JPH1149796A - シクロエルゴスタン誘導体 - Google Patents
シクロエルゴスタン誘導体Info
- Publication number
- JPH1149796A JPH1149796A JP21893997A JP21893997A JPH1149796A JP H1149796 A JPH1149796 A JP H1149796A JP 21893997 A JP21893997 A JP 21893997A JP 21893997 A JP21893997 A JP 21893997A JP H1149796 A JPH1149796 A JP H1149796A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cycloergostane
- derivative
- formula
- emesterone
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 病原性を有する真菌に対して抗菌活性をもつ
新規物質の提供。 【解決手段】 エメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属
に属する微生物を培養して得られる下記式（Ｉ）で示さ
れるシクロエルゴスタン誘導体およびその製造方法。 【化１】 ［式中、Ｒ1は水素原子を、Ｒ2は水酸基をそれぞれ表す
か、あるいはＲ1およびＲ2は一緒になって単結合を表
す。］
新規物質の提供。 【解決手段】 エメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属
に属する微生物を培養して得られる下記式（Ｉ）で示さ
れるシクロエルゴスタン誘導体およびその製造方法。 【化１】 ［式中、Ｒ1は水素原子を、Ｒ2は水酸基をそれぞれ表す
か、あるいはＲ1およびＲ2は一緒になって単結合を表
す。］
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、抗真菌作用を有す
るシクロエルゴスタン誘導体およびその製造方法に関す
る。
るシクロエルゴスタン誘導体およびその製造方法に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】従来より抗真菌性物質として、アンフォ
テリシンＢ、ナイスタチン、トリコマイシン等のポリエ
ン系物質、ミコナゾール、ケトコナゾール等のイミダゾ
ール系物質、フルコナゾール等のトリアゾール系物質が
知られていたが、これらの抗真菌性物質は、選択毒性、
薬効等において問題があり真菌感染症の治療剤として未
だ十分であるとは言えない。さらに高齢者や基礎疾患を
有する患者に発症がみられる、日和見感染としての深在
性真菌症であるアスペルギルス症に対しては有効な治療
法がなく、感染症治療分野で大きな問題となっている。
テリシンＢ、ナイスタチン、トリコマイシン等のポリエ
ン系物質、ミコナゾール、ケトコナゾール等のイミダゾ
ール系物質、フルコナゾール等のトリアゾール系物質が
知られていたが、これらの抗真菌性物質は、選択毒性、
薬効等において問題があり真菌感染症の治療剤として未
だ十分であるとは言えない。さらに高齢者や基礎疾患を
有する患者に発症がみられる、日和見感染としての深在
性真菌症であるアスペルギルス症に対しては有効な治療
法がなく、感染症治療分野で大きな問題となっている。
【０００３】一方、抗真菌作用を有するシクロエルゴス
タン誘導体としてＭｅｒ−ＮＦ８０５４ＡおよびＭｅｒ
−ＮＦ８０５４Ｘ（特開平６−１４５１９４号）が開示
されているが、その抗真菌活性は満足できるものではな
い。
タン誘導体としてＭｅｒ−ＮＦ８０５４ＡおよびＭｅｒ
−ＮＦ８０５４Ｘ（特開平６−１４５１９４号）が開示
されているが、その抗真菌活性は満足できるものではな
い。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】従って本発明は、この
ような問題を克服するため、病原性を有する真菌に対し
て抗菌力を有する新規なシクロエルゴスタン誘導体およ
びその製造方法を提供するものである。
ような問題を克服するため、病原性を有する真菌に対し
て抗菌力を有する新規なシクロエルゴスタン誘導体およ
びその製造方法を提供するものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、新規な抗
真菌性物質の探索を目的としてカビ類の生産する代謝産
物について研究を重ねた結果、エメリセラ（Ｅｍｅｒｉ
ｃｅｌｌａ）属に属する菌株が、その培養液中にアスペ
ルギルス症の原因菌であるアスペルギルス・フミガタス
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）に対
して抗菌活性を示す物質を複数生産していることを見出
した。その培養液から有効物質を分離精製し、その理化
学的性質を調べたところ、それらの有効物質は、いかな
る既知物質とも相違し、かつ優れた抗真菌活性を有する
ことを見出し、本発明を完成した。
真菌性物質の探索を目的としてカビ類の生産する代謝産
物について研究を重ねた結果、エメリセラ（Ｅｍｅｒｉ
ｃｅｌｌａ）属に属する菌株が、その培養液中にアスペ
ルギルス症の原因菌であるアスペルギルス・フミガタス
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）に対
して抗菌活性を示す物質を複数生産していることを見出
した。その培養液から有効物質を分離精製し、その理化
学的性質を調べたところ、それらの有効物質は、いかな
る既知物質とも相違し、かつ優れた抗真菌活性を有する
ことを見出し、本発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は、下記の理化学的性質
を有するシクロエルゴスタン誘導体を提供するものであ
る。
を有するシクロエルゴスタン誘導体を提供するものであ
る。
【化５】 但し、Ｒ1は水素原子をＲ2は水酸基をそれぞれ表すか、
あるいはＲ1およびＲ2は一緒になって単結合を表す。
あるいはＲ1およびＲ2は一緒になって単結合を表す。
【０００７】より具体的には、下記式（Ｉ−Ａ）で示さ
れる誘導体、
れる誘導体、
【化６】
【０００８】および下記式（Ｉ−Ｂ）で示される誘導
体、
体、
【化７】 を提供するものである。
【０００９】なお、本発明者らは、式（Ｉ−Ａ）で示さ
れる誘導体をエメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅ
Ａ）、式（Ｉ−Ｂ）で示される誘導体をエメステロンＢ
（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）とそれぞれ命名した。以
後、本明細書において各誘導体を上記名称を用いて説明
する。
れる誘導体をエメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅ
Ａ）、式（Ｉ−Ｂ）で示される誘導体をエメステロンＢ
（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）とそれぞれ命名した。以
後、本明細書において各誘導体を上記名称を用いて説明
する。
【００１０】また本発明は、エメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃ
ｅｌｌａ）属に属し、式（Ｉ）で示されるシクロエルゴ
スタン誘導体を生産する能力を有する微生物を培養し、
培養物からこれらシクロエルゴスタン誘導体を採取す
る、式（Ｉ）で示されるシクロエルゴスタン誘導体の製
造方法を提供するものである。
ｅｌｌａ）属に属し、式（Ｉ）で示されるシクロエルゴ
スタン誘導体を生産する能力を有する微生物を培養し、
培養物からこれらシクロエルゴスタン誘導体を採取す
る、式（Ｉ）で示されるシクロエルゴスタン誘導体の製
造方法を提供するものである。
【００１１】さらに本発明は、式（ＩＩ）で示されるシ
クロエルゴスタン誘導体Ｍｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘを、酸
化剤を用いて酸化する式（Ｉ−Ａ）で示されるエメステ
ロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）の製造方法およびエ
メステロンＡを脱水剤を用いて脱水する式（Ｉ−Ｂ）で
示されるエメステロンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）の
製造方法を提供するものである。
クロエルゴスタン誘導体Ｍｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘを、酸
