JPS61239897A

JPS61239897A - 多糖類の製造法

Info

Publication number: JPS61239897A
Application number: JP8320985A
Authority: JP
Inventors: Akira Sugisawa; 公杉澤; Masanori Yamamoto; 正典山本; Yukihiro Nomura; 幸弘野村; Osamu Fujii; 修藤井; Sayuri Ashida; 芦田　小百合
Original assignee: House Food Industrial Co Ltd
Current assignee: House Foods Corp
Priority date: 1985-04-16
Filing date: 1985-04-16
Publication date: 1986-10-25
Also published as: JPH0468918B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、常温でゲルを形成する新規な多糖類の製造法
に関する。

（従来の技術）微生物の生産する多糖類に関しては、これまでアルカリ
土類金属、キサントモナス属、アースロバフタ−属ある
いはバチルス属に属する細菌、ハンゼヌラ馬等の酵母類
、ブルラリア属等のカビ類の生産するものが知られてい
る。

しかし、これら多糖類のうち、常温で高い粘度を示しゲ
ルを形成するようなものは以外に少かった。

（発明か解決しようとする問題）本発明者等は、特に粘度の高い多糖類を得る目的で広く
土壌菌を採取し、その多糖類生産能を検索した。その結
果、本発明者等が５Ｐ−１と仮に表示したバチルス属に
属する細菌が、培養物中に極めて粘度の高い多糖類様物
質を蓄積することを見出した。

（問題点を解決するための手段）本発明は、かかる知見に基づき完成されたもので、その
要旨は、バチルス属に属し、主要構成成分がマンノース
、グルコース、キシロース、グルクロン酸からなる常温
でゲルを形成する多糖類生産能を有する細菌を培地に培
養して上記多糖類を生成せしめ、これを採取することを
特徴とする多糖類の製造法である。

以下、本発明について詳しく述べる。

本発明においては、主要構成成分がマンノース、グルコ
ース、キシロース、グルクロン酸からなる常温でゲルを
形成する多糖類生産能を有する細菌を培養する。このよ
うな菌としては、本発明者等が土壌より採取した５Ｐ−
１菌があり、その菌学的諸性質は次のとおりである。

く１〉形態的性質工、顕微鏡による観察栄養細胞形態：桿菌運動性：あり大きさ：　０．８〜Ｉ　Ｘ　２〜５　μＢ胞子：中央か
らやや端にかけて胞子を形成する。

胞子環ははっきりとふくらむ。

■、染色ダラム染色：陽性抗酸性染色：陰性 ■。培地における育成状況（１）肉汁寒天平板培養白色でしわがあり、光沢なし。

（２グルコース寒天平板培養黄色がかった白色で光沢があり、べっとりしている。

（３）両汁液体培養上部に被膜をつくり濁る。

４）グルコース肉汁液体培養肉汁より生育良好で、上部に被膜をつくる。

［５］肉汁ゼラチン穿刺培養液化遅い。

（６）リドマスミルクにおける生育　　　　′凝固しペ
プトン化する。リドマスを還元する。

く２〉生理的性質１、生育温度＝１５〜４５℃ ２゜生育最適温度＝３０℃ ３、生育ＰＨ：　５．５〜９．５４、生育最適ＰＨニア、０５、酸素要求性：好気性６、硝酸塩の還元性：あり７、脱窒反応：なし８、メチルレッド反応二陽性９、インドールの生成：なし１０、硫化水素の生成：なし１１゜澱粉の加水分解能：あり１２、クエン酸の利用性：あり１３、色素の生成：なし１４、ウレアーゼの生成：あり１５、オキシダーゼの生成：あり１６、カタラーゼの生成：あり１７．０−Ｆテスト二酸化醗酵〈３〉炭水化物の醗酵性第１表に示したような結果が得られた。

（以下、余白）第１表（以下、余白）以上の諸性質に従い、バージイズ・マニュアル・オブ・
デターミネーティブ・バタテオロジ−（Ｂ　ｅｒａｅｙ
ｓ　　Ｍ　ａｎｕａｌ　　ｏｆ　　Ｄ　ｅｔｅｒｍｉｎ
ａｔｉｖｅ８　ａｃｔｅｒｉｏｌｏＯＶ　＞第８版によ
り検索したところ、本菌はバチルス属’（３ａｃｉｌｌ
ｕｓ　）と同定された。更に、胞子嚢がはっきりとふく
らみ、胞子が楕円形であること、中央からやや端にかけ
て胞子を形成すること、グルコースから酸を生成しガス
を生産しないことを考慮すると、バチルス・サーキュラ
ンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｉｒｃｕｌａｎｓ　）に近
い。しかし、その特徴を厳密に比較すると、バチルス・
サーキュランスとは、ダラム染色性が陽性、アセトイン
を生成、ＭＲテスト陽性、ウレアーゼを生成、という点
で異なる。従って、本菌はバチルス属に属する新菌種と
認定し、バチルス・５Ｐ−１と命名すると共に工業技術
院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第８０１７号とし
て寄託している。

本発明においては、かかるバチルス属に属する多糖類生
産菌を培地で培養する。該培養に当っでは、使用する微
生物が資化できる炭素源、窒素源、生育に必要な各種無
機塩等の栄養源を含む培地が用いられる。具体的には、
炭素源としてはデンプン、ブドウ等、蔗糖などがあり１
、窒素源としては尿素、肉エキス、ペプトン、コーンス
テイープリカー、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸
アンモニウム、その他の有機物あるいは無機物が用いら
れ、無機物としては塩化ナトリウムまたはマグネシウム
、マンガン、カリウム、鉄、カルシウムなどの燐酸塩、
硫酸塩、炭酸塩などがあげられる。

