JPH05380B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規抗生物質SF2446A2物質、
SF2446A3物質、SF2446B1物質、SF2446B2物質
及びSF2446B3物質に関するものである。 従来の技術及び発明が解決しようとする問題点 従来、数多くの抗生物質が発明、発見され、人
体用医薬品、動物用医薬品、農薬等の分野で実用
化されている。しかしながら、まだ有効な物質が
見出されていないため解決されていない医療或い
は産業の分野が数多く残されている。例えば、一
般細菌及びマイコプラズマにより発症する感染症
は単独感染のほか他の細菌と混合感染する極めて
厄介な病気であり、この分野では強力でしかも広
範囲な抗菌活性と抗マイコプラズマ活性を持つ新
規な抗生物質を提供することが常に要望されてい
る。本発明者らは以上のような点に着目し、新規
な抗生物質を提供するとともに、その製造法を確
立することによつてこれを解決しようとするもの
である。 問題点を解決するための手段 本発明者らは、先にストレプトマイセス属に属
する特定の菌株を培養することにより、各種細菌
及びマイコプラズマに対して強い発育阻止作用を
有する物質が培養液中に生産、蓄積されることを
見出し、その有効物質を採取することに成功し、
SF2446物質と命名した［特願昭61−301156（昭和
61年12月19日出願）］。 本発明者らはこれと同一菌株の培養液中に他の
新規な有効物質を見付けSF2446A2物質、
SF2446A3物質、SF2446B1物質及びSF2446B2物
質と命名した。 またSF2446B1物質又はSF2446B2物質を酸で
処理することにより新規な抗生物質を得、これを
SF2446B3物質と命名した。 これらの本発明物質は下記の理化学的性状を有
する。 ［］ SF2446A2物質 (1) 色及び形状：赤褐色粉末 (2) 元素分析値：C58.10％，H5.26％，N1.90％ (3) 分子式 ：C₃₄H₃₅NO₁₅ (4) マススペクトル（FD−MS）：ｍ／z697
（M⁺） (5) 融点 ：180−184℃（分解） (6) 紫外部及び可視部吸収スペクトル（第１図） λ max nm（Ｅ１％ １cm） ［MeOH］：216（648），228sh
（494），251（448），270sh（370），
300sh（211），417（85），472（88） ［0.1N HCl−MeOH］：217（610），227sh（475），
250（451），270sh（376），300sh
（211），415（92），470（93） ［0.1N NaOH−MeOH］：213（1210），240sh
（535），300sh（212），574（123） (7) 赤外部吸収スペクトル（第６図） （KBr cm^-1）：3430，2920，2820，1720，
1680，1650，1615，1590，
1560，1510，1460，1410，
1360，1300，1260，1210，
1160，1110，1095，1050，955，
940，890，870，810，800 (8) ¹Ｈ NMRスペクトル（400MHz，CDCl₃）
（第１１図） δ（ppm）：1.22（3H，ｄ），2.32（3H，br ｓ），
3.03（1H，br ｄ），3.14（1H，
dd），3.35（1H，br ｄ），3.42
（3H，ｓ），3.48（3H，ｓ），
3.54（1H，dd），3.57（3H，ｓ），
3.60（3H，ｓ），3.60（1H，dq），
3.87（1H，dd），4.39（1H，br
ddd），4.92（1H，ｄ），4.97
（1H，dd），5.25（1H，dd），
5.96（1H，br ｓ），6.19（1H，
ｓ），6.49（1H，br，ｓ），6.84
（1H，ｄ），8.47（1H，ｓ），
11.85（1H，ｓ），14.26（1H，ｓ (9) ¹³Ｃ NMRスペクトル（100MHz，CDCl₃）
（第１６図） δ（ppm）：196.5s，190.2s，188.8s，179.5s，
171.9s，162.5s，160.1s，
147.3s，143.1s，142.7s，
140.5s，133.9s，124.1d，
124.0s，120.0s，118.7s，
116.7d，109.7s，105.3d，
