JPH0236878A - ヒト免疫不全症候群ウイルスおよび／またはその関連物質除去剤 - Google Patents
ヒト免疫不全症候群ウイルスおよび／またはその関連物質除去剤Info
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- JPH0236878A JPH0236878A JP63107019A JP10701988A JPH0236878A JP H0236878 A JPH0236878 A JP H0236878A JP 63107019 A JP63107019 A JP 63107019A JP 10701988 A JP10701988 A JP 10701988A JP H0236878 A JPH0236878 A JP H0236878A
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- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
- A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
- A61M1/3679—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits by absorption
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/04—Processes using organic exchangers
- B01J39/07—Processes using organic exchangers in the weakly acidic form
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- A—HUMAN NECESSITIES
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- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は患者の体液中からヒト免疫不全症候群ウィルス
（以下、ＨＩＶと略記）および／またはその関連物質を
吸着除去することに関する。
（以下、ＨＩＶと略記）および／またはその関連物質を
吸着除去することに関する。
ＨＩＶはヒトリンパ球、とくにヘル、＜Ｔリンパ球と親
和性を有し、かかるリンパ球に侵入してこれを破壊する
。このため、細胞性免疫の機能の低下を来し、その結果
、患者は日和見感染、または良性腫瘍にかかつて死亡す
ることが多い。
和性を有し、かかるリンパ球に侵入してこれを破壊する
。このため、細胞性免疫の機能の低下を来し、その結果
、患者は日和見感染、または良性腫瘍にかかつて死亡す
ることが多い。
現在、ＨＩＶにもとづく感染症を治療すべく精力的に研
究が行われている。例えば、ワクチンの製造が試みられ
ているが、ＨＩＶ遺伝子が変異し易く、ワクチンの標的
となる抗原の設定が困難である。ま友、逆転写酵素の特
異的阻害剤としてスラミン、ＨＰＡ２３などが使用され
、さらにＤＮＡ阻害剤としてＡＺＴなどの投与が試みら
れているが、良い臨床結果が得られず、副作用の大きい
ことが報告されている。ま友、インターフェロンのが、
臨床試験において著明な改善効果は得られていない。
究が行われている。例えば、ワクチンの製造が試みられ
ているが、ＨＩＶ遺伝子が変異し易く、ワクチンの標的
となる抗原の設定が困難である。ま友、逆転写酵素の特
異的阻害剤としてスラミン、ＨＰＡ２３などが使用され
、さらにＤＮＡ阻害剤としてＡＺＴなどの投与が試みら
れているが、良い臨床結果が得られず、副作用の大きい
ことが報告されている。ま友、インターフェロンのが、
臨床試験において著明な改善効果は得られていない。
さらにまた、ＨＩＶ患者血清中には、免疫複合体の増加
やインターロイキン−２産生の抑制因子の存在などが知
られ、これらの除去にプラズマフエレーシスも試みられ
ているが満足な皮果は得られていない 〔プラズマセラ
ビイ（ＰｌａｇｍａＴｈｅｒａｐｙ ）旦、２３（１９
８７））ｏ以上のようにＨＩｖにもとづく感染症の治療
には数多くの方法が試みられているが、いずれの治療法
にも限界がある。
やインターロイキン−２産生の抑制因子の存在などが知
られ、これらの除去にプラズマフエレーシスも試みられ
ているが満足な皮果は得られていない 〔プラズマセラ
ビイ（ＰｌａｇｍａＴｈｅｒａｐｙ ）旦、２３（１９
８７））ｏ以上のようにＨＩｖにもとづく感染症の治療
には数多くの方法が試みられているが、いずれの治療法
にも限界がある。
本発明者らは、Ｈ工Ｖ感染者のうち、感染初期あるいは
増悪期の患者においては体液中にもＨＩＶがＴ細胞から
大量に放出されるとの情報に基づき、体外循環治療法に
よって体液（とくに血漿）中のＨＩＶおよび／またはそ
の関連物質の量を低減化することができれば、症状の悪
化を防ぎ、ひいては延命につながるのではないかと考え
た。
増悪期の患者においては体液中にもＨＩＶがＴ細胞から
大量に放出されるとの情報に基づき、体外循環治療法に
よって体液（とくに血漿）中のＨＩＶおよび／またはそ
の関連物質の量を低減化することができれば、症状の悪
化を防ぎ、ひいては延命につながるのではないかと考え
た。
したがって、本発明の目的は、いかにして体液中のＨＩ
Ｍおよび／マ念はその関連物質を除去するかということ
であり、そのための除去剤を得ることである。
Ｍおよび／マ念はその関連物質を除去するかということ
であり、そのための除去剤を得ることである。
＝３
〔課題を解決するための手段〕
かかる目的は、表面が弱酸性ま念は弱塩基性を示す固体
物質からなる体液中のＨＩ Ｖおよび／ま之はその関連
物質を除去するための除去剤を提供することによって達
成さ豹、る。
物質からなる体液中のＨＩ Ｖおよび／ま之はその関連
物質を除去するための除去剤を提供することによって達
成さ豹、る。
本発明の特徴とするところは、ＨＩＶ感染患者の体液中
のＨＩＶおよび／またはその関連物質を除去するために
表面が弱酸性または弱塩基性を示す固体物質を使用する
ことにある。
のＨＩＶおよび／またはその関連物質を除去するために
表面が弱酸性または弱塩基性を示す固体物質を使用する
ことにある。
本発明において、表面が弱酸性または弱塩基性を示す固
体物質とは、固体物質表面上に田試薬を滴下して弱酸性
ま念は弱塩基性を呈するものをいい、弱酸性とは田２５
以上６．９以下、弱塩基性とは…７．４以上１０．５以
下を意味する。固体物質表面の田が７．０以上〜７．３
以下のもの（無極性のポリプロピレン、石英、 ５Ｏ
ａＮａ型の陽イオン交換樹脂等）ではＩ−Ｉ Ｉ Ｖお
よび／″！、たはその関連物質の吸着除去能がなく、ま
た、表面の田が２．５未満のもの（強酸型陽イオン交換
樹脂等）あるいは田が１０．５をこえるもの（強塩基型
陰イオン交換樹脂等）では体液中の蛋白質が凝固する傾
向にあり、体液からＨＩＶおよびその関連物質を効率的
に除去することが困難である。
