PL182434B1

PL182434B1 - Peptydy somatostatynowe, środek farmaceutyczny i sposób wytwarzania peptydów somatostatynowych

Info

Publication number: PL182434B1
Application number: PL95310274A
Authority: PL
Inventors: Rainer Albert; Christian Bruns; Peter Smith-Jones; Barbara Stolz; Gisbert Weckbecker
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1994-09-06
Filing date: 1995-09-04
Publication date: 2002-01-31
Also published as: ES2157309T3; JPH0881498A; AU3041495A; BR9503936A; CZ287012B6; PL310274A1; SK108895A3; SK283774B6; NO316569B1; DE69520256T2; GB9417873D0; EP0714911A3; CN1127259A; US6277356B1; EP0714911B1; KR100364111B1; GR3035997T3; HUT72895A; FI954147L; HU218284B

Abstract

1. Peptydy somatostatynowe o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, w postaci zwiazku wolnego lub kompleksu z radioaktywnym lanta- nowcem. 4. Srodek farm aceutyczny, zn a m ien - ny tym , ze zaw iera peptydy som atostatyno- we o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, przy czym zwiazek ma postac kompleksu z radioakty- wnym lantanowcem, wraz z jednym lub wieksza liczba farmaceutycznie dopuszczalnych nosni- ków lub rozcienczalników. 8. Sposób wytwarzania peptydów soma- tostatynowych o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem, znamienny tym, ze zwiazek o wzo- rze 1 w postaci nieskompleksowanej poddaje sie reakcji ze zwiazkiem dostarczajacym radioakty- wny lantanowiec, w temperaturze 60-120°C, ewentualnie w obecnosci stabilizatora. W Z ÓR 1 PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku są peptydy somatostatynowe, środek framaceutyczny zawierający te peptydy oraz sposób wytwarzania peptydów somatostatynowych. Te środki farmaceutyczne znajdują zastosowanie jako środki radiofarmaceutyczne, np. w radioterapii nowotworów zawierających receptory somatostatyny.

Zaletą radioterapii nowotworów za użyciem związków radioaktywnych jest selektywne docieranie do nowotworów i ich przerzutów, co ogranicza dawkę promieniowania, którą otrzymują normalne tkanki. Środek radioterapeutyczny powinien szybko gromadzić się i długo pozostawać w docelowych narządach, np. w narządzie zawierającym nowotwór, a szybko znikać z układu krążenia, dla obniżenia dawki promieniowania, jaką otrzymuje cały organizm. Środek radioterapeutyczny zawierający związek chelatowy z metalem radioaktywnym powinien być także termodynamicznie i/lub kinetycznie odporny na utratę metalu radioaktywnego. Środek radioterapeutyczny podawany wielokrotnie nie powinien być immunogenny.

Dokument GB-A-2 225 579 ujawnia peptydy somatostatynowe zawierające co najmniej jednągrupę chelatująca, którą można znaczyć radioaktywnie; stosuje się je w diagnostyce i terapii in vivo. Związki te są zdolne do wiązania się z receptorami somatostatyny, np. ulegającymi ekspresj i lub nadekspresji w nowotworach i przerzutach. Dokument EP-A2-607 103 opisuje peptydy somatostatynowe zawierające dwufunkcyjnągrupę chelatującąkwasu poliaminopolikarboksylowego przyłączoną do ich końca aminowego za pośrednictwem grupy mostkowej. Mimo, że obecność tej dwufunkcyjnej grupy chelatującej (ośmiokleszczowej) i grupy mostkowej prowadzi do polepszenia pewnych właściwości powstałego sprzężonego związku, to nadal istnieje naglące zapotrzebowanie na środek radiofarmaceutyczny o jeszcze lepszych właściwościach, zwłaszcza o wysokim stosunku narząd docelowy/nerki, dla zminimalizowania dawki promieniowania w nerkach.