84.6s，83.2d，79.8d，79.1s，
77.5d，70.9d，68.6d，62.8d，
60.8q，58.9q，52.6q，52.2q，
38.1t，23.9q，17.8q (10) 呈色反応：10％硫酸、モリブデン酸試薬に陽
性である。 (11) 溶解性：メタノール、クロロホルム、酢酸
エチル、アセトンに溶け、水に
溶けない。 (12) 薄層クロマトグラフイー：担体シリカゲル
プレート（メルク社製） 展開溶媒系 Rf値 ヘキサン−アセトン（２：１） 0.27 クロロホルム−メタノール（15：１） 0.40 (13) 塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質 ［］ SF2446A3物質 (1) 色及び形状：赤褐色粉末 (2) 元素分析値：C59.04％，H4.12％，N2.53％ (3) 分子式 ：C₂₆H₂₁NO₁₁ (4) マススペクトル（FD−MS）：ｍ／z523
（M⁺） (5) 融点 ： ＞220℃ (6) 紫外部及び可視部吸収スペクトル（第２図） λ max nm（Ｅ１％ １cm） ［MeOH］：214（587），228sh
（461），258sh（321），272sh
（270），300sh（185），412（48），
516（48） ［0.1N HCl−MeOH］：216（512），230sh（400），
255sh（321），275sh（260），
302sh（189），410（63），494（50） ［0.1N NaOH−MeOH］：214（1160），232
（465），300sh（193），460sh
（31），581（82） (7) 赤外部吸収スペクトル（第７図） （KBr cm^-1）：3430，3400，2940，1720，
1680，1650，1625，1590，
1465，1410，1360，1310，
1265，1220，1160，1120，
1090，1050，1000，960，940，
900，875，815，800， (8) ¹Ｈ NMRスペクトル（400MHz，CDCl₃）
（第１２図） δ（ppm）：2.40（3H，br ｓ），3.34（1H，br
ｄ），3.40（3H，ｓ），3.57（1H，
dd），3.85（3H，ｓ），4.68（1H，
br ｄ），4.97（1H，dd），5.24
（1H，br ｓ），5.58（2H，br），
5.95（1H，ｓ），6.54（1H，br
ｓ），8.20（1H，ｓ），12.10
（1H，ｓ），14.32（1H，ｓ） (9) ¹³Ｃ NMRスペクトル（100MHz，CDCl₃）
（第１７図） δ（ppm）：196.3s，190.0s，188.7s，179.7s，
172.1s，162.3s，160.1s，
149.0s，143.3s，142.7s，
140.0s，133.9s，124.3d，
123.9s，119.7s，118.8s，
116.2d，109.9s，104.3d，
84.6s，78.8s，62.8d，52.6q，
52.3q，38.0t，23.9q (10) 呈色反応：10％硫酸、モリブデン酸試薬に陽
性である。 (11) 溶解性：メタノール、クロロホルム、酢酸
エチル、アセトンに溶け、水に
溶けない。 (12) 薄層クロマトグラフイー：担体シリカゲル
プレート（メルク社製） 展開溶媒系 Rf値 ヘキサン−アセトン（２：１） 0.39 クロロホルムーメタノール（15：１） 0.42 (13) 塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質 ［］ SF2446B1物質 (1) 色及び形状：赤褐色粉末 (2) 元素分析値：C59.72％，H5.35％，N2.21％ (3) 分子式 ：C₃₄H₃₅NO₁₄ (4) マススペクトル（FD−MS）：ｍ／z682
（MH⁺） (5) 融点 ：188−192℃（分解） (6) 紫外部及び可視部吸収スペクトル（第３図） λ max nm（Ｅ１％ １cm） ［MeOH］：217（624），230sh
（465），252（461），275sh（341），
305sh（170），419（78），471（82） ［0.1N HCl−MeOH］：218（587），227sh（461），
252（473），270sh（330），300sh