体物質とは、固体物質表面上に田試薬を滴下して弱酸性
ま念は弱塩基性を呈するものをいい、弱酸性とは田２５
以上６．９以下、弱塩基性とは…７．４以上１０．５以
下を意味する。固体物質表面の田が７．０以上〜７．３
以下のもの（無極性のポリプロピレン、石英、 ５Ｏ
ａＮａ型の陽イオン交換樹脂等）ではＩ−Ｉ Ｉ Ｖお
よび／″！、たはその関連物質の吸着除去能がなく、ま
た、表面の田が２．５未満のもの（強酸型陽イオン交換
樹脂等）あるいは田が１０．５をこえるもの（強塩基型
陰イオン交換樹脂等）では体液中の蛋白質が凝固する傾
向にあり、体液からＨＩＶおよびその関連物質を効率的
に除去することが困難である。
本発明において除去剤の製造のために用いられる表面が
弱酸性ま念は弱塩基性を示す固体物質としては、リン酸
カルシウム（ヒドロキシアパタイト等）、アルミナ、シ
リカ、シリカ−アルミナ、ジルコニア等の無機物質から
なるもの、陰イオン交換樹脂（ＮＨ２＠Ｊ、）、陽イオ
ン交換樹脂（Ｃ■旧型、５ＯＢＨ型）、スルホン化、カ
ルボキシル化″！、りはアミノ化ポリオレフィン、スル
ホン化ポリスチレン、ジアルデヒド架橋等により不溶化
処理さｆＬタスルホン化、カルボキシル化またはアミン
化ポリビニルアルコル等の極性基を有する高分子物質か
らなるものがあげられる。これらの物質はそれ単独で所
望の形状（粒状等）に成形されて除去剤として用いられ
るが、比較的低活性な担体あるいは不活性な担体（多孔
性ガラス等）上に担持されて用いられることもできる。
弱酸性ま念は弱塩基性を示す固体物質としては、リン酸
カルシウム（ヒドロキシアパタイト等）、アルミナ、シ
リカ、シリカ−アルミナ、ジルコニア等の無機物質から
なるもの、陰イオン交換樹脂（ＮＨ２＠Ｊ、）、陽イオ
ン交換樹脂（Ｃ■旧型、５ＯＢＨ型）、スルホン化、カ
ルボキシル化″！、りはアミノ化ポリオレフィン、スル
ホン化ポリスチレン、ジアルデヒド架橋等により不溶化
処理さｆＬタスルホン化、カルボキシル化またはアミン
化ポリビニルアルコル等の極性基を有する高分子物質か
らなるものがあげられる。これらの物質はそれ単独で所
望の形状（粒状等）に成形されて除去剤として用いられ
るが、比較的低活性な担体あるいは不活性な担体（多孔
性ガラス等）上に担持されて用いられることもできる。
さらにまた、ポリヒドロキシエチルメタクリレート、ポ
リアクリル酸、ヘパリン、＝５− デキストラン硫酸などが担体に固定化して用いられる。
リアクリル酸、ヘパリン、＝５− デキストラン硫酸などが担体に固定化して用いられる。
本発明においては、上記のような表面が弱酸性または弱
塩基性を示す種々の固体物質が用いられるが、なかでも
表面が弱酸性を示す固体物質が好ましく、代表例として
陽イオン交換樹脂（５ＯａＨ型、Ｃ０ＯＨ型）、シリカ
−アルミナおよびヒドロキシアパタイト−シリカ−アル
ミナ三元系焼結体があげられ、る。
塩基性を示す種々の固体物質が用いられるが、なかでも
表面が弱酸性を示す固体物質が好ましく、代表例として
陽イオン交換樹脂（５ＯａＨ型、Ｃ０ＯＨ型）、シリカ
−アルミナおよびヒドロキシアパタイト−シリカ−アル
ミナ三元系焼結体があげられ、る。
本発明において除去剤として用いられる固体物質は表面
のみが弱酸性−または弱塩基性を示すものであればいず
れのものでもよいが、体液中で溶解するものは除かれる
。固体物質は多孔性のもの、非多孔性のものいずれでも
よい０ ＨＩＶおよび／またはその関連物質は固体物質の表面に
吸着さＡｎばよいので、固体物質の内部がどのような構
造になっていてもよく、材質が表面と異なっていてもよ
い。本発明において除去剤の形状は、粉末、粒状、板状
、繊維状いずれでもよいが、通常は直径０．１ ｍｇ〜
５聾の範囲内にある粒状体が用いらｎる。さらに、除去
剤は直接血球６一 と接触して用いられることもあるので１．ｌｆｕ球を損
傷しないよう球形であることが好ましい。
のみが弱酸性−または弱塩基性を示すものであればいず
れのものでもよいが、体液中で溶解するものは除かれる
。固体物質は多孔性のもの、非多孔性のものいずれでも
よい０ ＨＩＶおよび／またはその関連物質は固体物質の表面に
吸着さＡｎばよいので、固体物質の内部がどのような構
造になっていてもよく、材質が表面と異なっていてもよ
い。本発明において除去剤の形状は、粉末、粒状、板状
、繊維状いずれでもよいが、通常は直径０．１ ｍｇ〜
５聾の範囲内にある粒状体が用いらｎる。さらに、除去
剤は直接血球６一 と接触して用いられることもあるので１．ｌｆｕ球を損
傷しないよう球形であることが好ましい。
上記のごとき固体物質を用いて製造された除去剤で患者
の体液（血液、血漿等）（ｉｌ−処理すると、ＨＩＶお
よび／またはその関連物質が該除去剤に吸着さ力１、体
液中から除去さ九る。このような処理によってＨＩＶお
よび／またはその関連物質が有効に体液中から除去でき
ることは驚くべきことであり、予想外であった。本発明
において、ＨＩ■関連物質とは、１（ＩＶが侵入し、た
細胞から産生される代謝産物、さらにウィルスが体内に
侵入することによって産生される免疫相補細胞の活動全
抑制する物質（免疫抑制物質）を意味する。
の体液（血液、血漿等）（ｉｌ−処理すると、ＨＩＶお
よび／またはその関連物質が該除去剤に吸着さ力１、体
液中から除去さ九る。このような処理によってＨＩＶお
よび／またはその関連物質が有効に体液中から除去でき
ることは驚くべきことであり、予想外であった。本発明
において、ＨＩ■関連物質とは、１（ＩＶが侵入し、た
細胞から産生される代謝産物、さらにウィルスが体内に
侵入することによって産生される免疫相補細胞の活動全
抑制する物質（免疫抑制物質）を意味する。
本発明において、上記の固体・物質からなる除去剤はカ
ラムに充填されて使用されるが、該カラムには血液回路
と容易に接続し得る形状の入口部と出口部が設けられ、
除去剤層と出入口部との間に、体液等は通過するが、除
去剤は通過しないポリエステル製等のフィルターを備え
ているものが好ましいＱカラムとしては、ガラス、ポリ
エチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリス
チレン、ポリメチルメタクリレート製等のものが使用で
きるが、かかる除去剤を充填したカラムは通常滅菌（オ
ートクレーブ滅菌、γ線滅菌等）して使用されるので、
オートクレーブ滅菌可能なポリプロピレンやポリカーボ
ネート等が好ましいＯ前述のカラムを用いて患者の体液
からＨＩＶおよび／ま念はその関連物質の除去は体外循
環方式によって行なうことができる。体外循環方式とし
ては次の２方式があげられる０ （１）患者の血管から採取された血液をそのまま除去剤
が充填されたカラムに導入踵血液中のＨＩＶおよび／ま
たはその関連物質を吸着除去し、浄化された血液を患者
の血管に返す方式。
ラムに充填されて使用されるが、該カラムには血液回路
と容易に接続し得る形状の入口部と出口部が設けられ、
除去剤層と出入口部との間に、体液等は通過するが、除
去剤は通過しないポリエステル製等のフィルターを備え
ているものが好ましいＱカラムとしては、ガラス、ポリ
エチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリス
チレン、ポリメチルメタクリレート製等のものが使用で
きるが、かかる除去剤を充填したカラムは通常滅菌（オ
ートクレーブ滅菌、γ線滅菌等）して使用されるので、
オートクレーブ滅菌可能なポリプロピレンやポリカーボ
ネート等が好ましいＯ前述のカラムを用いて患者の体液
からＨＩＶおよび／ま念はその関連物質の除去は体外循
環方式によって行なうことができる。体外循環方式とし
ては次の２方式があげられる０ （１）患者の血管から採取された血液をそのまま除去剤
が充填されたカラムに導入踵血液中のＨＩＶおよび／ま
たはその関連物質を吸着除去し、浄化された血液を患者
の血管に返す方式。
（２）患者の血管から採取された血液を１ず分離膜等を
用いて血球と血漿に分離し、分離さ消、た血漿を除去剤
が充填され念力ラムに導入し、血漿中のＨＩＶおよび／
またはその関連物質を吸着除去後、浄化された血漿を上
記の血球に混合して患者の血管に返す方式。
用いて血球と血漿に分離し、分離さ消、た血漿を除去剤
が充填され念力ラムに導入し、血漿中のＨＩＶおよび／
またはその関連物質を吸着除去後、浄化された血漿を上
記の血球に混合して患者の血管に返す方式。
上記２方式のなかで、血球成分の損失（血小板の粘着、
赤血球の溶血等）を少なくして操作できる点から後者の
（２）の方式が実用的である。
赤血球の溶血等）を少なくして操作できる点から後者の
（２）の方式が実用的である。
かかる処理によって患者の体液からＨＩＶおよび／ま几
はその関連物質を除去することができるので、患者の症
状の増悪化傾向を防ぎ、患者を延命させることができる
。すなわち、増悪期においては前述のようにＨＩＶそれ
自体がＴ細胞から大量に放出されるので、これを除去で
きれば増悪化傾向が防がれるほか、ＨＩＶ関連物質が除
去された場合にも、ＨＩＶ関連物質による抗原−抗体反
応が抑制されること、リンパ球の破壊が抑制されること
から、症状の悪化を防ぐ効果を有するものと考えられる
。なお、かかる体液処理によって体液中の有用成分をも
除去されてしまうこともありうるので、その場合には患
者に有用成分を補給するのが望ましい。
はその関連物質を除去することができるので、患者の症
状の増悪化傾向を防ぎ、患者を延命させることができる
。すなわち、増悪期においては前述のようにＨＩＶそれ
自体がＴ細胞から大量に放出されるので、これを除去で
きれば増悪化傾向が防がれるほか、ＨＩＶ関連物質が除
去された場合にも、ＨＩＶ関連物質による抗原−抗体反
応が抑制されること、リンパ球の破壊が抑制されること
から、症状の悪化を防ぐ効果を有するものと考えられる
。なお、かかる体液処理によって体液中の有用成分をも
除去されてしまうこともありうるので、その場合には患
者に有用成分を補給するのが望ましい。
実施例１〜８および比較例１〜３
（１）除去剤の仕様
下記仕様の除去剤を用いて実験を行ったＱ（２）除去操
作 ＨＩＶ〔米国ＮＣ工所有のＨＩｖセルラインＨ９で培養
されたＨＩＶを感受性細胞ＣＥＭ（ＣＣＲＦ。
作 ＨＩＶ〔米国ＮＣ工所有のＨＩｖセルラインＨ９で培養
されたＨＩＶを感受性細胞ＣＥＭ（ＣＣＲＦ。
ＣＥＭ、 Ｆｌｏｗ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＡＴ
ＣＣＮｏ、 １９ ＡｃｕｔｅＬｙｍｐｈｏｂｌａｓｔ
ｉｃ Ｌｅｕｃｋｅｍｉａ ）に接種して増殖させ、継
代培養したもの〕感染細胞培地の上清液を前述の除去剤
で処理した。処理操作の詳細は下記のようである。
ＣＣＮｏ、 １９ ＡｃｕｔｅＬｙｍｐｈｏｂｌａｓｔ
ｉｃ Ｌｅｕｃｋｅｍｉａ ）に接種して増殖させ、継
代培養したもの〕感染細胞培地の上清液を前述の除去剤
で処理した。処理操作の詳細は下記のようである。
（］）各々の除去剤０．５ ｆ ｆ ２ ｍｌの混合溶
液培地ＲＰＭＩ−１６４０に浸漬し、加熱脱気し、密栓
して蒸気滅菌した。
液培地ＲＰＭＩ−１６４０に浸漬し、加熱脱気し、密栓
して蒸気滅菌した。
Ｃｒ＋）ＨＩ Ｖ感染細胞培地を２０００ｒｐｍで１５
分間遠心分離して得られた」二清液を０．４５μｍのフ
ィルターで濾過し、得られた涙液４ ｍｌとＲＰＭ１１
６４０ １６乳ｌと混合した。
分間遠心分離して得られた」二清液を０．４５μｍのフ
ィルターで濾過し、得られた涙液４ ｍｌとＲＰＭ１１
６４０ １６乳ｌと混合した。
（ｉｉｌ）（１）の除去剤が浸漬さ九ている培地に１ｉ
の上清液２ｄを添加して、室温にて３０分間放置した。
の上清液２ｄを添加して、室温にて３０分間放置した。
（１い（ｉｉｉ’＋の上清液’ｅ０．４５μｍのフィル
ターで沢過し九〇 （）（１いで得られ念涙液０．５４を培養液〔脈帯血す
ンパ球を５ Ｘ １０６個／１として、インターロイキ
ン２とフイトヘムアグリチニン（Ｐｈｙｔｏｂｅｍａ
−ｇ）＜１ｕｔｉｎｉｎ ） （Ｐ ＨＡ ）を添加し
て、４８時間培養しｆｃ後、９６ウエルのマルチタイタ
ープレートで総量１００μｔとして培養した〕に添加し
て３７℃にて所定時間（３ま念は５日）インキュベート
しブヒ、０ （Ｖｉ）（）の検体を１００ＯＧにて１０分間、遠心処
理を行った後、上清液を０．４５μｍのフィルターで濾
過した。
ターで沢過し九〇 （）（１いで得られ念涙液０．５４を培養液〔脈帯血す
ンパ球を５ Ｘ １０６個／１として、インターロイキ
ン２とフイトヘムアグリチニン（Ｐｈｙｔｏｂｅｍａ
−ｇ）＜１ｕｔｉｎｉｎ ） （Ｐ ＨＡ ）を添加し
て、４８時間培養しｆｃ後、９６ウエルのマルチタイタ
ープレートで総量１００μｔとして培養した〕に添加し
て３７℃にて所定時間（３ま念は５日）インキュベート
しブヒ、０ （Ｖｉ）（）の検体を１００ＯＧにて１０分間、遠心処
理を行った後、上清液を０．４５μｍのフィルターで濾
過した。
（ｖｉｉ）上清液は抗原の測定用に、沈渣はスライドグ
ラスに塗布して螢光抗体法による検体とした。
ラスに塗布して螢光抗体法による検体とした。
（ｖｉｉｌ）こｎら（１））〜（Ｖｉｉ ）７）実験を
行った検体の対照試料（感度のチエツク）として、ＨＩ
Ｖ培養細胞の上清液をＲＰＭ Ｉ−１６４０に１０−１
．１０−２．１０−８１０ ’、１０−５に希釈して調
製し、螢光抗体法の測定試料とした０ （８） ＨＩＶおよび／ま几はその関連物質の除去効果
の確認 （６）抗原濃度の測定 デュポン社（ｄｕ Ｐｏｎｔ） ＨＩ Ｖ抗原測定キラ
トラ用い、ＥＬＩＳＡ法により下記のようにして培養液
中の抗原濃度を測定し念。
行った検体の対照試料（感度のチエツク）として、ＨＩ
Ｖ培養細胞の上清液をＲＰＭ Ｉ−１６４０に１０−１
．１０−２．１０−８１０ ’、１０−５に希釈して調
製し、螢光抗体法の測定試料とした０ （８） ＨＩＶおよび／ま几はその関連物質の除去効果
の確認 （６）抗原濃度の測定 デュポン社（ｄｕ Ｐｏｎｔ） ＨＩ Ｖ抗原測定キラ
トラ用い、ＥＬＩＳＡ法により下記のようにして培養液
中の抗原濃度を測定し念。
（］）マイクロプレート上にて検体１８０．ｃ＋ｔに５
％Ｔｒｉｔｏｎ ｘ ｉ ｏ ｏ水溶液２ｏμｔを混合
した。
％Ｔｒｉｔｏｎ ｘ ｉ ｏ ｏ水溶液２ｏμｔを混合
