofenilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

4-(5-metilisoxazol-3-ilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-(tien-2-iletoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano; y

\quad

2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(tiazol-2-il)carbamoil]-benzofurano;

o una sal, solvato o profármaco del mismo.

Los compuestos de la invención se pueden administrar en forma de un profármaco. Un profármaco es un bioprecursor o un compuesto farmacéuticamente aceptable que es degradable en el cuerpo para producir un compuesto de la invención (tal como un éster o amida de un compuesto de la invención, particularmente un éster hidrolizable in vivo). Se conocen en la técnica diversas formas de profármacos. Para ejemplos de tales derivados de profármacos, véanse:

a)

Design of Prodrugs, publicado por H. Bundgaard, (Elsevier, \underline{1985}), y Métodos in Enzymology, Vol. \underline{42}, p. 309-396, publicado por K. Widder, et al. (Academic Press, \underline{1985});

b)

A Textbook of Drug Design and Development, publicado por Krogsgaard-Larsen;

c)

H. Bundgaard, Capítulo 5, "Design and Application of Prodrugs", por H. Bundgaard p. 113-191 (\underline{1991});

d)

H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (\underline{1992});

e)

H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (\underline{1988}); y

f)

N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull, 32, 692 (\underline{1984}).

Ejemplos de profármacos son los siguientes. Un éster hidrolizable in vivo de un compuesto de la invención que contiene un grupo carboxi o hidroxi es, por ejemplo, un éster farmacéuticamente aceptable que se hidroliza en el cuerpo del ser humano o animal para producir el ácido o alcohol progenitor. Los ésteres farmacéuticamente aceptables adecuados para carboxi incluyen ésteres alcoxi (C_{1}-C_{6})metílicos, por ejemplo metoximetílico, ésteres alcanoil (C_{1}-C_{6})oximetílicos, por ejemplo pivaloiloximetílico, ésteres ftalidílicos, ésteres cicloalcoxi (C_{3}-C_{8})carboniloxialquílicos (C_{1}-C_{6}), por ejemplo 1-ciclohexilcarboniloxietílico; ésteres 1,3-dioxolen-2-onilmetílicos, por ejemplo 5-metil-1,3-dioxolen-2-onilmetílico; y ésteres alcoxi (C_{1-6})carboniloxietílicos.

Un éster hidrolizable in vivo de un compuesto de la invención que contiene un grupo hidroxi incluye ésteres inorgánicos tales como ésteres de fosfato (incluyendo ésteres cíclicos fosforamídicos) y éteres \alpha-aciloxialquílicos y compuestos relacionados que, como resultado de la hidrólisis in vivo del éster, se rompen para dar el grupo o grupos hidroxi progenitores. Los ejemplos de éteres \alpha-aciloxialquílicos incluyen acetoximetoxi y 2,2-dimetil-propioniloximetoxi. Una selección de grupos formadores de ésteres hidrolizables in vivo para hidroxi incluye alcanoilo, benzoilo, fenilacetilo, y benzoilo y fenilacetilo sustituidos, alcoxicarbonilo (para dar ésteres de carbonatos de alquilo), dialquilcarbamoilo y N-(dialquilaminoetil)-N-alquilcarbamoilo (para dar carbamatos), dialquilaminoacetilo y carboxiacetilo.

Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención es, por ejemplo, una sal de adición de ácidos de un compuesto de la invención que es suficientemente básico, por ejemplo, una sal de adición de ácidos con, por ejemplo, un ácido inorgánico u orgánico, por ejemplo los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, trifluoroacético, cítrico o maleico. Además, una sal adecuada farmacéuticamente aceptable de un derivado de benzoxazinona de la invención que es suficientemente ácido es una sal de metal alcalino, por ejemplo una sal de sodio o potasio, una sal de metal alcalino-térreo, por ejemplo una sal de calcio o magnesio, una sal de amonio o una sal con una base orgánica que proporciona un catión fisiológicamente aceptable, por ejemplo una sal con metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris-(2-hidroxietil)amina.

Una característica adicional de la invención es una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, o una sal, solvato o profármaco del mismo, junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, para uso como medicamento.

Adicionalmente, de acuerdo con la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) para uso en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad mediada por GLK, en particular diabetes tipo 2.

El compuesto se formula convenientemente como una composición farmacéutica para uso de esta manera.

De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, se proporciona un método de tratamiento de enfermedades mediadas por GLK, especialmente diabetes tipo 2, administrando una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal, solvato o profármaco del mismo, a un mamífero que necesite de dicho tratamiento.

Enfermedades específicas que se pueden tratar mediante el compuesto o composición de la invención incluyen: reducción de la glucemia en diabetes mellitus tipo 2 sin riesgo serio de hipoglucemia (y potencial para tratar tipo 1), dislipidemia, obesidad, resistencia a la insulina, síndrome metabólico X, y tolerancia deteriorada a la glucosa.

Así pues, como se ha expuesto anteriormente, el sistema GLK/GLKRP puede describirse como una diana potencial de "diabesidad" (de beneficio tanto en la diabetes como en la obesidad). Así, de acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal, solvato o profármaco del mismo, en la preparación de un medicamento para uso en el tratamiento combinado o en la prevención de diabetes y obesidad.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal, solvato o profármaco del mismo, en la preparación de un medicamento para uso en el tratamiento o la prevención de la obesidad.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona un método para el tratamiento combinado de obesidad y diabetes administrando una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal, solvato o profármaco del mismo, a un mamífero que necesite de dicho tratamiento.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de la obesidad administrando una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal, solvato o profármaco del mismo, a un mamífero que necesite de dicho tratamiento.

Las composiciones de la invención pueden encontrarse en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo como comprimidos, pastillas, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas o aceitosas, emulsiones, polvos o gránulos dispersables, jarabes o elixires), para uso tópico (por ejemplo como cremas, ungüentos, geles, o disoluciones o suspensiones acuosas o aceitosas), para administración por inhalación (por ejemplo como un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para administración por insuflación (por ejemplo como un polvo finamente dividido), o para administración parenteral (por ejemplo como una disolución acuosa o aceitosa estéril para dosificación intravenosa, subcutánea, intramuscular, o como un supositorio para dosificación rectal).

Las composiciones de la invención se pueden obtener por procedimientos convencionales utilizando excipientes farmacéuticos convencionales, bien conocidos en la técnica. Así, las composiciones destinadas a uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, saborizantes y/o conservantes.

Excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados para una formulación de comprimidos incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes tales como lactosa, carbonato de sodio, fosfato de calcio o carbonato de calcio, agentes de granulación y disgregantes tales como almidón de maíz o ácido algénico; agentes aglutinantes tales como almidón; agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco; agentes conservantes tales como p-hidroxibenzoato de etilo o propilo, y antioxidantes, tales como ácido ascórbico. Las formulaciones de comprimidos pueden carecer de recubrimiento, o pueden estar recubiertas, ya sea para modificar su disgregación y la absorción subsiguiente del ingrediente activo en el tubo digestivo, o bien para mejorar su estabilidad y/o aspecto, utilizando en cualquier caso agentes y procedimientos de recubrimiento convencionales, bien conocidos en la técnica.

