JPH0314008B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はポリプレニル化合物またはその混合物
の製造方法に関する。さらに詳しくは、本発明は
ドリコールの合成原料として好適に使用しうる下
記の一般式 （式中、Ａは水酸基またはアシルオキシ基を表
わし、【式】はトランス型イソ プレン単位を表わし、【式】は シス型イソプレン単位を表わし、ｎは11から21ま
での整数である。） で示されるポリプレニル化合物またはその混合物
の製造方法に関する。 ドリコール類（dolichols）は1960年にJ.F.
Pennockらによつてヒトの腎臓、ブタの腎臓など
からはじめて単離され〔Nature（London），186，
470（1960）参照〕、のちに彼等によつて該ドリコ
ール類は下記の一般式 （式中、【式】はトランス型 イソプレン単位を表わし、
【式】はシス型イソプレン単位 を表わす。） で示される構造をもつポリプレノール同族体の混
合物であつて、上記式中のシス型イソプレン単位
の数ｊは一般に12から18まで分布し、ｊ＝14，15
および16の３種の同族体が主体となつていること
が明らかにされた〔R.W.Keenan et al.，
Biochemical Journal，165，405（1977）参照〕。
また、ドリコール類はブタの肝臓のみならず、哺
乳動物体内に広く分布しており、生体の生命維持
の上で極めて重要な機能を果していることが知ら
れている。例えばJ.B.Harfordらは子牛や豚の脳
白髄質を用いる試験管内テストにより、外因性ド
リコールがマンノースなどの糖成分の脂質への取
り込みを促進し、その結果、生体の生命維持の上
で重要な糖蛋白質の形成を増大させる作用をもつ
ことを明らかにしている〔Biochemical and
Biophysical Research Communication，76，
1036（1977）参照〕。ドリコールによるかかる脂質
への糖成分の取り込み促進効果は成長期の生体に
おけるよりも既に成熟している動物において顕著
であることから、老化防止の点でのドリコールの
働きが注目されている。また、R.W.Keenanらは
幼年期などの急速に成長を続けている生体にとつ
ては外からドリコールを摂取し、自己の体内で生
合成して得られるドリコールを補うことが重要で
あると述べている〔Archives of Biochemistry
and Biophysics，179，634（1977）参照〕。さら
に、赤松らはラツトの再生肝中のドリコールリン
酸エステルを定量し、その量が通常の肝中よりも
著るしく減少しており、肝組織での糖蛋白の合成
機能が大巾に低下していること、および外因性ド
リコールリン酸エステルを加えると該機能が改善
されることを見い出した〔第54回日本生化学会大
会（1981年）にて発表〕。このようにドリコール
類は生体にとつて極めて重要な物質であり、医薬
品またはその合成中間体、化粧品などにおける用
途開発が強く望まれている。 しかしながら、従来ドリコール類は入手が困難
であるため、充分に研究を行なうことができない
というのが実情である。たとえば豚の肝臓10Kgか
ら複雑な分離操作を経てやつと約0.6ｇのドリコ
ールが得られるに過ぎない〔J.Burgos etal.，
Biochemical Journal，88，470（1963）参照〕。 一方、ドリコール類を全合成することは、それ
らの複雑で特異な分子構造から明らかなように、
現在の有機合成化学の技術では至難のことであ
る。そこで、合成中間体を天然物に依存し、これ
に簡単な合成化学的処理を加えるのみでドリコー
ル類を得ることができるならば有利であるが、従
来そのような好都合な物質は見出されていない。 従来、種々の植物からポリプレノール化合物を
採取しうることが知られており、下記のポリプレ
ノール類が採取されている。 (1) ソラネソール (2) フイカプレノール類 (3) ベツラプレノール類 ベツラプレノール類はドリコール類と同様にω
−末端イソプレン単位に２個のトランス型イソプ
レン単位が連なつた構造を有するが、これまでに
知られているベツラプレノール類は上記のように
シス型イソプレン単位の数が最大でも６個しかな
く、このものからシス型イソプレン単位の数が14
個、15個および16個のものを主体とするドリコー
ル類を合成するためには、８個以上ものイソプレ
ン単位をシス型に規制して延長することが必要で
あるが、それは現在の有機合成技術ではほとんど
不可能である。 本発明者らは、哺乳類ドリコール類の合成原料
として有用なポリプレニル化合物を植物源に求め
て各種の植物からの抽出物を分析した結果、今
回、驚くべきことに、ヒノキ科（Family
Cupressaceae）、スギ科（Family
Taxodiaceae）またはイチイ科（Family
Taxaceae）に属する植物の葉から一般式（）
においてＡが水酸基またはアセトキシ基でありｎ
が14〜16であるポリプレニル化合物を比較的高濃
度に含有するポリプレニル画分が得られること、
該ポリプレニル画分は所望によりその構成成分で
ある個々のポリプレニル同族体に比較的容易に分
離しうること、したがつて該ポリプレニル画分お
よびそれから分離される各ポリプレニル同族体は
いずれも哺乳類ドリコール類の合成中間体として
非常に適していることを見出した。 しかして、本発明によれば、ヒノキ科、スギ科
またはイチイ科に属する植物の葉を有機溶媒で抽
出し、得られる抽出物からポリプレニル化合物ま
たはその混合物を分離し、必要に応じその分離前
または分離後に該ポリプレニル化合物またはその