した。
０Ｉ）−夜、室温にて放置した。
（ｒｒ＋ ＞ 自動水洗を３回くり返した。
（ＩＶ） ビオチン化された抗体溶液１００μＩＱ加
えて３７℃にて２時間インキュベートした。
えて３７℃にて２時間インキュベートした。
（Ｖ） 自動洗浄した。
（Ｖｌ）ｔ−ス・レーデイシュ・パーオキシダーゼ（Ｈ
ｏｒｓｅ−ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ）
−ストレブトアビジｙ （５ｔｒｅｐｔｏａｖｉｄｉｎ
） １００ μｔ ｋ加えて１５分間インキュベート
した。
ｏｒｓｅ−ｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ）
−ストレブトアビジｙ （５ｔｒｅｐｔｏａｖｉｄｉｎ
） １００ μｔ ｋ加えて１５分間インキュベート
した。
（ｖ：ｒ＋ 自動洗浄した後、１００μｔの色素「オ
ルソ・フエニレｙ−ジアミンＪ （０−ｐｈｅｎｙｌｅ
ｎｅ −ｄｉａｍｉｎｅ、 ０ＰＤ） 基質水溶液を
添加した。
ルソ・フエニレｙ−ジアミンＪ （０−ｐｈｅｎｙｌｅ
ｎｅ −ｄｉａｍｉｎｅ、 ０ＰＤ） 基質水溶液を
添加した。
（ｖ＋ｉｏ ４規定−硫酸水溶液５０μｔ’に添加し
て反応を停止した。
て反応を停止した。
（ＩＸ） ４９２ ｎｍの吸光度（ブランク：６２０
ｎｍ）を測定し、検電線からＨＩＭ濃度（ｎｔ／ｍｌ）
全算出し灸。
ｎｍ）を測定し、検電線からＨＩＭ濃度（ｎｔ／ｍｌ）
全算出し灸。
結果を第２表に示す。
第 ２ 表
第２表に示す如く、ＨＩＶ抗原（Ｐ−２４）は除去剤表
面が中性であるポリプロピレン、石英およびＳＯ３Ｎａ
型陽イオン交換樹脂ではほとんど吸着されなかった。し
かし、表面が弱酸性または弱塩基性を示す除去剤ではい
ずれも抗原を吸着除去することが認めらｎた。とくに、
ＳＯ３ＨｍまたはＣ０ＯＨ型の陽イオン交換樹脂やシリ
カ−アルミナなどの表面が弱酸性を示す除去剤は優れた
抗原除去能すなわち優れたＨ 工Ｖの除去能を示した。
面が中性であるポリプロピレン、石英およびＳＯ３Ｎａ
型陽イオン交換樹脂ではほとんど吸着されなかった。し
かし、表面が弱酸性または弱塩基性を示す除去剤ではい
ずれも抗原を吸着除去することが認めらｎた。とくに、
ＳＯ３ＨｍまたはＣ０ＯＨ型の陽イオン交換樹脂やシリ
カ−アルミナなどの表面が弱酸性を示す除去剤は優れた
抗原除去能すなわち優れたＨ 工Ｖの除去能を示した。
（Ｂ） 螢光抗体法による判定
前述の（２，）の除去操作で得らｆｌ−た沈査中にＦＩ
Ｉ Ｖおよび／またはその関連物質が存在するかどう
かを下記のように螢光抗体法により判定し、判定結果か
ら除去剤の性能を評価した。
Ｉ Ｖおよび／またはその関連物質が存在するかどう
かを下記のように螢光抗体法により判定し、判定結果か
ら除去剤の性能を評価した。
（１）先述したＨＩＶ吸着操作（ｒ２Ｘｌ）−（Ｖｌ＋
） ）で得られたそれぞれの沈渣を１プのＰＢＳにて１
分間低速回転させながら洗浄した。
） ）で得られたそれぞれの沈渣を１プのＰＢＳにて１
分間低速回転させながら洗浄した。
（ｉｊ）洗浄し念沈渣を５０μｔのＰＢＳ中にけん濁さ
せて螢光抗体測定用のスライドに１検体につき２スポツ
トずつ塗布した。
せて螢光抗体測定用のスライドに１検体につき２スポツ
トずつ塗布した。
釧）塗布後、スライドごとメタノール中に浸漬して固定
化処理した。
化処理した。
（］■）固定化処理したスポットにアセトンを加え、風
乾し友。
乾し友。
（Ｖ） （Ｐ−２４）抗体−ＰＢＳ溶液（容量比；１：
４０）２０μｔを各スポットに添加し念。
４０）２０μｔを各スポットに添加し念。
（Ｖｌ） これｆｃ３７℃にて２０分間インキュベー
トしｔ後、ＰＢＳ溶液にて２０分間洗浄した。
トしｔ後、ＰＢＳ溶液にて２０分間洗浄した。
（Ｖｆｉ） マウス抗ＩｇＧ抗体−ＰＢＳ溶液（容量
比；１：２０）２０μｔを各スポットに添加した。
比；１：２０）２０μｔを各スポットに添加した。
（ｖｉｉＤ これを３７℃にて２０分間インキュベー
トした後、ＰＢＳ溶液にて２０分間洗浄した。
トした後、ＰＢＳ溶液にて２０分間洗浄した。
（＋Ｘ） ストレプトアビジン（５ｔｒｅｐｔｏａｖ
ｉｄｉｎ ） ７ ルオｖ −１！ ｙ （ｆｌｕｏｒ
ｅｓｃｅｉｎ ） −Ｐ Ｂ Ｓ溶液（容量比ｉ１：５
０）２０μｔ”ｉｇ各ススポット添加し′Ｉｔ−０ （×）これを３７℃にて１０分間インキュベートした後
、暗所でＰＢＳ溶液にて洗浄し友。
ｉｄｉｎ ） ７ ルオｖ −１！ ｙ （ｆｌｕｏｒ
ｅｓｃｅｉｎ ） −Ｐ Ｂ Ｓ溶液（容量比ｉ１：５
０）２０μｔ”ｉｇ各ススポット添加し′Ｉｔ−０ （×）これを３７℃にて１０分間インキュベートした後
、暗所でＰＢＳ溶液にて洗浄し友。
（ＸＩ）９０％グリセリンと１０チのＰＢＳ混合液を１
スポツトあたり１滴加えた。
スポツトあたり１滴加えた。
（Ｘｉｉ） 紫外線照射下で、それぞれのスポットに
おける螢光部分の有無を顕微鏡で観察した０結果を第３
表に示す。
おける螢光部分の有無を顕微鏡で観察した０結果を第３
表に示す。
第 ３ 表
本コｙ ） ｏ −ル（＋） （ＣｅＥ）） ｅＲＰＭ
Ｉ−１６４０Ｋテ１０ ’１０−２．１０−３．１０−
４．１０−５ に希釈し念試料（培養３Ｈ後） コントロール（＋）（ＣＧ）の１０”ｔでの希釈試料に
おいては本法によって抗原が確認さｎ、ていることから
、本法のすぐれた感度は証明されている。第３表に示さ
れるように、培養３日後において、実施例２．３．５．
６．７及び８における抗原産生は←）であった。実施例
１と４における抗原産生は（→ではなかったけれども、
これらの抗原産生は比較例の抗原産生上りは少なかつ念
。培養５日後では、実施例３．５及び６についての抗原
産生は（ト）ではなかった。一方、実施例１．２．４．
７及び８については抗原産生がみられ念。このことは極
微量のＨＩＶが残留していた次めに５日間培養すること
によって検出限界金玉まわる抗原が産生されていること
を示していると判定されるので、これらの除低いと思わ
れる。
Ｉ−１６４０Ｋテ１０ ’１０−２．１０−３．１０−
４．１０−５ に希釈し念試料（培養３Ｈ後） コントロール（＋）（ＣＧ）の１０”ｔでの希釈試料に
おいては本法によって抗原が確認さｎ、ていることから
、本法のすぐれた感度は証明されている。第３表に示さ
れるように、培養３日後において、実施例２．３．５．
６．７及び８における抗原産生は←）であった。実施例
１と４における抗原産生は（→ではなかったけれども、
これらの抗原産生は比較例の抗原産生上りは少なかつ念
。培養５日後では、実施例３．５及び６についての抗原
産生は（ト）ではなかった。一方、実施例１．２．４．
７及び８については抗原産生がみられ念。このことは極
微量のＨＩＶが残留していた次めに５日間培養すること
によって検出限界金玉まわる抗原が産生されていること
を示していると判定されるので、これらの除低いと思わ
れる。
除去剤で処理した前述の培養液（ＣＥＭａ胞で増感させ
たもの）について、下記のように幼若リンパ球のチミジ
ン誘導体の取り込み量を測定し、除去剤の効果全判定し
た。
たもの）について、下記のように幼若リンパ球のチミジ