化剤を用いて酸化する式（Ｉ−Ａ）で示されるエメステ
ロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）の製造方法およびエ
メステロンＡを脱水剤を用いて脱水する式（Ｉ−Ｂ）で
示されるエメステロンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）の
製造方法を提供するものである。
【００１２】
【化８】
【００１３】
【化９】
【００１４】本発明に使用される微生物は、エメリセラ
（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属に属し、式（Ｉ）で示され
るシクロエルゴスタン誘導体を生産する能力を有する菌
株であればよく、例えば、エメリセラ・ヘテロタリカ
（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ ｈｅｔｅｒｏｔｈａｌｌｉｃ
ａ）ＡＴＣＣ１６８２４株を挙げることができるが、こ
の菌株に限らず、エメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）
属に属し、式（Ｉ）で示されるシクロエルゴスタン誘導
体を生産できる菌株であれば、それらの変異株も含めて
すべて本発明に使用することができる。
（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属に属し、式（Ｉ）で示され
るシクロエルゴスタン誘導体を生産する能力を有する菌
株であればよく、例えば、エメリセラ・ヘテロタリカ
（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ ｈｅｔｅｒｏｔｈａｌｌｉｃ
ａ）ＡＴＣＣ１６８２４株を挙げることができるが、こ
の菌株に限らず、エメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）
属に属し、式（Ｉ）で示されるシクロエルゴスタン誘導
体を生産できる菌株であれば、それらの変異株も含めて
すべて本発明に使用することができる。
【００１５】本発明のシクロエルゴスタン誘導体は上記
菌株を栄養培地に接種し、好気的に培養することにより
製造される。上記菌株の培養方法は、原則的には一般微
生物の培養方法に準ずるが、通常は液体培養による靜置
培養を行うのが好適である。
菌株を栄養培地に接種し、好気的に培養することにより
製造される。上記菌株の培養方法は、原則的には一般微
生物の培養方法に準ずるが、通常は液体培養による靜置
培養を行うのが好適である。
【００１６】培養に用いられる培地としては、エメリセ
ラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属に属する微生物が利用で
きる栄養源を含有する培地であればよく、各種の合成培
地、半合成培地、天然培地などいずれも用いることがで
きる。培地組成としては炭素源としてのグルコース、シ
ュークロース、フルクトース、グリセリン、デキストリ
ン、澱粉、糖蜜などを単独又は組合わせて用いることが
できる。窒素源としてはファーマメディア、ペプトン、
肉エキス、大豆粉、カゼイン、アミノ酸、酵母エキス、
尿素などの有機窒素源、硝酸ナトリウム、硫酸アンモニ
ウムなどの無機窒素源を単独又は組合わせて用いること
ができる。その他、塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭
酸カルシウム、硫酸マグネシウム、リン酸ナトリウム、
リン酸カリウム、塩化コバルトなどの塩類、重金属類
塩、ビタミンＢ、ビオチンなどのビタミン類も必要に応
じて添加することができる。
ラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属に属する微生物が利用で
きる栄養源を含有する培地であればよく、各種の合成培
地、半合成培地、天然培地などいずれも用いることがで
きる。培地組成としては炭素源としてのグルコース、シ
ュークロース、フルクトース、グリセリン、デキストリ
ン、澱粉、糖蜜などを単独又は組合わせて用いることが
できる。窒素源としてはファーマメディア、ペプトン、
肉エキス、大豆粉、カゼイン、アミノ酸、酵母エキス、
尿素などの有機窒素源、硝酸ナトリウム、硫酸アンモニ
ウムなどの無機窒素源を単独又は組合わせて用いること
ができる。その他、塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭
酸カルシウム、硫酸マグネシウム、リン酸ナトリウム、
リン酸カリウム、塩化コバルトなどの塩類、重金属類
塩、ビタミンＢ、ビオチンなどのビタミン類も必要に応
じて添加することができる。
【００１７】培養条件は、上記菌株が良好に生育して本
発明のシクロエルゴスタン誘導体を生産し得る範囲内で
適宜選択すればよい。例えば、培地のｐＨは、６〜８程
度、通常中性付近とすることが好ましい。培養温度は、
微生物が良好に生育する温度、通常２５〜３０℃、好ま
しくは２７〜２８℃に保つのがよい。培養時間は、１０
〜２８日間程度でよく、好ましくは１４〜２１日間であ
る。もちろん上述した各種の培養条件は、使用微生物の
種類や特性、外部条件などに応じて適宜変更でき、また
それに応じて上記範囲から最適条件を選択、調整でき
る。
発明のシクロエルゴスタン誘導体を生産し得る範囲内で
適宜選択すればよい。例えば、培地のｐＨは、６〜８程
度、通常中性付近とすることが好ましい。培養温度は、
微生物が良好に生育する温度、通常２５〜３０℃、好ま
しくは２７〜２８℃に保つのがよい。培養時間は、１０
〜２８日間程度でよく、好ましくは１４〜２１日間であ
る。もちろん上述した各種の培養条件は、使用微生物の
種類や特性、外部条件などに応じて適宜変更でき、また
それに応じて上記範囲から最適条件を選択、調整でき
る。
【００１８】培養中のシクロエルゴスタン誘導体の蓄積
量は、検定菌として、例えばアスペルギルス・フミガタ
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）を
用いた液体培養による抗菌力アッセイにより定量でき
る。上記培養液中に蓄積されたシクロエルゴスタン誘導
体は、濾過、遠心分離等の一般的固液分離手段によって
菌体を分離し、濾液および上澄液からの抽出により、回
収可能である。
量は、検定菌として、例えばアスペルギルス・フミガタ
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）を
用いた液体培養による抗菌力アッセイにより定量でき
る。上記培養液中に蓄積されたシクロエルゴスタン誘導
体は、濾過、遠心分離等の一般的固液分離手段によって
菌体を分離し、濾液および上澄液からの抽出により、回
収可能である。
【００１９】本発明のシクロエルゴスタン誘導体の分
離、精製は、公知の種々の方法を選択、組み合わせて行
うことができる。例えば、酢酸エチル、ｎ−ブタノール
等を用いた溶媒抽出や、アンバーライトＸＡＤ（ローム
・アンド・ハース社製）、ダイヤイオンＨＰ−２０（三
菱化学社製）等のポリスチレン系吸着樹脂、シリカゲ
ル、アルミナ、活性炭などの担体を用いるカラムクロマ
トグラフィーによる方法を用いることができる。これら
の担体から目的物質を溶出させる方法は、担体の種類、
性質によって異なるが、一例として、ポリスチレン系吸
着樹脂の場合には、溶出溶媒として、含水アルコール、
含水アセトン等を用いることができる。さらにセファデ
ックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）、バイオ・ゲル
Ｐ−２（バイオ・ラッド社製）等によるゲル濾過、シリ
カゲル、アルミナ等による薄層クロマトグラフィー、順
相あるいは逆相カラムを用いた分取用高速液体クロマト
グラフィー（分取ＨＰＬＣ）等を用いることができ、こ
れらの方法を単独または適宜組合せて、場合によっては
反復使用することにより、分離、精製することができ
る。
離、精製は、公知の種々の方法を選択、組み合わせて行
うことができる。例えば、酢酸エチル、ｎ−ブタノール
等を用いた溶媒抽出や、アンバーライトＸＡＤ（ローム
・アンド・ハース社製）、ダイヤイオンＨＰ−２０（三
菱化学社製）等のポリスチレン系吸着樹脂、シリカゲ
ル、アルミナ、活性炭などの担体を用いるカラムクロマ
トグラフィーによる方法を用いることができる。これら
の担体から目的物質を溶出させる方法は、担体の種類、
性質によって異なるが、一例として、ポリスチレン系吸
着樹脂の場合には、溶出溶媒として、含水アルコール、
含水アセトン等を用いることができる。さらにセファデ
ックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）、バイオ・ゲル
