RS65997B1 - Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene - Google Patents

Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene

Info

Publication number
RS65997B1
RS65997B1 RS20241076A RSP20241076A RS65997B1 RS 65997 B1 RS65997 B1 RS 65997B1 RS 20241076 A RS20241076 A RS 20241076A RS P20241076 A RSP20241076 A RS P20241076A RS 65997 B1 RS65997 B1 RS 65997B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
lag
antigen
human
antibodies
Prior art date
Application number
RS20241076A
Other languages
English (en)
Inventor
Nils Lonberg
Mohan Srinivasan
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48795938&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS65997(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of RS65997B1 publication Critical patent/RS65997B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Napomene: Kompletan dokument, uključujući referentnu tabelu(e) i listu(e) sekvenci, može se preuzeti sa Web stranice EPO.
Opis
Oblast tehnike
[0001] Terapijska antitela su jedan od najbrže rastućih segmenata farmaceutske industrije. Da bi se održala potentnost i minimizirala imunogenost, antitela i drugi proteinski lekovi moraju biti zaštićeni od fizičke i hemijske degradacije tokom proizvodnje i skladištenja. Zaista, jedna od primarnih poteškoća u razvoju terapeutika na bazi antitela je potencijalni imunogeni odgovor kada se daju subjektu, što može dovesti do brzog klirensa ili čak izazivanja sporednih neželjenih efekata koji su opasni po život, uključujući anafilaktički šok. Razni faktori utiču na imunogenost antitela, kao što su njegove fizičko-hemijske osobine (npr. čistoća, stabilnost ili rastvorljivost), klinički faktori (npr. doza, put administracije, heterogenost bolesti, ili osobine pacijenta), i istovremeno lečenje sa drugim agensima (Swann i sar. (2008) Curr Opinion Immuol 20:493-499).
[0002] Imunogenost antitela i/ili gubitak aktivnosti antitela je često usled deamidacije. Deamidacija je hemijski proces razdradnje koji se spontano dešava u proteinima (npr., antitela). Deamidacija uklanja amidnu funkcionalnu grupu sa aminokiselinskog ostatka, kao što su asparagin i glutamin, tako oštećujući njegov bočni lanac koji sadrži amid. Ovo, za uzvrat, uzrokuje strukturne i biološke promene kroz protein, tako stvarajući heterogene oblike antitela. Deamidacija je jedan od najčešćih post-translacionih modifikacija koja se dešava u rekombinantno proizvedenim terapijskim antitelima.
[0003] Na primer, heterogenost u teškom lancu monoklonskog antitela h1B4 (humanizovano anti-CD18 antitelo) usled deamidacije tokom ćelijske kulture je saopštena od strane Tsai i sar. (Pharm Res 10(11): 1580 (1993)). Dodatno, smanjenje/gubitak biološke aktivnosti usled deamidacije je problem koji je prepoznat. Kroon et al. su okarakterisali nekoliko mesta deamidacije u terapijskom antitelu OKT3, i saopštili da su uzorci grupe koja proizvodi OKT3 (starosti 14 meseci do 3 godine) pali ispod 75% aktivnost (Pharm Res 9(11):1386 (1992), strana 1389, druga kolona). Dodatno, uzorci OKT3 koji su pokazali velike količine oksidovanih peptida u njihovim mapama su značajno smanjili aktivnost u testu potentnosti vezivanja antigena (strana 1390, prva kolona). Autori su zaključili da specifična mesta hemijske modifikacije koja se dešavaju nakon skladištenja OKT3 su identifikovane mapiranjem peptida i korelisane sa opaženim promenama u hemijskim analizama i biološkim esejima antitela (strana 1392, prvo kolona). Gubitak biološke aktivnosti je takođe saopšten za razne druge deamidovane terapijske proteine, uključujući rekombinantnu humanu DNazu (Cacia i sar. (1993) J. Chromatogr. 634:229-239) i rekombinantni solubilni CD4 (Teshima i sar. (1991) Biochemistry 30:3916-3922). WO 2010/019570 A2 opisuje kombinovanu terapiju u kojoj se anti-LAG-3 antitelo administrira zajedno sa najmanje jednim dodatnim imunostimulatornim antitelom, kao što je anti-PD-1 antitelo, i farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0004] Uopšte, deamidacija poseduje značajan i nepredvidljiv problem za farmaceutsku industriju. Napori koji su povezani sa praćenjem varijabilnosti uzrokovane deamidacijom u sklopu terapeutika na bazi antitela, naročito, kao i brige FDA povezane sa ovom varijabilnošću, povećavaju troškove i odlažu kliničke studije. Pred toga, modifikacije koje se odnose na ovo pitanje, uključujući uslove pomeranja (npr., temperaturu, pH, i ćelijski tip) povezane sa rekombinantnom proizvodnjom i/ili promenama amino kiselina koje su podložne deamidaciji (npr., usmerena mutageneza) mogu negativno uticati na stabilnost i aktivnost, naročito kada su promene načinjene unutar regiona koji određuju komplementarnost (CDR) antitela. Shodno tome, postoji potreba za stabilnijim verzijama terapijskih antitela.
Suština pronalaskaa
[0005] Predmetni pronalazak je definisan patentnim zahtevima. Obezbeđuje pojedinačnu kompoziciju koja sadrži: (a) monoklonsko antitelo, ili njegov deo koji se vezuje za antigen, koji se vezuje za gen za aktivaciju humanih limfocita-3 (LAG-3), (b) antitelo na PD-1 ili njegov deo koji se vezuje za antigen, i (c) farmaceutski prihvatljiv nosač, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji vezuje antigen koji vezuje humani LAG-3 sadrži CDR1, CDR2 i CDR3 regione teškog lanca koji sadrže aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 15, 16, i 17 (SEK ID BR: 15, 16, i 17), respektivno, i CDR1, CDR2 i CDR3 regione lakog lanca koji sadrže sekvence aminokiselina SEQ ID NO: 18, 19 i 20, respektivno.
[0006] Konkretno pronalazak može da primenjuje izolovana monoklonska antitela (npr., humana monoklonska antitela) koja vezuju LAG-3 (npr. humani LAG-3). Antitela koja vezuju humani LAG-3 imaju optimizovanu fizičku stabilnost u poređenju sa prethodno opisanim anti-LAG-3 antitelima. Naročito, pronalazak primenjuje modifikovani oblik antitela 25F7 (US 2011/0150892 A1) koje ispoljava značajno poboljšanu termalnu i hemijsku stabilnost cu poređenju sa nemodifikovanim anitelom. Specifično, menjanjem kritičnog regiona vezivanja CDR2 domena teškog lanca antitela 25F7, pokazano je da je modifikovano antitelo ispoljilo značajno višu fizičku i termalnu stabilnost, smanjenu deamidaciju, višu termalnu reverziibilnost, i nižu agregaciju. U isto vreme, neočekivano je opaženo da je modifikovano antitelo zadržalo isti visok afinitet vezivanja za humani LAG-3 i funkcionalnu aktivnost nemodifikovanog antitela, uključujući sposobnost da inhibira vezivanje LAG-3 za molekule glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC) klase II i stimuliše odgovore antigen-specifične T ćelije. Kombinovani suštinski porast u stabilnosti i retenciji vezivanja / biološke aktivnosti modifikovanog antitela je iznenađujuć, naročito u pogledu kritičnosti CDR regiona za funkciju antitela.
[0007] Komozicija predmetnog pronalaska može biti korišćena za razne primene, uključujući stimulaciju odgovora antigen-specifične T ćelije kod subjekata koji imaju tumor ili virus, za inhibiciju rasta tumorskih ćelija kod subjekta, ili za lečenje kancera kod subjekta.
[0008] Shodno tome, u jednom aspektu, pronalazak se odnosi na kompoziciju koja sadrži monoklonsko antitelo (npr., humano antitelo), ili njegov deo koji se vezuje za antigen, koji ima varijabilni region teškog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 12. U drugom tehničkom rešenju, antitelo dalje uključuje varijabilni region lakog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 14.
[0009] U poželjnom tehničkom rešenju antitelo koje vezuje humani LAG-3 ispoljava povećane fizičke osobine (tj., termalnu i hemijsku stabilnost) u poređenju sa antitelom 25F7, dok još uvek zadržava barem isti afinitet vezivanja za humani LAG-3 kao 25F7. Na primer, antitelo ispoljava smanjenu varijabilnost sekvenci u CDR2 regionu teškog lanca usled deamidacije, u poređenju sa antitelom 25F7, npr., približno 2.5% ili manje modifikacije aminokiselinske sekvence nakon 12 nedelja na 4C° (tj., u studijama stabilnosti u stvarnom vremenu (“real-time”) kao što je opisano ovde) i/ili približno 12.0% ili manje modifikacije aminokiselinske sekvence nakon 12 nedelja na 40C° (tj., pod ubrzanim stresnim uslovima, kao što je opisano ovde), dok još zadržava afinitet vezivanja za humani LAG-3 od oko najmanje KDod 1 x 10<-7>M ili manje (poželjnije, KDod 1 x 10<-8>M ili manje, a KDod 5 x 10<-9>M ili manje, ili a KDod 1 x 10<-9>M ili manje). U drugom tehničkom rešenju, antitelo koje vezuje humani LAG-3 ispoljava termalnu reverzibilnost od najmanje oko 40% u PBS na pH 8.0. U drugom tehničkom rešenju, antitelo poseduje višu temperaturu topljenja (ukazujući na višu sveukupnu stabilnost in vivo), u poređenju sa nemodifikovanim antitelom (Krishnamurthy R i Manning MC (2002) Curr Pharm Biotechnol 3:361-71). U jednom tehničkom rešenju, antitelo ispoljava TM1(temperatura inicijalnog razvijanja) veću od 60°C, npr., veću od 65°C, ili veću od 70°C. Tačka topljenja antitela može biti izmerena korišćenjem diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (Chen i sar. (2003) Pharm Res 20: 1952-60; Ghirlando i sar. (1999) Immunol Lett 68:47-52) ili kružnog dihroizma (Murray i sar. (2002) J. Chromatogr Sci 40:343-9).
[0010] U drugom tehničkom rešenju, antitelo koje vezuje humani LAG-3 je naznačeno njegovom otpornošću na brzu degradaciju. Degradacija antitela može biti izmerena korišćenjem kapilarne elektroforeze (CE) i MALDI-MS (Alexander AJ i Hughes DE (1995) Anal Chem 67:3626-32).
[0011] U drugom tehničkom rešenju, antitelo koje vezuje humani LAG-3 ispoljava minimalne agregacione efekte, npr., agregacija od 25% ili manje, kao što je 20% ili manje, 15% ili manje, 10% ili manje, 5% ili manje, ili 4% ili manje. Agregacija može voditi ka pokretanju neželjenog imunskog odgovora i/ili izmenjenih nepovoljnih farmakokinetičkih svojstava. Agregacija može biti izmerena pomoću nekoliko tehnika, uključujući ekskluzionu hromatografiju po veličini na koloni (SEC), tečnu hromatografiju visokih performansi (HPLC), i rasipanje svetlosti.
[0012] U drugom tehničkom rešenju, antitelo koje vezuje humani LAG-3 dalje ispoljava najmanje jedno od sledećih svojstava:
(a) vezivanje za LAG-3 majmuna;
(b) nedostatak vezivanja za mišiji LAG-3;
(c) inhibicija vezivanja LAG-3 za molekule glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC) klase II; i
(d) stimulacija imunskih odgovora, posebno odgovora antigen-specifičnih T ćelija.
Poželjno, antitelo ispoljava najmanje dva od svojstava (a), (b), (c) i (d). Poželjnije, antitelo ispoljava najmanje tri od svojstava (a), (b), (c) i (d). Još poželjnije, antitelo ispoljava sva četiri od svojstava (a), (b), (c) i (d).
[0013] U drugom tehničkom rešenju, antitelo koje vezuje humani LAG-3 stimuliše odgovor antigen-specifične T ćelije, kao što je proizvodnja interleukina-2 (IL-2) u odgovoru antigenspecifične T ćelije. U drugim tehničkim rešenjima, antitelo stimuliše imunski odgovor, kao što je anti-tumorski odgovor (npr., inhibicija rasta tumora u in vivo modelima tumorskog grafta) ili autoimunski odgovor (npr., razvoj dijabetesa u NOD miševima).
[0014] U drugom tehničkom rešenju, antitelo koje vezuje humani LAG-3 vezuje epitop humanog LAG-3 koji sadrži aminokiselinsku sekvencu PGHPLAPG (SEQ ID NO: 21). U drugom tehničkom rešenju, antitelo vezuje epitop humanog LAG-3 koji sadrži aminokiselinsku sekvencu HPAAPSSW (SEQ ID NO: 22) ili PAAPSSWG (SEQ ID NO: 23).
[0015] U drugim tehničkim rešenjima, antitelo koje vezuje humani LAG-3 boji tkivo hipofize imunohistohemijom, ili ne boji hipofizno tkivo imunohistohemijom.
[0016] Antitela predmetnog pronalaska mogu biti antitela u punoj dužini, na primer, IgG1, IgG2 ili IgG4 izotipa, opciono sa mutacijom serina u prolin u zglobnom regionu konstantnog regiona teškog lanca (na položaju koji odgovara položaju 241 kako je opisano u Angal i sar. (1993) Mol. Immunol. 30:105-108), tako da je heterogenost disulfidnog mosta između teških lanaca smanjena ili ukinuta. U jednom aspektu, izotip konstantnog regiona je IgG4 sa mutacijom na aminokiselinskim ostacima 228, npr., S228P. Alternativno, antitela mogu biti fragmenti antitela, kao što su Fab, Fab' ili Fab'2 fragmenti, ili antitela sa jednim lancem.
[0017] U drugom aspektu predmetnog pronalaska, antitelo (ili njegov antigen-vezujući deo) je deo imunokonjugata koji uključuje terapijski agens, npr., citotoksin ili radioaktivni izotop, vezan za antitelo. U još jednom aspektu, antitelo je deo bispecifičnog molekula koji uključuje drugi funkcionalni segment (npr., drugo antitelo) koje ima različitu specifičnost vezivanja nego pomenuto antitelo, ili njegov antigen vezujući deo.
[0018] Molekuli nukleinske kiseline koje kodiraju antitela, ili njihove delove koji se vezuju za antigen (npr., varijabilni regioni i/ili CDR-ovi) pronalaska su takođe opisani, kao i ekspresioni vektori koji sadrže takve nukleinske kiseline i ćelije domaćina koje sadrže takve ekspresione vektore. Metode za pripremanje anti-LAG-3 antitela korišćenjem ćelija domaćina koje sadrži takve ekspresione vektore takođe su opisane, i mogu da obuhvate korake (i) eksprimiranja antitela u ćeliji domaćina i (ii) izolovanje antitela iz ćelije domaćina.
[0019] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje kompozicije predmetnog pronalaska za primenu u metodama stimulisanja imunskih odgovora primenom pronalaska. U jednom tehničkom rešenju, metoda obuhvata stimulisanje odgovora antigen-specifične T ćelije kontaktiranjem T ćelija sa kompozicijom predmetnog pronalaska, tako da je odgovor antigenspecifične T ćelije stimulisan. U poželjnom tehničkom rešenju, proizvodnja interleukina-2 pomoću antigen-specifične T ćelije je stimulisana. U drugom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima tumor i imunski odgovor na tumor je stimulisan. U drugom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima virus i imunski odgovor na virus je stimulisan.
[0020] U još jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje kompozicije predmetnog pronalaska za primenu u metodi za inhibiranje rasta tumorskih ćelija kod subjekta koja sadrži administiranje subjektu kompozicije pronalaska, tako da je rast tumora kod subjekta inhibirana. U još jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje kompozicije predmetnog pronalaska za primenu u metodi za lečenje virusne infekcije kod subjekta koja sadrži administriranje subjektu kompozicije pronalaska, tako da je virusna infekcija lečena kod subjekta.
[0021] Druga svojstva i prednosti trenutne objave će biti očigledni iz sledećeg detaljnog opisa i primera, koji se ne bi smeli tumačiti kao ograničavajući.
Kratak opis crteža
[0022]
Slika 1A prikazuje nukleotidnu sekvencu (sekvenca sa identifikacionim brojem - SEQ ID NO: 1) i aminokiselinsku sekvencu (SEQ ID NO: 2) varijabilnog regiona teškog lanca 25F7 humanog monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 5), CDR2 (SEQ ID NO: 6) i CDR3 (SEQ ID NO: 7) regioni su opisani i derivacije V, D i J germinativne linije su naznačene. CDR regioni su opisani korišćenjem Kabat sistema (Kabat i sar. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5. izdanje, U.S. Department of Health i Human Services, NIH broj objave 91-3242).
Slika 1B prikazuje nukleotidnu sekvencu (SEQ ID NO: 3) i aminokiselinsku sekvencu (SEQ ID NO: 4) varijabilnog regiona kapa lakog lanca 25F7 humanog monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 8), CDR2 (SEQ ID NO: 9) i CDR3 (SEQ ID NO: 10) regioni su opisani i derivacije V i J germinativne linije su naznačene. Aminokiselinske sekvence teškog i lakog lanca u punoj dužini antitela 25F7 su prikazane u SEQ ID NO: 32 i 34, redom.
Slika 2A prikazuje aminokiselinsku sekvenca (SEQ ID NO: 12) varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.5 monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 15), CDR2 (SEQ ID NO: 16) i CDR3 (SEQ ID NO: 17) regioni su opisani. Aminokiselinske sekvence teškog i lakog lanca u punoj dužini antitela LAG3.5 su prikazane u SEQ ID NO: 35 i 37, redom.
Slika 2B prikazuje nukleotidnu sekvencu (SEQ ID NO: 13) i aminokiselinsku sekvencu (SEQ ID NO: 14) varijabilnog regiona kapa lakog lanca LAG3.5 monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 18), CDR2 (SEQ ID NO: 19) i CDR3 (SEQ ID NO: 20) regioni su opisani.
Slika 3 prikazuje aminokiselinske sekvence sekvenci CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca LAG-3 varijanti LAG3.5 (SEQ ID NO: 42), LAG3.6 (SEQ ID NO: 43), LAG3.7 (SEQ ID NO: 44), i LAG3.8 (SEQ ID NO: 45), u poređenju sa aminokiselinskom sekvencom sekvence CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca antitela 25F7 (LAG3.1) (SEQ ID NO: 41) i odgovarajuće sekvence humane germinativne linije (SEQ ID NO: 27). CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.5 razlikuje se od CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca 25F7 za arginin (R) na položaju 54 (u odnosu na asparagin (N)) i serin (S) na položaju 56 (u odnosu na asparagine(N)). Preostali CDR regioni LAG3.5 i 25F7 su identični. Slika 3 takođe stavlja na uvid javnosti SEQ ID NO: 40.
Slike 4A i 4B su grafici koji prikazuju aktivnost vezivanja (EC50i afinitet, redom) antitela LAG3.1 (25F7), LAG3.2, LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8 da se aktiviraju CD4+ T ćelije. Slika 4B stavlja na uvid javnosti SEQ ID NO 41, 42, 45, 44, i 43, redom, redom koji se pojavljuju.
Slike 5A, B, C, D, i E su grafici koji prikazuju krive termalnog topljenja (tj., termalna stabilnost) antitela LAG3.1 (25F7), LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8, redom. Slike 6A, B, C, D, i E su grafici koji prikazuju krive termalne revezibilnosti (tj., termalna stabilnost) antitela LAG3.1 (25F7), LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8, redom.
Slika 7 je grafik, koji prikazuje aktivnost vezivanja antitela LAG3.1 (25F7) i LAG3.5 za aktivirane humane CD4+ T ćelije i vezivanje antigena (Biacore).
Slika 8 prikazuje rezultate mapiranja peptida korišćenjem masene spektrometrije (hemijske modifikacije / molekularna stabilnost) za antitela LAG3.1 (25F7) i LAG3.5 koja reflektuju deamidaciju i izomerizaciju nakon inkubacije tokom 5 dana pod ubrzanim stresnim uslovima kao što je opisano ovde. Slika 8 stavlja na uvid javnosti sekvence SEQ ID NO 46-52, redom, redom koji se pojavljuju.
Slika 9 je grafik koji poredi profile hidrofilnosti antitela LAG3.1 (25F7) i LAG3.5. Slike 10 A, B, C, i D su grafici koji porede afinitet i fizičku stabilnost (tj., termalnu i hemijsku stabilnost) antitela LAG3.1 i LAG3.5 na 4C° i 40C°, tj., i studije u ubrzanim stresnim uslovima i "real-time" studije, su opisane ovde.
Slike 11 A i B su grafici koji porede procenat modifikacije amino kiselinskih sekvenci antitela LAG3.1 i LAG3.5 na 4C° i 40C°.
Detaljan opis pronalaska
[0023] Da bi predmetna objava mogla brže da se razume, prvo su definisani određeni termini. Dodatne definicije su postavljene u detaljnom opisu.
[0024] Termini "25F7," "antitelo 25F7," "antitelo LAG3.1," i "LAG3.1" odnose se na antihumano LAG-3 antitelo opisano u US2011/0150892 A1. Nukleotidna sekvenca (SEQ ID NO: 1) koja kodira varijabilni region teškog lanca 25F7 (LAG3.1) i odgovarajuća aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 2) je prikazana na Slici 1A (sa CDR sekvencama koje su označene kao SEQ ID NO: 4, 5, i 7, redom). Nukleotidna sekvenca (SEQ ID NO: 3) koja kodira varijabilni region lakog lanca 25F7 (LAG3.1) i odgovarajuća aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 4) je prikazana na Slici 1B (sa CDR sekvencama koje su označene kao SEQ ID NO: 8, 9, i 10, redom).
[0025] Termin "LAG-3" odnosi se na Limfocitni Aktivacioni Gen-3. Termin "LAG-3" uključuje varijante, izoforme, homologe, ortologe i paraloge. Na primer, antitela specifična za humani LAG-3 protein mogu, u određenim slučajevima, unakrsno da reaguju sa LAG-3 proteinom iz vrsta koje nisu humane. U drugim tehničkim rešenjima, antitela specifična za humani LAG-3 protein mogu biti kompletno specifična za humani LAG-3 protein i ne moraju pokazati unakrsnu reaktivnost vrste ili druge tipove unakrsne reaktivnosti, ili mogu unakrsno reagovati sa LAG-3 iz određenih drugih vrsta ali ne svih drugih vrsta (npr., unakrsno reaguju sa majmunskim LAG-3 ali ne mišijim LAG-3). Termin "humani LAG-3" odnosi se na humanu sekvencu LAG-3, kao što je kompletna aminokiselinska sekvenca humanog LAG-3 koja ima Genbank Pristupni br. NP_002277 (SEQ ID NO: 29). Termin "mišiji LAG-3" odnosi se na mišiju sekvencu LAG-3, kao što je kompletna aminokiselinska sekvenca mišijeg LAG-3 koja ima Genbank Pristupni br. NP_032505. LAG-3 je takođe poznat u oblasti kao, na primer, CD223. Humana LAG-3 sekvenca može da se razlikuje od humanog LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. (Pristupnim brojem Banke gena) NP_002277 jer ima, npr., konzervirane mutacije ili mutacije u ne-konzerviranim regionima i LAG-3 ima suštinski istu biološku funkciju kao humani LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. NP_002277. Na primer, biološka funkcija LAG-3 je da ima epitop na vanćelijskom domenu LAG-3 koji je specifično vezan pomoću antitela iz trenutne objave ili biološka funkcija LAG-3 je vezivanje za molekule MHC klase II.
[0026] Termin "majmunski LAG-3" bi trebalo da obuhvati LAG-3 proteine eksprimirane od strane majmuna starog sveta i novog sveta, uključujući ali bez ograničenja na LAG-3 cinomolgus majmuna i LAG-3 rezus majmuna. Reprezentativna aminokiselinska sekvenca za LAG-3 majmuna je aminokiselinska sekvenca LAG-3 rezus majmuna koja je takođe deponovana kao Genbank Pristupni br. XM_001108923. Druga reprezentativna aminokiselinska sekvenca za majmunski LAG-3 je alternativna sekvenca rezus majmuna klona pa23-5 kao što je opisano u US 2011/0150892 A1. Ova alternativna rezus sekvenca ispoljava razliku u pojedinačnoj aminokiselini, na položaju 419, kao u poređenju sa sekvencom deponovanom u Banci gena – Genbank.
[0027] Posebna humana LAG-3 sekvenca će generalno biti najmanje 90% identična u aminokiselinskoj sekvenci humanom LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. NP_002277 i sadrži aminokiselinske ostatke koji identifikuju aminokiselinsku sekvencu kao humanu kada se poredi sa LAG-3 aminokiselinskim sekvencama drugih vrsta (npr., murinska). U određenim slučajevima, humani LAG-3 može biti najmanje 95%, ili čak najmanje 96%, 97%, 98%, ili 99% identična u aminokiselinskoj sekvenci sa LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. NP_002277. U određenim tehničkim rešenjima, sekvenca humanog LAG-3 će pokazati ne više od 10 razlika u amino kiselinama od LAG-3 sekvence sa Genbank Pristupnim br. NP_002277. U određenim tehničkim rešenjima, humani LAG-3 može da pokaže ne više od 5, ili čak ne više od 4, 3, 2, ili 1 razlike u amino kiselini od sekvence LAG-3 sa Genbank Pristupni br. NP_002277. Procenat identiteta može biti određen kao što je ovde opisano.
[0028] Termin "imunski odgovor" odnosi se delovanje, na primer, limfocita, antigen prezentujućih ćelija, fagocitnih ćelija, granulocita, i solubilnih makromolekula proizvedenih od strane gornjih ćelija ili jetre (uključujući antitela, citokine, i komplement) koji rezultuje u selektivnom oštećenju, uništavanju, ili eliminaciji iz ljudskog tela invazivnih patogena, ćelija ili tkiva koji su inficirani patogenima, kancerskih ćelija, ili, u slučajevima autoimunosti ili patološke inflamacije, normalnih ćelija ili tkiva.
[0029] "Odgovor antigen-specifične T ćelije" odnosi se na odgovore od strane T ćelije koji rezultuje iz stimulacije T ćelije sa antigenom za koji je T ćelija specifična. Ne-ograničavajući primeri odgovora od strane T ćelije na antigen-specifičnu stimulaciju obuhvata proliferaciju i proizvodnju citokina (npr., IL-2 proizvodnja).
[0030] Termin "antitelo" kako je ovde pomenuto uključuje cela antitela i bilo koji antigen vezujući fragment (tj., "antigen-vezujući deo") ili pojedinačne lance istih. Cela antitela su glikoproteini koji sadrže najmanje dva teška (H) lanca i dva laka (L) lanca međusobno povezana disulfidnim vezama. Svaki težak lanac sadrži varijabilni region teškog lanca (skraćen ovde kao VH) i konstantni region teškog lanca. Konstantni region teškog lanca sadrži tri domena, CH1, CH2 i CH3. Svaki lak lanac sadrži varijabilni region lakog lanca (skraćeno ovde kao VL) i konstantni region lakog lanca. Konstantni region lakog lanca sadrži jedan domen, CL. VHi VLregioni mogu biti dalje podeljeni u regione hipervarijabilnosti, nazvane regioni koji određuju komplementarnost (CDR), razdvojene regionima koji su više konzervirani, označene kao okvirni regioni (FR). Svaki VHi VLje sastavljen od tri CDR regiona i četiri FR regiona, postavljenih od amino-terminusa do karboksi-terminusa po sledećem redu: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Varijabilni regioni teških i lakih lanaca sadrže vezujući domen koji ineraguje sa antigenom. Konstantni regioni antitela mogu posredovati vezivanju imunoglobulina za tkiva domaćina ili faktore, uključujući razne ćelije imunskog sistema (npr., efektorske ćelije) i prvu komponentu (Clq) klasičnog sistema komplemenata.
[0031] Termin "antigen-vezujući deo" antitela (ili jednostavno "deo antitela"), kao što je ovde korišćeno, odnosi se na jedan ili više fragmenata antitela koji zadržavaju sposobnost da se specifično vežu za antigen (npr., LAG-3 protein). Pokazano je da funkcija antitela da se veže za antigen može biti izvedena pomoću fragmenata antitela u punoj dužini. Primeri vezujućih fragmenata obuhvaćeni unutar termina "antigen-vezujući deo" antitela obuhvataju (i) Fab fragment, monovalentni fragment koji se sastoji od VL, VH, CLi CH1 domena; (ii) F(ab')2fragment, bivalentni fragment koji sadrži dva Fab fragmenta vezana disulfidnim mostom na zglobnom regionu; (iii) Fd fragment koji se sastoji od VHi CH1domena; (iv) Fv fragment koji se sastoji od VHi CH1 domena; (v) Fv fragment koji se sastoji od VLi VHdomena jednog kraja antitela, (vi) dAb fragment (Ward i sar., (1989) Nature 341:544-546), koji se sastoji od VHdomena; (vii) izolovani region koji određuje komplementarnost (CDR); i (viii) nanotelo, varijabilni region teškog lanca koji sadrži jedan varijabilni domen i dva konstantna domena. Pored toga, iako su dva domena Fv fragmenta, VLi VH, kodirana odvojenim genima, oni mogu biti spojeni, korišćenjem rekombinantnih metoda, sintetičkim veznikom koji im omogućava da budu napravljeni kao pojedinačan proteinski lanac u kome se VLi VHregioni sparuju da formiraju monovalentne molekule (poznatikao Fv (scFv) sa jednim lancem; videti npr., Bird i sar. (1988) Science 242:423-426; i Huston i sar. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Takva antitela sa jednim lancem bi takođe trebalo da budu obuhvaćena terminom “antigen-vezujući deo" antitela. Ovi fragmenti antitela su dobijeni korišćenjem konvencionalnih tehnika koje su poznate prosečnim poznavaocima oblasti, i fragmenti su testirani za korisnost na isti način kao što su intaktna antitela.
[0032] "Izolovano antitelo", kao što je ovde korišćeno, treba da se odnosi na antitelo koje je suštinski oslobođeno od drugih antitela koja imaju različite antigenske specifičnosti (npr., izolovano antitelo koje specifično vezuje LAG-3 protein je suštinski oslobođeno od antitela koja specifično vezuju antigene osim LAG-3 proteina). Izolovano antitelo koje specifično vezuje humani LAG-3 protein može, međutim, imati unakrsnu-reaktivnost za druge antigene, kao što su LAG-3 proteini iz drugih vrsta. Štaviše, izolovano antitelo može biti suštinski oslobođeno od drugog ćelijskog materijala i/ili hemikalija.
[0033] Termini "monoklonsko antitelo" ili " kompozicija monoklonskog antitela " kao što je ovde korišćeno odnosi se na preparat molekula antitela od pojedinačne molekularne kompozicije. Kompozicija monoklonskog antitela pokazuje pojedinačnu specifičnost vezivanja i afinitet za poseban epitop.
[0034] Termin "humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da obuhvati antitela koja imaju varijabilne regione u kojima su i okvirni regioni i CDR regioni izvedeni iz sekvenci umunoglobulina humane germinativne linije. Pored toga, ako antitelo obuhvata konstantni region, konstantni region je takođe izveden iz sekvenci imunoglobulina humane germinativne linije. Humana antitela predmetnog pronalaska mogu da obuhvate aminokiselinske ostatke koji nisu kodirani pomoću sekvenci umunoglobulina humane germinativne linije (npr., mutacije uvedene nasumičnom ili usmerenom specifičnom mutagenezom in vitro ili pomoću somatske mutacije in vivo). Međutim, termin "humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, ne bi trebalo da obuhvati antitela u kojima CDR sekvence izvedene iz germinativne linije drugih sisarskih vrsta, kao što je miš, su nakalemljene na humane okvirne sekvence.
[0035] Termin "human monoklonsko antitelo" odnosi se na antitela koja pokazuju pojedinačnu specifičnost vezivanja, koja imaju varijabilne regione u kojima su i okvirni i CDR regioni izvedeni iz imunoglobulinskih sekvenci humane germinativne linije. U jednom tehničkom rešenju, humana monoklonska antitela su proizvedena pomoću hibridoma koji uključuje B ćeliju dobijenu iz transgene ne-humane životinje, npr., transgeni miš, koji ima genom koji sadrži transgen humanog teškog lanca i transgen lakog lanca spojen za imortalizovanu ćeliju.