Las composiciones para uso oral pueden encontrarse en forma de cápsulas de gelatina duras, en las cuales el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas, en las cuales el ingrediente activo se mezcla con agua o un aceite, tal como aceite de cacahuete, aceite de parafina, o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas contienen generalmente el ingrediente activo en forma finamente pulverizada, junto con uno o más agentes de suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinil-pirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga; agentes dispersantes o humectantes, tales como lecitina o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos (por ejemplo poli(estearato de oxietileno)), o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol, tales como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol, tales como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietilensorbitán. Las suspensiones acuosas pueden contener también uno o más conservantes (tales como p-hidroxibenzoato de etilo o propilo), antioxidantes (tales como ácido ascórbico), agentes colorantes, agentes saborizantes, y/o agentes edulcorantes (tales como sacarosa, sacarina o aspartamo).

Las suspensiones aceitosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal (tal como aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco), o en un aceite mineral (tal como aceite de parafina). Las suspensiones aceitosas pueden contener también un agente espesante, tal como cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Se pueden añadir agentes edulcorantes, tales como los indicados anteriormente, y agentes saborizantes, para proporcionar una preparación oral agradable al paladar. Estas composiciones se pueden conservar por adición de un anti-oxidante, tal como ácido ascórbico.

Los polvos y gránulos dispersables, adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por adición de agua, contienen generalmente el ingrediente activo junto con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados se ilustran por los ya mencionados anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, tales como agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes.

Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden encontrarse también en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de cacahuete, o un aceite mineral, tal como, por ejemplo, aceite de parafina, o una mezcla de cualquiera de estos. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser, por ejemplo, gomas de origen natural, tales como goma arábiga o goma de tragacanto, fosfátidos de origen natural, tales como haba de soja, lecitina, ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos con anhídridos de hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitán), y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, tales como monooleato de polioxietilen-sorbitán. Las emulsiones pueden contener también agentes edulcorantes, saborizantes y conservantes.

Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, tales como glicerina, propilenglicol, sorbitol, aspartamo o sacarosa, y pueden contener también un agente emoliente, un conservante, un saborizante y/o un colorante.

Las composiciones farmacéuticas pueden encontrarse también en forma de una suspensión acuosa o aceitosa estéril inyectable, que se puede formular de acuerdo con procedimientos conocidos utilizando uno o más de los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión apropiados, que se han mencionado anteriormente. Una preparación inyectable estéril puede ser también una disolución o suspensión inyectable estéril, en un diluyente o disolvente no tóxico, parenteralmente aceptable, por ejemplo una solución en 1,3-butanodiol.

Las composiciones para administración por inhalación se pueden encontrar en forma de un aerosol convencional a presión, dispuesto para dispensar el ingrediente activo como un aerosol que contiene sólido finamente dividido o gotitas líquidas. Se pueden utilizar propelentes convencionales de aerosoles, tales como hidrocarburos fluorados o hidrocarburos volátiles, y el dispositivo de aerosol está dispuesto convenientemente para dispensar una cantidad medida de ingrediente activo.

Para información adicional sobre formulación, se remite al lector al Capítulo 25.2 en el Volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente de la Junta Editorial), Pergamon Press 1990.

La cantidad de ingrediente activo que se combina con uno o más excipientes para producir una forma de dosificación individual variará necesariamente dependiendo del hospedante tratado y de la vía particular de administración. Por ejemplo, una formulación destinada para la administración oral a seres humanos contendrá generalmente, por ejemplo, de 0,5 mg a 2 g de agente activo mezclado con una cantidad apropiada y conveniente de excipientes, que puede variar de alrededor de 5 hasta alrededor de 98 por ciento en peso de la composición total. Formas unitarias de dosificación contendrán por regla general alrededor de 1 mg hasta alrededor de 500 mg de un ingrediente activo. Para información adicional sobre Vías de Administración y Regímenes de Dosificación, se remite al lector al Capítulo 25.3 en el Volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente de la Junta Editorial), Pergamon Press 1990.

El tamaño de la dosis para fines terapéuticos o profilácticos de un compuesto de la fórmula (I) variará naturalmente de acuerdo con la naturaleza y gravedad de las afecciones, la edad y el sexo del animal o paciente, y la vía de administración, de acuerdo con principios de medicina bien conocidos.

Al utilizar un compuesto de la fórmula (I) con fines terapéuticos o profilácticos, el mismo se administrará generalmente de tal modo que se reciba una dosis diaria comprendida en el intervalo de, por ejemplo, 0,5 mg a 75 mg por kg de peso corporal, administrada si se requiere en dosis divididas. Por regla general se administrarán dosis menores cuando se emplee una vía parenteral. Así, por ejemplo, para administración intravenosa, se utilizará generalmente una dosis comprendida en el intervalo de, por ejemplo, 0,5 mg a 30 mg por kg de peso corporal. Análogamente, para administración por inhalación, se utilizará una dosis comprendida en el intervalo de, por ejemplo, 0,5 mg a 25 mg por kg de peso corporal. No obstante, se prefiere la administración oral.

El aumento de la actividad de GLK descrito aquí se puede aplicar como una terapia individual, o puede implicar, además del objeto de la presente invención, una o más sustancias y/o tratamientos distintos. Un tratamiento conjunto de este tipo puede conseguirse mediante la administración simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. El tratamiento simultáneo puede ser un solo comprimido, o en comprimidos separados. Por ejemplo, en el tratamiento de la diabetes mellitus, la quimioterapia puede incluir las siguientes categorías principales de tratamiento:

1)

insulina y análogos de insulina;

2)

secretagogos de insulina, incluyendo sulfonilureas (por ejemplo, glibenclamida, glipizida) y reguladores de glucosa prandial (por ejemplo, repaglinida, nateglinida);

3)

agentes sensibilizadores de la insulina, incluyendo agonistas de PPARg (por ejemplo, pioglitazona y rosiglitazona);

4)

agentes que reprimen la producción hepática de glucosa (por ejemplo, metformina);

5)

agentes diseñados para reducir la absorción de glucosa por el intestino (por ejemplo, acarbosa);

6)

agentes diseñados para tratar las complicaciones de la hiperglucemia prolongada;

7)

agentes anti-obesidad (por ejemplo, sibutramina y orlistat);

8)

agentes anti-dislipidemia, tales como inhibidores de la HMG-CoA reductasa (estatinas, por ejemplo pravastatina); agonistas de PPAR\alpha (fibratos, por ejemplo gemfibrozilo); secuestrantes de ácidos biliares (colestiramina); inhibidores de la absorción de colesterol (estanoles vegetales, inhibidores sintéticos); inhibidores de la absorción de ácidos biliares (IBATi) y ácido nicotínico y análogos (niacina y formulaciones de liberación lenta);

9)

agentes antihipertensivos tales como \beta-bloqueantes (por ejemplo atenolol, inderal); inhibidores de la ACE (por ejemplo lisinoprilo); antagonistas del calcio (por ejemplo nifedipina); antagonistas de los receptores de angiotensinas (por ejemplo candesartán), antagonistas \alpha y agentes diuréticos (por ejemplo furosemida, benztiazida);

10)

moduladores de la hemostasis, tales como antitrombóticos, activadores de la fibrinolisis y agentes antiplaquetarios; antagonistas de la trombina; inhibidores del factor Xa; inhibidores del factor VIIa); agentes antiplaquetarios (por ejemplo aspirina, clopidogrel); anticoagulantes (heparina y análogos de bajo peso molecular, hirudina) y warfarina; y

11)

agentes anti-inflamatorios, tales como fármacos anti-inflamatorios no esteroideos (por ejemplo aspirina) y agentes anti-inflamatorios esteroideos (por ejemplo cortisona).