Ｐ−２（バイオ・ラッド社製）等によるゲル濾過、シリ
カゲル、アルミナ等による薄層クロマトグラフィー、順
相あるいは逆相カラムを用いた分取用高速液体クロマト
グラフィー（分取ＨＰＬＣ）等を用いることができ、こ
れらの方法を単独または適宜組合せて、場合によっては
反復使用することにより、分離、精製することができ
る。
【００２０】以上のようにして得られるシクロエルゴス
タン誘導体のうち、エメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏ
ｎｅＡ）は、以下に示す物理化学的性質を有する。 （１）外観：白色結晶性粉末 （２）融点：１０８〜１０９℃（アセトン−ヘキサン混
合溶媒から結晶化） （３）比旋光度：［α］D 20 ＋１７５°（ｃ ０．１
３５、クロロホルム） （４）分子式：Ｃ28Ｈ40Ｏ5 （５）マススペクトル（ＥＩ−ＭＳ）： 実測値；４５
６．２８８３、計算値;４５６．２８７６（Ｃ28Ｈ40Ｏ5
として）
タン誘導体のうち、エメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏ
ｎｅＡ）は、以下に示す物理化学的性質を有する。 （１）外観：白色結晶性粉末 （２）融点：１０８〜１０９℃（アセトン−ヘキサン混
合溶媒から結晶化） （３）比旋光度：［α］D 20 ＋１７５°（ｃ ０．１
３５、クロロホルム） （４）分子式：Ｃ28Ｈ40Ｏ5 （５）マススペクトル（ＥＩ−ＭＳ）： 実測値；４５
６．２８８３、計算値;４５６．２８７６（Ｃ28Ｈ40Ｏ5
として）
【００２１】（６）ＵＶ吸収スペクトル クロロホルム中で測定した極大吸収は、下記のとおりで
ある（単位：ｎｍ）。λｍａｘ（ｌｏｇε）：２４５．
０（４．３４） （７）ＩＲ吸収スペクトル 臭化カリウム錠剤で測定した特徴的な吸収は、下記のと
おりである（単位：ｃｍ-1）。 νｍａｘ：３４５０、２９６０、１７１０ （８）円偏光２色性 クロロホルム中で測定した結果は、下記のとおりであ
る。 ＣＤΔε（ｎｍ）：＋８．５（３０３）、＋５．２（２
７７）、−８．０（２４１）、−８．２（２３４）、＋
５．４（２１５）
ある（単位：ｎｍ）。λｍａｘ（ｌｏｇε）：２４５．
０（４．３４） （７）ＩＲ吸収スペクトル 臭化カリウム錠剤で測定した特徴的な吸収は、下記のと
おりである（単位：ｃｍ-1）。 νｍａｘ：３４５０、２９６０、１７１０ （８）円偏光２色性 クロロホルム中で測定した結果は、下記のとおりであ
る。 ＣＤΔε（ｎｍ）：＋８．５（３０３）、＋５．２（２
７７）、−８．０（２４１）、−８．２（２３４）、＋
５．４（２１５）
【００２２】（９）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００Ｍ
Ｈｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：０．８６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７
Ｈｚ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．
９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），１．０１（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０５（１Ｈ，ｍ），１．１
９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，６．４Ｈｚ），
１．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，３．９Ｈ
ｚ），１．３４（３Ｈ，ｓ），１．５５（１Ｈ，ｍ），
１．５９（１Ｈ，ｍ），１．６７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝
８．９Ｈｚ，４．５Ｈｚ，３．４Ｈｚ），１．７８（１
Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，８．９Ｈｚ，４．９Ｈ
ｚ），１．８６（１Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，
８．４Ｈｚ，７．６Ｈｚ，３．９Ｈｚ），２．１５（１
Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，７．３Ｈｚ，６．４
Ｈｚ，３．９Ｈｚ），２．２３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１
４．３Ｈｚ，７．３Ｈｚ，４．９Ｈｚ），２．３８（１
Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，７．６Ｈｚ，４．５Ｈ
ｚ），２．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），２．
４１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，８．９Ｈｚ，
３．９Ｈｚ），２．４２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．３
Ｈｚ，８．９Ｈｚ，４．２Ｈｚ），２．４４（１Ｈ，ｄ
ｄｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，７．３Ｈｚ，７．３Ｈｚ），
２．５９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，８．９Ｈ
ｚ，４．２Ｈｚ），２．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．８
Ｈｚ），２．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ），
２．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），３．７５
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１．５Ｈｚ），４．
１６（１Ｈ，ｓ），４．５３（１Ｈ，ｓ），５．６３
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），６．２６（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ）
Ｈｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：０．８６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７
Ｈｚ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．
９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），１．０１（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０５（１Ｈ，ｍ），１．１
９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，６．４Ｈｚ），
１．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，３．９Ｈ
ｚ），１．３４（３Ｈ，ｓ），１．５５（１Ｈ，ｍ），
１．５９（１Ｈ，ｍ），１．６７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝
８．９Ｈｚ，４．５Ｈｚ，３．４Ｈｚ），１．７８（１
Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，８．９Ｈｚ，４．９Ｈ
ｚ），１．８６（１Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，
８．４Ｈｚ，７．６Ｈｚ，３．９Ｈｚ），２．１５（１
Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，７．３Ｈｚ，６．４
Ｈｚ，３．９Ｈｚ），２．２３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１
４．３Ｈｚ，７．３Ｈｚ，４．９Ｈｚ），２．３８（１
Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，７．６Ｈｚ，４．５Ｈ
ｚ），２．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），２．