（191），419（87），469（88） ［0.1N NaOH−MeOH］：215（1230），246
（526），300（195），589（129） (7) 赤外部吸収スペクトル（第８図） （KBr cm^-1）：3450，3370，2940，2830，
1720，1675，1650，1620，
1566，1510，1465，1405，
1365，1310，1260，1240，
1215，1160，1130，1110，
1085，1150，1010，980，950，
920，885，860，815，800 (8) ¹Ｈ NMRスペクトル（400MHz，CDCl₃）
（第１３図） δ（ppm）：1.35（3H，ｄ），2.24（1H，ddd），
2.33（3H，br ｓ），2.63（1H，
br ｄ），2.76（1H，ddd），3.08
（1H，ddd），3.14（1H，ddd），
3.14（1H，dd），3.23（3H，ｓ），
3.34（1H，dq），3.61（3H，ｓ），
3.70（1H，dd），3.75（1H，br
ddd），3.80（3H，ｓ），3.82
（3H，ｓ），4.69（1H，dd），
4.71（1H，ｓ），5.86（1H，ｓ），
6.49（1H，br ｓ），6.84（1H，
ｄ），8.21（1H，ｓ），12.04
（1H，ｓ），14.15（1H，ｓ） (9) ¹³Ｃ NMRスペクトル（100MHz，CDCl₃）
（第１８図） δ（ppm）：197.7s，190.3s，188.7s，179.4s，
172.1s，162.4s，160.2s，
147.1s，145.1s，142.4s，
140.9s，133.7s，124.1d，
124.0s，120.9s，118.4s，
116.4d，109.4s，104.2d，
87.1s，82.8d，79.6d，79.2d，
77.9s，75.2d，73.3d，62.5q，
61.2q，52.3q，52.2q，26.7t，
23.8q，18.4t，18.0q (10) 呈色反応：10％硫酸、モリブデン酸試薬に陽
性である。 (11) 溶解性：メタノール、クロロホルム、酢酸
エチル、アセトンに溶け、 水に溶けない。 (12) 薄層クロマトグラフイー：担体シリカゲル
プレート（メルク社製） 展開溶媒系 Rf値 ヘキサン−アセトン（２：１） 0.43 クロロホルム−メタノール（15：１） 0.58 (13) 塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質 ［］ SF2446B2物質 (1) 色及び形状：赤褐色粉末 (2) 元素分析値：C59.16％，H5.18％，N2.05％ (3) 分子式 ：C₃₄H₃₅NO₁₄ (4) マススペクトル（FD−MS）：ｍ／z681
（M⁺） (5) 融点 ：177−181℃（分解） (6) 紫外部及び可視部吸収スペクトル（第４図） λ max nm（Ｅ１％ １cm） ［MeOH］：217（617），228sh
（470），250（455），270sh（355），
300sh（191），418（84），471（88） ［0.1N HCl−MeOH］：218（586），227sh（461），
251（464），270sh（370），305sh
（181），416（85），470（90） ［0.1N NaOH−MeOH］：214（1180），246
（501），300（195），585（128） (7) 赤外部吸収スペクトル（第９図） （KBr cm^-1）：3430，2930，2830，1720，
1680，1650，1620，1590，
1560，1515，1465，1405，
1365，1310，1265，1240，
1215，1165，1100，1040，
1020，995，950，920，885，
810，800 (8) ¹Ｈ NMRスペクトル（400MHz，CDCl₃）
（第１４図） δ（ppm）：1.27（3H，ｄ），2.26（1H，ddd），
2.37（3H，br ｓ），2.65（1H，
ｄ），2.77（1H，ddd），3.08
（1H，ddd），3.10（1H，dd），
3.12（1H，ddd），3.25（3H，
ｓ），3.50（3H，dq），3.55（3H，
ｓ），3.56（3H，ｓ），3.68（1H，
dd），3.80（3H，ｓ），4.02（1H，
ddd），4.86（1H，ｓ），5.19