De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, se proporcionan compuestos individuales producidos como productos finales en los Ejemplos expuestos más adelante, y sales, solvatos y profármacos de los mismos.

Otro aspecto de la presente invención proporciona un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I), o una sal, solvato o profármaco del mismo, procedimiento (en el que los grupos variables son como se definen en la fórmula (I), excepto que se especifique de otro modo) el cual comprende:

\newpage

Proceso 1): hacer reaccionar un ácido de fórmula (II):

2

o un derivado activado del mismo, con un compuesto de fórmula (III); o

3

Proceso 2): para compuestos de fórmula (I) en la que R^{4} es carboxi, desproteger un compuesto de fórmula (III):

4

en la que R^{x}C(O)O- es un grupo éster;

y después, si es necesario o deseable:

i)

convertir un compuesto de la fórmula (I) en otro compuesto de la fórmula (I); y/o

ii)

eliminar cualesquiera grupos protectores; y/o

iii)

formar una sal, solvato o profármaco del mismo.

Los derivados de ácidos activados adecuados incluyen haluros de ácidos, por ejemplo cloruros de ácidos, y ésteres activos, por ejemplo ésteres pentafluorofenílicos. La reacción de estos tipos de compuestos con aminas es bien conocida en la técnica.

El grupo R^{x}OC(O)- es un éster. Los valores adecuados para R^{x} son alquilo C_{1-6} y bencilo, particularmente metilo y etilo.

Las reacciones descritas anteriormente se pueden realizar en condiciones estándar. Los intermedios descritos anteriormente están comercialmente disponibles, son conocidos en la técnica o se pueden preparar mediante procedimientos conocidos.

Algunos de los intermedios descritos aquí son nuevos, y de este modo se proporcionan como una característica adicional de la invención. Por ejemplo, los compuestos de fórmula (III) se proporcionan como una característica adicional de la invención.

Durante el proceso de preparación, puede ser ventajoso utilizar un grupo protector. Los grupos protectores se pueden eliminar mediante cualquier método conveniente, como se describe en la bibliografía, o conocido por el químico experto y que sea apropiado para la eliminación del grupo protector en cuestión, seleccionándose dichos métodos de tal modo que efectúen la eliminación del grupo protector con una alteración mínima de los grupos en cualquier otro lugar de la molécula.

Por conveniencia, a continuación se dan ejemplos específicos de grupos protectores, en los cuales "inferior" significa que el grupo al que se aplica tiene preferiblemente 1-4 átomos de carbono. Debe entenderse que estos ejemplos no son exhaustivos. En los casos en que se den a continuación ejemplos específicos de métodos para la eliminación de grupos protectores, estos son, asimismo, no exhaustivos. El uso de grupos protectores y métodos de desprotección no mencionados específicamente está por supuesto comprendido dentro del alcance de la invención.

Un grupo protector de carboxi puede ser el resto de un alcohol alifático o aralifático formador de éster, o de un silanol formador de éster (conteniendo dicho alcohol o silanol preferiblemente 1-20 átomos de carbono). Ejemplos de grupos protectores de carboxi incluyen grupos alquilo C_{1-12} de cadena lineal o ramificada (por ejemplo, isopropilo, t-butilo); grupos alcoxi inferior-alquilo inferior (por ejemplo, metoximetilo, etoximetilo, isobutoximetilo); grupos aciloxi alifático inferior-alquilo inferior (por ejemplo, acetoximetilo, propioniloximetilo, butiriloximetilo, pivaloiloximetilo); grupos alcoxi inferior-carboniloxi-alquilo inferior (por ejemplo, 1-metoxicarboniloxietilo, 1-etoxicarbonil-oxietilo); grupos aril-alquilo inferior (por ejemplo, p-metoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, benzhidrilo y ftalidilo); grupos tri(alquilo inferior)sililo (por ejemplo, trimetilsililo y t-butildimetilsililo); grupos tri-(alquilo inferior)silil-alquilo inferior (por ejemplo, trimetilsililetilo); y grupos alquenilo C_{2-6} (por ejemplo, alilo y viniletilo).

Métodos particularmente apropiados para la eliminación de grupos protectores de carboxilo incluyen, por ejemplo, hidrólisis catalizada por ácidos, metales o enzimas.

Ejemplos de grupos protectores de hidroxi incluyen grupos alquenilo inferior (por ejemplo, alilo); grupos alcanoilo inferior (por ejemplo, acetilo); grupos alcoxicarbonilo inferior (por ejemplo, t-butoxicarbonilo); grupos alquenilo inferior-oxicarbonilo (por ejemplo, aliloxicarbonilo); grupos aril-alcoxicarbonilo inferior (por ejemplo, benzoiloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, o-nitrobenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo); grupos tri-alquilo inferior/arilsililo (por ejemplo, trimetilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo); grupos aril-alquilo inferior (por ejemplo, grupos bencilo); y grupos tri-aril-alquilo inferior (por ejemplo, trifenilmetilo).

Ejemplos de grupos protectores de amino incluyen formilo, grupos aralquilo (por ejemplo, bencilo y bencilo sustituido, es decir, p-metoxibencilo, nitrobencilo y 2,4-dimetoxibencilo, y trifenilmetilo); grupos di-p-anisilmetilo y furilmetilo; alcoxicarbonilo inferior (por ejemplo, t-butoxicarbonilo); alquenilo inferior-oxicarbonilo (por ejemplo, aliloxicarbonilo); grupos aril-alcoxicarbonilo inferior (por ejemplo, benciloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, o-nitrobenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo; trialquilsililo (por ejemplo, trimetilsililo y t-butildimetilsililo); alquilideno (por ejemplo, metilideno); bencilideno y grupos bencilideno sustituidos.

Métodos apropiados para eliminar grupos protectores de hidroxi y amino incluyen, por ejemplo, hidrólisis catalizada por ácidos, bases, metales o enzimas, o fotolíticamente para grupos tales como o-nitrobenciloxicarbonilo, o con iones fluoruro para grupos sililo.

Ejemplos de grupos protectores para grupos amida incluyen aralcoximetilo (por ejemplo, benciloximetilo y benciloximetilo sustituido); alcoximetilo (por ejemplo, metoximetilo y trimetilsililetoximetilo); tri-alquil/arilsililo (por ejemplo, trimetilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo); tri-alquil/arilsililoximetilo (por ejemplo, t-butildimetil-
sililoximetilo, t-butildifenilsililoximetilo); 4-alcoxifenilo (por ejemplo, 4-metoxifenilo); 2,4-di(alcoxi)fenilo (por ejemplo, 2,4-dimetoxifenilo); 4-alcoxibencilo (por ejemplo, 4-metoxibencilo); 2,4-di(alcoxi)bencilo (por ejemplo, 2,4-di-(metoxi)bencilo); y alqu-1-enilo (por ejemplo, alilo, but-1-enilo y vinilo sustituido, es decir, 2-fenilvinilo).

