CZ20001493A3 - Vícenásobně substituované varianty proteáz se změněným nábojemm, které je moľné pouľít jako detergenty - Google Patents

Vícenásobně substituované varianty proteáz se změněným nábojemm, které je moľné pouľít jako detergenty Download PDF

Info

Publication number
CZ20001493A3
CZ20001493A3 CZ20001493A CZ20001493A CZ20001493A3 CZ 20001493 A3 CZ20001493 A3 CZ 20001493A3 CZ 20001493 A CZ20001493 A CZ 20001493A CZ 20001493 A CZ20001493 A CZ 20001493A CZ 20001493 A3 CZ20001493 A3 CZ 20001493A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
protease
precursor
variant
subtilisin
protease variant
Prior art date
Application number
CZ20001493A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ300347B6 (cs
Inventor
Ayrookaran J. Poulose
Volker Schellenberger
James T. Kellis Jr.
Christian Paech
Joanne Nadherny
Donald P. Naki
Robert M. Caldwell
Katherine D. Collier
Original Assignee
Genencor International, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27420734&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ20001493(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Genencor International, Inc. filed Critical Genencor International, Inc.
Publication of CZ20001493A3 publication Critical patent/CZ20001493A3/cs
Publication of CZ300347B6 publication Critical patent/CZ300347B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38681—Chemically modified or immobilised enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G4/00—Chewing gum
    • A23G4/06—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G4/12—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
    • A23G4/123—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/189—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/10—Washing or bathing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38609—Protease or amylase in solid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/39—Organic or inorganic per-compounds
    • C11D3/3902—Organic or inorganic per-compounds combined with specific additives
    • C11D3/3905—Bleach activators or bleach catalysts
    • C11D3/3907—Organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/39—Organic or inorganic per-compounds
    • C11D3/3945—Organic per-compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/86—Products or compounds obtained by genetic engineering
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
    • C11D2111/10—Objects to be cleaned
    • C11D2111/12—Soft surfaces, e.g. textile
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
    • C11D2111/10—Objects to be cleaned
    • C11D2111/14—Hard surfaces

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Confectionery (AREA)
  • Exhaust Gas After Treatment (AREA)
  • Finish Polishing, Edge Sharpening, And Grinding By Specific Grinding Devices (AREA)