ン誘導体の取り込み量を測定し、除去剤の効果全判定し
た。
（１）新生児の潰帯血から分取したリンパ球ｋ ＩＪン
パ球数５ Ｘ １０’個／ ｍｌ に調製し念。
パ球数５ Ｘ １０’個／ ｍｌ に調製し念。
（１１）このリンパ球をＲＰＭＩ １６４０−１０チ
Ｆ’ＢＳ（新鮮仔牛血清）−ペニシリン１００ Ｉ Ｕ
／ ｒｒｔｌと１００μｇ ／ｍｌのストレフトマイ
シン−１％ＰＨＡ−インターロイキンー２（ＩＬ−２）
１単位／プに加えて３７℃にて４８時間培養した。
Ｆ’ＢＳ（新鮮仔牛血清）−ペニシリン１００ Ｉ Ｕ
／ ｒｒｔｌと１００μｇ ／ｍｌのストレフトマイ
シン−１％ＰＨＡ−インターロイキンー２（ＩＬ−２）
１単位／プに加えて３７℃にて４８時間培養した。
（ｉｉｉ ） 先の除去剤で処理した各々の検体（０
８Ｍ細胞で増感させた検体）２０μｔと（１１）の培養
液８０μｔ−’＜混合して３日間または５日間培養し亀
。
８Ｍ細胞で増感させた検体）２０μｔと（１１）の培養
液８０μｔ−’＜混合して３日間または５日間培養し亀
。
（１）（ｌｉｌ）の試料について各々、培養完了６時間
槽に放射化チミジン誘導体（（ｍｅｔｈｙｌ−１、２゜
３Ｈ−） ｔｈｙｒｎｉｄｉｎｅ −５’ −ｔｒｉｐ
ｈｏｓｐｈａｔｅ 、 ａｍｍｏｎｉｕｍｓａｌｔ、
３Ｈ−ｄＴＴＰ ）をｌ μｃｔ１ｒｉ／ｗｅｌｌ添
加した。
槽に放射化チミジン誘導体（（ｍｅｔｈｙｌ−１、２゜
３Ｈ−） ｔｈｙｒｎｉｄｉｎｅ −５’ −ｔｒｉｐ
ｈｏｓｐｈａｔｅ 、 ａｍｍｏｎｉｕｍｓａｌｔ、
３Ｈ−ｄＴＴＰ ）をｌ μｃｔ１ｒｉ／ｗｅｌｌ添
加した。
（）培養完了後、ワットマン社（Ｗａｔｔｍａｎ ）製
ガラスフィルター上に濾過することによってリンパ球を
回収し、５チドリクロロ酢酸水溶液１０ｒＬｌで洗浄し
、さらにメタノール１０ ａｔで洗浄した後、風乾し念
。
ガラスフィルター上に濾過することによってリンパ球を
回収し、５チドリクロロ酢酸水溶液１０ｒＬｌで洗浄し
、さらにメタノール１０ ａｔで洗浄した後、風乾し念
。
（Ｖ＋） このガラスフィルターをポリエチレン製容
器内にて抽出液（主成分：トルエン）を加えてその′−
１，まシンチレーションカウンターにてリンパ球に取り
込まれた３Ｈ−ｄＴＴＰ量全測定したＯ ここではコントロール（−）（Ｃｅ）に取り込まれた３
Ｈ−ｄＴＴＰ量を基準にして、そ１、それの除去剤にて
試料を処理した際の３Ｈ−ｄＴＴＰの取込み量から除去
剤の効果を比較検討した。−結果全第４表に示す。
器内にて抽出液（主成分：トルエン）を加えてその′−
１，まシンチレーションカウンターにてリンパ球に取り
込まれた３Ｈ−ｄＴＴＰ量全測定したＯ ここではコントロール（−）（Ｃｅ）に取り込まれた３
Ｈ−ｄＴＴＰ量を基準にして、そ１、それの除去剤にて
試料を処理した際の３Ｈ−ｄＴＴＰの取込み量から除去
剤の効果を比較検討した。−結果全第４表に示す。
第 ４
表
第４表に示す如く、ブランク（＋）（Ｃ■）では培養３
日後でチミジン誘導体の取込率がブランク←）（Ｃθ）
のそれと比較して約１／２に低下していｆｔＯこのこと
はＨＩｖによってリンノく球が破壊され、チミジン誘導
体が取り込まｎることが出来なくなっていることを示し
ている。５日後になればその傾向はさらに顕著になるこ
とが明らかになつ念。
日後でチミジン誘導体の取込率がブランク←）（Ｃθ）
のそれと比較して約１／２に低下していｆｔＯこのこと
はＨＩｖによってリンノく球が破壊され、チミジン誘導
体が取り込まｎることが出来なくなっていることを示し
ている。５日後になればその傾向はさらに顕著になるこ
とが明らかになつ念。
一方、ＨＩＶ培養液を除去剤で処理すると、チミジン誘
導体の取込率はコントロール←）及び中性除去剤の場合
と比較してみて、３日後、５日後でも顕著な低下は屹め
られない。このことは弱酸性または弱塩基性の除去剤に
よってｆ−１１Ｖそれ自体だけでな（ＨＩＶのリンパ球
破壊に関与する物質が除去されていることを示唆するも
のである。
導体の取込率はコントロール←）及び中性除去剤の場合
と比較してみて、３日後、５日後でも顕著な低下は屹め
られない。このことは弱酸性または弱塩基性の除去剤に
よってｆ−１１Ｖそれ自体だけでな（ＨＩＶのリンパ球
破壊に関与する物質が除去されていることを示唆するも
のである。
第４表に示す結果は、第２表及び第３表に示す結果とほ
ぼ対応しているが、第２表においてＨＩ■抗原吸着能が
それ程高くなくても第４表ではリンパ球の高い生存を示
す除去剤（たとえば、実施例１）もある。このことは、
除去剤がＨＩＶそｎ自体はもとよりその関連物質も同時
に吸着除去している可能性を示唆している。
ぼ対応しているが、第２表においてＨＩ■抗原吸着能が
それ程高くなくても第４表ではリンパ球の高い生存を示
す除去剤（たとえば、実施例１）もある。このことは、
除去剤がＨＩＶそｎ自体はもとよりその関連物質も同時
に吸着除去している可能性を示唆している。
０ バッチ法によるＨＩＶおよび／ま念はその関連物質
除去能の判定 ＣＥＭ細胞を用いて（へ及び（Ｂ）と同様の方法で７日
後及び１４日後のＨＩＶ抗原濃度および抗原の産生を測
定した。操作法は次のとおりである０（，１） 除去
剤０．５？／ＲＰＭＩ−１６４０．２ｍｌにＨＩＶ培養
液の上清液２罰を添加して３０分間撮盪した。
除去能の判定 ＣＥＭ細胞を用いて（へ及び（Ｂ）と同様の方法で７日
後及び１４日後のＨＩＶ抗原濃度および抗原の産生を測
定した。操作法は次のとおりである０（，１） 除去
剤０．５？／ＲＰＭＩ−１６４０．２ｍｌにＨＩＶ培養
液の上清液２罰を添加して３０分間撮盪した。
（）１）（ｉ）の上清液全採取し、０．４５μｍのメン
ブランフィルタ−で濾過した。
ブランフィルタ−で濾過した。
ｃ］：ｒ：＋ Ｐ液のうち０．５ ｍｌを抗原測定用
試料とした。
試料とした。
（ｉｖ） （ｉｉｉ）の０．２ ｒｒｔｌ ＠ ＣＥ
Ｍ細胞（５Ｘ１０５個／ｍｌ）ＲＰＭＩ−１６４０培
養液１．８罰に接種し、炭酸ガス培養器中にて培養した
。
Ｍ細胞（５Ｘ１０５個／ｍｌ）ＲＰＭＩ−１６４０培
養液１．８罰に接種し、炭酸ガス培養器中にて培養した
。
（Ｖ） 接種後４日用に培養上清液ｌ ｍｅを採取し
、新鮮なＲＰＭＩ−１６４０培養液を１扉ｅ加えた。
、新鮮なＲＰＭＩ−１６４０培養液を１扉ｅ加えた。
（Ｖｌ） 接棟後７日用に培養＠ ｌ ｍｌを採取し
、新鮮なＲＰＭＩ−１６４０水溶液１ ｍｌを添加した
。採取した培養液の上清について抗Ｗ、濃度およびＯＥ
Ｍ細胞においてＩ（ＩＶの抗原産生を螢光抗体法により
測定し友。
、新鮮なＲＰＭＩ−１６４０水溶液１ ｍｌを添加した
。採取した培養液の上清について抗Ｗ、濃度およびＯＥ
Ｍ細胞においてＩ（ＩＶの抗原産生を螢光抗体法により
測定し友。
（ｖｉｉ） 接種後１１日日目（）と同様の操作全行
つ７’ｊ。
つ７’ｊ。
（ｖｉｉｉ） 接種後１４日吊用（ｖｉ）と同様の操
作を行い、抗原濃度および抗原の産生を測定した。
作を行い、抗原濃度および抗原の産生を測定した。
測定結果を第５表に示す０
−ｆｉ ｑ ：Ｅ（ＩＶ−ＲＰＭＩ−１６４０培養液を
用いて螢光抗体法およびキットによる）ＩＩＶ抗原濃度