４１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，８．９Ｈｚ，
３．９Ｈｚ），２．４２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．３
Ｈｚ，８．９Ｈｚ，４．２Ｈｚ），２．４４（１Ｈ，ｄ
ｄｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，７．３Ｈｚ，７．３Ｈｚ），
２．５９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，８．９Ｈ
ｚ，４．２Ｈｚ），２．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．８
Ｈｚ），２．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ），
２．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），３．７５
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１．５Ｈｚ），４．
１６（１Ｈ，ｓ），４．５３（１Ｈ，ｓ），５．６３
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），６．２６（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ）
【００２３】（１０）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５
ＭＨｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：９．４，１０．３，１４．２，２
１．０，２１．０，２５．４，２９．３，３０．６，３
２．８，３６．９，３６．９２，３７．１３，４２．４
６，４３．４２，４６．６１，５１．３２，５２．１，
５４．７，５５．３，７２．１，７５．４，７９．９，
１２３．８，１２５．２，１３１．６，１５２．７，２
０６．９，２１２．０
ＭＨｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：９．４，１０．３，１４．２，２
１．０，２１．０，２５．４，２９．３，３０．６，３
２．８，３６．９，３６．９２，３７．１３，４２．４
６，４３．４２，４６．６１，５１．３２，５２．１，
５４．７，５５．３，７２．１，７５．４，７９．９，
１２３．８，１２５．２，１３１．６，１５２．７，２
０６．９，２１２．０
【００２４】またエメステロンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎ
ｅＢ）は、以下に示す物理化学的性質を有する。 （１）外観：白色結晶性粉末 （２）融点：１０５〜１０６℃（アセトン−ヘキサン混
合溶媒から結晶化） （３）比旋光度：［α］D 20 ＋４１６°（ｃ ０．０
８５、クロロホルム） （４）分子式：Ｃ28Ｈ38Ｏ4 （５）マススペクトル（ＥＩ−ＭＳ）： 実測値；４３
８．２７６４、計算値；４３８．２７６９（Ｃ28Ｈ38Ｏ
4として）
ｅＢ）は、以下に示す物理化学的性質を有する。 （１）外観：白色結晶性粉末 （２）融点：１０５〜１０６℃（アセトン−ヘキサン混
合溶媒から結晶化） （３）比旋光度：［α］D 20 ＋４１６°（ｃ ０．０
８５、クロロホルム） （４）分子式：Ｃ28Ｈ38Ｏ4 （５）マススペクトル（ＥＩ−ＭＳ）： 実測値；４３
８．２７６４、計算値；４３８．２７６９（Ｃ28Ｈ38Ｏ
4として）
【００２５】（６）ＵＶ吸収スペクトル クロロホルム中で測定した極大吸収は、下記のとおりで
ある（単位：ｎｍ）。 λｍａｘ（ｌｏｇε）：３３７．２（４．３６）、２２
０．６（４．１０） （７）ＩＲ吸収スペクトル 臭化カリウム錠剤法で測定した特徴的な吸収は、下記の
とおりである（単位：ｃｍ-1）。 νｍａｘ：３４５０、２９６０、１７１０、１６５０、
１５９０ （８）円偏光２色性 クロロホルム中で測定した結果は、下記のとおりであ
る。 ＣＤΔε（ｎｍ）：＋９．１（３７０）、−８．２（３
３３）、＋２１．８（３０５）、−２．０（２５２）、
−３．９（２３２）、−１０．３（２１８）
ある（単位：ｎｍ）。 λｍａｘ（ｌｏｇε）：３３７．２（４．３６）、２２
０．６（４．１０） （７）ＩＲ吸収スペクトル 臭化カリウム錠剤法で測定した特徴的な吸収は、下記の
とおりである（単位：ｃｍ-1）。 νｍａｘ：３４５０、２９６０、１７１０、１６５０、
１５９０ （８）円偏光２色性 クロロホルム中で測定した結果は、下記のとおりであ
る。 ＣＤΔε（ｎｍ）：＋９．１（３７０）、−８．２（３
３３）、＋２１．８（３０５）、−２．０（２５２）、
−３．９（２３２）、−１０．３（２１８）
【００２６】（９）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００Ｍ
Ｈｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：０．８６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７
Ｈｚ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．
９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．９９（１Ｈ，
ｍ），１．０５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．３
６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，３．１Ｈｚ），
１．４１（３Ｈ，ｓ），１．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
０．７Ｈｚ，７．０Ｈｚ），１．５６（１Ｈ，ｄｑｑ，
Ｊ＝６．７Ｈｚ，６．４Ｈｚ，６．４Ｈｚ），１．６８
（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，６．４Ｈｚ，５．
５Ｈｚ），１．７１（１Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．１Ｈ
ｚ，９．２Ｈｚ，４．２Ｈｚ，３．７Ｈｚ），１．８４
（１Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，８．５Ｈｚ，
６．１Ｈｚ，４．０Ｈｚ），２．１７（１Ｈ，ｄｄｄ，
Ｊ＝１１．９Ｈｚ，６．８Ｈｚ，６．１Ｈｚ），２．１
９（１Ｈ，ｍ），２．３７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．５
Ｈｚ，８．３Ｈｚ，４．２Ｈｚ），２．４４（１Ｈ，ｄ
ｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，６．８Ｈｚ，５．５Ｈｚ），
２．４６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，９．２Ｈ
ｚ，６．１Ｈｚ），２．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８
Ｈｚ），２．５２（１Ｈ，ｍ），２．５７（１Ｈ，ｄｄ
ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，４．０Ｈｚ，３．７Ｈｚ），
２．６１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，６．４Ｈ
ｚ，６．１Ｈｚ），２．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８
Ｈｚ），３．２６（１Ｈ，ｂｒ），３．７８（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１．５Ｈｚ），５．７１（１
Ｈ，ｓ），６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），
６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ）
Ｈｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：０．８６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７
Ｈｚ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．