Description

Serinové proteázy jsou podskupiny karbonylových hydroláz. Obsahují diverzní skupinu enzymů, které ' .vykazují široké funkcí (popisuje. se 131: 74-88). Navzdory rozmezí specifit a biologickýchv publikaci Stroud, ! R. Sci. Amer., jejich funkční diverzitě katalytického mechanizmu serinových proteáz se dosáhlo alespoň u dvou geneticky odlišných rodin enzymů: 1) subtil-izíny a 2) serinové proteázy příbuzné - savčímu chýmotrypsinu ‘ a. homologní bakteriální serinové proteázy (například trypsin a trypsin S.. gresius) . Tyto dvě rodiny serinových proteáz vykazují značně stejné mechanizmy katalýzy (popisuje ' se v publikaci. Kraut, J.
(1977;
Annu. Rev.
Biochem., 46; 331-358. Dále, ačkoli proteázy nemají, příbuznou primární strukturu, terciální struktura těchto dvou enzymatických rodin tvoří konzervativní katalytickou triádu aminokyselin, které obsahují serín, histidin a aspartát.
Subtilizíny jsou serinové proteázy (s . přibližnou molekulovou hmotností. 27 500) , které· se vylučují ve velkém množství z širokého rozmezí druhů Bacillus a jiných mikroorganizmů. Proteinová sekvence subtilizínu se stanovila alespoň z devíti různých druhů Bacillus (Markand, F. S., et al., (1983), Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem. 364: 1537-1540).
V literatuře struktura se zminu]e subtilizínu amyloliquefaciens,
Bacillus trojrozměrná krystalografická z mikroorganizmu Bacillus licheniformis přirozených variant mikroorganizmu B. lentus.
a několik Tyto studie subtilizín není geneticky příbuzný se proteázami, vykazuje podobnou aktivní místní strukturu. Analýza krystalických struktur subtilizínu pomocí X-záření, přičemž subtilizín,obsahuje kovalentně vázané peptidové’ inhibitory (popisuje se v publikaci Robertus, J. D., ukazují, že ačkoli savčími ' serinovými • ·
2439-2449) nebo komplexy Robertus, J. D. ět al., et al.’, (1972), Biochemistry, 11:
produktů (popisuje se ' v publikaci (1976), J. Biol. Chem. 251: 1097-1103), poskytuje také informace o aktivním místě a putativním .vazebném štěpení substrátu subtilizínu. Publikuje se velké množství 'studií kinetických. a chemických úprav, molekul (popisuje se v. publikaci Svedsen, B., (1976) Cerlsberg Res. Commun., 41:
237-291, Markland, F. S.' Id.). .a existuje alespoň jedna zpráva,’ ,kde vedlejší řetězec methioninu ' subtilizínu s .222 zbytky se přeměnil peroxidem vodíku na methioninsulfoxid (popisuje se v publikaci. Stauffer, D. C., at al., (1965),. J. Biol. Chem.; 244:· 5333-5338) a’.provedla se rozsáhlá místně specifická mutageneze (Wells and Estell (1988) TIBS 13: 291-297).
Běžným problémem.·· vývoje proteázové varianty -vhodné pro použití v detergentové formulaci jsou./ různé podmínky promytí zahrnující různé detergentové formulace, kde se '. mohou použít proteázová varianty. Detergentové formulace užívané v různých oblastech mají různé koncentrace. různých relevantních komponent přítomných v promývací vodě. Například Evropský detergentový systém v'typickém případě. obsahuje přibližně. 4 500 až 5 000. ppm detergentových komponentů v prací vodě, zatímco Japonský detergentový systém v typickém případě obsahuje v prací- vodě přibližně 667 ppm detergentových komponentů. V Severní Americe,, zvláště pak ve Spojených státech, vykazuje detergentový systém v prací vodě přibližně 975 ppm detergentových komponentů. Překvapivě, se vyvinul způsob detailního projektu varianty proteáz vhodné pro použití v systému s nízkou koncentrací detergentů, systému s vysokou koncentrací detergentů a/nebo systému se střední koncentrací detergentů, stejně jako ve všech třech typech systému koncentrací detergentů.
Podstata vynálezu, . . · *··4 proteázou promývácí
Vynález popisuje proteázové varianty obsahující substituce aminokyselin v jedné nebo ve více pozicích zbytků tak, že substituce mění náboj v této poloze na více negativní nebo méně pozitivní ve srovnání prekurzorovou proteázou a tak proteázová varianta je více účinná v systému s nízkou koncentrací detergentu ve srovnání s prekurzorovou proteázou. Systém s nízkou koncentrací .. detergentu je promývácí systém, který obsahuje méně než přibližně 800 ppm komponentů detergentu přítomných v prací vodě.
Dále vynález popisuje proteázové varianty, obsahující substituce aminokyselin v polohách jednoho nebo více zbytků tak, že substituce mění náboj v této poloze tak, . že náboj je více pozitivní nebo méně negativní ve srovnání s prekurzorovou proteázou a tak proteázová varianta je více účinná v systému s vysokou koncentrací detergentu ve srovnání s prekurzorovou Systém s vysokou koncentrací detergentu je systém, který má obsah detergentových .komponentů vyšší než přibližně 2 000 ppm detergentových komponent přítomných v prací vodě.
Dále vynález popisuje proteázové varianty obsahující substituce aminokyselin v jedné nebo více polohách zbytků, které mění náboj v této poloze, tak, že je více pozitivní nebo méně negativní · ve srovnání s.prekurzorovou proteázou, což znamená, že proteázová varianta je více účinná v systému se střední koncentrací detergentu ve srovnání s prekurzorovou proteázou. Systém se střední koncentrací detergentu je systém, který obsahuje v prací vodě přibližně 800 ppm až 2 000 ppm detergentových komponentů.
Vynález dále popisuje proteázové varianty obsahující substituce aminokyselin v polohách jednoho nebo více zbytků tak, že substituce mění náboj v této poloze tak, že náboj je více negativní nebo méně pozitivní ve srovnání s prekurzorovou proteázou a tak proteázová varianta je více účinná v systému se střední koncentrací detergentu ve srovnání prekurzorovou
proteázou. Systém se střední koncentrací detergentů je promývací systém, který obsahuje v prací vodě -přibližně 800. ppm až přibližně 2 000 ppm detergentových komponentů.
Dále vynález popisuje sekvence DNA kódující takové proteázové'varianty, stejně jako expresívní vektory - obsahujíčí takové varianty sekvencí DNA.
Vynález, dále popisuje hostitelské buňky transformované takovými vektory, stejně jako hostitelské' buňky, které jsou schopny exprimovat takovou DNA, aby se produkovaly .proteázové .varianty buď, uvpitř. buňky nebo vně. buňky.
Dále vynález, popisuje čistící kompozici· obsahující proteázovou variantu.podle vynálezu.
t
Navíc se! popisuje krmení pro zvířata obsahující proteázovou variantu podle vynálezu.
Dále se popisuje- 'kompozice vhodná pro ošetření textilií obsahující proteázovou variantu podle vynálezů. ·
Dále se popisuje, způsob produkce proteázové-. varianty, která je více účinná v systému nízké, . střední a vysoké koncentrace detergentů ve srovnání s prekurzorovou proteázou, která zahrnuje: \
a) substituci aminokyseliny v jedné nebo více polohách zbytků, kde substituce mění náboj v této poloze tak,, že' činí náboj více pozitivní nebo méně negativní ve - ; srovnání s prekurzorovou proteázou,
b) substituce aminokyseliny v jedné nebo více poloh zbytků, kde substituce mění náboj v této poloze tak, že činí náboj více negativní nebo méně pozitivní ve srovnání s prekurzorovou proteázou,
c) testovaní varianty pro stanovení její účinnosti v systému vysoké, střední a nízké .koncentrace detergentů ve srovnání s prekurzorovou proteázou a
d) opakování kroků popsaných v odstavci a), až c) , které jsou nezbytné k produkci proteázové varianty, ’ která je více účinná v systému s nízkou, střední a - vysokou koncentrací • · • · ·
detergentů ve' srovnání s prekurzorovou proteázou, přičemž kroky a) až b) se mohou provést v libovolném pořadí.
ucmnej si nezbytné pozitivně
Jak se uvádí shora v textu, jistá zeměpisná', mí sta vykazují, jisté podmínky praní a různé typy detergentů. Například v Japonsku používají systém s nízkou, koncentrací detergentů, zatímco v Evropě používají systém s vysokou koncentrací detergentů. Jak' se diskutuje shora v textů , ve . Spojených státech se používá -systém se střední koncentrací detergentů. Zjistilo sé, že různé proteázové varianty působí v těchto různých detergentových formulacích optimálně.. Avšak na'základě tohoto pozorování se - předpokládá, že . bude obtížné nalézt proteázu, která bude dobře fungovat ve všech třech, typech detergentů,. 'Překvapivě, není tomu .tak. Vyvinul se způsob rozumně navržené proteázové varianty, která se použije buď v systému- s nízkou koncentrací detergentů nebo v systému s vysokou koncentrací detergent-u --nebo » dokonce v systému se střední koncentrací detergentů nebo' dále' pracuje ve všech systémech uvedených t.řech koncentrací, ,
Zjistilo se,, že za účelem produkovat proteázovou variantu, která je účinněj'ší.v systému s nízkou koncentrací, je nezbytné nahradit .pozitivně nabitý zbytek nebo zbytky buď negativně nabitým zbytkem nebo zbytky nebo neutrálním zbytkem nebo zbytky s negativně nabitým zbytkem nebo zbytky. Naopak se uvádí, že za účelem produkce proteázové varianty, která je s vysokou koncentrací detergentů, negativně zbytkem zbytkem(zbytky) a/nebo neutrálním zbytkem(zbytky) s pozitivně nabitým zbytkem(zbytky). Dále se. zjistilo, že řada proteázových variant použitelná.v systému s nízkou koncentrací detergentů a/nebo v systémů s vysokou koncentrací detergentů je také účinná v systému se, střední koncentrací detergentů. Vyvážením těchto změn je možné produkovat proteázovou ie nabitý zbytek(zbytky) buď (zbytky) nebo neutrálním v systému nahradit nabitým • · ···· variantu, která funguje dobře v systémech s nízkou- koncentrací detergentu/ v systémech . s nízkou nebo střední koncentrací' detergentu, v systémech se střední a vysokou koncentrací detergentu nebo v systémech všech tří koncentrací detergentu.
Elektrostatický náboj libovolného ionizovatelného. vedlejšího řetězce aminokyseliny s kyselou nebo bazickou funkcí ve vodném roztoku je funkce pH. Kyselé zbytky Glu a Asp v rovnovážném postupu ztrácí disociací' při/.hodnotě pH' 3 až 6 proton, přičemž získávají negativní náboj. Stejným způsobem His, Lys a Arg se při hodnotách pH 5 až 8, 8,5 až 11,5 a pH 11 až 14 postupně deprotonizuji, čímž ztrácejí pozitivní náboj.' Proton . zbytku Tyr OH zvyšuje svou ..disociací mezi-· hodnotami pH 8,5 a. 11,5, přičemž Tyr získává negativní náboj. Disociační rozmezí karboxylového konce se pohybuje mezi .hodnotami pH 1 až 4, což vede ke vzniku negativního náboje. V.případě N-konce je tato hodnota pH 8 až ' 11, což je doprovázeno ztrátou pozitivního náboje.. Disociační rozmezí vedlejšího řetězce aminokyseliny jsou průměrné hodnoty pro řadu proteinů, ale je známo,' že je ovlivňujú neobvyklé strukturální konfigurace ve stejných proteinech.
Kumulativní·· účinek všech nábojů stanoví, zda protein má při dané hodnotě pH čistě pozitivní nebo negativní náboj. Hodnota pH, při kterém účinnost pozitivního a negativního náboje je ..účinná a uvádí protein do elektrostaticky neutrálního stádia se nazývá izoelektrický bod (pl) . V případě, že se posune hodnota pH nebo že se přidá nebo odstraní. aminokyselina s ionizovatelným zbytkem vedlejšího řetězce, protein ztratí nebo získá náboj. Zvýšení čistě pozitivního náboje se dosáhne buď nahrazením zbytku, který je při daném pH'negativně nabitý, pozitivně nabitým zbytkem nebo zbytkem bez náboje, což vede k formální změně náboje +1 a +2. Nahrazením nenabitého zbytku vedlejšího řetězce zbytkem, který je protonizován při daném pH, formální změna náboje je +1. Podobně čistě negativní náboj se může zvýšit nahrazením »· ···· • · • 0 pozitivně nabitých, a nenabitých vedlejších řetězců negativně nabitými.vedlejšími řetězci při pH pozorování, čímž se zvýší negativní náboj o -1 a -2.
• Systém s nízkou ..koncentrací detergentů zahrnuje detergenty, kde v prací vodě je přítomno méně než přibližné 800 ppm detergentových komponentů. Japonské detergenty- se ‘v obecném případě považují za systém s nízkou koncentrací
Λ detergentů, který obsahuje v prací vodě přibližně 667, ppm detergentových komponentů. ,
Střední koncentrace detergentů zahrnuje detergenty, kde v'prací vodě je obsaženo přibližně 800 ppm. a 2000 ppm ‘detergentových .. komponentů. Detergenty v Severní ..Americe se v obecném případě považují. za systémy se střední koncentrací detergentů,. ‘které v .prací vodě obsahují přibližně 975 ppm V Brazílii obsahují’ - detergenty
500 ppm ' zahrnuj e detergentových 'komponentů.
v typickém případě v,prací, vodě přibližně- 1 detergentových komponentů.
Sytém s vysokou koncentrací detergentů detergenty, kde v promývací vodě je obsaženo více- jak 2 000 ppm. detergentových komponentů. Evropské detergenty se v obecném případě považují za systémy . s vysokou koncentrací detergentů, což znamená, že v prací vodě obsahují přibližně 4 500 až 5 000 ppm detergentových komponentů.
Detergenty Latinské Ameriky v obecném případě obsahují vysoké množství fosfátů a rozmezí detergentů používaných v Latinské Americe spadá do systému se střední nebo vysokou koncentrací detergentů, což je rozmezí mezi 1 500 ppm až 6 000 ppm detergentových komponentů v prací vodě. v textu brazilské detergenty v typickém v prací vodě 1 500 ppm detergentových komponentů. Avšak výskyt detergentů - s vysokým obsahem fosfátů není omezen na další státy •- Latinské Ameriky, kde se mohou používat systémy s vysokou koncentrací detergentů, které obsahují v promývací vodě’až přibližně 6 000 ppm detergentových komponentů.
Jak se'uvádí shora případě obsahují • · • · ··· ·
Z uvedených skutečností je zřejmé, že koncentrace detergentových sloučenin v typických pracích roztocích v celém světě kolísá od hodnoty nižší 'než přibližně 800 ppm (což je nízká koncentrace detrgentu), například přibližně 667 ppm v Japonsku, přes hodnotu 8 00 ppm k hodnotě 2 0Ó0 ppm (což je střední koncentrace detergentů),. například přibližně 975 ppm v US a přibližně 1 500 v Brazílii až k hodnotě 2 000 ppm (což je vysoká koncentrace detergentů). Příkladem je koncentrace 4 500 ppm až. přibližně 5 000 ppm v Evropě a .6 .000 ppm v místech, kde se používají detergént.y s vysokým, obsahem fosfátů.
Koncentrace v typických pracích -roztocích :,se stanoví empiricky, V USA v typickém případě v .pračce udržuje objem 64,4 1 pracího roztoku.. Aby se získala přibližná; hodnota koncentrace detergentů v pracím roztoku 975 ppm, pak se musí do. pracího· roztoku přidat přibližně .62,72 g ' detergentové kompozice. ' Toto množství, je typické množství odměřované uživatelem do prací vody - cdměrkcu, -krerá je' přibalena u· detěrgentu. ;Proteázy které v obecném jsou karbonylové ..hydrolázy, případě štěpí peptidpvé vazby proteinů nebo peptidů. Termín „proteáza znamená přirozeně se vyskytující proteázu nebo rekombinantní proteázu. Přirozeně se vyskytující proteázy zahrnují ' α-aminoacylpeptidovo.u . ~ hydrolázu, peptidylaminokyselinovou hydrolázu, acylaminohydrolázu, serinovou karboxypeptidázu, metalokarboxypeptidázu, thiolproteinázu, karboxylproteinázu a .metaloproteinázu. Zahrnují také serinové proteázy, metaloproteázy , a . kyselé proteázy, stejně jako endo- a exoproteázy.
Vynález dále popisuje . proteázové enzymy, které jsou varianty karbonylových hydroláz, které se přirozeně nevyskytují (proteázové varianty)/ které vykazují odlišnou proteolytickou aktivitu, stabilitu, substrátovou specifitu, profil pH a nebo charakteristiky použití ve srovnání
í., 7 s prekurzorovou karbonylovou hydrolázou, ze které, se získala ·· ···· ·· · · · · · · · · ·· · ·· · · · · · ······· ···· • · · · ·· · ·· · · aminokyselinová sekvence varianty. Ve specifickém případě takové,proteázové varianty vykazují aminokyselinovou sekvenci, která se v přírodě nevyskytuje a která se získala substitucí řady aminokyselinových zbytků prekurzorové proteázy různými aminokyselinami. Prekurzorová proteáza může být přirozeně “sě vyskytující proteázou nebo rekombinantní proteázou.
Proteázové varianty podle vynálezu zdůrazňují substituci libovolné z devatenácti přirozeně se vyskytujících Laminokyselin v-určených polohách aminokyselinových zbytků. Takové substituce se mohou provést v libovolném prekurzorovém subtilizínu (prokaryontní, eukaryontní, savčí atd) . V tomto dokumentu se různé . aminokyseliny značí běžným třípísmenným kódem. Takový kód je stanoven v publikaci Dále, M.W. (1989), Molecular Genetics of Bacteria, John Wiley and Sons, Ltd., Appendix 3. , · ' ' „Zde používaně, proteázové .varianty· se přednostně získaly ze subtilizínu mikroorganizmu. Bacillus'. Více -se upřednostňují varianty proteáz získané; ze subtilizínu mikroorganizmu Bacillus lentus a subtilizínu 309. .
Subtilizíny. jsou bakteriální a houbové proteázy, které v obecném případě štěpí peptidové vazby proteinů nebo peptidů. Termín _ „subtilizín znamená přirozeně se vyskytující subtilizín nebo rekombinantní subtilizín. Je známo, že série přirozeně se vyskytujících subtilizínů produkují a často vylučují různé druhy mikroorganizmů. Aminokyselinové sekvence zástupců této série nejsou zcela homologní. Avšak subtilizíny v této sérii vykazují stejný nebo podobný typ proteolytické aktivity. Tato třída serinových proteáz sdílí běžnou aminokyselinovou sekvenci definující katalytickou triádu, která se odlišuje od třídy serinových proteáz příbuzných chymotripsinu. Subtilizíny a serinové proteázy příbuzné chymotrypsinu vykazují katalytickou' triádu obsahující aspartát, histidin a serin. U proteáz příbuzných subtilizínu relativní pořadí těchto aminokyselin (čtou se od N-konce k C♦' · .· » ·· ··*· konci) je aspartáť-histidin-serin. U proteáz příbuzných chymotrypsinu 1 je relativní pořadí histidin-aspartát-serin. Subtilizín zde vystupuje jako serinová proteáza vykazující, katalytickou triádu proteáz příbuzných subtilizínu. Příklady zahrnují, ale nejsou omezeny na subtilizíny uvedené na obrázku' č. 3. Číslování ' aminokyselin v proteázách odpovídá’ číslům přiřazených sekvencím subtilizínu mikroorganizmu. Bacillus amyloliquefaciens přítomných na obrázku č. 1. ' , Termín „rekombinantní subtilizín nebo „rekombinantní proteáza. znamená subtilizín, ve kterém sekvence DNA kódující subtilizín nebo proteázu je upravena tak, aby se produkovala varianta · (nebo mutant) sekvence DNA, která kóduje substituci, deleci nebo inzercí jedné nebo více aminokyselin v přirozeně s;e .vyskytující aminokyselinové·, sekvenci. Vhodné metody produkce takové úpravy jsou popsány v dokumentu US patent RE 34,606, US patent 5,204,015 a US patent 5,185,258, US patent 5,700,676, US patent. 5,801,038 a US patent 5,763,257. ....
'Termín „subtilizíny, které nepocházejí z<člověka a DNA je kódující se mohou získat z mnoha prokaryontních a., eukaryontních organizmů. Vhodné příklady prokaryontních organizmů zahrnují gram-negativní organizmy, jako je Έ. colinebo Pseudomonas a' gram pozitivní bakterie jako je' Micrococcus nebo Bacillus. Příklady eukaryontních organizmů, ze kterých je možné získat subtilizín a „ jejich geny, mohou zahrnovat kvasinky, jako jsou Saccharomyces cerevisiae, houby jako je Aspergillus sp.. .
Termín „varianta proteázy má aminokyselinovou sekvenci, která se získala z aminokyselinové sekvence „prekurzorové proteázy. Prekurzorové proteázy zahrnují přirozeně se vyskytující proteázy a rekombinantní .proteázy. Aminokyselinová sekvence varianty proteázy se „získala z aminokyselinové sekvence prekurzorové proteázy substitucí, deleci nebo inzercí jedné nebo více aminokyselin prekurzorové .aminokyselinové sekvence. Taková modifikace je spíše modifikace „sekvence ·· ···· ·· ···· ·· «· • · · · · ' · · · · · ··· ··· β · ♦ · ····*···*···« ·· ·· ·· · ·· ·· prekurzorové DNA, která kóduje aminokyselinovou sekvenci prekurzorové proteázy, než úprava enzymy prekurzorové proteázy per se. Vhodné metody takových úprav prekurzorové sekvence DNA zahrnují zde popsané metody, stejně jako metody známé v oboru (popisuje se například v dokumentu EP 0 328299, * WÓ89/062'7'9' ~a v už uvedených US patentech a přihláškách).
Tyto čísla poloh aminokyselin .odpovídají číslům označujícím sekvenci subtilizínu mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens, která je uvedena na obrázku č. 1. Vynález se neomezuje pouze na mutaci tohoto určitého subtilizínu, ale také zahrnuje prekurzorové proteázy, které obsahují aminokyselinové zbytky v polohách, které jsou „ekvivalentní s.určitými identifikovanými zbytky v subtilizínu organizmu Bacillus amyloliquefaciens. V preferovaném provedení vynálezu prekurzorové proteáza je. subtilizín organizmu Bacillus lentus a substituce se . provádí v ekvivalentních polohách aminokyselinových l zbytků. v organizmu . B. lentus, které odpovídají těm uvedeným shora v textu.
Poloha zbytku (aminokyseliny) prekurzorové proteázy je ekvivalentní zbytku subtilizínu . mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens v případě, že je buď. homologní (to znamená, že odpovídá poloze buď v primární nebo terciální struktury) nebo analogická se specifickým zbytkem nebo částí uvedeného zbytku v subtilizínu organizmu Bacillus amyloliquefaciens ( to znamená, že vykazuje stejnou nebo podobnou funkční kapacitu kombinovat, reagovat nebo chemicky interagovat).
Za účelem dosáhnout homologie s primární strukturou aminokyselinová sekvence prekurzorové proteázy se přímo porovnává s primární sekvencí subtilizínu a zvláště se sadou zbytků, které jsou známy, že jsou v subtilizínech se známou sekvencí neměnné. Například obrázek č. 2 znázorňuje konzervativní zbytky subtilizínu organizmu B. amyloliquefaciens a B. lentus. Po uspořádání konzervativních zbytků, což umožňuje . nezbytné · začlenění a delece za účelem
I» ··* · udržet uspořádání (to znamena zabránit eliminaci konzervativních zbytků pomocí doplňkové delece a inzerce), se určité aminokyseliny organizmu Bacillus definují zbytky ekvivalentní . prov primární sekvenci . subtilizínu amyloliquéfaciens'. Uspořádání konzervativních 'zbytJčů by“mělo přednostně konzervovat 100 % takových zbytků. Avšak uspořádání* vyšší, než 75 % nebo 50: %. konzervativních zbytků , je také.
adekvátní pro definování ekvivalentních zbytků. Měla bý se udržovat konzervativnost katalytické; ' ’· triády
Asp32/His.64/.Ser221. V publikaci Siezen’'et ' al., (1991) Protein
Eng. 4(7): 719-737 se popisuje uspořádání velkého množství proteáz. V této, publikaci se také - popisuje r .
subtiláz nebo. .serinových proteáz- podobných serinových rozdělení subtilizínu do.jednoťlivých'skupin,
Například na -obrázku č, sekvence subtilizínu · amyloliquefaciens, Bacifus' jsou uspořádány aminokyselinové
Bacillus sekvencemi sekvenci ž mikroorganizmů sub ti lis, .. Ba c i lus lích enqfo rm i s (carlsbergensis) a Becillus lentus, přičemž .se stanoví maximální množství' - . homologie mezi aminokyselinovými Porovnání - těchto sekvencí naznačuje, že . v každé... existuje . řada- konzervativních zbytků. Tyto konzervativní zbytky (mezi BPNa B. lentus) jsou uvedeny na obrázku č. 2.
Tyto konzervativní zbytky . se tak mohou použít k definici odpovídajících ekvivalentních aminokyselinových zbytků subtilizínu mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens v jiných subtilizínech, jako je subtilizín mikroorganizmu Bacillus lentus (popisuje se v přihlášce PCT č. W089/06279, uveřejněné 13. července 1989), který je preferovaným proteázovým prekurozorovým enzymem nebo subtilizín popsaný jako PB92 (popsaný v dokumentu EP, 0 328 299), který vykazuje vysokou homologii s preferovaným- subtilizínem mikroorganizmu .Bacillus lentus. Aminokyselinové sekvence jistého'z těchto subtilizínů jsou uspořádány na obrázku č. 3Á a 3B se sekvencí subtilizínu ·« ««·· a· ···· ·· ·· ·· · · · · · · · a • a · a a · a a a a • « · · · · · · · a · a a aa · · · aa · aa a a· aa a a · aa a a
Bacillus amyloliquefaciens tak, aby se dosáhlo’ maximální homologie konzervativních zbytků. Jak je možné , vidět, v sekvenci mikroorganizmu Bacillus lentus ve srovnání se subtilizínem Bacillus amyloliquefaciens existuje řada deleci..Tak například ekvivalentní aminokyselinou- v případěVal Γ65’ v subtilizínu Bacillus amyloliquefaciens u jiných subtilizínůj mikroorganizmů je izoleucin B. lentus a B. licheriiformis. .
Termín „ekvivalentní zbytky se mohou také . definovat stanovenou homologii prekurzorové proteázy ,na úrovni terciální struktury, přičemž terciální struktura se stanovila krystalografií pomocí rentgenového záření. Ekvivalentní zbytky se definují jako ty, pro které atomové koordináty dvou nebo. více ' hlavních řetězcových atomů určitého aminokyselinového zbytku prekurzorové proteázy a subtilizín mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens (N na N, CA na CA, C na C a Q na 0) jsou '0,13 nm, přičemž se upřednostňuje, aby tyto atomové koordináty po uspořádání byly 0,1 nm. Uspořádání se dosáhne po té,, co se zorientuje a umístí nejlepší model, přičemž dojde k maximálnímu přesahu '.atomových koordinát ' atomů vodíku proteinu proteázy vůči subtilizínu Bacillus ,amyloliquefaciens. Nej lepším modelem je krystalografický model vykazující nejnižší faktor R v případě experimentálních ďifrakčních dat při nej.vyšším možném rozlišení.
R factor = ^\Fo(h)\-\Fc(h)\
Zh\Fo(h)\
Ekvivalentní zbytky, které jsou funkčními analogy ke specifickému zbytku subtilizínu Bacillus amyloliquefaciens jsou definovány jako aminokyseliny prekurzorové roteázy, které mohou přizpůsobit konfořmaci tak, že buď změní nebo se podílejí definovaným způsobem na struktuře proteinu, navázání substrátu nebo katalýze a přiřazují se ke specifikému zbytku subtilizínu mikroorganizmu . Bacillus amyloliquefaciens. Jsou to
11 » · 9 4 • « · 1
4« 4··4
1991 ty zbytky prekurzorové proteázy (jejichž terciální struktura, se získala rentgenovou krystalografií), které obsazují analogickou polohu, ačkoli atomy hlavního řetězce daného zbytku nemohou uspokojit kriterium ekvivalence na základě obsazení homologické 'polohy, * přičemž* “atomové ' koordináty' alespoň dvou atomů vedlejšího řetězce zbytku leží 0,13 nm od odpovídajících atomů vedlejšího řetězce subtilizínu mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens. Koordináty trojrozměrné struktury subtilizínu .mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens jsou uvedeny v dokumentu přihláška EPO č. 0 251 446 (ekvivalent US patentu č. 5, 182,204) a může se použít ke stanovení ekvivalentních zbytků na úrovni terciální struktury. ...
' · Některé z těchto zbytků určených . pro substituci jsou konzervativní zbytky, zatímco ostatní nejsou konzervativní.
V případě ’ zbytků, které nejsou konzervativní, substituce jednoho nebo více aminokyselin ,je která produkuje variantu, která sekvenci, která neodpovídá sekvenci zjištěné v přírodě.
V případě konzervativních zbytků výsledkem takových substitucí nebude přirozeně se vyskytující sekvence. Varianty proteáz podle vynálezu zahrnují zralé formy variant proteáz, stejně jako přo-formy a prepro-formy takových variant proteáz. Prepro-formy jsou preferované konstrukce, protože umožňují expresi, sekreci variant proteáz. Termín „pro-sekvence znamená sekvence aminokyselin vázaných na N-terminální část zralé formy proteázy, která když se odstraní vede k objevení „zralé formy proteázy. Řada proteolytických enzymů se nachází v přírodě jako translační proenzymové produkty a v nepřítomnosti post-translačního zpracování se exprimují tímto způsobem. Preferované pro-sekvénce produkující varianty proteáz jsou putativní pro-sekvence subtilizínu mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens, ačkoli se mohou použít jiné proteázové pro-sekvence.
limitována na substituci, vykazuje aminokyselinovou ·* ···· <· ···· ·* ·-· · · φ · ···· ·' · φ 9 9 « ··«· • · · · · · · · φ ·· « • · · · * · · · ·φ · ·· ·· ·· · ·· ··
Termín „signální- sekvence nebo „presekvence znamenají libovolnou sekvenci aminokyselin vázaných na N-terminální části proteázy nebo N-terminální části pro-proteázy, která se může podílet na. sekreci zralé formy nebo pro-formy proteázy. Tato definice signální se.kve'nčé~je~ řúnkcnT, jěstliže’ zahrnu je“ všechny uvedené aminokyselinové sekvence- kódované N-terminální' částí genu proteázy, která se podílí’1· na uskutečnění .sekrece proteázy za , nativních podmínek. . Vynález popisujé . takové sekvence, které se používají pro ovlivnění sekrece' zde definovaných variant proteáz. Jedna možná' signální sekvence obsahuje prvních sedm aminokyselinových . zbytků signální sekvence, . které ..pochází ze subtilizínu’ Bacillus subtillis fúzovaného se zbytkem 1 signální sekvence s subtilizínu z. mikroorganizmu Bacillus. lentus (ATCC 21536).,
Termín „prepró-. forma varianty proteázy zahrnuje zralou' formu proteázy .obsahu j ící ...’prosekvenei operativně spojenou s aminokoncem proteáz a s pre-sekvencí t nebo ' se ^signální sekvencí operativně spojenou s amino-koncem.. prosekvence.
Termín „expresívní vektor, znamená konstrukci DNA obsahující sekvenci DNA, která je operativně spojená.s vhodnou . kontrolní sekvencí schopnou ovlivnit expresi uvedené DNA ve vhodném hostiteli. Takové kontrolní sekvence zahrnují promotor, který ovlivňuje transkripci, operátorovou sekvenci, která řídí takovou transkripci, sekvenci kódující vhodná místa na ribozómu, kam se váže mRNA a sekvence , které řídí ukončení transkripce a translace.. Vektorem může být plazmid, fágové částice nebo jednoduše potencionální inzert v genomu. Po té, co je vhodný hostitel transformován, vektor se může replikovat a funguje nezávisle na genomu hostitele nebo se může v některých případech sám začlenit do genomu hostitele. U některých specifikacích termín „plazmid a „vektor jsou vnitřně zaměnitelné, přičemž plazmid je nejběžněji užívanou formou vektoru. Vynález dále popisuje také .jiné formy expresívních vektorů, které vykazují ekvivalentní funkce a stávají se dobře známy v oboru.
Termín „hostitelská buňka podle vynálezu je v obecném případě prokaryontní nebo eukaryontní hostitel,. který se přece osino upr a vu j e-metodami 'pop sáným i' v US '-patent u 'RE '34', 606 · tak, aby, nebyl· schopen vylučovat ’ enzymaticky aktivní endoproteázy. Preferovaná hostitelská buňka pro expresi proteázy je mikroorganizmus Bacillus .kmen BG2036, který je nedostatečný v případě enzymaticky aktivní neutrální proteázy a alkalické proteázy (subtilizínu). Konstrukce .kmene BG2036 se popisuje v US patentu 5,264,366. Jiné hostitelské buňky vhodné pro expresi proteázy zahrnují Bacillus subtilis 168 (popisuje se v publikaci US patent č. 34,606 a US patent č. 5,264,366) stejně jako vhodný kmen mikroorganizmu Bacillus , jako je B. licheniformis, B‘. lentus atd.·· ·· '
Hostitelské .buňky ‘se transformovaly nebo transfekovaly vektory konstruovanými Takové transformované za . použití metod rekombinace DNA. hostitelské buňky jsou schopny replikovat vektory kóduj ící varianty proteáz nebo . exprimovat požadovanou variantu proteáz. V případě vektorů, které kódují pre- nebo prepro-formu varianty proteázy, se pak tyto varianty v typickém případě vylučují z hostitelské buňky do média hostitelské buňky.
Termín „operativně spojený znamená vztah mezi dvěmi oblastmi DNA. Jednoduše znamená, že jsou vzájemně funkčně příbuzné. Například pre-sekvence je operativně spojená s peptidem, jestliže funguje jako signální sekvence, která se podílí ' na vylučování zralé formy proteinu, přičemž nejpravděpodobněji 'zahrnuje štěpení signální sekvence. Promotor je operativně spojen s kódující sekvencí, jestliže řídí transkripci sekvence. Vazebné místo ribozómu je operativně spojeno s kódující sekvencí,, jestliže, je umístěno tak, že umožňuje translaci.
Geny kódující přirozeně se vyskytující prekurzorovou proteázu se mohou získat pomocí obecných metod, které jsou známy v oboru. Metody v obecném případě obsahují syntézu značených sond, které vykazují putativní sekvence .kódující oblasti *”protěažý) ' přípravu '' genomových knihoven ‘ genu hybridizaci se sondami. Pozitivně hybrldizující. klony se pak mapují a sekvenují. . .
Klonované proteázy se pak používají pro transformaci hostitelské buňky za účelem exprese proteázy. Gen proteázy se pak liguje do plazmidu s vysokým počtem kopií. Tento plazmid se replikuje v hostitelech ve smyslu, že obsahuje dobře známé elementy nezbytně pro plazmidovou replikaci: promotor je operativně spojený s genem (který se může začlenit jako vlastní, homologní promotor 'genu, jestliže je rozeznán, to znamená transkribován hostitelem), ukončení transkripce a' polyadenylační- oblast (nezbytnou pro stabilitu mRNA transkribovanou ·hostitelem z genu proteázy v.jistých buňkách eukaryontního hostitele), která je exogenní nebo se· dodává endogenní terminační oblastí génu proteázy a je-li to nutné, zahrnuje selekční gen , jako je gen nesoucí rezistenci na antibiotika , který umožňuje kontinuální kultivaci . Jouněk hostitele infikovaných plazmidem růstem v médiu, které obsahuje antibiotika. Plazmidy s vysokým počtem, kopií také obsahují počátek replikace, který je pro hostitele vhodný. Plazmidy s vysokým počtem kopií také obsahují počátek replikace, což umožňuje vytvořit velké množství plazmidů v cytoplazmě bez omezení chromozomu. Avšak . vynález také popisuje začlenění více kopii genu proteázy do hostitelského genomu. To umožňují prokaryontní a eukaryontní organizmy, které jsou zvláště náchylné k homologní rekombinaci.
Gen může být přirozený gen organizmu B. lentus. V jiném případě je možné produkovat syntetický gen kódující přirozeně se vyskytující nebo mutantní prekurzorovou proteázu. V takovém případě je možné stanovit sekvenci DNA a/nebo aminokyselinovou sekvenci prekurzorové proteázy. Syntetizovalo se několik přesahujících syntetických jednořetězcových fragmentů DNA, které po hybridizaci a ligaci produkují syntetickou DNA kódující prekurzorovou proteázu. Příklad syntetické genové “iconsťřulíce se uvadl“v' přikl~adu*“3 ’~do'kumentuJ—-US—patent^T-'č — 5,204,015.’ .....' — ’ - - - - - * ------ ' Klonoval se přirozeně se vyskytující nebo syntetický gen prekurzorové· proteázy.- Provedla . se řada .modifikací, aby se, zvýšila možnost použiti genu při syntéze přirozeně se vyskytující ; prekurzorové. proteázy/ Takové modifikace zahrnují produkci .rekombinantníchproteáz, jak se popisuje v publikaci US patent. RE’ 34,606 a přihláška EPO č. 0 251 446, a produkci zde popsaných variant proteáz.
Následující způsob. kazetové mutageneze se může použít- pro konstrukci variant proteáz podle, vynálezu, ačkoli se mohou použít -i . júné metody. Nejdříve se . získá přirozeně· . se vyskytující gen kódující proteázu a celý nebo jeho část se sekvenuje. Pak se v sekvenci hledá bod, ve kterém je nutné provést mutaci (deleci, inzerci nebo substituci) jedné ; nebo více aminokyselin v kódovaném enzymu. V sekvenci, která sousedí s tímto bodem se hodnotila přítomnost restrikčních míst vhodných pro nahrazení krátkého segmentu genu s oligonukleotidy, které v případě, že se exprimují budou kódovat různé mutanty. Upřednostňuje se, aby taková restrikční místa byla jediná restrikční místa v proteázovém genu, což umožňuje nahrazení segmentu genu. Může se však použít libovolné restrikční místo, které se v genu proteázy neopakuje, přičemž štěpením restrikčními enzymy mohou vznikat genové fragmenty, které se sestaví do správné sekvence. Jestliže restrikční místa nejsou v polohách s vhodnou vzdáleností od vybraného bodu (10 až 15 nukleotidů) , pak se taková místa vytvoří substitucí nukleotidů v genu takovým způsobem, že se v konečné konstrukci změní čtecí rámec nebo kódované aminokyseliny. Extenzí primeru M13 podle obecně ·'· ·· známých metod se provedla mutace genu za účelem změny sekvence. '
Jestliže jednou dojde ke . klonování přirozeně se vyskytující DNA ’ nebo syntetické DNA, pak restrikční místa · ~1 emu j’íc mrs tá7 'kde se p rověde~ Thuťácej^Vse ““štěpí* restrikčnímy enzymy a cJo genu še ligu je pluralita oligonukleotidových kazet s komplementárním koncem. Tímto způsobem se zjednoduší mutageneze, protože všechny oligonukleotidy se syntetizovaly tak, aby měly stejná restrikční místa a pro vznik restrikčních míst jsou nezbytné syntetické linkery.
Proteolytické aktivita se definuje jako rychlost hydrolýžy peptidových- vazeb na miligram aktivního e.nzymu. Za účelem měření proteolytické aktivity, existuje řada známých postupů (popisuje se v publikaci Proteinases, ; .Advances
Engineering/Biotechnology, A.
K. M. Kalisz, „Microbial in Biochemical
Fiechter ed.,. 1988'
Vedle upravené proteolytické aktivity řada enzymů podle, vynálezu může mít jiné upravené vlastnosti, jako je poměr km, kcat, kcat/Km a/nebo . upravenou specifitu substrátu a/nebo upravený, profil aktivity v.závislosti na pH. Tyto enzymy' se mohou upravit pro určitý substrát, který předchází přípravě peptidů nebo je přítomen při hydrolytickém zpracování, jako je použití při praní prádla.
Vynález dále popisuje zabezpečení proteázy, která vykazuje změněnou proteolytickou aktivitu ve srovnání s prekurzorovou proteázou, protože zvýšení takové aktivity (numericky vyšší) umožňuje použití enzymu, který působí účinněji na cílový substrát. Zajímavé jsou také různé enzymy, které vykazují změněnou tepelnou stabilitu a/nebo substrátovou specifitu ve srovnání s prekurzorem. V některých případech je. nutná nižší proteolytická aktivita. Například snížení proteolytické aktivity ,je nutné,' když se požaduje syntetická aktivita proteáz (například při syntéze peptidů) . Je' možné snížit proteolytickou aktivitu v případě, že jě schopná porušit.
• · produkt takové syntézy. Naopak v některých případech může být nutné zvýšit proteolytickou aktivitu enzymu verzus jeho perkurzoru. Navíc je možné požadovat zvýšení nebo snížení (změna) stability varianty, přičemž je nutná alkalická nebo ' teplotrií stabilit a . Z výšení nebo ' sní žen i ' Km, kcar'' nebe 'kear;/KR' jsou specifické pro substrát, který' se používá pro stanovení těchto kinetických parametrů.
Zjistilo se, že varianty proteáz obsahující substituce aminokyselin v jedné nebo více poloh zbytků tak,· že.substituce mění náboj v poloze tak, že se stává více negativní nebo méně pozitivní ve srovnání s prekurzorovou proteázou. Tyto varianty jsou účinnější při. nižší koncentraci. detergentu . než prekurzorové proteáza.
Zjistilo se, že varianty proteáz obsahující substituce aminokyselin v jedné nebo- ve více polohách zbytku tak, že substituce mění náboj v této poloze, přičemž náboj se stává více .pozitivní nebo méně negativní ve srovnání s.prekurzorovou proteázou. Varianty proteáz jsou účinnější při vysokých koncentracích detergentu ve srovnání - s prekurzorovou proteázou.
Zjistilo se, že řada variant proteáz jsou použitelné v systému nízkých koncentracích detergentu a/nebo v systémech s vysokými koncentracemi. detergentu, také jsou účinné v systému střední koncentrace detergentu.
Tyto substituce se přednostně provádí u subtilizínu organizmu Bacillus lentus (rekombinantní nebo přirozený typ) , ačkoli se substituce mohou provést v libovolné proteáze organizmu Bacillus, upřednostňuje se subtilizín organizmu Bacillus.
Na základě výsledků získaných s rozdílnými proteázami, uvedené mutace .v subtilizínu organizmu Bacillus amyloliquefaciens jsou důležité při proteolytické aktivitě a/nebo ., stabilitě těchto enzymů a při čištění nebo promývání takových enzymů.
2.1
Řada proteázových variant podle vynálezu je použitelná při vytváření různých kompozic detergentů nebo formulací osobní potřeby, , .jako jsou šampony nebo pleťová voda. Řada známých látek jsou vhodná povrchově aktivní činidla, která- se ’ poúž Tvajť v “k omp ozic í dlí ob sáhujících ‘mu't anty ' p r o c e á z~~ “pcriTe vynálezu. Týt-o ' látky zahrnuj í* neiontové., aniontové; ,. kationtové -nebo pbójetné detergenty,’ jak se popisuje v dokumentu US 4,404,128 (Barry a Anderson): a US 4,261,868 (Jiří Flora, et al./ ) . Vhodná detergentová formulace še popisuje v příkladu 7. dokumentu US patent 5,204,015/ V oboru jsou . známy různé formulace, které se používají -jako čistící kompozice. Vedle typických čistících- kompozic se pro libovolný účel, kde se používá přirozená proteáza nebo proteáza divokého typu, . je možné použit varianty proteáz podle vynálezu. Tyto varianty se mohou použít například'při aplikacích kusového'nebo kapalného mýdla, při aplikací prostředků, na nádobí,, čisticích.; roztoků pro kontaktní čočky, produktů hydroiýzy peptidů, při zpracování odpadů, ..aplikací na textilie,, jako enz.ymy štěpící ’· n ' - ' fúzi při- produkci.' proteinu. -Varianty podle vynalezu mohou vykazovat zvýšenou účinnost detergentové srovnání s prekurzorem). . Zvýšená účinnost definuje jako zesílení schopnosti čistit skvrny citlivé vůči jistému enzymu, jako jsou skvrny od trávy a krve, jak se definuje obvyklým hodnocením-po standardním cyklu praní.
Proteázy podle vynalezu se mohou vnést do práškových nebo kapalných detergentů, jejichž pH je mezi 6,5 a 12,0 s procentovým zastoupením přibližně 0,01 až 5% hmot. (upřednostňuje se 0,1 % až 0,5 %). Tyto detergentové čistící kompozice mohou také zahrnovat jiné enzymy, jako jsou proteázy,- amylázy, celulázy, lipázy nebo endoglykolázy stejně jako plnidla nebo stabilizéry.
•Vedle, proteáz podle vynálezu neexistuje žádné specifické využití běžných čistících prostředků. Jinými slovy libovolná teplota a pH vhodné pro detergent je také vhodný pro uvedenou kompozice (ve detergentů se * « · · · · · · · · • · · · · · * ·, · 9 · · ··· · · · ♦ kompozici, pokud pH je ve shora uvedeném rozmezí a teplota je nižší než teplota denaturující proteázy. Proteázy podle vynálezu se mohou použít jako čistící kompozice bez detergentů buď samotné nebo v kombinaci s plnidly a stabilizéry.
Vynález také popisuje čistící kompozice obsahující proteázové varianty podle vynálezu. -Čistící kompozice mohou dále obsahovat aditiva, která se v těchto čistících kompozicích běžně používají. Tyto aditiva se mohou vybrat, ale nejsou omezena, na bělidla, povrchově aktivní činidla, plnidla, enzymy a bělící katalytická činidla. V. oboru je známo, že aditiva jsou vhodná pro inkluzi do kompozic. Zde uvedený seznam není’ vyčerpávající a je nutné ho brát jako příklady vhodných aditiv. V oboru je také známo, že je možné používat pouze ty aditiva, která jsou kompatibilní s enzymy a jinými komponenty v kompozici, jako je například povrchově aktivní činidlo. '
Množství aditiva, které je přítomno v čistící kompozici’ je přibližně 0,01 % až 99,9 %, upřednostňuje se přibližně 1 %. až 95 %, více se upřednostňuje. 1 % až 80 %.
Proteázové varianty podle vynálezu se mohou přidat do zvířecího krmení, jak se popisuje v dokumentu .US 5,612,055, US 5,314, 692 a US 5,147,642.
Dále vynález popisuje kompozici pro ošetření textilií, které zahrnují proteázové varianty podle vynálezu. Kompozice se může použít při ošetření například hedvábí nebo vlny, jak se popisuje v dokumentech RD 216,034, EP 134,267, US 4,533,359 a EP 344,259.
Přehled obrázků na výkrese
Na obrázku č. 1 A až ' C je znázorněna sekvence DNA a aminokyselinová · sekvence subtilizínu mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens a částečná restrikční mapa tohoto genu.
• · · ·
Na obrázku č. 2 jsou znázorněny konzervativní aminokyselinové zbytky subtilizínu mikroorganizmů Bacillus amyloliquefaciens (BPN)'a Bacillus lentus (divoký typ).
Na obrázcích 3A až 3'B je znázorněna aminokyselinová sekvence čtyř subtilizínu. Horní řádek reprezentuje aminokyselinovou sekvenci subtilizínu z mikroorganizmu Bacillus amyloliquefaciens (také se někdy nazývá jako subtilizín BPN')· Druhý řádek, znázorňuje aminokyselinovou sekvenci subtilizínu z mikroorganizmu'Bacillus subtilis. Třetí aminokyselinovou sekvenci subtilizínu licheniformis. Čtvrtý řádek znázorňuje sekvenci subtilizínu· z mikroorganizmu Bacillus lentus (který se v dokumentu PCT WO89/06276 nazývá subtilizín 309). Symbol * znázorňuje nepřítomnost specifických aminokyselinových zbytků ve srovnání se subtilizínem BPN'.
řádek znázorňuje z mikroorganizmu B. aminokyselinovou
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: · .
Produkovalo se a čistilo se velké množství variant proteáz za použití metod dobře známých v oboru. Všechny mutace se provedly v subtilizínu organizmu Bacillus lentus GG36.
Produkované proteázové varianty se testovaly u dvou typů detergentů a při dvou typech promývání za použití testů popsaných v publikaci „An improved method of assaying for a preferred enzyme and/or preffered detergent compositíon, US Seriál No. 6%/068,796.
V-tabulce 1 až 13 se uvádějí testované proteázy a výsledky testů ve dvou různých detergentech. Všechny hodnoty jsou dány jako porovnání s první proteázou uvedenou, v tabulce (to znamená, že hodnota 1,32 ukazuje schopnost uvolnit 132 % barviva v porovnání se
100 první varianty uvedené v tabulce) .
9 9 99 9
Sloupec A ukazuje rozdíly v náboji variant. V případě sloupce B detergentem byl 0,67 g/l filtrovaného Ariel Ultra (Procter and- Gamble, Cincinnati, OH, USA) v roztoku, který obsahuje 3 zrna na 3, 785 1 míchaného Ca2+/Mg2+. V každé prohlubni se použilo 0,3 ppm enzymu při teplóťě’'25 ' °C (systém · s nízkou koncentrací deteřgentu). V odstavci C detergentem byl 3,38 g/l filtrovaného Ariel Futur (Procter . and Ganúale, Cincinnati, · OH, USA) v roztoku obsahujícím 15 zrn v 3,785 1 směsi Ca2 + /Mg2+ a'v každé prohlubni se použilo 0,3 ppm enzymu při teplotě 40 °C (systém s vysokou koncentrací detergentů)..
Tabulka’č. 1
A B C
N7SD S103A V104I Q109R 1.00 1.00
N76Ď S103A V104I Q109R Q245R - 0.48 1.41
Tabulka č 2
• i . I '· ' A B c
V68A N7SD S103A V104I G159D Q236H|Q24SR| 1.00 1..00
V68A N76D S103A V104I G159D N204D jG23SH j Q245R -1 1.11 0.03
Tabulka č. 3
! A B C
V68A N76D S103A V104I • 1.00 1.00
722 K V68A N76D S103A V104I i 0.74 1.85
Tabulka č. 4
A B C
N76D S103A V104I M222S 1.00 1.00
JJ76D S103A V1041 N173R M222S 0 0 66 .1.84
. - „
r - - - Q12R . N76D- S103A - V1041 M222S Q245R + 1 0.41 5.84
Tabulka Č... 5
- . A B c
Q12R N76D S103A I104T S130T M222S Q245R 1.00 1.00
Q12R N76D S103A I104T S130T M222S Q245R N26.1D -1 1.79 0.81
Q12R N76D S103Á I104T S130T R170S N185D M222S N243D Q245R -3 2.87 0.02
Tabulka č. 6
A B C
V68A N76D S103A V1041 G159D Q236H *. J 1.00 1.00
V68A N76D S103A V104I G159D Q236H Q245R + 1 0,94 6.80
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K 7- — +3 0.44 20.60
Tabulka č. 7
A B C
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R A CD + 1 1.00 0.44 1.00 2.66
V68A N76D S103Á V104I G159D P210R A232V Q236H
Tabulka č. 8
A B C
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K 1.00 1.00
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K -1 1.96 0.65
. ' * 1 > í
0* ···· 00 0000 00 00 • ;f. 0 0· 0 0 0 0. · /. - 0 ' 0 9 · 0 0 0 0 0 «
Tabulka č. 9
A B C
V68A S103A V1O4I G159D A232V Q236H Q245R 1.00 1.00
ΛΖ6.8Α. S.103A ..V1.04I. G159D A232V Q236H K237E Q245R -2 1.27. 0.12
Tabulka č. 10
• A B C
V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R L257V 1.00 1.00
V68A N76D S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R L257V -1 1.56 0.48
Tabuli <a č. 11 ♦
A B c
S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K 1.00 Ί.00
S103A V104I G159D L217E A232V Q236H Q245R N248D N252K -1 1.90. 0.15
Tabulka č. 12
.· , A B C
S103A V104I S1O1G G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K 1.00 1.00
N76D S103A V104I S101G G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K -1 1.28 0.39
Tabulka č. 13
A B C
N62D S103A V1041 G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K 1.00 1.00
N62D S103A V104I Q1O9R G159D T213R A232V Q236H Q245R N248D N252K + 1 0.40 1.74
» » 4 4' ·
4
4 i Si ;
4444
4 ·
1 4
4* připravily a testovaly, varianty proteáz, které
Ί
Příklad 2:
Následující varianty(proteáz se jak se popisuje v příkladu 1.
Varianty v tabulce č. 14 jsou vykazuj i oba typy Substituci“: ty, 'k t e r e*^ mě ní~na'b o j V uvedené poloze, přičemž se . zde mění nábóStak, že je' více 'negativní nebo méně negativní ve srovnání s organizmem B. lentus GG36 stejně jako. neutrální 'substituce, které neovlivňu-jí náboj v dané poloze zbytku. Tak se produkuj i . proteázové varianty, jejíž účinnost je lepší, než standardní účinnost v obou systémech detergentových koncentrací, jak v systému . s'nízkou koncentrací detergentu (sloupec A, 0,67 g/l filtrovaného Ariel Ultra (Procter and Gamble, Cincinnati, OH, USA), což je roztok, který obsahuje .3 zrna na 3,785 1 míchaného Ca2 + /Mg2+ a v každé prohlubni se použilo 0,3 ppm enzymu při -teplotě 25 °C, tak v systému s vysokou koncentrací - detergentu (sloupec By 3,38 g/l filtrovaného Ariel/Futur (Procter and Gamble·, Cincinnati, OH, USA), v roztoku, který'obsahuje 15-zrn na 3, 785 1 míchaného Ca2+/Mg2+· a v každé prohlubni se použilo 0,3- ppm enzymu při teplotě 40 °C). , ·* 4 4·4
444« · · ♦ * · 4 4 4 4 · 4 *9 4 4 4· « · ··· 4 · 4 · 44 4
Tabulka č. 14:
• A B
N76D S103A V104I 1.00 1.00
' V68A S103A V1041 G159D A232V Q236H Q245R N252K — —.. -—- 1.41 J.85
V68A N76D S103A ' V104I G159D T213R A232V Q236H Q245R .T260A 1.30 1.73
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K 2.77 1.20
V68A S103A V104I N140D G159D A232V Q236H Q245R N252K. 2.96 1.42
N43K V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R 2.05 1.78
N43D V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N252K 2.00 1.34
V68A N76D S103A V1041 G159D A215R A232V Q236H Q245R 1.67 1.45
Q12R V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R 2.16 1.72,
N76D S103A V104I V147I G159D A232V Q236H Q245R N248S K251R 1.35 1.29
V68A N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R S256R 2.01 1.72
.V68A N76D S103A V104I G159D Q206R A232V Q236H Q245R 2.09 1.62
S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K 1.44 1.41
G20R V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K 1.81 1.72
V68A S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R N248D N252K L257R 1.51 1.41
V68A S103A V104I A232V Q236H Q245R N248D N252K 1.04 1.50
N76D S103A V104I G159D A232V Q236H Q245R L257V 1.92 1.09

