JPH0640899B2 - 吸着体の製造法 - Google Patents

吸着体の製造法

Info

Publication number
JPH0640899B2
JPH0640899B2 JP3118365A JP11836591A JPH0640899B2 JP H0640899 B2 JPH0640899 B2 JP H0640899B2 JP 3118365 A JP3118365 A JP 3118365A JP 11836591 A JP11836591 A JP 11836591A JP H0640899 B2 JPH0640899 B2 JP H0640899B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
salt
dextran sulfate
gel
amount
molecular weight
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP3118365A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH04227268A (ja
Inventor
敍孝 谷
恒夫 林
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Original Assignee
Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd filed Critical Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Priority to JP3118365A priority Critical patent/JPH0640899B2/ja
Publication of JPH04227268A publication Critical patent/JPH04227268A/ja
Publication of JPH0640899B2 publication Critical patent/JPH0640899B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • External Artificial Organs (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 【0001】 【産業上の利用分野】本発明は血液中の有害成分を除去
するための吸着体の製造法に関する。さらに詳しくは、
血液あるいは血漿、血清中からリポ蛋白、とくに極低密
度リポ蛋白(VLDL)および(または)低密度リポ蛋白(LD
L) を選択的に吸着除去するための吸着体の製造法に関
する。 【0002】 【従来の技術・発明が解決しようとする課題】血液中に
存在するリポ蛋白のうちVLDL、LDL はコレステロールを
多く含み、動脈硬化の原因となることが知られている。
とりわけ家族性高脂血症などの高脂血症、高コレステロ
ール症においては、正常値の数倍のVLDLおよび(また
は)LDL値を示し、冠動脈の硬化などをひきおこす。 【0003】これらの疾患の治療には食事療法、薬物療
法が行なわれているが、効果に限度があり、副作用も懸
念されている。とくに家族性高脂血症に対してはVLDL、
LDLを多く含んだ患者の血漿を分離したのち、正常血漿
またはアルブミンなどを成分とする補液と交換してVLDL
値、LDL 値を低下させる、いわゆる血漿交換療法が現在
のところほぼ唯一の効果的な治療法である。 【0004】しかしながら、血漿交換療法は周知のごと
く、(1) 高価な新鮮血漿あるいは血漿製剤を用いる必要
がある、(2) 肝炎ウィルスなどの感染の惧れがある、
(3) 有害成分のみでなく有用成分も同時に除去してしま
う、すなわち、リポ蛋白のばあい、有用である高密度リ
ポ蛋白(HDL) も同時に除去してしまう、などの欠点を有
する。 【0005】叙上の欠点を解消する目的で膜による有害
成分の選択的除去が試みられているが、選択性の点で満
足できるものはいまだえられていない。 【0006】また、同じ目的で抗原、抗体などを固定し
た、いわゆる免疫吸着体を用いる試みがなされており、
該方法は選択性の点ではほぼ満足できるものの、用いる
抗原、抗体の入手が困難かつ高価であるという欠点を有
する。 【0007】さらには、除去対象物質に特異的な親和性
(アフィニティー)を有する物質(以下、リガンドとい
う)を担体に固定した、いわゆるアフィニティークロマ
トグラフィーの原理による吸着体も試みられている。該
方法に用いられるリガンドは抗原、抗体などに比べれば
入手しやすい物質が多いが、生体に由来する物質が多い
ため、体外循環治療に用いるには滅菌操作などに対する
安定性、価格、安全性などの点で満足しうるものはあま
りない。 【0008】この中でデキストラン硫酸および(また
は)その塩はリガンドとして優れており、これを多孔質
セルロースゲルに共有結合を介して固定することによっ
て、高効率でかつ安全に、しかも選択性よくリポ蛋白を