９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．９９（１Ｈ，
ｍ），１．０５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．３
６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，３．１Ｈｚ），
１．４１（３Ｈ，ｓ），１．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
０．７Ｈｚ，７．０Ｈｚ），１．５６（１Ｈ，ｄｑｑ，
Ｊ＝６．７Ｈｚ，６．４Ｈｚ，６．４Ｈｚ），１．６８
（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，６．４Ｈｚ，５．
５Ｈｚ），１．７１（１Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．１Ｈ
ｚ，９．２Ｈｚ，４．２Ｈｚ，３．７Ｈｚ），１．８４
（１Ｈ，ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，８．５Ｈｚ，
６．１Ｈｚ，４．０Ｈｚ），２．１７（１Ｈ，ｄｄｄ，
Ｊ＝１１．９Ｈｚ，６．８Ｈｚ，６．１Ｈｚ），２．１
９（１Ｈ，ｍ），２．３７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．５
Ｈｚ，８．３Ｈｚ，４．２Ｈｚ），２．４４（１Ｈ，ｄ
ｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，６．８Ｈｚ，５．５Ｈｚ），
２．４６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，９．２Ｈ
ｚ，６．１Ｈｚ），２．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８
Ｈｚ），２．５２（１Ｈ，ｍ），２．５７（１Ｈ，ｄｄ
ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，４．０Ｈｚ，３．７Ｈｚ），
２．６１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，６．４Ｈ
ｚ，６．１Ｈｚ），２．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８
Ｈｚ），３．２６（１Ｈ，ｂｒ），３．７８（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１．５Ｈｚ），５．７１（１
Ｈ，ｓ），６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），
６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ）
【００２７】（１０）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５
ＭＨｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：９．４７，１０．７，２１．０，
２１．０，２１．１，２５．７，２９．５，３０．６，
３０．９，３４．１，３６．６，３８．４，４２．４，
４４．０，４６．４，５１．１，５５．４，５５．６，
７２．４，７５．９，１２１．９，１２６．２，１２
８．２，１３０．８，１５３．７，１６１．６，１９
８．２，２１１．７
ＭＨｚ） 重クロロホルム中で測定した主要なピークは下記のとお
りである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：９．４７，１０．７，２１．０，
２１．０，２１．１，２５．７，２９．５，３０．６，
３０．９，３４．１，３６．６，３８．４，４２．４，
４４．０，４６．４，５１．１，５５．４，５５．６，
７２．４，７５．９，１２１．９，１２６．２，１２
８．２，１３０．８，１５３．７，１６１．６，１９
８．２，２１１．７
【００２８】また本発明のシクロエルゴスタン誘導体
は、上記したとおり微生物の培養液から採取することが
できるが、化学合成法によっても製造することができ
る。本発明のシクロエルゴスタン誘導体のうち、エメス
テロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）は、式（ＩＩ）で
示されるシクロエルゴスタン誘導体Ｍｅｒ−ＮＦ８０５
４Ｘをジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ト
ルエン、アセトニトリル、アセトン、酢酸、ジメチルホ
ルムアミドなどの不活性溶媒中、ピリジニウムクロロク
ロメート、ピリジニウムジクロメート、クロム酸、二ク
ロム酸ナトリウム、二酸化マンガン、四酸化ルテニウ
ム、ヂィス・マーチン試薬、ジョーンズ試薬、コリンズ
試薬、ジメチルスルホキシド−オキザリルクロライド、
ジメチルスルホキシド−ジシクロヘキシルカルボジイミ
ドなどの酸化剤を用いてＭｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘの３位
水酸基を選択的に酸化することにより製造することがで
きる。
は、上記したとおり微生物の培養液から採取することが
できるが、化学合成法によっても製造することができ
る。本発明のシクロエルゴスタン誘導体のうち、エメス
テロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）は、式（ＩＩ）で
示されるシクロエルゴスタン誘導体Ｍｅｒ−ＮＦ８０５
４Ｘをジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ト
ルエン、アセトニトリル、アセトン、酢酸、ジメチルホ
ルムアミドなどの不活性溶媒中、ピリジニウムクロロク
ロメート、ピリジニウムジクロメート、クロム酸、二ク
ロム酸ナトリウム、二酸化マンガン、四酸化ルテニウ
ム、ヂィス・マーチン試薬、ジョーンズ試薬、コリンズ
試薬、ジメチルスルホキシド−オキザリルクロライド、
ジメチルスルホキシド−ジシクロヘキシルカルボジイミ
ドなどの酸化剤を用いてＭｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘの３位
水酸基を選択的に酸化することにより製造することがで
きる。
【００２９】溶媒と酸化剤の組合わせ、反応温度、反応
時間などの反応条件は、目的とするエメステロンＡ（ｅ
ｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）が好収率で得られるよう、適宜
選択すればよい。例えば、ジクロロメタン溶媒中、酸化
剤としてピリジニウムクロロクロメートを原料化合物１
モルに対して０．３〜１．５モル加え、−７８〜２５℃
で０．５〜３時間反応させると、副反応が少なく、目的
とするエメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）を好
収率で得ることができる。
時間などの反応条件は、目的とするエメステロンＡ（ｅ
ｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）が好収率で得られるよう、適宜
選択すればよい。例えば、ジクロロメタン溶媒中、酸化
剤としてピリジニウムクロロクロメートを原料化合物１
モルに対して０．３〜１．５モル加え、−７８〜２５℃
で０．５〜３時間反応させると、副反応が少なく、目的
とするエメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）を好
収率で得ることができる。
【００３０】なお、原料となる式（ＩＩ）で示されるシ
クロエルゴスタン誘導体は、特開平６−１４５１９４号
公報に開示されているとおり、アスペルギルス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ）属に属する微生物の培養液、あるい
は後述するエメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属に属
する微生物の培養液から、それぞれ抽出精製して得るこ
とができる。
クロエルゴスタン誘導体は、特開平６−１４５１９４号
公報に開示されているとおり、アスペルギルス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ）属に属する微生物の培養液、あるい
は後述するエメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属に属
する微生物の培養液から、それぞれ抽出精製して得るこ
とができる。