Claims (8)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1.
  2. 2.
  3. 3.
  4. 4 .
  5. 5. '
  6. 6.
  7. 7 .
    9.
    tttt tttttttt tttt' tttttttt ··' tttt .
    • Z· · tt · · · tt: φ • tt ··· ·«·· • « ··· * · · · · · · • · tt tt tttttt tttttttt ·· tttt tttt · tttt tttt
    VáriantěT proteazy ^obsahu j’íčí sú b s t it u č ϊ ' ' ami no kysěTiΊ1 y 1 v jédne nebo více. poloh zbytku, kde substituce' mění náboj v uvedené poloze, přičemž , náboj je více negativní nebo méně pozitivní ve srovnáni S. prekurzorovou proteázou a kde varianta proteázy je ve srovnání s prekurzorovou proteázou . účinnější v systému s nízkou koncentrací detergentů.
    Varianta proteázy podle . nároku 1, kde proteázou je subtilizín. ·- ·. . 4
    Varianta proteázy podle nároku 1, která se získala ze subtilizínu .organizmu Bacillus. ·
    Varianta proteázy podle nároku 3, která se získala ze subtilizínu, organizmu Bacillus lentus.
    DNA kódující variantu proteázy.podle nároku 1. ·
    Expresívní vektor kódující DNA podle- nároku 5.
    Hostitelská buňka, v y ζ· n a č-u, j í c.í se. tím, že se transformovala expresívním vektorem podle .nároku Čistící 'kompozice obsahující variantu proteázy podle nároku 1.
    pro ' zvířata, vyznačující se ž e obsahuje variantu proteázy podle nároku 1.
    Sloučenina vhodná pro ošetření textilie, obsahující variantu proteázy podle nároku 1.
    Varianta proteá.zy obsahující substituci aminokyseliny v jedné nebo více poloh zbytků, kde substituce mění náboj v této poloze, přičemž se náboj stává více pozitivní nebo méně negativní ve srovnání s prekurzorovou proteázou a kde varianta proteázy ve srovnání s prekurzorovou proteázou je více účinná v systému s vysokou koncentrací detergentů. Varianta proteázy podle nároku 11, kde proteázou je
    Krmení tím, subtilizín.
  8. 9 9 ·· » · · 1
    V · · 4 ♦··· ♦ ίί i i i
    15~
    c)
    d)
    Varianta proteázy podle nároku 11, která se získala ze subtilizínu.organizmu Bacillus.
    Varianta proteázy podle nároku 13, která se získala ze subtilizínu organizmu Bacillus lentus.
    DNA kódující variantu p ró t e á“z ý” podlé nároku“ li.. Expresívní vektor kódující DNA podle nároku 15'.’ . Hostitelská buňka, vyznačující se tím, se transformovala expresívním vektorem podle nároku 16 . Čistící kompozice, vyznačující setí m, , obsahuje.variantu proteázy podle nároku 11.
    . Krmení pro zvířata, v y z n a'č u j i c i tím, že obsahuje variantu proteázy podle'nároku 11.
    , Sloučenina ' pro ošetření textilie . obsahující variantu proteázy podle nároku 11.
    . Varianta proteázy podle nároku 1, kde -vysoká koncentrace detergentů je v prací vodě vyšší než 2- 000. ppm.
    Způsob produkce varianty proteázy,. * která je ve srovnání . s prekurzorovou proťeázou účinnější v systému, s nízkým,, středním - a vysokým obsahem. detergentů, vyznačující setím, že zahrnuje:
    substituci aminokyseliny v jedné nebo více poloh zbytků, kde substituce mění náboj v této poloze tak, že . se stává více pozitivní nebo méně negativní ve srovnání s prekurzorovou proteázou, substituci aminokyseliny v jedné nebo více poloh, kde substituce mění v této poloze náboj tak, že se stává více negativní nebo méně pozitivní ve srovnání s prekurzorovou proteázou, testování varianty, přičemž se v systému s vysokou, střední detergentů ve srovnání s prekurzorovou’ proteázou a opakování kroků a) až c) , přičemž je; nezbytné vytvořit variantu proteázy, ’ která je účinnější ve srovnání s stanoví její účinnost a nízkou koncentrací ·· ··<· *· ···· ·«' ·· • '· '· ·' · 9 .9' - 9· 9 · • · « · 9 9 · V 9' 9 ' ·
    31 ······· · ·Z *
    9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 prekurzorovou proteázou v systému s nízkou, střední nebo vysokou koncentrací detergentů.
    23. Varianta proteázy obsahující substituci aminokyseliny v jedné nebo více poloh zbytků, kde substituce změní náboj ~v p o 1 o~z e~ ťakj žěTě ve“sYdvrtání s“*p_r 5kurzorovou~pro teá'ZOu více pozitivní nebo méně negativní a kde varianta· proteázy ve srovnání s prekurzorovou proteázou je účinnější v systému se střední, koncentrací detergentů. ’
    24. Varianta proteázy obsahující substituci ..aminokyseliny v jedné nebo více polohách zbytků, kde substituce změní náboj v poloze tak, že náboj je více negativní nebo méně pozitivní ve srovnání s prekurzorovou proteázou a kde varianta proteázy je ve srovnání s prekurzorovou proteázou účinnější v systému se střední, koncentrací detergentů.
CZ20001493A 1997-10-23 1998-10-23 Zpusob zvýšení úcinnosti subtilizinu a zpusob výroby pracího prostredku CZ300347B6 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US95632497A 1997-10-23 1997-10-23
US95632397A 1997-10-23 1997-10-23
US95656497A 1997-10-23 1997-10-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20001493A3 true CZ20001493A3 (cs) 2001-11-14
CZ300347B6 CZ300347B6 (cs) 2009-04-29

Family

ID=27420734

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001478A CZ20001478A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty
CZ20001493A CZ300347B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Zpusob zvýšení úcinnosti subtilizinu a zpusob výroby pracího prostredku
CZ20001479A CZ20001479A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Bělící prostředky obsahující mnohočetné substituované proteázové varianty
CZ20001503A CZ301469B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Subtilizín a prostredek s jeho obsahem
CZ20001477A CZ20001477A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Čistící prostředky obsahující mnohočetně substituované proteázové varianty
CZ20001504A CZ302287B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Varianta subtilisinu

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001478A CZ20001478A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Ćistící prostředky obsahující mnohonásobně substituované proteázové a amylázové varianty

Family Applications After (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001479A CZ20001479A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Bělící prostředky obsahující mnohočetné substituované proteázové varianty
CZ20001503A CZ301469B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Subtilizín a prostredek s jeho obsahem
CZ20001477A CZ20001477A3 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Čistící prostředky obsahující mnohočetně substituované proteázové varianty
CZ20001504A CZ302287B6 (cs) 1997-10-23 1998-10-23 Varianta subtilisinu

Country Status (26)

Country Link
US (5) US6312936B1 (cs)
EP (10) EP1612271B1 (cs)
JP (7) JP2001520307A (cs)
KR (6) KR100612981B1 (cs)
CN (9) CN1295313C (cs)
AR (10) AR016969A1 (cs)
AT (9) ATE513479T1 (cs)
AU (7) AU742573B2 (cs)
BR (6) BR9813260A (cs)
CA (9) CA2306894C (cs)
CZ (6) CZ20001478A3 (cs)
DE (7) DE69840346D1 (cs)
DK (9) DK1624050T3 (cs)
EG (2) EG21711A (cs)
ES (7) ES2301214T3 (cs)
HK (1) HK1039159B (cs)
HU (3) HUP0100859A2 (cs)
ID (4) ID28256A (cs)
MA (2) MA25044A1 (cs)
NO (3) NO327607B1 (cs)
NZ (3) NZ520771A (cs)
PL (1) PL191529B1 (cs)
PT (8) PT1612271E (cs)
TR (8) TR200101199T2 (cs)
TW (2) TW585912B (cs)
WO (5) WO1999020723A2 (cs)