（1H，dd），6.19（1H，ｓ），
6.40（1H，ｄ），6.50（1H，br
ｓ），8.34（1H，ｓ），12.06
（1H，ｓ），14.19（1H，ｓ） (9) ¹³Ｃ NMRスペクトル（100MHz，CDCl₃）
（第１９図） δ（ppm）：198.1s，190.2s，188.7s，179.6s，
172.1s，162.5s，160.2s，
147.3s，145.0s，142.4s，
141.2s，133.7s，124.2d，
124.1s，120.9s，118.4s，
116.8d，109.5s，105.5d，
87.2s，83.0d，79.8d，78.1s，
77.5d，70.8d，68.7d，60.7q，
58.9q，52.3q，52.2q，26.7t，
23.9q，18.5t，17.7q， (10) 呈色反応：10％硫酸、モリブデン酸試薬に陽
性である。 (11) 溶解性：メタノール、クロロホルム、酢酸
エチル、アセトンに溶け、水に
溶けない。 (12) 薄層クロマトグラフイー：担体シリカゲル
プレート（メルク社製） 展開溶媒系 Rf値 ヘキサン−アセトン（２：１） 0.35 クロロホルム−メタノール（15：１） 0.45 (13) 塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質 ［］ SF2446B3物質 (1) 色及び形状：赤褐色粉末 (2) 分子式 ：C₂₆H₂₁NO₁₀ (3) マススペクトル（FD−MS）：ｍ／z507
（M⁺） (4) 融点 ：187−192℃ (5) 紫外部及び可視部吸収スペクトル（第５図） λ max nm（Ｅ１％ １cm） ［MeOH］：217（680），227sh
（517），251（464），275sh（345），
300sh（231），409（87），489（73） ［0.1N HCl−MeOH］：218（645），227sh（501），
251（473），272sh（361），300sh
（241），410（91），493（75） ［0.1N NaOH−MeOH］：215（1220），240sh
（511）， 285sh（245），460（47），587
（128） (6) 赤外部吸収スペクトル（第１０図） （KBr cm^-1）：3440，3360，2950，1720，
1685，1650，1625，1590，
1465，1405，1360，1310，
1260，1220，1165，1105，
1080，1050，1005，955，915，
890，815，800 (7) ¹Ｈ NMRスペクトル（400MHz，CDCl₃）
（第１５図） δ（ppm）：2.27（1H，ddd），2.38（3H，br ｓ），
2.76（1H，ddd），3.08（1H，
ddd），3.15（1H，ddd），3.23
（3H，ｓ），3.84（3H，ｓ），
4.70（1H，ｓ），5.43（2H，br），
5.94（1H，ｓ），6.51（1H，br
ｓ），8.22（1H，ｓ），12.06
（1H，ｓ），14.25（1H，ｓ） (8) ¹³Ｃ NMRスペクトル（100MHz，CDCl₃）
（第２０図） δ（ppm）：197.9s，190.3s，188.8s，179.8s，
172.2s，162.4s，160.3s，
148.9s，145.1s，142.4s，
140.9s，133.7s，124.2d，
124.1s，120.9s，118.6s，
116.4d，109.5s，104.5d，
87.1s，78.0s，52.3×2q，26.8t，
23.9q，18.5t (9) 呈色反応：10％硫酸、モリブデン酸試薬に陽
性である。 (10) 溶解性：メタノール、クロロホルム、酢酸エ
チル、アセトンに溶け、水に溶
けない。 (11) 薄層クロマトグラフイー：担体シリカゲル
プレート（メルク社製） 展開溶媒系 Rf値 ヘキサン−アセトン（２：１） 0.46 クロロホルムーメタノール（15：１） 0.50 (12) 塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質 本願発明物質は下記の化学構造式で示される。 【表】 本発明に使用される新規抗生物質の生産菌の一
例としては、兵庫県の土壌から新たに分離された