の感度の検討も行つ念。それらの測定結果全第６表に示
す０ このように抗原濃度の測定限界は０．０３ ｎｇ 、Ａ
ｃｅであり、希釈倍率１０−２〜１０−３でほぼ判定不
能になるが螢光抗体法では１０−５が検出限界である。
用いて螢光抗体法およびキットによる）ＩＩＶ抗原濃度
の感度の検討も行つ念。それらの測定結果全第６表に示
す０ このように抗原濃度の測定限界は０．０３ ｎｇ 、Ａ
ｃｅであり、希釈倍率１０−２〜１０−３でほぼ判定不
能になるが螢光抗体法では１０−５が検出限界である。
したがって、同一試料を２つの検出方法で判定すること
は極めて重要なことである。また、キットによる抗原濃
度の測定はＨＩＶ（Ｐ−２４）を検知するのであり、１
（ＩＶの活性の有無にかかわらず’ＨＩＶ（Ｐ−２４）
が培養液の上清中に存在する限り発色検知されるもので
ある。し念がってここで検討したシリカ−アルミナ、イ
オン交換樹脂（Ｃ０ＯＨ型および５ＯａＨ型）で処理後
の試料溶液のＩ（ＩＶ抗原産生能ｉｄ モ、！： ＯＨ
ＩＶ−ＲＰＭＩ−１６４０溶１（７） １０−２〜１０
−３に低下しており、これらがすぐれ７ｊＨＩＶ除去能
を有していることは明らかである。
は極めて重要なことである。また、キットによる抗原濃
度の測定はＨＩＶ（Ｐ−２４）を検知するのであり、１
（ＩＶの活性の有無にかかわらず’ＨＩＶ（Ｐ−２４）
が培養液の上清中に存在する限り発色検知されるもので
ある。し念がってここで検討したシリカ−アルミナ、イ
オン交換樹脂（Ｃ０ＯＨ型および５ＯａＨ型）で処理後
の試料溶液のＩ（ＩＶ抗原産生能ｉｄ モ、！： ＯＨ
ＩＶ−ＲＰＭＩ−１６４０溶１（７） １０−２〜１０
−３に低下しており、これらがすぐれ７ｊＨＩＶ除去能
を有していることは明らかである。
以下余白
第
表
抗原濃度：ｎｇ／ｍ
（ト）循環系によるＨＩＶ抗原および／ま念はその関連
物質除去能の判定 新鮮な分生血清（ＦＢＳ）を上記除去剤を充填し念力ラ
ム（ミニモジュール）に下記の要領で循環し、培養液中
のＨＩＶ抗原の濃度を測定し念。
物質除去能の判定 新鮮な分生血清（ＦＢＳ）を上記除去剤を充填し念力ラ
ム（ミニモジュール）に下記の要領で循環し、培養液中
のＨＩＶ抗原の濃度を測定し念。
（１）ポリプロピレン類のカラム（容量１ｏ４；内径１
５ｍ）に４１の除去剤を入れ、生理食塩水を満たした。
５ｍ）に４１の除去剤を入れ、生理食塩水を満たした。
（１１）カラム全体をオートクレーブ滅菌した。
（ｉｉｉ ） 滅菌されたカラム中の生理食塩水を混
合溶液培地ＲＰＭニー１６４０で充分置換した。
合溶液培地ＲＰＭニー１６４０で充分置換した。
（１）ＨＩＶ培養液５０プ（１０％のＦＩ１３Ｓを含む
混合溶液培地ＲＰＭＩ−１６４０） （ＰＨニア、４
）を７ ａｌ ７分の速度で１時間カラムに循環し念。
混合溶液培地ＲＰＭＩ−１６４０） （ＰＨニア、４
）を７ ａｌ ７分の速度で１時間カラムに循環し念。
（Ｖ） 循環後、培養液中のＨＩＶｉＪＪＪ：濃度を
測定し念。結果を第７表に示す。
測定し念。結果を第７表に示す。
以下余白
第 ７
表
第７表から循環系によりＨＩＶ培養液中からＨＩＶ抗原
は有効に除去されていることがわかる。
は有効に除去されていることがわかる。
（Ｖｌ） さらにこれをＯＥＭに接種し、７日、１４
日、２１日後における抗原濃度および螢光抗体法による
抗原産生を観察した。結果全第８表に示す。第８表にお
いて、抗原濃度の表示は０．０４ｎ ｇ／ｙｒｔ１以上
を（＋）、０．０３ ｎｇ ／ｄより大きく００４ｎｇ
〜未満を（±）、０．０３ ｎｇ／だｊ以下を（−）と
した０ 第８表に示されるように、ミニモジュールによる循環法
によって処理され念試料溶液の螢光抗体法によるＯＥＭ
細胞内の抗原の産生けすべて（−）であり、唖めて効率
的にＨＩＶを吸着除去できることがわかる。
日、２１日後における抗原濃度および螢光抗体法による
抗原産生を観察した。結果全第８表に示す。第８表にお
いて、抗原濃度の表示は０．０４ｎ ｇ／ｙｒｔ１以上
を（＋）、０．０３ ｎｇ ／ｄより大きく００４ｎｇ
〜未満を（±）、０．０３ ｎｇ／だｊ以下を（−）と
した０ 第８表に示されるように、ミニモジュールによる循環法
によって処理され念試料溶液の螢光抗体法によるＯＥＭ
細胞内の抗原の産生けすべて（−）であり、唖めて効率
的にＨＩＶを吸着除去できることがわかる。
（４）除去剤の安全性の判定
シリカ−アルミナ（実施例３）、陽イオン交換樹脂（Ｃ
０ＯＨ型）（実施例５）及び陽イオン交換樹脂（５Ｏ３
Ｈ型）（実施例６）を混合溶液培地ＲＰＭ１１６４０中
で１２１℃で２０分間処理し、各々抽出物を得念。各抽
出物をＣＥＭ細胞へ加え、細胞毒性を測定し念。その結
果、全ての抽出物において、ＯＥＭ細胞への添加２１日
後にＯＥＭ細胞の９０−９５％が生き残った。
０ＯＨ型）（実施例５）及び陽イオン交換樹脂（５Ｏ３
Ｈ型）（実施例６）を混合溶液培地ＲＰＭ１１６４０中
で１２１℃で２０分間処理し、各々抽出物を得念。各抽
出物をＣＥＭ細胞へ加え、細胞毒性を測定し念。その結
果、全ての抽出物において、ＯＥＭ細胞への添加２１日
後にＯＥＭ細胞の９０−９５％が生き残った。
比較例４
陽イオン交換樹脂Ｄｏｗｅｘ ５０ ’ＷＸ ８ （ダ
ウケミカル社（Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ 、ｙｈ）（
表面のｌｌ＋：２．０）および陰イオン交換樹脂ＩＲＡ
−７５［：日本オルガノ社製〕（表面の１：１２．０）
＆″用いて、実施例１と同様の操作を行ったが、培養液
の粘度の上昇をみ几。
ウケミカル社（Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ 、ｙｈ）（
表面のｌｌ＋：２．０）および陰イオン交換樹脂ＩＲＡ
−７５［：日本オルガノ社製〕（表面の１：１２．０）
＆″用いて、実施例１と同様の操作を行ったが、培養液
の粘度の上昇をみ几。
このことは実際に患者の血漿を該イオン交換樹脂俣
で処理する場合には血・・・の凝固という望ましくない
事態をひきおこす可能性のあることを示唆しており、表
面の田が強酸性ま念は強塩基性を示す固体物質は本発明
においては用いられない。
事態をひきおこす可能性のあることを示唆しており、表
面の田が強酸性ま念は強塩基性を示す固体物質は本発明
においては用いられない。
実施例９〜１４
シリカゾル〔日量化学工業＠夷、シリカ濃度２１．５重
ｔ％ｌおよびアルミナゾル〔日産化学工業■製、アルミ
ナ濃度１６．５重ｔ％〕を第９表に示すような各組成比
になるよう混合し、熱板上であらかじめ水分を蒸発除去
した。これを電気炉中にて５５０℃にて３時間焼成した
。得られたシリカ−アルミナ各々０１２を液体培地ＲＰ
ＭＩ−１６４０（濃度１．０２ ｆ／ｄｔ ） ２ ｍ
ｌに浸漬し、１２１℃、２０・・０９１ｍ１を添加して
３０分間振盪し、ＨＩＶ吸着能測定用の試料とした。
ｔ％ｌおよびアルミナゾル〔日産化学工業■製、アルミ
ナ濃度１６．５重ｔ％〕を第９表に示すような各組成比
になるよう混合し、熱板上であらかじめ水分を蒸発除去
した。これを電気炉中にて５５０℃にて３時間焼成した
