JPH027635B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPH027635B2 JPH027635B2 JP56190071A JP19007181A JPH027635B2 JP H027635 B2 JPH027635 B2 JP H027635B2 JP 56190071 A JP56190071 A JP 56190071A JP 19007181 A JP19007181 A JP 19007181A JP H027635 B2 JPH027635 B2 JP H027635B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- tryptophan
- resistant
- azaserine
- producing
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/22—Tryptophan; Tyrosine; Phenylalanine; 3,4-Dihydroxyphenylalanine
- C12P13/227—Tryptophan
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
- Y10S435/839—Bacillus subtilis
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は、発酵法によるＬ−トリプトフアン
（以下、トリプトフアンと記す）の製造法に関す
る。 従来トリプトフアンの製造法としては、トリプ
トフアンの前駆物質であるアントラニル酸、イン
ドール或いは３−インドールピルビン酸よりトリ
プトフアンを製造する方法が知られている。 これら前駆物質を使用する方法に対し、前駆物
質を使用しないで、糖類等を炭素源とし、バチル
ス属に属しトリプトフアンアナログに耐性を有す
る変異株を使用して直接発酵法によりトリプトフ
アンを生産する方法（特公昭53−39517）が開発
されている。 そこで、本発明者らはバチルス属の微生物を用
いて更に糖類等の炭素源からトリプトフアンを直
接発酵法により安価に製造する方法を開発すべく
研究を行なつた結果、バチルス属の上記のような
トリプトフアンアナログ耐性の他に更にアゼセリ
ン（Ｏ−ジアゾアセチル−Ｌ−セリン）に耐性を
有する微生物の中に、従来知られているものより
更に大量のトリプトフアンを生産する能力を有す
る菌株があることを見い出した。この発明はこの
知見に基づいて更に研究の結果完成されたもので
ある。 本発明の方法で使用される変異株は、バチルス
属に属しトリプトフアンアナログ及びアゼセリン
に耐性を有し、かつトリプトフアンを生産する能
力を有する微生物であり、例えば、次のような変
異株が使用される。 バチルス・ズブチリス AJ11709 FERM−
P6225（５−Ｆ−Trpr、ASr） バチルス・ズブチリス AJ11710 FERM−
P6226（５−Ｆ−Trpr、Leu-、ASr） バチルス・ズブチリス AJ11716 FERM−
P6227（５−Ｆ−Trpr、IMr、ASr） ５−Ｆ−Trpr：５−フルオロトリプトフアン耐
性 ASr：アザセリン耐性 Leu-：Ｌ−ロイシン要求性 IMr：インドールマイシン耐性 これら本発明で使用される変異株は、バチルス
属のトリプトフアンアナログ耐性、トリプトフア
ン生産菌を親株とし、これに通常の変異誘導操
作、例えば、紫外線照射あるいはＮ−メチル−
N′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（以下、
NGと略す。）、亜硝酸等の化学薬剤処理を施し、
変異処理した菌株を親株が生育できないような量
のアゼセリンを含有する平板寒天培地で培養し、
該平板培地上に生育するコロニーを分離すること
によつて得られる。 上記の親株としてはトリプトフアンアナログ耐
性の他にトリプトフアン生産に有用な性質を有す
るトリプトフアン生産菌、例えば、Ｌ−アルギニ
ン、Ｌ−リジン、Ｌ−ロイシンもしくはＬ−フエ
ニルアラニン要求性のトリプトフアン生産菌（特
公昭53−39517号公報）、再にはトリプトフアンア
ナログ耐性でかつインドールマイシン耐性のトリ
プトフアン生産菌（特開昭56−92796号公報）等
が使用される。具体例としては次のようなトリプ
トフアンアナログ耐性のトリプトフアン生産菌が
使用される。 バチルス・ズブチリス FT−145 FERM−
P1783（５−Ｆ−Trpr） バチルス・ズブチリス FFL−５ FERM−
P1786（５−Ｆ−Trpr＋Leu-） バチルス・ズブチリス AJ11483 FERM−
P5286（５−Ｆ−Trpr＋IM） その他、本発明の変異株はバチルス属の野性株
を親株とし、これにアゼセリン耐性を付与した後
トリプトフアンアナログ耐性を付与することによ
つても誘導することができる。この場合にも再に
トリプトフアン生産に有用な性質、例えば、Ｌ−
フエニルアラニン、Ｌ−チロシン、Ｌ−ロイシ
ン、Ｌ−ヒスチジン等のアミノ酸に対する栄養要
求性、あるいはフエニルアラニンアナログ耐性等
を付与することが望ましい。 以下の実験例にて、本発明のアザセリン耐性ト
リプトフアン生産菌のアザセリンに対する耐性度
を示す。 実験例 第１表に示す組成の最少培地及び最少培地に
100μｇ／mlのアザセリンを添加した寒天培地を
調製し、加熱滅菌した後直径8.5cmのフレートに
移してプレート寒天培地を作つた。 上記アザセリン含有のプレートに最少寒天プレ
ート上に生育したバチルス・ズブチリス
AJ11709、AJ11710及びAJ11716を夫々各プレー
ト当り106個宛接種し、30℃で48時間プレート培
養を行い、プレート上に生育したコロニー数を測
定した。その結果を第２表に示す。
（以下、トリプトフアンと記す）の製造法に関す
る。 従来トリプトフアンの製造法としては、トリプ
トフアンの前駆物質であるアントラニル酸、イン
ドール或いは３−インドールピルビン酸よりトリ
プトフアンを製造する方法が知られている。 これら前駆物質を使用する方法に対し、前駆物
質を使用しないで、糖類等を炭素源とし、バチル
ス属に属しトリプトフアンアナログに耐性を有す
る変異株を使用して直接発酵法によりトリプトフ
アンを生産する方法（特公昭53−39517）が開発
されている。 そこで、本発明者らはバチルス属の微生物を用
いて更に糖類等の炭素源からトリプトフアンを直
接発酵法により安価に製造する方法を開発すべく
研究を行なつた結果、バチルス属の上記のような
トリプトフアンアナログ耐性の他に更にアゼセリ
ン（Ｏ−ジアゾアセチル−Ｌ−セリン）に耐性を
有する微生物の中に、従来知られているものより
更に大量のトリプトフアンを生産する能力を有す
る菌株があることを見い出した。この発明はこの
知見に基づいて更に研究の結果完成されたもので
ある。 本発明の方法で使用される変異株は、バチルス
属に属しトリプトフアンアナログ及びアゼセリン
に耐性を有し、かつトリプトフアンを生産する能
力を有する微生物であり、例えば、次のような変
異株が使用される。 バチルス・ズブチリス AJ11709 FERM−
P6225（５−Ｆ−Trpr、ASr） バチルス・ズブチリス AJ11710 FERM−
P6226（５−Ｆ−Trpr、Leu-、ASr） バチルス・ズブチリス AJ11716 FERM−
P6227（５−Ｆ−Trpr、IMr、ASr） ５−Ｆ−Trpr：５−フルオロトリプトフアン耐
性 ASr：アザセリン耐性 Leu-：Ｌ−ロイシン要求性 IMr：インドールマイシン耐性 これら本発明で使用される変異株は、バチルス
属のトリプトフアンアナログ耐性、トリプトフア
ン生産菌を親株とし、これに通常の変異誘導操
作、例えば、紫外線照射あるいはＮ−メチル−
N′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（以下、
NGと略す。）、亜硝酸等の化学薬剤処理を施し、
変異処理した菌株を親株が生育できないような量
のアゼセリンを含有する平板寒天培地で培養し、
該平板培地上に生育するコロニーを分離すること
によつて得られる。 上記の親株としてはトリプトフアンアナログ耐
性の他にトリプトフアン生産に有用な性質を有す
るトリプトフアン生産菌、例えば、Ｌ−アルギニ
ン、Ｌ−リジン、Ｌ−ロイシンもしくはＬ−フエ
ニルアラニン要求性のトリプトフアン生産菌（特
公昭53−39517号公報）、再にはトリプトフアンア
ナログ耐性でかつインドールマイシン耐性のトリ
プトフアン生産菌（特開昭56−92796号公報）等
が使用される。具体例としては次のようなトリプ
トフアンアナログ耐性のトリプトフアン生産菌が
使用される。 バチルス・ズブチリス FT−145 FERM−
P1783（５−Ｆ−Trpr） バチルス・ズブチリス FFL−５ FERM−
P1786（５−Ｆ−Trpr＋Leu-） バチルス・ズブチリス AJ11483 FERM−
P5286（５−Ｆ−Trpr＋IM） その他、本発明の変異株はバチルス属の野性株
を親株とし、これにアゼセリン耐性を付与した後
トリプトフアンアナログ耐性を付与することによ
つても誘導することができる。この場合にも再に
トリプトフアン生産に有用な性質、例えば、Ｌ−
フエニルアラニン、Ｌ−チロシン、Ｌ−ロイシ
ン、Ｌ−ヒスチジン等のアミノ酸に対する栄養要
求性、あるいはフエニルアラニンアナログ耐性等
を付与することが望ましい。 以下の実験例にて、本発明のアザセリン耐性ト
リプトフアン生産菌のアザセリンに対する耐性度
を示す。 実験例 第１表に示す組成の最少培地及び最少培地に
100μｇ／mlのアザセリンを添加した寒天培地を
調製し、加熱滅菌した後直径8.5cmのフレートに
移してプレート寒天培地を作つた。 上記アザセリン含有のプレートに最少寒天プレ
ート上に生育したバチルス・ズブチリス
AJ11709、AJ11710及びAJ11716を夫々各プレー
ト当り106個宛接種し、30℃で48時間プレート培
養を行い、プレート上に生育したコロニー数を測
定した。その結果を第２表に示す。
【表】
【表】
尚、本発明でいうアザセリン耐性とは、106個
の変異株をアザセリンを100μｇ／ml含む最少培
地で上記培養条件下で培養した場合に500個以上
のコロニーを生成するものをいう。 本発明で使用する培地は炭素源、窒素源、無機
塩類、その他必要に応じてアミノ酸、ビタミン等
の有機微量栄養素を含有する通常の栄養培地が使
用される。炭素源としてはグルコース、シユーク
ロース、マルトース、澱粉水解物、糖蜜等が使用
され、その他エタノール、酢酸、クエン酸等も単
独あるいは上記他の炭素源と併用して用いられ
る。窒素源としては硫酸アンモニウム、塩化アン
モニウム、リン酸アンモニウム等のアンモニウム
塩、硝酸塩、尿素、ペプトン等有機あるいは無機
の窒素源が使用される。有機微量栄養素としては
アミノ酸、ビタミン、脂肪酸、核酸、再に、これ
らのものを含有するペプトン、カザミノ酸、酵母
エキス、大豆蛋白分解物等が使用され、生育にア
ミノ酸等を要求する栄養要求性変異株を使用する
場合には要求される栄養素を補添することが必要
である。無機塩類としてはリン酸塩、マグネシウ
ム塩、カルシウム塩、鉄塩、マンガン塩等が使用
される。 培養は通常の培養条件下で行えば良く、PHを５
ないし９、温度を20ないし40℃に制御しつつ１〜
４日間振盪培養又は通気撹拌培養することにより
培養液中に著量のトリプトフアンが蓄積される。
培養中にPHが下がる場合には、炭酸カルシウムを
別殺菌して加えるか又はアンモニア水、アンモニ
アガス等のアルカリで中和する。又、有機酸を炭
素源とする場合はPHの上昇を鉱酸又は有機酸で中
和する。 培養液からトリプトフアンを採取する方法は、
公知のトリプトフアン回収方法に従つて行えば良
く、培養液から菌体を除去した後濃縮晶析する方
法、あるいはイオン交換クロマトグラフイー等に
よつて採取される。 以下、実施例にて説明する。 実施例 １ 下記第３表に示した組成のトリプトフアン生産
用培地20mlを500ml容のフラスコに分注し、それ
に第３表に示す微生物をそれぞれ1/3スラント量
植えつけ30℃で96時間振盪培養した。それぞれの
培養液中のトリプトフアン生成量は第４表の如く
であつた。
の変異株をアザセリンを100μｇ／ml含む最少培
地で上記培養条件下で培養した場合に500個以上
のコロニーを生成するものをいう。 本発明で使用する培地は炭素源、窒素源、無機
塩類、その他必要に応じてアミノ酸、ビタミン等
の有機微量栄養素を含有する通常の栄養培地が使
用される。炭素源としてはグルコース、シユーク
ロース、マルトース、澱粉水解物、糖蜜等が使用
され、その他エタノール、酢酸、クエン酸等も単
独あるいは上記他の炭素源と併用して用いられ
る。窒素源としては硫酸アンモニウム、塩化アン
モニウム、リン酸アンモニウム等のアンモニウム
塩、硝酸塩、尿素、ペプトン等有機あるいは無機
の窒素源が使用される。有機微量栄養素としては
アミノ酸、ビタミン、脂肪酸、核酸、再に、これ
らのものを含有するペプトン、カザミノ酸、酵母
エキス、大豆蛋白分解物等が使用され、生育にア
ミノ酸等を要求する栄養要求性変異株を使用する
場合には要求される栄養素を補添することが必要
である。無機塩類としてはリン酸塩、マグネシウ
ム塩、カルシウム塩、鉄塩、マンガン塩等が使用
される。 培養は通常の培養条件下で行えば良く、PHを５
ないし９、温度を20ないし40℃に制御しつつ１〜
４日間振盪培養又は通気撹拌培養することにより
培養液中に著量のトリプトフアンが蓄積される。
培養中にPHが下がる場合には、炭酸カルシウムを
別殺菌して加えるか又はアンモニア水、アンモニ
アガス等のアルカリで中和する。又、有機酸を炭
素源とする場合はPHの上昇を鉱酸又は有機酸で中
和する。 培養液からトリプトフアンを採取する方法は、
公知のトリプトフアン回収方法に従つて行えば良
く、培養液から菌体を除去した後濃縮晶析する方