SF2446株がある。 SF2446株の菌学的性状は下記の通りである。 形態 基生菌糸は長く伸張し、よく分岐し、通常の条
件下では分断しない。気菌糸の着生は貧弱である
が、オートミール寒天、スターチ寒天、グリセロ
ール・アスパラギン寒天、シユクロース・硝酸塩
寒天等で着生し、胞子形成も認められる。気菌糸
の分岐は単純分岐で車軸分岐は見られない。気菌
糸先端の胞子連鎖は波状、ループ状、フツク状、
あるいは不完全は螺旋状となる。電子顕微鏡によ
る観察では、胞子は円筒型ないし楕円型で、0.5
〜1.1×0.6〜1.3μmの大きさを有し、表面はしわ
状（rugose）ないし刺状（spiny）である。胞子
は通常50個以上連鎖する。胞子嚢、運動性胞子、
菌核等は観察されない。 各種培地上の生育状態 SF2446株の各種培地上の生育状態は第１表に
示す通りである。色の記載について［ ］内に示
す標準はコンテイーナー・コーポレーシヨン・オ
ブ・アメリカ（Container Corporation of
America）社製の「カラー・ハーモニー・マニ
アル（Color Harmony Maumal）」に記載され
ているものを用いた。観察は28℃で14〜21日間培
養後に行なつた。 【表】 生理的性質 (1) 生育温度範囲：イースト麦芽寒天において20
〜37℃の温度範囲で生育し、26〜30℃で良好に
生育する。 (2) ゼラチンの液化：陰性 (3) スターチの加水分解：陰性 (4) 硝酸塩の還元：陰性 (5) 脱脂乳のペプトン化：陰性 脱脂乳の凝固：陰性 (6) 耐塩性：４％の食塩含有培地では生育する
が、５％以上では生育しない。 (7) メラニン様色素の生成：陰性 炭素源の利用性（ISP No.９培地使用） (1) 利用する ：Ｄ−グルコース、グリセロール (2) 利用しない：Ｄ−キシロース、Ｌ−アラビノ
ース、Ｄ−マンニトール、ｉ−イノシトール、
ラフイノース、シユクロース (3) 利用が疑わしい：Ｄ−フラクトース、Ｌ−ラ
ムノース 細胞壁組成 ベツカー（Becker）らの方法（Appl.
Microbiol.13，236，1965）により分析した結果、
細胞壁組成成分中のジアミノピメリン酸はLL型
であつた。 以上の性状より、SF2446株は放線菌の中でス
トレプトマイセス属に属すると考えるのが妥当で
ある。従つて、本発明者らはSF2446株をストレ
プトマイセス・エスピー・SF2446
（Streptomyces sp.SF2446）と称することにし
た。 SF2446株は工業技術院微生物工業技術研究所
に微工研菌寄第8980号（FERM Ｐ−8980）とし
て受託されている。 SF2446株は他の放線菌の場合に見られるよう
に、その性状が変化しやすい。例えば、SF2446
株の、またはこの株に由来する突然変異株（自然
発生または誘発性）、形質接合体または遺伝子組
み換え体であつても、本願にかかわる抗生物質を
生産するものは全て本発明に使用できる。本発明
の方法では、前記の菌を通常の微生物が利用しう
る栄養物を含有する培地で培養する。栄養源とし
ては、グルコース、水飴、デキストリン、シユク
ロース、澱粉、糖蜜、動、植物油等を使用出来
る。また窒素源として、大豆粉、小麦胚芽、コー
ンステイプリカー、綿実粕、肉エキス、ペプト
ン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソー
ダ、尿素等を使用出来る。その他、必要に応じて
ナトリウム、カリウム、マグネシウム、コバル
ト、塩素、燐酸、硫酸、及びその他のイオンを生
じることができる無機塩類を添加することは有効
である。また菌の発育を助け、本願にかかわる抗
生物質の生産を促進するような有機及び無機質を
適当に添加することができる。 培養法としては、好気的条件での培養法、特に
深部培養法が最も適している。培養に適当な温度
は20〜37℃であるが、多くの場合26〜30℃付近で
培養する。本願にかかわる抗生物質の生産は培地
や培養条件により異なるが、振盪培養、タンク培
養とも通常１〜８日の間でその蓄積が最高に達す
る。培養液中の本願にかかわる抗生物質の蓄積量
が最高になつた時に培養を停止し、培養液から目
的物質を単離精製する。 このようにして生産される本願抗生物質は前記
の理化学的性状を有するので、その性状に従つて
培養液から抽出、精製することが可能であるが、
