JPS5995893A - Ｓｅｎ−１２８−ｂ物質及びその製法 - Google Patents
Ｓｅｎ−１２８−ｂ物質及びその製法Info
- Publication number
- JPS5995893A JPS5995893A JP57207272A JP20727282A JPS5995893A JP S5995893 A JPS5995893 A JP S5995893A JP 57207272 A JP57207272 A JP 57207272A JP 20727282 A JP20727282 A JP 20727282A JP S5995893 A JPS5995893 A JP S5995893A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- methanol
- chloroform
- substance
- value
- sen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/02—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using fungi
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は重要な生物学的活性を有する。新規な微生物代
謝産物５ＥＮ−１２８−Ｂ物質に関する。
謝産物５ＥＮ−１２８−Ｂ物質に関する。
本発明に係る５ＥＮ−１２８−Ｂは、この明細書におい
て５ＥＮ−１２８−Ａと称する物質とともに５ＥＮ−１
２８と総称される。５ＥＮ−１２８−Ａは、５ＥＮ−１
２８−Ｂと同様の方法で得られ、同様の理化学的性質及
び生物的活性を有する物質である。
て５ＥＮ−１２８−Ａと称する物質とともに５ＥＮ−１
２８と総称される。５ＥＮ−１２８−Ａは、５ＥＮ−１
２８−Ｂと同様の方法で得られ、同様の理化学的性質及
び生物的活性を有する物質である。
本発明に係る５ＥＮ−１２８−Ｂは次のような理化学的
性質を有する。
性質を有する。
＋ａ＋外観 無色針状結晶
（ｂｌ融点 １１９〜１２５℃
ｔｃ＋元素分析
実測値 ｃ ： ６３．２１ Ｈ： ６．６３
Ｎ ： １１．０１理論値 Ｃ：６２．８９ Ｈ：
６．５０ Ｎ：１１．２８ｆｄ）分子量
２４８ （マススペクトル）ｔｅ１分子式 Ｃ１
ＲＨ１６Ｎ２０３（ｆｌ旋光度 （α］ｇ＝０° Ｃ
＝０．５％（クロロボルム中）（ｇ＋紫外部吸収スペク
トル 第１図、第２図に示す通りであり、メタノール中及び酸
性メタノール中で２４７ｍμ、 ３１５ｍμに極大吸収
を示す。アルカリ性メタノール中で２３８ｍμ、 ２６
５ｍμ（肩）、２９０〜３１０ｍμに極大吸収を示す。
Ｎ ： １１．０１理論値 Ｃ：６２．８９ Ｈ：
６．５０ Ｎ：１１．２８ｆｄ）分子量
２４８ （マススペクトル）ｔｅ１分子式 Ｃ１
ＲＨ１６Ｎ２０３（ｆｌ旋光度 （α］ｇ＝０° Ｃ
＝０．５％（クロロボルム中）（ｇ＋紫外部吸収スペク
トル 第１図、第２図に示す通りであり、メタノール中及び酸
性メタノール中で２４７ｍμ、 ３１５ｍμに極大吸収
を示す。アルカリ性メタノール中で２３８ｍμ、 ２６
５ｍμ（肩）、２９０〜３１０ｍμに極大吸収を示す。
（ｈｌｌ赤外及吸収スペクト
ル３図に示す。
＋１１ｌｌｌｌ−１−Ｎスペクトル
第４図に示す。
（Ｊｌ熔解性
クロロホルム、メタノール、酢酸エチル１アセトン、ジ
メチルスルホキシドに易溶、水に不溶。
メチルスルホキシドに易溶、水に不溶。
（ｋｌ呈色反応
陽性：ヨード、過マンガン酸カリウム
陰性：塩化第二鉄、ニンヒドリン
ＦＩＩＲｆ値
西独メルク社製シリカゲル（＾ｒ ｔ ５５５４）を用
いた薄層クロマトグラフィーにおい”ζ次のＲｆ値を示
す。
いた薄層クロマトグラフィーにおい”ζ次のＲｆ値を示
す。
展開溶媒 クロロホルム：メタノール−５０：１０、７
８ 展開溶媒 ヘンゼン：酢酸エチル：り００ボルム−１：
１：１ ０．６３ （（ロ）中性、酸性、塩基性の区別 塩基性物質 本発明物質の生物学的性質は、以下の通りである。
８ 展開溶媒 ヘンゼン：酢酸エチル：り００ボルム−１：
１：１ ０．６３ （（ロ）中性、酸性、塩基性の区別 塩基性物質 本発明物質の生物学的性質は、以下の通りである。
〈血小板凝集抑制作用〉
（１）材料及び方法
検体はジメチルスルホキシドに溶解して使用する。溶媒
の最終濃度は１％となるように調製する。対照には同濃
度のジメチルスルホキシドを用いた。血小板凝集惹起物
質として最終濃度５μ門 のアデノシン−２−燐酸（以
下ＡＤＰという）１５０μ門のアラキドン酸（以下ＡＡ
という）及び１０μｇ／ｍｌのコラーゲンを用いた。
の最終濃度は１％となるように調製する。対照には同濃
度のジメチルスルホキシドを用いた。血小板凝集惹起物
質として最終濃度５μ門 のアデノシン−２−燐酸（以
下ＡＤＰという）１５０μ門のアラキドン酸（以下ＡＡ
という）及び１０μｇ／ｍｌのコラーゲンを用いた。
