JPS6234397B2 - - Google Patents
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- JPS6234397B2 JPS6234397B2 JP14819479A JP14819479A JPS6234397B2 JP S6234397 B2 JPS6234397 B2 JP S6234397B2 JP 14819479 A JP14819479 A JP 14819479A JP 14819479 A JP14819479 A JP 14819479A JP S6234397 B2 JPS6234397 B2 JP S6234397B2
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- thienylalanine
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、発酵法によるＬ―ロイシンの製造法
に関する。 従来、Ｌ―ロイシンの発酵法による製造法とし
ては、ブレビバクテリウム属、セラチア属、サル
モネラ属、コリネバクテリウム属等の微生物を使
用する方法が知られている。 これに対し、本発明者らは、エシエリヒア属の
微生物から突然変異によつてβ―２―チエニルア
ラニン耐性株を育種することにより、著量のＬ―
ロイシンを生産する能力を有する菌株を得た。 発明の方法において用いられる微生物として
は、具体的には、以下のものがある。 エシエリヒア・コリ AJ 11478 （β―２―チエニルアラニン耐性、β―ヒドロ
キシロイシン耐性） （FERM―Ｐ 5274） エシエリヒア・コリ AJ 11479 （β―２―チエニルアラニン耐性） （FERM―Ｐ 5275） これらの菌株は、エシエリヒア・コリＫ―12
（ATCC 10798）から変異誘導したものであり、
何れもβ―２―チエニルアラニンに耐性を有する
菌株である。 これらの菌株の、β―２―チエニルアラニンに
対する耐性度を第１表に示す。これらの結果は、
下記組成の培地に各薬剤を表に示した濃度になる
ように溶解し、各菌株を接種したのち、31℃で24
時間培養を行い、菌の生育を調べたものである。 培地組成：グルコース0.5ｇ／dl、
（NH4）2SO40.1ｇ／dl、KH2PO40.846ｇ／dl、ク
エン酸ナトリウム0.05ｇ／dl、KOH 0.226ｇ／
dl、MgSO4・4H2O0.04ｇ／dl、FeSO4・7H2O1
mg／dl、MnSO4・4H2O1mg／dl、チアミン・塩
酸塩１mg／mlを含む。
に関する。 従来、Ｌ―ロイシンの発酵法による製造法とし
ては、ブレビバクテリウム属、セラチア属、サル
モネラ属、コリネバクテリウム属等の微生物を使
用する方法が知られている。 これに対し、本発明者らは、エシエリヒア属の
微生物から突然変異によつてβ―２―チエニルア
ラニン耐性株を育種することにより、著量のＬ―
ロイシンを生産する能力を有する菌株を得た。 発明の方法において用いられる微生物として
は、具体的には、以下のものがある。 エシエリヒア・コリ AJ 11478 （β―２―チエニルアラニン耐性、β―ヒドロ
キシロイシン耐性） （FERM―Ｐ 5274） エシエリヒア・コリ AJ 11479 （β―２―チエニルアラニン耐性） （FERM―Ｐ 5275） これらの菌株は、エシエリヒア・コリＫ―12
（ATCC 10798）から変異誘導したものであり、
何れもβ―２―チエニルアラニンに耐性を有する
菌株である。 これらの菌株の、β―２―チエニルアラニンに
対する耐性度を第１表に示す。これらの結果は、
下記組成の培地に各薬剤を表に示した濃度になる
ように溶解し、各菌株を接種したのち、31℃で24
時間培養を行い、菌の生育を調べたものである。 培地組成：グルコース0.5ｇ／dl、
（NH4）2SO40.1ｇ／dl、KH2PO40.846ｇ／dl、ク
エン酸ナトリウム0.05ｇ／dl、KOH 0.226ｇ／
dl、MgSO4・4H2O0.04ｇ／dl、FeSO4・7H2O1
mg／dl、MnSO4・4H2O1mg／dl、チアミン・塩
酸塩１mg／mlを含む。
【表】
本発明でいう薬剤耐性とは、上記培養条件下に
おいて、薬剤が存在するときの比生育度が親株で
あるエシエリヒア・コリ―Ｋ―12よりも大である
場合をいう。又比生育度は、薬剤が無添加のとき
の菌の生育量（接種菌量を差し引いた量）を100
とした。生育は570nmの吸光度で測定した。 Ｌ―ロイシン生産のための培養培地は特に制限
せず、炭素源、窒素源、無機塩及び必要ならば有
機微量栄養素を含有する通常の培地が用いられ
る。炭素源として含水炭素（グルコース、シユク
ロース、フラクトース、ラクトース及びこれらを
含有するデンプンやセルロース等の加水分解物、
糖蜜、ホエイ等）、有機酸（酢酸、クエン酸等）、
アルコール（グリセリン、エタノール）が使用で
きる。窒素源としては、アンモニウム塩（硫酸ア
ンモニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニ
ウム、塩化アンモニウム等）、アンモニアガス、
アンモニア水等が使用できる。無機塩としてはリ
ン酸塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、鉄塩、
マンガン塩、微量金属塩等を必要に応じて使用す
る。有機微量栄養素としては、栄養要求性のある
場合には、該当するアミノ酸、ビタミン、脂肪酸
類、有機塩基物質等を適当量添加し、必要に応じ
てさらに生育促進物質としてアミノ酸、ビタミン
及びこれらを含有する大豆加水分解物、酵母エキ