【００３１】さらに本発明のシクロエルゴスタン誘導体
のうち、エメステロンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）
は、エメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）をアセ
トン、メタノール、テトラヒドロフラン、ジメチルホル
ムアミド、ジオキサンなどの有機溶媒中、塩化カルシウ
ム、モレキュラシーブなどの脱水剤およびトシル酸、メ
タンスルホン酸、塩酸、硫酸、トリフルオロボラン−エ
ーテル錯体、塩化スズ、四塩化チタンなどの酸触媒を用
いて５位の水酸基を脱水することにより製造することが
できる。溶媒、脱水剤および酸触媒の組合わせ、反応温
度、反応時間などの反応条件は、目的とするエメステロ
ンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）が好収率で得られるよ
う、適宜選択すればよい。例えば、アセトン溶媒中、脱
水剤として塩化カルシウムおよび酸触媒としてトシル酸
を原料化合物１モルに対して、それぞれ１〜１００モル
および０．０１〜１モル加え、０〜１２０℃で０．５〜
２時間還流させると目的とするエメステロンＢ（ｅｍｅ
ｓｔｅｒｏｎｅＢ）を好収率で得ることができる。
のうち、エメステロンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）
は、エメステロンＡ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＡ）をアセ
トン、メタノール、テトラヒドロフラン、ジメチルホル
ムアミド、ジオキサンなどの有機溶媒中、塩化カルシウ
ム、モレキュラシーブなどの脱水剤およびトシル酸、メ
タンスルホン酸、塩酸、硫酸、トリフルオロボラン−エ
ーテル錯体、塩化スズ、四塩化チタンなどの酸触媒を用
いて５位の水酸基を脱水することにより製造することが
できる。溶媒、脱水剤および酸触媒の組合わせ、反応温
度、反応時間などの反応条件は、目的とするエメステロ
ンＢ（ｅｍｅｓｔｅｒｏｎｅＢ）が好収率で得られるよ
う、適宜選択すればよい。例えば、アセトン溶媒中、脱
水剤として塩化カルシウムおよび酸触媒としてトシル酸
を原料化合物１モルに対して、それぞれ１〜１００モル
および０．０１〜１モル加え、０〜１２０℃で０．５〜
２時間還流させると目的とするエメステロンＢ（ｅｍｅ
ｓｔｅｒｏｎｅＢ）を好収率で得ることができる。
【００３２】上述した方法に従い製造することのできる
本発明のシクロエルゴスタン誘導体は、アスペルギルス
症の原因菌であるアスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）の生育を低濃
度で抑制する。表１に本発明のシクロエルゴスタン誘導
体の病原性真菌に対する増殖抑制効果を示す。表１は、
アスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＦＭ４９４２の胞子懸濁液を
含む平板（グルコース０．５％、ｙｅａｓｔｎｉｔｒｏ
ｇｅｎ ｂａｓｅ（ＤＩＦＣＯ社製）６．７％、アガロ
ース１％、ｐＨ６．４）にシクロエルゴスタン誘導体の
メタノール溶液を染み込ませたペーパーデイスクをの
せ、３５℃で２０時間培養し、阻止円の大きさ（直径）
を観察した結果をまとめたものである。
本発明のシクロエルゴスタン誘導体は、アスペルギルス
症の原因菌であるアスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）の生育を低濃
度で抑制する。表１に本発明のシクロエルゴスタン誘導
体の病原性真菌に対する増殖抑制効果を示す。表１は、
アスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ＩＦＭ４９４２の胞子懸濁液を
含む平板（グルコース０．５％、ｙｅａｓｔｎｉｔｒｏ
ｇｅｎ ｂａｓｅ（ＤＩＦＣＯ社製）６．７％、アガロ
ース１％、ｐＨ６．４）にシクロエルゴスタン誘導体の
メタノール溶液を染み込ませたペーパーデイスクをの
せ、３５℃で２０時間培養し、阻止円の大きさ（直径）
を観察した結果をまとめたものである。
【００３３】
【表１】
【００３４】表１から明らかなように、本発明のシクロ
エルゴスタン誘導体は、アスペルギルス症の原因菌であ
るアスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）の生育を低濃度で抑制した。し
かも後述する実施例で示すように培養細胞に対する毒性
がほとんどないという優れた性質を有している。
エルゴスタン誘導体は、アスペルギルス症の原因菌であ
るアスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）の生育を低濃度で抑制した。し
かも後述する実施例で示すように培養細胞に対する毒性
がほとんどないという優れた性質を有している。
【００３５】
【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に
説明するが、これによって本発明が限定されるものでは
ない。なお、培地におけるパーセント(％)は、特に断り
のない限り、重量／容量パーセントを示す。
説明するが、これによって本発明が限定されるものでは
ない。なお、培地におけるパーセント(％)は、特に断り
のない限り、重量／容量パーセントを示す。
【００３６】実施例１ （１）培養 エメリセラ・ヘテロタリカ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ ｈ
ｅｔｅｒｏｔｈａｌｌｉｃａ）ＡＴＣＣ１６８２４株の
斜面培地（ポテト・デキストロース寒天培地）に種培地
（スクロース３％、酵母エキス０．１％、硝酸ナトリウ
ム０．６％、リン酸二水素カリウム０．１％、硫酸マグ
ネシウム五水和物０．０５％、塩化カリウム０．０５
％、硫酸第一鉄０．００１％）を５ｍｌ添加し、菌体を
均一に分散し種培養とした。この種培養液を上記と同じ
組成の培地６０リットルを含む１０００ｍｌ容のルーフ
ラスコ２４０本に接種し、２７℃で２１日間靜置培養を
行なった。
ｅｔｅｒｏｔｈａｌｌｉｃａ）ＡＴＣＣ１６８２４株の
斜面培地（ポテト・デキストロース寒天培地）に種培地
（スクロース３％、酵母エキス０．１％、硝酸ナトリウ
ム０．６％、リン酸二水素カリウム０．１％、硫酸マグ
ネシウム五水和物０．０５％、塩化カリウム０．０５
％、硫酸第一鉄０．００１％）を５ｍｌ添加し、菌体を
均一に分散し種培養とした。この種培養液を上記と同じ
組成の培地６０リットルを含む１０００ｍｌ容のルーフ
ラスコ２４０本に接種し、２７℃で２１日間靜置培養を
行なった。
【００３７】（２）ジクロロメタンによる抽出 培養終了後、培養液（約６０リットル）を濾過により菌
体と上清に分け、培養上清について４Ｎ塩酸で液性を酸
性に調整した後、約３０リットルのジクロロメタンを加
え、抽出し、有機溶媒層を採取した。この操作を２回繰
返し、得られた有機溶媒層を併せ、無水硫酸ナトリウム
で脱水乾燥した後、減圧下に濃縮乾固して固形物３．４
３ｇを得た。
体と上清に分け、培養上清について４Ｎ塩酸で液性を酸
性に調整した後、約３０リットルのジクロロメタンを加
え、抽出し、有機溶媒層を採取した。この操作を２回繰
返し、得られた有機溶媒層を併せ、無水硫酸ナトリウム
で脱水乾燥した後、減圧下に濃縮乾固して固形物３．４
３ｇを得た。
【００３８】（３）シリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーによる精製 これをクロロホルム１０ｍｌに溶かし、あらかじめクロ
ロホルム／メタノール混液（１００：１）で充填したシ
リカゲルカラム（メルク社製、Ａｒｔ７７３４、３５φ
×１４０ｍｍ）に吸着させ、クロロホルム／メタノール
混液（１００：１）１５００ｍｌで展開し、溶出液を約
１００ｍｌずつ分取した。シクロエルゴスタン誘導体の
検出は、クロロホルム／アセトン混液（２０：１）およ
びベンゼン／酢酸エチル混液（２：３）を展開溶媒とす
るシリカゲル薄層クロマトグラフィー（メルク社製、Ａ
ｒｔ５７１５、硫酸試薬による発色）で行い、硫酸試薬
陽性のフラクションを集め、減圧下に濃縮乾固した。
ーによる精製 これをクロロホルム１０ｍｌに溶かし、あらかじめクロ
ロホルム／メタノール混液（１００：１）で充填したシ
リカゲルカラム（メルク社製、Ａｒｔ７７３４、３５φ
×１４０ｍｍ）に吸着させ、クロロホルム／メタノール
混液（１００：１）１５００ｍｌで展開し、溶出液を約
１００ｍｌずつ分取した。シクロエルゴスタン誘導体の
検出は、クロロホルム／アセトン混液（２０：１）およ
びベンゼン／酢酸エチル混液（２：３）を展開溶媒とす
るシリカゲル薄層クロマトグラフィー（メルク社製、Ａ
