BE445131A - - Google Patents

Description

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  Procédé pour   l'extraction   d'enzymes et d'insuline des pancréas de mammifères. 



   Depuis plusieurs années les pancréas de mammifères, plus particulièrement des bêtes à cornes et des porcs, ont été utilisés industriellement comme matières premières, d'une part pour l'ex- traction d'insuline, d'autre part pour la fabrication de prépara- tions d'enzymes du pancréas, qui peuvent être employées par exem- ple dans les tanneries et l'industrie textile, connue constituant des lessives dites enzymatiques, ou à des fins pharmaceutiques et d'autres buts, où les enzymes du pancréas sécrétées exogènement, plus particulièrement la trypsine, sont employées. 



   Dans le traitement des glandes pour l'extraction de l'in-   suline   on opère principalement en traitant les glandes finement 

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 divisées par un dissolvant de l'insuline dans des conditions telles que l'insuline soit protégée contre l'action de la trypsine. 



  Comme dissolvant on emploie on pratique pour ainsi dire exclusive- ment de l'alcool acidifié,   par   lequel la trypsine est randue inactive. Par ce mode d'opération la trypsine est détruite à un si haut degré, que le résidu obtenu   âpres   l'extraction ne peut pas être employé avantageusement   confie     salière     première   pour la fabrication de préparations des enzymes du pancréas. 



   Si les glandes doivent être employées   comme     matières     premières   pour la production de   préparations     d'enzymes   il a donc été nécessaire   jusqu'%    présent de les employer directement, c'est- à-dire sans traitement préliminaire à l'effet d'une extraction de l'insuline, les enzymes   étant   extraites des glandes au moyen d'un 
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 traitement par des agents extractifs 89i)rO,)jir::s, pr'jferablement des liquides aqueux.

   Jusqu'ici le   résidu   obtenu   par   ce traitement n'a pas eté utilisé dans l'industrie   comme     matière   première et à cause de l'extraction d'enzymes qu'il   avait     subie,   il a surtout été considéré impropre   comme   matière   première     pour   la   préparation   d'insuline. 



   Or, suivant la présente invention on a trouve le fait surprenant qu'il est possible d'utiliser les mêmes pancréas aussi bien à   la   préparation d'insuline qu'à la production de prépara- tions d'enzymes, si l'on extrait d'abord les enzymes, et si la matière obtenue comme résidu de   l'extraction   est ensuite utilisée à   la.   préparation d'insuline.

   La   presente   invention est donc basée sur la, connaissance nouvelle, qu'une extraction des enzymes des glandes exécutée d'une manière appropriée   n'empêche   point que la. matière ayant subi cette extraction puisse être employée pour la production d'insuline.

     Conséquemment   la presente invention rend possible une meilleure exploitation de la quantité de matière première disponible, ce qui n'est pas seulement d'une grande importance dans des conditions où seulement des quantités limitées - /\ de matière première sont disponibles, mais ce qui doit être consi- 

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   déré   aussi   comme   un avantage au cas où d'amples quantités de ma- tière première sont disponibles, puisque la technique doit toujours tendre à tirer profit des quantités de matières premières présentes d'une manière aussi complète que possible. En outre il semble que la présente invention permette de préparer de l'insuline présen- tant des qualités améliorées. 



   Dans le procédé suivant l'invention on opère de la manié- re suivante: d'abord la trypsine et les autres enzymes sécrétées exogènement sont extraites de glandes fraîches ou conservées, propres àla préparation d'insuline, en employant un agent extrac- tif, par exemple de l'eau acidifiée, qui dans les conditions d'extraction employées n'est pas un agent extractif actif pour l'insuline, et n'a pas d'action destructive sur celle-ci, après quoi la matière obtenue comme résidu est utilisée pour en extraire l'insuline. 



     Avant   l'extraction des enzymes les glandes fraîches ou conservées par   congelation   par exemple, sont préparées de la ma- nière usuelle, c'est-à-dire débarrassées des particules de graisse ou de tissu éventuellement adhérentes, après quoi elles sont cou- pées en petits morceaux ou transformées en bouillie finement di- visée, par traitement dans un hachoir par exemple. 



   Dans l'extraction des enzymes des glandes il faut em- ployer des conditions d'extraction telles que des quantités d'insuline considérables ne passent pas en solution en même 'temps, et que la trypsine soit empêchée de développer son action destruc- tive sur l'insuline. Parmi les conditions d'extraction la tempéra- ture employée, la durée de l'extraction et le pH régnant pendant l'extraction sont d'une importance décisive. Tandis que le rende- ment en trypsine n'est dépendant que du pH régnant et par consé- quent indépendant de la température et de la durée de l'extraction, au dedans de   certaines limites   naturellement, le rendement en insu- line obtenue   subsequemment   est dépendant de toutes les trois con- ditions sus-mentionnées. 

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   Ainsi, en opérant à un pH   détermine,   une température croissante et une durée d'extraction prolongée dans l'extraction des enzymes diminueront le rendement dans l'extraction subséquente d'insuline. Par exemple, la durée de l'extraction à un pH de 2 environ et à 0 C. peut être   de -)   à 16 heures ou plus longue encore, tandis qu'à 10 C. cette durée doit être restreinte à peu d'heures, et à 25 C elle doit être très courte. 



   Quant au pH, celui-ci doit en tout cas être inférieur à 7,   c'est-à-dire   qu'il faut exécuter l'extraction en milieu acide. 



  D'ailleurs on peut travailler à des pH aussi bas que 1 et plus bas encore. Cependant il est avantageux que le milieu d'extrac- tion ne soit pas trop acide. Un intervalle de pH convenable est de 1 à 4. En employant de l'eau acidifiée comme agent extractif un pH d'environ 2 semble être le plus approprié pendant l'extrac- tion des enzymes. 



   En employant de l'eau acidifiée comme agent extractif, une extraction des enzymes à un pH   d'environ 2   et à 0 C. environ, pendant une demi-heure environ, donne des résultats particulière- ment favorables. Or,   comme   il résulte de ce qui précède, on obtient également des résultats intéressants en employant des durées d'extraction plus longues, de 1 à 2 heures par exemple ou davan- tage. Cependant une durée d'extraction de 24 heures est trop longue. 



   A titre d'exemple   l'exocution   du procède peut se faire comme suit : 
1 kilogramme de pancréas est finement divisé et soumis à une extraction douce à 0 C. environ pendant une demi-heure en employant 2 litres d'eau additionnée de 10 cm3 d'acide sulfurique concentré. L'extrait d'enzymes est separe, par centrifugation ou filtration par exemple, et du   résidu   on prépare de l'insuline de manière usuelle par extraction avec de l'alcool acidifié. 



   On obtient un rendement en trypsine de 10 millions d'unités   Fuld-Gross   et un rendement en insuline de 2.000 unités internationales. 

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   Ces rendements représentent des rendements moyens. En partant de glandes de particulièrement bonne qualité et en employant l'appareillage le plus approprié on peut obtenir des rendements considérablement plus élevés, aussi bien des enzymes que de   l'hormone.   



   Enfin il faut remarquer. qu'en employant des glandes toutes fraîches on peut obtenir des extraits d'enzymes, dans les- quels les enzymes, la trypsine par exemple, sont inactives. Or de tels extraits peuvent facilement être activés. 



   REVENDICATIONS --------------------------- 
1.- Procédé pour l'extraction d'enzymes et d'insuline des pancréas de mammifères, plus particulièrement des bêtes à cornes et des porcs, caractérisé par le fait que d'abord on extrait la trypsine et les autres enzymes sécrétées exogènement de glandes fraîches ou conservées, propres à la préparation d'insuline, en employant un agent extractif, de l'eau acidifiée par exemple, qui, dans les conditions d'extraction employées, n'est pas un agent extractif pour l'insuline, et n'a pas d'action destructive sur celle-ci, et qu'ensuite la matière obtenue comme résidu de cette extraction est utilisée pour en extraire l'insuline.

Claims (1)

1. 2.- Procédé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que l'extraction des enzymes est opérée à un pH de 1 à 4, préférablement 2.

   3.- Procédé suivant la revendication 1 ou 2, caractérisé par le fait que l'on emploie une durée d'extraction courte, de 1 à 2 heures, convenablement une demi-heure, par exemple.

   4. - Procédé suivant une ou plusieurs des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que l'extraction des enzymes est opérée à une température relativement basse, 0 C. environ par exemple. <Desc/Clms Page number 6>

   5. - Procédé pour l'extraction d'enzymes et d'insuline des pancréas de mammifères, en substance tel que décrit ci-dessus.