Los grupos aralcoximetilo se pueden introducir en el grupo amida haciendo reaccionar este último grupo con el cloruro de aralcoximetilo apropiado, y se pueden eliminar mediante hidrogenación catalítica. Los grupos alcoximetilo, tri-alquil/arilsililo y tri-alquil/sililoximetilo se pueden introducir haciendo reaccionar la amida con el cloruro apropiado, y eliminando con ácido; o, en el caso de los grupos que contienen sililo, con iones fluoruro. Los grupos alcoxifenilo y alcoxibencilo se introducen convenientemente por arilación o alquilación con un haluro apropiado, y se eliminan por oxidación con nitrato cérico-amónico. Finalmente, los grupos alqu-1-enilo se pueden introducir haciendo reaccionar la amida con el aldehído apropiado, y se pueden eliminar con ácido.

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Aspectos biológicos Ensayos

Los efectos biológicos de los compuestos de fórmula (I) se pueden ensayar de la siguiente manera:

(1)

La actividad enzimática de GLK se puede medir incubando GLK, ATP y glucosa. La velocidad de formación de producto se puede determinar acoplando el ensayo a un sistema de G-6-P-deshidrogenasa, NADP-NADPH y midiendo el aumento de densidad óptica a 340 nm (Matschinsky et al 1993).

(2)

Un ensayo de unión de GLK/GLKRP para medir las interacciones de unión entre GLK y GLKRP. El método se puede utilizar para identificar compuestos que modulan GLK mediante modulación de la interacción entre GLK y GLKRP. Se incuban GLKRP y GLK con una concentración inhibidora de F-6-P, opcionalmente en presencia de compuesto de ensayo, y se mide el grado de interacción entre GLK y GLKRP. Los compuestos que desplazan F-6-P o que reducen de algún otro modo la interacción de GLK/GLKRP se detectarán mediante una disminución en la cantidad de complejo de GLK/GLKRP formado. Los compuestos que promueven la unión de F-6-P o aumentan de cualquier otro modo la interacción de GLK/GLKRP se detectarán mediante un aumento en la cantidad de complejo de GLK/GLKRP formado. A continuación se describe un ejemplo específico de un ensayo de combinación de este tipo.

Ensayo de proximidad de centelleo de GLK/GLKRP

Se encontró que los compuestos de la invención tienen una actividad de menos de 10 \mum cuando se ensayaron según el ensayo de proximidad de centelleo de GLK/GLKRP descrito a continuación.

Se usaron GLK y GLKRP humanas recombinantes para desarrollar un SPA (ensayo de proximidad de centelleo) de "mezcla y medición" de 96 pocillos como se describe en el documento WO 01/20327. Se incuban GLK (biotinilada) y GLKRP con perlas de SPA enlazadas a estreptavidina (Amersham), en presencia de una concentración inhibidora de [3H]F-6-P radiomarcado (Amersham Custom Synthesis TRQ8689), dando una señal. Los compuestos que o bien desplazan el F-6-P o bien alteran de cualquier otro modo la interacción de la unión de GLK/GLKRP provocarán la pérdida de esta señal.

Se realizaron ensayos de unión, a temperatura ambiente durante 2 horas. Las mezclas de reacción contenían Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), ATP 2 mM, MgCl_{2} 5 mM, DTT 0,5 mM, GLK biotinilada recombinante (0,1 mg), GLKRP recombinante (0,1 mg), 0,05 mCi de [3H]F-6-P (Amersham) para dar un volumen final de 100 ml. Después de la incubación, se determinó el grado de formación del complejo de GLK/GLKRP por adición de 0,1 mg/pocillo de perlas de SPA enlazadas a avidina (Amersham) y contando por centelleo en un instrumento Packard TopCount NXT.

(3)

Un ensayo de unión de F-6-P/GLKRP para medir la interacción de unión entre GLKRP y F-6-P. Este método puede utilizarse para proporcionar información adición sobre el mecanismo de acción de los compuestos. Los compuestos identificados en el ensayo de unión de GLK/GLKRP pueden modular la interacción de GLK y GLKRP por desplazamiento de F-6-P o por modificación de la interacción de GLK/GLKRP de algún otro modo. Por ejemplo, se sabe que las interacciones proteína-proteína tienen lugar generalmente mediante interacciones a través de sitios de fijación múltiples. De este modo, es posible que un compuesto que modifica la interacción entre GLK y GLKRP pudiese actuar uniéndose a uno o más de varios sitios de unión diferentes.

El ensayo de unión de F-6-P/GLKRP identifica únicamente aquellos compuestos que modulan la interacción de GLK y GLKRP por desplazamiento de F-6-P de su sitio de unión en GLKRP.

Se incuba GLKRP con el compuesto de ensayo y una concentración inhibidora de F-6-P, en ausencia de GLK, y se mide el grado de interacción entre F-6-P y GLKRP. Los compuestos que desplazan la unión de F-6-P a GLKRP se pueden detectar mediante un cambio en la cantidad de complejo de GLKRP/F-6-P formado. A continuación se describe un ejemplo específico de un ensayo de fijación de este tipo.

Ensayo de proximidad de centelleo de F-6-P/GLKRP

Se utilizó GLKRP humana recombinante para desarrollar un ensayo de proximidad de centelleo "de mezcla y medida" de 96 pocillos, como se describe el documento WO01/20327 (enyos contenidos se incorporan agui como referencia). Se incuba GLKRP, marcada con FLAG, con perlas de SPA recubiertas con proteína A (Amersham), y con un anticuerpo anti-FLAG en presencia de una concentración inhibidora de [3H]F-6-P radiomarcada. Se genera una señal. Los compuestos que desplazan la F-6-P provocarán la pérdida de esta señal. Una combinación de este ensayo y el ensayo de unión de GLK/GLKRP permitirá al observador identificar compuestos que alteran la interacción de unión de GLK/GLKRP por desplazamiento de F-6-P.

Se realizaron ensayos de unión, a temperatura ambiente durante 2 horas. Las mezclas de reacción contenían Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), ATP 2 mM, MgCl_{2} 5 mM, DTT 0,5 mM, GLKRP recombinante marcada con FLAG (0,1 mg), anticuerpo anti-FLAG M2 (0,2 mg) (IBI Kodak), 0,05 mCi de [3H]F-6-P (Amersham), para dar un volumen final de 100 ml. Después de la incubación, se determinó el grado de formación del complejo de F-6-P/GLKRP por adición de 0,1 mg/pocillo de perlas de SPA enlazadas a proteína A (Amersham), y contando por centelleo en un instrumento Packard TopCount NXT.

Producción de GLK recombinante y GLKRP Preparación de ARNm

Se preparó ARNm total de hígado humano por homogeneización con Polytron en isotiocianato de guanidina 4M, citrato 2,5 mM, Sarkosil 0,5%, b-mercaptoetanol 100 mM, seguido de centrifugación a través de CsCl 5,7M, acetato de sodio 25 mM a 135.000 g (max) como se describe en Sambrook J, Fritsch EF y Maniatis T, 1989.