吸着除去しうる体外循環治療用吸着体がえられる。 【0009】しかしながら、デキストラン硫酸および
(または)その塩は、固定化反応に利用できる官能基と
して反応性の低い水酸基しかなく、必要量のデキストラ
ン硫酸および(または)その塩を固定するのが困難であ
った。 【0010】本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、デキ
ストラン硫酸および(または)その塩も、担体によって
は効率よく固定できることを見出し、本発明を完成する
に至った。 【0011】 【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、
孔質セルロースゲルとエピクロルヒドリンおよび(また
は)ポリオキシラン化合物とを反応させてエポキシ基を
導入し、ついでデキストラン硫酸および(または)その
塩を反応させて固定する、体外循環治療用リポ蛋白吸着
体の製造法に関する。 【0012】 【実施例】デキストラン硫酸および(または)その塩と
は、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc
mesenteroides) などにより生産される多糖であるデキ
ストランの硫酸エステルおよび(または)その塩であ
り、直鎖状でも分岐鎖状でもよく、塩としてはナトリウ
ム、カリウムなどの水溶性塩が好ましい。 【0013】なお、本発明に使用するデキストラン硫酸
および(または)その塩は、リポ蛋白の吸着効率や安全
性の面から比較的低分子量でかつイオウ含量が高いもの
が望ましい。目安としては、極限粘度が0.12dl/g以下、
イオウ含量が15重量%以上である。 【0014】本発明でいう極限粘度とは、デキストラン
硫酸および(または)その塩をナトリウム塩とし、中性
の1M食塩水溶液中、25℃で測定したものである。 【0015】担体として用いられる多孔質セルロースゲ
ルは、他の担体(とくに合成高分子系担体)に比べ、担
体上の単位活性基あたりのデキストラン硫酸および(ま
たは)その塩の固定量が多く、好都合であり、その他に
もつぎのような長所を有している。 【0016】(1) 機械的強度が高く、カラムなどに充填
して、血液、血漿などの体液を流したばあいの圧力損失
が小さく、目詰りなどをおこしにくい。 【0017】(2) 充分な大きさの細孔が多数存在し、吸
着除去対象物質が細孔内に侵入できるようにせしめう
る。なお、球状蛋白質およびウィルスを用いて測定した
排除限界分子量は100 万〜1億の範囲が適当である(た
だし排除限界分子量とは細孔内に侵入できない(排除さ
れる)分子のうち最も小さい分子量をもつものの分子量
をいう)。 【0018】(3) 同様の細孔径、空孔率を有する合成ポ
リマーハードゲルに比べ、強じんで、破砕の恐れが少な
い。 【0019】(4) 表面に固定化反応に用いうる官能基ま
たは容易に活性化しうる官能基としてヒドロキシル基が
存在する。 【0020】(5) 高圧蒸気滅菌などの滅菌操作による変
化が少ない。 【0021】なお、(2) の球状蛋白質およびウィルスを
用いて測定した排除限界分子量(以下、排除限界分子量
という)に関しては、排除限界分子量100 万未満の担体
を用いたばあいには、VLDL、LDL の除去量が小さく実用
に耐えないが、排除限界分子量が100 万〜数百万とVLD
L、LDL の分子量に近い担体でもある程度実用に供しう
るものがえられる。一方、排除限界分子量が1億をこえ
ると、リガンドの固定量が減少して結果的に吸着量が減
り、またゲルの強度も低下するため好ましくない。かか
る理由のため本発明に用いる多孔質セルロースゲルは排
除限界分子量が100 万〜1億の範囲であるのが適当であ
る。 【0022】また、多孔質セルロースゲルの表面は、合
成高分子などでコーティングされていてもよい。 【0023】多孔質セルロースゲルの粒子径は小さい方
が吸着能力の点で好ましいが、粒子径があまりに小さく
なるとカラムに充填したばあいの圧力損失が大きくな
り、好ましくなく、1〜5,000 μの範囲であることが好
ましい。 【0024】デキストラン硫酸および(または)その塩
を多孔質セルロースゲルに固定する方法には種々ある
が、体外循環治療に用いるにはリガンドが脱離しないこ
とが重要であるので、リガンドが結合の強固なエポキシ
を介して多孔質セルロースゲルに固定されていること
が必要である。 【0025】固定化方法としては、結合が強固でリガン
ドの脱離の危険性が少ないエピクロルヒドリン法、また
はビスエポキサイドなどのポリオキシラン化合物を用い
る方法が採用される。デキストラン硫酸および(また
は)その塩の固定化量については、有意なリポ蛋白吸着
量をうるにはカラム体積1mlあたり0.2mg 以上が好まし
く、また経済性を考慮すると100mg 以下が望ましい。 【0026】なお、固定化反応終了後未反応のデキスト
ラン硫酸および(または)その塩は回収して精製などの
工程を経て再使用することもできる。 【0027】また、デキストラン硫酸および(または)
その塩を固定した多孔質セルロースゲルは、未反応の活