[0036] Termin "rekombinantno humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, uključuje sva humana antitela koja su pripremljena, eksprimirana, kreirana ili izolovana rekombinantnim sredstvima, kao što su (a) antitela izolovana iz životinje (npr., miš) koja je transgena ili transhromozomska za humane imunoglubulinske gene ili za hibridome pripremljene odatle (opisano dalje ispod), (b) antitela izolovana iz ćelije domaćina transformisana da eksprimiraju humano antitelo, npr., iz transfektoma, (c) antitela izolovana iz biblioteke rekombinantnih, kombinatornih humanih antitela, i (d) antitela pripremljena, eksprimirana, kreirana ili izolovana drugim sredstvima koja uključuju splajsovanje genskih sekvenci humanog immunoglobulina za druge DNK sekvence. Takva rekombinantna humana antitela imaju varijabilne regione u kojima okvirni i CDR regioni su izvedeni iz sekvenci humanog imunoglobulina germinativne linije. U određenim tehničkim rešenjima, međutim, takva rekombinantna humana antitela mogu biti podvrgnuta in vitro mutagenezi (ili, kada je korišćena životinja transgena za humane Ig sekvence, in vivo somatskoj mutagenezi) i tako aminokiselinske sekvence VHi VLregiona rekombinantnih antitela su sekvence koje, kada su izvedene iz i povezane sa humanim VHi VLsekvencama geminativne linije, ne mogu prirodno da postoje u okviru repertoara humanog antitela germinativne linije in vivo.
[0037] Termin "izotip" odnosi se na klasu antitela (npr., IgM ili IgGI) koja je kodirana pomoću gena konstantnog regiona teškog lanca.
[0038] Fraza "antitelo koje prepoznaje antigen" i "antitelo specifično za antigen" su korišćeni naizmenično ovde sa terminom "antitelo koje se vezuje specifično za antigen."
[0039] Termin "derivati humanog antitela" odnose se na bilo koji modifikovani oblik humanog antitela, npr., konjugat antitela i drugi agens ili antitelo.
[0040] Termin "humanizovano antitelo" bi trebalo da se odnosi na antitela u kojima CDR izvedene iz germinativne linije drugih sisarskih vrsta, kao što je miš, su bile graftovane na humane okvirne sekvence. Dodatne modifikacije okvirnog regiona mogu biti načinjene u sklopu humanih okvirnih sekvenci.
[0041] Termin "himerno antitelo" bi trebalo da se odnosi na antitela u kojima su sekvence varijabilnog regiona izvedene iz jedne vrste i sekvence konstantnog regiona su izvedene iz druge vrste, kao što je antitelo u kome su sekvence varijabilnog regiona izvedene iz mišijeg antitela i sekvence konstantnog regiona su izvedene iz humanog antitela.
[0042] Kao što je ovde korišćeno, antitelo koje "specifično vezuje humani LAG-3" bi trebalo da se odnosi na antitelo koje se vezuje za humani LAG-3 protein (i moguće LAG-3 protein iz jedne ili više ne-humanih vrsta) ali se ne vezuje suštinski za ne-LAG-3 proteine. Poželjno, antitelo se vezuje za humani LAG-3 protein sa "visokim afinitetom", naime sa KDod 1 x 10-7 M ili manje, poželjnije 1 x 10<-8>M ili manje, poželjnije 5 x 10<-9>M ili manje, poželjnije 1 x 10<-9>M ili manje.
[0043] Termin "ne vezuje se suštinski" za protein ili ćelije, kao što je ovde korišćeno, znači da se ne vezuje ili se ne vezuje sa visokim afinitetom za protein ili ćelije, tj. vezuje se za protein ili ćelije sa KDod 1 x 10<-6>M ili više, poželjnije 1 x 10<-5>M ili više, poželjnije 1 x 10<-4>M ili više, poželjnije 1 x 10<-3>M ili više, čak poželjnije 1 x 10<-2>M ili više.
[0044] Termin "Kasoc" ili "Ka", kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da se odnosi na stopu asocijacije posebne antitelo-antigen interakcije, dok termin "Kdis" ili "Kd," kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da se odnosi na stopu disasocijacije posebne antitelo-antigen interakcije.
Termin "KD," kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da se odnosi na konstantnu disocijacije, koja je dobijena iz odnosa Kato Ka(tj., Kd/Ka) i izražena je kao molarna koncentracija (M). KDvrednosti za antitela mogu biti određene korišćenjem metoda dobro uspostavljenih u oblasti. Poželjna metoda za određivanje KDantitela je korišćenjem površinske plazmonske rezonance, poželjno korišćenjem sistema biosenzora kao što je Biacore<®>sistem.
[0045] Termin "visok afinitet" za IgG antitelo odnosi se na antitelo koje ima KDod 1 x 10-7 M ili manje, poželjnije 5 x 10<-8>M ili manje, čak poželjnije 1x10<-8>M ili manje, čak poželjnije 5 x 10<-9>M ili manje i čak poželjnije 1 x 10<-9>M ili manje za ciljni antigen. Međutim, vezivanje sa "visokim afinitetom" može da varira za izotipove antitela. Na primer, vezivanje sa “visokim afinitetom” za IgM izotip odnosi se na antitelo koje ima KDof 10<-6>M ili manje, poželjnije 10<-7>M ili manje, čak poželjnije 10<-8>M ili manje.
[0046] Termin "deamidacija" odnosi se na hemijski degradativni proces koji se spontano dešava u proteinima (npr., antitela). Deamidacija uklanja amidnu funkcionalnu grupu sa aminokiselinskog ostataka, kao što su asparagin i glutamin, tako oštećujući, njegove bočne lance koji sadrže amid. Specifično, bočni lanac asparagina napada susednu peptidnu grupu, formirajući simetrični intermedijer sukcinimida. Simetrija intermedijera rezultuje u dva proizvoda hidrolize, ili aspartat ili izoaspartat. Slična reakcija može takođe da se odigra u bočnim lancima aspartata, proizvodeći parcijalnu konverziju u izoaspartat. U slučaju glutamina, brzina deamidacije je generalno deset puta manja nego asparaginska, međutim, mehanizam je sencijalno isto, zahtevajući samo molekule vode da se nastavi.
[0047] Termin "subjekat" uključuje bilo koju humanu ili ne-humanu životinju. Termin "nehumana životinja" uključuje sve kičmenjake, npr., sisare i ne-sisare, kao što su he-humani primati, ovce, psi, mačke, krave, konji, kokoške, vodozemci, i gmizavci, iako su poželjni sisari, kao što su ne-humani primati, ovde, psi, mačke, krave i konji.
[0048] Razni aspekti predmetnog pronalaska su opisani u još detalja u sledećim odeljcima.
Anti-LAG-3 antitela koja imaju povećanu stabilnost i povoljna funkcionalna svojstva
[0049] Antitela koja vezuju humani LAG-3 za primenu u pronalasku specifično se vezuju za humani LAG-3 i imaju optimizovanu stabilnost u poređenju sa prethodno opisanim anti-LAG-3 antitelima, naročito u poređenju sa antitelom 25F7 (LAG3.1). Ova optimizacija uključuje smanjenu deamidaciju (npr., povećanu hemijsku stabilnost) i povećano termalno ponovno sklapanje (npr., povećana fizička stabilnost), dok još zadržava vezivanej sa visokim afinitetom za humani LAG-3.
[0050] Metode za identifikaciju mesta deamidacije su poznate u oblasti (videti, npr., hromatografiju sa razmenom jona, na reverznoj fazi, i sa hidrofobnim interakcijama, i peptidno mapiranje proizvoda proteolitičke digestije (LC-MS)). Pogodni eseji za merenje fizičke stabilnosti obuhvataju, npr., analizu tačaka topljenja i/ili ponovno sklapanje strukture antitela nakon denaturacije (npr., procenat reverzibilnosti kao što je opisano, npr., u Primeru 3, Odeljak 3).
[0051] Vezivanje za humani LAG-3 može biti procenjeno korišćenjem jedne ili više tehnika takođe dobro uspostavljenih u oblasti. Na primer, antitelo može biti testirano pomoću testa protočne citometrije u kome antitelo reaguje sa ćelijskom linijom koja eksprimuje humani LAG-3, kao što su CHO ćelije koje su transfektovane da eksprimuju LAG-3 (npr., humani LAG-3, ili mišiji LAG-3 (npr., rezus ili cinomolgus majmuni) ili mišiji LAG-3) na njihovoj ćelijskoj površini. Druge pogodne ćelije za primenu u testovima protočne citometrije obuhvataju anti-CD3-stimulisane CD4<+>aktivirane T ćelije, koje eksprimiraju nativni LAG-3. Dodatno ili alternativno, vezivanje antitela, uključujući kinetiku vezivanja (npr., KDvrednost), može biti testirana u BIAcore testovima. Drugi pogodni testovi vezivanja obuhvataju ELISA testove, na primer, korišćenjem rekombinantnog LAG-3 proteina.
[0052] Antitela predmetnog pronalaska poželjno se vezuju za humani LAG-3 protein sa KDod 1 x 10<-7>M ili manje, i poželjnije 1 x 10<-8>M ili manje, 5 x 10<-9>M ili manje, ili 1 x 10<-9>M ili manje.
[0053] Tipično, antitelo se vezuje za LAG-3 u limfoidnim tkivima, kao što su krajnik, slezina ili timus, koje može biti detektovano imunohistohemijom. U jednom tehničkom rešenju, antitelo boji hipofizno tkivo (npr., su zadržana u hipofizi) kao što je izmereno imunohistohemijom. U drugom tehničkom rešenju, antitelo ne boji hipofizno tkivo (tj., nije zadržano u hipofizi) kao što je izmereno imunohistohemijom.
[0054] Dodatna funkcionalna svojstva obuhvataju unakrsnu-reaktivnost sa LAG-3 iz druge vrste. Na primer, antitelo može da se veže za mišiji LAG-3 (npr., cinomolgus majmun, rezus majmun), ali ne ad se suštinski veže za LAG-3 iz mišijeg LAG-3. Poželjno, antitelo koje se vezuje za humani LAG-3 sa visokim afinitetom.
[0055] Druga funkcionalna svojstva obuhvataju sposobnost antitela da stimuliše imunski odgovor, kao što je odgovor antigen-specifične T ćelije. Ovo može biti testirano, na primer, procenjivanjem sposobnosti antitela da stimuliše proizvodnju interleukina-2 (IL-2) u odgovoru antigen-specifične T ćelije. U određenim tehničkim rešenjima, antitelo se vezuje za humani LAG-3 i stimuliše odgovor antigen-specifične T ćelije. U drugim tehničkim rešenjima, antitelo se vezuje za humani LAG-3 ali ne stimuliše odgovor antigen-specifične T ćelije. Drugi načini za evaluaciju kapaciteta antitela da stimuliše imunski odgovor obuhvataju testiranje njegove sposobnosti da inhibira rast tumora, kao što je u in vivo modelu tumorskog grafta (videti, npr., Primer 6) ili sposobnost da stimuliše autoimunski odgovor, kao što je sposobnost da pospešuje razvoj autoimune bolesti u autoimunom modelu, npr., sposobnost da pospešuje razvoj dijabetesa u NOD mišijem modelu.
[0056] Poželjna antitela za primenu u pronalasku su humana monoklonska antitela. Dodatno ili alternativno, antitela mogu biti, na primer, himerna ili humanizovana monoklonska antitela.
Monoklonsko antitelo LAG3.5
[0057] Antitelo koje vezuje humani LAG-3 i koje je poželjno za primenu u pronalasku je humano monoklonsko antitelo, LAG3.5, strukturno i hemijski okarakterisano kao što je opisano ispod i u sledećim Primerima. VHaminokiselinska sekvenca LAG3.5 je pokazana u SEQ ID NO: 12 (Slika 2A). VLaminokiselinska sekvenca LAG3.5 je pokazana u SEQ ID NO: 14 (Slika 2B).
[0058] VHi VLsekvence (ili CDR sekvence) drugih anti-LAG-3 antitela koja vezuju humani LAG-3 mogu biti "izmešana i uparena sa" sa VHi VLsekvencama (ili CDR sekvencama) antitela LAG3.5. Poželjno, kada su VHi VLlanci (ili CDR regioni u sklopu takvih lanaca) izmešani i upareni, VHsekvenca iz posebnog VH/VLuparivanja je zamenjena sa strukturno sličnom VHsekvencom. Isto tako, poželjno VLsekvenca iz posebnog VH/VLuparivanja je zamenjena sa strukturno sličnom VLsekvencom.
[0059] Prema tome, antitela koja sadrže predmetnog pronalaska sadrže:
a) varijabilni region teškog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 12 (tj., VHLAG3.5); i
b) varijabilni region lakog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 14 (tj., VLLAG3.5) ili VLdrugog anti-LAG3 antitela (tj., koja se razlikuje od LAG3.5);
gde antitelo specifično vezuje humani LAG-3.
[0060] Dalje antitela koja vezuju humani LAG-3 mogu da sadrže:
a) regione CDR1, CDR2 i CDR3 varijabilnog regiona teškog lanca koji sadrže aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 12 (tj., CDR sekvence LAG3.5, SEQ ID NO: 15, 16, i 17, redom; i
b) regione CDR1, CDR2 i CDR3 varijabilnog regiona lakog lanca koji sadrže aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 14 (tj., CDR sekvence LAG3.5, SEQ ID NO: 18, 19, i 20, redom) ili CDR-ovi drugog anti-LAG3 antitela (tj. koji se razlikuje od LAG3.5);
gde antitelo specifično vezuje humani LAG-3.
[0061] Još dalje, antitela koja vezuju humani LAG-3 uključuju varijabilni CDR2 region teškog lanca LAG3.5 kombinovan sa CDR regionima drugih antitela koja vezuju humani LAG-3, npr., CDR1 i/ili CDR3 iz varijabilnog regiona teškog lanca, i/ili CDR1, CDR2, i/ili CDR3 iz varijabilnog regiona lakog lanca različitog anti-LAG-3 antitela.
[0062] Dodatno, poznato je u oblasti da CDR3 domen, nezavisno od CDR1 i/ili CDR2 domena, sam može odrediti specifičnost vezivanja za srodni antigen i da višestruka antitela mogu predvidljivo biti generisana imajući istu specifičnost vezivanja na osnovu uobičajene CDR3 sekvence. Videti, npr., Klimka i sar., British J. of Cancer 83(2):252-260 (2000); Beiboer i sar J. Mol. BioL 296:833-849 (2000); Rader i sar., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.
95:8910-8915 (1998); Barbas i sar., J. Am. Chem. Soc. 116:2161-2162 (1994); Barbas i sar., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92:2529-2533 (1995); Ditzel i sar., J. Immunol. 157:739-749 (1996); Berezov i sar., BIAjournal 8:Scientific Review 8 (2001); Igarashi i sar., J. Biochem (Tokyo) 117:452-7 (1995); Bourgeois i sar., J. Virol 72:807-10 (1998); Levi i sar., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:4374-8 (1993); Polymenis i Stoller, J. Immunol. 152:5218-5329 (1994) i Xu i Davis, Immunity 13:37-45 (2000). Videti takođe, američke patente br. 6,951,646; 6,914,128; 6,090,382; 6,818,216; 6,156,313; 6,827,925; 5,833,943; 5,762,905 i 5,760,185.
[0063] Shodno tome, antitela koja vezuju humani LAG-3 uključuju CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.5 i najmanje CDR3 varijabilnog regiona teškog i/ili lakog lanca LAG3.5 (SEQ ID NOs: 17 i/ili 20), ili CDR3 varijabilnog regiona teškog i/ili lakog lanca drugog LAG-3 antitela, gde je antitelo sposobno za specifično vezivanje za humani LAG-3. Ova antitela poželjno (a) kompetiraju za vezivanje sa; (b) zadržavaju funkcionalne karakteristike; (c) vezuju se za isti epitop; i/ili (d) imaju slični afinitet vezivanja kao LAG3.5. Još dalje, antitela koja vezuju humani LAG-3 uključuju CDR2 varijabilnog regiona lakog lanca LAG3.5 (SEQ ID NOs: 17 i/ili 20), ili CDR2 varijabilnog regiona lakog lanca drugog LAG-3 antitela, gde je antitelo sposobno za specifično vezivanje za humani LAG-3. Druga antitela koja vezuju humani LAG-3 mogu da uključuju CDR1 varijabilni region teškog i/ili lakog lanca LAG3.5 (SEQ ID NOs: 17 i/ili 20), ili CDR1 varijabilni region teškog i/ili lakog lanca drugog LAG-3 antitela, gde je antitelo sposobno za specifično vezivanje za humani LAG-3.
Konzervativne modifikacije
[0064] Druga antitela koja vezuju humani LAG-3 mogu da sadrže sekvence varijabilnog regiona teškog i/ili lakog lanca ili CDR1, CDR2 i CDR3 sekvence koje se razlikuju od onih od LAG3.5 pomoću jedne ili više konzervativnih modifikacija. Poželjno, međutim, ostaci 54 i 56 od VHCDR2 ostaju kao arginin i serin, redom (tj., nisu mutirane). Razume se u oblasti da određene modifikacije konzervativne sekvence mogu biti načinjene da ne uklanjaju vezivanje antigena. Videti, npr., Brummell i sar. (1993) Biochem 32:1180-8; de Wildt i sar. (1997) Prot. Eng. 10:835-41; Komissarov i sar. (1997) J. Biol. Chem. 272:26864-26870; Hall i sar. (1992) J. Immunol. 149:1605-12; Kelley i O'Connell (1993) Biochem. 32:6862-35; Adib-Conquy i sar. (1998) Int. Immunol. 10:341-6 i Beers i sar. (2000) Clin. Can. Res.6:2835-43. Prema tome, antitelo sadrži varijabilni region teškog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence i/ili varijabilni region lakog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence, gde:
a) sekvenca CDR1 varijabilnog regiona teškog lanca sadrži SEQ ID NO: 15, i/ili njene konzervativne modifikacije, osim na položajima 54 i 56; i/ili
b) sekvenca CDR3 varijabilnog regiona teškog lanca sadrži SEQ ID NO: 17, i njene konzervativne modifikacije; i/ili
c) sekvence varijabilnog regiona lakog lanca CDR1, i/ili CDR2, i/ili CDR3 sadrže SEQ ID NO: 18, i/ili, SEQ ID NO: 19, i/ili SEQ ID NO: 20, i/ili njihove konzervativne modifikacije; i
d) antitelo specifično vezuje humani LAG-3.
[0065] Dodatno ili alternativno, antitelo može da poseduje jedan ili više od sledećih funkcionalnih svojstava opisanih iznad, kao što su vezivanje sa visokim afinitetom za humani LAG-3, vezivanje za LAG-3 majmuna, nedostatak vezivanja za mišiji LAG-3, sposobnost da inhibira vezivanje LAG-3 za molekule MHC klase II i/ili sposobnost da stimuliše odgovore antigen-specifične T ćelije.
[0066] Antitelo opisano ovde može biti, na primer, humano, humanizovano ili himerno antitelo
[0067] Kao što je ovde korišćeno, termin "konzervativne modifikacije sekvence" bi trebalo da se odnosi na amino kiselinske modifikacije koje značajno ne utiču ili ne menjaju karakteristike vezivanja antitela koja sadrže aminokiselinsku sekvencu. Takve konzervativne modifikacije obuhvataju amino kiselinske supstitucije, adicije i delecije. Modifikacije mogu biti uvedene u antitelo standardnim tehnikama poznatim u oblasti, kao što su usmerena mutageneza i mutageneza posredovana PCR-om. Konzervativne amino kiselinske supstitucije su one u kojima je aminokiselinski ostatak zamenjen sa amino kiselinskim ostatkom koji ima sličan bočni lanac. Familije aminokiselinskih ostataka koji imaju slične bočne lance su definisane u oblasti. Ove familije obuhvataju aminokiseline sa baznim bočnim lancima (npr., lizin, arginin, histidin), kiselim bočnim lancima (npr., asparaginska kiselina, glutaminska kiselina), nenaelektrisanim polarnim bočnim lancima (npr., glicin, asparagin, glutamin, serin, treonin, tirozin, cistein, triptofan), nepolarnim bočnim lancima (npr., alanin, valin, leucin, izoleucin, prolin, fenilalanin, metionin), beta-razgranatim bočnim lancima (npr., treonin, valie, izoleucin) i aromatičnim bočnim lancima (npr., tirozin, fenilalanin, triptofan, histidin). Tako, jedan ili više aminokiselinskih ostataka u sklopu CDR regiona antitela mogu biti zamenjeni sa drugim aminokiselinskim ostacima iz iste familije bočnih lanaca i izmenjeno antitelo može biti testirano za zadržanu funkciju (tj., funkcije prikazane iznad) korišćenjem funkcionalnih eseja opisanih ovde.
Projektovana i modifikovana antitela
[0068] Antitela mogu biti preipremljena korišćenjem antitela koje ima jedan ili više od VHi/ili VLsekvenci od LAG3.5 kao početni materijal da se projektuje modifikovano antitelo. Antitelo može biti projektovano modifikacijom jednog ili više ostataka u sklopu jednog ili oba varijabilna regiona (tj., VHi/ili VL), na primer u sklopu jednog ili više CDR regiona i/ili u sklopu jednog ili više okvirnih regiona. Dodatno ili alternativno, antitelo može biti projektovano modifikovanjem ostataka u sklopu konstantnog(ih) regiona, na primer menjanjem efektorskih funkcija antitela.
[0069] CDR graftovanje može biti korišćeno da se projektuju varijabilni regioni antitela. Antitela interaguju sa ciljni antigenima predominanto preko aminokiselinskih ostataka koji su locirani u šest regiona koji određuju komplementranost teškog i lakog lanca (CDR regioni). Iz ovog razloga, aminokiselinske sekvence u sklopu CDR regiona su raznovrsnije između pojedinačnih antitela negos ekvence izvan CDR regiona. Pošto su CDR sekvence odgovorne za većinu antitelo-antigen interakcija, moguće je da se eksprimiraju rekombinantna antitela koja imitiraju svojstva specifičnih prirodnih antitela konstruisanjem ekspresionih vektora koji obuhvataju CDR sekvence iz specifičnih prirodnih antitela graftovanih na okvirne sekvence iz različitog antitela sa različitih svojstvima (videti, npr., Riechmann i sar. (1998) Nature 332:323-327; Jones i sar. (1986) Nature 321:522-525; Queen i sar. (1989) Proc. Natl. Acad. Videti. U.S.A. 86:10029-10033; Američki patenti br. 5,225,539; 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 i 6,180,370).
[0070] Shodno navedenom, drugo tehnničko rešenje pronalaska primenjuje izolovano monoklonsko antitelo, ili njegov deo koji se vezuje za antigen, koji sadrži varijabilni region teškog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence koje sadrže SEQ ID NO: 15, 16, 17, respektivno, i varijabilni region lakog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence koje sadrže SEQ ID NO: 18, 19, 20, respektivno (tj., CDR-ove LAG3.5). Dok ova antitela sadrže VHi VLCDR sekvence monoklonskog antitela LAG3.5, mogu da sadrže različite okvirne sekvence.
[0071] Okvirne sekvence mogu biti dobijene iz javnih DNK baza podataka ili objavljenih referenci koje obuhvataju genske sekvence antitela germinativne linije. Na primer, germinativne DNK sekvence za humane gene varijabilnog regiona teškog i lakog lanca mogu biti nađene u "VBase" bazi podataka humanih germinativnih sekvenci (dostupna na internetu na www.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase), kao i u Kabat i sar. (1991), citiran gore, Tomlinson i sar. (1992) "The Repertoire of Human Germline VH Sequence Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops" J. Mol. Biol.227:776-798; i Cox i sar. (1994) "A Directory hof human Germ-line VH Segments Reveals a Strong Bias in their Usage" Eur. J. Immunol. 24:827-836. Kao drugi primer, germinativne DNK sekvence za varijabilni region humanog teškog i lakog lanca mogu biti nađene u bazi podataka Banke gena. Na primer, sledeće sekvence teškog lanca germinativne linije nađene u HCo7 HuMAb mišu su dostune u pratećim pristupnim brojevima Banke gena: 1-69 (NG_0010109, NT_024637 & BC070333), 3-33 (NG_0010109 & NT_024637) i 3-7 (NG_0010109 & NT_024637). Kao drugi primer, sledeće sekvence teškog lanca germinativne linije nađene u HCo12 HuMAb mišu su dostupne u pratećim pristupnim brojevima Banke gena: 1-69 (NG_0010109, NT_024637 & BC070333), 5-51 (NG_0010109 & NT_024637), 4-34 (NG_0010109 & NT_024637), 3-30.3 (CAJ556644) & 3-23 (AJ406678).
[0072] Proteinske sekvence antitela su upoređene nasuprot sastavljene baze podataka sekvenci proteina korišćenjem jedne od metoda za pretragu sličnosti sekvenci koja se zove the Gapped BLAST (Altschul i sar. (1997), gore), koje je dobro poznata prosečnim poznavaocima oblasti.
[0073] Poželjne okvirne sekvence za primenu u antitelima su one koje su strukturno slične okvirnim sekvencama korišćenim od strane odabranih antitela, npr., slične sa VH4-34 okvirnom sekvencom i/ili VKL6 okvirnom sekvencom korišćenom od strane poželjnih monoklonskih antitela. VHCDR1, CDR2, i CDR3 sekvence, i VKCDR1, CDR2, i CDR3 sekvence, mogu biti graftovane na okvirne regione koji imaju identičnu sekvencu kao ona nađena u imunoglobulinskom genu germinativne linije od koga se okvirna sekvenca izvodi, ili CDR sekvence mogu biti graftovane na okivirne regione koji sadrže jednu ili više mutacija kao u poređenju sa germinativnom sekvencom. Na primer, nađeno je da je u pojedinim slučajevima efikasno da se mutiraju ostaci u sklopu okvirnih regiona da se održi ili pojača sposobnost antitela da veže antigen (videti npr., američke patente br. 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 i 6,180,370).
[0074] Drugi tip modifikacije varijabilnog regiona je mutiranje aminokiselinskih ostataka unutar VHi/ili VLCDR1, CDR2 i/ili CDR3 regiona da se time poboljša jedno ili više svojstava vezivanja (npr., afinitet) antitela od interesa. Usmerena mutageneza ili mutageneza posredovana PCR-om može biti izvedena da se uvede mutacija(e) i efekat na vezivanje antitela, ili drugo funkcionalno svojstvo od interesa, može biti procenjeno u in vitro ili in vivo esejima kako je opisano ovde i obezbeđeno u Primerima. Poželjno konzervativne modifikacije (kao što je razmotreno iznad) su predstavljene. Mutacije mogu biti aminokiselinske supstitucije, adicije ili delecije, ali su poželjne supstitucije. Pored toga, tipično ne više od jednog, dva, tri, četiri ili pet ostataka u sklopu CRD regionu su izmenjeni.
[0075] Prema tome, izolovana anti-LAG-3 monoklonska antitela, ili njihovi antigen vezujući delovi, mogu da sadrže varijabilni region teškog lanca koji sadrži: (a) VHCDR1 region koji sadrži SEQ ID NO: 15, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 15; (b) VHCDR2 region koji sadrži SEQ ID NO: 16, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 16 (poželjno gde položaji 54 i 56 su isti kao u SEQ ID NO:16); (c) VHCDR3 region koji sadrži SEQ ID NO: 17, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 17; (d) VLCDR1 region koji sadrži SEQ ID NO: 18, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 18; (e) VLCDR2 region koji sadrži SEQ ID NO: 19, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 19; i (f) VLCDR3 region koji sadrži SEQ ID NO: 20, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 20.
[0076] Projektovana antitela uključuju ona u kojima su modifikacije napravljene na ostacima okvira u sklopu VHi/ili VL, npr. da se poboljšaju svojstva antitela. Tipično takve modifikacije okvira su napravljene da se smanji imunogenost antitela. Na primer, jedan pristup je "povratno mutirati" jedan ili više ostataka okvira do odgovarajuće germinativne sekvence. Specifičnije, antitelo koje je podleglo somatskoj mutaciji može da sadrži ostatake okvira koji se razlikuju od germinativne sekvence od koje je antitelo izvedeno. Takvi ostaci mogu biti identifikovani poređenjem okvirne sekvence antitela sa germinativnom sekvencom od koje je antitelo izvedeno.
[0077] Drugi tip modifikacija okvira uključuje mutiranje jednog ili više ostataka u sklopu okvirnog regiona, da se uklone epitope T ćelije da bi se time smanjila potencijalna imunogenost antitela. Ovaj prirtup je takođe nazvan kao "deimunizacija" i opisan je u još detalja u objavi američkog patenta br.20030153043.
[0078] Dodatno ili alternativno modifikacijama napravljenim u sklopu okvirnih regiona, antitela mogu biti projektovana da obuhvate modifikacije u sklopu Fc regiona, tipično da se izmene jedno ili više funkcionalnih svojstava antitela, kao što su polu-život u serumu, fiksiranje komplementa, vezivanje FC receptora, i/ili antigen-zavisna ćelijska citotoksičnost. Pored toga, antitelo može biti hemijski modifikovano (npr., jedan ili više hemijskih segmenata mogu biti prikačeni za antitelo) ili biti modifikovani da izmene njegovu glikozilaciju, ponovo da izmene jedno ili više funkcionalnih svojstava antitela. Svaki od ovih tehničkih rešenja je opisano u još detalja ispod. Numerisanje ostataka u Fc regionu je pomoću EU indeksa Kabat-a.
[0079] U poželjnom tehničkom rešenju, antitelo je antitelo IgG4 izotipa koje sadrži mutaciju serina u prolin na položaju koji odgovara položaju 228 (S228P; EU indeks) u zglobnom regionu konstantnog regiona teškog lanca. Ova mutacija je prijavljena da poništava heterogenost disulfidnih mostova između teških lanaca u zglobnom regionu (Angal i sar. gore; položaj 241 je baziran na Kabat-ovom sistemu numeracije).
[0080] U jednom tehničkom rešenju, zglobni region CH1 je modifikovan tako da je broj cisteinskih ostataka u zglobnom regionu izmenjen, npr., povećan ili smanjen. Ovaj pristup je dalje opisan u američkom patentu br. 5,677,425. Broj cisteinskih ostataka u zglobnom regionu CH1 je izmenjen da, na primer, folakša skapanje lakih i teških lanaca ili da poveća ili smanji stabilnost antitela.
[0081] U drugom tehničkom rešenju, Fc zglobni region antitela je mutiran da smanji biološki poluživot antitela. Specifičnije, jedna ili više mutacija aminokiselina su uvedene u CH2-CH3 granični (interfejs) region domena Fc-zglobnog fragmenta tako da je antitelo smanjilo vezivanje Staphylococcyl proteina A (SpA) u odnosu na vezivanje SpA za nativni Fc-zglobni domen. Ovaj pristup je opisan u još detalja u američkom patentu br.6,165,745.
[0082] U drugom tehničkom rešenju, antitelo je modifikovano da poveća svoj biološki poluživot. Razni pruistupi su mogući. Na primer, jedna ili više sledećih mutacija može biti uvedena: T252L, T254S, T256F, kao što je opisan u američkom patentu br. 6,277,375. Alternativno, da bi se povećao biološki poluživot, antitelo može biti izmenjeno u sklopu CH1 ili CL regiona da sadrži epitop koji vezuje “salvage” receptor uzet iz dve petlje CH2 domena Fc regiona IgG, kao što je opisan u američkim patentima br.5,869,046 i 6,121,022.
[0083] U još jednom tehničkom rešenju, Fc region je izmenjen zamenjivanjem najmanje jednog aminokielinskog ostatka sa drugačijim aminokiselinskim ostatkom da se izmeni efektorska funkcija(e) antitela. Na primer, jedna ili više aminokiselina odabranih od aminokiselinskih ostataka 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 i 322 može biti zamenjena sa sa drugačijim aminokiselinskim ostatkom tako da antitelo ima izmenjen afinitet za efektorski ligand ali zadržava sposobnost za vezivanje antigena parentalnog antitela. Efektorski ligand kome je afinitet izmenjen može biti, na primer, Fc receptor ili C1 komponenta komplementa. Ovaj pristup je opisan u još detalja u američkim patentima br.5,624,821 i 5,648,260.
[0084] U još jednom primeru, jedna ili više aminokiselina odabranih od aminokiselinskih ostataka 329, 331 i 322 može biti zamenjena sa drugačijim aminokiselinskim ostatkom tako da antitelo ima izmenjeno C1q vezivanje i/ili smanjenu ili poništenu citotoksičnost zavisnu od komplementa (CDC). Ovaj pristup je opisan u još detalja u američkom patentu br.
6,194,551.
[0085] U još jednom primeru, jedan ili više ainokiselinskih ostataka u sklopu položaja aminokiselina 231 i 239 su izmenjeni da se time izmeni sposobnost antitela da fiksiraju komplement. Ovaj pristup je opisan dalje u objavi PCT prijave WO 94/29351.