。得られたシリカ−アルミナ各々０１２を液体培地ＲＰ
ＭＩ−１６４０（濃度１．０２ ｆ／ｄｔ ） ２ ｍ
ｌに浸漬し、１２１℃、２０・・０９１ｍ１を添加して
３０分間振盪し、ＨＩＶ吸着能測定用の試料とした。
試料の上清・・液を採取し、０．４５７ｍのフィルター
で濾過し、涙液中のＨＩＶ濃度（Ｐ−２４抗原）を先と
同様にＥＬＩＳＡ法 ′ −肴奪併キ字オ
呼にて測定した。測定結果を第９表に示す。
で濾過し、涙液中のＨＩＶ濃度（Ｐ−２４抗原）を先と
同様にＥＬＩＳＡ法 ′ −肴奪併キ字オ
呼にて測定した。測定結果を第９表に示す。
第 ９ 表
合性を維持し、しかもＨＩＶに対して高い吸着活性を有
する吸着剤について検討し念結果、ヒドロキシアパタイ
ト−シリカ−アルミナ三元系吸着剤のなかに高活性を有
する除去剤が得られることを見出した。
する吸着剤について検討し念結果、ヒドロキシアパタイ
ト−シリカ−アルミナ三元系吸着剤のなかに高活性を有
する除去剤が得られることを見出した。
ヒドロキシアパタイトに所定濃度になるようシリカゾル
、アルミナゾルを同時に含浸させ、水分をあらかじめ蒸
発除去した後、電気炉で５５０℃、３時間焼成処理を行
つ之。
、アルミナゾルを同時に含浸させ、水分をあらかじめ蒸
発除去した後、電気炉で５５０℃、３時間焼成処理を行
つ之。
得られた除去剤を各々０．５？秤量し、液体培地ＲＰＭ
Ｉ−１６４０２ｍ、ｌに浸漬して１２１℃にて２０この
ように、シリカ−アルミナ系除去剤におけるＨＩＶの除
去能はＳ ｉ／ｌ’−１原子比が高い領域で優れている
ことがわかる。
Ｉ−１６４０２ｍ、ｌに浸漬して１２１℃にて２０この
ように、シリカ−アルミナ系除去剤におけるＨＩＶの除
去能はＳ ｉ／ｌ’−１原子比が高い領域で優れている
ことがわかる。
実施例１５〜２１
ヒドロキシアパタイトはインブラント用材料として使用
されており、生体適合性に優れている。
されており、生体適合性に優れている。
本発明者らは、ヒドロキシアパタイトの生体適＝３２−
・・・・２ｒｌＬｌを添加して３０分間振盪し、ＨＩＶ
除去能測定用試料とした。
除去能測定用試料とした。
試料の上清・・液を採取し、０．４５ＩＸｎのフィルタ
ーで一過し、涙液中のＨＩＶ濃度（Ｐ−２４抗″ＩＩ
） ’！−先と同様にＥＬＩＳＡ法にて測定した。それ
らの測定結果を第１０表に示す。
ーで一過し、涙液中のＨＩＶ濃度（Ｐ−２４抗″ＩＩ
） ’！−先と同様にＥＬＩＳＡ法にて測定した。それ
らの測定結果を第１０表に示す。
第１０表
なお、ここで使用したヒドロキシアパタイト（は、Ｃａ
／Ｐ ： １．５０のものを５５０℃にて３時間焼成処
理し念ものを使用し念。ま念、その粒子径は第Ｂ０表に
示す如く、ヒドロキシアパタイト単独のＨＩＭ除去能に
比較してシリカ、アルミナを含浸させて焼成し几試料の
それは、含浸濃度が比較的５〜１０％と低濃度である時
に高活性を示すことがわかる。このように、シリカ−ア
ルミナ濃度が低濃度領域で高活性を示すということは最
終的にはシリカ−アルミナ量を減少させることになり、
望ましい。
／Ｐ ： １．５０のものを５５０℃にて３時間焼成処
理し念ものを使用し念。ま念、その粒子径は第Ｂ０表に
示す如く、ヒドロキシアパタイト単独のＨＩＭ除去能に
比較してシリカ、アルミナを含浸させて焼成し几試料の
それは、含浸濃度が比較的５〜１０％と低濃度である時
に高活性を示すことがわかる。このように、シリカ−ア
ルミナ濃度が低濃度領域で高活性を示すということは最
終的にはシリカ−アルミナ量を減少させることになり、
望ましい。
実施例２２〜２３
デビソン■製シリカーアルミナ（Ｓｔ／Ａ７原子比４．
４０）に、０．７９重量係のポリメタクリル酸ヒドロキ
シエチルエステル（ＰＨＥＭＡ）−エタ／−ル溶液を最
終的にシリカ−アルミナに対してＰＨＥＭＡが１重量チ
になるように含浸させた。エタノールを温水浴上で加熱
しながら蒸発除去した後、１１０℃にて２時間キユアリ
ング処理を行った０ ＨＩＶ除去能の評価は上記のヒドロキシアパタイト−シ
リカ−アルミナ系除去剤の実験と同様の方法で行った。
４０）に、０．７９重量係のポリメタクリル酸ヒドロキ
シエチルエステル（ＰＨＥＭＡ）−エタ／−ル溶液を最
終的にシリカ−アルミナに対してＰＨＥＭＡが１重量チ
になるように含浸させた。エタノールを温水浴上で加熱
しながら蒸発除去した後、１１０℃にて２時間キユアリ
ング処理を行った０ ＨＩＶ除去能の評価は上記のヒドロキシアパタイト−シ
リカ−アルミナ系除去剤の実験と同様の方法で行った。
測定結果を第１１表に示す。
第１１表
このようにＰＨＥＭＡをコーティングすることによって
ＨＩＶ除去能が向上することが認められた。
ＨＩＶ除去能が向上することが認められた。
ＰＩ（ＢＭＡのコーティング濃度を上昇することは理論
的には可能であるが、現実には１．５〜２．０％にする
と粒子がブロック化するという望ましくない現象が発現
する。したがってシリカ−アルミナへのＰＨＥＭＡのコ
ーティング濃度（被覆濃度）は１チ程度が適当であると
考えら九る。
的には可能であるが、現実には１．５〜２．０％にする
と粒子がブロック化するという望ましくない現象が発現
する。したがってシリカ−アルミナへのＰＨＥＭＡのコ
ーティング濃度（被覆濃度）は１チ程度が適当であると
考えら九る。
以上のように、本発明によれば１（ＩＶおよび／ま几は
その関連物質を除去でき、しかも正常リンパ球の生育を
阻害しないことが認められ念。したがって、本発明によ
る除去剤を用いて体外循環方式によって増悪期の患者の
体液（増悪期には体液中にＨＩＶが急激に増加すること
が知ら消、ている）中からＨＩＶおよび／″！、たはそ
の関連物質を除去することにより、患者の症状の増悪化
領内をくいとめ、延命させることができるものと期待さ
れ、また、かかる方式は抗ウィルス剤などを用いる薬物
療法の補助手段になるものと考えられる。また本発明の
除去剤を用いて、血液製剤を精製することや臨床検査用
の血液からＨＩＶを濃縮することも可能である。
その関連物質を除去でき、しかも正常リンパ球の生育を
阻害しないことが認められ念。したがって、本発明によ
る除去剤を用いて体外循環方式によって増悪期の患者の
体液（増悪期には体液中にＨＩＶが急激に増加すること
が知ら消、ている）中からＨＩＶおよび／″！、たはそ
の関連物質を除去することにより、患者の症状の増悪化
領内をくいとめ、延命させることができるものと期待さ
れ、また、かかる方式は抗ウィルス剤などを用いる薬物
療法の補助手段になるものと考えられる。また本発明の
除去剤を用いて、血液製剤を精製することや臨床検査用
の血液からＨＩＶを濃縮することも可能である。
本発明によって表面が弱酸性または弱塩基性を示す固体
物質からなる除去剤を提供することができる。該除去剤
を使用して例えば体外循環方式によって体液を処理する
と体液中のヒト免疫不全症候群ウィルスそれ自体および
／甘たは該ウィルスの関連物質を有効に除去することが
できるので、患者の延命が期待でき、本発明の意義は大
きい。
物質からなる除去剤を提供することができる。該除去剤
を使用して例えば体外循環方式によって体液を処理する
と体液中のヒト免疫不全症候群ウィルスそれ自体および