El ARNm poli A^{+} se preparó directamente utilizando un kit de aislamiento de ARNm FastTrack^{TM} (Invitrogen).

Amplificación mediante PCR de las secuencias de ADNc de GLK y GLKRP

Se obtuvo ADNc humano de GLK y GLKRP mediante PCR a partir de ARNm hepático humano, utilizando técnicas establecidas descritas en Sambrook, Fritsch y Maniatis, 1989. Se diseñaron cebadores de PCR de acuerdo con las secuencias de ADNc de GLK y GLKRP mostradas en Tanizawa et al 1991 y Bonthron, D.T. et al 1994 (corregido posteriormente en Warner, J.P. 1995).

Clonación en vectores Bluescript II

Se clonó ADNc de GLK y GLKRP en E. coli utilizando pBluescript II (Short et al 1998), un sistema de vector de clonación recombinante similar al empleado por Yanisch-Perron C et al (1985), que comprende un replicón a base de colEI que tiene un fragmento de ADN polienlazador que contiene múltiple sitios de restricción singulares, flanqueado por secuencias promotoras de bacteriófago T3 y T7; un origen de replicación de fago filamentoso; y un gen marcador de resistencia al fármaco ampicilina.

Transformaciones

Las transformaciones en E. coli se llevaron a cabo generalmente por electroporación. Se hicieron crecer cultivos de 400 ml de las cepas DH5a o BL21 (DE3) en caldo L hasta una DO 600 de 0,5, y se cosecharon por centrifugación a 2000 g. Las células se lavaron dos veces en agua desionizada enfriada en hielo, se suspendieron de nuevo en 1 ml de glicerina al 10%, y se guardaron en partes alícuotas a -70ºC. Las mezclas de ligación se desalaron utilizando membranas Millipore serie V^{TM} (0,0025 mm de tamaño de poros). Se incubaron 40 ml de células con 1 ml de mezcla de ligación de ADN plasmídico en hielo durante 10 minutos en cubetas de electroporación de 0,2 cm, y se pulsaron luego utilizando un aparato Gene Pulser^{TM} (BioRad) a 0,5 kVcm^{-1}, 250 mF, 250. Se seleccionaron transformantes en agar L complementado con tetraciclina a 10 mg/ml o ampicilina a 100 mg/ml.

Expresión

Se expresó GLK a partir del vector pTB375NBSE en células BL21 de E. coli, produciendo una proteína recombinante que contenía un marcador 6-His inmediatamente adyacente a la metionina N-terminal. Alternativamente, otro vector adecuado es pET21(+)DNA, Novagen, número de catálogo 697703. El marcador 6-His se utilizó para permitir la purificación de la proteína recombinante en una columna rellena con ácido nitrilotriacético-níquel-agarosa, procedente de Qiagen (número de catálogo 30250).

Se expresó GLKRP a partir del vector pFLAG CTC (IBI Kodak) en células BL21 de E. coli, produciendo una proteína recombinante que contenía un marcador FLAG C-terminal. La proteína se purificó inicialmente por intercambio iónico en DEAE-Sefarose, seguido de la utilización del marcador FLAG para la purificación final en una columna de inmunoafinidad M2 anti-FLAG adquirida de Sigma-Aldrich (número de catálogo A1205).

Biotinilación de GLK

Se biotiniló GLK por reacción con éster biotinamidocaproato-N-hidroxisuccinimida (biotina-NHS) adquirido de Sigma-Aldrich (número de catálogo B2643). Resumidamente, los grupos amino libres de la proteína diana (GLK) se hacen reaccionar con biotina-NHS a una relación molar definida, formando enlaces amídicos estables que dan como resultado un producto que contiene biotina enlazada covalentemente. El exceso de biotina-NHS no conjugada se separa del producto por diálisis. Específicamente, se añadieron 7,5 mg de GLK a 0,31 mg de biotina-NHS en 4 ml de HEPES 25 mM de pH 7,3, KCl 0,15 M, ditiotreitol 1 mM, EDTA 1 mM, MgCl_{2} 1 mM (tampón A). Esta mezcla de reacción se dializó contra 100 ml de tampón A que contenía 22 mg adicionales de biotina-NHS. Después de 4 horas, se eliminó el exceso de biotina-NHS por diálisis intensa contra tampón A.

Los ejemplos siguientes se dan con fines ilustrativos y no tienen por objeto limitar el alcance de esta Solicitud. Cada compuesto ilustrado representa un aspecto particular e independiente de la invención. En los Ejemplos no limitantes que siguen, excepto que se indique de otro modo:

(i)

las evaporaciones se llevaron a cabo por evaporación giratoria a vacío, y los procedimientos de acabado se llevaron a cabo después de la eliminación de los sólidos residuales, tales como agentes secantes, por filtración;

\global\parskip1.000000\baselineskip

(ii)

las operaciones se realizaron a temperatura ambiente, es decir, en el intervalo de 18-25ºC, y en una atmósfera de gas inerte, tal como argón o nitrógeno;

(iii)

los rendimientos se dan únicamente para ilustración, y no son necesariamente el máximo alcanzable;

(iv)

las estructuras de los productos finales de la fórmula (I) se confirmaron por resonancia magnética nuclear (RMN) (generalmente de protón) y técnicas espectrales de masas; los valores del desplazamiento químico en la resonancia magnética de protón se midieron en la escala delta, en dimetilsulfóxido deuterado, excepto que se establezca de otro modo, y las multiplicidades de los picos se muestran según lo siguiente: s, singlete; d, doblete; t, triplete; m, multiplete; br, ancho; q, cuartete; quin, quintete;

(v)

los intermedios no se caracterizaron totalmente por lo general, y la pureza se evaluó mediante cromatografía de capa fina (TLC), cromatografía de líquidos de altas prestaciones (HPLC), análisis infrarrojo (IR) o de RMN;

(vi)

la cromatografía se realizó sobre sílice (gel de sílice Merck 60, 0,040-0,063 mm, mallas 230-400); y

(vii)

cuando se hace referencia a una columna "Bondelut", esto significa una columna que contiene 10 g ó 20 g ó 50 g ó 70 g de sílice de 40 micrómetros de tamaño de partículas, estando la sílice contenida en una jeringuilla desechable de 60 ml, y soportada mediante un disco poroso, obtenida de Varian, Harbor City, California, USA, con el nombre "Mega Bond Elut SI"; "Mega Bond Elut" es una marca;

(viii)

se usan las siguientes abreviaturas:

DCM

diclorometano;

DMF

dimetilformamida;

LCMS

cromatografía de líquidos/espectroscopia de masas;

THF

tetrahidrofurano.

