JPS631319B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はアミノグリコシド抗生物質の特定の位
置のアミノ基又はアルキルアミノ基をアシル基で
選択的に保護されたアミノグリコシド抗生物質保
護誘導体の製造法に関するものである。本発明
は、アミノグリコシド抗生物質の特定の位置のア
ミノ基又はアルキルアミノ基を選択的に保護する
方法に関するものでもある。本発明は主として、
３−アミノグリコシル基を６位に有するデオキシ
ストレプタミンからなるアミノグリコシド抗生物
質のアミノ保護誘導体の製造に応用される。 アミノグリコシド抗生物質は比較的反応性に富
むアミノ基と水酸基とを複数個含有する物質であ
る。アミノグリコシド抗生物質から誘導される半
合成アミノグリコシド抗生物質が多数製造されて
いる。この半合成的製造に当つて、原料アミノグ
リコシド抗生物質の特定位置のアミノ基又は水酸
基又はそれら両者を予じめ適当な保護基で選択的
に保護することが多くの場合必要とされ、あるい
は好ましいとされる。 従来、アミノグリコシド抗生物質のアミノ基及
び（又は）水酸基の選択的保護について、水酸基
の場合は各種の保護法が成功例をみているが、ア
ミノグリコシド抗生物質の多数のアミノ基又はア
ルキルアミノ基のうち、特定位置のアミノ基又は
アルキルアミノ基のみを選択的に保護すること
は、それぞれのアミノ基又はアルキルアミノ基の
反応性に大差がないため、困難であるか又は煩雑
な操作を要する。カナマイシンＡの6′位アミノ基
に例が見られる如く、分子中で１個のみの炭素原
子に結合している或る炭素原子に結合したアミノ
基又はメチルアミノ基は、分子中で２個又はそれ
以上の炭素原子に結合している或る炭素原子に結
合したアミノ基又はメチルアミノ基より比較的反
応性に富むので、前者のようなアミノ基又はアル
キルアミノ基は後者よりもやや優先的に保護基導
入剤と反応し、従つて前者のアミノ基又はメチル
アミノ基が選択的に保護された保護体（とくにア
シル基による保護の場合）が他の保護誘導体より
収率よく得られることがある。また、近年本発明
者らの一部は、アミノグリコシド抗生物質分子中
の一対のアミノ基と水酸基が分子の立体構造中で
隣接している場合、それらのみを環状カルバメー
トの形に結合できること、従つて他のアミノ基を
閉塞することなく前記の一対のアミノ基と水酸基
を同時に保護できることを発見した（米国特許第
3925354号及び第3965089号参照）。 最近、ナガブツシヤンら（日本特開昭52−
153944号公報又は米国特願SN.697297）はカナマ
イシン、ゲンタミシン、シソミシン等によつて代
表される４−０−（アミノグリコシル）−６−０−
（アミノグリコシル）−２−デオキシストレプタミ
ン類に属するアミノグリコシド抗生物質に対し
て、銅（）、ニツケル（）、コバルト（）、
カドミウム（）よりなる群から選択された二価
遷移金属（M⁺⁺）の塩を適当な有機溶媒中で作用
せしめると、該抗生物質の分子中でビシナル
（vicinal）な関係にある特定位置の一対のアミノ
基と水酸基との間に、上記二価金属カチオンが錯
結合されて金属塩錯体が形成されることを見出し
た。 このようにして該アミノ基は二価金属カチオン
により閉塞される。したがつてひきつづきその錯
体にアシル化剤を作用させると、二価金属カチオ
ンの錯結合による閉塞を受けてないアミノ基のみ
が主としてアシル化されるから、アシル基による
選択的保護が得られる。これを、カナマイシンＡ
を例にとつて説明する。すなわち、カナマイシン
Ａに銅（）、ニツケル（）、コバルト（）又
はカドミウム（）の二価金属カチオン（M⁺⁺）
を作用させた場合、 上記の式（）の如く二価金属カチオン
（M⁺⁺）はカナマイシンＡ分子の１位アミノ基と
2″位水酸基との間及び3″位アミノ基と4″水酸基と
の間に錯結合する（したがつてカナマイシンA1
モル当り金属塩は最低２モルを必要とする）。そ
の結果１位と3″位のアミノ基は同時に閉塞され、
その後に式（）の錯体にアシル化剤を作用させ
ると、上記の金属カチオンにより閉塞されていな
い３位アミノ基と6′位アミノ基のみが主としてア
シル化され、従つて３・6′−ジ−Ｎ−アシル化体
が得られることが認められたのである。（「ジヤー
ナル、オブ、アメリカン、ケミカル、ソサエテ
イ」100巻5253−5254頁、1978年参照）。 本発明者らは上記の事実を認識しつつも、さら
に種々の金属カチオンとカナマイシンＡ、カナマ
イシンＢの如きアミノグリコシド抗生物質及びそ
れらの誘導体との間の相互作用についてくわしく
研究した。その結果、二価の亜鉛カチオンは上記
の二価のニツケル、二価のコバルト、二価の銅及
び二価のカドミウムのカチオンとは異つた挙動を
示すけれど、結果として、３−アミノグリコシル
基（又は３−アルキルアミノグリコシル基）を６
位に有するデオキシストレプタミンを部分構造と
して有するアミノグリコシド化合物（たとえばカ
ナマイシンＡ、Ｂ、Ｃ）に対しては、その１位ア
ミノ基又はアルキルアミノ基と当該３−アミノグ
リコシル基（又は３−アルキルアミノグリコシル
基）の３−アミノ基（又はアルキルアミノ基）と
の両者を亜鉛カチオンは強力に閉塞する事実を発
見した。 例えば、カナマイシンＢに対して上記ニツケ
ル、コバルト、銅及びカドミウムとカチオンを作
用させる場合は式（）に示すような金属塩錯体
が形成されることがナガブツシヤンらによれば基
待される。 これは上記「ジヤーナル、オブ、アメリカン、
ケミカル、ソサエテイ」記載の事実から明瞭であ
る。カナマイシンＢはビシナルな関係にあるアミ
ノ基と水酸基とを、１と2″位との間、2′と3′位と
の間及び3″と4″位との間に３対も有するからであ
る。然るに、実際には、カナマイシンＢと亜鉛カ
チオンとを作用せしめると、形成された錯体は
2′−アミノ基と3′−水酸基との間が亜鉛カチオン
により閉塞されない。あるいは閉塞されたとして
もその力は極めて小さい。したがつて、カナマイ
シンＢと亜鉛カチオンとの錯体をひきつづきベン
ジルオキシカルボニル基でアシル化すると、３・
2′及び6′位の３個のアミノ基がアシル化されたト
リ−３・2′・6′−Ｎ−アシル化誘導体が相対的に
高い収率で収得される。その際３・6′−ジ−Ｎ−
アシル化誘導体は事実上収得されない（実施例19
参照）。この事実は亜鉛カチオンが上述の四種の
金属カチオンとは異なる挙動を有することを示唆
する。 又、さらに一例を示すならば、カナマイシンＡ
に亜鉛カチオンを作用せしめた後、ベンジルオキ
シカルボニル基でアシル化せしめた場合（前出の
式（）参照）には、亜鉛カチオンをカナマイシ
ンA1モルに対し１モル強の比で存在せしめるな
らば、３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ルカナマイシンＡが主要アシル化生成物として形
成されるという事実である。しかもこの際注目す
べきことは、このアシル化反応によりカナマイシ
ンＡの１・３・6′・3″−テトラ−Ｎ−ベンジルオ
キシカルボニル誘導体と、未反応原料であるカナ
マイシＡとは同時に或程度まで形成されたが、反
応機構から形成が予想されるトリ−Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル誘導体が極めて少量しか形成さ
れなかつたという事実である（実施例７参照）。
前記ナガブシヤンら（特開昭52−153944号は、式
（）から明らかに推定される如く、銅、ニツケ
ル、コバルト等の金属の塩は最低２モル比の量で
作用させることを必要とすると明細書の説明中で
述べているが、亜鉛カチオンの場合はこれと異な
り１モル比以上であればその閉塞効果を発揮す
る。事実、ニツケル塩をカナマイシンＡに対して
１モル強の量で作用せしめて形成される錯体をそ
の後にベンジルオキシカルボニル基でアシル化す
る場合には、亜鉛塩では好収率で得られる３・
6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナマイ
シンＡが極めて低収率でしか得られない。（実施
例７参照）。上述の事実から、亜鉛（）カチオ
ンはニツケル（）、コバルト（）、銅（）及
びカドミウム（）カチオンとは異なつた錯体形
成機構あるいは錯体安定強度を有することが認め
られる。さらに亜鉛カチオンは亜鉛塩の形で供給
されるが、亜鉛塩が安価であること、また公害源
となりにくいことなどが特長としてあげられる。 結局、本発明者らによると、３−アミノグリコ
シル基又は３−アルキルアミノグリコシル基を６
位に有するアミノグリコシド抗生物質（４位にア
ミノグリコシル基を有することもできる）に対し
て適当な溶剤中で亜鉛カチオンを作用させた場合
に、アミノグリコシド抗生物質の種類に応じて決
まる特定位置にあるアミノ基と水酸基とが亜鉛カ
チオンと同時に錯結合し、これにより閉塞される
ことが見出され、また、こうして形成されたアミ
ノグリコシド抗生物質と亜鉛カチオンとの錯体に
対して、ポリペプチド合成で使用されるアミノ基
保護用アシル基の導入のため、アシル化剤を反応
させた時に、亜鉛カチオンとの錯結合で閉塞され
てない方のアミノグリコシド抗生物質のアミノ基
の少なくとも一個がアシル化されて保護されるこ
と、またその後にアシル化生成物（亜鉛カチオン
との錯体）から亜鉛カチオンを適宜の手段で脱除
すると、亜鉛カチオンと当初に錯結合しない挙動
を示すアミノ基が選択的にアシル基で保護された
アミノグリコシド抗生物質の保護誘導体が得られ
ることが見出された。 従つて、本発明の要旨とするところは、３−ア
ミノグリコシル基又は３−アルキルアミノグリコ
シル基を６位にするデオキシストレプタミンから
なるアミノグリコシド抗生物質に亜鉛カチオンを
作用させて生成される亜鉛錯体を、アミノ基用の
アシル保護基を導入するアシル化剤と反応させ、
これにより亜鉛カチオンと錯結合している該アミ
ノグリコシド抗生物質のＮ−アシル化誘導体の亜
鉛錯体を生成させ、次いでこのＮ−アシル化誘導
体の亜鉛錯体から亜鉛カチオンを除去することを
特徴とする、アミノ基を選択的にアシル基で保護
された前記アミノグリコシド抗生物質の保護誘導
体の製造法にある。 さて本発明の方法は近年その医薬品としての効
果が頓に証明されてきたアミノカシン（「ジヤー
ナル、オブ、アンチビオチクス」25巻695−708
頁、1972年）を初めとして、カナマイシン類の１
−Ｎ−アミノアシル化誘導体の合成に当つて原料
アミノグリコシド抗生物質の１位アミノ基以外の
アミノ基をアシル基で保護した保護体を調製する
のに役立つ。それら１−Ｎ−アミノアシル化誘導
体はカナマイシンＡ、カナマイシンＢ、カナマイ
シンＣ、ゲンタミシン類、シソミシンなど及びこ
れらの各種デオキシ誘導体又はＮ−アルキル誘導
体など広い範囲にわたるが、共通していることは
その１位アミノ基がアシル化されていることであ
る。（米国特許第3781268号、第3939143号、第
3940382号第4001208号、等参照）。この１−Ｎ−
アシル化により母物質になかつた耐性菌抗菌力が
付与され、また多くの場合母物質よりも各種の菌
に対する抗菌力が増大する。 次に本発明の方法の実施について詳しく説明す
る。 本発明において、亜鉛カチオンを作用させられ
て亜鉛錯体（亜鉛錯塩とも言える）を生成するべ
きアミノグリコシド抗生物質は、３−アミノグリ
コシル基又は３−アルキルアミノグリコシル基を
６位OH基上に置換基として有するデオキシスト
レプタミンからなるものであり、これは４位OH
基上に置換基としてアミノグリコシル基を有する
こともできる。本発明で用いられるこの種のアミ
ノグリコシド抗生物質の例には、カナマイシン
Ａ、6′−Ｎ−アルキルカナマイシンＡ、特に6′−
Ｎ−メチルカナマイシンＡ、3′−デオキシカナマ
イシンＡ、6′−Ｎ−メチル−3′−デオキシカナマ
イシンＡ、4′−デオキシカナマイシンＡ、6′−Ｎ
−メチル−4′−デオキシカナマイシンＡのカナマ
イシンＡ群；カナマイシンＢ、3′−デオキシカナ
マイシンＢ（トブラマイシン）、4′−デオキシカナ
マイシンＢ、3′・4′−ジオキシカナマイシンＢ
（ジベカシン）、3′・4′−ジデオキシ−3′−エノカ
ナマイシンＢ、6′−Ｎ−メチル−3′・4′−ジデオ
キシカナマイシンＢのカナマイシンＢ群；カナマ
イシンＣ、3′−デオキシカナマイシンＣ、3′・
4′−ジデオキシカナマイシンＣのカナマイシンＣ
群；ゲンタマイシンＡ、Ｂ、Ｃ；ベルダマイシ
ン、シソマイシン等の公知化合物がある。３−ア
ミノグリコシル置換基又は３−アルキルアミノグ
リコシル基を６位OH基上に有するデオキシスト
レプタミンを基本骨格とするアミノグリコシド抗
生物質に属する限り、将来発見されるであろう現
在未知のアミノグリコシド抗生物質についても、
また既知のアミノグリコシド抗生物質の化学的変
換によつて将来合成されるであろう新しい半合成
アミノグリコシツド抗生物質についても本発明は
応用できる。 本発明は応用されるアミノグリコシド抗生物質
の特に適当な例は、次の一般式（） 〔式中、R¹は水酸基又はアミノ基であり、R²及
びR³はそれぞれ水素又は水酸基であり、R⁴は水
酸基又はアミノ基は炭素数１〜４のアルキルアミ
ノ基、特にメチルアミノ基である〕で示されるカ
ナマイシンＡ、カナマイシンＢ、カナマイシン
Ｃ、これらカナマイシン類のデオキシ誘導体又は
これらの6′−Ｎ−アルキル誘導体である。 本発明において上記のアミノグリコシド抗生物
質に亜鉛カチオンを作用させて錯体を生成させる
ためには、上記のアミノグリコシド抗生物質の遊
離塩基又は酸付加塩を適当な有機溶媒又は含水有
機溶媒に溶解又は懸濁せしめ、ここに適当な亜鉛
塩をアミノグリコシド抗生物質に対し少くとも１
モル量の量で添加する。使用される有機溶媒とし
ては、亜鉛塩添加後に形成された亜鉛錯体が少な
くとも部分的に溶解するならば通常の有機溶媒は
すべて使用できる。但し極性有機溶媒及びとくに
水を大量に使用することは望ましくない。これは
亜鉛錯体の安定性を低下せしめ次後のアシル化又
はアミノ保護反応を不完全なものにするからであ
る。したがつて、錯体生成に当つて用いる溶媒と
しては溶解力の大きいジメチルスルホキシドの如
きものが望ましいが含水ジメチルスルホキシド、
ジメチルホルムアミド、含水ジメチルホルムアミ
ド、ジメチルスルホキシドとテトラヒドロフラン
との混合物、テトラヒドロフラン、含水テトラヒ
ドロフラン、メタノール、エタノール、さらに含
水メタノールの如き低級アルカノールでも使用で
きる。 亜鉛カチオンは亜鉛塩の形で錯体生成の場に供
給される。亜鉛塩としては通常の無機酸又は有機
酸と亜鉛カチオンとの反応で生じたものが使用で
きる。但し一般にアミノ基を含む錯体は遊離アミ
ノ基と金属の錯塩の方がアンモニウム型アミンと
金属との錯塩よりも安定であるので、弱酸塩たと
えば酢酸亜鉛が望ましい。もし強酸塩、たとえば
塩化亜鉛を使用した場合には、そのままで錯体は
形成されるが、さらに弱アルカリ性の酢酸ナトリ
ウムなどを同時に添加する方が望ましい。又同様
の理由でアミノグリコシド抗生物質の酸付加塩、
例えば塩酸塩などを使用した場合には中和剤とし
て酢酸ナトリウム又は水酸化ナトリウムの如き塩
基を添加することが望ましい。この際不必要に大
量の上記の中和剤を使用すると、水酸化亜鉛が沈
澱するので注意しなければならない。たとえば上
記アミノグリコシド抗生物質のテトラ塩酸塩を用
いる場合には、４モルの水酸化ナトリウムを添加
すべきである。又亜鉛塩とアミノグリコシド抗生
物質とのモル比は亜鉛塩が等モル以上であれば、
錯体形成反応は進行するがこの錯体形成は平衡反
応であるためそれ以上のモル数を使用することが
望ましい。実際に好収率が得られるモル数は2.3
〜６モル位であるが４〜５モル使用が実際上好適
である。亜鉛塩の添加後の錯体形成に要する時間
は使用溶媒により左右されるが、瞬間的（含水溶
媒の場合）から20時間の範囲であり、又その反応
は通常常温で行なわれる。この際、冷却又は加温
してもよい。 かくして得られたアミノグリコシド抗生物質の
亜鉛錯体を含む溶液又は懸濁液に対して、アシル
化剤を加える。 本発明で用いられるアシル化剤は、上記のよう
に形成されたアミノグリコシド抗生物質と亜鉛カ
チオンとの錯体中の遊離アミノ基に対して、アル
カノイル基、アロイル基、アルコキシカルボニル
基、アラルキルオキシカルボニル基、アリールオ
キシカルボニル基、アルキルスルホニル基、アラ
ルキルスルホニル基又はアリールスルホニル基で
あるアシル基を結合させるために使用される通常
の保護試薬である。このアシル化剤は、次の一般
式_a R⁵COOH （ａ） 〔式中、R⁵は水素、アルキル基、特に炭素数１
〜６のアルキル基又はアリール基、特にフエニル
基、又はアラルキル基であり、これらは更に置換
基を有することもできる〕で示されるカルボン酸
又はこれの酸ハライド、酸無水物又は活性エステ
ルであることができ、あるいは次式 R⁵O−CO−Cl _b のクロロホルメート又は次式 R⁵O−CO−Ｏ−C₆H₅−ｐ−NO_{2 c} のｐ−ニトロフエニル・カルボネート又は次式 の如きＮ−ヒドロキシサクシンイミドによる活性
エステル又は次式 R⁵O−CO−N_{3 e} のアジドホルメート〔R⁵は上記の意味をもつ〕
であることができ、あるいは次の一般式_f R⁶SO₃H _f 〔式中、R⁶はアルキル基、特に炭素数１〜６の
アルキル基、アリール基、特にフエニル基又はア
ラルキル基、特にベンジル基の如きフエニルアル
キル基である〕で示されるスルホン酸又はこれの
酸ハライド、酸無水物又は活性エステルであるこ
とができる。従つて、アミノ基の保護のためのア
シル化反応は広い意味のアシル化であつて、例え
ばホルミル化、アセチル化、プロピオニル化、ト
リフルオロアセチル化、ベンジルオキシカルボニ
ル化、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル
化、ｔ−ブトキシカルボニル化、フエノキシカル
ボニル化、トシル化等の反応である。 具体的なアシル化剤としては、アセトキシホル
ミル、ｐ−ニトロフエニルホルメート、無水酢
酸、塩化アセチル、無水プロピオン酸、トリフル
オロ酢酸のｐ−ニトロフエノールエステル、トリ
フルオロ酢酸エチル、Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルオキシサクシンイミド（代表的な活性エステ
ル）、Ｎ−ベンジルオキシカルボニルオキシフタ
ルイミド、塩化ベンジルオキシカルボニル、ｐ−
メトキシベンジルオキシカルボニルオキシｐ−ニ
トロフエニル、ｔ−ブトキシカルボニルアジド、
塩化フエノキシカルボニル、トシルクロリド等が
使用される。 これらのアシル化試薬はそのまま、またはテト
ラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、あるい
は両者の混合物などの溶媒系に溶解せしめてから
加えてもよい。その添加量は反応すべきアミノ基
と同モル数あるいはわづか過剰であることが通常
であるが、アミノ基のモル数の３倍位までは場合
により使用される。添加に要する時間は一時に加
える場合から２〜３時間にわたつて加える場合ま
であるが、通常は30分〜１時間の範囲である。反
応温度は−20℃〜100℃間で行なうが通常は０℃
〜常温の間で行なう。時には、アシル化試薬添加
時の温度は低く、次第に反応温度をあげる場合も
ある。通常、このアシル化反応は、上記の亜鉛錯
体を形成した時に用いた溶剤中で行い得る。 本発明の方法においては、上述のアシル化反応
後に、生成されたアミノグリコシド抗生物質Ｎ−
アシル化誘導体と亜鉛カチオンとの錯体から亜鉛
カチオンを脱除し、（錯体の分解）、これによつて
アミノグリコシド抗生物質のＮ−アシル化誘導
体、すなわちＮ−保護誘導体を分離、形成させ
る。 亜鉛カチオンを上記錯体から脱除する方法とし
ては、上記錯体を含有するアシル化反応液そのも
のまたは上記錯体を他の有機溶剤に転溶させて得
られた有機溶剤溶液に対して、亜鉛カチオンを不
溶性の亜鉛化合物例えば硫化亜鉛、水酸化亜鉛又
は炭酸亜鉛に転化させる作用を有する亜鉛沈澱剤
を添加、作用させる第１の方法がある。また、前
記のアシル化反応液又は転溶で得た前記の有機溶
剤溶液を溶剤の蒸発により濃縮又は乾固させ又は
稀釈剤液体を添加し、これで得られた油状乃至固
体沈析物又は残渣から所期のＮ−アシル化体を回
収する第２の方法も利用できる。こゝで稀釈剤液
体とは、上記の亜鉛錯体又はその中に含まれるア
ミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシル化誘導体を全
く又は殆んど溶解し得ないような有機液体又は水
である。この第１の方法に用いる亜鉛沈澱剤とし
ては、硫化水素、アルカリ金属硫化物、例えば硫
化ナトリウム、硫化アンモニウム、アルカリ土類
金属硫化物例えば硫化カルシウム、アルカリ金属
炭酸塩例えば炭酸ナトリウムがある。単に水を加
えて、上記錯体から亜鉛カチオンを脱除できる場
合もある。この第１の方法によれば、亜鉛沈澱剤
を上記錯体の溶液に添加すると、比較的早く亜鉛
カチオンは不溶性亜鉛化合物として沈析して来る
から、この沈析物を去する。液中に残留した
アミノグリコシド抗生物質のＮ−アシル化誘導体
は、これを常法で、例えば溶液の濃縮により又は
抽出により回収する。そして必要ならば、精製す
る。その精製には、例えばシリカゲル塔クロマト
グラフイ法が利用できる。前記の第２の方法によ
れば、アシル化反応液（又はその他の有機溶剤溶
液）を濃縮又は乾固することにより油状乃至固体
沈澱物又は残渣を先づ得るのである。難揮発性溶
媒たとえばジメチルスルホキシド等をアシル化反
応の溶剤として使用した場合には、エチルエーテ
ル等の稀釈剤溶媒を加え難揮発性溶媒をエチルエ
ーテルに溶解（又は稀釈）させ目的のＮ−アシル
化生成物亜鉛錯体を含む固体を沈析せしめること
ができる。これらの油状物及至固体は、一般に
は、アミノグリコシド抗生物質のＮ−アシル化誘
導体と亜鉛カチオンとの錯体と、溶剤の除去によ
り錯体のうちの一部分の錯結合が破れたことに基
因して生じた遊離の該Ｎ−アシル化誘導体と、そ
れに伴つて生じた亜鉛塩と、過剰分として添加さ
れて初めから存在した亜鉛塩と使用した有機溶剤
の若干の残量（ないこともある）との混合物から
成る。 (イ) この油状乃至固体混合物に対して、この中に
含まれる亜鉛錯体中の亜鉛カチオンの錯結合を
破る作用をもつ極性有機液体であつてしかも亜
鉛塩を溶解し得るが所期のアミノグリコシド抗
生物質Ｎ−アシル化誘導体を溶解しないような
有機液体、このような有機液体の混合物又は含
水有機液体、あるいは水を添加、混合すると、
亜鉛錯体は分解し、脱離した亜鉛カチオンが亜
鉛塩の形で溶解、抽出されるから、不溶残渣と
して前記Ｎ−アシル化誘導体が残り、採取でき
る。これは、所望ならば、更に有機溶剤に再溶
解して精製することができる。前記の目的に用
い得る極性有機液体としては、例えばメタノー
ル、エタノール、液体アンモニア、エチルアミ
ン、トリエチルアミンがある。 (ロ) 前記の油状乃至固体混合物に対して、この中
に含まれる亜鉛錯体中の亜鉛カチオンの錯結合
を破る作用をもつ極性有機溶剤であつてしかも
亜鉛塩を溶解し得ないが所期のアミノグリコシ
ド抗生物質Ｎ−アシル化誘導体を溶解し得る極
性有機溶剤（含水でもよい）を添加、混合する
と、亜鉛錯体は分解し、且つ遊離した前記Ｎ−
アシル化誘導体は該有機溶剤に溶解、抽出さ
れ、こうして不溶のまゝ残る亜鉛塩から分離で
きる。このように得られた前記Ｎ−アシル化誘
導体溶液は、所望ならば精製後、濃縮すると、
所期のＮ−アシル化誘導体を収得できる。 (ハ) 前記のアシル化反応液、若しくはこれからア
シル化生成物を有機溶剤で抽出して得た抽出液
を濃縮又は蒸発乾固することにより又は稀釈剤
液体の添加により得た前記の油状乃至固体混合
物は、この混合物全体が水溶性あるいは部分的
水溶性である場合には、前記の混合物全体を適
当な含水有機溶媒に再溶解し、この溶液からク
ロマトグラフイー的に亜鉛塩と所期のＮ−アシ
ル化誘導体とを別々に採取することができる。
この目的のため、本発明者らはカチオン又はア
ニオン交換樹脂、キレート交換樹脂又は金属と
結合しうる基をもつ水不溶性高分子物質たとえ
ばキチンやキトサンを利用できることを見出し
た。使用できるカチオン交換樹脂の種類には、
交換基としてカルボキシル基（−CO₂H）を有
するものとスルホン酸基（−SO₃H）を有する
ものとがある。まづカルボキシル基を有するカ
チオン交換樹脂を利用する場合には、前述の固
体混合物を適当な含水有機溶媒たとえば水−メ
タノール（水含有率は場合により10〜90％に変
動する）や水−ジオキサン（水含有率は上に同
じ）に溶解して上記交換樹脂を含むカラムにチ
ヤージし、はじめ上記含水有機溶媒でよく洗滌
し、その後に酸又は塩基を含む上記含水有機溶
媒を展開溶媒として用いて展開する。ここに酸
としては酢酸の如き弱有機酸又は稀塩酸の如き
無機酸が、また塩基としては水酸化アンモニウ
ムが主として使用される。酸又は塩基の展開溶
媒に含まれる量はそれぞれ0.01〜５％（重量）
が適当である。亜鉛カチオンと目的とするＮ−
アシル化誘導体とは樹脂に対する結合力を異に
するので、この吸着力の差によつて展開操作時
に両者は分離される。かくして亜鉛塩から分離
されて溶出されたＮ−アシル化誘導体を含むフ
ラクシヨンを集め、濃縮すれば、目的のＮ−ア
シル化誘導体が得られる。 交換基としてスルホン酸基をもつイオン交換
樹脂を用いる場合にも、上記と全く同一機構で
あり、したがつて同様に処理できる。弱塩基性
及び強塩基性アニオン交換樹脂を用いる場合に
は、Ｎ−アシル化誘導体はアシル化されないア
ミノ基を持つので上記の弱及び弱塩基性アニオ
ン交換樹脂にはイオン的に反撥して一般に吸着
されず、適当な含水溶液で展開することにより
Ｎ−アシル化誘導体は溶出される。その際、亜
鉛カチオンは樹脂中に残留することが多い。 さらにキレート交換樹脂はその金属キレート
能により亜鉛カチオンと結合しうるので、前記
の油状乃至固体混合物の含水有機溶媒溶液を先
づキレート交換樹脂のカラムにチヤージし、そ
の後にこのカラムを適当な溶媒系で展開するこ
とによりＮ−アシル化生成物のみを優先的に溶
出させ得る。さらに金属と結合する性質を有す
る水不溶性の高分子物質たとえばキチンあるい
はキトサンも上述のキレート交換樹脂と同様に
使用できる。 (ニ) 前記のアシル化保護反応を行つたアシル化反
応液を直接に、前記の如きカチオン又はアニオ
ン交換樹脂、キレート交換樹脂、又は金属と結
合しうる基をもつ水不溶性高分子物質のカラム
に流して吸着を行い、次いでこのようにチヤー
ジされたカラムを含水有機溶剤で必要ならば、
洗滌し、その後に前項(ハ)で述べたように酸又は
塩基を含むまたは含まない前記含水有機溶剤で
展開しその後に前項(ハ)のと同様に操作する第３
の方法も、亜鉛錯体からの亜鉛カチオンの脱離
及び所期のアミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシ
ル化誘導体の回収のために採用できる。 (ホ) 所期のアミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシル
化誘導体それ自体が実質的に水に不溶性のもの
である場合には、アシル化反応で生成した該Ｎ
−アシル化誘導体と亜鉛カチオンとの亜鉛錯体
を含むアシル化反応液を直接に水で処理（水の
添加、混合）する第４の方法を行いうる。 このアミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシル化
誘導体が実質的に水不溶性である場合の例とし
ては３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカ
ルボニルジベカシン（実施例23）などがある。
この場合アシル化反応液に直接に水を添加、混
和すれば、亜鉛錯体の錯結合が破れて該Ｎ−ア
シル化誘導体は固体として沈澱し、脱離した亜
鉛カチオンから生じた亜鉛塩は溶解したまゝ残
るから、ほとんど純粋なＮ−アシル化誘導体を
亜鉛塩から分離し得る。 本発明の方法において、今迄に述べた様に、ア
ミノグリコシド抗生物質の亜鉛錯体に対してアシ
ル化又はアミノ基保護反応を行うが、これにより
形成されたモノ−、ジ−又はトリ−Ｎ−アシル化
誘導体の亜鉛錯体は使用した亜鉛カチオンと錯結
合しているので、目的とするＮ−アシル化誘導体
が水に不溶性又はわづかに可溶性である場合（実
施例23）には、アシル化反応後、アシル化反応液
を水で処理することにより、亜鉛カチオンが脱離
し水で溶解して除去され、水に不溶性のＮ−アシ
ル化誘導体が固体として沈析するから、この水不
溶物質を出発物質として用いて次後の所望反応を
行い得る（前項(ホ)の場合）。しかるに一般的に、
アミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシル化誘導体そ
れ自体は水可溶性又は部分水溶性を有するので、
アシル化反応液に直ちに水を混和して単に水処理
を行なうと、所期のＮ−アシル化物質の収率を著
しく低下せしめる。それ故、アシル化反応で生じ
たアミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシル化誘導体
の亜鉛錯体を先づアシル化反応液から分け取り、
次いでこれを水又は含水有機溶媒に溶解せしめ、
その溶液から亜鉛カチオンのみを除去する方が良
い（前項(ロ)、(ハ)の場合）。一般に認められた簡単
な亜鉛カチオン脱離法の一つは、沈澱剤として硫
化水素又は硫化物を作用せしめて亜鉛カチオンを
硫化亜鉛として沈澱する方法である（前記(イ)の場
合の一例）。然るに硫化亜鉛はしばしばコロイド
化してその去を困難にし、あわせて沈澱剤とす
る硫化水素又は硫化物は悪臭を発するから余り工
業化に適さない。そこで本発明者らは硫化物によ
らない他の方法で亜鉛カチオンを脱離する方法を
種々研究した結果、イオン交換樹脂又はその他の
高分子物質による亜鉛カチオン脱離法（前記(ハ)、
(ニ)の場合）が有効であることを発見した。この方
法(ハ)、(ニ)は操作が容易であり、分離効率が良好で
あり、収率が高いので工業化上極めて有利な方法
である。 本発明の方法においては、前述のようにして、
主として１位と3″位アミノ基又はアルキルアミノ
基以外の他のアミノ基又はアルキルアミノ基を保
護されたアミノグリコシド抗生物質Ｎ−アシル化
誘導体が得られる。この化合物はその後に通常の
方法で１−Ｎ−アシル化し、ひきつづいて通常の
方法で上記のアミノ保護基を脱離すると、抗菌剤
として有用な半合成１−Ｎ−アシル化アミノグリ
シド抗生物質が得られる。 １−Ｎ−アシル化アミノグリコシド抗生物質の
合成についてカナマイシンＡを例にとつて説明す
る。カナマイシンＡの１位と3″位のアミノ基が亜
鉛カチオンとの錯塩形成によつてはじめに閉塞さ
れるので、その亜鉛錯体に本発明により適当なア
シル化試薬あるいはその他のアミノ基保護試薬を
作用せしめることにより３位及び6′位のアミノ基
がアシル基または他の保護基で保護される。その
後、錯体形成にあづかつた亜鉛カチオンを脱離
後、１位アミノ基に導入すべきアシル基を有する
アシル化試薬を作用させると、このアシル基は遊
離している１位と3″位のアミノ基とのみ反応す
る。しかしその際１位アミノ基は一般的にかなり
反応性が3″位アミノ基より高いので目的の１−Ｎ
−アシルカナマイシンＡが好収率で得られる。こ
のようにすると、カナマイシンＡ又は6′−アミノ
基があらかじめ保護されたカナマイシンＡに直接
にアシル化試薬を作用させた場合に比べてより高
い収率で目的の１−Ｎ−アシルカナマイシンＡが
与えられることは明白である。 本発明の方法を、前記の一般式（）のカナマ
イシン類に適用した場合には、１位と3″位アミノ
基以外のアミノ基の一部又は全部が保護された下
記の式（） 〔式中、R¹aは−OH基−NH₂基、−NHCOR⁵基
又は−NHCO・OR⁵基あるいは−NHSO₂R⁶基を
示し、R⁴aは−OH基、−NHCOR⁵基、

【式】−NHCO・OR⁵基、

【式】−NHSO₂R⁶基又は

【式】基を示し、R²及びR³は式（） におけると同じ意味をもち、R⁷は−COR⁵基又は
−CO・OR⁵基あるいは−SO₂R⁶基を示し、R⁵及
びR⁶は式（ａ）−（_f）におけると同じ意味を
もち、R⁸はアルキル基である〕で示されるＮ−
アシル化誘導体が得られる。 即ち本法をカナマイシン類に適用した場合、通
常は１位と3″位以外のアミノ基又はアルキルアミ
ノ基の全部が上述の基によつて保護された物質
（）が得られるが、この際もし導入すべき保護
アシル基が立体的に大きい場合（たとえばｔ−ブ
トキシカルボニル基）、または導入すべき保護ア
シル基が通常の大きさであつても、その使用モル
数を減少した場合や反応時間を短縮した場合に
は、導入されたアシル基の個数が少なく保護化さ
れた物質が得られる。さらにくわしくはこの際
6′位のアミノ基又は6′位のメチルアミノ基は他の
アミノ基より反応性に富むので主として6′位アミ
ノ基又は6′位メチルアミノ基のみが保護された物
質が得られる。 化合物（）は各種の誘導体合成の重要な中間
体である。化合物（）の１位アミノ基をアシル
化し、その後、その１位アシル基以外の、アミノ
基又はメチルアミノ基の保護基を脱離して耐性菌
に有効な半合成１−Ｎ−アシル化アミノグリコシ
ド抗生物質に導く反応と組合わせた場合には殊に
化合物（）の合成中間体としての価値が増大す
る。一例として化合物（）にアシル基、たとえ
ば（Ｓ）−４−ベンジルオキシカルボニルアミノ
−２−ヒドロキシブチリル基を結合する場合に
は、これに対応する置換された酪酸の各種活性エ
ステルたとえばＮ−ヒドロキシサクシンイミド、
Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、又はｐ−ニトロフ
エノールとのエーテルを作り、これと化合物
（）とを適当な溶媒たとえば含水テトラヒドロ
フラン中で反応せしめればよい。その後、上記ベ
ンジルオキシカルボニル基及び保護基R⁷を通常
の方法たとえば酸、塩基による加水分解、金属に
よる接触還元、または液体アンモニア中のナトリ
ウムによるラジカル還元により除去すれば、１位
に（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシブチリル
基が結合された、耐性菌に有効なアミノグリコキ
シド抗生物質として一般式（） 〔式中R₁、R₂、R₃及びR₄は式（）に示したも
のと同一の意味を表わしｎ＝１〜３である〕の化
合物を収得できる。 次に本発明を実施例について説明する。 実施例 １ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 (i) カナマイシンＡ（遊離塩基）2.0ｇ（4.13ミリ
モル）をジメチルスルホキシド50mlとテトラヒ
ドロフラン20mlの混液に懸濁させ、酢酸亜鉛
（）二水和物４ｇ（18.1ミリモル）を加え、
室温で反応混合物が均一溶液となるまで撹拌し
た。懸濁したカナマイシンＡが亜鉛錯体を形成
して溶解するまで約４〜５時間を要した。つぎ
にこの溶液を０℃に冷却し、これにＮ−ベンジ
ルオキシカルボニルオキシサクシンイミド

【式】 2.37ｇ（9.5ミリモル）をテトラヒドロフラン
−ジメチルスルホキシド（１：１）の混液40ml
に溶解した冷溶液（０℃）を約１時間かけて
徐々に加え、つぎに４時間反応液を室温にて放
置した。この間にカナマイシンＡの亜鉛錯体は
ベンジルオキシカルボニル化（本発明のアシル
化）を受けた。本反応溶液はクロロホルムメタ
ノール−28％アンモニア水（１：１：１）の下
層を展開溶媒とする薄層クロマトグラムに於て
Rf0.23に主スポツトが認められるが他の副生成
物によるスポツトはそれより上部に２〜３点か
すかに認められる程度であつた。 (ii) この反応溶液を500mlのエチルエーテル中に
投入し、析出した油状物質をエーテルで数回洗
滌し固いシロツプ状物質8.8ｇを得た。 (iii) つぎに本シロツプ状物質より亜鉛塩を除去す
る下記の方法(A)−(J)を行つた。 (A) 官能基としてカルボキシ基（−CO₂H）を
持つ弱酸性カチオン交換樹脂（アンバーライ
トCG50樹脂（H⁺型）、ローム・アンド・ハ
ース社製）を使用する方法。あらかじめアン
バーライトCG50（H⁺型）樹脂60mlを水−ジ
オキサン（２：１）で充分処理し、これをカ
ラムに充填し、ここに前述のシロツプ状物質
１ｇを水−ジオキサン（１：１）にとかした
溶液をチヤージし、１％酢酸を含む水−ジオ
キサン（２：１）で展開した。目的物質であ
る。ニンヒドリン活性な３・6′−ジ−Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニルカナマイシンＡが先
に溶出され、つづいてジフエニルカルバジド
による呈色に活性な酢酸亜鉛が溶出された。
前者のフラクシヨンを集め、濃縮し、濃縮物
をエーテルで洗滌し、白色固体340mg（81％）
を得た。〔α〕²⁵ _D＋76゜（c1、含水ジメチルホル
ムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₄H₄₈N₄O₁₅・2CH₃CO₂H−
H₂Oとして 理論値：Ｃ、51.23；Ｈ、6.56；Ｎ、6.29％ 分析値：Ｃ、51.02；Ｈ、6.71；Ｎ、6.22％ (B) 官能基としてカルボキシレート基をもつ弱
酸性カチオン交換樹脂（アンバーライト
CG50樹脂（NH₄ ⁺型））を用いる方法。 アンバーライトCG50（NH₄ ⁺型）樹脂60ml
に実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１ｇを水
−ジオキサン（１：１）にとかした溶液をチ
ヤージし、０〜0.1規定アンモニアを含む水
−ジオキサン（１：１）で傾斜展開した。亜
鉛イオンは溶出されず、目的物質である３・
6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナ
マイシンＡが溶出される。溶出液を濃縮し、
白色固体328mg（89％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋86゜
（c1、含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₄H₄₈N₄O₁₅・1/2H₂CO₃として 理論値：Ｃ、52.87；Ｈ、6.30；Ｎ、7.15％ 分析値：Ｃ、52.50；Ｈ、6.59；Ｎ、7.00％ (C) 官能基として強酸性基（−SO₃H）をもつ
カチオン交換樹脂、ダウエツクス50W×２樹
脂、ダウケミカル社製）を用いる方法。 水−ジオキサン（２：１）で前処理したダ
ウエツクス50W×２（H⁺型）樹脂30mlを含む
カラムに実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１
ｇを水−ジオキサン（２：１）にとかした溶
液をチヤージし、水−ジオキサン（２：１）
溶液で溶出液の液性が中性になるまで洗滌し
た。ついで０−１規定アンモニアを含む水−
ジオキサン（２：１）溶液で傾斜展開を行な
うと、目的物質である。３・6′−ジ−Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニルカナマイシンＡを含
む部分が溶出された。溶出液を減圧下に濃縮
乾固し、実施例１(iii)(B)と同一な白色固体311
mg（84％）を得た。 (D) ダウエツクス50W×２樹脂を用いる別法。 水−メタノール（３：１）で前処理したダ
ウエツクス50W×２（H⁺型）樹脂30mlを含む
カラムに実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１
ｇを水−メタノール（３：１）にとかした溶
液をチヤージし、水−メタノール（３：１）
で充分洗滌後、０〜６規定塩酸を含む水−メ
タノール（３：１）で傾斜展開を行なつた。
目的とする３・6′−ジ−Ｎ−ペンジルオキシ
カルボニルカナマイシンＡを含むフラクシヨ
ンを集め強塩基性アニオン交換樹脂、たとえ
ばダウエツクス１×２樹脂（OH型）を微酸
性になるまで加え、混合物を過後液を濃
縮乾固し、目的物質を二塩酸塩として285mg
（72％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋79゜（c1、含水ジメ
チルホルムアミド＝１：２） (E) 官能基として強塩基性基をもつアニオン交
換樹脂（ダウエツクス１×２樹脂、ダウケミ
カル社製）を用いる方法。 水−ジオキサン（１：１）で前処理したダ
ウエツクス１×２樹脂（OH型）30mlを含む
カラムに実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１
ｇをチヤージし水−ジオキサン（１：１）で
比較的速かに展開した。目的物質を含む部分
を集め濃縮乾固し、実施例１(iii)(B)と同様な白
色固体305mg（83％）を得た。 (F) 官能期として弱塩基性基をもつアニオン交
換樹脂（ダウエツクスWGR樹脂、ダウケミ
カル社製）を用いる方法。 水−ジオキサン（２：１）で前処理したダ
ウエツクスWGR樹脂（塩基型）50mlを含む
カラムに実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１
ｇを水−ジオキサン（２：１）にとかした液
をチヤージし、水−ジオキサン（２：１）で
展開した。目的物質である。３・6′−ジ−Ｎ
−ベンジルオキシカルボニルカナマイシンＡ
がわづかの亜鉛イオンを伴つて溶出されるの
で、この部分を集め濃縮乾固し白色固体450
mgを得た。本物質はこのまゝ、後記の参考例
１に従つて１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２
−ヒドロキシブチリル）カナマイシンＡを製
造する際の原料として使用でき、その際本物
質に随拌したわづかの亜鉛イオンの混入は何
等の支障も与えない。 (G) 官能基として弱酸性基をもつキレート樹
脂、（ダウエツクスA1樹脂、ダウケミカル社
製）を用いる方法。 １％のアンモニアを含む水−ジオキサン
（１：１）で前処理したダウエツクスA1樹脂
50mlのカラムに実施例１(ii)で得たシロツプ状
物質１ｇを水−ジオキサン（１：１）に溶解
しチヤージし、０〜１規定アンモニアを含む
水−ジオキサン（１：１）混液で傾斜展開し
た。目的物質である、３・6′−ジ−Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニルカナマイシンＡを含む
部分のみが次第に溶出される。以下(B)方法と
同様に処理し白色固体272mg（74％）を得た。 (H) キトサン（Chitosane）を用いる方法。 水−メタノール（３：１）で充分前処理し
たキトサン100mlをカラムに充填しこれに前
述の実施例１(ii)で得られたシロツプ状物質１
ｇを水−メタノール（３：１）に溶解しチヤ
ージし、水−メタノール（３：１）で展開し
た。目的物質である３・6′−ジ−Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニルカナマイシンＡが先に溶
出され、酢酸亜鉛は非常に遅れて溶出され
た。前者を集め濃縮し、残渣をあらかじめ水
−ジオキサン（１：１）で処理したアンバー
ライトCG50樹脂（NH₄ ⁺型）を含むカラム
にチヤージし、水−ジオキサン（１：１）で
カラムを充分洗滌して後０−0.1規定アンモ
ニアを含む水−ジオキサン（１：１）で傾斜
展開し、ニンヒドリン活性なフラクシヨンを
集め、濃縮し実施例１(iii)(B)と同一の白色固体
301mg（82％）を得た。 (I) 官能基としてカルボキシル基をもつ高分子
物質（CM−セフアデツクスＣ−25）フアル
マシア フアインケミカル社製）を使用する
方法。 あらかじめCM−セフアデツクスＣ−25
（NH⁺ ₄型）樹脂40mlを水−ジオキサン（１：
１）で充分処理し、カラムに充填し、これに
実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１ｇを水−
ジオキサン（１：１）にとかした溶液をチヤ
ージし、水−ジオキサン（１：１）200mlで
洗滌後０〜0.1規定アンモニアを含む水−ジ
オキサン（１：１）で傾斜展開した。亜鉛イ
オンは溶出されず目的とする３・6′−ジ−Ｎ
−ベンジルオキシカルボニルカナマイシンＡ
が溶出される。溶出液を濃縮し、実施例１(iii)
(B)と同一の白色固体303mg（82％）を得た。 (J) 亜鉛沈澱剤として硫化水素を用いる方法 実施例１(ii)で得たシロツプ状物質１ｇを水
−メタノール（１：１）20mlに溶解しアンモ
ニア水を加えて後、硫化水素を充分導入し
た。硫化亜鉛の沈澱を含む混合物を過助剤
セライトを満たしたグラスフイルターで過
し液を減圧で濃縮し得られたシロツプ状物
質をエーテルでよく洗滌した。得られた固体
残渣を水−ジオキサン（１：１）に溶解し、
アンバーライト1RA900（OH型）（強塩基性
樹脂；ロームアンドハース社製）のカラム30
mlにチヤージし水−ジオキサン（１：１）で
展開し３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニルカナマイシンＡを含む部分を集め濃縮
乾固し、実施例１(iii)(B)と同一な白色固体235
mg（64％）を得た。 実施例 ２ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（１モル相当
量）をジメチルスルホキシド15mlに懸濁させ、こ
れに塩化亜鉛420mg（３モル相当量）と酢酸ナト
リウム三水和物840mg（６モル相当量）を加え、
常温で10時間撹拌を続けて後Ｎ−ベンジルオキシ
カルボニルオキシフタルイミド

【式】675mg（2.2 モル相当量）をジメチルスルホキシド10mlに溶解
した溶液を約１時間かけて徐々に加え、さらに４
時間常温で放置した。 以後実施例１(ii)及び(iii)(I)と全く同様に処理し、
３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナ
マイシンＡの白色固体598mg（74％）を得た。 実施例 ３ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ四塩酸塩600mg（0.95ミリモ
ル）、水酸化ナトリウム150mg（3.8ミリモル）を
ジメチルスルホキシド15ml中で１時間撹拌して反
応せしめ、ここに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミ
リモル）を加え、さらに５時間撹拌を続けた。Ｎ
−ベンジルオキシカルボニルオキシサクシンイミ
ド545mg（2.2ミリモル）ジメチルスルホキシド−
テトラヒドロフラン（１：１）５mlに溶解した溶
液を30分かけて加え、混合物を常温で一夜撹拌し
た。反応混合物にエチルエーテルを加え、析出し
た沈澱をとり、以後この沈澱物を実施例１(iii)(H)と
同様に処理し、白色固体581mg（78％）を得た。 実施例 ４ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 (i) カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリ
モル）を水−ジメチルスルホキシド（１：９）
の混液20mlに溶解し、酢酸亜鉛二水和物１ｇ
（4.55ミリモル）を加えて後Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニルオキシサクシンイミド590mg（2.4
ミリモル）を加え、常温で一夜放置した。大量
のエチルエーテルを加え析出した水分に富んだ
層を分離し、さらにエーテルで数回洗滌した。
シロツプ状の層を得た。 (ii) このシロツプ状の物質を水−メタノール
（３：１）にとかした液をキトサン200mlのカラ
ムにチヤージし水−メタノール（３：１）で展
開した。ニンヒドリン活性の部分を集め濃縮後
濃縮液をアンバーライトCG50樹脂（NH₄ ⁺型）
のカラムにチヤージし、水−ジオキサン（１：
１）の混液でカラムを充分洗滌後、０〜0.1規
定アンモニアを含む水−ジオキサン（１：１）
に傾斜展開し、目的物質を含む部分を集め、濃
縮し、実施例１(iii)(B)と同一の白色固体494mg
（61％）を得た。 実施例 ５ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）に水−テトラヒドロフラン（１：３）の混液
20mlを加え、さらに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55
ミリモル）を加えて後Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルオキシサクシンイミド590mg（2.4ミリモル）
を加え、常温で一夜放置した。反応液を減圧で濃
縮後残渣をキトサン200mlのカラムにチヤージし、
以後実施例４と全く同様に処理し、白色固体414
mg（51％）を得た。 実施例 ６ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）を水メタノール（１：７）15mlに溶解し、酢
酸亜鉛２水和物1.5ｇを得えて後、Ｎ−ベンジル
オキシカルボニルオキシサクシンイミド590mg
（2.4ミリモル）を含む、テトラヒドロフラン溶液
７mlを加え常温で一夜放置した。反応液を濃縮後
残渣をキトサン200mlのカラムにチヤージし以後
実施例４と全く同様に処理し、白色固体442mg
（55％）を得た。 実施例 ７ ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（１モル相当
量）をジメチルスルホキシド20mlに懸濁せしめ、
これに酢酸亜鉛二水和物272mg（1.2モル相当量）
を加え、常温で10時間撹拌を続けて得られた殆ん
ど透明な溶液にＮ−ベンジルオキシカルボニルオ
キシサクシンイミド540mg（2.1モル相当量）を少
量づつ約２時間かけて徐々に加えた。その後さら
に一夜常温で放置した。この溶液に大量のエーテ
ルを加え、析出した沈澱を採取し、これをさらに
数回エーテルで洗滌した。 得られた固いシロツプ状物質はクロロホルム−
メタノール−28％アンモニア（１：１：１、下
層）による展開系による薄層クロマトグラムに於
て、Rf0.4に１・３・6′・3″−テトラ−Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニルカナマイシンＡの弱いスポ
ツト（薄層板に硫酸を噴霧して後強熱して呈色せ
しめた）、Rf0.28に弱いスポツト、Rf0.23に目的
とする３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ルカナマイシンＡの一番強いスポツト、Rf0.12に
6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナマイシン
Ａの弱いスポツトさらにRf0に未反応のカナマイ
シンＡの非常に弱いスポツトを与えた。しかし
Rf0.28〜0.4間にあらわれるトリ−Ｎ−ベンジル
オキシカルボニルカナマイシンＡに相当するスポ
ツトは殆んど認められなかつた。 この固いシロツプ状物質を水−ジオキサン
（１：１）に溶解し、水−ジオキサン（１：１）
で前処理したCM−セフアデツクスＣ−25（NH₄ ⁺
型）樹脂100mlにチヤージし以後実施例１(iii)(I)と
同様に処理した。この処理により亜鉛イオンが除
かれると同時に目的物質である３・6′−ジ−Ｎ−
ベンジルオキシカルボニルカナマイシンＡは他の
生成物から分離され白色固体として412mg（51％）
得られた。 比較のため、上述の反応をカナマイシンＡ（遊
離塩基）500mg（１モル相当量）と酢酸ニツケル
四水和物308mg（1.2モル相当量）を出発物質とし
上記と全く同様に反応を行なうと、目的物質であ
る３・6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナマ
イシンＡが上記と同様の白色固体として59mg
（7.3％）が得られた。 実施例 ８ ３・6′−ジ−Ｎ−（ｐ−メトキシベンジルオキ
シカルボニル）カナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド12mlに懸濁させ酢酸
亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加え、実施
例１と全く同様にして作つた均一溶液にｐ−メト
キシベンジルオキシカルボニルオキシ−ｐ−ニト
ロフエニル（pCH₃OC₆H₄CH₂OCOOC₆H₄pNO₂）
789mg（2.6ミリモル）をジメチルスルホキシド10
mlに溶解した溶液を約30分間に加えた後一夜放置
した。以後実施例１(ii)及び(iii)(B)と同様に処理し白
色固体722mg（83％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋87゜（c1、
含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₆H₅₂N₄O₁₇・1/2H₂CO₃として 理論値：Ｃ、51.95；Ｈ、6.33；Ｎ、6.64％ 分析値：Ｃ、51.56；Ｈ、6.41；Ｎ、6.53％ 実施例 ９ 6′−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）カナマイ
シンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド12mlに懸濁させ、こ
れに酢酸亜鉛二水和物１ｇを加え実施例１(i)と同
様にして作つた均一溶液にｔ−ブトキシカルボニ
ルアジド220mg（1.54ミリモル）を加え、常温で
一夜撹拌した。以下実施例１(ii)及び(iii)(B)と同様に
処理し白色固体627mgを得た。〔α〕²⁵ _D＋96゜（c1、
含水ジメチルホルムアミド＝１：２）。 実施例 10 ３・6′−ジ−Ｎ−トリフルオロアセチルカナマ
イシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）ジメチルスルホキシド12mlに懸濁させ、これ
に酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加え
実施例１(i)と同様にして作つた均一溶液にトリフ
ルオロ酢酸のパラニトロフエノールエステル1.2
ｇ（5.1ミリモル）をジメチルスルホキシド10ml
に溶解した溶液を加え、常温で一夜撹拌した。以
後、実施例１(ii)と同様にエチルエーテルで処理
し、エーテル不溶物を実施例１(iii)(A)と同様に処理
し白色固体590mg（70％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋81゜
（c1、含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₂₂H₃₄N₄O₁₃F₆・2CH₃CO₂H・H₂O
として 理論値 Ｃ、38.33；Ｈ、5.44；Ｎ、6.88％ Ｆ、13.99％ 分析値 Ｃ、38.03；Ｈ、5.48；Ｎ、6.54％ 実施例 11 ３・6′−ジ−Ｎ−フエノキシカルボニルカナマ
イシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド15mlとテトラヒドロ
フラン５mlの混液に懸濁させ、これに酢酸亜鉛二
水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加え実施例１(i)と
同様にして作つた均一溶液を０℃に冷却し、これ
に塩化フエノキシカルボニル（C₆H₅OCOCl）
400mg（2.55ミリモル）の０℃に冷却したテトラ
ヒドロフラン溶液（３ml）を同温度で徐々に加
え、１時間かかつて反応溶液の温度を常温までも
ち来たした。さらに３時間常温に放置後実施例１
(ii)と同様にエチルエーテルで処理し、エーテル不
溶分を実施例１(ii)(A)と同様に処理し、白色固体
625mg（70％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋73゜（c1、含水ジ
メチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₂H₄₄N₄O₁₅・2CH₃CO₂H・H₂Oと
して 理論値：Ｃ、50.11；Ｈ、6.31；Ｎ、6.49％ 分析値：Ｃ、49.77；Ｈ、6.60；Ｎ、6.11％ 実施例 12 ３・6′−ジ−Ｎ−アセチルカナマイシンＡの製
造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド12mlに懸濁させ、こ
れに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加
え実施例１(i)と同様にして作つた均一溶液に無水
酢酸260mg（2.6ミリモル）をジメチルスルホキシ
ド10mlに溶解した溶液を加え、常温で一夜撹拌し
た。以後実施例１(ii)及び(iii)(A)と全く同様に処理し
白色固体525mg（72％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋93゜（c1、
含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₂₂H₄₀N₄O₁₃・2CH₃CO₂H・H₂Oと
して 理論値：Ｃ、44.19；Ｈ、7.13；Ｎ、7.93％ 分析値：Ｃ、44.20；Ｈ、7.07；Ｎ、7.85％ 実施例 13 ３・6′−ジ−Ｎ−ホルミルカナマイシンＡの製
造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（１モル相当
量）をジメチルスルホキシド12mlに懸濁させ、こ
れに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.5モル相当量）を
加え実施例１(i)と同様にして作つた均一溶液にパ
ラニトロフエニルホルメート（OHCO−
C₆H₄pNO₂）690mg（４モル相当量）を加え常温
で一夜撹拌した。以後実施例１(ii)及び(iii)(H)と同様
に処理してニンヒドリン活性なフラクシヨンを集
め、炭酸ガスを導入後濃縮し白色固体430mg（67
％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋101゜（c1、水） 元素分析 C₂₀H₃₆N₄O₁₃・H₂CO₃・H₂Oとして 理論値：Ｃ、40.64；Ｈ、6.50；Ｎ、9.03％ 分析値：Ｃ、40.43；Ｈ、6.47；Ｎ、8.83％ 実施例 14 ３・6′−ジ−Ｎ−トシルカナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド15mlに懸濁させこれ
に酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加え
均一溶液になるまで撹拌した。これに塩化トシル
400mg（2.1ミリモル）を７mlのテトラヒドロフラ
ンに溶解させた溶液を徐々に加え、常温で１時間
放置した。さらに200mgの塩化トシルを3.5mlのテ
ナラヒドロフランに溶解させた溶液を加え２時間
放置した。以後実施例１(ii)及び(iii)(A)と全く同様に
処理し白色固体270mg（28％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋
68゜（c1、含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₂H₄₈N₄O₁₅S₂・2CH₃CO₂H・H₂O
として 理論値：Ｃ、46.44；Ｈ、6.28；Ｎ、6.02；Ｓ、6.89％ 分析値：Ｃ、46.31；Ｈ、5.98；Ｎ、6.31；Ｓ、6.55％ 本反応を酢酸亜鉛なしに行うと上記固体はほと
んど採取されない。 実施例 15 ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
6′−Ｎ−メチルカナマイシンＡの製造 ６−Ｎ−メチルカナマイシンＡ（遊離塩基）500
mg（1.0ミリモル）をジメチルスルホキシド12ml
に懸濁させこれに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミ
リモル）を加え均一溶液になるまで撹拌した。こ
の溶液にＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシサ
クシンイミド550mg（2.2ミリモル）をジメチルス
ルホキシド−テトラヒドロフラン（１：１）５ml
に溶解した溶液を30分かかつて加えその後常温に
て一夜放置した。以後実施例１(ii)及び(iii)(A)と全く
同様に処理し白色固体720mg（79％）を得た。
〔α〕²⁵ _D＋74゜（c1、含水ジメチルホルムアミド＝
１：２） 本物質は以後参考例１と同様に処理することに
より１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキ
シブチリル）−6′−Ｎ−メチルカナマイシンＡを
得た。 実施例 16 ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
3′−デオキシカナマイシンＡの製造 3′−デオキシカナマイシンＡ（遊離塩基）500mg
（1.07ミリモル）をジメチルスルホキシド12mlに
懸濁させこれに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリ
モル）を加え均一溶液になるまで撹拌した。この
溶液にＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシサク
シンイミド610mg（2.45ミリモル）をジメチルス
ルホキシド−テトラヒドロフラン（１：１）５ml
に溶解した溶液を加え常温にて一夜放置した。以
後実施例１(ii)及び(iii)(A)と全く同様に処理し白色固
体765mg（82％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋76゜（c1、含水
ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₄H₄₈N₄O₁₄・2CH₃CO₂H・H₂Oと
して 理論値：Ｃ、52.16；Ｈ、6.68；Ｎ、6.40％ 分析値：Ｃ、51.99；Ｈ、6.75；Ｎ、6.20％ 本物質は以後参考例１と同様に処理することに
より１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキ
シブチリル）−3′−デオキシカナマイシンＡを得
た。 実施例 17 ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
3′−デオキシ−6′−Ｎ−メチルカナマイシンＡ
の製造 3′−デオキシ−6′−Ｎ−メチルカナマイシンＡ
（遊離塩基）500mg（1.04ミリモル）をジメルスル
ホキシド12mlに懸濁させ、これに酢酸亜鉛二水和
物１ｇ（4.55ミリモル）を加え生成した均一溶液
にＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシサクシン
イミド595mg（2.4ミリモル）をジメチルスルホキ
シド−テトラヒドロフラン（１：１）５mlに溶解
させた溶液を加え、常温にて一夜放置した。以後
実施例１(ii)及び(iii)(A)及と全く同様に処理し白色固
体737mg（80％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋73゜（c1、含水
ジメチルホルムアミド＝１：２） 本物質は以後参考例１と同様に処理することに
より１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキ
シブチリル）−3′−デオキシ−6′−Ｎ−メチルカ
ナマイシンＡを得た。 実施例 18 ３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
4′−デオキシカナマイシンＡの製造 4′−デオキシカナマイシンＡ（遊離塩基）（内藤
ら、ジヤーナルオブアンテイビオテスク、27巻
838−849頁、1974年）；三宅、土屋、梅沢、梅沢、
ブレタン、オブ、ケミカルソサエテーオブジヤパ
ン、50巻、2362−2368頁、1977年）500mg（1.07
ミリモル）をジメチルスルホキシド12mlに懸濁さ
せ、これに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモ
ル）を加え均一溶液になるまで撹拌した。この溶
液にＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシサクシ
ンイミド580mg（2.3ミリモル）をジメチルスルホ
キシド４mlに溶解した溶液を１時間かかつて徐々
に加えその後常温で一夜放置した。以後実施例１
(ii)及び(iii)(A)と全く同様に処理し白色固体666mg
（71％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋77゜（c1、含水ジメチル
ホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₃₄H₄₈N₄O₁₈・2CH₃CO₂H・H₂Oと
して 理論値：Ｃ、52.16；Ｈ、6.68；Ｎ、6.40％ 分析値：Ｃ、51.77；Ｈ、6.79；Ｎ、6.31％ 実施例 19 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルカナマイシンＢの製造 カナマイシンＢ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド12mlとテトラヒドロ
フラン４mlの混液に懸濁させ、これに酢酸亜鉛二
水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加えて均一溶液に
なるまで撹拌した。この溶液を０℃に冷却し、こ
れにＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシサクシ
ンイミド825mg（3.3ミリモル）をテトラヒドロフ
ラン−ジメチルスルホキシド（１：１）の混液10
mlに溶解した冷溶液を約１時間を要して徐々に加
えその後０℃に２時間、室温にて一夜放置した。
以後実施例１(ii)及び(iii)(A)と全く同様に処理し白色
固体740mg（70％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋63゜（c1、含
水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₄₂H₅₅N₅O₁₆・2CH₃CO₂H・H₂Oと
して 理論値：Ｃ、53.95；Ｈ、6.40；Ｎ、6.84％ 分析値：Ｃ、53.66；Ｈ、6.67；Ｎ、6.63％ 本物質は以後参考例１と同様に処理することに
より１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキ
シブチリル）カナマイシンＢに導き得た。 実施例 20 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルトプラマイシンの製造 トプラマイシン（遊離塩基）480mg（1.03ミリ
モル）をジメチルスルホキシド12mlに懸濁させ、
これに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモル）を
加え、１時間撹拌した。この溶液にＮ−ベンジル
オキシカルボニルオキシサクシンイミド850mg
（3.4ミリモル）をテトラヒドロフラン−ジメチル
スルホキシド（１：１）の混液10mlに溶解した溶
液を約１時間かけて徐々に加え、その後室温にて
一夜放置した。反応液を実施例１(ii)と同様に多量
のエチルエーテルで処理し、固いシロツプ状物質
を得た。以後実施例１(iii)(A)と同様に処理し（ただ
し水−ジオキサン＝２：１は１：１に変更）白色
固体810mg（78％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋65゜（c1、含
水ジメチルホルムアミド＝１：２） 元素分析 C₄₂H₅₅N₅O₁₅・2CH₃CO₂H・H₂Oと
して 理論値：Ｃ、54.81；Ｈ、6.50；Ｎ、6.95％ 分析値：Ｃ、54.77；Ｈ、6.71；Ｎ、6.88％ 本物質は以後参考例１と同様に処理することに
より１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキ
シブチリル）トブラマシンを得た。 実施例 21 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル−6′−Ｎ−メチルトブラマイシンの製造 6′−Ｎ−メチルトブラマイシン遊離塩基500mg
（1.04ミリモル）を実施例20と全く同様に処理し
白色固体890mg（84％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋63゜（c1、
含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 実施例 22 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル−4′−デオキシカナマイシンＢの製造 4′−デオキシカナマイシンＢ（三宅、土屋、梅
沢、梅沢、ブレタン、オブ、ケミカル、ソサエテ
ーオブ、ジヤパン、50巻、2362−2368頁、1977
年）（遊離塩基）480mg（1.03ミリモル）を実施例
20と全く同様に処理し白色固体815mg（79％）を
得た。〔α〕²⁵ _D＋63゜（c1、含水ジメチルホルムアミ
ド＝１：２） 実施例 23 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルジベカシンの製造 ジベカシン遊離塩基600mg（1.33ミリモル）に
ジメチルスルホキシド15mlを加え撹拌した。得ら
れた溶液に酢酸亜鉛二水和物1.4ｇ（6.4ミリモ
ル）を加え撹拌した。得られた溶液にＮ−ベンジ
ルオキシカルボニルオキシサクシンイミド1.1ｇ
（4.4ミリモル）をジメチルスルホキシド12mlに溶
解した溶液を約１時間かけて徐々に加え、その後
室温にて一夜放置した。反応液に大量のエチルエ
ーテルを加えれた油状沈析物（主として目的物と
ジメチルスルホキシドとを含む）をさらにエチル
エーテルで洗滌し、固いシロツプ状物質を得た。 これをくりかえし水洗した。水処理により酢酸
亜鉛の過剰分は除かれまた錯体も水で分解され除
かれた。水不溶固体1.1ｇを得た。本固体はクロ
ロホルム−メタノール−18％アンモニア（１：
１：１下層）を展開系とする薄層クロマトグラム
に於てRf0.3に単一点を与え、わづかの亜鉛を混
入するが殆んど純粋の３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニルジベカシンである。本物
質は以後参考例１と同様に処理することにより１
−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシブチ
リル）−ジベカシンに導き得た。 なお先に得た粗３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニルジベカシンを精製するために
実施例20と同様に処理した。〔α〕²⁵ _D＋68゜（c1、含
水ジメチルホルムアミド＝１：２）。 実施例 24 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル−6′−Ｎ−メチルジベカシンの製造 6′−Ｎ−メチルジベカシン遊離塩基500mg
（1.07ミリモル）と酢酸亜鉛二水和物1.2ｇ（5.45
ミリモル）をジメチルスルホキシド20mlに溶解せ
しめ、これにＮ−ベンジルオキシカルボニルオキ
シサクシンイミド910mg（3.6ミリモル）を約30分
かけて徐々に加えその後、この溶液を常温にて一
夜放置した。以後実施例23と全く同様に処理し殆
んど純粋な表題物質910mgを得た。本物質は以後
参考例１と同様に処理することにより１−Ｎ−
（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシブチリル）−
6′−Ｎ−メチルジベカシンに導き得た。 実施例 25 ３・2′−ジ−Ｎ・ベンジルオキシカルボニルカ
ナマイシンＣの製造。 カナマイシンＣ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）を実施例１(i)、(ii)及び(iii)(A)と同様に処理し
白
色固体730mg（79％）を得た。〔α〕²⁵ _D＋75゜（c1、
含水ジメチルホルムアミド＝１：２） 本物質は以後参考例１と同様に処理することに
より１−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキ
シブチリル）カナマイシンＣに導き得た。 実施例 26 6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルカナマイシ
ンＡ カナマイシンＡ（遊離塩基）500mg（1.03ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド20mlに懸濁させこれ
に酢酸亜鉛２水和物0.5ｇ（2.3ミリモル）を加え
均一溶液になるまで撹拌した。 この溶液にＮ−ベンジルオキシカルボニルオキ
シサクシンイミド283mg（1.13ミリモル）を加え
常温にて一夜放置した。以後実施例１(ii)及び(iii)(I)
と同様に処理し、白色固体556mgを得た。〔α〕²⁵ _D
＋92゜（c1、水） 実施例 27 6′−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルジベカシン ジベカシン（遊離塩基）500mg（１モル相当量）
をジメチルスルホキシド12mlに溶解し、酢酸亜鉛
二水和物0.7ｇ、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル
オキシサクシンイミド305mg（1.1mm相当量）を加
え実施例26と同様に処理し、白色固体382mgを得
た。〔α〕²⁵ _D＋105゜（c0.5、水） 実施例 28 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル−3′・4′−ジデオキシ−3′−エノカナマイ
シンＢの製造。 3′・4′−ジデオキシ−3′−エノカナマイシンＢ
（西村、土屋、梅沢、梅沢、ブレタン・オブ・ケ
ミカル・ソサエテイ・オブ・ジヤパン50巻1580−
1583頁、1977年）（遊離塩基）500mg（1.11ミリモ
ル）をジメチルスルホキシド12mlに溶解せしめこ
れに酢酸亜鉛二水和物１ｇ（4.55ミリモル）を加
え１時間撹拌した。この溶液にＮ−ベンジルオキ
シカルボニルオキシサクシンイミド870mg（3.49
ミリモル）を30分かけて徐々に加えその後一夜放
置した反応液を実施例１(ii)と同様に多量のエチル
エーテルで処理し固いシロツプ状物質を得た。以
後、実施例１(iii)(B)と同様に処理し（ただし水−ジ
オキサン＝２：１は１：２に変更）白色固体784
mgを得た。〔α〕²⁵ _D＋30゜（c1、含水ジメチルホルム
アミド＝１：２） 実施例 29 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルシソミシンの製造 シソミシン（遊離塩基）500mg（1.12ミリモル）
をジメチルスルホキシド（12ml）中酢酸亜鉛二水
和物１ｇ（4.55ミリモル）とＮ−ベンジルオキシ
カルボニルオキシサクシンイミド870mg（3.49ミ
リモル）とで実施例28と全く同様に処理し白色固
体780mgを得た。〔α〕²⁵ _D＋110゜（c1、含水ジメチル
ホルムアミド＝１：２） 実施例 30 ３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニルゲンタミシンの製造 ゲンタミシン混合物（遊離塩基）500mgをジメ
チルスルホキシド（12ml）中酢酸亜鉛二水和物１
ｇとＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシサクシ
ンイミド870mgとで実施例32と全く同様に処理し
白色固体787mgを得た。 実施例 31 ３・6′−ビス（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）
カナマイシンＡの製造 カナマイシンＡ（10.0ｇ）及び酢酸亜鉛２水和
物（27ｇ）をジメチルスルホキシド（DMF）
（180ml）中で室温下に２時間撹拌し、これにｔ−
ブチルＳ−（４・６−ジメチルピリミジン−２−
イル）チオールカーボネート（24ｇ）を加え50℃
で40時間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留
物をメタノール（300ml）、水（300ml）の混液に
溶解して得た溶液を、アンバーライトCG−50
（H⁺型）（650ml）のカラムを通過させた。カラム
を水：メタノール（１：１）の混液で洗浄した
後、0.8N−アンモニア水で溶出し、粗目的物13.5
ｇを得た。これをシリカゲルクロマトグラフイ
〔ワコーゲルＣ−200、300ｇ、展開溶媒クロロホ
ルム−メタノール−濃アンモニア水（９：９：
1.5）〕で精製すると、表題の目的化合物の11.0ｇ
を得た。 m.p.237〜246℃（分解） 〔α〕²³ _D＋89.9゜（c1.0、DMSO） SIMS：685（Ｍ＋１） 実施例 32 ３・2′・6′−トリス（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボ
ニル）カナマイシンＢの製造 カナマイシンＢ（1.06ｇ）及び酢酸亜鉛２水和
物（2.4ｇ）を水（２ml）、DMF（20ml）の混液中
で室温下に２時間撹拌した後、ジ−ｔ−ブチル−
ジカーボネート（1.65ｇ）を加え30℃で20時間撹
拌した。反応液を1/4量まで濃縮し、ここにｎ−
ブタノール（40ml）、濃アンモニア水（20ml）、飽
和食塩水（10ml）を加え、室温下に30分間撹拌し
た。さらに水層をｎ−ブタノール15mlで抽出し
た。ブタノール抽出液を合わせ、これをシリカゲ
ルクロマトグラフイ〔ワコーゲルＣ−200、30ｇ、
展開溶媒クロロホルム−メタノール−濃アンモニ
ア水（９：６：0.3）〕で精製すると、表題物質の
0.71ｇを得た。 m.p.178〜188℃ 〔α〕²³ _D＋78.9゜（c1.0、DMSO） SIMS：784（Ｍ＋１） 実施例 33 ３・2′・6′−トリス（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボ
ニル）−3′・4′−ジデオキシカナマイシンＢの
製造 3′・4′−ジデオキシカナマイシンＢ（1.0ｇ）及
び酢酸亜鉛２水和物（2.4ｇ）を水（２ml）
DMF20mlの混液中で室温下に２時間撹拌した後、
ジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（1.65ｇ）を加
えて、30℃で20時間撹拌した。反応液を1/4量ま
で濃縮し、これにｎ−ブタノール（40ml）、濃ア
ンモニア水（20ml）、飽和食塩水（10ml）を加え
て、室温下に30分間撹拌した。水層を再びｎ−ブ
タノール（15ml）で抽出した。ブタノール抽出液
を合わせ、シリカゲルクロマトグラフイ〔ワコー
ゲルC200、30ｇ、展開溶媒クロロホルム−メタ
ノール−濃アンモニア水（９：６：0.1）〕で精製
すると、表題物質の1.26ｇを得た。 m.p.163〜170℃ 〔α〕²³ _D＋78゜（c1.0、DMSO） SIMS：752（Ｍ＋１） 参考例 １ １−Ｎ−（（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシ
ブチリル（カナマイシンＡ（アミカシン）の製
造 実施例１で得た３・6′−ジ−Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニルカナマイシンＡ酢酸塩55mg（0.062
ミリモル）を水−テトラヒドロフラン（２：５）
1.5mlに溶解し、無水炭酸ナトリウム13mg（0.12
ミリモル）を加えた後（Ｓ）−４−ベンジルオキ
シカルボニルアミノ−２−ヒドロキシ酪酸のＮ−
ハイドロキシサクシンイミドエステル23mg
（0.066ミリモル）を加え常温で10時間放置した。
反応溶液を濃縮後含水ジオキサン（１：１）４ml
に溶解し、わづかの酢酸を加えて液性を弱酸性に
して後パラジウム黒を加え常圧水素で１時間還元
した。反応液を過、濃縮後、濃縮物をCMセフ
アデツクスＣ−25（NH¹⁺ ₄型）（フアルマシア フ
アインケミカル社製）のカラムにチヤージし０−
0.5規定のアンモニア水で傾斜展開した。目的物
質を含む溶出分を集め濃縮乾固し表題物質をモノ
炭酸塩として24mg（60％）得た。本物質は諸物理
性質、抗菌力の点で標品と一致した。 参考例 ２ １−Ｎ−（DL−イソセリル）ジベカシンの製造 実施例23で得た３・2′・6′−トリ−Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニルジベカシン酢酸塩58mg（0.06
ミリモル）を水−テトラヒドロフラン（２：５）
1.5mlに溶解し、無水炭酸ナトリウム13mg（0.12
ミリモル）を加えた後、Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニル−DL−イソセリンのＮ−ハイドロキシサ
クシンイミドエステル21mg（0.063ミリモル）を
加え常温で10時間放置した。以後、参考例１と同
様に処理して、標題物質をモノ炭酸塩として21mg
（59％）得た。本物質は諸物理性質、抗菌力の点
で標品と一致した。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ ３−アミノグリコシル基又は３−アルキルア
   ミノグリコシル基を６位に有するデオキシストレ
   プタミンからなるアミノグリコシド抗生物質に亜
   鉛カチオンを作用させて生成される亜鉛錯体を、
   アミノ基用のアシル保護基を導入するアシル化剤
   と反応させ、これにより亜鉛カチオンと錯結合し
   ている該アミノグリコシド抗生物質のＮ−アシル
   化誘導体の亜鉛錯体を生成させ、次いでこのＮ−
   アシル化誘導体の亜鉛錯体から亜鉛カチオンを除
   去することを特徴とする、アミノ基を選択的にア
   シル基で保護された前記アミノグリコシド抗生物
   質の保護誘導体の製造法。