／甘たは該ウィルスの関連物質を有効に除去することが
できるので、患者の延命が期待でき、本発明の意義は大
きい。
特許出願人 床式会社 り ラ し
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、表面が弱酸性または弱塩基性を示す固体物質からな
る体液中のヒト免疫不全症候群ウィルスそれ自体および
／または該ウィルスの関連物質を除去するための除去剤
。 ２、該固体物質がＣＯＯＨ型またはＳＯ＿３Ｈ型陽イオ
ン交換樹脂である請求項１記載の除去剤。 ３、該固体物質がシリカ−アルミナである請求項１記載
の除去剤。 ４、該固体物質がヒドロキシアパタイト−シリカ−アル
ミナ三元系焼結体である請求項１記載の除去剤。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/277,266 US5041079A (en) | 1987-12-04 | 1988-11-29 | Method for removing human immunodeficiency virus and/or its related compounds |
| EP88311476A EP0320184A1 (en) | 1987-12-04 | 1988-12-02 | Agents for removing human immunodeficiency virus and/or its related compounds |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8728453A GB2213056A (en) | 1987-12-04 | 1987-12-04 | Agents for removing immunodeficiency virus and related compounds |
| GB8728453 | 1987-12-04 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0236878A true JPH0236878A (ja) | 1990-02-06 |
| JP2635365B2 JP2635365B2 (ja) | 1997-07-30 |
Family
ID=10628033
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63107019A Expired - Lifetime JP2635365B2 (ja) | 1987-12-04 | 1988-04-27 | ヒト免疫不全症候群ウイルスおよび／またはその関連物質除去剤 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2635365B2 (ja) |
| GB (1) | GB2213056A (ja) |
| ZA (1) | ZA888822B (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5667684A (en) * | 1994-04-28 | 1997-09-16 | Terumo Kabushiki Kaisha | Material for removing HIV and its related substances |
| JP2007101932A (ja) * | 2005-10-05 | 2007-04-19 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 表示装置 |
| JP2009042074A (ja) * | 2007-08-09 | 2009-02-26 | Denka Seiken Co Ltd | 吸着担体及び吸着担体の製造方法 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0728491B1 (en) * | 1995-02-22 | 2000-11-15 | Kawasumi Laboratories, Inc. | Method of producing a blood transfusion device |
| RU2362587C2 (ru) * | 2007-01-09 | 2009-07-27 | Сергей Александрович Лемешев | Средство для лечения вирусных инфекционных заболеваний |
| ES2585046T3 (es) * | 2011-03-30 | 2016-10-03 | Toray Industries, Inc. | Columna de purificación de sangre |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4681870A (en) * | 1985-01-11 | 1987-07-21 | Imre Corporation | Protein A-silica immunoadsorbent and process for its production |
-
1987
- 1987-12-04 GB GB8728453A patent/GB2213056A/en not_active Withdrawn
-
1988
- 1988-04-27 JP JP63107019A patent/JP2635365B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-24 ZA ZA888822A patent/ZA888822B/xx unknown
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5667684A (en) * | 1994-04-28 | 1997-09-16 | Terumo Kabushiki Kaisha | Material for removing HIV and its related substances |
| JP2007101932A (ja) * | 2005-10-05 | 2007-04-19 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 表示装置 |
| JP2009042074A (ja) * | 2007-08-09 | 2009-02-26 | Denka Seiken Co Ltd | 吸着担体及び吸着担体の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2635365B2 (ja) | 1997-07-30 |
| GB2213056A (en) | 1989-08-09 |
| ZA888822B (en) | 1989-08-30 |
| GB8728453D0 (en) | 1988-01-13 |
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