[0086] U još jednom primeru, Fcy region je modifikovan da poveća sposobnost antitela da posreduje u ćelijskoj citotoskičnosti zavisnoj od antitela (ADCC) i/ili da poveća afinitet za Fcγ receptor modifikovanjem jedne ili više aminokiselina na sledećim položajima: 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 ili 439. Ovaj pristup je opisan dalje u objavi PCT prijave WO 00/42072. Pored toga, mesta vezivanja na humanom IgG1 za FcyR1, FcyRII, FcyRIII i FcRn su mapirana i varijante sa poboljšanim vezivanjem su opisane (videti Shields i sar. (2001) J. Biol. Chem. 276:6591-6604). Specifične mutacije na položajima 256, 290, 298, 333, 334 i 339 su pokazane da poboljšavanju vezivanje za FcyRIII. Dodatno, sledeći mutanti kombinacija su pokazani da poboljšavaju FcyRIII vezivanje: T256A/S298A, S298A/E333A, S298A/K224A i S298A/E333A/K334A.
[0087] U još jednom tehničkom rešenju, glikozilacija antitela je modifikovana. Na primer, neglikolizovano antitelo može biti napravljeno (tj., antitelo kome nedostaje glikozilacija). Glikozilacija može biti izmenjena da, na primer, poveća afinitet antitela za antigen. Takve modifikacije ugljenih hidrata mogu biti postignute pomoću, na primer, menjanja jednog ili više mesta glikozilacije u sklopu sekvence antitela. Na primer, jedna ili više aminoksielinskih supstitucija može biti načinjena kao rezultat eliminacije jednog ili više mesta glikozilacije okvira varijabilnog regiona da se time eliminiše glikozilacija na tom mestu. Takva glikozilacija može povećati afinitet antitela za antigen. Videti, npr., američki patenti br.
5,714,350 i 6,350,861.
[0088] Dodatno ili alternativno, antitelo može biti napravljeno da ima izmenjen tip glikozilacije, kao što je hipofukozilovano antitelo koje ima smanjene količine fukozil ostataka ili antitelo koje ima povećane račvaste GlcNac strukture. Takvi izmenjeni šabloni glikozilacije su pokazani da povećavaju ADCC sposobnost antitela. Takve ugljenohidratne modifikacije mogu biti postignute pomoću, na primer, eksprimiranja antitela u ćeliji domaćina sa izmenjenom mašinerijom za glikozilaciju. Ćelije sa izmenjenom mašinerijom za glikozilaciju su opisane u oblasti i mogu biti korišćene kao ćelije domaćina u kojima se eksprimiraju rekombinantna antitela da se time proizvede antitelo sa izmenjenom glikozilacijom. Na primer, ćelijskim linijima Ms704, Ms705, i Ms709 nedostaje gen za fukoziltransferazu, FUT8 (α (1,6)-fucosyltransferase), tako da antitela eksprimirana u Ms704, Ms705, i Ms709 ćelijskim linijama imaju nedostatak fukoze na njihovim ugljenim hidratima. Ms704, Ms705, i Ms709 FUT8<-/->ćelijske linije su kreirane ciljanim prekidom FUT8 gena u CHO/DG44 ćelijama korišćenjem dva vektora za zamenu (videti objavu američkog patenta br. 20040110704 i Yamane-Ohnuki i sar. (2004) Biotechnol Bioeng 87:614-22). Kao drugi primer, EP 1,176,195 opisuje ćelijsku liniju sa funkcionalno prekinutim FUT8 genom, koji kodira fukozil transferazu, tako da antitela eksprimirana u takvoj ćelijskoj liniji ispoljavaju hipofukozilaciju smanjivanjem ili eliminisanjem enzima povezanog sa α-1,6 vezom. EP 1,176,195 takođe opisuje ćelijske linije koje imaju nisku aktivnost enzima za dodavanje fukoze na N-acetilglukozamin koji se vezuje za Fc region antitela ili nema enzimsku aktivnost, na primer ćelijska linija mišijeg mijeloma YB2/0 (ATCC CRL 1662). Objava PCT prijave WO 03/035835 opisuje varijantnu CHO ćelijsku liniju, Lec13 ćelije, sa smanjenom sposobnošću da prikači fukozu za Asn(297)-povezane ugljene hidrate, takođe rezultujući u hipofukozilaciji antitela ekspirmiranih u toj ćeliji domaćina (videti takođe Shields i sar. (2002) J. Biol. Chem. 277:26733-26740). Antitela sa modifikovanim profilom glikozilacije mogu takođe biti proizvedena u kokošjim jajima, kao što je opisano u objavi PCT prijave WO 06/089231. Alternativno, antitela sa modifikovanim profilom glikozilacije mogu biti proizvedena u biljnim ćelijama, kao što je Lemna. Metode za proizvodnju antitela u biljnom sistemu je stavljena na uvid javnosti u američkoj patentnoj prijavi koja odgovara broju slučaja advokata Alston & Bird LLP 040989/314911, podnešenoj 11. avgusta 2006. Objava PCT prijave 99/54342 opisuje ćelijske linije projektovana da eksprimiraju glikoproteinmodifikujuće glikozil transferaze (npr., β(1,4)-N-acetilglukozaminiltransferaza III (GnTIII)) tako da antitela eksprimirana u projektovanim ćelijskim linijama ispoljavaju povećane račvaste GlcNac strukture koje rezultuju povećanom ADCC aktivnošću antitela (videti takođe Umana i sar. (1999) Nat. Biotech. 17:176-180). Alternativno, fukozni ostaci antitela mogu biti iscepani korišćenjem fukozidaznog enzima; npr., fukozidaza α-L-fukozidaza uklanja fukozil ostatke sa antitela (Tarentino i sar. (1975) Biochem. 14:5516-23).
[0089] Još jedna modifikacija antitela ovde koja je predviđena ovom predmetnom objavom je pegilacija. Antitelo može biti pegilovano da, na primer, poveća biološki (npr., serumski) polu život antitela. Da bi se pegilovalo neko antitelo, antitelo, ili fragment istog, tipično reaguje sa polietilen glikolom (PEG), kao što je reaktivni estarski ili aldehidni derivat PEG-a, u uslovima u kojima jedna ili više PEG grupa postaju prikačene za antitelo ili fragment antitela. Poželjno, pegilacija je izvedena pomoću reakcije acilacije ili reakcije alkilacije sa reaktivnim PEG molekulom (ili analognim polimerom rastvornim u vodi). Kao što je ovde korišćeno, termin "polietilen glikol" bi trebalo da obuhvati bilo koji od oblika PEG-a koji je korišćen da derivatizuje druge proteine, kao što su mono (C1-C10) alkoksi- ili ariloksi- polietilen glikol ili polietilen glikol -maleimid. U određenim tehničkim rešenjima, antitelo koje treba pegilovati je aglikozilovano antitelo. Metode za pegilaciju proteina su poznate u stanju tehnike i mogu biti primenjene na antitela za primenu u pronalasku. Videti, npr., EP 0 154 316 i EP 0401 384.
Fizička svojstva antitela
[0090] Antitela mogu biti okarakterisana njihovim raznim fizičkim svojstvima, da se detektuju i-ili diferenciraju različite klase istih.
[0091] Na primer, antitela mogu da sadrže jedno ili više mesta glikozilacije u varijabilnom regionu lakog ili teškog lanca. Takva mesta glikozilacije mogu rezultovati u povećanoj imunogenosti antitela ili izmeni pK antitela usled izmenjenog vezivanja antigena (Marshall i sar. (1972) Annu Rev Biochem 41:673-702; Gala i Morrison (2004) J Immunol 172:5489-94; Wallick i sar. (1988) J Exp Med 168:1099-109; Spiro (2002) Glycobiology 12:43R-56R; Parekh i sar. (1985) Nature 316:452-7; Mimura i sar. (2000) Mol Immunol 37:697-706). Poznato je da se glikozilacija dešava na motivima koji sadrže N-X-S/T sekvencu. U nekim slučajevima, poželjno je imati anti-LAG-3 antitelo koje ne sadrži glikozilaciju varijabilnog regiona. Ovo može biti postignuto ili selektovanjem antitela koja ne sadrže motiv glikozilacije u varijabilnom regionu ili mutiranjem ostataka u sklopu regiona glikozilacije.
[0092] U poželjnom tehničkom rešenju, antitela ne sadrže mesta izomerizma. Deamidacija asparagina može da se desi na N-G ili D-G sekvenci i rezultuje u stvaranju ostataka izoasparaginske kiseline koji uvodi nabor u polipeptidni lanac i smanjuje njegovu stabilnost (efekat izoasparaginske kiseline).
[0093] Svako antitelo će imati jedinstvenu izoelektričnu tačku (pI), koja generalno pada u opseg pH između 6 i 9.5. pI za IgG1 antitelo tipično pada u okviru pH opsega od 7-9.5 i pI za IgG4 antitelo tipično pada unutar pH opsega od 6-8. Spekuliše se da antitela sa pI izvan normalnog opsega mgu imati izvesno odmotavanje i nestabilnost u in vivo uslovima. Tako, poželjno je imati anti-LAG-3 antitelo koje obuhvata pI vrednost koja spada u normalni opseg. Ovo može biti postignuto ili selektovanjem antitela sa pI u normalnom opsgeu ili mutiranjem naelektrisanih površinskih ostataka.
Molekuli nukleinske kiseline koji kodiraju antitela
[0094] U još jednom aspektu, opisane su molekule nukleinske kiseline koji kodiraju varijabilne regione lakog i/ili teškog lanca, ili CDR-ova, antitela za primenu u pronalasku. Nukleinske kiseline mogu biti prisutne u celim ćelijama, u ćelijskom lizatu, ili u delimično prečišćenom ili suštinski čistom obliku. Nukleinska kiselina je "izolovana" ili "učinjena suštinski čistom" kada je prečišćena od drugih ćelijskih komponenti ili drugih zagađivača, npr., druge ćelijske nukleinske kiseline ili proteini, standardnim tehnikama, uključujući alkalni/SDS tretman, CsCl “banding”, hromatografiju na koloni, elektroforezu na agaroznom gelu i druge dobro poznate u oblasti. Videti, Ausubel, i sar., ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing i Wiley Interscience, Njujork. Nukleinska kiselina za primenu u pronalasku može biti, npr., DNK ili RNK i može ili ne mora da sadrži intronsku sekvencu. Poželjno je da je nukleinska kiselina cDNK molekul.
[0095] Nukleinske kiseline za primenu u pronalasku mogu biti dobijene primenom standardnih molekularno bioloških tehnika. Za antitela eksprimirana pomoću hibridoma (npr., hibridomi pripremljeni od transgenih miševa koji nose humane imunoglobulinske gene kao što je opisano dodatno ispod), cDNK koje kodiraju lake i teške lance antitela napravljene pomoću hibridoma mogu biti dobijene standardnom PCR amplifikacijom ili tehnikama kloniranja cDNK: Za antitela dobijena iz biblioteke imunoglobulinskih gena (npr., korišćenjem tehnika fagnog displeja – “phage display” tehnika”), nukleinska kiselina koja kodira takva antitela može biti nadokađena iz biblioteke gena.
[0096] Poželjno je da molekuli nukleinskih kiselina za primenu u pronalasku uključuju one koji kodiraju VHi VLsekvence LAG3.5 monoklonskog antitela (SEQ ID NO: 12 i 14, respektivno) ili CDR-ovi. Kada su jednom dobijeni DNK fragmenti koji kodiraju VHi VLsegmente, ovim DNK fragmentima može dalje da se manipuliše standardnim tehnikama rekombinantne DNK, na primer da se konvertuju varijabilni regioni gena u gene lanca antitela u punoj dužini, u gene Fab fragmenta ili scFv gen. U ovim manipulacijama, VL- ili VH-kodirajući DNK fragment je operativno povezan za drugi DNK fragment koji kodira drugi protein, kao što je konstantni region antitela ili fleksibilni linker. Termin "operativno povezan", kao što je korišćeno u ovom kontekstu, treba da znači da su dva DNK fragmenta spojena tako da su aminokiselinske sekvence kodirane pomoću dva DNK fragmenta koja ostaju u okviru.
[0097] Izolovana DNK koja kodira VHregion može biti konvertovana u gen teškog lanca u punoj dužini operativnim vezivanjem VH-kodirajuće DNK za drugi DNK molekul koji kodira konstantne regione teškog lanca (CH1, CH2 i CH3). Sekvence humanog gena konstantnog regiona teškog lanca su poznate u oblasti (videti npr., Kabat i sar. (1991), gore) i DNK fragmenti koji obuhvataju ove regione mogu biti dobijeni standardnom PCR amplifikacijom. Konstantni region teškog lanca može biti IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM ili IgD konstantni region, ali najpoželjniji je IgG1 ili IgG4 konstantni region. Za gen teškog lanca Fab fragmenta, VH-kodirajuća DNK može biti operativno povezana za drugi DNK molekul koji kodira samo CH1 konstantni region teškog lanca.
[0098] Izolovana DNK koja kodira VLregion može biti konvertovana u gen lakog lanca u punoj dužini (kaoi gen Fab lakog lanca) operativno povezujući VL-kodirajuću DNK za drugi molekul DNK koji kodira konstantni region lakog lanca, CL. Sekvence gena humanog konstantnog regiona lakog lanca su poznate u oblasti (videti npr., Kabat i sar., gore) i DNK fragmenti koji obuhvataju ove regione mogu biti dobijeni standardnom PCR amplifikacijom. Poželjno je da konstantni region lakog lanca može biti kapa ili lambda konstantni region.
[0099] Da bi se kreirao scFv gen, VH- i VL-kodirajući DNK fragmenti su operativno povezani za drugi fragment koji kodira fleksibilni linker, npr., koji kodira aminokiselinsku sekvencu (Gly4-Ser)3(SEQ ID NO: 28), tako da VHi VLsekvence mogu biti ekprimovane kao susedni jednolančani protein, sa VLi VHregionima koji su spojeni fleksibilnim linkerom (videti npr., Bird i sar. (1988) Science 242:423-426; Huston i sr. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty i sar., (1990) Nature 348:552-554).
Proizvodnja monoklonskih antitela
[0100] Monoklonska antitela (mAbs) za primenu u predmetnom pronalasku mogu biti proizvedena primenom dobro poznatih tehnika hibridizacije somatskih ćelija (hibridoma) Kohler-a i Milstein-a (1975) Nature 256: 495. Drugi putevi proizvodnje monoklonskih antitela obuhvataju virusnu ili onkogensku transformaciju B limfocita i tehnike fagnog displeja. Himerna ili humanizovana antitela su takođe dobro poznata u oblasti. Videti npr., američke patente br.4,816,567; 5,225,539; 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 i 6,180,370.
[0101] Poželjno je da su antitela humana monoklonska antitela. Takva humana monoklonska antitela usmerena na humani LAG-3 mogu biti generisana korišćenjem transgenih ili transhromozomskih miševa koji nose delove humanog imunskog sistema više nego mišijeg sistema. Ovi transgeni ili transhromozomski miševi obuhvataju miševe koji se nazivaju ovde HuMAb Mouse<®>i KM Mouse<®>, redom, i kolektivno se zovu ovde "humani Ig miševi."
[0102] HuMAb Mouse<®>(Medarex<®>, Inc.) sadrži minilokuse humanog imunoglubulinskog gena koji kodiraju neuređene imunoglobulinske sekvence teškog (µ i y) i κ lakog lanca, zajedno sa ciljanim mutacijama koje inaktiviraju endogene lokuse µ i κ lanaca (videti npr., Lonberg i sar. (1994) Nature 368(6474): 856-859). Prema tome, miševi koji ispoljavaju smanjenu ekspresiju mišijeg IgM ili κ, i u odgovoru na imunizaciju, uvedeni transgeni humanog teškog i lakog lanca podležu izmeni klase i somatskoj mutaciji da se generišu humana IgGκ monoklonska antitela sa visokim afinitetom (Lonberg i sar. (1994), gore; prikazano u Lonberg (1994) Handbook of Experimental Pharmacology 113:49-101; Lonberg, N. i Huszar, D. (1995) Intern. Rev. Immunol.13: 65-93, i Harding i Lonberg (1995) Ann. N. Y. Acad. Sci. 764:536-546). Priprema i primena HuMAb Mouse<®>, i genomske modifikacije izvedene pomoću takvih miševa, su dalje opsiani u Taylor i sar. (1992) Nucleis Acids Research 20:6287-6295; Chen i sar. (1993) International Immunology 5: 647-656; Tuaillon i sar. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:3720-3724; Choi i sar. (1993) Nature Genetics 4:117-123; Chen i sar. (1993) EMBO J. 12: 821-830; Tuaillon i sar. (1994) J. Immunol.
152:2912-2920; Taylor i sar. (1994) International Immunology 6: 579-591; i Fishwild i sar. (1996) Nature Biotechnology 14: 845-851. Videti dalje, američke patente br. 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; 5,789,650; 5,877,397; 5,661,016; 5,814,318; 5,874,299; 5,770,429; i 5,545,807; PCT obkave br. WO 92/03918; WO 93/12227; WO 94/25585; WO 97/13852; WO 98/24884; WO 99/45962 i WO 01/14424.
[0103] Humana antitela mogu biti povećana korišćenjem miša koji nosi sekvence humanog imunoglobulina na transgenima i transhomozomima, kao što je miš koji nosi humani transgen teškog lanca i humani transhromozom lakog lanca. Ovaj miš se naziva ovde kao "KM mouse<®>," i opisan je detaljno u objavi PCT prijave WO 02/43478. Modifikovan oblik ovog miša, koji dalje sadrži homozigotni poremećaj, gena endogenog FcyRIIB receptora, je takođe opisan u objavi PCT prijave WO 02/43478 i nazvan je ovde kao "KM/FCGR2D mouse<®>." Dodatno, miševi sa transgenima ili HCo7 ili HCo12 teškog lanca ili oba mogu biti korišćeni.
[0104] Dodatno transgene životinje uključuju Xenomouse (Abgenix, Inc., Američki patenti br. 5,939,598; 6,075,181; 6,114,598; 6,150,584 i 6,162,963). Dalje, životinje uključuju "TC miševe" (Tomizuka i sar. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:722-727) i krave koje nose transhromozome humanog teškog i lakog lanca (Kuroiwa i sar. (2002) Nature Biotechnology 20:889-894; PCT objava WO 02/092812).
[0105] Humana monoklonska antitela mogu biti pripremljena korišćenjem “phage display” tehnika za skrining bliblioteka gena humanog immunoglobulina. Videti, npr. američke patente br. 5,223,409; 5,403,484; 5,571,698; 5,427,908; 5,580,717; 5,969,108;6,172,197; 5,885,793; 6,521,404; 6,544,731; 6,555,313; 6,582,915; i 6,593,081.
[0106] Humana monoklonska antitela mogu takođe biti pripremljena korišćenjem SCID miševa u humanim imunskim ćelijama koje su rekonstituisane tako da odgovor humanog antitela može biti generisan po imunizaciji. Videti, npr., američke patente br. 5,476,996 i 5,698,767.
[0107] Humana anti-LAG-3 antitela takođe mogu biti pripremljena korišćenjem “fagnog displeja” gde fagi sadrže nukleinske kiseline koje kodiraju antitela generisana u transgenim životinjama prethodno imunizovanim sa LAG-3. Poželjno je da je transgena životinja HuMab, KM, ili Kirin miš. Videti, npr. američki patent br.6,794,132.
Imunizacija humanih Ig miševa
[0108] U jednom primeru, humani Ig miševi su imunizovani sa prečišćenim ili obogaćenim preparatom LAG-3 antigena, rekombinantnog LAG-3 proteina, ili ćelijama koje eksprimiraju LAG-3 protein. Videti, npr., Lonberg i sar. (1994), gore; Fishwild i sar. (1996), gore; objave PCT prijava WO 98/24884 ili WO 01/14424. Poželjno je da su 6-16 nedelja stari miševi imunizovani sa 5-50 µg LAG-3 proteina. Alternativno, deo LAG-3 fuzionisan za ne-LAG-3 polipetidom je korišćen.
[0109] Transgeni miševi mogu biti imunizovani intraperitonealno (IP) ili intravenski (IV) sa LAG-3 antigenom u kompletnom Freund-om adjuvansu, praćeno sa naknadnim IP ili IV imunizacijama sa antigenom u nekompletnom Freund-om adjuvansu. Adjuvansi koji nisu Freund-ovi ili cele ćelije u odsustvu adjuvansa mogu biti korišćeni. Plazma može takođe biti testirana pomoću ELISA i ćelije miševa sa dovoljno titara anti-LAG3 humanog imunoglobulina mogu biti korišćene za fuzije.
Stvaranje hibridoma koji proizvode humana monoklonska antitela
[0110] Da bi se napravili hibridomi koji proizvode humana monoklonska antitela za primenu u pronalasku, splenociti i/ili ćelije limfnih čvorova iz imunizovanih miševa mogu biti izolovane i fuzionisane za odgovarajuću imortalizovanu ćelijsku liniju, kao što je ćelijska linija mišijeg mijeloma. Dobijeni hibridomi mogu biti testirani za proizvodnju antigenspecifičnih antitela. Stvaranje hibridoma je dobro poznato u oblasti. Videti, npr., Harlow i Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, Njujork.
Stvaranje transfektoma koji proizvode monoklonska antitela
[0111] Antitela za primenu u pronalasku takođe se mogu proizvesti u transfektomu ćelije domaćina primenom, na primer, kombinacije tehnika rekombinantne DNK i metoda transfekcije gena što je dobro poznato u oblasti tehnike (npr., Morrison, S. (1985) Science 229: 1202). DNK koja kodira lake i teške lance delimične ili pune dužine dobijene standardnim tehnikama molekularne biologije može biti ubačena u jedan ili više ekspresionih vektora tako da su geni operativno povezani sa transkripcionim i translacionim regulatornim sekvencama. U ovom kontekstu, termin „operativno povezan“ podrazumeva da gen antitela bude ligiran u vektor tako da transkripcione i translacione kontrolne sekvence unutar vektora služe svojoj predviđenoj funkciji regulacije transkripcije i translacije gena antitela.
[0112] Termin "regulatorna sekvenca" treba da uključuje promotere, pojačivače i druge elemente za kontrolu ekspresije (npr., signale poliadenilacije) koji kontrolišu transkripciju ili translaciju gena lanca antitela. Takve regulatorne sekvence su opisane, npr., u Goeddel (Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Dijego, CA (1990)). Poželjne regulatorne sekvence za ekspresiju sisarske ćelije domaćina obuhvataju virusne elemente koji usmeravaju visoke nivoe proteinske ekspresije u sisarskim ćelijama, kao što su promoteri i/ili pojačivači izvedeni od citomegalovirusa (CMV), Simian Virusa 40 (SV40), adenovirusa, (npr., adenovirusni glavni kasni promoter (AdMLP) i polioma. Alternativno, nevirusne regulatorne sekvence mogu biti korišćene, kao što je ubikvitinski promoter ili β-globin promoter. Još dodatno, regulatorni elementi sastavljeni od sekvenci iz različitih izvora, kao što je SRα promoterski sistem, koji sadrži sekvence od SV40 ranog promotera i dugačak terminalni ponovak humane T ćelijske leukemije virus tipa 1 (Takebe i sar. (1988) Mol. Cell. Biol.8:466-472). Ekspresioni vektor i sekvence za kontrolu ekspresije su izabrane da budu kompatibilni sa ekspresionom ćelijom domaćina koja je korišćena.
[0113] Gen za laki lanac antitela i gen teškog lanca antitela mogu biti insertovani u iste ili odvojene ekspresione vektore. Poželjno je da su varijabilni regioni korišćeni da se kreiraju kompletni geni antitela bilo kog izotipa antitela insertujući ih u ekspresione vektore koji već kodiraju konstantne regione teškog lanca i konstantne regione lakog lanca željenog izotipa tako da je VHsegment operativno povezan za CHsegment(e) u sklopu vektora i VLsegment je operativno povezan za CLsegment u sklopu vektora. Dodatno ili alternativno, rekombinantni ekspresioni vektor može da kodira signalni peptid koji olakšava sekreciju lanca antitela iz ćelije domaćina. Gen za lanac antitela može biti kloniran u vektor tako da je signalni peptid povezan unutar okvira za amino terminus gena za lanac antitela. Signalni peptid može biti imunoglobulinski signalni peptid ili heterologni signalni peptid (tj., signalni peptid iz ne-imunoglobulinskog proteina).
[0114] Kao dodatak genima za lanac antitela i regulatornim sekvencama, rekombinantni ekspresioni vektori mogu nositi dodatne sekvence, kao što su sekvence koje regulišu replikaciju vektora u ćelijama domaćina (npr., poreklo replikacije) i selektabilni geni markera. Selektabilni marker gen olakšava selekciju ćelija domaćina u koji je vektor uveden (videti, npr., američki patenti br. 4,399,216; 4,634,665 i 5,179,017). Na primer, tipično selektabilni marker gen daje otpornost na lekove, kao što su G418, higromicin ili metotreksat, ćeliji domaćina u koju je uveden vektor. Poželjni selektabilni marker geni obuhvataju gen za dihidrofolat reduktazu (DHFR) (za primenu u dhfr-ćelijama domaćina sa selekcijom/amplifikacijom metotreksata) i neo gen (za G418 selekciju).
[0115] Za ekspresiju lakih i teških lanca, ekspresioni vektor(i) koji kodiraju teške i lake lance su transfektovani u ćeliju domaćina standardnim tehnikama. Razni oblici termina transfekcija" bi trebalo da obuhvate širog asortiman tehnika obično korišćenih za uvođenje egzogene DNK u prokariotsku ili eukariotsku ćeliju domaćina, npr., elektroporacija, precipitacija kalcijum fosfata, transfekcija DEAE-dekstrana i slično. Iako je teoretski moguće eksprimirati antitela u ili prokariotkim ili eukariotskim ćelijama domaćina, ekspresija antitela u eukariotskim ćelijama, i najpoželjnije sisarskim ćelijama domaćina, je najpoželjnija jer je najveća verovatnoća da se takve eukariotske ćelije, i naročito sisarske ćelije sakupe i luče ispravno savijena i imunološki aktivna antitela.
[0116] Poželjne sisarske ćelije domaćina za eksprimiranje rekombinantnih antitela sadrže ovarijum kineskog hrčka (CHO ćelije) (uključujući dhfr<->CHO ćelije, opisane u Urlaub i Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220, korišćene kao DHFR selektabilni marker, npr., kao što je opisano u R. J. Kaufman i P. A. Sharp (1982) J. Mol. Biol. 159:601-621), NSO mijelomske ćelije, COS ćelije i SP2 ćelije. Naročito, za primenu sa NSO mijelomskim ćelijama, drugi poželjni ekspresioni sistem je GS genski ekspresioni sistem stavljen na uvid javnosti u WO 87/04462, WO 89/01036 i EP 338,841. Kad su rekombinantni ekspresioni vektori koji kodiraju gene antitela uvedeni u sisarske ćelije domaćina, antitela su proizvedena kultivisanjem ćelija domaćina tokom perioda koji je dovoljan da se dozvoli ekspresija antitela u ćelijama domaćina, ili poželjnije, sekrecija antitela u medijum za kulture u kome su ćelije domaćina gajene. Antitela mogu biti opravljena iz medijuma za kulture korišćenjem standardnih metoda prečišćavanja proteina.
Imunokonjugati
[0117] Antitela mogu biti spojena sa terapijskim agensom da se formira imunokonjugat kao što je konjugat antitelo-lek (ADC). Pogodni terapijski agensi obuhvataju antimetabolite, alkilujuće agense, agense koji se vezuju za mali žleb DNK, DNK interkalatori, agensi koji unakrsno povezuju DNK, inhibitori histon deacetilaze, inhibitori jedarnog izvoza, proteazomski inhibitori, inhibitori topoizomeraze I ili II, inhibitori proteina toplotnog šoka, inhibitori tirozinkinaze, antibiotici, i anti-mikotici. U ADC, antitelo i terapijski agens poželjno su spojeni preko veznika koji može da se iscepa kao što je peptidil, disulfidni, ili hidrazon veznik. Poželjnije, veznik je peptidil veznik kao što je Val-Cit, Ala-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Pro-Val-Gly-Val-Val (SEQ ID NO: 39), Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Ala-Ala-Asn, Cit-Cit, Val-Lys, Lys, Cit, Ser, ili Glu. ADCs mogu biti pripremljeni kao što je opisano u američkim patentima br. 7,087,600; 6,989,452; i 7,129,261; Objavama PCT prijava WO 02/096910; WO 07/038658; WO 07/051081; WO 07/059404; WO 08/083312; i WO 08/103693; Objavama amaeričkih patenata 20060024317; 20060004081; i 20060247295.
Bispecifični molekuli
[0118] U još jednom aspektu, predmetno obelodanjenje prikazuje bispecifične molekule koji sadrže jedno ili više antitela sa najmanje jednim drugim funkcionalnim molekulom, npr., drugim peptidom ili proteinom (npr., drugim antitelom ili ligandom za receptor) za stvaranje bispecifičnog molekula koji vezuje za najmanje dva različita mesta vezivanja ili ciljne molekule. Prema tome, kao što je ovde korišćeno, "bispecifični molekul" uključuje molekule koji imaju tri ili više specifičnosti. Poželjno je da bispecifični molekul sadrži prvu specifičnost vezivanja za LAG-3 i drugu specifičnost vezivanja za aktivirajući molekul koji upošljava citotoksični efektor ćelije koji može da ubije ciljnu ćeliju koja eksprimira LAG-3. Primeri pogodnih aktivirajućih molekula su CD64, CD89, CD16, i CD3. Videti, npr., Kufer i sar., TRENDS in Biotechnology, 22 (5), 238-244 (2004).
[0119] Bispecifični molekul može da ima, dodatno na anti-Fc specifičnost vezivanja i anti-LAG-3 specifičnost vezivanja, treću specifičnost. Treća specifičnost može biti za antipojačavajući faktor (EF), npr., molekul koji se vezuje za površinski protein uključen u citotoksičnu aktivnost i time povećava imunski odgovor na ciljnu ćeliju. Na primer, antipojačavajući faktor može da veže citotoksičnu T-ćeliju (npr. putem CD2, CD3, CD8, CD28, CD4, CD40, ili ICAM-1) ili drugu imunsku ćeliju, rezultujući povećanim imunskim odgovorom na ciljnu ćeliju.
[0120] Bispecifični molekuli mogu doći u mnogo različitih oblika i veličina. Na jednom kraju spektra veličina, bispecifični molekul zadržava format tradiconalnog antitela, osim što, umesto da ima dva vezujuća kraka sa identičnom specifičnošću, ima dva vezujuća kraka koji imaju raziličitu specifičnost. U drugoj krajnosti su bispecifični molekuli koji se sastoje od dva jednolančana fragmenta antitela (scFv's) koji su povezani petidnim lancem, takozvani Bs(scFv)2konstrukt. Bispecifični molekuli srednje veličine obuhvataju dva različita F(ab) fragmenta koji su povezani sa petidil veznikom. Bispecifični molekuli ovih i drugih formata mogu biti pripremljeni genetičkim inženjeringom, somatskom hibridizacijom, i hemijskim metodama. Videti, npr., Kufer i sar, cited gore; Cao i Suresh, Bioconjugate Chemistry, 9 (6), 635-644 (1998); i van Spriel i sar., Immunology Today, 21 (8), 391-397 (2000), i reference citirane tamo.
Farmaceutske kompozicije
[0121] U još jednom aspektu, predmetna objava obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedno ili više antitela koja je formulisana zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem. Kompozicija može opciono da sadrži jedan ili više farmaceutski aktivnih sastojaka, kao što su drugo antitelo ili lek. Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska takođe mogu biti administrirane u kombinovanoj terapiji sa, na primer, drugim imunostimulatornim agensom, antikancerskim agensom, antivirusnim agensom, ili vakcinom, tako da anti-LAG-3 antitelo pojačava imunski odgovor na vakcinu.
[0122] Farmaceutska kompozicija može da sadrži bilo koji broj ekscipijenasa. Ekscipijensi koji mogu biti korišćeni obuhvataju nosače, površinske aktivne sastojke, agense za zgušnjavanje ili emulzifikaciju, čvrsta veziva, pomoćne agense za disperziju ili suspenziju, solubilizatore, agense za bojenje, sredstva za ukus, premaze, sredstva za dezintegraciju, lubrikante, zaslađivače, konzervanse, izotonična sredstva, i njihove kombinacije. Selekcija i primena pogodnih ekscipijenasa je učena u Gennaro, ed., Remington: The Science i Practice of Pharmacy, 10. izdanje. (Lippincott Williams & Wilkins 2003).
[0123] Poželjno, farmaceutska kompozicija je pogodna za intravensku, intramuskularnu, subkutanu, parenteralnu, spinalnu ili epidermalnu administraciju (npr., injekcija ili infuzija). U zavisnosti od puta administracije, aktivno jedinjenje može biti presvučeno materijalom da ga zaštiti od delovanja pomoćnih sredstava i drugih prirodnih uslova koja mogu da ga inaktiviraju. Fraza "parenteralna administracija" kao što je ovde korišćeno označava načine administracije osim enteralne i topikalne administracije, obično injekcijom, i uključuje, bez ograničenja, intravensku, intramuskularnu, intraarterijsku, intratekalnu, intrakapsularnu, intraorbitalnu, intrakardijalnu, intradermalnu, intraperitonealnu, transtrahealnu, subkutanu, subkutikularnu, intraartikularnu, subkapsularnu, suarahnoidalnu, intraspinalnu, epiduralnu i intrasternalnu injekciju i infuziju. Alternativno, antitelo može biti administrirano putem neparenteralnog puta, kao što je topikalni, epidermalni ili mukozalni put of administracije, npr., intranazalno, oralno, vaginalno, rektalno, sublingvalno ili topikalno.
[0124] Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska mogu da sadrže farmaceutski prihvatljive soli. "Farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na so koja zadržava željenu biološku aktivnost parentalnog jedinjenja i ne daje nikakve neželjene toksikološke efekte. Primeri takvih soli uključuju kisele adicione soli i bazne adicione soli. Kisele adicione soli uključuju one koje su izvedene iz netoksičnih neorganskih kiselina, kao što su hlorovodonična, azotna, fosforna, sumporna, bromovodonična, jodovodonična, fosforasta i slično, kao i iz netoksičnih neorganskih kiselina kao što su alifatične mono- i dikarboksilne kiseline, fenil-supstituisane alkanske kiseline, hidroksi alkanske kiseline, aromaticne kiseline, alifatične i aromatične sulfonske kiseline i slično. Bazne adicione soli uključuju one koje su izvedene iz zemno alkalnih metala, kao što su natrijum, kalijum, magnezijum, kalcijum i slično, kao i iz netoksičnih organskih amina, kao što su N,N'-dibenziletilendiamin, N-metilglukamin, hloroprokain, holin, dietanolamin, etilendiamin, prokain i slično.
[0125] Farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku sterilnih vodenih rastvora ili disperzija. One takođe mogu biti formulisane u mikroemulziji, lipozomu, ili drugoj određenoj strukturi pogodnoj za visoke koncentracije leka.
[0126] Količina aktivnog sastojka koji može biti kombinovan sa materijalom nosača da proizvede pojedinačni dozni oblik će varirati u zavisnosti od subjekta koji se leči i konkretnoog načina administracije i generalno će biti ona količina kompozicije koja proizvodi terapijski efekat. Uopšteno, od sto procenata, ova količina će biti u opsegu od oko 0.01% do oko devedeset četiri procenta aktivnog sastojka, poželjno od oko 0.1% do oko 70%, najpoželjnije od oko 1% do oko 30% aktivnog sastojka u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0127] Dozni režimi su podešeni da obezbede optimalni željeni odgovor (npr., terapijski odgovor). Na primer, pojedinačni bolus može biti administriran, nekoliko podeljenih doza mogu biti administrirane tokom vremena ili doza može biti proporcionalno smanjena ili povećana kao što je ukazano potrebama terapijske situacije. Posebno je povoljno formulisati parenteralne kompozicije u doznom jediničnom obliku za lakoću administracije i uniformnost doze. Dozni jedinični oblik kao što je ovde korišćeno odnosi se na fizički diskretne jedinice koje odgovaraju jediničnim dozama za subjekte koji se tretiraju; svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu aktivnog jedinjenja izračunatu da bi proizvela željeni terapijski efekat u vezi sa potrebnim farmaceutskim nosačem. Alternativno, antitelo može biti administrirano kao formulacija sa produženim oslobađanjem, pri čemu je u tom slučaju neophodna manje česta administracija.
[0128] Za administraciju antitela, doze su u opsegu od oko 0.0001 do 100 mg/kg, i i češće 0.01 do 5 mg/kg, telesne mase domaćina. Na primer doze mogu biti 0.3 mg/kg telesne mase, 1 mg/kg telesne mase, 3 mg/kg telesne mase, 5 mg/kg telesne mase ili 10 mg/kg telesne mase ili u sklopu the range of 1-10 mg/kg. Režim lečenja koji služi kao primer podrazumeva adminsitraciju jednom nedeljno, jednom svake dve nedelje, jednom svake tri nedelje, jednom svake četiri nedelje, jednom mesečno, jednom svaka 3 meseca ili jednom svakih tri do 6 meseci. Poželjni dozni režimi za anti-LAG-3 antitelo obuhvataju 1 mg/kg telesne mase ili 3 mg/kg telesne mase intravenskom administracijom, sa antitelom koje se daje korišćenjem jednim od sledećih doznih rasporeda: (i) svake četiri nedelje za šest doza, zatim svaka tri meseca; (ii) svake tri nedelje; (iii) 3 mg/kg telesne mase jednom praćeno sa 1 mg/kg telesne mase svake tri nedelje. U nekim metodama, doza je prilagođena da se dostigne koncentracija antitela u plazmi od oko 1-1000 µg /ml i u nekim metodama oko 25-300 µg /ml.
[0129] "Terapijski efikasna doza" anti-LAG-3 antitela poželjno rezultuje u smanjenju težine simptoma bolesti, povećanja u učestalosti i trajanju perioda bez simptoma bolesti, ili prevenciji oštećenja ili onesposobljavanja usled nepovoljnih okolnosti izazvanih bolešću. Na primer, za lečenje subjekata koji nose tumor, "terapijski efikasna doza" poželjno inhibira rast tumora za najmanje oko 20%, poželjnije za najmanje oko 40%, još poželjnije za najmanje oko 60%, i još poželjnije za najmanje oko 80% u odnosu na netretirane subjekte. Terapijski efikasna količina terapijskog jedinjenja može da smanji veličinu tumora, ili na neki drugi način ublaži simptome kod subjekta, koji je tipično čovek ili može biti drugi sisar.
[0130] Farmaceutska kompozicija može biti formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem, uključujući implante, transdermalne flastere, i mikroenkapsulirane sisteme isporuke. Biorazgradivi, biokompatibilni polimeri mogu biti korišćeni, kao što su etilen vinil acetat, polianhidridi, poliglikolna kiselia, kolagen, poliortoestri, i polimlečna kiselina. Videti, npr., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., Njujork, 1978.
[0131] Terapijske kompozicije mogu biti administrirane pomoću medicinskih sredstava kao što su (1) uređaji za ubrizgavanje pod kožu bez igala (npr., US 5,399,163; 5,383,851; 5,312,335; 5,064,413; 4,941,880; 4,790,824; i 4,596,556); (2) mikro-infuzione pumpe (US 4,487,603); (3) transdermalni uređaji (US 4,486,194); (4) infuzioni aparati (US 4,447,233 i 4,447,224); i (5) osmotski uređaji (US 4,439,196 i 4,475,196).
[0132] Humana monoklonska antitela mogu biti formulisana da siguraju ispravnu distribuciju in vivo. Na primer, da bi osigurali da terapijska jedinjenja prelaze krvno-možanu barijeru, ona mogu biti formulisana u lipozomima, koji mogu dodatno da sadrže ciljajuće delove da se poboljša selektivni transport u specifične ćelije ili organe. Videti, npr. US 4,522,811; 5,374,548; 5,416,016; i 5,399,331; V.V. Ranade (1989) J. Clin. Pharmacol. 29:685; Umezawa i sar., (1988) Biochem. Biophys. Res. Commun. 153:1038; Bloeman i sar. (1995) FEBS Lett.357:140; M. Owais i sar. (1995) Antimicrob. Agents Chemother. 39:180; Briscoe i sar. (1995) Am. J. Physiol. 1233:134; Schreier i sar. (1994) J. Biol. Chem. 269:9090; Keinanen i Laukkanen (1994) FEBS Lett.346:123; i Killion i Fidler (1994) Immunomethods 4:273.
Primene predmetnog pronalaska
[0133] Kompozicije predmetnog pronalaska imaju brojne in vitro i in vivo korisnosti, uključujući, na primer, detekciju LAG-3 ili poboljšanje imunskih odgovora blokadom LAG-3. Poželjno je da su antitela humana antitela. Takva antitela mogu biti administrirana ćelijama u kulturi, in vitro ili ex vivo, ili humanim subjektima, npr., in vivo, da poboljšaju imunitet u raznim situacijama. Prema tome, u jednom aspektu obelodanjenje obezbeđuje metode modifikovanja imunskog odgovora kod subjekta koje obuhvataju administraciju kompozicije pronalaska tako da je imunski odgovor kod subjekta modifikovan. Poželjno, odgovor je poboljšan, stimulisan ili pozitivno regulisan.
[0134] Poželjni subjekti obuhvataju humane pacijente kod kojih postoji potreba za poboljšanjem imunskog odgovora. Metode su posebno pogodne za lečenje humanih pacijenata koji imaju poremećaj koji može biti lečen povećanjem imunskog odgovora (npr., imunski odgovor posredovan T ćelijama). Metode su posebno pogodne za lečenje kancera in vivo. Da se postigne antigen-specifično poboljšanje imuniteta, anti-LAG-3 antitela mogu biti administrirana zajedno sa antigenom od interesa ili antigen već može biti prisutan kod subjekta koji treba da se leči (npr., subjekat koji ima tumor ili virus). Kada su antitela za LAG-3 administrirana zajedno sa drugim agensom, ova dva mogu biti administrirana ili po redu ili istovremeno.
[0135] Takođe su ovde opisane metode za detektovanje prisustva humanog LAG-3 antigena u uzorku, ili merenje količine humanog LAG-3 antigena, koje sadrži kontaktiranje uzorka, i kontrolnog uzorka, sa humanim monoklonskim antitelom, ili njegovim antigen vezujućim delom, koji se specifično vezuje za humani LAG-3, u uslovima koji dozvoljavaju formiranje između antitela ili njegovog dela i humanog LAG-3. Formiranje kompleksa je zatim detektovano, gde razlika formiranja kompleksa između uzorka u poređenju sa kontrolnim uzorkom je pokazalo prisustvo humanog LAG-3 antigena u uzorku. Pored toga, anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska mogu biti korišćena da se prečisti humani LAG-3 imunoafinitetnim prečišćavanjem.
[0136] Poznata je sposobnost anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska da inhibira vezivanje LAG-3 za molekule MHC klase II i stimuliše odgovor antigen-specifičnih T ćelija, kompozicije predmetnog pronalaska mogu takođe biti primenjene u in vitro i in vivo metodama da stimulišu, poboljšaju ili pospeše odgovor antigen-specifičnih T ćelija. Na primer, pronalazak obezbeđuje kompozicije za primenu u metodi stimulisanja odgovora antigen-specifične T ćelije koji sadrži vezu pomenute T ćelije sa kompozicijom pronalaska, tako da je odgovor antigen-specifične T ćelije stimulisan. Bilo koji pogodni indikator odgovora antigen-specifične T ćelije može biti korišćen da se izmeri odgovor antigenspecifične T ćelije. Neograničavajući primeri takvih pogodnih indikatora obuhvataju povećanu proliferaciju T ćelija u prisustvu antitela i/ili povećanja proizvodnje citokina u prisustvu antitela. U poželjnom tehničkom rešenju, proizvodnja interleukina-2 pomoću antigen-specifične T ćelije je stimulisana.
[0137] Predmeti pronalazak takođe kompozicije za primenu u metodi stimulacije imunskog odgovora (npr., odgovor antigen-specifične T ćelije) kod subjekta koji sadrži administriranje komopzicije iz pronalaska subjektu tako da je imunski odgovor (npr., odgovor antigenspecifične T ćelije) kod subjekta stimulisan. U poželjnom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima tumor i imunski odgovor na tumor je stimulisan. U drugom poželjnom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima virus i imunski odgovor na virus je stimulisan.
[0138] U drugom tehničkom rešenju, kompozicija je za primenu u metodama za inhibiciju rasta tumorske ćelije kod subjekta koji sadrži administraciju kompozicije iz pronalaska subjektu tako da je rast tumora kod subjekta inhibiran. U još jednom tehničkom rešenju, kompozicija je za primenu u metodama za lečenje virusne infekcije kod subjekta koji sadrži administraciju antitela iz pronalaska subjektu tako da je virusna infekcija lečena kod subjekta.
[0139] Ove i druge primene su detaljno razmotrene u nastavku.
Kancer
[0140] Blokada LAG-3 pomoću antitela može da poboljša imunski odgovor na kancersku ćeliju kod pacijenta. U jednom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na lečenje subjekta in vivo primenom anti-LAG-3 antitela tako da je rast kancerskih tumora inhibiran. Anti-LAG-3 antitelo može biti korišćeno samo da inhibira rast kancerskih tumora. Alternativno, anti-LAG-3 antitelo može biti korišćeno u vezi sa drugim imunogenskim agensima, standardnim lečenjima kancera, ili drugim antitelima, kao što je opisano ispod.
[0141] Prema tome, u jednom tehničkom rešenju, komopzicija je za primenu u metodi inhibiranja rasta tumorske ćelije kod subjekta, koja sadrži administiranje subjektu terapijski efikasne količine anti-LAG-3 antitela, ili njegovog dela koji se vezuje za antigen. Poželjno, antitelo je humano anti-LAG-3 antitelo (kao svako od humanih anti-humanih LAG-3 antitela opisanih ovde). Dodatno ili alternativno, antitelo može biti himerno ili humanizovano anti-LAG-3 antitelo.
[0142] Poželjni kanceri čiji rast može biti inhibiran korišćenjem antitela predmetnog pronalaska obuhvataju kancere koji tipično odgovaraju na imunoterapiju. Neograničavajući primeri poželjnih kancera za tretman obuhvataju melanom (npr., metastatski maligni melanom), kancer bubrega (npr. karcinom jasnih ćelija), kancer prostate (npr. hormonski refraktorni adenokarcinom prostate), kancer dojke, kancer debelog creva i kancer pluća (npr. nesitnoćelijski kancer pluća). Dodatno, pronalazak uključuje refraktorne ili rekurentne maligne bolesti čiji se rast može inhibirati korišćenjem antitela predmetnog pronalaska.
[0143] Primeri drugih karcinoma koji se mogu lečiti primenom kompozicija predmetnog pronalaska obuhvataju kancer kostiju, kancer pankreasa, karcinom kože, kancer glave ili vrata, kožni ili intraokularni maligni melanom, karcinom materice, kancer jajnika, kancer rektuma, kancer analnog regiona, kancer želuca, kancer testisa, karcinom jajovoda, karcinom endometrijuma, karcinom grlića materice, karcinom vagine, karcinom vulve, Hočkinovu bolest, ne-Hočkinov limfom, kancer jednjaka, kancer tankog creva, kancer endokrinog sistema, kancer štitne žlezde, kancer paratiroidne žlezde, kancer nadbubrežne žlezde, sarkom mekog tkiva, kancer uretre, kancer penisa, hronične ili akutne leukemije uključujući akutnu mijeloidnu leukemiju, hroničnu mijeloidnu leukemiju, akutnu limfoblastnu leukemija, hroničnu limfocitnu leukemiju, solidne tumore detinjstva, limfocitni limfom, kancer bešike, kancer bubrega ili uretera, karcinom bubrežne karlice, neoplazmu centralnog nervnog sistema (CNS), primarni CNS limfom, tumorsku angiogenezu, tumor kičmene ose, gliom moždanih stem ćelija, hipofizni adenom, Kapošijev sarkom, epidermoidni kancer, kancer skvamoznih ćelija, limfom T-ćelija, kanceri izazvani sredinom, uključujući i one izazvane azbestom, i kombinaciju pomenutih kancera. Predmetni pronalazak je takođe koristan za lečenje metastatskih kancea, posebno metatatskih kancea koji eksprimiraju PD-L1 (Iwai i sar. (2005) Int. Immunol. 17:133-144).
[0144] Opciono, antitela za LAG-3 mogu biti kombinovana sa imunogenskim agensima, kao što u kancerske ćelije, prečišćeni tumorski antigeni (uključujući rekombinantne proteine, peptide, i ugljenohidratne molekule), ćelije, i ćelije transfektovane sa genima koji kodiraju imuno stimulatorne citokine (He i sar. (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Neograničavajući primeri tumorskih vakcina koje mogu biti korišćene obuhvataju peptide melanomskih antigena, kao što su peptidi gp100, MAGE antigena, Trp-2, MART1 i/ili tirozinaza, ili tumorske ćelije transfektovane da eksprimiraju citokin GM-CSF (razmotren dodatno ispod).
[0145] Kod ljudi, neki tumori su pokazani kao imunogeni kao što su melanom. Povećavanjem praga aktivacije T ćelija pomoću LAG-3 blokade, tumorski odgovori kod domaćina mogu biti aktivirani.
[0146] LAG-3 blokada je verovatno efikasnija kada je kombinovana sa protokolom vakcinacije. Mnoge eksperimentalne strategije vakcinacije za tumore su smišljene (videti Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D.2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; videti takođe Restifo, N. i Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, str.3023-3043 u DeVita et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology, peto izdanje). U jednoj od ovih strategija, vakcina je pripremljena korišćenjem autolognih ili alogenih tumorskih ćelija. Ove ćelijske vakcine su pokazane kao najefikasnije kada su tumorske ćelije transdukovane da eksprimiraju GM-CSF. GM-CSF je pokazan kao potentni aktivator prezentovanja antigena za tumorsku vakcinaciju (Dranoff i sar. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 90: 3539-43).
[0147] Studija genske ekspresije i šablona ekspresije velikih gena kod raznih tumora je dovela do definicije takozvanih tumor specifičnih antigena (Rosenberg, SA (1999) Immunity 10: 281-7). U mnogim slučajevima, ovi tumorski specifični antigeni su diferencijalni antigeni eksprimirani u tumorima i u ćeliji iz koje se razvio tumor, na primer melanocitni antigeni gp100, MAGE antigeni, i Trp-2. Još važnije, mnogi od ovih antigena mogu biti pokazani kao mete tumor specifičnih T ćelija koje se nalaze u domaćinu. LAG-3 blokada može biti korišćena u vezi sa kolekcijom rekombinantnih proteina i/ili peptida eksprimiranih u tumoru u cilju da se generiše imunski odgovor na ove proteine. Ovi proteini su normalno viđeni od strane imunskog sistema kao sopstveni antigeni i stoga su tolerantni na njih. Tumorski antigen može da obuhvati protein telomerazu, koja je potrebna za sintezu telomera hromozoma i koja je eksprimirana u više od 85% humanih kancera i samo u ograničenom broju somatskih tkiva (Kim i sar. (1994) Science 266: 2011-2013). (Ova somatska tkiva mogu biti zaštićena od imunskog napada raznim načinima). Tumorski antigen može takođe biti "neo-antigeni" eksprimirani u kancerskim ćelijama zbog somatskih mutacija koje menjaju proteinsku sekvecu ili stvaraju fuzione proteine između dve nepovezane sekvence (tj., bcr-abl u Filadelfija hromozomu), ili idiotip iz tumora B ćelija.
[0148] Druge tumorske vakcine mogu da obuhvate proteine iz virusa koji su uključeni u humanim kancerima kao što su Humani Papiloma Virusi (HPV), Hepatitis Virusi (HBV i HCV) i Kapošijev Herpes Sarkoma Virus (KHSV). Drugi oblik tumor specifičnog antigena koji može biti korišćen u vezi sa LAG-3 blokadom su prečišćeni proteini toplotnog šoka (HSP) izolovani iz samog tumorskog tkiva. Ovi proteini tiplotnog šoka sadrže fragmente proteina iz tumorske ćelije i ovi HSP su visoko efikasni pri isporuci antigen prezentujućim ćelijama za izazivanje tumorske imunosti (Suot & Srivastava (1995) Science 269:1585-1588; Tamura i sar. (1997) Science 278: 117-120).
[0149] Dendritske ćelije (DC) su potentne antigen prezentujuće ćelije koje mogu biti korišćene da pripreme antigen-specifične odgovore. Dendritske ćelije mogu biti proizvedene ex vivo i napunjene sa raznim proteinskim i peptidnim antigenima kao i tumorskim ćelijskim ekstraktima (Nestle i sar. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). Dendritske ćelije takođe mogu biti transdukovane genetskim sredstvima kako bi se eksprimirali i ti tumorski antigeni. Dendritske ćelije takođe su spojene direktno sa tumorskim ćelijama u cilju imunizacije (Kugler i sar. (2000) Nature Medicine 6:332-336). Metoda vakcinacije, DC imunizacija može biti efikasno kombinovana sa LAG-3 blokadom da se aktiviraju potentniji anti-tumorski odgovori.
[0150] LAG-3 blokada može takođe biti kombinovana sa standardnim lečenjima kancera. LAG-3 blokada može biti efikasno kombinovana sa hemoterapijskim režimima. U ovim slučajevima, može biti moguće smanjiti dozu hemoterapijskog agensa koji je administriran (Mokyr i sar. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Primer takve kombinacije je anti-LAG-3 antitelo u kombinaciji sa dekarbazinom za lečenje melanoma. Drugi primer takve kombinacije je anti-LAG-3 antitelo u kombinaciji sa interleukinom-2 (IL-2) za lečenje melanoma. Naučno obrazloženje iza kombinovane upotrebe blokade LAG-3 i hemoterapije jeste da smrt ćelije, koja je posledica citotoksičnog delovanja većine hemoterapijskih jedinjenja, treba da rezultira povećanim nivoom tumorskog antigena na putu prezentacije antigena. Druge kombinovane terapije koje mogu rezultirati sinergijom sa blokadom LAG-3 kroz ćelijsku smrt su zračenje, operacija, i hormonska deprivacija. Svaki od ovih protokola stvara izvor tumorskog antigena u domaćinu. Inhibitori angiogeneze se takođe mogu kombinovati sa blokadom LAG-3. Inhibicija angiogeneze dovodi do smrti tumorskih ćelija koja može da dovede tumorski antigen u puteve prezentacije antigena domaćina.
[0151] LAG-3 blokirajuća antitela mogu takođe biti korišćena u kombinaciji sa bispecifičnim antitelima koja ciljaju Fcα ili Fcy receptor-eksprimirajuće efektorske ćelije tumorskim ćelijama (videti, npr., američke patente br.5,922,845 i 5,837,243). Bispecifična antitela mogu biti korišćena da ciljaju dva odvojena antigena. Na primer bispecifična antitela za anti-Fc receptor/anti tumorski antigen (npr., Her-2/neu) su korišćena da ciljaju makrofage na mestu tumora. Ovo ciljanje može efikasnije da aktivira tumor specifične odgovore. Količina T ćelija u ovim odgovorima može biti uvećana primenom LAG-3 blokade. Alternativno, antigen može biti isporučen direktno dendritskim ćelijama pomoću primene bispecifičnih antitela koja se vezuju za tumorski antigen i specifični ćelijski površinski marker dendritskih ćelija.
[0152] Tumori izbegavaju imunološki nadzor domaćina velikim brojem mehanizama. Mnogi od ovih mehanizama mogu biti prevaziđeni inaktivacijom proteina koji su eksprimirani od strane tumora i koji su imunosupresivni. Ovi obuhvataju između ostalih TGF-β (Kehrl i sar. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard & O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), i Fas ligand (Hahne i sar. (1996) Science 274: 1363-1365). Antitela za svaki od ovih entiteta mogu biti korišćeni u kombinaciji sa anti-LAG-3 da bi se suprotstavili efektima imunosupresivnog agensa i favorizovali tumorske imunske odgovore od strane domaćina.
[0153] Druga antitela koja aktiviraju imunološko odgovaranje domaćina mogu se koristiti u kombinaciji sa anti-LAG-3. Ovi obuhvataju molekule na površini dendritske ćelije koji aktiviraju DC funkciju i prezentaciju antigena. Anti-CD40 antitela su sposobna efikasno supstituisati za aktivnost T pomoćne ćelije (Ridge i sar. (1998) Nature 393: 474-478) i mogu biti korišćena povezana sa LAG-3 antitelom (Ito i sar. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40). Aktivirajuća antitela za T ćelijske kostimulatorne molekule kao što je CTLA-4 (npr., američki patent br.5,811,097), OX-40 (Weinberg i sar. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-1BB (Melero i sar. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997), i ICOS (Hutloff i sar. (1999) Nature 397: 262-266) mogu takođe obezbediti povećane nivoe aktivacije T ćelija.
[0154] Transplantacija koštane srži se trenutno koristi za lečenje različitih tumora hematopoetskog porekla. Dok je bolest kalem aprotiv domaćina konsekvenca ovog lečenja, terapijska korist se može dobiti od odgovora kalema prema domaćinu. LAG-3 blokada se može koristiti da poveća efikasnost donorskih nakalemljenih tumor specifičnih T ćelija.
[0155] Takođe postoji nekoliko eksperimentalnih protokola lečenja koji uključuju ex vivo aktivaciju i proširenje antigen specifičnih T ćelija i adoptivni transfer ovih ćelija u primaoce kako bi se stimulisale antigen-specifične T ćelije protiv tumora (Greenberg & Riddell (1999) Science 285: 546-51). Ove metode mogu takođe biti korišćene da se aktiviraju odgovori T ćelija na infektivne agense kao što je CMV. Ex vivo aktivacija u prisustvu anti-LAG-3 antitela može da poveća učestalost i aktivnost adoptivno transferovanih T ćelija.
Infektivne bolesti
[0156] Kompozicije iz pronalaska se mogu takođe primeniti za lečenje pacijenata koji su bili izloženi određenim toksinima ili patogenima. Prema tome, drugi aspekt pronalaska obezbeđuje kompozicije za primenu u postupku lečenja infektivne bolesti kod subjekta koji obuhvata administriranje subjektu kompozicije iz pronlaska, tako da se subjekat leči od infektivnue bolesti. Poželjno, antitelo je humano antitelo za anti-humani LAG-3 (kao što je bilo koji od humanih anti-LAG-3 antitela opisanih ovde). Dodatno ili alternativno, antitelo može biti himerno ili humanizovano antitelo.
[0157] Slično njenoj primeni na tumorima kao što je prethodno razmotreno, blokada LAG-3 posredovana antitelom se može koristiti sama, ili kao pomoćno sredstvo, u kombinaciji sa vakcinama, kako bi se stimulisao imunski odgovor na patogene, toksine, i sopstvene antigene. Primeri patogena za koje ovaj terapijski pristup može biti naročito koristan, uključuju patogene za koje trenutno nema efikasne vakcine, ili patogene za koje su konvencionalne vakcine manje nego potpuno efikasne. Ove obuhvataju, ali nisu ograničene na HIV, Hepatitis (A, B, & C), Grip, Herpes, Giardia, Malaria, Leishmania, Staphilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. LAG-3 blokada je naročito korisna protiv utvrđenih infekcija agensima kao što je HIV koji predstavljaju izmenjene antigene u toku infekcija. Ovi novi epitopi su prepoznati kao strani u vreme administracije anti-humanog LAG-3, čime se izaziva snažan T-ćelijski odgovor koji nije ometan negativnim signalima preko LAG-3.
[0158] Neki primeri patogenih virusa koji uzorkuju infekcije koje se mogu lečiti kompozicijama predmetnog pronalaska obuhvataju HIV, hepatitis (A, B, ili C), herpes virus (npr., VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II, i CMV, Epstein Barr virus), adenovirus, virus gripa, flaviviruse, ehovirus, rinovirus, koksaki virus, koronavirus, respiratorni sincicijski virus, virus mumpsa, rotavirus, virus malih boginja, virus rubeola, parvovirus, vakcinija virus, HTLV virus, virus denge, papiloma virus, molluscum virus, poliovirus, virus besnila, JC virus i virus arbovirusnog encefalitisa.
[0159] Neki primeri patogenih bakterija koje uzrokuju infekcije koje se mogu lečiti kompozicijama iz pronalaska koje uključuju hlamidiju, rikecija bakterije, mikobakterije, stafilokoke, streptokoke, pneumonokoke, meningokoke i gonokoke, klebsijela, proteus, serratia, pseudomonas, legionelu, difteriju, salmonelu, bacile, koleru, tetanus, botulizam, antraks, kugu, leptospirozu, bakterije Limes bolesti.
[0160] Neki primeri patogenih gljiva koje uzrokuju infekcije koje se mogu lečiti kompozicijama iz pronalaska koje uključuju Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, itd.), Criptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, itd.), Genus Mucorales (mucor, absidia, rhizopus) Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis i Histoplasma capsulatum.
[0161] Neki primeri patogenih parazita koji uzrokuju infeckcije koje se mogu lečiti kompozicijama iz pronalaska koje uključuju Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondii, Nippostrongylus brasiliensis.
[0162] U svim gornjim metodama, LAG-3 blokada može biti kombinovana sa drugim oblicima imunoterapije kao što je lečenje citokinima (npr., interferoni, GM-CSF, G-CSF, IL-2), ili terapija bispecifičnim antitelom, koja obezbeđuje poboljšanu prezentaciju tumorskih antigena (videti, npr., Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2:1121-1123).
Autoimunske reakcije
[0163] Anti-LAG-3 antitela mogu izazvati i pojačati autoimunske odgovore. Zapravo, indukcija antitumorskih odgovora korišćenjem tumorskih ćelija i peptidnih vakcina otkriva da mnogi anti-tumorski odgovori uključuju anti-samo reaktivnosti (van Elsas i sar. (2001) J. Exp. Med.194:481-489; Overwijk, i sar. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.96: 2982-2987; Hurwitz, (2000) gore; Rosenberg & White (1996) J. Immunother Emphasis Tumor Immunol 19 (1): 81-4). Stoga, moguće je uzeti u obzir korišćenje anti-LAG-3 blokade u vezi sa raznim sopstvenim proteinima u cilju da se osmisle protokole vakcinacije za efikasno generisanje imunskih odgovora protiv ovih sopstvenih proteina (samo-proteina) za lečenje bolesti. Na primer, Alchajmerova bolest uključuje neadekvatnu akumulaciju Aβ peptida u amiloidnim depozitima u mozgu; odgovori antitela na amiloid mogu da očiste ove amiloidne depozite (Schenk i sar., (1999) Nature 400: 173-177).
[0164] Drugi sopstveni proteini se takođe mogu koristiti kao mete kao što je IgE za lečenje alergije i astme, i TNFa za reumatoidni artritis. Na kraju, odgovori antitela na različite hormone mogu biti indukovani korišćenjem anti-LAG-3 antitela. Neutralizujući odgovori antitela na reproduktivne hormone mogu se koristiti za kontracepciju. Neutralizujući odgovor antitela na hormone i druge solubilne fakotre koji su potrebni za rast određenih tumora takođe se može smatrati mogućim metama vakcinacije.
[0165] Analogne metode kao što je opisano gore za primenu anti-LAG-3 antitela mogu se koristiti za indukciju terapijskih autoimunskih odgovora za lečenje pacijenata koji imaju neadekvatnu akumulaciju drugih sopstvenih-antigena, kao što su depoziti amiloida, uključujući Aβ u Alzheimerovoj bolesti, citokina kao što su TNFα, i IgE.
Vakcine
[0166] Anti-LAG-3 antitela mogu biti korišćena da se stimulišu antigen-specifični imunski odgovori istovremenom administracijom anti-LAG-3 antitela sa antigenom od interesa (npr., vakcina). Prema tome, u drugom aspektu pronalaska kompozicije se primenjuju u metodi poboljšavanja imunskog odogovra na antigen kod subjekta koja obuhvata administriranje subjektu: (i) antigena; i (ii) anti-LAG-3 antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, tako da je imunski odgovor na antigen kod subjekta poboljšan. Poželjno, antitelo je humano antitelo za anti-humani LAG-3 (kao bilo koje od humanih antitela za antihumani LAG-3 koja su opisana ovde dodatno) Dodatno ili alternativno, antitelo može biti himerno ili humanizovano antitelo. Antigen može da bude, na primer, tumorski antigen, virusni antigen, bakterijski antigen ili antigen iz patogena. Neograničavajući primeri takvih antigena obuhvataju one razmotrene u odeljcima iznad, ili antigene iz virusa, bakterija ili drugih patogena opisanih iznad.
[0167] Pogodni načini administracije kompozicija antitela (npr., humana monoklonska antitela, multispecifični i bispecifični molekuli i imunokonjugati) predmetnog pronalaska in vivo i in vitro su dobro poznati u oblasti i mogu biti odabrani od strane prosečnih poznavalaca oblasti. Na primer, kompozicije antitela mogu biti administrirane injekcijom (npr., intravenski ili subkutano). Pogodne doze korišćenih molekula će zavisiti od starosti i mase subjekta i koncentracije i/ili formulacije kompozicije antitela.
[0168] Kao što je prethodno opisano, kompozicije predmetnog pronalaska mogu biti koadministrirana sa jednim ili više drugih terapijskih agenasa npr. citotoksični agens, radiotoksični agens ili imunosupresivni agens. Antitelo može biti vezano za agens (kao imuno-kompleks) ili može biti administrirano odvojeno od agensa. U drugom slučaju (odvojena administracija), antitelo može biti administrirano pre, posle ili istovremeno sa agensom ili može biti koadministrirano sa drugim poznatim terapijama, npr. antikancerska terapija, npr. zračenje. Takvi terapijski agensi obuhvataju, između ostalog, anti-neoplastične agense kao što su doksorubicin (adriamicin), cisplatin bleomicin sulfat, karmustin, hlorambucil, dakarbazin i ciklofosfamid hidroksiurea koji su, sami po sebi, samo efikasni na nivoima koji su toksični ili subtoksični za pacijenta. Cisplatin se intravenski administrira u dozi od 100 mg/ml jednom svake četiri nedelje i adriamicin se intravenski administrira u dozi od 60 do 75 mg/ml jednom svakih 21 dan. Ko-administriranje humanih anti-LAG-3 antibelela ili njihovih fragmenata vezanih za antigen, predmetnog pronalaska sa hemoterapijskim agensima obezbeđuje dva antikancerska agensa koja deluju preko različitih mehanizama koji imaju citotoksični efekat na humane tumorske ćelije. Takva koadministracija može da reši probleme usled razvoja otpornosti na lekove ili promene antigenosti tumorskih ćelija koji bi ih učinili nereaktivnim sa antitelom.
[0169] Takođe opisani su kompleti koji sadrže kompozicije predmetnog pronalaska i uputstva za primenu. Komplet može dalje sadržati najmanje jedan dodatni reagens, ili jedno ili više dodatnih humanih antitela. Kompleti tipično uključuju oznaku koja označava nameravanu upotrebu sadržaja kompleta. Termin oznaka uključuje bilo koje pisanje, ili snimljeni materijal koji se isporučuje na ili sa kompletom, ili koji inače prati komplet.
Kombinovana terapija
[0170] Traženi pronalazak se odnosi na jednu kompoziciju koja sadrži: (a) monoklonsko antitelo, ili njegov deo koji se vezuje za antigen, koji vezuje humani LAG-3, (b) anti-PD-1 antitelo, ili njegov deo koji se vezuje za antigen, i (c) farmaceutski prihvatljiv nosač. Shodno tome, pronalazak se odnosi na kombinovanu terapiju u kojoj se anti-LAG-3 antitelo (ili njegov deo koji se vezuje za antigen) iz ovog pronalaska primenjuje zajedno sa jednim ili više dodatnih antitela koja su efikasna u stimulisanju imunih odgovora da bi na taj način dodatno pojačali, stimulisali ili poboljšali imuni odgovori kod subjekta
[0171] Ovde su dalje opisane metode za stimulisanje imunog odgovora kod subjekta koji obuhvataju administriranje subjektu anti-LAG-3 antitela i jednog ili više dodatnih imunostimulatornih antitela, kao što su anti-PD-1 antitelo, anti-PD -L1 antitelo i/ili anti-CTLA-4 antitelo, tako da se imuni odgovor stimuliše kod subjekta, na primer da inhibira rast tumora ili da stimuliše antivirusni odgovor. Prema pronalasku, subjektu se administriraju anti-LAG-3 antitelo i anti-PD-1 antitelo. U jednom tehničkom rešenju, anti-LAG-3 antitelo je ljudsko antitelo, kao što je antitelo prema pronalasku. Alternativno, anti-LAG-3 antitelo može biti, na primer, himerno ili humanizovano antitelo (npr., pripremljeno od mišijeg anti-LAG-3 mAb). U drugom tehničkom rešenju, najmanje jedno dodatno imunostimulatorno antitelo (tj. anti-PD-1 antitelo) je ljudsko antitelo. Alternativno, najmanje jedno dodatno imunostimulatorno antitelo može biti, na primer, himerno ili humanizovano antitelo (npr., pripremljeno od mišijeg anti-PD-1).
[0172] Dalje, ovde je opisana metoda za lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancer) obuhvata administriranje LAG-3 antitela i CTLA-4 antitela subjektu. Anti-LAG-3 antitelo može biti administrirano u subterapijskoj dozi, anti-CTLA-4 antitelo može biti administrirano u subterapijskoj dozi, ili oba mogu biti administrirana u subterapijskoj dozi. Dalje, ovde je opisana metoda za izmenu neželjenog događaja povezanog sa lečenjem hiperproliferativnog oboljenja sa imunostimulatornim agensom, koja sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-CTLA-4 antitela subjektu. Subjekat može biti čovek, anti-CTLA-4 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom 10D1 (opisano u objavi PCT prijave WO 01/14424), anti-LAG-3 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom, kao što je LAG3.5 opisan ovde. Druga anti-CTLA-4 antitela obuhvaćena koja su ovde opisana uključuju na primer, one stavljene na uvid javnosti u: WO 98/42752; WO 00/37504; Američki patent br. 6,207,156; Hurwitz i sar. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95(17):10067-10071; Camacho i sar. (2004) J. Clin. Oncology 22(145): Abstrakt br. 2505 (antitelo CP-675206); i Mokyr i sar. (1998) Cancer Res. 58:5301-5304. Anti-CTLA-4 antitelo mogu se vezati za humani CTLA-4 sa KDod 5 x 10<-8>M ili manje, vezati za humani CTLA-4 sa KDod 1 x 10<-8>M ili manje, vezuje se za humani CTLA-4 sa KDof 5 x 10<-9>M ili manje, ili vezati za humani CTLA-4 sa KDod između 1 x 10<-8>M i 1 x 10<-10>M ili manje.
[0173] Predmetni pronalazak obezbeđuje kompozicije za primenu u metodi za lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancer), koja obuhvata administriranje LAG-3 antitela i PD-1 antitela subjektu. U sledećim tehničkim rešenjima, anti-LAG-3 antitelo se administrira u subterapijskoj dozi, anti-PD-1 antitelo je administrirano u subterapijskoj dozi, ili su oba administrirana u subterapijskoj dozi. U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje kompozicije za primenu u metodi za izmenu neželjenih događaja povezanih sa lečenjem hiperproliferativne bolesti sa imunostimulatornim agensom, koja obuhvata administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-PD-1 antitela subjektu. U određenim tehničkim rešenjima, subjekat je čovek. U određenim tehničkim rešenjima, anti-PD-1 antitelo je monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom i anti-LAG-3 antitelo je monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom, kao što je LAG3.5 koje je ovde opisano. Primeri anti-PD-1 antitela sa humanom sekvencom obuhvataju 17D8, 2D3, 4H1, 5C4 i 4A11, koji su opisani u objavi PCT prijave WO 06/121168. Druga anti-PD-1 antitela obuhvataju, npr., lambrolizumab (WO2008/156712), i AMP514 (WO2010/027423, WO2010/027827, WO2010/027828, WO2010/098788). U određenim tehničkim rešenjima, anti-PD-1 antitelo se vezuje za humani PD-1 sa KDod 5 x 10<-8>M ili manje, se vezuje za humani PD-1 sa KDod 1 x 10<-8>M ili manje, se vezuje za humani PD-1 sa KDod 5 x 10<-9>M ili manje, ili se vezuje za humani PD-1 sa KDizmeđu 1 x 10<-8>M i 1 x 10<-10>M ili manje.
[0174] Dalje, ovde je opisana metoda za lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancera), koja sadrži administriranje LAG-3 antitela i PD-L1 antitela subjektu. Anti-LAG-3 antitelo može biti administrirano u subterapijskoj dozi, anti-PD-LI antitelo može biti administriran u subterapijskoj dozi, ili oba mogu biti administrirana u subterapijskoj dozi. Dalje, ovde je opisana metoda za izmenu neželjenih događaja povezanih sa lečenjem hiperproliferativne bolesti sa imunostimulatornim agensom, koja sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-PD-L1 antitela subjektu. Subjekat može biti čovek. Anti-PD-L1 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom i anti-LAG-3 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom, kao što je LAG3.5 opisan ovde. Primeri humanog sekvenca anti-PD-L1 antitela obuhvataju 3G10, 12A4, 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7 i 13G4, koji su opisani u objavi PCT prijave WO 07/005874. Druga anti-PD-L1 antitela obuhvataju, npr., MPDL3280A (RG7446) (WO2010/077634), MEDI4736 (WO2011/066389), i MDX1105 (WO2007/005874). Anti-PD-L1 antitelo može da se veže za humani PD-L1 sa KDod 5 x 10<-8>M ili manje, da se veže za humani PD-L1 sa KDod 1 x 10<-8>M ili manje, da se veže za humani PD-L1 sa KDod 5 x 10<-9>M ili manje, ili da se veže za humani PD-L1 sa KDizmeđu 1 x 10<-8>M i 1 x 10<-10>M ili manje.
[0175] Blokada LAG-3 i jednog ili više drugig ciljnih antigena kao što je CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 pomoću antitela koja poboljšavaju imunski odgovor na kancerske ćelije kod pacijenta. Kanceri čiji rast može biti inhibiran korišćenjem antitela trenutne objave obuhvataju kancere koji tipično odgovaraju na imunoterapiju. Reprezentativni primeri kancera za lečenje sa kombinovanom terapijom trenutne objave obuhvataju one kancere koji su specifično navedeni iznad u razmatranju monoterapije sa anti-LAG-3 antitelima.
[0176] Kombinacija terapijskih antitela razmotrena ovde može biti administrirana istovremeno sa pojedinačnom kompozicijom u farmaceutski prihvatljivom nosaču, ili istovremeno kao odvojene kompozicije sa svakim antitelom u farmaceutski prihvatljivom nosaču. Dalje, kombinacija terapijskih antitela može biti administrirana sekvencijalno. Na primer, anti-CTLA-4 antitelo i anti-LAG-3 antitelo mogu biti administrirani sekvencijalno, tako što se anti-CTLA-4 antitelo administrira prvo i anti-LAG-3 antitelo drugo, ili anti-LAG-3 antitelo se administrira prvo i anti-CTLA-4 antitelo drugo. Dodatno ili alternativno, anti-PD-1 antitelo i anti-LAG-3 antitelo mogu biti administrirani sekvencijalno, tako što se anti-PD-1 antitelo administrira prvo i anti-LAG-3 antitelo drugo, ili anti-LAG-3 antitelo se administrira prvo i anti-PD-1 antitelo drugo. Dodatno ili alternativno, anti-PD-L1 antitelo i anti-LAG-3 antitelo mogu biti administrirani sekvencijalno, tako što je anti-PD-L1 antitelo administrirano prvo i anti-LAG-3 antitelo drugo, ili anti-LAG-3 antitelo se administrira prvo i anti-PD-L1 antitelo drugo. Prema traženom pronalasku, anti-LAG-3 antitelo i anti-PD-1 antitelo se administriraju istovremeno kao jedna kompozicija u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
[0177] Pored toga, ako je više od jedne doze kombinovane terapije administrirano sekvencijalno, redosled sekvencijalne administracije može biti obrnut ili zadržan po istom redosledu na svakoj tački administracije, sekvencijalne administracije mogu biti kombinovane sa istovremenim administracijama, ili bilo koja kombinacija istih. Na primer, prva administracija kombinacije anti-CTLA-4 antitela i anti-LAG-3 antitela može biti istovremena, druga administracija može biti sekvencijalna sa anti-CTLA-4 prvim i anti-LAG-3 drugim, i treća administracija može biti sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-CTLA-4 drugim, itd. Dodatno ili alternativno, prva administracija kombinacije anti-PD-1 antitela i anti-LAG-3 antitela može biti istovremena, druga administracija može biti sekvencijalna sa anti-PD-1 prvim i anti-LAG-3 drugim, i treća administracija može biti sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-PD-1 drugim, itd. Dodatno ili alternativno, prva administracija kombinacije anti-PD-L1 antitela i anti-LAG-3 antitela može biti istovremena, druga administracija može biti sekvencijalna sa anti-PD-L1 prvim i anti-LAG-3 drugim, i treća administracija može biti sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-PD-L1 drugim, itd. Druga reprezentativna shema doziranja može da uključi prvu administracija koja je sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-CTLA-4 (i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1) drugim, i sledeće administracije mogu biti istovremene.
[0178] Opciono, kombinacija anti-LAG-3 i jednog ili više dodatnih antitela antitela (npr., anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela) može biti dalje kombinovana sa imunogenskim agensom, kao što su kancerske ćelije, prečišćeni tumorski antigeni (uključujući rekombinantne proteine, peptide, i ugljenohidratne molekule), ćelije, i ćelije transfektovane sa genima koji kodiraju imuno stimulatorne citokine (He i sar. (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Neograničavajući primeri vakcina protiv tumora koje mogu biti korišćene obuhvataju peptide melanomskih antigena, kao što su peptidi gp100, MAGE antigena, Trp-2, MART1 i/ili tirozinaza, ili tumorske ćelije transfektovane da eksprimiraju citokin GM-CSF (razmotreno dodatno ispod). Kombinovana LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada može biti dalje kombinovana sa protokolom vakcinacije, kao što je bilo koji od protokola vakcinacije koji je razmotren detaljno iznad u odnosu na monoteraiju sa anti-LAG-3 antitelima.
[0179] Kombinovani LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada mogu takođe dalje biti kombinovani sa standardnim tretmanima za kancer. Na primer, kombinovan LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada mogu biti efikasno kombinovani sa hemoterapijskim režimima. U ovim slučajevima, moguće je smanjiti dozu drugog hemoterapijskog reagesna koji je administriran sa kombinacijom trenutne objave (Mokyr i sar. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Kao primer takve kombinacije je kombinacija anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 antitela i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela dalje u kombinaciji sa dekarbazinom za lečenje melanoma. Drugi primer je kombinacija anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 antitela i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-LI antitela dalje u kombinaciji sa interleukinom-2 (IL-2) za lečenje melanoma. Naučno obrazloženje koje stoji iza kombinovane primene LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade sa hemoterapijom je da ćelijska smrt, koja je posledica citotoksičnog delovanja većine hemoterapijskih jedinjenja, treba da rezultuje povećanim nivoima tumorskog antigena u putu prezentacije antigena. Druge kombinovane terapije koje mogu da rezultuju u sinergiji sa kombinovanim LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokadom kroz ćelijsku smrt obuhvataju zračenje, operaciju, ili hormonsku deprivaciju. Svaki od ovih protokola stvara izvor tumorskog antigena u domaćinu. Inhibitori angiogeneze takođe mogu biti kombinovani sa kombinovanim LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokadom. Inhibicija angiogeneze dovodi do smrti tumorskih ćelija, koja može biti izvor tumorskog antigena koji se unosi u puteve prezentacije antigena domaćina.
[0180] Kombinacija LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokirajućih antitela može takođe biti primenjena u kombinaciji sa bispecifičnim antitelima koja ciljaju Fcα ili Fcy receptor-eksprimirajuće efektorske ćelije na tumorskim ćelijama (videti, npr., američke patente br. 5,922,845 i 5,837,243). Bispecifična antitela mogu biti korišćena da ciljaju dva odvojena antigena. Količina T ćelije u ovim odgovorima bi mogla biti uvećana primenom kombinovanog LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade.
[0181] U još jednom primeru, kombinacija anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela može biti korišćena u sponi sa antineoplastičnim antitelima, kao što je Rituxan<®>(rituksimab), Herceptin<®>(trastuzumab), Bexxar<®>(tositumomab), Zevalin<®>(ibritumomab), Campath<®>(alemtuzumab), Lymphocide<®>(eprtuzumab), Avastin<®>(bevacizumab), i Tarceva<®>(erlotinib), i slično. Putem primera i bez želje da se bude vezan za teoriju, lečenje sa antikancerskim antitelom ili antikancerskim antitelom koje je konjugovano za toksin može voditi ka smrti kancerskih ćelija (npr., tumorskih ćelija) koje bi potencirale imunski odgovor posredovan od strane CTLA-4, PD-1, PD-L1 ili LAG-3. Kao primer, lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancerski tumor) može da obuhvata antikancersko antitelo u kombinaciji sa anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitelom, istovremeno ili sekvencijalno ili bilo koju njihovu kombinaciju, koja bi potencirala anitumorske imunske odgovore od strane domaćina.
[0182] Tumori izbegavaju imunološki nadzor domaćina velikim brojem mehanizama. Mnogi od ovih mehanizama mogu biti prevaziđeni inaktivacijom proteina, koji su eksprimirani od strane tumora i koji su imunosupresivni. Ovi obuhvataju, između ostalih, TGF-β (Kehrl i sar. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard & O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), i Fas ligand (Hahne i sar. (1996) Science 274: 1363-1365). U još jednom primeru, antitela za svaki od ovih entiteta mogu biti dalje kombinovana sa kombinacijom anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela da bi se poništili efekte imunosupresivnih sredstava, i favorizovali antitumorski imunski odgovori od strane domaćina.
[0183] Druga antitela koja se mogu koristiti za aktiviranje imunološkog odgovora domaćina mogu se dalje koristiti u kombinaciji sa kombinacijom anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela. Ovi obuhvataju molekule na površini dendritske ćelije koji aktiviraju DC funkciju i antigen prezentaciju. Anti-CD40 antitela (Ridge i sar., gore) mogu biti korišćena u sprezi sa anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 kombinacijom (Ito i sar., gore). Druga aktivirajuća antitela za T ćeljske kostimulatorne molekule Weinberg i sar., gore, Melero i sar. gore, Hutloff i sar., gore) mogu takođe obezbediti povećane nivoe aktivacije T ćelija.
[0184] Kao što je razmotreno iznad, transplantacija koštane srži se trenutno koristi za lečenje različitih tumora hematopoetskog porekla. Kombinovani LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada mogu biti korišćeni da povećaju efikasnost donorskih nakalemljenih tumor specifičnih T ćelija.
[0185] Nekoliko protokola eksperimentalnog lečenja uključuje ex vivo aktivaciju i ekspanziju antigen specifičnih T ćelija i adoptivni transfer ovih ćelija u primaoce radi antigen-specifičnih T ćelija protiv tumora (Greenberg & Riddell, gore). Ove metode se takođe mogu koristiti za aktiviranje odgovora T ćelija na infektivne agense kao što je CMV. Aktivacija ex vivo u prisustvu anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela može se očekivati da poveća učestalost i aktivnost T ćelija koje su prenešene adoptivnim transferom.
[0186] Dalje, ovde je opisana metoda za izmenu neželjenih događaja povezanih sa lečenjem hiperproliferativne bolesti (npr., kancera) sa imunostimulatornim agensom da sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela subjektu. Na primer, metode koje su ovde opisane obezbeđuju metodu smanjivanja incidence kolitisa indukovanog imunostimulatornim terapijskim antitelom ili dijareje od strane administriranja ne-apsorbujućeg steroida pacijentu. S obzirom da će svaki pacijent koji će dobiti imunostimulatorno terapijsko antitelo biti pod rizikom za razvoj kolitisa ili dijareje izazvane takvim antitelom, ova cela populacija pacijenata je pogodna za terapiju u skladu sa predmetnim pronalaskom. Iako su steroidi administrirani za lečenje inflamatorne bolesti creva (IBD) i sprečavaju pogoršanje IBD-a, oni nisu korišćeni za sprečavanje (smanjenje incidence) IBD-a kod pacijenata kod kojih nije dijagnostikovana IBD. Značajni neželjeni efekti povezani sa steroidima, čak i ne-apsorbujući steroidi, obeshrabruju profilaktičku upotrebu.
[0187] Dalje, kombinacija LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade (tj., imunostimulatorna terapijska antitela anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela) može biti dalje kombinovana sa primenom bilo kog ne-apsorbujućeg steroida. Kao što je ovde korišćeno, "ne-apsorbujući steroid" je glukokortikoid koji ispoljava obimni metabolizam prvog prolaza tako da je, nakon metabolizma u jetri, biodostupnost steroida niska, tj., manja od oko 20%. Ne-apsorbujući steroid može biti budesonid. Budesonid je glukokortikosteroid koji deluje lokalno, koji je u velikoj meri metabolisan, primarno od strane jetre, nakon oralne administracije. ENTOCORT EC<®>(Astra-Zeneca) je oralna formulacija budesonida zavisna od pH i vremena razvijena da se optimizuje isporučivanje laka u ileum i kroz debelo crevo. ENTOCORT EC<®>je odobren u SAD za lečenje blage do umerene Kronove bolesti uključujući ileum i uzlazno crevo. Uobičajena oralna doza ENTOCORT EC<®>za lečenje Kronove bolesti je 6 do 9 mg/dan. ENTOCORT EC<®>je oslobođen u crevima pre nego što se apsorbuje i zadrži u sluznici creva. Jednom kada prođe kroz ciljno tkivo sluznice creva, ENTOCORT EC<®>je u velikoj meri metabolisan od strane citohrom P450 sistema u jetri do metabolita sa zanemarljivom glukokortikoidnom aktivnošću. Stoga, bioraspoloživost je niska (oko 10%). Mala biodostupnost budesonida dovodi do poboljšanog terapijskog odnosa u poređenju sa drugim glukokortikoidima sa manje obimnim metabolizmom prvog prolaza. Budesonid ima manje štetnih efekata, uključujući manju supresiju hipotalamus-hipofize, nego sistemski delujući kortikosteroidi. Međutim, hronična administracija ENTOCORT EC® može dovesti do sistemskih glukokortikoidnih efekata kao što je hiperkorticizam i adrenalna supresija. Videti PDR 58. Izdanje 2004; 608-610.
[0188] Još dalje, kombinacija LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade (tj., imunostimulatorna terapijska antitela anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela) u vezi sa ne-apsorbujućim steroidom može dalje biti kombinovana sa salicilatom.S alicilati obuhvataju 5-ASA agense kao što su, na primer: sulfasalazin (AZULFIDINE<®>, Pharmacia & UpJohn); olsalazin (DIPENTUM<®>, Pharmacia & UpJohn); balsalazid (COLAZAL<®>, Salix Farmaceutskes, Inc.); i mesalamin (ASACOL<®>, Procter & Gamble Farmaceutskes; PENTASA<®>, Shire US; CANASA<®>, Axcan Scandipharm, Inc.; ROWASA<®>, Solvay).
[0189] U skladu sa metodama koje su ovde opisane, salicilat administriran u kombinaciji sa anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitelima i ne-apsorbujućim steroidom mogu da uključe bilo koju istovremenu ili sekvencijalnu administraciju salicilata i ne-apsorbujućeg steroida u svrhu smanjenja incidence kolitisa koji je indukovan uz pomoć imunostimulatornih antitela. Prema tome, na primer, metode za smanjenje incidence kolitisa koji je indukovan imunostimulatornim antitelima obuhvataju administriranje salicilata i neapsorbujućeg istovremeno ili sekvencijalno (npr., salicilat je administriran 6 sati nakon neapsorbujućeg steroida), ili bilo koju njihovu kombinaciju. Dalje, u skladu sa predmetnim pronalaskom, salicilat i ne-apsorbujući steroid mogu biti administrirani istim putem (npr., oba su administrirana oralno) ili različitim putevima (npr., salicilat je administriran oralno i neapsorbujući steroid je administriran rektalno), koji mogu da se razliku od puta(puteva) koji su korišćeni za administraciju anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela.
[0190] Predmetna objava je dalje ilustrovana pomoću primera koji slede, koje ne bi trebalo tumačiti kao dodatno ograničavajuće.
Primeri
Primer 1: Dizajn varijanti LAG3.1 (antitelo 25F7)
[0191] Varijante antitela prethodno opisanog anti-LAG-3 antitela, 25F7, koje se ovde nazivaju LAG3.1, su stvorene prvim analiziranjem aminokiselinske sekvence antitela za potencijalna mesta degradacije. Ekspresija usmerene mutageneze LAG3.1 VHregiona izvršeno je korišćenjem kompleta - QuikChange II XL® Site-Directed Mutagenesis Kit (Agilent Technologies). Izmenjeni VHregioni su zatim subklonirani u UCOE® (EMD Millipore) vektore koji sadrže konstantni region humanog IgG4-S228P. Različiti vektori teškog lanca su svaki ko-transfektovan sa vektorom koji eksprimira LAG3.1 kapa lanac u CHO-S ćelije, i stabilni pulovi su odabrani za ekspresiju.
[0192] Pet potencijalnih motiva deamidacije su identifikovani u sklopu varijabilnog regiona teškog lanca CDR2. Ova mesta su locirana na položajima 52, 54, 56, 58, i 60 varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.1 (SEQ ID NO: 2) (videti Sliku 1A). Naročito, deamidacija "NG" sekvence u sklopu VH CDR2 (SEQ ID NO: 6) je opažena u svim uslovima, kao i za dalju izomerizaciju sekvence. Deamidacija početnog materijala je oko 10%. Dalje, pronađeno je da ova "NG" sekvenca ne odgovara germitaivnoj sekvenci (videti Sliku 3). Međutim, konsenzus sekvenca germinativne linije je potencijalno mesto glikozilacije i stoga, nije obuhvaćena među varijantama antitela.
[0193] Dizajnirane su četiri varijante (nazvane ovde kao LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8) koje upućuju na dva potencijalna motiva deamidacije (položaji 54 i 56), kao što je prikazano na Slici 3. Ove varijante su podvrgnute matriksu u uslovima kao što je sumarizovano u Tabeli 1 ispod i sledeće karakteristike su analizirane: (a) hemijske i termalne stabilnosti (fizička stabilnost); (b) ekskluziona hromatografija po veličini (agregacija); (c) Izoelektrični Fokusirajući gel (IEF) (heterogenost naelektrisanja); (d) aktivnost pomoću Biacore analize (vezivanje i funkcionalna aktivnost); i (e) mapiranje peptida masenom spektrometrijom (hemijske modifikacije / molekularna stabilnost).
Tabela 1
Primer 2: Karakterizacija LAG-3 varijanti
1. Vezivanje aktiviranih humanih CD4<+>T ćelija
[0194] Da bi se testirala sposobnost varijanti antitela da se vežu za nativni humani LAG-3 na površini aktiviranih humanih T ćelija, mononuklearne ćelije periferne krvi normalnog zdravog donora su stimulisane u pločama za tkivne kulture od 15 cm u gustini od 2x10e6 ćelija/mL, sa kombinacijom anti-CD3 (eBioscience, Cat #16-0037-85) i anti-CD28 (BD Bioscience, Cat # 555725) antitela prisutnih u rastvoru pri 5 µg/mL i 3 µg/mL, redom. Nakon tri dana stimulacije ćelije su sakupljene, isprane 1X sa 1x PFAE puferom (1x PBS 2% FBS, 0.02% natrijum azid, 2mM Na EDTA), i resuspendovane u 1x PFAE puferu za bojenje.
[0195] Za reakciju vezivanja, LAG3.1 varijante su serijski razblažene sa hladnim 1x PFAE puferom, zatim je 50 µl rastvora razblaženog antitela pomešano sa 50 µl Fitc-obeleženog anti-humanog CD4 (BD Bioscience, Cat # 555346) razblaženog 1:16 u 1x PFAE puferu. Za reakciju vezivanja, 100 µl ove smeše razblaženog antitela je dodato u 2 x 10<5>ćelija i smeša je inkubirana na 4°C tokom 30 minuta. Ćelije su zatim isprane dva puta sa 1x PFAE puferom.
1:200 razblaženje PE-obeleženog anti-humanog Fcy-specifičnog antitela (Jackson ImmunoResearch, Cat. # 109-116-170) je dodato i smeša je inkubirana tokom 30 minuta na 4°C, praćeno ispiranjem dva puta sa hladnim x PFAE puferom. Nakon finalnog ispiranja, 150 µl hladnog 1x PFAE je dodat u svaki rastvor i analiza vezivanja antitela je izvedena protočnom citometrijom pomoću FACSCanto protočnog citometra (BD Bioscience).
[0196] Rezultati analize protočnom citometrijom su sumarizovani na Slici 4A koja je grafik koji prikazuje EC50za vezivanje antitela za aktivirane humane CD4+ T ćelije. Slika 4B je grafik koji prikazuje vezivanje antitela za solubilni humani LAG-3/Fc antigen pomoću BIACORE. Kao što je pokazano, afiniteti vezivanja LAG3.5 i LAG3.8 su malo niži, u poređenju sa LAG3.1, dok su njihove “off-rate” konstante (konstante disocijacije) malo više u poređenju sa LAG3.1.
2. Fizička stabilnost
[0197] Termalna stabilnost i termalna denaturacija varijanti je testirana korišćenjem Microcal VP-DSC. Specifično, svaka varijnata je razblažena u PBS (Mediatech kat. broj 21-040-CV lot broj 21040139). Finalna koncentracija uzorka je 250 µg/mL nakon razblaživanja u PBS. Uzorak je skeniran do 74°C, ohlađen do 25°C, i ponovo zagejan do 74°C. PBS pufer je korišćen kao “blank” kontrola. Podaci su fitovani u “Non-2-state” modelu i fitovanje krive je izvedeno pomoću Origin softvera.
[0198] Kao što je sumarizovano u Tabeli 2 i pokazano na Slici 5, LAG3.5 je imao višu temperaturu topljenja TM2 nego LAG3.1, ukazujući na veću opštu stabilnost.
Tabela 2
[0199] Ponovno savijanje antitela nakon denaturacije je inverzna mera potencijala dugotrajne agregacije. Shodno tome, varijante LAG-3 su takođe testirane i upoređene u pogledu termalne reverzibilnosti. Specifično, antitela su zagrejana na 74°C i ohlađena do sobne temperature pre nego što su ponovo zagrejana na 74°C. Odnos površine ispod krive drugog i prvog termograma daje procenu termalne reverzibilnosti, koja je direktna mera konformacione reverzibilnost.
[0200] Kao što je sumarizovano u Tabeli 3 i pokazano na Slici 6, LAG3.5 je imao suštinski višu termalnu reverzibilnost od svih drugih varijanti. Primetno, procentualna reverzibilnost za LAG3.5 (47%) je više nego udvostručena od one za LAG3.1 (20%). Termalna reverzibilnost je snažno korelisana sa dugoročnim potencijalom agregacije. Niža reverzibilnost odgovara većoj potencijalnoj agregaciji. Na osnovu ovog zapažanja, LAG3.1 bi potencijalno pokazao suštinski veću agregaciju tokom vremena, u poređenju sa LAG3.5. Slično tome, sve druge varijante mogu potencijalno pokazati suštinski veću agregaciju tokom vremena u poređenju sa LAG3.5
Tabela 3
3. Agregacija
[0201] Varijante su takođe testirane na stabilnost kao mera proteinske agregacije korišćenjem standardne ekskluzione HPLC po veličini (SEC-HPLC) prema sledećem protokolu: test uzorci antitela su razblaženi do 1.0 mg/ml sa rastvorom fosfatnog slanog pufera (PBS) i 10 uL je primenjeno na HPLC (Waters, model 2795). Separacija je postignuta na filtracionoj koloni sa gelom (TOSOH Bioscience, TSKgel G3000 SWxl, 7,8mm x 300mm, proizvod # 08541) korišćenjem mobilne faze od 0.1M natrijum fosfata, 0.15M natrijum hlorida, 0.1M natrijum sulfata, pH 7.2. Analit je detektovan praćenjem UV apsorbance na 280nm, a procenta površine pika kompozicije antitela je određen korišćenjem Empower softvera. Kao što je pokazano u Tabeli 4, LAG3.5 je pokazao suštinski smanjenu agregaciju u poređenju sa LAG3.1.
Tabela 4
Uzorak IgG Monomer (% površine pika) IgG Agregat (% površine pika)
Primer 3: Selekcija varijanti
[0202] Na osnovu gore opisanih studija, varijanta antitela LAG3.5 je izabrana za dalju analizu, s obzirom na njegovu značajno poboljšanu fizičku i hemijsku stabilnost u poređenju sa njegovim nemodifikovanim oblikom(LAG3.1), naročito njegovim visokim kapacitetom za konformaciono savijanje (termalna reverzibilnost). Ova analiza uključuje dvostepeni pristup (a) ubrzanog stresa, (b) praćeno procenom stabilnosti u realnom vremenu od 12 nedelja. Specifično, LAG3.5 je inkubiran na 1.0 mg/ml u pH 8.0, 50 mM amonijum bikarbonatu, tokom 5 dana na 40C°. Analiziran je stepen modifikacije nakon 5 dana, kao i efekti na aktivnost i stabilnost. LAG3.5 varijanta je zatim podvrgnuta stvarnoj stabilnosti PBS u trajanju od 12 nedelja i kasnije analizirana. Rezultati ovih studija su opisani ispod.
