JPS61126092A - 抗生物質ｔｍ−５９１ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は抗生物質に関する。

従来の技術 本発明の抗生物質は構造不明の新規の物質であリ、比較
すべき公知の抗生物質は見当らない、。

発明が解決しようとする問題点 本発明の目的は、グラム陽性細菌と一部の真菌・に対し
増殖抑制作用を示す新規の抗生物質を提供することにあ
る。

問題点を解決するための手段 本発明の目的物質を生産する菌株は、本発明者らが秋田
県由利郡金浦町の土壌より新たに分離した菌株であり、
微生物の名称「ストレプトパーティ／リウム・エヒメン
セ（Ｓｔｒｅｐｅｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｅｈｉ
ｍｓｎｓｅ）　Ｔ　Ｍ　−５９１Ｊおよび微生物寄託番
号「微工研菌寄第７８４７　号（ＦＩＲＭ　Ｐ−７８４
７）Ｊとして工業技術院微生物工業技術研究所に寄託さ
れておシ、この菌株を培養して得られる本発明の目的物
質を抗生物質ＴＭ−５９１と命名した。

この菌株の菌学的性状を以下に示す。

１、形　態 栄養菌糸は合成寒天培地および天然寒天培地においてよ
く発達し、不規則に分岐するが通常！′ｉ涛壁を有しな
い。気菌糸はえ一トミール寒天培地。

グ’ｌ　−ｔ　＋７　７・アスパラギン寒天培地および
麦芽冴寒天培地などでわずかに形成される。顕微鏡で観
察すると、気直系の分岐方法は車軸分岐で気菌糸の先端
は輪生状（Ｂｉｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓ　）を呈する。

胞子は通常１０個前後の連鎖が認められる。胞子の表面
は、しわを有せず、はとんど平滑である。胞子の形状は
円筒状で、その大きさは１．２−１．６Ｘ　２．８−　
ｉ２μである。菌核、胞子のう、べん毛胞子は観察され
ない。

Ｕ、培地上での生育状態 各種培地上に３０℃で１４日間培養した時の生育状態に
ついての肉眼的観察結果を第１表に示す。

第１表　生育状Ｓ ■、生理的性質 （１）生育温度範囲 オートミール寒天培地上において２０〜３７℃の範囲で
良好に生育する。１０℃以下、４０℃以上の温度範囲で
は生育しｉい。

（２）生化学的性質 ａ）好気性、嫌気性の区別　：　好気性ｂ）ゼラチンの
液化　　　　：　陽性 Ｃ）脱脂乳の凝固　　　　　・　陰性 ｄ）脱脂乳のペプトン化　　二湯性 ｅ）スターチの加水分解　　：　陽性 ｆ）メラニン様色素生成　　：　陽性 （３）炭素源の利用 （プリド・・ム・ゴツトリーブ寒天培地上）利用する。

Ｄ−グルコース、Ｄ−７ラクトース、／ユクロース、Ｌ
−ラムノー ス、Ｄ−マルトース、マノノース。

Ｄ−マンニット、サリ／／、スタ ーチ。

わずかに利用する： Ｌ−アラビノース、Ｄ−キノロー ス、ガラクトース、ラフィノース。

ラクトース、イヌリ／、イノ／ト・ −ル。

以上の性状から本Ｍ株が放線菌に属することば明らかで
あり、上記諸性状をｘ、　ｓ、　ｐ、　Ｖジ・イ／ター
ナ／ヨナル畳ストレプトミセス〜プロジェクト」、バー
ジ−著「マニーアル・オブ・ディターミナティブ・バク
バリオロン−」第８版（１９７４年）およびワックスマ
ン著「ジ・アクチノミセテス」第２巻（１９６１年）に
報告されている多くの既知菌種と比較した結果、本菌株
はストレプトパーティ／リウム瞭エヒメンセ（Ｓｔｒ８
ｐｔＯＶθｒｔｉｃｉ−１１ｉｕｍ　ｅｈｉｍｅｎｓｅ
　）に最も近い性状を示していた。

以上の結果より本菌株はストレプトパーティ７リウム・
エヒメ／セと種を同じくするものと判定し、本菌株をス
トレプトパーティゾリウム・エヒメンセ　ＴＭ−５９１
と命名した。

抗生物質ＴＭ−５９１の生産は大略一般の発酵生産物を
生産する場合に進じ、各種の栄養物質を含む培地でｒＭ
−ｓ９＋株を好気的条件下で培養することにより行う。

培地は主として液体培地を用い災素源七してはグルコー
ス、シュクロース、廃糖蜜、スターチなどを単独か、ま
たは混合して用いる。窒素源としては瑚二謳ス、オート
ミール、尊母エキス、大豆扮、ポリペブト７などを単独
か、または混合して用いるっその他、本菌株の生育を助
は抗生物質ＴＭ−５？＋の主型を促進する有機物および
漂機塩を適当に添加することができる。消泡剤としては
、アデカノール、ノリコンなどを用いることができる。