（２）血小板の調製
体重２．０〜２．５ｋｇの雄家兎の総領動脈より採血し
、３．８％のクエン酸を１０分の１容血液に加えて軽く
混ぜ、 １３００ｘビで２分間遠心分離をして得た上清
を多血小板血漿（以下ＰＰＰという）とした。沈渣を更
に１６００Ｘ ｇで１ｏ分間遠心分離して得た上清を乏
血小板血！ＩＩ （以下ＰＰＰという）とした。
、３．８％のクエン酸を１０分の１容血液に加えて軽く
混ぜ、 １３００ｘビで２分間遠心分離をして得た上清
を多血小板血漿（以下ＰＰＰという）とした。沈渣を更
に１６００Ｘ ｇで１ｏ分間遠心分離して得た上清を乏
血小板血！ＩＩ （以下ＰＰＰという）とした。
（３）凝集能測定方法
血小板凝集メーターを使用し、血小板凝集による吸光度
の経時的変化を記録した。
の経時的変化を記録した。
即ち２００μｌのＰＰＰを採り、ＰＰＰとの差を一定に
調製した後、ＰＲＰに対照溶媒あるいは検体を２５μｌ
加え攪拌しく１０００ ｒｐｍ） １分後に凝集惹起
物質を２５μｌ加えて吸光度の変化を記録した。抑制率
は対照の最大凝集率（Δ％）と検体の最大凝集率（Ｂ％
）より５次式に従って求めた。
調製した後、ＰＲＰに対照溶媒あるいは検体を２５μｌ
加え攪拌しく１０００ ｒｐｍ） １分後に凝集惹起
物質を２５μｌ加えて吸光度の変化を記録した。抑制率
は対照の最大凝集率（Δ％）と検体の最大凝集率（Ｂ％
）より５次式に従って求めた。
抑制率（％）＝ （１−Ｂ／Ａ）Ｘ１００検体濃度を変
えて抑制率を求め、それよりＩＣ５０（５０％抑制する
濃度）を求めた。結果は以下のようである。
えて抑制率を求め、それよりＩＣ５０（５０％抑制する
濃度）を求めた。結果は以下のようである。
以上の理化学的性質及び生物学的性質から５ＥＮ−１２
８−Ｂは文献未記載の新規物質であることが確認された
。
８−Ｂは文献未記載の新規物質であることが確認された
。
上述したように５ＥＮ−１２８−Ｂは血小板凝集抑制作
用という重要な生物学的性質を有し２例えば血栓症等の
治療薬として期待できる。
用という重要な生物学的性質を有し２例えば血栓症等の
治療薬として期待できる。
本発明において新規物質５ＥＮ−１２８−Ｂの生産菌と
して使用される菌株（以下５ＥＮ−１２８株と称する）
は奈良県奈良市三月堂の土壌より分離されたが、菌学的
検索の結果、ストレプトミセス・メラノスボロファシェ
ンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｅｌａｎｏｓｐｏ
ｒｏｆａｃｉｅｎｓ ）に属する菌と同定され、ストレ
プトミセス・メラノスポロファミエンス５ＥＮ−１２８
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｅｌａｎｏｓｐｏｒｏ
ｆａｃｉｅｎｓ Ｓ Ｅ Ｎ −１２８）と命名され、
工業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第６７７
５号として寄託されている。
して使用される菌株（以下５ＥＮ−１２８株と称する）
は奈良県奈良市三月堂の土壌より分離されたが、菌学的
検索の結果、ストレプトミセス・メラノスボロファシェ
ンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｅｌａｎｏｓｐｏ
ｒｏｆａｃｉｅｎｓ ）に属する菌と同定され、ストレ
プトミセス・メラノスポロファミエンス５ＥＮ−１２８
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｅｌａｎｏｓｐｏｒｏ
ｆａｃｉｅｎｓ Ｓ Ｅ Ｎ −１２８）と命名され、
工業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第６７７
５号として寄託されている。
５Ｂ１１−１２８株は次のような菌学的性質を有する。
なお、実験の手順はインターナショナル・ストレプトミ
セス・プロジェクト（ＩｓＰ）の実験法（ＩＥ、Ｂ、Ｓ
ｈｉｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ；Ｉｎｔｅｒｎ、Ｊ、Ｓｙ
ｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、、 Ｖｏｌ、
１６ （３） ｐ、 ３１３〜３４０ （１９６６）
）によった。また培地は上記文献以外に産業別審査基
４ａ「応用微生物工業」及びワックスマン著（Ｓ。
セス・プロジェクト（ＩｓＰ）の実験法（ＩＥ、Ｂ、Ｓ
ｈｉｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ；Ｉｎｔｅｒｎ、Ｊ、Ｓｙ
ｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、、 Ｖｏｌ、
１６ （３） ｐ、 ３１３〜３４０ （１９６６）
）によった。また培地は上記文献以外に産業別審査基