混合物を加水分解、エステル化もしくはエステル
交換反応またはそれらの２種以上の反応に付する
ことを特徴とする一般式（）で示されるポリプ
レニル化合物またはその混合物の製造方法が提案
される。ヒノキ科、スギ科またはイチイ科に属す
る植物の葉を有機溶媒で抽出し、得られる抽出物
を、必要に応じ加水分解したのち、クロマトグラ
フイー、分別溶解法、分別冷凍沈殿法、分子蒸留
法またはこれらの方法の２種もしくはそれ以上の
組合わせからなる分離法に付して、メルク社製薄
層クロマト用プレート〔シリカゲル60F₂₅₄被覆
（pre−coated）；層の厚さ0.25mm〕を用いてｎ−
ヘキサンと酢酸エチルとの容量比で９：１の混合
溶媒を展開溶媒とする薄層クロマトグラフイー
（10cm展開）において標準物質としてのソラネシ
ルアセテートのRf値が0.40〜0.45となる条件下に
0.18〜0.25および／または0.50〜0.55の範囲内の
Rf値を示す画分を単離回収することにより、Ａ
が水酸基である一般式（）の化合物および／ま
たはＡがアセトキシ基である一般式（）の化合
物の混合物から本質的になり、そしてｎが14であ
る一般式（）の化合物、ｎが15である一般式
（）の化合物およびｎが16である一般式（）
の化合物の少なくとも３種を必須成分としてそれ
ぞれ実質量含有するポリプレニル組成物を得るこ
とができる。 本発明において原料として用いるヒノキ科植
物、スギ科植物およびイチイ科植物（以下、これ
らを単に原料植物と称することがある。）はいず
れも種子植物門裸子植物亜門球果植物綱球果植物
目に属する植物である。ヒノキ科植物は地球上に
広く分布し、19の属に分類される。このなかでと
くにヒノキ（Chamaecyparis obtusa）、イブキ
（Juniperus chinensis）、およびネズミサシ
（Juniperus rigida）が好適に使用される。また、
スギ科植物は中国を中心として北半球温帯地方に
広く分布し、９属よりなるが、とくにスギ
（Cryptomeria japonica）およびメタセコイヤ
（Metasequoia glyptostroboides）が好適に使用
される。さらに、イチイ科植物は北半球に広く分
布し、５属よりなるが、とくにイチイ（Taxus
cuspidata）およびカヤ（Torreya nucifera）が
好適に使用される。 所望により上記各種の原料植物の葉を２種また
はそれ以上混合して抽出してもよい。原料植物の
葉は乾燥後に本発明に従う抽出処理に供してもよ
く、また未乾燥のまま用いることもできる。一般
には乾燥した葉の方が好ましく、その際の乾燥の
程度は乾燥葉の重量基準で含水率が一般に約30％
以下、好ましくは10％以下とすることが有利であ
る。さらに、葉は破砕した後に抽出することが好
ましく、それにより、抽出溶媒との接触面積が増
大し、抽出効率を上げることができる。 前記一般式（）で示されるポリプレニル同族
体は原料植物の葉の中では一般に遊離のアルコー
ルの形および／または酢酸エステルの形でかなり
高濃度で含まれており、該葉から該ポリプレニル
同族体を効果的に抽出するためには、該ポリプレ
ニル同族体をよく溶解する油溶性の有機溶媒が好
適に使用される。かかる油溶性の有機溶媒として
は、一般に誘電定数εが32.7以下、好ましくは
25.0以下、さらに好ましくは20.7以下のものが好
適であり、具体的には下記に例示する溶媒がそれ
ぞれ単独でまたは２種もしくはそれ以上の混合溶
媒として使用できる。 (a) 炭化水素類：例えば、石油エーテル、ペンタ
ン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、トルエ
ン、キシレンなど。 (b) ハロゲン化炭化水素類：例えば、クロロホル
ム、塩化メチレン、四塩化炭素、四塩化エタ
ン、パークロルエチレン、トリクロルエチレン
など。 (c) エステル類：例えば、酢酸メチル、酢酸エチ
ル、プロピオン酸エチルなど。 (d) エーテル類：例えば、ジエチルエーテル、ジ
イソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、
ジオキサンなど。 (e) ケトン類：例えば、アセトン、メチルエチル
ケトン、ジエチルケトン、ジイソプロピルケト
ンなど。 (f) アルコール類：例えば、メチルアルコール、
エチルアルコール、プロピルアルコール、ブチ
ルアルコールなど。 使用する溶媒の選択にあたつては、目的とする
前記一般式（）のポリプレニル化合物を選択的
に高効率で抽出し、それ以外の物質はできるだけ
抽出しないものが望ましく、かかる観点からすれ
ば、上記溶媒中、炭化水素類、ハロゲン化炭化水
素類、エステル類、ジエチルエーテル、ジイソプ
ロピルエーテルの如き極性の低いエーテル類およ
びケトン類が特に好適である。 抽出溶媒の使用量は臨界的なものではなく、用
いる溶媒の種類、抽出すべき葉の種類や状態等に
応じて広範に変えることができるが、一般には原
料植物の葉１重量部（乾燥重量基準）当り約１〜
約100重量部、好ましくは５〜50重量部、さらに
好ましくは10〜30重量部の範囲内で用いることが
有利である。 抽出は上記の溶媒中に原料植物の葉を浸漬し、
必要に応じて連続的または間欠的に撹拌すること
により行なうことができる。抽出時の温度も臨界
的なものではなく、用いた溶媒の種類や量等の条
件に応じて広範に変えることができるが、一般に
は約０℃から溶媒の還流温度までの温度を用いる
ことができ、通常は室温で充分である。かかる条
件下に抽出は普通１〜10日間行なうのが有利であ
る。 抽出処理後の浸漬液は葉その他の固形分を除去
