CH282642A - Procédé de préparation d'acide ptéroylglutamique. - Google Patents

Description

  Procédé de préparation d'acide     ptéroy1glutamique.       Le présent brevet a pour objet un pro  cédé de préparation d'une     ptéridine    substi  tuée, soit d'acide     ptéroylgluta.inique    qui, au    moins sous une forme     tautomère,        présente    la  formule suivante:

    
EMI0001.0006     
         Suivant    l'invention, on prépare cet acide  en faisant. réagir à chaud un composé de for  mule  
EMI0001.0008     
    où Y est un reste s'éliminant au cours de la  réaction et comprenant un atome d'azote lié,  d'une part., au groupe méthylène et, d'autre  part, au moins à deux atomes de carbone, avec  un dérivé fonctionnel de l'acide     p-aminoben-          zoylglutamique,    et en ce qu'on hydrolyse le  produit résultant pour obtenir l'acide     péroyl-          glut.amique    libre.  



  Ce dérivé fonctionnel est, de préférence,  un ester ou une amide.  



  L'acide     ptéroylglutamique    obtenu est un       composé    jaune à rouge brun, difficilement    soluble dans l'eau et les solvants     organiques.     Il peut être utilisé pour stimuler la formation,  de l'hémoglobine et dans le traitement des  anémies     inacrocytiques.     



  Les sels d'acides de ]'acide     ptéroy        igluta-          inique    peuvent se préparer par traitement de  celui-ci au moyen d'acides minéraux forts,  par exemple l'acide     ehlorhydrique    ou l'acide  sulfurique. On peut aussi obtenir des sels de  bases par traitement dudit acide au moyen  d'un agent alcalin approprié, par exemple un  hydroxyde d'un métal alcalin, de l'ammonia  que ou une amine.

   D'autres sels métalliques  contenant comme cations le zinc,     L'argent,    le  nickel, le cuivre, le magnésium, le baryum et  autres peuvent être obtenus par double dé  composition, par exemple en traitant une so  lution d'un sel de métal alcalin de l'acide     pté@          roylglutamique    au moyen d'un sel soluble  contenant le cation voulu.

        Le reste Y est du type     -NRR'    ou       -NR.R'R"X,    où R, R' et R" peuvent être des  radicaux aliphatiques ou aromatiques ou peu  vent ensemble constituer le reste d'un noyau  saturé ou non saturé comprenant l'atome  d'azote, comme dans le cas de la     pipérïdine    ou  de la     pyridine.    X est de préférence un halo  gène ou tout autre anion capable de former  un sel d'ammonium quaternaire.  



  Le composé contenant le reste Y peut être  préparé en faisant réagir un     2,3-dihalopro-          pionaldéhy    de avec une amine secondaire ou  tertiaire et en faisant agir ensuite la     2,4,5-tri-          amino-6-hydroxypyrimidine    sur le produit de  la réaction. Si on part d'amines secondaires,  on obtient des amines tertiaires (Y =     NRR')     et si l'on part d'amines tertiaires, on obtient  des composés d'ammonium quaternaire  (Y ---     NRR'R"X).     



  Comme aminés secondaires appropriées, citons  la     diéthylamine,    la     diisopropylamine,    la     di-          octylamine,    la     morpholine,    la     pipéridine,    la       méthylaniline    et antres amines secondaires  aliphatiques et aromatiques, dans lesquelles R  et R' représentent des radicaux identiques ou  différents qui peuvent être ou non inclus  dans une structure à noyau.

   Les amines ter  tiaires utilisables sont par exemple la     pyri-          dine,    utilisée de préférence, et d'autres telles  que les     picolines,    la     triméthylamine,    la     di-          méthylaniline,    la quinoléine et analogues.  



  Pour favoriser l'élimination du groupe  ment Y, il est indiqué d'opérer à une tempé  rature assez élevée, comprise à l'ordinaire  entre 100 et 200  C, de préférence entre 140  et l80  C. L'hydrolyse s'effectue avantageuse  ment à chaud, en présence d'un acide tel que  l'acide sulfurique ou l'acide chlorhydrique,  ou d'une base telle que     l1lydroxyde    de sodium  ou l'hydroxyde de potassium.  