特に以下に述べる方法により効率的に抽出、精製
することが出来る。すなわち、有効成分を含有す
る培養液に酢酸エチル等の水と自由に混和しない
有機溶媒を加えて攪拌、抽出する。一方、固形物
はアセトン等の水と自由に混和する有機溶媒と水
を加えて攪拌し、固形分から有効成分を抽出し、
有機溶媒を留去した後、酢酸エチル等の水と自由
に混和しない有機溶媒を用いて有効成分を抽出す
る。このようにして得られた油状物質をシリカゲ
ル、アルミナ、ゲル濾過剤等の担体を適宜組み合
わせたクロマトグラフイーにより本願抗生物質を
単離する。 発明の効果 本発明にかかわる抗生物質は主としてグラム陽
性の一般細菌及びマイコプラズマに対して強い抗
菌作用を有する。一般細菌では日本化学療法学会
法の寒天平板希釈法（Chemotherapy29，76−
79，1981）に従い、マイコプラズマではPPLOブ
ロス培地を使用した液体希釈法（Chemotherapy
23，2569−2576，1975）に準じて測定した抗生物
質SF2446物質、SF2446A2物質、SF2446A3物
質、SF2446B1物質、SF2446B2物質及び
SF2446B3物質に各種微生物に対する最小発育阻
止濃度（MIC）は第２表に示す通りである。 【表】 【表】 実施例 １ 種培地として、スターチ2.0％、グルコース1.0
％、小麦胚芽0.6％、ポリペプトン0.5％、酵母エ
キス0.3％、大豆粉0.2％、炭酸カルシウム0.1％を
含む培地を用いた。また生産培地として、グルコ
ース3.0％、小麦胚芽1.5％、大豆粉0.5％、コーン
ステイープリカー1.0％、炭酸カルシウム0.1％、
塩化コバルト0.001％を含む培地を用いた。なお、
殺菌前PHはすべてPH7.0に調整した。 前記種培地20mlを分注した100ml容三角フラス
コを120℃で30分間殺菌し、これにストレプトマ
イセス・エスピー・SF2446（FERM Ｐ−8980）
の斜面培養の１−２白金耳を接種し、28℃で３日
間振とう培養し第１種培養とした。次いで種培地
80mlを分注した500ml容三角フラスコを120℃で30
分間殺菌し、前記第１種培養４mlを接種後、28℃
で２日間振とう培養して、これを第２種培養とし
た。更に種培地1Lを分注した5L容三角フラスコ
を120℃で30分間殺菌し、第２種培養50mlを接種
後、28℃で１日間振とう培養して、これを第３種
培養とした。更に予め120℃で30分間殺菌した種
培地25Lを分注した50L容ジヤーフアメンターに、
第３種培養1Lを接種し、28℃で１日間通気攪拌
培養し、これを第４種培養とした。 予め120℃で30分間殺菌した200Lの生産培地を
含む300L容ジヤーフアメンターに、前記の第４
種培養25Lを接種し、28℃で５日間通気（20L／
分）、攪拌（初期100rpm，48時間以降130rpm）
培養した。培養終了後、濾過助剤として珪藻土を
加え濾過した。 濾過後に得られた菌体を含む固形分に70％アセ
トン水158Lを加えて１時間攪拌し、再び濾過し
て有効成分を含む菌体抽出液158Lを得た。更に
菌体抽出液を減圧濃縮してアセトンを留去した水
層54LをPH７に調整し、酢酸エチル54Lを加えて
１時間攪拌して有効成分を抽出した。この操作を
２回繰り返し、得られた酢酸エチル抽出液に無水
硫酸ナトリウムを加えて乾燥後、約2Lまで減圧
濃縮した。濃縮液は５℃で１週間放置後、析出し
た結晶を濾別し、冷メタノール次いでヘキサンで
洗浄して乾燥すると、8.59gのSF2446物質が得ら
れた。この濾液と洗浄液を合わせて減圧濃縮する
と、赤褐色の油状物質が得られた。 この油状物質をクロロホルムで予め充填したシ
リカゲルカラム2.4L（ワコーゲルＣ−300、和光純
薬社製）の上部にのせ、クロロホルム5Lで洗浄
後、クロロホルム−メタノール（10：１）で展開
して活性画分を集め減圧濃縮すると、油状物質が
得られた。この操作を２回繰り返し、得られた油
状物質を同様のシリカゲルカラム2.4Lの上部にの
せ、クロロホルム1Lで洗浄後、クロロホルム−
メタノール（50：１）、200mlフラクシヨンカツト
で展開すると、フラクヨン３〜６（Fr.）に
SF2446B1物質を主に含む活性区が、フラクシヨ
ン７〜14（Fr.）にSF2446物質及びSF2446A3物
質を主に含む活性区が、フラクシヨン15〜18（Fr.