法、あるいはイオン交換クロマトグラフイー等に
よつて採取される。 以下、実施例にて説明する。 実施例 １ 下記第３表に示した組成のトリプトフアン生産
用培地20mlを500ml容のフラスコに分注し、それ
に第３表に示す微生物をそれぞれ1/3スラント量
植えつけ30℃で96時間振盪培養した。それぞれの
培養液中のトリプトフアン生成量は第４表の如く
であつた。
【表】
Claims (1)
- １ バチルス属に属し、トリプトフアンアナログ
及びアザセリンに耐性を有し、かつＬ−トリプト
フアン生産能を有する微生物を液体培地中に好気
的に培養し、培養液中にＬ−トリプトフアンを生
成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする
Ｌ−トリプトフアンの製造法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56190071A JPS5894391A (ja) | 1981-11-27 | 1981-11-27 | 発酵法によるｌ−トリプトフアンの製造法 |
| DE8282110586T DE3273233D1 (en) | 1981-11-27 | 1982-11-16 | Process for producing l-tryptophan by fermentation |
| EP82110586A EP0081107B1 (en) | 1981-11-27 | 1982-11-16 | Process for producing l-tryptophan by fermentation |
| US06/444,172 US4560652A (en) | 1981-11-27 | 1982-11-24 | Process for producing L-tryptophan by fermentation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56190071A JPS5894391A (ja) | 1981-11-27 | 1981-11-27 | 発酵法によるｌ−トリプトフアンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5894391A JPS5894391A (ja) | 1983-06-04 |
| JPH027635B2 true JPH027635B2 (ja) | 1990-02-20 |
Family
ID=16251869
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56190071A Granted JPS5894391A (ja) | 1981-11-27 | 1981-11-27 | 発酵法によるｌ−トリプトフアンの製造法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4560652A (ja) |
| EP (1) | EP0081107B1 (ja) |
| JP (1) | JPS5894391A (ja) |
| DE (1) | DE3273233D1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57174096A (en) * | 1981-04-20 | 1982-10-26 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-tryptophan by fermentation method |
| EP1103600A4 (en) * | 1998-07-30 | 2002-11-06 | Takeda Chemical Industries Ltd | PROCESS FOR PRODUCING INDOLEMYCIN |
| CN104478787A (zh) * | 2014-11-24 | 2015-04-01 | 河南巨龙生物工程股份有限公司 | 一种从脱色用废活性炭中提取色氨酸的方法 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3700558A (en) * | 1967-11-20 | 1972-10-24 | Lepetit Spa | Production of l-tryptophan by fermentation |
| JPS4818828B1 (ja) * | 1969-08-28 | 1973-06-08 | ||
| JPS5335152B1 (ja) * | 1971-03-09 | 1978-09-26 | ||