  Il est préférable d'effectuer la réaction  initiale au sein d'un milieu modérément basi  que. Les meilleurs résultats sont obtenus lors  qu'on emploie pour rendre le milieu alcalin  des     alcoolates    de métaux alcalins, par exemple  le     méthylate    de sodium.     l'éthylate    de sodium,  le     méthylate    de potassium, etc. Pour effec-    tuer l'hydrolyse, il est indiqué de chauffer le  mélange à une température comprise entre  50 et 100  C. Les groupements ester sont en  général plus facilement éliminés que- les grou  pements amide.  



  La réaction initiale paraît aboutir à de  meilleurs rendements lorsqu'on opère sous des  conditions anhydres, c'est-à-dire lorsqu'on  chauffe les réactifs tels quels ou dans un sol  vant non aqueux, de préférence dans de     l'éthy-          lène-glycol    ou dans d'autres solvants tels que  les alcools, les éthers, les hydrocarbures et la       pyridine.    La réaction se produit toutefois éga  lement dans l'eau.  



  Il est donné ci-après plusieurs exemples de  mise en     oeuvre    du procédé suivant la présente  invention.  



  <I>Exemple 1:</I>  On a préparé préalablement comme suit  l'ester y-éthylique de l'acide     p-aminobenzoyl-          glutamique     On dissout de l'ester ;,-éthylique d'acide       p-nitro-benzoylglutamique    (32,4 parties) dans  150 parties en volume d'éthanol. On ajoute 6  parties de charbon activé et on clarifie la solu  tion. On additionne le filtrat de 6,4 parties de       palladium        sur        charbon    à     10%        et        on        effectue     la réduction à la température ambiante en  partant d'une pression d'hydrogène de 22,7 kg.

    Dans l'espace de 3 heures et 45 minutes,       une        quantité        de        91,2        %        de        la,        quantité        théori-          que        d'hydrogène    est absorbée. On élimine le  catalyseur par filtrage et on évapore le filtrat  orangé sous vide et dans une atmosphère  d'azote (la température du bain ne dépassant.  pas 45  C). On obtient de l'ester y-éthylique  d'acide     p-aminobenzoylglutamique    de couleur  orangée.  



  On dissout l'ester y-éthylique de l'acide       p-aminobenzoylglutamique    dans 200 volumes  d'éthylène-glycol anhydre. A cette solution on  ajoute 38,4 parties d'iodure de     2-amino-4-hy-          droxy-6-ptéridylméthylpyridinium    (préparé  par réaction entre la     2,4,5-triamino-6-hy-          droxypyrimidine,    le     2,3-dibromopropionaldé-          hyde    et la     pyridine)

      et suffisamment de     mé-          thylate    de sodium pour obtenir une faible ta  che sur du papier humide à     la.benzoazurine.         On chauffe la solution foncée à 140 à 150  C  pendant 3 heures, en ajoutant de temps en  temps de petites quantités de     méthylate    de  sodium pour maintenir la faible tache sur le  papier humide à la     benzoazurine.    La quan  tité totale de     méthylate    de sodium utilisée est  d'environ 4,0 parties.

   On précipite l'ester       7-éthylique    de l'acide     ptéroylglutamique    brut  en ajoutant lentement le mélange de la réac  tion, dans l'espace d'une     demi-heure,    à 1000  parties en volume d'une solution bouillante  d'acide acétique dans de l'eau. On ajoute suf  fisamment d'acide acétique pour maintenir  une tache brune sur du papier au rouge  Congo. La température est réduite à 10  C et  ensuite le produit brut est isolé par filtrage,  lavé à l'eau froide et à l'acétone et séché à  50  C. Le poids du produit brut se monte à  22,2 parties.  



  On dissout 20 parties du produit obtenu  ,dans 3000 parties en volume     d'hydroxyde    de  sodium 0,1 N et on élève la température à  60  C, cette température étant maintenue pen  dant 20 minutes. A la solution, on ajoute len  tement, à 60  C, 8,3 parties de chlorure de cal  cium sous forme d'une solution aqueuse à  30 0/0. On ajoute 40 parties de terre de diato  mées et on clarifie la solution. On lave le<B>gâ-</B>  teau de terre de diatomées au moyen de 300  parties d'eau chaude et on le rejette ensuite.  On ajuste le pH du filtrat à 10,78 à 40  C par  addition lente de 85 parties en volume de solu  tion de chlorure à 10 0/0. On ajoute 100 par  ties de terre de diatomées et on clarifie la so  lution.