Ejemplo 1 2-Metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]-benzofurano

Se añadió disolución de hidróxido de sodio (0,94 ml de 1M, 0,94 mM) a una disolución de 2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-metoxicarbonilpiridin-2-il)carbamoil]benzofurano (Método 1; 120 mg, 0,314 mM) en una mezcla de metanol/THF (1 ml + 4 ml), y la disolución resultante se agitó a temperatura ambiente. Después de 4 h, la mezcla de reacción se diluyó con agua (5 ml), y se concentró hasta la mitad del volumen, a vacío. La mezcla resultante se acidificó hasta pH 6 con HCl 1M. El precipitado sólido resultante se filtró, se lavó con agua, y se secó para dar un sólido de color crema pálido. Éste se cromatografió (10 g Bondelut), eluyendo con DCM que contiene metanol (gradiente de 0 - 10%), para dar el compuesto del título como un sólido incoloro. RMN: 1,03 (d, 6H), 2,09 (sept., 1H), 2,45 (s, 3H), 3,97 (d, 2H), 6,66 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,31 (t, 2H), 8,87 (s, 1H), 11,10 (bs; 1H); m/z 367 (M+H)^{+}.

Ejemplos 2-7

Los siguientes compuestos se prepararon mediante el procedimiento del Ejemplo 1, a partir del éster apropiado.

5

6

7

8

9

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Ejemplo 8

El siguiente compuesto se prepare mediante el procedimiento del Método 1 usando 2-aminotiazol.

10

Preparación de los materiales de partida

Los materiales de partida para los Ejemplos anteriores están comercialmente disponibles o se preparan fácilmente mediante métodos estándar, a partir de materiales conocidos. Por ejemplo, las siguientes reacciones son ilustraciones pero no limitaciones de la preparación de algunos de los materiales de partida usados en las reacciones anteriores.

Método 1

2-Metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-metoxicarbonilpiridin-2-il)carbamoil]benzofurano

Se añadió cloruro de oxalilo (410 mg, 282 \mul, 3,225 mmoles, 5 eq) a una disolución de 2-metil-4-isobutoxi-6-carboxibenzofurano (Método 2; 0,160 mg, 0,645 mmoles) en DCM (5 ml), y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h a temperatura ambiente. Se añadió más reactivo, la mezcla de reacción se agitó durante 16 h, y después se calentó hasta 40ºC. Como todavía quedaba ácido de partida, el disolvente se eliminó a vacío, y el residuo se trató con cloruro de oxalilo puro. La mezcla de reacción se concentró entonces a vacío y se disolvió en piridina (5 ml); a la disolución resultante se añadió 2-aminopiridin-5-carboxilato de metilo (98 mg, 0,645 mmoles). Después de agitar durante 16 h, la disolución rojiza se concentró a vacío, y la goma resultante se disolvió en DCM y se cromatografió (20 g Bondelut, eluyendo con hexano que contiene acetato de etilo, 0 - 100%) para dar el compuesto del título (122 mg, rendimiento 49,5%) como una goma incolora que solidifica lentamente; LC-MS 383 (M+H)^{+}, fuerza 94,4%.

Método 2 2-Metil-4-isobutoxi-6-carboxibenzofurano

Se añadió disolución de hidróxido de sodio (2,28 ml de 1M, 2,28 mmoles, 3 eq) a una disolución de 2-metil-4-isobutoxi-6-metoxicarbonilbenzofurano (Método 7; 200 mg, 0,76 mmoles; contenía aprox. 15% en moles de éster isobutílico) en MeOH (2,28 ml)/THF (2,28 ml). Después de 2 horas a 50ºC, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente toda la noche, y después se concentró a vacío hasta la mitad del volumen. La disolución resultante se diluyó con agua, y se acidificó hasta pH 5 (HCl 1M), y el precipitado floculante resultante se filtró y se secó para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (165 mg, 88%). RMN: 1,02 (d, 6H), 2,06 (sept., 1H), 2,45 (s, 3H), 3,90 (d, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 12,83 (bs, 1H); m/z 247 (M-H)^{-}, 94,6% por LC-MS.

Métodos 3-6

Los siguientes compuestos se prepararon mediante el procedimiento del Método 2.

11

Método 7 2-Metil-4-isobutoxi-6-metoxicarbonilbenzofurano

El 2-metil-4-hidroxi-6-metoxicarbonilbenzofurano (Método 12; 412 mg, se supone 1,0 mmol) se agitó en DMF anhidra (10 ml), y la disolución se trató secuencialmente con carbonato de potasio (690 mg, 5 mmoles, 5 eq) y 1-yodo-2-metilpropano (442 mg, 276 \mul, 2,4 mmoles, 2,4 eq). La mezcla de reacción se agitó a 90ºC durante 3 horas, después se enfrió y se vertió en agua; la mezcla resultante se extrajo dos veces con acetato de etilo, los extractos se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a vacío para producir un aceite marrón. Éste se cromatografió (50 g Bondelut, eluyendo con hexano que contiene acetato de etilo, 0 - 100%) para dar el compuesto del título como un aceite claro contaminado con aprox. 15% del éster isobutílico correspondiente. RMN: 1,02 (d, 6H), 2,06 (sept., 1H), 2,45 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,91 (d, 2H), 6,66 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,66 (s, 1H); el espectro también contenía señales consistentes con éster isobutílico, aprox. 15% en moles.

Métodos 8-11

Los siguientes compuestos se prepararon mediante el procedimiento del Método 7.

12

13

Método 12 2-Metil-4-hidroxi-6-metoxicarbonilbenzofurano

Se añadió 2-metil-4-acetoxi-6-metoxicarbonilbenzofurano (Método 14; 1,275 g, 5,14 mmoles) a una suspensión de carbonato de potasio (1,408 g, 10,3 mmoles, 2 eq) en MeOH (100 ml) y agua (2 ml), y la mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. El licor sobrenadante se decantó del material insoluble, y se evaporó a vacío para dar un sólido crema (2,19 g, se supone que está contaminado con materiales inorgánicos). RMN: 2,35 (s, 3H), 3,56 (br s, 1H), 3,73 (s, 3H), 6,46 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,86 (s, 1H); m/z 205 (M-H)^{-}, 83% por LC-MS.

Método 13

El siguiente compuesto se preparó mediante el procedimiento del Método 12 a partir de 4-acetoxi-6-metoxicarbonilbenzofurano (J Chem Soc (C); 1968, 867-9).

14

Método 14 2-Metil-4-acetoxi-6-metoxicarbonilbenzofurano

Una mezcla de ácido E-3-metoxicarbonil-4-(5-metilfur-2-il)-but-3-enoico (Método 15; 1,39 g, 6,2 mmoles) y acetato de potasio (620 mg, 6,3 mmoles) en anhídrido acético (12,5 ml) se calentó a 140ºC durante 15 mins. La mezcla de reacción se enfrió y se vertió sobre una mezcla de agua/acetato de etilo; la capa acuosa se separó, y la capa orgánica se lavó secuencialmente con disolución saturada de bicarbonato de sodio y salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a vacío para dar el producto bruto como una masa cristalina oscura. Ésta se cromatografió (50 g Bondelut, eluyendo con hexano que contiene acetato de etilo, 0 - 100%) para dar el compuesto del título como un sólido amarillo pálido, 1,42 g (92%). RMN: 2,36 (s, 3H), 3,34 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,68 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,96 (s, 1H); m/z 247 (M-H)^{-}, 97,1% por LC-MS.