Families Citing this family (642)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA23346A1 (fr) * 1993-10-14 1995-04-01 Genencor Int Variantes de la subtilisine
CN1148444C (zh) * 1997-08-29 2004-05-05 诺沃奇梅兹有限公司 蛋白酶变体及组合物
ES2368718T3 (es) * 1997-10-23 2011-11-21 Danisco Us Inc. Variantes de subtilisina con múltiples sustituciones.
AR016969A1 (es) * 1997-10-23 2001-08-01 Procter & Gamble VARIANTE DE PROTEASA, ADN, VECTOR DE EXPRESIoN, MICROORGANISMO HUESPED, COMPOSICIoN DE LIMPIEZA, ALIMENTO PARA ANIMALES Y COMPOSICIoN PARA TRATAR UN TEXTIL
CA2331783C (en) 1998-07-02 2009-12-29 Genencor International, Inc. Chemically modified proteins with a carbohydrate moiety
JP2003512012A (ja) * 1998-10-23 2003-04-02 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 洗剤組成物に用いられるプロテアーゼ変異体のスクリーニング法
DE69940978D1 (de) 1998-11-10 2009-07-23 Univ Toronto Chemisch modifizierte mutante serinhydrolasen
AU781451B2 (en) * 1999-04-28 2005-05-26 Genencor International, Inc. Specifically targeted catalytic antagonists and uses thereof
US6627744B2 (en) 1999-07-02 2003-09-30 Genencor International, Inc. Synthesis of glycodendrimer reagents
WO2001007578A2 (en) * 1999-07-22 2001-02-01 The Procter & Gamble Company Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regions
MXPA02000842A (es) * 1999-07-22 2002-07-30 Procter & Gamble Conjugados de proteasa que tienen sitios de corte protegidos estericamente.
WO2001018165A1 (en) * 1999-09-09 2001-03-15 The Procter & Gamble Company A detergent composition containing a protease
KR100387166B1 (ko) * 1999-12-15 2003-06-12 닛뽄덴끼 가부시끼가이샤 유기 일렉트로 루미네선스 소자
US7067049B1 (en) * 2000-02-04 2006-06-27 Exxonmobil Oil Corporation Formulated lubricant oils containing high-performance base oils derived from highly paraffinic hydrocarbons
DE10007608A1 (de) * 2000-02-18 2001-08-30 Henkel Kgaa Protease und Percarbonat enthaltende Wasch- und Reinigungsmittel
WO2001064852A1 (en) * 2000-03-03 2001-09-07 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
US6777218B1 (en) 2000-03-14 2004-08-17 Novozymes A/S Subtilase enzymes having an improved wash performance on egg stains
AU2001249811B2 (en) * 2000-04-03 2006-06-08 Maxygen, Inc. Subtilisin variants
US7226770B2 (en) * 2000-04-28 2007-06-05 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variant
CN1454252A (zh) * 2000-06-30 2003-11-05 宝洁公司 含有麦芽糖α－淀粉酶的洗涤剂组合物
WO2002002725A1 (en) * 2000-06-30 2002-01-10 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising a cyclodextrin glucanotransferase enzyme
IL154142A0 (en) 2000-07-28 2003-07-31 Henkel Kgaa Novel amylolytic enzyme extracted from bacillus sp.a 7-7 (dsm 12368) and washing and cleaning agents containing this novel amylolytic
US20020155574A1 (en) 2000-08-01 2002-10-24 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
US6893855B2 (en) * 2000-10-13 2005-05-17 Novozymes A/S Subtilase variants
US6803222B2 (en) 2000-11-22 2004-10-12 Kao Corporation Alkaline proteases
US7303907B2 (en) 2001-01-08 2007-12-04 Health Protection Agency Degradation and detection of TSE infectivity
EP1241112A3 (en) 2001-03-15 2003-02-26 The Procter & Gamble Company Flexible multiple compartment pouch
ATE527276T1 (de) * 2001-03-23 2011-10-15 Genencor Int Proteine, die veränderte immunogene reaktionen bewirken, und verfahren zu deren herstellung und anwendung
EP3000881A3 (en) 2001-05-15 2016-07-20 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
DK200101090A (da) * 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
DE10153792A1 (de) 2001-10-31 2003-05-22 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease-Varianten und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neuen Alkalischen Protease-Varianten
DE10162728A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10162727A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14391) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10163884A1 (de) 2001-12-22 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus sp. (DSM 14392) und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
US7332320B2 (en) * 2001-12-31 2008-02-19 Genencor International, Inc. Protease producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
ATE450606T1 (de) * 2002-01-16 2009-12-15 Genencor Int Mehrfachsubstituierte proteasevarianten
JP5328002B2 (ja) * 2002-01-16 2013-10-30 ジェネンコー・インターナショナル・インク 複数置換プロテアーゼ変異体
US7223386B2 (en) * 2002-03-11 2007-05-29 Dow Corning Corporation Preparations for topical skin use and treatment
US20030180281A1 (en) * 2002-03-11 2003-09-25 Bott Richard R. Preparations for topical skin use and treatment
DK2339016T3 (da) 2002-03-29 2017-01-23 Danisco Us Inc Øget produktion af subtilisiner
US20050244567A1 (en) 2002-07-29 2005-11-03 Aminotech As Method for production of peptides/amino acids produced by said method and use of the same
US7082689B2 (en) * 2002-10-11 2006-08-01 Black & Decker Inc. Keyless shoe lock for reciprocating saw
TWI319007B (en) * 2002-11-06 2010-01-01 Novozymes As Subtilase variants
US7888093B2 (en) * 2002-11-06 2011-02-15 Novozymes A/S Subtilase variants
DE10260903A1 (de) 2002-12-20 2004-07-08 Henkel Kgaa Neue Perhydrolasen
US20050059567A1 (en) * 2003-09-11 2005-03-17 The Procter & Gamble Company Methods of formulating enzyme cocktails, enzyme cocktails for the removal of egg-based and grass-based stains and/or soils, compositions and products comprising same
WO2005052161A2 (en) 2003-11-19 2005-06-09 Genencor International, Inc. Serine proteases, nucleic acids encoding serine enzymes and vectors and host cells incorporating same
US7985569B2 (en) 2003-11-19 2011-07-26 Danisco Us Inc. Cellulomonas 69B4 serine protease variants
EP2325318A1 (en) 2004-02-13 2011-05-25 Novozymes A/S Protease variants
EP1751264B2 (en) 2004-05-17 2013-08-28 The Procter and Gamble Company Bleaching composition comprising a carbohydrate oxidase
US20090060933A1 (en) * 2004-06-14 2009-03-05 Estell David A Proteases producing an altered immunogenic response and methods of making and using the same
JP2006143853A (ja) * 2004-11-18 2006-06-08 Lion Corp アミラーゼ含有漂白性組成物
JP2006143855A (ja) * 2004-11-18 2006-06-08 Lion Corp 飲料シミ汚れ除去効果を向上させたアミラーゼ含有漂白性組成物
US7147634B2 (en) 2005-05-12 2006-12-12 Orion Industries, Ltd. Electrosurgical electrode and method of manufacturing same
US8814861B2 (en) 2005-05-12 2014-08-26 Innovatech, Llc Electrosurgical electrode and method of manufacturing same
US20070161531A1 (en) * 2005-07-08 2007-07-12 Novozymes A/S Subtilase variants
EP2385111B1 (en) * 2005-07-08 2016-09-07 Novozymes A/S Subtilase variants
GB0603775D0 (en) * 2006-02-24 2006-04-05 Health Prot Agency Infectivity assay
CN101415482B (zh) 2006-03-31 2015-04-15 金克克国际有限公司 用于化合物分离的切向流动过滤设备、系统和方法
US7629158B2 (en) * 2006-06-16 2009-12-08 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions
CN101473036B (zh) * 2006-06-23 2012-12-12 丹尼斯科美国公司 利用用于工程改造多种性质的位点评价文库对序列和活性关系进行系统评价
CN104232365A (zh) * 2006-07-18 2014-12-24 丹尼斯科美国公司 在宽温度范围内具有活性的蛋白酶变体
EP2066785B1 (en) * 2006-08-11 2023-02-01 Novozymes Biologicals, Inc. Bacteria cultures and compositions comprising bacteria cultures
JP2010507001A (ja) * 2006-10-16 2010-03-04 ダニスコ・ユーエス・インク、ジェネンコー・ディビジョン 非リン酸系食器洗浄剤
KR20090129425A (ko) 2007-03-12 2009-12-16 다니스코 유에스 인크. 개질된 프로테아제
US7922970B2 (en) * 2007-04-03 2011-04-12 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Use of sonication to eliminate prions
EP2460823B1 (en) 2007-05-10 2014-02-26 Danisco US Inc. A modified secretion system to increase expression of polypeptides in bacteria
WO2008153925A2 (en) * 2007-06-06 2008-12-18 Danisco Us, Inc., Genencor Division Methods for improving multiple protein properties
RU2460576C2 (ru) 2007-09-12 2012-09-10 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Фильтрация с контролем внутреннего засорения
US8021436B2 (en) 2007-09-27 2011-09-20 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions comprising a xyloglucan conjugate
US7618801B2 (en) * 2007-10-30 2009-11-17 Danison US Inc. Streptomyces protease
WO2009061380A2 (en) 2007-11-05 2009-05-14 Danisco Us Inc., Genencor Division VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES
AU2008325249B2 (en) 2007-11-05 2013-10-10 Danisco Us Inc. Alpha-amylase variants with altered properties
US8512982B2 (en) 2007-12-21 2013-08-20 Danisco Us Inc. Enhanced protein production in Bacillus
MX2010008359A (es) 2008-02-04 2010-08-30 Danisco Us Inc Variantes de alfa-amilasa ts23 con propiedades alteradas.
EP2380965B1 (en) * 2008-02-08 2014-03-19 The Procter & Gamble Company Process for making a water-soluble pouch
US8066818B2 (en) 2008-02-08 2011-11-29 The Procter & Gamble Company Water-soluble pouch
US20090209447A1 (en) * 2008-02-15 2009-08-20 Michelle Meek Cleaning compositions
US20090233830A1 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Penny Sue Dirr Automatic detergent dishwashing composition
EP2100948A1 (en) * 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP2100947A1 (en) 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
JP5973166B2 (ja) 2008-03-26 2016-08-23 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 安定化された液体酵素組成物
NZ587540A (en) 2008-03-28 2012-06-29 Danisco Us Inc Method for amplifying locus in bacterial cell
MX2010013113A (es) 2008-06-06 2010-12-21 Danisco Inc Variantes de alfa-amilasa geobacillus stearothermophilus con propiedades mejoradas.
BRPI0915681A2 (pt) 2008-06-06 2015-08-04 Danisco Us Inc Composições e métodos compreendendo proteases microbianas variantes
EP2166092A1 (en) 2008-09-18 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP2166073A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166076A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166075A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
CA2738447C (en) 2008-09-25 2019-01-08 Danisco Us Inc. Alpha-amylase blends and methods for using said blends
BRPI0920925A2 (pt) * 2008-11-11 2015-08-18 Danisco Us Inc Composições e métodos compreendendo uma variante de subtilisina
BRPI0922083A2 (pt) 2008-11-11 2017-05-30 Danisco Us Inc proteases compreendendo uma ou mais mutações combináveis
US8183024B2 (en) 2008-11-11 2012-05-22 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising a subtilisin variant
CN103396904B (zh) 2008-11-11 2015-12-23 宝洁公司 包含丝氨酸蛋白酶变体的组合物和方法
US20100267304A1 (en) * 2008-11-14 2010-10-21 Gregory Fowler Polyurethane foam pad and methods of making and using same
US20100125046A1 (en) 2008-11-20 2010-05-20 Denome Frank William Cleaning products
EP2213715A1 (en) 2009-02-02 2010-08-04 The Procter & Gamble Company Liquid hand dishwashing detergent composition
EP2216391A1 (en) 2009-02-02 2010-08-11 The Procter & Gamble Company Liquid hand dishwashing detergent composition
ES2461892T3 (es) 2009-02-02 2014-05-21 The Procter & Gamble Company Composición detergente líquida para lavado de vajillas a mano
ES2488117T3 (es) 2009-02-02 2014-08-26 The Procter & Gamble Company Composición detergente líquida para lavado de vajillas a mano
EP2216390B1 (en) 2009-02-02 2013-11-27 The Procter and Gamble Company Hand dishwashing method
EP2216392B1 (en) 2009-02-02 2013-11-13 The Procter and Gamble Company Liquid hand dishwashing detergent composition
EP2216393B1 (en) 2009-02-09 2024-04-24 The Procter & Gamble Company Detergent composition
US8293697B2 (en) 2009-03-18 2012-10-23 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene sorbitol acetal derivatives
US8153574B2 (en) 2009-03-18 2012-04-10 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene polyol acetal derivatives and detersive enzymes
RU2011144134A (ru) 2009-04-01 2013-05-10 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Композиции и способы, включающие варианты альфа-амилазы с измененными свойствами
WO2010138347A1 (en) 2009-05-26 2010-12-02 The Procter & Gamble Company Aqueous liquid composition for pre-treating soiled dishware
AR076941A1 (es) 2009-06-11 2011-07-20 Danisco Us Inc Cepa de bacillus para una mayor produccion de proteina
EP2451922A1 (en) 2009-07-09 2012-05-16 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a compacted liquid laundry detergent composition
US20110009307A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 Alan Thomas Brooker Laundry Detergent Composition Comprising Low Level of Sulphate
MX2012000480A (es) 2009-07-09 2012-01-27 Procter & Gamble Composiciones detergente catalitica de lavanderia que comprende niveles relativamente bajos de electrolitos solubles en agua.
JP2012532246A (ja) 2009-07-09 2012-12-13 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 比較的低濃度の水溶性電解質を含む触媒性洗濯洗剤組成物
WO2011005917A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a liquid laundry detergent composition
EP2451919A1 (en) 2009-07-09 2012-05-16 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a liquid laundry detergent composition
BR112012000492A2 (pt) 2009-07-09 2019-09-24 Procter & Gamble composição detergente moderadamente alcalina, com baixos teores de coadjuvantes que compreende ácido fitalimido peroxicaproico para tratamento de tecido sólido
WO2011005623A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company Laundry detergent composition comprising low level of bleach
MX341475B (es) 2009-07-31 2016-08-19 Akzo Nobel N V * Composiciones de copolimero hibrido para aplicaciones de cuidado personal.
PL2292725T5 (pl) 2009-08-13 2022-11-07 The Procter And Gamble Company Sposób prania tkanin w niskiej temperaturze
CA2775037A1 (en) * 2009-09-25 2011-03-31 Novozymes A/S Detergent composition
EP2480650B1 (en) * 2009-09-25 2017-03-22 Novozymes A/S Subtilase variants
CN102762222B (zh) 2009-12-09 2015-11-25 丹尼斯科美国公司 包含蛋白酶变体的组合物和方法
EP3434764B1 (en) 2009-12-09 2026-04-08 The Procter & Gamble Company Fabric and home care products
ES2423580T5 (es) 2009-12-10 2021-06-17 Procter & Gamble Método y uso de una composición para lavado de vajillas
EP2333042B1 (en) 2009-12-10 2015-07-01 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing product and use thereof
ES2399311T5 (es) 2009-12-10 2020-06-19 Procter & Gamble Composición detergente
EP2333041B1 (en) 2009-12-10 2013-05-15 The Procter & Gamble Company Method and use of a dishwasher composition
US20120258507A1 (en) 2009-12-21 2012-10-11 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing thermobifida fusca lipase and methods of use thereof
WO2011084417A1 (en) 2009-12-21 2011-07-14 Danisco Us Inc. Detergent compositions containing geobacillus stearothermophilus lipase and methods of use thereof
BR112012017056A2 (pt) 2009-12-21 2016-11-22 Danisco Us Inc "composições detergentes contendo lipase de bacillus subtilis e métodos para uso das mesmas"
RU2012136133A (ru) * 2010-01-22 2014-02-27 ДюПон НЬЮТРИШН БАЙОСАЙЕНСИЗ АпС Способы получения аминозамещенных гликолипидных соединений
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
EP3892709A3 (en) 2010-02-10 2022-01-19 Novozymes A/S Variants and compositions comprising variants with high stability in presence of a chelating agent
PL2361964T3 (pl) 2010-02-25 2013-05-31 Procter & Gamble Kompozycja detergentu
EP2365054A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising secondary alcohol-based detersive surfactant
EP2365059A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising C.I. fluorescent brightener 260 in alpha-crystalline form
EP2380957A1 (en) 2010-04-19 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition having a dynamic in-wash ph profile
EP2365058A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition having an excellent anti-encrustation profile
EP2377914B1 (en) 2010-04-19 2016-11-09 The Procter & Gamble Company Mildly alkaline, low-built, solid fabric treatment detergent composition comprising perhydrolase
EP2363456A1 (en) 2010-03-01 2011-09-07 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising brightener in micronized particulate form
US20120067373A1 (en) 2010-04-15 2012-03-22 Philip Frank Souter Automatic Dishwashing Detergent Composition
CN102858970B (zh) 2010-04-15 2017-07-21 丹尼斯科美国公司 包含变体蛋白酶的组合物和方法
US20110257062A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Robert Richard Dykstra Liquid laundry detergent composition comprising a source of peracid and having a ph profile that is controlled with respect to the pka of the source of peracid
US20110257060A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Robert Richard Dykstra Laundry detergent composition comprising bleach particles that are suspended within a continuous liquid phase
US8889612B2 (en) 2010-04-19 2014-11-18 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a compacted liquid laundry detergent composition
US20110257069A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Stephen Joseph Hodson Detergent composition
EP2380963B1 (en) 2010-04-23 2015-12-23 The Procter and Gamble Company Method of perfuming
EP2383329A1 (en) 2010-04-23 2011-11-02 The Procter & Gamble Company Particle
EP2380962B1 (en) 2010-04-23 2016-03-30 The Procter and Gamble Company Particle
EP2380478A1 (en) 2010-04-23 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing product
ES2682051T3 (es) 2010-04-23 2018-09-18 The Procter & Gamble Company Composición detergente
ES2533368T3 (es) 2010-04-23 2015-04-09 The Procter & Gamble Company Producto para lavavajillas
WO2011140316A1 (en) 2010-05-06 2011-11-10 The Procter & Gamble Company Consumer products with protease variants
DE102010028951A1 (de) 2010-05-12 2011-11-17 Henkel Ag & Co. Kgaa Lagerstabiles flüssiges Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend Protease und Lipase
AR081423A1 (es) 2010-05-28 2012-08-29 Danisco Us Inc Composiciones detergentes con contenido de lipasa de streptomyces griseus y metodos para utilizarlas
EP2395071A1 (en) 2010-06-10 2011-12-14 The Procter & Gamble Company Solid detergent composition comprising lipase of bacterial origin
EP2395070A1 (en) 2010-06-10 2011-12-14 The Procter & Gamble Company Liquid laundry detergent composition comprising lipase of bacterial origin
WO2011163457A1 (en) 2010-06-23 2011-12-29 The Procter & Gamble Company Product for pre-treatment and laundering of stained fabric
EP2412792A1 (en) 2010-07-29 2012-02-01 The Procter & Gamble Company Liquid detergent composition
US8685171B2 (en) 2010-07-29 2014-04-01 The Procter & Gamble Company Liquid detergent composition
CN101922108B (zh) * 2010-09-14 2012-09-05 东华大学 使用1，4，7-三氮杂环壬烷配合物的活化漂白的方法
WO2011026154A2 (en) 2010-10-29 2011-03-03 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions
WO2012057781A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions comprising a fungal serine protease
FI123942B (fi) 2010-10-29 2013-12-31 Ab Enzymes Oy Sieniperäisen seriiniproteaasin variantteja
DE102010063458A1 (de) * 2010-12-17 2012-06-21 Henkel Ag & Co. Kgaa Lagerstabiles flüssiges Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend Protease und Amylase
CA2827405C (en) 2011-02-15 2023-01-10 Novozymes Biologicals, Inc. Mitigation of odor in cleaning machines and cleaning processes
DE102011005354A1 (de) * 2011-03-10 2012-09-13 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte Proteasevarianten
EP2712363A1 (en) 2011-04-29 2014-04-02 Danisco US Inc. Detergent compositions containing geobacillus tepidamans mannanase and methods of use thereof
EP2702152A1 (en) 2011-04-29 2014-03-05 Danisco US Inc. Detergent compositions containing bacillus sp. mannanase and methods of use thereof
CN103608356A (zh) 2011-04-29 2014-02-26 丹尼斯科美国公司 包含黏琼脂芽孢杆菌(Bacillus agaradhaerens)甘露聚糖酶的洗涤剂组合物及其使用方法
CN106065381B (zh) * 2011-05-05 2019-07-26 宝洁公司 包含丝氨酸蛋白酶变体的组合物和方法
CA3194062A1 (en) 2011-05-05 2012-11-08 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising serine protease variants
US20140371435A9 (en) 2011-06-03 2014-12-18 Eduardo Torres Laundry Care Compositions Containing Thiophene Azo Dyes
EP2537918A1 (en) 2011-06-20 2012-12-26 The Procter & Gamble Company Consumer products with lipase comprising coated particles
US20120324655A1 (en) 2011-06-23 2012-12-27 Nalini Chawla Product for pre-treatment and laundering of stained fabric
EP3421595B1 (en) 2011-06-30 2020-10-07 Novozymes A/S Alpha-amylase-variants
EP2540824A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants reference to a sequence listing
EP2551335A1 (en) 2011-07-25 2013-01-30 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilized liquid detergent composition
WO2013016031A1 (en) 2011-07-27 2013-01-31 The Procter & Gamble Company Multiphase liquid detergent composition
US8853144B2 (en) 2011-08-05 2014-10-07 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide graft polymer composition and methods of improving drainage
US8636918B2 (en) 2011-08-05 2014-01-28 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide hybrid polymer composition and methods of controlling hard water scale
US8679366B2 (en) 2011-08-05 2014-03-25 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide graft polymer composition and methods of controlling hard water scale
US8841246B2 (en) 2011-08-05 2014-09-23 Ecolab Usa Inc. Cleaning composition containing a polysaccharide hybrid polymer composition and methods of improving drainage
CN103781903A (zh) 2011-08-31 2014-05-07 丹尼斯科美国公司 包含脂肪分解酶变体的组合物和方法
PL2584028T3 (pl) 2011-10-19 2017-10-31 Procter & Gamble Cząstka
EP2773321B1 (en) 2011-11-04 2015-09-09 Akzo Nobel Chemicals International B.V. Graft dendrite copolymers, and methods for producing the same
MX2014005094A (es) 2011-11-04 2014-08-08 Akzo Nobel Chemicals Int Bv Copolimeros de dendrita hibridos, composiciones de los mismos y metodos para producirlos.
JP6378089B2 (ja) 2011-12-09 2018-08-22 ダニスコ・ユーエス・インク 微生物におけるタンパク質産生のための、Ｂ．ズブチリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）からのリボソームプロモーター
JP2015500041A (ja) 2011-12-13 2015-01-05 ダニスコ・ユーエス・インク 混合培養物から調製された酵素カクテル
MX2014007446A (es) * 2011-12-20 2014-08-01 Novozymes As Variantes de subtilasa y polinucleotidos que las codifican.
EP2794866A1 (en) 2011-12-22 2014-10-29 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising a lipolytic enzyme variant
US9801398B2 (en) 2012-01-26 2017-10-31 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
DK2623586T3 (da) 2012-02-03 2017-11-13 Procter & Gamble Sammensætninger og fremgangsmåder til overfladebehandling med lipaser
CA2867361C (en) 2012-03-19 2017-07-25 Milliken & Company Carboxylate dyes
EP2834353B1 (en) 2012-04-02 2017-07-19 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
CN113201519A (zh) 2012-05-07 2021-08-03 诺维信公司 具有黄原胶降解活性的多肽以及编码其的核苷酸
IN2014DN09938A (cs) * 2012-05-30 2015-08-14 Clariant Int Ltd
EP2674475A1 (en) 2012-06-11 2013-12-18 The Procter & Gamble Company Detergent composition
MX364390B (es) 2012-06-20 2019-04-25 Novozymes As Uso de polipeptidos que tienen actividad proteasa en alimentos para animales y detergentes.
CN104471048B (zh) 2012-07-12 2018-11-16 诺维信公司 具有脂肪酶活性的多肽及编码它的多核苷酸
US8945314B2 (en) 2012-07-30 2015-02-03 Ecolab Usa Inc. Biodegradable stability binding agent for a solid detergent
US9994799B2 (en) 2012-09-13 2018-06-12 Ecolab Usa Inc. Hard surface cleaning compositions comprising phosphinosuccinic acid adducts and methods of use
US9752105B2 (en) 2012-09-13 2017-09-05 Ecolab Usa Inc. Two step method of cleaning, sanitizing, and rinsing a surface
US20140308162A1 (en) 2013-04-15 2014-10-16 Ecolab Usa Inc. Peroxycarboxylic acid based sanitizing rinse additives for use in ware washing
US8871699B2 (en) 2012-09-13 2014-10-28 Ecolab Usa Inc. Detergent composition comprising phosphinosuccinic acid adducts and methods of use
EP2712915A1 (en) 2012-10-01 2014-04-02 The Procter and Gamble Company Methods of treating a surface and compositions for use therein
CN113105950A (zh) 2012-10-04 2021-07-13 艺康美国股份有限公司 用于洗衣和其他硬表面清洁的预浸泡工艺
CN110093330B (zh) 2012-10-12 2023-11-28 丹尼斯科美国公司 包含脂解酶变体的组合物和方法
EP2914720B1 (en) 2012-11-05 2022-08-31 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising thermolysin protease variants
WO2014100018A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Danisco Us Inc. Novel mannanase, compositions and methods of use thereof
JP2016506442A (ja) 2012-12-20 2016-03-03 ザ プロクター アンド ギャンブルカンパニー ケイ酸塩でコーティングされた漂白剤を含む洗剤組成物
WO2014099525A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Danisco Us Inc. Paenibacillus curdlanolyticus amylase, and methods of use, thereof
US20160053243A1 (en) 2012-12-21 2016-02-25 Danisco Us Inc. Alpha-amylase variants
EP2767579B1 (en) 2013-02-19 2018-07-18 The Procter and Gamble Company Method of laundering a fabric
HUE052331T2 (hu) 2013-02-19 2021-04-28 Procter & Gamble Textiltisztítási eljárás
EP2767582A1 (en) 2013-02-19 2014-08-20 The Procter and Gamble Company Method of laundering a fabric
CA2902279C (en) 2013-03-05 2019-05-28 The Procter & Gamble Company Mixed sugar amine or sugar amide surfactant compositions
ES2676895T5 (es) 2013-03-11 2022-04-27 Danisco Us Inc Variantes combinatorias de alfa-amilasa
CN105209508A (zh) 2013-03-15 2015-12-30 路博润先进材料公司 衣康酸聚合物
US9631164B2 (en) 2013-03-21 2017-04-25 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
BR112015021923A2 (pt) 2013-03-28 2017-07-18 Procter & Gamble composições de limpeza contendo uma polieteramina, um polímero removedor de sujeiras e uma carboximetil-celulose
CN103215151B (zh) * 2013-04-25 2015-01-07 上海巴方精细化工有限公司 矢车菊低刺激护肤香皂
US20160083703A1 (en) 2013-05-17 2016-03-24 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
JP6188199B2 (ja) * 2013-05-20 2017-08-30 ライオン株式会社 食器洗い機用洗浄剤
CN103361198B (zh) * 2013-05-22 2015-01-07 上海巴方精细化工有限公司 川芎消炎复合香皂
BR112015029686A2 (pt) 2013-05-28 2017-07-25 Procter & Gamble composições para o tratamento de superfícies compreendendo corantes fotocrômicos
EP3004314B1 (en) 2013-05-29 2018-06-20 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3004342B1 (en) 2013-05-29 2023-01-11 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
JP2016526880A (ja) 2013-05-29 2016-09-08 ダニスコ・ユーエス・インク 新規メタロプロテアーゼ
EP3260538B1 (en) 2013-05-29 2021-04-14 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
WO2014207227A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
JP2016523098A (ja) 2013-07-04 2016-08-08 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 再付着防止効果を有するポリペプチドおよびそれをコードするポリヌクレオチド
ES2956266T3 (es) 2013-07-19 2023-12-18 Danisco Us Inc Composiciones y procedimientos que comprenden una variante de enzima lipolítica
CN105358686A (zh) * 2013-07-29 2016-02-24 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
BR112016002067A2 (pt) * 2013-07-29 2017-08-29 Danisco Us Inc Variantes de enzimas
BR112016005286A2 (pt) 2013-09-12 2017-09-12 Danisco Us Inc composições e métodos compreendendo variantes de protease do clado lg12
CN105555935A (zh) 2013-09-18 2016-05-04 宝洁公司 包含羧化物染料的衣物洗涤护理组合物
US9834682B2 (en) 2013-09-18 2017-12-05 Milliken & Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
JP6185182B2 (ja) 2013-09-18 2017-08-23 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー チオフェンアゾカルボキシレート染料を含有する洗濯ケア組成物
WO2015042086A1 (en) 2013-09-18 2015-03-26 The Procter & Gamble Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
WO2015042013A1 (en) 2013-09-18 2015-03-26 Lubrizol Advanced Materials, Inc. Stable linear polymers
DE102013219467A1 (de) * 2013-09-26 2015-03-26 Henkel Ag & Co. Kgaa Stabilisierte Inhibitor-Proteasevarianten
EP2857487A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857486A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857485A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising alkanolamine-free cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
WO2015057619A1 (en) 2013-10-15 2015-04-23 Danisco Us Inc. Clay granule
US20160289653A1 (en) 2013-11-14 2016-10-06 Danisco Us Inc. Stable Enzymes by Glycation Reduction
EP3910057A1 (en) 2013-12-13 2021-11-17 Danisco US Inc. Serine proteases of the bacillus gibsonii-clade
EP3514230B1 (en) 2013-12-13 2021-09-22 Danisco US Inc. Serine proteases of bacillus species
EP4163305B1 (en) 2013-12-16 2024-07-10 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Use of poly alpha-1,3-glucan ethers as viscosity modifiers
KR102410391B1 (ko) 2013-12-18 2022-06-16 뉴트리션 앤드 바이오사이언시스 유에스에이 4, 인크. 양이온성 폴리 알파-1,3-글루칸 에테르
DK3089991T3 (da) 2013-12-31 2019-12-02 Danisco Us Inc Forbedret proteinekspression
EP3097174A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
EP3097175B1 (en) 2014-01-22 2018-10-17 The Procter and Gamble Company Fabric treatment composition
EP3097172A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
EP3097173B1 (en) 2014-01-22 2020-12-23 The Procter and Gamble Company Fabric treatment composition
CA2841024C (en) 2014-01-30 2017-03-07 The Procter & Gamble Company Unit dose article
EP3105256A1 (en) 2014-02-14 2016-12-21 E. I. du Pont de Nemours and Company Poly-alpha-1,3-1,6-glucans for viscosity modification
WO2015130669A1 (en) 2014-02-25 2015-09-03 The Procter & Gamble Company A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
US10752562B2 (en) 2014-02-25 2020-08-25 The Procter & Gamble Company Process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
JP6342508B2 (ja) 2014-02-26 2018-06-13 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 消泡剤組成物
EP2915873A1 (en) * 2014-03-06 2015-09-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing composition
US9695253B2 (en) 2014-03-11 2017-07-04 E I Du Pont De Nemours And Company Oxidized poly alpha-1,3-glucan
ES2823562T3 (es) 2014-03-14 2021-05-07 Lubrizol Advanced Mat Inc Polímeros y copolímeros de ácido itacónico
US20170096653A1 (en) 2014-03-21 2017-04-06 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
US20150275143A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP3122849B1 (en) 2014-03-27 2021-07-21 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP2924105A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP2924106A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
WO2015150457A1 (en) 2014-04-01 2015-10-08 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
WO2015171592A1 (en) 2014-05-06 2015-11-12 Milliken & Company Laundry care compositions
US9365805B2 (en) 2014-05-15 2016-06-14 Ecolab Usa Inc. Bio-based pot and pan pre-soak
WO2015187757A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 The Procter & Gamble Company Detergent composition comprising polyalkyleneimine polymers
US20170121695A1 (en) 2014-06-12 2017-05-04 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2015195777A1 (en) 2014-06-19 2015-12-23 E. I. Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
US9714403B2 (en) 2014-06-19 2017-07-25 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
EP3327122B1 (en) 2014-07-04 2021-02-17 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3739029A1 (en) 2014-07-04 2020-11-18 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US11103118B2 (en) 2014-08-01 2021-08-31 Ecolab Usa Inc. Method of manual surface cleaning using cleaning textiles and of washing said cleaning textiles
EP2987849A1 (en) 2014-08-19 2016-02-24 The Procter and Gamble Company Method of Laundering a Fabric
EP2987848A1 (en) 2014-08-19 2016-02-24 The Procter & Gamble Company Method of laundering a fabric
WO2016040629A1 (en) 2014-09-10 2016-03-17 Basf Se Encapsulated cleaning composition
US9617502B2 (en) 2014-09-15 2017-04-11 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing salts of polyetheramines and polymeric acid
US20160090552A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing a polyetheramine and an anionic soil release polymer
BR112017005767A2 (pt) 2014-09-25 2017-12-12 Procter & Gamble composições de limpeza contendo uma polieteramina
US9388368B2 (en) 2014-09-26 2016-07-12 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
DK3207129T3 (da) 2014-10-17 2020-02-24 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus-arten
EP3172329A1 (en) 2014-10-24 2017-05-31 Danisco US Inc. Method for producing alcohol by use of a tripeptidyl peptidase
EP3212782B1 (en) 2014-10-27 2019-04-17 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069557A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
EP4403631A3 (en) 2014-10-27 2024-10-30 Danisco US Inc. Serine proteases
US20170335306A1 (en) 2014-10-27 2017-11-23 Danisco Us Inc. Serine proteases
WO2016069552A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases
CA2967658A1 (en) 2014-11-17 2016-05-26 The Procter & Gamble Company Benefit agent delivery compositions
WO2016079305A1 (en) 2014-11-20 2016-05-26 Novozymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
EP3233893B1 (en) 2014-12-16 2021-01-20 Danisco US Inc. Enhanced protein expression
WO2016100128A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Danisco Us Inc Enhanced protein expression
CN108064306B (zh) 2014-12-23 2022-11-01 营养与生物科学美国4公司 酶促产生的纤维素
US20180030456A1 (en) 2015-02-19 2018-02-01 Danisco Us Inc. Enhanced protein expression
DK3268471T3 (da) 2015-03-12 2019-12-02 Danisco Us Inc Sammensætninger og fremgangsmåder omfattende lg12-clade-proteasevarianter
HUE039080T2 (hu) 2015-04-29 2018-12-28 Procter & Gamble Textilkezelési módszer
US20160319225A1 (en) 2015-04-29 2016-11-03 The Procter & Gamble Company Method of treating a fabric
EP3088506B1 (en) 2015-04-29 2018-05-23 The Procter and Gamble Company Detergent composition
WO2016176282A1 (en) 2015-04-29 2016-11-03 The Procter & Gamble Company Method of treating a fabric
CN117683589A (zh) 2015-04-29 2024-03-12 宝洁公司 洗涤织物的方法
EP3292173B1 (en) 2015-05-04 2025-03-26 Milliken & Company Leuco triphenylmethane colorants as bluing agents in laundry care compositions
JP7175612B2 (ja) 2015-05-08 2022-11-21 ノボザイムス アクティーゼルスカブ アルファ－アミラーゼ多様体およびこの多様体をコードするポリヌクレオチド
US20180142224A1 (en) 2015-05-08 2018-05-24 Novozymes A/S Alpha-amylase variants having improved performance and stability
AR105416A1 (es) 2015-05-08 2017-10-04 Novozymes As VARIANTES DE a-AMILASA Y POLINUCLEÓTIDOS QUE LAS CODIFICAN
EP3872174B1 (en) 2015-05-13 2023-03-01 Danisco US Inc. Aprl-clade protease variants and uses thereof
EP3303536B1 (en) 2015-06-02 2019-04-17 Unilever PLC Laundry detergent composition
US20180134997A1 (en) 2015-06-09 2018-05-17 Danisco Us Inc. Osmotic burst encapsulates
US10941372B2 (en) 2015-06-11 2021-03-09 Conopco, Inc. Laundry detergent composition
EP4234693A3 (en) 2015-06-17 2023-11-01 Danisco US Inc Bacillus gibsonii-clade serine proteases
WO2016206837A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Unilever Plc Laundry detergent composition
EP3350303B1 (en) 2015-09-17 2020-04-08 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising polypeptides having xanthan degrading activity
CA2991114A1 (en) 2015-09-17 2017-03-23 Novozymes A/S Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same
MX2018001358A (es) * 2015-10-09 2018-06-15 Novozymes As Metodo de lavanderia, uso de polipeptidos y composicion de detergente.
ES3069936T3 (en) 2015-10-28 2026-06-11 Novozymes As Detergent composition comprising amylase and protease variants
EP4483721A3 (en) 2015-11-05 2025-04-16 Danisco US Inc. Paenibacillus and bacillus spp. mannanases
JP7364331B2 (ja) 2015-11-05 2023-10-18 ダニスコ・ユーエス・インク パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属種マンナナーゼ
WO2017083229A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
WO2017083228A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
WO2017083226A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
WO2017089093A1 (en) * 2015-11-25 2017-06-01 Unilever N.V. A liquid detergent composition
DK3387124T3 (da) 2015-12-09 2021-08-23 William Cuevas Kombinatoriske alfa-amylasevarianter
JP6591278B2 (ja) * 2015-12-15 2019-10-16 花王株式会社 食器用固体洗浄剤組成物
CN108699543B (zh) 2015-12-18 2023-07-14 丹尼斯科美国公司 具有内切葡聚糖酶活性的多肽及其用途
CN108603185B (zh) 2015-12-30 2022-05-17 诺维信公司 酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP3205392A1 (en) 2016-02-12 2017-08-16 Basf Se Microcapsules and process for preparation of microcapsules
EP3205393A1 (en) 2016-02-12 2017-08-16 Basf Se Process for preparation of microcapsules
CN108603139B (zh) 2016-02-17 2020-12-04 荷兰联合利华有限公司 增白组合物
EP3417040B1 (en) 2016-02-17 2019-09-04 Unilever PLC Whitening composition
FI3419991T3 (fi) 2016-03-04 2023-01-31 Modifioidut ribosomaaliset promoottorit proteiinien tuottamiseksi mikro-organismeissa
KR20180117701A (ko) 2016-03-09 2018-10-29 바스프 에스이 캡슐형 세탁용 세정 조성물
BR112018068068B1 (pt) 2016-03-21 2023-04-18 Unilever Ip Holdings B.V. Composição aquosa líquida de detergente para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
BR112018070468B1 (pt) 2016-04-08 2022-07-12 Unilever Ip Holdings B.V Composição de detergente líquida aquosa para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
WO2017182295A1 (en) 2016-04-18 2017-10-26 Basf Se Liquid cleaning compositions
US20190194636A1 (en) 2016-05-03 2019-06-27 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
WO2017192300A1 (en) 2016-05-05 2017-11-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
JP6067168B1 (ja) * 2016-05-30 2017-01-25 株式会社ニイタカ 自動洗浄機用洗浄剤組成物
JP7609549B2 (ja) 2016-05-31 2025-01-07 ダニスコ・ユーエス・インク プロテアーゼ変異体およびその使用
CN110283803B (zh) * 2016-06-02 2021-08-03 天津科技大学 一种磷脂酶d及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法
DK3470517T5 (da) * 2016-06-09 2024-09-09 Kao Corp Alkalisk protease-variant
CN109563497A (zh) 2016-06-17 2019-04-02 丹尼斯科美国公司 蛋白酶变体及其用途
EP3275989A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275986B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275987A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275988B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275985A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3504330A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018037064A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent compositions comprising xanthan lyase variants i
US11512300B2 (en) 2016-08-24 2022-11-29 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
AU2017317564B2 (en) 2016-08-24 2021-09-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising GH9 endoglucanase variants I
BR112019006576A2 (pt) 2016-11-01 2019-07-02 Milliken & Co corantes leuco como agentes de azulamento em composições de cuidados de lavanderia
JP6790257B2 (ja) 2016-11-01 2020-11-25 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケア組成物における青味剤としてのロイコ着色剤、その包装、キット及び方法
BR112019008706A2 (pt) 2016-11-01 2019-07-16 Procter & Gamble colorantes leucos como agentes de azulamento em composições para cuidado na lavagem de roupas
US20180119056A1 (en) 2016-11-03 2018-05-03 Milliken & Company Leuco Triphenylmethane Colorants As Bluing Agents in Laundry Care Compositions
WO2018085524A2 (en) 2016-11-07 2018-05-11 Danisco Us Inc Laundry detergent composition
US10577571B2 (en) 2016-11-08 2020-03-03 Ecolab Usa Inc. Non-aqueous cleaner for vegetable oil soils
JP6907317B2 (ja) 2016-12-02 2021-07-21 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 酵素を含む洗浄組成物
US10550443B2 (en) 2016-12-02 2020-02-04 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
JP6907318B2 (ja) 2016-12-02 2021-07-21 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 酵素を含む洗浄組成物
CN110023469A (zh) 2016-12-15 2019-07-16 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
US20200392477A1 (en) 2016-12-21 2020-12-17 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
CN110312794B (zh) 2016-12-21 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶
EP3339423A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
RU2019123965A (ru) 2017-02-01 2021-02-01 Дзе Проктер Энд Гэмбл Компани Очищающие композиции, содержащие варианты амилазы
FI3585910T3 (fi) 2017-02-24 2024-06-19 Danisco Us Inc Koostumukset ja menetelmät proteiinin tuotannon lisäämiseksi bacillus licheniformiksessa
EP3583210B1 (en) 2017-03-15 2021-07-07 Danisco US Inc. Trypsin-like serine proteases and uses thereof
WO2018184004A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Danisco Us Inc Alpha-amylase combinatorial variants
EP3601515A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Danisco US Inc. Delayed release enzyme formulations for bleach-containing detergents
EP3401385A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
WO2019006077A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Danisco Us Inc PARTICLES CONTAINING LOW AGGLOMERATION ENZYME
EP3649222B1 (en) 2017-07-07 2024-03-13 Unilever IP Holdings B.V. Whitening composition
WO2019008035A1 (en) 2017-07-07 2019-01-10 Unilever Plc Laundry cleaning composition
EP3668973A2 (en) 2017-08-18 2020-06-24 Danisco US Inc. Alpha-amylase variants
WO2019040412A1 (en) 2017-08-23 2019-02-28 Danisco Us Inc METHODS AND COMPOSITIONS FOR EFFICIENT GENETIC MODIFICATION OF BACILLUS LICHENIFORMIS STRAINS
EP3673056A1 (en) 2017-08-24 2020-07-01 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising gh9 endoglucanase variants ii
CN111344404A (zh) 2017-08-24 2020-06-26 诺维信公司 黄原胶裂解酶变体以及编码其的多核苷酸
WO2019038058A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novozymes A/S GH9 ENDOGLUCANASE VARIANTS AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING SUCH VARIANTS
US20210130744A1 (en) 2017-08-24 2021-05-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising xanthan lyase variants ii
JP7218985B2 (ja) 2017-09-13 2023-02-07 ダニスコ・ユーエス・インク バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）におけるタンパク質産生の増加のための改変５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）配列
CA3075090A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
MX2020003103A (es) 2017-10-12 2020-07-28 Procter & Gamble Colorantes leuco como agentes de azulado en composicion para el cuidado de la ropa.
TWI715878B (zh) 2017-10-12 2021-01-11 美商美力肯及公司 隱色著色劑及組成物
CA3074613A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 The Procter & Gamble Company Leuco colorants in combination with a second whitening agent as bluing agents in laundry care compositions
WO2019089228A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Milliken & Company Leuco compounds, colorant compounds, and compositions containing the same
WO2019089898A1 (en) 2017-11-02 2019-05-09 Danisco Us Inc Freezing point depressed solid matrix compositions for melt granulation of enzymes
US20200354708A1 (en) 2017-11-29 2020-11-12 Danisco Us Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2019105675A1 (en) 2017-11-30 2019-06-06 Unilever Plc Detergent composition comprising protease
EP3502227B1 (en) 2017-12-19 2024-09-04 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
DE102017223281A1 (de) * 2017-12-19 2019-06-19 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigugnsmittel enthaltend durch Betain stabilisierte Amylase
ES3023210T3 (en) 2017-12-19 2025-05-30 Procter & Gamble Automatic dishwashing detergent composition
EP3502245B1 (en) 2017-12-19 2025-03-05 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
DK3502246T3 (da) 2017-12-19 2025-07-07 Procter & Gamble Rensemiddelsammensætning til automatisk opvask
CN111742041B (zh) 2017-12-21 2023-06-06 丹尼斯科美国公司 包含耐热干燥剂的含酶的热熔细粒
JP6967447B2 (ja) * 2017-12-27 2021-11-17 小林製薬株式会社 錠剤状義歯洗浄剤
EP3735478B1 (en) 2018-01-03 2023-08-16 Danisco US Inc. Mutant and genetically modified bacillus cells and methods thereof for increased protein production
KR20200086739A (ko) 2018-01-26 2020-07-17 더 프록터 앤드 갬블 캄파니 효소를 포함하는 수용성 단위 용량 물품
BR112020016068A2 (pt) 2018-02-08 2020-12-08 Danisco Us Inc. Partículas cera termicamente resistente matriz para encapsulamento de enzima
KR20200124258A (ko) 2018-02-23 2020-11-02 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물
US20190264140A1 (en) 2018-02-28 2019-08-29 The Procter & Gamble Company Methods of cleaning
JP2021513590A (ja) 2018-02-28 2021-05-27 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗浄組成物
US12188064B2 (en) * 2018-03-23 2025-01-07 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
WO2019219531A1 (en) 2018-05-17 2019-11-21 Unilever Plc Cleaning composition
EP3810769A1 (en) 2018-06-19 2021-04-28 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3810767B1 (en) 2018-06-19 2026-07-15 Danisco US Inc. Subtilisin variants
JP2021527413A (ja) 2018-06-19 2021-10-14 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 自動食器洗浄洗剤組成物
EP3799601A1 (en) 2018-06-19 2021-04-07 Danisco US Inc. Subtilisin variants
US20200032178A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose articles comprising water-soluble fibrous structures and particles
WO2020028443A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Danisco Us Inc Variant alpha-amylases having amino acid substitutions that lower the pka of the general acid
EP3844255A1 (en) 2018-08-30 2021-07-07 Danisco US Inc. Enzyme-containing granules
WO2020046613A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 Danisco Us Inc Compositions comprising a lipolytic enzyme variant and methods of use thereof
CN112703246A (zh) 2018-09-17 2021-04-23 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP3856882A1 (en) 2018-09-27 2021-08-04 Danisco US Inc. Compositions for medical instrument cleaning
US20210355469A1 (en) 2018-10-12 2021-11-18 Danisco Us Inc Alpha-amylases with mutations that improve stability in the presence of chelants
BR112021009789A2 (pt) 2018-11-20 2021-08-17 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima esterase
CN113015781B (zh) 2018-11-20 2022-09-13 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
BR112021009828A2 (pt) 2018-11-20 2021-08-17 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente líquida, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima esterol esterase
BR112021009807A2 (pt) 2018-11-20 2021-08-17 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima isomerase
WO2020104156A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
US12509672B2 (en) 2018-11-28 2025-12-30 Danisco Us Inc. Subtilisin variants having improved stability
EP3898919A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 Novozymes A/S Detergent pouch comprising metalloproteases
EP3702452A1 (en) * 2019-03-01 2020-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions comprising two proteases
CN113439116B (zh) 2019-03-14 2023-11-28 宝洁公司 包含酶的清洁组合物
EP3938503A1 (en) 2019-03-14 2022-01-19 The Procter & Gamble Company Method for treating cotton
WO2020186030A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising enzymes
BR112021018731A2 (pt) 2019-03-21 2021-12-21 Novozymes As Variantes de alfa-amilase e polinucleotídeos codificando as mesmas
WO2020229661A1 (en) 2019-05-16 2020-11-19 Unilever Plc Laundry composition
CN113825829A (zh) 2019-05-16 2021-12-21 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣组合物
WO2020236873A1 (en) 2019-05-20 2020-11-26 Ecolab Usa Inc. Surfactant package for high foaming detergents with low level of medium to long chain linear alcohols
EP3741283B1 (en) 2019-05-22 2025-03-19 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
CN114174504B (zh) 2019-05-24 2026-04-17 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
EP3976775A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3980517A1 (en) 2019-06-06 2022-04-13 Danisco US Inc. Methods and compositions for cleaning
EP3986996A1 (en) 2019-06-24 2022-04-27 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants
EP3990602B1 (en) 2019-06-28 2025-02-26 Unilever Global IP Limited Detergent composition
WO2020260006A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent compositions
EP3990603B1 (en) 2019-06-28 2022-12-07 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
EP3990604B1 (en) 2019-06-28 2022-12-14 Unilever Global IP Limited Detergent composition
BR112021025261A2 (pt) 2019-06-28 2022-04-26 Unilever Ip Holdings B V Composição detergente e método doméstico para tratar um tecido
CN113906124B (zh) 2019-06-28 2024-08-02 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP3770241A1 (de) 2019-07-22 2021-01-27 Henkel AG & Co. KGaA Reinigungsmittel mit protease zur automatischen dosierung
US11873465B2 (en) 2019-08-14 2024-01-16 Ecolab Usa Inc. Methods of cleaning and soil release of highly oil absorbing substrates employing optimized extended chain nonionic surfactants
AR119874A1 (es) 2019-09-02 2022-01-19 Unilever Nv Composición detergente con un derivado de éster de ácido cítrico de un monoglicérido
DE112020004477T5 (de) 2019-09-19 2022-06-30 Unilever Global Ip Limited Detergenszusammensetzungen
AR120142A1 (es) 2019-10-07 2022-02-02 Unilever Nv Composición detergente
US11653595B2 (en) 2019-10-08 2023-05-23 The Toro Company Mower with front mounted rotary cutting deck having a tipped up service position
US12410385B2 (en) 2019-10-24 2025-09-09 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition comprising an amylase
BR112022007697A2 (pt) 2019-10-24 2022-07-12 Danisco Us Inc Alfa-amilase variante que forma maltopentaose/maltohexaose
US11492571B2 (en) 2019-10-24 2022-11-08 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition comprising a protease
KR102316445B1 (ko) * 2019-11-29 2021-10-26 씨제이제일제당 주식회사 신규 세린 프로테아제 변이체
EP3835396B1 (en) 2019-12-09 2025-12-03 The Procter & Gamble Company A detergent composition comprising a polymer
EP4090727A1 (en) 2020-01-13 2022-11-23 Danisco US Inc. Compositions comprising a lipolytic enzyme variant and methods of use thereof
EP4090738A1 (en) 2020-01-15 2022-11-23 Danisco US Inc. Compositions and methods for enhanced protein production in bacillus licheniformis
US20230407208A1 (en) 2020-01-29 2023-12-21 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Laundry detergent product
EP3862412A1 (en) 2020-02-04 2021-08-11 The Procter & Gamble Company Detergent composition
MX2022013878A (es) 2020-06-05 2022-11-30 Procter & Gamble Composiciones detergentes que contienen un surfactante ramificado.
WO2021249927A1 (en) 2020-06-08 2021-12-16 Unilever Ip Holdings B.V. Method of improving protease activity
JP2023534927A (ja) 2020-07-06 2023-08-15 エコラボ ユーエスエー インコーポレイティド 構造化アルコキシル化シロキサンを含む起泡性アルコール／水混合組成物
WO2022010893A1 (en) 2020-07-06 2022-01-13 Ecolab Usa Inc. Foaming mixed alcohol/water compositions comprising a combination of alkyl siloxane and a hydrotrope/solubilizer
EP4176031A1 (en) 2020-07-06 2023-05-10 Ecolab USA Inc. Peg-modified castor oil based compositions for microemulsifying and removing multiple oily soils
CA3187725A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
WO2022031309A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
WO2022031312A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method and pack
WO2022031310A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
CN116323935A (zh) 2020-08-27 2023-06-23 丹尼斯科美国公司 用于清洁的酶和酶组合物
EP4204548A1 (en) * 2020-08-28 2023-07-05 Novozymes A/S Polyester degrading protease variants
EP4204530B1 (en) 2020-08-28 2024-07-17 Unilever IP Holdings B.V. Detergent composition
CN116018396B (zh) 2020-08-28 2024-11-12 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
US20230303949A1 (en) 2020-08-28 2023-09-28 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Surfactant and detergent composition
WO2022043042A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
CN116157496A (zh) 2020-08-28 2023-05-23 联合利华知识产权控股有限公司 表面活性剂和洗涤剂组合物
CN116507725A (zh) 2020-10-07 2023-07-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体
US20230392018A1 (en) 2020-10-27 2023-12-07 Milliken & Company Compositions comprising leuco compounds and colorants
EP4237527A1 (en) 2020-10-29 2023-09-06 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising alginate lyase enzymes
JP7667265B2 (ja) 2020-11-17 2025-04-22 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー アルカリ性すすぎによる自動食器洗浄方法
WO2022108766A1 (en) 2020-11-17 2022-05-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition comprising amphiphilic graft polymer
EP4001388A1 (en) 2020-11-17 2022-05-25 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method with amphiphilic graft polymer in the rinse
EP4006131A1 (en) 2020-11-30 2022-06-01 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric
WO2022122481A1 (en) 2020-12-07 2022-06-16 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent compositions
WO2022122480A1 (en) 2020-12-07 2022-06-16 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent compositions
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
CN116529285B (zh) 2020-12-23 2025-05-13 巴斯夫股份公司 两亲性烷氧基化多胺及其用途
CN112662652A (zh) * 2021-01-20 2021-04-16 天津科技大学 一种胶原降解活力降低的碱性蛋白酶突变体
EP4284906A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Danisco US Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
EP4039806A1 (en) 2021-02-04 2022-08-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants with im-proved stability
WO2022171780A2 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
KR102613549B1 (ko) 2021-03-12 2023-12-13 씨제이제일제당 주식회사 신규 세린 프로테아제 변이체
MX2023005793A (es) 2021-03-15 2023-05-29 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que contienen variantes de polipeptido.
JP7688157B2 (ja) 2021-05-05 2025-06-03 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 洗浄組成物の作製及び汚れの検出の方法
EP4086330A1 (en) 2021-05-06 2022-11-09 The Procter & Gamble Company Surface treatment
US20240247209A1 (en) 2021-05-18 2024-07-25 Nouryon Chemicals International B.V. Polyester polyquats in cleaning applications
EP4341317A1 (en) 2021-05-20 2024-03-27 Nouryon Chemicals International B.V. Manufactured polymers having altered oligosaccharide or polysaccharide functionality or narrowed oligosaccharide distribution, processes for preparing them, compositions containing them, and methods of using them
EP4108767A1 (en) 2021-06-22 2022-12-28 The Procter & Gamble Company Cleaning or treatment compositions containing nuclease enzymes
EP4359518A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
US20240287409A1 (en) 2021-06-30 2024-08-29 Nouryon Chemicals International B.V. Chelate-amphoteric surfactant liquid concentrates and use thereof in cleaning applications
WO2023278297A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Danisco Us Inc Variant lipases and uses thereof
EP4123006B1 (en) 2021-07-19 2026-03-25 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and pro-perfume materials
ES3070841T3 (es) 2021-07-19 2026-06-17 The Procter & Gamble Co Tratamiento de tejidos mediante esporas bacterianas
JP7739435B2 (ja) 2021-08-10 2025-09-16 株式会社日本触媒 ポリアルキレンオキシド含有化合物
EP4388077A1 (en) 2021-08-20 2024-06-26 Danisco US Inc. Polynucleotides encoding novel nucleases, compositions thereof and methods thereof for eliminating dna from protein preparations
CN117916354A (zh) 2021-09-03 2024-04-19 丹尼斯科美国公司 用于清洁的衣物洗涤组合物
WO2023039270A2 (en) 2021-09-13 2023-03-16 Danisco Us Inc. Bioactive-containing granules
CN117957300A (zh) 2021-09-20 2024-04-30 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
WO2023057367A1 (en) 2021-10-08 2023-04-13 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry composition
CN118119692A (zh) 2021-10-14 2024-05-31 宝洁公司 包含阳离子去垢性聚合物和脂肪酶的织物和家庭护理产品
EP4194537A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
EP4194536A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
JP7842216B2 (ja) 2021-12-16 2026-04-07 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー プロテアーゼを含む自動食器洗浄組成物
US20250051748A1 (en) 2021-12-16 2025-02-13 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
CN118679252A (zh) 2021-12-16 2024-09-20 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
CN118647716A (zh) 2021-12-16 2024-09-13 丹尼斯科美国公司 成麦芽五糖/麦芽六糖变体α-淀粉酶
US20230365897A1 (en) 2021-12-16 2023-11-16 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition including a protease
WO2023114793A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 The Procter & Gamble Company Home care composition
EP4448750A2 (en) 2021-12-16 2024-10-23 Danisco US Inc. Subtilisin variants and uses thereof
WO2023114792A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 The Procter & Gamble Company Home care composition comprising an amylase
EP4486858A1 (en) 2022-03-01 2025-01-08 Danisco US Inc. Enzymes and enzyme compositions for cleaning
EP4273210A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
EP4273209A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Machine-cleaning compositions containing enzymes
EP4279571A1 (en) 2022-05-19 2023-11-22 The Procter & Gamble Company Laundry composition comprising spores
CN119487163A (zh) 2022-05-27 2025-02-18 联合利华知识产权控股有限公司 包含线性烷基苯磺酸盐、甲酯乙氧基化物和烷氧基化的两性离子多胺聚合物的液体组合物
CN119365577A (zh) 2022-05-27 2025-01-24 联合利华知识产权控股有限公司 包含酶的组合物
WO2023227332A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer and a protease
WO2023227331A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composition comprising a specific methyl ester ethoxylate surfactant and a lipase
EP4532659B1 (en) 2022-05-27 2025-12-17 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an aminocarboxylate, an organic acid and a fragrance
WO2023227421A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer, and a fragrance
EP4532672A1 (en) 2022-06-03 2025-04-09 Unilever IP Holdings B.V. Liquid detergent product
EP4544016A1 (en) 2022-06-21 2025-04-30 Danisco US Inc. Methods and compositions for cleaning comprising a polypeptide having thermolysin activity
US20240026248A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Ecolab Usa Inc. Novel nonionic extended surfactants, compositions and methods of use thereof
EP4321604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester
EP4581137A1 (en) 2022-09-02 2025-07-09 Danisco Us Inc Mannanase variants and methods of use
CN120112635A (zh) 2022-09-02 2025-06-06 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体及其相关方法
CN119855892A (zh) 2022-09-02 2025-04-18 丹尼斯科美国公司 洗涤剂组合物及其相关方法
CN120303385A (zh) 2022-09-13 2025-07-11 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣机和洗涤方法
CN119895022A (zh) 2022-09-13 2025-04-25 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣机和洗涤方法
EP4587542A1 (en) 2022-09-13 2025-07-23 Unilever IP Holdings B.V. Washing machine and washing method
US20260085256A1 (en) 2022-09-13 2026-03-26 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Washing machine and washing method
EP4349947A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349946A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Unit dose fabric treatment product
EP4349944A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349943A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349945A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349942A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349948A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
WO2024088706A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4361239A1 (en) 2022-10-25 2024-05-01 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
WO2024088716A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4612210A1 (en) 2022-11-04 2025-09-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024094790A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Clariant International Ltd Polyesters
EP4612211A1 (en) 2022-11-04 2025-09-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
CN120303400A (zh) 2022-11-09 2025-07-11 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
CN120202283A (zh) 2022-11-29 2025-06-24 联合利华知识产权控股有限公司 组合物
EP4630526A1 (en) 2022-12-05 2025-10-15 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition comprising a polyalkylenecarbonate compound
EP4634352A1 (en) 2022-12-12 2025-10-22 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4386074B1 (en) 2022-12-16 2025-12-03 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4388967A1 (en) 2022-12-19 2024-06-26 The Procter & Gamble Company Dishwashing method
KR20250130619A (ko) 2022-12-23 2025-09-02 노보자임스 에이/에스 카탈라제 및 아밀라제를 포함하는 세제 조성물
EP4658776A1 (en) 2023-02-01 2025-12-10 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
JP2026503673A (ja) 2023-02-01 2026-01-29 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 酵素を含有する洗剤組成物
WO2024186819A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
CN120813242A (zh) 2023-03-16 2025-10-17 营养与生物科学美国第四公司 用于清洁和臭味控制的短芽孢杆菌发酵物提取物及其用途
EP4680710A1 (en) 2023-03-17 2026-01-21 Unilever IP Holdings B.V. Composition
WO2024193937A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Machine dishwash filter cleaner
WO2024194098A1 (en) 2023-03-21 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent unit dose
EP4695364A1 (en) 2023-04-11 2026-02-18 Unilever IP Holdings B.V. Composition
CN121358835A (zh) 2023-04-11 2026-01-16 联合利华知识产权控股有限公司 组合物
CN120882844A (zh) 2023-04-11 2025-10-31 联合利华知识产权控股有限公司 组合物
WO2024213428A1 (en) 2023-04-11 2024-10-17 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4695361A1 (en) 2023-04-11 2026-02-18 Unilever IP Holdings B.V. Composition
WO2024223218A1 (en) 2023-04-25 2024-10-31 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4458932A1 (en) 2023-05-04 2024-11-06 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition
EP4458933A1 (en) 2023-05-05 2024-11-06 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising a propoxylated polyol
EP4481027A1 (en) 2023-06-19 2024-12-25 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing enzymes
EP4484536A1 (en) 2023-06-26 2025-01-01 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4488351A1 (en) 2023-07-03 2025-01-08 The Procter & Gamble Company Compositions containing a porphyrin binding protein
ES3059595T1 (en) 2023-07-11 2026-03-23 Unilever Ip Holdings B V Method for treating fabric
WO2025011808A1 (en) 2023-07-11 2025-01-16 Unilever Ip Holdings B.V. Method for treating fabric
WO2025012293A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and method
WO2025016669A1 (en) 2023-07-19 2025-01-23 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry capsule
WO2025026734A1 (en) 2023-08-02 2025-02-06 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
CN121605174A (zh) 2023-08-04 2026-03-03 联合利华知识产权控股有限公司 组合物
EP4754225A1 (en) 2023-08-04 2026-06-10 Unilever IP Holdings B.V. Composition
EP4509589A1 (en) 2023-08-16 2025-02-19 Unilever IP Holdings B.V. Unit dose product
WO2025071996A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Danisco Us Inc. Variant cutinase enzymes with improved solubility and uses thereof
WO2025085351A1 (en) 2023-10-20 2025-04-24 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4549541A1 (en) 2023-11-02 2025-05-07 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4549540A1 (en) 2023-11-02 2025-05-07 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4553137A1 (en) 2023-11-08 2025-05-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising a polyester
EP4559998A1 (en) 2023-11-22 2025-05-28 The Procter & Gamble Company Composition comprising microcapsules comprising spores
DE102023212361A1 (de) * 2023-12-07 2025-06-12 Henkel Ag & Co. Kgaa Protease-varianten mit verbesserter bleichestabilität
WO2025124811A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4570890A1 (en) 2023-12-14 2025-06-18 Unilever IP Holdings B.V. Composition
EP4570893A1 (en) 2023-12-15 2025-06-18 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4570892A1 (en) 2023-12-15 2025-06-18 The Procter & Gamble Company A laundry detergent composition
WO2025153644A1 (en) 2024-01-18 2025-07-24 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2025153645A1 (en) 2024-01-18 2025-07-24 Unilever Ip Holdings B.V. Use for fabric shape retention
EP4610340A1 (en) 2024-03-01 2025-09-03 The Procter & Gamble Company A laundry detergent composition comprising a polyester
EP4624555A1 (en) 2024-03-26 2025-10-01 The Procter & Gamble Company Fabric and home care compositions
EP4624554A1 (en) 2024-03-26 2025-10-01 The Procter & Gamble Company Fabric care compositions
WO2025202369A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202372A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202370A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202379A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
EP4624572A1 (en) 2024-03-27 2025-10-01 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025202382A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in cleaning compositions
WO2025202374A1 (en) 2024-03-27 2025-10-02 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2025213357A1 (en) 2024-04-09 2025-10-16 The Procter & Gamble Company Particulate fabric care composition
WO2025214720A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2025214659A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Unilever Ip Holdings B.V. Washing method
WO2025217909A1 (en) 2024-04-19 2025-10-23 The Procter & Gamble Company Particulate fabric care product
EP4636063A1 (en) 2024-04-19 2025-10-22 The Procter & Gamble Company A unit dose laundry detergent product
EP4644515A1 (en) 2024-05-02 2025-11-05 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and cationic glucan
EP4660287A1 (en) 2024-06-06 2025-12-10 The Procter & Gamble Company Use of a polysaccharide ester in a laundry detergent composition
EP4663732A1 (en) 2024-06-10 2025-12-17 The Procter & Gamble Company Use of graft polymer in a laundry detergent composition
EP4663733A1 (en) 2024-06-10 2025-12-17 The Procter & Gamble Company Use of a graft polymer in a laundering process
EP4663737A1 (en) 2024-06-13 2025-12-17 Unilever IP Holdings B.V. Laundry unit dose product
EP4663738A1 (en) 2024-06-13 2025-12-17 Unilever IP Holdings B.V. Laundry unit dose product
EP4663729A1 (en) 2024-06-13 2025-12-17 Unilever IP Holdings B.V. Method for treating fabrics
EP4663728A1 (en) 2024-06-13 2025-12-17 Unilever IP Holdings B.V. Method for treating fabrics
WO2026012789A1 (en) 2024-07-08 2026-01-15 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2026012788A1 (en) 2024-07-08 2026-01-15 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2026024922A1 (en) 2024-07-25 2026-01-29 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4703461A1 (en) 2024-08-29 2026-03-04 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose article comprising a metalloprotease
WO2026050315A1 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4703460A1 (en) 2024-08-29 2026-03-04 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose article comprising a metalloprotease
WO2026093440A1 (en) * 2024-11-04 2026-05-07 Novozymes A/S Protease variants and compositions comprising same
WO2026099025A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid laundry composition
WO2026099023A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid laundry composition
WO2026099027A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2026099021A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Method for treating fabrics
WO2026099022A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid laundry composition
WO2026099020A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid laundry composition
WO2026099024A1 (en) 2024-11-11 2026-05-15 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid laundry composition
WO2026104351A1 (en) 2024-11-15 2026-05-21 Unilever Ip Holdings B.V. Home care substrate treatment compositions and methods
WO2026104353A1 (en) 2024-11-15 2026-05-21 Unilever Ip Holdings B.V. Home care substrate treatment compositions and methods
CN119662610B (zh) * 2024-11-20 2026-07-17 天津科技大学 一种碱性蛋白酶突变体及其应用
WO2026128766A1 (en) 2024-12-13 2026-06-18 Danisco Usa Inc. Malodor control compostions comprising bacterial fermentate extracts and methods related thereof
WO2026128769A1 (en) 2024-12-13 2026-06-18 Danisco Usa Inc. Cleaning compositions comprising bacterial fermentate extracts and methods related thereof
US20260176557A1 (en) 2024-12-19 2026-06-25 The Procter & Gamble Company Fabric and home care compositions
EP4790123A1 (en) 2025-02-06 2026-08-12 The Procter & Gamble Company Lipase variants and compositions thereof