したのち必要に応じて溶媒を除去して濃縮液とす
る。かくして得られる抽出物をついでクロマトグ
ラフイー、分別溶解法、分別冷凍沈殿法、分子蒸
留法またはこれらの方法の２種もしくはそれ以上
の組合わせからなる分離工程に付して、目的とす
るポリプレニル画分を回収することができる。 上記分離工程におけるポリプレニル化合物が含
有されている画分の確認は、メルク社製薄層クロ
マト用プレート（シリカゲル60F₂₅₄ pre−
coated；層厚0.25mm）を用いかつｎ−ヘキサンと
酢酸エチルとの容量比で９：１の混合溶媒を展開
溶媒とする薄層クロマトグラフイー（10cm展開）
において標準物質としてのソラネシルアセテート
のRf値が0.40〜0.45となる条件下に、0.18〜0.25
〔前記一般式（）においてＡが水酸基を表わす
場合〕および／または0.50〜0.55〔前記一般式
（）においてＡがアセトキシ基を表わす場合〕
の範囲内のRf値のところにスポツトが存在する
か否かにより行なうことができる。しかして、以
下の説明において薄層クロマトグラフイーのRf
値を言及する場合には、特にことわらない限り、
上記条件下に測定した値を意味することを了解す
べきである。 上記抽出物の分離工程において使用しうるクロ
マトグラフイー、分別溶解法、分別冷凍沈殿法お
よび分子蒸留法の各方法の操作はそれ自体公知の
ものであり、本発明においても公知の方法に準じ
て行なうことができるので、各方法の詳細につい
ては文献の引用を以つて説明に代え、ここには特
に注意すべき点のみを記載する。 (A) クロマトグラフイー〔例えば、H.Heftman，
“Chromatography”，Reinhold Publish Co.，
New York（1961）参照〕 抽出物が少量の場合には薄層クロマトグラフイ
ーおよび液体クロマトグラフイーが適当である
が、大量の抽出物の処理にはカラムクロマトグラ
フイーが好適である。使用しうるクロマトグラフ
イー用担体としては、シリカゲル、アルミナ、フ
ロリジル、セライト、活性炭、セルロースなどが
挙げられ、中でもシリカゲルが好適である。 シリカゲルカラムを使用して分離操作を行なう
場合の展開溶媒としては、例えば、ヘキサン／酢
酸エチル（容量比95：５〜80：20）、ヘキサン／
ジイソプロピルエーテル（容量比95：５〜80：
20）、石油エーテル／酢酸メチル（容量比95：５
〜80：20）、石油エーテル／イソプロピルアルコ
ール（容量比99：１〜90：10）、ベンゼン／ジエ
チルエーテル（容量比95：５〜80：20）、ベンゼ
ン／酢酸エチル（容量比98：２〜80：20）などの
混合溶媒系あるいはクロロホルム、メチレンクロ
リドなどが挙げられる。 (B) 分別溶解法〔例えば、L.C.Craig，
“Technique of Organic Chemistry”，Vol，
13，Interscience，（1951）参照〕 前記一般式（）のポリプレニル化合物はペン
タン、ヘキサンのような非極性溶媒に易溶であ
り、一方、メタノールや水などの極性溶媒には難
溶であるので、この溶解性の差を利用して分別溶
解法により精製できる。例えば抽出液濃縮物のよ
うな粗精製物を上記非極性溶媒に溶解し、ついで
該非極性溶媒と非混和性の極性溶媒で洗浄するこ
とによつて、極性溶媒に易溶な不純物を大幅に除
去することができる。本方法では好適に使用され
る非極性溶媒としては、例えば、石油エーテル、
ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、トル
エンなどの炭化水素系溶媒およびメチレンクロリ
ド、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素系溶
媒が好適である。また、かかる非極性溶媒と非混
和性の極性溶媒としては例えば水あるいはメタノ
ールが好適である。 (C) 分別冷凍沈殿法〔例えば、E.W.Berg，
“Physical and Chemical Methods of
Separation”Chapter 14，15，McGraw−
Hill，New York（1963）参照〕 前記一般式（）のポリプレニル化合物は約−
10℃以下で固化する。従つて、抽出物を−10℃以
下、好ましくは約−15〜約−30℃に冷却下に放置
し、目的物を固化させたのち固−液分離すること
によつて、かかる温度で固化しない不純物から精
製することができる。しかしながら、該ポリプレ
ニル化合物はあまり優れた結晶性を有さず、ワツ
クス状固体となるため、本方法により完全に精製
することは難しいので、他の精製方法と組合せて
実施することが好ましい。なお、逆にポリプレノ
ール中に存在する結晶性の不純物を優先的に析出
させて除去することも可能である。 (D) 分子蒸留法〔例えば、G.Burrows，
“Molecular Distillation”，Clarendon Press，
Oxford（1960）参照〕 前記一般式（）の化合物は分子量が大きいた
め、分子蒸留法を用いることによつて低分子量の
不純物を除去することができる。例えば10^-3〜
10^-5mmＨｇの真空度において100〜250℃の加熱条
件下に分子蒸留して、低分子留分と高分子留分と
に分割される。このとき、高分子留分に目的物質
は保持され、低分子量不純物を大幅に除去するこ
とができる。 上記の各分離法によつて充分に純度の高いポリ
プレニル画分が得られない場合には、これら分離
法の２種もしくはそれ以上の組合わせを用いるこ
ともできる。例えば、クロマトグラフイーと分別
溶解法；クロマトグラフイーと分別冷凍沈殿法と
分別溶解法；クロマトグラフイーと分別冷凍沈殿
法と分別溶解法と分子蒸留法；クロマトグラフイ
ーと分子蒸留法と分別溶解法；クロマトグラフイ
ーと分子蒸留法；分子蒸留法と分別溶解法；分子
蒸留法と分別溶解法と分別冷凍沈殿法などの組合
わせを用いることができる。 かくして、薄層クロマトグラフイーにおける
Rf値が0.18〜0.25および／または0.50〜0.55の画
分が単離回収される。Rf値が0.18〜0.25の画分
は、前記一般式（）におけるＡが水酸基を表わ
す場合の同族体の混合物から実質的に成り、他
方、Rf値が0.50〜0.55の画分は前記一般式（）
におけるＡがアセトキシ基を表わす場合の同族体
の混合物から実質的に成る。 かくして得られる画分をさらに例えば分配型高
速液体クロマトグラフイーに付することによつ
て、個々の同族体成分を単離することもできる。 なお、上記分離工程において、抽出物を上記の
分離操作に供する前に、該抽出物を加水分解し
て、そこに含まれうる前記一般式（）における
Ａがアセトキシ基を表わす場合の同族体を対応す
るＡが水酸基を表わす場合の同族体に予め転化す
ることが可能である。かくすることにより次いで
行なう分離操作が簡単になることがある。しか
し、かかる加水分解は勿論分離操作が終つた後の
Rf値が0.50〜0.55の成分を含む画分に対して行な
うこともできる。この加水分解は公知の脂肪酸エ
ステル類を加水分解するために知られている通常
の任意の方法を用いて行うことが可能であり、た
とえば含水メタノールまたはエタノール中に水酸
化ナトリウムまたは水酸化カリウムを溶解させた
溶液（アルカリ金属水酸化物濃度は好ましくは約
0.1〜30重量％とすることができる）100重量部に
対して上記の抽出物または画分を約５〜50重量部
の割合で加えて約25〜90℃で約0.5〜５時間反応
させればよい。 以上述べた方法によつて単離回収されるポリプ
レニル画分においてRf値が0.18〜0.25の画分は前
記一般式（）におけるＡが水酸基を表わす場合
の複数のポリプレノール同族体の混合物から実質
的になり、またRf値が0.50〜0.55の画分は前記一
般式（）におけるＡがアセトキシ基を表わす場
合の複数のポリプレニルアセテート同族体の混合
物から実質的になるものである。抽出物中におけ
る前者と後者の存在比率（ポリプレノール同族体
混合物：ポリプレニルアセテート同族体混合物）
は大体20：１乃至１：1000（重量比）の範囲内に
あり、また、各画分中のポリプレノールまたはポ
リプレニルアセテート同族体の分布状態（分布パ
ターン）は原料植物の種類によつて若干異なる。
同一種の原料植物から得られるものの分布状態は
大体同じであり、原料として用いた葉の若さや採
取時期および地域などの要因に関係なくほぼ一定
である。 本発明方法により得られるポリプレニル組成物
を哺乳動物のドリコール類に誘導するに際して該
組成物をそのまま用いてもよく、あるいは必要に
応じて該組成物を構成する各ポリプレニル化合物
を単離したのち反応させることもできる。さら
に、該組成物または単離されたポリプレニル化合
物を、それが遊離のアルコールであるかまたはア
セテートの形であるかに応じて、加水分解、エス
テル化もしくはエステル交換反応またはそれらの
２種以上の反応に付することにより、ポリプレノ
ールをポリプレニルエステルに、またはポリプレ
ニルアセテートを一般式（）で示される他のポ
リプレニルエステルもしくはポリプレノールに変
換してもよい。 本発明方法により製造される一般式（）で示
されるポリプレニルエステルの例として、一般式
（）中のＡをRCOO−で表わすとき、該Ｒが水
素原子、炭素数１〜18のアルキル基（例えば、メ
チル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ
−ブチル、sec−ブチル、イソブチル、tert−ブ
チル、ｎ−ペンチル、イソアミル、ｎ−ヘキシ
ル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル、ｎ−ドデシル、
ｎ−ウンデシル、ステアリルなど）、炭素数２〜
18のアルケニル基（例えば、３−ブテニル、３−
ペンテニル、４−ペンテニル、ゲラニル、ゲラニ
ルメチル、フアルネシル、フアルネシルメチルな
ど）、炭素数５〜７のシクロアルキル基（例えば、
シクロペンチル、シクロヘキシル、メチルシクロ
ヘキシル、シクロヘプチルなど）、炭素数６〜10
のアリール基（例えば、フエニル、トリル、キシ
リル、ナフチルなど）、炭素数７〜11のアラルキ
ル基（例えば、ベンジル、フエネチル、メチルベ
ンジル、ジメチルベンジル、α−またはβ−ナフ
チルメチルなど）または１〜３個のフツ素原子も
しくは塩素原子で置換されたメチル基（例えばモ
ノフルオロメチル、トリフルオロメチル、モノク
ロルメチル、ジクロルメチルなど）であるエステ
ル類を挙げることができる。これらのポリプレニ
ルエステルまたはその混合物を得るための一般式
（）で示されるポリプレノールまたはその混合
物のエステル化またはエステル交換反応はエステ
ル類を得るための自体公知のエステル化またはエ
ステル交換反応方法および条件を用いて行なうこ
とができる。例えば、エステル化は一般式（）
で示されるポリプレノールまたはその混合物をエ
ステル化触媒および溶媒の存在または不存在下に
ギ酸、酢酸、モノフルオロ酢酸、モノクロル酢
酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、酪酸、カ
プロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン
酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、
リノール酸、リノレン酸、フアルネシル酸、フア
ルネシル酢酸、安息香酸、３，５−ジメチル安息
香酸、４−エチル安息香酸などの所望のカルボン
酸またはそれらの酸ハライドもしくは酸無水物と
混合し、必要に応じて加熱撹拌することにより容
易に行われる。好ましくは、上記ポリプレノール
またはその混合物をヘキサン、ベンゼン、メチレ
ンクロリド、クロロホルム、ジエチルエーテルな
どの溶媒に溶解し、これに該ポリプレノールに対
して１〜５モル当量の上記酸ハライドを加え該ポ
リプレノールに対して１〜５モル当量のピリジン
の存在下に室温から溶媒の還流温度までの適宜の
温度で１時間〜24時間撹拌することにより行われ
る。 また、エステル交換反応は、一般式（）で示
されるポリプレノールまたはその混合物と所望の
カルボン酸（例えば上記各種のカルボン酸）の低
級アルキルエステル（好ましくはメチルエステ
ル、エチルエステルなど）とをエステル交換触媒
の任意の存在下に作用させることにより行われ
る。好ましくは、上記ポリプレノールまたはその
混合物及び所望のカルボン酸エステルとをベンゼ
ン、トルエン、キシレンなどの溶媒に溶解し、該
ポリプレノールに対して0.01〜0.1モル当量の水
素化ナトリウムを加えて２時間〜５日間溶媒の還
流条件下に反応させることによつて行われる。 本発明方法により得られる一般式（）で示さ
れるポリプレニル化合物またはその混合物は、例
えば下記の合成経路により容易に哺乳動物のドリ
コール類に導かれる。 上記において、Ｘはハロゲン原子好ましくはCl
またはBrを表わし、Ｚは水酸基の保護基たとえ
ばテトラヒドロピラニル基、メトキシメチル基、
ベンジル基などを表わし、OCORはアシルオキシ
基を表わし、Ｑは下記の基を表わす。 〔式中、ｎは一般式（）中のそれと同じ意味
を有する。〕 本発明方法により得られるポリプレニル化合物
およびそれらの混合物は、上記のほかに、たとえ
ば化粧品基材、軟膏基材あるいはそれらの製造原
料などとしても有用である。 以下、本発明を実施例により説明するが、本発
明はこれらの実施例によつて制限を受けるもので
はない。なお、実施例および参照例中、IR分析
は液膜で測定し、NMRはTMSを内部標準とし
てCDCl₃中で測定した。FD−MASS分析（電界
電離法質量分析）の値は ¹H， ¹²C， ¹⁶O，
⁷⁹Brとして補正した値である。 実施例 １ ６月下旬に倉敷市内で採取したスギの葉10Kg
（未乾燥重量）を約50℃で24時間熱風乾燥したの
ち室温約20℃で１週間クロロホルム80中に浸漬
して抽出した。この抽出液からクロロホルムを留
去して得た濃縮物中に石油エーテル５を加えて
不溶性成分を別し、液を濃縮後クロロホルム
を展開溶媒として用いてシリカゲルカラムにより
分離し、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／１（容
量比）の混合溶媒を用いたシリカゲル薄層クロマ
トグラフイー〔メルク社製薄層クロマト用プレー
ト（シリカゲル60F₂₅₄被覆；層の厚さ0.25mm）を
使用し、10cm展開〕においてRf値0.52および0.19
を示す画分（粗ポリプレニル画分）として約25ｇ
の油状物を得た。なお、上記薄層クロマトグラフ
イーにおいてソラネシルアセテートはRf値0.41を
示した。この油状物にアセトン約300mlを加えて
アセトン可溶成分を溶解し、得られた混合物を
過し、液を濃縮し、得られた油状物をメタノー
ル300ml、水30mlおよび水酸化ナトリウム20ｇと
共に２時間65℃に加熱したのちメタノールを留去
し、残留物にジエチルエーテル400mlを加えて抽
出し、エーテル層を約100mlの水で５回洗浄した
あと無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去し
て19.8ｇの油状物を得た。ついで、この油状物を
約１Kgのシリカゲルおよびｎ−ヘキサン／ジイソ
プロピルエーテル＝90／10（容量比）の混合液を
用いてカラムクロマトグラフイーにより分離し、
上記の薄層クロマトグラフイーにおいてRf値0.19
を示す画分として17.2ｇの油状物を得た。この油
状物は90％以上の純度を有するポリプレノールで
あり、このものについて測定した分子量分布は下
記のとおりであつた。この値は上記油状物につい
てメルク社製セミ分取用高速液体クロマトカラム
Li Chrosorb RP18−10（C₁₈タイプ）を用いアセ
トン／メタノール＝90／10の混合溶媒を溶離液と
し、示差屈折計を検出器として用いた高速液体ク
ロマトグラフイーにより得られたクロマトグラム
の面積比率から算出したものである。 ｎの値 面積比率（％） 11 0.6 12 1.4 13 6.6 14 21.5 15 21.9 16 5.6 17 3.1 18 9.4 19 16.5 20 10.2 21 2.6 前記の高速液体クロマトグラフイーを用いて上
記の油状物から各成分を分取し、質量分析、赤外
線吸収スペクトル、 ¹H−NMRスペクトルおよ
び ¹³C−NMRスペクトルによりそれらの成分が
一般式（）においてＡが水酸基であるポリプレ
ノールであることを確認した。各成分について
FD−MASSの結果ならびに ¹H−NMRのδ値を
表１に、 ¹³C−NMRのδ値を表２にまとめて示
した。 表１の ¹H−NMRデータ中、(b)は幅広シグナ
ル、(d)は二重線シグナル、（ｔ）は三重線シグナ
ルを意味する。 【表】 【表】 【表】 【表】 実施例 ２〜７ 実施例１におけるスギの葉にかえて岡山県内で
採取したメタセコイヤ、ヒノキ、イブキ、ネズミ
サシ、イチイまたはカヤの葉を原料とし、実施例
１と同様の操作および条件により一般式（）に
おいてＡが水酸基であるポリプレノールを得た。
該ポリプレノールの構造は実施例１と同様にして
高速液体クロマトグラフイーにより分取した各成
分の質量分析、IR分析およびNMRの分析の結果
が実施例１において得られたそれらと実質的に一
致したことにより確認した。該ポリプレノールの
収量、実施例１と同様にして測定した分子量分布
（鎖長分布）などを表３にまとめて示した。 【表】 実施例 ８ 10月下旬に倉敷市内で採集したヒノキの葉５Kg
（未乾燥重量）を約40℃で12時間熱風乾燥し、ミ
キサーで小さく粉砕したのち室温約15℃で石油エ
ーテル／アセトン＝４／１（容量比）の混合溶媒
40を用いて１週間抽出した。抽出液を水洗後、
無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち溶媒を留去し
て約100ｇの残留物を得た。このものにｎ−ヘキ
サン１を加えてｎ−ヘキサン可溶成分を溶解
し、過し、液を濃縮後にシリカゲルカラムお
よびｎ−ヘキサン／ジエチルエーテル＝95／５
（容量比）の混合溶媒を用いて、実施例１で用い
たと同じ薄層クロマトグラフイーにおいてRf値
0.50を示す画分を分取し約9.8ｇの油状物を得た。
この油状物にアセトン約100mlを加えてアセトン
可溶性成分を溶解し、過して得た液を約400
ｇのシリカゲルを用いｎ−ヘキサン／ジエチルエ
ーテル＝95／５（容量比）の混合溶媒で分離して
5.5ｇの油状物を得た。この油状物は90％以上の
純度を有するポリプレニルアセテートであり、こ
のものについてウオーターズ社製高速液体クロマ
トカラム（μ Bondapak／C₁₈を用いてアセト
ン／メタノール＝70／30（容量比）の混合溶媒を
溶離液とし、示差屈折計を検出器として用いた高
速液体クロマトグラフイーにより得られたクロマ
トグラムの面積比率から求めた分子量分布は下記
のとおりであり、表３に記載した実施例３におけ
るポリプレノールの場合のそれと±0.8（％）の範
囲内でよい一致を示した。 一般式（）中のｎの値 面積比率（％） 11 0.3 12 3.0 13 6.8 14 12.9 15 10.5 16 7.6 17 10.4 18 21.3 19 18.8 20 7.2 21 1.2 実施例１におけると同じ高速液体クロマトグラ
フイーにより上記の油状物（ポリプレニルアセテ
ート含量90％以上）から各成分を分取し、質量分
析、赤外線吸収スペクトル、 ¹H−NMRスペク
トルおよび ¹³C−NMRスペクトルによりそれら
の成分が一般式（）においてＡがアセトキシ基
であるポリプレニルアセテートであることを確認
した。各成分についてのFD−MASS分析の結果
は下記のとおりであつた。一般式()中のｎの値 FD−MASS分析m/e値 11 1012 12 1080 13 1148 14 1216 15 1284 16 1352 17 1420 18 1488 19 1556 20 1624 21 1692 さらに、各成分を実施例１で行なつた加水分解
反応に準じで同様に加水分解することにより得た
ポリプレノール類は、これらとｎの値が等しい実
施例１で得られた各ポリプレノール類と実質的に
同じ ¹H−NMRスペクトル、 ¹³C−NMRスペク
トル及び赤外線吸収スペクトルを与えた。 実施例 ９〜14 実施例８におけるヒノキの葉にかえて岡山県内
で採取したイブキ、ネズミサン、スギ、メタセコ
イヤ、イチイまたはカヤの葉を原料とし、実施例
８と同様の操作および条件により一般式（）に
おいてＡがアセトキシ基であるポリプレニルアセ
テートを得た。該ポリプレニルアセテートの構造
確認は実施例８の場合と同様にして行なつた。該
ポリプレニルアセテートの収量および純度を表４
に示した。なお、これらのポリプレニルアセテー
トにおける分子量分布は同じ植物体から得られた
実施例２〜７のポリプレノールにおけるそれらと
大きくは変らなかつた。 【表】 実施例 15〜42 原料植物の葉を約40℃で12時間熱風乾燥したの
ち各100ｇずつに分けて表５に示した溶媒１中
に浸漬し、７日間室温で抽出した。得られた抽出
液から抽出溶媒を留去し、残留物をヘキサン2200
mlに溶解し、その溶液をメタノール／水＝９／１
（容量比）の混合溶液約100mlで３回洗浄したのち
無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去して
油状物を得た。この油状物をメタノール20ml、水
酸化カリウム0.5ｇとともに２時間65℃に加熱し
たのちメタノールを留去し、残留物にジエチルエ
ーテル50mlを加えて抽出し、エーテル層を約20ml
の飽和食塩水で３回洗浄したのち無水硫酸マグネ
シウムで乾燥し、溶媒を留去して油状物を得た。
この油状物を100ｇのシリカゲルを用いｎ−ヘキ
サン／酢酸エチル＝９／１（容量比）の混合液で
分離し、実施例１におけると同様の薄層クロマト
グラフイーによりRf値0.19を示す画分（ポリプレ
ノール混合物）を得た。この画分の重量をポリプ
レノール収量として表５にまとめて示した。な
お、得られたポリプレノール混合物の組成は、用
いた溶媒の種類に関係なく、実施例１〜７におい
て同じ原料植物から得られたポリプレノール混合
物のそれと実質的に同一であつた。 【表】 【表】 の溶媒の容量比を表わす。
実施例 43 実施例１と同様にしてスギの葉から得られたｎ
＝15、Ａ＝OHである一般式（）のポリプレノ
ール1.24ｇおよびピリジン1.0ｇを乾燥ジエチル
エーテルに溶解した溶液中に室温で無水酢酸1.2
ｇを滴下し、滴下完了後、一夜室温で撹拌した。
得られた反応混合物を飽和食塩水で洗浄し、つい
で無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、ジエチルエ
ーテルを留去し、淡黄色粘性液体を得た。このも
のをシリカゲルカラムクロマトグラフイー（ヘキ
サン／酢酸エチルを展開液として使用）により精
製し1.04ｇの微黄色液体を得た。このものについ
てIR分析したところ約3300cm^-1の原料ポリプレ
ノールのOH基に起因する吸収が消失し、−
OCOCH₃に起因する1745cm^-1および1255cm^-1の吸
収が現われた。また、NMR分析を行なつたとこ
ろ原料ポリプレノールの−ＣＨ ₂OHに帰属され
るシグナル（doublet，δ＝4.08）が消失し、−Ｃ
Ｈ₂OCOCH₃に帰属される新らたなシグナル
（doublet，δ＝4.55）が観測された。 −CH₂OCOCＨ ₃に帰属されるべきシグナルは
【式】に帰属されるシグナル（δ＝ 2.04）と重なつて観測された。また、FD−
MASS分析によりｍ／ｅ＝1284を得た。以上の
ことからこの液体がｎ＝15、Ａ＝OCOCH₃であ
る一般式（）のポリプレニルアセテートである
ことが確認された。 また、実施例３と同様にしてヒノキから得られ
たｎ＝18、Ａ＝OHである一般式（）のポリプ
レノール1.45ｇを用いて上記と同様の操作を行な
つたところ最終生成物として1.12ｇの微黄色液体
が得られ、このものはｎ＝18、Ａ＝OCOCH₃で
ある一般式（）のポリプレニルアセテートであ
ることが確認された。このものはFD−MASS分
析によりｍ／ｅ＝1488を与えた。 ｎの値が上記以外である一般式（）のポリプ
レニルアセテートおよびｎが11〜21の間で任意に
分布するポリプレニルアセテート混合物も同様の
操作により合成できた。 実施例 44 実施例３と同様にしてヒノキから得られたｎ＝
15、Ａ＝OHである一般式（）のポリプレノー
ル1.24ｇ、オレイン酸メチル0.5ｇおよび水素化
ナトリウム0.01ｇをトルエン50ml中に溶解し110
℃で48時間窒素ガス雰囲気下で加熱した。反応溶
液を室温まで冷却したのち飽和食塩水で洗浄し、
無水硫酸マグネシウム上で乾燥したのち溶剤を留
去して黄色液状物を得た。このものをシリカゲル
カラムクロマトグラフイー（ヘキサン／酢酸エチ
ルを展開液として使用）により精製して0.45ｇの
無色粘性液体を得た。この液体はIR分析したと
ころ原料ポリプレノールのOH基に起因する吸収
約3300cm^-1が消失していた。また、FD一MASS
分析によりｍ／ｅ＝1506を与えた。以上のことか
らこのものがｎ＝15、Ａ＝OCOC₁₇H₃₃である一
般式（）のポリプレニルオレエートであること
が確認された。ｎが15以外のポリプレニルオレエ
ートおよびｎが11〜21に任意に分布するポリプレ
ニルオレエート混合物も同様の操作により合成で
きた。 実施例 45 実施例５と同様にしてネズミサシから得られた
ｎ＝14、Ａ＝OHである一般式（）のポリプレ
ノール1.17ｇとピリジン10mlとの混合物中に室温
でベンゾイルクロリド0.28ｇを加え、一夜室温で
撹拌した。ついで反応混合物を約150mlの水中に
注ぎ、ジエチルエーテルで抽出し、得られたエー
テル層を飽和食塩水、希塩酸水、飽和炭酸水素ナ
トリウム水、そして再び飽和食塩水で洗浄したの
ち、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、ジエチル
エーテルを留去して黄色液体を得た。これをシリ
カゲルカラムクロマトグラフイー（ヘキサン／酢
酸エチルを展開液として使用）により精製し0.87
ｇの微黄色液体を得た。このものについてIR分
析したところ原料ポリプレノールのOH基に起因
する吸収が消失し、1715cm^-1及び1270cm^-1にエス
テル結合に起因する吸収が現われた。またFD−
MASS分析したところｍ／ｅ＝1278を与えた。
以上のことからこの液状物がｎ＝14、Ａ＝
OCOC₆H₅である一般式（）のポリプレニルベ
ンゾエートであることが確認された。ｎが14以外
のポリプレニルベンゾエート及びｎが11〜20に任
意に分布するポリプレニルベンゾエート混合物も
同様の操作により合成できた。 参考例 アルゴン置換した３つ口フラスコに、マグネシ
ウム細片0.316ｇ（13ｍmol）と無水テトラヒド
ロフラン0.5mlおよび１，２−ジブロモエタン
0.08mlを入れ、これをドライヤーで激しく泡立つ
まで加熱した。次に２−〔４−ブロモ−３−メチ
ルブトキシ〕−テトラヒドロ−2H−ピラン2.51ｇ
（10ｍmol）の無水テトラヒドロフラン（3.0ml）
溶液を、この活性化されたマグネシウムに溶媒が
丁度沸騰するような速度で滴下した。滴下終了後
この混合物を70℃にて15分間撹拌した。これに無
水テトラヒドロフラン60mlを加えてグリニヤール
溶液とした。 別にアルゴン置換した３つ口フラスコに一般式
（）においてｎ＝15、Ａ＝−OCOCH₃であるポ
リプレニルアセテート6.42ｇ（５ｍmol）の無水
テトラヒドロフラン（15ml）溶液とLi₂CuCl₄の無
水テトラヒドロフラン溶液（0.1モル溶液、2.0
ml）を入れた。これに先に調製したグリニヤール
溶液を０℃で１時間かけて滴下し、さらに０℃で
２時間撹拌を続けた。そののち、この反応混合物
に飽和塩化アンモニウム水を加えて加水分解し、
エーテル抽出した。エーテル層を飽和食塩水で洗
浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥したのち回
転蒸発器を用いて溶媒留去して7.82ｇの淡黄色液
状物を得た。このものはシリカゲル薄層クロマト
グラフイー（ヘキサン／酢酸エチル＝97／３を展
開液として使用）によりRf＝0.35に主スポツトを
有していた。また、この淡黄色液状物をFD−
MASS分析したところ原料ポリプレニルアセテ
ートの存在を示すｍ／ｅ＝1284は全く検出され
ず、一般式（）においてｎ＝15、Ｚ＝テトラヒ
ドロ−2H−ピラニル基である化合物を示すｍ／
ｅ＝1396が主ピークとして検出された。 ついで、この淡黄色液状物をヘキサン40mlに溶
かし、これにｐ−トルエンスルホン酸ピリジン
0.13ｇ（0.5ｍmol）とエタノール20mlを加えた。
この溶液を55℃で３時間加熱撹拌した。冷却後、
炭酸ナトリウム（0.21ｇ）を加えて中和し、回転
蒸発器で溶媒を留去した。得た濃縮物をエーテル
に溶かし、これを飽和炭酸水素ナトリウム水、続
いて飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウム
上で乾燥した。溶媒を回転蒸発器で除き、残つた
油状物質を0.5Torr.，150℃で30分間加熱し低沸
成分を除去した。残つた液状部をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイー（ヘキサン／酢酸エチル＝
９／１を展開液として使用）することにより無色
透明な液体5.25ｇを得た。このものはシリカゲル
薄層クロマトグラフイー（ヘキサン／酢酸エチル
＝９／１を展開液として使用）によりRf＝0.19に
単一スポツトを与えた。また、下記に示した分析
結果によりこの液体が一般式(A)においてｊ＝15で
ある化合物であることが確認された。 FD−MASS分析ｍ／ｅ＝1312（計算値1312） IR分析（cm^-1）；830，1060，1376，1440，
2850，2920，3320 ¹³C−NMR分析（ppm／強度）135.365／430，
135.229／3567，135.005／349，134.937／
290，131.210／213，125.071／5242，
124.993／499，124.448／505，124.282／463，
124.214／445，61.241／551，40.029／541，
39.757／683，37.548／582，32.245／5500，
32.021／456，29.316／528，26.825／492，
26.699／548，26.436／5166，25.677／542，
25.308／567，23.430／6330，19.557／548，
17.679／353，16.006／640 ¹H−NMR分析（ppm、シグナル型状、プロト
ン比） 5.10（ｂ，18H）、3.66（ｍ，2H）、 2.03（ｂ，70H）、1.68（ｓ，48H）、 1.60（ｓ，9H）、1.80−1.10（ｍ，5H）、 0.91（ｄ，3H）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ヒノキ科、スギ科またはイチイ科に属する植
   物の葉を有機溶媒で抽出し、得られる抽出物から
   ポリプレニル化合物またはその混合物を分離し、
   必要に応じその分離前または分離後に該ポリプレ
   ニル化合物またはその混合物を加水分解、エステ
   ル化もしくはエステル変換反応またはそれらの２
   種以上の反応に付することを特徴とする一般式 （式中、Ａは水酸基またはアシルオキシ基を表
   わし、【式】はトランス型イソ プレン単位を表わし、【式】は シス型イソプレン単位を表わし、ｎは11から21ま
   での整数である。） で示されるポリプレニル化合物またはその混合物
   の製造方法。 ２ 有機溶媒が炭化水素類、ハロゲン化炭化水素
   類、エーテル類、エステル類およびケトン類から
   選ばれる特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ３ ヒノキ科、スギ科またはイチイ科に属する植
   物の葉を有機溶媒で抽出し、得られる抽出物を、
   必要に応じ加水分解したのち、クロマトグラフイ
   ー、分別溶解法、分別冷凍沈殿法、分子蒸留法ま
   たはこれらの方法の２種もしくはそれ以上の組合
   わせからなる分離法に付して、メルク社製薄層ク
   ロマト用プレート（シリカゲル60F₂₅₄被覆；層の
   厚さ0.25mm）を用いてｎ−ヘキサンと酢酸エチル
   との容量比で９：１の混合溶媒を展開溶媒とする
   薄層クロマトグラフイー（10cm展開）において標
   準物質としてのソラネシルアセテートのRf値が
   0.40〜0.45となる条件下に0.18〜0.25および／ま
   たは0.50〜0.55の範囲内のRf値を示す画分を単離
   回収することによりポリプレニル組成物を得る特
   許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ４ 植物の葉がヒノキ（Chamaecyparis
   obtusa）、イブキ（Juniperus chinensis）、ネズ
   ミサシ（Juniperus rigida）、スギ
   （Cryptomeria japonica）、メタセコイヤ
   （Metasequoia glyptostroboides）、イチイ
   （Taxus cuspidata）またはカヤ（Torreya
   nucifera）の葉である特許請求の範囲第１項、第
   ２項または第３項記載の製造方法。