Método 15 Ácido E-3-metoxicarbonil-4-(5-metilfur-2-il)-but-3-enoico

Una disolución de éster t-butílico del ácido E-3-metoxicarbonil-4-(5-metilfur-2-il)-but-3-enoico (Método 16; 1,39 g, 4,96 mmoles) en ácido trifluoroacético / agua (20 ml de 90:10 v/v) se agitó a temperatura ambiente durante 20 mins.; la mezcla de reacción se diluyó entonces con tolueno (30 ml), y se evaporó a vacío para dar un aceite marrón. Después de posteriormente destilar azeotrópicamente con tolueno (30 ml), éste solidificó; la trituración con isohexano y la recogida del residuo produjo el compuesto del título como un sólido marrón (1,05 g, 95%). RMN 2,33 (s, 3H), 3,65 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 6,29 (d, 1H), 6,85 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 12,34 (bs, 1H).

Método 16 Éster t-butílico del ácido E-3-metoxicarbonil-4-(5-metilfur-2-il)-but-3-enoico

Una disolución de 1-metoxicarbonil-2-t-butoxicarbonil etil fosforano (JCS Perkin II, 1975, p1030; 2,69 g, 6 mmoles, 1,2 eq) y 5-metilfuran-2-al (0,5 ml, 5 mmoles) en tolueno seco (10 ml) se agitó a 80ºC durante 48 h, y después se evaporó hasta sequedad. El residuo se cromatografió (50 g Bondelut; eluyendo con hexano que contiene 10% v/v de acetato de etilo) para dar el compuesto del título como un aceite marrón (1,39 g, 100%). RMN: 1,38 (s, 9H), 2,33 (s, 3H), 3,62 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 6,31 (d, 1H), 6,85 (d, 1H), 7,42 (s, 1H).

Método 17 2-Metil-4-(2-fluorobenciloxi)-6-[N-(4-metoxicarbonilfenil)-carbamoil]benzofurano

Una disolución de ácido 2-metil-4-(2-fluorobenciloxi)-1-benzofuran-6-carboxílico (Método 3; 0,60 mg, 0,2 mmoles) y 2-aminopiridin-5-carboxilato de metilo (61 mg, 0,4 mmoles, 2 eq) en piridina (1 ml) se trató con oxicloruro de fósforo (20,5 \mul, 0,22 mmoles, 1,1 eq), y la mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en agua, y se extrajo dos veces con acetato de etilo; los extractos se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y evaporaron para dar una goma amarilla. Ésta se cromatografió (10 g Bondelut, eluyendo con hexano que contiene acetato de etilo, 0 - 100%) para dar el compuesto del título como un sólido (61 mg, 70%). RMN: 2,46 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 5,37 (s, 2H), 6,66 (s, 1H), 7,25 (m, 2H), 7,42 (m, 1H), 7,62 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 8,36 (m, 2H), 8,91 (s, 1H), 11,20 (bs, 1H); m/z 435 (M+H)^{+}, 100% por LC-MS.

Métodos 18-22

Los siguientes compuestos se prepararon mediante el procedimiento del Método 17.

15

Método 23 2-Metil-4-(2-tien-3-iletoxi)-6-metoxicarbonilbenzofurano

A una disolución de 2-metil-4-hidroxi-6-metoxicarbonilbenzofurano (Método 12; 1,24 g, 6,0 mmoles) y 2-(3-tienil)etanol (768 mg, 0,67 ml, 6,0 mmoles) en DCM (DCM, 50 ml) se añadió trifenilfosfina soportada en polímero (2,5 g, aprox. 3 mmoles/g, 1,5 eq), y la suspension se enfrió hasta 5ºC en una atmósfera de argón. A esto se añadió azodicarboxilato de di-t-butilo (1,725 g, 7,5 mmoles, 1,5 eq), y la mezcla de reacción se agitó toda la noche, dejando calentar hasta la temperatura ambiente. Después se filtró a través de tierra de diatomeas, se lavó a conciencia con DCM, y el filtrado y los lavados se evaporaron a vacío hasta \sim50 ml de volumen total. A esto se añadió ácido trifluoroacético (2 ml), y la disolución se evaporó a vacío para dar un aceite rojo. Éste se cromatografió (70 g Bondelut, eluyendo con hexano que contiene acetato de etilo, 0 - 50%) para dar un sólido rojo; éste se volvió a cromatografiar (como antes) para dar el compuesto del título como un sólido cristalino incoloro (150 mg, rendimiento 8%). RMN: 2,46 (s, 3H), 3,10 (t, 2H), 3,83 (s, 3H), 4,33 (t, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,12 (dd, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,46 (dd, 1H), 7,66
(s, 1H).

Composiciones farmacéuticas

A continuación se ilustran formas representativas de dosificación farmacéutica de la invención como se define aquí (designándose el compuesto activo "Compuesto X"), para uso terapéutico o profiláctico en seres humanos:

16

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Nota

Las formulaciones anteriores se pueden obtener por procedimientos convencionales bien conocidos en la técnica farmacéutica. Los comprimidos (a)-(c) se pueden dotar de recubrimiento entérico por métodos convencionales, por ejemplo para proporcionar un recubrimiento de acetato-ftalato de celulosa. Las formulaciones de aerosol (h)-(k) se pueden utilizar en asociación con dispensadores estándar de aerosol de dosis medidas, y los agentes de suspensión trioleato de sorbitán y lecitina de soja se pueden sustituir por un agente de suspensión alternativo, tal como monooleato de sorbitán, sesquioleato de sorbitán, polisorbato 80, poli(oleato de glicerina) o ácido oleico.

Referencias

1. Printz, R. L., Magnuson, M. A. y Granner, D. K. (1993) Annual Review of Nutrition 13, 463-96

2. DeFronzo, R. A. (1988) Diabetes 37, 667-87

3. Froguel, P., Zouali, H., Vionnet, N., Velho, G., Vaxillaire, M., Sun, F., Lesage, S., Stoffel, M., Takeda, J. y Passa, P. (1993) New England Journal of Medicine 328, 697-702

4. Bell, G. I., Pilkis, S. J., Weber, I. T. y Polonsky, K. S. (1996) Annual Review of Physiology 58, 171-86

5. Velho, G., Petersen, K. F., Perseghin, G., Hwang, J. H., Rothman, D. L., Pueyo, M. E., Cline, G. W., Froguel, P. y Shulman, G. I. (1996) Journal of Clinical Investigation 98, 1755-61

6. Christesen, H. B., Jacobsen, B. B., Odili, S., Buettger, C., Cuesta-Munoz, A., Hansen, T., Brusgaard, K., Massa, O., Magnuson, M. A., Shiota, C., Matschinsky, F. M. y Barbetti, F. (2002) Diabetes 51, 1240-6

7. Glaser, B., Kesavan, P., Heyman, M., Davis, E., Cuesta, A., Buchs, A., Stanley, C. A., Thornton, P. S., Permutt, M. A., Matschinsky, F. M. y Herold, K. C. (1998) New England Journal of Medicine 338, 226-30

8. Caro, J. F., Triester, S., Patel, V. K., Tapscott, E. B., Frazier, N. L. y Dohm, G. L. (1995) Hormone & Metabolic Research 27, 19-22

