JPS6366194A - 新規なアントラサイクリン抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は制がん作用を有する新規なアントラサイクリン
抗生物質に関するものである。

（従来の技術） 制がん性アントラサイクリン抗生物質としては、従来か
ら放線菌の培養液よシ得られるダウンマイシン（米国特
許第３，６１６，２４２号明細書参照）及びアドリアマ
イシン（米国特許第３．５９０．０２８最明ａ曹参照）
が知られておシ、これらの化合物は実験動物腫瘍に対し
て広域抗がんスペクトルを有し、がん化学療法剤として
臨床的にも広く利用されている。しかし、ダウノマイシ
ン、及びアドリアマイシンはかなシ強い抗がん作用を示
すが、また重篤な６毒作用などの副作用も強く、制がん
剤として決して満足できるものではない。そのため、発
酵法、半合成法、微生物変換法など各種の手段によシ、
更に多数のアントラサイクリン抗生物質が提案されてい
る〔例えば、特公昭５１−３４９５号公報（アクラシノ
マイシンＡ及びＢ）、ジャーナルオブアンチビオティク
ス（Ｊｏｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｕｔｉｂｌｏｔｉｃｓ）ｖ
ｏ　１　、３３　＋第１３３１−１３４０頁、トビノク
ス　インアンチビオティック　ケミストリー（Ｔｏｐｌ
ｃｓ＋　ｉｎＡｎｔｉｂｌｏｔｉｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ）ｖｏｌ、１２　、第１０２−２７９頁（Ｅｌｌｉｓ
　Ｈｏｒｗｏｏｄ　Ｌｉｍｌｔｅｄ発行）、特開１１ｆ
（５７−５６４９４号公報（４−デメトキシ−１１−デ
オキンダウノマイシン等）、特開昭５６−１５２９９号
（ロドマイシン群抗生物質）等〕。

（発明が解決しようとする問題） 抗腫瘍剤としてのアントラサイクリン抗生物質は、上述
の如く、各種の類縁化合物が提案され、既に一部は臨床
的に広く利用されているものもあシ、また臨床試験に供
されているものもある。しかし、毒性、抗がん作用双方
について共に満足できるものはない。しかも、抗腫瘍剤
は、試験管内試験、動物試験の結果が必ずしも直接にヒ
トの抗がん作用と相関しないため、多角的な研究が要求
される。そのため抗腫瘍剤として一応の評価がなされて
いるアントラサイクリン抗生物質類について、更に臨床
薬として有効な新な部類に属する化合物の提案が望まれ
ている。

（問題点を解決するための手段） 本発明者等は、よシ有用なアントラサイクリン抗生物質
又はその合成中間体となり得る新規化合物を提案すべく
研究を重ねた結果、ロドマイシン群抗生物質を生産する
能力を有する本出願人の保存菌株又は公知の菌株を変異
原として、例えば紫外線あるいはＮ−メチル−Ｎ′−二
トローＮ−二ト０グアニジン（以下ｒ　ＮＴＧ　Ｊと略
称する）を用いる通常の変異処理によシ得られる特異な
変異菌株を培養するか、又はさらにその培養を適当な酸
処理によシ、物質のなかに強い制がん作用を示す新規ア
ントラサイクリン抗生物質の取得に成功し、本発明を完
成した。

しかして、本発明は次式 ％式％ 原子を表わす、 で示される新規なアントラサイクリン抗生物質を提供す
るものである。すなわち、α−シトロマイジノンとロド
サミンが分子中に共存する点で構造上の特徴を有する従
来の文献に未載のグリコシドである。

で示される化合物（以下ｒ　Ｙ２６２−Ｉ　Ｊと略記す
る）、式 で示される化合物（以下ｒＹ２６２−２Ｊと略記する）
、及び式 で示される化合物（以下ｒＹ２６２−３Ｊと略記する）
を提供するものである。

（作用・効果） これらの化合物は、培養マウス白血病細胞Ｌ１２１０に
対して増殖阻止作用を示し、就中、Ｙ２６２−３はその
作用が強く、制がん剤として有用である。

なお、かかる細胞増殖阻止作用は、次に示す試験によシ
容易に確認できる。

２０チ仔牛血清を含むＲＰＭ１１６４培地（ローズウェ
ルパーク研究所）へＬ１２１０細胞を５　Ｘ　１０’　
／ｙ−／ｒａｔ接種し、これに本発明の物質を０．０１
〜１．０μｂ郁の濃度で添加し、３７℃にて炭酸ガス培
養器中で４８時間培養し、対照区に対す６５０％増殖阻
害濃度を求めた。なお、本発明の物質の添加は１１５０
Ｍ酢酸（ｐＨ３，０）中にｌ　ｗｑ、、ＡＩ　濃度で溶
解したのち、Ｄｕｌｂｅｃａｏ　ＰＢＳ　（−）　（日
永製薬製）で希釈し２、添加した。

更に、上記のＬ１２１０培養細胞を１０チ仔牛血清ｅ　
含ｔｒ　ＲＰＭ　１１６４０培地へ８×１０ｖｉＬｌと
なる様に懸濁し、３７℃にて炭酸ガス培養器中で１．５
時間培養を行ったのち、上記で調製した本発明物質の溶
液を種々濃度で添加し、１５分後さらに１４Ｃ−ウリジ
ン（０，０５μＣｉ／ｌｈ７りまたは１４Ｃサミジン（
０，０５μｃｔＡＬｌ）を添加し、３７℃にて６０分間
培養した。反応液へ冷Ｉ　Ｃ１ト’）クロル酢酸（ＴＣ
Ａ）を添加し、反応を中止させると同時に、酸不溶物を
沈殿させ、遠心操作にて集積せしめ、冷５％ＴＣＡ２ｍ
Ｊにて２回洗浄したのち、ギ酸に溶解し、放射活性を測
足し、無添加対照区に対する放射能の取込み率から５０
％取込み阻害濃度を求めた。

第１表に結果を示す。

Ｙ２６２−１　　　０．５５　　　　　　　５．００　
　　　　３．９０Ｙ２６２−２　　　０．２６　　　　
　　　６．００　　　　　０．５５Ｙ２６２−３　　　
０．００７　　　　　　０．２８　　　　　０．２３本
発明の化合物Ｙ２６２−１　、　Ｙ２６２−２及びＹ２
６２−３の製造はストレプトミセス属に属するロドマイ
シン群抗生物質を生産する能力を有する土壌分離菌株又
は公知の菌株を、変異原として例えば紫外線或はＮＴＧ
を用いる通常の変異処理により容易に単離される本発明
の化合物Ｙ２６２−１　、　Ｙ２６２−２及びＹ２６２
−３を生産する能力を有する変異株を、適当な栄養源か
らなる培地に培養することにより、さらに好ましくはそ
の培養プロスを適尚表条件下で酸処理することによシ行
うことが出来る。これらの変異株のうち具体的なものと
しては、ストレプトミセス・ビオラセウス（影但曲翌突
ｖｉｏｌａｃｅｕａ　）Ａ２６２をＮＴＧ処理して得ら
れる変異株の−っである５Ｃ−７菌株を挙げることが出
来る。

本菌株は昭和６１年３月３１日付で工業技術院微生物工
業研究所に微工研菌寄第８７２０号（ＦＥＲＭ　Ｐ−８
７２０）として寄託されている。以下に５Ｃ−７菌株の
菌学的性状を示す。

（１）形態 良く分枝した基中菌糸よシ、嗟旋状の気中菌糸を形成し
、輪生枝は認められない。成熟した胞子鎖は１０〜５０
ケの胞子の連鎖を認める。胞子の表面はとげ状である。

（１１）各種培地における生育状態 色の記載について（）内に示す標準はＨｌＤ。

Ｔｒｅａｎ＠ｒ　＆　Ｅ、Ｊ、　Ｂａｃｋｕｍ著、　Ｓ
ｙｓｔｅｍ　ｏｆ　ｃｏｌａｒＷｈｅｅｌｓ　ｆｏｒ　
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｔｅ　Ｔａｘｏｕｏｍｙ　（Ｊ
、Ａｐｐｌ。

Ｍｌｃｒｏｂｌｏｌ、　１１巻３３５〜３３８頁、１９
６３年）を用い、補足的に日本色彩研究所出版の「色の
標準」を用いた。

第２表　各種培地における生育状態（２８℃）（ｌｉｔ
）生理的性質 （１）生育温度節１ｆｆｌ（イースト、麦芽寒天培地（
ｐ１１６．０）、２０℃、２８℃、３３℃、３７℃、４
２℃の各濃度で実験）：２０°Ｃ〜３７℃で生育が認め
られた。

（２）　　セ５チンの液化（グルコース　、ｌ、Ｏ）　
ン、ゼラチン培地、２０℃培養）：僅かに陽性（３）ス
ターチの加水分解（スターチ、無機塩寒天培地）：陽性 （４）脱脂牛乳の凝固及びペプトン化：僅かに凝固、及
び−１′ノトン化は陽性 （５）　　メラニン様色素の生成（トリプトファン、イ
ーストエキス、鉄寒天培地）：陽性 （１い各種炭素源の利用性（フリートノ・ム、コドリー
グ寒天培地）。

Ｄ−グルコース　　　　＋ Ｄ−フラクトース　　　＋ シュクロース　　　　　＋ イノシトール　　　　　＋ Ｌ−ラムノース　　　　＋ ラフィノース　　　　　＋ Ｄ−マンニット　　　　＋ 本発明による化合物Ｙ２６２−１　、　Ｙ２６２−２及
びＹ２６２−３の製造に使用する菌株の培養は、放線菌
の栄養源として通常使用されるそれ自体公知の培地組成
中で行うことが出来る。例えば炭素源としてはグルコー
ス、グリセリン、蔗糖、澱粉、マルトース、動植物油な
どが使用でき、窒素源としては、大豆粉、肉エキス、酵
母エキス、ベグトン、コー、ンスティーグリカー、綿実
粕、魚粉などの有機体窒素並びに硫酸アンモニウム、塩
化アンモニウム、硝酸ナトリウム、リン、酸アンモニウ
ムなどの無機体窒素が使用できる。又必要に応じて食塩
、塩化カリウム、リン酸塩、その他Ｍｇ’、Ｃ轟廿。

Ｚｎ廿、Ｆｅ　　、Ｃｕ　　、Ｍｎ　あるいはＮｉ　　
などの２価金属塩及びアミノ酸やピタずン類を添加する
ほか、発酵中の発泡を抑制するため、例えばシリコーン
他各種市販消泡剤を適宜添加することもできる。

温度、戸、通気攪拌および発酵時間などの発酵条件は、
用いられる菌株が最大量の核化合物を蓄積する様に選択
する。例えば、温度は２０〜４０℃、好ましくは２８℃
、−は５〜９、好ましくは６〜７において、発酵時間は
３〜１０日間、好ましくは６〜７日間で発酵を行うのが
有利である。

培養液からＹ２６２−１　、　Ｙ２６２−２及びＹ２６
２−３を単離、採取するには発酵終了後の培養液をその
まま、或は濃塩酸、濃硫酸、あるいは濃リン酸を加えて
−を１．０〜２．０、好ましくはｐＨ１，０としたのち
、およそ１〜１０時間室温、或は加温下にて攪拌する。

これを遠心分離するかまたはケイ藻土の如き適当な濾過
助剤の存在下で濾過することによシ、菌体と上清または
Ｆ液に分離する。遠心上清あるいはＦ液からはｐＨ７〜
９でクロロホルム、トルエン、酢酸エチル、シタノール
などの有機溶媒で抽出するか、あるいは適当な吸着担体
、例えば合成吸着樹脂（例えばＨＰ−２０：三菱樹脂社
製）、イオン交換樹脂で処理し吸着させたのち、含水ア
セトンやメタノールで抽出する。一方、菌体からは必要
によジアセトン、メタノール、エタノールもしくはエタ
ノール等の有機溶媒を用いて抽出する。いずれも濃縮乾
個して粗粉末′を採取し、シリカダルを用いるカラム及
び薄層クロマトグラフィー及び高速液体クロマトグラフ
ィーを適宜組合せることにより、Ｙ２６２−１　、　Ｙ
２６２−２及びＹ２６２−３を精製、単離することが出
来る。

以下に本発明を実施例によシ更に詳細に説明する。

実施例１ ストレプトミセス・ビオラ上ウスＡ２６２，５Ｃ−フ菌
株（微工研条菌寄第８７２０号）のＹ　８　（０，３チ
酵母エキス、１チ可溶性デンプン、］、５チ寒天、ｐＨ
７，２）斜面培養よシー白金耳を採シ、下記する種母培
地１００ｄを分注殺菌した５００ｍ／容三角フラスコＫ
ｉｌ！し、２８℃、ロータリーシェカー（２２Ｏｒｐｍ
　）にて２日間振盪培養して種母を作成した。

種母培地 可溶性デンプン　　　　　０．５％ グルコース　　　　　　　０．５　％ 大豆粉（ニスサンミート、味の素社製）１．０食塩　　
　　　　　　　　０，１ 第ニリン酸カリ　　　　　　０．１ 硫酸マグネシウム　　　　０．１ 水道水 ＰＩ（７，４（殺菌前） 次いで、下記組成の生産培地５１を入れ殺菌した１０ノ
容ジャーファーメンタ−３基に上記種母培養液を１基当
シ２００ｍ１ずつ添加接種した。

生産培地 可溶性デンプン　　　　　５．０チ エスサンミート（前出）　　　　３．Ｏｑ６酵母エキス
　　　　　　　０．２チ 食塩　　　　　　　　　　０．２チ 炭酸カルシウム　　　　　０．３チ ミネラル溶液＊０．２％ 水道水 ＰＨ７，０（殺菌前） ＊　ＣｕＳＯ４’５Ｈ２０２，８ｆ　、　　ＦｅＳＯ４
・７Ｈ２００，４ｆ、ＭｎＣｌ２・４Ｈ２０３，２？　
、　ＺｎＳＯ４’　２Ｈ２００，８ｙ−を蒸溜水５００
１Ｉｌｌに溶解した。

通気量２．５１７分、攪拌３５０回転／分、２８℃で６
日間培養した。培養液を回収し＠塩酸を添加して−を１
．０に調節したのち、６５℃で２時間加熱攪拌したのち
、遠心操作にて菌体と上清に分離した。菌体にはアセト
ン８ＩＩを加え、よく攪拌抽出したのち、濾過にてア七
トン抽出液を得た。

これをおよそ２ノまで減圧濃縮したのち、＋ＪＩ　２．
５となし、クロロホルム２１で抽出洗浄した。次いで、
４Ｎ苛性ソーダにてＰＨ８，０に調整し、クロロホルム
４１（総ｆｉｌ：）で抽出した。

一方、遠心上清に関しては２１のクロロホルムで抽市洗
浄したのち、４Ｎ苛性ソーダーにて−８，０に調整し、
クロロホルム５Ａ’（ｌｉｄ量）で抽出した。菌体から
のクロロホルム抽出物と混合し、少量まで濃縮する。こ
れに過剰のｎ−ヘキサンを添加して抽出物を沈澱させ、
真空乾燥してＹ２６２−１　、　Ｙ２６２−２及びＹ２
６２−３を含む粗粉末５，８ｙ−を採取した。

実施例２ 実施例１で行た粗粉末５．８　ｉ！−をシリカダルカラ
ムクロマト（ｍ３５鰭、シリカダルＣ−２００（和光紬
薬）　１００ｉＩ−）にかけ、下記の如き溶媒系で順次
展開した。

１、クロロホルム　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　１０００ｍ１２、りｏロホルムーメタノール
（５００：１）　　　　　　　　　　　５００　ｗＬ１
３、　　　　ｓ　　　　　　ｔｔ　　　　（２５０：１
）　　　　　　　　　　　５００ｍ１４、　　　　ｐ　
　　　　　ｔｔ　　　　（１００：１）　　　　　　　
　　　　５００ゴ５、　　　　＃　　　　　　ｐ　　　
　（５０：１）　　　　　　　　　　　２００ｍ１６、
　　　　ｔｔ　　　　　　ｎ　　　　（１０：１）　　
　　　　　　　　　２００ｍ１７、　クロロホルム−）
ｌｌ’／−ｈ−水（１００ＪＯ：０．１）　　　　　　
５００　ｍ１８、　　　　ｔｔ　　　　　　ｔｔ　　　
　　ｔｔ　（８０：１０：０．１）　　　　　　５００
ゴ９、　　　　ｐ　　　　　　／／　　　　　／／（５
０：１０：０．１）　　　　　１５００ＴＬ１１０、　
　　Ｉ／　　　　　　Ｉ　　　　　／／　（２０：１０
：０．１）　　　　　２０００　ＷＬｌＹ２６２−３は
Ａ６展開溶媒で溶出、次いでＹ２６２−１が基７溶媒で
、Ｙ２６２−２は屋９及び屋１ｏ溶媒の展開時に溶出し
た。又該当区分をそれぞれ濃縮乾個し、Ｙ２６２−１　
、　Ｙ２６２−２及びＹ２６２−３の各部分精製粉末を
それぞれ６１１η、６５２■及び８５０ηを得た。

実施例３ 実施例２で得たＹ２６２−１の部分精製粉末６１１■ヲ
、シリカダルカラムクロ−Ｖ）（φ２０龍、シリカｙ　
ルＣ−２００（前出）５０ｉＩＬ）で再クロマトを行っ
た。下記に示す溶媒で順次展開した。

扁１．クロロホルムーメタノール　　　　（１０：１）
　　　　　　　　５００ｍ／２、クロロホルム−メタノ
ール−Ｈ２Ｏ（１００：１０：０．１）　　　５００　
Ｒ／３、　　　　Ｉ　　　　　　　ｌ　　　　　ｌ　　
　（Ｚｏｏ：１５：０．１）　　　１０００１００Ｏ、
Ｉ　　　　　　　＃　　　　　ｔｔ　　　（１００：２
０：０．１）　　　５００ａｌＡ３〜４の溶媒で溶出し
九Ｙ２６２−１区分を集め、濃縮乾個して３５０岬のＹ
２６２−１粉末を得た。

これをさらに、分取用シリカダル薄層グレートＰＦ２５
４　（メルク社製）１７枚の下端よυ２０闘位に塗布、
溶媒系クロロホルム−メタノール−ギ酸（４０：１０：
１）で展開した。Ｙ２６２−１部分をかきとり、クロロ
ホルム−メタノール（２：１）で抽出、濃縮乾個して再
び分取用シリカグル薄層グレー）　ＰＦ２５４　（前出
）１２枚に塗布、溶媒系りＯＣｌホにムーメタノールー
濃アンモニア水（３０：１０：０．２）で展開した。Ｙ
２６２−１部分をかきとジクロロホルム−メタノール（
２：１）で抽出、濃縮乾個した。これを１１５０Ｍ酢酸
（ｐＨ３，０）５０ｍｌに溶解、トルエン３０ばて２回
抽出洗浄したのち、４Ｎ苛性ソーダーで−を８．０に調
整し、クロロホルムで抽出した。水洗したのち、芒硝で
乾燥させ、濃縮し、過剰のｎ−へキサンを添加して沈殿
、ｐ過集積し、真空乾燥して純度９９チ以上のＹ２６２
−１　１５８岬を取得した。Ｙ２６２−１の物理化学的
性状は下記の通シである。

Ａ）性状：黄色粉末 Ｂ）融点：１７４−１７５℃ Ｃ）　　（α）乙３：＋１８５°　（ｃ　Ｏ，０２、Ｃ
ＨＣｌ５　）Ｄ）紫外可視吸収スペクトル λ９０％ＣＨ３°Ｈｎｍ　（Ｅ　”　）　：　２０５　
（３７２）　、　２３１（７０３）。

ｍｌＸ　　　　　　　ＩＣｍ ２５８（４５１）　、　２９１ｓｈ （１５１）　、　４３５（２１６） λ０．０１Ｎ　ＨＣｌ−９０チＣＨＯＨ１チｍ１ＬＸ　
　　　　　’　　ｎｍ（Ｅｌ（１７ｍ　）　”２０４（
３６４）　、　２３１（７１６）　、　２５８（４４８
）　。

２９１ｓｈ（１５２）　、　４３５（２１７）λ０．０
１ＮＮａＯＨ−９０％ＣＨｓＯＨｎｍ　（Ｅｘ＊　）：
ｍｉｘ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ｔｃ
１ｒＬ２０５（５２４）　、　２３４（６００）　、　
２９２（１６３）　。

４０４（９３）、５１０（１２７） Ｅ）　　赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ　）シｃｍ−’
　：３４００．２９５０，１６３０，１６１０．１５８
０，１４６０゜１３８０．１３３０，１２７０．１２２
０．１１２０，１０２０゜９９０．９１０，８００ Ｆ）　　ＦＤ−ＭＳスペクトル： ｔｒｙ’ｓ　５２７　（Ｍ＋）　　（”２ａＨｓｓＯｑ
Ｎとしてｍｗ。

５２７．５７　） Ｇ）プロトン核磁気共鳴スペクトル（４００ＭＨｚ）Ｃ
ＤＣｔ、−ＣＤ５０Ｈ（１０：１）中゛１淀プロトン　
　　　ＪＰｐｍ １−Ｈ７，８１ｄ　　（Ｊ＝７．５Ｈｚ）２−Ｈ’７．
６２　　ｔ　　（Ｊ＝７．５Ｈｚ）　　　　　　α−シ
トロマイ３−Ｈ７，３０ｄ　　（Ｊ＝７．５Ｈｚ）　　
　　　　”’部分６−Ｈ８，０Ｏｓ ７−Ｈ４，８６ｄｄ　　（Ｊ＝６．０１（ｚ、２．０Ｈ
ｚ）８−Ｈａ　　　　　２．３８　　ｄｄ　　（Ｊ＝１
５．０Ｈｚ、６．０Ｈｚ）８−Ｈｂ　　　　　２．０２
　　ｂｄ　　（Ｊ＝１５．０Ｈｚ）１０−Ｈ５，０３ｇ １３−Ｈａ　　　　１．８１　　ｑ　　（Ｊ＝７．５Ｈ
ｚ）１３−Ｈｂ　　　　１．８０　　ｑ　　（Ｊ−７，
５Ｈｚ）１４−ＣＨｓ　　　１．０９　　ｔ　　（Ｊ＝
７．５Ｈｚ）１’−Ｈ５，３４ｄ　　（Ｊ−４，０Ｈｚ
）２’−Ｈａ　　　　１．６９　　ｄｔ　　（Ｊ−１６
，０Ｈｚ、４．０Ｈｚ）　　１０位結合の２’−Ｈｂ　
　　　１．５４　　ｄｄ　　（Ｊ＝１６．０Ｈｚ、５．
０Ｈｚ）　　”’ミツ部分３’−Ｈ２，２９ｍ　　（Ｊ
＝１６．０Ｈｚ、５．０Ｈｚ、３．０Ｈｚ）ぎ−Ｎ（Ｃ
Ｈ３）２２．２２　　！１ ４′−Ｈ３，６８ｂｓ ５”Ｈ３，９４ｑ　　（Ｊ＝７．０Ｈｚ）６’−Ｈ１，
３４ｄ　　（Ｊ＝７．０Ｈｚ　）実施例４ 実施例２で得たＹ２６２−２の部分精製粉末６２５岬を
、シリカダルカラムクロマト（φ２ｏＩ１１、シリカダ
ルＣ−２００（前出）５Ｏ？）で再クロマトを行った。

下記に示す溶媒系で順次展開した。

墓１．クロロホルムーメタノール−Ｈ２０（１００：１
０：０．１）　　　５００ｒｔｒ１２−　　’　　　　
ｊＦ　　　Ｉ　　（１００：１２：０．１）　　５００
ｍ１３、＃　　　　ｐ　　　ｙ　　（１００：２０：０
．２）　　５００ｍ１４、　　ｐ　　　　ｔｒ　　　ｐ
　　（１００：３０：０．２）　　５００ｍ１５、　　
＃　　　　ｐ　　　ｔｔ　　（１００：４０：０．２）
　　５００ｍ１６、　　ｉｔ　　　　ｔｔ　　　＃　　
（１００：５０：０．５）　　５００ｍ／７、　　ｔｔ
　　　　ｌ　　　＃　　（１００：Ｚｏｏ：１．０）　
　５００ｍ１Ｙ２６２−２溶出区分を集め濃縮乾個して
２７８１９のＹ２６２−２粉末を得た。

これをさらに、分取用シリカダル薄層グレートＰＦ２５
４　（前出）１７枚の下端よシ２０１１１位置に塗布シ
、クロロホルム−メタノール−ギ酸（２０：１０：１）
系で展開した。Ｙ２６２−２部分をかきとシ、メタノー
ルで抽出、濃縮乾個して再び分取用シリカダル薄層プレ
ート６枚に塗布、クロロホルム−メタノール−アンモニ
ア水（３０：１０：０．２）で展開した。Ｙ２６２−２
部分をかきとり、メタノールで抽出、これに水及びクロ
ロホルムを加え、振盪し、クロロホルム層に転溶させた
。水洗し、１１５０Ｍ酢酸（ｐＨ３，０）６０ゴで抽出
した。これをトルエン３０ｒＩＬｌで２回抽出洗浄した
のち、４Ｎ苛性ソーダーでＰＨを８．０となし、クロロ
ホルム１５０ｍ／（総量）で抽出した。水洗し、芒硝で
乾燥させたのち、減圧濃縮し、過剰のｎ−ヘキサンを添
加して沈殿させ、沖過集積、真空乾燥して９９ｑ６以上
純度のＹ２６２−２　１２４■を取得した。

Ｙ２６２−２の物理化学的性状は下記の通）である。

Ａ）性状：黄色粉末 Ｂ）融点：１３４〜１３７°Ｃ Ｃ）　　（α）、、＋１４９°（ｃ　Ｏ，０２、ＣＨＣ
Ｌｓ　）Ｄ）紫外可視吸収スペクトル λ９０％ＣＨＯＨ１チ　　。

ｍ□５ｎｍ（Ｅｌ、Ｌ）、２０５（３２５）、２３１（
５７８）、２５８（３７１）　、　２９３ｓｈ（１２４
）　、　４３６λ０．０ＩＮＨＣｔ−９０％ＣＨｓＯＨ
ｎｍ　（，１９６）　：ｍａｘ　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　１ｃＷＬ２０５（３０３）　、　２
３１（５８８）　、　２５８（３６９）　。

２９３ｓｈ（１２５）　、４３６（１７８）λ０．０Ｉ
ＮＮａＯＨ−９０％ＣＨ３０Ｈｎｍ　（、１％　）　：
ｍａｘ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
ｃｔｎ２０４（４５６）、２３４（４８６）　、２９３
（１３４）。

４０４（７５）　、　５１２（１０６）Ｅ）赤外線吸収
ス（クトル（ＫＢｒ　）シｃｍ−’　：３４００．２９
５０，１６２０，１６１０，１５８０，１４６０゜１３
７０．１３３０．１２７０，１２２０．１１２０．１０
２０゜９９０．９１０．８００ Ｆ）　　ＦＤ−ＭＳスペクトル： ｍ／ｚ　６８４　（Ｍ＋）　　（Ｃ５４Ｈ４８０１１Ｎ
２としてｍ、ｖｒ、　６８４．７８　） Ｇ）プロトン核磁気共鳴スイクトル（４００ＭＨｚ　）
ＣＤＣｌ２−ＣＤ５０Ｈ（１０：１）中で測定プロトン
　　　　　　　δｐｐｍ １−Ｈ７，８３ｄ　　　（Ｊ＝８．０Ｈｚ）２−Ｈ７，
６９ｔ　　　（Ｊ＝８．０Ｈｚ）　　　　　　　α−シ
トロマイシ３−Ｈ７，３１ｄ　　”（Ｊ＝８．０Ｈｚ）
　　　　　　７７部分６−Ｈ７，８４ｔｔ ７−Ｈ４，９６ｄｄ　　（Ｊ−６，０Ｈｚ、４．０Ｈｚ
）８−Ｈａ　　　　　　２．４９　　ｄｄ　　　（Ｊ＝
１７．０Ｈｚ、６．０Ｈｚ）８−Ｈｂ　　　　　　２．
０７　　ｂｄ　　　（Ｊ＝１７．０Ｈｚ、４．０Ｈｚ）
１０−Ｈ５，１０ｍ １３−Ｈａ　　　　　１．８３　　　ｑ　　　（Ｊ＝７
．５Ｈｚ）１３−Ｈｂ　　　　　１．７３　　　ｑ　　
　（Ｊ−７，５Ｈｚ）１４−ＣＨｓ　　１．１２　　ｔ
　　’（Ｊ＝７．５Ｈｚ）１’−Ｉ（５，２５ｄ　　　
（Ｊ＝４．０Ｈｚ）２’−Ｈａ　　　　　　１．６８　
　ｄｔ　　　（Ｊ＝１６．０Ｈｚ、４．０Ｈｚ）２’−
Ｈｂ　　　　１．５４　　ｄｄ　　（Ｊ＝１６．０Ｈｚ
、５．０Ｈｚ）　　１０位結合ノ３’−１（２，２５ロ
円ペン部分 ３’−Ｎ（Ｃ１も）２２．２２　　ｇ ４’−Ｈ３，６７ｂｓ ５’−Ｈ３，９３ｑ ６′−Ｈ１，３８ｄ　　（Ｊ＝７．０Ｈｚ）３”−Ｈ２
，３８ｍ　　（Ｊ＝１６．０Ｈｚ、５．０）［ｚ、３．
０Ｈｚ）３“−Ｎ（ＣＨ５）２２．２７　　ｇ ４“−Ｈ３，７１ｂｇ ５“−Ｈ４，０３ｑ　　（Ｊ＝７．０Ｈｚ）６＃−Ｈ１
，４０ｄ　　（Ｊ−７，０Ｈｚ　）実施例Ｓ 実施例２で得たＹ２Ｏ２−３の部分精製粉末８５０■を
シリカダルカラムクロマト（φ２０１１１１、シリカゲ
ルＣ−２００（前出）５０１Ｆ）で再クロマトを行なっ
た。下記に示す溶媒系で順次展開した。

扁１　クロロホルム−メタノール−濃アンモニア水（１
００：８：０．０５）５０〇− ７ｆＬ２　　　　ｔｔ　　　　　　　ｔｔ　　　　　　
　　Ｉ　　　　　（１００：１０：０．１）１０００Ｉ
ＩＩ１ 分画組成を薄層クロマトグラフィーで調べ、Ｙ２Ｏ２−
３を含む区分を集め濃縮乾個して２２０キのＹ２Ｏ２−
３粉末を得た。

これをさらに分取用シリカゲル薄層プレートｐｙ２５４
　（メルク社製）３０枚の下端よｐｚＱｗｍ位に塗布、
溶媒系クロロホルム−メタノール−水−酢酸（４０：１
０：０．４：０．２）で展開した。

Ｙ２Ｏ２−１部分をかきとシ、クロロホルム−メタノー
ル（２：１）で抽出、濃縮乾個した。これを１１５０Ｍ
酢酸（ｐ’（３，０）　５０ｍｌに溶解、トルエン３０
ｍで２回抽出洗浄したのち、４Ｎ苛性ソーダーでｐ）（
を８．０に調整し、クロロホルムで抽出した。

水洗したのち、芒硝で乾燥させ、濃縮し、過剰のｎ−へ
キサンを添加して沈殿、濾過集積し、真空乾燥して純度
９８．５％のＹ２Ｏ２−３を１０８ｒ１１ｉ取得した。

Ｙ２Ｏ２−３の物理化学的性状は下記の通シである。

Ａ）性状：黄色粉末 Ｂ）融点：　１２７−１３０℃ Ｃ）　　（α几３：＋１０８°（ｃ　０１０２　、ＣＨ
Ｃ４ｓ中）Ｄ）紫外可視吸収スペクトル λｇ（＄ＣＨ５°Ｈｎｍ　（Ｅ　に）　：　２０４　（
４０３）、２３１（７４３）。

ｍｉｘ ２５８（４９２）、２９０ｓｈ（１６８）、４３５（２
３０）λ０，０ＩＮＨＣ１−９０チＣＨ，ＯＨ１チｍａ
ｘ”ｍ（Ｅｌｃｍ　）　’ ２０４（３８９）、２３１（７，４０）　、２ｊ８（４
９３）、　２９０ｓｈ（１６７）、４３５（２３１） ２０．０１ＮＮａＯＨ９０％ＣＨＯＨ１％　。

ｍｉｘ　　　　　　５１ｍ（Ｅｌ、、）　’２０７（７
４７）、２４０（６８７）、２８５（１７５）、４０２
（７６）、４９８（１７６） Ｅ）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ　）シｃｍ−’　：
３４００．２９４０，１６２１５，１６０５，１５８０
，１４６０，１３７０゜１３３０．１２６０，１２０５
，１０３０，１０２０，９８０，７９０Ｆ）　　ＦＤ−
ＭＳスイクトル： ｎ７ｚ　　５２７　（Ｍ＋）　　（”２ａＨｓｓＯｑＮ
としてｍ、　ｖ。

５２７．５７） Ｇ）プロトン核磁気共鳴スペクトル（４００！１ｌＩｆ
（ｚ）ＣＤＣ１，中で測定 プロトン　　　　　　　δｐｐｍ １−Ｈ７，８１ｄ　　　（Ｊ＝８．０Ｈｚ）２−Ｈ７，
６８ｔ　　　（Ｊ＝８−ＯＨｚ）　　　　　　　α−シ
トロマイシ３−Ｈ７，３２ｄ　　（Ｊ＝８．０Ｈｚ）　
　　　　”部分６−Ｈ７，７５ｇ ７−）（４，９２ｔ　　　（Ｊ＝４．０Ｉ（ｚ）１０−
Ｈ４，９５ｍ １３−Ｈａ　　　　　１．８９　　　ｑ　　　（Ｊ＝７
．５Ｈｚ）１３−Ｈｂ　　　　　１．７３　　　ｑ　　
　（Ｊ＝７．５Ｈｚ）１４−ＣＨｓ　　　　１．１３　
　　ｔ　　　（に１．５）（ｚ）１’−Ｈ５，３５ｂｇ ３′−Ｈ２，３ｍ ３′〜Ｎ（ＣＨ３）２　２．２２　　　ｓ４′−Ｈ３，
７１ｂＢ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ＿１及びＲ＿２は同時に基▲数式、化学式、表
   等があります▼を表わすか、又個別に基▲数式、化学式
   、表等があります▼若しくは水素原子を表わす、 で示される新規なアントラサイクリン抗生物質。