1. Vezivanje antigena
[0203] Kao što je pokazano na Slici 7 (i Tabeli 5), nije primećena promena u vezivanju antigena nakon 5 dana. Kao što je takođe prikazano na Slikama 10 A i B, LAG3.5 je pokazao da nema promene u vezivanju antigena ili fizičkoj stabilnosti nakon 12 nedelja. Naročito, LAG3.5 održava viši afinitet nego LAG3.8 tokom celog perioda od 12 nedelja i na 4°C i na 40°C.
Tabela 5
2. Hemijske modifikacije/molekularna stabilnost
[0204] Peptidno mapiranje masenom spektometrijom je korišćeno da se analizira hemijska / molekularna stabilnost LAG3.5 u poređenju sa LAG3.1. Specifično, prečišćeno antitelo je redukovano, alkilovano, dializirano, i digerirano sa tripsinom (Promega Cat. V5111) i GluC (Roche Cat. 11047817001). Digerirani produkti su analizirani nano-LC MSMS masenom spektrometrijom (Thermo Fisher LTQ Orbitrap).
[0205] Kao što je prikazano na Slici 8, LAG3.1 je pokazao povećanu heterogenost u VHu poređenju sa LAG3.5 kada je podvrgnut ubrzanoj stabilnosti na višem pH, koja deamiduje asparaginske ostatke (korak 1). Promena u masi usled izomerizacije ne bi mogla da se detektuje u trenutnim eksperimentalnim uslovima. Procenat promene je izražen kao odnos svih promena kombinovanih sa osnovnim pikom.
[0206] Dodatno, kao što je prikazano na Slici 11, LAG3.1 je pokazao povećanu heterogenost u VHu poređenju sa LAG3.5 kada je podvrgnut produženoj stabilnosti u stvarnom vremenu od 12 nedelja, i na 4°C i na 40°C (korak 2).
3. Fizička stabilnost
[0207] Termalna reverzibilnost je izmerena u PBS i na pH 8.0. U oba uslova, LAG3.5 je ponovo ispoljio približno dvostruki nivo ponovnog sklapanja u poređenju sa LAG3.1. Specifično, kao što je prikazano u Tabelama 6-8, LAG3.5 je pokazao 43% ponovnog sklapanja u poređenju sa 18% za LAG3.1 u PBS. LAG3.5 takođe je pokazao 48% ponovnog sklapanja u poređenju sa 29% ponovnog sklapanja za LAG3.1 na pH 8.0.
Tabela 6 - DSC:topljenje
Tabela 7 - Fluorolog-2:razmotavanje
Tabela 8: DSC:ponovno sklapanje
4. Heterogenost naelektrisanja
[0208] Da bi se procenila heterogenost naelektrisanja, varijante su analizirane korišćenjem izoelektrofokusiranja (IEF) sa standardnim markerima od pI 5.5 i pI 10.0 u poređenju sa LAG3.1. Ukratko, rastvori antitela su primenjeni na 1 mm debljine IEF pI 3-7 unapred napravljen gel (Invitrogen, Cat# EC6648BOX) uporedo sa pI 3-10 markerima (SERVA, Cat# 39212). Elektroforeza je izvedena korišćenjem IEF 3-7 katodonog pufera (Invitrogen, Cat# LC5370) i IEF anodnog pufera (Invitrogen, Cat# LC5300) i primenom električne struje po redosledu od 100 V konstantno tokom 1 h, 200 V konstantno tokom 1h, i 500 V konstantno tokom 30 min. IEF gelovi su bojeni sa Coomassie plavim da se detektuju proteinske trake i obezbojeni sa rastvorom metanol-sirćetne kiseline. IEF gelovi su zatim analizirani pomoću ImageQuant TL softvera. Na osnovu ovih analiza (podaci nisu prikazani), LAG3.5 je pokazao značajno manju heterogenost u poređenju sa LAG3.1.
5. HIC-HPLC
[0209] Da bi se procenila rastvorljivost, varijnate su analizirane korišćenjem standardne hromatografije hidrofobnih interakcija (HIC-HPLC) u skladu sa sledećim protokolom: 50 uL 2M amonijum sulfata je dodato do 50 uL test uzorka antitela pri 1 mg/ml. 80 uL test uzorka je zatim primenjeno na HPLC (Waters, model 2795) povezanog u redu na HIC koloni (TOSOH Bioscience, Etar-5PW TSK-gel, 7.5mm x 75mm, proizvod br. 07573). Uzorak je eluiran pri brzini protoka od 1.0 ml/min sa gradijentom od 100% pufera A (2M amonijum sulfat, 0.1M natrijum fosfat, pH 7.0) do 100% pufera B (0.1M natrijum fosfat, pH 7.0) tokom 50 minuta. Antitelo je detektovano praćenjem UV apsorbance na 280nm i podaci su analizirani korišćenjem Empower softvera. Kao što je pokazano na Slici 9, hidrofilnost LAG3.5 je pokazala rastvorljivost pri visokim koncentracijama amonijum sulfata.
Primer 4: Preokret inhibicije imunskog odgovora koji je posredovan T-ćelijama
[0210] Aktivnost LAG3.5 je određena pomoću funkcionalnog testa koji je koristio antigenspecifični mišiji T ćelijki hibrid (3A9). Hibridom 3A9 eksprimuje T ćelijski receptor specifičan za peptid iz lizozima kokošijeg jajeta (HEL48-62) i luči IL-2 kada se kultiviše sa peptidnim pulsirajućim, MHC-podudarnim ćelijama koje predstavljaju antigen (LK35.2). Pošto je huLAG-3-Fc sposoban da se vezuje za MHC klase II-pozitivne mišije B ćelijske linije, ekspresija huLAG-3 u liniji 3A9 mogla bi imati inhibitorni efekat kroz angažovanje sa klasom II na liniji predstavljanja miša. Poređenje profila peptidnog odgovora roditeljskog 3A9 sa profilom humanih LAG-3-transdukovanih 3A9 ćelija koje su kultivisane sa MHC-podudarnim antigen prezentujućim ćelijama, pokazalo je da ekspresija humanog LAG-3 inhibira odziv na peptide u poređenju sa kontrolnim ćelijama 3A9. Ova inhibicija je preokrenuta LAG-3 blokadom primenom LAG3.5. Stoga je za LAG3.5 pokazana blokada inhibicije posredovane sa LAG-3.
Primer 5: Aktivacija T-ćelija pomoću LAG3.5
[0211] Funkcionalna aktivnost LAG3.5 na primarnim T ćelijama je procenjena korišćenjem humanih PBMC kultura stimulisanih superantigenom SEB. Ukupni PBMC su izolovani iz krvi osamnaest humanih donora i stimulisani tokom 72 sata u bilo kom od dva formata testa: (i) fiksna količina antitela (20 µg/mL) i serijska razblaženja SEB, ili (ii) fiksna količina SEB (85 ng/mL) i serijska razblaženja antitela. Sekretovan IL-2, kao mera aktivnosti T ćelija, praćen je ELISA testom. Antitelo na anti-PD-1 antitelo i ipilimumab su korišćeni kao pozitivne kontrole, i aktivnost LAG3.5 u kombinaciji sa anti-PD-1 ili anti-CTLA-4 takođe je procenjena za podgrupu donora antitela.
[0212] Poboljšana sekrecija IL-2 je opažena u opsegu SEB koncentracija od 15 do 18 donora tretiranih sa samo LAG3.5, u poređenju sa tretmanom izotipskim kontrolnim antitelom. U većini slučajeva stimulacija je manja nego što je opaženo za lečenje sa anti-PD-1 ili Ipilimumabom. Uzimajući u obzir LAG3.5, rezultati dva formata eseja (opisani iznad) se slažu jedan sa drugim. Pored toga, kod 5 od 6 testiranih donora, kombinovanje LAG3.5 sa anti-PD-1 ili Ipilimumabom dovelo je do viših nivoa stimulacije nego što je opaženo za izotipsko kontorlno antitelo kombinovano sa anti-PD-1 ili Ipilimumabom. Ovi podaci otkrili su da LAG3.5 može da fukcioniše u esejima na normalnim humanim T ćelijama i može dalje da aktivira odgovore posredovane inhibicijom PD-1 i CTLA-4 funkcije.
SAŽETAK LISTE SEKVENCI
0213
VHn.a. LAG3.5
VHa.a. LAG3.5
VKn.a. LAG3.5
VKa.a. LAG3.5
human LAG-3 a.a. sequence
LAG3.1HC
TRANSLATION\OF\LAG3.1HC
LAG3.1LC
TRANSLATION\OF\LAG3.1LC
LAG3.5 heavy chain sequence – complete
LAG3.5 heavy chain sequence – complete
LAG3.5 kappa chain sequence – Complete
LAG3.5 - kappa chain sequence – Complete

Claims (21)

Patentni zahtevi
1. Pojedinačna kompozicija koja sadrži:
(a) monoklonsko antitelo, ili njegov deo koji se vezuje za antigen, koji se vezuje za gen za aktivaciju humanih limfocita-3 (LAG-3),
(b) anti-PD-1 antitelo, ili negov deo koji se vezuje za antigen, i
(c) farmaceutski prihvatljiv nosač;
pri čemu monoklonsko antitelo, ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3, sadrži CDR1, CDR2 i CDR3 regione teškog lanca koji sadrže aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 15, 16 i 17, respektivno, i CDR1, CDR2 i CDR3 regione lakog lanca koji sadrže aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 18, 19 i 20, respektivno.
2. Pojedinačna kompozicija prema patentnom zahtevu 1, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 sadrži varijabilne regione teškog i lakog lanca koji sadrže aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 12 i 14, respektivno.
3. Pojedinačna kompozicija prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 pokazuje jedno ili kombinaciju sledećih svojstava:
(a) vezivanje za LAG-3 majmuna;
(b) nedostatak vezivanja za mišiji LAG-3;
(c) inhibicija vezivanja LAG-3 za molekule klase II glavne histokompatibilnosti (MHC); ili
(d) stimulacija imunskog odgovora.
4. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 stimuliše proizvodnju interleukina-2 (IL-2) u antigen-specifičnom T ćelijskom odgovoru i/ili stimuliše antitumorski imunski odgovor.
5. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 je antitelo pune dužine i/ili anti-PD-1 antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen je antitelo pune dužine.
6. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 je izotip IgG1, IgG2 ili IgG4 i/ili anti-PD-1 antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen je izotip IgG1, IgG2 ili IgG4.
7. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-6, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 je humano antitelo IgG4 pune dužine koje se vezuje za humani LAG-3 sa KDod 0.27 × 10<-9>M ili manje, što je određeno površinskom plazmonskom rezonancom.
8. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, pri čemu monoklonsko antitelo koje se vezuje za humani LAG-3 sadrži teške i lake lance koji sadrže aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 35 i 37, respektivno.
9. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 je fragment antitela ili jednolančano antitelo i/ili anti-PD-1 antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen je fragment antitela ili jednolančano antitelo.
10. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-9, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 je humano, humanizovano, ili himerno antitelo, i anti-PD-1 antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen je humano, humanizovano, ili himerno antitelo.
11. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-10, pri čemu monoklonsko antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen koji se vezuje za humani LAG-3 i anti-PD-1 antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen su monoklonska antitela humane sekvence.
12. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-11, pri čemu anti-PD-1 antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen varijabilne regione teškog i lakog lanca 5C4.
13. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, koja je pogodna za intravensku administraciju.
14. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13, za primenu u postupku stimulisanja imunskog odgovora kod subjekta.
15. Pojedinačna kompozicija za primenu prema patentnom zahtevu 14, pri čemu subjekat je subjekat koji nosi tumor i imunski odgovor protiv tumora je stimulisan.
16. Pojedinačna kompozicija za primenu prema patentnom zahtevu 14, pri čemu imunski odgovor je antigen-specifičan T-ćelijski odgovor, tako da je antigen-specifičan T-ćelijski odgovor stimulisan.
17. Pojedinačna kompozicija za primenu prema patentnom zahtevu 16, pri čemu je proizvodnja interleukina-2 stimulisana od strane antigen-specifičnih T ćelija.
18. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13, za primenu u postupku za inhibiciju rasta tumorskih ćelija kod subjekta.
19. Pojedinačna kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13, za primenu u postupku za lečenje kancera kod subjekta.
20. Pojedinačna kompozicija za primenu prema patentnom zahtevu 19, pri čemu kancer je melanom, metastatski maligni melanom, kancer bubrega, karcinom bistrih ćelija, kancer prostate, hormon refraktorni adenokarcinom prostate, kancer dojke, kancer debelog creva, kancer pluća, ili nesitnoćelijski kancer pluća.
21. Pojedinačna kompozicija za primenu prema patentnom zahtevu 19 ili 20, pri čemu kancer je refraktorni ili rekurentni malignitet, ili metastatski kancer.
RS20241076A 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene RS65997B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261667058P 2012-07-02 2012-07-02
EP20192145.9A EP3795592B1 (en) 2012-07-02 2013-07-02 Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS65997B1 true RS65997B1 (sr) 2024-10-31

Family

ID=48795938

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20241076A RS65997B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene
RS20201404A RS61084B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene
RS20170932A RS56398B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija humanih antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20201404A RS61084B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene
RS20170932A RS56398B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija humanih antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene

Country Status (39)

Country Link
US (7) US9505839B2 (sr)
EP (4) EP3795592B1 (sr)
JP (6) JP6320376B2 (sr)
KR (6) KR20230159625A (sr)
CN (2) CN108101991B (sr)
AR (3) AR091649A1 (sr)
AU (5) AU2013286914B2 (sr)
BR (1) BR112014032999B1 (sr)
CA (2) CA2877746C (sr)
CL (1) CL2014003637A1 (sr)
CO (1) CO7170127A2 (sr)
CY (3) CY1119563T1 (sr)
DK (3) DK3275899T3 (sr)
EA (2) EA202090227A1 (sr)
ES (3) ES2638545T3 (sr)
FI (2) FI3795592T3 (sr)
FR (1) FR22C1057I2 (sr)
HR (3) HRP20241357T1 (sr)
HU (4) HUE034553T2 (sr)
IL (1) IL236517B (sr)
LT (4) LT3275899T (sr)
LU (1) LUC00286I2 (sr)
MX (2) MX365417B (sr)
MY (3) MY169383A (sr)
NL (1) NL301205I2 (sr)
NO (2) NO2023008I1 (sr)
NZ (1) NZ628528A (sr)
PE (4) PE20241623A1 (sr)
PH (2) PH12021552200A1 (sr)
PL (2) PL2867258T3 (sr)
PT (3) PT3275899T (sr)
RS (3) RS65997B1 (sr)
SG (2) SG11201408780XA (sr)
SI (3) SI3275899T1 (sr)
SM (3) SMT202000628T1 (sr)
TN (1) TN2014000536A1 (sr)
TW (8) TWI617581B (sr)
UY (1) UY34887A (sr)
WO (1) WO2014008218A1 (sr)

Families Citing this family (591)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103059138B (zh) * 2005-05-09 2015-10-28 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
WO2007005874A2 (en) * 2005-07-01 2007-01-11 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
HRP20150965T1 (hr) 2009-03-25 2015-11-06 Genentech, Inc. Anti-fgr3 protutijela i metode koje ih koriste
ES2671748T3 (es) 2011-07-21 2018-06-08 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Inhibidores heterocíclicos de proteína quinasas
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
UA117466C2 (uk) 2012-12-13 2018-08-10 Мерк Шарп Енд Доме Корп. СТАБІЛЬНИЙ СКЛАД У ВИГЛЯДІ РОЗЧИНУ АНТИТІЛА ДО IL-23p19
WO2014140180A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Anti-lag-3 binding proteins
WO2014169078A2 (en) 2013-04-09 2014-10-16 Boston Biomedical, Inc. Methods for treating cancer
KR20160037989A (ko) * 2013-08-02 2016-04-06 아두로 바이오테크 홀딩스, 유럽 비.브이. 면역 자극을 위한 cd27 효능제와 면역 체크포인트 억제의 조합
PT3508502T (pt) * 2013-09-20 2023-06-22 Bristol Myers Squibb Co Combinação de anticorpos anti-lag-3 e anticorpos anti-pd-1 para tratar tumores
US10570204B2 (en) 2013-09-26 2020-02-25 The Medical College Of Wisconsin, Inc. Methods for treating hematologic cancers
WO2015066413A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Novartis Ag Oxazolidinone hydroxamic acid compounds for the treatment of bacterial infections
PE20160953A1 (es) 2013-12-12 2016-09-26 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Anticuerpo pd-1, fragmento de union al antigeno de este y uso medico de este
RS61479B1 (sr) 2013-12-24 2021-03-31 Bristol Myers Squibb Co Triciklično jedinjenje kao antikancerski agensi
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
TWI680138B (zh) * 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
US9683048B2 (en) 2014-01-24 2017-06-20 Novartis Ag Antibody molecules to PD-1 and uses thereof
DK3556775T3 (da) * 2014-01-28 2022-01-03 Bristol Myers Squibb Co Anti-lag-3 antistoffer til behandling af hæmatologiske maligniteter
ME03489B (me) 2014-01-31 2020-01-20 Novartis Ag Molekuli antitijela na tim-3 i njihove upotrebe
JP6747975B2 (ja) * 2014-01-31 2020-08-26 アイム・セラピューティクス・べー・フェー 安定な抗体を産生するための手段及び方法
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
NZ725006A (en) 2014-03-12 2019-11-29 Yeda Res & Dev Reducing systemic regulatory t cell levels or activity for treatment of disease and injury of the cns
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
JP6576962B2 (ja) 2014-03-14 2019-09-18 ノバルティス アーゲー Ｌａｇ−３に対する抗体分子およびその使用
PL3122745T3 (pl) 2014-03-24 2019-08-30 Novartis Ag Monobaktamowe związki organiczne do leczenia zakażeń bakteryjnych
CA2951259A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 Flexus Biosciences, Inc. Immunoregulatory agents
EP3151921B1 (en) 2014-06-06 2019-08-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof
US10092645B2 (en) * 2014-06-17 2018-10-09 Medimmune Limited Methods of treatment with antagonists against PD-1 and PD-L1 in combination with radiation therapy
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
JP2017523213A (ja) 2014-08-06 2017-08-17 ノバルティス アーゲー 抗菌薬としてのキノロン誘導体
JO3663B1 (ar) * 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
EP3191126B1 (en) 2014-09-13 2020-05-13 Novartis AG Combination therapies of alk inhibitors
KR20170066546A (ko) 2014-10-03 2017-06-14 노파르티스 아게 조합 요법
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
EP3206711B1 (en) 2014-10-14 2023-05-31 Novartis AG Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
SG11201702845QA (en) 2014-10-29 2017-05-30 Bicycle Therapeutics Ltd Bicyclic peptide ligands specific for mt1-mmp
UY36391A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido1), sus métodos de síntesis y composiciones farmacèuticas que las contienen
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
MX2017005462A (es) 2014-11-05 2017-07-28 Flexus Biosciences Inc Agentes inmunorreguladores.
KR102569813B1 (ko) 2014-11-21 2023-08-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Cd73에 대항한 항체 및 그의 용도
WO2016094639A1 (en) * 2014-12-10 2016-06-16 Wisconsin Alumni Research Foundation Mini-intronic plasmid dna vaccines in combination with lag3 blockade
SMT201900631T1 (it) 2014-12-16 2020-01-14 Novartis Ag Composti di acido isossazol idrossammico come inibitori di lpxc”
WO2016100882A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Novartis Ag Combination therapies
AR103232A1 (es) 2014-12-22 2017-04-26 Bristol Myers Squibb Co ANTAGONISTAS DE TGFbR
EA039219B1 (ru) 2014-12-23 2021-12-20 Бристол-Майерс Сквибб Компани Антитела к tigit
CA2974956A1 (en) * 2015-01-29 2016-08-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Checkpoint inhibitor and vaccine combinations and use of same for immunotherapy
HK1247861A1 (zh) 2015-01-30 2018-10-05 President And Fellows Of Harvard College 用於癌症治疗的肿瘤周围和肿瘤内部材料
MA41463A (fr) * 2015-02-03 2017-12-12 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre le gène d'activation 3 des lymphocytes (lag-3)
WO2016127052A1 (en) 2015-02-05 2016-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Cxcl11 and smica as predictive biomarkers for efficacy of anti-ctla4 immunotherapy
MX2017010595A (es) * 2015-02-19 2018-11-12 Bioclin Therapeutics Inc Métodos, composiciones, y equipos para tratamiento de cáncer.
AU2016226468B2 (en) 2015-03-02 2020-10-22 Bristol-Myers Squibb Company TGF-beta inhibitors
EP3268035A4 (en) 2015-03-10 2018-10-31 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene" -dependent signalling
MX2017012738A (es) 2015-04-03 2017-11-15 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores de indolamina 2.3-dioxigenasa (ido) para el tratamiento de cancer.
HUE053903T2 (hu) 2015-04-13 2021-07-28 Five Prime Therapeutics Inc Kombinációs terápia rák ellen
EA201792273A1 (ru) 2015-04-17 2018-04-30 Бристол-Маерс Сквибб Компани Композиции, содержащие комбинацию анти-pd-1 антитела и другого антитела
EP3294736B1 (en) 2015-05-11 2020-07-22 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US9725449B2 (en) 2015-05-12 2017-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
ES2770349T3 (es) 2015-05-12 2020-07-01 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de 5H-pirido[3,2-b]indol como agentes antineoplásicos
DK3298021T3 (da) 2015-05-18 2019-08-05 Tolero Pharmaceuticals Inc Alvocidib-prodrugs, der har øget biotilgængelighed
KR20190080992A (ko) 2015-05-21 2019-07-08 하푼 테라퓨틱스, 인크. 삼중특이성 결합 단백질 및 사용 방법
KR20230028478A (ko) 2015-05-29 2023-02-28 아게누스 인코포레이티드 항-ctla-4 항체 및 이의 사용 방법
JP6797137B2 (ja) 2015-05-29 2020-12-09 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｏｘ４０に対する抗体およびその使用
JP2018521979A (ja) 2015-06-03 2018-08-09 ボストン バイオメディカル， インコーポレイテッド 癌の治療に使用するための癌幹細胞性阻害剤および免疫療法剤を含む組成物
EA039293B1 (ru) * 2015-06-05 2021-12-30 Мерк Шарп И Доум Корп. Антитела против lag3 и антигенсвязывающие фрагменты
TWI773646B (zh) * 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
AU2016285920A1 (en) 2015-06-29 2018-02-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to CD40 with enhanced agonist activity
EP3322431A2 (en) 2015-07-16 2018-05-23 Biokine Therapeutics Ltd. Compositions and methods for treating cancer
US9902772B2 (en) 2015-07-22 2018-02-27 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody therapeutics that bind LAG3
CN108137597A (zh) 2015-07-28 2018-06-08 百时美施贵宝公司 TGFβ受体拮抗剂
EP3317301B1 (en) 2015-07-29 2021-04-07 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3
WO2017019897A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
WO2017019896A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
MA58293B1 (fr) * 2015-07-30 2024-11-29 Macrogenics, Inc. Molécules de liaison pd-1 et leurs procédés d'utilisation
KR20180042370A (ko) 2015-08-25 2018-04-25 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tgf 베타 수용체 길항제
PL3344654T3 (pl) 2015-09-02 2021-05-17 Immutep S.A.S. Przeciwciała anty-lag-3
MX390633B (es) 2015-09-14 2025-03-04 Infinity Pharmaceuticals Inc Formas solidas de derivados de isoquinolinona, proceso de fabricacion, composiciones que las contienen y metodos de uso de las mismas.
JP6952028B2 (ja) * 2015-09-29 2021-10-20 シャンハイ チャンジアン バイオテクノロジー カンパニー リミテッド Ｐｄ−１抗体およびその使用
MY192202A (en) 2015-10-02 2022-08-06 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specific for pd1 and tim3
TWI756187B (zh) * 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途
US10149887B2 (en) 2015-10-23 2018-12-11 Canbas Co., Ltd. Peptides and peptidomimetics in combination with t cell activating and/or checkpoint inhibiting agents for cancer treatment
CN108289951A (zh) * 2015-10-30 2018-07-17 豪夫迈·罗氏有限公司 抗-因子d抗体和缀合物
CR20180306A (es) 2015-11-02 2018-10-16 Five Prime Therapeutics Inc Polipéptidos del dominio extracelular de cd80 y su uso en el tratamiento del cáncer
CN108350416A (zh) 2015-11-09 2018-07-31 百时美施贵宝公司 操纵在cho细胞中产生的多肽的品质属性的方法
JP6945456B2 (ja) * 2015-11-13 2021-10-06 マクロジェニクス，インコーポレーテッド Ｌａｇ‐３結合分子及びその使用方法
KR102317574B1 (ko) 2015-11-18 2021-10-26 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Pd1 및/또는 lag3 결합제
BR112018010172A2 (pt) 2015-11-19 2018-11-21 Bristol Myers Squibb Co anticorpos contra receptor de fator de necrose de tumor induzido por glicocorticoide (gitr) e usos dos mesmos
PT3376857T (pt) 2015-11-20 2021-05-27 Regeneron Pharma Animais não humanos com um gene humanizado 3 de ativação de linfócitos
JP7349787B2 (ja) 2015-11-23 2023-09-25 ファイヴ プライム セラピューティクス インク 癌治療におけるｆｇｆｒ２阻害剤単独または免疫刺激剤との組み合わせ
CN108367069B (zh) 2015-12-14 2022-08-23 宏观基因有限公司 对于pd-1和ctla-4具有免疫反应性的双特异性分子及其使用方法
US10450318B2 (en) 2015-12-15 2019-10-22 Bristol-Myers Squibb Company CXCR4 receptor antagonists
US11045547B2 (en) 2015-12-16 2021-06-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-LAG3 antibodies and antigen-binding fragments
EP4424322A3 (en) 2015-12-17 2025-04-16 Novartis AG Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
US20170198040A1 (en) 2015-12-18 2017-07-13 Novartis Ag ANTIBODIES TARGETING CD32b AND METHODS OF USE THEREOF
HK1257518A1 (zh) 2016-01-11 2019-10-25 Novartis Ag 针对人白介素-2的免疫刺激性人源化单克隆抗体及其融合蛋白
US9845325B2 (en) 2016-02-19 2017-12-19 Novartis Ag Tetracyclic pyridone compounds as antivirals
CA3016534A1 (en) * 2016-03-04 2017-09-08 The Rockefeller University Antibodies to cd40 with enhanced agonist activity
US20190284293A1 (en) 2016-03-04 2019-09-19 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-cd73 antibodies
FI3433257T3 (fi) 2016-03-24 2024-01-08 Novartis Ag Alkynyylinukleosidianalogeja ihmisen rinoviruksen estäjinä
IL262359B (en) 2016-04-13 2022-09-01 Vivia Biotech Sl In vitro bite-activated T cells
AU2017252527A1 (en) 2016-04-18 2018-11-08 Celldex Therapeutics, Inc. Agonistic antibodies that bind human CD40 and uses thereof
WO2017192815A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US10696648B2 (en) 2016-05-04 2020-06-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2017192840A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
JP2019516687A (ja) 2016-05-04 2019-06-20 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ阻害剤およびその使用方法
WO2017192844A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
MA45029B1 (fr) * 2016-05-18 2021-03-31 Boehringer Ingelheim Int Anticorps anti pd-1 et anti-lag3 pour le traitement du cancer
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
EP3493844A4 (en) 2016-05-20 2021-03-24 Harpoon Therapeutics Inc. SINGLE DOMAIN SERUM ALBUMIN BINDING PROTEIN
KR102369735B1 (ko) 2016-05-20 2022-03-02 바이오하벤 파마슈티컬 홀딩 컴퍼니 엘티디. 암을 치료하기 위한 면역요법과의 글루타메이트 조정제의 용도
CN109715196A (zh) 2016-06-13 2019-05-03 转矩医疗股份有限公司 用于促进免疫细胞功能的组合物和方法
CN109311828A (zh) 2016-06-14 2019-02-05 诺华股份有限公司 作为抗菌剂的(r)-4-(5-(环丙基乙炔基)异噁唑-3-基)-n-羟基-2-甲基-2-(甲基磺酰基)丁酰胺的结晶形式
WO2017216686A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag 8,9-fused 2-oxo-6,7-dihydropyrido-isoquinoline compounds as antivirals
WO2017216685A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag Pentacyclic pyridone compounds as antivirals
JP7085708B2 (ja) 2016-06-20 2022-06-17 エフ－スター セラピューティクス リミテッド Ｌａｇ－３結合要素
KR102379464B1 (ko) 2016-06-20 2022-03-29 키맵 리미티드 항-pd-l1 항체
EP3858858A1 (en) 2016-06-20 2021-08-04 F-Star Delta Limited Binding molecules binding pd-l1 and lag-3
MX2018015393A (es) 2016-06-23 2019-04-29 Jiangsu Hengrui Medicine Co Anticuerpo lag-3, fragmento de union al antigeno del mismo y aplicacion farmaceutica del mismo.
SG10201912456RA (en) 2016-06-24 2020-02-27 Infinity Pharmaceuticals Inc Combination therapies
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
CA3030841A1 (en) 2016-07-14 2018-01-18 Fred Hutchinson Cancer Research Center Multiple bi-specific binding domain constructs with different epitope binding to treat cancer
CN117683135A (zh) 2016-07-14 2024-03-12 百时美施贵宝公司 针对tim3的抗体及其用途
GB201612520D0 (en) 2016-07-19 2016-08-31 F-Star Beta Ltd Binding molecules
WO2018017633A1 (en) 2016-07-21 2018-01-25 Bristol-Myers Squibb Company TGF Beta RECEPTOR ANTAGONISTS
US11198730B2 (en) * 2016-08-15 2021-12-14 Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. Anti-LAG-3 antibody
KR20190040990A (ko) 2016-08-26 2019-04-19 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인돌아민 2,3-디옥시게나제의 억제제 및 그의 사용 방법
CN110267990B (zh) * 2016-08-30 2023-11-07 Xencor股份有限公司 结合共刺激性和检查点受体的双特异性免疫调节抗体
WO2018047109A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Novartis Ag Polycyclic pyridone compounds as antivirals
WO2018057955A1 (en) 2016-09-23 2018-03-29 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific antibody molecules comprising lambda and kappa light chains
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
MA46529A (fr) 2016-10-11 2019-08-21 Agenus Inc Anticorps anti-lag-3 et leurs procédés d'utilisation
JP7212821B2 (ja) 2016-10-13 2023-01-26 チア・タイ・ティエンチン・ファーマシューティカル・グループ・カンパニー・リミテッド 抗ｌａｇ－３抗体および組成物
WO2018073753A1 (en) 2016-10-18 2018-04-26 Novartis Ag Fused tetracyclic pyridone compounds as antivirals
US10660909B2 (en) 2016-11-17 2020-05-26 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists
US11279694B2 (en) 2016-11-18 2022-03-22 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
CA3045306A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 Boston Biomedical, Inc. Naphthofuran derivatives, preparation, and methods of use thereof
JP6992068B2 (ja) 2016-12-07 2022-02-03 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｃｔｌａ－４抗体およびそれらの使用方法
US10961239B2 (en) 2017-01-05 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company TGF beta receptor antagonists
CN110214012B (zh) 2017-01-20 2023-05-09 艾库斯生物科学有限公司 用于治疗癌症相关疾病的唑嘧啶
JP7167041B2 (ja) 2017-02-10 2022-11-08 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 免疫ｐｅｔイメージングのための放射標識抗ｌａｇ３抗体
WO2018151820A1 (en) 2017-02-16 2018-08-23 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof
EP3389702A4 (en) * 2017-02-22 2019-08-14 I-Mab ANTI-LAG-3 ANTIBODIES AND USES THEREOF
WO2018183928A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3601353A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Five Prime Therapeutics, Inc. Combination therapy for cancer using anti-gitr antibodies
KR102461885B1 (ko) 2017-04-03 2022-11-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-pd-1 항체와 돌연변이 il-2 또는 il-15의 면역접합체
US11285207B2 (en) 2017-04-05 2022-03-29 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antibodies specifically binding to PD1 and LAG3
SG11201909344SA (en) * 2017-04-05 2019-11-28 Hoffmann La Roche Anti-lag3 antibodies
MX2019011961A (es) 2017-04-05 2019-12-05 Symphogen As Terapias combinadas dirigidas a proteina 1 de muerte celular programada (pd-1), proteina 3 de dominio de mucina y dominio inmunoglobulina de los linfocitos t (tim-3), y gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3).
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
CN110709422B (zh) 2017-04-19 2023-12-26 马伦戈治疗公司 多特异性分子及其用途
WO2018195397A2 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Kyn Therapeutics Indole ahr inhibitors and uses thereof
WO2018200430A1 (en) 2017-04-26 2018-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of antibody production that minimize disulfide bond reduction
KR102769634B1 (ko) * 2017-04-27 2025-02-19 테사로, 인코포레이티드 림프구 활성화 유전자-3 (lag-3)에 대한 항체 작용제 및 그의 용도
AR111419A1 (es) 2017-04-27 2019-07-10 Novartis Ag Compuestos fusionados de indazol piridona como antivirales
EP3615566B1 (en) 2017-04-28 2023-12-20 Marengo Therapeutics, Inc. Multispecific molecules comprising a non-immunoglobulin heterodimerization domain and uses thereof
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
ES2899616T3 (es) 2017-04-28 2022-03-14 Five Prime Therapeutics Inc Polipéptidos del dominio extracelular del CD80 para su uso en aumentar los linfocitos T de memoria central
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
UY37718A (es) 2017-05-05 2018-11-30 Novartis Ag 2-quinolinonas triciclicas como agentes antibacteriales
EP3621642B1 (en) * 2017-05-10 2024-09-18 Zhejiang Shimai Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies against lag3 and uses thereof
CN121159691A (zh) 2017-05-12 2025-12-19 哈普恩治疗公司 间皮素结合蛋白质
US11066392B2 (en) 2017-05-12 2021-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CA3062656A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Boston Biomedical, Inc. Methods for treating cancer
WO2018213377A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Arcus Biosciences, Inc. Quinazoline-pyrazole derivatives for the treatment of cancer-related disorders
CN110691795A (zh) * 2017-05-30 2020-01-14 百时美施贵宝公司 包含抗-lag3抗体、pd-1途径抑制剂和免疫治疗剂组合的组合物
MX2019012076A (es) * 2017-05-30 2019-12-09 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden un anticuerpo anti gen-3 de activacion del linfocito (lag-3) o un anticuerpo anti-lag-3 y un anticuerpo anti muerte celular programada 1 (pd-1) o anti ligando 1 de muerte celular programada (pd-l1).
PL3631454T3 (pl) 2017-05-30 2024-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Leczenie guzów lag-3 pozytywnych
US20210246227A1 (en) 2017-05-31 2021-08-12 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules that bind to myeloproliferative leukemia (mpl) protein and uses thereof
CN111344303A (zh) 2017-06-01 2020-06-26 Xencor股份有限公司 结合cd123和cd3的双特异性抗体
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
US20200172628A1 (en) 2017-06-22 2020-06-04 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3641812A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer
JP2020524694A (ja) 2017-06-22 2020-08-20 ノバルティス アーゲー がんの処置における使用のためのＩＬ−１β結合性抗体
US10899798B2 (en) 2017-06-26 2021-01-26 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligands with detectable moieties and uses thereof
US20200223924A1 (en) 2017-06-27 2020-07-16 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
CA3066789A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Bristol-Myers Squibb Company Amorphous and crystalline forms of ido inhibitors
JP6896989B2 (ja) * 2017-07-13 2021-06-30 ナンジン リーズ バイオラブズ カンパニー リミテッド 抗体結合ｌａｇ−３及びその使用
KR20250025039A (ko) 2017-07-20 2025-02-20 노파르티스 아게 항-lag-3 항체의 투여 요법 및 그의 용도
WO2019023459A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
JP7670481B2 (ja) 2017-08-04 2025-04-30 バイスクルテクス・リミテッド Ｃｄ１３７に対して特異的な二環式ペプチドリガンド
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
KR20200051646A (ko) 2017-08-17 2020-05-13 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Ahr 억제제 및 이의 용도
IL272697B2 (en) 2017-08-18 2023-12-01 Adastra Pharmaceuticals Inc A polymorphic form of TG02
KR20200042937A (ko) 2017-08-30 2020-04-24 페인스 테라퓨틱스 인코포레이티드 항-lag-3 항체 및 이의 용도
CN111051328B (zh) 2017-08-31 2023-11-03 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
KR20250021628A (ko) 2017-08-31 2025-02-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
WO2019046498A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
JP7196160B2 (ja) 2017-09-12 2022-12-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤アルボシジブを用いた、ｂｃｌ－２阻害剤に対して非感受性である癌の治療レジメン
IL273432B (en) 2017-09-22 2022-09-01 Kymera Therapeutics Inc Protein compounds and their uses
EP3684366A4 (en) 2017-09-22 2021-09-08 Kymera Therapeutics, Inc. Crbn ligands and uses thereof
US12145987B2 (en) 2017-10-05 2024-11-19 Daiichi Sankyo Company, Limited Method for depleting cytotoxic T cells using an anti-LAG-3 antibody composition
US11203592B2 (en) 2017-10-09 2021-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
KR102885797B1 (ko) 2017-10-10 2025-11-12 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
EP3694552A1 (en) 2017-10-10 2020-08-19 Tilos Therapeutics, Inc. Anti-lap antibodies and uses thereof
PE20201183A1 (es) 2017-10-13 2020-11-03 Harpoon Therapeutics Inc Proteinas trispecificas y metodos de uso
IL315737A (en) 2017-10-13 2024-11-01 Harpoon Therapeutics Inc B-cell maturation antigen-binding proteins
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
US11427610B2 (en) 2017-10-16 2022-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
EP3697434A1 (en) 2017-10-18 2020-08-26 Vivia Biotech, S.L. Bite-activated car-t cells
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
CN111542544A (zh) 2017-11-01 2020-08-14 百时美施贵宝公司 用于治疗癌症的免疫刺激性激动性抗体
US11166959B2 (en) 2017-11-06 2021-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Isofuranone compounds useful as HPK1 inhibitors
EP3710053A1 (en) 2017-11-16 2020-09-23 Novartis AG Combination therapies
WO2019097479A1 (en) 2017-11-17 2019-05-23 Novartis Ag Novel dihydroisoxazole compounds and their use for the treatment of hepatitis b
CA3083949A1 (en) 2017-11-30 2020-06-06 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
JP7348899B2 (ja) 2017-12-08 2023-09-21 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 多重特異性分子及びその使用
CN111741976B (zh) 2017-12-19 2024-09-17 英沃克斯制药有限公司 包括pd-l1抗原结合位点的fc结合片段
CN111433210A (zh) 2017-12-20 2020-07-17 诺华股份有限公司 作为抗病毒药的稠合三环吡唑并-二氢吡嗪基-吡啶酮化合物
RU2771384C2 (ru) * 2017-12-22 2022-05-04 Цзянсу Хэнжуй Медсин Ко., Лтд. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело к lag-3, и ее применение
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
CN109970856B (zh) * 2017-12-27 2022-08-23 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN115925943A (zh) 2017-12-27 2023-04-07 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
US11306149B2 (en) 2017-12-27 2022-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CD40 antibodies and uses thereof
US11447449B2 (en) 2018-01-05 2022-09-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3737408A1 (en) 2018-01-08 2020-11-18 Novartis AG Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADATION AGENTS AND ASSOCIATED USES
KR102813913B1 (ko) 2018-01-12 2025-05-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tim3에 대한 항체 및 그의 용도
EP3737675A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. Crbn ligands and uses thereof
US11655295B2 (en) 2018-01-18 2023-05-23 Sichuan Kelun-Biotech Biopharmaceutical Co., Ltd. Anti-LAG-3 antibody and use thereof
KR20200116481A (ko) 2018-01-29 2020-10-12 메르크 파텐트 게엠베하 Gcn2 억제제 및 이의 용도
JP7377207B2 (ja) 2018-01-29 2023-11-09 メルク パテント ゲーエムベーハー Ｇｃｎ２阻害剤およびその使用
WO2019149716A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies comprising an antigen-binding site binding to lag3
EP3746116A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 Novartis AG Combination therapy using a chimeric antigen receptor
EP3746470A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 F. Hoffmann-La Roche AG Stabilized immunoglobulin domains
EP3752203A1 (en) 2018-02-13 2020-12-23 Novartis AG Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US11478479B2 (en) 2018-02-16 2022-10-25 Arcus Biosciences, Inc. Dosing with an azolopyrimidine compound
US10875894B2 (en) 2018-02-23 2020-12-29 Bicycletx Limited Multimeric bicyclic peptide ligands
WO2019165315A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists alone or in combination
CN111801331A (zh) 2018-02-28 2020-10-20 诺华股份有限公司 吲哚-2-羰基化合物及其用于治疗乙型肝炎的用途
EP3758751A4 (en) 2018-02-28 2021-11-17 Wuxi Biologics Ireland Limited. MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST HUMAN LAG-3, METHOD OF MANUFACTURING AND USING THEREOF
CN110204614B (zh) * 2018-02-28 2022-07-12 广州誉衡生物科技有限公司 抗人lag-3单克隆抗体及其制备方法和用途
CA3091805A1 (en) 2018-03-05 2019-09-12 Arcus Biosciences, Inc. Arginase inhibitors
JP7250808B2 (ja) 2018-03-08 2023-04-03 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗がん剤としての環状ジヌクレオチド
WO2019178362A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
US20210009711A1 (en) 2018-03-14 2021-01-14 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
EP3768720A4 (en) * 2018-03-20 2022-01-05 Wuxi Biologics Ireland Limited NEW ANTI-BODY ANTI-LAG-3 POLYPEPTIDE
EP3768716A1 (en) 2018-03-21 2021-01-27 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to vista at acidic ph
BR112020018539A2 (pt) 2018-03-23 2020-12-29 Bristol-Myers Squibb Company Anticorpos contra mica e/ou micb e usos dos mesmos
KR20200139724A (ko) 2018-03-30 2020-12-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
JP7104458B2 (ja) 2018-04-02 2022-07-21 上海博威生物医薬有限公司 リンパ球活性化遺伝子－３（ｌａｇ－３）結合抗体およびその使用
CN110343178B (zh) * 2018-04-03 2022-07-22 上海开拓者生物医药有限公司 抗人lag-3单克隆抗体及其应用
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
JP2021522211A (ja) 2018-04-16 2021-08-30 アリーズ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｅｐ４阻害剤およびその使用
JP7516254B2 (ja) 2018-04-18 2024-07-16 ゼンコア インコーポレイテッド Ｉｌ－１５／ｉｌ－１５ｒａヘテロ二量体ｆｃ融合タンパク質およびその使用
WO2019204665A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Xencor, Inc. Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
WO2019213340A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Uracil derivatives as mer-axl inhibitors
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
UY38251A (es) 2018-06-01 2019-12-31 Novartis Ag Moléculas de unión contra bcma y usos de las mismas
EP3801617A1 (en) 2018-06-01 2021-04-14 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that bind cd123 and cd3
CN113166972A (zh) 2018-06-11 2021-07-23 耶鲁大学 新型免疫检查点抑制剂
CN110606892B (zh) * 2018-06-14 2023-09-26 华博生物医药技术（上海）有限公司 一种高亲和力高生物活性的lag-3抗体及其应用
CN110615840A (zh) * 2018-06-19 2019-12-27 信达生物制药(苏州)有限公司 全人源的抗lag-3抗体及其应用
IL279489B2 (en) 2018-06-22 2025-10-01 Bicycletx Ltd Bicyclic peptide ligands specific for nectin-4, a drug conjugate containing the peptide ligands and a pharmaceutical composition containing the drug conjugate
EA202190137A1 (ru) 2018-06-27 2021-05-17 Бристол-Маерс Сквибб Компани Нафтиридиноновые соединения для применения в качестве активаторов t-клеток
CN112654621B (zh) 2018-06-27 2024-05-14 百时美施贵宝公司 可作为t细胞活化剂的经取代萘啶酮化合物
CN112119094B (zh) 2018-06-29 2024-11-22 Y生物股份有限公司 与淋巴细胞活化基因3特异性结合的单克隆抗体及其用途
JP7554742B2 (ja) 2018-07-03 2024-09-20 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗ｔｃｒ抗体分子およびその使用
WO2020010177A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic crbn ligands and uses thereof
WO2020010227A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
AU2019302454A1 (en) 2018-07-09 2021-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to ILT4
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
ES2963694T3 (es) 2018-07-10 2024-04-01 Novartis Ag Derivados de 3-(5-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona y su uso en el tratamiento de enfermedades dependientes de la proteína con dedos de cinc 2 de la familia ikaros (ikzf2)
CN112638948B (zh) 2018-07-11 2025-08-15 戊瑞治疗有限公司 在酸性pH下结合至VISTA的抗体
GB201811408D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd CD137 Binding Molecules
GB201811450D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Delta Ltd Mesothelin and CD137 binding molecules
GB201811404D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Anti-CD137 Antibodies
GB201811403D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Antibody molecules
MX2021000398A (es) 2018-07-12 2021-05-27 F Star Therapeutics Ltd Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y cd137.
GB201811410D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd OX40 Binding molecules
EP3820898B1 (en) 2018-07-12 2025-09-03 invoX Pharma Limited Antibody molecules that bind cd137 and ox40
GB201811415D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Anti-Mesothelin Anti bodies
SG11202100267TA (en) 2018-07-18 2021-02-25 Arcus Biosciences Inc Solid forms of an azolopyrimidine compound
MY204773A (en) 2018-07-20 2024-09-12 Surface Oncology Inc Anti-cd112r compositions and methods
WO2020023356A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US12059420B2 (en) 2018-07-23 2024-08-13 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
JP2021532143A (ja) * 2018-07-26 2021-11-25 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company 癌の処置のためのｌａｇ−３併用療法
CN110172099B (zh) * 2018-08-16 2020-03-03 上海健信生物医药科技有限公司 抗lag-3人源化单克隆抗体分子，抗原结合片段及其医药用途
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US12030875B2 (en) 2018-09-07 2024-07-09 PIC Therapeutics, Inc. EIF4E inhibitors and uses thereof
CN121426803A (zh) 2018-09-12 2026-01-30 诺华股份有限公司 抗病毒吡啶并吡嗪二酮化合物
TWI791894B (zh) 2018-09-21 2023-02-11 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 新型白介素２及其用途
WO2020061482A1 (en) 2018-09-21 2020-03-26 Harpoon Therapeutics, Inc. Egfr binding proteins and methods of use
TWI801664B (zh) 2018-09-21 2023-05-11 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 新型白介素２及其用途
MX2021003554A (es) 2018-09-25 2021-05-27 Harpoon Therapeutics Inc Proteinas de union a dll3 y metodos de uso.
WO2020069372A1 (en) 2018-09-27 2020-04-02 Elstar Therapeutics, Inc. Csf1r/ccr2 multispecific antibodies
WO2020065453A1 (en) 2018-09-29 2020-04-02 Novartis Ag Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of shp2
JP7612571B2 (ja) 2018-10-03 2025-01-14 ゼンコア インコーポレイテッド Ｉｌ－１２ヘテロ二量体ｆｃ－融合タンパク質
WO2020076969A2 (en) 2018-10-10 2020-04-16 Tilos Therapeutics, Inc. Anti-lap antibody variants and uses thereof
EP3864047A2 (en) 2018-10-12 2021-08-18 Xencor, Inc. Pd-1 targeted il-15/il-15ralpha fc fusion proteins and uses in combination therapies thereof
BR112021004857A2 (pt) * 2018-10-19 2021-06-08 Bristol-Myers Squibb Company terapia de combinação para melanoma
EP3873532A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Novartis AG Dc-sign antibody drug conjugates
TWI828800B (zh) 2018-11-16 2024-01-11 美商阿克思生物科學有限公司 Arg1及/或arg2之抑制劑
TW202033555A (zh) 2018-11-16 2020-09-16 美商必治妥美雅史谷比公司 抗nkg2a抗體及其用途
US11352350B2 (en) 2018-11-30 2022-06-07 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
CA3119807A1 (en) 2018-12-04 2020-06-11 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Cdk9 inhibitors and polymorphs thereof for use as agents for treatment of cancer
GB201820325D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for psma
GB201820288D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicycle Tx Ltd Bicycle peptide ligaands specific for MT1-MMP
GB201820295D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for MT1-MMP
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
CN113438961A (zh) 2018-12-20 2021-09-24 Xencor股份有限公司 含有IL-15/IL-15Rα和NKG2D抗原结合结构域的靶向异二聚体Fc融合蛋白
AU2019402189B2 (en) 2018-12-20 2023-04-13 Novartis Ag Dosing regimen and pharmaceutical combination comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
CA3119582A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1.beta. binding antibodies
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
IL282838B2 (en) 2018-12-21 2025-05-01 Valerio Therapeutics Conjugated nucleic acid molecules and their uses
CN113260420A (zh) 2018-12-21 2021-08-13 拜斯科阿迪有限公司 Pd-l1特异性的双环肽配体
WO2020128613A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
CN113474045A (zh) 2018-12-21 2021-10-01 拜斯科技术开发有限公司 Pd-l1特异性的双环肽配体
US20200369762A1 (en) 2018-12-21 2020-11-26 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
JP7662528B2 (ja) 2019-02-12 2025-04-15 スミトモ ファーマ アメリカ， インコーポレイテッド 複素環式タンパク質キナーゼ阻害剤を含む製剤
JP7488826B2 (ja) 2019-02-15 2024-05-22 ノバルティス アーゲー 置換３－（１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン誘導体及びその使用
AU2020222345B2 (en) 2019-02-15 2022-11-17 Novartis Ag 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
GB2597851B (en) 2019-02-21 2024-05-29 Marengo Therapeutics Inc Antibody molecules that bind to NKP30 and uses thereof
AU2020226893B2 (en) 2019-02-21 2025-02-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
CN111620949A (zh) 2019-02-28 2020-09-04 三生国健药业（上海）股份有限公司 结合人lag-3的抗体、其制备方法和用途
EP3937964B1 (en) 2019-03-12 2026-03-11 Arcus Biosciences, Inc. Treatment of an oncogenene driven cancer having a kras or egfr mutation by decreasing adenosine production or antagonizing adenosine activation
BR112021018506A2 (pt) 2019-03-19 2021-11-30 Fundacio Privada Inst Dinvestigacio Oncològica De Vall Hebron Terapia de combinação para tratamento do câncer
WO2020191326A1 (en) 2019-03-20 2020-09-24 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Treatment of acute myeloid leukemia (aml) with venetoclax failure
WO2020198077A1 (en) 2019-03-22 2020-10-01 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Compositions comprising pkm2 modulators and methods of treatment using the same
US20230083015A1 (en) 2019-03-26 2023-03-16 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of stat3
WO2020205467A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 The Regents Of The University Of Michigan Stat3 protein degraders
CA3135487A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 Arcus Biosciences, Inc. Treatment of cancer utilizing an identified adenosine fingerprint
SG11202110828UA (en) 2019-04-02 2021-10-28 Bicycletx Ltd Bicycle toxin conjugates and uses thereof
JP2022527114A (ja) 2019-04-05 2022-05-30 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド 分解剤およびそれらの使用
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
WO2020231713A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
US20230295087A1 (en) 2019-05-13 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2020232019A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
JP2022534981A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよび組み合わせ治療
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
CN114127315A (zh) 2019-05-30 2022-03-01 百时美施贵宝公司 鉴定适合于免疫肿瘤学(i-o)疗法的受试者的方法
CN114502540A (zh) 2019-05-31 2022-05-13 医肯纳肿瘤学公司 Tead抑制剂和其用途
WO2020251972A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
WO2020252336A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Vanderbilt University Dibenzylamines as amino acid transport inhibitors
US20220304984A1 (en) 2019-06-12 2022-09-29 Vanderbilt University Amino acid transport inhibitors and the uses thereof
JP2022539088A (ja) * 2019-06-24 2022-09-07 イノベント バイオロジクス（スーチョウ）カンパニー，リミティド 抗ｌａｇ‐３抗体を含む製剤、その調製方法及び使用
AU2020302928A1 (en) 2019-06-27 2022-02-03 Medstar Health, Inc. HDAC6-activated macrophages, compositions, and uses thereof
BR112021026517A2 (pt) 2019-06-28 2022-05-10 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de irak e usos dos mesmos
US11529350B2 (en) 2019-07-03 2022-12-20 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (TNK1) inhibitors and uses thereof
IT201900011676A1 (it) 2019-07-12 2021-01-12 St Superiore Di Sanita Anticorpo ricombinante umano contro il recettore di membrana LAG3, suoi usi medici e diagnostici.
JP7738909B2 (ja) 2019-07-16 2025-09-16 ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ミシガン Ｅｅｄ阻害剤としてのイミダゾピリミジンおよびその使用
WO2021011868A1 (en) 2019-07-17 2021-01-21 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
TWI862640B (zh) 2019-07-30 2024-11-21 英商拜西可泰克斯有限公司 異質雙環肽複合物
WO2021026179A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
CA3151824A1 (en) 2019-08-27 2021-03-04 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon e3 ligase inhibitors
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
US12215105B2 (en) 2019-09-13 2025-02-04 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 antagonists and uses thereof
WO2021053559A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
EP4031241A1 (en) 2019-09-19 2022-07-27 The Regents Of The University Of Michigan Spirocyclic androgen receptor protein degraders
AU2020350689A1 (en) 2019-09-19 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to VISTA at acidic pH
CA3153777A1 (en) 2019-09-22 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for lag-3 antagonist therapy
US11667613B2 (en) 2019-09-26 2023-06-06 Novartis Ag Antiviral pyrazolopyridinone compounds
WO2021067863A2 (en) 2019-10-03 2021-04-08 Xencor, Inc. Targeted il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
EP4041768A1 (en) * 2019-10-09 2022-08-17 StCube & Co. Antibodies specific to glycosylated lag3 and methods of use thereof
TW202128757A (zh) 2019-10-11 2021-08-01 美商建南德克公司 具有改善之特性的 PD-1 標靶 IL-15/IL-15Rα FC 融合蛋白
WO2021079195A1 (en) 2019-10-21 2021-04-29 Novartis Ag Tim-3 inhibitors and uses thereof
IL292347A (en) 2019-10-21 2022-06-01 Novartis Ag Combination treatments with ventoclax and tim-3 inhibitors
EP4054591A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Astrazeneca AB Combination therapy for treating cancer
AU2020380384A1 (en) 2019-11-08 2022-05-26 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 antagonist therapy for melanoma
MX2022005839A (es) 2019-11-19 2022-06-09 Bristol Myers Squibb Co Compuestos utiles como inhibidores de la proteina helios.
WO2021108288A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Bristol-Myers Squibb Company Salts/cocrystals of (r)-n-(4-chlorophenyl)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
EP4065582B1 (en) 2019-11-26 2025-02-19 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic carbazole derivatives and uses thereof
WO2021119159A1 (en) 2019-12-10 2021-06-17 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
KR20220145325A (ko) 2019-12-17 2022-10-28 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Irak 분해제 및 이의 용도
WO2021127283A2 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
CN115052662A (zh) 2019-12-20 2022-09-13 诺华股份有限公司 抗TGFβ抗体和检查点抑制剂用于治疗增殖性疾病的用途
EP4081308A4 (en) 2019-12-23 2024-01-24 Kymera Therapeutics, Inc. SMARCA DEGRADERS AND USES THEREOF
EP4081513B1 (en) 2019-12-23 2024-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Substituted quinolinonyl piperazine compounds useful as t cell activators
US20230086933A1 (en) 2019-12-23 2023-03-23 Bristol-Myers Squibb Company Substituted heteroaryl compounds useful as t cell activators
AR120823A1 (es) 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
MX2022006958A (es) 2019-12-23 2022-07-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de quinazolinilo sustituidos utiles como activadores de celulas t.
WO2021133917A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca inhibitors and uses thereof
BR112022012222A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-13 Bristol Myers Squibb Co Derivados de piperazina substituídos úteis como ativadores de células t
WO2021138407A2 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to cd33 and uses thereof
GB2609554B (en) 2020-01-03 2025-08-20 Marengo Therapeutics Inc Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
AU2021206618A1 (en) 2020-01-06 2022-08-18 Hifibio, Inc. Anti-TNFR2 antibody and uses thereof
WO2021139682A1 (en) 2020-01-07 2021-07-15 Hifibio (Hk) Limited Anti-galectin-9 antibody and uses thereof
CN115279771B (zh) 2020-01-15 2025-03-21 缆图药品公司 Map4k1抑制剂
IL293752A (en) 2020-01-17 2022-08-01 Novartis Ag Combination comprising a tim-3 inhibitor and a hypomethylating agent for use in treating myelodysplastic syndrome or chronic myelomonocytic leukemia
CN111205371B (zh) * 2020-01-22 2022-03-29 北京吉尔麦迪生物医药科技有限公司 一种抗淋巴细胞激活基因3的抗体及应用
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
CA3170411A1 (en) 2020-03-03 2021-09-10 Christopher L. Vandeusen Eif4e inhibitors and uses thereof
KR20220151189A (ko) 2020-03-09 2022-11-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 증진된 효능제 활성을 갖는 cd40에 대한 항체
MX2022011602A (es) 2020-03-19 2023-01-04 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de la proteína de homólogo de ratón de minuto 2 (mdm2) y usos de los mismos.
TWI888507B (zh) 2020-03-19 2025-07-01 美商阿克思生物科學有限公司 作為HIF-2α抑制劑的四氫萘及四氫喹啉化合物
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
US12522623B2 (en) 2020-03-26 2026-01-13 Regents Of The University Of Michigan Small molecule STAT protein degraders
US20230147852A1 (en) * 2020-04-03 2023-05-11 Sorrento Therapeutics, Inc. Engineered Antibodies That Bind LAG3
EP4132971A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Merck Sharp & Dohme LLC Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
AR122043A1 (es) * 2020-05-12 2022-08-03 Bristol Myers Squibb Co Dosificación y administración del anticuerpo anti-ctla-4 activable
WO2021231732A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
KR20230019152A (ko) 2020-06-02 2023-02-07 아르커스 바이오사이언시즈 인코포레이티드 Tigit에 대한 항체
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
EP4161521A4 (en) 2020-06-03 2024-07-10 Kymera Therapeutics, Inc. DEUTERED IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
WO2021258010A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime compounds useful as t cell activators
TW202214857A (zh) 2020-06-19 2022-04-16 法商昂席歐公司 新型結合核酸分子及其用途
MX2022015852A (es) 2020-06-23 2023-01-24 Novartis Ag Regimen de dosificacion que comprende derivados de 3-(1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona.
JP2023531230A (ja) * 2020-06-30 2023-07-21 アークス セラピューティクス エーエス 全身性硬化症の治療のための抗ｓ１００ａ４抗体
US20250262293A1 (en) 2020-07-07 2025-08-21 BioNTech SE Therapeutic rna for hpv-positive cancer
US20230233690A1 (en) 2020-07-10 2023-07-27 The Regents Of The University Of Michigan Androgen receptor protein degraders
WO2022011204A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule androgen receptor protein degraders
MX2023001217A (es) 2020-07-30 2023-03-03 Kymera Therapeutics Inc Metodos de tratamiento de linfomas mutantes.
JP7819176B2 (ja) 2020-08-03 2026-02-24 ノバルティス アーゲー ヘテロアリール置換３－（１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン誘導体及びその使用
CN116348476A (zh) 2020-08-03 2023-06-27 拜斯科技术开发有限公司 基于肽的接头
JP7832177B2 (ja) 2020-08-10 2026-03-17 シャンハイ・シュンバイフイ・バイオテクノロジー・カンパニー・リミテッド Ｉｇｓｆ８を標的化することによる自己免疫疾患および癌を治療するための組成物および方法
EP4196502A1 (en) 2020-08-13 2023-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of redirecting of il-2 to target cells of interest
US20240240255A1 (en) 2020-08-17 2024-07-18 Bicycletx Limited Bicycle conjugates specific for nectin-4 and uses thereof
GB2616354A (en) 2020-08-26 2023-09-06 Marengo Therapeutics Inc Methods of detecting TRBC1 or TRBC2
KR20230058442A (ko) 2020-08-28 2023-05-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 간세포성 암종에 대한 lag-3 길항제 요법
US20230338587A1 (en) 2020-08-31 2023-10-26 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
MX2023002326A (es) 2020-08-31 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Firma de localizacion celular e inmunoterapia.
US20230321285A1 (en) 2020-08-31 2023-10-12 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
EP4221842A4 (en) 2020-10-02 2024-11-20 Dracen Pharmaceuticals, Inc. LYOPHILIZED COMPOSITION CONTAINING (S)-ISOPROPYL 2-((S)-2-ACETAMIDO-3-(1H-INDOL-3-YL)PROPANAMIDO)-6-DIAZO-5-OXOHEXANOATE FOR SUBCUTANEOUS ADMINISTRATION AND ITS USE
EP4228764A1 (en) 2020-10-14 2023-08-23 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
IL301907A (en) 2020-10-23 2023-06-01 Bristol Myers Squibb Co LAG-3 antagonist therapy for lung cancer
JP2023548529A (ja) 2020-11-06 2023-11-17 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９結合分子及びその使用
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
AU2021392040A1 (en) 2020-12-02 2023-06-29 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
US20240018248A1 (en) 2020-12-02 2024-01-18 Vib Vzw An ltbr agonist in combination therapy against cancer
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
WO2022125497A1 (en) 2020-12-08 2022-06-16 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Eganelisib for use in the treatment of pd-l1 negative cancer
CN114621344B (zh) * 2020-12-10 2022-08-30 北京东方百泰生物科技股份有限公司 一种抗lag-3单克隆抗体的纯化方法
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
CA3202330A1 (en) 2020-12-16 2022-06-23 Anthony Casarez Compounds useful as t cell activators
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
CA3196999A1 (en) 2020-12-28 2022-07-07 Masano HUANG Methods of treating tumors
EP4267105B1 (en) 2020-12-28 2025-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
TW202241891A (zh) 2020-12-30 2022-11-01 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑及其用途
US20250186539A2 (en) 2021-01-11 2025-06-12 Bicycletx Limited Methods for treating cancer
WO2022165260A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
CA3210196A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of treating cancer with kinase inhibitors
AU2022215844A1 (en) 2021-02-02 2023-09-14 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
MX2023009060A (es) 2021-02-02 2023-09-29 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 y usos de estos.
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
AU2022221124A1 (en) 2021-02-12 2023-08-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydroazepine derivatives for the treatment of cancer
JP2024506909A (ja) 2021-02-12 2024-02-15 ニンバス サターン， インコーポレイテッド Ｈｐｋ１アンタゴニスト及びその使用
US12171768B2 (en) 2021-02-15 2024-12-24 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK4 degraders and uses thereof
AU2022220869A1 (en) 2021-02-15 2023-08-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak4 degraders and uses thereof
US20240166647A1 (en) 2021-03-03 2024-05-23 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon Ligands
US20240190874A1 (en) 2021-03-03 2024-06-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of androgen receptor
CN117295737A (zh) 2021-03-05 2023-12-26 林伯士萨顿公司 Hpk1拮抗剂和其用途
US20240199648A1 (en) 2021-03-08 2024-06-20 Blueprint Medicines Corporation Map4k1 inhibitors
WO2022197641A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Rapt Therapeutics, Inc. 1h-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl-amine derivatives as hematopoietic progenitor kinase 1 (hpk1) modulators and/or inhibitors for the treatment of cancer and other diseases
WO2022213062A1 (en) 2021-03-29 2022-10-06 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
BR112023019847A2 (pt) 2021-03-29 2023-11-07 Juno Therapeutics Inc Métodos para dosagem e tratamento com uma combinação de uma terapia com inibidor de ponto de verificação e uma terapia com célula t car
US20240376224A1 (en) 2021-04-02 2024-11-14 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
JP2024515545A (ja) 2021-04-05 2024-04-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー がん治療のためのピリジニル置換オキソイソインドリン化合物
RS66982B1 (sr) 2021-04-06 2025-07-31 Bristol Myers Squibb Co Piridinil supstituisana oksoizoindolinska jedinjenja
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
AU2022255506A1 (en) 2021-04-08 2023-11-09 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules binding to tcr and uses thereof
US20240279225A1 (en) 2021-04-08 2024-08-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds and methods for theranostic targeting of parp activity
US12325697B2 (en) 2021-04-09 2025-06-10 Nimbus Clio, Inc. CBL-B modulators and uses thereof
TW202309022A (zh) 2021-04-13 2023-03-01 美商努法倫特公司 用於治療具egfr突變之癌症之胺基取代雜環
CA3215081A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Alfredo C. Castro Mek inhibitors and uses thereof
IL308314A (en) 2021-05-07 2024-01-01 Kymera Therapeutics Inc CDK2 compounds and their uses
US20240285740A1 (en) 2021-05-12 2024-08-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treating cancer
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
CN117337288A (zh) 2021-05-21 2024-01-02 艾库斯生物科学有限公司 Axl抑制剂化合物
US20240246967A1 (en) 2021-05-21 2024-07-25 Arcus Biosciences, Inc. Axl compounds
IL309831A (en) 2021-07-13 2024-02-01 BioNTech SE Multispecific binding agents against CD40 and CD137 in combined cancer therapy
AR126442A1 (es) 2021-07-14 2023-10-11 Blueprint Medicines Corp Inhibidores de map4k1
WO2023288264A1 (en) 2021-07-15 2023-01-19 Blueprint Medicines Corporation Map4k1 inhibitors
EP4392421A1 (en) 2021-08-25 2024-07-03 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
AU2022334296A1 (en) 2021-08-25 2024-03-07 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
AU2022341239A1 (en) 2021-09-08 2024-03-21 Redona Therapeutics, Inc. Papd5 and/or papd7 inhibiting 4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivatives
MX2024003936A (es) * 2021-09-29 2024-06-28 Akeso Biopharma Inc Anticuerpo anti-lag3, composicion farmaceutica y uso.
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
EP4423069A1 (en) 2021-10-29 2024-09-04 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hif-2alpha and methods of use thereof
IL309227A (en) 2021-10-29 2024-02-01 Bristol Myers Squibb Co LAG-3 antagonist therapy for hematological cancer
JP2024540080A (ja) 2021-10-29 2024-10-31 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ４分解剤およびその合成
IL313439A (en) 2021-12-16 2024-08-01 Valerio Therapeutics New conjugated nucleic acid molecules and their uses
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023122778A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Pyridazinone derivatives useful as t cell activators
WO2023122777A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023122772A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
EP4469477A1 (en) 2022-01-26 2024-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
CA3243419A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. CYTOKINE-ASSOCIATED TUMOR-INFILTRATING LYMPHOCYTE COMPOSITIONS AND PROCESSES
JP2025504059A (ja) 2022-01-31 2025-02-06 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋデグレーダー及びその使用
CN118946556A (zh) 2022-02-01 2024-11-12 阿维纳斯运营公司 Dgk靶向化合物及其用途
EP4479388A1 (en) 2022-02-14 2024-12-25 Gilead Sciences, Inc. Antiviral naphthyridinone compounds
JP2025507694A (ja) 2022-02-25 2025-03-21 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 結腸直腸癌に対する組み合わせ療法
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
US20250297018A1 (en) 2022-03-15 2025-09-25 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
CN118871451A (zh) 2022-03-18 2024-10-29 百时美施贵宝公司 分离多肽的方法
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
CN114874324B (zh) * 2022-05-13 2023-02-03 苏州旭光科星抗体生物科技有限公司 一种检测可溶性lag-3蛋白含量的酶联免疫检测试剂盒及应用
JP2025519119A (ja) 2022-05-25 2025-06-24 イケナ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｅｋ阻害剤及びその使用
CN119562830A (zh) 2022-06-02 2025-03-04 百时美施贵宝公司 抗体组合物及其使用方法
EP4556493A1 (en) 2022-07-11 2025-05-21 Genuv Inc. Cytokine fusion protein
EP4554680A1 (en) 2022-07-15 2025-05-21 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hpk1 and methods of use thereof
WO2024020034A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
IL318575A (en) 2022-08-02 2025-03-01 Liminal Biosciences Ltd HETEROARYL CARBOXAMIDE AND GPR84-RELATED ANTAGONISTS AND USES THEREOF
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
KR20250056924A (ko) 2022-08-02 2025-04-28 리미널 바이오사이언시스 리미티드 치환된 피리돈 gpr84 길항제 및 이의 용도
KR20250046309A (ko) 2022-08-08 2025-04-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 T 세포 활성화제로서 유용한 치환된 테트라졸릴 화합물
EP4568963A1 (en) 2022-08-09 2025-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Tertiary amine substituted bicyclic compounds useful as t cell activators
TW202417439A (zh) 2022-08-11 2024-05-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 雙環四氫噻吖呯衍生物
CA3262845A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag BICYCLIC TETRAHYDROTHIAZEPINE DERIVATIVES
CN119677732A (zh) 2022-08-11 2025-03-21 豪夫迈·罗氏有限公司 双环四氢氮杂䓬衍生物
JP2025526727A (ja) 2022-08-11 2025-08-15 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 二環式テトラヒドロチアゼピン誘導体
JP2025531079A (ja) 2022-09-14 2025-09-19 アーカス バイオサイエンシズ インコーポレイティド エトルマデナントの分散体
WO2024081385A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Hpk1 inhibitors and methods of use thereof
CN120091809A (zh) 2022-10-20 2025-06-03 艾库斯生物科学有限公司 Cd73化合物的冻干制剂
EP4608995A1 (en) 2022-10-24 2025-09-03 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Tumour stratification for responsiveness to an immune checkpoint inhibitor
CN120187419A (zh) 2022-10-24 2025-06-20 癌症研究技术有限公司 通过氧化还原状态调节剂使肿瘤对检查点抑制剂敏感
AR131141A1 (es) 2022-11-22 2025-02-19 Pic Therapeutics Inc Inhibidores de eif4e y usos de los mismos
CN120418289A (zh) 2022-12-14 2025-08-01 安斯泰来制药欧洲有限公司 结合cldn18.2和cd3的双特异性结合剂与免疫检查点抑制剂的联合疗法
CN120731228A (zh) 2022-12-21 2025-09-30 百时美施贵宝公司 肺癌的组合疗法
WO2024137865A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Gossamer Bio Services, Inc. Compounds useful as t cell activators
CN115819595B (zh) * 2023-01-03 2023-05-16 上海百英生物科技股份有限公司 一种抗lag3纳米抗体及其制备方法与应用
WO2024150017A1 (en) 2023-01-13 2024-07-18 Akrivia Biomedics Limited Method of profiling diseases
JP2026505276A (ja) 2023-01-31 2026-02-13 ユニバーシティ オブ ロチェスター Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ感染症を治療するための免疫チェックポイント遮断療法
AU2024234840A1 (en) 2023-03-13 2025-09-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating melanoma
WO2024196952A1 (en) 2023-03-20 2024-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Tumor subtype assessment for cancer therapy
AU2024252845A1 (en) 2023-04-06 2025-10-16 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.4) Limited Methods for treating and monitoring cancer
EP4705292A1 (en) 2023-05-05 2026-03-11 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
AU2024267385A1 (en) 2023-05-08 2026-01-08 Bristol-Myers Squibb Company Substituted phenyl oxazolone compounds
CN121666382A (zh) 2023-05-10 2026-03-13 缆图药品公司 GSK3α抑制剂和其使用方法
WO2024233853A2 (en) * 2023-05-11 2024-11-14 Elixiron Immunotherapeutics (hong Kong) Limited A combination comprising lag-3 targeting moiety and interleukin-10
WO2024243502A1 (en) 2023-05-25 2024-11-28 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
KR20260020409A (ko) 2023-05-31 2026-02-11 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Ikzf1-4 단백질의 수준을 감소시키기 위한 치환된 옥사졸론 화합물
AU2024281414A1 (en) 2023-06-02 2025-12-11 Arcus Biosciences, Inc. Biomarkers for predicting cancer treatment efficacy
AU2024285766A1 (en) 2023-06-07 2026-01-08 Bristol-Myers Squibb Company Spirocyclic substituted oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compound
CN121646585A (zh) 2023-06-23 2026-03-10 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的经取代的氧代异吲哚啉基哌啶-2,6-二酮化合物
WO2024264017A2 (en) 2023-06-23 2024-12-26 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
TW202515608A (zh) 2023-06-26 2025-04-16 以色列商坎布根有限公司 Ｉｌ—１８ｂｐ拮抗抗體及其於癌症治療之單一療法及組合療法的用途
WO2025030002A2 (en) 2023-08-02 2025-02-06 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
WO2025038763A1 (en) 2023-08-15 2025-02-20 Bristol-Myers Squibb Company Ceramic hydroxyapatite chromatography flow through method
WO2025038857A1 (en) 2023-08-16 2025-02-20 Arcus Biosciences, Inc. TETRALINS TARGETING MUTANT HIF-2α
EP4568957A1 (en) 2023-09-02 2025-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Substituted phenyl oxooxazolyl piperidine dione compounds
WO2025064197A1 (en) 2023-09-02 2025-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Substituted azetidinyl oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compounds
WO2025054339A1 (en) 2023-09-08 2025-03-13 Arcus Biosciences, Inc. Triazolopyridine compounds as inhibitors of kit
KR20250068738A (ko) 2023-09-13 2025-05-16 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 치환된 옥소이소인돌리닐 피페리딘-2,6-디온 화합물
WO2025072330A1 (en) 2023-09-26 2025-04-03 Arcus Biosciences, Inc. Kit inhibitor compounds and methods of use thereof
WO2025068461A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their use in treating cancer
WO2025068452A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their use in treating cancer
WO2025076299A1 (en) 2023-10-06 2025-04-10 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
WO2025096539A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096505A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096490A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096488A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096494A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096487A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
TW202523302A (zh) 2023-11-02 2025-06-16 美商阿克思生物科學有限公司 噻唑化合物及其使用方法
WO2025106736A2 (en) 2023-11-15 2025-05-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating lung cancer
AR134560A1 (es) 2023-12-08 2026-01-28 Astellas Pharma Inc Terapia de combinación que implica agentes de unión biespecíficos que se unen a cldn18.2 y cd3 y agentes que estabilizan o aumentan la expresión de cldn18.2
WO2025120866A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
WO2025120867A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and anti-vegfr2 antibodies
WO2026033885A1 (en) 2024-08-08 2026-02-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
WO2025132831A1 (en) 2023-12-19 2025-06-26 Universite D'aix-Marseille N-heteroaryl derivatives and uses thereof for treating cancer
WO2025137370A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Arcus Biosciences, Inc. Salt forms of an axl inhibitor
US20250215087A1 (en) 2023-12-29 2025-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy of kras inhibitor and treg depleting agent
WO2025151487A2 (en) 2024-01-08 2025-07-17 Regents Of The University Of Michigan Small-molecule inhibitors of adar1
US12521446B2 (en) 2024-02-27 2026-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CEACAM5 antibody drug conjugates
US20250361320A1 (en) 2024-02-27 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
WO2025193571A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193572A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193574A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193573A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193583A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193569A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193759A1 (en) 2024-03-12 2025-09-18 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of an azolopyrimidine compound
WO2025193770A1 (en) 2024-03-13 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides
WO2025226767A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Substituted 3-(5-(6-aminopyridin-2-yl)-4-fluoro-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione compounds for use in the treatment of cancer
WO2025237275A1 (zh) * 2024-05-13 2025-11-20 南京维立志博生物科技股份有限公司 用于治疗肿瘤的抗lag-3抗体或其抗原结合部分
WO2025245489A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of tumors in subjects having fgl-1 positive samples
NL2037811B1 (en) 2024-05-29 2025-12-12 Univ Oslo Treatment for Cancer
GB202408360D0 (en) 2024-06-11 2024-07-24 Cancer Research Tech Ltd Tumour sensitisation
WO2025262250A1 (en) 2024-06-20 2025-12-26 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their uses
WO2026006759A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Arcus Biosciences, Inc. Pharmaceutical compositions, dosage forms, and methods of making and using same
WO2026035787A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) macrocyles
WO2026035866A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with a lag-3 inhibitor and a pd-1 inhibitor
WO2026037841A1 (en) 2024-08-12 2026-02-19 ONA Therapeutics S.L. Anti-fgfr4 molecules and uses thereof
WO2026050572A2 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules binding to tcr and uses thereof
WO2026059987A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Arcus Biosciences, Inc. Biomarkers for methods of treating cancer
WO2026059973A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Arcus Biosciences, Inc. Biomarkers for methods of treating cancer

Family Cites Families (160)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1081681A (en) 1910-08-31 1913-12-16 Otis Elevator Co Alternating-current-motor control.
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
DE3572982D1 (en) 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US5374548A (en) 1986-05-02 1994-12-20 Genentech, Inc. Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor
MX9203291A (es) 1985-06-26 1992-08-01 Liposome Co Inc Metodo para acoplamiento de liposomas.
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
AU600575B2 (en) 1987-03-18 1990-08-16 Sb2, Inc. Altered antibodies
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
GB8809129D0 (en) 1988-04-18 1988-05-18 Celltech Ltd Recombinant dna methods vectors and host cells
US5476996A (en) 1988-06-14 1995-12-19 Lidak Pharmaceuticals Human immune system in non-human animal
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
JP2989002B2 (ja) 1988-12-22 1999-12-13 キリン―アムジエン・インコーポレーテツド 化学修飾顆粒球コロニー刺激因子
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5976877A (en) 1990-01-08 1999-11-02 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Proteins produced by human lymphocytes DNA sequence encoding these proteins and their pharmaceutical and biological uses
FR2656800B1 (fr) 1990-01-08 1992-05-15 Roussy Inst Gustave Nouvelles proteines produits par les lymphocytes humains, sequence d'adn codant pour ces proteines et applications pharmaceutiques et biologiques.
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
JP3068180B2 (ja) 1990-01-12 2000-07-24 アブジェニックス インコーポレイテッド 異種抗体の生成
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US6172197B1 (en) 1991-07-10 2001-01-09 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
DE69133476T2 (de) 1990-08-29 2006-01-05 GenPharm International, Inc., Palo Alto Transgene Mäuse fähig zur Produktion heterologer Antikörper
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
GB9108652D0 (en) 1991-04-23 1991-06-12 Antisoma Ltd Immunoreactive compounds
ES2341666T3 (es) 1991-12-02 2010-06-24 Medimmune Limited Produccion de autoanticuerpos de repertorios de segmentos de anticue rpos expresados en la superficie de fagos.
AU3328493A (en) 1991-12-17 1993-07-19 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
EP0640094A1 (en) 1992-04-24 1995-03-01 The Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
EP0671927B1 (en) 1992-09-16 2003-01-15 The Scripps Research Institute Human neutralizing monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus
JP3919830B2 (ja) 1992-11-28 2007-05-30 財団法人化学及血清療法研究所 抗ネコヘルペスウイルス−１組換え抗体および該抗体をコードする遺伝子断片
JPH08509612A (ja) 1993-04-26 1996-10-15 ジェンファーム インターナショナル インコーポレイテッド 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物
AU691811B2 (en) 1993-06-16 1998-05-28 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
AU1866895A (en) 1994-01-04 1995-08-01 Scripps Research Institute, The Human monoclonal antibodies to herpes simplex virus and methods therefor
PT758383E (pt) 1994-05-06 2007-05-31 Roussy Inst Gustave Fracções polipeptídicas solúveis da ptroteína lag-3; processo de produção; composição terapêutica; anticorpos anti-idiotipo
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6121022A (en) 1995-04-14 2000-09-19 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
DE69624824T2 (de) 1995-07-21 2003-09-11 Applied Research Systems Ars Holding N.V., Curacao Verfahren zur erkennung, identifizierung, isolierung, selektiver markierung und zielgerichteter erkennung von th1 lymphozyten mit hilfe von lag-3 protein
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
KR19990087557A (ko) 1996-03-07 1999-12-27 그윈넬 해리 제이 근적외선 형광 비밀정보의 열전사 인쇄 및 표시용 리본
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
WO1998023741A1 (fr) 1996-11-28 1998-06-04 Institut Gustave Roussy Mutants de la proteine lag-3, leur expression et utilisation
US6500422B2 (en) 1996-11-29 2002-12-31 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Methods for preventing graft rejection in transplantation and for producing a universal gene therapy host cell using lymphocyte activation (LAG-3)
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
WO1998042752A1 (en) 1997-03-21 1998-10-01 Brigham And Women's Hospital Inc. Immunotherapeutic ctla-4 binding peptides
AU736549B2 (en) 1997-05-21 2001-08-02 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Method for the production of non-immunogenic proteins
EP0900841A1 (en) 1997-06-18 1999-03-10 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) LAG-3 splice variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
EP1071700B1 (en) 1998-04-20 2010-02-17 GlycArt Biotechnology AG Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
GB9814383D0 (en) 1998-07-02 1998-09-02 Cambridge Antibody Tech Improvements relating to antibodies
CN1325517C (zh) 1998-07-21 2007-07-11 展马博联合股份有限公司 抗丙型肝炎病毒抗体及其用途
SG156547A1 (en) 1998-12-23 2009-11-26 Pfizer Human monoclonal antibodies to ctla-4
HUP0104865A3 (en) 1999-01-15 2004-07-28 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
US6914128B1 (en) 1999-03-25 2005-07-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing
EP2264166B1 (en) 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
GB9911569D0 (en) 1999-05-18 1999-07-21 Oxford Biomedica Ltd Antibodies
IL147972A0 (en) 1999-08-23 2002-09-12 Dana Farber Cancer Inst Inc Ge Pd-1, a receptor for b7-4 and uses therefor
CA2381770C (en) 1999-08-24 2007-08-07 Medarex, Inc. Human ctla-4 antibodies and their uses
US7605238B2 (en) 1999-08-24 2009-10-20 Medarex, Inc. Human CTLA-4 antibodies and their uses
US6794132B2 (en) 1999-10-02 2004-09-21 Biosite, Inc. Human antibodies
KR20120053525A (ko) 2000-06-16 2012-05-25 캠브리지 안티바디 테크놀로지 리미티드 면역특이적으로 ＢＬｙＳ에 결합하는 항체
US6818216B2 (en) 2000-11-28 2004-11-16 Medimmune, Inc. Anti-RSV antibodies
CA2430013C (en) 2000-11-30 2011-11-22 Medarex, Inc. Transgenic transchromosomal rodents for making human antibodies
AU2002302919A1 (en) 2001-02-22 2002-10-03 Institut Pasteur Comparative mycobacterial geneomics as a tool for identifying targets for the diagnosis, prophylaxis or treatment of mycobacterioses
US20020146753A1 (en) 2001-04-06 2002-10-10 Henrik Ditzel Autoantibodies to glucose-6-phosphate isomerase and their participation in autoimmune disease
KR100583331B1 (ko) 2001-05-11 2006-05-26 기린 비루 가부시키가이샤 인간 항체 λ 경쇄 유전자를 포함하는 인간 인공 염색체 및 자손 전달 가능한 상기 인간 인공 염색체를 포함하는 비인간 동물
MXPA03011094A (es) 2001-05-31 2004-12-06 Medarex Inc Citotoxinas, profarmacos, ligadores, y estabilizadores utiles para ello.
EP1295895B1 (en) 2001-09-19 2011-08-10 Institut Gustave Roussy Peptides and proteins binding to glu-pro motifs, therapeutical compositions containing the same and applications thereof
DK1436404T3 (da) 2001-09-19 2010-03-08 Alexion Pharma Inc Manipulerede templates og deres anvendelse i single-primer amplifikation
US20030228319A1 (en) 2002-04-16 2003-12-11 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
CA2463879C (en) 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040258678A1 (en) 2002-02-22 2004-12-23 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
WO2003085107A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells with modified genome
PT1537878E (pt) 2002-07-03 2010-11-18 Ono Pharmaceutical Co Composições de imunopotenciação
CA2503330A1 (en) 2002-10-29 2004-05-13 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
WO2005035732A2 (en) 2003-02-19 2005-04-21 Dyax Corporation Papp-a ligands
PL1897548T5 (pl) 2003-02-28 2025-03-17 The Johns Hopkins University Regulacja komórek T
US8119340B2 (en) 2003-10-08 2012-02-21 The Feinstein Institute For Medical Research Methods and compositions for diagnosis and treatment of B cell chronic lymphocytic leukemia
KR101225299B1 (ko) * 2003-12-10 2013-01-24 메다렉스, 인코포레이티드 인터페론 알파 항체 및 그의 용도
EP2357201B1 (en) 2004-04-13 2017-08-30 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-P-selectin antibodies
WO2005103081A2 (en) 2004-04-20 2005-11-03 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
NZ550934A (en) 2004-05-19 2010-05-28 Medarex Inc Chemical linkers and conjugates thereof
US7691962B2 (en) 2004-05-19 2010-04-06 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
BRPI0513706A (pt) 2004-07-20 2008-05-13 Symphogen As anticorpo policlonal recombinante anti-rhesus d e métodos de produção
CA2575791A1 (en) 2004-08-03 2006-02-16 Dyax Corp. Hk1-binding proteins
WO2006029219A2 (en) 2004-09-08 2006-03-16 Ohio State University Research Foundation Human monoclonal anti-ctla4 antibodies in cancer treatment
AU2005292227A1 (en) 2004-10-01 2006-04-13 Medarex, Inc. Methods of treating CD30 positive lymphomas
SI3428191T1 (sl) 2004-10-06 2025-03-31 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1 in PD-1 v zdravljenju karcinoma ledvičnih celic
AU2006214032B2 (en) 2005-02-18 2012-03-08 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (PSMA) lacking in fucosyl residues
KR20070108259A (ko) 2005-03-23 2007-11-08 화이자 프로덕츠 인크. Ｃｔｌａ-4 항체와 호르몬 요법에 의한 전립선암의 치료법
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
CN103059138B (zh) 2005-05-09 2015-10-28 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
WO2007005874A2 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
CA2623652C (en) 2005-09-26 2013-11-26 Medarex, Inc. Antibody-drug conjugates and methods of use
AU2006305842B2 (en) 2005-10-26 2011-11-03 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Methods and compounds for preparing CC-1065 analogs
EP2465870A1 (en) 2005-11-07 2012-06-20 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus VH/VL hypervariable sequences
CA2627190A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
JP2009518320A (ja) 2005-12-05 2009-05-07 シュムフォウエン アクティーゼルスカブ 抗オルトポックスウイルス組換えポリクローナル抗体
EP2975057A1 (en) 2006-07-10 2016-01-20 Fujita Health University Novel anti-cd73 antibody
WO2008073160A2 (en) 2006-08-17 2008-06-19 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods for converting or inducing protective immunity
SI2059535T1 (sl) * 2006-08-18 2014-03-31 Novartis Ag Za prlr specifiäśno protitelo in njegove uporabe
CL2007003622A1 (es) 2006-12-13 2009-08-07 Medarex Inc Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales.
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 Medarex Llc 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
CN101616911A (zh) 2007-02-21 2009-12-30 梅达莱克斯公司 具有单个氨基酸的化学连接物及其偶联物
BRPI0809674A2 (pt) 2007-03-30 2014-10-07 Medimmune Llc Formulação aquosa estéril, estável, forma de dosagem unitária farmacêutica, recipiente selado, kit, método para prevenir, controlar, tratar ou melhorar uma doença ou distúrbio inflamatório, composição, processo para a preparação de uma composição, e, método para estabilizar um anticorpo 13h5
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
EP3222634A1 (en) 2007-06-18 2017-09-27 Merck Sharp & Dohme B.V. Antibodies to human programmed death receptor pd-1
US20090028857A1 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
PT2201100E (pt) 2007-09-14 2016-06-03 Univ Brussel Vrije Aperfeiçoamento da capacidade estimulatória de células t das células que apresentam antígeno humano e o seu uso na vacinação
EA018396B1 (ru) 2007-10-01 2013-07-30 Бристоль-Мейерз Сквибб Компани Антитела человека, которые связывают мезотелин, и применение таких антител
AU2008334076A1 (en) 2007-11-30 2009-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibody partner molecule conjugates directed to protein tyrosine kinase 7 (PTK7)
KR20100093578A (ko) 2007-11-30 2010-08-25 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-비7에이취4 단일클론 항체-약물 접합체 및 그 사용 방법
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
BRPI0917891A2 (pt) 2008-08-25 2015-11-24 Amplimmune Inc antagonistas de pd-1 e métodos de utilização dos mesmos
PL2350129T3 (pl) 2008-08-25 2015-12-31 Amplimmune Inc Kompozycje antagonistów PD-1 i sposoby stosowania
NZ717213A (en) 2008-12-09 2017-10-27 Genentech Inc Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
CA2768204A1 (en) * 2009-07-15 2011-01-20 Aimm Therapeutics B.V. Gram-positive bacteria specific binding compounds
LT2504364T (lt) 2009-11-24 2017-11-10 Medimmune Limited Tiksliniai surišantys agentai prieš b7-h1
JP5934203B2 (ja) * 2010-07-14 2016-06-15 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 抗ａｄｄｌモノクローナル抗体およびこの使用
WO2012054438A1 (en) * 2010-10-22 2012-04-26 Schering Corporation Anti-pcsk9
HK1203971A1 (en) 2012-05-15 2015-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
WO2014140180A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Anti-lag-3 binding proteins
KR20160037989A (ko) 2013-08-02 2016-04-06 아두로 바이오테크 홀딩스, 유럽 비.브이. 면역 자극을 위한 cd27 효능제와 면역 체크포인트 억제의 조합
PT3508502T (pt) 2013-09-20 2023-06-22 Bristol Myers Squibb Co Combinação de anticorpos anti-lag-3 e anticorpos anti-pd-1 para tratar tumores
DK3556775T3 (da) 2014-01-28 2022-01-03 Bristol Myers Squibb Co Anti-lag-3 antistoffer til behandling af hæmatologiske maligniteter
EA201792273A1 (ru) 2015-04-17 2018-04-30 Бристол-Маерс Сквибб Компани Композиции, содержащие комбинацию анти-pd-1 антитела и другого антитела
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
EP2867258B1 (en) 2017-06-28
TWI662046B (zh) 2019-06-11
NL301205I1 (sr) 2023-04-19
ES2831406T3 (es) 2021-06-08
LTPA2022015I1 (sr) 2022-12-12
SI3275899T1 (sl) 2020-11-30
LT3275899T (lt) 2020-12-10
CY2022035I2 (el) 2023-01-27
PE20241623A1 (es) 2024-08-07
HRP20241357T1 (hr) 2024-12-20
JP2026041896A (ja) 2026-03-10
TW202432599A (zh) 2024-08-16
US11345752B2 (en) 2022-05-31
TWI701045B (zh) 2020-08-11
EP2867258A1 (en) 2015-05-06
EP3275899A1 (en) 2018-01-31
WO2014008218A1 (en) 2014-01-09
HK1249535A1 (en) 2018-11-02
TW202540190A (zh) 2025-10-16
TN2014000536A1 (en) 2016-03-30
CN108101991A (zh) 2018-06-01
US9505839B2 (en) 2016-11-29
JP2015527880A (ja) 2015-09-24
HUE069061T2 (hu) 2025-02-28
HUE034553T2 (en) 2018-02-28
TW201726743A (zh) 2017-08-01
AU2021225177A1 (en) 2021-09-30
NL301205I2 (nl) 2023-05-24
EP3795592A1 (en) 2021-03-24
US20190256594A1 (en) 2019-08-22
US20150307609A1 (en) 2015-10-29
MX2019006411A (es) 2019-08-14
KR20200075891A (ko) 2020-06-26
US10377824B2 (en) 2019-08-13
US20250136684A1 (en) 2025-05-01
CN108101991B (zh) 2022-02-11
PL3795592T3 (pl) 2024-10-07
US20230077348A1 (en) 2023-03-16
AU2017221874B2 (en) 2019-05-02
KR102290633B1 (ko) 2021-08-19
RS61084B1 (sr) 2020-12-31
CO7170127A2 (es) 2015-01-28
ES2638545T3 (es) 2017-10-23
PT3795592T (pt) 2024-09-17
CN104411723B (zh) 2018-01-30
CL2014003637A1 (es) 2015-03-27
CA3161329A1 (en) 2014-01-09
PT3275899T (pt) 2020-11-17
LT2867258T (lt) 2017-09-11
EP3275899B1 (en) 2020-08-26
KR20210102485A (ko) 2021-08-19
HRP20201852T8 (hr) 2021-06-25
SMT202000628T1 (it) 2021-01-05
IL236517B (en) 2018-06-28
DK3795592T3 (da) 2024-10-14
HRP20201852T1 (hr) 2021-01-08
TW201831515A (zh) 2018-09-01
PE20150221A1 (es) 2015-02-19
MX2015000116A (es) 2015-04-14
JP7009531B2 (ja) 2022-02-10
IL236517A0 (en) 2015-02-26
FIC20230009I1 (fi) 2023-02-09
JP2020103301A (ja) 2020-07-09
US20180371087A1 (en) 2018-12-27
BR112014032999B1 (pt) 2022-10-18
NZ628528A (en) 2016-07-29
CA2877746C (en) 2022-07-19
CN104411723A (zh) 2015-03-11
AU2019204803A1 (en) 2019-07-25
PH12021552200A1 (en) 2022-05-02
AU2025200257A1 (en) 2025-02-20
PH12014502854A1 (en) 2015-02-23
NO2023008I1 (no) 2023-02-07
AR125268A2 (es) 2023-06-28
TW201406784A (zh) 2014-02-16
HK1207386A1 (en) 2016-01-29
LTC2867258I2 (sr) 2025-06-10
CY1123609T1 (el) 2022-03-24
BR112014032999A2 (pt) 2017-08-01
KR102126596B1 (ko) 2020-06-24
PE20191324A1 (es) 2019-09-24
EP3795592B1 (en) 2024-07-24
CY2022035I1 (el) 2023-01-05
US20170137514A1 (en) 2017-05-18
PH12014502854B1 (en) 2015-02-23
US10266591B2 (en) 2019-04-23
DK3275899T3 (da) 2020-11-30
KR20230159625A (ko) 2023-11-21
US20140093511A1 (en) 2014-04-03
TW201938198A (zh) 2019-10-01
HRP20171315T1 (hr) 2017-10-20
TWI771721B (zh) 2022-07-21
EA202090227A1 (ru) 2020-05-31
AR091649A1 (es) 2015-02-18
PL2867258T3 (pl) 2017-11-30
NO2023020I1 (no) 2023-05-03
SMT202400395T1 (it) 2024-11-15
HUS2300002I1 (hu) 2023-01-28
JP6668405B2 (ja) 2020-03-18
TW202118789A (zh) 2021-05-16
DK2867258T3 (en) 2017-10-02
JP2024041966A (ja) 2024-03-27
AU2019204803B2 (en) 2021-06-10
TWI576355B (zh) 2017-04-01
AU2013286914B2 (en) 2017-06-29
LT3795592T (lt) 2024-09-25
KR102461102B1 (ko) 2022-10-31
LUC00286I2 (sr) 2025-05-12
EA035013B1 (ru) 2020-04-17
FR22C1057I2 (fr) 2023-12-15
KR20220150417A (ko) 2022-11-10
EA201590138A1 (ru) 2015-07-30
TWI617581B (zh) 2018-03-11
MX365417B (es) 2019-06-03
KR20150023909A (ko) 2015-03-05
RS56398B1 (sr) 2017-12-29
PT2867258T (pt) 2017-08-31
AU2013286914A1 (en) 2015-01-29
UY34887A (es) 2013-12-31
SI2867258T1 (sl) 2017-10-30
ES2987734T3 (es) 2024-11-18
FI3795592T3 (fi) 2024-10-01
HUE052406T2 (hu) 2021-04-28
JP6320376B2 (ja) 2018-05-09
CA2877746A1 (en) 2014-01-09
SG11201408780XA (en) 2015-01-29
SI3795592T1 (sl) 2024-10-30
TW202313688A (zh) 2023-04-01
SMT201700449T1 (it) 2017-11-15
AR129651A2 (es) 2024-09-18
AU2017221874A1 (en) 2017-09-21
EP4553086A2 (en) 2025-05-14
AU2019204803C1 (en) 2023-06-29
MY169383A (en) 2019-03-26
CY1119563T1 (el) 2018-03-07
JP2018126149A (ja) 2018-08-16
SG10201610960YA (en) 2017-02-27
MY197322A (en) 2023-06-13
KR20240168469A (ko) 2024-11-29
MY197544A (en) 2023-06-22
PE20191759A1 (es) 2019-12-12
FR22C1057I1 (fr) 2023-01-06
JP2022064901A (ja) 2022-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20250136684A1 (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
CA2734335C (en) Human antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK40051182B (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK40051182A (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK1249535B (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK1207386B (en) Optimization of human antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
EA044665B1 (ru) Фармацевтическая композиция, содержащая анти-lag-3 антитело и анти-pd-1 антитело