Family Cites Families (94)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1611703B1 (de) * 1967-10-11 1972-03-09 Windmoeller & Hoelscher Vorrichtung zum Abteilen einer bestimmten Stueckzahl innerhalb einer am Ende einer Sack- oder Beutelmaschine gebildeten kontinuierlichen Folge von Saecken oder Beuteln
US4028263A (en) * 1973-08-24 1977-06-07 Colgate-Palmolive Company Bleaching and brightening detergent composition
NL7904044A (nl) 1978-05-31 1979-12-04 Unilever Nv Werkwijze ter bereiding van homogene, vloeibare compo- sities.
US4261868A (en) 1979-08-08 1981-04-14 Lever Brothers Company Stabilized enzymatic liquid detergent composition containing a polyalkanolamine and a boron compound
US4404128A (en) 1981-05-29 1983-09-13 The Procter & Gamble Company Enzyme detergent composition
GR76237B (cs) 1981-08-08 1984-08-04 Procter & Gamble
JPS58144105A (ja) 1982-02-12 1983-08-27 Kurabo Ind Ltd スケ−ル除去獣毛繊維の製法
GB8310080D0 (en) 1983-04-14 1983-05-18 Interox Chemicals Ltd Bleach composition
US4760025A (en) 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
US5182204A (en) 1984-05-29 1993-01-26 Genencor International, Inc. Non-human carbonyl hydrolase mutants, vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
US5264366A (en) 1984-05-29 1993-11-23 Genencor, Inc. Protease deficient bacillus
US5204015A (en) 1984-05-29 1993-04-20 Genencor International, Inc. Subtilisin mutants
JPS6141481U (ja) * 1984-08-10 1986-03-17 三菱電機株式会社 シ−ム溶接装置
US4797362A (en) * 1985-06-06 1989-01-10 Lion Corporation Alkaline proteases and microorganisms producing same
US4908773A (en) * 1987-04-06 1990-03-13 Genex Corporation Computer designed stabilized proteins and method for producing same
US4728455A (en) 1986-03-07 1988-03-01 Lever Brothers Company Detergent bleach compositions, bleaching agents and bleach activators
IE65767B1 (en) 1986-04-30 1995-11-15 Genencor Int Non-human carbonyl hydrolase mutants DNA sequences and vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
GB8629837D0 (en) 1986-12-13 1987-01-21 Interox Chemicals Ltd Bleach activation
US4853871A (en) * 1987-04-06 1989-08-01 Genex Corporation Computer-based method for designing stablized proteins
US5314692A (en) 1987-08-24 1994-05-24 Cultor Ltd. Enzyme premix for feed and method
EP0344259A4 (en) 1987-10-30 1991-04-24 Lsi Logic Corporation Method and means of fabricating a semiconductor device package
DK6488D0 (da) * 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
PT89702B (pt) * 1988-02-11 1994-04-29 Gist Brocades Nv Processo para a preparacao de novos enzimas proteoliticos e de detergentes que os contem
US5543302A (en) * 1988-05-27 1996-08-06 Solvay Enzymes, Inc. Proteases of altered stability to autolytic degradation
DE3841152A1 (de) 1988-12-07 1990-06-13 Hoechst Ag Verwendung von bakterienlysierendem enzymprodukt als zusatzstoff zur verbesserung der futterverwertung in der tierproduktion
GB8908416D0 (en) 1989-04-13 1989-06-01 Unilever Plc Bleach activation
AU618675B2 (en) * 1989-05-17 1992-01-02 Amgen, Inc. Multiply mutated subtilisins
DE69034159T2 (de) * 1989-06-26 2005-02-17 Unilever N.V. Enzymatische Waschmittelzusammensetzungen
US5665587A (en) * 1989-06-26 1997-09-09 Novo Nordisk A/S Modified subtilisins and detergent compositions containing same
DK316989D0 (da) * 1989-06-26 1989-06-26 Novo Nordisk As Enzymer
GB9003741D0 (en) 1990-02-19 1990-04-18 Unilever Plc Bleach activation
ES2100924T3 (es) 1990-05-21 1997-07-01 Unilever Nv Activacion de blanqueador.
DE69128094T2 (de) * 1990-12-21 1998-03-19 Novonordisk As Enzym-mutanten mit einer geringen variation der molekularladung über einen ph-bereich
US5769630A (en) * 1991-02-25 1998-06-23 Louisiana State University, Subperiosteal bone anchor
GB9108136D0 (en) 1991-04-17 1991-06-05 Unilever Plc Concentrated detergent powder compositions
US5340735A (en) * 1991-05-29 1994-08-23 Cognis, Inc. Bacillus lentus alkaline protease variants with increased stability
US5274147A (en) 1991-07-11 1993-12-28 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Process for preparing manganese complexes
EP0995801A1 (de) * 1991-07-27 2000-04-26 Genencor International GmbH Verfahren zur Verbesserung des Stabilität von Enzymen und stabilisierte Enzyme
GB9118242D0 (en) 1991-08-23 1991-10-09 Unilever Plc Machine dishwashing composition
GB9124581D0 (en) 1991-11-20 1992-01-08 Unilever Plc Bleach catalyst composition,manufacture and use thereof in detergent and/or bleach compositions
US5153161A (en) 1991-11-26 1992-10-06 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Synthesis of manganese oxidation catalyst
US5194416A (en) 1991-11-26 1993-03-16 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Manganese catalyst for activating hydrogen peroxide bleaching
EP0544490A1 (en) 1991-11-26 1993-06-02 Unilever Plc Detergent bleach compositions
CA2085642A1 (en) 1991-12-20 1993-06-21 Ronald Hage Bleach activation
GB9127060D0 (en) 1991-12-20 1992-02-19 Unilever Plc Bleach activation
US5316935A (en) * 1992-04-06 1994-05-31 California Institute Of Technology Subtilisin variants suitable for hydrolysis and synthesis in organic media
EP0571982A1 (en) * 1992-05-27 1993-12-01 Showa Denko Kabushiki Kaisha Alkaline lipase, method for producing the same, microorganism producing the same and detergent composition containing alkaline lipase
DE4218448A1 (de) 1992-06-04 1993-12-09 Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg Alkalische Proteasen aus Bacillus pumilus
US5256779A (en) 1992-06-18 1993-10-26 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Synthesis of manganese oxidation catalyst
US5284944A (en) 1992-06-30 1994-02-08 Lever Brothers Company, Division Of Conopco, Inc. Improved synthesis of 1,4,7-triazacyclononane
KR950702633A (ko) * 1992-07-17 1995-07-29 한스 발터 라벤 고알칼리성 세린 프로테아제(high alkaline serine proteases)
US5280117A (en) 1992-09-09 1994-01-18 Lever Brothers Company, A Division Of Conopco, Inc. Process for the preparation of manganese bleach catalyst
US5567601A (en) * 1993-06-01 1996-10-22 University Of Maryland Subtilisin mutants lacking a primary calcium binding site
WO1995005477A1 (en) * 1993-08-12 1995-02-23 University Of Maryland Thermostable alkaline metalloprotease produced by a hyphomonas, and preparation thereof
US6436690B1 (en) * 1993-09-15 2002-08-20 The Procter & Gamble Company BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted
MA23346A1 (fr) 1993-10-14 1995-04-01 Genencor Int Variantes de la subtilisine
ATE245185T1 (de) * 1993-10-14 2003-08-15 Procter & Gamble Proteasen enthaltende bleichmittelzusammensetzungen
HU219851B (hu) * 1993-10-14 2001-08-28 The Procter And Gamble Company Proteáz tartalmú tisztítókészítmények
PL314103A1 (en) * 1993-10-23 1996-08-19 Imp Tobacco Ltd Improvement in or related to tobacco artricles
ES2364776T3 (es) * 1994-02-24 2011-09-14 HENKEL AG &amp; CO. KGAA Enzimas mejoradas y detergentes que las contienen.
US5691295A (en) * 1995-01-17 1997-11-25 Cognis Gesellschaft Fuer Biotechnologie Mbh Detergent compositions
EP1921147B1 (en) * 1994-02-24 2011-06-08 Henkel AG & Co. KGaA Improved enzymes and detergents containing them
ES2250969T3 (es) * 1994-03-29 2006-04-16 Novozymes A/S Amilasa alcalina de bacilo.
WO1995027774A1 (en) * 1994-04-07 1995-10-19 The Procter & Gamble Company Bleach compositions comprising metal-containing bleach catalysts and antioxidants
US6599730B1 (en) * 1994-05-02 2003-07-29 Procter & Gamble Company Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
GB9409336D0 (en) 1994-05-10 1994-06-29 Finnfeeds Int Ltd Use of an enzyme for manufacturing an agent for the treatment and/or prophylaxis of coccidiosis
GB9416841D0 (en) 1994-08-19 1994-10-12 Finnfeeds Int Ltd An enzyme feed additive and animal feed including it
ATE190090T1 (de) 1994-12-09 2000-03-15 Procter & Gamble Diacylperoxydteilchen enthaltende zusammensetzungen für automatische geschirreinigung
US5534302A (en) 1995-01-05 1996-07-09 National Science Council Method of preparing a fiber reinforced modified phenolic resin composite
US5534179A (en) 1995-02-03 1996-07-09 Procter & Gamble Detergent compositions comprising multiperacid-forming bleach activators
AR000862A1 (es) * 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
US5780285A (en) * 1995-03-03 1998-07-14 Genentech, Inc. Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing dibasic residues
US5837516A (en) * 1995-03-03 1998-11-17 Genentech, Inc. Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing basic residues
US6455295B1 (en) * 1995-03-08 2002-09-24 The Procter & Gamble Company Subtilisin Carlsberg variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
IL117352A0 (en) * 1995-03-09 1996-07-23 Procter & Gamble Thermitase variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6475765B1 (en) * 1995-03-09 2002-11-05 Procter & Gamble Company Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
IL117350A0 (en) * 1995-03-09 1996-07-23 Procter & Gamble Proteinase k variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US5523434A (en) 1995-03-15 1996-06-04 The Procter & Gamble Company Synthesis of bleach activators
EP0821722B1 (en) * 1995-04-17 2000-07-26 The Procter & Gamble Company Preparation and use of composite particles containing diacyl peroxide
US5837517A (en) * 1995-05-05 1998-11-17 Novo Nordisk A/S Protease variants and compositions
ATE203563T1 (de) 1995-06-16 2001-08-15 Procter & Gamble Bleichmittelzusammensetzungen, die kobaltkatalysatoren enthalten
AU5862396A (en) 1995-06-16 1997-01-15 Procter & Gamble Company, The Automatic dishwashing compositions comprising cobalt catalysts
US5597936A (en) 1995-06-16 1997-01-28 The Procter & Gamble Company Method for manufacturing cobalt catalysts
US5576282A (en) 1995-09-11 1996-11-19 The Procter & Gamble Company Color-safe bleach boosters, compositions and laundry methods employing same
US5703034A (en) * 1995-10-30 1997-12-30 The Procter & Gamble Company Bleach catalyst particles
US5762647A (en) * 1995-11-21 1998-06-09 The Procter & Gamble Company Method of laundering with a low sudsing granular detergent composition containing optimally selected levels of a foam control agent bleach activator/peroxygen bleaching agent system and enzyme
WO1997022680A1 (en) * 1995-12-20 1997-06-26 The Procter & Gamble Company Bleach catalyst plus enzyme particles
US5883065A (en) * 1996-01-22 1999-03-16 The Procter & Gamble Company Phase separated detergent composition
JP2000505502A (ja) * 1996-03-07 2000-05-09 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 改良アミラーゼを含んでなる洗剤組成物
US6069122A (en) * 1997-06-16 2000-05-30 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent compositions containing organic diamines for improved grease cleaning, sudsing, low temperature stability and dissolution
US6177392B1 (en) * 1997-01-13 2001-01-23 Ecolab Inc. Stable solid block detergent composition
ATE338823T1 (de) * 1997-06-04 2006-09-15 Genecor Int Inc Protease zur gründlichen reinigung und/oder flecken- und filmreduktion und zusammensetzungen damit
US6057171A (en) * 1997-09-25 2000-05-02 Frequency Technology, Inc. Methods for determining on-chip interconnect process parameters
AR016969A1 (es) * 1997-10-23 2001-08-01 Procter & Gamble VARIANTE DE PROTEASA, ADN, VECTOR DE EXPRESIoN, MICROORGANISMO HUESPED, COMPOSICIoN DE LIMPIEZA, ALIMENTO PARA ANIMALES Y COMPOSICIoN PARA TRATAR UN TEXTIL