ｒｔ５７１５、硫酸試薬による発色）で行い、硫酸試薬
陽性のフラクションを集め、減圧下に濃縮乾固した。
【００３９】（４）分取低圧液体クロマトグラフィー
（ＬＰＬＣ）による精製 この乾固物をベンゼン／酢酸エチル混液（３：１）５ｍ
ｌに溶かし、あらかじめ同じ組成の展開液で充填したＬ
ＰＬＣ（和光純薬社製、ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌＣＱ−
３、２０φ×３００ｍｍのガラスカラムに充填したも
の）に付し、同じ組成の溶液１５０ｍｌで洗浄後、ベン
ゼン／酢酸エチル混液（２：１）３００ｍｌで展開し、
溶出液を約１５ｍｌずつ分取し、前述した条件で硫酸試
薬陽性のフラクションを集めた。さらにシリカゲルカラ
ムをベンゼン／酢酸エチル混液（１：１）３００ｍｌで
展開し、溶出液を約１５ｍｌずつ分取し、硫酸試薬陽性
のフラクションを集めた。これを減圧下に濃縮乾固し
て、Ｍｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘを２０ｍｇ得た。
（ＬＰＬＣ）による精製 この乾固物をベンゼン／酢酸エチル混液（３：１）５ｍ
ｌに溶かし、あらかじめ同じ組成の展開液で充填したＬ
ＰＬＣ（和光純薬社製、ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌＣＱ−
３、２０φ×３００ｍｍのガラスカラムに充填したも
の）に付し、同じ組成の溶液１５０ｍｌで洗浄後、ベン
ゼン／酢酸エチル混液（２：１）３００ｍｌで展開し、
溶出液を約１５ｍｌずつ分取し、前述した条件で硫酸試
薬陽性のフラクションを集めた。さらにシリカゲルカラ
ムをベンゼン／酢酸エチル混液（１：１）３００ｍｌで
展開し、溶出液を約１５ｍｌずつ分取し、硫酸試薬陽性
のフラクションを集めた。これを減圧下に濃縮乾固し
て、Ｍｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘを２０ｍｇ得た。
【００４０】（５）分取高速液体クロマトグラフィーに
よる精製 先の分取低圧液体クロマトグラフィーにおいて、ベンゼ
ン／酢酸エチル混液（２：１）で溶出した活性フラクシ
ョンを減圧下に濃縮し、溶媒を除いた後、クロロホルム
３ｍｌに溶かし、分取高速液体クロマトグラフィーによ
り精製した。すなわち、カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ｓ
ＩＬ−０６（１０φ×３００ｍｍ）、移動相：クロロホ
ルム／メタノール混液（２００：１）、ポンプ流速：
３．５ｍｌ／ｍｉｎ、検出：ＲＩｄｅｔｅｃｔｅｒの条
件で、保持時間１５分にピークを示すエメステロンＡお
よび保持時間１７．５分にピークを示すエメステロンＢ
を分取した。これを減圧下に乾固させて新規ステロイド
エメステロンＡを８４ｍｇ、エメステロンＢを１０ｍ
ｇ、それぞれ得た。
よる精製 先の分取低圧液体クロマトグラフィーにおいて、ベンゼ
ン／酢酸エチル混液（２：１）で溶出した活性フラクシ
ョンを減圧下に濃縮し、溶媒を除いた後、クロロホルム
３ｍｌに溶かし、分取高速液体クロマトグラフィーによ
り精製した。すなわち、カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ｓ
ＩＬ−０６（１０φ×３００ｍｍ）、移動相：クロロホ
ルム／メタノール混液（２００：１）、ポンプ流速：
３．５ｍｌ／ｍｉｎ、検出：ＲＩｄｅｔｅｃｔｅｒの条
件で、保持時間１５分にピークを示すエメステロンＡお
よび保持時間１７．５分にピークを示すエメステロンＢ
を分取した。これを減圧下に乾固させて新規ステロイド
エメステロンＡを８４ｍｇ、エメステロンＢを１０ｍ
ｇ、それぞれ得た。
【００４１】実施例２ Ｍｅｒ−ＮＦ８０５４Ｘ３１ｍｇをあらかじめ脱水処理
したジクロロメタン４０ｍｌに溶解し、０℃に冷却後、
ピリジニウムクロロクロメート７ｍｇを加え、１．５時
間撹拌した。これに２−プロパノール２ｍｌを加えた
後、反応液を濃縮乾固し、分取高速液体クロマトグラフ
ィーにより精製した。カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＳＩ
Ｌ−０６（１０φ×３００ｍｍ）、移動相：クロロホル
ム／メタノール混液（２００：１）、ポンプ流速：３．
５ｍｌ／ｍｉｎ、検出：ＲＩｄｅｔｅｃｔｅｒの条件
で、保持時間１５分にエメステロンＡを３ｍｇ得た。ま
た、エメステロンＡの後画分から未反応原料としてＭｅ
ｒ−ＮＦ８０５４Ｘを２２ｍｇ得た。
したジクロロメタン４０ｍｌに溶解し、０℃に冷却後、
ピリジニウムクロロクロメート７ｍｇを加え、１．５時
間撹拌した。これに２−プロパノール２ｍｌを加えた
後、反応液を濃縮乾固し、分取高速液体クロマトグラフ
ィーにより精製した。カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＳＩ
Ｌ−０６（１０φ×３００ｍｍ）、移動相：クロロホル
ム／メタノール混液（２００：１）、ポンプ流速：３．
５ｍｌ／ｍｉｎ、検出：ＲＩｄｅｔｅｃｔｅｒの条件
で、保持時間１５分にエメステロンＡを３ｍｇ得た。ま
た、エメステロンＡの後画分から未反応原料としてＭｅ
ｒ−ＮＦ８０５４Ｘを２２ｍｇ得た。
【００４２】実施例３ エメステロンＡ２ｍｇをアセトン２ｍｌに溶解し、トシ
ル酸０．０５ｍｌ、無水塩化カルシウム２、３粒を加
え、３０分還流した。炭酸カリウムで中和した後、反応
物をクロロホルムで数回抽出した。有機溶媒層を無水硫
酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に濃縮乾固した。こ
れを分取高速液体クロマトグラフィーにより精製した。
カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＳＩＬ−０６（１０φ×３
００ｍｍ）、移動相：クロロホルム／メタノール混液
（２００：１）、ポンプ流速：３．５ｍｌ／ｍｉｎ、検
出：ＲＩｄｅｔｅｃｔｅｒの条件で、保持時間１７．５
分にエメステロンＢを１．５ｍｇ得た。
ル酸０．０５ｍｌ、無水塩化カルシウム２、３粒を加
え、３０分還流した。炭酸カリウムで中和した後、反応
物をクロロホルムで数回抽出した。有機溶媒層を無水硫
酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に濃縮乾固した。こ
れを分取高速液体クロマトグラフィーにより精製した。
カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＳＩＬ−０６（１０φ×３
００ｍｍ）、移動相：クロロホルム／メタノール混液
（２００：１）、ポンプ流速：３．５ｍｌ／ｍｉｎ、検
出：ＲＩｄｅｔｅｃｔｅｒの条件で、保持時間１７．５
分にエメステロンＢを１．５ｍｇ得た。
【００４３】実施例４ 各種ヒトがん細胞を用いてがん細胞の増殖を５０％抑制
する濃度（ＩＣ50）を測定した。Ｋ５６２（白血病細
胞）、ＨＴ２９（大腸がん）、ＨＴ１０８０（細網芽肉
腫細胞）、ＭＣＦ７（乳がん細胞）、ＰＣ６（肺がん細
胞）、ＭＫＮ２８（胃がん細胞）をそれぞれ２〜５×１
０3／ウエルとなるように９６ウエルのマイクロタイタ
ープレートに加え、１０％ＦＢＳを加えたＲＰＭＩ１６
４０培地（フェノールレッド不含）とともに種々の濃度
の被検化合物の存在下、３７℃の５％ ＣＯ2インキュベ
ーター内で３日間培養した。その後、ＷＳＴ−１試薬
［０.０６５％ ２−（４−ヨード−フェニル）−３−
（４−ニトロフェニル）−５−（２,４−ジスルフォニ
ル）−２Ｈ−テエトラゾリウムナトリウム塩，０.００
７％硫酸メチル−１−メトキシ−５−メチルフェナジウ
ム］を１０μｌ加え、更に３時間インキュベートし、プ
レートリーダーで４５０ｎｍ（対照波長６５０ｎｍ）の
吸光度を測定した。被検化合物を添加していない対照の
吸光度（Ｃ）と被検化合物を添加した場合の吸光度
（Ｔ）より、増殖抑制率（％）を（１−Ｔ／Ｃ）×１０
０の計算式で求め、ＩＣ50を算出した。その結果を表２
に示す。
する濃度（ＩＣ50）を測定した。Ｋ５６２（白血病細
胞）、ＨＴ２９（大腸がん）、ＨＴ１０８０（細網芽肉
腫細胞）、ＭＣＦ７（乳がん細胞）、ＰＣ６（肺がん細
胞）、ＭＫＮ２８（胃がん細胞）をそれぞれ２〜５×１
０3／ウエルとなるように９６ウエルのマイクロタイタ
ープレートに加え、１０％ＦＢＳを加えたＲＰＭＩ１６
４０培地（フェノールレッド不含）とともに種々の濃度
の被検化合物の存在下、３７℃の５％ ＣＯ2インキュベ
ーター内で３日間培養した。その後、ＷＳＴ−１試薬
［０.０６５％ ２−（４−ヨード−フェニル）−３−
（４−ニトロフェニル）−５−（２,４−ジスルフォニ
ル）−２Ｈ−テエトラゾリウムナトリウム塩，０.００
７％硫酸メチル−１−メトキシ−５−メチルフェナジウ