４ａ「応用微生物工業」及びワックスマン著（Ｓ。
八、Ｗａｋｓｍａｎ ： Ｔｂｅ Ａｃｔｉｎｏｍｙｃ
ｅｔｅｓ Ｖｏｌ、２ （１９６１） ）に（列示さ
れているものを使用した。
ｅｔｅｓ Ｖｏｌ、２ （１９６１） ）に（列示さ
れているものを使用した。
１ｉの記載はコンテイナー・コーポレーション・オフ・
アメリカ （Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ Ｃｏｒｐｏｌａｔｉ
ｏｎ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ）のカラー・ハーモニ
ー・マニュアル （Ｃｏｌｏｒ Ｉｌａｒｍｏｎｙ Ｍ
ａｎｕａｌ）を参照して必要のある場合はこれを付記し
た。
アメリカ （Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ Ｃｏｒｐｏｌａｔｉ
ｏｎ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ）のカラー・ハーモニ
ー・マニュアル （Ｃｏｌｏｒ Ｉｌａｒｍｏｎｙ Ｍ
ａｎｕａｌ）を参照して必要のある場合はこれを付記し
た。
（１）ＩＳＰの方法による記載
（ａｌ形態学的特徴
顕微鏡下でよく分岐した基中菌糸から気菌糸を生じ、１
０個以上の胞子の連鎖を認める。胞子形成鎖は螺旋状を
示しＩＳＰの基準によればセクション・スパイラル（Ｓ
ｅｃｔｉｏｎＳｐｉｒａｌｅｓ）に属する。胞子は通審
卵状〜球状で、 （０，４５〜０．６ ） Ｘ （０
，６〜０．７５）μ程度の大きさを有し、電子顕微鏡に
よる胞子表面構造は鍛型である。
０個以上の胞子の連鎖を認める。胞子形成鎖は螺旋状を
示しＩＳＰの基準によればセクション・スパイラル（Ｓ
ｅｃｔｉｏｎＳｐｉｒａｌｅｓ）に属する。胞子は通審
卵状〜球状で、 （０，４５〜０．６ ） Ｘ （０
，６〜０．７５）μ程度の大きさを有し、電子顕微鏡に
よる胞子表面構造は鍛型である。
以上の形態学的特徴はイースト・麦芽寒天培地、グリセ
ロール・アスパラギン寒天培地その他の気菌糸を良々ｆ
に形成する培地において観察される。
ロール・アスパラギン寒天培地その他の気菌糸を良々ｆ
に形成する培地において観察される。
（ｂｌコロニーの色
胞子を充分着生した気菌糸の色調は、イースト・麦芽寒
天培地、グリセロール・アスパラギン寒天培地、オーｌ
−ミール寒天培地、スターチ無機塩寒天培地、その他の
気菌糸を良好に形成する培地において灰色糸（Ｔｒｅｓ
ｎｅｒ ＢａｃｋｕｓＣｏｌｏｒ Ｗｈｅｅｌｓ ）で
ある。即ち代表的色調は明褐灰色（３ｆｅ ） 〜明る
い灰色（５ｆｅ〜７ｆｅ、八５ｈｅｓ）である。時に例
えばスターチ・無機塩寒天培地、イース１−・麦芽寒天
培地上において、白色から淡黄色（ｌｂａ〜ｌｄｂ ）
を帯び明るい灰色（５ｆｅ〜７ｆｅ ）に至る。またグ
ルコース・アスパラギン寒天培地、オートミール寒天培
地、グリセロール・アスパラギン寒天培地」−など、あ
る種の培地ではコロニーの一部が湿潤し、いわゆる゛ハ
イグロスコピック状になり黒化する。
天培地、グリセロール・アスパラギン寒天培地、オーｌ
−ミール寒天培地、スターチ無機塩寒天培地、その他の
気菌糸を良好に形成する培地において灰色糸（Ｔｒｅｓ
ｎｅｒ ＢａｃｋｕｓＣｏｌｏｒ Ｗｈｅｅｌｓ ）で
ある。即ち代表的色調は明褐灰色（３ｆｅ ） 〜明る
い灰色（５ｆｅ〜７ｆｅ、八５ｈｅｓ）である。時に例
えばスターチ・無機塩寒天培地、イース１−・麦芽寒天
培地上において、白色から淡黄色（ｌｂａ〜ｌｄｂ ）
を帯び明るい灰色（５ｆｅ〜７ｆｅ ）に至る。またグ
ルコース・アスパラギン寒天培地、オートミール寒天培
地、グリセロール・アスパラギン寒天培地」−など、あ
る種の培地ではコロニーの一部が湿潤し、いわゆる゛ハ
イグロスコピック状になり黒化する。
（Ｃ１栄養菌糸（コロニー裏面）の色
イースト・麦芽寒天培地、グリセロール・アスパラギン
寒天培地で黄色、オートミール寒天培地で淡黄色を呈す
る。
寒天培地で黄色、オートミール寒天培地で淡黄色を呈す
る。
スターチ無機塩寒天培地上では通常無色であるか１時に
黄色味を帯びる。
黄色味を帯びる。
ｆｄ）培地の色（可溶性色素）
メラノイト色素の産生：陰性
その他の色素の産生：イースト・麦芽寒天培地、グリセ
ロール・アスパラギン寒天培地上で黄色、オートミール
寒天培地上で淡黄色の可溶性色素を産生ずる。スターチ
無機塩寒天培地では通雷可溶性色素は産生じないが５時
に淡黄色を呈する。
ロール・アスパラギン寒天培地上で黄色、オートミール
寒天培地上で淡黄色の可溶性色素を産生ずる。スターチ
無機塩寒天培地では通雷可溶性色素は産生じないが５時
に淡黄色を呈する。
（ｅｌ炭素源の利用性
Ｉ Ｓ ｌ）記載糖の利用性
Ｄ−グルコース、Ｌ−アラヒノース、１〕−ギンｌコー
ス、Ｄ−マンニトール、Ｄ−フラクトース、シュークロ
ース、ｉ−イノシトール、ラフィノース、ラムノースを
利用する。
ス、Ｄ−マンニトール、Ｄ−フラクトース、シュークロ
ース、ｉ−イノシトール、ラフィノース、ラムノースを
利用する。
その他の糖の利用性
ガラクトース、ラクトース、マンノース、マルト−ス。
サリシン、イヌリンを利用する。
（ＩＩ）その他の性状
（以下余白）
（ａ）培養基上の性状（２７℃、１４日間培養）その他
の培養基上の性状 グルコース・ペプトン・ゼラチン培地：生育は良好で気
菌糸はない。栄養菌糸、可溶性色素は薄黄味薄褐色。ゼ
ラチンを強く液化する。
の培養基上の性状 グルコース・ペプトン・ゼラチン培地：生育は良好で気
菌糸はない。栄養菌糸、可溶性色素は薄黄味薄褐色。ゼ
ラチンを強く液化する。
セルロース：
ツアペックの硝酸塩溶液、ツアペックの塩化アンモニウ
ム溶液のいずれでも生育良好。
ム溶液のいずれでも生育良好。
トリプトーン・イースト培地：
生育は良好で可溶性色素は薄黄味薄褐色を呈する。
（ｂｌ生理的性状
■ゼラチンの液化 ： 陽性
■硝酸塩の還元 ： 陽性
■スターチの氷解能 ： 陽性
■ミルクの凝固 ： 陽性
■ミルクのペプトン化 ： 陽性
■硫化水素の産生 ： 陰性
■メチ２４１色素の産生： 陰性
■チロシナーセ ： 陰性
■生育温度範囲。
５℃、１０°Ｃ１１５°Ｃ，２０°Ｃ、２５’Ｃ、２８
°Ｃ９３０°Ｃ１３５’Ｃ１３７°Ｃ，４０℃、４５℃
、５０℃でそれぞれ実験。
°Ｃ９３０°Ｃ１３５’Ｃ１３７°Ｃ，４０℃、４５℃
、５０℃でそれぞれ実験。
１０°Ｃ以下及び４０℃以上では生育せず、１５°Ｃ１
３７°Ｃで生育不良、他はいずれも生育良好であるが、
約２８℃が最適温度である。
３７°Ｃで生育不良、他はいずれも生育良好であるが、
約２８℃が最適温度である。
［相］生育ｐｌ＋範囲
ｐＨ４，５〜９．０で生育、 ｐ１１６．０〜ｐｌ！７
．５が最適。
．５が最適。
■セルラーセ ： 陽性
以上の菌学的性状より１本発明に使用する菌株（ＳＥＮ
−１２８株）はスｌ−レプｔ−ミセス属に属する。本菌
株は灰色系の気菌糸を有し、スパイラル型の形態的特徴
を有し。
−１２８株）はスｌ−レプｔ−ミセス属に属する。本菌
株は灰色系の気菌糸を有し、スパイラル型の形態的特徴
を有し。
胞子表面はｊｉｌ！を型であり、栄養菌糸、可溶性色素
はいずれも黄色であり、メラニン陰性であり、またある
種の培地ではコロニーの一部が湿潤し、ハイグロスコピ
ックとなり黒化するなどが主な特徴である。
はいずれも黄色であり、メラニン陰性であり、またある
種の培地ではコロニーの一部が湿潤し、ハイグロスコピ
ックとなり黒化するなどが主な特徴である。
これらの諸点を考慮して３文献（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ、
Ｅ、Ｂ、ａｎｄＧｏｔｔｌｉｅｂ、 Ｄ、Ｉｎｔｅｒｎ
、 Ｊ、 Ｓｙｓｔｅｍａｔｊｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
、＋ １８ （２）６９〜１８９ （１９６８）
； １８ （４） ２７９〜３９２ （１９６８）
ｉ １９ （４）３９１〜５１２ （１９６９）
； ２２ （４） ２６５ 〜３９４ （１９
７２） 。
Ｅ、Ｂ、ａｎｄＧｏｔｔｌｉｅｂ、 Ｄ、Ｉｎｔｅｒｎ
、 Ｊ、 Ｓｙｓｔｅｍａｔｊｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
、＋ １８ （２）６９〜１８９ （１９６８）
； １８ （４） ２７９〜３９２ （１９６８）
ｉ １９ （４）３９１〜５１２ （１９６９）
； ２２ （４） ２６５ 〜３９４ （１９
７２） 。
Ｓ、八、Ｗａｋｓｍａｎ ； Ｔｈｅ Ａｃｔｉ
ｎｏｍｙｃｅｔｅｓ Ｖｃｌ、２ （１９６
１） ）を検索した結果、ストレプトミセス・メラノ
スポーファシェンスの簡略に属すると同定された。更に
、５ＥＮ−１２８株は血小板凝集抑制作用を有する本発
明物質である新規物質５ＥＮ−１２８−Ｂ及び５ＥＮ−
１２８−Ａを産生ずるという有用な特徴を有するので、
ス（・レゾｌ−ミセス・メラノスボロファシェンスＳ
Ｅ Ｎ −１２８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｍｅｌａ
ｎｏｓｐｏｒｏｆａｃｉｅｎｓ Ｓ Ｅ Ｎ −１２８
）と命名し、公知の菌株と区別した。
ｎｏｍｙｃｅｔｅｓ Ｖｃｌ、２ （１９６
１） ）を検索した結果、ストレプトミセス・メラノ
スポーファシェンスの簡略に属すると同定された。更に
、５ＥＮ−１２８株は血小板凝集抑制作用を有する本発
明物質である新規物質５ＥＮ−１２８−Ｂ及び５ＥＮ−
１２８−Ａを産生ずるという有用な特徴を有するので、
ス（・レゾｌ−ミセス・メラノスボロファシェンスＳ
Ｅ Ｎ −１２８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｍｅｌａ
ｎｏｓｐｏｒｏｆａｃｉｅｎｓ Ｓ Ｅ Ｎ −１２８
）と命名し、公知の菌株と区別した。
本発明における使用菌としては１上記したストレプトミ
セス・メラノスボロファシェンス５ＥＮ−１２８株及び
本菌株を変異処理した変異株だけでなく、ストレプトミ
セス属に属し、５ＥＮ−１２８−Ｂを産生ずる菌であれ
ばすべて用いることができる。本発明の実施にあたって
はスＩ・レプトミセス・メラノスボロファシェンス５Ｅ
Ｎ−１２８株を通常の微生物の培養方法で培養すること
ができる。培地の栄養源としては一般に微生物の培養に
利用されるものが使用できる。即ち炭素源としてはグル
コース、デンプン１５）等が、窒素源としては、大豆粉
、ペプｉ・ン、肉エキス、コーン・ステイープ・リッカ
ー等が使用される。その他、塩化ナトリウム、塩化カリ
ウム、塩化アンモニウム、炭酸カルシウムの適量を加え
ると良好な結果を得、更に、微量の鉄、マグネシウムの
硫酸塩等を加えても良い。培養方法としては、静置培養
、振盪培養、深部攪拌通気培養が好ましい。培養温度は
２２〜３０°Ｃ５好ましくは２４〜２７°Ｃ９ρ１１は
通常で６〜８で培養すれば９通電４８〜７２時間で５Ｅ
Ｎ−１２８−Ｂ物質が培養液中に産生される。５ＥＩＩ
−１２８−Ｂの抽出、単離には通常用いられる方法が広
く採用可能である。
セス・メラノスボロファシェンス５ＥＮ−１２８株及び
本菌株を変異処理した変異株だけでなく、ストレプトミ
セス属に属し、５ＥＮ−１２８−Ｂを産生ずる菌であれ
ばすべて用いることができる。本発明の実施にあたって
はスＩ・レプトミセス・メラノスボロファシェンス５Ｅ
Ｎ−１２８株を通常の微生物の培養方法で培養すること
ができる。培地の栄養源としては一般に微生物の培養に
利用されるものが使用できる。即ち炭素源としてはグル
コース、デンプン１５）等が、窒素源としては、大豆粉
、ペプｉ・ン、肉エキス、コーン・ステイープ・リッカ
ー等が使用される。その他、塩化ナトリウム、塩化カリ
ウム、塩化アンモニウム、炭酸カルシウムの適量を加え
ると良好な結果を得、更に、微量の鉄、マグネシウムの
硫酸塩等を加えても良い。培養方法としては、静置培養
、振盪培養、深部攪拌通気培養が好ましい。培養温度は
２２〜３０°Ｃ５好ましくは２４〜２７°Ｃ９ρ１１は
通常で６〜８で培養すれば９通電４８〜７２時間で５Ｅ
Ｎ−１２８−Ｂ物質が培養液中に産生される。５ＥＩＩ
−１２８−Ｂの抽出、単離には通常用いられる方法が広
く採用可能である。
即ち培養液中より水と混和しない有機溶媒１例えば酢酸
エステル類、アルコール類、ケトン頬、エーテル類等に
よる抽出方法、活性炭等による吸着法、シリカゲル、ア
ルミナ等によるクロマト法を単独又は適当に組み合せて
利用することができる。以下に実施例をあげて本発明を
更に詳しく説明する。
エステル類、アルコール類、ケトン頬、エーテル類等に
よる抽出方法、活性炭等による吸着法、シリカゲル、ア
ルミナ等によるクロマト法を単独又は適当に組み合せて
利用することができる。以下に実施例をあげて本発明を
更に詳しく説明する。
実施例
ストレプトミセス・メラノスボロファシェンス５ＥＮ−
１２８株の斜面培養から、 １００ｍ１の種培地（＃
粉２％、大豆粉１％、塩化ナトリウム０．５％、塩化カ
リウム０．０５％１硫酸マグネシウム０．０５％、硝酸
ナトリウム０．２％、炭酸カルシウム０．３５％、ρ１
１７．０）をいれた５００ｍ１容のエルレンマイヤーフ
ラスコに植菌し、２７°Ｃにて３日間振盪培養を行い１
種培養液を得た。
１２８株の斜面培養から、 １００ｍ１の種培地（＃
粉２％、大豆粉１％、塩化ナトリウム０．５％、塩化カ
リウム０．０５％１硫酸マグネシウム０．０５％、硝酸
ナトリウム０．２％、炭酸カルシウム０．３５％、ρ１
１７．０）をいれた５００ｍ１容のエルレンマイヤーフ
ラスコに植菌し、２７°Ｃにて３日間振盪培養を行い１
種培養液を得た。
この種培養液２００ｍ１を６１の醗酵培地（種培地と同
一培地）をいれたｌｉシアーファーメンタ−に接種し、
２１３’Ｃにて３日間通気攪拌培養（通気量６７！／ｍ
ｉｎ、攪拌速度５００ｒｐｍ ）を行った。このように
して得た培養液５０ ｆｆを菌体と濾別後、ｐ１１未調
製でｎ−ブクノールを加え２回抽出を行った。このｎ−
ブタノール層を合わせ、減圧下で濃縮乾固し。
一培地）をいれたｌｉシアーファーメンタ−に接種し、
２１３’Ｃにて３日間通気攪拌培養（通気量６７！／ｍ
ｉｎ、攪拌速度５００ｒｐｍ ）を行った。このように
して得た培養液５０ ｆｆを菌体と濾別後、ｐ１１未調
製でｎ−ブクノールを加え２回抽出を行った。このｎ−
ブタノール層を合わせ、減圧下で濃縮乾固し。
クロロボルム：水−１＝１の溶液１βを加え１分配を行
った。これのクロロホルム層を分取し、減圧下にて濃縮
乾固し、油状物質１．５ｇを得た。この油状物質をクロ
ロボルムにて充填したシリカゲル（ワコーゲルＣ−２０
０，和光純薬）カラム ｌｏ００ｍｌ上端に添加した。
った。これのクロロホルム層を分取し、減圧下にて濃縮
乾固し、油状物質１．５ｇを得た。この油状物質をクロ
ロボルムにて充填したシリカゲル（ワコーゲルＣ−２０
０，和光純薬）カラム ｌｏ００ｍｌ上端に添加した。
クロロボルム次にクロロボルム：メタノール−１００：
１のｌ容媒を用いて順次溶出し。
１のｌ容媒を用いて順次溶出し。
３０ｍ１ずつ分画した。活性物質を含む分画を集め、減
圧下にて濃縮乾固し、粗粉末３７０＋ｎｇを得た。これ
をクロロホルムに熔解して、シリカゲル薄層（メルク社
製、Ａｒｔ ５７４４ ）にスポットして、クロロホル
ム：メタノール−を用いて展開した。
圧下にて濃縮乾固し、粗粉末３７０＋ｎｇを得た。これ
をクロロホルムに熔解して、シリカゲル薄層（メルク社
製、Ａｒｔ ５７４４ ）にスポットして、クロロホル
ム：メタノール−を用いて展開した。
活性物質を含む両分をかきとってクロロホルムで抽出し
た。溶媒を減圧下除去して更にクロロボルムに溶解して
ンリカゲル薄Ｎ（メルク社，Ａｒｔ ５７４４ ）にス
ボソトシて酢酸エチル：ヘンセン：クロロホルム−１：
ｌ ：ｌの？ｇ 媒ヲ用いて展開した。５ＥＩＩ−１２
８−Ｂの両分を薄層板よりかきとってクロロポルムで抽
出した。減圧下に溶媒を除去後。
た。溶媒を減圧下除去して更にクロロボルムに溶解して
ンリカゲル薄Ｎ（メルク社，Ａｒｔ ５７４４ ）にス
ボソトシて酢酸エチル：ヘンセン：クロロホルム−１：
ｌ ：ｌの？ｇ 媒ヲ用いて展開した。５ＥＩＩ−１２
８−Ｂの両分を薄層板よりかきとってクロロポルムで抽
出した。減圧下に溶媒を除去後。
メタノールを用いて再結晶すると、無色板状結晶として
ＳＥ Ｎ −１，２８−Ｂが２０ｍｇ得られた。
ＳＥ Ｎ −１，２８−Ｂが２０ｍｇ得られた。
第１図は本発明物質５ＥＮ−１２８−Ｂのメタノール中
及び酸性メタノール中での紫外部吸収スペクトルを表す
。 第２図は１本発明物質５ＥＮ−１２８−Ｂのアルカリ性
メタノール中での紫外部吸収スペクトルを表ず。第３図
は本発明物質５ＥＮ−１２８−Ｂの臭化カリウム錠での
赤外部吸収スペクトルを表す。第４図は１本発明物質５
ＥＮ−１２８−Ｂの重水素化クロロホルム中でのＮＭＲ
吸収スペクトル（２００Ｍｌ１ｚ ）を表ず。 出願人 日本新薬株式会社 代理人 弁理士 片間 宏 第１頁の続き ０発 明 者 中村輝也 大津市瀬田３丁目４番１号宝酒 造株式会社中央研究所内 ０発 明 者 松永尚夫 大津市瀬田３丁目４番１号宝酒 造株式会社中央研究所内 ０発 明 者 西尾修治 大津市瀬田３丁目４番１号宝酒 造株式会社中央研究所内 ０出 願 人 宝酒造株式会社 京都市伏見区竹中町６０９番地 手続ネｎｆ正書 １、事件の表示 ぶ７−２ｏ’？２７２〜昭和
５７年１１月２５日付提出の特許側（２）（願番通知未
受領） ２、発明の名称 ５ＥＮ−１２８−Ｂ物質及びその製法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 〒６０１京都市南区吉祥院西ノ庄門口町１４番地
名称（４１５）日 本新薬株式会社（他１名）取締役社
長 森 下 弘 ４、代理人 居所 〒６０１京都市南区吉祥院西ノ庄門口町１４番
地明細書の発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 （１）明細書第８頁に掲げる次の表。 ［− 凝集剤 ＡＩ）Ｆ ＡＡ コラーゲン
」 を。 ［ 凝集剤 ＡＤＰ ＡＡ コラ−ケンＩ
Ｃ５ｏ（、ｉ７ｇ／ｍｌ） ＞５０ ３０ ３
０」 に訂正する。 （２）明細書第１５頁最下行に、「メラノスポーファＪ
とあるのを、 「メラノスボロファ」に訂正する。 （３）明細書第１８頁第５行に、 Ｉｎ−ブタノール
を加え」とあるのを＋ Ｉｎ−ブタノール ２５１を
加え」に訂正する。 以」− ５２９−
及び酸性メタノール中での紫外部吸収スペクトルを表す
。 第２図は１本発明物質５ＥＮ−１２８−Ｂのアルカリ性
メタノール中での紫外部吸収スペクトルを表ず。第３図
は本発明物質５ＥＮ−１２８−Ｂの臭化カリウム錠での
赤外部吸収スペクトルを表す。第４図は１本発明物質５
ＥＮ−１２８−Ｂの重水素化クロロホルム中でのＮＭＲ
吸収スペクトル（２００Ｍｌ１ｚ ）を表ず。 出願人 日本新薬株式会社 代理人 弁理士 片間 宏 第１頁の続き ０発 明 者 中村輝也 大津市瀬田３丁目４番１号宝酒 造株式会社中央研究所内 ０発 明 者 松永尚夫 大津市瀬田３丁目４番１号宝酒 造株式会社中央研究所内 ０発 明 者 西尾修治 大津市瀬田３丁目４番１号宝酒 造株式会社中央研究所内 ０出 願 人 宝酒造株式会社 京都市伏見区竹中町６０９番地 手続ネｎｆ正書 １、事件の表示 ぶ７−２ｏ’？２７２〜昭和
５７年１１月２５日付提出の特許側（２）（願番通知未
受領） ２、発明の名称 ５ＥＮ−１２８−Ｂ物質及びその製法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 〒６０１京都市南区吉祥院西ノ庄門口町１４番地
名称（４１５）日 本新薬株式会社（他１名）取締役社