9. Desai, U. J., Slosberg, E. D., Boettcher, B. R., Caplan, S. L., Fanelli, B., Stephan, Z., Gunther, V. J., Kaleko, M. y Connelly, S. (2001) Diabetes 50, 2287-95

10. Shiota, M., Postic, C., Fujimoto, Y., Jetton, T. L., Dixon, K., Pan, D., Grimsby, J., Grippo, J. F., Magnuson, M. A. y Cherrington, A. D. (2001) Diabetes 50, 622-9

11. Ferre, T., Pujol, A., Riu, E., Bosch, F. y Valera, A. (1996) Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93, 7225-30

12. Seoane, J., Barbera, A., Telemaque-Potts, S., Newgard, C. B. y Guinovart, J. J. (1999) Journal of Biological Chemistry 274, 31833-8

13. Moore, M. C., Davis, S. N., Mann, S. L. y Cherrington, A. D. (2001) Diabetes Care 24, 1882-7

14. Alvarez, E., Roncero, I., Chowen, J. A., Vazquez, P. y Blazquez, E. (2002) Journal of Neurochemistry 80, 45-53

15. Lynch, R. M., Tompkins, L. S., Brooks, H. L., Dunn-Meynell, A. A. y Levin, B. E. (2000) Diabetes 49, 693-700

16. Roncero, I., Alvarez, E., Vazquez, P. y Blazquez, E. (2000) Journal of Neurochemistry 74, 1848-57

17. Yang, X. J., Kow, L. M., Funabashi, T. y Mobbs, C. V. (1999) Diabetes 48, 1763-1772

18. Schuit, F. C., Huypens, P., Heimberg, H. y Pipeleers, D. G. (2001) Diabetes 50, 1-11

19. Levin, B. E. (2001) International Journal of Obesity 25

20. Alvarez, E., Roncero, I., Chowen, J. A., Thorens, B. y Blazquez, E. (1996) Journal of Neurochemistry 66, 920-7

21. Mobbs, C. V., Kow, L. M. y Yang, X. J. (2001) American Journal of Physiology - Endocrinology & Metabolism 281, E649-54

22. Levin, B. E., Dunn-Meynell, A. A. y Routh, V. H. (1999) American Journal of Physiology 276, R1223-31

23. Spanswick, D., Smith, M. A., Groppi, V. E., Logan, S. D. y Ashford, M. L. (1997) Nature 390, 521-5

24. Spanswick, D., Smith, M. A., Mirshamsi, S., Routh, V. H. y Ashford, M. L. (2000) Nature Neuroscience 3, 757-8

25. Levin, B. E. y Dunn-Meynell, A. A. (1997) Brain Research 776, 146-53

26. Levin, B. E., Govek, E. K. y Dunn-Meynell, A. A. (1998) Brain Research 808, 317-9

27. Levin, B. E., Brown, K. L. y Dunn-Meynell, A. A. (1996) Brain Research 739, 293-300

28. Rowe, I. C., Boden, P. R. y Ashford, M. L. (1996) Journal of Physiology 497, 365-77

29. Fujimoto, K., Sakata, T., Arase, K., Kurata, K., Okabe, Y. y Shiraishi, T. (1985) Life Sciences 37, 2475-82

30. Kurata, K., Fujimoto, K. y Sakata, T. (1989) Metabolism: Clinical & Experimental 38, 46-51

31. Kurata, K., Fujimoto, K., Sakata, T., Etou, H. y Fukagawa, K. (1986) Physiology & Behavior 37, 615-20.

Claims (10)

1. Un compuesto de fórmula (I):

29

en la que:

\quad

el anillo A es piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo; en la que dicho piridin-2-ilo o tiazol-2-ilo puede estar opcionalmente sustituido en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{4};

\quad

uno de R^{1} y R^{2} es hidrógeno, y el otro es hidrógeno o alquilo C_{1-4}; en la que R^{1} y R^{2} pueden estar sustituidos en el carbono con uno o más grupos seleccionados de R^{5};

\quad

R^{3} se selecciona de alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, carbociclilo, heterociclilo, carbocicliloxi y heterocicliloxi; en la que R^{3} puede estar independientemente sustituido en el carbono, de forma opcional, con uno o más grupos seleccionados de R^{6}; y en la que si dicho heterociclilo contiene un resto -NH-, ese nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-4};

\quad

R^{4} se selecciona de halo, carboxi y alquilo C_{1-4};

\quad

R^{5} y R^{6} se seleccionan independientemente de halo, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, N-(alquil C_{1-4})amino, N,N-(alquil C_{1-4})_{2}amino, carbociclilo, heterociclilo, carbocicliloxi, heterocicliloxi y carbociclilidenilo; en la que R^{5} y R^{6} pueden estar independientemente sustituidos en el carbono, de forma opcional, con uno o más R^{7}; y en la que si dicho heterociclilo contiene un resto -NH-, ese nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-4};

\quad

R^{7} se selecciona de halo, carboxi, metilo, etilo, metoxi, etoxi, metilamino, etilamino, dimetilamino, dietilamino y N-metil-N-etilamino;

o una sal, solvato o profármaco del mismo.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que el Anillo A no está sustituido, o está sustituido con carboxi.

3. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que uno de R^{1} y R^{2} es hidrógeno, y el otro es hidrógeno o alquilo C_{1-4}.

4. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{3} se selecciona de alcoxi C_{1-4}; en el que R^{3} puede estar independientemente sustituido en el carbono, de forma opcional, con uno o más grupos seleccionados de R^{6}.

5. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{3} se selecciona de 2-fluorobenciloxi, 5-metilisoxazol-3-ilmetoxi y 2-tien-3-iletoxi.

6. Un compuesto según la reivindicación 1, seleccionado de:

\quad

2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-(2-fluorofenilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(5-carboxitiazol-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-(5-metilisoxazol-3-ilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

4-(2-fluorofenilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

4-(5-metilisoxazol-3-ilmetoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano;

\quad

2-metil-4-(tien-2-iletoxi)-6-[N-(5-carboxipiridin-2-il)carbamoil]benzofurano; y

\quad

2-metil-4-isobutoxi-6-[N-(tiazol-2-il)carbamoil]-benzofurano;

o una sal, solvato o profármaco del mismo.

7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal, profármaco o solvato del mismo, junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

8. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para uso en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad mediada por GLK.

9. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I), como se define en la reivindicación 1, o una sal, solvato o profármaco del mismo, procedimiento (en el que los grupos variables son como se definen en la reivindicación 1, excepto que se especifique de otro modo) el cual comprende:

Proceso 1): hacer reaccionar un ácido de fórmula (II):

30

o un derivado activado del mismo, con un compuesto de fórmula (III); o

31

Proceso 2): para compuestos de fórmula (I) en la que R^{4} es carboxi, desproteger un compuesto de fórmula (III):

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en la que R^{x}C(O)O- es un grupo éster;

y después, si es necesario o deseable:

i)

convertir un compuesto de la fórmula (I) en otro compuesto de la fórmula (I); y/o

ii)

eliminar cualesquiera grupos protectores; y/o

iii)

formar una sal, solvato o profármaco del mismo.

10. Un compuesto de fórmula (III) según la reivindicación 9.