ム］を１０μｌ加え、更に３時間インキュベートし、プ
レートリーダーで４５０ｎｍ（対照波長６５０ｎｍ）の
吸光度を測定した。被検化合物を添加していない対照の
吸光度（Ｃ）と被検化合物を添加した場合の吸光度
（Ｔ）より、増殖抑制率（％）を（１−Ｔ／Ｃ）×１０
０の計算式で求め、ＩＣ50を算出した。その結果を表２
に示す。
【００４４】
【表２】
【００４５】
【発明の効果】本発明のシクロエルゴスタン誘導体は、
表１に示した通り、アスペルギルス症の原因菌であるア
スペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）に対して抗真菌活性を有する。こ
れらの性質に基づき本発明のシクロエルゴスタン誘導体
は、医薬、農薬あるいはそれらへの変換素材としての有
用性が期待できる。
表１に示した通り、アスペルギルス症の原因菌であるア
スペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）に対して抗真菌活性を有する。こ
れらの性質に基づき本発明のシクロエルゴスタン誘導体
は、医薬、農薬あるいはそれらへの変換素材としての有
用性が期待できる。
Claims (6)
- 【請求項１】 式（Ｉ）、 【化１】 式中、Ｒ1は水素原子をＲ2は水酸基をそれぞれ表すか、
あるいはＲ1およびＲ2は一緒になって単結合を表す、で
示されるシクロエルゴスタン誘導体。 - 【請求項２】 式（Ｉ−Ａ）、 【化２】 で示される請求項１記載のシクロエルゴスタン誘導体。
- 【請求項３】 式（Ｉ−Ｂ）、 【化３】 で示される請求項１記載のシクロエルゴスタン誘導体。
- 【請求項４】 エメリセラ（Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ）属
に属し、請求項１〜３記載のシクロエルゴスタン誘導体
を生産する能力を有する微生物を培養し、培養物から請
求項１〜３記載のシクロエルゴスタン誘導体を採取する
ことを特徴とする請求項１〜３記載のシクロエルゴスタ
ン誘導体の製造方法。 - 【請求項５】 式（ＩＩ）、 【化４】 で示されるシクロエルゴスタン誘導体を、酸化剤を用い
て酸化することを特徴とする請求項２記載のシクロエル
ゴスタン誘導体の製造方法。 - 【請求項６】 請求項２記載のシクロエルゴスタン誘導
体を、脱水剤を用いて脱水することを特徴とする請求項
３記載のシクロエルゴスタン誘導体の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21893997A JP3656875B2 (ja) | 1997-07-31 | 1997-07-31 | シクロエルゴスタン誘導体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21893997A JP3656875B2 (ja) | 1997-07-31 | 1997-07-31 | シクロエルゴスタン誘導体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1149796A true JPH1149796A (ja) | 1999-02-23 |
| JP3656875B2 JP3656875B2 (ja) | 2005-06-08 |
Family
ID=16727705
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21893997A Expired - Fee Related JP3656875B2 (ja) | 1997-07-31 | 1997-07-31 | シクロエルゴスタン誘導体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3656875B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115466772A (zh) * | 2022-06-27 | 2022-12-13 | 宁波大学 | 一种麦角烷型甾体化合物及其制备方法和用途 |
-
1997
- 1997-07-31 JP JP21893997A patent/JP3656875B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115466772A (zh) * | 2022-06-27 | 2022-12-13 | 宁波大学 | 一种麦角烷型甾体化合物及其制备方法和用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3656875B2 (ja) | 2005-06-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3189443B2 (ja) | 抗真菌性物質ｂｅ−３１４０５ | |
| JP3656875B2 (ja) | シクロエルゴスタン誘導体 | |
| JP3517880B2 (ja) | 抗真菌性物質ｂｅ−４９３８５類及びその製造法 | |
| US5001258A (en) | Antibiotic, fumifungin, a microbial process for the preparation thereof, and the use thereof as a pharmaceutical | |
| JPH07278041A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−２４８１１及びその製造法 | |
| JP3703677B2 (ja) | 新規マクロライド系化合物ｊｋ | |
| MXPA04007918A (es) | Derivados de fenalenona, procedimientos para su preparacion y utilizacion de los mismos. | |
| JPH09157266A (ja) | 新規抗生物質エポキシキノマイシンａおよびｂとその製造法 | |
| JPH10114776A (ja) | 制がん性物質Ｍｅｒ−ＷＦ１７２６およびその製造方法 | |
| JPH10147594A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−４３５４７類 | |
| JP4224404B2 (ja) | 破骨細胞分化抑制物質 | |
| JP2000086627A (ja) | 抗菌性物質ｂｅ−５４４７６及びその製造法 | |
| JPH0881438A (ja) | 新規物質ｔｍｃ−１及びその製法 | |
| JP2000026497A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−６０８２８及びその製造法 | |
| JPH1121263A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−４５９８５類 | |
| JP2000178274A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−５４０１７及びその製造法 | |
| JP2002080446A (ja) | 新規化合物ｆ−１５６０３及びその製造法 | |
| JPH10310584A (ja) | 抗真菌化合物 | |
| JPH11349590A (ja) | 抗菌性物質ｂｅ−６５９３２及びその製造法 | |
| JPH06199882A (ja) | 新規抗真菌性抗生物質ｗ７１７６ｂおよびｗ７１７６ｃ並びにそれらの製造方法 | |
| JPH0822858B2 (ja) | 新規抗生物質ｈ９およびその製造法 | |
| JPH10101663A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−５１０６８及びその製造法 | |
| JPH10101660A (ja) | 生理活性物質Ｍｅｒ−ｆ３およびその製造方法 | |
| JPH04135494A (ja) | ２３―ヒドロキシプロタイロノライドの製造方法 | |
| JPH0987284A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ−４２３０３類 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20050302 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20050303 |
|
| R150 | Certificate of patent (=grant) or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |