ES2398076T3 - Anticuerpos de alta afinidad contra el receptor de IL-6 humano - Google Patents

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Abstract

Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor de interleucina6 humano (hlL-6R) con una Kd de 500 pM o inferior, según se mide por resonancia de plasmón superficial, en el que: (i) las CDR de la cadena pesada comprenden las SEC ID Nº: 5, 7 y 9 como CDR1, CDR2 y CDR3 de cadenapesada respectivamente, y (ii) las CDR de la cadena ligera comprenden las SEC ID Nº: 13, 15 y 17 como CDR1, CDR2 y CDR3 de cadenaligera respectivamente.

Description

Anticuerpos de alta afinidad contra el receptor de IL-6 humano
Declaración de la técnica relacionada
La interleucina 6 (IL-6) es una citocina pleotrópica producida por células inmunes y no inmunes que desempeña un papel crucial en la regulación de la respuesta inmune, reacciones de fase aguda y hematopoyesis. Se une a IL-6R soluble y unido a membrana celular (cadena e) formando un complejo binario, y este complejo es capaz de interaccionar con gp130 unida a membrana celular (cadena 1), induce la formación de un complejo de señalización que comprende dos cada uno de IL-6, IL-6R y gp130.
En los documentos US 5.670.373, 5.795.965, 5.817.790, 6.410.691 y EP 409 607B1 se describen anticuerpos contra hlL-6R. En los documentos US 5.888.510 y 6.723.319 se describen métodos terapéuticos
Breve resumen de la invención
En un primer aspecto, la invención desvela anticuerpos humanos, preferentemente anticuerpos humanos recombinantes, que se unen específicamente al receptor de interleucina 6 humano (hlL-6R). Estos anticuerpos se caracterizan por la unión a hlL-6R con gran afinidad y una cinética de disociación lenta, y por la capacidad para neutralizar la actividad de IL-6. Los anticuerpos pueden ser de longitud completa (por ejemplo, un anticuerpo IgG1 o lgG4) o pueden comprender solamente una porción de unión a antígeno (por ejemplo, un fragmento Fab, F(ab')2 o scFv), y pueden modificarse para afectar a la funcionalidad, por ejemplo, para eliminar funciones efectoras residuales (Reddy et al. (2000) J. Immunol. 164: 1925-1933). En una realización preferida, la invención proporciona un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une al receptor de IL-6 humano (SEC ID Nº: 1) con una KD de aproximadamente 500 pM o menos, según se mide por resonancia de plasmón superficial. En una realización más específica, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno tiene una KD de menos de 300 pM, o menos de 200 pM, o incluso menos de 100 pM. En diversas realizaciones, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo bloquea la actividad de hlL-6 con una CI50 de 250 pM o menos, según se mide por bioensayo de luciferasa. En realizaciones más específicas, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo presenta una CI50 de 150 pM o menos.
En aspectos relacionados, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de la invención se une a hlL-6R con una afinidad al menos 2 veces superior a con la que se une a IL-6R de mono. En realizaciones más preferidas, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno se une a proteína hlL-6R (SEC ID Nº: 1) con una afinidad que es hasta aproximadamente 3 veces superior respecto a su unión a IL-6R de mono (dominio extracelular de Macaca fascicularis mostrado en la SEC ID Nº: 251).
Por lo tanto, la invención proporciona un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor de interleucina 6 humano (hlL-6R) con una KD de 500 pM o menos, según se mide por resonancia de plasmón superficial, en el que:
(i)
las CDR de la cadena pesada comprenden las SEC ID Nº: 5, 7 y 9 como CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada respectivamente, y
(ii)
las CDR de la cadena ligera comprenden las SEC ID Nº: 13, 15 y 17 como CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena ligera respectivamente
En realizaciones específicas, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende la pareja de HCVR/LCVR de la SEC ID Nº: 3/11.
En un segundo aspecto, la invención proporciona moléculas de ácido nucleico aisladas que codifican un anticuerpo
o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de la invención. En una realización, la molécula de ácido nucleico de la invención codifica un anticuerpo o fragmento del mismo que comprende una HCVR como se ha descrito anteriormente. En realizaciones específicas, la molécula de ácido nucleico que codifica la HCVR es la SEC ID Nº: 2. En un aspecto relacionado, la invención proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica una LCVR como se ha descrito anteriormente. En realizaciones específicas, la molécula de ácido nucleico que codifica la LCVR es la SEC ID Nº: 10.
La invención desvela anticuerpos anti-hlL-6R o fragmentos de unión a antígeno de los mismos que tienen un patrón de glicosilación modificado. En algunas aplicaciones, puede ser útil una modificación para eliminar sitios de glicosilación no deseables, o un anticuerpo que carezca de un resto de fucosa en una cadena de oligosacárido, por ejemplo, para aumentar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) (véase Shield et al. (2002) JBC
277: 26733). En otras aplicaciones, puede realizarse una modificación de una galactosilación para modificar la citotoxicidad dependiente del complemento (CDC).
En aspectos adicionales, la invención proporciona vectores de expresión recombinantes que llevan las moléculas de ácido nucleico de la invención, y células hospedadoras en las que se han introducido dichos vectores, así como métodos de generación de los anticuerpos o fragmentos de unión a antígeno de la invención obtenidos por cultivo de las células hospedadoras de la invención. La célula hospedadora puede ser una célula procariota o eucariota, preferentemente la célula hospedadora es una célula de E. coli o una célula de mamífero, tal como una célula CHO.
En un aspecto adicional, la invención presenta una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo humano
o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo que se une específicamente a hlL-6R y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
En aspectos adicionales, la invención proporciona un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, como se ha definido anteriormente, para su uso en la atenuación o inhibición de una enfermedad o trastorno mediado por IL-6 en un ser humano, en el que la enfermedad o trastorno mediado por IL-6 es artritis, una enfermedad inflamatoria del intestino o lupus eritematoso sistémico. El trastorno se selecciona por tanto de, artritis, incluyendo artritis reumatoide crónica; una enfermedad inflamatoria del intestino, incluyendo enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa; o lupus eritematoso sistémico
En aspectos adicionales, la invención proporciona el uso de un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, como se ha definido anteriormente, en la fabricación de un medicamento para su uso para atenuar o inhibir una enfermedad o trastorno mediado por IL-6 en un ser humano, en el que la enfermedad o trastorno mediado por IL-6 es artritis, una enfermedad inflamatoria del intestino o lupus eritematoso sistémico.
Otros objetos y ventajas serán evidentes a partir de una revisión de la descripción detallada subsiguiente.
Descripción detallada
Antes de describir los presentes métodos, debe entenderse que esta invención no se limita a los métodos y condiciones experimentales particulares descritas, ya que dichos métodos y condiciones pueden variar. También debe entenderse que la terminología usada en la presente memoria es únicamente con el fin de describir realizaciones particulares, y no pretende ser limitante, ya que el alcance de la presente invención estará limitado únicamente por las reivindicaciones adjuntas.
A menos que se defina otra cosa, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente memoria tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto en la materia a la que pertenece la invención. Aunque puede usarse cualquier método y material similar o equivalente a los descritos en la presente memoria en la práctica
o ensayo de la presente invención, los métodos y materiales preferidos se describen a continuación.
La expresión "IL6R humano" (hlL-6R), como se usa en la presente memoria, pretende referirse a un receptor de citocina humano que se une específicamente a interleucina 6 (IL-6). El dominio extracelular de hlL-6R se muestra en la SEC ID Nº: 1.
El término "anticuerpo", como se usa en la presente memoria, pretende referirse a moléculas de inmunoglobulina que comprenden cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro. Cada cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (abreviada en la presente memoria como HCVR o VH) y una región constante de cadena pesada. La región constante de cadena pesada comprende tres dominios: CH1, CH2 y CH3. Cada cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (abreviada en la presente memoria como LCVR o VL) y una región constante de cadena ligera. La región constante de cadena ligera está compuesta por un dominio (CL1). Las regiones VH y VL pueden subdividirse adicionalmente en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de complementariedad (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones flanqueantes (FR). Cada VH y VL está compuesta por tres CDR y cuatro FR, dispuestas del extremo amino-terminal al extremo carboxi-terminal en el orden siguiente: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
La expresión "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo (o simplemente "porción de anticuerpo" o "fragmento de anticuerpo"), como se usa en la presente memoria, se refiere a uno o más fragmentos de un anticuerpo que conservan la capacidad para unirse específicamente a un antígeno (por ejemplo, hlL-6R). Se ha demostrado que la función de unión a antígeno de un anticuerpo puede realizarse por fragmentos de un anticuerpo de longitud completa. Los ejemplos de fragmentos de unión incluidos dentro de la expresión "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo incluyen (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente que consiste en los dominios VL, VH, CL1 y CH1; (ii) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos por un puente disulfuro en la región de bisagra; (iii) un fragmento Fd que consiste en los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv que consiste en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento dAb (Ward et al. (1989) Nature 241: 544-546), que consiste en un dominio VH; y (vi) una región determinante de complementariedad aislada (CDR). Además, aunque los dos dominios del fragmento Fv, VL y VH, están codificados por genes separados, pueden unirse, usando métodos recombinantes, mediante un enlazador sintético que permita generarlos como una sola cadena contigua en la que las regiones VL y VH se emparejan para formar moléculas monovalentes (conocidas como Fv de cadena sencilla (scFv); véase, por ejemplo, Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; y Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883). Dichos anticuerpos de cadena sencilla también pretenden incluirse dentro de la expresión "porción de unión a antígeno" de un anticuerpo. Se incluyen también otras formas de anticuerpos de cadena sencilla, tales como diacuerpos (véase, por ejemplo, Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad Sci. USA 90: 6444-6448).
Un anticuerpo "neutralizante" o "bloqueante", como se usa en la presente memoria, pretende referirse a un anticuerpo cuya unión a hlL-6R da como resultado la inhibición de la actividad biológica de hlL-6. Esta inhibición de la actividad biológica de hlL-6 puede evaluarse por medición de uno o más indicadores de actividad biológica de hlL6 conocidos en la técnica, tales como la activación celular inducida por hlL-6 y la unión de hlL-6 a hlL-6R (véanse los ejemplos a continuación).
Una "CDR" o región determinante de complementariedad es una región de hipervariabilidad intercalada dentro de regiones que están más conservadas, denominadas "regiones flanqueantes" (FR). En realizaciones diferentes del anticuerpo anti-hlL-6R o fragmento de la invención, las FR pueden ser idénticas a las secuencias de línea germinal humanas, o pueden estar modificadas de forma natural o artificial. Un grupo de CDR puede definirse como una secuencia de aminoácidos de consenso.
La expresión "resonancia de plasmón superficial”, como se usa en la presente memoria, se refiere a un fenómeno óptico que permite el análisis de interacciones a tiempo real por detección de alteraciones en las concentraciones de proteína dentro de una matriz biodetectora, por ejemplo usando el sistema BIAcore™ (Pharmacia Biosensor AB).
El término "epítopo" es un determinante antigénico que interacciona con un sitio de unión a antígeno específico en la región variable de una molécula de anticuerpo conocida como parátopo. Un solo antígeno puede tener más de un epítopo. Los epítopos pueden ser conformacionales o lineales. Un epítopo conformacional se produce por aminoácidos espacialmente yuxtapuestos de diferentes segmentos de la cadena polipeptídica lineal. Un epítopo lineal es uno producido por restos aminoacídicos adyacentes en una cadena polipeptídica. En ciertas circunstancias, un epítopo puede incluir restos de sacáridos, grupos fosforilo o grupos sulfonilo en el antígeno.
La expresión "identidad sustancial" o "sustancialmente idéntico", cuando se refiere a un ácido nucleico o fragmento del mismo, indica que, cuando está óptimamente alineado con las inserciones o deleciones de nucleótidos apropiadas con otro ácido nucleico (o su cadena complementaria), existe una identidad de secuencia de nucleótidos en al menos aproximadamente el 95% y, más preferentemente, al menos aproximadamente el 96%, 97%, 98% o 99% de las bases de nucleótidos, según se mide por cualquier algoritmo de identidad de secuencia bien conocido, tal como FASTA, BLAST o Gap, como se analizan a continuación.
Como se aplica a polipéptidos, la expresión "similitud sustancial" o "sustancialmente similar" significa que dos secuencias peptídicas, cuando están óptimamente alineadas, tal como mediante los programas GAP o BESTFIT usando los pesos de huecos por defecto, comparten una identidad de secuencia de al menos el 95%, aún más preferentemente una identidad de secuencia de al menos el 98% o 99%. Preferentemente, las posiciones de restos que no son idénticas difieren por sustituciones de aminoácidos conservativas. Una "sustitución de aminoácidos conservativa" es una en la que un resto aminoacídico se sustituye por otro resto aminoacídico que tiene una cadena lateral (grupo R) con propiedades químicas similares (por ejemplo, carga o hidrofobicidad). En general, una sustitución de aminoácido conservativa no cambiará sustancialmente las propiedades funcionales de una proteína. En casos en los que dos o más secuencias de aminoácidos difieren entre sí por sustituciones conservativas, el porcentaje de identidad de secuencia o grado de similitud puede ajustarse al alza para corregir por la naturaleza conservativa de la sustitución. Los medios para realizar este ajuste son bien conocidos por los expertos en la materia. Véase, por ejemplo, Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24: 307-331. Los ejemplos de grupos de aminoácidos que tienen cadenas laterales con propiedades químicas similares incluyen 1) cadenas laterales alifáticas: glicina, alanina, valina, leucina e isoleucina; 2) cadenas laterales de hidroxilo alifáticas: serina y treonina; 3) cadenas laterales que contienen amida: asparagina y glutamina; 4) cadenas laterales aromáticas: fenilalanina, tirosina y triptófano; 5) cadenas laterales básicas: lisina, arginina e histidina; 6) cadenas laterales ácidas: aspartato y glutamato, y 7) las cadenas laterales que contienen azufre son cisteína y metionina. Los grupos de sustitución de aminoácidos conservativos preferidos son: valina-leucina-isoleucina, fenilalanina-tirosina, lisina-arginina, alaninavalina, glutamato-aspartato y asparagina-glutamina. Como alternativa, una sustitución conservativa es cualquier cambio que tiene un valor positivo en la matriz de verosimilitud logarítmica PAM250 descrita en Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443 45. Una sustitución "moderadamente conservativa" es cualquier cambio que tiene un valor no negativo en la matriz de verosimilitud logarítmica PAM250.
La similitud de secuencia para polipéptidos, que también se denomina identidad de secuencia, se mide típicamente usando un software de análisis de secuencia. El software de análisis de proteína empareja secuencias similares usando medidas de similitud asignadas a diversas sustituciones, deleciones y otras modificaciones, incluyendo sustituciones de aminoácidos conservativas. Por ejemplo, el software GCG contiene programas tales como Gap y Bestfit que pueden usarse con parámetros por defecto para determinar la homología de secuencia o la identidad de secuencia entre polipéptidos estrechamente relacionados, tales como polipéptidos homólogos de diferentes especies de organismos o entre una proteína de tipo silvestre y una muteína de la misma. Véase, por ejemplo, GCG Versión 6.1. Las secuencias polipeptídicas también pueden compararse usando FASTA, usando los parámetros por defecto o recomendados, un programa en GCG Versión 6.1. FASTA (por ejemplo, FASTA2 y FASTA3) proporciona alineamientos y porcentajes de identidad de secuencia de las regiones del mejor solapamiento entre las secuencias de consulta y de búsqueda (Pearson (2000) anteriormente). Otro algoritmo preferido cuando se compara una secuencia de la invención con una base de datos que contiene un gran número de secuencias de diferentes organismos es el programa informático BLAST, especialmente blastp o tblastn, usando los parámetros por defecto. Véase, por ejemplo, Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403 410 y Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389 402.
Preparación de anticuerpos humanos
Los métodos para generar anticuerpos humanos incluyen, por ejemplo, Velocimmune™ (Regeneran Pharmaceuticals), tecnología XenoMouse™ (Green et al. (1994) Nature Genetics 7: 13-21; Abgenix), la estrategia de "minilocus" y la presentación en fago (y véanse, por ejemplo, los documentos US 5.545.807, US 6.787.637). La tecnología Velocimmune™ (documento US 6.596.541) incluye un método de generación de un anticuerpo totalmente humano de alta especificidad contra un antígeno seleccionado. Esta tecnología implica la generación de un ratón transgénico que tiene un genoma que comprende regiones variables de cadena pesada y ligera humanas unidas operativamente a loci de la región constante de ratón endógenos, de modo que el ratón produce un anticuerpo que comprende una región variable humana y una región constante de ratón en respuesta a una estimulación antigénica. El ADN que codifica las regiones variables de las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo se aísla y se une operativamente a ADN que codifica las regiones constantes de cadena pesada y ligera humanas. El ADN se expresa después en una célula capaz de expresar el anticuerpo totalmente humano. En una realización específica, la célula es una célula CHO.
Los anticuerpos pueden ser terapéuticamente útiles en el bloqueo de una interacción de ligando-receptor o la inhibición de la interacción del componente receptor, más que por destrucción de células a través de la fijación del complemento (citotoxicidad dependiente del complemento) (CDC) y de la participación de la citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC). La región constante de un anticuerpo es importante en la capacidad de un anticuerpo para fijar el complemento y mediar la citotoxicidad dependiente de células. Por lo tanto, el isotipo de un anticuerpo puede seleccionarse basándose en si es deseable para el anticuerpo mediar la citotoxicidad.
Las inmunoglobulinas humanas pueden existir en dos formas que están asociadas con la heterogeneidad de la bisagra. En una forma, una molécula de inmunoglobulina comprende una construcción estable de cuatro cadenas de aproximadamente 150-160 kDa en la que los dímeros se mantienen unidos por un enlace disulfuro de cadena pesada intercatenario. En una segunda forma, los dímeros no están unidos por enlaces disulfuro intercatenarios y se forma una molécula de aproximadamente 75-80 kDa compuesta por una cadena pesada y ligera acopladas covalentemente (medio anticuerpo). Estas formas han sido extremadamente difíciles de separar, incluso después de purificación por afinidad. La frecuencia de aparición de la segunda forma en diversos isotipos de IgG intacta es debida a, pero sin limitación, diferencias estructurales asociadas con el isotipo de la región de bisagra del anticuerpo. De hecho, una sola sustitución de aminoácido en la región de bisagra de la bisagra de lgG4 humana puede reducir significativamente la aparición de la segunda forma (Angal et al. (1993) Molecular Immunology 30: 105) hasta los niveles observados típicamente usando una bisagra de lgG1 humana. La presente invención incluye anticuerpos que tienen una o más mutaciones en la región de bisagra, CH2 o CH3 que pueden ser deseables, por ejemplo, en la producción, para mejorar el rendimiento de la forma de anticuerpo deseada.
Los anticuerpos de la invención se preparan preferentemente con el uso de la tecnología Velocimmune™. Un ratón transgénico en el que las regiones variables de cadena pesada y ligera de inmunoglobulina endógenas se sustituyen con las regiones variables humanas correspondientes se expone al antígeno de interés, y se recuperan las células linfáticas (tales como células B) de los ratones que expresan anticuerpos. Las células linfáticas pueden fusionarse con una línea celular de mieloma para preparar líneas celulares de hibridoma inmortales, y dichas líneas celulares de hibridoma se exploran y se seleccionan para identificar líneas celulares de hibridoma que produzcan anticuerpos específicos contra el antígeno de interés. El ADN que codifica las regiones variables de la cadena pesada y la cadena ligera puede aislarse y unirse a regiones constantes isotípicas deseables de la cadena pesada y la cadena ligera. Dicha proteína de anticuerpo puede producirse en una célula, tal como una célula CHO. Como alternativa, el ADN que codifica los anticuerpos quiméricos específicos de antígeno o los dominios variables de las cadenas ligera y pesada puede aislarse directamente a partir de linfocitos específicos de antígeno.
En un aspecto, el ratón transgénico comprende hasta 18 genes de cadena pesada variable humana funcionales y 12 genes de cadena ligera kappa variable humana funcionales. En otro aspecto, el ratón transgénico comprende hasta 39 genes de cadena pesada variable humana y 30 genes de cadena ligera kappa variable humana. En otro aspecto más, el ratón transgénico comprende hasta 80 genes de cadena pesada variable humana y 40 genes de cadena ligera kappa variable humana.
En general, los anticuerpos de la presente invención poseen afinidades muy elevadas, poseyendo típicamente valores de KD de aproximadamente 10-9 a aproximadamente 10-12 M, cuando se miden por su unión a antígeno inmovilizado en una fase sólida o en fase de solución.
Inicialmente, se aíslan anticuerpos quiméricos de alta afinidad que tienen una región variable humana y una región constante de ratón. Como se describe a continuación, los anticuerpos se caracterizan y se seleccionan por sus características deseables, incluyendo la afinidad de unión a hlL-6R, la capacidad para bloquear hlL-6 y/o la selectividad por la proteína humana. Las regiones constantes de ratón se sustituyen con una región constante humana deseada para generar el anticuerpo totalmente humano de la invención, por ejemplo lgG4 o lgG1 de tipo silvestre o modificada (por ejemplo, SEC ID Nº: 242, 243, 244). Aunque la región constante seleccionada puede variar de acuerdo con un uso específico, las características de unión a antígeno de alta afinidad y de especificidad de diana residen en la región variable.
Mapeo de epítopos y tecnologías relacionadas
Para explorar la búsqueda de anticuerpos que se unen a un epítopo particular, puede realizarse un ensayo rutinario de bloqueo cruzado tal como el descrito en Antibodies: A Laboratory Manual 1988 Cold Spring Harbor Laboratory, Harlow y Lane, eds. Otros métodos incluyen mutantes de barrido mediante alanina, transferencias de péptidos (Reineke (2004) Methods Mol Biol 248: 443-63) o análisis de escisión de péptidos como se describen en los ejemplos a continuación. Además, pueden emplearse métodos tales como la escisión de epítopos, la extracción de epítopos y la modificación química de antígenos (Tomer (2000) Protein Science: 9: 487-496).
La generación de perfiles asistida por modificaciones (MAP), también conocida como generación de perfiles de anticuerpos basada en la estructura del antígeno (ASAP), es un método que clasifica grandes cantidades de anticuerpos monoclonales (mAb) dirigidos contra el mismo antígeno de acuerdo con las similitudes del perfil de unión de cada anticuerpo con superficies de antígenos modificadas química o enzimáticamente (Publicación de Solicitud de Patente de Estados Unidos Nº 2004/0101920). Cada categoría puede reflejar un epítopo único diferente de forma distintiva de, o parcialmente solapante con un epítopo representado por otra categoría. Esta tecnología permite el filtrado rápido de anticuerpos genéticamente idénticos, de modo que la caracterización puede centrarse en anticuerpos genéticamente distintos. Cuando se aplica a la exploración de hibridomas, la MAP puede facilitar la identificación de clones de hibridoma poco frecuentes con características deseadas. La MAP puede usarse para separar los anticuerpos de hlL-6R de la invención en grupos de anticuerpos que se unen a diferentes epítopos.
Los agentes útiles para alterar la estructura del antígeno inmovilizado son enzimas, tales como, por ejemplo, enzimas proteolíticas y agentes químicos. La proteína antigénica puede inmovilizarse en superficies de microplacas biodetectoras o perlas de poliestireno. Estas últimas pueden procesarse, por ejemplo, con un ensayo tal como un ensayo de detección múltiple Luminex™ (Luminex Corp., TX). Debido a la capacidad de Luminex™ para manejar un análisis múltiple con hasta 100 tipos diferentes de perlas, el Luminex™ proporciona superficies antigénicas casi ilimitadas con diversas modificaciones, dando como resultado una resolución mejorada en la generación de perfiles de epítopos de anticuerpos sobre un ensayo de biodetector.
Administración terapéutica y formulaciones
La administración de entidades terapéuticas de acuerdo con la invención se administrará con vehículos, excipientes y otros agentes adecuados que se incorporan en formulaciones para proporcionar una transferencia, administración, tolerancia y similares mejoradas. Pueden encontrarse una multitud de formulaciones apropiadas en la lista de especialidades farmacéuticas conocida por todos los químicos farmacéuticos: Remington's Pharmaceutical Sciences (15ª ed, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1975), particularmente el Capítulo 87 por Blaug, Seymour, en el mismo. Estas formulaciones incluyen, por ejemplo, polvos, pastas, pomadas, gelatinas, ceras, lípidos oleosos, lípidos (catiónicos o aniónicos) que contienen vesículas (tales como Lipofectin™), conjugados de ADN, pastas de absorción anhidras, emulsiones de aceite en agua y de agua en aceite, emulsiones de carbowax (polietilenglicoles de diversos pesos moleculares), geles semisólidos y mezclas semisólidas que contienen carbowax. Cualquiera de las mezclas anteriores puede ser apropiada en tratamientos y terapias de acuerdo con la presente invención, con tal de que el ingrediente activo en la formulación no se inactive por la formulación y la formulación sea fisiológicamente compatible y tolerable con la vía de administración. Véase también Powell et al. PDA (1998) J Pharm SciTechnol.
52: 238-311 y las citas en el mismo para información adicional relacionada con excipientes y vehículos bien conocidos por los químicos farmacéuticos.
Ejemplos
Los ejemplos siguientes se presentan para proporcionar a los expertos en la materia una divulgación y descripción completas de cómo preparar y usar los métodos y composiciones de la invención, y no pretenden limitar el alcance de lo que los inventores consideran su invención. Se han realizado esfuerzos para asegurar la precisión con respecto a los números usados (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), pero deberían suponerse algunos errores y desviaciones experimentales. A menos que se indique otra cosa, las partes son partes en peso, el peso molecular es el peso molecular promedio, la temperatura es en grados centígrados, y la presión es la atmósferica o próxima a esta.
Ejemplo 1. Generación de anticuerpos humanos contra el receptor de IL-6 humano.
La inmunización de roedores puede realizarse por cualquier método conocido en la técnica (véase, por ejemplo, Harlow y Lane (1988) anteriormente; Malik y Lillehoj, Antibody techniques: Academic Press, 1994, CA). En una realización preferida, el antígeno hlL-6R se administra directamente a ratones que comprenden loci de ADN que codifican tanto la región variable de cadena pesada como la región variable de cadena ligera kappa de Ig humana (Velocimmune™, Regeneron Pharmaceuticals, Inc.; documento US 6.596.541), con un adyuvante para estimular la respuesta inmune. Dicho adyuvante incluye adyuvante completo e incompleto de Freund, sistema adyuvante MPL+TDM (Sigma) o RIBI (dipéptidos de muramilo) (véase O'Hagan, Vaccine Adjuvant, por Human Press, 2000, NJ). Dicho adyuvante puede prevenir la dispersión rápida del polipéptido por secuestro del antígeno en un depósito de administración prolongada local, y puede contener factores que puedan estimular la respuesta inmune del hospedador. En una realización, el hlL-6R se administra indirectamente como un plásmido de ADN que contiene el gen de hlL-6R y que expresa hlL-6R usando la maquinaria de expresión de proteína celular del hospedador para producir polipéptido antigénico in vivo. En ambas estrategias, el programa de inmunización requiere varias administraciones separadas unas cuantas semanas. La respuesta inmune de anticuerpo se controla mediante un inmunoensayo específico de antígeno convencional. Cuando los animales alcanzaron su respuesta inmune máxima, se recogieron las células B que expresaban anticuerpo y se fusionaron con células de mieloma de ratón para preservar su viabilidad, formando células de hibridoma. Para seleccionar anticuerpos monoclonales funcionalmente deseables, se exploraron los medios acondicionados de las células de hibridoma o células transfectadas para determinar su especificidad, afinidad de unión a antígeno y potencia en el bloqueo de la unión de hlL-6 a hlL-6R (descrito a continuación).
Ejemplo 2. Anticuerpos anti-hlL6R generados por aislamiento directo de esplenocitos
El ADN que codifica dominios VH y VL puede aislarse directamente a partir de una sola célula B positiva para antígeno. En resumen, el ratón transgénico inmunizado con hlL-6Ra se sacrificó y sus esplenocitos se recogieron. Los eritrocitos se eliminaron por lisis, seguido de sedimentación de los esplenocitos recogidos. Los esplenocitos resuspendidos se incubaron primero con un cóctel de IgG humana, FITC-anti-mFc y biotina-IL6Ra durante 1 hora. Las células teñidas se lavaron dos veces con PBS, después se tiñeron con un cóctel de IgG humana y de rata, APCanti-mlgM y SA-PE durante una hora. Las células teñidas se lavaron una vez con PBS y se analizaron por citometría de flujo en un MoFlo (Cytomation). Cada célula B positiva para IgG, negativa para IgM y positiva para antígeno se separó y se sembró en placas en un pocillo separado en una placa de 96 pocillos. Se realizó una RT-PCR de genes de anticuerpo a partir de estas células B de acuerdo con un método descrito por Wang et al. (2000) (J Immunol Methods 244: 217-225). En resumen, se sintetizaron los ADNc para cada célula B individual mediante RT-PCR. Cada producto de RT resultante se dividió después y se transfirió a dos pocillos correspondientes en dos placas de 96 pocillos. Un conjunto de los productos de RT resultantes se amplificó primero por PCR usando un cebador degenerado 5' específico para la secuencia líder de la región variable de la cadena pesada de IgG humana y un cebador 3' específico para la región constante de la cadena pesada de ratón, para formar un amplicón. El amplicón se amplificó después de nuevo por PCR usando un conjunto de cebador degenerado 5' específico para la región flanqueante 1 de la secuencia de la región variable de la cadena pesada de IgG humana y un cebador 3' anidado específico para la región constante de la cadena pesada de ratón. El otro conjunto de los productos de RT resultantes se amplificó primero por PCR usando un cebador degenerado 5' específico para la secuencia líder de la región variable de la cadena ligera kappa humana y un cebador 3' específico para la región constante de la cadena ligera kappa de ratón para formar un amplicón. El amplicón se amplificó después de nuevo por PCR usando un conjunto de cebador degenerado 5' específico para la región flanqueante 1 de la secuencia de la región variable de la cadena ligera kappa humana y un cebador 3' anidado específico para la región constante da la cadena ligera kappa de ratón. Los productos de PCR de cadena pesada y cadena ligera se clonaron en vectores de anticuerpo linealizados con Sap l que contenían la región constante de cadena pesada de IgG1 y la región constante de cadena ligera kappa, respectivamente. El plásmido de cadena pesada tiene un sitio lox2272 y un sitio lox511 flanqueando los casetes de expresión de cadena pesada. Además, inmediatamente cadena abajo del lox2272 en el plásmido de cadena pesada existe un gen de resistencia a higromicina que carece de un promotor y de un ATG iniciador. El gen de resistencia a higromicina también está unido transcripcionalmente a un gen de eGFP cadena abajo mediante una secuencia de IRES. El plásmido de cadena ligera tiene un sitio loxP y un sitio lox2272 flanqueando el casete de expresión de la cadena ligera. Además, el plásmido de cadena ligera tiene un promotor de SV40 inmediatamente antes de un ATG en el sitio lox2272, de modo que tras la integración en una célula hospedadora apropiada el promotor de SV40 proximal a lox2272 y el ATG iniciador del plásmido de cadena ligera se ponen adyacentes al gen de resistencia a higromicina en el plásmido de cadena pesada en la fase de lectura apropiada, para permitir la transcripción y traducción de los genes de resistencia a higromicina y eGFP. Los plásmidos recombinantes purificados que tenían una secuencia de región variable de cadena pesada y los plásmidos que tenían una secuencia de región variable de cadena ligera de la misma célula B se combinaron y transfectaron después junto con un plásmido que expresa la recombinasa Cre, en una línea celular hospedadora CHO modificada. La línea celular hospedadora CHO modificada contiene, de 5' a 3', un sitio loxP, un eCFP, un sitio lox2272, DsRed y un sitio lox511 en un locus transcripcionalmente activo. Por consiguiente, la célula CHO hospedadora puede aislarse por citometría de flujo como una célula positiva para azul, positiva para rojo y negativa para verde. Cuando los plásmidos recombinantes que expresan genes de cadena pesada y de cadena ligera se transfectan juntos con un plásmido que expresa la recombinasa Cre, la recombinación específica de sitio mediada por la recombinasa Cre da como resultado la integración de los plásmidos de anticuerpo en el locus cromosómico que contiene los sitios lox y el reemplazo de los genes de eCFP y DsRed. Después, los recombinantes pueden aislarse como células negativas para azul, negativas para rojo y positivas para verde por citometría de flujo. Por consiguiente, las células CHO
5 transfectadas con plásmidos recombinantes que tenían una secuencia de región variable de cadena pesada y plásmidos que tenían una secuencia de región variable de cadena ligera de la misma célula B se separaron por citometría de flujo, y los recombinantes apropiados que muestran el fenotipo negativo para azul, negativo para rojo y positivo para verde se aislaron, y se establecieron líneas celulares CHO que expresaban anticuerpo recombinante a partir de los clones aislados.
Ejemplo 3. Determinación de la afinidad de unión a antígeno
La KD de la unión de antígeno a los anticuerpos seleccionados descritos anteriormente se determinó por la cinética superficial en un ensayo de resonancia de plasmón superficial de biodetector a tiempo real (BIAcore™). Más
15 específicamente, la afinidad de los anticuerpos por IL-6R humano se midió usando un BIAcore® 2000 o BIAcore® 3000. El anticuerpo se capturó en una superficie con anti-IgG de ratón y se expuso a diversas concentraciones de proteína hlL-6R recombinante en forma monomérica o dimérica. Se realizó un análisis cinético usando el software BIAevaluation™ para obtener las constantes de velocidad de asociación y disociación.
20 Las afinidades de unión de los anticuerpos a hlL-6R también se midieron para medios acondicionados de hibridoma
o proteínas purificadas mediante inmunoensayo de competición basado en placa. Las proteínas de anticuerpo se purificaron usando cromatografía de afinidad de Proteína G a partir de medio de acondicionamiento de células de hibridoma que tenía agotada la IgG bovina (lnvitrogen). Para el ELISA de competición, en resumen, se premezclaron cantidades constantes de anticuerpo a diferentes niveles con diluciones seriadas de proteína antigénica, hlL-6R-hFc, 25 que variaban de 0 a 10 !g/ml, y se incubaron durante dos horas a temperatura ambiente para alcanzar un equilibrio de pseudo-unión entre el anticuerpo y el antígeno. Estas soluciones se transfirieron después a placas de 96 pocillos previamente recubiertas con hlL-6R-hFc para permitir que el anticuerpo libre en las mezclas se uniera al hlL-6R-hFc recubierto sobre la placa. Las placas se recubrieron típicamente con de 1 a 2 !g/ml de proteína hlL-6R-hFc en solución de PBS durante una noche a 4ºC, seguido de bloqueo inespecífico con BSA. Después de eliminar por 30 lavado el exceso de anticuerpo en solución, los anticuerpos unidos a la placa se detectaron con un reactivo de anticuerpo policlonal de cabra anti-IgG o IgA de ratón conjugado con HRP y se revelaron usando sustratos colorimétricos o quimioluminiscentes. La dependencia de las señales de las concentraciones de antígeno en solución se analizaron con un análisis de ajuste de 4 parámetros usando el software Prism" (Graph Pad) y se describió como CI50. También se llevó a cabo un inmunoensayo de competición usando un instrumento Kinexa™ en
35 fase de solución estable (Sapidyne Inc.).
Los resultados se muestran en la Tabla 1 (control: anticuerpo monoclonal humanizado contra IL-6R humano (Patente de Estados Unidos Nº 5.817.790 SEC ID Nº: 69 y 71). Anticuerpo (secuencias de aminoácidos de HCVR y LCVR): VQ8A9-6 (3, 11); VQ8F11-21 (19, 27); VV7G4-1 (35, 43); VV7G4-10 (51, 59), VV6C10-1 (67, 75); VV6C10-3
40 (83, 91); VV6C10-4 (99, 107); W6F12-11 (115, 123); VV9A6-11 (131, 139); W6A9-5 (147, 155), VV3D8-4 (163, 171); VV1G4-7 (179, 187); 248982-13-1-E5 (195, 203); 248982-13-2-A9 (211, 219). La KD de monómero y dímero se determinó por BIAcore™; la KD en solución por Kinexa™; la CI50 por ensayos de ELISA (n.d. = no determinada).
Tabla 1. Afinidad de unión a antígeno
Anticuerpo
Kd Monómero (nM) Kd Dímero(nM) Kd Monómero en solución (nM) ELISA CI50 Dímero(nM)
VQ8A9-6
0,222 0,101 0,120 0,004
VQ8F11-21
0,067 0,023 0,009 0,008
VV3D8-4
2,410 0,172 1,910 0,013
VV6A9-5
0,097 0,146 0,032 0,005
VV1G4-7
0,225 0,070 0,197 0,041
VV6C10-1
0,267 0,032 2,050 0,010
VV6F12-11
n.d. n.d n.d 0,033
VV7G4.10
n.d. n.d. n.d. 1,980
VV9A6-11
n.d. n.d. n.d. 0,347
VV6C10-3
n.d. n.d. n.d. 0,009
248982-13-1-E5
0,987 0,785 n.d. 0,360
248982-13-2-A9
2,870 n.d. n.d. 0,054
Anticuerpo
Kd Monómero (nM) Kd Dímero(nM) Kd Monómero en solución (nM) ELISA CI50 Dímero(nM)
Control
1,790 n.d. 1,960 n.d.
Ejemplo 4. Neutralización de la actividad de hlL-6
Las actividades de bloqueo de hlL-6 de los anticuerpos anti-hlL-6R de la invención se exploraron mediante
5 inmunoensayos de bloqueo de hlL-6, bioensayos de crecimiento celular dependiente de hlL-6 in vitro y resonancia de plasmón superficial (BIAcore™). El inmunoensayo se usó para explorar la capacidad del anticuerpo ensayado para bloquear la unión de hlL-6 a hlL-6R, y el bioensayo in vitro se usó para determinar la potencia de los anticuerpos en la neutralización de la transducción de señales celulares mediada por hlL-6R.
10 Para el inmunoensayo, se recubrió proteína recombinante hlL-6 sobre una placa de 96 pocillos en tampón PBS durante una noche a 4ºC. Esta placa se usó para capturar el hlL-6R-hFc libre de soluciones de muestra de anticuerpo, y la cantidad de hlL-6R-hFc capturado se cuantificó de acuerdo con la curva patrón. Las soluciones de muestra estaban compuestas por una cantidad constante de proteína recombinante hlL-6R-hFc (100 pM) y cantidades variables de anticuerpo, en medio acondicionado de hibridoma bruto o como proteína de anticuerpo
15 purificada, que varían de 0 a aproximadamente 50 nM en diluciones seriadas. Las mezclas de antígeno-anticuerpo se incubaron a temperatura ambiente durante �2 horas para permitir que la unión de antígeno-anticuerpo alcance el equilibrio. Las soluciones de muestra equilibradas se transfirieron después a las placas recubiertas con hlL-6 para la medición del hlL-6R-hFc libre. Después de 1 hora de unión, la placa se lavó y el hlL-6R-hFc unido se detectó usando anticuerpos policlonales de cabra anti-hFc conjugados con HRP (Jackson Immuno Research), y se reveló usando
20 sustrato de TMB (BD Pharmigen). Las CI50 se determinaron como la cantidad de anticuerpo necesaria para reducir el 50% del IL-6R-hFc detectable contra ligando hlL-6 unido a placa. Los resultados se muestran en la primera columna de la Tabla 2.
Además, la capacidad del anticuerpo de ensayo para bloquear la unión de hlL-6 al receptor hlL-6R se determinó
25 usando resonancia de plasmón superficial. Las moléculas de antígeno hlL-6R-hFc purificadas se capturaron mediante anticuerpos policlonales de cabra anti-IgG humana inmovilizados en la superficie de CM-5 a través de acoplamiento con amina a una densidad de 250 UR. La solución de hlL-6 (0,25 ml, 50 nM) se inyectó sobre la superficie de receptor y se registró la hlL-6 unida (primera inyección de IL-6). Después, la hlL-6 unida se eliminó con una estimulación de MgCI2 3 M, seguida de tampón de acondicionamiento. El anticuerpo anti-hlL6R en medio
30 acondicionado de hibridoma se inyectó sobre la superficie de receptor capturado, seguido de una segunda inyección de hlL-6. El porcentaje de reducción en la unión de hIL-6 resultante a partir de complejo de anticuerpo y receptor preformado se usó como una puntuación para definir los bloqueantes de hlL-6 de los no bloqueantes (segunda columna, Tabla 2).
35 Tabla 2. Neutralización de la unión de hlL-6
Anticuerpo
CI50 Inhibición de la unión de hlL6R/hlL6 (nM) Inhibición de la unión de hlL6/hlL6R (%) CI50 Inhibición de la proliferación celular de XG-1 (nM) CI50 actividad luciferasa de HepG2/Stat3 (nM)
VQ8A9-6
0,39 68 0,40 0,097
VQ8F11-21
0,12 98 0,62 0,135
VV3D8-4
0,61 93 >100 n.d.
VV6A9-5
0,35 100 1,10 0,188
VV1G4-7
1,10 34 1,80 0,578
VV6C10-1
4,60 61 >6,90 n.d.
VV6F12-11
2,20 n.d. n.d. n.d.
VV7G4-10
13,00 n.d. n.d. n.d.
VV9A6-11
0,50 n.d. n.d. n.d.
VV6C10-3
0,06 n.d. n.d. n.d.
Control
2,20 91 1,50 0,854
La capacidad de los anticuerpos de hlL-6R para bloquear la actividad de hlL-6 in vitro se midió en la línea de mieloma dependiente de hlL-6 XG-1. Células XG-1 mantenidas en medio que contenía hlL-6 se lavaron dos veces con medio sin hlL-6 y se cultivaron durante �24 horas en medio sin hlL-6 para reducir la hlL-6 residual. Las células 40 privadas de suero se centrifugaron después y se resuspendieron en el medio a 4 x 105 células por ml, y se
sembraron en placas 20.000 células por pocillo en una placa de cultivo de tejidos de 96 pocillos. Las proteínas de anticuerpo purificadas se diluyeron en serie en medio y se añadieron a las células sembradas en placas a concentraciones que variaban de 0 a 50 nM. Posteriormente, se añadió hlL-6 recombinante a los pocillos a una concentración final de 8 pM. Se dejó que las células crecieran durante 72 horas a 37ºC en una incubadora
5 humidificada de CO2 al 5%. Al final del periodo de crecimiento, se midieron las células vivas usando el kit CCK-8 (Dojindo, Japón). Las CI50 se determinaron como se ha descrito anteriormente, y se describen en la tercera columna de la Tabla 2.
La capacidad de los anticuerpos de hlL-6R para bloquear la actividad de hlL-6 también se midió in vitro en la línea
10 celular de hepatoma humano sensible a hlL-6, HepG2. Las células HepG2 se transfectaron con un plásmido indicador que contenía un elemento de respuesta STAT3 (transductor de señales y activador de la transcripción 3) unido a un gen de luciferasa. Las células transfectadas se trataron con tripsina, se centrifugaron y se resuspendieron en el medio a aproximadamente 2,5 x 105 células por ml y se sembraron en placas a 20.000 células por pocillo en una placa de cultivo de tejidos de 96 pocillos. Las proteínas de anticuerpo purificadas se diluyeron en serie en medio
15 y se añadieron a las células sembradas en placas a concentraciones que variaban de 0 a 100 nM. Posteriormente, se añadió hlL-6 recombinante a los pocillos a una concentración final de 50 pM. La respuesta se midió después de incubar las células durante 6 horas a 37ºC en una incubadora humidificada de CO2 al 5%. La actividad de luciferasa se midió con el sistema de ensayo de luciferasa Steady-Glo™ (Promega). Las CI50 se determinaron como se ha descrito anteriormente, y se describen en la cuarta columna de la Tabla 2.
Ejemplo 5. Diversidad de epítopos de unión
Se realizó un inmunoensayo de competición de unión a anticuerpo usando como control anticuerpo humanizado contra IL-6R humano. En resumen, se recubrió una placa inmunoabsorbente de 96 pocillos con 20 ng por pocillo de 25 proteína recombinante hlL-6R durante una noche a 4ºC. Después de bloquear la unión inespecífica con BSA, los sitios de unión de hlL-6R en una mitad de la placa se saturaron con unión del anticuerpo de control por adición de 500 ng del control por pocillo, y a la otra mitad de la placa se añadió tampón de unión solamente. Después de una unión de tres horas a temperatura ambiente, se adicionaron los anticuerpos purificados a una concentración final de 50 ng/ml con y sin el anticuerpo de control preexistente en el pocillo. Después de una hora de unión adicional, el 30 anticuerpo libre se eliminó por lavado y el anticuerpo unido a la placa se detectó con anticuerpo policlonal de cabra anti-IgG o IgA de ratón conjugado con HRP y la placa se reveló usando sustratos cromáticos de HRP, y se registró la absorbancia a 450 nm. Las deducciones en porcentaje de la unión de los anticuerpos anti-hlL6R por la presencia del anticuerpo de control se enumeran en la Tabla 3 a continuación. Se realizó un experimento similar usando la tecnología de resonancia de plasmón superficial (Tabla 3). Ambos métodos generaban resultados coherentes. Los
35 anticuerpos VQ8F11, VV3D8, VV6A9, VV6C10-1 se unían a epítopos que solapaban con el anticuerpo de control; mientras que los anticuerpos VQ8A9, VV1G4, VV6F12, VV7G4, VV9A6 y VV6C10-3 parecían unirse a epítopos distintos ya que la unión a antígeno no se bloqueaba por el anticuerpo de control. La competición parcial puede ser el resultado del impedimento estérico del primer anticuerpo unido, aun cuando los epítopos puedan no ser solapantes.
Tabla 3. Competición de la unión a antígeno con anticuerpo de control
Anticuerpo
BIAcore™ (% reducción) Inmunoensayo (% reducción)
VQ8A9-6
26 3
VQ8F11-21
96 79
VV3D8-4
97 84
VV6A9-5
96 84
VV1G4-7
12 3
VV6C10-1
90 80
VV6F12-11
n.d. 3
VV7G4-10
n.d. 26
VV9A6-11
n.d. 18
VV6C10-3
n.d. 1
Ejemplo 6. Propiedad de unión cruzada entre especies
45 Se ensayaron cuatro anticuerpos para determinar la reactividad cruzada con proteína recombinante IL-6R de mono usando la tecnología de BIAcore™. En resumen, se usó una microplaca biodetectora sobre la que se inmovilizó anticuerpo policlonal de cabra anti-Fc de ratón para presentar anticuerpos monoclonales anti-hlL-6R a una densidad de aproximadamente 75 UR. Se inyectó proteína IL-6R humana recombinante o monomérica de mono (Macaca fascicularis, dominio extracelular; SEC ID Nº: 251), a un intervalo de concentraciones entre 1,25-40 nM, sobre la superficie de anticuerpo. La unión del receptor al anticuerpo y la disociación del complejo unido se controlaron a tiempo real. Se obtuvo tanto la constante de velocidad de asociación (ka) como la constante de velocidad de disociación (kd) y se calculó la KD (Tabla 4).
Tabla 4. Comparación de la afinidad de unión a IL-6R humano y de mono
Anticuerpo
Antígeno ka (M-1S-1) kd (S-1) Kd (nM)
Control
IL6R humano 1,74E+05 1,67E-04 0,963
IL6R de mono
1,44E+05 1,68E-04 1,170
VQ8F11-21
IL6R humano 8,51 E+05 4,38E-05 0,051
IL6R de mono
3,39E+05 4,86E-05 0,143
VV1G4-7
IL6R humano 2,57E+05 6,18E-05 0,240
IL6R de mono
no unión
VV6A9-5
IL6R humano 5,18E+05 8,41 E-05 0,162
IL6R de mono
5,00E+05 7,70E-05 0,154
VQ8A9-6
IL6R humano 7,32E+05 2,76E-04 0,377
IL6R de mono
7,31E+05 4,16E-04 0,569
Entre los cuatro anticuerpos ensayados, VQ8F11, VV6A9 y VQ8A9 reaccionaban fuertemente con el receptor de
10 mono con valores de KD que diferían en hasta de aproximadamente 1,5 a aproximadamente 3 veces de la unión a receptor humano, respectivamente. VV1G4, que no se bloqueaba por el anticuerpo de control (Tabla 3), no mostraba unión al receptor de mono a pesar de la fuerte unión al receptor humano con una KD de 241 pM.
Ejemplo 7. Efecto de la región constante sobre la afinidad de unión
15 La afinidad de unión a hlL-6R monomérico de cuatro anticuerpos que tenían IgG de ratón, lgG1 humana o lgG4 humana (de tipo silvestre y modificados) se determinó usando BIAcore™ como se ha descrito anteriormente, excepto por que se usó una superficie de anticuerpo policlonal de cabra anti-Fc humana para capturar anticuerpos hlgG. Se inyectó hlL-6R monomérico a concentraciones de 12,5, 6,25, 3,12 y 1,56 nM. La capacidad de los anticuerpos para
20 neutralizar la transducción de señales de HepG2/STAT3 dependiente de hlL-6 también se determinó en un ensayo de luciferasa (CI50). Las CI50 para diferentes isotipos de IgG eran similares, sugiriendo la ausencia de efecto del isotipo sobre la afinidad del anticuerpo por el antígeno.
Tabla 5. Comparación de isotipos de IgG
Anticuerpo
IgG ka (M-1S-1) kd (S-1) Kd (nM) CI50 (nM)
VQ8F11-21
hlgG1 6,22E+05 4,54E-05 0,073 0,150
hlgG4
7,17E+05 5,22E-05 0,073 0,228
mlgG2a
7,86E+05 5,27E-05 0,067 0,135
modhlgG4
8,81E+05 4,705-05 0,053 0,249
VQ8A9-6
hlgG1 1,09E+06 2,60E-04 0,238 0,130
hlgG4
1,17E+06 2,35E-04 0,201 0,185
mlgG1
9,95E+05 2,21 E-04 0,222 0,097
VV6A9-5
hlgG1 7,12E+05 8,87E-05 0,125 0,204
hlgG4
5,67E+05 7,64E-05 0,135 0,343
mlgG2a
7,72E+05 7,52E-05 0,097 0,188
VQ1G4-21
hlgG1 3,34E+05 7,92E-05 0,237 0,767
hlgG4
2,73E+05 9,18E-05 0,336 0,528
mlgG2a
3,41E+05 7,66E-05 0,225 0,578
Aspectos de la divulgación
Lo que se indica a continuación son aspectos de la divulgación:
(1)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor de interleucina 6 humano (hlL-6R) con una KD de aproximadamente 500 pM o menor, y 300 pM o menor, según se mide por resonancia de plasmón superficial,.
(2)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (1) que se une al hlL-6R con una afinidad al menos 2 veces mayor con respecto a su unión al IL-6R de mono.
(3)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (1) o (2), que comprende un dominio de región determinante de complementariedad 3 (CDR3) de cadena pesada y un dominio CDR3 de cadena ligera, en el que
el dominio CDR3 de cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2- X3 - X4 - X5 - X6 - X7 -X8 - X9 - X10 - X11 - X12 - X13 - X14 - X15 - X16 - X17- X18- X19 (SEC ID Nº: 247) en la que X1 = Ala, X2 = Lys, X3 = Gly, X4 = Arg, X5 = Asp, X6 = Ser o Ala, X7 = Phe, X8 = Asp; X9 = Ile, X10 = Pro o ausente, X11 = Phe o ausente, X12 = Val o ausente, X13 = Tyr o ausente, X14 = Tyr o ausente, X15 = Tyr o ausente, X16 = Gly o ausente, X17 = Met o ausente, X18 = Asp o ausente y X19 = Val o ausente; y el dominio CDR3 de cadena ligera comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X5- X9 (SEC ID Nº: 250) en la que X1 = Gln, X2 = Gln o His, X3 = Ala, X4 = Asn o Tyr, X5 = Ser, X6 = Phe, X7 = Pro, X8 = Pro y X9 = Thr.
(4)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (3), que adicionalmente comprende un dominio CDR1 de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3
-
X4- X5 - X6 - X7 - X8(SEC ID Nº: 245) en la que X1 = Gly o Arg, X2 = Phe, X3 = Thr, X4 = Phe, X5 = Asp, X6 = Asp, X7 = Tyr y X8 = Ala; un dominio CDR2 de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8(SEC ID Nº: 246) en la que X1 = Ile o Val, X2 = Ser, X3 = Trp, X4 = Asn, X5 = Ser, X6 = Gly, X7 = Ser y X8 = Ile; un dominio CDR1 de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 -X4 - X5 - X6 - X7 - X8(SEC ID Nº: 248), en la que X1 = Gln, X2 = Gly, X3 = Ile, X4 = Ser, X5 = Ser y X6 = Trp; y un dominio CDR2 de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 -X2 -X3 (SEC ID Nº: 249), en la que X1 = Gly o Ala, X2 = Ala yX3 = Ser.
(5)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (1) o (2), que comprende:
un dominio CDR3 de cadena pesada seleccionado del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 25, 153, 9, 185, 41, 57, 73, 89, 105, 121, 137, 169, 201 y 217; y un dominio CDR3 de cadena ligera seleccionado del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 33, 161, 17, 193, 49, 65, 81, 97, 113, 129, 145, 177, 209 y 225.
(6)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (5), que adicionalmente comprende:
un dominio CDR1 de cadena pesada seleccionado del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 21, 149, 5,181, 37, 53, 69, 85, 101, 117, 133, 165, 197 y 213; un dominio CDR2 de cadena pesada seleccionado del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 23, 151, 7,183, 39, 55, 71, 87, 103, 119, 135, 167, 199 y 215; un dominio CDR1 de cadena ligera seleccionado del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 29, 157, 13, 189, 45, 61, 77, 93, 109, 125, 141, 173, 205 y 221; y un dominio CDR2 de cadena ligera seleccionado del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 31, 159, 15, 191, 47, 63, 79, 95, 111, 127, 143, 175, 207 y 223.
(7)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (5) o (6), en el que las CDR de cadena pesada y las CDR de cadena ligera comprenden las SEC ID Nº: 21, 23, 25 y las SEC ID Nº: 29, 31, 33; las SEC ID Nº: 149, 151, 153 y las SEC ID Nº: 157, 159, 161; las SEC ID Nº: 5, 7, 9 y las SEC ID Nº: 13, 15, 17; y las SEC ID Nº: 181, 183, 185 y las SEC ID Nº: 189, 191, 193, respectivamente.
(8)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (1) o (2), que comprende una región variable de cadena pesada (HCVR) seleccionada del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 19, 47, 3, 179, 227, 231, 35, 51, 67, 83, 99, 115, 131, 239, 241,163, 235, 195 y 211; y una región variable de cadena ligera (LCVR) seleccionada del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 27, 155, 11, 187, 229, 233, 43, 59, 75, 91, 107, 123, 139, 171, 237, 203 y 219.
(9)
Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con (8), que comprende los de pares HCVR/LCVR seleccionados del grupo que consiste en las SEC ID Nº: 19/27; 147/155; 3/11; 179/187; 227/229; 231/233; 35/43; 51/59; 67/75; 83/91; 99/107; 115/123; 131/139; 239/155; 241/155; 163/171; 235/237; 195/203 y 211/219.
(10)
Una molécula de ácido nucleico aislada que codifica un anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de acuerdo con una cualquiera de (1) a (9).
(11)
Un vector que comprende la secuencia de nucleótidos de acuerdo con (10).
(12)
Un sistema vector - hospedador para la producción de un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo que se une específicamente al receptor de IL-6 humano que comprende un vector de acuerdo con (11), en una célula huésped adecuada.
(13)
Un sistema vector - hospedador de acuerdo con (12), en el que la célula hospedadora es una célula procariota o eucariota seleccionada de una célula de E. coli o una célula CHO.
(14)
Un método para producir un anticuerpo anti-IL-6R o un fragmento de unión a antígeno del mismo, que comprende cultivar células de un sistema vector - hospedador de acuerdo con (12) o (13) en condiciones que permitan la producción del anticuerpo o fragmento del mismo y recuperar el anticuerpo o fragmento así producido.
(15)
El uso de un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de (1) to (9) en la preparación de un medicamento para su uso para atenuar o inhibir una enfermedad o un trastorno mediado por IL-6 en un ser humano.
(16)
Un anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de
(1)
a (9) para su uso en la atenuación o inhibición de una enfermedad o trastorno mediado por IL-6 en un ser humano.
(17)
Una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de (1) a (9) y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.
(18)
Un método para atenuar o inhibir una enfermedad o un trastorno mediado por IL-6 en un paciente humano, comprendiendo el método administrar a un paciente humano una cantidad eficaz de un anticuerpo
o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de (1) a (9).
(19)
Un método de acuerdo con (18), en el que la enfermedad o trastorno mediado por IL-6 es artritis, tal como artritis reumatoide crónica; una enfermedad inflamatoria del intestino, tal como enfermedad de Crohn
o colitis ulcerosa; o lupus eritematoso sistémico.
Listado de secuencias
<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc.
<120> Anticuerpos de alta afinidad contra el receptor de IL-6 humano
<130> 6010A-WO
<140> A asignar
<141>
<150> 60/810.664
<151>
<150> 60/843.232
<151>
<160> 251
<170> FastSEQ para Windows Versión 4.0
<210> 1
<211> 358
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<400> 1
<210> 2 10 <211> 379
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220> 15 <223> Sintético
<400> 2
<210> 3
<211> 126
<212> PRT 5 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
10 <400> 3
<210> 4 15 <211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220> 20 <223> Sintético
<400> 4 ggattcatct ttgatgatta tgcc 24
25 <210> 5
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
30 <220>
<223> Sintético
<400> 5
<210> 6
<211> 24
<212> ADN 40 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético <400> 6 attagttgga atagtggtag cata 24
<210> 7
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 7
15
<210> 8 <211> 57 <212> ADN <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
25
<400> 8 gcaaaagatg gaggcagcag ctggttaccg ttcgtctact actacggtat ggacgtc 57
<210> 9 <211> 19 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
35
<400> 9
<210> 10
<211> 325
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 11
<210> 11
<211> 108
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
10
<210> 12 <211> 18 <212> ADN <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
15
<400> 12 cagagtatta gcagcaac 18
20
<210> 13 <211> 6 <212> PRT <213> Secuencia artificial
25
<220> <223> Sintético <400> 13
30
<210> 14 <211> 9 <212> ADN <213> Secuencia artificial
35
<220> <223> Sintético
40 45
<400> 14 ggtgcatcc 9 <210> 15 <211> 3 <212> PRT <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
50
<400> 15
5
<210> 16 <211> 30 <212> ADN <213> Secuencia artificial
10
<220> <223> Sintético <400> 16 cagcagtata gtagctggcc tccgtacact 30
15
<210> 17 <211> 10 <212> PRT <213> Secuencia artificial
20
<220> <223> Sintético
<400> 17
25
<210> 18
<211> 349
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
30
<220>
<223> Sintético
<400> 18
35
<210> 19
<211> 116 40 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 45
<400> 19
<210> 20 <211> 24 <212> ADN <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
<400> 20 agatttacct ttgatgatta tgcc
24
<210> 21 <211> 8 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
<400> 21
<210> 22 <211> 24 <212> ADN <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
<400> 22 attagttgga atagtggtag aata
24
<210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
<400> 23
5
<210> 24 <211> 27 <212> ADN <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
10
<400> 24 gcaaaaggcc gagattcttt tgatatc 27
15
<210> 25 <211> 9 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
20
<400> 25
<210> 26 25 <211> 322
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220> 30 <223> Sintético
<400> 26
35
<210> 27
<211> 107
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
40
<220>
<223> Sintético
<400> 27
45
<210> 28
<211> 18
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 28 cagggtatta gcagctgg 18
<210> 29
<211> 6
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 29
<210> 30
<211> 9
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 30 ggtgcatcc 9
<210> 31
<211> 3
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 31
<210> 32
<211> 27
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 32 caacaggcta acagtttccc gtacact 27
<210> 33
<211> 9
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 33
<210> 34
<211> 370
<212> ADN 10 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
15 <400> 34
<210> 35 20 <211> 123
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220> 25 <223> Sintético
<400> 35
30
<210> 36 <211> 24 <212> ADN <213> Secuencia artificial
35
<220> <223> Sintético
40
<400> 36 24 ggttacactt ttacccatta tggt 24
<210> 37
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 37
<210> 38
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 38 24 atcagcgctt acaatgatga caca 24
<210> 39
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 39
<210> 40
<211> 48
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 40 gcgagagaag cgcagctcgt cctctactac tactacggta tggacgtc 48
<210> 41
<211> 16
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 41
<210> 42
<211> 322
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 42
10 <210> 43
<211> 107
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
15 <220>
<223> Sintético
<400> 43
20 25
<210> 44 <211> 18 <212> ADN <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
30
<400> 44 cagagtgtta gcagcttc 18
35
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<220> <223> Sintético
40
<400> 45
<210> 46 45 <211> 9
<212> ADN
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<223> Sintético
5 <400> 46 gatgcatcc 9
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<211> 3
<212> PRT
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<220>
<223> Sintético 15
<400> 47
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25
<220>
<223> Sintético
<400> 48
cagcagcgta acaattggcc gtacatt
27
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35
<220>
<223> Sintético
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<220>
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10
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20 25
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30
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<223> Sintético
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10
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<223> Sintético 50
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<220>
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<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
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<223> Sintético
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<220>
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<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
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20
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<220>
<223> Sintético
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<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
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5
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15
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20
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35
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<212> PRT
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<220>
<223> Sintético
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<223> Sintético
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<212> PRT
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<220>
<223> Sintético
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<211> 24
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<220>
<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
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5
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10
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15
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<220> <223> Sintético
20
<400> 121
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<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 30
<400> 122
35 <210> 123
<211> 107
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
40 <220>
<223> Sintético
<400> 123
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<220>
<223> Sintético
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<212> PRT
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<220>
<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
<400> 127
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<213> Secuencia artificial
5
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<400> 129
20
<210> 130
<211> 370
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25
<220>
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30
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<220>
<223> Sintético 40
<400> 131
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<212> ADN
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<220>
<223> Sintético
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<220>
<223> Sintético
<400> 133
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<211> 24
<212> ADN
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<220>
<223> Sintético
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<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 135
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<220>
<223> Sintético
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<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 137
<210> 138
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<220>
<223> Sintético 15
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<211> 107
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25 <220>
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<400> 139
35
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<220> <223> Sintético
40
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45
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<220>
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<220>
<223> Sintético
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<220>
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<210> 145
<211> 9
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<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 145
<210> 146
<211> 349
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<220>
<223> Sintético
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<220>
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<400> 147
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30 35
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<220>
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<220>
<223> Sintético
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<212> ADN
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<220>
<223> Sintético
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<210> 153
<211> 9
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 153
<210> 154
<211> 322
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 154
<210> 155
<211> 107
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
5
<220>
<223> Sintético
<400> 155
10
15
<210> 156 <211> 18 <212> ADN <213> Secuencia artificial
20
<220> <223> Sintético <400> 156 cagggtatta gcagctgg 18
25
<210> 157 <211> 6 <212> PRT <213> Secuencia artificial
30
<220> <223> Sintético
<400> 157
35 40
<210> 158 <211> 9 <212> ADN <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
45
<400> 158 gctgcatcc 9
50
<210> 159 <211> 3 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 159
<210> 160 <211> 27 <212> ADN <213> Secuencia artificial
15
<220> <223> Sintético <400> 160 caacatgctt acagtttccc gtacact 27
<210> 161 <211> 9 <212> PRT <213> Secuencia artificial
25
<220> <223> Sintético
<400> 161
<210> 162
<211> 349
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 162
<210> 163
<211> 116
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 163
5
<210> 164 <211> 24 <212> ADN <213> Secuencia artificial
10
<220> <223> Sintético <400> 164 ggattcacct ttgatgatta tgcc 24
15
<210> 165 <211> 8 <212> PRT <213> Secuencia artificial
20
<220> <223> Sintético
<400> 165
25 30
<210> 166 <211> 24 <212> ADN <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
35
<400> 166 attagttgga acagtggtag aata 24
40
<210> 167 <211> 8 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220> <223> Sintético
45
<400> 167
5
<210> 168 <211> 27 <212> ADN <213> Secuencia artificial
10
<220> <223> Sintético <400> 168 gcaaaaggcc gggatgcttt tgatatc 27
15
<210> 169 <211> 9 <212> PRT <213> Secuencia artificial
20
<220> <223> Sintético
<400> 169
25
<210> 170
<211> 322
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
30
<220>
<223> Sintético
<400> 170
35
<210> 171
<211> 107 40 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 45
<400> 171
<210> 172
<211> 18
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 172 cagggtatta gcagctgg 18
<210> 173
<211> 6
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 173
<210> 174
<211> 9
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 174 gctgcatcc 9
<210> 175
<211> 3
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 175
<210> 176
<211> 27
<212> ADN <213> Secuencia artificial
5
<220> <223> Sintético
<400> 176 caacaggcta acagtttccc gtacact
27
10
<210> 177 <211> 9 <212> PRT <213> Secuencia artificial
15
<220> <223> Sintético
<400> 177
<210> 178
<211> 361
<212> ADN 25 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
30 <400> 178
<210> 179 35 <211> 120
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220> 40 <223> Sintético
<400> 179
<210> 180
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 180 ggatacacct tcacctctta tgat 24
<210> 181
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 181
<210> 182
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 182 atgaacccaa acagtggtaa caca 24
<210> 183
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 183 <210> 187
5
<210> 184 <211> 39 <212> ADN <213> Secuencia artificial
10
<220> <223> Sintético <400> 184 gcgcgagact acagtagcca ctactacggt ttggacgtc 39
15
<210> 185 <211> 13 <212> PRT <213> Secuencia artificial
20
<220> <223> Sintético
<400> 185
25
<210> 186
<211> 322
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
30
<220>
<223> Sintético
<400> 186
35
<211> 107 40 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 45
<400> 187
<210> 188
<211> 18
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 188 caggacatta gcaattat 18
<210> 189
<211> 6
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 189
<210> 190
<211> 9
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 190 gttgcatcc 9
<210> 191
<211> 3
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 191
<210>
192
<210>
194
<211> 30 <212> ADN <213> Secuencia artificial
5
<220> <223> Sintético
10 15
<400> 192 caacagttta atagttaccc gctcactttc <210> 193 <211> 10 <212> PRT <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético 30
20
<400> 193
<211> 378 25 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 30
<400> 194
35 <210> 195
<211> 126
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
40 <220>
<223> Sintético
<400> 195
<210> 196
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 196 ggattcacct ttgatgatta tgcc 24
<210> 197
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 197
<210> 198
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 198 attagttgga atagtggggc cata 24
<210> 199
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 199
5
<210> 200 <211> 57 <212> ADN <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
10
<400> 200 acaaaagaag aagtgggagc tacggtggat tatttctact tctacggtat ggacgtc 57
15
<210> 201 <211> 19 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220> <223> sintético
20
<400> 201
<210> 202 25 <211> 318
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220> 30 <223> Sintético
<400> 202
35
<210> 203
<211> 106
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
40
<220>
<223> Sintético
<400> 203
45
<210> 204
<211> 18
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 204 cagagtgtta gcaactac 18
<210> 205
<211> 6
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 205
<210> 206
<211> 9
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 206 gatgcatcc 9
<210> 207
<211> 3
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 207
<210> 208
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 208 cagcagcgta gcaactggcc tacg 24
<210> 209
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 209
<210> 210
<211> 348
<212> ADN 10 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
15 <400> 210
<210> 211 20 <211> 116
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220> 25 <223> Sintético
<400> 211 <220>
30
<210> 212 <211> 24 <212> ADN <213> Secuencia artificial
35
<220> <223> Sintético
40 45
<400> 212 ggattcacct ttgatgatta tgccc <210> 213 <211> 8 <212> PRT <213> Secuencia artificial 24
<223> Sintético
<400> 213
<210> 214
<211> 24
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 214 attagttgga atagtggtag ggta 24
<210> 215
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 215
<210> 216
<211> 27
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 216 acaaaaggcc gggatgcttt tgatatc 27
<210> 217
<211> 9
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 217
<210> 21
<211> 321
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 218
<210> 219
<211> 107 5 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 10
<400> 219
15
<210> 220 <211> 18 <212> ADN <213> Secuencia artificial
20
<220> <223> Sintético
25 30
<400> 220 cagggtatta gcagctgg <210> 221 <211> 6 <212> PRT <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético 18
35
<400> 221
40
<210> 222 <211> 9 <212> ADN <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 222
gctgcatcc 9 5
<210> 223
<211> 3
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 223 15
<210> 224
<211> 27
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
25
<400> 224
caacaggcta acagtttccc gtacact
27
<210> 225
<211> 9
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
35
<223> Sintético
<400> 225
<210> 226
<211> 378
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 226
<210> 227
<211> 126
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 227
<210> 228
<211> 324 10 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 15
<400> 228
20 <210> 229
<211> 108
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
25 <220>
<223> Sintético
<400> 229
<210> 230
<211> 348 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 230
10
<210> 231
<211> 116
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
15
<220>
<223> Sintético
<400> 231
20
<210> 232
<211> 321 25 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 30
<400> 232
35 <210> 233
<211> 107
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
40 <220>
<223> Sintético
<400> 233
5 <210> 234
<211> 360
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
10 <220>
<223> Sintético
<400> 234
<210> 235
<211> 120
<212> PRT 20 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
25 <400> 235
<210> 236
<211> 321
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<400> 236
<210> 237
<211> 107 10 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 15
<400> 237
<210> 238 20 <211> 349
<212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220> 25 <223> Sintético
<400> 238
30
<210> 239
<211> 116
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
35
<220>
<223> Sintético
<400> 239
40
<210> 240
<211> 348 5 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 10
<400> 240
15 <210> 241
<211> 116
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
20 <220>
<223> Sintético
<400> 241
<210> 242
<211> 330
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<210> 243
<211> 327
<212> PRT 10 <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
15 <400> 243
<210> 244
<211> 327 5 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético 10
<400> 244
5
<210> 245 <211> 6 <212> PRT <213> Secuencia artificial
10 15
<220> <223> Sintético <220> <221> VARIANTE <222> (1)...(6) <223> Xaa = Cualquier aminoácido <400> 245
20
<210> 246 <211> 3 <212> PRT <213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<220>
<221> VARIANTE
<222> (1)...(3)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido
<400> 246
<210> 247
<211> 10
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<220>
<221> VARIANTE
<222> (1)...(10)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido
<400> 247
<210> 248
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<220>
<221> VARIANTE
<222> (1)...(8)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido
<400> 248
<210> 249
<211> 8
<212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintético
<220>
<221> VARIANTE
<222> (1)...(8)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido
<400> 249
5
<210> 250 <211> 19 <212> PRT <213> Secuencia artificial <220> <223> Sintético
10
<220> <221> VARIANTE <222> (1)...(19) <223> Xaa = Cualquier aminoácido
15
<400> 250
<210> 251
<211> 311
<212> PRT
<213> Macaca fascicularis
<400> 251

Claims (14)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor de interleucina 6 humano (hlL-6R) con una Kd de 500 pM o inferior, según se mide por resonancia de plasmón superficial, en el que:
    (i)
    las CDR de la cadena pesada comprenden las SEC ID Nº: 5, 7 y 9 como CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada respectivamente, y
    (ii)
    las CDR de la cadena ligera comprenden las SEC ID Nº: 13, 15 y 17 como CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena ligera respectivamente
  2. 2.
    Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende la pareja de HCVR/LCVR de la SEC ID Nº: 3/11.
  3. 3.
    Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, que se une específicamente al hlL-6R con una KD de 300 pM o inferior, según se mide por resonancia de plasmón superficial.
  4. 4.
    Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con la reivindicación 1, 2 o 3, que se une al hlL-6R con una afinidad al menos 1,5 veces superior respecto a la unión al IL-6R de mono.
  5. 5.
    El anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el fragmento de unión a antígeno se selecciona de Fab, F(ab')2 y scFv.
  6. 6.
    Una molécula de ácido nucleico aislada que codifica un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
  7. 7.
    Un vector de expresión que comprende la molécula de ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 6.
  8. 8.
    Una célula hospedadora aislada que comprende un vector de expresión de acuerdo con la reivindicación 7.
  9. 9.
    La célula hospedadora de acuerdo con la reivindicación 8, en el que la célula hospedadora es una célula procariota o eucariota seleccionada de una de E. coli o una célula CHO.
  10. 10.
    Un método para producir un anticuerpo anti-IL-6R o fragmento de unión a antígeno del mismo, que comprende cultivar la célula hospedadora de acuerdo con la reivindicación 8 o 9 en condiciones que permitan la producción del anticuerpo o fragmento del mismo y la recuperación del anticuerpo o fragmento así producido.
  11. 11.
    El uso de un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en la fabricación de un medicamento para su uso para atenuar o inhibir una enfermedad o trastorno mediado por IL-6 en un ser humano, en el que la enfermedad o trastorno mediado por IL-6 es artritis, una enfermedad inflamatoria del intestino o lupus eritematoso sistémico.
  12. 12.
    Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para su uso en la atenuación o inhibición de una enfermedad o trastorno mediado por IL-6 en un ser humano, en el que la enfermedad o trastorno mediado por IL-6 es artritis, una enfermedad inflamatoria del intestino o lupus eritematoso sistémico.
  13. 13.
    Una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.
  14. 14.
    El uso de acuerdo con la reivindicación 11 o un anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 12, en el que dicha artritis es artritis reumatoide crónica, o dicha enfermedad inflamatoria del intestino es la enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa.
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Families Citing this family (392)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US20050144655A1 (en) 2000-10-31 2005-06-30 Economides Aris N. Methods of modifying eukaryotic cells
DK2314629T4 (da) 2002-07-18 2023-02-06 Merus Nv Rekombinant produktion af blandinger af antistoffer
USRE47770E1 (en) 2002-07-18 2019-12-17 Merus N.V. Recombinant production of mixtures of antibodies
WO2004106375A1 (en) 2003-05-30 2004-12-09 Merus Biopharmaceuticals B.V. I.O. Fab library for the preparation of anti vegf and anti rabies virus fabs
US20100069614A1 (en) 2008-06-27 2010-03-18 Merus B.V. Antibody producing non-human mammals
AR058135A1 (es) 2005-10-21 2008-01-23 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agentes para el tratamiento de cardiopatias
CN104761637B (zh) 2006-03-31 2021-10-15 中外制药株式会社 调控抗体血液动力学的方法
JP5754875B2 (ja) 2006-04-07 2015-07-29 国立大学法人大阪大学 筋再生促進剤
JP5307708B2 (ja) 2006-06-02 2013-10-02 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ヒトｉｌ−６受容体に対する高親和性抗体
US8080248B2 (en) 2006-06-02 2011-12-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of treating rheumatoid arthritis with an IL-6R antibody
WO2008020079A1 (en) 2006-08-18 2008-02-21 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of deseases and disorders associated with il-6-mediated signalling
US7608693B2 (en) 2006-10-02 2009-10-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High affinity human antibodies to human IL-4 receptor
ES2433380T3 (es) * 2006-11-30 2013-12-10 Medimmune Limited Anticuerpos específicos para el complejo de interleucina 6 y el receptor de interleucina 6
RU2448979C2 (ru) 2006-12-14 2012-04-27 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Антитела человека к дельта-подобному лиганду-4 человека
TWI438208B (zh) 2007-01-23 2014-05-21 中外製藥股份有限公司 抑制慢性排斥反應之藥劑
KR20170036814A (ko) * 2007-05-21 2017-04-03 앨더바이오 홀딩스 엘엘씨 신규한 래빗 항체 인간화 방법 및 인간화된 래빗 항체
US9701747B2 (en) 2007-05-21 2017-07-11 Alderbio Holdings Llc Method of improving patient survivability and quality of life by anti-IL-6 antibody administration
DK2164514T3 (en) 2007-05-21 2017-02-27 Alderbio Holdings Llc Antibodies to IL-6 and its use
US8252286B2 (en) 2007-05-21 2012-08-28 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
US20090238825A1 (en) * 2007-05-21 2009-09-24 Kovacevich Brian R Novel rabbit antibody humanization methods and humanized rabbit antibodies
US8062864B2 (en) 2007-05-21 2011-11-22 Alderbio Holdings Llc Nucleic acids encoding antibodies to IL-6, and recombinant production of anti-IL-6 antibodies
US8404235B2 (en) 2007-05-21 2013-03-26 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US8178101B2 (en) 2007-05-21 2012-05-15 Alderbio Holdings Inc. Use of anti-IL-6 antibodies having specific binding properties to treat cachexia
US7906117B2 (en) 2007-05-21 2011-03-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever
MX2010001395A (es) 2007-08-10 2010-03-10 Regeneron Pharma Anticuerpos humanos de alta afinidad de factor de crecimiento de nervio humano.
MX2010003329A (es) 2007-09-26 2010-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-receptor de il-6.
ES2595638T3 (es) 2007-09-26 2017-01-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Método para modificar el punto isoeléctrico de un anticuerpo mediante la sustitución de aminoácidos en una CDR
KR101680906B1 (ko) 2007-09-26 2016-11-30 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항체 정상영역 개변체
KR102057826B1 (ko) 2008-04-11 2019-12-20 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 복수 분자의 항원에 반복 결합하는 항원 결합 분자
MX2010012031A (es) * 2008-05-13 2011-01-20 Novimmune Sa Anticuerpos anti-il-6/il-6r y metodos de uso de los mismos.
EP2669298A3 (en) * 2008-05-23 2014-02-26 Ablexis, LLC Single variable immunoglobulin domain comprising VL-DH-JL
CA2728243C (en) 2008-06-05 2020-03-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Il-6 inhibitor for suppressing neuroinvasion in pancreatic cancer
EP2147594B1 (en) 2008-06-27 2013-11-13 Merus B.V. Antibody producing non-human mammals
TWI440469B (zh) * 2008-09-26 2014-06-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Improved antibody molecules
AU2012200724B8 (en) * 2008-09-26 2014-09-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Improved antibody molecules
AU2009313958B2 (en) * 2008-11-13 2015-09-10 Femta Pharmaceuticals, Inc. Humanized anti-IL-6 antibodies
US8337847B2 (en) 2008-11-25 2012-12-25 Alderbio Holdings Llc Methods of treating anemia using anti-IL-6 antibodies
US9452227B2 (en) 2008-11-25 2016-09-27 Alderbio Holdings Llc Methods of treating or diagnosing conditions associated with elevated IL-6 using anti-IL-6 antibodies or fragments
US8992920B2 (en) 2008-11-25 2015-03-31 Alderbio Holdings Llc Anti-IL-6 antibodies for the treatment of arthritis
US8323649B2 (en) 2008-11-25 2012-12-04 Alderbio Holdings Llc Antibodies to IL-6 and use thereof
US8420089B2 (en) 2008-11-25 2013-04-16 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US9212223B2 (en) 2008-11-25 2015-12-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
JO3672B1 (ar) 2008-12-15 2020-08-27 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية عالية التفاعل الكيماوي بالنسبة لإنزيم سبتيليسين كنفرتيز بروبروتين / كيكسين نوع 9 (pcsk9).
AU2010217120B2 (en) * 2009-02-24 2014-11-20 Novartis Ag Methods for identifying immunobinders of cell-surface antigens
MX352922B (es) * 2009-02-24 2017-12-14 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Métodos para identificar inmunoligadores de los antígenos de la superficie celular.
EP2826789A1 (en) 2009-03-19 2015-01-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody constant region variant
WO2010106812A1 (en) * 2009-03-19 2010-09-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical formulation containing improved antibody molecules
JP5717624B2 (ja) 2009-03-19 2015-05-13 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
GB0905023D0 (en) 2009-03-24 2009-05-06 Univ Erasmus Medical Ct Binding molecules
NZ595461A (en) 2009-04-10 2013-01-25 Ablynx Nv Improved amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of il-6r related diseases and disorders
WO2010115995A2 (en) * 2009-04-10 2010-10-14 Ablynx Nv Improved amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of il-6r related diseases and disorders
DK3622815T3 (da) 2009-07-08 2023-06-26 Kymab Ltd Gnavermodeller og terapeutiske molekyler
US9445581B2 (en) 2012-03-28 2016-09-20 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
JO3182B1 (ar) 2009-07-29 2018-03-08 Regeneron Pharma مضادات حيوية بشرية عالية الالفة مع تولد الاوعية البشرية - 2
SI2493922T1 (sl) * 2009-10-26 2017-06-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Postopek za proizvodnjo glikoziliranega imunoglobulina
US9775921B2 (en) 2009-11-24 2017-10-03 Alderbio Holdings Llc Subcutaneously administrable composition containing anti-IL-6 antibody
CN102740888B (zh) 2009-11-24 2016-10-12 奥尔德生物制药公司 Il-6抗体及其用途
ES2724975T3 (es) 2009-12-10 2019-09-18 Regeneron Pharma Ratones que producen anticuerpos de cadena pesada
JO3274B1 (ar) 2009-12-24 2018-09-16 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية للبروتين 4 المشابه لأجيوبيوتين البشري
JO3417B1 (ar) 2010-01-08 2019-10-20 Regeneron Pharma الصيغ المستقرة التي تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد مستقبل( interleukin-6 (il-6r
AR080428A1 (es) 2010-01-20 2012-04-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulaciones liquidas estabilizadas contentivas de anticuerpos
JO3183B1 (ar) 2010-01-29 2018-03-08 Regeneron Pharma طرق لمعالجة أمراض المناعة الذاتية مضادات dll4
SMT202600080T1 (it) 2010-02-08 2026-03-09 Regeneron Pharma Topo con catena leggera comune
US20120021409A1 (en) 2010-02-08 2012-01-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Common Light Chain Mouse
US20130045492A1 (en) 2010-02-08 2013-02-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain
US9796788B2 (en) 2010-02-08 2017-10-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire
CA2800065A1 (en) * 2010-05-21 2011-11-24 Peptimed, Inc. Reagents and methods for treating cancer
JO3340B1 (ar) 2010-05-26 2019-03-13 Regeneron Pharma مضادات حيوية لـعامل تمايز النمو 8 البشري
WO2011149051A1 (ja) 2010-05-28 2011-12-01 中外製薬株式会社 抗腫瘍t細胞応答増強剤
EP2582389B1 (en) 2010-06-16 2018-02-21 Trellis Bioscience, LLC High affinity human antibodies to human cytomegalovirus (cmv) gb protein
SMT201700023T1 (it) 2010-08-02 2017-03-08 Regeneron Pharma Topi che producono proteine leganti vl
US9533039B2 (en) 2010-09-27 2017-01-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating systemic lupus erythematosus (SLE) using anti-CD48 antibodies
AR083044A1 (es) * 2010-09-27 2013-01-30 Regeneron Pharma Anticuerpos anti-cd48 y usos de los mismos
JO3375B1 (ar) 2010-11-08 2019-03-13 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية للجين a1 الشبيه بعامل النخر الورمي (tl1a)
JO3756B1 (ar) * 2010-11-23 2021-01-31 Regeneron Pharma اجسام مضادة بشرية لمستقبلات الجلوكاجون
CA2818813C (en) 2010-11-23 2020-10-06 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-il-6 antibodies for the treatment of oral mucositis
EP2647706B1 (en) 2010-11-30 2023-05-17 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly
WO2012098238A1 (en) 2011-01-21 2012-07-26 Novimmune S.A. Combination therapies and methods using anti-cd3 modulating agents and anti-il-6 antagonists
SG192117A1 (en) 2011-01-28 2013-08-30 Sanofi Sa Human antibodies to pcsk9 for use in methods of treating particular groups of subjects
ME02106B (me) 2011-02-25 2015-10-20 Regeneron Pharma Miševi sa adam6
MX342810B (es) * 2011-03-03 2016-10-13 Apexigen Inc Anticuerpos del receptor anti-interleucina-6 (anti-il-6) y sus metodos de uso.
BR112013024781B1 (pt) 2011-04-01 2021-09-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Métodos de produção de um anticorpo e de uma composição farmacêutica
PL2631654T3 (pl) 2011-05-12 2015-09-30 Regeneron Pharma Oznaczenie uwalniania neuropeptydu dla kanałów sodowych
AR087329A1 (es) 2011-06-17 2014-03-19 Regeneron Pharma Anticuerpos humanos contra proteina 3 de tipo angiopoietina humana
AR087305A1 (es) 2011-07-28 2014-03-12 Regeneron Pharma Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit
HUE047278T2 (hu) 2011-08-05 2020-04-28 Regeneron Pharma Humanizált univerzális könnyûláncú egerek
BR112014006394A2 (pt) 2011-09-19 2017-03-28 Kymab Ltd manipulação de diversidade genética de imunoglobulina e terapêuticos multi-anticorpos
WO2013041722A1 (en) 2011-09-23 2013-03-28 Ablynx Nv Prolonged inhibition of interleukin-6 mediated signaling
WO2013045916A1 (en) 2011-09-26 2013-04-04 Kymab Limited Chimaeric surrogate light chains (slc) comprising human vpreb
CA2791109C (en) 2011-09-26 2021-02-16 Merus B.V. Generation of binding molecules
PH12014500483A1 (en) 2011-09-30 2014-04-14 Regeneron Pharma Anti-erbb3 antibodies and uses thereof
TWI589299B (zh) * 2011-10-11 2017-07-01 再生元醫藥公司 用於治療類風濕性關節炎之組成物及其使用方法
US9943594B2 (en) 2011-10-11 2018-04-17 Sanofi Biotechnology Methods for the treatment of rheumatoid arthritis
SG10201914052TA (en) * 2011-10-11 2020-03-30 Sanofi Biotechnology Compositions for the treatment of rheumatoid arthritis and methods of using same
SG11201401181YA (en) 2011-10-17 2014-04-28 Regeneron Pharma Restricted immunoglobulin heavy chain mice
WO2013059548A1 (en) 2011-10-19 2013-04-25 Sanofi Compositions and methods for treating cancer using jak2 inhibitor
WO2013059426A1 (en) * 2011-10-21 2013-04-25 The Regents Of The University Of California Human endogenous retrovirus peptides, antibodies to the peptides, and methods of use thereof
CN103059137A (zh) * 2011-10-21 2013-04-24 神州细胞工程有限公司 抗hIL6R高亲和力抗体的制备及应用
CN108866101A (zh) 2011-10-28 2018-11-23 瑞泽恩制药公司 人源化il-6和il-6受体
JO3370B1 (ar) * 2011-11-10 2019-03-13 Regeneron Pharma طريقة لتثبيط نمو الورم عن طريق تثبيط مستقبل انترلوكين 6
DK2780368T3 (en) 2011-11-14 2018-02-05 Regeneron Pharma COMPOSITIONS AND PROCEDURES FOR INCREASING MUSCLE MASS AND MUSCLE STRENGTH BY SPECIFIC ANTAGONIZATION OF GDF8 AND / OR ACTIVIN A
MX354902B (es) 2011-11-23 2018-03-23 Bioven 3 Ltd Proteínas recombinantes y sus usos terapéuticos.
US9253965B2 (en) 2012-03-28 2016-02-09 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
SG10201605675WA (en) 2011-12-20 2016-09-29 Regeneron Pharma Humanized light chain mice
US9371383B2 (en) 2012-01-31 2016-06-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-ASIC1 antibodies and uses thereof
NZ626242A (en) 2012-01-31 2017-02-24 Regeneron Pharma Anti-asic1 antibodies and uses thereof
TWI613215B (zh) 2012-02-22 2018-02-01 再生元醫藥公司 抗－大－內皮素－１（ｂｉｇ－ｅｔ－１）抗體及其用途
AR090219A1 (es) 2012-03-02 2014-10-29 Regeneron Pharma Anticuerpos humanos frente a toxinas de clostridium difficile
MX353278B (es) 2012-03-06 2018-01-05 Regeneron Pharma Raton con cadena ligera comun.
EP2825036B1 (en) 2012-03-16 2018-05-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Histidine engineered light chain antibodies and genetically modified rodents for generating the same
US20140013456A1 (en) 2012-03-16 2014-01-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Histidine Engineered Light Chain Antibodies and Genetically Modified Non-Human Animals for Generating the Same
EP3539374A1 (en) 2012-03-16 2019-09-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals expressing ph-sensitive immunoglobulin sequences
WO2013138681A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice that produce antigen-binding proteins with ph-dependent binding characteristics
GB2502127A (en) 2012-05-17 2013-11-20 Kymab Ltd Multivalent antibodies and in vivo methods for their production
US10251377B2 (en) 2012-03-28 2019-04-09 Kymab Limited Transgenic non-human vertebrate for the expression of class-switched, fully human, antibodies
TWI619729B (zh) 2012-04-02 2018-04-01 再生元醫藥公司 抗－ｈｌａ－ｂ*２７抗體及其用途
US9248181B2 (en) 2012-04-20 2016-02-02 Merus B.V. Methods and means for the production of Ig-like molecules
JO3820B1 (ar) 2012-05-03 2021-01-31 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية لـ fel d1وطرق لاستخدامها
ME03551B (me) 2012-06-12 2020-07-20 Regeneron Pharma Humanizovane nehumane živoтinje sa ograničenim lokusima imunoglobulinskog тeškog lanca
TWI641619B (zh) 2012-06-25 2018-11-21 美商再生元醫藥公司 抗－ｅｇｆｒ抗體及其用途
US9574004B2 (en) 2012-08-21 2017-02-21 Sanofi Biotechnology Methods for treating or preventing asthma by administering an IL-4R antagonist
JO3462B1 (ar) 2012-08-22 2020-07-05 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية تجاه gfr?3 وطرق لاستخدامها
PT3889181T (pt) 2012-09-07 2024-05-29 Regeneron Pharma Um anticorpo antagonista de il-4r para utilização no tratamento da dermatite atópica por administração
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
CN104781280A (zh) 2012-11-13 2015-07-15 瑞泽恩制药公司 抗前动力蛋白受体(prokr)抗体及其使用
JO3405B1 (ar) 2013-01-09 2019-10-20 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد مستقبل عامل النمو المشتق من الصفائح الدموية - بيتا واستخداماتها
MY178882A (en) 2013-02-20 2020-10-21 Regeneron Pharma Non-human animals with modified immunoglobulin heavy chain sequences
HK1218550A1 (zh) 2013-03-13 2017-02-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. 常見輕鏈小鼠
EP4545567A3 (en) 2013-03-13 2025-08-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire
JO3532B1 (ar) 2013-03-13 2020-07-05 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد انترلوكين-33 واستعمالاتها
EA201591762A1 (ru) 2013-03-14 2015-12-30 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Человеческие антитела к grem1
MX2015010749A (es) 2013-03-14 2015-11-30 Regeneron Pharma Anticuerpos humanos para nav1.7.
AR095196A1 (es) 2013-03-15 2015-09-30 Regeneron Pharma Medio de cultivo celular libre de suero
US9788534B2 (en) 2013-03-18 2017-10-17 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
US9783618B2 (en) 2013-05-01 2017-10-10 Kymab Limited Manipulation of immunoglobulin gene diversity and multi-antibody therapeutics
US9783593B2 (en) 2013-05-02 2017-10-10 Kymab Limited Antibodies, variable domains and chains tailored for human use
US11707056B2 (en) 2013-05-02 2023-07-25 Kymab Limited Animals, repertoires and methods
US10782290B2 (en) 2013-06-11 2020-09-22 National Center Of Neurology And Psychiatry Method for predicting post-therapy prognosis of relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) patient, and method for determining applicability of novel therapy
CN111437387B (zh) 2013-06-21 2024-10-01 赛诺菲生物技术公司 通过施用il-4r拮抗剂治疗鼻息肉症的方法
TW201920262A (zh) 2013-07-30 2019-06-01 美商再生元醫藥公司 抗活化素ａ之抗體及其用途
US10935554B2 (en) 2013-08-23 2021-03-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Diagnostic tests and methods for assessing safety, efficacy or outcome of allergen-specific immunotherapy (SIT)
RU2019121863A (ru) 2013-09-18 2019-08-29 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Антитела со встроенным в легкие цепи гистидином и генетически модифицированные отличные от человека животные для их получения
GB201316644D0 (en) 2013-09-19 2013-11-06 Kymab Ltd Expression vector production & High-Throughput cell screening
AU2014330922A1 (en) 2013-10-01 2016-03-03 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
CN105765386B (zh) 2013-10-31 2019-07-16 瑞泽恩制药公司 用于检测中和抗体的竞争性配体结合测定法
CN118105480A (zh) 2013-11-12 2024-05-31 赛诺菲生物技术公司 用于与pcsk9抑制剂一起使用的给药方案
WO2015077491A1 (en) 2013-11-20 2015-05-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Aplnr modulators and uses thereof
DE202014010499U1 (de) 2013-12-17 2015-10-20 Kymab Limited Targeting von humaner PCSK9 zur Cholesterinbehandlung
US9017678B1 (en) 2014-07-15 2015-04-28 Kymab Limited Method of treating rheumatoid arthritis using antibody to IL6R
US8945560B1 (en) 2014-07-15 2015-02-03 Kymab Limited Method of treating rheumatoid arthritis using antibody to IL6R
WO2015095511A2 (en) * 2013-12-20 2015-06-25 The Scripps Research Institute Functional antibodies that modulate cell death and related methods
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
WO2015116852A1 (en) * 2014-01-29 2015-08-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating rheumatoid arthritis by administering an il-6r antibody
IL315136A (en) 2014-02-21 2024-10-01 Sanofi Biotechnology Methods for treating or preventing asthma by administering an il-4rantagonist
JP6632984B2 (ja) 2014-03-11 2020-01-22 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． 抗ＥＧＦＲｖＩＩＩ抗体およびその使用
TWI701042B (zh) 2014-03-19 2020-08-11 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
AU2015231025A1 (en) 2014-03-21 2016-09-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Vl antigen binding proteins exhibiting distinct binding characteristics
CA3124228C (en) 2014-03-21 2024-05-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals that make single domain binding proteins
JO3701B1 (ar) 2014-05-23 2021-01-31 Regeneron Pharma مضادات حيوية بشرية لمتلازمة الشرق الأوسط التنفسية - بروتين كورونا فيروس الشوكي
CN107001461A (zh) 2014-09-16 2017-08-01 瑞泽恩制药公司 抗胰高血糖素抗体及其使用方法
US9840557B2 (en) 2014-09-23 2017-12-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-IL-25 antibodies and uses thereof
CA2963712A1 (en) 2014-10-21 2016-04-28 Ablynx Nv Treatment of il-6r related diseases
AU2015346150B2 (en) 2014-11-14 2021-08-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating chronic sinusitis with nasal polyps by administering an IL-4R antagonist
KR102614189B1 (ko) 2014-11-17 2023-12-18 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. Cd3xcd20 이특이적 항체를 이용한 종양의 치료 방법
WO2016089886A2 (en) * 2014-12-02 2016-06-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating dry eye disease by administering an il-6r antagonist
TWI702229B (zh) 2014-12-19 2020-08-21 美商再生元醫藥公司 流行性感冒病毒血球凝集素之人類抗體
TWI710573B (zh) 2015-01-26 2020-11-21 美商再生元醫藥公司 抗伊波拉病毒醣蛋白之人類抗體
CA2972393A1 (en) 2015-02-27 2016-09-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Composition for treating il-6-related diseases
CA2979702A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals that select for light chain variable regions that bind antigen
JP7082484B2 (ja) 2015-04-01 2022-06-08 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
KR20170135967A (ko) 2015-04-15 2017-12-08 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Gdf8 억제제를 사용하여 강도 및 기능을 증가시키는 방법
JP2016208934A (ja) * 2015-05-12 2016-12-15 学校法人日本大学 抗イヌインターロイキン−６受容体モノクローナル抗体又は抗体フラグメント及びその利用
US10697883B2 (en) 2015-05-19 2020-06-30 National Center Of Neurology And Psychiatry Method for determining application of therapy to multiple sclerosis (MS) patient
US11174317B2 (en) 2015-06-04 2021-11-16 National Center Of Neurology And Psychiatry Therapeutic agent for mental illness comprising IL-6 inhibitor as active ingredient
IL296285A (en) 2015-07-06 2022-11-01 Regeneron Pharma Multispecific antigen-binding molecules and uses thereof
JOP20160154B1 (ar) 2015-07-31 2021-08-17 Regeneron Pharma أجسام ضادة مضاد لل psma، وجزيئات رابطة لمستضد ثنائي النوعية الذي يربط psma و cd3، واستخداماتها
TWI870789B (zh) 2015-08-04 2025-01-21 美商再生元醫藥公司 補充牛磺酸之細胞培養基及用法
JP2018523684A (ja) 2015-08-18 2018-08-23 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． リポタンパク質アフェレーシスを受けている高脂血症の患者を治療するための抗ｐｃｓｋ９阻害抗体
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途
EP3184547A1 (en) * 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
LT3394103T (lt) 2015-12-22 2023-09-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Antikūnų prieš pd-1 ir bispecifinių antikūnų prieš cd20/cd3 derinys, skirtas vėžiui gydyti
AU2016381992B2 (en) 2015-12-28 2024-01-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide
KR20230006929A (ko) 2016-01-13 2023-01-11 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 조작된 중쇄 다양성 영역을 갖는 설치류
CN109195443A (zh) 2016-02-16 2019-01-11 雷杰纳荣制药公司 具有突变型犬尿氨酸酶基因的非人动物
CA3016880A1 (en) 2016-03-07 2017-09-14 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating rheumatoid arthritis
EP3216461A1 (en) 2016-03-07 2017-09-13 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating rheumatoid arthritis
RS62769B1 (sr) 2016-04-08 2022-01-31 Regeneron Pharma Postupci za lečenje hiperlipidemije inhibitorom angptl8 i inhibitorom angptl3
SG11201807885PA (en) * 2016-04-20 2018-10-30 Regeneron Pharma Compositions and methods for making antibodies based on use of expression-enhancing loci
BR112018071285A2 (pt) 2016-04-20 2019-02-12 Regeneron Pharma célula, conjunto de vetores, vetor, sistema, e, método
EP3448891A1 (en) 2016-04-28 2019-03-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of making multispecific antigen-binding molecules
TWI910495B (zh) 2016-05-13 2026-01-01 美商再生元醫藥公司 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法
CN113831407B (zh) 2016-05-20 2024-06-11 瑞泽恩制药公司 用于使用多个引导rna来破坏免疫耐受性的方法
WO2017201731A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Beijing Vdjbio Co., Ltd. Antibodies, composition and kits comprising same, and methods of use thereof
WO2017214089A1 (en) 2016-06-06 2017-12-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals expressing antibodies with human lambda light chains
CN109563170B (zh) 2016-06-10 2023-10-13 瑞泽恩制药公司 抗gitr抗体及其用途
CN116769024A (zh) 2016-06-14 2023-09-19 瑞泽恩制药公司 抗c5抗体及其用途
TW201815821A (zh) 2016-07-18 2018-05-01 美商再生元醫藥公司 抗茲卡病毒抗體及使用方法
RU2656160C2 (ru) * 2016-08-17 2018-05-31 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, способный связываться с рецептором интерлейкина-6 человека
EP3504328A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Host cell protein modification
HUE067888T2 (hu) 2016-09-01 2024-11-28 Regeneron Pharma Módszerek az allergia megelõzésére vagy kezelésére egy IL-4R antagonista adagolásával
MY199468A (en) 2016-09-23 2023-10-31 Regeneron Pharma Anti-steap2 antibodies, antibody-drug conjugates, and bispecific antigen-binding molecules that bind steap2 and cd3, and uses thereof
JP7066690B2 (ja) 2016-09-23 2022-05-13 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 抗ｍｕｃ１６（ムチン１６）抗体
SG10201913483XA (en) 2016-11-04 2020-03-30 Regeneron Pharma Non-human animals having an engineered immunoglobulin lambda light chain locus
TWI782930B (zh) 2016-11-16 2022-11-11 美商再生元醫藥公司 抗ｍｅｔ抗體，結合ｍｅｔ之雙特異性抗原結合分子及其使用方法
EA201991203A1 (ru) 2016-11-17 2019-10-31 Способы лечения ожирения антителами к angptl8
IL266640B (en) 2016-11-29 2022-09-01 Regeneron Pharma A pharmaceutical composition for averting opioid addiction
EP3548514A1 (en) 2016-11-29 2019-10-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating prlr positive breast cancer
EP4649966A3 (en) 2016-12-01 2026-02-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled anti-pd-l1 antibodies for immuno-pet imaging
TWI784988B (zh) 2016-12-01 2022-12-01 美商再生元醫藥公司 治療發炎症狀的方法
RS67826B1 (sr) 2016-12-22 2026-03-31 Regeneron Pharma Postupak za lečenje alergije sa monoklonskim antitelima specifičnim za alergen
TWI781130B (zh) 2017-01-03 2022-10-21 美商再生元醫藥公司 抗金黃色葡萄球菌溶血素ａ毒素之人類抗體
EA201991673A1 (ru) 2017-02-10 2020-01-17 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Меченные радиоактивным изотопом антитела к lag3 для иммуно-пэт-визуализации
US11603407B2 (en) 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
WO2018203545A1 (ja) 2017-05-02 2018-11-08 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター Ｉｌ－６及び好中球の関連する疾患の治療効果の予測及び判定方法
IL270894B2 (en) 2017-06-01 2023-04-01 Regeneron Pharma Human antibodies to bet v 1 and methods of using them
DK3635009T3 (da) 2017-06-07 2026-03-30 Regeneron Pharma Sammensætninger og fremgangsmåder til internalisering af enzymer
CA3061874A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer
EA202090149A1 (ru) 2017-06-28 2020-05-31 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Антигенсвязывающие белки против вируса папилломы человека (hpv) и способы их применения
BR112020000127A2 (pt) 2017-07-06 2020-07-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. método para selecionar um hidrolisado de soja, e, glicoproteína
TWI799432B (zh) 2017-07-27 2023-04-21 美商再生元醫藥公司 抗ctla-4抗體及其用途
CN111051343B (zh) * 2017-09-13 2022-11-22 江苏恒瑞医药股份有限公司 Il-6r抗体、其抗原结合片段及医药用途
CA3076632A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific antigen-binding molecules that bind a staphylococcus target antigen and a complement component and uses thereof
JP7235249B2 (ja) 2017-10-20 2023-03-08 学校法人兵庫医科大学 抗ｉｌ－６受容体抗体を含有する術後の癒着を抑制するための医薬組成物
CA3079946A1 (en) 2017-10-30 2019-05-09 Sanofi Biotechnology Methods for treating or preventing asthma by administering an il-4r antagonist
US11066474B2 (en) 2017-11-30 2021-07-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-TrkB monoclonal antibodies and methods of use
HUE060608T2 (hu) 2017-12-05 2023-03-28 Regeneron Pharma Genetikailag módosított immunglobulin lambda könnyûlánccal rendelkezõ egerek és azok alkalmazása
CA3274059A1 (en) 2017-12-13 2026-03-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-c5 antibody combinations and uses thereof
SG11202005146VA (en) 2017-12-18 2020-06-29 Regeneron Pharma Bispecific antigen binding molecules that bind leptin receptor and/or gp130, and methods of use thereof
WO2019126194A1 (en) 2017-12-18 2019-06-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Angptl8 assay and uses thereof
MX2020006639A (es) 2017-12-22 2020-09-14 Regeneron Pharma Sistema y metodo para caracterizar las impurezas de un producto farmaceutico.
US11780907B2 (en) 2018-01-26 2023-10-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Human antibodies to influenza hemagglutinin
WO2019151418A1 (ja) 2018-01-31 2019-08-08 元一 加藤 Ｉｌ－６阻害剤を含有する喘息の治療剤
BR112020013336A2 (pt) 2018-01-31 2020-12-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. produto farmacêutico proteico, métodos para caracterizar as impurezas do produto farmacêutico proteico de alto peso molecular intermediário, para produção de um anticorpo, e para caracterizar as impurezas de fármaco com variação de carga, anticorpo, e, sistema para caracterizar impurezas de fármaco de alto peso molecular intermediário.
TW202311746A (zh) 2018-02-02 2023-03-16 美商再生元醫藥公司 用於表徵蛋白質二聚合之系統及方法
US12258597B2 (en) 2018-02-07 2025-03-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for therapeutic protein delivery
WO2019168774A1 (en) 2018-02-28 2019-09-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for identifying viral contaminants
MX2020008991A (es) 2018-03-01 2020-12-10 Regeneron Pharma Metodos para alterar la composicion corporal.
US12259355B2 (en) 2018-03-19 2025-03-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Microchip capillary electrophoresis assays and reagents
US12253490B2 (en) 2018-03-19 2025-03-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Microchip capillary electrophoresis assays and reagents
HUE065344T2 (hu) 2018-03-19 2024-05-28 Regeneron Pharma Mikrochip kapilláris elektroforézis assay-k és reagensek
MA52175A (fr) 2018-03-26 2021-02-17 Regeneron Pharma Anticorps anti-pfrh5 et leurs fragments de liaison à l'antigène
KR102871690B1 (ko) 2018-04-30 2025-10-16 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Her2 및/또는 aplp2에 결합하는 항체 및 이중특이적 항원-결합 분자 및 접합체 그리고 이들의 용도
CN118955710A (zh) 2018-05-09 2024-11-15 里珍纳龙药品有限公司 抗msr1抗体及其使用方法
TW202016125A (zh) 2018-05-10 2020-05-01 美商再生元醫藥公司 用於定量及調節蛋白質黏度之系統與方法
BR112020023145A2 (pt) 2018-05-17 2021-02-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. anticorpo anti-cd63 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, molécula de ligação ao antígeno biespecífica, proteína terapêutica de múltiplos domínios, polinucleotídeo composição farmacêutica, e, composto
IL318469A (en) 2018-06-14 2025-03-01 Regeneron Pharma Non-human animals capable of reorganizing transgenic DH-DH, and their uses
AU2019288299B2 (en) 2018-06-19 2026-02-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-factor XII/XIIa antibodies and uses thereof
IL279354B1 (en) 2018-06-21 2026-02-01 Regeneron Pharma Bispecific antibodies against psma and against cd28 and their uses
MD3823665T2 (ro) 2018-07-19 2024-05-31 Regeneron Pharma Receptori antigenci chimerici cu specificitate BCMA și utilizările acestora
TWI838389B (zh) 2018-07-19 2024-04-11 美商再生元醫藥公司 雙特異性抗-BCMAｘ抗-CD3抗體及其用途
KR20210043624A (ko) 2018-08-10 2021-04-21 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 무릎 및/또는 고관절 통증의 안전하고 효과적인 치료를 위한 약제학적 조성물
CA3109513A1 (en) 2018-08-23 2020-02-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-fc epsilon-r1 alpha (fcer1a) antibodies, bispecific antigen-binding molecules that bind fcer1a and cd3, and uses thereof
CN119264211A (zh) 2018-08-27 2025-01-07 瑞泽恩制药公司 拉曼光谱在下游纯化中的应用
SG11202101674QA (en) 2018-08-29 2021-03-30 Regeneron Pharma Methods and compositions for treating subjects having rheumatoid arthritis
JP7511542B2 (ja) 2018-08-30 2024-07-05 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド タンパク質複合体を特徴づけるための方法
KR20210082207A (ko) 2018-10-23 2021-07-02 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항-npr1 항체 및 이의 용도
CA3117945A1 (en) 2018-11-09 2020-05-14 University Of Massachusetts Anti-cfae antibodies and methods of use
CA3110377A1 (en) 2018-11-21 2020-05-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-staphylococcus antibodies and uses thereof
MA54540A (fr) 2018-12-19 2021-10-27 Regeneron Pharma Anticorps anti-cd28 x anti-cd22 bispécifiques et leurs utilisations
US11453721B2 (en) 2018-12-19 2022-09-27 Regeneran Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-MUC16 x anti-CD28 antibodies and uses thereof
US20220025036A1 (en) 2018-12-21 2022-01-27 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
CN113677356A (zh) * 2019-01-07 2021-11-19 湖南思为康医药有限公司 用于降低毒性的共表达嵌合抗原受体和il-6拮抗剂的修饰免疫细胞及其在过继细胞疗法中的用途
WO2020150491A1 (en) 2019-01-16 2020-07-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for characterizing disulfide bonds
MA54861A (fr) 2019-01-31 2021-12-08 Regeneron Pharma Anticorps anti-récepteur de l'il6 pour traiter l'arthrite idiopathique juvénile
KR20210126641A (ko) 2019-02-12 2021-10-20 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 보체 및 표적 항원에 결합하기 위해 이중 특이적 항체를 사용하는 조성물 및 방법
CA3128519A1 (en) 2019-02-21 2020-08-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating ocular cancer using anti-met antibodies and bispecific antigen binding molecules that bind met
WO2020178193A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method of treatment of sarcoidosis
CA3132587A1 (en) 2019-03-21 2020-09-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of il-4/il-13 pathway inhibitors and plasma cell ablation for treating allergy
CA3134335A1 (en) 2019-03-22 2020-10-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Egfr x cd28 multispecific antibodies
MX2021012335A (es) 2019-04-10 2021-11-12 Regeneron Pharma Anticuerpos humanos que se unen a ret y metodos de uso de los mismos.
EP3957324A4 (en) 2019-04-17 2023-02-08 Hiroshima University THERAPEUTIC FOR UROLOGICAL ONCOLOGY CHARACTERIZED BY BEING ADMINISTRATED IN COMBINATION WITH IL-6 INHIBITOR AND CCR2 INHIBITOR
SG11202111742QA (en) 2019-04-24 2021-11-29 Sanofi Biotechnology Methods of diagnosis and treatment of rheumatoid arthritis
US20210000949A1 (en) 2019-05-01 2021-01-07 Sanofi Biotechnology Methods for treating or preventing asthma by administering an il-33 antagonist
WO2020231992A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Improved competitive ligand binding assays
CA3142710A1 (en) 2019-06-04 2020-12-10 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating pain in subjects with rheumatoid arthritis
MX2021014893A (es) 2019-06-05 2022-03-11 Regeneron Pharma Animales no humanos que tienen un repertorio de cadena ligera lambda limitado expresado a partir del locus kappa y usos de estos.
EP3983015A1 (en) 2019-06-11 2022-04-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-pcrv antibodies that bind pcrv, compositions comprising anti-pcrv antibodies, and methods of use thereof
EP3983444A4 (en) * 2019-06-14 2023-10-25 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against pd-1 and methods of use thereof
WO2020252471A1 (en) * 2019-06-14 2020-12-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against pd-1 and methods of use thereof
CN114375205A (zh) 2019-06-20 2022-04-19 武田药品工业株式会社 用基于病毒的基因疗法进行治疗的方法
BR112022000740A2 (pt) 2019-07-16 2022-07-05 Sanofi Biotechnology Métodos para tratamento ou prevenção de asma por administração de um antagonista de il-4r
EP4004049A1 (en) 2019-07-24 2022-06-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric antigen receptors with mage-a4 specificity and uses thereof
AU2020349462A1 (en) 2019-09-16 2022-03-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled MET binding proteins for immuno-PET imaging
WO2021061790A1 (en) 2019-09-24 2021-04-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for chromatography use and regeneration
US12297451B1 (en) 2019-10-25 2025-05-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Cell culture medium
IL292353A (en) 2019-10-28 2022-06-01 Regeneron Pharma Anti-haemagglutinin antibodies and methods of using them
CA3158119A1 (en) 2019-11-25 2021-06-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulations using non-aqueous emulsions
CN114929343B (zh) 2019-12-06 2025-03-18 瑞泽恩制药公司 用双特异性抗BCMA x抗CD3抗体治疗多发性骨髓瘤的方法
AU2020398168A1 (en) 2019-12-06 2022-07-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating COPD by administering an IL-33 antagonist
EP4081544A1 (en) 2019-12-23 2022-11-02 Sanofi Biotechnology Methods for treating or preventing allergic asthma by administering an il-33 antagonist and/or an il-4r antagonist
CN115398236B (zh) 2020-01-21 2024-06-11 瑞泽恩制药公司 用于糖基化的蛋白质的电泳的去糖基化方法
US20230390391A1 (en) 2020-01-22 2023-12-07 Regents Of The University Of Minnesota Bi-specific chimeric antigen receptor t cells targeting cd83 and interleukin 6 receptor
MX2022009476A (es) 2020-02-10 2022-08-22 Regeneron Pharma Anticuerpos anti-tmprss2 y fragmentos de union a antigeno.
KR20220140802A (ko) 2020-02-11 2022-10-18 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항-acvr1 항체 및 이의 용도
KR20220148200A (ko) 2020-02-28 2022-11-04 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Her2에 결합하는 이중특이적 항원 결합 분자 및 이의 사용 방법
US11787867B2 (en) 2020-03-06 2023-10-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-GITR antibodies and uses thereof
KR20250107297A (ko) 2020-04-02 2025-07-11 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항-sars-cov-2 스파이크 당단백질 항체 및 항원-결합 단편
IL297836A (en) * 2020-05-06 2023-01-01 Sorrento Therapeutics Inc Neutralizing antibodies that bind the sars-cov-2 s protein
JP7702428B2 (ja) 2020-05-12 2025-07-03 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 抗ｇｌｐ１ｒアンタゴニスト抗体およびその使用方法
KR102934248B1 (ko) 2020-05-18 2026-03-04 바이오션, 인코포레이티드 Il6r에 결합하는 항체 및 이의 용도
CA3180369A1 (en) 2020-05-26 2021-12-02 Inka Albrecht Compositions comprising an antibody against interleukin-6 receptor for the treatment of rheumatoid arthritis and methods of using same
MX2022014598A (es) 2020-05-26 2023-03-31 Regeneron Pharma Anticuerpos anti-glicoproteína espicular sars-cov-2 y fragmentos de unión al antígeno.
EP4159236A4 (en) 2020-05-29 2024-08-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody-containing formulation
US20230192871A1 (en) 2020-05-29 2023-06-22 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating noninflammatory pain in subjects with rheumatoid arthritis
WO2021257695A2 (en) * 2020-06-16 2021-12-23 Hifibio (Hk) Limited Methods and compositions related to neutralizing antibodies against human coronavirus
US20230416343A1 (en) * 2020-08-07 2023-12-28 Sorrento Therapeutics, Inc. Neutralizing Antibodies that Bind the SARS-COV-2 S Protein
JP2023539107A (ja) 2020-08-20 2023-09-13 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド アクチビンａアンタゴニストによる心機能障害及びｃｏｖｉｄ－１９の予防及び治療方法
WO2022046925A1 (en) 2020-08-26 2022-03-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of treating an allergy with allergen-specific monoclonal antibodies
WO2022047108A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Asparagine feed strategies to improve cell culture performance and mitigate asparagine sequence variants
US20220090060A1 (en) 2020-09-11 2022-03-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Identification and production of antigen-specific antibodies
MX2023003214A (es) 2020-09-18 2023-05-24 Regeneron Pharma Moleculas de union al antigeno que se unen a cd38 y/o cd28 y usos de las mismas.
JP2023544406A (ja) 2020-10-05 2023-10-23 サノフィ・バイオテクノロジー Ｉｌ－４ｒアンタゴニストを投与することによって小児対象における喘息を治療するための方法
CA3190569A1 (en) 2020-10-22 2022-04-28 Christopher Daly Anti-fgfr2 antibodies and methods of use thereof
WO2022115588A1 (en) 2020-11-25 2022-06-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulations using non-aqueous membrane emulsification
KR20230121854A (ko) 2020-12-17 2023-08-21 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 단백질-캡슐화 마이크로겔의 제작
US12325752B2 (en) 2020-12-18 2025-06-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Immunoglobulin proteins that bind to NPR1 agonists
CA3165366A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acids encoding anchor modified antibodies and uses thereof
MX2023008527A (es) 2021-01-20 2023-07-28 Regeneron Pharma Metodos para mejorar el valor proteico en cultivo celular.
JP2024512299A (ja) 2021-03-03 2024-03-19 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド タンパク質の粘度を定量及び変更するためのシステム及び方法
WO2022187626A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-sars-cov-2-variant-spike glycoprotein antibodies and antigen-binding fragments
AU2022243005A1 (en) 2021-03-26 2023-10-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for developing mixing protocols
BR112023021256A2 (pt) 2021-04-20 2023-12-12 Regeneron Pharma Anticorpos humanos para artemina e métodos de uso dos mesmos
AU2022271212A1 (en) 2021-05-04 2023-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric antigen receptors with mage-a4 specificity and uses thereof
CA3219609A1 (en) 2021-05-04 2022-11-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multispecific fgf21 receptor agonists and their uses
WO2022240877A1 (en) 2021-05-11 2022-11-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-tmprss6 antibodies and uses thereof
WO2022253805A1 (en) * 2021-06-01 2022-12-08 Symphogen A/S Anti-nkg2a antibodies and compositions
BR112023024984A2 (pt) 2021-06-01 2024-02-20 Regeneron Pharma Tampão de amostra de eletroforese aquosa, método para identificar contaminantes ou impurezas em uma amostra de droga proteica, e, kit
TW202317623A (zh) 2021-06-14 2023-05-01 美商再生元醫藥公司 基於il2之治療劑及其使用方法
US20240316169A1 (en) 2021-07-05 2024-09-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Utilization of antibodies to shape antibody responses to an antigen
US12496470B2 (en) 2021-07-14 2025-12-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-SARS-CoV-2-spike glycoprotein antibodies and antigen-binding fragments
IL310362A (en) 2021-07-26 2024-03-01 Sanofi Biotechnology Methods for the treatment of chronic spontaneous urticaria by administration of an IL-4R antagonist
US20230077710A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. HIGH-THROUGHPUT AND MASS-SPECTROMETRY-BASED METHOD FOR QUANTITATING ANTIBODIES AND OTHER Fc-CONTAINING PROTEINS
CA3232463A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Philip Mellors Methods of controlling antibody heterogeneity
CA3230984A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Ross BROWNE Systems and methods of ph modeling and control
WO2023059803A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ph meter calibration and correction
IL312187A (en) 2021-10-20 2024-06-01 Regeneron Pharma Methods for treating prurigo nodularis by administering an IL-4R antagonist
CN118414168A (zh) 2021-10-22 2024-07-30 里珍纳龙药品有限公司 因子xi a2结构域结合抗体和其使用方法
TW202330104A (zh) 2021-10-26 2023-08-01 美商再生元醫藥公司 用於產生實驗室用水及分配不同溫度之實驗室用水的系統及方法
EP4433500A1 (en) 2021-11-19 2024-09-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for reducing centralized pain
JP2024542823A (ja) 2021-12-06 2024-11-15 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド アンタゴニスト抗ｎｐｒ１抗体およびその使用方法
KR20240164561A (ko) 2022-03-18 2024-11-19 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 폴리펩타이드 변종을 분석하기 위한 방법 및 시스템
EP4504788A1 (en) * 2022-04-06 2025-02-12 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating polymyalgia rheumatica by administering an il?6r antagonist
WO2023196903A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific antigen-binding molecules that bind and cd3 and tumor associated antigens (taas) and uses thereof
WO2023212586A1 (en) 2022-04-27 2023-11-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for selecting patients for treatment with an ngf antagonist
US20230416396A1 (en) 2022-05-18 2023-12-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multispecific antigen binding molecules that bind cd38 and 4-1bb, and uses thereof
EP4554977A1 (en) 2022-07-12 2025-05-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Antibodies to ciliary neurotrophic factor receptor (cntfr) and methods of use thereof
CN120091829A (zh) 2022-08-29 2025-06-03 赛诺菲生物技术公司 通过施用il-4r拮抗剂治疗慢性诱导性寒冷性荨麻疹的方法
CN120152993A (zh) 2022-11-07 2025-06-13 里珍纳龙药品有限公司 因子xi催化结构域结合抗体和其使用方法
US20240190978A1 (en) 2022-11-15 2024-06-13 CSBioAsset LLC Compositions and methods for immunomodulatory bifunctional fusion molecules
TW202435942A (zh) 2022-12-16 2024-09-16 美商里珍納龍藥品有限公司 評估層析管柱完整性的方法及系統
WO2024130165A1 (en) 2022-12-16 2024-06-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Angptl3 inhibitors for triglyceride reduction in multifactorial chylomicronemia syndrome
KR20250148746A (ko) 2023-01-13 2025-10-14 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. Fgfr3 결합 분자 및 그의 사용 방법
US20240245779A1 (en) 2023-01-25 2024-07-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modeling liquid protein composition stability
EP4655595A1 (en) 2023-01-25 2025-12-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mass spectrometry-based characterization of antibodies co-expressed in vivo
WO2024163708A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Asymmetrical flow field-flow fractionation with mass spectrometry for biomacromolecule analysis
EP4665764A1 (en) 2023-02-13 2025-12-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of muscle related disorders with anti-human cacng1 antibodies
EP4665410A1 (en) 2023-02-17 2025-12-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled anti-lag3 antibodies for immuno-pet imaging
EP4669963A2 (en) 2023-02-22 2025-12-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. SYSTEM FITNESS PARAMETERS AND COLUMN AGING
AU2024241290A1 (en) 2023-03-22 2025-11-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating chronic obstructive pulmonary disease (copd) by administering an il-4r antagonist
US20240366471A1 (en) 2023-05-01 2024-11-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multidose antibody drug products using phenol or benzyl alcohol
WO2024229105A1 (en) 2023-05-02 2024-11-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-human m-cadherin (cdh15) antibodies, conjugates, and uses thereof for delivery of genetic payloads to muscle cells
IL325163A (en) 2023-06-16 2026-02-01 Regeneron Pharma CD40 × CD40 dual-specific antigen-binding molecules and their application
WO2025014913A1 (en) 2023-07-10 2025-01-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific pd-l1xcd28 antibodies and methods of use thereof
CN121666401A (zh) 2023-07-10 2026-03-13 瑞泽恩制药公司 双特异性PD-L1x4-1BB抗体及其使用方法
CN119285767B (zh) * 2023-07-10 2025-11-18 东莞市朋志生物科技有限公司 抗白介素-6抗体、检测白介素-6的试剂和试剂盒
CN121568720A (zh) 2023-07-10 2026-02-24 瑞泽恩制药公司 抗人类cacng1抗体-药物缀合物及其用途
IL325613A (en) 2023-07-19 2026-02-01 Regeneron Pharma Antibodies against factor xii/xiia and their uses
WO2025054406A1 (en) 2023-09-08 2025-03-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for assessing chromatographic column integrity
US20250095773A1 (en) 2023-09-18 2025-03-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for developing chromatography protocols
US20250109905A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Lyophilization using controlled nucleation
US20250129117A1 (en) 2023-10-18 2025-04-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Rapid purification of monoclonal antibody from in-process upstream cell culture material
US20250145662A1 (en) 2023-11-02 2025-05-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing lipase activity using stress
WO2025149846A1 (en) 2024-01-12 2025-07-17 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating frail subjects with polymyalgia rheumatica by administering an il-6r antagonist
TW202547482A (zh) 2024-01-12 2025-12-16 法商賽諾菲生物技術公司 已接受類固醇之具有風濕性多肌痛症之個體之治療
WO2025166281A1 (en) 2024-02-01 2025-08-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Platform for charge-detection mass spectrometry analysis of aavs
WO2025175164A1 (en) 2024-02-16 2025-08-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of producing concentrated formulated drug substances comprising proteins, and concentrated formulated drug substance made by the methods
TW202602489A (zh) 2024-03-15 2026-01-16 美商再生元醫藥公司 作為經穩定的蛋白質調配物之賦形劑的聚山梨醇酯及聚氧乙烯山梨糖醇酐
US20250388685A1 (en) 2024-04-15 2025-12-25 Sanofi Biotechnology Methods for treating chronic rhinosinusitis without nasal polyps by administering an il-4r antagonist
WO2025240335A1 (en) 2024-05-13 2025-11-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fgfr3 binding molecules and methods of use thereof
WO2025259840A1 (en) 2024-06-13 2025-12-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for scaled chromatography
US20260000758A1 (en) 2024-06-28 2026-01-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific antigen binding molecules that bind gdf8 and activin a and uses thereof
US20260014252A1 (en) 2024-07-11 2026-01-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. GPRC5D x CD28 Bispecific Antibodies and Methods of Use Thereof
WO2026025028A1 (en) 2024-07-26 2026-01-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of making ultra-high concentrated protein formulations using lyophilization
WO2026050255A2 (en) 2024-08-27 2026-03-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-slc3a2-apis antigen-binding proteins and methods of use thereof
WO2026047197A1 (en) 2024-08-30 2026-03-05 Sanofi Biotechnology Differential biomarkers for anti-interleukin-6 and anti-tumor necrosis factor-α treatment response in rheumatoid arthritis
WO2026059949A1 (en) 2024-09-10 2026-03-19 Sanofi Biotechnology Methods for treating chronic pruritus of unknown origin (cpuo) by administering an il-4r antagonist
WO2026060350A1 (en) 2024-09-13 2026-03-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of improving photo stability and controlling formation of hmw species in biologic formulations, and biologic formulations produced by the methods
WO2026076201A2 (en) 2024-10-03 2026-04-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for producing therapeutic proteins using single pass tangential flow filtration for in-line concentration and volume reduction of production pools
WO2026080597A1 (en) 2024-10-08 2026-04-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained delivery of biologics and non-aqueous manufacture of same
CN119775414B (zh) * 2025-03-12 2025-06-06 武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司 抗猴白介素-6单克隆抗体、酶联免疫检测试剂盒及其应用

Family Cites Families (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1341152C (en) * 1988-01-22 2000-12-12 Tadamitsu Kishimoto Receptor protein for human b cell stimulatory factor-2
US5670373A (en) 1988-01-22 1997-09-23 Kishimoto; Tadamitsu Antibody to human interleukin-6 receptor
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US5216128A (en) 1989-06-01 1993-06-01 Yeda Research And Development Co., Ltd. IFN-β2/IL-6 receptor its preparation and pharmaceutical compositions containing it
ES2093017T3 (es) * 1989-07-20 1996-12-16 Tadamitsu Kishimoto Anticuerpo contra el receptor de la interleuquina-6 humana.
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
JPH05227970A (ja) * 1992-02-19 1993-09-07 Chugai Pharmaceut Co Ltd ヒトインターロイキン−６受容体に対する再構成ヒト抗体
US5795965A (en) * 1991-04-25 1998-08-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Reshaped human to human interleukin-6 receptor
FR2694767B1 (fr) 1992-08-13 1994-10-21 Innotherapie Lab Sa Anticorps monoclonaux anti-IL6R, et leurs applications.
WO1994009138A1 (en) 1992-10-20 1994-04-28 Cetus Oncology Corporation Interleukin-6 receptor antagonists
US5888511A (en) * 1993-02-26 1999-03-30 Advanced Biotherapy Concepts, Inc. Treatment of autoimmune diseases, including AIDS
US5888510A (en) 1993-07-21 1999-03-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component
AU7967294A (en) * 1993-10-06 1995-05-01 Board Of Regents, The University Of Texas System A monoclonal anti-human il-6 receptor antibody
ES2384222T3 (es) 1994-10-07 2012-07-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Inhibición del crecimiento anómalo de células sinoviales utilizando un antagonista de IL-6 como principio activo
CN1306963C (zh) * 1994-10-21 2007-03-28 岸本忠三 用于治疗il－6产生所致疾病的药物组合物
EP0800829B2 (en) 1994-12-29 2012-07-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Use of a pm-1 antibody or of a mh 166 antibody for enhancing the anti-tumor effect of cisplatin or carboplatin
EP0811384B1 (en) 1995-02-13 2006-06-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Muscle protein decomposition inhibitor containing il-6 receptor antibody
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
US5785965A (en) 1996-05-15 1998-07-28 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior Univ. VEGF gene transfer into endothelial cells for vascular prosthesis
US6692742B1 (en) * 1996-06-27 2004-02-17 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Remedies for myeloma to be used together with nitrogen mustard antitumor agents
US20020187150A1 (en) * 1997-08-15 2002-12-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preventive and/or therapeutic agent for systemic lupus erythematosus comprising anti-IL-6 receptor antibody as an active ingredient
PT1004315E (pt) 1997-08-15 2008-07-09 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Profilácticos e/ou medicamentos contendo anticorpos neutralizantes anti-receptor de il-6 para reduzir a excreção de proteínas urinárias no lúpus eritematoso sistémico
CN100374159C (zh) * 1998-03-17 2008-03-12 中外制药株式会社 一种包含il-6拮抗剂活性成分的炎性肠道疾病的预防或治疗剂
ES2276525T3 (es) 1998-08-24 2007-06-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preventivos o remedios para la pancreatitis que contienen anticuerpos anti-receptor il-6 como ingrediente activo.
US6787637B1 (en) 1999-05-28 2004-09-07 Neuralab Limited N-Terminal amyloid-β antibodies
JP5485489B2 (ja) 2000-08-11 2014-05-07 中外製薬株式会社 抗体含有安定化製剤
AU1091802A (en) 2000-10-20 2002-04-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Degraded agonist antibody
CN1259973C (zh) 2000-10-25 2006-06-21 中外制药株式会社 含有il－6拮抗剂作为有效成分的牛皮癣的预防或治疗剂
JP4889187B2 (ja) * 2000-10-27 2012-03-07 中外製薬株式会社 Ｉｌ−６アンタゴニストを有効成分として含有する血中ｍｍｐ−３濃度低下剤
US6596541B2 (en) * 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
UA80091C2 (en) * 2001-04-02 2007-08-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Remedies for infant chronic arthritis-relating diseases and still's disease which contain an interleukin-6 (il-6) antagonist
CN101721362B (zh) 2002-02-14 2018-07-03 中外制药株式会社 包含抗体的溶液制剂
US20060078532A1 (en) * 2004-10-12 2006-04-13 Omoigui Osemwota S Method of prevention and treatment of Atherosclerosis, Peripheral vascular disease, Coronary artery disease, aging and age-related disorders including osteoporosis, arthritis, type 2 diabetes, dementia and Alzheimer's disease
US20060078531A1 (en) * 2004-10-12 2006-04-13 Osemwota Sota Method of prevention and treatment of atherosclerosis, peripheral vascular disease, coronary artery disease, and age-related disorders including osteoporosis, arthritis, type 2 diabetes, dementia and Alzheimer's disease
US20060275294A1 (en) * 2002-08-22 2006-12-07 Omoigui Osemwota S Method of prevention and treatment of aging, age-related disorders and/or age-related manifestations including atherosclerosis, peripheral vascular disease, coronary artery disease, osteoporosis, arthritis, type 2 diabetes, dementia, alzheimers disease and cancer
US20060078533A1 (en) * 2004-10-12 2006-04-13 Omoigui Osemwota S Method of prevention and treatment of aging and age-related disorders including atherosclerosis, peripheral vascular disease, coronary artery disease, osteoporosis, arthritis, type 2 diabetes, dementia, alzheimer's disease and cancer
US7482436B2 (en) * 2002-08-30 2009-01-27 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Human antihuman interleukin-6 antibody and fragment of antibody
US20040101920A1 (en) 2002-11-01 2004-05-27 Czeslaw Radziejewski Modification assisted profiling (MAP) methodology
US7534427B2 (en) * 2002-12-31 2009-05-19 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B cell malignancies and autoimmune diseases using unconjugated antibodies and conjugated antibodies and antibody combinations and fusion proteins
GB2401040A (en) 2003-04-28 2004-11-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for treating interleukin-6 related diseases
JP4960096B2 (ja) 2003-09-22 2012-06-27 ペントラコール ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｉｌ−６の生物学的効果を減じる化合物の使用
AR048210A1 (es) * 2003-12-19 2006-04-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Un agente preventivo para la vasculitis.
ATE464908T1 (de) * 2004-02-11 2010-05-15 Warner Lambert Co Verfahren zur behandlung von osteoarthritis mit anti-il-6 antikörpern
US20070036788A1 (en) * 2004-09-22 2007-02-15 Ahmed Sheriff Use of a compound for reducing the biological effectiveness of il-6
WO2006046661A1 (ja) * 2004-10-28 2006-05-04 Osaka University インターロイキン－６阻害剤
US20060177436A1 (en) * 2004-12-16 2006-08-10 Genentech, Inc. Methods for Treating Autoimmune Disorders
EP2153848A3 (en) * 2005-01-27 2010-07-21 The Regents of the University of California Therapeutic monoclonal antibodies that neutralize botulinium neurotoxins
JP5307708B2 (ja) * 2006-06-02 2013-10-02 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ヒトｉｌ−６受容体に対する高親和性抗体
US8080248B2 (en) 2006-06-02 2011-12-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of treating rheumatoid arthritis with an IL-6R antibody
WO2008020079A1 (en) 2006-08-18 2008-02-21 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of deseases and disorders associated with il-6-mediated signalling
RU2319351C1 (ru) * 2006-09-13 2008-03-20 Олег Иванович Квасенков Способ подготовки к хранению яблок свежих специального назначения
CA2667466A1 (en) 2006-10-27 2008-05-02 Ablynx N.V. Intranasal delivery of polypeptides and proteins
JP6071165B2 (ja) 2007-05-31 2017-02-01 ゲンマブ エー／エス 安定なＩｇＧ４抗体
WO2009095489A2 (en) 2008-02-01 2009-08-06 Ablynx N.V. Improved amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of diseases and disorders associated with il-6-mediated signalling
WO2009109584A1 (en) 2008-03-07 2009-09-11 Ferring International Center S. A. ANTIBODY BINDING ONLY TO IL6-sIL6R COMPLEX

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Publication number Publication date
KR101464502B1 (ko) 2014-12-01
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HRP20120175T1 (hr) 2012-03-31
JP2013226143A (ja) 2013-11-07
JP2009539349A (ja) 2009-11-19
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RS52176B (sr) 2012-08-31
LUC00050I1 (es) 2017-11-22
NZ573557A (en) 2010-08-27
CN101454345A (zh) 2009-06-10
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US7582298B2 (en) 2009-09-01
EP2041177B1 (en) 2011-12-14
ES2377579T3 (es) 2012-03-29
US20230094591A1 (en) 2023-03-30
ATE537190T1 (de) 2011-12-15
MY159787A (en) 2017-01-31
US20120003697A1 (en) 2012-01-05

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