BE571406A - - Google Patents

Description

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   La présente invention est relative à un procédé de,préparation de com- posés   hydroxy-prégnaniques   de formule 
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 dans laquelle X représente de l'hydrogène, un atome de chlore ou de fluor, X1 un atome de chlore ou un atome de fluor, et Y un groupe oxo, ou bien de l'hydrogè- ne et   un   hydroxyle libre ou   estérifié,   et des l'déhydro-composés correspondants. 



   Le procédé est caractérisé par le fait qu'on incube, avec une culture de Streptomyces   roseoahromogenus,   des composés de formule 
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 dans laquelle X représente de l'hydrogène, un atome de chlore ou de fluor, X1 un atome de chlore ou un atome de fluor, Y un groupe oxo, ou bien de l'hydrogène et un groupe hydroxyle libre ou estérifié, et R de l'hydrogène ou un reste acyle, ainsi que les l-déhydro-composés correspondants. 



   Pour la mise en oeuvre du procédé miorobiologique, on peut inouber les substances de départ dans des conditions aérobies connues en elles-mêmes; avec des cultures du micro-organisme indiqué. La croissance a lieu en culture de surfa- ce, ou ce qui est techniquement avantageux, en culture immergée, en secouant ou en agitant. Les cultures renferment du carbone assimilable, notamment des hydrates de carbone, ainsi que le cas échéant des substances de croissance, par exemple de l'eau de gonflement du mais ou du moût de bière, et des sels inorganiques. 



  On peut, par suite ,utiliser des solutions nutritives naturelles,   synthétiques   ou semi-synthétiques. Un procédé pratiquement très simple est décrit ci-après sans que l'invention soit pour autant limitée par ces indications: On cultive les orga- nismes dans des appareils et dans des conditions identiques à ceux qui sont connus pour la fabrication des antibiotiques suivant le procédé dit de culture immergée. 



  Lorsque les cultures se sont   développées,on   ajoute les substances de départ indi- quées sous la forme d'une fine dispersion ou d'une solution, par exemple dans le méthanol, l'acétone ou l'éthylène-glycol, et poursuit l'incubation. Finalement on sépare le mycélium, extrait le filtrat et/ou la masse de mycélium, et isole de l'extrait les   16[alpha]-hydroxy-composés   d'une manière connue en elle-même, par exemple par le procédé..de répartition entre solvants ou mélanges de solvants non miscibles les uns avec les autres, par adsorption, chromatographie, cristallisation, trans- formation en dérivés fonctionnels, par exemple en esters et analogues.

   On peut aussi effectuer ces mêmes réactions en séparant tout d'abord les enzymes actives de culture aérobies correspondantes des organismes indiqués et en les utilisant à 

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 1'exclusion des cultures en croissance. C'est ainsi qu'on peut, par exemple, sépa- 
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 rer le élium formé de cultures aérobies correspondantes des organiaméM7indi- qués, le mettre en suspension dans de l'eau ou dans des solutions-tampons, ajouter à ces suspensions les substances de départ indiquées, et incuber. 
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  Les composés A 4-Ptégnéniques et les composés tll,4¯prégnadiéniques servant de substances de départ peuvent être obtenus suivant les procédés décrit dans les demandes de brevet déposées en Belgique par la Demanderesse: le 22 mars 
1958 pour "Nouveaux composés   prégnadiéniques   et procédé pour leur préparation", le 9 août 1958 pour "Procédé de préparation de fluoro-prégnènes", le 20 août 1958 pour "Procédé de préparation d'halogéno-prégnènes" et le 2 septembre 1958 poux "Procédé de préparation de nouveaux composés   halogéno-prégnaniques." .   



   L'invention est décrite plus en détail dans les exemples non limi- tatifs qui suivent, dans lesquels les températures sont indiquées en degrés cen-   tigrades   
Exemple 1   (M-327)   
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 - bV-ttna culture de Streptomyoes $oxeoahromogenus sur un milieu gélosé renfermant 1% de glucose et 1% d'extrait de levure. On utilise alors 1 cm3 de cette suspension pour ensemencer 50 cm3 d'un milieu aqueux stérilisé renfer- mant 2% de peptone et 5% d'eau de gonflement du mais (Corn steop liquor), placés dans une fiole conique de 250 cm3.

   Tout en aérant à 28 , on secoue alors pendant 24 à 48 heures à la machine une série de ces ficles coniques, ce qui fait qu'on 
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 obtient une culture en croissance de Strepto'roseoohromogenus; 
Dans chaque fiole conique on ajoute alors 10 mg de   6[alpha]-fluoro-cortiso-   ne et secoue le mélange en aérant, pendant 48 à 72 heures. On extrait alors au chlorure de méthylène, lave l'extrait à l'eau, sèche sur du sulfate de sodium et évapore à sec sous vide. On purifie le résidu par chromatographie sur du gel 
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 de silice, ce qui fait qu'on obtient la 6a-fluoro-16oG-hydroxy-cortisone. 