）にSF2446B2物質を主に含む活性区が、フラ
クシヨン19〜28（Fr.）及びフラクシヨン29〜40
（Fr.）にSF2446A2物質を主に含む活性区が得
られた。Fr.を減圧濃縮乾固すると、650mgの油
状物質が得られた。この油状物質を予めヘキサン
−アセトン（２：１）で充填したシリカゲルカラ
ム120mlの上部にのせ、同様の溶媒系で展開する
と、SF2446B1物質を主に含む粗物質が得られ
た。この粗物質を更に分取用シリカゲルTLC（展
開系：ヘキサン−アセトン１：１）で精製する
と、80.5mgのSF2446B1物質が得られた。Fr.を
減圧濃縮乾固すると、10.51gの粗物質が得られ
た。この粗物質をクロロホルム−メタノール
（１：１）混液を用いて再結晶を行うと、1.82gの
SF2446物質が得られた。濾液を減圧濃縮し、得
られた粗物質はクロロホルム−メタノール（１：
１）を展開溶媒とするセフアデツクスLH−20
（750ml，Pharmacia社製）のカラムクロマトグ
ラフイーを行い、活性画分を減圧濃縮乾固した。
更にこの操作を２回繰り返すと、570mgのSF2446
物質及び303mgの主にSF2446A3物質を含む粗物
質が得られた。この粗物質をシリカゲルカラム
（30g、展開系：クロロホルム−メタノール30：
１）次いで分取用シリカゲルカラムTLC（展開
系：クロロホルム−メタノール15：１）で精製す
ると、23.7mgのSF2446A3物質が得られた。Fr.
を減圧濃縮乾固すると、772mgの粗物質が得られ
た。この粗物質はクロロホルム−メタノール
（30：１）を展開溶媒とするシリカゲル（80g）
カラムクロマトグラフイーを行い、得られた活性
画分を減圧濃縮乾固すると、123mgの粗物質が得
られた。更にこの粗物質を分取用シリカゲル
TLC（展開系：トルエン−酢酸エチル１：２、次
いでクロロホルム−メタノール15：１）で精製す
ると、78.8mgのSF2446B2物質が得られた。Fr.