長 森 下 弘 ４、代理人 居所 〒６０１京都市南区吉祥院西ノ庄門口町１４番
地明細書の発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 （１）明細書第８頁に掲げる次の表。 ［− 凝集剤 ＡＩ）Ｆ ＡＡ コラーゲン
」 を。 ［ 凝集剤 ＡＤＰ ＡＡ コラ−ケンＩ
Ｃ５ｏ（、ｉ７ｇ／ｍｌ） ＞５０ ３０ ３
０」 に訂正する。 （２）明細書第１５頁最下行に、「メラノスポーファＪ
とあるのを、 「メラノスボロファ」に訂正する。 （３）明細書第１８頁第５行に、 Ｉｎ−ブタノール
を加え」とあるのを＋ Ｉｎ−ブタノール ２５１を
加え」に訂正する。 以」− ５２９−
Claims (2)
- （１）下記の理化学的性質を有する新規物質５ＥＮ−１
２８−Ｂ。 ＋ａ＋外観 無色剣状結晶 （ｂｌ融点 １１９〜１２５°Ｃ （Ｃ１元素分析 実測値 Ｃ：６３．２１ Ｈ： ６．６３ Ｎ：
１１．０１理論値 ｃ ： ６２．８９ Ｈ： ６
．５０ Ｎ ： １１．２Ｂ（ｄ１分子Ｎ
２４８（マススペクトル）ｔｅ１分子式 Ｃ１０
１１１６Ｎ２０３（ｆｌ旋光度 〔α１ｇ−０° Ｃ
＝０．５％（クロロホルム中）（ｇｌ紫外部吸収スペク
１〜ル 第１図、第２図に示す通りであり、メタノール中及び酸
性メタノール中で２４７ｍμ、 ３１５ｍμに極大吸収
を示す。アルカリ性メタノール中で２３８ｍμ、 ２６
５ｍ、ｃ＋ （肩） 、 ２９０−３１０ｍμに極大
吸収を示す。 （ｈｌ赤外部吸収スペクトル 第３図に示す。 （ＩＩＩＨ−ＮＭＲスペクトル 第４図に示す。 （Ｊｌ溶解性 クロロホルム、メタノール、酢酸エチル、アセ１−ン、
ジメチルスルホキシド （ｋｌ呈色反応 陽性：ヨード，過マンガン酸カリウム 陰性：塩化第二鉄，ニンヒドリン （１ｉＲｆ値 西独メルク社製シリカケル（Ａｒｔ ５５５４）を用し
）た薄層クロマトグラフィーにおいて次のＲｒ値を示す
。 展開溶媒 クロロホルム：メタノール−５０：１０、
７ ８ Ｈ 開溶媒 ヘンセン：酢酸エチル：クロロン１クルム
＝ｉｌｌ Ｏ．６３ （ｍ＋中性，酸性，塩基性の区別 塩基性物質 - （２）ストレプトミセス属に属する下記の理化学的性質
を有する新規物質Ｓ ｒＥ Ｎ−１２８−Ｂを産生ずる
菌を培地に培養し、得られる培養液から５ＥＮ−１２８
−Ｂを分離。 採取することを特徴とする。５ＥＮ−１２８−Ｂの製造
法。 ｆａｔ外観 無色針状結晶 （ｂｌ融点 １１９〜１２５°Ｃ （Ｃ１元素分析 実測値 Ｃ：６３．２１ Ｈ： ６．６３ Ｎ：
１１．０１理論値 Ｃ：６２．８９ Ｈ： ６．５
０ Ｎ：１１．２Ｂ（ｄｉ分子量 ２４８
（マススペクトル）ｔｅ＋分子式 Ｃ１０Ｈｌｓ
Ｎ２ ｏ３（ｆｌ旋光度 （α］：＝０’ Ｃ＝
０．５％（りｏｏボルム中）ｔａ紫外部吸収スペクトル 第１図、第２図に、示す通りであり、メタノール中及び
酸性メタノール中で２４７ｍμ、３１５ｍμに極大吸収
を示す。アルカリ性メタノール中で２３８ｍμ、 ２６
５ｍμ（肩） 、 ２９０〜３１０ｍ、ｕに極大吸収
を示す。 （ｈｌｌ赤外及吸収スペクト ル３図に示す。 （ｌｌ ’Ｈ−ＮＭＲスペクトル 第４図に示す。 ｆＪ）ン容解性 クロロホルム、メタノール、酢酸エチル、アセトン、ジ
メチルスルホキシドに易溶、水に不溶。 （ｋ）呈色反応 陽性：ヨード、過マンガン酸カリウム 陰性：塩化第二鉄、ニンヒドリン （１１Ｒｆ値 西独メルク社製シリカゲル／Ａｒｔ ５５５４）を用い
た薄層クロマトグラフィーにおいて次のＲｆ値を示す。 展開ｍ媒 クロロホルム：メタノール−５０＝１０、７
８ 展開溶媒 ベンゼン：酢酸エチル：クロロポルム＝１：
１．：１ ０．６３Ｆｍｌ中性、酸性、
塩基性の区別 塩基性物質
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57207272A JPS5995893A (ja) | 1982-11-25 | 1982-11-25 | Ｓｅｎ−１２８−ｂ物質及びその製法 |
| KR1019830005454A KR840006679A (ko) | 1982-11-25 | 1983-11-17 | Sen-128-b의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57207272A JPS5995893A (ja) | 1982-11-25 | 1982-11-25 | Ｓｅｎ−１２８−ｂ物質及びその製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5995893A true JPS5995893A (ja) | 1984-06-02 |
| JPH0211595B2 JPH0211595B2 (ja) | 1990-03-14 |
Family
ID=16537044
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57207272A Granted JPS5995893A (ja) | 1982-11-25 | 1982-11-25 | Ｓｅｎ−１２８−ｂ物質及びその製法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5995893A (ja) |
| KR (1) | KR840006679A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3537586A1 (de) * | 1984-10-22 | 1986-07-10 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Physiologisch aktive substanzen mit der bezeichnung sen-366 und verfahren zu ihrer herstellung |
-
1982
- 1982-11-25 JP JP57207272A patent/JPS5995893A/ja active Granted
-
1983
- 1983-11-17 KR KR1019830005454A patent/KR840006679A/ko not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3537586A1 (de) * | 1984-10-22 | 1986-07-10 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Physiologisch aktive substanzen mit der bezeichnung sen-366 und verfahren zu ihrer herstellung |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR840006679A (ko) | 1984-12-01 |
| JPH0211595B2 (ja) | 1990-03-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS62220196A (ja) | 新規物質ｕｃｎ―０１ | |
| Yoshida et al. | Studies on new vasodilators, WS-1228 A and B I. Discovery, taxonomy, isolation and characterization | |
| JPH0641067A (ja) | 新規カルパイン阻害物質ｋｐ−１２４１及びその製造法 | |
| JPS59156289A (ja) | Ｓｅｎ−１２８−ａ物質及びその製法 | |
| JP3806856B2 (ja) | Ａ−１２１１物質 | |
| JPH0211595B2 (ja) | ||
| JPH03227971A (ja) | カルバゾール化合物 | |
| JPH0553786B2 (ja) | ||
| JPH0539283A (ja) | 新規物質Ｓ−５９９１７ａ及びその製造方法 | |
| JPH09157266A (ja) | 新規抗生物質エポキシキノマイシンａおよびｂとその製造法 | |
| JPS6034550B2 (ja) | 酵素阻害物質ｋｍ−２７５３およびその製造法 | |
| JP3674955B2 (ja) | 新規制癌性抗生物質ｍｊ６５４−ｎｆ４物質及びその製造法 | |
| JPH02306953A (ja) | 新規な制癌抗生物質コナゲニン及びその製造法 | |
| JPS62186787A (ja) | 新規な微生物 | |
| JPH03240495A (ja) | 新規生理活性物質サイクロオクタチン、その製造法およびその用途 | |
| JPH04316573A (ja) | 新規化合物ｃｆ‐２４、その使用および製造 | |
| JPS6348284A (ja) | 新抗生物質ｙｐ−０２９０８ｌ−ａおよびその製造法 | |
| JPH041179A (ja) | 抗腫瘍性物質ｂｅ―１４１０６ | |
| JPH11217382A (ja) | 抗生物質ツベラクトマイシンとその製造法 | |
| JPS62434A (ja) | 新規化合物ｓｓ７３１３ａ及びその製造法並びにこれを含有する免疫調節剤 | |
| JP2002332297A (ja) | 生理活性化合物チロペプチンａおよびｂとその製造方法 | |
| JPH0418087A (ja) | 新規物質ｕｃｆ１ | |
| JPH04279555A (ja) | 新規β−グルクロニダーゼ阻害物質７−ヒドロキシベナノマイシノン及びその製造法 | |
| JPH0383947A (ja) | 新規なｑ―５４８６―ａ物質及びその製造法 | |
| JPS5824118B2 (ja) | シンコウセイブツシツｓｆ −１５４０ ブツシツノセイゾウホウ |