培１　＆ｔ　Ｐ　Ｈ５，５〜９．５　好マＬ、　＜　ハ
ａ　５〜７．０、温度１５℃〜４５℃好ましくは２５℃
〜３５℃で実施され、通常数日程度の培養でよい。

このようにして得られた培養物中には、本発明の目的と
する多糖類が含まれている。従って、該培養物中から多
糖類を抽出、精製する必要がある。該多糖類の精製に当
っては、予め培養物中の菌体その他の固形分を除去した
後多糖類を回収する方が好ましい。

精製には、加熱、遠心分離、洗浄、乾燥、溶媒による分
別沈澱や抽出など、多糖類を不純物から回収するために
通常使用される手段を単独に、あるいは適宜組み合わせ
ることによって実施すればよい。その−例を示すと、上
記固形分を除去して得られた溶液に、アセトン等の溶媒
を添加して多糖類を析出せしめ、よって得られた多糖類
を水に溶解させ、再びアセトン等の溶媒により多糖類を
析出させる。この処理を繰り返し行なった後、透析、凍
結乾燥することにより精製された多糖類を得ることがで
きる。

このようにして得られた多糖類の性質を以下示す。

（１）、構成成分本発明の多糖類の加水分解物（加水分解条件＝５％（Ｖ
／Ｖ）硫酸１００℃１２時間）を濃縮し、薄層クロマト
グラフィー、液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグ
ラフィー、カルバゾール硫酸比色法により分析定量した
。

その結果、マンノース、グルコース、キシロース、グル
クロン酸が主要構成成分であることがわかった。そして
、それぞれの成分はモル比７：２：２：１で構成されて
いる。一方、本多糖類の加水分解物をエルラン−モルガ
ン法により比色定量したが、ヘキソサミンは検出されな
かった。

（２Ｊ、−膜組成分析（乾物当り）粗蛋白質（ａ２５ｘＮ）：２６％　　灰分：１２５％　
粗脂肪：０．０％　炭水化物：８４．９％（３）０分子量７５０．０００以上（５ｅｐｈａｃｒｙｌ　　Ｇ　−３
００（〕７ルマシア　ファイン　ケミカル類）によるゲ
ル濾過法で測定）（４）、融点融点は認められない。

（５］、赤外線吸収スペクトル第１図のとおりである。

（６）、溶剤に対する溶解性水に可溶、メタノール、エタノール、アセトン等有機溶
媒に不溶。

（７）、呈色反応アンスロン反応、硫酸カルバゾール反応に陽性、エルソ
ンーモルガン反応に陰性。

（８）、塩基性、酸性、中性の区別セチリトリメチルアンモニウムプロマイドにより沈澱を
生ずることから酸性多糖である。

（９）、物質の色白色。

ω）、粘度常温で水に溶け、粘度の高い溶液になる。粘度と濃度と
の関係は第２図に示すとおりである。

ａｌ）、酸およびアルカリに対する安定度ＰＨ５で最高
粘度を示し、ＰＨ６〜１０の範囲で比較的安定した粘度
を示す。

（１２１，塩に対する安定度カルシウムなどの二価の金属塩の存在下で粘度の低下は
認められず、高粘性を示す。

本多糖類は以上のような特徴を有するほかに以下に示す
ような特徴的性質を有している。

即ち、比較的低濃度（０，７％Ｗ／Ｖ）で加熱溶解、冷
却凝固の性質を有することはもちろんのこと、室温で水
と接触させるだけで流動性を全く失い、ゼリー状になる
。

こうした特徴的性質を有する本多糖類は、増粘剤、ゲル
化剤、賦形剤等として広い分野で利用することができる
。また、サイジング剤、凝集剤等としても利用すること
ができ、更には土壌改良剤、肥料粒化剤等として農業の
分野においても利用することができる。

実施例５０Ｃ）ｍｌ容坂ロフラスコの次の組成の培地を１００
ｇ＋Ｉ入れて滅菌した。

（培地組成）グルコース５％、ポリペプトン０．５％、酵母エキス０
．５％、リン酸−カリウム０．１％、硫酸マグネシラ（
７水塩）０８１％、炭酸カルシウム０８７５％、Ｐ　Ｈ
７，０゜この培地にバチルス５Ｐ−１（微工研菌寄第８０１７号
）を接種し、３０℃、９日間振盪培養した。培養液１０
０１Ｉに蒸溜水を添加して５倍希釈し、８０℃、１０分
間加熱した後、直ちに遠心分離（１４，０ＯＯＧ、２０
分間）を施して菌体その他の不要成分を除き、上澄液に
倍量のアセトンを撹拌しながら往側して多糖を繊維状に
析出させる。この粗多糖を再び蒸溜水に溶解後、上記ア
セトン沈澱処理操作を２回繰り返した後、多糖溶液をセ
ルロースチューブ（分画分子量１万）に入れ、流水で２
日、蒸溜水で１日透析した後、凍結乾燥し、綿状の精製
多糖４．４ｇを得た。これは前記した諸性質を有してい
た。

【図面の簡単な説明】

第１図はバチルス５ｐ−ｉ菌子糖類の赤外線吸収スペク
トルのパターンを示し、第２図は本多糖類の濃度と粘度
との関係を示すグラフである。

Claims

【特許請求の範囲】

バチルス属に属し、主要構成成分がマンノース、グルコ
ース、キシロース、グルクロン酸からなる常温でゲルを
形成する多糖類生産能を有する細菌を培地に培養して上
記多糖類を生成せしめ、これを採取することを特徴とす
る多糖類の製造法。