ス、ペプトン、カザミノ酸等を使用する。 培養条件は通常の方法でよく、PH５ないし９、
温度20℃ないし45℃、好気条件下に20ないし96時
間培養すればよい。培養中にPHが下るときには、
炭酸カルシウムを別殺菌して加えるか又はアンモ
ニア水、アンモニアガス等のアルカリで中和す
る。 Ｌ―ロイシンの培養液からの採取は常法により
行なうことができる。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、（NH4）2SO42.5ｇ／dl、
KH2PO40.2ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.1ｇ／dl、酵
母エキス0.05ｇ／dl、サイアミン塩酸塩1000γ／
、FeSO4・7H2O1mg／dl、MnSO4・4H2O1mg／
dl、炭酸カルシウム2.5ｇ／dlの組成をもち、PH
7.0の水溶液培地を500mlフラスコに20ml分注し、
これに各菌株を１白金耳植えつけ、31℃で72時間
培養した。発酵終了時におけるＬ―ロイシンの蓄
積量は第２表の如くであつた。
おいて、薬剤が存在するときの比生育度が親株で
あるエシエリヒア・コリ―Ｋ―12よりも大である
場合をいう。又比生育度は、薬剤が無添加のとき
の菌の生育量（接種菌量を差し引いた量）を100
とした。生育は570nmの吸光度で測定した。 Ｌ―ロイシン生産のための培養培地は特に制限
せず、炭素源、窒素源、無機塩及び必要ならば有
機微量栄養素を含有する通常の培地が用いられ
る。炭素源として含水炭素（グルコース、シユク
ロース、フラクトース、ラクトース及びこれらを
含有するデンプンやセルロース等の加水分解物、
糖蜜、ホエイ等）、有機酸（酢酸、クエン酸等）、
アルコール（グリセリン、エタノール）が使用で
きる。窒素源としては、アンモニウム塩（硫酸ア
ンモニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニ
ウム、塩化アンモニウム等）、アンモニアガス、
アンモニア水等が使用できる。無機塩としてはリ
ン酸塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、鉄塩、
マンガン塩、微量金属塩等を必要に応じて使用す
る。有機微量栄養素としては、栄養要求性のある
場合には、該当するアミノ酸、ビタミン、脂肪酸
類、有機塩基物質等を適当量添加し、必要に応じ
てさらに生育促進物質としてアミノ酸、ビタミン
及びこれらを含有する大豆加水分解物、酵母エキ
ス、ペプトン、カザミノ酸等を使用する。 培養条件は通常の方法でよく、PH５ないし９、
温度20℃ないし45℃、好気条件下に20ないし96時
間培養すればよい。培養中にPHが下るときには、
炭酸カルシウムを別殺菌して加えるか又はアンモ
ニア水、アンモニアガス等のアルカリで中和す
る。 Ｌ―ロイシンの培養液からの採取は常法により
行なうことができる。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、（NH4）2SO42.5ｇ／dl、
KH2PO40.2ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.1ｇ／dl、酵
母エキス0.05ｇ／dl、サイアミン塩酸塩1000γ／
、FeSO4・7H2O1mg／dl、MnSO4・4H2O1mg／
dl、炭酸カルシウム2.5ｇ／dlの組成をもち、PH
7.0の水溶液培地を500mlフラスコに20ml分注し、
これに各菌株を１白金耳植えつけ、31℃で72時間
培養した。発酵終了時におけるＬ―ロイシンの蓄
積量は第２表の如くであつた。
Claims (1)
- １ エシエリヒア属に属し、β―２―チエニルア
ラニンに耐性を有する微生物を、液体培地中に好
気的に培養して培養液中にＬ―ロイシンを生成蓄
積せしめ、これを採取することを特徴とするＬ―
ロイシンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14819479A JPS5672695A (en) | 1979-11-15 | 1979-11-15 | Preparation of l-leucine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14819479A JPS5672695A (en) | 1979-11-15 | 1979-11-15 | Preparation of l-leucine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5672695A JPS5672695A (en) | 1981-06-16 |
| JPS6234397B2 true JPS6234397B2 (ja) | 1987-07-27 |
Family
ID=15447351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14819479A Granted JPS5672695A (en) | 1979-11-15 | 1979-11-15 | Preparation of l-leucine |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5672695A (ja) |
Cited By (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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