性基をモノエタノールアミンなどで不活性化しておくこ
とが望ましい。 【0028】本発明による吸着体を体外循環治療に用い
るには種々の方法があるが、入口と出口に体液成分(血
球、蛋白質など)は通過するが吸着体は通過できないフ
ィルター、メッシュなどを装着したカラムに充填し、該
カラムを体外循環回路に組み込み、血液、血漿などの体
液をカラムに通して行なう方法が代表的である。 【0029】つぎに参考例および実施例をあげて本発明
の方法をさらに詳しく説明するが、本発明はかかる実施
例のみに限定されるわけではない。 【0030】参考例1 架橋ポリアクリレートであるトヨパールHW65(東洋曹達
(株)製、排除限界分子量5,000,000 、粒子径50〜100
μm )10mlに飽和NaOH水溶液6ml、エピクロルヒドリン
15mlを加え、攪拌しながら50℃で2時間反応させたの
ち、ゲルをアルコールおよび水の順で洗浄してエポキシ
化されたゲルをえた。導入されたエポキシ基の量は、カ
ラム体積1mlあたり250 μmol であった。 【0031】えられたゲル2mlに、極限粘度(デキスト
ラン硫酸および(または)その塩をナトリウム塩とし、
中性の1M食塩水溶液中、25℃で測定したもの、以下同
様)0.027dl/g 、イオウ含量17.7重量%のデキストラン
硫酸ナトリウム0.5gおよび水2mlを加えた(デキストラ
ン硫酸ナトリウムの濃度は約13重量%)。ついでpH11に
調整し、45℃で16時間振とう後ゲルを濾別して2M食塩
水、0.5M食塩水および水の順で洗浄してデキストラン硫
酸ナトリウムが固定されたゲルをえた。固定されたデキ
ストラン硫酸ナトリウムの量は、カラム体積1mlあたり
0.4mg であり、エポキシ基1μmol あたりの固定量は1.
6 μg であった。 【0032】実施例1 多孔質セルロースゲルであるCSKA-3(チッソ(株)製、
排除限界分子量50,000,000、粒子径45〜105 μm )10ml
に、20%NaOH4g 、ヘプタン12g およびノニオン系界面
活性剤TWEEN20 を1滴加えた。40℃で2時間攪拌後、エ
ピクロルヒドリン5g を加えて2時間攪拌し、ゲルを水
洗濾過してエポキシ化セルロースゲルをえた。導入され
たエポキシ基の量はカラム体積1mlあたり30μmol であ
った。 【0033】えられたゲル2mlに極限粘度0.027dl/g 、
イオウ含量17.7重量%のデキストラン硫酸ナトリウム0.
12g および水2mlを加え(デキストラン硫酸ナトリウム
の濃度は約2.5 重量%)、pH11に調整して45℃で16時間
振とうした。ゲルを濾別して、2M食塩水、0.5M食塩水お
よび水の順で洗浄し、デキストラン硫酸ナトリウムが固
定されたセルロースゲルをえた。 【0034】固定されたデキストラン硫酸ナトリウムの
量はカラム体積1mlあたり0.15mgであり、エポキシ基1
μmol あたりの固定量は5μg であった。 【0035】実施例2 固定化反応時のデキストラン硫酸ナトリウムの濃度を13
重量%にしたほかは、実施例1と同様にして固定化反応
を行なった。固定されたデキストラン硫酸ナトリウムの
量はカラム体積1mlあたり2.3mg で、エポキシ基1μmo
l あたりの固定量は76μg であった。 【0036】試験例 参考例1および実施例1〜2でえられたゲルをモノエタ
ノールアミンを用いて未反応のエポキシ基を不活性化さ
せたのち、それぞれ1mlをカラムに充填し、該カラムに
高脂血症患者の血漿(総コレステロール濃度308mg/dl)
6mlを流し、流出した血漿中のLDL 濃度を総コレステロ
ールを指標として測定した(用いた血漿中のコレステロ
ールはほとんどがLDL に由来するため)。 【0037】結果を表1に示す。 【0038】 【表1】 【0039】 【発明の効果】本発明の方法により製造された吸着体を
体外循環治療に用いると、血液あるいは血漿、血清中か
らリポ蛋白、とくに極低密度リポ蛋白(VLDL)および(ま
たは)低密度リポ蛋白(LDL) を選択的に吸着除去しう
る。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】1 多孔質セルロースゲルとエピク
    ロルヒドリンおよび(または)ポリオキシラン化合物と
    を反応させてエポキシ基を導入し、ついでデキストラン
    硫酸および(または)その塩を反応させて固定する、
    外循環治療用リポ蛋白吸着体の製造法。
JP3118365A 1991-05-23 1991-05-23 吸着体の製造法 Expired - Lifetime JPH0640899B2 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP3118365A JPH0640899B2 (ja) 1991-05-23 1991-05-23 吸着体の製造法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP3118365A JPH0640899B2 (ja) 1991-05-23 1991-05-23 吸着体の製造法