| JPS5119037B2 (ja) * | 1972-11-16 | 1976-06-14 | ||
| JPS575694A (en) * | 1980-06-10 | 1982-01-12 | Showa Denko Kk | Production of l-tryptophane |
| JPS57208994A (en) * | 1981-06-19 | 1982-12-22 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-tryptophan by fermentation |
| JPS5881107A (ja) * | 1981-11-06 | 1983-05-16 | ナショナル住宅産業株式会社 | 建築用化粧板の条溝形成方法 |
| JPS5880378A (ja) * | 1981-11-10 | 1983-05-14 | Ishikawajima Harima Heavy Ind Co Ltd | コ−クス乾式消火設備におけるプリチヤンバ圧制御装置 |
| JPS6092796A (ja) * | 1983-10-27 | 1985-05-24 | 松下電器産業株式会社 | 脱水洗濯機の駆動装置 |
-
1981
- 1981-11-27 JP JP56190071A patent/JPS5894391A/ja active Granted
-
1982
- 1982-11-16 EP EP82110586A patent/EP0081107B1/en not_active Expired
- 1982-11-16 DE DE8282110586T patent/DE3273233D1/de not_active Expired
- 1982-11-24 US US06/444,172 patent/US4560652A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0081107A3 (en) | 1984-02-01 |
| DE3273233D1 (en) | 1986-10-16 |
| US4560652A (en) | 1985-12-24 |
| JPS5894391A (ja) | 1983-06-04 |
| EP0081107A2 (en) | 1983-06-15 |
| EP0081107B1 (en) | 1986-09-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH02186994A (ja) | 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法 | |
| JP3008565B2 (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| JP2578463B2 (ja) | 発酵法によるｌ−リジンの製造法 | |
| JPH027635B2 (ja) | ||
| JPH05123178A (ja) | Ｌ−フエニルアラニンの製造法 | |
| JPH027634B2 (ja) | ||
| JPH027636B2 (ja) | ||
| JPH029795B2 (ja) | ||
| JPH0644871B2 (ja) | 発酵法によるｌ−ロイシンの製造法 | |
| JP3100763B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 | |
| JPH028718B2 (ja) | ||
| JPH028719B2 (ja) | ||
| JPH0412720B2 (ja) | ||
| JPH0314438B2 (ja) | ||
| JPH0314436B2 (ja) | ||
| KR830001259B1 (ko) | 미생물에 의한 l-글루타민의 제조방법 | |
| JPH0347840B2 (ja) | ||
| JPH028720B2 (ja) | ||
| JP2578496B2 (ja) | 発酵法によるイノシンの製造法 | |
| JPH06311891A (ja) | トレハロースの製造方法 | |
| JPH027637B2 (ja) | ||
| JPS5971697A (ja) | 発酵法によるｌ−チロシンの製造法 | |
| JPH0211238B2 (ja) | ||
| JPH0211235B2 (ja) | ||
| JPH0822235B2 (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |