ES2987734T3 - Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos - Google Patents

Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos Download PDF

Info

Publication number
ES2987734T3
ES2987734T3 ES20192145T ES20192145T ES2987734T3 ES 2987734 T3 ES2987734 T3 ES 2987734T3 ES 20192145 T ES20192145 T ES 20192145T ES 20192145 T ES20192145 T ES 20192145T ES 2987734 T3 ES2987734 T3 ES 2987734T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
antibody
lag
antigen
human
antibodies
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES20192145T
Other languages
English (en)
Inventor
Nils Lonberg
Mohan Srinivasan
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bristol Myers Squibb Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48795938&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2987734(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Application granted granted Critical
Publication of ES2987734T3 publication Critical patent/ES2987734T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

La presente invención proporciona anticuerpos monoclonales aislados que se unen específicamente a LAG-3 y tienen propiedades funcionales optimizadas en comparación con los anticuerpos anti-LAG-3 descritos anteriormente, como el anticuerpo 25F7 (US 2011/0150891 A1). Estas propiedades incluyen sitios de desamidación reducidos, mientras que aún conservan una unión de alta afinidad a LAG-3 humana y estabilidad física (es decir, térmica y química). También se proporcionan moléculas de ácido nucleico que codifican los anticuerpos de la invención, vectores de expresión, células huésped y métodos para expresar los anticuerpos de la invención, así como inmunoconjugados, moléculas biespecíficas y composiciones farmacéuticas que comprenden los anticuerpos. La presente invención también proporciona métodos para detectar LAG-3, así como métodos para tratar respuestas inmunitarias estimulantes utilizando un anticuerpo anti-LAG-3 de la invención. También se proporciona una terapia de combinación, en la que los anticuerpos se coadministran con al menos un anticuerpo inmunoestimulador adicional. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos
Antecedentes de la invención
Los anticuerpos terapéuticos son uno de los segmentos de crecimiento más rápido de la industria farmacéutica. Para mantener la potencia (es decir, la actividad) y minimizar la inmunogenicidad, los anticuerpos y otros fármacos de proteínas deben protegerse de la degradación física y química durante la fabricación y el almacenamiento. De hecho, una de las principales dificultades al desarrollar anticuerpos terapéuticos es la potencial respuesta inmunógena cuando se administran a un sujeto, que puede conducir a un aclaramiento rápido o incluso inducir efectos que suponen un riesgo para la vida incluyendo un choque anafiláctico. Diversos factores alteran la inmunogenicidad de un anticuerpo, tales como sus propiedades fisicoquímicas (por ejemplo, pureza, estabilidad, o solubilidad), factores clínicos (por ejemplo, dosis, ruta de administración, heterogeneidad de la enfermedad, o características del paciente), y el tratamiento simultáneo con otros agentes (Swann et al. (2008) Curr Opinion Inmunol 20:493-499).
La inmunogenicidad de los anticuerpos y/o la pérdida de actividad del anticuerpo frecuentemente se deben a la desamidación. La desamidación es un proceso químico degradativo que se produce espontáneamente en las proteínas (por ejemplo, anticuerpos). La desamidación elimina un grupo funcional amida de un resto aminoácido, tal como asparagina y glutamina, dañando de este modo sus cadenas secundarias que contienen amida. Esto, a su vez, produce alteraciones estructurales y biológicas en toda la proteína, creando de esta manera formas heterogéneas del anticuerpo. La desamidación es una de las modificaciones posteriores a la traducción más comunes que se producen en anticuerpos terapéuticos producidos de forma recombinante.
Por ejemplo, la heterogeneidad en la cadena pesada del anticuerpo monoclonal h1B4 (un anticuerpo dirigido contra CD18 humanizado) debida a desamidación durante el cultivo celular fue notificada por Tsai et al. (Pharm Res 10(11):1580 (1993)). Además, la reducción/pérdida de la actividad biológica debida a la desamidación ha sido un problema reconocido. Por ejemplo, Kroon et al. caracterizaron varios sitios de desamidación en el anticuerpo terapéutico OKT3, y notificaron que las muestras de los lotes de producción de OKT3 (envejecidas de 14 meses a 3 años) han disminuido su actividad hasta por debajo del 75 % (Pharm Res 9(11):1386 (1992), página 1389, segunda columna). Además, las muestras de OKT3 que muestran grandes cantidades de péptidos oxidados en sus cartografías tenían una actividad significativamente reducida en el ensayo de potencia de unión al antígeno (página 1390, primera columna). Los autores concluyeron que los sitios específicos de modificación química que se producen tras el almacenamiento de OKT3 se identificaron mediante cartografía de péptidos y se correlacionaron con los cambios observados en los análisis clínicos y los ensayos biológicos del anticuerpo (página 1392, primera columna). Se ha notificado también la pérdida de actividad biológica para varias diferentes proteínas terapéuticas desamidadas, incluyendo la DNasa humana recombinante (Cacia et al. (1993) J. Chromatogr. 634:229-239) y CD4 soluble recombinante (Teshima et al. (1991) Biochemistry 30:3916-3922). El documento WO 2010/019570 A2 describe una terapia de combinación en que un anticuerpo anti-LAG-3 se coadministra con al menos un anticuerpo inmunoestimulador adicional, tal como un anticuerpo anti-PD-1, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
En su conjunto, la desamidación supone un problema un problema significativo e impredecible para la industria farmacéutica. Los esfuerzos asociados con el control de la variabilidad producida por la desamidación en anticuerpos terapéuticos, en particular, así como las preocupaciones de la FDA asociadas con esta variabilidad, aumentan los costes y retrasan los ensayos clínicos. Por otra parte, las modificaciones para abordar este problema, incluyendo las condiciones de desplazamiento (por ejemplo, temperatura, pH, y tipo de célula) asociadas con la producción recombinante y/o la alteración de aminoácidos que son susceptibles a desamidación (por ejemplo, mutagénesis dirigida a sitio) pueden afectar negativamente la estabilidad y la actividad, especialmente, cuando los cambios se realizan en las regiones determinantes de la complementariedad (CDR) del anticuerpo. En consecuencia, existe una necesidad de versiones más estables de anticuerpos terapéuticos.
Sumario
La presente invención se define por las reivindicaciones. Proporciona una composición única que comprende: (a) un anticuerpo monoclonal, o una porción de unión a antígeno del mismo, que se une al gen 3 de activación de linfocitos humano (LAG-3), (b) un anticuerpo anti-PD-1 o una porción de unión a antígeno del mismo y (c) un vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano comprende las regiones CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 15, 16 y 17, respectivamente, y las regiones CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena ligera que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 18, 19 y 20, respectivamente.
En particular, la invención puede usar anticuerpos monoclonales aislados (por ejemplo, anticuerpos monoclonales humanos) que se unen al LAG-3 (por ejemplo, LAG-3 humano). Los anticuerpos que se unen al LAG-3 humano tienen una estabilidad física optimizada en comparación con los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 descritos anteriormente. En particular, la invención usa una forma modificada del anticuerpo 25F7 (documento US 2011/0150892 A1) que presenta una estabilidad térmica y química significativamente mejorada en comparación con el anticuerpo sin modificar. Específicamente, mediante la alteración de la crítica región de unión del dominio CDR2 de la cadena pesada del anticuerpo 25F7, se ha mostrado que el anticuerpo modificado presentaba una estabilidad física y térmica significativamente mayor, una desamidación reducida, mayor reversibilidad térmica, y menor agregación. Al mismo tiempo, se observó de forma inesperada que el anticuerpo modificado retenía la misma afinidad de unión elevada por el LAG-3 humano y la actividad funcional del anticuerpo sin modificar, incluyendo la capacidad de inhibir la unión de LAG-3 con las moléculas de histocompatibilidad mayor (MHC) de clase II y estimular las respuestas de linfocitos T específicos de antígenos. El aumento sustancial combinado de la estabilidad y la retención de la actividad de unión/biológica del anticuerpo modificado era sorprendente, particularmente a la vista de la criticidad de las regiones CDR para la función del anticuerpo.
Las composiciones de la invención pueden utilizarse para varias aplicaciones, incluyendo la estimulación de las respuestas de los linfocitos T específicos de antígenos en sujetos que con tumores o que trasportan virus, para inhibir el crecimiento de células tumorales en un sujeto, o para el tratamiento de cáncer en un sujeto.
En consecuencia, en un aspecto, la invención pertenece a una composición que comprende un anticuerpo monoclonal (por ejemplo, un anticuerpo humano) o una porción de unión a antígeno del mismo, que tiene una región variable de la cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 12. En otra realización, el anticuerpo incluye además una región variable de la cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 14.
En una realización preferida, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano presenta propiedades físicas mejoradas (es decir, estabilidad térmica y química) en comparación con el anticuerpo 25F7, aunque reteniendo a la vez al menos la misma afinidad de unión por LAG-3 humano que 25F7. Por ejemplo, el anticuerpo presenta una menor variabilidad de la secuencia en la región CDR2 de la cadena pesada debida a desamidación, en comparación con el anticuerpo 25F7, por ejemplo, aproximadamente un 2,5 % o menos de modificaciones de la secuencia de aminoácidos después de 12 semanas a 4 °C (es decir, según los estudios de estabilidad en "tiempo real" que se describen en el presente documento) y/o aproximadamente un 12,0 % o menos modificaciones de la secuencia de aminoácidos después de 12 semanas a 40 °C (es decir, en condiciones de estrés acelerado, como se describe en el presente documento), aunque reteniendo a la vez una afinidad de unión por LAG-3 humano de aproximadamente al menos Kd de 1 x 10'7 M o menos (más preferentemente, una Kd de 1 x 10'8 M o menos, una Kd de 5 x 10'9 M o menos, o una Kd de 1 x 10'9 M o menos). En otra realización, el anticuerpo presenta una reversibilidad térmica de al menos aproximadamente 40 % en PBS a pH 8,0. En otra realización, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano posee una mayor temperatura de fusión (indicando mayor estabilidad globalin vivo),en comparación con el anticuerpo sin modificar (Krishnamurthy R y Manning MC (2002) Curr Pharm Biotechnol 3:361-71). En una realización, el anticuerpo presenta una T<m>1 (la temperatura del desplegado inicial) de más de 60 °C, por ejemplo, más de 65 °C, o más de 70 °C. El punto de fusión de un anticuerpo puede medirse utilizando calorimetría de barrido diferencial (Chen et al. (2003) Pharm Res 20: 1952 60; Ghirlandol et al. (1999) Immunol Lett 68:47-52) o dicroísmo circular (Murray et al. (2002) J. Chromatogr Sci 40:343-9).
En otra realización, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano se caracteriza por su resistencia a la degradación rápida. La degradación de un anticuerpo puede medirse utilizando electroforesis capilar (EC) y MALDI-EM (Alexander AJ and Hughes DE (1995) Anal Chem 67:3626-32).
En otra realización, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano presenta efectos de agregación mínimos, por ejemplo, una agregación del 25 % o menos, tal como del 20 % o menos, 15 % o menos, 10 % o menos, 5 % o menos, o 4 % o menos. La agregación puede conducir a la estimulación de una respuesta inmunitaria indeseada y/o alterada o a propiedades farmacocinéticas desfavorables. La agregación puede medirse mediante diversas técnicas, incluyendo columna de exclusión por tamaños (SEC), cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), y dispersión de luz.
En otra realización, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano presenta además al menos una de las siguientes propiedades:
(a) unión a LAG-3 de mono;
(b) ausencia de unión a LAG-3 de ratón;
(c) inhibición de la unión de LAG-3 a moléculas de histocompatibilidad mayor (MHC) de clase II; y
(d) estimulación de respuestas inmunitarias, particularmente respuestas de linfocitos T específicos de antígenos.
Preferentemente, el anticuerpo presenta al menos dos de las propiedades (a), (b), (c) y (d). Más preferentemente, el anticuerpo presenta al menos tres de las propiedades (a), (b), (c) y (d). Incluso más preferentemente, el anticuerpo presenta las cuatro propiedades (a), (b), (c) y (d).
En otra realización, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano estimula una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos, tales como la producción de interleucina-2 (IL-2) en una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos. En otras realizaciones, el anticuerpo estimula una respuesta inmunitaria, tal como una respuesta antitumoral (por ejemplo, inhibición del crecimiento del tumor en un modelo de injerto tumoralin vivo)o una respuesta autoinmunitaria (por ejemplo, desarrollo de diabetes en ratones NOD).
En otra realización, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano se une a un epítopo de LAG-3 humano que comprende la secuencia de aminoácidos PGHPLAPG (SEQ ID NO: 21). En otra realización, el anticuerpo se une a un epítopo de LAG-3 humano que comprende la secuencia de aminoácidos HPAAPSSW (SEQ ID NO: 22) o PAAPSSWG (<s>E<q>ID NO: 23).
En otras realizaciones, el anticuerpo que se une al LAG-3 humano tiñe el tejido de la pituitaria mediante inmunohistoquímica, o no tiñe el tejido de la pituitaria mediante inmunohistoquímica.
Los anticuerpos de la invención pueden ser anticuerpos de longitud completa, por ejemplo, de un isotipo IgG1, IgG2 o IgG4, opcionalmente con una mutación serina a prolina en la región bisagra de la región constante de la cadena pesada (en la posición correspondiente a la posición 241 como se describe en Angal et al. (1993) Mol. Immunol.
30:105-108), de tal manera que la heterogeneidad del puente disulfuro entre las cadenas pesadas se reduce o elimina. En un aspecto, el isotipo de la región constante es IgG4 con una mutación en los restos de aminoácido 228, por ejemplo, S228P. Como alternativa, los anticuerpos pueden ser fragmentos de anticuerpos, tales como fragmentos Fab, Fab' o Fab'2, o anticuerpos monocatenarios.
En otro aspecto de la invención, el anticuerpo (o la porción de unión a antígeno del mismo) es parte de un inmunoconjugado que incluye un agente terapéutico,por ejemplo,una citotoxina o un isótopo radiactivo, unido al anticuerpo. En otro aspecto, el anticuerpo es parte de una molécula biespecífica que incluye un segundo resto funcional (por ejemplo, un segundo anticuerpo) que tiene una especificidad de unión diferente a dicho anticuerpo, o porción de unión a antígeno del mismo.
Se describen también moléculas de ácidos nucleicos que codifican los anticuerpos, o porciones de unión a antígeno (por ejemplo, regiones variables y/o CDR) de los mismos, de la invención así como vectores de expresión que comprenden dichos ácidos nucleicos y células hospedadoras que comprenden dichos vectores de expresión. Se describen también métodos para preparar anticuerpos dirigidos contra LAG-3 que utilizan las células hospedadoras que comprenden dichos vectores de expresión, y pueden incluir las etapas de (i) expresar el anticuerpo en la célula hospedadora y (ii) aislar el anticuerpo de la célula hospedadora.
En otro aspecto, la invención proporciona las composiciones de la invención para su uso en los métodos de estimulación de respuestas inmunitarias usando la invención. En una realización, el método implica estimular una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos poniendo en contacto los linfocitos T con una composición de la invención, de tal manera que se estimula una respuesta de los linfocitos T específicos de antígenos. En una realización preferida, se estimula la producción de interleucina-2 mediante los linfocitos T específicos de antígenos. En otra realización, el sujeto es un sujeto que tiene un tumor y se estimula una respuesta inmunitaria contra el tumor. En otra realización, el sujeto es un sujeto que tiene un virus y se estimula una respuesta inmunitaria contra el virus.
En otra realización adicional, la invención proporciona las composiciones de la invención para su uso en un método para inhibir el crecimiento de las células tumorales en un sujeto que comprende administrar al sujeto una composición de la invención, de tal manera que se inhiba el crecimiento del tumor en el sujeto. En otra realización adicional más, la invención proporciona las composiciones de la invención para su uso en un método para tratar la infección vírica en un sujeto que comprende administrar al sujeto una composición de la invención de tal manera que se trata la infección vírica en el sujeto.
Otras características y ventajas de la presente descripción serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y los ejemplos, que no deben considerarse como limitantes.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1A muestra la secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 1) y la secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 2) de la región variable de la cadena pesada del anticuerpo monoclonal humano 25F7. Se delinean las regiones CDR1 (SEQ ID NO: 5), CDR2 (SEQ ID NO: 6) y CDR3 (SEQ ID NO: 7) y se indican las derivaciones V, D y J de la línea germinal. Se delinean las regiones CDR utilizando el sistema Kabat (Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Quinta edición, U.S. Department of Health and Human Services, publicación NIH n° 91-3242).
La Figura 1B muestra la secuencia de nucleótidos (SEQ ID NO: 3) y la secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 4) de la región variable de la cadena ligera kappa del anticuerpo monoclonal humano 25F7. Se delinean las regiones CDR1 (SEQ ID NO: 8), CDR2 (SEQ ID NO: 9) y CDR3 (SEQ ID NO: 10) y se indican las derivaciones V y J de la línea germinal. Las secuencias de aminoácidos de la cadena pesada y la cadena ligera de longitud completa del anticuerpo 25F7 se muestran en las SEQ ID NO: 32 y 34, respectivamente.
La Figura 2A muestra la secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 12) de la región variable de la cadena pesada del anticuerpo monoclonal LAG3.5. Se delinean las regiones CDR1 (SEQ ID NO: 15), CDR2 (SEQ ID n O: 16) y CDR3 (SEQ ID NO: 17). Las secuencias de aminoácidos de la cadena pesada y la cadena ligera de longitud completa del anticuerpo LAG3.5 se muestran en las SEQ ID NO: 35 y 37, respectivamente.
La Figura 2B muestra la secuencia de nucleótidos (SEQ ID NO: 13) y la secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 14) de la región variable de la cadena ligera kappa del anticuerpo monoclonal LAG3.5. Se delinean las regiones CDR1 (SEQ ID NO: 18), CDR2 (SEQ ID NO: 19) y CDR3 (SEQ ID NO: 20).
La Figura 3 muestra las secuencias de aminoácidos de las secuencias de la región variable de la cadena pesada CDR2 de las variantes de LAG-3 denominadas LAG3.5 (SEQ ID NO: 42), LAG3.6 (SEQ ID NO: 43), LAG3.7 (SEQ ID NO: 44), y LAG3.8 (SEQ ID NO: 45), en comparación con la secuencia de aminoácidos de la secuencia de la región variable de la cadena pesada de CDR2 del anticuerpo 25F7 (LAG3.1) (SEQ ID NO: 41) y la correspondiente secuencia de la línea germinal humana (SEQ ID NO: 27). La región variable de la cadena pesada de CDR2 de LAG3.5 difiere de la región variable de la cadena pesada de CDR2 de 25F7 por la arginina (R) en la posición 54 (frente a la asparagina (N)) y la serina (S) en la posición 56 (frente a la asparagina (N)). Las CDR restantes de LAG3.5 y 25<f>7 son idénticas. La Figura 3 también desvela la S<e>Q ID NO: 40.
Las Figuras 4A y 4B son gráficas que muestran la actividad de unión (CE50 y la afinidad, respectivamente) de los anticuerpos LAG3.1 (25F7), LAG3.2, LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, y LAG3.8 para los linfocitos T CD4+ humanos. La Figura 4B desvela las SEQ ID NO 41,42, 45, 44 y 53, respectivamente, en orden de aparición.
Las Figuras 5A, B, C, D, y E son gráficas que muestran las curvas de fusión térmica (es decir, estabilidad térmica) de los anticuerpos LAG3.1 (25F7), LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, y LAG3.8, respectivamente.
Las Figuras 6A, B, C, D, y E son gráficas que muestran las curvas de reversibilidad térmica (es decir, estabilidad térmica) de los anticuerpos LAG3.1 (25F7), LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, y LAG3.8, respectivamente.
La Figura 7 es una gráfica, que muestra la actividad de unión de los anticuerpos LAG3.1 (25F7) y LAG3.5 a los linfocitos T CD4+ humanos activados y la unión al antígeno (Biacore).
La Figura 8 muestra los resultados de la cartografía de péptidos utilizando espectrometría de masas (modificaciones químicas/estabilidad molecular) para los anticuerpos LAG3.1 (25F7) y LAG3.5 que reflejan la desamidación y la isomerización después de incubación durante 5 días en condiciones de estrés acelerado como se describe en el presente documento. La Figura 8 desvela las SEQ ID NO 46-52, respectivamente, en orden de aparición.
La Figura 9 es una gráfica que compara los perfiles de hidrofilidad de los anticuerpos LAG3.1 (25F7) y LAG3.5. Las Figuras 10 A, B, C, y D son gráficas que comparan la afinidad y la estabilidad física (es decir, la estabilidad térmica y química) de los anticuerpos LAG3.1 y LAG3.5 a 4 °C y 40 °C, es decir, estudios tanto en condiciones de estrés acelerado y como de estabilidad en "tiempo real", como se describe en el presente documento.
Las Figuras 11 A y B son gráficas que comparan el porcentaje de modificación de las secuencias de aminoácidos de los anticuerpos LAG3.1 y LAG3.5 a 4 °C y 40 °C.
Descripción detallada de la invención
A fin de que la presente descripción pueda entenderse más fácilmente, determinados términos se definen en primer lugar. Se muestran definiciones adicionales a través de la descripción detallada.
Los términos "25F7," "anticuerpo 25F7," "anticuerpo LAG3.1," y "LAG3.1" se refieren al anticuerpo dirigido contra LAG-3 humano descrito en el documento US2011/0150892 A1. La secuencia de nucleótidos (SEQ ID NO: 1) que codifica la región variable de la cadena pesada de 25F7 (LAG3.1) y la correspondiente secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 2) se muestra en la Figura 1A (con las secuencias de la CDR designadas como SEQ ID NO: 4, 5, y 7, respectivamente). La secuencia de nucleótidos (SEQ ID NO: 3) que codifica la región variable de la cadena ligera de 25F7 (LAG3.1) y la correspondiente secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO: 4) se muestra en la Figura 1B (con las secuencias de la CDR designadas como SEQ ID NO: 8, 9, y 10, respectivamente).
El término "LAG-3" se refiere al gen 3 de activación de linfocitos. El término "LAG-3" incluye las variantes, isoformas, homólogos, ortólogos y parálogos. Por ejemplo, los anticuerpos específicos de la proteína LAG-3 humana pueden, en determinados casos, reaccionar en cruzado con una proteína LAG-3 procedente de una especie diferente a la humana. En otras realizaciones, los anticuerpos específicos de una proteína LAG-3 humana pueden ser completamente específicos de la proteína LAG-3 humana y pueden no presentar especies u otros tipos diferentes de reactividad cruzada, o pueden reaccionar en cruzado con LAG-3 de determinadas especies diferentes pero no de todas las especies diferentes (por ejemplo, reaccionar en cruzado con LAG-3 de mono pero no con LAG-3 de ratón). El término "LAG-3 humano" se refiere a la secuencia de LAG-3 humano, tal como la secuencia de aminoácidos completa de LAG-3 humano que tiene el n.° de registro del Genbank NP_002277 (SEQ ID NO: 29). El término "LAG-3 de ratón" se refiere a una secuencia de LAG-3 de ratón, tal como la secuencia de aminoácidos completa de LAG-3 de ratón que tiene el n.° de registro del Genbank NP_032505. LAG-3 se conoce también en la técnica como, por ejemplo, CD223. La secuencia de LAG-3 humano puede diferir del LAG-3 humano del n.° de registro del Genbank NP_002277 por tener,por ejemplo,mutaciones en regiones conservadas o mutaciones en regiones no conservadas y el LAG-3 tiene sustancialmente la misma función biológica que el LAG-3 humano del n.° de registro del Genbank NP_002277. Por ejemplo, una función biológica de LAG-3 humano es la tiene un epítopo en el dominio extracelular de LAG-3 que está unido específicamente a un anticuerpo de la presente descripción o una función biológica de LAG-3 humano es la unión a las moléculas MHC de Clase II.
Se pretende que el término "LAG-3 de mono" abarque las proteínas LAG-3 expresadas por los monos del viejo mundo y el nuevo mundo, incluyendo, aunque no de forma limitativa, LAG-3 de macaco cangrejero y LAG-3 de macaco rhesus. Una secuencia de aminoácidos representativa de LAG-3 de mono es la secuencia de aminoácidos de LAG-3 del macaco rhesus que se depositó con el n.° de registro del Genbank n.° XM_001108923. Otra secuencia de aminoácidos representativa de LAG-3 de mono es la secuencia de macaco rhesus alternativa del clon pa23-5 que se describe en el documento US 2011/0150892 A1. Esta secuencia de rhesus alternativa presenta una diferencia en un único aminoácido, en la posición 419, en comparación con la secuencia depositada en el Genbank.
Una secuencia de LAG-3 humano concreta será por lo general un 90 % idéntica, en su secuencia de aminoácidos, a la de LAG-3 humano con el n.° de registro del Genbank NP 002277 y contiene los restos de aminoácidos que identifican la secuencia de aminoácidos como humana cuando se compara con las secuencias de aminoácidos de LAG-3 de otras especies (por ejemplo, murino). En determinados casos, un LAG-3 humano puede ser al menos un 95 %, o incluso al menos un 96 %, 97 %, 98 %, o 99 % idéntica, en su secuencia de aminoácidos, a LAG-3 del n.° de registro del Genbank NP_002277. En determinadas realizaciones, una secuencia de LAG-3 humano no presentará más de 10 diferencias de aminoácidos respecto de la secuencia de LAG-3 del n.° de acceso al Genbank NP_002277. En determinadas realizaciones, el LAG-3 humano puede presentar no más de 5, o incluso no más de 4, 3, 2, o 1 aminoácido de diferencia respecto de la secuencia de LAG-3 del n.° de acceso al Genbank NP_002277. El porcentaje de identidad puede determinarse como se describe en el presente documento.
El término "respuesta inmunitaria" se refiere a la acción de, por ejemplo, linfocitos, células presentadoras de antígenos, fagocitos, granulocitos, y macromoléculas solubles producidas por las anteriores células o el hígado (incluyendo anticuerpos, citoquinas, y complemento) que da como resultado un daño selectivo en, la destrucción de, o la eliminación de patógenos invasores del cuerpo humano, células o tejidos infectados con patógenos, células cancerosas o, en casos de autoinmunidad o inflamación patológica, células o tejidos humanos normales.
Una "respuesta de linfocitos T específicos de antígenos" se refiere a respuestas de un linfocito T que resulta de la estimulación de los linfocitos T por el antígeno para el cual el linfocito T es específico. Los ejemplos no limitantes de respuestas por un linfocito T tras la estimulación específica de antígeno incluyen la proliferación y la producción de citoquinas (por ejemplo, producción de IL-2).
El término "anticuerpo" como se denomina en el presente documento incluye anticuerpos completos y cualquier fragmento de unión a antígeno (es decir, "porción de unión a antígeno") o fragmento monocatenario del mismo. Los anticuerpos completos son glicoproteínas que comprenden al menos dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro. Cada cadena pesada comprende una región variable de la cadena pesada (abreviada en el presente documento como V<h>) y una región constante de la cadena pesada. La región constante de la cadena pesada comprende tres dominios, C<h>1, C<h>2 y C<h>3. Cada cadena ligera comprende una región variable de la cadena ligera (abreviada en el presente documento como V<l>) y una región constante de la cadena ligera. La región constante de la cadena ligera comprende un dominio, C<l>. Las regiones V<h>y V<l>se pueden subdividir adicionalmente en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDR), entremezcladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones marco (FR). Cada V<h>y V<l>está compuesta por tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el extremo amino al extremo carboxi en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Las regiones variables de las cadenas pesada y ligera contienen un dominio de unión que interactúa con el antígeno. Las regiones constantes de los anticuerpos pueden mediar en la unión de la inmunoglobulina a los tejidos o factores hospedadores, incluyendo diversas células del sistema inmunitario (por ejemplo, células efectoras) y el primer componente (Clq) del sistema clásico del complemento.
La expresión "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo (o simplemente "porción de anticuerpo"), como se usa en el presente documento, se refiere a uno o más fragmentos de un anticuerpo que retiene la capacidad de unirse específicamente a un antígeno (por ejemplo, una proteína LAG-3). Se ha mostrado que la función de unión a antígeno de un anticuerpo puede llevarse a cabo por fragmentos de un anticuerpo de longitud completa. Los ejemplos de fragmentos de unión abarcados en el término "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo incluyen (i) un fragmento Fab, Un fragmento monovalente que consiste en los dominios V<l>, V<h>, CL y C<h>1; (ii) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos mediante un puente disulfuro a la región bisagra; (iii) un fragmento Fd que consiste en los dominios V<h>y C<h i>; (iv) un fragmento Fv que consiste en los dominios V<h>y C<h>1; (v) un fragmento Fv que consiste en los dominios V<l>y V<h>de un brazo único de un anticuerpo, (vi) un fragmento dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), que consiste en un dominio V<h>; (vii) una región determinante la complementariedad aislada (CDR); y (viii) un nanocuerpo, una región variable de la cadena pesada que contiene un único dominio variable y dos dominios constantes. Además, aunque los dos dominios del fragmento Fv, V<l>y V<h>, están codificados por genes separados, se pueden unir, utilizando métodos recombinantes, mediante un enlazador sintético que permite fabricarlos como una proteína monocatenaria en el que las regiones V<l>y V<h>se emparejan para formar moléculas monovalentes (conocidas como Fv monocatenario (scFv);véase, por ejemplo,Bird et al. (1988) Science 242:423-426; y Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Se pretende que dichos anticuerpos monocatenarios estén abarcados en la expresión "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo. Estos fragmentos de anticuerpos se obtienen utilizando técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia, y los fragmentos se seleccionan por su utilidad de la misma manera que se hace con los anticuerpos intactos.
Se pretende que un "anticuerpo aislado", como se usa en el presente documento, se refiera a un anticuerpo que está sustancialmente exento de otros anticuerpos que tienen diferentes especificidades antigénicas (por ejemplo, un anticuerpo aislado que se une específicamente a una proteína LAG-3 está sustancialmente exento de anticuerpos que se unen específicamente a antígenos diferentes de las proteínas LAG-3). Un anticuerpo aislado que se une específicamente a una proteína LAG-3 puede, sin embargo, tener reactividad cruzada con otros antígenos, tales como proteínas LAG-3 de otras especies. Por otra parte, un anticuerpo aislado puede estar prácticamente exento de otros materiales celulares y/o sustancias químicas.
Los términos "anticuerpo monoclonal" o "composición de anticuerpo monoclonal" como se usan en el presente documento se refieren a una preparación de moléculas de anticuerpo de composición molecular única. Una composición de anticuerpo monoclonal muestra una única especificidad y afinidad de unión por un epítopo concreto.
Se pretende que término "anticuerpo humano", como se usa en el presente documento, incluya anticuerpos que tienen regiones variables en las que tanto las regiones del marco como las regiones CDR se derivan de secuencias de inmunoglobulina de líneas germinales humanas. Además, si el anticuerpo contiene una región constante, la región constante se deriva también de secuencias de inmunoglobulina de líneas germinales humanas. Los anticuerpos humanos de la invención pueden incluir restos de aminoácidos no codificados por secuencias de inmunoglobulina de líneas germinales humanas (por ejemplo, mutaciones introducidas mediante mutagénesis aleatoria o específica de sitioin vitroo mediante mutación somáticain vivo).Sin embargo, no se pretende que el término "anticuerpo humano", como se usa en el presente documento, incluya anticuerpos en los que las secuencias de la CDR derivadas de la línea germinal de otra especie de mamífero, tal como un ratón, se hayan injertado en secuencias marco humanas.
La expresión "anticuerpo monoclonal humano" se refiere a anticuerpos que expresan una única especificidad de unión, que tiene regiones variables en las que tanto las regiones del marco como la CDR se derivan de secuencias de inmunoglobulina de líneas germinales humanas. En una realización, los anticuerpos monoclonales humanos se producen mediante un hibridoma que incluye un linfocito B obtenido de un animal transgénico no humano,por ejemplo,un ratón transgénico, que tiene un genoma que comprende un transgén de la cadena pesada humana y un transgén de la cadena ligera fusionados con una célula inmortalizada.
La expresión "anticuerpo humano recombinante", como se usa en el presente documento, incluye todos los anticuerpos humanos que se han preparado, expresado, creado o aislado por medios recombinantes, tales como (a) anticuerpos aislados de un animal (por ejemplo, un ratón) que es transgénico o transcromosómico para los genes de la inmunoglobulina humana o un hibridoma preparado a partir del anterior (descrito adicionalmente a continuación), (b) anticuerpos aislados a partir de una célula hospedadora transformada para expresar el anticuerpo humano,por ejemplo,a partir de un transfectoma, (c) anticuerpos aislados a partir de una biblioteca recombinante combinatoria de anticuerpos humanos, y (d) anticuerpos que han preparado, expresado, creado o aislado por cualquier otro medio que implica el corte y empalme de secuencias del gen de la inmunoglobulina humana con otras secuencias de ADN. Dichos anticuerpos recombinantes humanos tienen regiones variables en las que las regiones del marco y de la CDR se derivan de secuencias de inmunoglobulina de líneas germinales humanas. En determinadas realizaciones, sin embargo, dichos anticuerpos recombinantes humanos se pueden someter a mutagénesisin vitro(o, cuando seutilizaun animal transgénico para secuencias de Ig humanas, mutagénesis somáticain vivo)y de esta manera, las secuencias de aminoácidos de las regiones de Vh y Vl de los anticuerpos recombinantes son secuencias que, aunque se derivan y están relacionadas con las secuencias de V<h>y V<l>de líneas germinales humanas, pueden no existir de manera naturalin vivoen el repertorio de la línea germinal del anticuerpo humano.
El término "isotipo" se refiere a una clase de anticuerpo (por ejemplo, IgM o IgG1) que está codificado por los genes de la región constante de la cadena pesada.
Las frases "un anticuerpo que reconoce un antígeno" y "un anticuerpo específico de un antígeno" se utilizan de manera indistinta en el presente documento con el término "un anticuerpo que se une específicamente a un antígeno".