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP58187365A Division JPS6077769A (ja) 1982-12-02 1983-10-05 吸着体の製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH04227268A JPH04227268A (ja) 1992-08-17
JPH0640899B2 true JPH0640899B2 (ja) 1994-06-01

Family

ID=14734904

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP3118365A Expired - Lifetime JPH0640899B2 (ja) 1991-05-23 1991-05-23 吸着体の製造法

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JPH0640899B2 (ja)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5691233B2 (ja) * 2010-04-23 2015-04-01 Jnc株式会社 結晶性セルロースの溶解方法及び多孔性セルロースの製造方法
WO2014038686A1 (ja) * 2012-09-10 2014-03-13 株式会社カネカ 吸着体

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6256782A (ja) * 1985-09-05 1987-03-12 Mitsubishi Heavy Ind Ltd セパレ−ト型熱交換システム

Also Published As

Publication number Publication date
JPH04227268A (ja) 1992-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5401415A (en) Adsorption material for the selective removal of LDL and/or vLDL and method of using therefor
EP0476721B1 (en) A method for removing serum amyloid protein
EP0225867B1 (en) Adsorbent and process for preparing the same
US5216127A (en) Adsorbent for serum amyloid protein
JPH0434451B2 (ja)
JP4578405B2 (ja) 全血処理が可能な低密度リポ蛋白およびフィブリノーゲンの吸着材、及び吸着器
EP1507563B1 (en) Endotoxin-binding ligands and their use
NZ213819A (en) Lipoprotein adsorbent using hydroxy-containing polymer gel
JPS6319214B2 (ja)
JP2928589B2 (ja) 変性ldlの吸着体およびそれを用いる変性ldlの除去装置
JPH0518625B2 (ja)
JPH0640899B2 (ja) 吸着体の製造法
JPS59193135A (ja) 吸着体
JP2649224B2 (ja) 体液処理装置の滅菌方法および滅菌された体液処理装置
JP2732252B2 (ja) ヘモグロビン選択吸着剤
JPH0611333B2 (ja) 免疫複合体の吸着体およびそれを用いた免疫複合体の除去装置
JPH0471551B2 (ja)
JPS6256782B2 (ja)
JPH035822B2 (ja)
JP2925249B2 (ja) コレステロールの除去方法
JP2726662B2 (ja) 吸着体およびそれを用いた除去装置
JPH024301B2 (ja)
JPH01158970A (ja) 直接血液潅流用免疫グロブリン吸着材および吸着装置
US7348294B2 (en) Adsorbent and method for adsorbing cardiac glycoside
JPH0126709B2 (ja)