   Le gâteau de terre de diatomées est lavé  au     moyen.\de200Kparties    en volume d'eau chaude  et ensuite rejeté. On ajuste le pH du filtrat  jaune orange foncé à 3,07 par addition de 11  parties en volume d'acide chlorhydrique con  centré (36 0/0). On ajoute 100 parties de terre  de diatomées et on abaisse la température à  10  C. Le solide est     ensuite    isolé par filtrage  et lavé au moyen de 200 volumes     d'eaa     chaude. Le filtrat et les eaux de lavage sont  rejetés.

   On met en suspension le gâteau de  terre de diatomées dans 2700 parties en vo  lume d'eau et on ajoute de l'hydroxyde de  sodium jusqu'à ce que l'on obtienne une tache    légèrement rosée sur du papier à la     benzo-          a.zurine.    La température est élevée et main  tenue à 80  C pendant 10 minutes. Ensuite,  on refroidit, à 20  C dans l'espace d'une heure,  tandis qu'on fait passer du dioxyde de car  bone dans la solution. On isole le solide par  filtrage à 20  C tout en maintenant une atmo  sphère de dioxyde de carbone au-dessus de la.  surface de l'entonnoir Buchner pendant le fil  trage. Le gâteau de terre de diatomées est lavé  au moyen de 200 parties en volume d'eau  froide et rejeté ensuite.

   On ajuste le pH du  filtrat de couleur jaune orange pâle à 3,0 par  addition d'acide chlorhydrique 5 N. On ajoute  <B>100</B> parties de terre de diatomées et on abaisse  la température à 10  C. On isole le solide par  filtrage et on lave le gâteau au moyen de 200  parties en volume d'eau glacée. Le filtrat et  les eaux de lavage sont rejetés. On met en sus  pension le gâteau de terre de diatomées dans  1000 parties en volume d'eau, on élève la tem  pérature à 80  C et on ajoute de l'oxyde de  magnésium en quantité     juste    suffisante pour  obtenir une tache très faible sur du papier à.  la     phénolphthaléine.    A cette solution on ajoute  0,5 parties de charbon activé et après agita  tion pendant 10 minutes à une température  de 80 à 85  C, on clarifie la solution.

   Le gâ  teau de terre de diatomées est lavé au moyen  de 200 parties en     volume    d'eau chaude et re  jeté ensuite. Le filtrat jaune foncé est ajouté  lentement, dans l'espace d'une demi-heure, à  une solution bouillante consistant     en,    200 par  ties en volume d'eau et 15 parties en volume  d'acide acétique glacial. La température est  réduite à 10  C et ensuite le produit amorphe  do couleur orange foncé est isolé par filtrage,  lavé à l'eau froide et à l'acétone et séché à  50  C.

   On obtient<B>0,572</B> partie d'acide     ptéroyl-          glutamique    de couleur -jaune foncé dont la  teneur en acide     ptéroylglutamique,    détermi  née par analyse chimique et par épreuve     bio-          logique,        est        de        80,0        et        de        61,4%        respective-          ment.     



       Exemple     On condense de la manière décrite dans  l'exemple 1 16,1 parties d'ester     diétby        lique         d'acide     p-aminobenzoy        lglutamique    avec 19,2       parties    d'iodure de     2-amino-4-hydroxy-6-pté-          ridylméthy        lpyridinium    dans 120 parties en       volume        d'éthylène-glycol    anhydre.

   On obtient  11,6 parties de matière brute rouge brun     foneé     dont la teneur en acide     ptéroylglutamique    est       de        16,7        %    à     l'analyse        chimique        et        de        4,35        0/0     l'épreuve biologique.  



  On traite le produit brut obtenu de la ma  nière décrite dans l'exemple 1, en omettant  toutefois le traitement final par l'oxyde de  magnésium et le charbon activé. On obtient.       Lin    produit amorphe jaune foncé d'une teneur       en        acide        ptéroylglutamique        de        68,3        %    à     l'ana-          lyse        chimique        et        de        34,

  4        %    à     l'épreuve        bio-          1        ogique.     



       Exemple   <I>3:</I>  En appliquant le processus décrit dans  L'exemple 1, on condense 3,212 parties de     l#NT,N-          diéthyl    - (p -     aminobenzoyl    - y -     glutamide)    avec  3,8? parties d'iodure de     2-amino-4-hydroxy-6-          ptéridy        lmétliy        lpyridinium    dans 60 parties en       ,,-olume    d'éthylène-glycol anhydre. On obtient  '3,17 parties d'un produit     brut    rouge brun       oncé.     



  On hydrolyse ce produit     brut    de la ma  nière décrite dans l'exemple 1. On obtient -un  produit dont la teneur en acide     ptéroylgluta-          inique,        déterminée    par analyse chimique, est  de 3,5 0/0.  



  <I>Exemple</I>  On ajoute 1,43 g d'ester éthylique d'acide       p-aminobenzoylisoglutamique    et 1.,47 g d'io  dure de N-[     (2-amino-4-hydroxy-6-ptéridyl)-          niéthyl]-pyridinium    à 5     cm3        d'éthylène-gIy-          col    contenant 0,27 g de     méthoxyde    de sodium  et on chauffe le mélange pendant 3 heures à       p    40  C. Le mélange est, ensuite refroidi, dilué       au    moyen de 50     em3    d'eau et acidifié à     pH     3,5. Par filtrage, on obtient 1,1 g d'une ma  tière brun foncé.  



  On dissout 0,8     g    du composé     ptéroylique          brut    obtenu dans 120     cm3    d'hydroxyde de so  dium 0,1 N et on chauffe la solution pendant  15 minutes à 70  C. On ajoute 0,82 g de chlo  rure de calcium dissous dans un peu d'eau.  On continue de chauffer pendant 10 minutes.  On ajoute une solution de chlorure de zinc    pour amener le pH à. 11. On filtre le mélange  et on ajuste le pH du filtrat à. 2,5. On isole  la matière insoluble par filtrage et on la dis  sout, pendant qu'elle est encore humide, clans  2     cm3    d'acide chlorhydrique. On ajoute la so  lution à 25     cm3    d'eau et on refroidit subite  ment le mélange.

   On obtient 54 mg d'un pro  duit révélant une teneur en acide     ptéroylglu-          tamique        de        87,0        %        à.        l'analyse        chimique        et        de          19,6        %    à     l'épreuve        biologique.     



       Exemple.   <I>5:</I>  On ajoute 2,65 g de     p-aminobenzoyl-          gluta.mine    et 3,82 g d'iodure de     N-[(2-amino-          4-hydroxy-6-ptéridyl)-niéthyl]        -pyridinium    à  15     cm3        d'éthylène-glycol    contenant 1,08 g de       méthoxyde    de sodium et on chauffe le mé  lange pendant 3 heures à 7.38  C. On     mélange     le tout à 100     eni3    d'eau glacée et on ajuste le  pH de manière à obtenir une réaction acide  avec le papier indicateur au Congo rouge. On  filtre le mélange et on obtient. 3,4 g de pro  duit solide.  



  On dissout 3 g du produit obtenu dans  300     cms    d'hydroxyde de     sodium    0,1 N et on  chauffe la solution pendant 10     minutes    à  70  C. On ajoute 1,65 g de chlorure de cal  cium dissous dans un peu d'eau. Le mélange  est chauffé pendant 10 minutes, amené à pH  11 (papier indicateur) et filtré. Le pH du  filtrat est amené à. 2,5 et ensuite le filtrat est  soumis à la     centrifugation.    On met en suspen  sion le précipité dans environ 300     em3    d'eau  et on soumet une fois de plus le mélange à la  centrifugation. On     ajoute    5     cin3    d'acide chlor  hydrique concentré au précipité et on mé  lange.

   Le mélange est dilué au moyen d'eau  jusqu'à un volume de 70     cm'.    On laisse re  froidir le mélange dans une glacière     pendant.     la nuit et on filtre. La. quantité de matière  obtenue se monte à 120 mg. Teneur en acide  folique: 87,3 0/0, déterminée par analyse chi  mique, et 40,7 0/0, déterminée par épreuve bio  logique.  



       Exeîyt.ple   <I>6:</I>  On a préparé comme suit le composé à.  faire réagir avec le dérivé de l'acide     p-amino-          benzoy1glutamique:         A une solution de 216 g de     2,3-dibrorno-          propionaldéhyde    dans 500     cm3    d'éther an  hydre, refroidie à -50  C, on ajoute une solu  tion à 50  C de 73     g    de     diéthylamine    dans  500     cm3    d'éther anhydre, en refroidissant  pour maintenir la température entre -30 et       -40     C. On laisse reposer la suspension de  solide blanc dans l'éther pendant 1 heure.

    Pendant ce temps, la température monte à  + 10  C. On ajoute 100     em3    d'eau pour dis  soudre le produit et on rejette la couche éthé  rée. On ajoute la solution aqueuse à une sus  pension de 100 g de     2,4,5-triamino-6-hydroxy-          pyrimidine    (sous forme de     dihydrochlorure)     dans 300     cm3    d'eau. On ajoute de l'hydroxyde  de     sodium    (5 N) pour amener le pH à environ    3. Ensuite, on ajoute 100     cm3    d'une solution  contenant 20 g d'iode et 40 g d'iodure de  potassium.

   On isole le produit, soit     l'hydro-          iodure    de     2-amino-4-hydroxy-6-(diétliylamino-          m6thyl)-pyrimido[5,4-b]pyrazine,    et on le  fait ensuite réagir avec de l'ester     y-éthylique     d'acide     p-aminobenzoylglutamique    pour pro  duire l'ester     y-éthylique    de l'acide     ptéroylglu-          tamique.    On hydrolyse cet ester pour obtenir  l'acide     ptéroylglutamique.  

Claims (1)

1. REVENDICATION: Procédé de préparation d'acide ptéroyl- glutamique qui, au moins sous une forme tau- tomère, présente la formule: EMI0005.0029 caractérisé en ce qu'on fait réagir à chaud un composé de formule:

   EMI0005.0030 où 5' est un reste s'éliminant au cours de 1a réaction et comprenant un atome d'azote lié, d'une part, au groupe méthylène et, d'autre part, au moins à deux atomes de carbone, avec 1111 dérivé fonctionnel de l'acide p-aminoben- zoy1g;lutamique, et en ce qu*on hydrolyse le produit résultant pour obtenir l'acide ptéroyl- glutainique libre. SOIJS-REVENDICATIONS 1.

   Procédé suivant la revendication, carac térisé en ce que ledit composé est un halogénure de N-[(2-amino-4-hydroxy-6-pyrimido[4,5-b] pyrazyl) -méthyl ] -pyridinium. 2. Procédé suivant la revendication, carac térisé en ce que le reste Y est tel que ledit composé constitue une amine tertiaire par rapport à l'atome d'azote fixé au groupe méthylène. 3. Procédé selon la revendication, caracté risé en ce que le reste Y est tel que ledit com posé constitue un composé d'ammonium qua ternaire par rapport à l'atome d'azote fixé au groupe méthylène. 4.

   Procédé suivant la revendication et la sous-revendication 2, caractérisé en ce que l'hydrolyse est effectuée en milieu alcalin. 5. Procédé suivant la revendication et la sous-revendication 3, caractérisé en ce que l'hydrolyse est effectuée en milieu alcalin. 6. Procédé suivant la revendication, carac térisé en ce que la réaction initiale est effec- tuée à une température comprise entre 100 et 200 C et à un pH de 8 au moins. 7. Procédé suivant la revendication et la sous-revendication 6, caractérisé en ce que la dite- réaction est effectuée en présence d'un alcoolate de métal alcalin. " 8. Procédé suivant la revendication et les sous-revendications 6 et 7, caractérisé en ce que ladite réaction est effectuée en présence d'un solvant sensiblement anhydre.