La expresión "derivados de anticuerpos humanos" se refiere a cualquier forma modificada del anticuerpo humano,por ejemplo,un conjugado del anticuerpo y otro agente o anticuerpo.
Se pretende que el término "anticuerpo humanizado" se refiera a anticuerpos en los que las secuencias de la CDR derivadas de la línea germinal de otra especie de mamífero, tal como un ratón, se hayan injertado en secuencias marco humanas. Se pueden realizar modificaciones adicionales de la región marco en las secuencias marco humanas.
Se pretende que el término "anticuerpo quimérico" se refiera a anticuerpos en los que las secuencias de la región variable se deriven de una especie y las secuencias de la región constante se deriven de otra especie, tal como un anticuerpo en el que las secuencias de la región variable se derivan de un anticuerpo de ratón y las secuencias de la región constante se derivan de un anticuerpo humano.
Tal como se usa en el presente documento, se pretende que un anticuerpo se "une específicamente a una proteína LAG-3 humana" se refiera a un anticuerpo que se une a una proteína LAG-3 humana (y posiblemente una proteína LAG-3 de una o más especies no humanas) pero que no se une sustancialmente a proteínas no LAG-3. Preferentemente, el anticuerpo se une a una proteína LAG-3 humana con "elevada afinidad", concretamente con una K<d>de 1 x 10'7 M o menos, más preferentemente 1 x 10'8 M o menos, más preferentemente 5 x 10'9 M o menos, más preferentemente 1 x 10'9 M o menos.
El término "no se une sustancialmente" a una proteína o células, como se usa en el presente documento, significa que no se une o no se une con una elevada afinidad a la proteína o las células, es decir, se une a la proteína o a las células con una K<d>de 1 x 10<-6>M o más, más preferentemente 1 x 10<-5>M o más, más preferentemente 1 x 10<-4>M o más, más preferentemente 1 x 10<-3>M o más, incluso más preferentemente 1 x 10<-2>M o más.
Se pretende que el término "Kasoc" o "Ka", como se usa en el presente documento, se refiera a la velocidad de asociación de una interacción anticuerpo-antígeno concreta, mientras se pretende que el término "Kdis" o "Kd," como se usa en el presente documento, se refiera a la velocidad de disociación de una interacción anticuerpo-antígeno concreta. Se pretende que el término "K<d>", como se usa en el presente documento, se refiera a la constante de disociación, que se obtiene a partir del cociente de Kd y Ka (es decir, Kd/Ka) y se expresa como concentración molar (M). Se pueden determinar los valores de K<d>para los anticuerpos utilizando los métodos bien establecidos en la materia. Un método preferido para determinar la K<d>de un anticuerpo es utilizar la resonancia de plasmón superficial, utilizando preferentemente un sistema biosensor tal como un sistema Biacore®.
El término "elevada afinidad" para un anticuerpo IgG se refiere a un anticuerpo que tiene una K<d>de 1 x 10<-7>M o menos, más preferentemente 5 x 10<-8>M o menos, incluso más preferentemente 1 x 10<-8>M o menos, incluso más preferentemente 5 x 10<-9>M o menos e incluso más preferentemente 1 x 10<-9>M o menos para un antígeno diana. Sin embargo, la unión con "elevada afinidad" puede variar para otros isotipos de anticuerpos. Por ejemplo, la unión con "elevada afinidad" para un isotipo IgM se refiere a un anticuerpo que tiene una K<d>de 10<-6>M o menos, más preferentemente 10<-7>M o menos, incluso más preferentemente 10<-8>M o menos.
El término "desamidación" se refiere a un proceso químico degradativo que se produce espontáneamente en las proteínas (por ejemplo, anticuerpos). La desamidación elimina un grupo funcional amida de un resto aminoácido, tal como asparagina y glutamina, dañando de este modo sus cadenas secundarias que contienen amida. Específicamente, la cadena secundaria de una asparagina ataca el grupo peptídico adyacente, formando un intermedio de succinimida simétrico. La simetría del intermedio da como resultado dos productos de hidrólisis, tanto aspartato como isoaspartato. Se puede producir también una reacción similar en cadenas secundarias de aspartato, dando como resultado una conversión parcial en isoaspartato. En el caso de glutamina, la velocidad de desamidación es generalmente diez veces menor que la de la asparagina, sin embargo, el mecanismo es esencialmente el mismo, requiriendo solo moléculas de agua para continuar.
El término "sujeto" incluye cualquier animal humano o no humano. El término "animal no humano" incluye todos los vertebrados,por ejemplo,mamíferos y no mamíferos, tales como primates no humanos, ovejas, perros, gatos, vacas, caballos, pollos, anfibios, y reptiles, aunque se prefieren mamíferos, tales como primates no humanos, ovejas, perros, gatos, vacas y caballos.
Se describen diversos aspectos de la invención con detalles adicionales en las siguientes subsecciones.
Anticuerpos dirigidos contra LAG-3 que tienen estabilidad aumentada y ventajosas propiedades funcionales
Los anticuerpos que se unen al LAG-3 humano para su uso en la invención se unen específicamente a LAG-3 humano y tienen estabilidad optimizada en comparación con los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 anteriormente descritos, particularmente en comparación con el anticuerpo 25F7 (LAG3.1). Esta optimización incluye una desamidación reducida (por ejemplo, estabilidad química aumentada) y un mayor desplegado térmico (por ejemplo, estabilidad física aumentada), aunque reteniendo a la vez una elevada afinidad de unión al LAG-3 humano.
Se conocen en la materia los métodos para identificar los sitios de desamidación (véanse, por ejemplo, intercambio iónico, fase inversa, y cromatografía de interacción hidrófoba, y cartografiado peptídico de digestiones proteolíticas (CL-EM)). Los ensayos adecuados para medir la estabilidad física incluyen, por ejemplo, el análisis de los puntos de fusión y/o el desplegado de la estructura del anticuerpo tras la desnaturalización (por ejemplo, porcentaje de reversibilidad como se ha descrito, por ejemplo, en el Ejemplo 3, sección 3).
La unión a LAG-3 humano puede evaluarse utilizando una o más técnicas también bien establecidas en la materia. Por ejemplo, puede probarse un anticuerpo mediante un ensayo de citometría de flujo en el que el anticuerpo se hace reaccionar con una línea de células que expresa LAG-3 humano, tal como células CHO que se han transfectado para expresar LAG-3 (por ejemplo, LAG-3 humano, o LAG-3 de mono (por ejemplo, macaco rhesus o macaco cangrejero) 0 LAG-3 de ratón) sobre su superficie celular. Otras células adecuadas para su uso en los ensayos de citometría de flujo incluyen los linfocitos T activados con CD4+ estimulados contra CD3, que expresan LAG-3 natural. De manera adicional o alternativa, la unión del anticuerpo, incluyendo la cinética de unión (por ejemplo, el valor de la K<d>), puede probarse en ensayos BIAcore. Otros ensayos de unión adicionales adecuados incluyen ensayos ELISA, por ejemplo, utilizando una proteína LAG-3 recombinante.
Los anticuerpos que se unen a LAG-3 humano se unen preferentemente a la proteína LAG-3 humana con una K<d>de 1 x 10<' 7>M o menos, y más preferentemente 1 x 10<' 8>M o menos, 5 x 10<' 9>M o menos, o 1 x 10<' 9>M o menos.
Normalmente, el anticuerpo se une a LAG-3 en los tejidos linfoides, tales como amígdala, bazo o timo, que se pueden detectar mediante inmunohistoquímica. En una realización, el anticuerpo tiñe el tejido de la pituitaria (por ejemplo, se retiene en la pituitaria) tal como se mide mediante inmunohistoquímica. En otra realización, el anticuerpo no tiñe el tejido de la pituitaria (es decir, no se retiene en la pituitaria) tal como se mide mediante inmunohistoquímica.
Las propiedades funcionales adicionales incluyen la reactividad cruzada con LAG-3 de otras especies. Por ejemplo, el anticuerpo puede unirse a LAG-3 de mono (por ejemplo, macaco cangrejero, macaco rhesus), pero no se une prácticamente con el LAG-3 de ratón. Preferentemente, un anticuerpo que se une a la LAG-3 humano se une a LAG-3 humano con elevada afinidad.
Otras propiedades funcionales incluyen la capacidad del anticuerpo para estimular una respuesta inmunitaria, tal como una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos. Esto se puede probar, por ejemplo, evaluando la capacidad del anticuerpo para estimular la producción de interleucina-2 (IL-2) en una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos. En determinadas realizaciones, el anticuerpo se une a LAG-3 humano y estimula una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos. En otras realizaciones, el anticuerpo se une a LAG-3 humano pero no estimula una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos. Otros medios para evaluar la capacidad del anticuerpo para estimular una respuesta inmunitaria incluyen someter a ensayo su capacidad para inhibir el crecimiento tumoral, tal como en un modelo de injerto tumoralin vivo(véase,por ejemplo,Ejemplo 6) o la capacidad para estimular una respuesta autoinmunitaria, tal como la capacidad de promover el desarrollo de una enfermedad autoinmunitaria en un modelo autoinmunitario, por ejemplo, la capacidad de promover el desarrollo de diabetes en el modelo NOD de ratón.
Los anticuerpos preferidos para su uso en la invención son anticuerpos monoclonales humanos. De manera adicional o alternativa, los anticuerpos pueden ser, por ejemplo, anticuerpos monoclonales quiméricos o humanizados.
Anticuerpo monoclonal LAG3.5
Un anticuerpo que se une a LAG-3 humano y se prefiere para su uso en la invención es el anticuerpo monoclonal humano, LAG3.5, caracterizado estructural y químicamente como se describe a continuación y en los siguientes Ejemplos. La secuencia de aminoácidos para V<h>de LAG3.5 se muestra en la SEQ ID NO: 12 (Figura 2A). La secuencia de aminoácidos para V<l>de LAG3.5 se muestra en la SEQ ID NO: 14 (Figura 2B).
Las secuencias de V<h>y V<l>(o las secuencias de la CDR) u otros anticuerpos dirigidos contra LAG-3 que se unen a LAG-3 humano se pueden "mezclar y emparejar" con las secuencias de V<h>y V<l>(o las secuencias de la CDR) del anticuerpo LAG3.5. Preferentemente, cuando las cadenas Vh y Vl (o las CDR de dichas cadenas) se mezclan y emparejan, una secuencia de Vh de un emparejamiento Vh/Vl concreto se sustituye por una secuencia Vh estructuralmente similar. Igualmente, preferentemente, una secuencia de Vl de un emparejamiento Vh/Vl concreto se sustituye con una secuencia Vl estructuralmente similar.
En consecuencia los anticuerpos que se unen a LAG-3 humano pueden comprender:
(a) una región variable de la cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 12 (es decir, la Vh de LAG3.5); y
(b) una región variable de la cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 14 (es decir, la V<l>de LAG3.5) o las CDR de otro anticuerpo anti-LAG-3 (es decir, que difiere de LAG3.5);
en el que el anticuerpo se une específicamente a LAG-3 humano.
Los anticuerpos adicionales que se unen a LAG-3 humano pueden comprender:
(a) las regiones CDR1, CDR2, y CDR3 de la región variable de cadena pesada que comprenden la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 12 (es decir, las secuencias de CDR de LAG3.5, SEQ ID NO: 15, 16, y 17, respectivamente); y
(b) las regiones CDR1, CDR2, y CDR3 de la región variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 14 (es decir, las secuencias de CDR de LAG3.5, SEQ ID NO: 18, 19, y 20, respectivamente) o las CDR de otro anticuerpo anti-LAG-3 (es decir, que difiere de LAG3.5);
en el que el anticuerpo se une específicamente a LAG-3 humano.
Los anticuerpos más adicionales que se unen a LAG-3 humano incluyen la región CDR2 variable de la cadena pesada de LAG3.5 combinada con las CDR de otros anticuerpos que se unen a la LAG-3 humano, por ejemplo, una CDR1 y/o una CDR3 de la región variable de la cadena pesada, y/o una CDR1, CDR2, y/o CDR3 de la región variable de la cadena ligera de un anticuerpo dirigido contra LAG-3 diferente.
Además, es bien sabido en la materia que el dominio CDR3, independientemente de los dominio(s) CDR1 y/o CDR2, en solitario, puede determinar la especificidad de unión de un anticuerpo por un antígeno homólogo y que se pueden generar de forma predictible múltiples anticuerpos que tienen la misma especificidad de unión basándose en la secuencia de la CDR3 común.Véanse, por ejemplo,Klimka et al., British J. of Cancer B3(2):252-260 (2000); Beiboer et al., J. Mol. Biol., 296:833-849 (2000); Rader et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95:8910-8915 (1998); Barbas et al., J. Am. Chem. Soc. 116:2161-2162 (1994); Barbas et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92:2529-2533 (1995); Ditzel et al., J. Immunol. 157:739-749 (1996); Berezov et al., BIAjournal 8:Scientific Review 8 (2001); Igarashi et al., J. Biochem (Tokio) 117:452-7 (1995); Bourgeois et al., J. Virol 72:807-10 (1998); Levi et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:4374-8 (1993); Polymenis y Stoller, J. Immunol. 152:5218-5329 (1994) y Xu y Davis, Immunity 13:37-45 (2000). Véanse también, las patentes de los Estados Unidos con números 6.951.646; 6.914.128; 6.090.382; 6.818.216; 6.156.313; 6.827.925; 5.833.943; 5.762.905 y 5.760.185.
En consecuencia, los anticuerpos que se unen a LAG-3 humano incluyen la CDR2 de la región variable de la cadena pesada de LAG3.5 y al menos la CDR3 de la región variable de la cadena pesada y/o ligera de LAG3.5 (SEQ ID NO: 17 y/o 20), o la CDR3 de la región variable de la cadena pesada y/o ligera de otro anticuerpo LAG-3, en el que el anticuerpo es capaz de unirse específicamente a LAG-3 humano. Estos anticuerpos preferentemente (a) compiten por la unión; (b) retienen las características funcionales; (c) se unen al mismo epítopo; y/o (d) tienen una afinidad de unión similar a LAG3.5. Los anticuerpos más adicionales que se unen a LAG-3 humano pueden incluir además la CDR2 de la región variable de la cadena ligera de LAG3.5 (SEQ ID NO: 17 y/o 20), o la CDR2 de la región variable de la cadena ligera de otro anticuerpo LAG-3, en el que el anticuerpo es capaz de unirse específicamente a LAG-3 humano. Otros anticuerpos que se unen a LAG-3 humano pueden incluir además la CDR1 de la región variable de la cadena pesada y/o ligera de LAG3.5 (SEQ ID NO: 17 y/o 20), o la CDR1 de la región variable de la cadena pesada y/o ligera de otro anticuerpo LAG-3, en el que el anticuerpo es capaz de unirse específicamente a LAG-3 humano.
Modificaciones conservativas
Otros anticuerpos que se unen a LAG-3 humano pueden comprender que comprenden secuencias de la región variable de la cadena pesada y/o ligera o las secuencias de CDR1 CDR2 y CDR3 que difieren de las de LAG3.5 en una o más modificaciones conservativas. Se prefiere, sin embargo, que los restos 54 y 56 de la CDR2 de Vh siguen siendo arginina y serina, respectivamente (es decir, no están mutados). Se entiende en la técnica que pueden realizarse determinadas modificaciones conservativas de la secuencia que no eliminan la unión al antígeno.Véanse, por ejemplo,Brummell et al. (1993) Biochem 32:1180-8; de Wildt et al. (1997) Prot. Eng. 10:835-41; Komissarov et al. (1997) J. Biol. Chem. 272:26864-26870; Hall et al. (1992) J. Immunol. 149:1605-12; Kelley y O'Connell (1993) Biochem. 32:6862-35; Adib-Conquy et al. (1998) Int. Immunol. 10:341-6 y Beers et al. (2000) Clin. Can. Res. 6:2835-43. En consecuencia, el anticuerpo comprende la región variable de la cadena pesada que comprende las secuencias de CDR1 CDR2, y CDR3 y/o la región variable de la cadena ligera que comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3, en el que:
(a) la secuencia de CDR1 de la región variable de la cadena pesada comprende la SEQ ID NO: 15, y/o modificaciones conservativas de la misma, excepto en las posiciones 54 y 56; y/o
(b) la secuencia de CDR3 de la región variable de la cadena pesada comprende la SEQ ID NO: 17, y modificaciones conservativas de la misma; y/o
(c) las secuencias de la CDR1 y/o CDR2, y/o CDR3 de la región variable de la cadena ligera comprenden la SEQ ID NO: 18, y/o, SEQ ID NO: 19, y/o SEQ iD NO: 20, y/o modificaciones conservativas de la misma; y
(d) el anticuerpo se une específicamente a la LAG-3 humano.
De manera adicional o alternativa, el anticuerpo puede poseer una o más de las siguientes propiedades funcionales descritas anteriormente, tales como una elevada afinidad de unión a LAG-3 humano, unión a LAG-3 de mono, ausencia de unión a LAG-3 de ratón, la capacidad de inhibir la unión de LAG-3 con las moléculas MHC de clase II y la capacidad de estimular las respuestas de los linfocitos T específicos de antígeno.
El anticuerpo descrito en el presente documento puede ser, por ejemplo, un anticuerpo humano, humanizado o quimérico.
Tal como se usa en el presente documento, se entiende que la expresión "modificaciones conservativas de la secuencia" se refiere a modificaciones de aminoácidos que no afectan o alteran significativamente las características de unión al anticuerpo que contiene la secuencia de aminoácidos. Dichas modificaciones conservativas incluyen sustituciones, adiciones y deleciones de aminoácidos. Se pueden introducir modificaciones en un anticuerpo mediante técnicas normalizadas conocidas en la materia, tales como mutagénesis dirigida al sitio y mutagénesis mediada por PCR. Sustituciones de aminoácidos conservativas son aquellas en las que el resto de aminoácido se sustituye por un resto de aminoácido que tiene una cadena secundaria similar. Las familias de restos de aminoácidos que tienen cadenas secundarias similares se han definido en la técnica. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas secundarias básicas (por ejemplo, lisina, arginina, histidina), cadenas secundarias ácidas (por ejemplo, ácido aspártico, ácido glutámico), cadenas secundarias polares no cargadas (por ejemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína, triptófano), cadenas secundarias no polares (por ejemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina), cadenas secundarias beta-ramificadas (por ejemplo, treonina, valina, isoleucina) y cadenas secundarias aromáticas (por ejemplo, tirosina, fenilalanina, triptófano, histidina). De este modo, uno o más restos de aminoácidos en las regiones CDR de un anticuerpo se puede sustituir por otros restos de aminoácidos de la misma familia de cadena secundaria y se puede probar el anticuerpo alterado para la función retenida (es decir, las funciones anteriormente definidas) utilizando los ensayos funcionales descritos en el presente documento.
Anticuerpos genomanipulados y modificados
Se pueden preparar anticuerpos utilizando un anticuerpo que tiene una o más de las secuencias V<h>y/o V<l>de LAG3.5 como material de partida para genomanipular un anticuerpo modificado. Un anticuerpo puede genomanipularse modificando uno o más restos en una o ambas regiones variables (es decir, V<h>y/o V<l>), por ejemplo en una o más regiones CDR y/o en una o más regiones del marco. De manera adicional o alternativa, un anticuerpo puede genomanipularse modificando restos en la(s) región(es) constante(s), por ejemplo, para alterar la(s) función(es) efectora(s) del anticuerpo.
El injerto de la CDR se puede usar para genomanipular regiones variables de anticuerpos. Los anticuerpos interactúan con los antígenos diana predominantemente a través de restos de aminoácidos que se localizan en las seis regiones determinantes de la complementariedad (CDR) de la cadena pesada y la cadena ligera. Por este motivo, las secuencias de aminoácidos en las CDR son más diversas entre anticuerpos individuales que las secuencias fuera de las CDR. Como las secuencias de la CDR son responsables de la mayoría de las interacciones anticuerpo-antígeno, es posible expresar anticuerpos recombinantes que imiten las propiedades de los anticuerpos específicos que se producen naturalmente construyendo vectores de expresión que incluyan secuencias de la CDR del anticuerpo específico que se produce naturalmente injertado sobre las secuencias marco de un anticuerpo diferente con propiedades diferentes (véanse,por ejemplo,Riechmann et al. (1998) Nature 332:323-327; Jones et al. (1986) Nature 321:522-525; Queen et al. (1989) Proc. Natl. Acad. Véanse, U.S.A. 86:10029-10033; las patentes de Estados Unidos números 5.225.539; 5.530.101; 5.585.089; 5.693.762 y 6.180.370).
En consecuencia, otra realización de la invención hace uso de un anticuerpo monoclonal aislado, o porción de unión a antígeno del mismo, que comprende una región variable de la cadena pesada que comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 que comprenden las SEQ ID NO: 15, 16, 17, respectivamente, y una región variable de la cadena ligera que comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 que comprenden las SEQ ID NO: 18, 19, 20, respectivamente (es decir, las CDR de LAG3.5). Aunque estos anticuerpos contienen las secuencias de CDR de V<h>y V<l>del anticuerpo monoclonal LAG3.5, pueden contener diferentes secuencias marco.
Dichas secuencias marco pueden obtenerse a partir de bases de datos públicas del ADN o referencias publicadas que incluyen las secuencias génicas de anticuerpos de la línea germinal. Por ejemplo, las secuencias de ADN de la línea germinal de los genes de la región variable de la región pesada y ligera humana se pueden encontrar en la base de datos de la secuencia de la línea germinal humana "VBase" (disponible en internet en www.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase), así como en Kabat et al. (1991), citado anteriormente; Tomlinson et al. (1992) "The Repertoire of Human Germline VH Sequences Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops" J. Mol. Biol. 227:776-798; y Cox et al. (1994) "A Directory of Human Germ-line VH Segments Reveals a Strong Bias in their Usage" Eur. J. Immunol. 24:827-836. Como ejemplo adicional, se pueden encontrar en la base de datos Genbank las secuencias de ADN de la línea germinal para los genes de la región variable de la cadena pesada y ligera. Por ejemplo, las siguientes secuencias de la cadena pesada de la línea germinal que se encuentran en el ratón HCo7 HuMAb están disponibles con los números de registro del Genbank adjuntos: 1-69 (NG_0010109, NT_024637 y BC070333), 3-33 (NG_0010109 y NT_024637) y 3-7 (NG_0010109 & NT_024637). Como ejemplo adicional, las siguientes secuencias de la cadena pesada de la línea germinal que se encuentran en el ratón HCo 12 H uMAb están disponibles con los números de acceso del Genbank adjuntos: 1-69 (NG_0010109, NT_024637 y BC070333), 5-51 (NG_0010109 y NT_024637), 4 34 (NG_0010109 y NT_024637), 3-30.3 (CAJ556644) y 3-23 (AJ406678).
Las secuencias de proteínas del anticuerpo se compararon con una base de datos de secuencias de proteínas compiladas utilizando uno de los métodos de investigación de la similitud de secuencias denominado BLAST con huecos (Altschulet al.(1997),citado anteriormente),que es bien conocido por los expertos en la materia.
Las secuencias marco preferidas para su uso en los anticuerpos son aquellas que son estructuralmente similares a las secuencias marco utilizadas por los anticuerpos seleccionados,por ejemplo,similares a las secuencias marco 4 34 de V<h>y/o las secuencias marco L6 de V<k>utilizadas por los anticuerpos monoclonales preferidos. Las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de V<h>, y las secuencias de c Dr 1, CDR2, y CDR3 de V<h>, se pueden injertar sobre regiones marco que tienen una secuencia idéntica a la que se encuentra en el gel de la inmunoglobulina de la línea germinal de la que deriva la secuencia marco, o las secuencias de CDR se pueden injertar sobre regiones marco que contienen una o más mutaciones en comparación con las secuencias de la línea germinal. Por ejemplo, se ha descubierto que, en determinados casos, es beneficioso mutar restos en el interior de las regiones marco para mantener o potenciar la capacidad de unión al antígeno del anticuerpo (véanse, por ejemplo, las patentes de Estados Unidos con números 5.530.101; 5.585.089; 5.693.762 y 6.180.370).
Otro tipo de modificación de la región variable es mutar restos de aminoácidos en el interior de las regiones CDR1, CDR2 y/o CDR3 de V<h>y/o V<l>para mejorar de esta forma una o más propiedades de unión (por ejemplo, la afinidad) del anticuerpo de interés. La mutagénesis dirigida a sitio o la mutagénesis mediada por PCR pueden llevarse a cabo para introducir la(s) mutación(ones) y el efecto sobre la unión del anticuerpo, u otra propiedad funcional de interés, se puede evaluar en ensayosin vitro o in vivocomo se describe en el presente documento y se proporcionan en los Ejemplos. Se introducen modificaciones preferentemente conservativas (como se describe anteriormente). Las mutaciones pueden ser sustituciones, adiciones o deleciones de aminoácidos, pero son preferentemente sustituciones. Por otra parte, normalmente no se alteran más de uno, dos, tres, cuatro o cinco restos en una región CDR.
En consecuencia, los anticuerpos monoclonales aislados dirigidos contra LAG-3, o porciones de unión a antígeno de los mismos, pueden comprender una región variable de la cadena pesada que comprende: (a) una región CDR1 de V<h>que comprende la SEQ ID NO: 15, o una secuencia de aminoácidos que tiene una, dos, tres, cuatro o cinco sustituciones, deleciones o adiciones de aminoácidos en comparación con la SEQ ID NO: 15; (b) una región CDR2 de V<h>que comprende la SEQ ID NO: 16, o una secuencia de aminoácidos que tiene una, dos, tres, cuatro o cinco sustituciones, deleciones o adiciones de aminoácidos en comparación con la SEQ ID NO: 16 (preferentemente en la que las posiciones 54 y 56 son las mismas que en la SEQ ID NO:16); (c) una región CDR3 de V<h>que comprende la SEQ ID NO: 17, o una secuencia de aminoácidos que tiene una, dos, tres, cuatro o cinco sustituciones, deleciones o adiciones de aminoácidos en comparación con la SEQ ID NO: 17; (d) una región CDR1 de V<l>que comprende la SEQ ID NO: 18, o una secuencia de aminoácidos que tiene una, dos, tres, cuatro o cinco sustituciones, deleciones o adiciones de aminoácidos en comparación con la SEQ ID NO: 18; (e) una región CDR2 de V<l>. que comprende la SEQ ID NO: 19, o una secuencia de aminoácidos que tiene una, dos, tres, cuatro o cinco sustituciones, deleciones o adiciones de aminoácidos en comparación con la SEQ ID NO: 19; y (f) una región CDR3 de V<l>. que comprende la SEQ ID NO: 20, o una secuencia de aminoácidos que tiene una, dos, tres, cuatro o cinco sustituciones, deleciones o adiciones de aminoácidos en comparación con la SEQ ID NO: 20.
Los anticuerpos genomanipulados incluyen aquellos en los que se han realizado modificaciones en los restos marco dentro de V<h>y/o V<l>, por ejemplo, para mejorar las propiedades del anticuerpo. Normalmente, dichas modificaciones en el marco se realizan para disminuir la inmunogenicidad del anticuerpo. Por ejemplo, una solución es "retromutar" uno o más restos marco en la secuencia de la línea germinal correspondiente. Más específicamente, un anticuerpo que ha experimentado una mutación somática puede contener restos marco que difieren de la secuencia de la línea germinal a partir de la cual se deriva el anticuerpo. Dichos restos pueden identificarse comparando las secuencias marco del anticuerpo con las secuencias de la línea germinal a partir de la cual se deriva el anticuerpo.
Otro tipo de modificación del marco implica mutar uno o más restos en la región del marco, para eliminar los epítopos de los linfocitos T para reducir de esta forma la inmunogenicidad potencial del anticuerpo. Esta solución se denomina también "desinmunización" y se describe con mayor detalle en la publicación de patente de EE.UU. n.° 20030153043.
De forma adicional o alternativa a las modificaciones realizadas en las regiones marco, se pueden genomanipular los anticuerpos para incluir modificaciones en la región Fc, de forma típica para alterar una o más propiedades funcionales del anticuerpo, tales como la semivida en suero, la fijación del complemento, la unión al receptor Fc, y/o la citotoxicidad celular dependiente de antígeno. Además, un anticuerpo puede estar modificado químicamente (por ejemplo, se pueden unir uno o más restos químicos al anticuerpo) o modificarse para alterar su glicosilación, de nuevo para alterar una o más propiedades funcionales del anticuerpo. Cada una de estas realizaciones se describe en detalle a continuación. La numeración de los restos en la región Fc es la del índice de la UE de Kabat.
En una realización preferida, el anticuerpo es un anticuerpo isotipo IgG4 que comprende una mutación de serina a prolina en una posición correspondiente a la posición 228 (S228P; índice de la UE) en la región bisagra de la región constante de la cadena pesada. Se ha notificado que esta mutación elimina la heterogeneidad de los puentes disulfuro entre las cadenas pesada de la región bisagra (Angalet al.citado anteriormente; la posición 241 se basa en el sistema de numeración de Kabat).
En una realización, la región bisagra de CH1 se modifica de tal manera que el número de restos de cisteína en la región bisagra está alterado,por ejemplo,aumentado o disminuido. Esta solución se describe adicionalmente en la patente de Estados Unidos n.° 5.677.425. El número de restos de cisteína en la región bisagra de CH1 se altera para, por ejemplo, facilitar el ensamblaje de las cadenas ligera y pesada o para aumentar o disminuir la estabilidad del anticuerpo.
En otra realización, la región bisagra Fc de un anticuerpo se muta para disminuir la semivida biológica del anticuerpo. Más específicamente, se introducen una o más mutaciones de aminoácidos en la región de la interfase del dominio CH2-CH3 del fragmento bisagra Fc de tal manera que el anticuerpo tiene alterada la unión a la proteína A de estafilococo (SpA) con respecto a la unión de Spa al dominio de la bisagra de Fc natural. Esta solución se describe en detalle adicionalmente en la patente de Estados Unidos n.° 6.165.745.
En otra realización, el anticuerpo se modifica para aumentar su vida media biológica. Son posibles diversas soluciones. Por ejemplo, se pueden introducir una o más de las siguientes mutaciones: T252L, T254S, T256F, tal como se ha descrito en la patente de Estados Unidos n.° 6.277.375. Como alternativa, para aumentar la vida media biológica, el anticuerpo se puede alterar en la región CH1 o CL para que contenga un epítopo de unión al receptor de rescate a partir de dos bucles de un dominio CH2 de una región Fc de una IgG, como se describe en las patentes de Estados Unidos números 5.869.046 y 6.121.022.
En otras realizaciones más, la región Fc se altera sustituyendo al menos un resto de aminoácido por un resto de aminoácido diferente para alterar una o varias funciones efectoras del anticuerpo. Por ejemplo, uno o más aminoácidos seleccionados entre los restos de aminoácidos 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 y 322, se pueden sustituir por un resto de aminoácido diferente de tal manera que el anticuerpo tiene una afinidad alterada por el ligando de un efector pero retiene la capacidad de unión a antígeno del anticuerpo progenitor. El ligando efector cuya afinidad se altera puede ser, por ejemplo, un receptor Fc o el componente<c>I del complemento. Esta solución se describe en detalle además en las patentes de Estados Unidos números 5.624.821 y 5.648.260.
En otro ejemplo, uno o más aminoácidos seleccionados entre los restos de aminoácidos 329, 331 y 322 se pueden sustituir por resto de aminoácido diferente de tal manera que el anticuerpo tiene alterada la unión a Clq y/o reducida o eliminada la citotoxicidad dependiente del complemento (CDC). Esta solución se describe en detalle adicionalmente en la patente de Estados Unidos n.° 6.194.551.
En otro ejemplo, uno o más restos de aminoácidos en las posiciones de aminoácidos 231 y 239 se alteran para modificar de esta forma la capacidad del anticuerpo para fijar el complemento. Esta solución se describe adicionalmente en la publicación PCT WO 94/29351.
En otro ejemplo más, la región Fc se modifica para aumentar la capacidad del anticuerpo para mediar en la citotoxicidad dependiente de anticuerpo (ADCC) y/o aumentar la afinidad del anticuerpo por un receptor F<cy>modificando uno o más aminoácidos en las siguientes posiciones: 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307,
309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388,
389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 o 439. Esta solución se describe adicionalmente en la publicación
PCT WO 00/42072. Por otra parte, los sitios de unión en la IgG1 para FcyR1, FcyRII, FcyRIII y FcRn se han cartografiado y se han descrito las variantes con unión mejorada (véase Shields et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:6591-6604). Se ha mostrado mostró que las mutaciones específicas en las posiciones 256, 290, 298, 333, 334 y 339 mejoran la unión a FcyRIII. Asimismo, se mostró que las siguientes combinaciones de mutantes mejoran la unión a FcyRIII:
T256A/S298A, S298A/E333A, S298A/K224A y S298A/E333A/K334A.
En otra realización adicional más, la glicosilación de un anticuerpo se modifica. Por ejemplo, se puede preparar un anticuerpo aglicosilado (es decir, el anticuerpo carece de glicosilación). La glicosilación puede alterarse para, por ejemplo, aumentar la afinidad del anticuerpo por el antígeno. Dichas modificaciones de los hidratos de carbono se pueden llevar a cabo, por ejemplo, alterando uno o más sitios de glicosilación en la secuencia del anticuerpo. Por ejemplo, se pueden realizar una o más sustituciones de aminoácidos que dan como resultado la eliminación de uno o más sitios de glicosilación de la región variable del marco para eliminar de esta forma la glicosilación en ese sitio.
Dicha glicosilación puede aumentar la afinidad del anticuerpo por el antígeno.Véanse, por ejemplo,las patentes de Estados Unidos números 5.714.350 y 6.350.861.
De manera adicional o alternativa, puede prepararse un anticuerpo que tenga un tipo de glicosilación alterado, tal como un anticuerpo hipofucosilado que tenga cantidades reducidas de restos fucosilo o un anticuerpo que tenga estructuras GlcNac bisectrices aumentadas. Dichos modelos de glicosilación alterados han demostrado aumentar la capacidad de ADCC de los anticuerpos. Dichas modificaciones de los hidratos de carbono se pueden llevar a cabo, por ejemplo, expresando el anticuerpo en una célula hospedadora con una maquinaria de glicosilación alterada. Se han descrito en la técnica células con maquinaria de glicosilación alterada y se pueden usar como células hospedadoras en las cuales expresar anticuerpos recombinantes para producir de esta forma un anticuerpo con la glicosilación alterada. Por ejemplo, las líneas de células Ms704, Ms705, y Ms709 carecen del gen de la fucosiltransferasa, FUT8 (a (1,6)-fucosiltransferasa), de forma que los anticuerpos expresados en las líneas de células Ms704, Ms705, y Ms709 carecen de fucosa en sus hidratos de carbono. Las líneas de células Ms704, Ms705, y Ms709 FUT8'A se crearon mediante la perturbación dirigida del gen FUT8 en células CHO/DG44 utilizando dos vectores de sustitución (véase la publicación de patente de los Estados Unidos n.° 20040110704 y Yamane-Ohnuki et al., (2004) Biotechnol Bioeng 87:614-22). Como ejemplo adicional, el documento EP 1.176.195 describe una línea de células con un gen FUT8 perturbado funcionalmente, que codifica una fucosil transferasa, de tal manera que los anticuerpos expresados en dicha línea de células presentan hipofucosilación debido a la reducción o eliminación de la enzima relacionada con el enlace a-1,6. El documento EP 1.176.195 describe también líneas de células que tienen una baja actividad enzimática para añadir fucosa a la N-acetilglucosamina que se une a la región Fc del anticuerpo, o que no tienen actividad enzimática, por ejemplo, la línea de células YB2/0 de mieloma de rata (ATCC CRL 1662). La publicación PCT WO 03/035835 describe una variante de la línea de células CHO, células Lec13, con capacidad reducida para atacar la fucosa en hidratos de carbono unidos a Asn(297), dando como resultado también la hipofucosilación de anticuerpos expresados en esta célula hospedadora (véase también Shields et al., (2002) J. Biol.
Chem. 277:26733-26740). Pueden producirse también anticuerpos con un perfil de glicosilación modificado en huevos de pollo, tal como se describe en la publicación PCT WO 06/089231. Como alternativa, pueden producirse anticuerpos con un perfil de glicosilación modificado en células vegetales, tales comoLemna.Los métodos para la producción de anticuerpos en un sistema de planta se desvelan en la solicitud de patente de los Estados Unidos que corresponde a
Alston & Bird LLP con el n.° de referencia del apoderado 040989/314911, presentada el 11 de agosto de 2006. La publicación PCT WO 99/54342 describe líneas de células genomanipuladas para expresar las glicosil transferasas modificadoras de glicoproteínas (por ejemplo, p(1,4)-N-acetilglucosaminiltransferasa III (GnTIII)), de tal manera que
los anticuerpos expresados en las líneas de células genomanipuladas presentan estructuras GIcNac bisectrices aumentadas que dan como resultado una actividad ADCC aumentada de los anticuerpos (véase también Umana et al., (1999) Nat. Biotech. 17:176-180). Como alternativa, los restos de fucosa del anticuerpo pueden escindirse utilizando una enzima fucosidasa;por ejemplo,la fucosidasa a-L-fucosidasa elimina restos fucosilo de los anticuerpos (Tarentino et al. (1975) Biochem. 14:5516-23).
Otra modificación de los anticuerpos en el presente documento que se contempla en esta divulgación es la pegilación. Un anticuerpo puede pegilarse para, por ejemplo, aumentar la semivida biológica (por ejemplo, en suero) del anticuerpo. Para pegilar un anticuerpo, el anticuerpo, o uno de sus fragmentos, normalmente se hace reaccionar con polietilenglicol (PEG), tal como un derivado de éster reactivo o aldehido de PEG, en condiciones en las que uno o más grupos de PEG quedan unidos al anticuerpo o fragmento de anticuerpo. Preferentemente, la pegilación se lleva a cabo mediante una reacción de acilación o una reacción de alquilación con una molécula de PEG reactiva (o un polímero reactivo análogo soluble en agua). Tal como se usa en el presente documento, se pretende que el término "polietilenglicol" abarque cualquiera de las formas de PEG que se han utilizado para derivatizar otras proteínas, tales como mono (C1-C10) alcoxi- o ariloxi-polietilenglicol o polietilenglicol-maleimida. En determinadas realizaciones, el anticuerpo que se va a pegilar es un anticuerpo aglicosilado. Se conocen en la técnica los métodos para pegilar proteínas y se pueden aplicar a los anticuerpos para su uso en la invención.Véanse, por ejemplo,los documentos EP 0 154316 y EP 0401 384.
Propiedades físicas de los anticuerpos
Los anticuerpos pueden caracterizarse por sus diversas propiedades físicas, para detectar y/o diferenciar las diferentes clases de los mismos.
Por ejemplo, los anticuerpos pueden contener uno o más sitios de glicosilación tanto en la región variable de la cadena ligera como en la región variable de la cadena pesada. Dichos sitios de glicosilación pueden dar como resultado una inmunogenicidad aumentada del anticuerpo o una alteración de la pK del anticuerpo debido a la unión a antígeno alterada (Marshall et al. (1972) Annu Rev Biochem 41:673-702; Gala y Morrison (2004) J Immunol 172:5489-94; Wallick et al. (1988) JExp Med 168:1099-109; Spiro (2002) Glycobiology 12:43R-56R; Parekh et al. (1985) Nature 316:452-7; Mimura et al. (2000) Mol Immunol 37:697-706). Se sabe que la glicosilación se produce en motivos que contienen una secuencia N-X-S/T. En algunos casos, se prefiere tener un anticuerpo dirigido contra LAG-3 que no contiene la glicosilación de la región variable. Esto se puede conseguir tanto seleccionando anticuerpos que no contienen el motivo de glicosilación en la región variable como mutando restos en la región de glicosilación.
En una realización preferida, los anticuerpos no contienen sitios de isomerismo de la asparagina. Se puede producir la desamidación de la asparagina en secuencias N-G o D-G y dar como resultado la creación de un resto de ácido isoaspártico que introduce un pliegue en la cadena polipeptídica y disminuye su estabilidad (efecto del ácido isoaspártico).
Cada anticuerpo tendrá un único punto isoeléctrico (pl), que generalmente se encuentra en el intervalo de pH entre 6 y 9,5. El pl de un anticuerpo IgG1 se encuentra normalmente en el intervalo de pH de 7-9,5 y el pl de un anticuerpo IgG4 que se encuentra normalmente en el intervalo de pH de 6-8. Se especula que los anticuerpos con un pl fuera del intervalo normal pueden tener algún desplegado e inestabilidad en las condicionesin vivo.De este modo, se prefiere tener un anticuerpo dirigido contra LAG-3 que contenga un valor de pl comprendido en el intervalo normal. Esto se puede conseguir ya sea seleccionando anticuerpos con un pl en el intervalo normal o bien mutando los restos de superficies cargadas.
Moléculas de ácidos nucleicos que codifican anticuerpos
En otro aspecto, se describen moléculas de ácidos nucleicos que codifican las regiones variables de la cadena pesada y/o la cadena ligera, o las CDR, de los anticuerpos para su uso en la invención. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en células completas, en un lisado celular, o en una forma parcialmente purificada o sustancialmente pura. Un ácido nucleico se "aísla" o se "vuelve sustancialmente puro" cuando se purifica de otros componentes celulares u otros contaminantes,por ejemplo,otros ácidos nucleicos o proteínas celulares, mediante técnicas convencionales, incluyendo tratamiento alcalino/con SDS, formación de bandas de CsCl, cromatografía en columna, electroforesis en gel de agarosa y otras bien conocidas en la materia.Véanse,Ausubel, et al., ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing y Wiley Interscience, Nueva York. Un ácido nucleico para su uso en la invención puede ser,por ejemplo,ADN o ARN y puede contener o no secuencias intrónicas. Se prefiere que el ácido nucleico sea una molécula de ADNc.
Los ácidos nucleicos para su uso en la invención pueden obtenerse usando técnicas de biología molecular convencionales. Para los anticuerpos expresados por hibridomas (por ejemplo, hibridomas preparados a partir de ratones transgénicos que contienen genes de la inmunoglobulina humana como se describe en detalle a continuación), se pueden obtener los ADNc que codifican las cadenas ligera y pesada del anticuerpo preparado mediante el hibridoma mediante técnicas de amplificación de la PCR o de clonación del ADNc convencionales. Para los anticuerpos obtenidos de una genoteca de inmunoglobulina (por ejemplo, utilizando técnicas de expresión en fago), se puede recuperar un ácido nucleico que codifica dichos anticuerpos de la genoteca.
Las moléculas de ácidos nucleicos preferidas para su uso en la invención incluyen aquellas que codifican las secuencias Vh y Vl del anticuerpo monoclonal LAG3.5 (SEQ ID NO: 35 y 37, respectivamente) o las CDR. Una vez que se obtienen los fragmentos de ADN que codifican los segmentos V<h>y V<l>, estos fragmentos de ADN pueden manipularse adicionalmente mediante técnicas de ADN recombinante convencionales, por ejemplo, para convertir los genes de la región variable en genes de la cadena del anticuerpo de longitud completa, en genes del fragmento Fab o en un gen de scFv. En estas manipulaciones, un fragmento de ADN que codifica Vl o Vh está unido operativamente a otro fragmento de ADN que codifica otra proteína, tal como una región constante de anticuerpo o un enlazador flexible. Se pretende que la expresión "unido operablemente", como se usa en este contexto, que signifique que los dos fragmentos de ADN están unidos de tal manera que las secuencias de aminoácidos codificadas por los dos fragmentos de ADN permanecen en marco.
El ADN aislado que codifica la región Vh puede convertirse en un gen de la cadena pesada de longitud completa uniendo operativamente el ADN que codifica la VH con otra molécula de ADN que codifica las regiones constantes de la cadena pesada (CH1, CH2 y CH3). Las secuencias de los genes de la región constante de la cadena pesada humana se conocen en la materia (véase por ejemplo, Kabat et al. (1991), citado anteriormente) y los fragmentos de ADN que abarcan estas regiones se pueden obtener mediante amplificación de la PCR convencional. La región constante de la cadena pesada puede ser una región constante de IgG 1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM o IgD, pero con máxima preferencia, es una región constante de IgG1 o IgG4. Para un gen de la cadena pesada del fragmento Fab, el ADN que codifica la Vh puede estar unido operativamente a otra molécula de ADN que codifica solamente la región constante CH1 de la cadena pesada.
El ADN aislado que codifica la región Vl puede convertirse en un gen de la cadena ligera de longitud completa (así como un gen de la cadena ligera de Fab) uniendo operativamente el ADN que codifica la VL con otra molécula de ADN que codifica la región constante de la cadena ligera, CL. Las secuencias de los genes de la región constante de la cadena ligera humana se conocen en la materia (véase, por ejemplo, Kabat et al., citado anteriormente) y los fragmentos de ADN que abarcan estas regiones se pueden obtener mediante amplificación de la PCR convencional. Se prefiere que la región constante de la cadena ligera puede ser una región constante kappa o lambda.
Para crear un gen scFv, los fragmentos de ADN que codifican V<h>y V<l>están unidos operativamente a otro fragmento que codifica un enlazador flexible,por ejemplo,que codifica la secuencia de aminoácidos (Gly4-Ser)3 (SEQ ID NO: 28), de tal manera que las secuencias Vh y Vl puedan expresarse como una proteína monocatenaria contigua, con las regiones V<l>y V<h>unidas por el enlazador flexible (véase, por ejemplo, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., (1990) Nature 348:552-554).
Producción de anticuerpos monoclonales
Los anticuerpos monoclonales (mAb) para su uso en la presente invención pueden producirse utilizando la técnica de hibridación de células somáticas (hibridoma) bien conocida de Kohler y Milstein (1975) Nature 256: 495. Otras vías para producir anticuerpos monoclonales incluyen la transformación vírica u oncogénica de linfocitos B y las técnicas de expresión en fagos. Los anticuerpos quiméricos o humanizados también son bien conocidos en la materia. Véanse por ejemplo, las patentes de Estados Unidos con números 4.816.567; 5.225.539; 5.530.101; 5.585.089; 5.693.762 y 6.180.370.
Se prefiere que los anticuerpos invención sean anticuerpos monoclonales humanos. Tales anticuerpos monoclonales humanos dirigidos contra LAG-3 humano pueden generarse utilizando ratones transgénicos o transcromosómicos que contienen partes del sistema inmunitario humano en lugar del sistema de ratón. Estos ratones transgénicos y transcromosómicos incluyen los ratones denominados en el presente documento como HuMAb Mouse®y KM Mouse®, respectivamente, y que se denominan colectivamente en el presente documento como "ratones Ig humanos".
El HuMAb Mouse® (Medarex®, Inc.) contiene miniloci del gen de la inmunoglobulina humana que codifican las secuencias de la cadena pesada (|j y y) y la cadena ligera k no reordenadas de la inmunoglobulina humana, junto con mutaciones dirigidas que inactivan los loci endógenos de las cadenas j y k (véase, por ejemplo, Lonberg et al. (1994) Nature 368(6474): 856-859). En consecuencia, los ratones presentan una expresión reducida de la IgM o k, de ratón y, en respuesta a la inmunización, los transgenes de la cadena pesada y ligera humana introducidos experimentan un cambio de clase y una mutación somática para generar anticuerpos monoclonales IgGK humanos de elevada afinidad (Lonberget al.(1994),citado anteriormente);revisado en Lonberg (1994) Handbook of Experimental Pharmacology 113:49-101; Lonberg, N. y Huszar, D. (1995) Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93, y Harding y Lonberg (1995) Ann. N. Y. Acad. Sci. 764:536-546). La preparación y uso del HuMAb Mouse®, y las modificaciones genómicas realizadas mediante dichos ratones, se describe adicionalmente en Taylor et al. (1992) Nucleic Acids Research 20:6287-6295; Chen et al. (1993) International Immunology 5: 647-656; Tuaillon et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:3720-3724; Choi et al. (1993) Nature Genetics 4:117-123; Chen et al. (1993) EMBO J. 12: 821-830; Tuaillon et al. (1994) J. Immunol. 152:2912-2920; Taylor et al. (1994) International Immunology 6: 579-591; y Fishwild et al. (1996) Nature Biotechnology 14: 845-851. Véanse además, las patentes de Estados Unidos con números 5.545.806; 5.569.825; 5.625.126; 5.633.425; 5.789.650; 5.877.397; 5.661.016; 5.814.318; 5.874.299; 5.770.429; y 5.545.807; publicaciones PCT números WO 92/03918; WO 93/12227; WO 94/25585; WO 97/13852; WO 98/24884; WO 99/45962 y WO 01/14424.
Los anticuerpos humanos pueden sensibilizarse utilizando un ratón que contiene secuencias de la inmunoglobulina humana en transgenes y transcromosomas, tales como un ratón que contiene un transgén de la cadena pesada humana y un transcromosoma de la cadena ligera humana. Este ratón se denomina en el presente documento "ratón KM®" y se describe en detalle en la publicación PCT WO 02/43478. Una forma modificada de este ratón, que comprende además una perturbación homocigótica del gen del receptor FcyRIIB endógeno, se describe también en la publicación PCT WO 02/43478 y se denomina en el presente documento como "ratón KM/FCGR2D®". Además, se pueden usar cualquiera de los transgenes de la cadena pesada HCo7 o HCo12 o ambos.
Los animales transgénicos incluyen el Xenomouse (Abgenix, Inc., patentes de Estados Unidos con números 5.939.598; 6.075.181; 6.114.598; 6.150.584 y 6.162.963). Los animales adicionales incluyen "ratones TC" (Tomizuka et al., (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:722-727) y vacas que contienen transcromosomas de la cadena pesada y la cadena ligera humanas (Kuroiwa et al. (2002) Nature Biotechnology 20:889-894; publicación PCT WO 02/092812).
Se pueden preparar anticuerpos monoclonales humanos utilizando métodos de expresión en fagos para seleccionar genotecas de la inmunoglobulina humana.Véanse,por ejemplo, las patentes de Estados unidos números 5.223.409; 5.403.484; 5.571.698; 5.427.908; 5.580.717; 5.969.108; 6.172.197; 5.885.793; 6.521.404; 6.544.731; 6.555.313; 6.582.915; y 6.593.081.
También se pueden preparar anticuerpos monoclonales humanos utilizando ratones SCID en los que se han reconstituido células inmunitarias humanas de tal manera que se puede generar una respuesta de anticuerpos humanos tras la inmunización.Véanse, por ejemplo,las patentes de Estados Unidos números 5.476.996 y 5.698.767.
Se pueden preparar también anticuerpos dirigidos contra LAG-3 humanos utilizando la expresión en fagos donde los fagos comprenden ácidos nucleicos que codifican anticuerpos generados en animales transgénicos anteriormente inmunizados con LAG-3. Se prefiere que el animal transgénico es un ratón HuMab, ratón KM, o ratón Kirin.Véase,por ejemplo, la patente de Estados Unidos n.° 6.794.132.
Inmunización de ratones Ig humanos
En un ejemplo, los ratones Ig humanos se inmunizan con una preparación purificada o enriquecida de un antígeno de LAG-3, proteína LAG-3 recombinante, o células que expresan la proteína LAG-3.Véanse, por ejemplo,Lonberget al.(1994), citado anteriormente; Fishwildet al.(1996), citado anteriormente; las publicaciones Pc T WO 98/24884 y WO 01/14424. Se prefiere que los ratones de 6-16 semanas de edad se inmunicen con 5-50 |jg de proteína LAG-3. Como alternativa, se usó una porción de LAG-3 fusionada a un polipéptido no LAG-3.
Los ratones transgénicos se pueden inmunizar por vía intraperitoneal (IP) o intravenosa (IV) con un antígeno de LAG-3 en adyuvante completo de Freund, seguido por inmunizaciones posteriores IP o IV con antígeno en adyuvante incompleto de Freund. Se pueden usar adyuvantes diferentes de los de Freund o células completas en ausencia de adyuvante. El plasma se puede cribar mediante ELISA y se pueden usar células de ratones con suficientes títulos de inmunoglobulina dirigida contra LAG-3 humano para las fusiones.
Generación de hibridomas productores de anticuerpos monoclonales humanos
Para generar hibridomas productores de anticuerpos monoclonales humanos para su uso en la invención, se pueden aislar esplenocitos y/o células de ganglios linfáticos de ratones inmunizados y fusionarse en una línea de células inmortalizadas adecuadas, tal como una línea celular de mieloma de ratón. Los hibridomas resultantes pueden cribarse según la producción de anticuerpos específicos de antígenos. La generación de hibridomas es bien conocida en la materia.Véase, por ejemplo,Harlow y Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, Nueva York.
Generación de transfectomas productores de anticuerpos monoclonales
También se pueden producir anticuerpos para su uso en la invención en un transfectoma de una célula hospedadora utilizando, por ejemplo, una combinación de técnicas de ADN recombinante y métodos de transfección génica como se conoce bien en la técnica (por ejemplo, Morrison, S. (1985) Science 229:1202). El ADN que codifica las cadenas ligera y pesada de longitud parcial o completa obtenidas mediante técnicas de biología molecular convencionales puede insertarse en uno o más vectores de expresión de tal manera que los genes están unidos operativamente a secuencias reguladoras de la transcripción y la traducción. En este contexto, se pretende que el término "unido operativamente" signifique que un gen de un anticuerpo está ligado en un vector de tal manera que las secuencias control de la transcripción y la traducción comprendidas en el vector sirvan para su función prevista de regular la transcripción y la traducción del gen del anticuerpo.
Se pretende que el término "secuencia reguladora" incluya promotores, potenciadores y otros elementos de control de la expresión (por ejemplo, señales de poliadenilación) que controlan la transcripción o la traducción de los genes de la cadena del anticuerpo. Dichas secuencias reguladoras se describen,por ejemplo,en Goeddel (Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990)). Las secuencias reguladoras preferidas para la expresión en una célula hospedadora de mamífero incluyen elementos víricos que dirigen elevados niveles de expresión de proteínas en células de mamífero, tales como promotores y/o potenciadores derivados de citomegalovirus (CMV), virus 40 de simio (VS40), adenovirus, (por ejemplo, el promotor tardío mayor de adenovirus (AdMLP) y el polioma. Como alternativa, se pueden usar secuencias reguladoras no víricas, tales como el promotor de la ubiquitina o el promotor de la globina p. Además, elementos reguladores compuestos de secuencias de diferentes fuentes, tales como el sistema promotor SRa, que contiene secuencias del promotor temprano del SV40 y de la repetición terminal larga del virus de la leucemia de linfocitos T de tipo 1 (Takebe et al. (1988) Mol. Cell. Biol. 8:466-472). El vector de expresión y las secuencias control de la expresión se seleccionan para que sean compatibles con la expresión de la célula hospedadora utilizada.
Se pueden insertar el gen de la cadena ligera del anticuerpo y el gen de la cadena pesada del anticuerpo en el mismo vector o en vectores de expresión separados. Se prefiere que se usen las regiones variables para crear genes de anticuerpo de longitud completa de cualquier isotipo de anticuerpo insertándolos en vectores de expresión que ya codifican las regiones constantes de la cadena pesada y las regiones constantes de la cadena ligera del isotipo deseado de tal manera que el segmento Vh está unido operativamente al(a los) segmento(s) Ch dentro del vector, y el segmento Vl está unido operativamente al segmento Cl dentro del vector. De manera adicional o alternativa, el vector de expresión recombinante puede codificar un péptido señal que facilita la secreción de la cadena de anticuerpo desde la célula hospedadora. El gen de la cadena de anticuerpo puede clonarse en el vector de tal manera que el péptido señal se una en marco al extremo amino del gen de la cadena del anticuerpo. El péptido señal puede ser un péptido señal de la inmunoglobulina o un péptido señal heterólogo (es decir, un péptido señal de una proteína no de inmunoglobulina).
Además de los genes de la cadena de anticuerpo y las secuencias reguladoras, los vectores de expresión recombinante pueden contener secuencias adicionales, tales como secuencias que regulan la replicación del vector en células hospedadoras (por ejemplo, orígenes de replicación) y genes marcadores seleccionables. El gen marcador seleccionable facilita la selección de células hospedadoras en las que se ha introducido el vector (véanse,por ejemplo,las patentes de Estados Unidos números 4.399.216; 4.634.665 y 5.179.017). Por ejemplo, de forma típica, el gen marcador seleccionable transmite resistencia a fármacos, tales como G418, higromicina o metotrexato, o una célula hospedadora en la que se ha introducido el vector. Los genes marcadores seleccionables preferidos incluyen el gen de la dihidrofolato reductasa (DHFR) (para su uso en las células hospedadoras dhfr con selección/amplificación por metotrexato) y el gen neo (para la selección de G418).
Para la expresión de las cadenas ligera y pesada, el(los) vector(es) de expresión que codifica(n) las cadenas pesada y ligera se transfecta(n) en una célula hospedadora mediante técnicas convencionales. Se pretende que las diversas formas del término "transfección" abarquen una amplia variedad de técnicas comúnmente utilizadas para la introducción de ADN exógeno en una célula hospedadora procariota o eucariota,por ejemplo,electroporación, precipitación con fosfato de calcio, transfección mediante DEAE-dextrano y similares. Aunque es teóricamente posible expresar los anticuerpos tanto en células hospedadoras procariotas como eucariotas, la expresión de anticuerpos en células eucariotas, y lo más preferente en células hospedadoras de mamífero, es la más preferida debido a que dichas células eucariotas, y en particular células de mamífero, son más propensas que las células procariotas a ensamblarse y secretar un anticuerpo correctamente plegado e inmunológicamente activo.
Las células hospedadoras de mamífero preferidas para expresar los anticuerpos recombinantes incluyen células de ovario de hámster chino (células CHO) (incluyendo células CHO dhfr, descritas en Urlaub y Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220, utilizadas con un marcador seleccionable DHFR,por ejemplo,como se describe en R. J. Kaufman y P. A. Sharp (1982) J. Mol. Biol. 159:601-621), células NSO de mieloma, células COS y células SP2. En particular, para su uso en células NSO de mieloma, otro sistema de expresión preferido es el sistema de expresión génica GS desvelado en los documentos WO 87/04462, WO 89/01036, y<e>P 338.841. Cuando los vectores de expresión recombinante que codifican genes de anticuerpo se introducen en células hospedadoras de mamífero, se producen los anticuerpos cultivando las células hospedadoras durante un periodo de tiempo suficiente para permitir la expresión del anticuerpo en las células hospedadoras o, más preferentemente, la secreción del anticuerpo en el medio de cultivo en el que se hacen crecer células hospedadoras. Los anticuerpos se pueden recuperar del medio de cultivo utilizando métodos de purificación de proteínas convencionales.
Inmunoconjugados
Los anticuerpos pueden conjugarse con un agente terapéutico para formar un inmunoconjugado tal como un conjugado de anticuerpo-fármaco (ADC). Los agentes terapéuticos adecuados incluyen antimetabolitos, agentes alquilantes, aglutinantes de la ranura menor del ADN, intercalantes de ADN, reticuladores del ADN, inhibidores de la histona desacetilasa, inhibidores de la exportación nuclear, inhibidores de los proteosomas, inhibidores de la topoisomerasa I o II, inhibidores de la proteína de choque térmico, inhibidores de la tirosina quinasa, antibióticos, y agentes antimitóticos. En el ADC, el anticuerpo y el agente terapéutico se conjugan preferentemente mediante un enlazador escindible tal como un enlazador de peptidilo, disulfuro, o hidrazona. Más preferentemente, el enlazador es un enlazador de peptidilo tal como Val-Cit, Ala-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Pro-Val-Gly-Val-Val (SEQ ID NO: 39), Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Ala-Ala-Asn, Cit-Cit, Val-Lys, Lys, Cit, Ser, o Glu. Los ADC se pueden preparar como se describe en las patentes de Estados Unidos números 7.087.600; 6.989.452; y 7.129.261; las publicaciones PCT WO 02/096910; WO 07/038658; WO 07/051081; WO 07/059404; WO 08/083312; y WO 08/103693; publicaciones de patente de Estados Unidos 20060024317; 20060004081; y 20060247295.
Moléculas biespecíficas
En otro aspecto, la presente descripción presenta moléculas biespecíficas que comprenden uno o más anticuerpos unidos a al menos una molécula funcional distinta, por ejemplo, otro péptido o proteína (por ejemplo, otro anticuerpo o ligando para un receptor) para generar una molécula biespecífica que se une a al menos dos sitios de unión o moléculas diana diferentes. De este modo, como se usa en el presente documento, "molécula biespecífica" incluye moléculas que tienen tres o más especificidades. Se prefiere que la molécula biespecífica comprende una primera especificidad de unión por LAG-3 y una segunda especificidad de unión por una molécula estimuladora que recluta células efectoras citotóxicas que pueden destruir una célula diana que expresa LAG-3. Los ejemplos de moléculas estimulantes adecuadas son CD64, CD89, CD16, y CD3.Véase, por ejemplo,Kufer et al., TRENDS in Biotechnology, 22 (5), 238-244 (2004).
Una molécula biespecífica puede tener, además de la especificidad de unión dirigida contra Fc y una especificidad de unión dirigida contra LAG-3, una tercera especificidad. La tercera especificidad puede ser para un factor antipotenciación (EF),por ejemplo,una molécula que se une a una proteína superficial implicada en la actividad citotóxica y que aumenta de esta forma la respuesta inmunitaria contra la célula diana. Por ejemplo, el factor antipotenciación se puede unir a un linfocito T citotóxico (por ejemplo, mediante CD2, CD3, CD8,<c>D28, CD4, CD40, o ICAM-1) u otra célula inmunitaria, dando como resultado una respuesta inmunitaria aumentada contra la célula diana.
Las moléculas biespecíficas pueden estar en muchos formatos y tamaños diferentes. En un extremo del espectro de tamaños, una molécula biespecífica retiene el formato de anticuerpo tradicional, excepto que, en vez de tener dos brazos de unión de especificidad idéntica, tiene dos brazos de unión teniendo cada uno una especificidad diferente. En el otro extremo están las moléculas biespecíficas que consisten en dos fragmentos de anticuerpos monocatenarios (scFv) unidos mediante una cadena peptídica, lo que se denomina una construcción Bs(scFv)2. Las moléculas biespecíficas de tamaño intermedio incluyen dos fragmentos F(ab) diferentes unidos por un enlazador de peptidilo. Las moléculas biespecíficas de estos y otros formatos pueden prepararse mediante ingeniería genética, hibridación somática, o métodos químicos.Véase, por ejemplo,Kuferet al.,citado anteriormente; Cao y Suresh, Bioconjugate Chemistry, 9 (6), 635-644 (1998); y van Spriel et al., Immunology Today, 21 (8), 391-397 (2000), y las referencias citadas en el anterior.
Composiciones farmacéuticas
En otro aspecto, la presente descripción proporciona una composición farmacéutica que comprende uno o más anticuerpos formulados junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición puede contener opcionalmente uno o más principios farmacéuticamente activos adicionales, tales como otro anticuerpo o un fármaco. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden también administrarse en un tratamiento combinado con, por ejemplo, otro agente inmunoestimulante, agente anticanceroso, un agente antivírico, o una vacuna, de tal manera que el anticuerpo dirigido contra LAG-3 potencia la respuesta inmunitaria contra la vacuna.
La composición farmacéutica puede comprender cualquier número de excipientes. Los excipientes que se pueden usar incluyen vehículos, agentes tensioactivos, agentes espesantes o emulsionantes, aglutinantes sólidos, adyuvantes de la dispersión o suspensión, solubilizantes, colorantes, agentes aromatizantes, recubrimientos, agentes disgregantes, lubricantes, edulcorantes, conservantes, agentes isotónicos, y combinaciones de los mismos. La selección y uso de excipientes adecuados se contempla en Gennaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a Ed. (Lippincott Williams y Wilkins 2003).
Preferentemente, la composición farmacéutica es adecuada para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, espinal o epidérmica (por ejemplo, mediante inyección o infusión). Dependiendo de la ruta de administración, el principio activo puede revestirse con un material para protegerle de la acción de los ácidos y otras condiciones naturales que pudieran inactivarlo. La frase "administración parenteral" como se usa en el presente documento significa modos de administración diferentes de la administración entérica y tópica, usualmente mediante inyección, e incluye, sin limitación, inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardiaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural e intraesternal. Como alternativa, un anticuerpo puede administrarse mediante una ruta no parenteral, tal como una ruta de administración tópica, epidérmica o mucosal,por ejemplo,por vía intranasal, oral, vaginal, rectal, sublingual o tópica.
Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden incluir sales farmacéuticamente aceptables. Una "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que retiene la actividad biológica deseada del compuesto precursor y no trasmite ningún efecto toxicológico indeseado. Los ejemplos de dichas sales incluyen sales de adición de ácido y sales de adición de base. Las sales de adición de ácido incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos no tóxicos, tales como ácido clorhídrico, nítrico, fosfórico, sulfúrico, bromhídrico, yodhídrico, fosforoso y similares, así como de ácidos orgánicos no tóxicos tales como ácidos alifáticos monocarboxílicos y dicarboxílicos, ácidos alcanoicos sustituidos con fenilo, ácidos hidroxialcanoicos, ácidos aromáticos, ácidos alifáticos y aromáticos sulfónicos y similares. Las sales de adición de base incluyen aquellas derivadas de metales alcalinotérreos, tales como sodio, potasio, magnesio, calcio y similares, así como de aminas orgánicas no tóxicas, tales como N,N'-dibenciletilendiamina, N-metilglucamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, procaína y similares.
Las composiciones farmacéuticas pueden estar en la forma de soluciones o dispersiones acuosas estériles. Se pueden formular también en una microemulsión, liposoma, u otra estructura ordenada adecuada para una concentración de fármaco elevada.
La cantidad de principio activo que puede combinarse con un material vehículo para producir una forma farmacéutica unitaria variará dependiendo del sujeto que se está tratando y del modo de administración concreto y será generalmente la cantidad de la composición que produce un efecto terapéutico. Generalmente, más allá del cien por ciento, esta cantidad variará desde aproximadamente 0,01 % a aproximadamente noventa y nueve por ciento de principio activo, preferentemente desde aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 70 %, lo más preferente desde aproximadamente 1 % a aproximadamente 30 % de principio activo, junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica). Por ejemplo, se puede administrar un único bolo, se pueden administrar varias dosis divididas en el tiempo o se puede reducir o aumentar la dosis proporcionalmente según indiquen las exigencias de la situación terapéutica. Es especialmente ventajoso formular las composiciones parenterales en una forma farmacéutica unitaria para facilitar la administración y la uniformidad de la dosificación. La forma farmacéutica unitaria como se usa en el presente documento se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para los sujetos que se van a tratar; cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado junto con el vehículo farmacéutico requerido. Como alternativa, el anticuerpo se puede administrar como una formulación de liberación sostenida, en cuyo caso se requiere una administración menos frecuente.
Para la administración del anticuerpo, los intervalos de dosificación serán desde aproximadamente 0,0001 a 100 mg/kg, y más usualmente 0,01 a 5 mg/kg, del peso corporal del hospedador. Por ejemplo, las dosificaciones pueden ser de 0,3 mg/kg de peso corporal, 1 mg/kg de peso corporal, 3 mg/kg de peso corporal, 5 mg/kg de peso corporal o 10 mg/kg de peso corporal o comprendidas en el intervalo de 1-10 mg/kg. Un régimen de tratamiento ilustrativo conlleva la administración una vez por semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas, una vez al mes, una vez cada 3 meses o una vez cada tres a 6 meses. Los regímenes de dosificación preferidos para un anticuerpo dirigido contra LAG-3 incluyen 1 mg/kg de peso corporal o 3 mg/kg de peso corporal mediante administración intravenosa, administrándose el anticuerpo usando uno de los siguientes calendarios de dosificación: (i) cada cuatro semanas para seis dosificaciones, a continuación cada tres meses; (ii) cada tres semanas; (iii) 3 mg/kg de peso corporal una vez seguido por 1 mg/kg de peso corporal cada tres semanas. En algunos métodos, la dosificación se ajusta para conseguir una concentración de anticuerpo en plasma de aproximadamente 1-1000 |jg /ml y en algunos métodos aproximadamente 25-300 jg /ml.
Una "dosificación terapéuticamente eficaz" de un anticuerpo dirigido contra LAG-3 de la invención da como resultado preferentemente una disminución en la gravedad de los síntomas de la enfermedad, un aumento en la frecuencia y la duración de los periodos exentos de síntomas de la enfermedad, o una prevención del deterioro o la discapacidad debidos a la afección de la enfermedad. Por ejemplo, para el tratamiento de los sujetos que tienen tumores, una "dosificación terapéuticamente eficaz" inhibe preferentemente el crecimiento del tumor en al menos aproximadamente un 20 %, más preferentemente en al menos aproximadamente un 40 %, aún de forma más preferente en al menos aproximadamente un 60 %, y todavía de forma más preferente en al menos aproximadamente un 80 % con respecto a los sujetos no tratados. Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto terapéutico puede disminuir el tamaño del tumor, o mejorar de otra forma los síntomas en un sujeto, que es normalmente un ser humano o puede ser de otro mamífero.
La composición farmacéutica puede ser una formulación de liberación controlada, incluyendo implantes, parches transdérmicos, y sistemas de administración microencapsulados. Se pueden usar polímeros biodegradables y biocompatibles, tales como etileno acetato de vinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres, y ácido poliláctico.Véase, por ejemplo,Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York, 1978.
Las composiciones terapéuticas se pueden administrar mediante dispositivos médicos tales como (1) dispositivos de inyección hipodérmica sin aguja (por ejemplo, documentos US 5.399.163; 5.383.851; 5.312.335; 5.064.413; 4.941.880; 4.790.824; y 4.596.556); (2) bombas de microinfusión (documento US 4.487.603); (3) dispositivos transdérmicos (documento US 4.486.194); (4) aparatos de infusión (documentos US 4.447.233 y 4.447.224); y (5) dispositivos osmóticos (documentos US 4.439.196 y 4.475.196).
Los anticuerpos monoclonales humanos pueden formularse para asegurar una distribución adecuadain vivo.Por ejemplo, para asegurar que los compuestos terapéuticos cruzan la barrera hematoencefálica, se pueden formular en liposomas, que pueden comprender adicionalmente restos directores para potenciar el transporte selectivo en células u órganos específicos.Véase,por ejemplo los documentos US 4.522.811; 5.374.548; 5.416.016; y 5.399.331; V.V. Ranade (1989) J. Clin. Pharmacol. 29:685; Umezawa et al., (1988) Biochem. Biophys. Res. Commun. 153:1038; Bloeman et al. (1995) FEBS Lett. 357:140; M. Owais et al. (1995) Antimicrob. Agents Chemother. 39:180; Briscoe et al. (1995) Am. J. Physiol. 1233:134; Schreier et al. (1994) J Biol. Chem. 269:9090; Keinanen y Laukkanen (1994) FEBS Lett. 346:123; y Killion y Fidler (1994) Immunomethods 4:273.
Usos de la invención
Las composiciones de la presente invención tienen numerosas utilidadesin vitroein vivoque implican, por ejemplo, la detección de LAG-3 o la potenciación de respuestas inmunitarias mediante el bloqueo de LAG-3. Se prefiere que los anticuerpos sean anticuerpos humanos. Dichos anticuerpos se pueden administrar a células en cultivo,in vitrooex vivo,o a sujetos humanos,por ejemplo, in vivo,para potenciar la inmunidad en varias situaciones. En consecuencia, en un aspecto, la divulgación proporciona un método para modificar una respuesta inmunitaria en un sujeto que comprende administrar al sujeto la composición de la invención de tal manera que se modifica la respuesta inmunitaria en el sujeto. Preferentemente, la respuesta se potencia, estimula o regula en exceso.
Los sujetos preferidos incluyen pacientes humanos que necesitan potenciar una respuesta inmunitaria. Los métodos son particularmente adecuados para tratar pacientes humanos que tienen un trastorno que se puede tratar aumentando una respuesta inmunitaria (por ejemplo, la respuesta inmunitaria mediada por linfocitos T). Los métodos son particularmente adecuados para el tratamiento del cáncerin vivo.Para conseguir la potenciación de la inmunidad específica de antígeno, los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 se pueden administrar junto con un antígeno de interés o el antígeno puede estar ya presente en el sujeto que se va a tratar (por ejemplo, un sujeto que tiene un tumor o que tiene un virus). Cuando los anticuerpos contra LAG-3 se administran junto con otro agente, los dos se pueden administrar en cualquier orden o simultáneamente.
Se describen también en el presente documento métodos para detectar la presencia del antígeno LAG-3 humano en una muestra, o medir la cantidad del antígeno LAG-3 humano, que comprenden poner en contacto la muestra, y una muestra de control, con un anticuerpo monoclonal humano, o una porción de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a LAG-3 humano, en condiciones que permitan la formación de un complejo entre el anticuerpo o una porción del mismo y LAG-3 humano. A continuación se detecta la formación de un complejo, en el que una diferencia en la formación del complejo entre la muestra en comparación con la muestra del control es indicativa de la presencia de antígeno LAG-3 humano en la muestra. Por otra parte, los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 de la invención pueden utilizarse para purificar LAG-3 humano mediante purificación por inmunoafinidad.
Dada la capacidad de los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 de la invención para inhibir la unión de LAG-3 a las moléculas MHC de clase II y de estimular las respuestas de los linfocitos T a antígenos, las composiciones de la invención pueden utilizarse también en métodosin vitro e in vivopara estimular, potenciar o regular en exceso las respuestas de los linfocitos T específicos de antígenos. Por ejemplo, la invención proporciona composiciones para su uso en un método para estimular una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos que comprende poner en contacto dichos linfocitos T con una composición de la invención, de tal manera que se estimula una respuesta de los linfocitos T específicos de antígenos. Cualquier indicador adecuado de una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos se puede usar para medir la respuesta de los linfocitos T específicos de antígenos. Los ejemplos no limitantes de dichos indicadores adecuados incluyen la proliferación aumentada de linfocitos T en presencia del anticuerpo y/o el aumento en la producción de citoquinas en presencia del anticuerpo. En una realización preferida, se estimula la producción de interleucina-2 mediante los linfocitos T específicos de antígenos.
La invención proporciona también composiciones para su uso en un método de estimular una respuesta inmunitaria (por ejemplo, una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos) en un sujeto que comprende administrar una composición de la invención al sujeto de tal manera que se estimula una respuesta inmunitaria (por ejemplo, una respuesta de linfocitos T específicos de antígenos). En una realización preferida, el sujeto es un sujeto que tiene un tumor y se estimula una respuesta inmunitaria contra el tumor. En otra realización preferida, el sujeto es un sujeto que tiene un virus y se estimula una respuesta inmunitaria contra el virus.
En otra realización, la composición es para su uso en métodos para inhibir el crecimiento de las células tumorales en un sujeto que comprende administrar al sujeto una composición de la invención de tal manera que se inhibe dicho crecimiento del tumor en el sujeto. En otra realización adicional, la composición es para su uso en métodos para tratar una infección vírica en un sujeto que comprende administrar al sujeto un anticuerpo de la invención de tal manera que se trata la infección vírica en el sujeto.
Estos y otros usos se describen en detalle a continuación.
Cáncer
El bloqueo de LAG-3 por anticuerpos puede potenciar la respuesta inmunitaria a células cancerosas en el paciente. En un aspecto, la presente invención se refiere al tratamiento de un sujetoin vivousando un anticuerpo dirigido contra LAG-3 de tal manera que se inhibe dicho crecimiento de tumores cancerosos. Se puede usar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 en solitario para inhibir el crecimiento de tumores cancerosos. Como alternativa, Se puede usar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 junto con otros agentes inmunógenos, tratamientos convencionales contra el cáncer, u otros anticuerpos, como se describe más adelante.
En consecuencia, en una realización, la composición es para su uso en un método para inhibir el crecimiento de células tumorales en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo dirigido contra LAG-3, o una porción de antígeno del mismo. Preferentemente, el anticuerpo es un anticuerpo dirigido contra LAG-3 humano (tal como cualquiera de los anticuerpos humanos dirigidos contra LAG-3 humano descritos en el presente documento). De manera adicional o alternativa, el anticuerpo puede ser un anticuerpo dirigido contra LAG-3 quimérico o humanizado.
Los cánceres preferidos cuyo crecimiento puede inhibirse utilizando los anticuerpos de la invención incluyen cánceres normalmente sensibles a la inmunoterapia. Los ejemplos no limitantes de cánceres preferidos para el tratamiento incluyen melanoma (por ejemplo, melanoma maligno metastásico), cáncer renal (por ejemplo, carcinoma de células claras), cáncer de próstata (por ejemplo, adenocarcinoma de próstata refractario a hormonas), cáncer de mama, cáncer de colon y cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón no microcítico). Asimismo, la invención incluye neoplasias resistentes a tratamiento o recurrentes cuyo crecimiento puede inhibirse utilizando los anticuerpos de la invención.
Los ejemplos de otros cánceres que se pueden tratar utilizando las composiciones de la invención incluyen cáncer de hueso, cáncer de páncreas, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma cutáneo o intraocular maligno, cáncer uterino, cáncer de ovario, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer de testículo, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma de endometrio, carcinoma de cuello de útero, carcinoma de vagina, carcinoma de vulva, enfermedad de Hodgkin, linfoma no de Hodgkin, cáncer de esófago, cáncer de intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroides, cáncer de la glándula paratiroidea, cáncer de la glándula adrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de uretra, cáncer de pene, leucemias crónicas o agudas que incluyen leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, tumores sólidos de la infancia, linfoma linfocítico, cáncer de vejiga, cáncer de riñón o de uréter, carcinoma de la pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma de la pituitaria, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide, cáncer escamocelular, linfoma de linfocitos T, cánceres inducidos ambientalmente que incluyen aquellos inducidos por asbesto, y las combinaciones de dichos cánceres. La presente invención es también útil para el tratamiento de cánceres metastásicos, especialmente cánceres metastásicos que expresan PD-L1 (Iwai et al. (2005) Int. Immunol.
17:133-144).
Opcionalmente, los anticuerpos contra LAG-3 se pueden combinar con un agente inmunógeno, tal como células bacterianas, antígenos tumorales purificados (incluyendo proteínas recombinantes, péptidos, y moléculas de hidratos de carbono), células, y células transfectadas con genes que codifican citoquinas estimulantes inmunitarias (He et al. (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Los ejemplos no limitantes de vacunas tumorales que se pueden usar incluyen péptidos de antígenos de melanoma, tales como los péptidos de gp100, antígenos MAGE, Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, o células tumorales transfectadas para expresar la citoquina GM-CSF (descritas adicionalmente a continuación).
En los seres humanos, algunos tumores han mostrado ser inmunógenos tales como los melanomas. Al aumentar el umbral de activación de los linfocitos T mediante el bloqueo de LAG-3, pueden activarse las respuestas tumorales del hospedador.
Es probable que el bloqueo de LAG-3 sea más eficaz cuando se combina con un protocolo de vacunación. Se han ideado muchas estrategias experimentales para la vacunación contra tumores (véase Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; véase también Restifo, N. y Sznol, M., Cancer Vaccines, cap. 61, pp. 3023-3043 en DeVita et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology, Quinta edición). En una de estas estrategias, se prepara una vacuna utilizando células tumorales autólogas o alogénicas. Estas vacunas celulares han mostrado ser más eficaces cuando las células tumorales se transducen para expresar GM-CSF. GM-CSF ha mostrado ser un potente activador de la presentación de antígenos para la vacunación tumoral (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A.
90: 3539-43).
El estudio de la expresión génica y de los modelos de expresión génica a gran escala en diversos tumores ha conducido a la definición de los denominados antígenos específicos del tumor (Rosenberg, SA (1999) Immunity 10: 281-7). En muchos casos, estos antígenos específicos de tumor son antígenos de diferenciación expresados en los tumores y en la célula de la que surge el tumor, por ejemplo, antígenos gp100 de melanocitos, antígenos MAGE, y Trp-2. De forma más importante, muchos de estos antígenos pueden mostrar ser las dianas de linfocitos T específicos de tumores que se encuentran en el hospedador. Se puede usar el bloqueo de LAG-3 junto con una serie de proteínas y/o péptidos recombinantes en un tumor a fin de generar una respuesta inmunitaria a estas proteínas. El sistema inmunitario suele considerar estas proteínas como autoantígenos y, por tanto, son tolerantes a ellas. El antígeno tumoral puede incluir la proteína telomerasa, que es necesaria para la síntesis de los telómeros de los cromosomas y que se expresa en más del 85 % de cánceres humanos y solamente en un número limitado de tejidos somáticos (Kim et al. (1994) Science 266: 2011-2013). (Estos tejidos somáticos pueden protegerse del ataque inmunitario por diversos medios). Los antígenos tumorales pueden ser también "neoantígenos" expresados en células cancerosas debido a mutaciones somáticas que alteran la secuencia de proteínas o crean proteínas de fusión entre dos secuencias no relacionadas (es decir, bcr-abl en el cromosoma Philadelphia), o el idiotipo de tumores de linfocitos B.
Otras vacunas tumorales pueden incluir las proteínas de virus implicados en cánceres humanos tales como los virus del papiloma humano (VPH), los virus de la hepatitis (VHB y VHC) y el virus del sarcoma del herpes de Kaposi) (VSHK). Otra forma de antígeno específico de tumor que se puede usar junto con el bloqueo de LAG-3 son las proteínas de choque térmico purificadas (HSP) aisladas del propio tejido tumoral. Estas proteínas de choque térmico contienen fragmentos de proteínas de las células tumorales y estas HSP son muy eficaces en la administración a células presentadoras de antígenos para estimular la inmunidad tumoral (Suot & Srivastava (1995) Science 269:1585-1588; Tamura et al. (1997) Science 278: 117-120).
Las células dendríticas (CD) son potentes células presentadoras de antígenos que se pueden usar para estimular respuestas específicas a antígenos. Las CD pueden producirseex vivoy cargarse con diversos antígenos de proteínas y péptidos así como extractos de células tumorales (Nestle et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). Las CD pueden transducirse también por medios genéticos para expresar también estos antígenos tumorales. Las CD se han fusionado también directamente a células tumorales con fines de inmunización (Kugler et al. (2000) Nature Medicine 6:332-336). Como método de inmunización, la inmunización con CD puede combinarse eficazmente con el bloqueo de LAG-3 para activar respuestas antitumorales más potentes.
El bloqueo de LAG-3 puede combinarse también con tratamientos contra el cáncer convencionales. El bloqueo de LAG-3 puede combinarse eficazmente con regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, puede ser posible reducir la dosis de reactivo quimioterapéutico administrada (Mokyr et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Un ejemplo de dicha combinación es un anticuerpo dirigido contra LAG-3 combinado con descarbazina para el tratamiento del melanoma. Otro ejemplo de dicha combinación es un anticuerpo dirigido contra LAG-3 combinado con interleucina-2 (IL-2) para el tratamiento del melanoma. La lógica científica subyacente al uso combinado del bloqueo de LAG-3 y la quimioterapia es que la muerte celular, que es una consecuencia de la acción citotóxica de la mayoría de compuestos quimioterapéuticos, debería dar como resultado mayores niveles de antígeno tumoral en la ruta de presentación del antígeno. Otros tratamientos combinados que pueden dar como resultado la sinergia con el bloqueo de LAG-3 a través de la célula son la radiación, la cirugía, y la privación de hormonas. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el hospedador. Pueden también combinarse los inhibidores de la angiogénesis con el bloqueo de LAG-3. La inhibición de la angiogénesis conduce a la muerte de células tumorales que pueden alimentar al antígeno tumoral en las rutas de presentación del antígeno al hospedador.
Se pueden usar también anticuerpos que bloquean LAG-3 en combinación con anticuerpos biespecíficos que dirigen las células efectoras que expresan el receptor Fca o F<cy>hacia las células tumorales (véase,por ejemplo,las patentes de Estados Unidos números 5.922.845 y 5.837.243). Se pueden usar anticuerpos biespecíficos que se dirijan a dos antígenos diferentes. Por ejemplo, se han utilizado anticuerpos biespecíficos dirigidos contra el receptor de FC/antígeno antitumoral (por ejemplo, Her-2/neu) para dirigir macrófagos a los sitios del tumor. Este direccionamiento puede activar más eficazmente respuestas específicas de tumor. El brazo de linfocitos T de estas respuestas aumentaría mediante el uso del bloqueo de LAG-3. Como alternativa, el antígeno puede administrarse directamente a las CD mediante el uso de anticuerpos biespecíficos que se unen al antígeno tumoral y al marcador superficial celular específico de células dendríticas.
Los tumores eluden la vigilancia inmunitaria del hospedador mediante una gran variedad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden superarse mediante la inactivación de las proteínas que expresan los tumores y que son inmunosupresoras. Estas incluyen entre otras TGF-p (Kehrl et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard y O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), y ligando Fas (Hahne et al. (1996) Science 274: 1363-1365). Los anticuerpos de cada una de estas entidades se pueden usar junto con un anticuerpo dirigido contra LAG-3 para contrarrestar los efectos del agente inmunosupresor y favorecer las respuestas inmunitarias tumorales del hospedador.
Se pueden usar otros anticuerpos que activan la sensibilidad inmunitaria del hospedador junto con el anticuerpo dirigido contra LAG-3. Estos incluyen moléculas sobre la superficie de células dendríticas que activan la función CD y la presentación del antígeno. Los anticuerpos dirigidos contra CD40 son capaces de sustituir eficazmente la actividad de los linfocitos T auxiliares (Ridge et al. (1998) Nature 393: 474-478) y se pueden usar junto con los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 (Ito et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40). Anticuerpos activadores de las moléculas coestimulantes de los linfocitos T tales como CTLA-4 (por ejemplo, patente de Estados Unidos n.° 5.811.097), OX-40 (Weinberg et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-1BB (Melero et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997), e ICOS (Hutloff et al. (1999) Nature 397: 262-266) pueden proporcionar también niveles aumentados de activación de linfocitos T.
El trasplante de médula ósea se usa actualmente para tratar varios tumores de origen hematopoyético. Aunque la enfermedad de injerto frente a hospedador es una consecuencia de este tratamiento, puede obtenerse un beneficio terapéutico del injerto frente a las respuestas tumorales. Se puede usar el bloqueo de LAG-3 para aumentar la eficacia de los linfocitos T específicos de tumor injertados en el donante.
Existen también varios protocolos de tratamiento experimentales que implican la activación y expansiónex vivode linfocitos T específicos de antígenos y la transferencia adoptiva de estas células en receptores a fin de estimular los linfocitos T específicos de antígenos frente al tumor (Greenberg & Riddell (1999) Science 285: 546-51). Estos métodos se pueden usar también para activar respuestas de los linfocitos T a agentes infecciosos tales como CMV. La activación ex vivo en presencia de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 puede aumentar la frecuencia y la actividad de los linfocitos T transferidos adoptivamente.
Enfermedades infecciosas
Las composiciones de la invención también pueden utilizarse para tratar pacientes que se han expuesto a toxinas o patógenos concretos. En consecuencia, otro aspecto de la invención proporciona las composiciones para su uso en un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto que comprende administrar al sujeto la composición de la invención, de tal manera que el sujeto se trata para la enfermedad infecciosa. Preferentemente, el anticuerpo es un anticuerpo humano dirigido contra lAG-3 humano (tal como cualquiera de los anticuerpos humanos dirigidos contra LAG-3 humano descritos en el presente documento). De manera adicional o alternativa, el anticuerpo puede ser un anticuerpo quimérico o humanizado.
Similar a su aplicación a los tumores que se ha descrito anteriormente, el bloqueo de LASG-3 mediado por anticuerpo se puede usar solo, o como un adyuvante, en combinación con vacunas, para estimular la respuesta inmunitaria a patógenos, toxinas, y autoantígenos. Los ejemplos de patógenos para los cuales esta solución terapéutica puede ser particularmente útil incluyen patógenos para los cuales no existe actualmente vacuna eficaz, o patógenos para los cuales las vacunas convencionales son menos que completamente eficaces. Estas incluyen, aunque no de forma limitativa VIH, Hepatitis (A, B, y C), gripe, herpes, giardia, malaria, Leishmania, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. El bloqueo de LAG-3 es particularmente útil frente a las infecciones establecidas por agentes tales como VIH que presentan antígenos alterados durante el curso de las infecciones. Estos novedosos epítopos son reconocidos como extraños en el momento de la administración del anticuerpo dirigido contra LAG-3 humano, provocando de esta manera una fuerte respuesta de linfocitos T que no está amortiguada por señales negativas a través de LAG-3.
Algunos ejemplos de virus patógenos que producen infecciones tratables por las composiciones de la invención incluyen VIH, hepatitis (A, B, o C), virus del herpes (por ejemplo, VZV, VHS-1, VHA-6, VHS-II, y CMV, virus de Epstein-Barr), adenovirus, virus de la gripe, flavivirus, ecovirus, rinovirus, virus de coxackie, coronavirus, virus sincitial respiratorio, virus de las paperas, rotavirus, virus del sarampión, virus de la rubeola, parvovirus, virus vaccinia, virus HTLV, virus del dengue, virus del papiloma, virus de moluscos, poliovirus, virus de la rabia, virus JC y virus de la encefalitis arbovírica.
Algunos ejemplos de bacterias patógenas que producen infecciones tratables por las composiciones de la invención incluyen clamidias, bacterias rickettsiales, micobacterias, estafilococos, estreptococos, pneumococos, meningococos y gonococos, klebsiella, proteus, serratia, pseudomonas, legionela, difteria, salmonela, bacilos, cólera, tétanos, botulismo, ántrax, peste, leptospirosis, y bacterias de la enfermedad de Lymes.
Algunos ejemplos de hongos patógenos que producen infecciones tratables por las composiciones de la invención incluyen Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, etc.), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, etc.), Géneros de Mucorales (mucor, absidia, rhizopus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis e Histoplasma capsulatum.
Algunos ejemplos de parásitos patógenos que producen infecciones tratables por las composiciones de la invención incluyen Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleria fowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondii, Nippostrongylus brasiliensis.
En todos los métodos anteriores, el bloqueo de LAG-3 puede combinarse con otras formas de inmunoterapia tales como tratamiento con citoquinas (por ejemplo, interferones, GM-CSF, G-CSF, IL-2), o tratamiento con anticuerpos biespecíficos, que proporcionan una presentación potenciada de antígenos tumorales (véanse,por ejemplo,Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2:1121-1123).
Reacciones autoinmunitarias
Los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 pueden provocar y amplificar respuestas autoinmunitarias. De hecho, la inducción de respuestas antitumorales utilizando células tumorales y vacunas peptídicas describe que muchas respuestas antitumorales implican antiautorreactividades (van Elsas et al. (2001) J. Exp. Med. 194:481-489; Overwijk, et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96: 2982-2987; Hurwitz, (2000) anteriormente citado; Rosenberg y White (1996) J. Immunother Emphasis Tumor Immunol 19 (1): 81-4). Por lo tanto, es posible considerar la utilización del bloqueo dirigido contra LAG-3 junto con diversas autoproteínas a fin de concebir protocolos de vacunación para generar eficazmente respuestas inmunitarias contra estas autoproteínas para el tratamiento de la enfermedad. Por ejemplo, la enfermedad de Alzheimer implica la acumulación inadecuada del péptido Ap en depósitos amiloides en el cerebro; las respuestas de los anticuerpos contra el amiloide son capaces de aclarar estos depósitos amiloides (Schenk et al., (1999) Nature 400: 173-177).
Se pueden usar también otras autoproteínas como dianas tales como IgE para el tratamiento de la alergia y el asma, y TNFa para la artritis reumatoide. Finalmente, se pueden inducir respuestas de anticuerpos a diversas hormonas mediante el uso de un anticuerpo dirigido contra LAG-3. Se pueden usar las respuestas de los anticuerpos neutralizantes a las hormonas reproductoras para la contracepción. Se puede considerar también la respuesta de los anticuerpos a las hormonas y otros factores solubles que se requieren para el crecimiento de tumores concretos como posibles dianas de vacunación.
Se pueden considerar métodos análogos a los que se han descrito anteriormente para el uso de un anticuerpo dirigido contra LAG-3 en la inducción de respuestas autoinmunitarias terapéuticas para tratar pacientes que tienen una acumulación inadecuada de otros autoantígenos, tales como depósitos de amiloide, incluyendo Ap en la enfermedad de Alzheimer, citoquinas tales como TNFa, e IgE.
Vacunas
Se pueden usar anticuerpos dirigidos contra LAG-3 para estimular respuestas inmunitarias específicas de antígenos mediante la coadministración de un anticuerpo dirigido contra LAG-3 con un antígeno de interés (por ejemplo, una vacuna). En consecuencia, en otro aspecto la invención las composiciones son para su uso en un método para potenciar una respuesta inmunitaria a un antígeno en un sujeto, que comprende administrar al sujeto: (i) el antígeno; y (ii) un anticuerpo dirigido contra LAG-3, o la porción de unión a antígeno del mismo, de tal manera que se potencia una respuesta inmunitaria en el sujeto. Preferentemente, el anticuerpo es un anticuerpo humano dirigido contra LAG-3 humano (tal como cualquiera de los anticuerpos humanos dirigidos contra LAG-3 humano descritos en el presente documento). De manera adicional o alternativa, el anticuerpo puede ser un anticuerpo quimérico o humanizado. El antígeno puede ser, por ejemplo, un antígeno tumoral, un antígeno vírico, un antígeno bacteriano o un antígeno procedente de un patógeno. Los ejemplos no limitantes de dichos antígenos incluyen los descritos en las secciones anteriores, tales como los antígenos tumorales (o vacunas tumorales) analizados anteriormente, o antígenos procedentes de virus, bacterias u otros patógenos descritos anteriormente.
Las rutas adecuadas para administrar las composiciones de anticuerpos (por ejemplo, anticuerpos monoclonales humanos, moléculas multiespecíficas y biespecíficas e inmunoconjugados) de la invenciónin vivoein vitroson bien conocidas en la técnica y se pueden seleccionar por las personas normalmente expertas en la materia. Por ejemplo, las composiciones de anticuerpos se pueden administrar mediante inyección (por ejemplo, intravenosa o subcutánea). Las dosificaciones adecuadas de las moléculas utilizadas dependerán de la edad y el peso del sujeto y de la concentración y/o la formulación de la composición de anticuerpo.
Como se ha descrito anteriormente, las composiciones de la invención pueden coadministrarse con uno o más agentes terapéuticos,por ejemplo,un agente citotóxico, un agente radiotóxico o un agente inmunosupresor. El anticuerpo puede unirse al agente (como un inmunocomplejo) o se puede administrar por separado del agente. En el último caso (administración separada), el anticuerpo puede administrarse antes, después o simultáneamente con el agente o puede coadministrarse con otros tratamientos conocidos,por ejemplo,una terapia dirigida contra el cáncer,por ejemplo,radiación. Dichos agentes terapéuticos incluyen, entre otros, agentes antineoplásicos tales como doxorrubicina (adriamicina), sulfato de cisplatino bleomicina, carmustina, clorambucilo, dacarbazina y ciclofosfamida hidroxiurea que, por sí mismos, son solo eficaces a niveles que son tóxicos o subtóxicos para un paciente. Cisplatino se administra por vía intravenosa como una dosis de 100 mg/ml una vez cada cuatro semanas y se administra adriamicina por vía intravenosa como una dosis de 60-75 mg/ml una vez cada 21 días. La coadministración de los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 humano, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos, de la presente invención con agentes quimioterapéuticos proporciona dos agentes anticancerosos que funcionan mediante diferentes mecanismos que dan como resultado un efecto citotóxico en células tumorales humanas. Dicha coadministración puede resolver problemas debido al desarrollo de resistencia a los fármacos o un cambio en la antigenicidad de las células tumorales que les volvería no reactivos con el anticuerpo.
También se describen kits que comprenden las composiciones de la invención e instrucciones para el uso. El kit puede contener además un reactivo adicional, o uno o más anticuerpos humanos adicionales. Los kits incluyen normalmente una marca indicativa del uso previsto del contenido del kit. El término marca incluye cualquier material escrito, o grabado suministrado sobre o con el kit, o que acompaña de otra forma al kit.
Terapia de combinación
La invención reivindicada se refiere a una composición única que comprende: (a) un anticuerpo monoclonal, o una porción de unión a antígeno del mismo, que se une a LAG-3, (b) un anticuerpo anti-PD-1 o una porción de unión a antígeno del mismo y (c) un vehículo farmacéuticamente aceptable. En consecuencia, la invención se refiere a tratamiento combinado en el que un anticuerpo dirigido contra LAG-3 (o porción de unión a antígeno del mismo) de la presente invención se coadministra con uno o más anticuerpos adicionales que son eficaces para estimular respuestas inmunitarias para potenciar, estimular o regular en exceso todavía más las respuestas inmunitarias de un sujeto.
Se describen además en el presente documento métodos para estimular una respuesta inmunitaria en un sujeto que comprende administrar al sujeto un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y uno o más anticuerpos inmunoestimulantes adicionales, tales como un anticuerpo dirigido contra PD-1, un anticuerpo dirigido contra PD-L1 y/o un anticuerpo dirigido contra CTLA-4, de tal manera que se estimula una respuesta inmunitaria en el sujeto, por ejemplo, para inhibir el crecimiento tumoral o para estimular una respuesta antivírica. De acuerdo con la invención, se administra al sujeto un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y un anticuerpo dirigido contra PD-1. En una realización, el anticuerpo dirigido contra LAG-3 es un anticuerpo humano, tal como un anticuerpo de la divulgación. Como alternativa, el anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede ser, por ejemplo, un anticuerpo quimérico o humanizado (por ejemplo, preparado a partir de un mAb de ratón dirigido contra LAG-3). En otra realización, el al menos un anticuerpo inmunoestimulante adicional (por ejemplo, el anticuerpo dirigido contra PD-1) es un anticuerpo humano. Como alternativa, el al menos un anticuerpo inmunoestimulante adicional puede ser, por ejemplo, un anticuerpo quimérico o humanizado (por ejemplo, preparado a partir de un de ratón dirigido contra PD-1).
Adicionalmente, se describe en el presente documento un método para tratar una enfermedad hiperproliferativa (por ejemplo, cáncer), que comprende administrar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y un anticuerpo dirigido contra CTLA-4 a un sujeto. El anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede administrarse a una dosis subterapéutica, el anticuerpo dirigido contra CTLA-4 puede administrarse a una dosis subterapéutica, o ambos pueden administrarse a una dosis subterapéutica. Adicionalmente, se describe en el presente documento un método para alterar un acontecimiento adverso asociado con el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa con un agente inmunoestimulante, que comprende administrar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y una dosis subterapéutica de anticuerpo dirigido contra CTLA-4 a un sujeto. El sujeto puede ser un ser humano. El anticuerpo dirigido contra CTLA-4 puede ser un anticuerpo monoclonal 10D1 de secuencia humana (descrito en la publicación PCT WO 01/14424) y el anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede ser un anticuerpo monoclonal de secuencia humana, tal como LAG3.5 descrito en el presente documento. Otros anticuerpos dirigidos contra CTLA-4 abarcados por los métodos descritos en el presente documento incluyen, por ejemplo, los desvelados en: los documentos WO 98/42752; WO 00/37504; la patente de EE.UU. n.° 6.207.156; Hurwitz et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95(17):10067-10071; Camacho et al. (2004) J. Clin. Oncology 22(14S): resumen n.° 2505 (anticuerpo CP-675206); y Mokyr et al. (1998) Cancer Res. 58:5301-5304. En determinadas realizaciones, el anticuerpo dirigido contra CTLA-4 puede unirse a CTLA-4 humano con una K<d>de 5 x 10'8 M o menos, puede unirse a CTLA-4 humano con una Kd de 1 x 10'8 M o menos, se une a CTLA-4 humano con una K<d>de 5 x 10'9 M o menos, o puede unirse a CTLA-4 humano con una K<d>de entre 1 x 10'8 M y 1 x 10'1° M o menos.
La presente invención proporciona composiciones para su uso en un método para tratar una enfermedad hiperproliferativa (por ejemplo, cáncer), que comprende administrar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y un anticuerpo dirigido contra PD-1 a un sujeto. En realizaciones adicionales, el anticuerpo dirigido contra LAG-3 se administra a una dosis subterapéutica, el anticuerpo dirigido contra PD-1 se administra a una dosis subterapéutica, o ambos se administran a una dosis subterapéutica. En otra realización, la presente invención proporciona composiciones para su uso en un método para alterar un acontecimiento adverso asociado con el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa con un agente inmunoestimulante, que comprende administrar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y una dosis subterapéutica de un anticuerpo dirigido contra PD-1 a un sujeto. En determinadas realizaciones, el sujeto es un ser humano. En determinadas realizaciones, el anticuerpo dirigido contra PD-1 es un anticuerpo monoclonal de secuencia humana y el anticuerpo dirigido contra LAG-3 es un anticuerpo monoclonal de secuencia humana, tal como LAG3.5 descrito en el presente documento. Los ejemplos de anticuerpos dirigidos contra PD-1 de secuencia humana incluyen 17D8, 2D3, 4H1, 5C4 y 4A11, que se describen en la publicación PCT WO 06/121168. Otros anticuerpos dirigidos contra PD-1 incluyen, por ejemplo, lambrolizumab (documento WO2008/156712), y AMP514 (documentos WO2010/027423, WO2010/027827, WO2010/027828, WO2010/098788). En determinadas realizaciones, el anticuerpo dirigido contra PD-1 se une a PD-1 humano con una Kd de 5 x 10'8 M o menos, se une a PD-1 con una Kd de 1 x 10'8 M o menos, se une a PD-1 con una Kd de 5 x 10'9 M o menos, o se une a PD-1 humano con una Kd de ente 1 x 10'8 M y 1 x 10'10 M o menos.
Adicionalmente, se describe en el presente documento un método para tratar una enfermedad hiperproliferativa (por ejemplo, cáncer) que comprende administrar un anticuerpo contra LAG-3 y un anticuerpo contra PD-L1 a un sujeto. El anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede administrarse a una dosis subterapéutica, el anticuerpo dirigido contra PD-L1 puede administrarse a una dosis subterapéutica, o ambos se pueden administrar a una dosis subterapéutica. Adicionalmente, se describe en el presente documento un método para alterar un acontecimiento adverso asociado con el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa con un agente inmunoestimulante que comprende administrar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y una dosis subterapéutica de un anticuerpo dirigido contra PD-L1 a un sujeto. El sujeto puede ser un ser humano. El anticuerpo dirigido contra PD-L1 puede ser un anticuerpo monoclonal de secuencia humana y el anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede ser un anticuerpo monoclonal de secuencia humana, tal como LAG3.5 descrito en el presente documento. Los ejemplos de anticuerpos dirigidos contra PD-L1 de secuencia humana incluyen 3G10, 12A4, 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7 y 13G4, que se describen en la publicación PCT WO 07/005874. Otros anticuerpos dirigidos contra PD-L1 incluyen, por ejemplo, MPDL3280A (RG7446) (documento WO2010/077634), MEDI4736 (documento WO2011/066389), y MDX1105 (documento WO2007/005874). El anticuerpo dirigido contra PD-L1 puede unirse a PD-L1 humano con una Kd de 5 x 10-8 M o menos, se une a PD-L1 humano con una K<d>de 1 x 10-8 M o menos, se une a PD-L1 humano con una K<d>de 5 x 10-9 M o menos, o se une a PD-L1 humano con una K<d>de entre 1 x 10-8 M y 1 x 10'1° M o menos.
El bloqueo de LAG-3 y uno o más segundos antígenos diana tales como CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 por anticuerpos puede potenciar la respuesta inmunitaria a células cancerosas en el paciente. Los cánceres cuyo crecimiento puede inhibirse utilizando los anticuerpos de la presente descripción incluyen cánceres normalmente sensibles a la inmunoterapia. Los ejemplos representativos de cánceres a tratar con la terapia de combinación de la presente descripción incluyen aquellos cánceres específicamente relacionados anteriormente en la descripción de la monoterapia con los anticuerpos dirigidos contra LAG-3.
La combinación de los anticuerpos terapéuticos descritos en el presente documento puede administrarse simultáneamente como una composición única en un vehículo farmacéuticamente aceptable, o simultáneamente como composiciones separadas con cada anticuerpo en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Además, la combinación de anticuerpos terapéuticos puede administrarse secuencialmente. Por ejemplo, un anticuerpo dirigido contra CTLA-4 y/o un anticuerpo dirigido contra LAG-3 se pueden administrar secuencialmente, de tal manera que se administra en primer lugar un anticuerpo dirigido contra CTLA-4 y se administra en segundo lugar un anticuerpo dirigido contra LAG-3, o se administra en primer lugar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y en segundo lugar anticuerpo dirigido contra CTLA-4. De manera adicional o alternativa, un anticuerpo dirigido contra PD-1 y/o un anticuerpo dirigido contra LAG-3 se pueden administrar secuencialmente, de tal manera que se administra en primer lugar un anticuerpo dirigido contra PD-1 y se administra en segundo lugar un anticuerpo dirigido contra LAG-3, o se administra en primer lugar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y en segundo lugar anticuerpo dirigido contra PD-1. De manera adicional o alternativa, un anticuerpo dirigido contra PD-L1 y un anticuerpo dirigido contra LAG-3 se pueden administrar secuencialmente, de tal manera que se administra en primer lugar un anticuerpo dirigido contra PD-L1 y se administra en segundo lugar un anticuerpo dirigido contra LAG-3, o se administra en primer lugar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y se administra en segundo lugar un anticuerpo dirigido contra PD-L1. De acuerdo con la invención reivindicada, el anticuerpo anti-LAG-3 y el anticuerpo anti-PD-1 se administran concurrentemente como una composición individual en un vehículo farmacéuticamente aceptable.
Además, si se administra secuencialmente más de una dosis de la terapia de combinación, puede invertirse el orden de la administración secuencial o mantenerse en el mismo orden en cada punto temporal de administración, las administraciones secuenciales pueden combinarse con administraciones simultáneas, o cualquier combinación de las mismas. Por ejemplo, la primera administración de una combinación de un anticuerpo dirigido contra CTLA-4 y un anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede ser concurrente, la segunda administración puede ser secuencial con el anticuerpo dirigido contra CTLA-4 primero y el anticuerpo dirigido contra LAG-3 segundo, y la tercera administración puede ser secuencial, primero con un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y segundo con un anticuerpo dirigido contra CTLA-4, etc. De manera adicional o alternativa, la primera administración de una combinación de un anticuerpo dirigido contra PD-1 y un anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede ser concurrente, la segunda administración puede ser secuencial, primero con un anticuerpo dirigido contra PD-1 y segundo con anticuerpo dirigido contra LAG-3, y la tercera administración puede ser secuencial, primero con un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y segundo con un anticuerpo dirigido contra PD-1, etc. De manera adicional o alternativa, la primera administración de una combinación de un anticuerpo dirigido contra PD-L1 y un anticuerpo dirigido contra LAG-3 puede ser concurrente, la segunda administración puede ser secuencial primero con el anticuerpo dirigido contra PD-L1 y segundo con el anticuerpo dirigido contra LAG-3, y la tercera administración puede ser secuencial, primero con anticuerpo dirigido contra LAG-3 y segundo con el anticuerpo dirigido contra PD-L1, etc. Otro esquema de dosificación representativo puede implicar una primera administración que sea secuencial primero con el anticuerpo dirigido contra LAG-3 y segundo con el anticuerpo dirigido contra CTLA-4 (y/o un anticuerpo dirigido contra PD-1 y/o un anticuerpo dirigido contra PD-L1), y las administraciones posteriores pueden ser concurrentes.
Opcionalmente, la combinación de un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y uno o más anticuerpos adicionales (por ejemplo, anticuerpos dirigidos contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1) puede combinarse adicionalmente con un agente inmunógeno, tal como células bacterianas, antígenos tumorales purificados (incluyendo proteínas recombinantes, péptidos, y moléculas de hidratos de carbono), células, y células transfectadas con genes que codifican citoquinas inmunoestimulantes (He et al., (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Los ejemplos no limitantes de vacunas tumorales que se pueden usar incluyen péptidos de antígenos de melanoma, tales como los péptidos de gp100, antígenos MAGE, Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, o células tumorales transfectadas para expresar la citoquina GM-CSF (descritas adicionalmente a continuación). Un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 puede combinarse adicionalmente con un protocolo de vacunación, tal como cualquiera de los protocolos de vacunación descritos en detalle anteriormente con respecto a la monoterapia con anticuerpos dirigidos contra LAG-3.
Un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 puede combinarse también adicionalmente con tratamientos contra el cáncer convencionales. Por ejemplo, un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 puede combinarse eficazmente con regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, es posible reducir la dosis de otros reactivos quimioterapéuticos administrados junto con la combinación de la presente descripción (Mokyr et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Un ejemplo de dicha combinación es una combinación de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1 combinados adicionalmente con dacarbazina para el tratamiento del melanoma. Otro ejemplo es una combinación de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1 combinados adicionalmente con interleucina-2 (IL-2) para el tratamiento del melanoma. La lógica subyacente al uso combinado del bloqueo de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 y junto con la quimioterapia es que la muerte celular, que es una consecuencia de la acción citotóxica de la mayoría de compuestos quimioterapéuticos, debería dar como resultado mayores niveles de antígeno tumoral en la ruta de presentación del antígeno. Otras terapias de combinación que pueden dar como resultado una sinergia con un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 mediante la muerte celular incluyen radiación, la cirugía, o privación de hormonas. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el hospedador. Los inhibidores de la angiogénesis pueden también combinarse con un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1. La inhibición de la angiogénesis conduce a la muerte de las células tumorales, que pueden ser una fuente del antígeno tumoral introducido en las rutas de presentación del antígeno del hospedador.
Se puede usar también una combinación de anticuerpos que bloquean LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 junto con anticuerpos biespecíficos que dirigen las células efectoras que expresan el receptor Fca o F<cy>hacia las células tumorales (véanse,por ejemplo,las patentes de Estados Unidos números 5.922.845 y 5.837.243). Se pueden usar anticuerpos biespecíficos que se dirijan a dos antígenos diferentes. El grupo del linfocito T de estas respuestas se aumentaría mediante el uso de un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1.
En otro ejemplo, se puede usar una combinación de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1 junto con anticuerpos antineoplásicos, tales como Rituxan® (rituximab), Herceptin® (trastuzumab), Bexxar® (tositumomab), Zevalin® (ibritumomab), Campath® (alemtuzumab), Lymphocide® (eprtuzumab), Avastin® (bevacizumab), y Tarceva® (erlotinib), y similares. A modo de ejemplo y sin desear quedar ligados a teoría alguna, el tratamiento con un anticuerpo anticanceroso o un anticuerpo anticanceroso conjugado a una toxina puede conducir a la muerte de las células cancerosas (por ejemplo, células tumorales) que potenciarían una respuesta inmunitaria mediada por CTLA-4, PD-1, PD-L1 o LAG-3. Como un ejemplo, un tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa (por ejemplo, un tumor canceroso) puede incluir un anticuerpo anticanceroso junto con anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1, de forma concurrente o secuencial o cualquier combinación de las mismas, que puedan potenciar respuestas inmunitarias antitumorales del hospedador.
Los tumores eluden la vigilancia inmunitaria del hospedador mediante una gran variedad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden superarse por la inactivación de las proteínas, que se expresan por los tumores y que son inmunosupresoras. Estas incluyen, entre otros, TGF-p (Kehrl et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard y O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), y ligando Fas (Hahne et al. (1996) Science 274: 1363-1365). En otro ejemplo, los anticuerpos de cada una de estas entidades pueden combinarse adicionalmente con una combinación de un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o un anticuerpo dirigido contra PD-1 y/o un anticuerpo dirigido contra PD-L1 para contrarrestar los efectos de los agentes inmunosupresores y favorecer las respuestas inmunitarias antitumorales del hospedador.
Otros anticuerpos que se pueden usar para activar la sensibilidad inmunitaria del hospedador pueden utilizarse adicionalmente junto con una combinación de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1. Estos incluyen moléculas sobre la superficie de células dendríticas que activan la función CD y la presentación del antígeno. Los anticuerpos dirigidos contra CD40 (Ridgeet al.,anteriormente citado) se pueden usar junto con una combinación de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1 (Itoet al., anteriormente citado).Otros anticuerpos activadores de moléculas coestimulantes de linfocitos T, Weinberget al., anteriormente citado,Meleroet al.anteriormente citado, Hutloffet al., anteriormente citado)pueden proporcionar también niveles aumentados de activación de linfocitos T.
Tal como se ha analizado anteriormente, el trasplante de médula ósea se usa actualmente para tratar varios tumores de origen hematopoyético. Se puede usar un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 para aumentar la eficacia de los linfocitos T específicos de tumor injertados en el donante.
Algunos protocolos de tratamiento experimental implican la activación y expansiónex vivode linfocitos T específicos de antígenos y la transferencia adoptiva de estas células a receptores para estimular los linfocitos T específicos de antígenos frente al tumor (Greenberg y Riddell,anteriormente citado).Estos métodos se pueden usar también para activar respuestas de los linfocitos T a agentes infecciosos tales como CMV. La activaciónex vivoen presencia de anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1 puede aumentar la frecuencia y la actividad de los linfocitos T transferidos adoptivamente.
Adicionalmente, se describe en el presente documento un método para alterar un acontecimiento adverso asociado con el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa (por ejemplo, cáncer) con un agente inmunoestimulante, que comprende administrar un anticuerpo dirigido contra LAG-3 y una dosis subterapéutica de un anticuerpo dirigido contra CTLA-4 y/o contra PD-1 y/o contra PD-L1 a un sujeto. Por ejemplo, los métodos descritos en el presente documento proporcionan un método para reducir la incidencia de la colitis o diarrea inducida por anticuerpos terapéuticos inmunoestimulantes administrando un esteroide no absorbible al paciente. Puesto que cualquier paciente que reciba un anticuerpo terapéutico inmunoestimulante está en riesgo de desarrollar colitis o diarrea inducida por dicho anticuerpo, esta población completa de pacientes es adecuada para el tratamiento de acuerdo con la presente invención. Aunque se han administrado esteroides para tratar la enfermedad inflamatoria del intestino (EII) y evitar agravamientos de la EII, no se han utilizado para prevenir (disminuir la incidencia) de la EII en pacientes a los que no se les ha diagnosticado EII. Los efectos secundarios significativos asociados con los esteroides, incluso con los esteroides no absorbibles, han desaconsejado el uso profiláctico.
Además, un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 (es decir, anticuerpos terapéuticos inmunoestimulantes dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-L1) se pueden combinar adicionalmente con el uso de cualquier esteroide no absorbible. Tal como se usa en el presente documento, un "esteroide no absorbible" es un glucocorticoide que presenta un amplio metabolismo de primer paso, de tal manera que, tras el metabolismo en el hígado, la biodisponibilidad del esteroide es baja,es decir,menos de aproximadamente un 20 %. El esteroide no absorbible puede ser budesonida. La budesonida es un glucocorticosteroide que actúa localmente, que se metaboliza extensamente, principalmente por el hígado, tras la administración oral. ENTOCORT EC® (Astra-Zeneca) es una formulación oral de budesonida dependiente del pH y del tiempo desarrollada para optimizar la administración del fármaco en el íleo y a lo largo del colon. ENTOCORT EC® está autorizado en Estados Unidos para el tratamiento de la enfermedad de Crohn leve a moderada que implica el íleo y/o el colon ascendente. La dosificación oral usual de ENTOCORT EC® para el tratamiento de la enfermedad de Crohn es de 6 a 9 mg/día. ENTOCORT EC® se libera en los intestinos antes de absorberse y retenerse en la mucosa del intestino. Una vez que pasa a través del tejido diana de la mucosa del intestino, ENTOCORT EC® se metaboliza extensamente por el sistema del citocromo P450 en el hígado a metabolitos con actividad glucocorticoide despreciable. Por lo tanto, la biodisponibilidad es baja (aproximadamente un 10 %). La baja disponibilidad de budesonida da como resultado una relación terapéutica mejorada en comparación con otros glucocorticoides con metabolismo de primer paso menos extenso. La budesonida da como resultado pocos efectos secundarios, incluyendo menos supresión hipotalámica-pituitaria, que los corticosteroides que actúan sistémicamente. Sin embargo, la administración crónica de ENTOCORT EC® puede dar como resultado efectos glucocorticoides sistémicos tales como hipercorticismo y supresión adrenal. Véase el PDR 58° ed. 2004; 608-610.
Todavía adicionalmente, un bloqueo combinado de LAG-3 y CTLA-4 y/o PD-1 y/o PD-L1 (es decir, anticuerpos terapéuticos inmunoestimulantes dirigidos contra LAG-3 y contra CTL-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o contra PD-L1) junto con un esteroide no absorbible se pueden combinar adicionalmente con un salicilato. Los salicilatos incluyen agentes 5-ASA tales como, por ejemplo: sulfasalazina (AZULFIDINE®, Pharmacia & Upjohn); olsalazina (DIp En TUM®, Pharmacia & Upjohn); balsalazida (COLAZAL®, Salix Pharmaceuticals, Inc.); y mesalamina (ASACOL®, Procter & Gamble Pharmaceuticals; PENTASA®, Shire US; CANASA®, Axcan Scandipharm, Inc.; ROWASA®, Solvay).
De acuerdo con los métodos descritos en el presente documento, un salicilato administrado junto con anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTL-4 y/o anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o contra PD-L-1 y un esteroide no absorbible puede incluir cualquier administración solapante o secuencial del salicilato y del esteroide no absorbible para disminuir la incidencia de la colitis inducida por los anticuerpos inmunoestimulantes. De este modo, por ejemplo, los métodos para reducir la incidencia de la colitis inducida por los anticuerpos inmunoestimulantes abarcan administrar un salicilato y un esteroide no absorbible de forma concurrente o secuencial (por ejemplo, se administra un salicilato 6 horas después de un esteroide no absorbible), o cualquier combinación de las mismas. Adicionalmente, se pueden administrar un salicilato y un esteroide no absorbible por la misma ruta (por ejemplo, ambos se administran por vía oral) o por diferentes rutas (por ejemplo, se administra un salicilato por vía oral y se administra un esteroide no absorbible por vía rectal), que puede diferir de la(s) ruta(s) utilizadas para administrar los anticuerpos dirigidos contra LAG-3 y contra CTLA-4 y/o los anticuerpos dirigidos contra PD-1 y/o contra PD-L1.
La presente invención se ilustra adicionalmente por los siguientes ejemplos, que no deben considerarse como una limitación adicional.
Ejemplos
Ejemplo 1: Diseño de variantes de LAG3.1 (Anticuerpo 25F7)
Se crearon variantes de anticuerpos del anticuerpo dirigido contra LAG-3 anteriormente descrito, 25F7, denominado en el presente documento como LAG3.1, analizando en primer lugar la secuencia de aminoácidos del anticuerpo para los sitios potenciales de degradación. Se llevó a cabo la expresión de la mutagénesis dirigida a sitio de la región Vh de LAG3.1 utilizando el kit de mutagénesis dirigida al sitio QuikChange II XL® (Agilent Technologies). A continuación se subclonaron las regiones V<h>alteradas en vectores UCOE® (EMD Millipore) que contienen la región constante de IgG4-S228P humana. Cada uno de los diferentes vectores de la cadena pesada se cotransfectaron con un vector que expresaba la cadena kappa de LAG3.1 en células CHO-S, y se seleccionaron combinaciones estables para la expresión.
Se identificaron cinco motivos de desamidación potenciales en la CDR2 de la región variable de la cadena pesada. Estos sitios se localizaron en las posiciones 52, 54, 56, 58, y 60 de la región variable de la cadena pesada de LAG3.1 (SEQ ID NO: 2) (véase la Figura 1A). En particular, la desamidación de la secuencia "NG" de la CDR2 de la VH (SEQ ID NO: 6) se observó en todas las condiciones, así como la isomerización adicional de la secuencia. La desamidación del material de partida fue aproximadamente del 10 %. Adicionalmente, se descubrió que esta secuencia "NG" no corresponde a una secuencia de la línea germinal (véase la Figura 3). Sin embargo, la secuencia consenso de la línea germinal era un sitio de glicosilación potencial y, por lo tanto, no se incluyó entre las variantes de anticuerpos.
Se diseñaron cuatro variantes (denominadas en el presente documento LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, y LAG3.8) que resolvieron dos de los motivos de desamidación potenciales (posiciones 54 y 56), como se muestra en la Figura 3. Estas variantes se sometieron a una matriz de condiciones que se resume en la siguiente Tabla 1 y se analizaron las siguientes características: (a) estabilidades química y térmica (estabilidad física); (b) cromatografía de exclusión por tamaño (agregación); (c) gel de centrado isoeléctrico (IEF) (heterogeneidad de carga); (d) actividad mediante el análisis Biacore (actividad de unión y funcional); y (e) cartografiado de péptidos mediante espectrometría de masas (modificaciones químicas/estabilidad molecular).
Tabla 1
Ejemplo 2 : Caracterización de variantes de LAG-3
1. Unión de linfocitos T CD4+ humanos activados
Para ensayar la capacidad de las variantes de anticuerpos para unirse a LAG-3 humano natural sobre la superficie de los linfocitos T activados humanos, se estimularon células mononucleares de sangre periférica de un donante sano normal en placas de cultivo de tejidos de 15 cm a una densidad de 2x10e6 células/ml, con una combinación de anticuerpo dirigido contra CD3 (eBioscience, n.° de catálogo 16-0037-85) y anticuerpo dirigido contra-CD28 (BD Bioscience, n.° de catálogo 555725) presentes en solución a 5 pg/ml y 3 pg/ml, respectivamente. Después de tres días de estimulación, las células se recogieron, se lavaron 1X con tampón 1x PFAE (1x PBS FBS al 2 %, azida de sodio al 0,02 %, Na EDTA 2 mM), y se resuspendieron en tampón 1x PFAE para la tinción.
Para la reacción de unión, las variantes de LAG3.1 se diluyeron en serie con tampón 1x PFAE frío, a continuación se mezclaron 50 pl de solución de anticuerpo diluida con 50 pl de anticuerpo marcado con Fitc dirigido contra CD4 humano (BD Bioscience, n.° de catálogo 555346) diluido 1:16 en tampón 1x PFAE. Para la reacción de unión, 100 pl de esta mezcla de anticuerpos diluida se añadieron a 2 x 10<5>células y la mezcla se incubó a 4 °C durante 30 minutos. A continuación las células se lavaron dos veces con tampón 1x PFAE. Una dilución 1:200 de anticuerpo de cabra marcado con PE dirigido contra anticuerpo específico de Fcy humano (Jackson ImmunoResearch, n.° de cat. 109-116 170) se añadió a lo anterior y la mezcla se incubó durante 30 minutos a 4 °C, seguido por lavado dos veces con tampón 1x PFAE frío. Tras el lavado final, se añadieron 150 pl de 1x PFAE frío a cada solución y se llevó a cabo el análisis de la unión del anticuerpo mediante citometría de flujo usando el citómetro de flujo FACSCanto (BD Bioscience).
Los resultados del análisis de citometría de flujo se resumen en la Figura 4A, que es un gráfico que muestra la CE50 para la unión del anticuerpo a linfocitos T CD4+ activados humanos. La Figura 4B es un gráfico que muestra la unión del anticuerpo a un antígeno LAG-3/Fc humano soluble mediante BIACORE. Tal como se muestra, las afinidades de unión de LAG3.5 y LAG3.8 son ligeramente menores, en comparación con LAG3.1, mientras que sus constantes de disociación son ligeramente mayores en comparación con LAG3.1.
2. Estabilidad física
Se ensayaron la estabilidad térmica y la desnaturalización térmica de las variantes utilizando Microcal VP-DSC. Específicamente, se diluyó cada variante en PBS (Mediatech n.° de catálogo 21-040-CV lote n.° 21040139). La concentración final de la muestra fue de 250 pg/ml tras la dilución en PBS. Se realizó un barrido de la muestra a 74 °C, se enfrió a 25 °C, y se recalentó a 74 °C. Se usó un tampón PBS como blanco control. Los datos se ajustaron a un modelo no de dos estados y se llevó a cabo el ajuste de la curva mediante el programa informático Origin.
Como se resume en la Tabla 2 y se muestra en la Figura 5, LAG3.5 tuvo una temperatura de fusión TM2 mayor que LAG3.1, indicando una mayor estabilidad global.
Tabla 2
El replegado del anticuerpo tras la desnaturalización es una medida inversa del potencial de agregación a largo plazo. En consecuencia, se ensayaron también las variantes de LAG-3y se compararon en términos de reversibilidad térmica. Específicamente, los anticuerpos se calentaron a 74 °C y se enfriaron a temperatura ambiente antes de calentarse de nuevo a 74 °C. La relación del área bajo la curva entre el segundo y el primer histograma proporciona la estimación de la reversibilidad térmica, que es una medida directa de la reversibilidad conformacional.
Como se resume en la Tabla 3 y se muestra en la Figura 6, LAG3.5 tuvo una reversibilidad térmica sustancialmente mayor que el resto de variantes. De forma notable, el porcentaje de reversibilidad de LAG3.5 (47 %) fue más del doble del de LAG3.1 (20 %). La reversibilidad térmica está fuertemente correlacionada con el potencial de agregación a largo plazo. Una reversibilidad menor corresponde a una agregación potencial mayor. Basándose en esta observación, LAG3.1 presentaría potencialmente una agregación sustancialmente mayor en el tiempo, en comparación con LAG3.5. De forma similar, el resto de variantes podrían presentar potencialmente una agregación sustancialmente mayor en el tiempo en comparación con LAG3.5.
Tabla 3
3. Agregación
Se ensayaron también las variantes para determinar la estabilidad como medida de la agregación de proteínas utilizando HPLC de exclusión por tamaños convencional (SEC-HPLC) de acuerdo con el siguiente protocolo: se diluyeron muestras de ensayo del anticuerpo a 1,0 mg/ml con solución salina tamponada con fosfato (PBS) y se aplicaron 10 ul a un HPLC (Waters, modelo 2795). Se llevó a cabo la separación en una columna de filtración en gel (TOSOH Bioscience, TSKgel G3000 SWxl, 7,8 mm x 300 mm, n.° de producto 08541) utilizando una fase móvil de fosfato de sodio 0,1 M, cloruro de sodio 0,15 M, sulfato de sodio 0,1 M, pH 7,2. El analito se detectó por seguimiento de la absorbancia del UV a 280 nm, y la composición porcentual del área de pico del anticuerpo se determinó mediante el programa informático Empower. Como se muestra en la Tabla 4, LAG3.5 presentó una agregación sustancialmente reducida en comparación con LAG3.1.
Tabla 4
Ejemplo 3: Selección de variantes
Basándose en los estudios descritos anteriormente, se seleccionó la variante del anticuerpo LAG3.5 para análisis adicional, a la vista de su estabilidad física y química significativamente mejorada en comparación con su forma sin modificar (LAG3.1), particularmente su elevada capacidad de replegado conformacional (reversibilidad térmica). Este análisis incluía una solución en dos etapas de (a) estrés acelerado, (b) seguida por una evaluación de la estabilidad en tiempo real durante 12 semanas. Específicamente, se incubó LAG3.5 a 1,0 mg/ml a pH 8,0, en bicarbonato de amonio 50 mM, durante 5 días a 40 °C. Se analizó el grado de modificaciones después de 5 días, así como los efectos sobre la actividad y la estabilidad. A continuación, se sometió la variante de LAG3.5 a estabilidad en tiempo real en PBS durante un plazo de 12 semanas y se analizó posteriormente. A continuación se describen los resultados de estos estudios.
1. Unión al antígeno
Como se muestra en la Figura 7 (y en la Tabla 5), no se observaron cambios en la unión al antígeno después de 5 días. Como también se muestra en las Figuras 10A y B, LAG3.5 no presentó cambios en la unión al antígeno ni en la estabilidad física después de 12 semanas. En particular, LAG3.5 mantiene una mayor afinidad que LAG3.8 durante el periodo completo de 12 semanas a 4 °C y 40 °C.
Tabla 5
2. Modificaciones químicas/Estabilidad molecular
Se utilizó el cartografiado de péptidos mediante espectrometría de masas para analizar la estabilidad química/molecular de LAG3.5 en comparación con LAG3.1. Específicamente, el anticuerpo purificado se redujo, se alquiló, se dializó, y se digirió con tripsina (catálogo de Promega, V5111) y GluC (Roche Cat. 11047817001). El resultado de las digestiones se analizó mediante espectrometría de masas nano-CL EMEM (Thermo Fisher LTQ Orbitrap).
Tal como se muestra en la Figura 8, LAG3.1 mostró una mayor heterogeneidad para V<h>en comparación con LAG3.5 cuando se sometió a estabilidad acelerada a un pH mayor, que desamida los restos de asparagina (etapa 1). El cambio en la masa debido a la isomerización no se pudo detectar en las condiciones experimentales actuales. El cambio del porcentaje se expresa como un cociente de todos los cambios combinados respecto al pico precursor.
Además, como se muestra en la Figura 11, LAG3.1 mostró una mayor heterogeneidad para V<h>en comparación con LAG3.5 cuando se sometió a estabilidad en tiempo real prolongada de 12 semanas, tanto a 4 °C como a 40 °C (etapa 2).
3. Estabilidad física
La reversibilidad térmica se midió en PBS a un pH 8,0. En ambas condiciones, LAG3.5 presentó de nuevo aproximadamente el doble de nivel de replegado en comparación con LAG3.1. Específicamente, como se muestra en las Tablas 6-8, LAG3.5 presentó un 43 % de replegado en comparación con un 18 % para LAG3.1 en PBS. LAG3.5 presentó también un 48 % de replegado en comparación con un 29 % de replegado para LAG3.1 a pH 8,0.
Tabla 6 - DSC:fusión
- -
Tabla 8: DSC:re le ado
4. Heterogeneidad de carga
Para evaluar la heterogeneidad de carga, se analizaron las variantes utilizando isoelectroenfoque (IEF) con marcadores convencionales de pI 5,5 y pI 10,0 en comparación con LAG3.1. En resumen, se aplicaron las soluciones de anticuerpo sobre un gel de IEF prefabricado de pI 3-7 de 1 mm de espesor (Invitrogen, n.° de catálogo EC6648BOX) junto con marcadores pI 3-10 (SERVA, n.° de cat. 39212). Se llevó a cabo la electroforesis utilizando un tampón de cátodo IEF 3-7 (Invitrogen, n.° de catálogo LC5370) y un tampón de ánodo IEF (Invitrogen, n° de catálogo LC5300) y se aplicó la corriente eléctrica de aproximadamente 100 V constantes durante 1 h, 200 V constantes durante 1 h, y 500 V constantes durante 30 min. Los geles IEF se tiñeron con azul de Coomasie para detectar las bandas de proteínas y se destiñeron con una solución de metanol-ácido acético. A continuación, los geles IEF se analizaron mediante el programa informático ImageQuant TL. Basándose en este análisis (no se muestran los datos), LAG3.5 presentó significativamente menos heterogeneidad en comparación con LAG3.1.
5. HIC-HPLC
Para evaluar la solubilidad, se analizaron las variantes utilizando la cromatografía de interacción hidrófoba convencional (HIC-HPLC) de acuerdo con el siguiente protocolo: 50 ul de sulfato de amonio 2 M se añadieron a 50 ul de la muestra de ensayo del anticuerpo a 1mg/ml. A continuación se aplicaron 80 ul de la muestra de ensayo a un HPLC (Waters, modelo 2795) conectado en línea a una columna HIC (TOSOH Bioscience, Éter-5PW TSK-gel, 7,5mm x 75mm, producto n.° 07573). Se eluyó la muestra a un caudal de 1,0 ml/min con un gradiente del 100 % de tampón A (sulfato de amonio 2 M, fosfato de sodio 0,1 M, pH 7,0) a 100 % de tampón B (fosfato de sodio 0,1 M, pH 7,0) durante 50 minutos. El anticuerpo se detectó por seguimiento de la absorbancia UV a 280 nm y se analizaron los datos con el programa informático Empower. Tal como se muestra en la Figura 9, la hidrofilicidad de LAG3.5 presento solubilidad a concentraciones elevadas de sulfato de amonio.
Ejemplo 4: Inversión de la inhibición de la respuesta inmunomediada de los linfocitos T
Se determinó la actividad de LAG3.5 por medio de un ensayo funcional que utilizó un hibridoma de linfocitos T de ratón específico de antígeno (3A9). El hibridoma 3A9 expresa un receptor de linfocitos T específico de un péptido de lisozima de huevo de gallina (HEL48-62) y secreta IL-2 cuando se cultiva simultáneamente con células presentadoras de antígenos pulsadas con péptidos (LK35.2) emparejadas por MHC. Como huLAG-3-Fc es capaz de unirse a líneas de células B positivas para MHC de clase II, la expresión de huLAG-3 en la línea 3A9 podría ejercer un efecto inhibidor a través del encaje con la clase II de la línea presentadora de murino. Una comparación del perfil de respuesta del péptido del precursor 3A9 con el de las células 3A9 transducidas con LAG-3 humano cultivadas simultáneamente con las células presentadoras de antígenos emparejadas con MHC demostró que la expresión de LAG-3 humano inhibió la sensibilidad del péptido en comparación con las células 3A9 del control. Esta inhibición se invirtió mediante el bloqueo de LAG-3 utilizando LAG3.5. Por lo tanto, se demostró el bloqueo de la inhibición mediada por LAG-3 para LAG3.5.
Ejemplo 5: Activación de linfocitos T mediante LAG3.5
La actividad funcional de LAG3.5 sobre linfocitos T primarios se evaluó usando cultivos de PBMC humanas estimuladas con el superantígeno SEB. Las PBMC totales se aislaron de la sangre de dieciocho donantes humanos y se estimularon durante 72 horas en cualquiera de dos formatos de ensayo: (i) una cantidad fija de anticuerpo (20 |jg/ml) y diluciones en serie de SEB, o (ii) una cantidad fija de SEB (85 ng/ml) y disoluciones en serie del anticuerpo. La IL-2 secretada, como medida de la actividad de los linfocitos T, se controló mediante ELISA. Se usaron anticuerpo dirigido contra PD-1 e Ipilimumab como controles positivos, y la actividad de LAG3.5 junto con la de los anticuerpos dirigidos contra PD-1 o contra CTLA-4 se evaluó para un subconjunto de donantes.
Se observó una secreción de IL-2 mejorada para una gama de concentraciones de SEB para quince de dieciocho donantes tratados con LAG3.5 solo, en comparación con el tratamiento con el anticuerpo control de isotipo. En la mayoría de los casos, la estimulación fue menor a la observada para el tratamiento con anticuerpo dirigido contra PD-1 o Ipilimumab. Con respecto al LAG3.5, los resultados de los dos formatos de ensayo (descritos anteriormente) concordaron entre sí. Por otra parte, en 5 de los 6 donantes sometidos a ensayo, la combinación de LAG3.5 con anticuerpo dirigido contra PD-1 o Ipilimumab dio como resultado mayores niveles de estimulación de lo observado para el anticuerpo control de isotipo combinado con anticuerpo dirigido contra PD-1 o Ipilimumab. Estos datos revelaron que LAG3.5 puede actuar en ensayos de linfocitos T humanos normales y que puede actividad adicionalmente respuestas mediadas por la inhibición de PD-1 y la función de CTLA-4.
SUMARIO DEL LISTADO DE SECUENCIAS
>1408_LAG-3_403_25F7.1_VH1_NT
CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACC
CTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGATTACTACTGGAA
CT GGAT CCGC CAGCCCCCAGGGAAGGGGCT GGAGT GGATT GGGGAAAT CAA
TCATAATGGAAACACCAACTCCAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCCTA
T C ACT AGACACGTCCAAGAACC AGTT CTCCCT GAAGCT GAGGT CTGT G ACCG
CCGCGGACACGGCT GT GTATTACT GT GCGTTT GGATATAGT GACTACGAGTA
CAACT GGTTCGACCCCT GGGGCCAGGGAACCCT GGT CACCGT CT CCTCA
>1408_LAG-3_403_25F7.1_VH1_AA
QV QLQQ W GAGLLKPSETLSLTCAVYGGSF SDYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINH
N GNTN SNP SLKSRVTLSLDTSKN QF SLKLRS VT AADTA VYY C AF GY SD YEYN W
FDPWGQGTLVTVSS
__________ ___________
|2 E [ Vk n.a. 25F7 | |
>1408_LAG-3_403_25F7.1_VK1_NT
GAAATTGT GTTGACACAGTCTCCAGCCACCCT GT CTTT GT CT CCAGGGGAAA
GAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTATTAGCAGCTACTTAGCCTG
GT ACCA AC AGAAACCT GGCC AGGCT CCCAGGCT CCT CAT CT AT GAT GCAT CC
AACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACA
GACTT CACT CT CACCAT CAGCAGCCTAGAGCCT GAAGATTTTGCAGTTTATT
ACT GT CAGCAGCGTAGCAACT GGCCT CT CACTTTT GGCCAGGGGACCAACCT
GGAGATCAAA
____________ _____________
|~ E [ V<k>a.a. 25F7 | |
>1408_LAG-3_403_25F7.1_VK1_AA
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRAT
GIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTNLEIK
V<h>n.a. LAG3.5caggtgcagctacagcagtggggcgcaggactgttgaagccttcggagaccctgtccctcacctgcgctgtctatggtgggtc cttcagtgattactactggaactggatccgccagcccccagggaaggggctggagtggattggggaaatcaatcatcgtggaa gcaccaactccaacccgtccctcaagagtcgagtcaccctatcactagacacgtccaagaaccagttctccctgaagctgaggt ctgtgaccgccgcggacacggctgtgtattactgtgcgtttggatatagtgactacgagtacaactggttcgacccctggggcc agggaaccctggtcaccgtctcctca_______________________________________________________
____________________________
I 12 | Vh a.a. LAG3.5 | |
Vh a.a. LAG3.5
QV QLQQ W GAGLLKPSETLSLT CAVYGGSF SDYYWNWIRQPPGKGLEWIGE
INHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVYYCAFGYS
D YEYN WFDP W GQ GTLVT V S S
__________________________
| 13 | V<k>n.a. LAG3.5 | |
V<k>n.a. LAG3.5gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcctgcagggccagtcagagt attagcagctacttagcctggtaccaacagaaacctggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccact ggcatcccagccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaagattttgca gtttattactgtcagcagcgtagcaactggcctctcacttttggccaggggaccaacctggagatcaaa
____________________________
| 14 | V<k>a.a. LAG3.5 | |
Vk a.a. LAG3.5
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYD
ASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAYYYCQQRSNWPLTFGQ
GTNLEIK
secuencia de LAG-3 a.a. humano
MWEAQFLGLLFLQPLWVAPVKPLQPGAEVPVVWAQEGAPAQLPCSPTIPLQDL
SLLRRAGVTWQHQPDSGPPAAAPGHPLAPGPHPAAPSSWGPRPRRYTYLSVGP
GGLRSGRLPLQPRVQLDERGRQRGDFSLWLRPARRADAGEYRAAVHLRDRALS
CRLRLRLGQASMTASPPGSLRASDWVILNCSFSRPDRPASVHWFRNRGQGRVPV
RESPHHHLAESFLFLPQVSPMDSGPWGCILTYRDGFNVSIMYNLTVLGLEPPTPL
TVYAGAGSRVGLPCRLPAGVGTRSFLTAKWTPPGGGPDLLVTGDNGDFTLRLE
DVSQAQAGTYTCHIHLQEQQLNATVTLAIITVTPKSFGSPGSLGKLLCEVTPVSG
QERFVWSSLDTPSQRSFSGPWLEAQEAQLLSQPWQCQLYQGERLLGAAVYFTE
LSSPGAQRSGRAPGALPAGHLLLFLTLGVLSLLLLVTGAFGFHLWRRQWRPRRF
SALEQGIHPPQAQSKIEELEQEPEPEPEPEPEPEPEPEPEQL*
LAG3.1HC
CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACC
CTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGATTACTACTGGAA
CT GGAT CCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCT GGAGTGGATT GGGGAAAT CAA
TCATAATGGAAACACCAACTCCAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCCTA
T C ACT AGACACGT CC AAGAACCAGTT CTCCCT GAAGCT GAGGT CT GT GACCG
CCGCGGACACGGCT GT GTATTACT GT GCGTTT GGATATAGT GACTACGAGTA
CAACT GGTT CGACCCCT GGGGCCAGGGAACCCT GGT CACCGT CT CCTCAGCT
AGCACCAAGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCT
CCGAGAGCACAGCCGCCCT GGGCTGCCT GGT CAAGGACTACTTCCCCGAACC
GGT GACGGT GTCGT GGAACTCAGGCGCCCT GACCAGCGGCGT GCACACCTT C
CCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCG
TGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACGAAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACA
AGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGTCCAAATATGGTCCCC
CAT GCCCACCAT GCCCAGCACCT GAGTT CCT GGGGGGACCATCAGT CTTCCT
GTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACT CT CAT GATCTCCCGGACCCCT GAGGTC
ACGT GCGT GGT GGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGT CCAGTT CAAC
TGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAG
GAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACC
AGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCC
TCCCGTCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAG
AGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAGGAGATGACCAAGAACC
AGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGT
GGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCC
CGT GCT GGACTCCGACGGCT CCTT CTT CCT CTACAGCAGGCTAACCGTGGAC
AAGAGCAGGT GGCAGGAGGGGAAT GT CTT CT CAT GCTCCGT G AT GC AT GAG
GCT CT GCACAACCACTACACACAGAAGAGCCT CT CCCT GT CT CT GGGTAAAT
GA
TRADUCCION\DE\LAG3.1HC
QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNW1RQPPGKGLEWIGEINH
NGNTNSNPSEKSRVTESEDTSKNQFSLKI.RSVTAADTAVYYCAFGYSDYEYNW
FDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVS
WNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKV
DKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQE
DPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKC
K.VSNKGLPSS1EKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSD
IAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWOEGNVFSCSVMH
LAG3.1LC
GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAA
GAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTATTAGCAGCTACTTAGCCTG
GTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCC
AACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACA
GACTT CACTCTCACCAT CAGCAGCCTAGAGCCT GAAGATTTTGCAGTTTATT
ACT GT CAGCAGCGTAGC AACTGGCCT CT CACTTTT GGCCAGGGGACCAACCT
GGAGATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCT
GATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACT
TCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAAT
CGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCT
ACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACA
AAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAA
GAGCTT C AAC AGGGGAGAGT GTT AG
TRADUCCION\DE\LAG3.1LC
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRAT
GIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTNLEIKRTVA
APSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTE
QDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC*
Secuencia de la cadena pesada de LAG3.5 - completa
QV QLQQ W GAGLLKPSETLSLT CAVYGGSF SDYYWNWIRQPPGKGLE WIGE
INHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVYYCAFGYS
DYEYNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVK
DYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKT
YTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDT
LMISRTPEVT CVVVDV SQEDPEV QFNWYVDGYEVHNAKTKPREEQFNSTY
RVV SVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYT
LPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDS
DGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK*
Secuencia de la cadena pesada de LAG3.5 - completa
caggtgcagctacagcagtggggcgcaggactgttgaagccttcggagaccctgtccctcacctgcgctgtctatggtgggtc cttcagtgattactactggaactggatccgccagcccccagggaaggggctggagtggattggggaaatcaatcatcgtggaa gcaccaactccaacccgtccctcaagagtcgagtcaccctatcactagacacgtccaagaaccagttctccctgaagctgaggt ctgtgaccgccgcggacacggctgtgtattactgtgcgtttggatatagtgactacgagtacaactggttcgacccctggggcc agggaaccctggtcaccgtctcctcagctagcaccaagggcccatccgtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctcc gagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctg accagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccag cagcttgggcacgaagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagagagttgagtccaa atatggtcccccatgcccaccatgcccagcacctgagttcctggggggaccatcagtcttcctgttccccccaaaacccaagga cactctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccaggaagaccccgaggtccagttcaact ggtacgtggatggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagttcaacagcacgtaccgtgtggtca gcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccgtcctc catcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagagccacaggtgtacaccctgcccccatcccaggaggaga tgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgg gcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaggctaaccgtgg acaagagcaggtggcaggaggggaatgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacacagaagag cctctccctgtctctgggtaaatga
Secuencia de la cadena kappa de LAG3.5 - completa
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYD
ASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQ
GTNLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKV
DNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQG
LSSPVTKSFNRGEC*
Secuencia de la cadena pesada de LAG3.5 - completa
gaaattg tg ttgacacag tctccagcca ccctg tc tttg tc tcca g g g g a a a g a g cca ccctc tcc tg ca g g g cca g tca g a g t a tta g ca g cta ctta gcctgg taccaacagaaacctggccaggctcccaggctcctca tcta tga tgca tccaacagggccact ggca tcccagccaggttca g tg g ca g tg g g tc tg g g a ca g a cttca ctc tca cca tca g ca g ccta g a g cctg a a g a ttttg ca g ttta tta ctg tca g cagcg tagcaactggcctctcacttttggccaggggaccaacctggagatcaaacg tacgg tggctgca cca tc tg tcttca tcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctg ttg tg tgcctgctgaataacttcta tccca gagaggccaaagtacag tg g a a g g tg g a ta a cg ccctcca a tcg g g ta a ctccca g g a g a g tg tca ca g a g ca g g a ca g c aaggacagcacctacagcctcag ca g ca ccctg a cg ctg a g ca a a g ca g a cta cg a g a a a ca ca a a g tc ta cg cctg cg a a g tca ccca tca g g g cctg a g ctcg cccg tca ca a a g a g cttca a ca g g g g a g a g tg tta g

Claims (21)

REIVINDICACIONES
1. Una composición individual que comprende:
(a) un anticuerpo monoclonal, o una porción de unión a antígeno del mismo, que se une al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) humano,
(b) un anticuerpo anti-PD-1, o una porción de unión a antígeno del mismo y
(c) un vehículo farmacéuticamente aceptable,
en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano comprende las regiones CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 15, 16 y 17, respectivamente, y las regiones CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena ligera que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 18, 19 y 20, respectivamente.
2. La composición individual de la reivindicación 1, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano comprende regiones variables de cadena pesada y ligera que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 12 y 14, respectivamente.
3. La composición individual de la reivindicación 1 o 2, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano exhibe una o una combinación de las siguientes propiedades:
(a) unión a LAG-3 de mono;
(b) carencia de unión a LAG-3 de ratón;
(c) inhibe la unión de LAG-3 a moléculas de histocompatibilidad mayor (MHC) de clase II; o
(d) estimula una respuesta inmunitaria.
4. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano estimula la producción de interleucina-2 (IL-2) en una respuesta específica de linfocitos T específicos de antígeno y/o estimula una respuesta inmunitaria antitumoral.
5. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano es un anticuerpo de longitud completa y/o el anticuerpo anti-PD-1 o la porción de unión a antígeno del mismo es un anticuerpo de longitud completa.
6. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano es un isotipo IgG1, IgG2 o IgG4 y/o el anticuerpo anti-PD-1 o la porción de unión a antígeno del mismo es un isotipo IgG1, IgG2 o IgG4.
7. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde el anticuerpo monoclonal que se une a LAG-3 humano es un anticuerpo humano IgG4 de longitud completa que se une a LAG-3 humano con una Kd de 0,27 x 10'9 M o menos según se determina por resonancia de plasmón superficial.
8. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el anticuerpo monoclonal que se une a LAG-3 humano comprende cadenas pesadas y ligeras que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 35 y 37, respectivamente.
9. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano es un fragmento de anticuerpo o un anticuerpo monocatenario y/o el anticuerpo anti-PD-1 o la porción de unión a antígeno del mismo es un fragmento de anticuerpo o un anticuerpo monocatenario.
10. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano es un anticuerpo humano, humanizado o quimérico y el anticuerpo anti-PD-1 o la porción de unión a antígeno del mismo es un anticuerpo humano, humanizado o quimérico.
11. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo que se une a LAG-3 humano y el anticuerpo anti-PD-1 o la porción de unión a antígeno del mismo son anticuerpos monoclonales de secuencia humana.
12. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en donde el anticuerpo monoclonal o la porción de unión a antígeno del mismo comprende las regiones variables de cadena pesada y ligera de 5C4.
13. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-12, que es adecuada para administración intravenosa.
14. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, para su uso en un método de estimulación de una respuesta inmunitaria en un sujeto.
15. La composición individual para su uso de acuerdo con la reivindicación 14, en donde el sujeto es un sujeto portador de un tumor y se estimula una respuesta inmunitaria contra el tumor.
16. La composición individual para su uso de acuerdo con la reivindicación 14, en donde la respuesta inmunitaria es una respuesta de linfocitos T específicos de antígeno, de tal manera que se estimula una respuesta de linfocitos T específicos de antígeno.
17. La composición individual para su uso de acuerdo con la reivindicación 16, en donde se estimula la producción de interleucina-2 por el linfocito T específico de antígeno.
18. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, para su uso en un método de inhibición del crecimiento de células tumorales en un sujeto.
19. La composición individual de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, para su uso en un método de tratamiento de cáncer en un sujeto.
20. La composición individual para su uso de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el cáncer es melanoma, melanoma maligno metastásico, cáncer renal, carcinoma de células claras, cáncer de próstata, adenocarcinoma de próstata refractario a hormonas, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer de pulmón o cáncer de pulmón no microcítico.
21. La composición individual para su uso de acuerdo con la reivindicación 19 o 20, en donde el cáncer es una neoplasia maligna refractaria o recurrente, o un cáncer metastásico.
ES20192145T 2012-07-02 2013-07-02 Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos Active ES2987734T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261667058P 2012-07-02 2012-07-02

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2987734T3 true ES2987734T3 (es) 2024-11-18

Family

ID=48795938

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES13737946.7T Active ES2638545T3 (es) 2012-07-02 2013-07-02 Optimización de anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos
ES17177885T Active ES2831406T3 (es) 2012-07-02 2013-07-02 Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos
ES20192145T Active ES2987734T3 (es) 2012-07-02 2013-07-02 Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES13737946.7T Active ES2638545T3 (es) 2012-07-02 2013-07-02 Optimización de anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos
ES17177885T Active ES2831406T3 (es) 2012-07-02 2013-07-02 Optimización de anticuerpos que se unen al gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) y sus usos

Country Status (39)

Country Link
US (7) US9505839B2 (es)
EP (4) EP3795592B1 (es)
JP (6) JP6320376B2 (es)
KR (6) KR20240168469A (es)
CN (2) CN108101991B (es)
AR (3) AR091649A1 (es)
AU (5) AU2013286914B2 (es)
BR (1) BR112014032999B1 (es)
CA (2) CA2877746C (es)
CL (1) CL2014003637A1 (es)
CO (1) CO7170127A2 (es)
CY (3) CY1119563T1 (es)
DK (3) DK3275899T3 (es)
EA (2) EA035013B1 (es)
ES (3) ES2638545T3 (es)
FI (2) FI3795592T3 (es)
FR (1) FR22C1057I2 (es)
HR (3) HRP20241357T1 (es)
HU (4) HUE034553T2 (es)
IL (1) IL236517B (es)
LT (4) LT2867258T (es)
LU (1) LUC00286I2 (es)
MX (2) MX365417B (es)
MY (3) MY197544A (es)
NL (1) NL301205I2 (es)
NO (2) NO2023008I1 (es)
NZ (1) NZ628528A (es)
PE (4) PE20241623A1 (es)
PH (2) PH12021552200A1 (es)
PL (2) PL3795592T3 (es)
PT (3) PT3275899T (es)
RS (3) RS65997B1 (es)
SG (2) SG10201610960YA (es)
SI (3) SI3275899T1 (es)
SM (3) SMT202400395T1 (es)
TN (1) TN2014000536A1 (es)
TW (8) TW202540190A (es)
UY (1) UY34887A (es)
WO (1) WO2014008218A1 (es)

Families Citing this family (603)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3530736A3 (en) * 2005-05-09 2019-11-06 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1 (pd-1) and methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
KR101704734B1 (ko) * 2005-07-01 2017-02-09 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
ES2549769T3 (es) 2009-03-25 2015-11-02 Genentech, Inc. Anticuerpos anti-FGFR3 y métodos que emplean los mismos
DK2734205T3 (en) 2011-07-21 2018-06-14 Tolero Pharmaceuticals Inc Heterocyclic Protein Kinase Inhibitors
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
UA117466C2 (uk) 2012-12-13 2018-08-10 Мерк Шарп Енд Доме Корп. СТАБІЛЬНИЙ СКЛАД У ВИГЛЯДІ РОЗЧИНУ АНТИТІЛА ДО IL-23p19
RS60538B1 (sr) * 2013-03-15 2020-08-31 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Anti-lag-3 vezujući proteini
US20160030384A1 (en) 2013-04-09 2016-02-04 Boston Biomedical, Inc. 2-acetylnaphtho[2,3-b]furan -4,9-dione for use on treating cancer
CN105682683A (zh) * 2013-08-02 2016-06-15 阿杜罗生物科技控股有限公司 结合cd27激动剂以及免疫检查点抑制以用于免疫刺激
RS64268B1 (sr) * 2013-09-20 2023-07-31 Bristol Myers Squibb Co Kombinacija anti-lag-3 antitela i anti-pd-1 antitela za lečenje tumora
EP3049442A4 (en) 2013-09-26 2017-06-28 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
WO2015066413A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Novartis Ag Oxazolidinone hydroxamic acid compounds for the treatment of bacterial infections
CR20160319A (es) 2013-12-12 2016-11-08 Jiangsu Hengrui Medicine Co Anticuerpo pd-1, fragmento de union al antigeno de este y uso médico de este
EA201990240A1 (ru) 2013-12-24 2019-06-28 Бристол-Маерс Сквибб Компани Новые трициклические соединения в качестве противораковых средств
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
TWI680138B (zh) * 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
UA122479C2 (uk) 2014-01-24 2020-11-25 Дана-Фарбер Кенсер Інстітьют, Інк. Виділена молекула антитіла, яка зв’язується з людським білком програмованої смерті-1 (pd-1)
WO2015116539A1 (en) 2014-01-28 2015-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Anti-lag-3 antibodies to treat hematological malignancies
DK3099709T3 (da) * 2014-01-31 2020-02-03 Aimm Therapeutics Bv Midler og fremgangsmåder til fremstilling af stabile antistoffer
PL3099717T3 (pl) 2014-01-31 2019-10-31 Novartis Ag Cząsteczki przeciwciała dla TIM-3 i ich zastosowanie
KR20200029627A (ko) 2014-03-12 2020-03-18 예다 리서치 앤드 디벨럽먼트 캄파니 리미티드 Cns의 질환 및 손상을 치료하기 위한 전신적 조절 t 세포 수준 또는 활성의 감소
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
EA201691765A1 (ru) * 2014-03-14 2016-12-30 Новартис Аг Молекулы антител против lag-3 и их применения
HUE042134T2 (hu) 2014-03-24 2019-06-28 Novartis Ag Monobaktám szerves vegyületek bakteriális fertõzések kezelésére
JP2017525753A (ja) 2014-06-06 2017-09-07 フレクサス・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッドＦｌｅｘｕｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｉｎｃ． 免疫調節剤
PL3151921T3 (pl) 2014-06-06 2020-02-28 Bristol-Myers Squibb Company Przeciwciała przeciwko receptorowi indukowanego glukokortykoidami czynnika martwicy nowotworu (gitr) i ich zastosowania
US10092645B2 (en) * 2014-06-17 2018-10-09 Medimmune Limited Methods of treatment with antagonists against PD-1 and PD-L1 in combination with radiation therapy
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
US10160726B2 (en) 2014-08-06 2018-12-25 Novartis Ag Quinolone derivatives as antibacterials
JO3663B1 (ar) * 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
EP3191126B1 (en) 2014-09-13 2020-05-13 Novartis AG Combination therapies of alk inhibitors
KR20170066546A (ko) 2014-10-03 2017-06-14 노파르티스 아게 조합 요법
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
SG11201702401RA (en) 2014-10-14 2017-04-27 Novartis Ag Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
NZ731185A (en) 2014-10-29 2024-03-22 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for mt1-mmp
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
EA201790806A1 (ru) 2014-11-05 2017-11-30 Флексус Байосайенсиз, Инк. Иммунорегулирующие средства
AR102537A1 (es) 2014-11-05 2017-03-08 Flexus Biosciences Inc Agentes inmunomoduladores
JP6805142B2 (ja) 2014-11-21 2020-12-23 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃｄ７３に対する抗体およびその使用
WO2016094639A1 (en) * 2014-12-10 2016-06-16 Wisconsin Alumni Research Foundation Mini-intronic plasmid dna vaccines in combination with lag3 blockade
HUE047225T2 (hu) 2014-12-16 2020-04-28 Novartis Ag LpxC inhibitor izoxazol hidroxámsav-vegyületek
EP3233918A1 (en) 2014-12-19 2017-10-25 Novartis AG Combination therapies
AR103232A1 (es) 2014-12-22 2017-04-26 Bristol Myers Squibb Co ANTAGONISTAS DE TGFbR
AR103268A1 (es) 2014-12-23 2017-04-26 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos contra tigit
KR102698184B1 (ko) * 2015-01-29 2024-08-23 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 관문 억제제 및 백신 조합 및 면역요법을 위한 이들의 사용
WO2016123573A1 (en) 2015-01-30 2016-08-04 President And Fellows Of Harvard College Peritumoral and intratumoral materials for cancer therapy
MA41463A (fr) * 2015-02-03 2017-12-12 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre le gène d'activation 3 des lymphocytes (lag-3)
WO2016127052A1 (en) 2015-02-05 2016-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Cxcl11 and smica as predictive biomarkers for efficacy of anti-ctla4 immunotherapy
SG11201706727XA (en) * 2015-02-19 2017-09-28 Bioclin Therapeutics Inc Methods, compositions, and kits for treatment of cancer
JP6836998B2 (ja) 2015-03-02 2021-03-03 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ＴＧＦ−β阻害剤
TWI706958B (zh) 2015-03-10 2020-10-11 美商艾杜諾生物科技公司 活化「干擾素基因刺激因子」依賴性訊息傳導之組合物及方法
MX2017012738A (es) 2015-04-03 2017-11-15 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores de indolamina 2.3-dioxigenasa (ido) para el tratamiento de cancer.
CA2980460A1 (en) 2015-04-13 2016-10-20 Five Prime Therapeutics, Inc. Combination therapy for cancer
HRP20201334T1 (hr) 2015-04-17 2020-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Kompozicije koje sadrže kombinaciju ipilimumaba i nivolumaba
WO2016183114A1 (en) 2015-05-11 2016-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US9725449B2 (en) 2015-05-12 2017-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
WO2016183115A1 (en) 2015-05-12 2016-11-17 Bristol-Myers Squibb Company 5h-pyrido[3,2-b]indole compounds as anticancer agents
HUE045585T2 (hu) 2015-05-18 2020-01-28 Tolero Pharmaceuticals Inc Megnövelt biológiai hozzáférhetõséggel rendelkezõ Alvocidib gyógyszer-elõanyagok
EP3297672B1 (en) 2015-05-21 2021-09-01 Harpoon Therapeutics, Inc. Trispecific binding proteins and methods of use
AU2016271111B2 (en) 2015-05-29 2022-04-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against OX40 and uses thereof
DK3303394T3 (da) 2015-05-29 2020-07-06 Agenus Inc Anti-ctla-4-antistoffer og fremgangsmåder til anvendelse deraf
WO2016196935A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Boston Biomedical, Inc. Compositions comprising a cancer stemness inhibitor and an immunotherapeutic agent for use in treating cancer
EA039293B1 (ru) * 2015-06-05 2021-12-30 Мерк Шарп И Доум Корп. Антитела против lag3 и антигенсвязывающие фрагменты
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
MX2017016502A (es) 2015-06-29 2018-03-12 Univ Rockefeller Anticuerpos contra cd40 con actividad agonista mejorada.
MX2017016844A (es) 2015-07-16 2018-08-15 Biokine Therapeutics Ltd Composiciones y procedimientos para tratar cancer.
CN114853891A (zh) * 2015-07-22 2022-08-05 索伦托药业有限公司 与lag3结合的抗体治疗剂
US10399987B2 (en) 2015-07-28 2019-09-03 Bristol-Myer Squibb Company TGF beta receptor antagonists
US20180340025A1 (en) 2015-07-29 2018-11-29 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3
US20180207273A1 (en) 2015-07-29 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
EP3328418A1 (en) 2015-07-29 2018-06-06 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
PE20231958A1 (es) * 2015-07-30 2023-12-06 Macrogenics Inc Moleculas de union a pd-1 y metodos de uso de las mismas
CN108349976A (zh) 2015-08-25 2018-07-31 百时美施贵宝公司 TGFβ受体拮抗剂
RU2760582C2 (ru) 2015-09-02 2021-11-29 Иммутеп С.А.С. Анти-LAG-3 антитела
CN114230571B (zh) 2015-09-14 2025-07-08 无限药品股份有限公司 异喹啉酮的固体形式、其制备方法、包含其的组合物及其使用方法
RU2722451C1 (ru) * 2015-09-29 2020-06-01 Шанхай Чжанцзян Биотекнолоджи Ко., Лтд. Pd-1 антитела и их применение.
MA43028B1 (fr) 2015-10-02 2021-09-30 Hoffmann La Roche Anticorps bispécifiques pour pd1 et tim3
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途
US10149887B2 (en) 2015-10-23 2018-12-11 Canbas Co., Ltd. Peptides and peptidomimetics in combination with t cell activating and/or checkpoint inhibiting agents for cancer treatment
TW201730211A (zh) * 2015-10-30 2017-09-01 建南德克公司 抗因子d抗體及結合物
CA3001131A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Five Prime Therapeutics, Inc. Cd80 extracellular domain polypeptides and their use in cancer treatment
KR20180073693A (ko) 2015-11-09 2018-07-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Cho 세포에서 생산되는 폴리펩티드의 품질 속성을 조작하는 방법
JP6945456B2 (ja) * 2015-11-13 2021-10-06 マクロジェニクス，インコーポレーテッド Ｌａｇ‐３結合分子及びその使用方法
IL300122A (en) 2015-11-18 2023-03-01 Merck Sharp ַ& Dohme Llc Substances that bind to PD1 and/or LAG3
MX2018006072A (es) 2015-11-19 2018-08-01 Squibb Bristol Myers Co Anticuerpos contra receptor de factor de necrosis de tumor inducido por glucocorticoides (gitr) y usos de los mismos.
CN108366548B (zh) 2015-11-20 2021-10-08 瑞泽恩制药公司 具有人源化淋巴细胞活化基因3的非人动物
SG10201913538VA (en) 2015-11-23 2020-02-27 Five Prime Therapeutics Inc Fgfr2 inhibitors alone or in combination with immune stimulating agents in cancer treatment
CN108367069B (zh) 2015-12-14 2022-08-23 宏观基因有限公司 对于pd-1和ctla-4具有免疫反应性的双特异性分子及其使用方法
US10450318B2 (en) 2015-12-15 2019-10-22 Bristol-Myers Squibb Company CXCR4 receptor antagonists
BR112018012352A2 (pt) * 2015-12-16 2018-12-11 Merck Sharp & Dohme Corp. anticorpos anti-lag3 e fragmentos de ligação ao antígeno
CN108495651A (zh) 2015-12-17 2018-09-04 诺华股份有限公司 抗pd-1的抗体分子及其用途
TW201731872A (zh) 2015-12-18 2017-09-16 諾華公司 標靶CD32b之抗體及其使用方法
JP6993699B2 (ja) 2016-01-11 2022-02-03 ウニヴェルズィテート・ツューリヒ ヒトインターロイキン－２に対する免疫刺激性ヒト化モノクローナル抗体及びその融合タンパク質
CN109071447B (zh) 2016-02-19 2022-04-22 诺华股份有限公司 四环吡啶酮化合物作为抗病毒剂
CN116063494A (zh) * 2016-03-04 2023-05-05 洛克菲勒大学 具有增强的激动剂活性的cd40的抗体
AU2017228470A1 (en) 2016-03-04 2018-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-CD73 antibodies
EP3433257B1 (en) 2016-03-24 2023-10-11 Novartis AG Alkynyl nucleoside analogs as inhibitors of human rhinovirus
ES3056995T3 (en) 2016-04-13 2026-02-25 Vivia Biotech Sl Ex vivo bite-activated t cells
BR112018071307A2 (pt) 2016-04-18 2019-02-26 Celldex Therapeutics, Inc. anticorpos agonistas que ligam cd40 humana e usos dos mesmos
EP3452450A1 (en) 2016-05-04 2019-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3452451A4 (en) 2016-05-04 2019-11-13 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
US10544099B2 (en) 2016-05-04 2020-01-28 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3452452A4 (en) 2016-05-04 2019-10-30 Bristol-Myers Squibb Company INHIBITORS OF INDOLEAMINE-2,3-DIOXYGENASE AND METHOD FOR THEIR USE
WO2017192844A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3848393A1 (en) * 2016-05-18 2021-07-14 Boehringer Ingelheim International GmbH Antibody molecules for cancer treatment
HRP20220237T1 (hr) 2016-05-20 2022-04-29 Biohaven Therapeutics Ltd. Primjena riluzola, prolijekova riluzola ili analoga riluzola sa imunoterapijama za liječenje raka
KR102530742B1 (ko) 2016-05-20 2023-05-09 하푼 테라퓨틱스, 인크. 단일 도메인 혈청 알부민 결합 단백질
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
CN109715196A (zh) 2016-06-13 2019-05-03 转矩医疗股份有限公司 用于促进免疫细胞功能的组合物和方法
SMT202000524T1 (it) 2016-06-14 2020-11-10 Novartis Ag Forma cristallina di (r)-4-(5-(ciclopropiletinil)isossazol-3-il)-n-idrossi-2-metil-2-(metilsolfonil)butanammide come agente antibatterico
WO2017216685A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag Pentacyclic pyridone compounds as antivirals
WO2017216686A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag 8,9-fused 2-oxo-6,7-dihydropyrido-isoquinoline compounds as antivirals
JP7085709B2 (ja) 2016-06-20 2022-06-17 エフ－スター セラピューティクス リミテッド Ｐｄ－ｌ１及びｌａｇ－３に結合する結合分子
SG11201811184UA (en) 2016-06-20 2019-01-30 F Star Beta Ltd Lag -3 binding members
KR102379464B1 (ko) 2016-06-20 2022-03-29 키맵 리미티드 항-pd-l1 항체
US11155617B2 (en) 2016-06-23 2021-10-26 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. LAG-3 antibody, antigen-binding fragment thereof, and pharmaceutical application thereof
EP3474856B1 (en) 2016-06-24 2022-09-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
US20190233534A1 (en) 2016-07-14 2019-08-01 Fred Hutchinson Cancer Research Center Multiple bi-specific binding domain constructs with different epitope binding to treat cancer
US20190248893A1 (en) 2016-07-14 2019-08-15 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against tim3 and uses thereof
GB201612520D0 (en) 2016-07-19 2016-08-31 F-Star Beta Ltd Binding molecules
US20190292179A1 (en) 2016-07-21 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company TGF Beta RECEPTOR ANTAGONISTS
RU2744866C2 (ru) * 2016-08-15 2021-03-16 Нэшнл Юниверсити Корпорейшн Хоккайдо Юниверсити Антитело против lag-3
EP3503916A1 (en) 2016-08-26 2019-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
HRP20251424T1 (hr) * 2016-08-30 2025-12-19 Xencor, Inc. Bispecifična imunomodulacijska protutijela koja se vežu na kostimulacijske receptore i receptore imunosnih kontrolnih točaka
TW201811788A (zh) 2016-09-09 2018-04-01 瑞士商諾華公司 作為抗病毒劑之多環吡啶酮化合物
CA3036564A1 (en) 2016-09-23 2018-03-29 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific antibody molecules comprising lambda and kappa light chains
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
KR20230133934A (ko) 2016-10-11 2023-09-19 아게누스 인코포레이티드 항-lag-3 항체 및 이의 사용 방법
US11390676B2 (en) 2016-10-13 2022-07-19 Symphogen A/S Anti-LAG-3 antibodies and compositions
WO2018073753A1 (en) 2016-10-18 2018-04-26 Novartis Ag Fused tetracyclic pyridone compounds as antivirals
US10660909B2 (en) 2016-11-17 2020-05-26 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists
WO2018094275A1 (en) 2016-11-18 2018-05-24 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
CA3045306A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 Boston Biomedical, Inc. Naphthofuran derivatives, preparation, and methods of use thereof
IL307242B1 (en) 2016-12-07 2026-07-01 Agenus Inc Anti-CTLA-4 antibodies and methods of using them
US10961239B2 (en) 2017-01-05 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company TGF beta receptor antagonists
MX389798B (es) 2017-01-20 2025-03-20 Arcus Biosciences Inc Azolopirimidina para el tratamiento de trastornos relacionados con el cáncer.
BR112019016336A2 (pt) 2017-02-10 2020-03-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Conjugado de anticorpo radiorrotulado, método para imageamento de um tecido que expressa lag3 e para tratar um tumor, e, composto.
WO2018151820A1 (en) 2017-02-16 2018-08-23 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof
WO2018153340A1 (en) * 2017-02-22 2018-08-30 I-Mab Anti-lag-3 antibodies and uses thereof
EP3601355A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3601353A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Five Prime Therapeutics, Inc. Combination therapy for cancer using anti-gitr antibodies
KR102461885B1 (ko) 2017-04-03 2022-11-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-pd-1 항체와 돌연변이 il-2 또는 il-15의 면역접합체
CA3052532A1 (en) 2017-04-05 2018-10-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies specifically binding to pd1 and lag3
UA128387C2 (uk) * 2017-04-05 2024-07-03 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антитіло до lag3
AU2018247916B2 (en) 2017-04-05 2025-04-24 Les Laboratoires Servier Combination therapies targeting PD-1, TIM-3, and LAG-3
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
EP3612563A1 (en) 2017-04-19 2020-02-26 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules and uses thereof
MX2019012431A (es) 2017-04-21 2020-08-03 Ikena Oncology Inc Inhibidores del receptor de hidrocarburos de arilo (ahr) de indol y usos de los mismos.
JP2020517699A (ja) 2017-04-26 2020-06-18 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ ジスルフィド結合の還元を最小限にする抗体製造法
AR111419A1 (es) 2017-04-27 2019-07-10 Novartis Ag Compuestos fusionados de indazol piridona como antivirales
TWI791519B (zh) * 2017-04-27 2023-02-11 美商提薩羅有限公司 針對淋巴細胞活化基因-3（lag-3）之抗體藥劑及其用途
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
CN110546509A (zh) 2017-04-28 2019-12-06 戊瑞治疗有限公司 用cd80细胞外结构域多肽进行治疗的方法
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
EP4328241A3 (en) 2017-04-28 2024-06-05 Marengo Therapeutics, Inc. Multispecific molecules comprising a non-immunoglobulin heterodimerization domain and uses thereof
AR111658A1 (es) 2017-05-05 2019-08-07 Novartis Ag 2-quinolinonas tricíclicas como agentes antibacteriales
US11339218B2 (en) 2017-05-10 2022-05-24 Zhejiang Shimai Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies against LAG3 and uses thereof
SG10202107880XA (en) 2017-05-12 2021-09-29 Harpoon Therapeutics Inc Mesothelin binding proteins
WO2018209049A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN110636846B (zh) 2017-05-17 2023-05-16 艾库斯生物科学有限公司 用于治疗癌症相关疾病的喹唑啉吡唑衍生物
JP2020520923A (ja) 2017-05-17 2020-07-16 ボストン バイオメディカル， インコーポレイテッド がんを処置するための方法
WO2018222718A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of lag-3 positive tumors
JP7301002B2 (ja) * 2017-05-30 2023-06-30 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗ｌａｇ－３抗体または抗ｌａｇ－３抗体および抗ｐｄ－１もしくは抗ｐｄ－ｌ１抗体を含む組成物
JP2020522495A (ja) * 2017-05-30 2020-07-30 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 抗ｌａｇ−３抗体、ｐｄ−１経路阻害剤および免疫療法剤の組み合わせを含む組成物
EP3630836A1 (en) 2017-05-31 2020-04-08 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules that bind to myeloproliferative leukemia (mpl) protein and uses thereof
EP3630839A1 (en) 2017-06-01 2020-04-08 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd 123 cd3
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
MX2019015885A (es) 2017-06-22 2020-09-10 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a cd73 y usos de las mismas.
US20200172628A1 (en) 2017-06-22 2020-06-04 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2018234879A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag USE OF IL-1β BINDING ANTIBODIES IN THE TREATMENT OF CANCER
WO2019002842A1 (en) 2017-06-26 2019-01-03 Bicyclerd Limited BICYCLIC PEPTIDE LIGANDS WITH DETECTABLE FRACTIONS AND USES THEREOF
CN111050791A (zh) 2017-06-27 2020-04-21 诺华股份有限公司 用于抗tim-3抗体的给药方案及其用途
KR102630575B1 (ko) 2017-06-30 2024-01-29 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Ido 억제제의 무정형 및 결정질 형태
JP6896989B2 (ja) * 2017-07-13 2021-06-30 ナンジン リーズ バイオラブズ カンパニー リミテッド 抗体結合ｌａｇ−３及びその使用
WO2019018730A1 (en) 2017-07-20 2019-01-24 Novartis Ag DOSAGE REGIMES FOR ANTI-LAG3 ANTIBODIES AND USES THEREOF
WO2019023459A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
JP7670481B2 (ja) 2017-08-04 2025-04-30 バイスクルテクス・リミテッド Ｃｄ１３７に対して特異的な二環式ペプチドリガンド
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
CN111163766A (zh) 2017-08-17 2020-05-15 医肯纳肿瘤学公司 Ahr抑制剂和其用途
ES2977589T3 (es) 2017-08-18 2024-08-27 Cothera Bioscience Inc Forma polimórfica de TG02
JP2020536495A (ja) * 2017-08-30 2020-12-17 フェインズ セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗ｌａｇ−３抗体及びその使用
EP3676277A1 (en) 2017-08-31 2020-07-08 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US10947263B2 (en) 2017-08-31 2021-03-16 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
JP7208225B2 (ja) 2017-08-31 2023-01-18 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
JP7196160B2 (ja) 2017-09-12 2022-12-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤アルボシジブを用いた、ｂｃｌ－２阻害剤に対して非感受性である癌の治療レジメン
MX2020003190A (es) 2017-09-22 2020-11-11 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de proteinas y usos de los mismos.
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
BR112020006860A2 (pt) 2017-10-05 2020-10-20 Daiichi Sankyo Company, Limited composição para depleção de células t citotóxicas
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
US11203592B2 (en) 2017-10-09 2021-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US11660311B2 (en) 2017-10-10 2023-05-30 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019075090A1 (en) 2017-10-10 2019-04-18 Tilos Therapeutics, Inc. ANTI-LAP ANTIBODIES AND USES THEREOF
CA3078969A1 (en) 2017-10-13 2019-04-18 Harpoon Therapeutics, Inc. Trispecific proteins and methods of use
IL315737A (en) 2017-10-13 2024-11-01 Harpoon Therapeutics Inc B-cell maturation antigen-binding proteins
EP3694884A1 (en) 2017-10-15 2020-08-19 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
ES2997757T3 (en) 2017-10-16 2025-02-18 Bristol Myers Squibb Co Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019077062A1 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Vivia Biotech, S.L. C-CELLS ACTIVATED BY BIT
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
US11603410B2 (en) 2017-11-01 2023-03-14 Bristol-Myers Squibb Company Immunostimulatory agonistic antibodies for use in treating cancer
WO2019090198A1 (en) 2017-11-06 2019-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Isofuranone compounds useful as hpk1 inhibitors
MX2020004756A (es) 2017-11-16 2020-08-20 Novartis Ag Terapias de combinacion.
WO2019097479A1 (en) 2017-11-17 2019-05-23 Novartis Ag Novel dihydroisoxazole compounds and their use for the treatment of hepatitis b
MX2020005651A (es) 2017-11-30 2020-10-28 Novartis Ag Receptor de antigeno quimerico dirigido a bcma y usos del mismo.
JP7348899B2 (ja) 2017-12-08 2023-09-21 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 多重特異性分子及びその使用
CA3086098A1 (en) 2017-12-19 2019-06-27 F-Star Beta Limited Fc binding fragments comprising a pd-l1 antigen-binding site
CN111433210A (zh) 2017-12-20 2020-07-17 诺华股份有限公司 作为抗病毒药的稠合三环吡唑并-二氢吡嗪基-吡啶酮化合物
EP3714901A4 (en) 2017-12-22 2022-03-02 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. ANTI-LAG-3 ANTIBODY PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND USE THEREOF
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN109970856B (zh) 2017-12-27 2022-08-23 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
CN111788227B (zh) 2017-12-27 2025-02-25 百时美施贵宝公司 抗cd40抗体及其用途
CN109970857B (zh) 2017-12-27 2022-09-30 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
US11447449B2 (en) 2018-01-05 2022-09-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2019136432A1 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Novartis Ag Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
JP7358361B2 (ja) 2018-01-12 2023-10-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔｉｍ３に対する抗体およびその使用
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADATION AGENTS AND ASSOCIATED USES
WO2019141092A1 (zh) 2018-01-18 2019-07-25 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 抗lag-3抗体及其用途
AU2019212969B2 (en) 2018-01-29 2025-01-23 Merck Patent Gmbh GCN2 inhibitors and uses thereof
CA3089762A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Merck Patent Gmbh Gcn2 inhibitors and uses thereof
JP2021511793A (ja) 2018-01-31 2021-05-13 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｌａｇ３に結合する抗原結合部位を含む二重特異性抗体
JP2021511782A (ja) 2018-01-31 2021-05-13 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 安定化された免疫グロブリンドメイン
AU2019215031C1 (en) 2018-01-31 2026-02-26 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
WO2019160956A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Novartis Ag Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
CA3090922A1 (en) 2018-02-16 2019-08-22 Arcus Biosciences, Inc. Dosing with an azolopyrimidine compound
WO2019165315A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists alone or in combination
CA3091775A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Bicycletx Limited Multimeric bicyclic peptide ligands
EP3758751A4 (en) 2018-02-28 2021-11-17 Wuxi Biologics Ireland Limited. MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST HUMAN LAG-3, METHOD OF MANUFACTURING AND USING THEREOF
CN110204614B (zh) * 2018-02-28 2022-07-12 广州誉衡生物科技有限公司 抗人lag-3单克隆抗体及其制备方法和用途
JP2021514982A (ja) 2018-02-28 2021-06-17 ノバルティス アーゲー インドール−２−カルボニル化合物及びｂ型肝炎治療のためのそれらの使用
WO2019173188A1 (en) 2018-03-05 2019-09-12 Arcus Biosciences, Inc. Arginase inhibitors
JP7250808B2 (ja) 2018-03-08 2023-04-03 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗がん剤としての環状ジヌクレオチド
EP3765516A2 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
EP3765517A1 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
JP7438180B2 (ja) * 2018-03-20 2024-02-26 ウーシー バイオロジクス アイルランド リミテッド 新規抗ｌａｇ－３抗体ポリペプチド
SG11202008593PA (en) 2018-03-21 2020-10-29 Five Prime Therapeutics Inc ANTIBODIES BINDING TO VISTA AT ACIDIC pH
JP7351845B2 (ja) 2018-03-23 2023-09-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｍｉｃａおよび／またはｍｉｃｂに対する抗体ならびにそれらの使用
EP3774911A1 (en) 2018-03-30 2021-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2019192432A1 (zh) 2018-04-02 2019-10-10 上海博威生物医药有限公司 结合淋巴细胞活化基因-3(lag-3)的抗体及其用途
CN110343178B (zh) * 2018-04-03 2022-07-22 上海开拓者生物医药有限公司 抗人lag-3单克隆抗体及其应用
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
CN112292128A (zh) 2018-04-16 2021-01-29 阿瑞斯医疗有限公司 Ep4抑制剂和其用途
CA3097625A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Xencor, Inc. Il-15/il-15ra heterodimeric fc fusion proteins and uses thereof
CA3097593A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Xencor, Inc. Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
US12037323B2 (en) 2018-05-03 2024-07-16 Bristol-Myers Squibb Company Uracil derivatives as Mer-AXL inhibitors
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CN112512578A (zh) 2018-06-01 2021-03-16 诺华股份有限公司 结合cd123和cd3的双特异性抗体的给药
PE20210320A1 (es) 2018-06-01 2021-02-16 Novartis Ag Moleculas de union contra bcma y usos de las mismas
CN119185533A (zh) 2018-06-11 2024-12-27 耶鲁大学 新型免疫检查点抑制剂
CN110606892B (zh) * 2018-06-14 2023-09-26 华博生物医药技术（上海）有限公司 一种高亲和力高生物活性的lag-3抗体及其应用
CN110615840A (zh) * 2018-06-19 2019-12-27 信达生物制药(苏州)有限公司 全人源的抗lag-3抗体及其应用
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
SG11202012973RA (en) 2018-06-27 2021-01-28 Bristol Myers Squibb Co Naphthyridinone compounds useful as t cell activators
CN112654621B (zh) 2018-06-27 2024-05-14 百时美施贵宝公司 可作为t细胞活化剂的经取代萘啶酮化合物
WO2020005003A1 (ko) 2018-06-29 2020-01-02 주식회사 와이바이오로직스 Lag-3에 특이적으로 결합하는 단클론항체 및 이의 용도
WO2020010250A2 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Elstar Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
US11292792B2 (en) 2018-07-06 2022-04-05 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic CRBN ligands and uses thereof
US12454520B2 (en) 2018-07-06 2025-10-28 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
MY201995A (en) 2018-07-09 2024-03-28 Five Prime Therapeutics Inc Antibodies binding to ilt4
BR122022012697B1 (pt) 2018-07-10 2023-04-04 Novartis Ag Usos de derivados de 3-(5-hidróxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6- diona, e kit
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
AU2019301120A1 (en) 2018-07-11 2021-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to VISTA at acidic pH
GB201811410D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd OX40 Binding molecules
GB201811450D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Delta Ltd Mesothelin and CD137 binding molecules
GB201811415D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Anti-Mesothelin Anti bodies
AU2019301206B2 (en) 2018-07-12 2025-10-30 Invox Pharma Limited Antibody molecules that bind CD137 and OX40
GB201811403D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Antibody molecules
BR112021000394A2 (pt) 2018-07-12 2021-04-06 F-Star Beta Limited Moléculas de anticorpo que se ligam a pd-l1 e cd137
GB201811404D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Anti-CD137 Antibodies
GB201811408D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd CD137 Binding Molecules
EP3823614A4 (en) 2018-07-18 2022-03-30 Arcus Biosciences, Inc. SOLID FORMS OF AN AZOLOPYRIMIDINE COMPOUND
JP7072715B2 (ja) 2018-07-20 2022-05-20 サーフィス オンコロジー インコーポレイテッド 抗ｃｄ１１２ｒ組成物及び方法
US12059420B2 (en) 2018-07-23 2024-08-13 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020023356A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
JP2021531306A (ja) 2018-07-25 2021-11-18 アドバンスド アクセラレーター アプリケーションズ エスエー 神経内分泌腫瘍の処置の方法
AU2019309849A1 (en) * 2018-07-26 2021-03-18 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 combination therapy for the treatment of cancer
CN110172099B (zh) * 2018-08-16 2020-03-03 上海健信生物医药科技有限公司 抗lag-3人源化单克隆抗体分子，抗原结合片段及其医药用途
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3846793B1 (en) 2018-09-07 2024-01-24 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
US11072610B2 (en) 2018-09-12 2021-07-27 Novartis Ag Antiviral pyridopyrazinedione compounds
CN112105634B (zh) 2018-09-21 2024-03-12 信达生物制药(苏州)有限公司 新型白介素2及其用途
US12195544B2 (en) 2018-09-21 2025-01-14 Harpoon Therapeutics, Inc. EGFR binding proteins and methods of use
CA3098930A1 (en) 2018-09-21 2020-03-26 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Novel interleukin-2 and use thereof
CN119306844A (zh) 2018-09-25 2025-01-14 哈普恩治疗公司 Dll3结合蛋白及使用方法
JP7465272B2 (ja) 2018-09-27 2024-04-10 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド Ｃｓｆ１ｒ／ｃｃｒ２多特異性抗体
EP3856345A1 (en) 2018-09-29 2021-08-04 Novartis AG Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of shp2
KR102884523B1 (ko) 2018-10-03 2025-11-10 젠코어 인코포레이티드 IL-12 이종이량체 Fc-융합 단백질
EP3863722A2 (en) 2018-10-10 2021-08-18 Tilos Theapeutics, Inc. Anti-lap antibody variants and uses thereof
CA3116188A1 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Xencor, Inc. Pd-1 targeted il-15/il-15ralpha fc fusion proteins and uses in combination therapies thereof
WO2020081928A1 (en) * 2018-10-19 2020-04-23 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for melanoma
EP3873532A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Novartis AG Dc-sign antibody drug conjugates
MX2021005708A (es) 2018-11-16 2021-09-21 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti grupo 2a del receptor inhibidor de células asesinas naturales (anti-nkg2a) y usos de los mismos.
EP3880685B1 (en) 2018-11-16 2025-06-18 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of arg1 and/or arg2
AU2019389174A1 (en) 2018-11-30 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
US11034710B2 (en) 2018-12-04 2021-06-15 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. CDK9 inhibitors and polymorphs thereof for use as agents for treatment of cancer
GB201820295D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for MT1-MMP
GB201820288D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicycle Tx Ltd Bicycle peptide ligaands specific for MT1-MMP
GB201820325D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for psma
US11618776B2 (en) 2018-12-20 2023-04-04 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric Fc fusion proteins containing IL-15/IL-15RA and NKG2D antigen binding domains
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
AU2019402189B2 (en) 2018-12-20 2023-04-13 Novartis Ag Dosing regimen and pharmaceutical combination comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
EP3897849A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 BicycleTx Limited Bicyclic peptide ligands specific for pd-l1
US20220056123A1 (en) 2018-12-21 2022-02-24 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
BR112021012066A2 (pt) 2018-12-21 2021-11-03 Onxeo Novas moléculas de ácido nucleico conjugadas e seus usos
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
US20220025036A1 (en) 2018-12-21 2022-01-27 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
JP2022516850A (ja) 2018-12-21 2022-03-03 ノバルティス アーゲー 骨髄異形成症候群の治療又は予防におけるＩＬ－１β抗体の使用
WO2020128527A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligands specific for pd-l1
HUE072069T2 (hu) 2019-02-12 2025-10-28 Sumitomo Pharma America Inc 2-((1R,4R)-4-((3-(3-(trifluormetil)fenil)imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)amino)ciklohexil)propán-2-ol sósavas sójának kristályos formája
CA3123519A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
EP3924054B1 (en) 2019-02-15 2025-04-02 Novartis AG 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
AU2020226893B2 (en) 2019-02-21 2025-02-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
JP7579795B2 (ja) 2019-02-21 2024-11-08 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド ＮＫｐ３０に結合する抗体分子およびその使用
CN111620949A (zh) 2019-02-28 2020-09-04 三生国健药业（上海）股份有限公司 结合人lag-3的抗体、其制备方法和用途
ES3070946T3 (en) 2019-03-12 2026-06-18 Arcus Biosciences Inc Treatment of an oncogenene driven cancer having a kras or egfr mutation by decreasing adenosine production or antagonizing adenosine activation
CA3133155A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 Fundacio Privada Institut D'investigacio Oncologica De Vall Hebron Combination therapy for the treatment for cancer
JP2022525149A (ja) 2019-03-20 2022-05-11 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド ベネトクラクスが失敗した急性骨髄性白血病（ａｍｌ）の処置
AU2020245437A1 (en) 2019-03-22 2021-09-30 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Compositions comprising PKM2 modulators and methods of treatment using the same
KR20220009941A (ko) 2019-03-26 2022-01-25 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간 Stat3의 저분자 분해제
CA3135487A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 Arcus Biosciences, Inc. Treatment of cancer utilizing an identified adenosine fingerprint
WO2020205467A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 The Regents Of The University Of Michigan Stat3 protein degraders
US20220184222A1 (en) 2019-04-02 2022-06-16 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
KR102980990B1 (ko) 2019-04-05 2026-06-25 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Stat 분해제 및 이의 용도
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
WO2020231713A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
CA3136568A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
WO2020231766A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
JP2022534982A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよびその使用
WO2020243570A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
US20220363760A1 (en) 2019-05-30 2022-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signature for suitability to immuno-oncology therapy
US11458149B1 (en) 2019-05-31 2022-10-04 Ikena Oncology, Inc. TEAD inhibitors and uses thereof
WO2020251972A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
US12624044B2 (en) 2019-06-10 2026-05-12 Kymera Therapeutics, Inc. SMARCA degraders and uses thereof
US20220304984A1 (en) 2019-06-12 2022-09-29 Vanderbilt University Amino acid transport inhibitors and the uses thereof
WO2020252336A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Vanderbilt University Dibenzylamines as amino acid transport inhibitors
EP3991747A4 (en) * 2019-06-24 2023-07-05 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Preparations containing anti-lag-3 antibody, and preparation method therefor and use thereof
CN115443329A (zh) 2019-06-27 2022-12-06 乔治华盛顿大学国会特许非营利公司 Hdac6激活的巨噬细胞、其组合物及用途
PH12022500002A1 (en) 2019-06-28 2023-04-03 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
AU2020300619A1 (en) 2019-07-03 2022-01-27 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (TNK1) inhibitors and uses thereof
IT201900011676A1 (it) 2019-07-12 2021-01-12 St Superiore Di Sanita Anticorpo ricombinante umano contro il recettore di membrana LAG3, suoi usi medici e diagnostici.
AU2020315401B2 (en) 2019-07-16 2025-05-22 The Regents Of The University Of Michigan Imidazopyrimidines as EED inhibitors and the use thereof
US12558427B2 (en) 2019-07-17 2026-02-24 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
TWI860386B (zh) 2019-07-30 2024-11-01 英商拜西可泰克斯有限公司 異質雙環肽複合物
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
US20220306630A1 (en) 2019-08-06 2022-09-29 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
AU2020336381A1 (en) 2019-08-27 2022-03-03 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon E3 ligase inhibitors
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
US12215105B2 (en) 2019-09-13 2025-02-04 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 antagonists and uses thereof
JP2022548881A (ja) 2019-09-18 2022-11-22 ノバルティス アーゲー Ｅｎｔｐｄ２抗体、組合せ療法並びに抗体及び組合せ療法を使用する方法
CA3149719A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to vista at acidic ph
AU2020348849A1 (en) 2019-09-19 2022-04-07 The Regents Of The University Of Michigan Spirocyclic androgen receptor protein degraders
WO2021055994A1 (en) 2019-09-22 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for lag-3 antagonist therapy
CN114667285B (zh) 2019-09-26 2025-08-08 诺华股份有限公司 抗病毒吡唑并吡啶酮化合物
EP4037700A2 (en) 2019-10-03 2022-08-10 Xencor, Inc. Targeted il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
KR20220088438A (ko) * 2019-10-09 2022-06-27 주식회사 에스티큐브앤컴퍼니 글리코실화된 lag3에 대해 특이적인 항체 및 이의 사용 방법
TW202128757A (zh) 2019-10-11 2021-08-01 美商建南德克公司 具有改善之特性的 PD-1 標靶 IL-15/IL-15Rα FC 融合蛋白
WO2021079195A1 (en) 2019-10-21 2021-04-29 Novartis Ag Tim-3 inhibitors and uses thereof
CN114786679A (zh) 2019-10-21 2022-07-22 诺华股份有限公司 具有维奈托克和tim-3抑制剂的组合疗法
WO2021090146A1 (en) 2019-11-04 2021-05-14 Astrazeneca Ab Combination therapy for treating cancer
EP4054723A1 (en) 2019-11-08 2022-09-14 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for melanoma
JP7629459B2 (ja) 2019-11-19 2025-02-13 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｅｌｉｏｓタンパク質の阻害剤として有用な化合物
AU2020394424A1 (en) 2019-11-26 2022-06-16 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic carbazole derivatives and uses thereof
CA3159071A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Tamar I. ROSENBAUM Salts/cocrystals of (r)-n-(4-chlorophenyl)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
WO2021119159A1 (en) 2019-12-10 2021-06-17 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
CA3161878A1 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Matthew M. Weiss Irak degraders and uses thereof
EP4076524A4 (en) 2019-12-17 2023-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
US20230057071A1 (en) 2019-12-20 2023-02-23 Novartis Ag Combination of anti tim-3 antibody mbg453 and anti tgf-beta antibody nis793, with or without decitabine or the anti pd-1 antibody spartalizumab, for treating myelofibrosis and myelodysplastic syndrome
MX2022007369A (es) 2019-12-23 2022-07-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de quinolinonilo piperazina sustituidos utiles como activadores de celulas t.
JP7677976B2 (ja) 2019-12-23 2025-05-15 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔ細胞アクティベーターとして有用な置換ヘテロアリール化合物
WO2021133917A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca inhibitors and uses thereof
CA3162979A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Upender Velaparthi Substituted piperazine derivatives useful as t cell activators
IL294148A (en) 2019-12-23 2022-08-01 Bristol Myers Squibb Co Substituted quinazolinyl compounds are useful as t-cell activators
US11679109B2 (en) 2019-12-23 2023-06-20 Kymera Therapeutics, Inc. SMARCA degraders and uses thereof
AR120823A1 (es) 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
WO2021138474A2 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
EP4084821A4 (en) 2020-01-03 2024-04-24 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to cd33 and uses thereof
BR112022013424A2 (pt) 2020-01-06 2022-12-13 Hifibio Hk Ltd Anticorpo anti-tnfr2 e seus usos
AU2021205143A1 (en) 2020-01-07 2022-07-28 Hifibio, Inc. Anti-Galectin-9 antibody and uses thereof
WO2021146749A1 (en) 2020-01-13 2021-07-22 The University Of Chicago Toll-like receptor agonist formulations and methods of use
EP4090663A1 (en) 2020-01-15 2022-11-23 Blueprint Medicines Corporation Map4k1 inhibitors
EP4090335A1 (en) 2020-01-17 2022-11-23 Novartis AG Combination comprising a tim-3 inhibitor and a hypomethylating agent for use in treating myelodysplastic syndrome or chronic myelomonocytic leukemia
CN111205371B (zh) * 2020-01-22 2022-03-29 北京吉尔麦迪生物医药科技有限公司 一种抗淋巴细胞激活基因3的抗体及应用
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
AR121506A1 (es) 2020-03-03 2022-06-08 Pic Therapeutics Inc Inhibidores del eif4e y sus usos
US20230140384A1 (en) 2020-03-09 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to cd40 with enhanced agonist activity
WO2021188948A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Kymera Therapeutics, Inc. Mdm2 degraders and uses thereof
CA3173831A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Arcus Biosciences, Inc. Tetralin and tetrahydroquinoline compounds as inhibitors of hif-2alpha
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
US12522623B2 (en) 2020-03-26 2026-01-13 Regents Of The University Of Michigan Small molecule STAT protein degraders
WO2021202904A1 (en) * 2020-04-03 2021-10-07 Sorrento Therapeutics, Inc. Engineered antibodies that bind lags
EP4132971A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Merck Sharp & Dohme LLC Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
AR122043A1 (es) * 2020-05-12 2022-08-03 Bristol Myers Squibb Co Dosificación y administración del anticuerpo anti-ctla-4 activable
US20230192867A1 (en) 2020-05-15 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
TW202210514A (zh) 2020-06-02 2022-03-16 美商阿克思生物科學有限公司 針對tigit的抗體
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
EP4161521A4 (en) 2020-06-03 2024-07-10 Kymera Therapeutics, Inc. DEUTERED IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
AR122644A1 (es) 2020-06-19 2022-09-28 Onxeo Nuevas moléculas de ácido nucleico conjugado y sus usos
WO2021258010A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime compounds useful as t cell activators
EP4168007A1 (en) 2020-06-23 2023-04-26 Novartis AG Dosing regimen comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
WO2022003042A1 (en) * 2020-06-30 2022-01-06 Arxx Therapeutics As Anti-s100a4 antibodies for the treatment of systemic sclerosis
CN116234568A (zh) 2020-07-07 2023-06-06 生物技术公司 用于hpv阳性癌症的治疗性rna
WO2022011204A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule androgen receptor protein degraders
WO2022011205A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Androgen receptor protein degraders
AU2021316053A1 (en) 2020-07-30 2023-03-02 Kymera Therapeutics, Inc. Methods of treating mutant lymphomas
CN116348476A (zh) 2020-08-03 2023-06-27 拜斯科技术开发有限公司 基于肽的接头
EP4188549A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Novartis AG Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
KR20230077722A (ko) 2020-08-10 2023-06-01 지브이20 테라퓨틱스 엘엘씨 Igsf8을 표적화하여 자가면역 질환 및 암을 치료하기 위한 조성물 및 방법
US20230416364A1 (en) 2020-08-13 2023-12-28 Bristol-Myers Squibb Company Methods of redirecting of il-2 to target cells of interest
WO2022038158A1 (en) 2020-08-17 2022-02-24 Bicycletx Limited Bicycle conjugates specific for nectin-4 and uses thereof
CA3190573A1 (en) 2020-08-26 2022-03-03 Andreas Loew Methods of detecting trbc1 or trbc2
MX2023002332A (es) 2020-08-28 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Terapia con antagonistas del gen 3 de activacion de linfocitos (lag-3) para carcinoma hepatocelular.
IL300916A (en) 2020-08-31 2023-04-01 Bristol Myers Squibb Co Cell localization signature and immunotherapy
WO2022043558A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230321285A1 (en) 2020-08-31 2023-10-12 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
WO2022072820A1 (en) 2020-10-02 2022-04-07 Dracen Pharmaceuticals, Inc. Lyophilized composition comprising (s)-isopropyl 2-((s)-2- acetamido-3-(1h-indol-3-yl)propanamido)-6-diazo-5- oxohexanoate for subcutaneous administration and the use thereof
EP4228764A1 (en) 2020-10-14 2023-08-23 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
CA3196496A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Laurence David TOMS Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
AU2021373366A1 (en) 2020-11-06 2023-06-01 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
EP4255895A1 (en) 2020-12-02 2023-10-11 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
JP2024508207A (ja) 2020-12-02 2024-02-26 ブイアイビー ブイゼットダブリュ がんに対する組み合わせ治療におけるｌｔｂｒアゴニスト
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
CA3204091A1 (en) 2020-12-08 2022-06-16 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Eganelisib for use in the treatment of pd-l1 negative cancer
US12606568B2 (en) 2020-12-09 2026-04-21 Kymera Therapeutics, Inc. SMARCA degraders and uses thereof
CN114621344B (zh) * 2020-12-10 2022-08-30 北京东方百泰生物科技股份有限公司 一种抗lag-3单克隆抗体的纯化方法
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
AU2021400725A1 (en) 2020-12-16 2023-08-03 Gossamer Bio Services, Inc. Compounds useful as t cell activators
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
PT4267105T (pt) 2020-12-28 2025-04-30 Bristol Myers Squibb Co Composições de anticorpos e métodos de utilização das mesmas
AU2021416156A1 (en) 2020-12-28 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumors
AR124547A1 (es) 2020-12-30 2023-04-05 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de irak y sus usos
US20250186539A2 (en) 2021-01-11 2025-06-12 Bicycletx Limited Methods for treating cancer
CA3206549A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Frederick G. Vogt Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
EP4284950A4 (en) 2021-01-29 2024-12-25 Board of Regents, The University of Texas System METHODS OF TREATMENT OF CANCER USING KINASE INHIBITORS
KR20230153387A (ko) 2021-02-02 2023-11-06 리미널 바이오사이언시스 리미티드 Gpr84 길항제 및 이의 용도
JP2024506858A (ja) 2021-02-02 2024-02-15 リミナル・バイオサイエンシーズ・リミテッド Ｇｐｒ８４アンタゴニストおよびその使用
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
MX2023009379A (es) 2021-02-12 2023-10-10 Hoffmann La Roche Derivados de tetrahidroazepina biciclicos para el tratamiento del cancer.
WO2022174253A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
WO2022174268A1 (en) 2021-02-15 2022-08-18 Kymera Therapeutics, Inc. Irak4 degraders and uses thereof
MX2023009178A (es) 2021-02-15 2023-08-21 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de la cinasa 4 asociada al receptor de interleucina 1 (irak4) y usos de los mismos.
WO2022187423A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon ligands
WO2022187419A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of androgen receptor
CN117295737A (zh) 2021-03-05 2023-12-26 林伯士萨顿公司 Hpk1拮抗剂和其用途
JP2024510176A (ja) 2021-03-08 2024-03-06 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｍａｐ４ｋ１阻害剤
US11918582B2 (en) 2021-03-15 2024-03-05 Rapt Therapeutics, Inc. Pyrazole pyrimidine compounds and uses thereof
WO2022213062A1 (en) 2021-03-29 2022-10-06 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
CN117858719A (zh) 2021-03-29 2024-04-09 朱诺治疗学股份有限公司 使用检查点抑制剂疗法和car t细胞疗法的组合进行给药和治疗的方法
JP2024514530A (ja) 2021-04-02 2024-04-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 切断型ｃｄｃｐ１に対する抗体およびその使用
EP4320125A1 (en) 2021-04-05 2024-02-14 Bristol-Myers Squibb Company Pyridinyl substituted oxoisoindoline compounds for the treatment of cancer
PE20231941A1 (es) 2021-04-06 2023-12-05 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de oxoisoindolina sustituidos con piridinilo
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
CA3214757A1 (en) 2021-04-08 2022-10-13 Andreas Loew Multifuntional molecules binding to tcr and uses thereof
EP4319755A4 (en) 2021-04-08 2025-03-26 Board of Regents, The University of Texas System Compounds and methods for theranostic targeting of parp activity
US12325697B2 (en) 2021-04-09 2025-06-10 Nimbus Clio, Inc. CBL-B modulators and uses thereof
TW202309022A (zh) 2021-04-13 2023-03-01 美商努法倫特公司 用於治療具egfr突變之癌症之胺基取代雜環
AU2022258968A1 (en) 2021-04-16 2023-10-19 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
CA3217792A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Kymera Therapeutics, Inc Cdk2 degraders and uses thereof
US20240285740A1 (en) 2021-05-12 2024-08-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treating cancer
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
WO2022246177A1 (en) 2021-05-21 2022-11-24 Arcus Biosciences, Inc. Axl compounds
EP4341262A1 (en) 2021-05-21 2024-03-27 Arcus Biosciences, Inc. Axl inhibitor compounds
WO2023285552A1 (en) 2021-07-13 2023-01-19 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
MX2024000751A (es) 2021-07-14 2024-03-25 Blueprint Medicines Corp Compuestos heterociclicos como inhibidores de map4k1.
US20240336630A1 (en) 2021-07-15 2024-10-10 Blueprint Medicines Corporation Map4k1 inhibitors
US12157732B2 (en) 2021-08-25 2024-12-03 PIC Therapeutics, Inc. eIF4E inhibitors and uses thereof
IL310924A (en) 2021-08-25 2024-04-01 Pic Therapeutics Inc Eif4e inhibitors and uses thereof
US20240376100A1 (en) 2021-09-08 2024-11-14 Redona Therapeutics, Inc. Papd5 and/or papd7 inhibiting 4-oxo-1, 4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivatives
EP4410835A4 (en) * 2021-09-29 2025-09-24 Akeso Biopharma Inc ANTI-LAG3 ANTIBODY, PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND USE
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
JP2024540080A (ja) 2021-10-29 2024-10-31 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ４分解剤およびその合成
TW202325279A (zh) 2021-10-29 2023-07-01 美商阿克思生物科學有限公司 HIF-2α抑制劑及其使用方法
WO2023077090A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
CA3240558A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Valerio Therapeutics New conjugated nucleic acid molecules and their uses
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023122778A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Pyridazinone derivatives useful as t cell activators
WO2023122777A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023122772A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
AU2023213937A1 (en) 2022-01-26 2024-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
EP4469065A1 (en) 2022-01-28 2024-12-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods
EP4472967A4 (en) 2022-01-31 2026-04-15 Kymera Therapeutics Inc Iraqi Degradation Agents and Their Uses
CN118946556A (zh) 2022-02-01 2024-11-12 阿维纳斯运营公司 Dgk靶向化合物及其用途
WO2023154905A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 Gilead Sciences, Inc. Antiviral pyrazolopyridinone compounds
KR20240153583A (ko) 2022-02-25 2024-10-23 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 결장직장암종에 대한 병용 요법
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
CA3259975A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
US20250206775A1 (en) 2022-03-18 2025-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
CN114874324B (zh) * 2022-05-13 2023-02-03 苏州旭光科星抗体生物科技有限公司 一种检测可溶性lag-3蛋白含量的酶联免疫检测试剂盒及应用
CN119768393A (zh) 2022-05-25 2025-04-04 医肯纳肿瘤学公司 Mek抑制剂和其用途
AU2023281061A1 (en) 2022-06-02 2024-12-05 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
AU2023308064A1 (en) 2022-07-11 2025-02-27 Genuv Inc. Cytokine fusion protein
EP4554680A1 (en) 2022-07-15 2025-05-21 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hpk1 and methods of use thereof
WO2024020034A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
EP4565568A1 (en) 2022-08-02 2025-06-11 Liminal Biosciences Limited Heteroaryl carboxamide and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028365A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Substituted pyridone gpr84 antagonists and uses thereof
EP4565569A1 (en) 2022-08-02 2025-06-11 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
KR20250046309A (ko) 2022-08-08 2025-04-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 T 세포 활성화제로서 유용한 치환된 테트라졸릴 화합물
US20260049076A1 (en) 2022-08-09 2026-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Tertiary Amine Substituted Bicyclic Compounds Useful as T Cell Activators
US20260035364A1 (en) 2022-08-11 2026-02-05 Hoffmann-La Roche Inc. Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033457A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
CN119677733A (zh) 2022-08-11 2025-03-21 豪夫迈·罗氏有限公司 双环四氢硫氮杂䓬衍生物
WO2024033458A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydroazepine derivatives
TW202421150A (zh) 2022-09-14 2024-06-01 美商阿克思生物科學有限公司 艾魯美冷之分散體
EP4602041A1 (en) 2022-10-14 2025-08-20 Arcus Biosciences, Inc. Hpk1 inhibitors and methods of use thereof
CN120091809A (zh) 2022-10-20 2025-06-03 艾库斯生物科学有限公司 Cd73化合物的冻干制剂
WO2024089417A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Tumour stratification for responsiveness to an immune checkpoint inhibitor
JP2025535474A (ja) 2022-10-24 2025-10-24 キャンサー・リサーチ・テクノロジー・リミテッド 酸化還元状態改変剤によるチェックポイント阻害剤に対する腫瘍の感応化
WO2024112894A1 (en) 2022-11-22 2024-05-30 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
JP2026501506A (ja) 2022-12-14 2026-01-16 アステラス・ファーマ・ヨーロッパ・ベスローデン・フェンノートシャップ Ｃｌｄｎ１８．２及びｃｄ３に結合する二重特異性結合剤並びに免疫チェックポイント阻害剤を含む併用療法
KR20250123912A (ko) 2022-12-21 2025-08-18 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 폐암에 대한 병용 요법
WO2024137865A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Gossamer Bio Services, Inc. Compounds useful as t cell activators
CN115819595B (zh) * 2023-01-03 2023-05-16 上海百英生物科技股份有限公司 一种抗lag3纳米抗体及其制备方法与应用
WO2024150017A1 (en) 2023-01-13 2024-07-18 Akrivia Biomedics Limited Method of profiling diseases
US20260217828A1 (en) 2023-01-31 2026-07-30 University Of Rochester Immune checkpoint blockade therapy for treating staphylococcus aureus infections
CN121127264A (zh) 2023-03-13 2025-12-12 瑞泽恩制药公司 用于在治疗黑素瘤中增强疗效的pd-1抑制剂和lag-3抑制剂组合
WO2024196952A1 (en) 2023-03-20 2024-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Tumor subtype assessment for cancer therapy
WO2024211551A1 (en) 2023-04-06 2024-10-10 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.4) Limited Methods for treating and monitoring cancer
EP4705292A1 (en) 2023-05-05 2026-03-11 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
ES3075944T3 (en) 2023-05-08 2026-08-10 Bristol Myers Squibb Co Substituted phenyl oxazolone compounds
CN121666382A (zh) 2023-05-10 2026-03-13 缆图药品公司 GSK3α抑制剂和其使用方法
WO2024233853A2 (en) * 2023-05-11 2024-11-14 Elixiron Immunotherapeutics (hong Kong) Limited A combination comprising lag-3 targeting moiety and interleukin-10
WO2024243502A1 (en) 2023-05-25 2024-11-28 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
CN121368591A (zh) 2023-05-31 2026-01-20 百时美施贵宝公司 用于降低ikzf 1-4蛋白水平的经取代的噁唑酮化合物
CN121285743A (zh) 2023-06-02 2026-01-06 艾库斯生物科学有限公司 用于预测癌症治疗功效的生物标志物
EP4724149A1 (en) 2023-06-07 2026-04-15 Bristol-Myers Squibb Company Spirocyclic substituted oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compound
KR20260028777A (ko) 2023-06-23 2026-03-04 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 치환된 옥소이소인돌리닐 피페리딘-2,6-디온 화합물
US20250059164A1 (en) 2023-06-23 2025-02-20 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
TW202515608A (zh) 2023-06-26 2025-04-16 以色列商坎布根有限公司 Ｉｌ—１８ｂｐ拮抗抗體及其於癌症治療之單一療法及組合療法的用途
WO2025030002A2 (en) 2023-08-02 2025-02-06 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
CN121712571A (zh) 2023-08-15 2026-03-20 百时美施贵宝公司 陶瓷羟基磷灰石色谱流通法
WO2025038857A1 (en) 2023-08-16 2025-02-20 Arcus Biosciences, Inc. TETRALINS TARGETING MUTANT HIF-2α
CN121752560A (zh) 2023-09-02 2026-03-27 百时美施贵宝公司 经取代的苯基氧代噁唑基哌啶二酮化合物
EP4784572A1 (en) 2023-09-02 2026-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Substituted azetidinyl oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compounds
WO2025054339A1 (en) 2023-09-08 2025-03-13 Arcus Biosciences, Inc. Triazolopyridine compounds as inhibitors of kit
AR133800A1 (es) 2023-09-13 2025-11-05 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de oxoisoindolinil piperidina-2,6-diona sustituida
WO2025072330A1 (en) 2023-09-26 2025-04-03 Arcus Biosciences, Inc. Kit inhibitor compounds and methods of use thereof
WO2025068452A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their use in treating cancer
WO2025068461A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their use in treating cancer
EP4788432A1 (en) 2023-10-06 2026-08-12 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
CN122422311A (zh) 2023-10-31 2026-07-17 百时美施贵宝公司 泛素特异性加工蛋白酶1 (usp1)化合物
WO2025096494A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096490A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
IL327996A (en) 2023-10-31 2026-06-01 Bristol Myers Squibb Co Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096487A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
KR20260109851A (ko) 2023-10-31 2026-07-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 유비퀴틴 특이적 프로세싱 프로테아제 1 (usp1) 화합물
US12384773B2 (en) 2023-11-02 2025-08-12 Arcus Biosciences, Inc. Thiazole compounds and methods of use thereof
CN122180519A (zh) 2023-11-15 2026-06-09 瑞泽恩制药公司 用于增强在治疗肺癌中的功效的pd-1抑制剂和lag-3抑制剂的组合
WO2025120867A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and anti-vegfr2 antibodies
WO2026033885A1 (en) 2024-08-08 2026-02-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
AR134560A1 (es) 2023-12-08 2026-01-28 Astellas Pharma Inc Terapia de combinación que implica agentes de unión biespecíficos que se unen a cldn18.2 y cd3 y agentes que estabilizan o aumentan la expresión de cldn18.2
WO2025120866A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
WO2025132831A1 (en) 2023-12-19 2025-06-26 Universite D'aix-Marseille N-heteroaryl derivatives and uses thereof for treating cancer
WO2025137370A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Arcus Biosciences, Inc. Salt forms of an axl inhibitor
CN122459678A (zh) 2023-12-29 2026-07-24 百时美施贵宝公司 KRAS抑制剂与Treg耗竭剂的组合疗法
WO2025151487A2 (en) 2024-01-08 2025-07-17 Regents Of The University Of Michigan Small-molecule inhibitors of adar1
TW202545568A (zh) 2024-01-29 2025-12-01 日商第一三共股份有限公司 抗her2抗體-藥物結合物與其他劑之組合
US12521446B2 (en) 2024-02-27 2026-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CEACAM5 antibody drug conjugates
US20250361320A1 (en) 2024-02-27 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
WO2025193572A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193571A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193583A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193574A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193569A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193573A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193759A1 (en) 2024-03-12 2025-09-18 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of an azolopyrimidine compound
WO2025193770A1 (en) 2024-03-13 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides
WO2025226767A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Substituted 3-(5-(6-aminopyridin-2-yl)-4-fluoro-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione compounds for use in the treatment of cancer
WO2025237275A1 (zh) * 2024-05-13 2025-11-20 南京维立志博生物科技股份有限公司 用于治疗肿瘤的抗lag-3抗体或其抗原结合部分
WO2025245489A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of tumors in subjects having fgl-1 positive samples
NL2037811B1 (en) 2024-05-29 2025-12-12 Univ Oslo Treatment for Cancer
GB202408360D0 (en) 2024-06-11 2024-07-24 Cancer Research Tech Ltd Tumour sensitisation
WO2025262250A1 (en) 2024-06-20 2025-12-26 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their uses
WO2026006759A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Arcus Biosciences, Inc. Pharmaceutical compositions, dosage forms, and methods of making and using same
WO2026035787A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) macrocyles
WO2026035866A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with a lag-3 inhibitor and a pd-1 inhibitor
WO2026037841A1 (en) 2024-08-12 2026-02-19 ONA Therapeutics S.L. Anti-fgfr4 molecules and uses thereof
WO2026050572A2 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules binding to tcr and uses thereof
WO2026059973A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Arcus Biosciences, Inc. Biomarkers for methods of treating cancer
WO2026059987A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Arcus Biosciences, Inc. Biomarkers for methods of treating cancer
WO2026080794A1 (en) 2024-10-11 2026-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Chemical compounds useful for degrading proteins
WO2026090348A1 (en) 2024-10-24 2026-04-30 Mirati Therapeutics, Inc. The use of son of sevenless (sos) inhibitor compounds such as 7-substituted benzofurans to treat cancer
WO2026096695A1 (en) 2024-10-31 2026-05-07 Bristol-Myers Squibb Company Anti-fucosyl-gm1 antibody drug conjugates
WO2026112386A1 (en) 2024-11-22 2026-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Substituted oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compounds and methods of degrading proteins
US20260144885A1 (en) 2024-11-22 2026-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Anti-lrrc15 antibodies and uses thereof
US20260144884A1 (en) 2024-11-22 2026-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Anti-lrrc15 antibody drug conjugates
GB202417285D0 (en) 2024-11-25 2025-01-08 Univ Oxford Innovation Ltd Expanded t cell population
GB202418460D0 (en) 2024-12-16 2025-01-29 Univ Oxford Innovation Ltd Multivalent binding proteins
WO2026136792A1 (en) 2024-12-20 2026-06-25 Nuvalent, Inc. Heteroaryl compounds as modulators of akt activity

Family Cites Families (160)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1081681A (en) 1910-08-31 1913-12-16 Otis Elevator Co Alternating-current-motor control.
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
DE3572982D1 (en) 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US5374548A (en) 1986-05-02 1994-12-20 Genentech, Inc. Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor
MX9203291A (es) 1985-06-26 1992-08-01 Liposome Co Inc Metodo para acoplamiento de liposomas.
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
JP3101690B2 (ja) 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
GB8809129D0 (en) 1988-04-18 1988-05-18 Celltech Ltd Recombinant dna methods vectors and host cells
US5476996A (en) 1988-06-14 1995-12-19 Lidak Pharmaceuticals Human immune system in non-human animal
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
EP0401384B1 (en) 1988-12-22 1996-03-13 Kirin-Amgen, Inc. Chemically modified granulocyte colony stimulating factor
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5976877A (en) 1990-01-08 1999-11-02 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Proteins produced by human lymphocytes DNA sequence encoding these proteins and their pharmaceutical and biological uses
FR2656800B1 (fr) 1990-01-08 1992-05-15 Roussy Inst Gustave Nouvelles proteines produits par les lymphocytes humains, sequence d'adn codant pour ces proteines et applications pharmaceutiques et biologiques.
EP1690935A3 (en) 1990-01-12 2008-07-30 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US6172197B1 (en) 1991-07-10 2001-01-09 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2246502T3 (es) 1990-08-29 2006-02-16 Genpharm International, Inc. Animales no humanos transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
GB9108652D0 (en) 1991-04-23 1991-06-12 Antisoma Ltd Immunoreactive compounds
PT1024191E (pt) 1991-12-02 2008-12-22 Medical Res Council Produção de auto-anticorpos a partir de reportórios de segmentos de anticorpo e exibidos em fagos
JPH07503132A (ja) 1991-12-17 1995-04-06 ジェンファーム　インターナショナル，インコーポレイティド 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
AU4116793A (en) 1992-04-24 1993-11-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
AU686113B2 (en) 1992-09-16 1998-02-05 Scripps Research Institute, The Human neutralizing monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus
JP3919830B2 (ja) 1992-11-28 2007-05-30 財団法人化学及血清療法研究所 抗ネコヘルペスウイルス−１組換え抗体および該抗体をコードする遺伝子断片
AU6819494A (en) 1993-04-26 1994-11-21 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
AU691811B2 (en) 1993-06-16 1998-05-28 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
WO1995018634A1 (en) 1994-01-04 1995-07-13 The Scripps Research Institute Human monoclonal antibodies to herpes simplex virus and methods therefor
JP3700859B2 (ja) * 1994-05-06 2005-09-28 アンスティテュ ギュスタブ ルシ Ｌａｇ−３タンパク質の可溶性ポリペプチドフラクション；製造方法、治療用製剤、抗イディオタイプ抗体
US6121022A (en) 1995-04-14 2000-09-19 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
PT843557E (pt) 1995-07-21 2003-03-31 Applied Research Systems Metodos para detectar indentificar isolar e etiquetar e abordar selectivamente linfocitos th1 por intermedio da proteina lag-3
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
CA2248064A1 (en) 1996-03-07 1997-09-12 Barbara Crawford Jackson Near infrared fluorescent security thermal transfer printing and marking ribbons
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
US6482925B1 (en) 1996-11-28 2002-11-19 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Mutants of the LAG-3 proteins and nucleotides encoding LAG-3 mutants
DE69632967T2 (de) 1996-11-29 2005-08-11 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Verfahren zur Verhinderung der Transplantabstoßung bei einer Transplantation und zur Herstellung einer universalen Gentherapie-Wirtszelle unter Anwendung von Lymphocyten-Aktivierungsgen (LAG-3)
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
EP0970128A1 (en) * 1997-03-21 2000-01-12 Brigham And Women's Hospital Immunotherapeutic ctla-4 binding peptides
EP0983303B1 (en) 1997-05-21 2006-03-08 Biovation Limited Method for the production of non-immunogenic proteins
EP0900841A1 (en) 1997-06-18 1999-03-10 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) LAG-3 splice variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
JP4334141B2 (ja) 1998-04-20 2009-09-30 グリカート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 抗体依存性細胞傷害性を改善するための抗体のグリコシル化操作
GB9814383D0 (en) 1998-07-02 1998-09-02 Cambridge Antibody Tech Improvements relating to antibodies
JP4593783B2 (ja) 1998-07-21 2010-12-08 ゲンマブ・アクティーゼルスカブ 抗ｃ型肝炎ウイルス抗体およびその使用
ES2706547T3 (es) 1998-12-23 2019-03-29 Pfizer Anticuerpos monoclonales humanos para CTLA-4
HUP0104865A3 (en) 1999-01-15 2004-07-28 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
US6914128B1 (en) 1999-03-25 2005-07-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing
EP2275540B1 (en) 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
GB9911569D0 (en) 1999-05-18 1999-07-21 Oxford Biomedica Ltd Antibodies
ES2539411T3 (es) 1999-08-23 2015-06-30 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. PD-1, receptor para la B7-4 y su utilización
US7605238B2 (en) 1999-08-24 2009-10-20 Medarex, Inc. Human CTLA-4 antibodies and their uses
NZ517202A (en) 1999-08-24 2004-05-28 Medarex Inc Human CTLA-4 antibodies and their uses
US6794132B2 (en) 1999-10-02 2004-09-21 Biosite, Inc. Human antibodies
AU2001268427B2 (en) 2000-06-16 2007-03-29 Glaxosmithkline Intellectual Property Limited Antibodies that immunospecifically bind to blys
US6818216B2 (en) 2000-11-28 2004-11-16 Medimmune, Inc. Anti-RSV antibodies
DE60131456T2 (de) 2000-11-30 2008-07-10 Medarex, Inc., Milpitas Transchromosomale transgen-nagetiere zur herstellung von humanen antikörpern
US20040121322A9 (en) 2001-02-22 2004-06-24 Cole Stewart T. Comparative mycobacterial genomics as a tool for identifying targets for the diagnosis, prophylaxis or treatment of mycobacterioses
US20020146753A1 (en) 2001-04-06 2002-10-10 Henrik Ditzel Autoantibodies to glucose-6-phosphate isomerase and their participation in autoimmune disease
AU2002309063B8 (en) 2001-05-11 2008-04-24 Kyowa Kirin Co., Ltd. Artificial human chromosome containing human antibody lambda light chain gene
KR20030033007A (ko) 2001-05-31 2003-04-26 코울터 파머수티컬, 인코포레이티드 세포독소, 약물전구체, 링커 및 이에 유용한 안정화제
ATE519779T1 (de) 2001-09-19 2011-08-15 Roussy Inst Gustave An das glu-pro motiv-bindende proteine und peptide, diese enthaltende therapeutische zusammensetzungen und deren anwendungen
JP4439262B2 (ja) 2001-09-19 2010-03-24 アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 操作されたテンプレートおよび単一プライマー増幅におけるそれらの使用
US20030228319A1 (en) 2002-04-16 2003-12-11 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
PL213948B1 (pl) 2001-10-25 2013-05-31 Genentech Inc Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje
US20040258678A1 (en) 2002-02-22 2004-12-23 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
KR20050000380A (ko) 2002-04-09 2005-01-03 교와 핫꼬 고교 가부시끼가이샤 게놈이 개변된 세포
DE60334303D1 (de) 2002-07-03 2010-11-04 Tasuku Honjo Immunpotenzierende zusammensetzungen
AU2003298607B9 (en) 2002-10-29 2011-08-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
US20050009136A1 (en) 2003-02-19 2005-01-13 Dyax Corporation PAPP-A ligands
US20060240024A1 (en) 2003-02-28 2006-10-26 The Johns Hopkins University T cell regulation
CA2541360A1 (en) 2003-10-08 2005-04-21 Bradley T. Messmer Methods and compositions for diagnosis and treatment of b cell chronic lymphocytic leukemia
PT2418220T (pt) 2003-12-10 2017-10-04 Squibb & Sons Llc Anticorpos contra interferão alfa e suas utilizações
WO2005100402A1 (en) 2004-04-13 2005-10-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-p-selectin antibodies
EP1740946B1 (en) 2004-04-20 2013-11-06 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
BRPI0510909A2 (pt) 2004-05-19 2008-12-16 Medarex Inc composto de ligaÇço fÁrmaco-ligante citotàxico, formulaÇço farmacÊutica, mÉtodo para matar uma cÉlula e mÉtodo para retardar ou interromper o crescimento de tumor
US7691962B2 (en) 2004-05-19 2010-04-06 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
JP4926054B2 (ja) 2004-07-20 2012-05-09 シムフォゲン・アクティーゼルスカブ 抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体及び製造方法
CA2575791A1 (en) 2004-08-03 2006-02-16 Dyax Corp. Hk1-binding proteins
WO2006029219A2 (en) 2004-09-08 2006-03-16 Ohio State University Research Foundation Human monoclonal anti-ctla4 antibodies in cancer treatment
MX2007003533A (es) 2004-10-01 2007-05-23 Medarex Inc Metodos de tratar linfomas cd30 positivas.
PL1810026T3 (pl) 2004-10-06 2018-08-31 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1 i PD-1 w leczeniu raka nerkowokomórkowego
CA2598454C (en) 2005-02-18 2013-04-09 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (psma) lacking in fucosyl residues
MX2007010603A (es) 2005-03-23 2007-10-18 Pfizer Prod Inc Terapia de cancer de prostata con anticuerpos contra ctla4 y terapia hormonal.
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
EP3530736A3 (en) 2005-05-09 2019-11-06 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1 (pd-1) and methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
KR101704734B1 (ko) 2005-07-01 2017-02-09 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
EA016577B1 (ru) 2005-09-26 2012-06-29 Медарекс, Инк. Конъюгаты антитело-лекарство и их применение
BRPI0619331A2 (pt) 2005-10-26 2011-09-27 Medarex Inc método para fazer um composto para preparar um análogo de cbi cc-1065, método para preparar um análogo de cbi cc-1065 e composto
EP1957531B1 (en) 2005-11-07 2016-04-13 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus vh/vl hypervariable sequences
WO2007059404A2 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
WO2007065433A2 (en) 2005-12-05 2007-06-14 Symphogen A/S Anti-orthopoxvirus recombinant polyclonal antibody
EP2975057A1 (en) 2006-07-10 2016-01-20 Fujita Health University Novel anti-cd73 antibody
WO2008073160A2 (en) 2006-08-17 2008-06-19 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods for converting or inducing protective immunity
CA2661023C (en) * 2006-08-18 2017-08-15 Novartis Ag Prlr-specific antibody and uses thereof
CL2007003622A1 (es) 2006-12-13 2009-08-07 Medarex Inc Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales.
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 梅達雷克斯有限責任公司 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
JP2010519310A (ja) 2007-02-21 2010-06-03 メダレックス インコーポレイテッド 単一のアミノ酸を有する化学リンカーおよびその複合体
KR101540823B1 (ko) 2007-03-30 2015-07-30 메디뮨 엘엘씨 항체 제제
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
PT2170959E (pt) 2007-06-18 2014-01-07 Merck Sharp & Dohme Anticorpos para o receptor humano de morte programada pd-1
US20090028857A1 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
PT2201100E (pt) 2007-09-14 2016-06-03 Univ Brussel Vrije Aperfeiçoamento da capacidade estimulatória de células t das células que apresentam antígeno humano e o seu uso na vacinação
HRP20150074T1 (hr) 2007-10-01 2015-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Humana antitijela koja se vežu za mezotelin i njihove uporabe
EP2229187A2 (en) 2007-11-30 2010-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibody partner molecule conjugates directed to protein tyrosine kinase 7 (ptk7)
AR069747A1 (es) 2007-11-30 2010-02-17 Medarex Inc Conjugado anticuerpo monoclonal anti-b7h4- farmaco y metodos de utilizacion
AR072999A1 (es) * 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
WO2010098788A2 (en) 2008-08-25 2010-09-02 Amplimmune, Inc. Pd-i antagonists and methods for treating infectious disease
EA201500417A1 (ru) 2008-08-25 2015-11-30 Эмплиммьюн, Инк. Композиции антагонистов pd-1 и способы применения
MX356367B (es) 2008-12-09 2018-05-25 Genentech Inc Anticuerpos anti-pd-l1 y su uso para mejorar la funcion de celulas t.
CN102666583B (zh) * 2009-07-15 2015-11-25 Aimm医疗股份公司 革兰氏阳性细菌特异性结合化合物
EP3279215B1 (en) 2009-11-24 2020-02-12 MedImmune Limited Targeted binding agents against b7-h1
US20130115227A1 (en) * 2010-07-14 2013-05-09 Renee C. Gaspar Anti-addl monoclonal antibody and uses thereof
WO2012054438A1 (en) * 2010-10-22 2012-04-26 Schering Corporation Anti-pcsk9
US9856320B2 (en) 2012-05-15 2018-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Cancer immunotherapy by disrupting PD-1/PD-L1 signaling
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
RS60538B1 (sr) 2013-03-15 2020-08-31 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Anti-lag-3 vezujući proteini
CN105682683A (zh) 2013-08-02 2016-06-15 阿杜罗生物科技控股有限公司 结合cd27激动剂以及免疫检查点抑制以用于免疫刺激
RS64268B1 (sr) 2013-09-20 2023-07-31 Bristol Myers Squibb Co Kombinacija anti-lag-3 antitela i anti-pd-1 antitela za lečenje tumora
WO2015116539A1 (en) 2014-01-28 2015-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Anti-lag-3 antibodies to treat hematological malignancies
HRP20201334T1 (hr) 2015-04-17 2020-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Kompozicije koje sadrže kombinaciju ipilimumaba i nivolumaba
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
DK2867258T3 (en) 2017-10-02
PT3795592T (pt) 2024-09-17
UY34887A (es) 2013-12-31
BR112014032999B1 (pt) 2022-10-18
PE20241623A1 (es) 2024-08-07
PE20191324A1 (es) 2019-09-24
AU2017221874A1 (en) 2017-09-21
IL236517A0 (en) 2015-02-26
LTPA2022015I1 (es) 2022-12-12
FI3795592T3 (fi) 2024-10-01
JP7009531B2 (ja) 2022-02-10
PL2867258T3 (pl) 2017-11-30
CA2877746A1 (en) 2014-01-09
EP4553086A2 (en) 2025-05-14
KR20200075891A (ko) 2020-06-26
US10377824B2 (en) 2019-08-13
PH12014502854A1 (en) 2015-02-23
WO2014008218A1 (en) 2014-01-09
CA3161329A1 (en) 2014-01-09
CN104411723A (zh) 2015-03-11
HK1249535A1 (en) 2018-11-02
EA035013B1 (ru) 2020-04-17
BR112014032999A2 (pt) 2017-08-01
US20230077348A1 (en) 2023-03-16
HRP20201852T8 (hr) 2021-06-25
US20250136684A1 (en) 2025-05-01
EA202090227A1 (ru) 2020-05-31
IL236517B (en) 2018-06-28
MY197322A (en) 2023-06-13
KR20230159625A (ko) 2023-11-21
NL301205I2 (nl) 2023-05-24
LT2867258T (lt) 2017-09-11
RS65997B1 (sr) 2024-10-31
TW201406784A (zh) 2014-02-16
LT3275899T (lt) 2020-12-10
AU2019204803A1 (en) 2019-07-25
CL2014003637A1 (es) 2015-03-27
RS56398B1 (sr) 2017-12-29
EP2867258A1 (en) 2015-05-06
EP3275899A1 (en) 2018-01-31
SMT202400395T1 (it) 2024-11-15
TWI662046B (zh) 2019-06-11
EP3795592B1 (en) 2024-07-24
US20190256594A1 (en) 2019-08-22
LTC2867258I2 (es) 2025-06-10
KR102126596B1 (ko) 2020-06-24
AU2019204803B2 (en) 2021-06-10
PT2867258T (pt) 2017-08-31
ES2831406T3 (es) 2021-06-08
PH12014502854B1 (en) 2015-02-23
JP2022064901A (ja) 2022-04-26
CY2022035I1 (el) 2023-01-05
EP3275899B1 (en) 2020-08-26
EP3795592A1 (en) 2021-03-24
AU2013286914A1 (en) 2015-01-29
PE20150221A1 (es) 2015-02-19
US20180371087A1 (en) 2018-12-27
TW202432599A (zh) 2024-08-16
SMT202000628T1 (it) 2021-01-05
CN108101991A (zh) 2018-06-01
TW201831515A (zh) 2018-09-01
TW201938198A (zh) 2019-10-01
TW202540190A (zh) 2025-10-16
RS61084B1 (sr) 2020-12-31
LUC00286I2 (es) 2025-05-12
EA201590138A1 (ru) 2015-07-30
MY169383A (en) 2019-03-26
US20170137514A1 (en) 2017-05-18
FR22C1057I2 (fr) 2023-12-15
JP2015527880A (ja) 2015-09-24
CO7170127A2 (es) 2015-01-28
JP2024041966A (ja) 2024-03-27
KR102461102B1 (ko) 2022-10-31
US11345752B2 (en) 2022-05-31
KR20150023909A (ko) 2015-03-05
HK1207386A1 (en) 2016-01-29
CY2022035I2 (el) 2023-01-27
TN2014000536A1 (en) 2016-03-30
KR20210102485A (ko) 2021-08-19
JP6320376B2 (ja) 2018-05-09
AR125268A2 (es) 2023-06-28
CA2877746C (en) 2022-07-19
HUE052406T2 (hu) 2021-04-28
CY1119563T1 (el) 2018-03-07
TWI701045B (zh) 2020-08-11
AU2019204803C1 (en) 2023-06-29
SI3275899T1 (sl) 2020-11-30
HUE034553T2 (en) 2018-02-28
JP2020103301A (ja) 2020-07-09
AU2025200257A1 (en) 2025-02-20
MX365417B (es) 2019-06-03
KR102290633B1 (ko) 2021-08-19
JP2026041896A (ja) 2026-03-10
AR129651A2 (es) 2024-09-18
PE20191759A1 (es) 2019-12-12
MX2019006411A (es) 2019-08-14
PH12021552200A1 (en) 2022-05-02
SG10201610960YA (en) 2017-02-27
DK3795592T3 (da) 2024-10-14
JP6668405B2 (ja) 2020-03-18
HRP20241357T1 (hr) 2024-12-20
DK3275899T3 (da) 2020-11-30
AR091649A1 (es) 2015-02-18
JP2018126149A (ja) 2018-08-16
US10266591B2 (en) 2019-04-23
TWI771721B (zh) 2022-07-21
SMT201700449T1 (it) 2017-11-15
KR20240168469A (ko) 2024-11-29
MY197544A (en) 2023-06-22
HUE069061T2 (hu) 2025-02-28
EP2867258B1 (en) 2017-06-28
TWI576355B (zh) 2017-04-01
KR20220150417A (ko) 2022-11-10
SI2867258T1 (sl) 2017-10-30
HRP20171315T1 (hr) 2017-10-20
CN104411723B (zh) 2018-01-30
AU2021225177A1 (en) 2021-09-30
PL3795592T3 (pl) 2024-10-07
LT3795592T (lt) 2024-09-25
CY1123609T1 (el) 2022-03-24
TW202118789A (zh) 2021-05-16
PT3275899T (pt) 2020-11-17
HRP20201852T1 (hr) 2021-01-08
AU2017221874B2 (en) 2019-05-02
FR22C1057I1 (fr) 2023-01-06
NL301205I1 (es) 2023-04-19
US20150307609A1 (en) 2015-10-29
MX2015000116A (es) 2015-04-14
ES2638545T3 (es) 2017-10-23
HUS2300002I1 (hu) 2023-01-28
FIC20230009I1 (fi) 2023-02-09
SI3795592T1 (sl) 2024-10-30
TW202313688A (zh) 2023-04-01
AU2013286914B2 (en) 2017-06-29
US9505839B2 (en) 2016-11-29
TW201726743A (zh) 2017-08-01
NZ628528A (en) 2016-07-29
CN108101991B (zh) 2022-02-11
US20140093511A1 (en) 2014-04-03
SG11201408780XA (en) 2015-01-29
TWI617581B (zh) 2018-03-11
NO2023008I1 (no) 2023-02-07
NO2023020I1 (no) 2023-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20250136684A1 (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK40051182B (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK40051182A (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK1249535B (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK1207386B (en) Optimization of human antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
EA044665B1 (ru) Фармацевтическая композиция, содержащая анти-lag-3 антитело и анти-pd-1 антитело