を減圧濃縮乾固すると、5.07gのSF2446A2物質が
得られた。同様にFr.を減圧濃縮乾固すると、
5.72gの粗物質が得られた。この粗物質はシリカ
ゲル（300g、展開系：クロロホルム−メタノー
ル50：１）カラムクロマトグラフイー、次いでシ
リカゲル（300g、展開系：ヘキサン−アセトン
２：１）カラムクロマトグラフイー、更にセフア
デツクスLH−20（展開系：クロロホルム−メタ
ノール１：１）カラムクロマトグラフイーを行
い、1.13gのSF2446A2物質が得られた。 実施例 ２ SF2446B1物質（15.2mg）のメタノール溶液
（2.2ml）に濃塩酸（0.2ml）を加えて、40℃で１
時間放置した。その後、減圧下に溶媒を留去し、
残査を分取用シリカゲルTLC（展開系：クロロホ
ルム−メタノール15：１）で精製すると、5.4mg
のSF2446B3物質が得られた。

【図面の簡単な説明】

第１図はSF2446A2物質（20μg／ml）の紫外部
及び可視部吸収スペクトルを示し、実線（―）は
メタノール溶液中、破線（……）は0.1規定塩酸
−メタノール溶液中、一点鎖線（―‐―）は0.1
規定水酸化ナトリウム−メタノール溶液中を示
す。第２図はSF2446A3物質（20μg／ml）の紫外
部及び可視部吸収スペクトルを示し、実線（―）
はメタノール溶液中、破線（……）は0.1規定塩
酸−メタノール溶液中、一点鎖線（―‐―）は
0.1規定水酸化ナトリウム−メタノール溶液中を
示す。第３図はSF2446B1物質（20μg／ml）の紫
外部及び可視部吸収スペクトルを示し、実線
（―）はメタノール溶液中、破線（……）は0.1規
定塩酸−メタノール溶液中、一点鎖線（―‐―）
は0.1規定水酸化ナトリウム−メタノール溶液中
を示す。第４図はSF2446B2物質（20μg／ml）の
紫外部及び可視部吸収スペクトルを示し、実線
（―）はメタノール溶液中、破線（……）は0.1規
定塩酸−メタノール溶液中、一点鎖線（―‐―）
は0.1規定水酸化ナトリウム−メタノール溶液中
を示す。第５図はSF2446B3物質（20μg／ml）の
紫外部及び可視部吸収スペクトルを示し、実線
（―）はメタノール溶液中、破線（……）は0.1規
定塩酸−メタノール溶液中、一点鎖線（―‐―）
は0.1規定水酸化ナトリウム−メタノール溶液中
を示す。第６図はSF2446A2物質の臭化カリウム
錠での赤外部吸収スペクトルを示す。第７図は
SF2446A3物質の臭化カリウム錠での赤外部吸収
スペクトルを示す。第８図はSF2446B1物質の臭
化カリウム錠での赤外部吸収スペクトルを示す。
第９図はSF2446B2物質の臭化カリウム錠での赤
外部吸収スペクトルを示す。第１０図は
SF2446B3物質の臭化カリウム錠での赤外部吸収
スペクトルを示す。第１１図はSF2446A2の重ク
ロロホルム溶液中、TMSを基準物質として測定
した400MHz¹Ｈ NMRスペクトルを示す。第１
２図はSF2446A3の重クロロホルム溶液中、
TMSを基準物質として測定した400MHz¹Ｈ
NMRスペクトルを示す。第１３図はSF2446B1
の重クロロホルム溶液中、TMSを基準物質とし
て測定した400MHz¹Ｈ NMRスペクトルを示
す。第１４図はSF2446B2の重クロロホルム溶液
中、TMSを基準物質として測定した400MHz¹Ｈ
NMRスペクトルを示す。第１５図は
SF2446B3の重クロロホルム溶液中、TMSを基準
物質として測定した400MHz¹Ｈ NMRスペクト
ルを示す。第１６図はSF2446A2の重クロロホル
ム溶液中、TMSを基準物質として測定した100M
Hz¹³Ｈ NMRスペクトルを示す。第１７図は
SF2446A3の重クロロホルム溶液中、TMSを基
準物質として測定した100MHz¹³Ｈ NMRスペク
トルを示す。第１８図はSF2446B1の重クロロホ
ルム溶液中、TMSを基準物質として測定した
100MHz¹³Ｈ NMRスペクトルを示す。第１９図
はSF2446B2の重クロロホルム溶液中、TMSを基
準物質として測定した100MHz¹³Ｈ NMRスペク
トルを示す第２０図はSF2446B3の重クロロホル
ム溶液中、TMSを基準物質として測定した100M
Hz¹³Ｈ NMRスペクトルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記の化学構造式を有する新規抗生物質
   SF2446A2，A3，B1，B2，B3物質およびそれら
   の塩；