  Si au lieu de 6a-fluoro-aortisone, on incube d'une manière analogue, avec le Streptomyces roseoohromogenus, les 6a-g-d.fluoro-dérivés et les 6(X-fluo- ro-9o6-ehloro-dérivés de la cortisone, de l'hydrocortisone, de la prednisone et de la prednisolone, on obtient alors les 6c-9a-difluoro-dérivés et les 6cx-fluoro- 9tx-chloro-dérivés de la 1 &tx-hydro3çy-eortisone, de la 16tx-hydroxy-hydrocortisone, de la 160e-hyàroxy-preànisone et de la 16os-hydroxy-prednisolone, D'une manière analogue, en partant de la 6 -fiuoro-preànisone et de la 6 -fiuoro-preànisolone, on obtient la 6K-fluoro-l6<X-bydroxy-prednisone et la 6-fluoro-16o-hydroxy-predni-   solone.   



   Exemple 2   (M-462)   
Dans une culture en croissance de Streptomyces roseochromogenus qui est obtenue comme indiqué dans l'exemple 1, on ajoute, pour 50 cm3 de culture, 
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 10 mg de 6a--ahloro-eortisone, puis agite le mélange pendant 48 à 72 heures à 28 , en l'aérant. On extrait ensuite le mélange réactionnel à plusieurs reprises avec du chlorure de méthylène, lave l'extrait à l'eau, sèche sur du sulfate de sodium, filtre et évapora sous vide. On chromatographie le résidu sur du gel de 
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 silice ce qui fait qu'on obtient la 6a-chlora-lbcx-hdroxy-eortisone; /\ max 234 m}h logé= 4,16. 



  D'une manière analogue les 6&-ahloro-àérivés et les 6ec.-ahloro-9a- halogéno-dérivés de la cortisone, de   l'hydrocortisone,   de la   prednisone,   et de 
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 la prednisolone sont transformés en les 16 -hydroxy-aonposés correspondants c'est- à-dire en les 6oc-ohloro-dérivés et en les 6cx-chloro-9tx halogéno-.é,rivés de la 160E-hydroxy-cortisone, de la 16a-hydrojW-hydrocortisone, de la 16a-hydroxy-predni- sone et de la 16a-hydroxy-prodnisolone.

Claims (1)

1. Revendications Un procédé de préparation de composés hydroxy-prégnaniques, caractéri- EMI3.1 sé-par le fait qu'on incube avec une culture de Streptomyaes roseochromogerius des composés de formule EMI3.2 dans laquelle X représente de l'hydrogène, un atome de chlore ou de fluor, X1 un atome de chlore ou un atome de fluor, Y un groupe oxo, ou bien de l'hydrogène et un groupe hydroxyle libre ou estérifié, et R de l'hydrogène ou un reste acyle, et les 1-déhydro-composés correspondants.

   Le présent procédé peut encore être caractérisé par les points sui- vants ; 1) On utilise comme substance de départ la 6[alpha]-fluoro-cortisone ou un ester de celle-ci. EMI3.3

   2) On utilise comme substance de départ la 6a,f.uoro-l,ydrocortisone ou un ester de celle-ci.

   3) On utilise comme substance de départ la 6o,9c-difluoro-cortisone ou un ester de celle-ci.

   4) On utilise comme substance de départ la 6 -90E-difluoro-hydrocorti- sone ou un ester de celle-ci.

   5) On utilise comme substance de départ la cx-fluoro-9oc.cb,loro-corti- sone ou un ester de celle-ci.

   6) On utilise comme substance de départ la 6cx-f7,uoro-9a-ohloro-hydro- cortisone ou un ester de celle-ci. EMI3.4 7) On utilise comme substance de départ la 6a-fluoro-pxednisone ou un ester de-celle,ci, EMI3.5 8) On utilise comme substance de départ la 60E-fluoro-preànisolone ou un ester de celle-ci.

   9) On utilise comme substance de départ la 6,9cx-difluoro-predn,isone ou un ester de celle-ci.

   10) On utilise comme substance de départ la 6tx,9(x-difluoro-prednisolone ou un ester de celle-ci.

   Il) On utilise comme substance de départ la 6oc.-fluoxo-9t-ch,oro-pred- nisone ou un ester de celle-ci. EMI3.6 12) On utilise comme substance de départ la 6a:-fluoro-9a:-chloro- prednisolone..ou un ester de celle-ci, EMI3.7 13) On utilise comme substance de départ la 60E-chloro-aortisone ou un ester de celle-ci. EMI3.8 14) On utilise comme substance de départ la 6(ï-chloro-bydrosortisone ou un ester de celle-ci. <Desc/Clms Page number 4>

   15) On utilise comme substance de départ la 6[alpha]-chloro-prednisone ou un ester de celle-ci.

   16) On utilise comme substance de départ la 6[alpha]-chloro-prednisolone ou un ester de celle-ci.