培養方法は秀とう培養９通気かくばん培養などの好気培
養が適しており、ｐＨ４〜８，２５〜５５℃で３〜６日
間、望ましくはＰ）（６〜７．２８〜３０℃で５日間培
養するっ この培養により生産された抗生＃ＩＪ質ＴＭ−５９１全
Ｍ離するには、発酵生産物を採取する一般的な方法に差
じて行えばよい。抗生物質Ｔ　Ｍ　−５９１は主に慕体
内に蓄積されるので、たとえば次の方法が効果的である
。すなわち、培養終了後、遠Ｉシ・分離または、濾過て
より分離した菌体かも抗生物質Ｔｙ−５９１を低級アル
コール、アセトンなどの有機溶媒で抽出し、この抽出液
を濃縮後、酢酸エチル、ベンゼノ、クココホルムなどの
非水ｍ　ａ有機溶媒に転溶し、これを屑綿して／コツプ
状とする。この７０ツブを再度ベンゼ／、酢酸エチル。

７１トン、エタノールなどの有機＠媒に溶解し、ソリ力
ゲル（和光紬薬、ワコーゲル：−２００）テ用いたカラ
ムクロマトグラフィーおよび七７丁デ、クスＬＨ−２０
（商品名、ファルマ７ア社製）を用いたゲル濾過に付す
ことにより抗生物質ＴＭ−５９１を精製、単離すること
ができる。

以上の精製方法で単離された抗生物質ＴＭ−５９１は下
記の理化学的性質を有している。

理化学的性質 ａ）外　観　　　　白色粉末 ｂ）ｍ、　ｐ．６３〜６６℃ ０）元素分析値　　Ｃ°６五７Ｂ％　Ｈ；　９．６０９
にｄ）分子量　　　　　ＳＩＭＳ　：　　ｍ／’Ｚ　　
６５１（’、丁−１−：コａ）ｅ）分子式　　　　Ｃ３
４Ｈ６ｏ　Ｏｏ。

ｆ）比旋光１度　　　　（α）、　＝＝＋２　ａ　４°
（Ｃ＝Ｑ、５．エタノール） ｇ）紫外Ｍ吸収スペクトル エタノール中（ＩＷ／ｍ／）で測定した結果を第１図に
示す。

ｈ）赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠中で測定した結果を第２図に示す。

１）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル ＣＤＣｌ３中４００　ＭＨｚで測定した結果を第３図に
示す。

ｊ）”ｃ−ＮＭＲスペクトル ＣＤＣｔＪ中＋　ＯＯＭＨｚで測定した結果を第４図に
示す。

ｋ）溶剤に対する溶解性 水に不溶、メタノール、エタノール、アセトン、アセト
ニトリル、　酢酸エチル、ベンゼン。

クロロホルム、ニーｆ　ｈ　ｉｃ　可溶。

１）呈色反応 二／ヒｌ−”ｌ）７．塩化第二鉄反応：陰性。

バニリン−硫酸、ヨード反応　：陽性。

ｍ）塩基性、酸性、中性の区別４　酸性。

作　　　用 抗生物質ＴＭ−５９１は、グラム陽性細菌と一部の真菌
に対し増殖抑制作用を有する。

以下、試験例を挙げ抗生物質ＴＭ−５９１の作用を具体
的に説明する。

試験例 日本化学療法学会法に準じ、細菌には抗生物質ＴＭ−５
９１を加えたパート４フフ１２Ｍ／寒天培地を用い、カ
ビ、酵母には同様に処理したサブロー寒天培地を用い、
抗生物質ＴＭ−５９１のＭ工Ｃ（最小発育阻止濃度）を
測定した。

その結果を第２表に示す。

第２表　　抗　　菌　　作　　用 １　　　　； スタフィロコパス・アウレウス　ＦＤＡ　　２０９Ｐ１
　１．５６　　ｉ発明の効果 工発明の目的物・質である抗生物；ｆＴ　Ｍ　−５９１
は、以上の諸性状を有し、細菌と一部の真夏に有効で新
規な抗生物質であり、医薬、農薬および飼料添加剤とし
て頁用である。なお、必要に応じてナトリウム塩、カリ
ウム塩、カルンユウム塩などに替え用いることができる
。

実施例 以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。

実施例 （１）　　グルコース　２％、オートミール　２％、肉
エキス　０．５％１食塩　１５％、炭酸力ルンウム０．
２５％、硫酸第二鉄　０．０４％、塩化マンガン０．０
４％からなるＰ）１７の無菌液体培地にＴＭ−５９１株
を接種し、３０℃　７２時間かくばん振とう培養し種培
養液とした。

次に内容量２００ｔの培養夕／りを用いて、種培養と同
じ組成の無菌培地１２０ｔに前記種培養液２ｔを接種し
、３０℃　９６時間かくはん通気培養した。培養終了後
、遠心分離機で上澄液と菌体に分けた。

得られた菌体をアセトン　１５ｔで２回抽出し、この抽
出液を合わせ濃縮してアセトンを除去した。

得られた水溶液を等量のベンゼンで２回抽出し、このベ
ンゼン区分を合わせ、無水硫酸す）　ＩＪウムで脱水後
、濃縮してかっ色シロップを得た。

このンロノプをベンゼン３００−に溶解し、ベンゼンで
調整したシリカゲル〔ワコーゲルＣ−２００（商品名、
和光紬薬製）〕の〕５００−カラに吸着サセた。ベンゼ
ン６００ｒｎｔで洗浄後、ベンゼンーアセト／（６０：
４０）７５０−で溶出を行い、その区分を除く。次いで
ペンゼ／−アセト／（４０：６０）で溶出を行い、この
区分を集めて濃縮乾固し、粗粉末６００ηを得た。

（２）前項（１）で得た粗粉末をアセトニトリル−エタ
ノール（８５：１５）混合溶媒１０ｒｄに溶解した。

この溶液をこれと同じ混合溶媒を溶離液とした逆相分配
分取高速液体クロマトグラフィー〔使用装置、ウォータ
ーズ社製システム６０００Ａ；カラム゛ヌクレオシルア
０１８（ナーゲル社製）を充填したステンレスカラム（
２０■Ｘ２５０ｗ）Ｊを用いて活性区分を分取した。得
られた活性区分を集め、濃縮乾固後、更にエタノールに
溶解し、セファテア　クスＩ、　Ｈ−２０（商品名：　
７アルマシア社製）ヲ用い、エタノールでゲル濾過を行
い、得られた活性区分を集め、濃縮乾固して白色粉末と
して抗生物質ＴＭ−５９１２００’９を得た。

ｍ、ｐ、６３〜６６℃

【図面の簡単な説明】

第１図はエタノール溶液で測定した抗生物質ＴＭ−５９
１の紫外線吸収スペクトル、第２図は、ＫＢｒ錠で測定
した抗生物質ＴＭ−５９１の赤外線吸°収スペクトル、
第３図はＣＤＣｌ３中、４００　ＭＨｚで測定した抗生
物質ＴＭ−５９１のＩ　Ｈ−ＮＭＲスペクトル、第４図
はｃＤｃｔ３中、１００　ＭＨｚで測定した抗生物質Ｔ
Ｍ−５９１の１３０−　ＮＭＲスペクトルをを示す。 特許出願人　　大正製薬株式会社 代理人　弁理士　　北　　川　　富　　造オ　１１！！

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）下記の理化学的性質を有する抗生物質ＴＭ−５９１
   。 ａ）外観　白色粉末 ｂ）ｍ．ｐ．　６３〜６６℃ ｃ）元素分析値　Ｃ：６３．７８％　Ｈ：９．６０％ ｄ）分子量　ＳＩＭＳ：ｍ／ｚ６５１（Ｍ＋Ｎａ）＾＋ ｅ）分子式　Ｃ＿３＿４Ｈ＿６＿０Ｏ＿１＿０ ｆ）比旋光度　〔α〕＾２＾６＿Ｄ＝＋２０．４°（ｃ
   ＝０．５、エタノール） ｇ）紫外線吸収スペクトル エタノール中（１ｍｇ／ｍｌ）で測定した結果を第１図
   に示す。 ｈ）赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠中で測定した結果を第２図に示す。 ｉ）＾１Ｈ−ＮＭＲスペクトル ＣＤＣｌ＿３中、４００ＭＨｚで測定した結果を第３図
   に示す。 ｊ）＾１＾３Ｃ−ＮＭＲスペクトル ＣＤＣｌ＿３中、１００ＭＨｚで測定した結果を第４図
   に示す。 ｋ）溶剤に対する溶解性 水に不溶、メタノール、エタノール、アセトン、アセト
   ニトリル、酢酸エチル、ベンゼン、クロロホルム、エー
   テルに可溶。 ｌ）呈色反応 ニンヒドリン、塩化第二鉄反応：陰性。 バニリン−硫酸、ヨード反応：陽性。 ｍ）塩基性、酸性、中性の区別：酸性。