182 434

Stwierdzono nieoczekiwanie, że niżej ujawnione peptydy somatostatynowe, zawierające jednofunkcyjny DOTA (kwas 1,4,7,10-tetraazacyklododckano-1,4,7, 10-tetraoctowy) sprzężony bezpośrednio (to jest bez udziału grupy mostkowej) z końcową grupą aminową peptydów somatostatynowych, wykazują lepsze właściwości. W szczególności, mają one korzystniejszą wartość stosunku narząd docelowy/nerki, a zatem dostarczają nerkom mniejszej dawki promieniowania.

Peptydy somatostatynowe, zgodnie z wynalazkiem, przedstawia wzór 1, w którym M oznacza wodór i mająone postać związku wolnego lub kompleksu z radioaktywnym lantanowcem.

Należy wziąć pod uwagę, iż każde wiązanie — łączące dwa atomy azotu we wzorze 1 jest wiązaniem etylenowym, a ugrupowanie peptydowe związku o wzorze 1 odpowiada [Tyr³]-oktreotydowi.

Związki o wzorze 1 mogą także istnieć w postaci soli wewnętrznej względnie w postaci addycyjnych soli z kwasami. Do addycyjnych soli z kwasami należą np. sole otrzymane drogą addycji kwasu organicznego polimerycznego lub nieorganicznego, np. chlorowodorek, octan, trifluorooctan lub mleczan.

Określenie radioaktywne lantanowce oznacza zwłaszcza ⁹⁰Y, ^I40La, ¹⁶¹Tb, ^,69Er, ¹⁵³Sm, ¹⁷⁷Lu, 166Dy, ^l66Ho lub ^Yb, korzystnie ^Tb i 90Y, a najkorzystniej 9°Y

Korzystnie, peptydy mająpostać kompleksu z 90y lub postać kompleksu z ^16lTb.

Związki o wzorze 1 można wytwarzać sposobami analogicznymi do znanych metod. Przykładowo, można je wytworzyć następująco:

a) przez usunięcie co najmniej jednej grupy zabezpieczającej obecnej w związku o wzorze 1 w postaci zabezpieczonej, lub

b) przez połączenie ze sobą wiązaniem amidowym dwóch jednostek peptydowych, z których jedna zawiera co najmniej jeden aminoalkohol, w postaci zabezpieczonej lub niezabezpieczonej, a druga zawiera grupę DOTA, przy czym to wiązanie amidowe jest takie, że otrzymuje się pożądaną sekwencję aminokwasową o wzorze 1, po czym ewentualnie prowadzi się etap a) sposobu, lub

c) przez połączenie ze sobą DOTA i żądanego peptydu somatostatynowego, w postaci zabezpieczonej lub niezabezpieczonej, w taki sposób, że grupę pochodzącą z DOTA przyłącza się do końca aminowego peptydu, po czym ewentualnie prowadzi się etap a) sposobu, lub

d) przez utlenienie DOTA-peptydu o sekwencji aminokwasowej o wzorze 1, w którym grupy merkapto rodników Cys są w wolnej postaci, tak aby wytworzyć związek o wzorze 1, w którym te dwa rodniki Cys są połączone mostkiem S-S-, i wyodrębnienie tak otrzymanych pochodnych o wzorze 1 w postaci wolnego związku, soli lub kompleksu z radionuklidem.

Powyższe reakcje można prowadzić w sposób analogiczny do znanych metod, np. sposobem opisanym w zamieszczonych dalej przykładach. Gdy jest to pożądane, można w tych reakcjach stosować, odpowiednie do użycia w peptydach lub chelatujących grupach DOTA, grupy zabezpieczające (dla zabezpieczenia grup funkcyjnych nie biorących udziału w reakcji). Określenie grupa zabezpieczająca może również obejmować żywicę polimeryczną zawierającą grupy funkcyjne. W etapie (c) sposobu, DOTA można stosować w postaci wolnego kwasu, jako bezwodnik lub zaktywowany ester, np. z N—hydroksysukcynimidem.

Sposób wytwarzania peptydów somatostatynowych o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem, zgodnie z wynalazkiem charakteryzuje się tym, że związek o wzorze 1 w postaci nieskompleksowanej poddaje się reakcji ze związkiem dostarczającym radioaktywny lantanowiec, w temperaturze 60 - 120°C, ewentualnie w obecności stabilizatora.

Korzystnie, reakcję prowadzi się w temperaturze 80 - 100°C, a jako związek dostarczający radioaktywny lantanowiec stosuje się jego sól. Gdy wytwarzanie kompleksu prowadzi się w temperaturze > K)0°C, można je realizować w autoklawie. Reakcję można prowadzić przez krótki okres czasu, np. 10- 20 minut. Gdy radioaktywnym lantanowcem jest 90γ, to korzystną solą dostarczającą 90Y jest 90 YC1₃.

182 434

Wyżej wspomniane reakcje można korzystnie prowadzić w warunkach zapewniających brak zanieczyszczeń metalami śladowymi. Korzystnie, w celu zmniejszenia wpływu metali śladowych, stosuje się destylowaną wodę zdejonizowanąi ultraczyste reagenty oraz unika się radioaktywności pochodzącej od nośników.

Związki o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnymi lantanowcami wykazuj ą aktywność farmaceutyczną, a zatem są stosowane jako środki radiofarmaceutyczne do leczenia in vivo nowotworów i przerzutów, które zawierająreceptory somatostatyny dające się oznaczyć w standardowych testach. Związki te są również stosowane do wytwarzania środków farmaceutycznych.

Środek farmaceutyczny, zgodnie z wynalazkiem charakteryzuje się tym, że zawiera peptydy somatostatynowe o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, przy czym związek ma postać kompleksu z radioaktywnym lantanowcem, wraz z jednym lub większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych nośników lub rozcieńczalników.

Korzystnie, środek zawiera peptydy o wzorze 1 postaci kompleksu z ⁹⁰Y lub z ¹⁶¹Tb.

Korzystnie, środek zawiera dodatkowo stabilizator.

Korzystnie, środek zawiera stabilizator wybrany z grupy obejmującej albuminę surowicy, kwas askorbinowy, retinol, kwas gentyzynowy lub jego pochodną oraz roztwór aminokwasu.

Środek farmaceutyczny można wytwarzać za pomocą znanych sposobów.

Stabilizator, np. akceptor wolnych rodników, hamuje autoradiolizę ugrupowania peptydowego. Odpowiednim stabilizatorem jest roztwór aminokwasów do wlewów, jak stosowany do pozajelitowego karmienia białkowego, korzystny wolny od elektrolitów i glukozy, np. handlowy wlew aminokwasowy taki, jak Proteinsteril® KE Nephro. Korzystnie, stabilizator stosuje się w stosunku wagowym 1 000 -10 000: 1, zwłaszcza 4 000 - 7 000: 1 względem związku o wzorze 1 w postaci nieskompleksowanej. Środki farmaceutyczne mogą zawierać dalsze dodatki, np. środek ustalający wartość pH w zakresie 7,2 - 7,4, jak octan sodowy lub amonowy, albo Na₂HPO₄. Korzystnie, stabilizator dodaje się do związku o wzorze 1 w postaci nieskompoleksowanej i kompleksowanie radioaktywnym lantanowcem prowadzi się w obecności stabilizatora. Kompleksowanie można wygodnie prowadzić w warunkach braku powietrza, np. w atmosferze azotu lub argonu. Po zakończeniu kompleksowania można jeszcze dodać stabilizator.

Związki o wzorze 1 wykazują, w szczególności, powinowactwo do receptorów somatostatyny, które to powinowactwo można ocenić in vitro w testach wiązania prowadzonych metodami ujawnionymi w pracach J. C. Reubi. Life Sc., 36,1829 (1985) i C. Bruns i inni, Biochem. J., 265, 339 (1990).

Zaobserwowano, że związki o wzorze 1, np. związek o wzorze 1 w postaci kompleksu z ^9(>Y lub ¹⁶1 Tb, wiążą się z dobrym powinowactwem i dobrą specyficznością do receptorów' somatostatyny przy wartościach pK_D około 8,0 - 10,0.

Związek z przykładu 1 wiąże się z wysokim powinowactwem do receptorów somatostatyny występujących w komórkach kory szczura lub komórkach nowotworu trzustki AR42J: przy użyciu [^,25I][Tyr³]-oktreotydu jako ligandu specyficznego wartości pKi dla tego związku wynosi ^9,9 ± ^0,1 . Związek z przykładu 2 jest specyficznym ligandem dla receptorów somatostatyny, który może zostać wyparty przez oktreotyd: plC5₀ = 9,0 ± 0,3.

Powinowactwo skompleksowanych związków o wzorze 1 do receptorów somatostatyny można także wykazać w testach in vivo, zgodnie ze standardowymi metodami testowymi, np. metodą ujawnioną w dokumencie GB-A-2 225 579. Przykładowo, w jednej z prób związek z przykładu 2 był w znaczącym stopniu nagromadzony w nowotworze w ciągu dwóch godzin po dootrzewnowym wstrzyknięciu dawki 5 pCi myszom z zewnątrzwydzielniczym nowotworem trzustki: 9,35 ± 0,70% ID/g znajdowało się w nowotworze zawierającym receptory somatostatyny, podczas gdy znacząco mniej radioaktywności nagromadziło się w normalnych tkankach zawierających receptory somatostatyny, np. ilość w trzustce wynosiła 1,52 ± 0,08% ID/g. Określenie % ID/g oznacza procent wstrzykniętej dawki radioaktywności w 1 g tkanki. Dla związku z przykładu 2 otrzymano, po 24 godzinach od wstrzyknięcia, nie tylko wysoki stosunek nowotwór/nerki, ale także wysoki stosunek nowotwór/wątroba i nowotwór/kość udowa.

182 434

Ze względu na to, że szpik kostny jest uważany za organ najbardziej wrażliwy na promieniowanie, małe nagromadzenie radioaktywności w kościach jest szczególnie korzystne.

Związki o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem wykazują działanie przeciw rozmnażaniu się komórek nowotworowych zawierających receptory somatostatyny, co np. wykazano w testach na nagich myszach.

Komórki szczurzego nowotworu trzustki AR42J poddano trypsynizacji i 1 x 10⁷ komórek nowotworowych (w 0,2 ml) wstrzyknięto podskórnie w oba boki nagich myszy. Gdy nowotwory osiągnęły znaczącą objętość 0,1 - 2 ml, zwierzęta podzielono stochastycznie na grupy kontrolne i leczone. Zwierzęta kontrolne otrzymywały albo nieskompleksowany związek o wzorze 1, albo odpowiedni zimny związek kompleksowy o wzorze 1, drogą wstrzyknięcia dootrzewnowego w dawkach odpowiadających najwyższej dawce w grupie leczonej. Każda mysz otrzymywała dawkę od 0,8 mCi aż do 40 mCi/kg/100 pl. Wielkość nowotworów oceniano z użyciem specjalnego cyrkla. W celu obliczenia objętości nowotworu w ml stosowano równanie: objętość (elipsoidalna) = długość x głębokość x wysokość x 0,52. Do obliczeń statystycznych użyto testu t-Studenta. W tym teście po upływie jednego tygodnia zaobserwowano przejściowe kurczenie się nowotworów, a wzrost nowotworów był opóźniony przez dwa tygodnie po jednorazowym podani związku z przykładu 2. Wprost przeciwnie wyniki uzyskano w grupie kontrolnej, w której nowotwory stale rosły, podwajając swe rozmiary po około 7 dniach. Stopień przeżycia w grupach leczonych znacząco wzrósł.

Podobne wyniki otrzymano przy leczeniu związkiem z przykładu 2 myszy lub szczurów z innymi nowotworami, np. rakiem sutka lub drobnokomórkowym rakiem płuc.

A zatem, rozwiązania będące przedmiotem wynalazku umożliwiają;

1. zastosowanie związku o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli jako środka radiofarmaceutycznego do leczenia in vivo nowotworów i przerzutów zawierających receptory somatostatyny,

2. leczenie in vivo nowotworów i przerzutów zawierających receptory somatostatyny, np. leczenie inwazyjności takich nowotworów lub objawów związanych ze wzrostem takich nowotworów, u pacjenta potrzebującego takiego leczenia, przy czym leczenie polega na podawaniu pacjentowi terapeutycznie skutecznej ilości związku o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli,

3. zastosowanie związku o wzorze 1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli do wytwarzania środka radiofarmaceutycznego.

Dawki stosowane w praktyce radioterapii będąsię, oczywiście, zmieniały, przykładowo w zależności od danego leczonego stanu, od znanej wrażliwości nowotworu danego typu na promieniowanie, objętości nowotworu i pożądanej terapii. Ogólnie, dawkę oblicza się na podstawie rozkładu radioaktywności w każdym narządzie i od obserwowanego poboru przez docelowy narząd. Kompleks o wzorze 1 emitujący promieniowanie β można podawać kilkakrotnie, np. w ciągu 1 - 3 tygodni lub dłużej. Wskazana dawka wynosi 5-100 pg związku o wzorze 1 skompleksowanego np. z 10-100 mCi radioaktywnego lantanowca, jak ⁹⁰Y lub ^l6lTb, przy czym w przypadku ^l6lTb jest korzystny, wyższy zakres radioaktywności.

Związki o wzorze 1 skompleksowane z radioaktywnymi lantanowcami można podawać dowolną, dogodną drogą, zwłaszcza dożylnie, np. w postaci roztworów lub zawiesin do wstrzyknięć. Można je także, korzystnie podawać jako wlew, np. wlew trwający 30 - 60 minut. W zależności od umiejscowienia nowotworu, można je podawać możliwie najbliżej tego miejsca, np. z użyciem zgłębnika. Można także powtarzać ich podawanie, w dawkach podzielonych.

Do nowotworów, które można leczyć za pomocą tych kompleksowych związków należą np. nowotwory przysadki, nowotwory układu żołądkowo-jelitowego i trzustki, rakowiaki, nowotwory ośrodkowego układu nerwowego, stercza, jajnika lub okrężnicy, drobnokmórkowy rak płuc, przyzwojaki, rak nerek, rak skóry, nerwiaki niedojrzałe, nowotwory złośliwe złożone z komórek chromochłonnych, rak rdzeniasty tarczycy, szpiczaki, chłoniaki, choroba Hodgkinga i nie-Hodgkinga, nowotwory kości i ich przerzuty'.

182 434

Wydzielanie radioaktywnych związków zachodzi zasadniczo przez nerki. Dalsze zabezpieczenie nerek przed nagromadzeniem się substancji radioaktywnej można osiągnąć przez podawanie lizyny lub argininy, albo roztworu aminokwasów o dużej zawartości lizyny i/'lub argininy, np. takiego handlowego roztworu aminokwasów, jak Vamina® 18EF lub Synthamin®-14 lub -10, przed wstrzyknięciem lub wraz ze związkiem o wzorze 1 w postaci kompleksu.

Związki o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem mogą istnieć wpostaci wolnego kwasu lub farmaceutycznie dopuszczalnych soli, które wykazująten sam rząd aktywności, co kompleksy w postaci wolnego kwasu.

Korzystny jest związek z przykładu 1 w postaci kompleksu z ⁹⁰Y.

Związki o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem można także stosować w leczeniu chorób autoimmunologicznych lub stanów zapalnych przebiegających z udziałem receptorów somatostatyny, np. w reumatoidalnym zapaleniu stawów.

Ponadto, związki o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem można stosować jako środek pomocniczy lub adiuwant w terapii cytostatykami, np. łącznie ze środkiem cytostatycznym, korzystnie ze środkiem cytostatycznym wzmagającym efekty radioterapii poprzez działanie jako środek uczulający na promieniowanie. Przykładami odpowiednich środków cytostatycznych czy uczulających na promieniowanie sącisplatyna, 5-fluorouracyl, cyklofosfamid i doksorubicyna.

Zgodnie z powyższym, rozwiązania będące przedmiotem wynalazku dodatkowo umożliwiają:

1. leczenie inwazyjności nowotworów zawierających receptory somatostatyny lub obj awów związanych ze wzrostem takich nowotworów u pacj enta potrzebuj ącego takiego leczenia, przy czym leczenie polega na podawaniu pacjentowi skutecznej ilości a) związku o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem lubjego farmaceutycznie dopuszczalnej soli i b) drugiego leku będącego środkiem cytostatycznym,

2. wytworzenie kompozycji terapeutycznej, np. zestawu, do stosowania w leczeniu inwazyjności nowotworów lub objawów związanych ze wzrostem nowotworów, która to kompozycja obejmuje środek farmaceutyczny stanowiący związek o wzorze 1 w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól oraz, dodatkowo, co najmniej jeden środek farmaceutyczny stanowiący środek cytostatyczny.

Środek cytostatyczny można stosować w dowolnej ilości znanej jako ilość cytostatycznie skuteczna lub skutecznie uczulająca na promieniowanie. Środek cystostatyczny można podawać jednocześnie ze środkiem radiofarmaceutycznym o wzorze 1 lub kolejno.

Wynalazek ilustrują następujące przykłady. Wszystkie wartości temperatury podano w °C. Zastosowano następując skróty:

Fmoc - 9-fluorenylometoksykarbony 1

Boc = tetrt-butoksykarbonyl

DOTA = kwas 1,4,7,10-tetraazacyklododekano-1,4,7,10-tetraoctowy

DMF = dimetylofomiamid

I-1

Oktreotyd = H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Ćys-Thr-ol

Przykład 1. Wytwarzanie związku o wzorze 2 g DOTAx2H₂O (wolny kwas) rozpuszczono w 50 ml wody (pH ~ 3,7). Po rozcieńczeniu 60 ml DMF natychmiast dodano 1 g N-hydroksysukcynimidu, 2,7 g N,N-dicykloheksylokarbodiimidu (DCCl) i 3 g (Tyr³, ε -Boc-Lys⁵]-oktreotydu. Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w temperaturze pokojowej przez 72 godziny w trakcie stałego mieszania. Związek ε -Lys⁵-zabezpieczony wyodrębniono przez oczyszczenie w kolumnie z żelem krzemionkowym 60, z użyciem chlorku metylenu/metanolu/50 % kwasu octowego (9/1/0,125) jako fazy ruchomej.

Po odszczepieniu grupy zabezpieczającej Lys⁵ działaniem kwasu trifluorooctowego (TFA,

100%) w ciągu 10 minut w temperaturze pokojowej i oczyszczeniu w kolumnie z żelem krzemionkowym 60, z użyciem chlorku metylenu/metanolu/50 % kwasu octowego (7/3/1 do 7/5/2) jako fazy ruchomej, oraz w kolumnie RP18-HPLC, z użyciem wody/acetonitrylu/1 % kwasu

182 434 octowego jako układu buforowego, otrzymano czysty i jednorodny związek tytułowy w postaci jego octanu.

FAB-MH+ : 1421 [a]^D ₂₂ = -14,75° (95 % w AcOH; c = 0,52)

Przykład 2. Związek z przykładu 1 znaczony 9°Y

Chelat znaczony ⁹0Y wytworzono przez dodanie 20 pl ⁹⁰Y (1,2 mCi, 0,04 M HCl) do 20 pl 50 pM związku z przykładu 1(0,15 M NH,OAc, 0,3 % BSA, pH 4,5). Ten roztwór poddano inkubacj i w 100° przez 15 minut. Pobrano próbkę podwielokrotną i rozcieńczono ją4 mM DTPA (pH 4,5), a następnie przeprowadzono analizę C18 HPLC z odwróconymi fazami dla ustalenia ilości wolnego nie schelatowanego 9°Y w mieszaninie reakcyjnej (wskazanej przez obecność [9°YDTPA]2-). Czystość radiochemiczna wynosi zwykle > 99,5%, a otrzymany chelat jest kinetycznie trwały w 4 mM DTPA (4 nM związek z przykładu 1, pH 4,5) w ciągu 7 dni.

Przykład 3. Związek z przykładu 1 znaczony 9°Y

W ciągu 15 minut na łaźni z wrzącą wodą ogrzewano w fiolce 120 pl 0,23 M kwasu askorbinowego, 0,15 M octanu amonowego (pH 4,8), 6 pl 1 mM związku z przykładu 1 i 1 20 pl 9°Y (85 mCi/ml, 0,04 HCl). Powstały roztwór rocieńczono do objętości 1 ml albo 0,23 M kwasem askorbinowym i 0,15 M NH₄OAc, albo roztworem aminokwasów do wlewów Proteinsteril® KE Nephro, po czym przechowywano go w temperaturze pokojowej przez długi okres czasu.

Roztwór aminokwasów do wlewów Proteinsteril®KE Nephro zawiera 11,4 g/l Leu, 9,63 g/l Lys, 9,53 g/l Val, 7,76 g/l Phe, 7,52 g/l Ile, 6,78 g/l Thr, 6,59 g/l Met, 4,9 g/l His i 2,91 g/l Trp.

Przykład 4. Wytwarzanie związku o wzorze 3

Związek tytułowy otrzymano powtórzywszy procedurę z przykładu 1, lecz z użyciem ε -Boc-Lys⁵ -oktreotydu.

MS (strumień jonów): 1403 (M-H)

Przykład 5: Związek z przykładu 4 znaczony 9°Y

Procedurę znaczenia z przykładu 2 powtórzono i otrzymano chelat 9°Y.

Przykład 6. Związek z przykładu 1 lub 4 znaczony ¹⁶¹ Tb

Procedurę znaczenia z przykładu 2 powtórzono z użyciem soli dostarczającej ^Tb zamiast soli dostarczającej 9°Y i otrzymano chelat¹⁶¹ Tb.

182 434

I w

— >> ο

ο

182 434

Ο

182 434 ο

ι ι_ χζ

ΙΟΙ ι— >-. <_)

I

W >·, (U χζ

ΟΙ — >> CJ 1 ω

χζ θα m

cc

Ό

V'

CM

X ο

II χ — — ο

CM

X

LJ ν_ι= Ο

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz. Cena 2,00 zł.

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. Peptydy somatostatynowe o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, w postaci związku wolnego lub kompleksu z radioaktywnym lantanowcem.
2. Peptydy według zastrz. 1, znamienne tym, że mają postać kompleksu z ⁹⁰Y.
3. Peptydy według zastrz. 1, znamienne tym, że mają postać kompleksu z ^l61Tb.
4. Środek farmaceutyczny, znamienny tym, że zawiera peptydy somatostatynowe o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, przy czym związek ma postać kompleksu z radioaktywnym lantanowcem, wraz z jednym lub większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych nośników lub rozcieńczalników.
5. Środek według zastrz. 4, znamienny tym, że zawiera peptydy o wzorze 1 wpostaci kompleksu z lub z ^l6’Tb.
6. Środek według zastrz. 4 albo 5, znamienny tym, że zawiera dodatkowo stabilizator.
7. Środek według zastrz. 6, znamienny tym, że stabilizator jest wybrany z grupy obejmującej albuminę surowicy, kwas askorbinowy, retinol, kwas gentyzynowy lub jego pochodną oraz roztwór aminokwasu.
8. Sposób wytwarzania peptydów somatostatynowych o wzorze 1, w którym M oznacza wodór, w postaci kompleksu z radioaktywnym lantanowcem, znamienny tym, że związek o wzorze 1 w postaci nieskompleksowanej poddaje się reakcji ze związkiem dostarczającym radioaktywny lantanowiec, w temperaturze 60-120°C, ewentualnie w obecności stabilizatora.