Also Published As

Publication number Publication date
DE69833015D1 (de) 2006-02-02
ATE314478T1 (de) 2006-01-15
CA2307640A1 (en) 1999-04-29
EP1025194B1 (en) 2008-12-10
TR200001113T2 (tr) 2002-05-21
CN1195857C (zh) 2005-04-06
ES2310014T5 (es) 2011-05-24
PL340600A1 (en) 2001-02-12
JP4511025B2 (ja) 2010-07-28
DK1612271T3 (da) 2011-09-12
US6312936B1 (en) 2001-11-06
ATE416624T1 (de) 2008-12-15
CA2308113C (en) 2011-07-26
CZ20001479A3 (cs) 2002-01-16
CN1597899A (zh) 2005-03-23
AR052281A2 (es) 2007-03-07
HUP0100859A2 (hu) 2001-06-28
ES2332915T3 (es) 2010-02-15
CA2306794C (en) 2009-07-07
ES2319470T3 (es) 2009-05-07
BR9813115A (pt) 2000-08-15
PT1624050E (pt) 2010-01-13
DK1025240T3 (da) 2006-05-22
WO1999020771A2 (en) 1999-04-29
US6815193B2 (en) 2004-11-09
PT1025241E (pt) 2005-08-31
CN1191347C (zh) 2005-03-02
JP5612026B2 (ja) 2014-10-22
CZ20001478A3 (cs) 2001-12-12
ES2319470T5 (es) 2012-05-16
ATE399469T1 (de) 2008-07-15
EP1571199B1 (en) 2011-06-22
NO326992B1 (no) 2009-03-30
HUP0104539A2 (hu) 2002-04-29
AU742632B2 (en) 2002-01-10
AR016969A1 (es) 2001-08-01
NO20001899L (no) 2000-06-19
CN1327476A (zh) 2001-12-19
CN1279720A (zh) 2001-01-10
KR20010024554A (ko) 2001-03-26
KR20010031374A (ko) 2001-04-16
DE69829577D1 (de) 2005-05-04
BRPI9813266B1 (pt) 2015-10-13
AR052355A2 (es) 2007-03-14
AU1196999A (en) 1999-05-10
EP1571199A3 (en) 2006-01-11
ES2319401T3 (es) 2009-05-07
BR9815230A (pt) 2001-10-02
DK1571199T3 (da) 2011-09-26
AR052353A2 (es) 2007-03-14
HUP0104539A3 (en) 2002-12-28
CA2306894A1 (en) 1999-04-29
DK1025194T4 (da) 2012-04-02
DK1398367T3 (da) 2009-04-06
EP1025240A2 (en) 2000-08-09
TR200002057T2 (tr) 2001-03-21
DK1025239T3 (da) 2008-06-02
JP2012183078A (ja) 2012-09-27
CA2308113A1 (en) 1999-04-29
KR20010024555A (ko) 2001-03-26
CZ20001503A3 (cs) 2000-12-13
CN1295313C (zh) 2007-01-17
KR100564039B1 (ko) 2006-03-28
CZ20001504A3 (cs) 2001-03-14
TW562859B (en) 2003-11-21
AU1199499A (en) 1999-05-10
AR052453A2 (es) 2007-03-21
CA2672500A1 (en) 1999-04-29
CN1279721A (zh) 2001-01-10
NZ519204A (en) 2004-02-27
EP1082404A2 (en) 2001-03-14
EP1398367A1 (en) 2004-03-17
EP1027418B2 (en) 2011-01-19
TR200101199T2 (tr) 2002-05-21
AU742694B2 (en) 2002-01-10
DE69839057T2 (de) 2009-03-12
CA2618389A1 (en) 1999-04-29
AU1197199A (en) 1999-05-10
TR200001111T2 (tr) 2002-12-23
AU742573B2 (en) 2002-01-10
WO1999020723A3 (en) 2001-01-04
AR013718A1 (es) 2001-01-10
AR052282A2 (es) 2007-03-07
CA2307640C (en) 2011-08-02
KR20010031372A (ko) 2001-04-16
CZ302287B6 (cs) 2011-02-09
WO1999020769A2 (en) 1999-04-29
TW585912B (en) 2004-05-01
AR052354A2 (es) 2007-03-14
AU1199699A (en) 1999-05-10
EP1025194B2 (en) 2012-01-04
CN100506963C (zh) 2009-07-01
EP1612271B1 (en) 2011-06-01
ID26501A (id) 2001-01-11
JP2001520045A (ja) 2001-10-30
CA2307638A1 (en) 1999-04-29
CN1286724A (zh) 2001-03-07
EP1571199A2 (en) 2005-09-07
JP2001520046A (ja) 2001-10-30
CA2308206C (en) 2009-10-06
PT1612271E (pt) 2011-09-01
JP2001520308A (ja) 2001-10-30
ATE511540T1 (de) 2011-06-15
WO1999020769A3 (en) 1999-08-26
EP1025241B2 (en) 2009-10-21
EP1025239A2 (en) 2000-08-09
WO1999020723A8 (en) 2001-03-08
BR9813879A (pt) 2000-09-26
NO20001900L (no) 2000-06-15
US20030119690A1 (en) 2003-06-26
ATE513479T1 (de) 2011-07-15
MA24811A1 (fr) 1999-12-31
KR20010031377A (ko) 2001-04-16
HUP0103080A2 (hu) 2001-12-28
US20030073222A1 (en) 2003-04-17
DE69839057D1 (de) 2008-03-13
JP2001520044A (ja) 2001-10-30
NZ520771A (en) 2004-06-25
EP1027418A1 (en) 2000-08-16
PT1571199E (pt) 2011-09-27
CN100558871C (zh) 2009-11-11
US6482628B1 (en) 2002-11-19
EP1624050A2 (en) 2006-02-08
AU1276299A (en) 1999-05-10
CN102021159A (zh) 2011-04-20
US6927055B2 (en) 2005-08-09
ES2310014T3 (es) 2008-12-16
AU758371B2 (en) 2003-03-20
EP1025194A1 (en) 2000-08-09
WO1999020726A1 (en) 1999-04-29
CZ300347B6 (cs) 2009-04-29
ES2241180T3 (es) 2005-10-16
NZ520770A (en) 2004-05-28
PL191529B1 (pl) 2006-06-30
US6673590B1 (en) 2004-01-06
EP1398367B1 (en) 2008-12-10
EG22075A (en) 2002-07-31
PT1025239E (pt) 2008-04-30
BR9813266A (pt) 2001-11-20
EP1025241A2 (en) 2000-08-09
ATE417099T1 (de) 2008-12-15
JP2001520305A (ja) 2001-10-30
KR20010031380A (ko) 2001-04-16
HK1039159A1 (en) 2002-04-12
DK1027418T3 (da) 2008-11-10
JP2001520307A (ja) 2001-10-30
CA2306894C (en) 2009-10-06
WO1999020723A9 (en) 1999-09-02
MA25044A1 (fr) 2000-10-01
EP1624050A3 (en) 2006-06-21
DK1025241T4 (da) 2010-03-08
CA2618389C (en) 2012-12-11
CA2672492A1 (en) 1999-04-29
CZ20001477A3 (cs) 2001-12-12
ATE384799T1 (de) 2008-02-15
EP1025241B1 (en) 2005-03-30
AU1118199A (en) 1999-05-10
NO20001901L (no) 2000-06-19
NO20001901D0 (no) 2000-04-12
DE69840346D1 (de) 2009-01-22
PT1025194E (pt) 2009-03-17
CN1286723A (zh) 2001-03-07
CA2308206A1 (en) 1999-04-29
DE69841226D1 (de) 2009-11-19
JP4346237B2 (ja) 2009-10-21
TR200001112T2 (tr) 2002-01-21
CN1198912C (zh) 2005-04-27
CN100342016C (zh) 2007-10-10
ID25897A (id) 2000-11-09
DE69829577T2 (de) 2006-02-02
DE69833015T2 (de) 2006-08-10
ES2301214T3 (es) 2008-06-16
DK1025241T3 (da) 2005-08-08
DE69840335D1 (de) 2009-01-22
CZ301469B6 (cs) 2010-03-17
BR9813260A (pt) 2000-08-22
WO1999020770A2 (en) 1999-04-29
ATE292179T1 (de) 2005-04-15
EP1624050B1 (en) 2009-10-07
WO1999020770A3 (en) 1999-09-02
ATE445002T1 (de) 2009-10-15
KR100612981B1 (ko) 2006-08-14
ES2255189T3 (es) 2006-06-16
AR015977A1 (es) 2001-05-30
AU8733701A (en) 2002-01-03
NO20001900D0 (no) 2000-04-12
ES2241180T5 (es) 2010-03-26
PT1027418E (pt) 2008-10-14
DK1025194T3 (da) 2009-04-06
BR9814097A (pt) 2000-10-03
ID28256A (id) 2001-05-10
HK1039159B (zh) 2008-05-09
CA2307638C (en) 2012-01-03
EP1612271A2 (en) 2006-01-04
WO1999020771A3 (en) 1999-07-01
PT1398367E (pt) 2009-03-12
DK1027418T4 (da) 2011-05-16
EP1025240B1 (en) 2005-12-28
TR200002014T2 (tr) 2000-12-21
DE69829577T3 (de) 2010-05-20
EP1027418B1 (en) 2008-07-02
DE69839677D1 (de) 2008-08-14
KR100616143B1 (ko) 2006-08-25
AR013719A1 (es) 2001-01-10
NO20001899D0 (no) 2000-04-12
EP1025239B1 (en) 2008-01-23
NO327607B1 (no) 2009-08-31
EP1624050B9 (en) 2010-03-24
CN1306577A (zh) 2001-08-01
CA2306794A1 (en) 1999-04-29
TR200002013T2 (tr) 2001-01-22
TR200101861T2 (tr) 2002-06-21
DK1624050T3 (da) 2010-02-15
WO1999020723A2 (en) 1999-04-29
ID25637A (id) 2000-10-19
BRPI9813115B1 (pt) 2015-03-31
CN1597898A (zh) 2005-03-23
EG21711A (en) 2002-02-27
EP1612271A3 (en) 2009-02-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5612026B2 (ja) 洗剤で使用される改変された正味の特性を有する複数置換プロテアーゼ変異体
CA2472725C (en) Multiply-substituted protease variants
RU2252254C2 (ru) Вариант субтилизина bacillus (варианты), кодирующая его днк, экспрессирующий вектор и очищающая композиция
US7129076B2 (en) Multiply-substituted protease variants with altered net charge for use in detergents
EP2287321B1 (en) Multiply-substituted protease variants
AU2002325461B2 (en) Multiply-substituted protease variants with altered net charge for use in detergents
AU2002320741B2 (en) Multiply-substituted protease variants
MXPA00003806A (en) Multiply-substituted protease variants with altered net charge for use in detergents

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20111023